期董迎辉等斧文蛤精子超微结构与受精过程的细胞学变化系统观察以期为斧文蛤受精机理的深入研究种质资源保护以及规模化人工育苗提供理论基础材料与方法材料斧文蛤亲贝于 * 年月取自浙江温州苍南县自然海区贝龄年壳长, 暂养在浙江省海洋水产养殖研究所清江科研基地足量轮换投喂新鲜的小球藻 #

Size: px

Start display at page:

Download "期董迎辉等斧文蛤精子超微结构与受精过程的细胞学变化系统观察以期为斧文蛤受精机理的深入研究种质资源保护以及规模化人工育苗提供理论基础材料与方法材料斧文蛤亲贝于 * 年月取自浙江温州苍南县自然海区贝龄年壳长, 暂养在浙江省海洋水产养殖研究所清江科研基地足量轮换投喂新鲜的小球藻 #"

断纵简
7 years ago
Views:

1 第卷第期年月水产学报! "#$% #% &'% 文章编号 * % ()%%%%* 斧文蛤精子超微结构与受精过程的细胞学变化董迎辉林志华姚韩韩浙江万里学院生物与环境学院浙江宁波摘要采用电镜和荧光显微镜技术对斧文蛤精子超微结构与受精过程的细胞学变化进行了系统研究电镜观察表明斧文蛤精子为鞭毛型全长 % %, 由头部中段和尾部三部分组成头部呈稍弯曲的狭茧形长约 %, 由顶体和细胞核组成顶体呈圆锥形内部中轴处有亚顶体腔细胞核为长锥形有核前窝和核后窝中段由线粒体围绕中心粒复合体构成个近球形的线粒体呈单层梅花状排列中心粒复合体由近端中心粒和远端中心粒组成远端中心粒延伸出尾部的轴丝尾部为细丝状鞭毛内部的轴丝呈典型的结构外周有波浪状质膜包被用荧光显微镜观察了斧文蛤受精及早期卵裂过程的细胞学变化结果发现斧文蛤成熟未受精卵呈圆球形核相处于第一次成熟分裂中期在水温条件下受精受精后,-1 精子入卵并膨胀成球形受精后,-1,-1 受精卵排出第一第二极体,-1 左右精卵核膨胀形成雄雌原核,-1 两性原核在卵子中央发生染色体联合,-1 受精卵进行第一次卵裂形成个大小不等的分裂球,-1 第二次卵裂结束形成大小个卵裂球核相变化与第一次卵裂基本相同,-1 第三次卵裂完成自此次起开始进行螺旋分裂另外在斧文蛤受精过程中发现了约的多精入卵现象其对成熟分裂和早期卵裂过程影响很大常造成成熟分裂紊乱和第一次卵裂染色体分离异常关键词斧文蛤精子超微结构受精多精入卵中图分类号 *% * 文献标识码斧文蛤,!!$#!-0'B 隶属于瓣鳃纲 ',$-'10-' 帘蛤目 "1#-' 帘蛤科 "1-' 文蛤属,!!$ 为暖水性海产双壳贝类主要分布于日本和中国南海在我国的广东海南广西等省份沿海均有分布埋栖于潮下带至水深, 浅海的沙质海底由于斧文蛤具有个体大生长快味道鲜美等优点潜在的养殖开发前景十分广阔然而目前斧文蛤人工繁养殖技术不成熟自然资源量稀缺且有关斧文蛤生产开发和基础研究的报道均十分匮乏仅见潘宝平等! 等利用线粒体 */ 基因片段及核糖体转录间隔区进行系统分类的研究而对其发育生物学方面的研究尚未见报道发育生物学中的受精生物学研究是开展人工繁殖和育种工作的基础和保障而精子超微结构观察和受精过程的细胞遗传学变化研究是受精生物学的重要内容近年来国内外学者已利用电镜荧光显微镜石蜡切片等多种技术手段对贝类的精子结构受精过程早期发育等进行了大量的研究为贝类的种类鉴别生殖进化受精机理研究及人工育苗杂交育种实践提供了重要资料本研究组自年开始斧文蛤的人工育苗和增殖放流工作已在亲贝促熟人工催产苗种培育人工养殖等方面取得了突破性进展作者在人工育苗中对其精子的超微结构和受精的细胞遗传学过程进行了收稿日期修回日期资助项目国家自然科学基金项目 * 国家八六三高技术研究发展计划宁波市科技局农业择优委托项目! 通讯作者林志华 $ +,'-$/0-0'**%#,

