资料手册 Eshmuno 层析介质系列高产下游纯化的完美辅助工具

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肃蒙
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1 资料手册 Eshmuno 层析介质系列高产下游纯化的完美辅助工具

引言 3 多年来, 默克 KGaA 一直是化学与制药工业的顶尖专家, 提供优质产品和服务默克 KGaA 的生命科学部门默克密理博, 延续了这一传统, 长期投资于研究和开发, 屡次创造了改变行业格局的革新默克密理博提供从发现到制造的一整套创新解决方案和支持服务, 目的是让您在生物制药工艺的每个步骤均获得性能优势来自默克密理博的层析介质对于层析, 挑战在于有效捕获最终产品,

2 引言 3 多年来, 默克 KGaA 一直是化学与制药工业的顶尖专家, 提供优质产品和服务默克 KGaA 的生命科学部门默克密理博, 延续了这一传统, 长期投资于研究和开发, 屡次创造了改变行业格局的革新默克密理博提供从发现到制造的一整套创新解决方案和支持服务, 目的是让您在生物制药工艺的每个步骤均获得性能优势来自默克密理博的层析介质对于层析, 挑战在于有效捕获最终产品, 同时尽可能降低成本缩短到临床应用的时间产品滴定度稳定增加, 对下游加工提出了更大的需求为帮助您成功, 我们致力于推出创新可靠且满足法规和市场需求的层析解决方案 193 年, 层析原理被发现, 仅仅一年后, 我们就率先制造了用于层析的硅石产品 Eshmuno 层析介质系列清晰体现了我们大力投资于研发的效果, 该层析介质系列是为高效的下游加工而设计的 Eshmuno 介质用于有效的下游加工 Eshmuno 层析介质是一个独特的离子交换介质系列, 它是为了单克隆抗体 (mab) 的高产下游纯化而特别设计的 Eshmuno 介质不但具有高结合力和优良的压力 - 流速特性, 还对特定纯化挑战具有高选择性和灵活性, 因而成为现有最高效的宿主细胞蛋白质 (HCP) 去除介质使用 Eshmuno 介质, 您的下游加工可获得杰出的生产能力, 从而大大节约开发时间和制造成本为什么选择 Eshmuno 介质? 下游加工的生产能力优越更高的选择性和 HCP 去除活跃的触手吸附稳健安全的填充程序切实地节约成本和时间 2

Eshmuno 介质怎样工作? Eshmuno 介质的核心在于创新专有的触手结构, 其与目标物质的结合远远比之前的技术更有效 Eshmuno 介质拥有优越的触手技术, 又具有新型亲水聚乙烯醚基质的优点它能够采用高得多的流率, 而生物分子仍与触手强力结合哪种 Eshmuno 介质适合于您的工艺?

3 Eshmuno 介质怎样工作? Eshmuno 介质的核心在于创新专有的触手结构, 其与目标物质的结合远远比之前的技术更有效 Eshmuno 介质拥有优越的触手技术, 又具有新型亲水聚乙烯醚基质的优点它能够采用高得多的流率, 而生物分子仍与触手强力结合哪种 Eshmuno 介质适合于您的工艺? Eshmuno S 介质阳离子交换介质设计目的 : 在直接捕获与蛋白 A 之后步骤中, 快速有效地纯化抗体与其他现代阳离子交换剂相比, 抗体结合力优越 Eshmuno Q 介质阴离子交换介质在典型的阴离子交换应用 ( 例如以流过模式去除杂质, 或在血液制品加工时分离血液因子 ) 中, 效果杰出与传统阴离子交换介质相比, 储存期间的稳定性提高 Eshmuno HCX 介质多模式层析介质为了在高含盐浓度下直接捕获蛋白质而特别设计在典型的离子交换和流过应用中, 含盐浓度较高时, 性能效果卓越 Eshmuno CPX 介质阳离子交换介质设计目的 : 利用专利触手得构造及 µm 粒径大小基质, 提供超高载量及优异的多具体去除能力与传统的阳离子交换精纯步骤相比, 分离单体及多聚体性能效果卓越且单位生产力高 3

