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2 12 +,-, :23 PPO Z4LX:\ 2371 somes: 犘狆狅 犇 1 犪 (lowppo), 犘狆狅 犇 1 犫 (highppo)and 犘狆狅 犇 1 犪犫 (intermediatetype),andtheirfrequen cywere57.8%,32.5% and9.8%,respectively.(3)thereweresixdiferentgenecombinationsonthe chromosomeof2aland2dl: 犘狆狅 犃 1 犪 / 犇 1 犪 (intermediatetype), 犘狆狅 犃 1 犪 / 犇 1 犫 (highppo), 犘狆狅 犃 1 犪 / 犘狆狅 犇 1 犪犫 (intermediatetype), 犘狆狅 犃 1 犫 / 犇 1 犪 (low PPO), 犘狆狅 犃 1 犫 / 犇 1 犫 (intermediatetype)and 犘狆狅 犃 1 犫 / 犘狆狅 犇 1 犪犫 (intermediatetype).thefrequencyof 犘狆狅 犃 1 犫 / 犇 1 犪 (low PPO)was25.6%.(4)The distributionfrequencyaboutdiferentvariationtypesofwheatppogeneinvariousecologicalregionsexis tedobviousdiferences:theproportionofthegenotypeof 犘狆狅 犃 1 犫 waslargerinnorthernwinterwheatre gionandsouth westernwinterwheatregion,and,theproportionofthegenotype 犘狆狅 犇 1 犪 waslargerin YelowandHuaifacultativewinterwheatareaandnorthernwinterwheatregion.Theproportionofgeno typecombination 犘狆狅 犃 1 犫 / 犇 1 犪 waslargerinnorthernwinterwheatregion.therefore,molecularmarker assistedselection (MAS)methodcouldbeconsideredforgeneticimprovementofappearancequalityof wheatgrain,andthroughintroducingfinegermplasmfromthenorthernwinterwheatregion. 犓犲狔狑狅狉犱狊 :commonwheat;ecotype;ppo;functionalmarker;mas 23 # 4!, U 4,23 K5, # 423 " 64, ; B # `, 23 6ABCD4# * ` [1] U V W X Y (polyphenol oxidase,ppo)_ ( ) ", 4 [2] PPO 423 5( ) C D 4 [3 4] PPO 4ST PPO 43%, 4 50% ~ 70% [5] 23 4!, 23 5 PPO 4[ Z PPO 4 Z [6] 23 PPO 4!2 R", #,! 5 R " 6B 7D $ % PPO 4& [7] ' [8],% 23ST PPO 4 2AL 2DL, : 37.2% ~50.1% 25.1%~29.1%4 Z Sun [9] ] 2A 4 (GenBank ( AY596268) ) STS^_`a 犘犘犗 18,bc 犘狆狅 犃 1 $4 Z He [10] *+2D 4,-(GenBank ( AY515506) 2./ 4 STS(SequenceTagSite)^ _ ` a,: 犘犘犗 16 犘犘犗 29, L : 犘狆狅 犇 1 $ 4 Z 0(] 14 `a bc PPO 4 Z [11 13],] 4 : ^ _ ` a [14] 8 2 [15 16] 3 [17 18] [19] J 3 L [20] 45 [21 23] 67 [24] U (8L)423 PPO Z 9, : ; U "PL( ), ] 1 4 :`a PPO $ bc, 0(] U ^_`a # U 23"PL 9 PPO Z9 :\4 < = 0 ( ] STS ^ _ ` a 犘犘犗 16 犘犘犗 29 犘犘犗 18 3 ^ _ ` a, 7 3L :;bc,- > 犘狆狅 犃 1@ 犘狆狅 犇 1? $4 Z, "PL4:\@A :B, PPO 2356QR4C, D D2356 EE 1 :; E 23 5( ) 7 23 L, ) 379 :;( 1) :;F R > 23GH, 2014~ > M,I J E F K 犇犖犃 67 M E :; N 3 T O 45;, N 8 4, P CTAB [25] N DNA, Q R S T U V W >?bc DNA 犛犜犛 8 ] 23 PPO 2A 2D $4 STS ^_`a 犘犘犗 16 犘犘犗 29 犘犘犗 18bc "PL23 4

3 :;"# ( ) < ()=> Table1 WheatcultivarscolectedfromdiferentecologicalregionsofChina OY Code 23" L Wheatecologicalregion 5( ) Wheatcolection Ⅰ J 3L Huanghuaiwinterwheatregion(HHWWR) 251 Ⅱ 3L Northernwinterwheatregion(NWWR) 41 Ⅲ 3L Southwesternwinterwheatregion(SWWWR) 53 Ⅳ 3L Changjiangmiddle lowerreacheswinterwheatregion(cmwwr) 25 Ⅴ Z 3L Qingzangspringwinterwheatregion(QSWWR) 4 Ⅵ Z3L Northeasternspringwheatregion(NESWR) 3 Ⅶ Z3L Northwesternspringwheatregion(NWSWR) 2 92 "#2 犃?2 犘犘犗 &DE 8 Table2 PrimersforidentificationofPPOgenesonchromosomes2Aand2Dincommonwheat `a Marker [,- Primersequence(5 3 ) \] Forward ^] Reverse _` a Fragmentsize/bp *` Z Targetedalele 犘犘犗 16 TGCTGACCGACCTTGACTCC CTCGTCACCGTCACCCGTAT 713 犘狆狅 犇 1 犪 犘犘犗 29 TGAAGCTGCCGGTCATCTAC AAGTTGCCCATGTCCTCGCC 490 犘狆狅 犇 1 犫 犘犘犗 18 AACTGCTGGCTCTTCTTCCCA AAGAAGTTGCCCATGTCCGC 685/876 犘狆狅 犃 1 犪 / 犘狆狅 犃 1 犫 Z `a4[b c" " >? ( ( 2) 犘犆犚 F G H I J PCR ^ 20 μl,20mmol L -1 Tris HCl(pH8.4),20mmol L -1 KCl,200μmol L -1 dntps,1.5 mmol L -1 MgCl 2,M [0.01μmol,TaqDNA (Y l.5u, DNA80ng ^ T100 TM Thermal Cycler (Bio Rad), Touchdown PCR,, 95 5min;95 30s,66 ~54 30s (M 0.3 ),72 1 min,40 ;72 5min;4 _` 0.08kg L -1 4 TUV W: bc, 1 TBE,110V V VW3h(*+_` a 2 9 VW# ),, Tanon Gis 2010 TU *+M :;4bc PPO, :B 2.1 KL < " # 犘狆狅 犃 1 M ' & N () 犘犘犗 18 ` a 379 E : ;,) b c 犘狆狅 犃 1 犪 ( PPO ) 犘狆狅 犃 1 犫 ( PPO ) 25,_` : 685bp 876bp a( 1),, 犘狆狅 犃 1 犪 $ 4 : ; 195,51.5%; 犘狆狅 犃 1 犫 4:;184, 48.5%,b,E :; PPO 4 : ; U( 3) b 3, 犘狆狅 犃 