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1 食品中毒採樣操作手冊

2 目錄 一 前言 2 二 食品中毒採樣一覽表 3 三 檢體採集 保存 包裝及運送 4 四 採樣應注意事項 7 五 採樣器材 9 六 參考資料 11 附錄一 食品衛生檢驗項目暨抽樣數量表 12 附錄二 食品中毒事件調查簡速報告單範例 14 1

3 一 前言 採樣為食品中毒調查工作之重要環節 正確的檢體採樣 可增進食品中毒檢 驗之效能 提高病因物質判明率 為使稽查人員對於食品中毒採樣有一致性的參 考標準 並提供簡單明確之操作原則 爰此 行政院衛生署參考國內外文獻資料 持續編寫新版之 食品中毒採樣操作手冊 以提供更完整的食品中毒採樣資訊 本手冊主要內容包括生物性及化學性食品中毒採樣一覽表 檢體採集 檢體保存 檢體包裝 運送方法及注意事項等 可作為相關人員進行食品中毒等採樣時的參 考 食品中毒事件定義 依流行病學以及美國疾病防治中心之定義 即二人或二 人以上攝取相同的食品而發生相似的症狀 則稱為一件 食品中毒案件 (outbreak) 2

4 二 食品中毒採樣一覽表 項 目 採樣目的 檢體 種類 檢體採集 包裝及 運送 採樣注意事項 備註 (詳見四) (詳見三) 微 生 物 性 檢 驗 微生物 毒素及分 子生物等 檢驗 食品 200 ~ 450 g (ml) 器皿 塗抹面積約50 cm2 環境 塗抹面積約50 cm2 或200 ~ 400 ml 水 500 ~ 1000 ml 1. 依檢體 選擇冷 凍 冷 藏或常 溫運 送 2. 送驗 時 應 隨檢體 同時附 1. 檢體採集方式詳 上 檢 見三(二) 體送驗 2. 食品衛生檢驗 單 項目暨抽樣數量 表 見附錄一 1. 應無菌操作採 1. 食品中毒案 樣 (1) 應於第一時間儘 2. 毒性劇烈之檢 速採樣送驗 相 體採檢時應謹 關注意事項詳見 慎操作 如肉毒 註 桿菌毒素 (2) 檢體運送前 先電傳 食品中 毒事件調查簡速 報告單 並聯絡 檢驗單位 檢體採集方式詳見 三(一) 化 學 性 檢 驗 農藥 食 品添加 物 食品 成分 重 金屬 天 然毒素及 其他污染 物等檢 驗 食品 食品添 加物 食品用 洗潔劑 1. 抽取散裝之檢 體時 採樣容器 應避免含干擾 檢測標的之物 質 (3) 檢體送驗時 隨檢體同時附上 食品中毒事件 調查簡速報告 單 及 檢體送 驗單 2. 檢測標的若具 光敏感特性 應 用可避光之容 器盛裝檢體 2. 採樣器材見五 容器 器 具或包 裝材料 註 食品中毒採樣注意事項 1. 凡經過研判認為有助於檢出中毒原因者皆應採取 可分為下列各類 (1) 食品檢體 包括嫌疑食品或剩餘食品 若無法得到嫌疑食品或剩餘食品 時 以容器包裝者 則採取同一批 或同一製造日期 或同一有效日期 之產品 (2) 器皿檢體 砧板 刀具 鍋子 餐具 容器 器具 包裝材料塗抹物檢 體等 (3) 環境檢體 飲水 清洗用水 養殖魚池水及其他環境塗抹物檢體等 (4) 其他 2. 檢體數量不足 應取全量 對有完整包裝者 以最小包裝為一單位 3. 同一批號或同一製造日期 或同一有效日期 視為同一檢體 對無標示者 以同一生產地代表同一檢體 4. 採樣者及提供檢體者應於檢體送驗單上簽名 3