4 Eshmuno S 介质优越的下游单抗纯化 Eshmuno S 介质是 Eshmuno 离子交换介质系列的第一个成员它是强阳离子交换剂, 在直接捕获与蛋白 A 之后步骤中具有高生产能力与所有 Eshmuno 介质产品一样,Eshmuno S 介质拥有触手结构以更有效地与目标物质结合, 又具有亲水聚乙烯醚基质的优点与其他现代阳离子交换剂相比, 它显示了优越抗体结合力平均粒径为 85µm 的 Eshmuno S 介质能够采用高得多的流速, 而生物分子仍与触手强力结合更高的选择性和 HCP 去除使用 Eshmuno S 介质的优点之一, 是它对所感兴趣的生物分子的高选择性 Eshmuno S 介质有效地去除宿主细胞蛋白质, 因而选择性比传统层析介质更高由于 Eshmuno S 介质具有优良的压力流动特性, 您的下游加工可获得杰出的生产能力 ( 超过 4 mg/ ml x h), 为 mab 的生产节约可观的制造成本 Eshmuno S 介质特性类型官能团 -SO 3 基质溶菌酶容量离子容量强阳离子交换剂表面接枝硬质聚乙烯醚亲水聚合物 mg/ml 沉降介质 -1 µeq/ml 沉降介质平均粒径 µm 平均粒径 85 µm IgG 动态载量压力降 (1 16mm, 5 ml/min, 1 cm/h) > 6 mg/ml(2 分钟保留时间 ) < 1. bar 图 1. 在直接捕获步骤中, 优越的 mab 结合力 a) 5% 流穿 5 分钟保留时间, Eshmuno S 介质从真实稀释原料中直接捕获单克隆抗体 mab2 的动态载量 (DBC) b) 用 Eshmuno S 介质, 可实现优良的压力流动特性 : 2 cm 内径的柱 ; 在 1 mm NaCl 中,19.5 cm 床层高度, 记录 8% 压缩 a) b) CEX1 CEX2 DBC mg/ml Eshmuno S 介质 1 净压力降 (bar) 线性流速 (cm/h) 4

Eshmuno Q 介质优越的阴离子交换层析 Eshmuno Q 阴离子交换介质兼具 Eshmuno 介质的触手结构与新型亲水聚乙烯醚基质 Eshmuno Q 介质在典型的阴离子交换应用 ( 例如以流过模式去除杂质, 或在血液制品加工时分离血液因子 ) 中, 效果杰出提高稳定性与常规阴离子交换介质不同,Eshmuno Q 介质内在 Eshmuno Q 介质特性类型强阴离子交换剂

5 Eshmuno Q 介质优越的阴离子交换层析 Eshmuno Q 阴离子交换介质兼具 Eshmuno 介质的触手结构与新型亲水聚乙烯醚基质 Eshmuno Q 介质在典型的阴离子交换应用 ( 例如以流过模式去除杂质, 或在血液制品加工时分离血液因子 ) 中, 效果杰出提高稳定性与常规阴离子交换介质不同,Eshmuno Q 介质内在 Eshmuno Q 介质特性类型强阴离子交换剂稳定, 不受柱消毒所用的碱性溶液的影响结果 : Eshmuno Q 介质保持高结合力, 而其他阴离子交换介质的结合力显著下降切实地节约成本和开发时间在许多应用中, 与其他阴离子交换剂相比, Eshmuno Q 介质显示的目标分子洗脱非常清晰由于目标分子浓度更高洗脱体积显著减小, 不必采取进一步的浓缩步骤这样, 您节省了缓冲溶液和官能团基质平均粒径 (d ) 85 µm 蛋白质结合力 (2 分钟保留时间,1% 流穿 ) 离子容量 pk 值 13 ph 稳定性 ph 1 ~ 13 压力极限三甲基铵乙基 (TMAE) 表面接枝硬质聚乙烯醚亲水聚合物 8 mg BSA/mL 沉降介质 4 mg plgg/ml 沉降介质 9-19 µeq/ml 沉降介质 8 bar 耗材的费用, 也节约了宝贵的时间 DBC(mg 蛋白质 /ml 重力沉降介质 ) min. residence time 8 min. residence time 4 62 mab1 (1 mm glycerine/ NaOH, ph 9.5) 65 7 mab3 (1 mm glycerine/ NaOH, ph 9.5) BSA ( mm Tris/ HCI, ph 8.) 65 huhsa (2 mm Tris/ HCI + 7 mm NaCl, ph 7.5, 9 ms/cm) 83 huhsa (2 mm Tris/ acetate, ph 5.5) 图 2. 在 1% 流穿条件下测量的动态载量 (DBC) 5