2 期董迎辉等斧文蛤精子超微结构与受精过程的细胞学变化系统观察以期为斧文蛤受精机理的深入研究种质资源保护以及规模化人工育苗提供理论基础材料与方法材料斧文蛤亲贝于 * 年月取自浙江温州苍南县自然海区贝龄年壳长, 暂养在浙江省海洋水产养殖研究所清江科研基地足量轮换投喂新鲜的小球藻 #!&# 亚心形扁藻 #!+! 叉鞭金藻!! 3% 等单胞藻藻液以促进其性腺发育成熟方法精子形态结构的透射电镜和扫描电镜观察活体解剖取发育成熟的雄性斧文蛤精巢剪切成,, 左右小块用冷的 % 戊二醛固定次置冰箱中保存固定样品经 %,#$( 磷酸缓冲液漂洗锇酸后固定丙酮系列脱水 3#1 环氧树脂包埋型超薄切片机切片切片厚度约 1, 醋酸铀和柠檬酸铅双重染色在日立型透射电镜下观察并拍照扫描电镜观察样品是取刚产出的斧文蛤浓密精液用冷的 % 戊二醛固定保存样品经酒精系列脱水叔丁醇置换临界点干燥离子溅射仪镀金在日立型扫描电镜下观察!! 拍照受精及早期卵裂过程的荧光显微镜观察选择性腺成熟的斧文蛤亲贝利用阴干流水刺激的方法催产分别挑出刚产的雌雄个体雄性排精呈烟雾状雌性产卵为颗粒状亲贝经淡水冲洗后单个放入的烧杯中加入, 过滤海水让其产卵排精通过镜检挑选质量好的精卵在水温条件下进行人工授精和培养从受精开始,-1 内每隔分钟取样一次 *,-1 每隔分钟取样一次每次取卵量粒以上样品用多聚甲醛溶液固定次保存于冰箱中观察前用 %,#$( 磷酸缓冲液 3 % 冲洗样品次滴加 #0> 荧光染料江苏碧云天生物技术研究所在黑暗环境下染色,-1 再用磷酸缓冲液冲洗次然后将卵液滴于载玻片上加滴抗淬灭剂用盖玻片轻微压片在 -#1 - 荧光显微镜的紫外光下观察!! 拍照每个样品观察卵数粒以上以上实验重复次结果斧文蛤精子的形态和超微结构斧文蛤精子属于鞭毛型由头部中段和尾部三部分组成全长 % %, 精子头部外形呈稍弯曲的狭茧形长度约 %, 由顶体 '##, 和细胞核 1$ 组成图版 + 顶体位于头部的最前端长 % %, 圆锥形顶部前端明显突出为短柱状整个顶体电子密度不均匀前部的顶体突电子密度小顶体后部稍大顶体内面中轴处有一圆柱形的亚顶体腔 '##,'$3' 图版 + 顶体后方为长圆柱形细胞核长约 %, 由后向前逐渐变细前端直径约 %, 后端直径约 %, 核内含有高度浓缩的染色质电子密度最高偶尔有着色浅的形状不规则的核泡存在图版 + 核前端有核前窝 #1> 1$'3#> 核后端与近端中心粒相邻的凹陷形成核后窝 3#>-#1$'3#> 与线粒体嵌入形成的凹陷为植入窝 -,3$'1>'>-#1 3#> 图版 + 中段由核后端的线粒体,->#0#1-' 和中心粒复合体 1>-#$'#,3$ 构成斧文蛤精子有个近球形或椭圆形的线粒体呈单层梅花状排列围绕在中心粒复合体周围图版 + 线粒体直径 % %, 内部为双层膜结构内膜向腔内折叠成嵴呈片层状排列清晰可见图版 + 中心粒复合体由近端中心粒 3#-,'$1>-#$ 和远端中心粒 ->'$ 1>-#$ 组成两中心粒为相互垂直的短筒状结构近端中心粒位于精子核后端的核后窝内与精子的长轴方向垂直远端中心粒紧接于近端中心粒之后与尾部鞭毛的轴丝相连图版 + 尾部鞭毛从远端中心粒末端引发出长度为 % %, 图版 + 横切面呈圆形直径约 %, 外周包被有小波浪状质膜 3$',',,'1 内部的轴丝 '#1, 呈典型的结构鞭毛末端变细中部轴丝的单体微管逐渐消失图版 +*