1 犪 犘狆狅 犃 1 犫 4 Z "PL4:\,,J 3L Z 犘狆狅 犃 1 犪 (55.0%)4:; U Z 犘狆狅 犃 1 犫 (45.0%); 3L Z 犘狆狅 犃 1 犪 (41.5%)4 : ; Z 犘狆狅 犃 1 犫 PPO Z 犘狆狅 犃 1 犫 3L 3L4,: 58.5% 60.4%; 3L Z 3L4:;,@ PPO 4 Z 犘狆狅 犃 1 犪,: 56.0% 75.0% 2.2 KL < O " # 犘狆狅 犇 1 M ' & N () 犘犘犗 16`a 犘狆狅 犇 1 犪 ( PPO ) 4:; _` 713bp a, 犘狆狅 犇 1 犫 ( PPO ) 4:; PCR _` a( 3,A); ^, 犘犘犗 29 ` a 犘狆狅 犇 1 犫 4 : ; _ ` 490bp 4 a, 犘狆狅 犇 1 犪 4 : ; PCR _ ` a ( 3,B), 2 ` a b c #,./,. & 379 :; 2DL $ % PPO Z:B,b c 犘狆狅 犇 1 犪 犘狆狅 犇 1 犫 犘狆狅 犇 1 犪犫 3 5 Z, PPO 犘狆狅 犇 1 犪 4:;) 219 U,

4 12 +,-, :23 PPO Z4LX:\ 2373 M.DL2000;1. 58; ;3. 1(; ;5. 6(;6. 311(;7.I06 16;8.3301; (;10. 8(;11.332; 犘犘犗 18bc "PL : 23 犘狆狅 犃 1 $4 Z M.DL2000;1.Aikang58;2.Bainong3217;3.Heyu1;4.Dengmai202;5.Huapei6;6.Fengdecunmai11; 7.An06 16;8.Guomai301;9.Fengdecunmai12;10.Huapei8;11.Guomai32;12.Bainong64 Fig.1 Alelicvariationof12wheatcultivarsfromdiferentecologicalregionsbythemarkerof 犘犘犗 18for 犘狆狅 犃 1 93 "#KL 犘狆狅 ' & ( ) KL < () Table3 Distributionofwheatdiferent 犘狆狅 genes(combinations)indiferentwheatecologicalregions Genetype )*Itern "PL Wheatregion Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅶ F Mean 犘狆狅 犃 1 犘狆狅 犇 1 犘狆狅 犃 1 / 犘狆狅 犇 1 犃 1 犪犃 1 犫 ( Total 犇 1 犪犇 1 犫犇 1 犪犫 ( Total 犃 1 犪犇 1 犪犃 1 犪犇 1 犫犃 1 犪犇 1 犪犫犃 1 犫犇 1 犪犃 1 犫犇 1 犫犃 1 犫犇 1 犪犫 ( Total 5( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% ( ) NO.ofcultivars Frenquency/% :Ⅰ~Ⅶ 1, Note:Ⅰ-Ⅶ sameastable1,thesameasbelow

5 犘狆狅 犃 1(A)@ 犘狆狅 犇 1(B)9 犘狆狅 犃 1/ 犘狆狅 犇 1(C) ( "PL4:\ Fig.2 Distributionofthegenesof 犘狆狅 犃 1(A), 犘狆狅 犇 1(B)and 犘狆狅 犃 1/ 犘狆狅 犇 1(C)indiferentwheat ecologicalregioncultivars M.DL2000;1. 58; ;3.I06 16;4.3301;5.332;6. 1(;7. 64; ; 9.K35(;10. 5(;11. 