5 三 檢體採集 保存 包裝及運送 (一) 微生物性 檢體 採集及保存 固狀食品或 二種以上之 混合食品 1. 若為小包裝之固狀食品 不須拆封 直接 運回實驗室 標示清楚 置於冷藏檢 體 運 送 箱 中 ( 內 放冷 藏 劑 不可使用乾冰冷 凍 ) 儘 速運 送 至實 驗 室 2. 以無菌解剖刀或其它器具 將食品切成小 塊 戴上無菌手套或以無菌袋內面翻出取 檢體 至少取 200 g 放入無菌袋或已滅菌 廣口瓶中冷藏 3. 若檢體無法於短時間內送達實驗室 則須 添加等量甘油鹽緩衝液 以乾冰冷凍運送 液狀食品或 飲料 冷凍食品 包裝及運送 採樣前先攪拌混合 再依下列方式擇一使用 1. 若為小包裝之液狀食品或飲料 不須拆 封 直接運回實驗室 食品檢體標示清楚 置 於冷藏檢體運送箱中 儘速運送至實驗室 2. 直接倒入或以無菌杓子至少取 200 ml 至 無菌容器中冷藏 3. 將長的無菌金屬或塑膠管伸入液中 開口 用手指捏住後移入無菌袋或已滅菌廣口 瓶中 4. 若檢體無法於短時間內送達實驗室 將檢 液與等量雙倍甘油鹽緩衝液混合 以乾冰冷凍運送 依下列方法擇一使用 1. 若為小包裝之冷凍食品 不需解凍或拆 封 直接運回實驗室 應繼續保持冷凍狀態 並標示清楚 2. 使用滅菌過鑽孔器由檢體的一邊通過中 心至另一邊 依此重覆取樣至檢體量達 200 g 以上 3. 以已滅菌或消毒之槌子 鑿刀等器具弄成 碎片收集至少 200 g 放入無菌容器中 4. 切下或鋸下至少 200 g 的冷凍肉或水產 品 5. 戴上無菌手套或以無菌袋內面翻出取檢 體 至少 200 g 4

6 生畜肉或生 禽肉 乾燥或脫水 食品 依下列方法擇一使用 1. 以無菌解剖刀將將屠體 肉塊等切成小單 位 戴上無菌手套或以無菌袋內面翻出取 檢體 放入無菌袋中 再加入 ml 之適量緩衝液 振盪混合 取出檢體 封 緊無菌袋口 同固體或液狀食品之方 法 若已收集緩衝液 時 應儘速送驗 2. 用已浸過磷酸鹽緩衝液或 0.1%蛋白腖液 之棉花棒擦拭檢體表面 塗抹面積約 50 cm2 將 棉 花 棒 之 頭 部 置 入 無 菌 袋 或 Cary-Blair 運送培養基中 以無菌操作折 剪 斷塗抹物木柄 3. 取部份檢體之肉塊 表皮等 戴上無菌手 套或以無菌袋內面翻出取檢體 至少 200 g 放入無菌袋或無菌廣口瓶中 儘量靠中心點取樣 依下列方法擇一使用 檢體應裝於可防濕之密 閉容器中 儘速送驗 不 需冷藏 1. 以無菌藥匙或杓子去除檢體表層後 更換 新的無菌藥匙 杓子 壓舌板等用具 至 少取樣 200 g 放入無菌袋或已滅菌廣口 瓶中 2. 以已滅菌或消毒之中空管由檢體之斜上 方經過中心點穿過至下方 緊握該管頂 部 將管內檢體移入無菌容器中 在不同 部位重覆數次直到取達 200 g 以上 亦可 使用已滅菌之藥匙 壓舌板等採樣器具進 行採樣 罐頭食品 若為已開封罐頭 則放入適當無菌容器中 標示清楚 剩餘食品 必要時先以已滅菌或消毒之解剖刀切成小單 位再以無菌藥匙 壓舌板等用具 至少取樣 200 g 放入無菌袋或無菌廣口瓶中 儘速送驗 環境及器皿 檢體 用已浸過滅菌磷酸鹽緩衝液或 0.1%蛋白腖液 之棉花棒 擦拭器材表面或環境表面 塗抹 面積約 50 cm2 將棉花棒之頭部置入無菌袋 或 Cary-Blair 運送培養基中 以無菌操作折 剪 斷塗抹物木柄 水檢體 管路內的水 應於水流過 10 秒鐘後收集 自 來水則於流過 5 分鐘後再自水龍頭之出口處 收集檢液約 500 ~ 1000 ml 標示清楚 密封 儘速 送驗 5