3 水产学报卷斧文蛤受精及早期卵裂过程的荧光显微观察精卵形态和精子入卵在荧光显微镜下斧文蛤成熟未受精卵呈圆球形卵径 %* *%, 卵内的双价染色体被 #0> 染料染成亮蓝色粗短鲜明卵质呈浅蓝色核相处于第一次成熟分裂中期图版 + 精子则仅能观察到头部内浓缩的染色质发出亮蓝色荧光图版 + 在水温 3% % 的条件下进行人工授精控制适宜的精卵比例精卵混合后精子借助尾巴的摆动迅速附着于卵子表面附着部位随机图版 + 受精后,-1 精子的头部已完全进入卵胞质中并逐渐膨大成直径为, 的近球形结构图版 + 两次成熟分裂精子入卵启动卵子的成熟分裂在受精后,-1 受精卵进行第一次成熟分裂同源染色体被分为两组一组被拉向卵膜另一组拉向卵子中央图版 + 靠卵膜的那组染色体逐渐向卵膜外拱最后经浓缩被排出卵膜之外形成第一极体完成第一次成熟分裂图版 + 受精后,-1 留于卵内的另一组染色体重新排列于赤道板上形成第二次成熟分裂的中期分裂相图版 +* 随后以同样的方式在第一极体下方发生第二次成熟分裂姐妹染色单体分离产生第二极体完成第二次成熟分裂图版 + 雌雄原核的形成与结合两次成熟分裂结束之后卵子染色体逐渐膨胀扩散形成一团由核膜包围的松散的染色质即为雌原核与此同时精核也发生第二次膨胀形成与雌原核形状相似的雄原核一般雌原核的位置靠近极体图版 + 受精后,-1 左右多数雌雄原核体积达到最大呈直径,=, 的椭圆形结构图版 + 雌雄原核形成以后均向卵子中央迁移并逐渐靠近图版 + 随后两原核的核膜破裂染色质凝缩成两组染色体图版 + 受精后,-1 形态鲜明的两组染色体在卵子中央合并以染色体联合的方式结合图版 + 早期卵裂联合核的染色体整齐地排列在与卵轴垂直的纺锤体的赤道板上形成有丝分裂的中期分裂相第一次卵裂行将开始图版 + * 受精后,-1 纺锤丝将染色体拉向两极图版 + 随着核分裂的进行卵细胞外形在横向上被拉长然后自极体处发生纵向内缢形成明显的卵裂沟将卵细胞分割成个大小不等的卵裂球图版 + 在卵裂过程中植物极的极叶伸缩不太明显第一次卵裂结束后两个卵裂球中的染色体又解凝为染色质核膜重建进入有丝分裂的间期图版 + 受精后,-1 左右两个卵裂球中的染色体细丝逐渐螺旋变粗形成清晰可见的染色体核膜破裂染色体排列于纺锤体的赤道板上形成第二次有丝分裂中期的核相图版 + 第二次卵裂与第一次卵裂过程基本相同在与第一次卵裂垂直的纵轴方向上发生不等全裂其中大卵裂球的染色体分裂速度较快图版 + * 结果在受精后,-1 卵裂基本结束形成小大个卵裂球图版 +,-1 左右胚胎开始第三次卵裂大卵裂球的染色体仍分裂较早图版 +,-1 第三次卵裂完成仍为不等全裂自此次卵裂起已开始进行螺旋分裂图版 + 多精受精与染色体异常分离在受精后,-1 观察到极少量受精卵有多精入卵 3#$B3,B 现象图版 + 多精入卵可以引起有些卵子成熟分裂异常排出个极体或不排极体图版 +* 受精后,-1 入卵精核也都能发生解凝缩膨胀形成多个雄原核由于入卵时间的差异造成了精核的原核化速度有所不同图版 + 在第一次卵裂的核分裂过程中因多个染色体组不能均等分离而产生异常的多极分离现象图版 + 结果导致早期卵裂的畸形图版 + 讨论斧文蛤精子超微结构及其所反映的生殖进化特征贝类精子的形态结构在不同属种之间表现出一定的差异这为贝类系统分类研究和生殖进化分析提供了重要依据 * 已有的研究表明精子的形态结构特别是顶体结构在不同目之间差别较大而同一科内差别较小如帘蛤科的菲律宾蛤仔 +& &#&&! 青蛤 *# 沟纹巴非蛤 & $! 和斧文蛤等精子头部均为长辣椒状或圆锥形且