6(;12.K38( 3 犘犘犗 16(A) 犘犘犗 29(B)bc "PL : 23 犘狆狅 犇 1 $4 Z M.DL2000;1.Aikang58;2.Bainong3217;3.An06 16;4.Guomai301;5.Guomai32;6.Heyu1;7.Bainong64; 8.Dengmai202;9.Fanmai5;10.Huapei5;11.Huapei6;12.Fanmai8 Fig.3 Alelicvariationof12wheatcultivarsfromdiferentecologicalregionsbymarkers of 犘犘犗 16(A)and 犘犘犗 29(B)for 犘狆狅 犇 %; PPO 犘狆狅 犇 1 犫 4:;) PPO 4 犘狆狅 犇 1 犫 3L 123, 32.5%; # bc 37 Z #, 70.7%, - 8 L # 2 3 ( 犘狆狅 犇 1 犪犫 4:;, 9.8%;@ 犘犘犗 18 bc, 犘犘犗 16+ 犘犘犗 29 b c PPO b 3 : B,@ 64ABCD; J 3L 3 L:\ $,: 58.2% 56.0%; ( 犘狆狅 犇 1 犪犫 J 3L:\ U,) 31

6 12 +,-, :23 PPO Z4LX:\ 2375 :;, ( :;483.8% 2.3 KL <O "# 犘狆狅 犃 1? 犘狆狅 犇 1 M' & N () 3 STS ^ _ ` a 犘犘犗 16 犘犘犗 29 犘犘犗 :;4:B, "PL23 PPO 2A 2D 4 $ Z,) 6 5 Z (,: : 犘狆狅 犃 1 犪 / 犇 1 犪 ( PPO ) 犘狆狅 犃 1 犪 / 犇 1 犫 ( PPO ) 犘狆狅 犃 1 犫 / 犇 1 犪 ( PPO ) 犘狆狅 犃 1 犫 / 犇 1 犫 ( PPO ) 犘狆狅 犃 1 犪 / 犘狆狅 犇 1 犪犫 ( PPO ) 犘狆狅 犃 1 犫 / 犘狆狅 犇 1 犪犫 ( PPO ), : 32.2% 14.0% 25.6% 18.5% 5.3% 4.5% C PPO $ 犘狆狅 犃 1 犫 / 犇 1 犪 (456QR 3@ 2,C,PPO Z ( "PL:\ [Z,,J 3L 3L23,PPO Z ( 犘狆狅 犃 1 犪 / 犇 1 犪,: 35.1% 40.0%; 3L 3L23 PPO Z ( 犘狆狅 犃 1 犫 / 犇 1 犪,: 41.5% 30.2% 3 23ST PPO 23 4#, "PL23 5( )PPO Z 9 :\, 23 PPO = (4 9 O PPO 4 =,E 2 3 : ; PPO 犘狆狅 犃 1 犫 犘狆狅 犇 1 犪 犘狆狅 犃 1 犪 / 犘狆狅 犇 1 犪 4 : 48.5% 57.8% 25.6% [26] -, 2 3 犘狆狅 犃 1 犫 犘狆狅 犇 1 犪 ( ) F,: 58.2% 59.8%, PPO ( 犘狆狅 犃 1 犪 / 犘狆狅 犇 1 犪 $ 32.5%? [ Z _ %& :; R9,= 56 b R 7 "PL U 5 C 4 O, [26] :;b 4 23"PL4 5@ ( ) E4L =106, 17 U D , E4L D6 = 23 PPO 4# = PPO $ 23 "P L:\@A :B, "PL PPO $4:\ [Z-, "PL $ :\ $ [11,20,25] ;=, Z 3L 3L423 5 PPO $ -, 5[ _@ 84"P, "PL 423 5( )PPO 8"P 4 5 ; 3L 3L423 5( ) PPO $( () F, "PL23 5( )4 PPO _ ;,$ 23 5! # 23 CD4, 5 (E 5*`,C DZ = (E (, * " P L ( [2016]1( ), 8 PPO 23 5( )4 = ] `a 犘犘犗 16 犘犘犗 29 犘狆狅 犇 1 $bc,e :; 犘狆狅 犇 1 犪 犘狆狅 犇 1 犫 犘狆狅 犇 1 犪犫 ) 3 5 Z, 犘狆狅 犇 1 犪犫 8, 4, :;) 37, 31 J 3L; 4 _@ ( 5 5 (, :;`a ( *4,23 PPO 2 3 2A 4 犘狆狅 犃 2D 4 犘狆狅 犇 1 $%, 2B 4 U QTL $ 4 [27 32], :;`a C PPO ( ), 0(] PPO 4^_ `a = ] PPO 4 ^ _ ` a 犘犘犗 16 犘犘犗 18 犘犘犗 29 E : ; 犘狆狅 犃 1 犘狆狅 犇 1 $4 Z,C U PPO $( ()4D6 5( ), 23 CD E K4:;, `a :;`a 5 4 #,! _ ( 23 O:;4 PPO " c, #_$ 54&> 4 U 40(

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