第 期 光谱学与光谱分析 + *' $> A 色谱柱 ++ 流动相为甲醇 甲酸 + + 流速 '$ 检测波长 $ 柱温 E * 双黄连口服液的 采集光谱仪分辨率为 扫描次数 次 以水作参比 每个样品作 次平行实验 取其平均光谱 用光谱仪专用软件 采集光谱 对光谱信号进行基线校正 光谱范围 - 数据处

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1 第 卷 第 期 光谱学与光谱分析 + 年 月 "$ $"' " 近红外光谱法测定双黄连口服液中绿原酸和连翘苷的含量 戴传云 高晓燕 汤 波 傅 亚 刘火安 重庆科技学院生物系 重庆 北京中医药大学科技发展中心 北京 摘 要 选择多批双黄连口服液样本 应用 法测定绿原酸和连翘苷的含量 同时进行 测定 建立了绿原酸和连翘苷的含量预测模型 及相关系数 为指标考察数据处理方法 为指标考察 的预处理方法及选择光谱范围或波数点 数据处理方法为逐步多元线性回归 直接采用原始光谱进行建模 绿原酸的波数为 + 和 连翘苷的波数为 + + 和 分别为 + 和 相关系数分别为 + 和 外部交互验证的结果表明该预测模型准确可靠 可作为双黄连口服液的快速质量评价控制方法 关键词 近红外光谱 双黄连口服液 绿原酸 连翘苷 中图分类号 + 文献标识码 '$ 引 言 反映的是分子的振动频谱 主要是分子中 基团的倍频和合频的吸收 其吸收谱带强度较弱 谱带复杂 重叠严重 与经典的定性 定量方法不同 技术需借助于化学计量学方法进行数据处理 将其所含的定性 定量信息提取出来 与经典的定量方法进行相关分析 建立数学模型 对待测组分进行含量预测或相似度判断 技术由于其快速 准确 无损 富含化学信息以及易于实现在线检测的特点 已被成功地应用于原料药 药品包装材料 药物中光学异构体的测定以及药品生产在线质量控制等方面 是合成药生产在线质量控制中应用最多的分析测试 技术之一 在含水较多的介质中指标的成分含量测定及 过程评价也有相关报道 中药口服液是一种现代中药制剂 建立其快速质量评价方法具有重要意义 本文选择双黄连口服液为研究对象 探索应用 进行中药口服液中指标成分快速测定的方法 双黄连口服液具有疏风解表 清热解毒的功效 用于外感风热所致的感冒 发热 咳嗽 咽痛等症 其处方由金银花 黄芩和连翘三味药组成 黄芩中的黄芩苷 金银花中的绿原酸以及连翘中的连翘苷是 + 版 中国药典 进行含量 测定的指标成分 目前已报道的绿原酸和连翘苷的含量测 定方法很多 大部分都采用 本文应用 与 的相关分析建立了双黄连口服液中绿原酸和连翘苷含量的快速预测模型 经与 法的交互验证 表明所建立的绿原酸和连翘苷含量预测模型准确 可靠 为双黄连口服液质量控制的在线化提供了参考方法 材料与方法 药品与试剂绿原酸 连翘苷对照品购自中国药品生物制品鉴定所 批号分别为 和 + 双黄连口服液由指定药厂提供及市场购得 甲醇为色谱纯 购自 ' 公司 甲酸为分析纯 购自北京化学试剂厂 仪器 $' 傅里叶变换近红外光谱仪 美国 ' 公司 $" 光谱分析软件 *' $ 高效液相色谱仪 包括四元泵 真空脱气泵 自动进样器 柱温箱 二极管阵列检测器 数据处理工作站 绿原酸含量的 测定 *' $> A 色谱柱 + + 流动相为甲醇 甲酸 + + 流速 '$ 检测波长 $ 柱温 E 连翘苷含量的 测定 收稿日期 修订日期 基金项目 国家自然科学基金项目 ++ 资助 作者简介 戴传云 年生 重庆科技学院生物系副教授 '"'

2 第 期 光谱学与光谱分析 + *' $> A 色谱柱 ++ 流动相为甲醇 甲酸 + + 流速 '$ 检测波长 $ 柱温 E * 双黄连口服液的 采集光谱仪分辨率为 扫描次数 次 以水作参比 每个样品作 次平行实验 取其平均光谱 用光谱仪专用软件 采集光谱 对光谱信号进行基线校正 光谱范围 - 数据处理方法光谱数据经多元散射校正技术 ''' '$ 处理 分别采用逐步多元线性回归 ' ' '$ * '$ 主成分分析 '$' $ $$"' 和偏最小二乘 ' D 建立定量校正模型 以校正集样品的交叉验证均方差 $D 为指标优化建模参数 和 的计算方法见文献 光谱预处理方法选择分别采用原始光谱 一阶导数光谱和二阶导数光谱进行建模 值 值光谱预处理方法用于建模 光谱范围选择排除水分子的影响后 值最小为原则选择光谱范围或波数点 结果 双黄连口服液中绿原酸含量测定本文采用 法测定了 批双黄连口服液中绿原酸的含量 结果见表 用于建立绿原酸含量预测模型的双黄连口服液中绿原酸的含量范围为 + * 双黄连口服液中连翘苷含量测定本文采用 法测定了 批双黄连口服液中连翘苷的含量 结果见表 用于建立连翘苷含量预测模型的双黄连口服液中连翘苷的含量范围为 ++ * 双黄连口服液的 图双黄连口服液的 图见图 数据处理方法的选择分别采用 和 建立绿原酸和连翘苷的定量校正模型 及相关系数 来考核 结果见表 表中数据可以看出采用 处理数据更具合理性 + ' ' $ ' $ ' ' ' $ $ $ * $' ' * $ $ * $' ' * ' ' $ ' $ ' ' ' $ $ $ '"'$ * $ $ '"'$ *