4 期董迎辉等斧文蛤精子超微结构与受精过程的细胞学变化精子中部多有一定弧度的弯曲贻贝科的紫贻贝,#+# 和翡翠贻贝!!+ 精子都为锥形蚌科的褶纹冠蚌 *!! &# 和三角帆蚌 (!& 精子呈子弹头形然而同科不同种贝类的精子在体尺参数顶体结构细胞核形状线粒体数目等方面存在或大或小的差别如 ; 等对种贻贝的精子结构进行了详细比较认为顶体形态可以作为种间区分的依据柯才焕等根据精子超微结构差别能将同种不同亚种的盘鲍 (# ++ 和皱纹盘鲍 ()+ * 区分开来竺俊全等利用毛蚶 &!! 青蚶!! 和泥蚶 #!! 精子顶体细胞核及中段等结构上的明显差异来探讨蚶科贝类的进化关系文蛤属贝类种间划分一直存在较大争议通过研究和对比我们发现文蛤与斧文蛤精子的顶体形态精核的核前窝结构存在明显差别文蛤顶体前端突出为短柱状而斧文蛤顶体前端呈灯泡状文蛤精核的核前窝不明显而斧文蛤精核的核前窝明显呈浅 " 字形这些精子超微结构的差别可为其物种鉴别提供有价值的信息顶体位于精子的最前端由高尔基体生发而来其中包含了与卵细胞结合需要的重要酶类在精卵识别结合顶体反应中发挥着重要作用大多数双壳贝类精子顶体的外形呈长短宽窄不一的圆锥形或倒 " 字形顶体结构的复杂程度与精卵结合的难易有关对于卵膜较薄或卵子具有受精孔的种类如淡水蚌类中的背角无齿蚌 + 4+ 褶纹冠蚌 *!! &# 和三角帆蚌 (!& 受精时不需要经过复杂的顶体反应顶体退化成几个小的顶体囊泡甚至消失而对于斧文蛤等大多数双壳贝类卵外被有一层厚的胶膜卵膜上无专门的受精孔精子入卵部位随机故而进化出顶体前端较尖顶体腔内储存有大量溶解酶的结构与其受精难度大相适应顶体的亚顶体腔中有颗粒状的球状肌动蛋白其在顶体反应中可聚合成顶体突引导精核进入卵细胞 * 在海胆的顶体突上有结合蛋白 -1-1 该蛋白具有高度的种间特异性只能与同物种卵细胞膜上的 -1-1 受体结合保证受精严格的物种特异性而有关双壳贝类精子识别蛋白的研究仅对长牡蛎 *!! 栉孔扇贝 *#!! 等贝类的精子膜蛋白进行了分离和初步鉴定至于各种蛋白的纯化和功能鉴定还需开展大量的深入研究精核是精子的最主要组成部分精核形状和其特殊结构核前窝核后窝的有无可以反映出物种间的差别和亲缘关系的远近双壳贝类精核的形状多为圆筒状或圆柱状不同种间有些许差别如菲律宾蛤仔的精核呈前窄后宽的圆锥形青蛤的精核呈稍弯曲的圆柱形西施舌 *#! 波纹巴非蛤 & +# 的精核近椭圆形褶纹冠蚌和三角帆蚌的精核呈子弹头形核前窝是顶体丝突起的结构基础而核后窝是精子尾部赖以形成的重要基础这两种结构的有无能影射出种间的亲缘关系 * 扇贝科的栉孔扇贝和虾夷扇贝 & 的精核都有核前窝和核后窝蚌科的褶纹冠蚌和三角帆蚌的精核都有核后窝而无核前窝蚶科的泥蚶和毛蚶的精核只有核后窝无核前窝而青蚶精核具有核前窝和核后窝据此认为泥蚶和毛蚶之间的亲缘关系近于青蚶 * 帘蛤科的菲律宾蛤仔沟纹巴非蛤西施舌斧文蛤的精核具有核前窝和核后窝而青蛤硬壳蛤,!!!! 波纹巴非蛤的精核无核前窝但并非前者或后者组内种间亲缘关系近故单凭核前窝和核后窝的有无难以判别物种间的亲缘关系斧文蛤的雌雄原核结合方式和多精入卵现象贝类雌雄原核的结合方式有原核融合和原核联合两种原核融合是指雌雄原核在结合时核膜相互融合其内的染色质融为一体后才形成合子染色体组目前仅发现栉孔扇贝鲍等少数贝类属此结合方式原核联合是指两性原核相互靠拢时核膜相嵌但不融合随后两原核都形成各自的染色体组待原核核膜消失后两组染色体联合起来形成合子染色体组已知太平洋牡蛎泥蚶菲律宾蛤仔 * 文蛤等多种贝类属此类型本研究用 #0> 染色荧光显微观察方法对斧文蛤雌雄原核的结合过程进行了仔细观察发现雌雄原核靠近结合时核膜一直存在直到两原核都形成各自的染色体组证明其结合方式为原核联合有关雌雄原核联合或

