156 草业学报第 24 卷紫花苜蓿 ( 犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪 ) 是全世界最重要的豆科牧草, 因其具有品质优良适口性好饲用形式多样饲 [1 3] 用价值高和良好的生态效应, 被冠以牧草之王的美称近年来, 随着我国苜蓿种植面积的进一步扩大, 苜蓿 [4] 病害问题也日趋严重,

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沙荀
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1 第 24 卷第 7 期 Vol.24,No.7 草业学报 ACTAPRATACULTURAESINICA 2015 年 7 月 July,2015 犇犗犐 : / 犮狔狓犫犺狋狆 :// 犮狔狓犫. 犾狕狌. 犲犱狌. 犮狀王瑜, 刘怡, 周彬彬, 袁庆华, 张丽, 潘龙其. 苜蓿对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性评价研究. 草业学报,2015,24(7): WangY,LiuY,ZhouBB,YuanQ H,ZhangL,PanLQ.Anevaluationoftheresistanceofalfalfacultivarsto 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 and 犘犺狅犿犪 leafspot diseases.actaprataculturaesinica,2015,24(7): 苜蓿对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性评价研究王瑜 1, 刘怡 1, 周彬彬 1, 袁庆华 1, 张丽 1,2, 潘龙其 1,2 (1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 ;2. 甘肃农业大学草业学院, 甘肃兰州 ) 摘要 : 为探明不同紫花苜蓿品种对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性, 本研究采用温室内孢子悬浮液喷雾接种法, 对来自国内外的 40 个苜蓿品种进行了苗期抗病性鉴定和评价, 同时, 对接种浓度进行研究研究结果表明, 随着孢子悬浮液浓度的升高,10 个品种匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的病情指数均呈现逐渐升高的趋势, 匍柄霉叶斑病的适宜接种浓度为 ~ 个孢子 /ml, 茎点霉叶斑病的适宜接种浓度为个孢子 /ml 在个孢子 /ml 的接种浓度下,40 个苜蓿品种匍柄霉叶斑病的病情指数为 3.33~35.83, 茎点霉叶斑病的病情指数为 13.07~52.27, 品种间均存在显著差异 ( 犘 <0.05) 从中筛选出抗匍柄霉叶斑病品种 14 份, 其中, 高抗品种 1 份 ( 公农 2 号 ), 中抗品种 13 份 ; 从中筛选出抗茎点霉叶斑病品种 1 份, 为来自美国的中抗品种润布勒关键词 : 紫花苜蓿 ; 匍柄霉叶斑病 ; 茎点霉叶斑病 ; 抗病性犃狀犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲狉犲狊犻狊狋犪狀犮犲狅犳犪犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊狋狅犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿犪狀犱犘犺狅犿犪犾犲犪犳狊狆狅狋犱犻狊犲犪狊犲狊 WANG Yu 1,LIU Yi 1,ZHOU Bin Bin 1,YUAN Qing Hua 1,ZHANGLi 1,2,PAN Long Qi 1,2 1. 犐狀狊狋犻狋狌狋犲狅犳犃狀犻犿犪犾犛犮犻犲狀犮犲狅犳犆犃犃犛, 犅犲犻犼犻狀犵 , 犆犺犻狀犪 ;2. 犆狅犾犲犵犲狅犳犌狉犪狊犾犪狀犱犛犮犻犲狀犮犲, 犌犪狀狊狌犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔, 犔犪狀狕犺狅狌 , 犆犺犻狀犪犃犫狊狋狉犪犮狋 :Fortyalfalfa( 犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪 )cultivarswerecolectedfrom Chinaandabroadandinoculatedwith suspensionsofdiferentconcentrationsofsporesfrom 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 leafspotand 犘犺狅犿犪 leafspotdiseasesto evaluatetheresistanceofalfalfatothesetwoleafspotdiseasesandidentifytheoptimalinoculationconcentra tion.thediseaseindicesof10cultivarsinoculatedwiththesetwofungigradualyincreasedwithconcentration increaseofthesporesuspensions.theappropriateinoculationconcentrationsforcomparingcultivarresistance to 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 and 犘犺狅犿犪 were to sporespermililiterand sporespermililiter,respec tively.withaconcentrationof sporespermililiterintheinoculate,thediseaseindicesof 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 leafspotinfortycultivarsrangedfrom3.33to35.83,whilethediseaseindicesof 犘犺狅犿犪 leafspotrangedfrom 13.07to52.27.Thereweresignificantdiferencesbetweenthe40cultivars ( 犘 <0.05).Fourteencultivars werefoundtoberesistantto 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 leafspot,includingonehighly resistantcultivar GongnongNo.2 andthirteenmoderately resistantcultivars.onlyonecultivar,rambler,from Americawasfoundtohavemod erateresistanceto 犘犺狅犿犪 leafspot. 犓犲狔狑狅狉犱狊 :alfalfa( 犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪 ); 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 leafspot; 犘犺狅犿犪 leafspot;diseaseresistance 收稿日期 : ; 改回日期 : 基金项目 : 十二五国家科技支撑计划课题 (2011BAD17B01) 和公益性行业 ( 农业 ) 科研专项经费项目 ( ) 资助作者简介 : 王瑜 (1981 ), 女, 山东威海人, 助理研究员 E mail:yuwang 99@hotmail.com 通讯作者 Correspondingauthor.E mail:yuanqinghua@hotmail.com