3 光谱学与光谱分析 第 卷 ' ' ' + ' ' ' $ + '$ ' $$ ' ' ' ' $ ' ' ' '$* * * 光谱预处理方法的选择分别采用原始光谱 值分析 数据见表 从表中数据可知 值差别不大 因此采用原始光谱建立预测模型 + '$ ' $$ ' ' ' $ '$* * $'' '"'$ '*'$ + ' '' + $ '' + - 光谱范围选择水分子中的 基团在 区的 $ 和 + +$ 附近分别有一个很强的倍频和合频吸收带 排除水峰的影响后 值最小为原则选择光谱范围或波长数点进行建模 本文选择的波数点具体数值见表 + 绿原酸 连翘苷含量预测模型的内部交互验证采用以上确定的最优条件 即 法处理数据 原始光谱及最佳波长点 建立绿原酸 连翘苷含量预测的最优模 型 为了评价模型的稳定性和拟合效果 对该模型进行内部交互验证 绿原酸含量预测模型的交互验证结果见图 连翘苷含量预测模型的交互验证结果见图 由图中可见 绿原酸和连翘苷含量的交互验证预测值与 测定值间的相关系数分别为 + 值分别为 和 交互验证结果表明预测值与 测定值接近 绿原酸和连翘苷含量预测模型的 预测值相对于 测定值的相对偏差分布范围分别为 和 之间 说明模型的稳定性和拟合效果较好 + * " ' + $ $ ' ' ' $ ' ' ' $ * $'' '"'$ 讨 论 中药的质量控制一直是影响中药国际化的瓶颈 其中一个主要原因就是中药质量的稳定均一难以保证 因此 实现中药生产过程质量控制的在线化是中药发展的方向 其中指标成分的快速测定是必不可少的 技术由于快速 无损及原位成为在线质量控制中指标成分含量测定的首选方法 本文应用 技术 以双黄连口服液为研究对象 探索了中药口服液中指标成分含量快速测定方法 为建立其他中药口服液及注射剂的在线质量控制方法提供了参考思路 + 版 中国药典 双黄连口服液项下规定了绿原酸 连翘苷和黄芩苷 种指标成分的含量测定 本文在研究过程中 对黄芩苷的含量预测模型也进行了研究 但其各种参数需要进一步优化 在后续的工作中将进一步深入研究

4 ' *"M C I ST >JM - $V X MS Na[ IJWVH $V X N S NIJWVH S ' *@M C I ST >JM -? $V X MS Na[ IJWVH $V X N S NIJWVH S 参 考 文 献 -jf I W af jvid]^ VM H?$?>> 瞿海斌刘全程翼宇$ 分析化学$""? 滕乐生王 迪宋 佳等$ Ud]W M B `]Q ]Z 光谱学与光谱分析$ ""** *$-*-? Wafe Bd]^ MIfVMB 刘绪平冯艳春胡昌勤$VM Z NJM H 药物分析杂志$ h ""** C$>?aW Iae M ]e 倪力军史晓浩高秀娇$VM JM H Z 中国药学杂志$""?+ *$@* Cd]M B cef I 冯尚坤徐海菊$a N U M B红外技术$""*" d]^ MIfVMB 侯少瑞 冯艳春 胡昌勤$VM Z NJM H 药物分析杂 h >JM H VHH N\ NI M MJ [ NVM 中华人民共和国卫生部药典委员会编$JM H N 中华人民共和国药典$ M J [ NVM $ 'R B VM H a 北京化学工业出版社$""C->> J *R \V Za I"VM HH a W H"""C">C B B

5 光谱学与光谱分析 第 卷 ' ' $ ' ' $ ' ' ' $ ' ' ' ' $ " $ A' "$ B B $ $ '*" $*D'$*B$' '" ' $ $ $*" $*D'$* '$ ' $ $ $ ''$ '$ ''$ ' '$*B$' '" '$ ''$ ' '$* '$ + ' $ " ' ''$* $ $ * $''$ '"'$'$ $* $*'$ ' '$* ' D '?D '" '$ $* $*'$ ' ' $$" $* $*'$ ' $ $ $ * $''$ '"'$ '$ '$* $ ' '$ ' $ $ * $ ''$ '"'$'$ $* $*'$ ' ' " '$$"' $ *'$ " $ $ '$* $ '$*$ $* $* $ $ '$* '*'$ ' $ '$ ' $ $ * $''$ '"'$ + $+ + ' '$ '' $ * $''$ '"'$ + $ + $ ''$'$' ''$* $ ' $ 'D '" $ $* $*'$ ' $* $*'$ ' * $' '"'$ ' $

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