7 (二) 化學性 1. 有關檢驗項目及檢體需要量可參考附錄一 食品衛生檢驗項目暨抽樣數量 表 2. 化學性檢驗之檢體採集 保存 包裝及運送 可參考微生物性方法 惟需 注意下列各項 (1) 所有步驟皆應避免可能改變或影響分析結果之檢體污染或損毀 所有檢 體須分開採樣 (2) 檢體保存所使用之檢體容器應避免含干擾檢測標的之物質 且依需要採 避光處裡 (3) 容器必須密封 避免檢體送驗時被任意開啟 (4) 為預防滲漏及損壞 檢體應儘快速送至實驗室 (5) 運送時 應避免檢體腐敗 新鮮檢體應保持低溫 冷凍檢體應維持冷凍 狀態 (6) 檢體若需同時進行微生物性及化學性檢驗 則檢體之包裝及運送條件需 符合兩者之需求 6

8 四 採樣應注意事項 (一) 採樣前 1. 檢體如係供化學分析者 採樣器具應清潔 乾燥 若係供微生物檢驗者 抽樣器具應清潔及滅菌 皆不得使檢體沾染異物 2. 食品中毒案為不可預期之突發事件 因此應將採集器具事先備妥於備用狀 態 以供緊急使用 (二) 採樣時 1. 微生物檢驗之採樣應以無菌方式操作採樣 避免二次污染 採取後迅速冷 藏 冷凍檢體則維持冷凍狀態 2. 為求採樣代表性 應取不同部位之檢體 如 微生物分佈不一定均勻 3. 檢體若數量不足時 應全部採集 如有外包裝 則應一併送驗 4. 抽取散裝之檢體時 採樣容器應避免含干擾檢測標的之物質 如欲分析殺菌 劑或重金屬時 不要裝入塑膠容器中 避免塑膠容器的物質溶出而影響檢 驗結果 5. 檢測標的若具光敏感特性 應用可避光之容器盛裝檢體 6. 檢體加以密封且標示要正確 清楚 勿因潮濕或摩擦等原因而脫落 7. 當場填妥食品中毒事件調查簡速報告單及檢體送驗單 8. 食品中毒案應考慮採樣現場 食品檢體種類 中毒症狀等情況以及抽樣目 的 研判可能發生之中毒原因 以供檢驗單位參考 9. 食品中毒案若無剩餘檢體時 可採集相關之可疑食品 原料或相同來源之 食品 10. 肉毒桿菌毒素毒性劇烈 致死率高 採樣時應謹慎操作 使用過之器材及 廢棄物 應立即送進滅菌釜滅菌 (三) 採樣後 1. 視檢體性質決定要冷凍 冷藏或常溫運送 檢體若需同時進行微生物性及 化學性檢驗 則檢體運送條件需符合兩者之需求 2. 冷藏運送一般保持在 某些常溫販售之食品 如 新鮮蔬果 應冷藏運送 盡量使微生物菌叢及 其他特性保持在消費者購買時之狀態 4. 非冷凍檢體 若採冷凍運送可能造成部分微生物傷害而影響檢驗結果 5. 勿使冷凍檢體在運送時解凍 若冷凍樣本已解凍 勿重覆冷凍 且在檢體 到達適當溫度時立即檢驗 通常為 0-7 7