2 156 草业学报第 24 卷紫花苜蓿 ( 犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪 ) 是全世界最重要的豆科牧草, 因其具有品质优良适口性好饲用形式多样饲 [1 3] 用价值高和良好的生态效应, 被冠以牧草之王的美称近年来, 随着我国苜蓿种植面积的进一步扩大, 苜蓿 [4] 病害问题也日趋严重, 已成为制约苜蓿产业发展的重要因素之一其中, 苜蓿叶部病害是引起草场退化草产 [5] 量减少草产品质量下降的重要原因苜蓿匍柄霉叶斑病( 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 leafspot) 又称苜蓿轮斑病, 是由匍柄霉 ( 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿犫狅狋狉狔狅狊狌犿 ) 引起的叶部病害该病广泛发生于美国澳大利亚新西兰等国家, 在我国的华北东北与西北等苜蓿主产区也有该病发生的记录, 已同锈病霜霉病褐斑病并列为中国普遍发生危害较重的叶部 [6 9] 病害匍柄霉叶斑病发生严重时会导致叶片大量脱落, 荚果生长期缩短, 种子产量降低 50%, 叶片中香豆醇 [10] 含量显著增高苜蓿茎点霉叶斑病又称春季黑茎与叶斑病 (springblackstem andleafspot), 是由苜蓿茎点霉 ( 犘犺狅犿犪犿犲犱犻犮犪犵犻狀犻狊 var. 犿犲犱犻犮犪犵犻狀犻狊 ) 引起的叶部病害该病是一种广泛发生的世界性病害, 在我国的吉林甘肃内 [11 12] 蒙古河北陕西等地均有发现苜蓿茎点霉叶斑病发生严重时使苜蓿干草产量减产 40%~50%, 种子产量减产 30%, 在生长季中期和后期, 此病常发生非常严重, 对许多大叶型品种 ( 如新疆的和阗苜蓿沙湾苜蓿布尔津苜蓿, 以及从美国和苏联引进的许多品种 ) 危害很大, 株发病率可高达 80%~100% [11] [13] [14] 选用抗病品种是苜蓿病害防治最为经济有效的方法, 对苜蓿霜霉病与褐斑病等叶部病害, 国内已有研 [6,15 16] [17] 究者进行了抗病种质材料筛选研究对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病国外已有研究者针对国外苜蓿品 [18 19] 种进行了抗病性鉴定与评价, 国内则仅有研究者进行了匍柄霉叶斑病的抗病性评价, 针对茎点霉叶斑病的抗性评价鉴定尚无报道本研究通过温室内孢子悬浮液喷雾接种法, 对来自国内外的 40 个苜蓿品种分别进行匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗病性鉴定与评价, 以筛选抗病品种, 为我国苜蓿种植中抗病品种的选择与抗病育种提供参考依据 1 材料与方法 1.1 供试材料苜蓿品种 : 本试验所用 40 个苜蓿品种 ( 表 1) 由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草种质资源研究室提供, 其中, 来自国外的品种 24 个, 来自国内的品种 16 个供试菌株 : 匍柄霉与苜蓿茎点霉菌种分别采自内蒙古阿鲁科尔沁旗田园牧歌草业公司生产基地与吉林农业科学院试验基地, 经室内分离纯化扩繁及致病性鉴定后, 接种于 PDA 培养基上,4 保存备用 1.2 研究方法育苗试验于 2014 年 3-8 月在中国农业科学院北京畜牧兽医研究所廊坊基地进行将苜蓿种子用 0.1% 升汞消毒 3~5min, 无菌水冲洗 4 次, 之后放在消毒培养皿的滤纸上, 加适量灭菌水以保持种子吸水膨胀将培养皿放入 20 培养箱内, 待种子发芽至幼根长到 1cm 长时移植到装有灭菌草炭与壤土 (1 1) 的塑料盘中, 塑料盘规格为 60cm 45cm 15cm( 长宽高 ) 移植时, 每个塑料盘划分为 10 行, 每行种植 1 个品种 (10 株 / 行 ), 每品种 3 个重复,25 温室内培养 6 周后进行接种接种方法采用孢子悬浮液喷雾接种法分别配制浓度为 , 和个孢子 /ml 的分生孢子悬浮液, 在 2h 内用喉头喷雾器将其均匀喷洒在苜蓿叶片上, 每盘用量为 40 ml, 覆盖黑色塑料薄膜以确保 100% 相对空气湿度,23 黑暗保湿 24h, 之后移去塑料薄膜,25 温室内正常管理 12d 后进行病情调查随机选择 4( 阿伯罗 Ⅱ) 8( 定襄 ) 12( 呼图壁 ) 16( 雷西斯 ) 20( 南特 ) 24( 切罗克 ) 28( 泰安 ) 32( 焉耆 ) 36 ( 印第安 ) 40( 费纳尔 ) 等 10 个品种进行 3 个浓度孢子悬浮液喷雾接种, 根据病情指数筛选适宜的接种浓度之后, 利用筛选出的适宜接种浓度对 40 份材料进行接种病情调查对每株苜蓿每个叶片的病情级别进行调查, 根据小叶病斑占叶面积的百分比对叶片进行病害分级匍柄霉叶斑病的分级标准为,0 级 : 无病斑 ;1 级 : 小叶病斑面积占叶面积的 1%~5%;2 级 : 小叶病斑面积占叶面积的 5%~15%;3 级 : 小叶病斑面积占叶面积的 15%~25%;4 级 : 小叶病斑面积占叶面积的 25% 以上

3 第 7 期王瑜等 : 苜蓿对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性评价研究 157 茎点霉叶斑病的分级标准为,0 级 : 无病斑 ;1 级 : 小叶病斑占叶面积的 1%~5%;2 级 : 小叶病斑占叶面积的 5%~15%;3 级 : 小叶病斑占叶面积的 15% ~25%;4 级 : 小叶病斑占叶面积的 25% ~ 35%;5 级 : 小叶病斑占叶面积的 35% 以上计算各品种的发病率和病情指数, 每品种 3 次重复, 每重复统计 10 株发病率 (%)=( 病株数 / 总株数 ) 100 病情指数 = ( 各级病叶数该级代表值 ) 调查总叶片数最重级别代表值抗病级别划分根据各品种苜蓿的病情指数分别对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗病级别进行划分, 分级标准为 : 病情指数 <5 为高抗 ; 5 病情指数 15 为中抗 ;15< 病情指数 25 为中感 ; 病情指数 >25 为高感 1.3 数据处理利用 SPSS19.0 软件进行数据统计分析, 用 Duncan 法进行差异显著性分析 2 结果与分析 2.1 孢子悬浮液浓度的筛选 3 个孢子悬浮液浓度下,10 个品种间匍柄霉叶斑病的病情指数均存在显著差异 ( 犘 <0.05), 随着孢子悬浮液浓度的升高, 各品种的病情指数均呈现升高的趋势 ( 图 1) 当孢子悬浮液浓度为个孢子 /ml 时,10 个品种匍柄霉叶斑病的病情指数为 4.67~28.33; 当孢子悬浮液浓度为个孢子 /ml 时, 病情指数为 7.50~35.83; 