5 水产学报卷融合的机制至今仍不清楚但大量的实验观察表明卵内的微管以及精核带入卵内的中心粒在此过程中发挥着重要作用贝类在正常受精的情况下大多数卵子为单精入卵单精受精精子不仅为卵子带来单倍体的遗传物质保持物种正常二倍体的细胞核而且还带入有丝分裂所必需的中心粒然而多精入卵现象在双壳贝类中普遍存在在已有报道的几乎所有贝类如近江牡蛎 /!!#! 太平洋牡蛎栉孔扇贝菲律宾蛤仔 * 文蛤宽壳全海笋! +# 泥蚶等均有多精入卵发生根据 ) 等的受精动力学理论和其他学者的研究结果多精入卵的发生不仅与精子运动能力卵子质量和精卵浓度等密切相关还与外界的受精条件如水温等诸多环境因素关系密切在太平洋牡蛎中用刚从卵巢中取出的卵子受精可出现大量的多精入卵泥蚶的精卵比例达到 = F 以上时多精入卵比例显著增加近江牡蛎在的低温环境下受精比 % 水温下多精入卵明显增加贻贝在低海水中受精易导致较高比例的多精入卵本研究中作者也毫不例外地在斧文蛤受精卵中观察到极少数约多精入卵现象由于本实验是在适宜的精卵浓度水温 3 等条件下进行授精所以推测这些多精入卵的发生很有可能是个别卵子不够成熟或过熟造成的有关斧文蛤多精入卵胚胎的进一步发育我们观察到了多个雄原核的形成和早期卵裂时的染色体异常分离至于其发育过程的细节以及发育失败的机理还不清楚尚待后续深入研究参考文献庄启谦 % 中国动物志软体动物门双壳纲帘蛤科 &% 北京科学出版社 % 徐凤山张素萍 % 中国海产双壳类图志 &% 北京科学出版社 % 王如才王昭萍 % 海水贝类养殖学 &% 青岛中国海洋大学出版社 % 潘宝平吴琪张素萍等 % 文蛤属,!!$ 基因及序列的系统学分析 % 海洋与湖沼 %! ; ; %)0B$#.1>- $'>-#1 # >0 ;1,!!$ &# $' "1-' ' #1,->#0#1-'$*/.1?1 %##$#.-'$'0 * *% ;& %0-1>># 3,'>- -1>-'>-#1-1, $,#+# %$>'>>* % ; %$>'>># >03, '1 3,'>#.1-#>03-# &B>-$-' &# $' -A'$A-' %;',> * % 柯才焕周时强田越等 % 三种鲍精子超微结构的比较 % 海洋学报 % * 竺俊全杨万喜 % 毛蚶与青蚶精子超微结构及其所反映的蚶科进化关系 % 动物学研究 % 孙慧玲方建光王清印等 % 泥蚶受精过程的细胞学荧光显微观察 % 水产学报 % 董迎辉林志华柴雪良等 % 文蛤受精及早期胚胎发育过程的细胞学观察 % 动物学报 *% 邓道贵谈奇坤 % 褶纹冠蚌精子的超微结构研究 % 水生生物学报 % 代培芳饶小珍陈寅山 % 菲律宾蛤仔的精子发生和精子超微结构 % 动物学杂志 * % 高悦勉白胡木吉力图孙静娴 % 青蛤精子的超微结构 % 水产科学 * *% 陈寅山饶小珍柯佳颖等 % 沟纹巴非蛤精子发生过程的超微结构观察 % 海洋科学 % 柯佳颖饶小珍陈寅山 % 翡翠贻贝精子的超微结构 % 动物学杂志 % 郭延平谈奇坤陈士超 % 三角帆蚌精子的形态及超微结构 % 动物学杂志 % 石安静 % 背角无齿蚌生殖细胞及钩介幼虫的扫描电镜观察 % 动物学杂志 ** % * 焦海峰尤仲杰竺俊全 % 软体动物精子的超微结构及其分类学意义 % 宁波大学学报理工版 % 樊启昶白书农 % 发育生物学原理 &% 北京高等教育出版社 % 刘丽燕杨爱国王清印等 % 长牡蛎精子膜蛋白的提取及其部分生化性质的研究 % 中国水产科学 * *% 刘丽燕杨爱国王清印等 % 栉孔扇贝精子膜蛋白的提取分离及初步鉴定 % 海洋水产研究 * % 饶小珍陈寅生陈文列等 % 西施舌精子发生过程的超微结构观察 % 水产学报