9 6. 檢體若需隔夜運送 乾冰與檢體比例至少需達 1:1 長時間運送或溫度較 高時應增加乾冰量 7. 採樣完成後 檢體要分開包裝並標示清楚 避免混淆 應當場編號 密封 後再加外包裝 再置於檢體運送箱內 8. 將 食品中毒事件調查簡速報告單 及 檢體送驗單 先以夾鏈袋密封 再置於檢體運送箱內 9. 為嚴防容器破損 封緘受損 凡易破檢體四周應再填塞緩衝材料後運送 10. 食品中毒案採樣完成後 應立即將食品中毒事件調查簡速報告單以電話 傳真 電郵方式與檢驗單位聯繫 告知檢體數量 檢體種類 中毒症狀 潛伏期 中毒人數等相關資料以利檢驗工作之進行 11. 採樣人員最好親自將檢體送達檢驗單位 如必須採用郵寄者 應在郵寄 後 立即以電話或傳真與收受單位有關人員聯繫 8

10 五 採樣器材 採樣器具(1,2) 檢體容器 無菌袋 cm 附蓋之廣口瓶 容量 0.3 ~ 1.5 L 鋁箔紙 採樣用具 藥匙 杓子 壓舌板 解剖刀 鑷子 鑽孔器 開罐器 鑿刀 金屬或塑膠管 直徑 1.25 ~ 2.5 cm 長 30 ~ 60 cm 採樣管 槌子 鋸子 滴管 剪刀 棉花 無菌塑膠手套 收集檢體器具 甘油鹽緩衝液 Cary-Blair 運送培養基 已滅菌 0.1%蛋白腖液或 磷酸鹽緩衝液(3) 取 5 ml 裝於螺蓋試管中 無菌棉花棒 拭 子 運送設備 檢體運送 檢體運送箱 緩衝填塞材料 冷藏或冷凍劑 冰塊 冰寶 乾冰 輔助設備 油性奇異筆 標籤 膠帶 封緘袋 封條 手電筒 火柴或打 火機 溫度記錄裝置 試管架 ph 測定儀 試紙 食品中毒 事件調查簡速報告單 檢體送驗單等相關表單 採樣箱 衣物 視需要 口罩 工作衣帽 靴子 消毒方式 消毒滅菌器材 95%酒精 酒精燈 70 ~ 75%酒精 濕熱滅菌法 以高壓滅菌釜 121 滅菌 15 分鐘以上 乾熱滅菌法 烘箱溫度 170 以上 時間 1 小時以上 蒸氣法 100 蒸氣處理 1 小時 (1) 微生物之採樣須以無菌採樣器具進行 並確保採樣器具隨時備妥 採樣箱內無 菌器具及緩衝液培養基 須定期更新 (2) 食品中毒採樣 每次至少需備有 15 個無菌袋或廣口瓶 15 支藥匙 6 個收集 檢體容器 溫度記錄裝置 部份輔助設備 同時無菌採樣器具應事先組合完成 以備緊急採樣使用 9

11 (3) 緩衝液及培養基 可使用目前已商品化之產品 自行配製方式如下 甘油鹽緩衝液 將氯化鈉 4.2 g 溶於蒸餾水中 使體積成為 900 ml 加入試藥級甘油 100 ml 無水磷酸氫二鉀 12.4 g 及無水磷酸二氫鉀 4 g 調整 ph 值至 7.2 以 121 滅菌 15 分鐘 配製雙倍甘油鹽緩衝液時 將甘油增至 200 ml 蒸 餾水減至 800 ml 磷酸鹽緩衝液 取磷酸二氫鉀 34 g 溶於蒸餾水 500 ml 以 1N 氫氧化鈉溶液調整 ph 值 至 7.2 再加蒸餾水使成 1000 ml 以 121 滅菌 15 分鐘 貯存於冰箱中 作為原液備用 使用時取原液 1.25 ml 加蒸餾水至 1000 ml 分裝於適 當用容器中 以 121 滅菌 15 分鐘 0.1%蛋白腖液 取蛋白腖 1 g 溶於蒸餾水 使成 1000 ml 分裝於適當容器中 經 121 滅菌 15 分鐘 最終 ph 值為 7.0 ± 0.1 Cary-Blair 運送培養基 取硫甘醇鈉 (Sodium thioglycolate) 1.5 g 磷酸氫鈉 (Disodium hydrogen phosphate) 1.1 g 氯化鈣 0.09 ~ 0.1 g 氯化鈉 5.0 g 及洋菜 5.0 ~ 5.6 g 溶 於蒸餾水 1000 ml 後 分裝 經 121 滅菌 15 分鐘備用 最終 ph 值為 8.4 ±