当孢子悬浮液浓度为个孢子 /ml 时, 病情指数为 36.67~66.67, 该浓度下 10 个品种的病情指数普遍较高, 均表现为高度感病, 不利于区分抗感材料因此, ~ 个孢子 /ml 为匍柄霉叶斑病适宜的接种浓度, 本试验后期采用个孢子 /ml 随着孢子悬浮液浓度的升高, 各品种茎点霉叶斑病的病情指数也呈现升高的趋势 ( 图 2) 当孢子悬浮液浓度为个孢子 /ml 时,10 个品种茎点霉叶斑病的病情指数为 14.93~21.33, 各材料间无显著差异 ; 当孢子悬浮液浓度为个孢子 /ml 时, 病情指数为 20.00~39.20, 材料间存在显著差异 ( 犘 <0.05); 当孢子悬浮液浓度为个孢子 /ml 时, 病情指数为 30.67~66.13, 材表 1 苜蓿品种及来源犜犪犫犾犲 1 犃犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊犪狀犱狋犺犲犻狉狉犲狊狅狌狉犮犲狊编号 Code 品种 Cultivar 来源地 Resources 号犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.no.102 苏联 SovietUnion 2 龙牧 803 犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.longmuno.803 黑龙江 Heilongjiang 3 C/W5 犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.c/w5 美国 America 4 阿伯罗 Ⅱ 犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.apoloⅡ 联合国粮食及农业组织 FAO 5 阿罗特犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.alouete 联合国粮食及农业组织 FAO 6 博维犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.boviss 加拿大 Canada 7 氮素犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.nitro 美国 America 8 定襄犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.dingxiang 山西 Shanxi 9 法金内犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.faginin 澳大利亚 Australia 10 阜康犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.fukang 新疆 Xinjiang 11 公农 2 号犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.gongnongno.2 陕西 Shanxi 12 呼图壁犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.hutubi 新疆 Xinjiang 13 霍呐伊犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.honeoye 美国 America 14 兰格勒犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.langreo 美国 America 15 劳拉犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.laura 联合国粮食及农业组织 FAO 16 雷西斯犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.resis 丹麦 Denmark 17 罗佑玛犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.rhizoma 加拿大 Canada 18 米蒂奥犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.meteor 联合国粮食及农业组织 FAO 19 莫欧佩 69 犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.moapa69 美国 America 20 南特犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.nante 澳大利亚 Australia 21 帕拉维沃犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.paraweaver 澳大利亚 Australia 22 皮克斯塔犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.pickstar 加拿大 Canada 23 乾果犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.qianguo 陕西 Shanxi 24 切罗克犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.cherokee 美国 America 25 润布勒犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.rambler 加拿大 Canada 26 蔏瓦犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.ruowa 澳大利亚 Australia 27 萨帕斯犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.surpass 联合国粮食及农业组织 FAO 28 泰安犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.taian 兰州 Lanzhou 29 维勒犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.veiler 加拿大 Canada 30 咸阳犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.xianyang 陕西 Shanxi 31 兴平犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.xingping 兴平 Xingping 32 焉耆犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.yanshi 新疆 Xinjiang 33 阳高犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.yanggao 山西 Shanxi 34 伊犁犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.yili 新疆 Xinjiang 35 