6 期董迎辉等斧文蛤精子超微结构与受精过程的细胞学变化 * % 赵志江李复雪 % 波纹巴非蛤精子发生的超微结构 % 台湾海峡 ** % ;) ; & #% 3,'>#/#''1 3,'>#.1--1 >01#>01?'0'.,!!!! &# $' -A'$A-'%$.#$&' *% 任素莲王德秀绳秀珍等 % 栉孔扇贝受精过程的细胞学观察 % 海洋湖沼通报 *% 蔡明夷柯才焕游伟伟等 % 杂色鲍 = 盘鲍杂交受精的细胞学研究 % 厦门大学学报 * % 任素莲王德秀王如才等 % 太平洋牡蛎受精过程中的精核扩散与成熟分裂 % 海洋湖沼通报 *** *% * 毕克包振民黄晓婷等 % 菲律宾蛤仔受精及早期胚胎发育过程的细胞学观察 % 水产学报 % 李永仁阙华勇张国范 % 海水双壳类受精生物学研究进展 % 海洋科学 * % 沈亦平刘汀姜海波等 % 合浦珠母贝受精细胞学观察 % 武汉大学学报自然科学版 *** % 杨爱国王清印孔杰等 % 栉孔扇贝受精卵减数分裂的细胞学观察 % 中国水产科学 *** * *% 董迎辉柴雪良陆荣茂等 % 宽壳全海笋受精和早期胚胎发育过程的细胞学观察 % 海洋学报 * % 姚韩韩林志华董迎辉等 % 泥蚶受精和早期卵裂核行为的细胞学观察 % 上海海洋大学学报 * ) ;&! ) #% 3, #,3>->-#1.', -1-A-'$',1># 3, #,3>->-#1-1>1->B B.#3 3'C1 % )###1*** *% ) ; ; & %3, #,3>->-#1.',3, -/ '1 1, 1.',>- #1>#$ %)# # #1 ** % ); &%A#--1. 3#$B3,B -1 >0#B> *!! %?'$> ** % ;&&%->1# >0,0'1-,#$#-1. 3#$B3,B -1 ##B> #>0, $,#+# %-#$ $ ** * *% 附图版说明 % 成熟未受精卵 % 精子 % 精子附卵 % 精子入卵 % 第一次成熟分裂后期 % 第一极体排出 *% 第二次成熟分裂中期 % 第二次成熟分裂后期 % 第二极体排出 % 雌雄原核形成与靠近 % 雌雄原核联合 *% 第一次卵裂中期 % 第一次卵裂后期 % 第一次卵裂末期 % 细胞期 % 第二次卵裂后期 *% 第二次卵裂末期 % 细胞期 % 第三次卵裂后期 % 细胞期 % 双精入卵 % 三精入卵 % 多个原核膨胀 % 染色体分离紊乱 * % 畸形卵裂!% 染色体!% 染色质 )% 雌性原核 &)% 雄性原核 )% 第一极体 )% 第二极体 % 精核 )% 精子 +% %1>-$-/,'>.. %3, %3, '>'0-1. ># >0.. %3, 31>'> -1.. %1'30'#>0->,'>'>-#1 -A--#1 %$'#>0->3#$'#B *%&>'30'#>0#1,'>'>-#1 -A--#1 %1'30'#>0#1,'>'>-#1 -A--#1 %$'#>0#1 3#$'#B %#,'>-#1 '1 '33#'0 #>0,'$'1,'$3#1$- %!0#,##, '#-'>-#1 #>0,'$'1,'$3#1$- *%&>'30'#>0->$'A'. %1'30'#>0->$'A'. %$#30'# >0->$'A'. %+$>'. %1'30'#>0#1 $'A'. *%$#30'#>0#1 $'A'. %+$>'. %1'30'#>0>0- $'A'. %+$>'. %C# 3,1>B -1># >0.. %03,1>B -1># >0.. %&$>-+,'$ 3#1$-#, %-# 0#,##,3''>-#1 * %1#,'$$'A'.%!%0#,##,!%0#,'>-1 )%,'$3#1$ &)%,'$3#1$ )%>0->3#$'#B )%>0#1 3#$'#B %3, 1$ )%3,%