Eshmuno HCX 介质在高含盐浓度下的直接捕获 Eshmuno HCX 介质是 Eshmuno 介质产品的新成员, 为混合模式介质 Eshmuno HCX 介质是为了在较高含盐浓度下直接捕获重组蛋白质而特别设计的凭借可靠的触手技术, 生物药物与介质之间可以存在多点相互作用, 从而产生更高的结合力

与离子交换剂不同, 混合模式介质在高含盐浓度下与蛋白质结合, 能够从澄清原料中直接捕获目标 S HO S S 与蛋白质的相互作用类型弱离子强离子疏水氢键供体 / 受体 Eshmuno HCX 介质特性类型官能团基质平均粒径 (d ) 75-95 µm IgG 动态载量 (ph 5.

在 mm 醋酸盐 mm 磷酸盐 -3 mm NaCl 中, 多克隆人 IgG 的动态载量 ( 单位为 mg/ml) 3 mm NaCl 1 mm NaCl 75 mm NaCl mm NaCl 4. 4.5 5. 5.5 6. 6.5 7.

6 Eshmuno HCX 介质在高含盐浓度下的直接捕获 Eshmuno HCX 介质是 Eshmuno 介质产品的新成员, 为混合模式介质 Eshmuno HCX 介质是为了在较高含盐浓度下直接捕获重组蛋白质而特别设计的凭借可靠的触手技术, 生物药物与介质之间可以存在多点相互作用, 从而产生更高的结合力特别设计的亲水聚乙烯醚基质填料能够采用高流速, 提高生物制药操作的加工速率因此,Eshmuno HCX 介质在典型的离子交换和流过应用中, 含盐浓度较高时, 性能效果杰出图 3. 与离子交换剂不同, 混合模式介质在高含盐浓度下与蛋白质结合, 能够从澄清原料中直接捕获目标 S HO S S 与蛋白质的相互作用类型弱离子强离子疏水氢键供体 / 受体 Eshmuno HCX 介质特性类型官能团基质平均粒径 (d ) µm IgG 动态载量 (ph 5.5, 5 分钟保留时间,1% 流穿 ) 离子容量多模式阳离子交换层析磺基羧基和苯基表面接枝硬质聚乙烯醚亲水聚合物 mg/ml 17-3 µeq/ml HO 线性流速可达 1 cm/h,< 2.5 bar 净压力 ph 稳定性 ph 2 ~ 12 压力极限 8 bar 图 4. 在 mm 醋酸盐 mm 磷酸盐 -3 mm NaCl 中, 多克隆人 IgG 的动态载量 ( 单位为 mg/ml) 3 mm NaCl 1 mm NaCl 75 mm NaCl mm NaCl ph 在很宽的工艺条件范围内具有优越的载量静态和动态测试方法均显示, 含盐度高时, Eshmuno HCX 介质在很宽的操作条件范围内获得高蛋白质结合力开放互相连通的孔隙结构, 保持快速传质, 从而在很宽的工艺条件范围内具有更高的动态载量图 5. 与其他基于球形填料的技术相比, 高度交联的亲水聚乙烯基衍生物形成了杰出的结构 µm 1 µm µm 硬质基质填料, 优越的填充性能仔细看 Eshmuno HCX 介质, 您会理解它为什么有优越的柱填充性能规则球形的颗粒适当的粒度分布, 易于填充和放大开放规则的孔隙系统, 使蛋白质容易与配位体接触 6

7 Eshmuno CPX 介质高聚体去除力的阳离子 Eshmuno CPX 介质是 Eshmuno 离子交换介质系列的最新成员它是强阳离子交换剂, 用在蛋白 A 之后精纯步骤中单体与多具体的分离, µm 的平均粒径, 带来优异的生产能力更高的载量和多聚体去除 Eshmuno CPX 是第一个为满足高生产下游纯化而延伸出的产品, 同时结合高载量与高聚体分离力, 满足下游纯化工艺中常见的挑战 - 必须在精纯步骤中分离与目标分子形态相近的不纯物 Eshmuno CPX 介质类型强阳离子交换剂官能团 -SO 3 基质表面接枝硬质聚乙烯醚亲水聚合物平均粒径 (d ) µm 蛋白结合能力 (4 分钟保留时间,5% 流穿 ) ph 稳定性 ph 1 ~ 13 压力极限线性流速 11 mg pigg/ml 沉降介质 8 bar 最高 cm/h( 压力小于 3 bar),2 1 cm i.d. 柱子,12%-15% 压缩比, 1mM NaCl 作为流动相 SBC mab7 [mg/ml sed. resin] 电导率 [ms/cm] 电导率 [ms/cm] DBG plgg [mg/ml CV] ph 1 ph 图 6. Eshmuno CPX 对单抗的静态结合能力,mg/ml 沉降介质图 7. Eshmuno CPX 对 plgg 的动态结合能力,mg/ml 柱体积 initial aggregate level: 7.2% mab 单体收率 (%) mab 多聚体水平 (%) 图 8. 料液 :mab5( 蛋白 A 亲和之后 ), 多聚体水平 :7.2%; 上样 :7 mg/ml 柱尺寸 :5 mm i.d. 2 mm; 柱体积 :3.9 ml; 线性流速 :2 cm/h Buffer A: mm 醋酸钠 + mm 氯化钠,pH 4.75,8 ms/cm Buffer B: mm 醋酸钠 + 1 M 氯化钠,pH 4.75 梯度 : 到 % B,2 个柱体积 7