沂阳犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.yiyang 陕西 Shanxi 36 印第安犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.indian 印度 India 37 秘鲁犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.peru 美国 America 38 芋县犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.yuxian 河北 Hebei 39 长武犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.changwu 陕西 Shanxi 40 费纳尔犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.vernal 美国 America 注 :FAO 为联合国粮食及农业组织的简称 Note:FAOistheabbreviationofFoodandAgricultureOrganization.

4 158 草业学报第 24 卷图 1 匍柄霉孢子悬浮液不同接种浓度对 10 个苜蓿品种病情指数的影响犉犻犵.1 犈犳犲犮狋狅犳犱犻犳犲狉犲狀狋犻狀狅犮狌犾犪狋犻狅狀犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狅犳犛. 犫狅狋狉狔狅狊狌犿狊狆狅狉犲狊狊狌狊狆犲狀狊犻狅狀狅狀犱犻狊犲犪狊犲犻狀犱犲狓狅犳狋犲狀犪犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊同一孢子悬浮液浓度下的不同小写字母表示差异显著 ( 犘 <0.05) 下同 Diferentsmalletersunderthesamesporesconcentrationshowsignif icantdiferences( 犘 <0.05).Thesamebelow. 图 2 茎点霉孢子悬浮液不同接种浓度对 10 个苜蓿品种病情指数的影响犉犻犵.2 犈犳犲犮狋狅犳犱犻犳犲狉犲狀狋犻狀狅犮狌犾犪狋犻狅狀犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狅犳犘. 犿犲犱犻犮犪犵犻狀犻狊狏犪狉. 犿犲犱犻犮犪犵犻狀犻狊狊狆狅狉犲狊狊狌狊狆犲狀狊犻狅狀狅狀犱犻狊犲犪狊犲犻狀犱犲狓狅犳狋犲狀犪犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊料间也存在显著差异 ( 犘 <0.05), 但该浓度下 10 个品种的病情指数也普遍较高, 均表现为高度感病, 不利于区分抗感材料因此, 茎点霉叶斑病的适宜接种浓度为个孢子 /ml 2.2 对匍柄霉叶斑病的抗病性 40 份材料间匍柄霉叶斑病的病情指数存在显著差异 ( 犘 <0.05), 发病率亦存在显著差异 ( 犘 <0.05) ( 表 2) 病情指数的变化范围为 3.33~35.83, 发病率的变化范围为 13.33%~96.67%, 表明不同品种苜蓿材料对匍柄霉叶斑病的抗性存在较大差异根据频率分布图 ( 图 3) 可知, 病情指数小于 5 的高抗材料有 1 份 ; 病情指数为 5~15 的中抗材料有 13 份 ; 病情指数为 15~25 的中感材料有 14 份 ; 病情指数大于 25 的高图 3 40 个苜蓿品种匍柄霉与茎点霉叶斑病病情指数的频率分布犉犻犵.3 犇犻狊狋狉犻犫狌狋犻狅狀狅犳犱犻狊犲犪狊犲犻狀犱犲狓狅犳犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿犪狀犱犘犺狅犿犪犾犲犪犳狊狆狅狋犻狀犳狅狉狋狔犪犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊

5 第 7 期王瑜等 : 苜蓿对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性评价研究 159 表 2 40 个苜蓿品种匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的病情分级犜犪犫犾犲 2 犈狏犪犾狌犪狋犻狅狀狅犳犳狅狉狋狔犪犾犳犪犾犳犪犮狌犾狋犻狏犪狉狊狉犲狊犻狊狋犪狀犮犲狋狅犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿犪狀犱犘犺狅犿犪犾犲犪犳狊狆狅狋匍柄霉叶斑病犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 leafspot 茎点霉叶斑病犘犺狅犿犪 leafspot 编号品种发病率病情指数抗病级别病情指数抗病级别 Code Cultivar Incidenceof Disease Gradeofdisease Disease Gradeofdisease disease(%) index resistance index resistance 号犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.no ± ±2.58 中感 MS 32.40±2.72 高感 HS 2 龙牧 803 犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.longmuno ± ±1.66 中感 MS 23.33±2.31 中感 MS 3 C/W5 犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.c/w ± ±0.61 中抗 MR 32.80±2.31 高感 HS 4 阿伯罗 Ⅱ 犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.apolo Ⅱ 70.00± ±2.61 高感 HS 41.07±4.17 高感 HS 5 阿罗特犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.alouete 50.00± ±0.38 中抗 MR 17.87±1.01 中感 MS 6 博维犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.boviss 73.33± ±2.20 高感 HS 17.07±1.08 中感 MS 7 氮素犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.nitro 60.00± ±1.33 中感 MS 51.20±5.39 高感 HS 8 定襄犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.dingxiang 40.00± ±1.44 中抗 MR 32.00±2.01 高感 HS 9 法金内犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.faginin 86.67± ±4.33 高感 HS 25.00±0.93 中感 MS 10 阜康犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.fukang 36.67± ±1.00 中抗 MR 50.67±5.01 