12 六 參考資料 行政院衛生署 衛署食字第 號公告修訂 食品衛生檢驗項目暨抽 樣數量表 行政院衛生署 2001 食品中毒採樣操作手冊 第三版 行政院衛生署疾病管制局 2007 防疫檢體採檢手冊 Codex Alimentarius Commission Codex Guidelines for the establishment of a regulatory programme for control of veterinary drug residues in foods CAC/GL Codex Alimentarius Commission Recommended methods of sampling for the determination of pesticide residues for compliance with MRLs CAC/GL Department of health and family services, Wisconsin division of public health bureau of communicable diseases and preparedness communicable disease epidemiology section Appendix D: Collection and handling of food samples. Foodborne and waterborne disease outbreak investigation manual. [ communicable/resources/pdffiles/fdwtrborneman.pdf] Downes, F. P. and Ito, K Chapter 2: Sampling plans, sample collection, shipment, and preparation for analysis. Compendium of methods for the microbiological examination of foods, fourth edition. American Public Health Assn. Microbiological Methods Committee, Microbiology Evaluation Division, Bureau of Microbial Hazards, Food Directorate, Health Products and Food Branch, Health Canada Appendix B: Collection and transportation of samples: applicable to all methods in the compendium of analytical methods. [ _b01- eng.php] The Commission of the European Communities Commission regulation (EC) No 333/2007 of 28 March 2007 laying down the methods of sampling and analysis for the official control of the levels of lead, cadmium, mercury, inorganic tin, 3-MCPD and benzo(a)pyrene in foodstuffs. U. S. Food and Drug Administration Chapter 4. Sampling. In Investigations Operations Manual [ UCM pdf] 11

13 附錄一 食品衛生檢驗項目暨抽樣數量表 檢驗 飲料 檢驗項目 檢體需要量 一 一般檢驗 一 一般檢驗 包括標示檢查 外觀檢 查 衛生指標微生物 著 色劑 防腐劑 人工甘味 劑及重金屬 (一) 單位包裝 內容 量在 250 毫升 含 以下者 需6瓶 罐 袋 盒或包 (二) 單位包裝內容量在250毫升至 1000毫升者 需4瓶 罐 袋 盒或包 (三) 單位包裝內容量在1000毫升 以上者 需3瓶 罐 袋 盒 或包 (四) 無包裝者需1000毫升以上 二 特別項目檢驗 二 若需檢驗特別項目 其中 成分分析 氰化物 農藥 食因性病原微生物 真菌 毒素 異物或其他 農畜禽水產品 一 一般檢驗 (一) 農藥 300公克以上 (二) 氰化物 50公克以上 三 其他則視情況取量 一 一般檢驗 包括標示檢查 外觀檢 查 衛生指標微生物 著 色劑 防腐劑 人工甘味 劑及重金屬 (一) 單位包裝淨重在200公克 含 以下者 需6罐 瓶 袋 盒 或包 (二) 單位包裝 淨重 在 200 公 克至 500公克者 需4罐 瓶 袋 盒或包 (三) 單位包裝淨重在500公克以上 者 需2罐 瓶 袋 盒或包 (四) 無包裝者需500公克以上 (五) 液狀者準用 一 至 四 但公克改為毫升 二 特別項目檢驗 二 若需檢驗特別項目 其中 成分分析 抗氧化劑 漂 白劑 保色劑 動物用藥 氰化物 農藥 食因性病 原微生物 真菌毒素 異 物或其他 (一) 農藥 300公克以上 (二) 氰化物 50公克以上 (三) 動物用藥 150公克 可食部 分 以上 三 其他則視情況取量 12