8 Eshmuno 介质和病毒去除生物制药存在病毒污染的风险层析是广为接受的病毒 ( 无论其大小形态 ) 去除方法视您的工艺参数而定, 您可以选择利用基于膜或基于球型颗粒填料的技术来实施病毒吸附策略通常, 这两种方法用于不同的工序基于膜的层析非常适合于高流率大体积的工序, 而基于小球的技术具有特异性 Eshmuno 介质怎样去除病毒? 关于 Eshmuno S 和 HCX 介质的多个实验, 指出了显著的病毒清除取自生产过程的细胞培养上清液, 被掺入已知滴定度的病毒凡是使用离子交换层析介质的, 数据均显示了显著的病毒清除以非结合或结合模式操作的阴离子交换层析, 能够有效去除潜在的病毒污染物, 可视为相当稳健的步骤使用新鲜或即将过期的层析材料, 不影响病毒清除能力, 说明了病毒清除工序中 Eshmuno 介质的稳健性这些数据说明,IEX 技术和大操作窗口可有助于总的病毒清除不同层析离子交换介质的病毒去除结果层析介质层析与模式类型病毒病毒 (log 1 ) 病毒 (log 1 ) 产品洗脱液 ( 运行 1) 产品洗脱液 ( 运行 2) AEX, 结合 MuLV Eshmuno Q MuLV AEX, 非结合 PPV Eshmuno S CEX, 结合,pH 5. MuLV PRV Eshmuno HCX 多模式 XMuLV MVM Eshmuno CPX CEX, 结合 XMuLV MVM.4 - 让 Eshmuno 介质为您所用 Eshmuno 介质的支持力量, 是默克密理博无可比拟的全球专业知识和客户支持服务 64 个国家有我们的专用服务组织, 在全球提供技术和应用专门知识您可以依靠我们提供现场培训与支持, 包括验证服务 ; 或使用我们在世界各地的八个生物制药科学与培训中心之一, 将我们的专业知识引入您的工艺我们的目标是帮助您 : 由小试规模, 可预测地有效地转变为制造规模生产确保以计划速率进行生产, 并获得所期望的收率和纯度建立稳健一致可转移的工艺确保厂房及时并成功地运行优良的制造质量 Eshmuno 介质在德国开发和制造依照 cgmp, 产品质量自始至终受到严格控制 Eshmuno 介质能够保证 : 优良的批间再现性杰出的法规支持无与伦比的专业知识和应用支持订购信息 Eshmuno S Eshmuno Q Eshmuno HCX Eshmuno CPX Merck Millipore and the M logo are trademarks of Merck KGaA, Darmstadt, Germany. 214 EMD Millipore Corporation, Billerica, MA, USA. All rights reserved. BPS2141Eshmuno v1

资料手册 Fractogel 层析介质 : 快速高效地捕获您的目标

资料手册 Fractogel 层析介质 : 快速高效地捕获您的目标资料手册 Fractogel 层析介质 : 快速高效地捕获您的目标引言 300 多年来, 默克 KGaA 为化学与制药工业开发了尖端优质的产品和服务默克 KGaA 的生命科学部门默克密理博, 延续了这一传统, 长期致力于研究和开发, 我们的投资屡次产生了改变行业格局的革新默克密理博提供从发现到制造的一整套创新解决方案和支持服务, 目的是让您在生物制药工艺的每个步骤均获得性能优势来自默克密理博的层析介质

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