高感 HS 11 公农 2 号犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.gongnongno ± ±0.03 高抗 HR 30.80±3.03 高感 HS 12 呼图壁犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.hutubi 76.67± ±2.41 高感 HS 31.60±4.82 高感 HS 13 霍呐伊犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.honeoye 63.33± ±1.01 中感 MS 22.67±2.01 中感 MS 14 兰格勒犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.langreo 46.67± ±0.87 中抗 MR 41.53±4.23 高感 HS 15 劳拉犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.laura 60.00± ±3.02 中感 MS 50.67±7.02 高感 HS 16 雷西斯犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.resis 63.33± ±4.20 中感 MS 39.20±2.77 高感 HS 17 罗佑玛犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.rhizoma 23.33± ±0.33 中抗 MR 40.13±6.22 高感 HS 18 米蒂奥犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.meteor 80.00± ±1.81 高感 HS 39.20±6.93 高感 HS 19 莫欧佩 69 犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.moapa ± ±0.84 高感 HS 48.53±3.32 高感 HS 20 南特犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.nante 56.67± ±1.41 中感 MS 25.00±4.23 中感 MS 21 帕拉维沃犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.paraweaver 33.33± ±1.44 中抗 MR 50.13±8.33 高感 HS 22 皮克斯塔犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.pickstar 56.67± ±3.82 中感 MS 30.40±1.45 高感 HS 23 乾果犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.qianguo 63.33± ±1.88 高感 HS 17.87±2.72 中感 MS 24 切罗克犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.cherokee 96.67± ±3.78 高感 HS 30.80±0.92 高感 HS 25 润布勒犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.rambler 30.00± ±0.54 中抗 MR 13.07±1.07 中抗 MR 26 蔏瓦犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.ruowa 36.67± ±1.07 中抗 MR 15.47±0.86 中感 MS 27 萨帕斯犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.surpass 63.33± ±2.50 中感 MS 30.80±2.02 高感 HS 28 泰安犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.taian 70.00± ±3.82 高感 HS 40.13±1.22 高感 HS 29 维勒犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.veiler 26.67± ±0.51 中抗 MR 24.00±3.21 中感 MS 30 咸阳犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.xianyang 80.00± ±1.56 高感 HS 51.20±5.23 高感 HS 31 兴平犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.xingping 30.00± ±0.61 中抗 MR 23.33±1.15 中感 MS 32 焉耆犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.yanshi 30.00± ±0.90 中抗 MR 52.27±4.21 高感 HS 33 阳高犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.yanggao 53.33± ±1.20 中感 MS 16.53±0.72 中感 MS 34 伊犁犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.yili 66.67± ±2.22 中感 MS 17.33±2.43 中感 MS 35 沂阳犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.yiyang 40.00± ±1.29 中抗 MR 24.00±4.58 中感 MS 36 印第安犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.indian 63.33± ±2.89 中感 MS 32.40±1.39 高感 HS 37 秘鲁犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.peru 60.00± ±3.10 中感 MS 30.40±6.04 高感 HS 38 芋县犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.yuxian 80.00± ±4.56 高感 HS 16.27±3.06 中感 MS 39 长武犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.changwu 70.00± ±1.44 高感 HS 48.53±5.08 高感 HS 40 费纳尔犕. 狊犪狋犻狏犪 cv.vernal 50.00± ±2.27 中感 MS 30.40±5.33 高感 HS 犉值犉 value 差异显著性 Significanceofdiference HR: 高抗 Highresistance;MR: 中抗 Mediumresistance;HS: 高感 Highsusceptibility;MS: 中感 Mediumsusceptibility.