7 水产学报卷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

8 !期董迎辉!等$斧文蛤精子超微结构与受精过程的细胞学变化 && "%" 图版!#斧文蛤精子超微结构的电镜观察 % 精子外形" a! $$$# % #头部和中段外形" a#$ $$$# %!精子纵切面" a#$ $$$ # %?顶体纵切面" a!$ $$$ # % "细胞核横切面 " a#$ $$$# % <中段横切面 " a!$ $$$ # % >近端中心粒横切 " a<$ $$$ # % O中段纵切面 " a"$ $$$ # % B尾部鞭毛纵切面 " a>$ $$$# % %$尾部鞭毛横切面" ao$ $$$#,顶体%,_轴丝% =3远端中心粒%.鞭毛%.A核前窝% 8线粒体% +细胞核% A3近端中心粒% AA核后窝% A8质膜% 00亚顶体腔) (1 -!#RC D- 0 00< =<" 1F >RS/ -<,S/ %_ I H QX Q D" a! $$$# % #_ I H QXH N IN D NC Q " a#$ $$$# %!-IF KN I I X Q D" a#$ $$$# %?-IF KN I I X D" a!$ $$$ # % "S I e I XIK K" a#$ $$$ # % <S I e I XD NC Q " a!$ $$$# % >S I e I XQ _ D I " a<$ $$$# % O-IF KN I I XD NC Q " a"$ $$$ # % B-IF KN I I XX F KD" a>$ $$$# % %$S I e I XX F KD" ao$ $$$#, D %, I D % =3N I %.X F KD%.AX IIK Q [ % 8D HIN % +IK K % A3Q _ D I % AAQ IK Q [ % A8Q DD DP I % 00 KP D Q

9 &&& "%# 水&产&学&报!" 卷图版"#斧文蛤受精及早期卵裂过程的荧光显微观察% [HZZ& (1 - "#); 01 0@ <0< >C 03 0== 1-0<-< - 1 ;3 1-8-@ < <" 14< = <D C % [HZZ&

图1 1 1. 沟纹巴非蛤精原细胞初级精母细胞和次级精母细胞的结构 Fig. 1 T he ultrastructure of sperma tog onium, prim ary spermat ocyt e and seco ndary spermat ocyt e o f P ap hi a

图1 1 1. 沟纹巴非蛤精原细胞初级精母细胞和次级精母细胞的结构 Fig. 1 T he ultrastructure of sperma tog onium, prim ary spermat ocyt e and seco ndary spermat ocyt e o f P ap hi a 陈寅山饶小珍柯佳颖许友勤利用透射电镜观察沟纹巴非蛤精子的发生和精子的超微结构揭示了从精原细胞逐渐发育成精子过程中超微结构的变化其过程主要包括核逐步拉长染色质浓缩顶体形成线粒体逐渐融合胞质减少以及中心粒演