14 加工食品 一 一般檢驗 一 一般檢驗 包括標示檢查 外觀檢 查 衛生指標微生物 著 色劑 防腐劑 人工甘味 劑及重金屬 (一) 醬油 醋 醬類 單位包裝內 容量在300毫升 含 以下者 需4瓶 罐 袋或包 (二) 單位包裝內容量在300毫升以 上者 需3瓶 罐 袋或包 (三) 其他固體狀調味品 依農畜禽 水產品取量 二 特別項目檢驗 二 若需檢驗特別項目 其中 成分分析 氰化物 農藥 食因性病原微生物 真菌 毒素 異物或其他 (一) 農藥 300公克以上 (二) 氰化物 50公克以上 三 其他則視情況取量 食品添加物 食品添加物規格標準規定之檢 驗項目 一 單位包裝淨重在100公克 含 以下者 需5包 瓶 袋或盒 食品用洗潔劑 衛生標準規定之檢驗項目 二 單位包裝淨重在100公克至500 公克者 需3包 瓶 袋或盒 三 無包裝者需500公克以上 四 液狀者準用 一 至 三 但 公克改為毫升 五 其他則視情況取量 容器 器具或包 衛生標準規定之檢驗項目 裝材料 一 有包裝者需10件以上 二 無包裝者檢驗表面合計需3000 平方公分以上 三 其他則視情況取量 包裝食品 營養標示檢驗 針對相同有效日期及包裝之同一產 品 由12箱產品中 每箱各隨機抽取 1罐 瓶 包 盒 袋 檢體 共計 12罐 瓶 包 盒 袋 其他食品類 一 標示檢查 視實際情況取需要量 二 視需要訂定之檢驗項目 13

15 附錄二 食品中毒事件調查簡速報告單 範例 衛生局食品中毒事件調查簡速報告單 一 二 三 四 五 六 七 八 第 報 攝食時間 年 月 日 時 分 發病時間 年 月 日 時 分始 攝食地點 發病地點 食品供應廠商名稱及地址 就診醫院名稱 住院人數/就診人數 人/ 人 攝食人數 人 中毒人數 人 死亡人數 人 主要症狀 發燒 噁心 嘔吐 腹瀉 腹痛 過敏反應 面潮紅 發癢 發疹 眩暈 神經症狀 複視 麻痺 眼皮下垂 吞嚥困難 呼吸困難 語 言困難 其它 九 潛伏期 小時小時 中位數 小時 十 患者可能攝食之涉嫌食品 非患者未攝食之涉嫌食品 十一 檢體採樣送檢情形 食品檢體名稱及數量 採樣日期 檢驗單位 環境檢體名稱及數量 採樣日期 檢驗單位 工作人員檢體名稱及數量 採樣日期 檢驗單位 患者人體檢體名稱及數量 採樣日期 檢驗單位 十二 推測中毒原因 細菌性食品中毒 如有可疑請註明 化學性食品中毒 重金屬 農藥 動物用藥 其他 請註明 天然毒素中毒 動物性 植物性 其他 請註明 十三 肇事場所處置 暫停作業 全面消毒 限期改善 輔導改善 追蹤稽查 最近稽查日期 其他 請註明 十四 涉嫌食品處理 封存 沒入銷毀 限期回收 限期改正 其他 請註明 十五 涉嫌食品製備保存狀況 製備日期及時間 保存場所及溫度 食品來源及調理情形 請註明 十六 烹調人員 人 具中餐技術士證 人 參加食品衛生講習 人 14

16 參加日期 十七 其他報告 本局於 年 以下請簡述案情 月 日 時 填寫人 填寫日期 分接獲 電話 傳真號碼 15 通報

17 附錄三 檢驗檢體送驗單 衛生局檢驗檢體送驗單 採樣日期 抽驗原因或目的 檢驗項目 檢體 檢體名稱 編號 共計送驗件數 抽驗地點 製造 進口 廠商 容器 包裝 茲檢送上列物品請予檢驗並將結果見覆以憑辦理 此致 啟 採樣人員 16 備註

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