6 160 草业学报第 24 卷感材料有 12 份由此可见,40 份材料中, 只有 2.5%(1 份 ) 的材料为高抗材料, 有 32.5%(13 份 ) 的材料为中抗材料, 其余 65.0%(26 份 ) 均为感病材料高抗匍柄霉叶斑病材料为来自陕西的公农 2 号 2.3 对茎点霉叶斑病的抗病性 40 份材料间茎点霉叶斑病的病情指数存在显著差异 ( 犘 <0.05)( 表 2), 发病率均为 100%, 无差异病情指数的变化范围为 13.07~52.27, 表明不同品种苜蓿材料对茎点霉叶斑病的抗性也存在较大差异根据频率分布图 ( 图 3) 可知, 病情指数小于 5 的高抗材料有 0 份 ; 病情指数为 5~15 的中抗材料有 1 份 ; 病情指数为 15~25 的中感材料有 14 份 ; 病情指数大于 25 的高感材料有 25 份由此可见,40 份材料中无高抗材料, 只有 2.5%(1 份 ) 的材料为中抗材料, 其余 97.5%(39 份 ) 均为感病材料中抗茎点霉叶斑病材料为来自美国的润布勒 3 讨论与结论 3.1 接种浓度北美苜蓿协会 (NAAIC) 于 1991 年曾提出苜蓿品种对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病抗病性的测定标准, 包括苜蓿幼苗培养菌株培养接种方法与条件病害分级等方面 (htp:// 其中, 菌液浓度的高低是接种成败的关键, 各种病害接种评价中使用的菌液浓度不尽相同在 NAAIC 的标准中, 匍柄霉叶斑病的建议浓度为 ~ 个孢子 /ml, 茎点霉叶斑病的建议浓度为 ~ 个孢子 /ml 在本研究的匍柄霉叶斑病接种鉴定中, 当孢子悬浮液浓度为 ~ 个孢子 /ml 时,10 个品种的病情指数为 4.67~45.83, 材料间存在显著差异, 可以区分抗感材料, 为适宜的接种浓度当孢子悬浮液浓度为个孢子 /ml 时,10 份材料的病情指数普遍偏高, 均表现为高度感病, 不利于区分抗感材料, 且浪费菌源张 [18] 静妮在对苜蓿进行匍柄霉叶斑病接种鉴定的过程中发现, ~ 个孢子 /ml 为适宜的接种浓度, 本研究的结果与此基本一致在茎点霉叶斑病的接种鉴定中, 当孢子悬浮液浓度为个孢子 /ml 时,10 个品种的病情指数间无显著差异 ; 当孢子悬浮液浓度为与个孢子 /ml 时,10 个品种间均存在显著差异 ( 犘 <0.05), 但在个孢子 /ml 浓度时,10 个品种的病情指数普遍较高, 均表现为高度感病, 不利于区分抗感材料因此, 茎点霉叶斑病的适宜接种浓度为 [17] 个孢子 /ml, 与 NAAIC 建议的浓度一致, 另外,Castel Miler 等研究茎点霉在抗感紫花苜蓿种质材料植株内的侵染与扩展时所采用的接种浓度为 ~ 个孢子 /ml, 本研究的结果与此也基本一致 3.2 抗病品种筛选本研究从 40 份苜蓿种质材料中筛选出高抗匍柄霉叶斑病材料 1 份, 为来自陕西的公农 2 号, 中抗材料 13 份 (5 份国内材料,8 份国外材料 ), 中感材料 14 份 (4 份国内材料,10 份国外材料 ), 高感材料 12 份 (6 份国内材料,6 份国外材料 ) 其中, 来自国内的 16 份材料中, 高抗材料占 6.25%, 中抗材料占 31.25%, 中感材料占 25.0%, 高感材料占 37.5%; 来自国外的 24 份材料中, 高抗材料占 0%, 中抗材料占 33.33%, 中感材料占 41.67%, 高感材料占 25.00% 表现为抗病的 14 份材料分别为 : 公农 2 号,C/W5, 阿罗特, 定襄, 阜康, 兰格勒, 罗佑玛, 帕拉维 [15] 沃, 润布勒, 蔏瓦, 维勒, 兴平, 焉耆, 沂阳 Borges 等通过对不同苜蓿属匍柄霉叶斑病抗性的研究发现犕犲犱犻犮犪犵狅犮犪狀犮犲犾犪狋犪, 野苜蓿 ( 犕. 犳犪犾犮犪狋犪 ), 犕. 犮狅犲狉狌犾犲犪和犕. 犺犲犿犻犮狔犮犾犪等 4 个苜蓿属均高抗匍柄霉叶斑病, 而紫花 [16] 苜蓿则均表现为感病 Lucas 等曾于 1973 年通过田间与室内的接种鉴定, 从 4 个紫花苜蓿品种中筛选出 [18] Apalachee 具有较好的匍柄霉叶斑病抗性国内的研究者中, 张静妮通过对 50 个紫花苜蓿品种的室内接种鉴 [19] 定筛选出抗匍柄霉叶斑病品种 3 个, 分别为公农 1 号, 庆阳,BL 201( 品系 ) 黄宁则通过对 44 个品种的离体 [19] 叶接种鉴定筛选出公农 2 号 BL 201( 品系 ) 等 15 个高抗品种本研究中公农 2 号也表现为高抗, 与黄宁的研究结果一致, 表明试验结果可靠, 可将其作为匍柄霉叶斑病抗病种质资源加以发掘利用经茎点霉接种鉴定发现 40 份紫花苜蓿种质材料的发病率均为 100%, 所有植株均呈现不同程度的染病状态, 病情指数为 13.07~52.27 从 40 份材料中筛选出中抗材料 1 份, 为来自美国的润布勒, 中感材料 14 份 (7 份国内材料,7 份国外材料 ), 高感材料 25 份 (9 份国内材料,16 份国外材料 ) 其中, 来自国内的 16 份材料均表现

7 第 7 期王瑜等 : 苜蓿对匍柄霉叶斑病与茎点霉叶斑病的抗性评价研究 161 为感病, 中感材料占 43.75%, 高感材料占 56.25%; 来自国外的 24 份材料中, 中抗材料占 4.16%, 中感材料占 29.17%, 高感材料占 66.67% 综合而言, 只有来自美国的润布勒具茎点霉中等抗性, 其余材料均表现为感病 NAAIC 公布的茎点霉叶斑病抗病对照品种为 PL PhR 和 Ramsey, 感病对照品种为 Ranger 和 Lahontan 品种的抗病性除取决于自身外, 还受各种因素的影响, 因此, 在通过温室试验筛选得到抗病品种后, 还需要在 [20] 后期进行大田自然环境下的跟踪试验犚犲犳犲狉犲狀犮犲狊 : [1] ZhangZF,NanZB.Researchprogressonalfalfabacterialdiseases.ActaPrataculturaeSinica,2014,23(4): [2] YueY H,QiX,WangY R, 犲狋犪犾.Persistenceof35 犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪 varietiesatthe10thyearafterestablishment.acta PrataculturaeSinica,2014,23(1): [3] TianCX,ZhangY M,WangK, 犲狋犪犾.Theanatomicalstructureresponsesinalfalfatosalinity alkalinitystressofnahco3. ActaPrataculturaeSinica,2014,23(5): [4] HongFZ.AlfalfaScience[M].Beijing:ChinaAgriculturePress,2009: [5] Shang WJ.AlfalfaleafdiseasesurveyandpathogenidentificationinNingxia.PrataculturalScience,1997,14(1): [6] BorgesOL,StanfordE H,WebsterRK.Selectionforresistanceto 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿犫狅狋狉狔狅狊狌犿 inalfalfa.cropscience,1976, 16(4): [7] BorgesO L,StanfordEH,WebsterRK.Thehost pathogeninteractionofalfalfaand 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿犫狅狋狉狔狅狊狌犿.Phytopathol ogy,1976,66(6): [8] NanZB.AlfalfadiseasesandintegrateddiseasepreventionandcontrolsysteminChina.AnimalScienceandVeterinaryMedi cine,2001,18(4):m1 M4. [9] HuangN,LuXS.Researchandresistanceevaluationprogressonalfalfaleafandrootdiseases.ChineseAgriculturalScience Buletin,2012,28(5):1 7. [10] NanZB. 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 leafspotdiseaseofalfalfa.grasslandandturf,1984,(4): [11] LiuR.Springblackstemdiseaseofalfalfa.GrasslandandTurf,1986,(4):1 6. [12] XuLB,LiuZP,Wang H X, 犲狋犪犾.Theinductionefectofjasmonicacidonalfalfadiseaseresistance.ChineseJournalof Grassland,2013,35(5): [13] ZhouLX,YiKX,MaZY.Theinoculationandidentificationofdownymildewofalfalfa.GansuAnimalandVeterinarySci ences,1998,(3):44. [14] YuanQ H,ZhangW S.Screeningforresistancetocommonleafspotinalfalfagermplasms.ActaPrataculturaeSinica,2000, 9(4): [15] BorgesO L,StanfordE H,WebsterR K.Sourcesandinheritanceofresistanceto 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 leafspotofalfalfa.crop Science,1976,16(4): [16] LucasLT,BusbiceT H,ChambeeDS.Resistanceto 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 leafspotinnewalfalfavariety.plantdiseasereporter, 1973,57(11): [17] Castel MilerC V,ZeyenRJ,SamacD A.Infectionanddevelopmentof 犘犺狅犿犪犿犲犱犻犮犪犵犻狀犻狊 onmoderatelyresistanceand susceptiblealfalfagenotypes.canadianjournalofplantpathology,2007,29(3): [18] ZhangJN.ResistanceEvaluationandMechanismofDiferentFalDormancyAlfalfa( 犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪 L.)on 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 LeafSpotDisease[D].Beijing:BeijingForestryUniversity,2008: [19] HuangN.ResistanceEvaluationofAlfalfa( 犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪 L.)on 犛狋犲犿狆犺狔犾犻狌犿 LeafSpotand 犉狌狊犪狉犻狌犿 RootRotDisea sesandthescreeningofstandardcheckcultivars[d].beijing:beijingforestryuniversity,2012: [20] DingSY,LiM Q,ZhaoH.Identificationofdiseaseresistanceofdiferentvarietiesofalfalfato 犉狌狊犪狉犻狌犿 spp..plantpro tection,2011,37(1): 参考文献 : [1] 张振粉, 南志标. 苜蓿细菌性病害研究进展. 草业学报,2014,23(4): [2] 岳彦红, 齐晓, 王彦荣, 等.35 个 10 龄紫花苜蓿品种的持久性比较. 草业学报,2014,23(1): [3] 田晨霞, 张咏梅, 王凯, 等. 紫花苜蓿组织解剖结构对 NaHCO3 盐碱胁迫的响应. 草业学报,2014,23(5): [4] 洪绂曾. 苜蓿科学 [M]. 北京 : 中国农业出版社,2009: [5] 商文静. 宁夏紫花苜蓿叶部病害调查和病原菌鉴定. 草业科学,1997,14(1): [8] 南志标. 我国的苜蓿病害及其综合防治体系. 动物科学与动物医学,2001,18(4):M1 M4.

8 162 草业学报第 24 卷 [9] 黄宁, 卢欣石. 苜蓿叶部与根部病害研究的评价进展. 中国农业通报,2012,28(5):1 7. [10] 南志标. 苜蓿匍柄霉叶斑病. 草原与草坪,1984,(4): [11] 刘若. 苜蓿春季黑茎病. 草原与草坪,1986,(4):1 6. [12] 徐林波, 刘正坪, 王海霞, 等. 茉莉酸对苜蓿抗病性的诱导作用. 中国草地学报,2013,35(5): [13] 周丽霞, 易克贤, 马振宇. 苜蓿霜霉病的接种鉴定. 甘肃畜牧兽医,1998,(3):44. [14] 袁庆华, 张文淑. 苜蓿对褐斑病抗性筛选研究. 草业学报,2000,9(4): [18] 张静妮. 不同秋眠等级苜蓿匍柄霉叶斑病抗性评价及抗病机理研究 [D]. 北京 : 北京林业大学,2008: [19] 黄宁. 苜蓿 ( 犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪 ) 匍柄霉叶斑病和镰刀菌根腐病抗性评价及标准对照品种的筛选 [D]. 北京 : 北京林业大学, 2012: [20] 丁守彦, 李敏权, 赵慧. 不同苜蓿品种对镰孢菌的抗性鉴定. 植物保护,2011,37(1):

BuletinofSoiland WaterConservation Vol.38,No.3 Jun.,2018 & X R( + 1, 1, < 1,=> 3 (1. E^ IFTU ^,NO ; 2.NO\ ^,NO ;3.NO B`a -

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