转化医学杂志 2014 年 6 月第 3 卷第 3 期 TranslationalMedicineJournal,Vol.3No.3,Jun 的组织细胞, 甚至可以跨胚层向外胚层及内胚层来源的组织细胞分化由于 BMSCs 取材容易, 体外培养扩增速度快, 具有低免疫原性和免疫抑制的

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1 174 转化医学杂志 2014 年 6 月第 3 卷第 3 期 TranslationalMedicineJournal,Vol.3No.3,Jun2014 综述中枢神经系统药物促进干细胞定向分化为神经元的研究进展杜云霞, 王晓虹, 王苏平 [ 摘要 ] 干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞目前, 通过干细胞移植并使其在体内定向分化为神经元来治疗中枢神经系统疾病已经受到广泛关注干细胞分化机制和促进干细胞定向分化药物的研究成为干细胞移植研究的热点, 国内外有关这方面的研究及药物研发已经取得了重大进展本文将对干细胞的来源分类及生物学特性作出总结, 并概述干细胞定向分化为神经元的诱导方法及中枢神经系统药物对其定向分化的促进作用 [ 关键词 ] 干细胞 ; 定向分化 ; 神经元 ; 药物 [ 中图分类号 ]R971;Q254 [ 文献标志码 ]A [ 文章编号 ] (2014) doi: /j isn Researchprogresofcentralnervoussystem drugsonfacilitating directionaldiferentiationofstem celsintoneurons DUYunxia,WANGXiaohong,WANGSuping (TheFirstDepartmentofNeurology,DalianCentralHospital,DalianLiaoning116033,China) [Abstract]Stemcelsareakindofcelswhichhavethepotentialofself renewalanddiferen tiation.atpresent,ithasreceivedextensiveatentionthatthroughstemceltransplantationandma kingitdirectionalydiferentiatedintoneuronstoofertherapyforcentralnervoussystem disease. Theresearchonthediferentiationmechanismandthedrugspromotingstemceldirectionaldiferen tiationhasbecomeahottopicofstemcelstransplantationresearch,theresearchanddevelopmentof thishasreceivedsignificantprogresathomeandabroad.thepresentpaperconcludedthesource, clasificationandbiologicalcharacteristicsofstem cels,andsummarizedtheapproachtoinducing directionaldiferentiationofstem celsandtheefectofcentralnervoussystem drugsonthedirec tionaldiferentiationofstemcelsintoneurons. [Keywords] Stemcels;Directionaldiferentiation;Neuron;Drugs 干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞, 在一定条件下它们可以分化为各种功能细胞或组织器官 [1] 目前, 干细胞移植已经成为全世界研究的热点, 随着研究的不断深入, 干细胞移植有望成为治疗中枢神经系统损伤性疾病的重要手段, 而如何将干细胞定向分化为神经元替代受损细胞是干细胞移植研究的关键所在因此, 诱导干细胞定向分化为神经元的机制以及促进诱导分化的药物研究已成为干细胞移植研究的重点近年来, 中枢神经系统药物联合干细胞移植治疗中枢神经系统疾病已经受到全世界各国学者的关注, 也取得了重大研究进展现主要就干细胞定向分化为神经元和中枢神经系统药物对其干预的研究现况作一综述 [ 作者单位 ] 辽宁大连, 大连市中心医院神经内一科 ( 杜云霞, 王晓虹, 王苏平 ) 1 干细胞的来源分类生物学特性干细胞是一种具有无限自我复制能力和向多种细胞分化潜能的细胞, 按其来源分为胚胎干细胞和成体干细胞, 按分化潜能干细胞可分为全能干细胞多能干细胞和单能干细胞全能干细胞具有形成完整个体的分化潜能, 如胚胎干细胞 ; 多能干细胞具有分化为多种细胞组织的潜能, 如骨髓间充质干细胞造血干细胞神经干细胞脂肪干细胞等 ; 单能干细胞只能向一二种类型的细胞分化, 如上皮组织基底层的干细胞肌肉中的成肌细胞等目前被广泛用于神经系统疾病治疗研究的有骨髓间充质干细胞 (bonemarowmesenchymalstemcels,bmscs) 神经干细胞 (neuralstemcels,nscs) 和胚胎干细胞 (em bryonicstemcels,escs) 等 BMSCs 在特定诱导条件下可以分化为中胚层

2 转化医学杂志 2014 年 6 月第 3 卷第 3 期 TranslationalMedicineJournal,Vol.3No.3,Jun 的组织细胞, 甚至可以跨胚层向外胚层及内胚层来源的组织细胞分化由于 BMSCs 取材容易, 体外培养扩增速度快, 具有低免疫原性和免疫抑制的特性, 并具有自我更新能力和可塑性, 被认为是理想的组织工程种子细胞 [2 3] NSCs 首次由 Chaudhuri 和 Bhatacharya [4] 从成年小鼠纹状体中分离出, 之后人们相继从哺乳动物胚胎期海马嗅球脑室部间脑中脑小脑脊髓中分离得到 NSCs NSCs 能分化为神经元星形胶质细胞和少突胶质细胞, 且具有免疫原性低能够定向迁移等优点, 移植到神经系统后仍可增殖, 目前被广泛应用于神经系统疾病治疗的研究 ESCs 能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型, 无论在体外还是体内环境, 都具有极强的增殖能力和分化为生物体全部 3 个胚层组织细胞的潜能 [5], 且具有遗传可操作性低免疫原性等特点, 可以应用于临床细胞组织和器官的修复和移植治疗 2 干细胞向神经元定向分化 2 1 信号通路在干细胞向神经元分化中的作用研究表明, 干细胞向神经元分化过程中涉及多条信号通路, 包括 Notch Wnt 音猬因子 (HedgehogHom olog,sonic,shh) 核因子 κb(nuclearfactor κb,nf [6] κb) 信号通路等 Kobayashi 和 Kageyama 等采用转基因小鼠, 研究发现 Hes1 表达含量高的胚胎干细胞向中胚层细胞分化敏感,Hes1 表达含量低的胚胎干细胞向神经元分化敏感, 而 Hes1 表达含量高低与 Notch 信号通路的激活与失活密切相关, 说明抑制 [7] Notch 信号可促进干细胞向神经元分化 Azim 等发现在 Wnt 信号通路中, 主要是 Wnt/β catenin 信号促进神经干细胞分化, 尤其是促进其向神经元分化 Wnt/β catenin 信号通路可以调节骨髓间充质干细胞分化为有功能的神经元, 可用于神经退行性疾病的治疗 [8] SHH 是神经发育过程中调节神经元分化的重要信号分子 [8], 体外 SHH 诱导胚胎干细胞分化为神经元已经取得成功 [9] [10] 宋革等在探讨 SHH 诱导恒河猴骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的分子机制中, 发现丝裂原活化蛋白激酶系统参与 SHH 的诱导过程,p38 被激活, 而细胞外调节蛋白激酶被抑制 NF κb 信号在调节神经干细胞增殖分化过程中起重要作用 [11] 在骨髓间充质干细胞向神经元分化的过程中,NF κb 核移位受抑制, 证明抑制 NF κb 信号传导, 有利于骨髓间充质干细胞向神经元分化 2 2 干细胞向神经元分化的诱导方法化学诱导法目前, 体外化学诱导实验主要是在培养基中加入生长因子或抗氧化剂 2000 年, [12] Woodbury 等首次采用抗氧化剂 β 巯基乙醇二甲基亚砜在体外成功地诱导成年小鼠和人的 BMSCs 向神经元分化, 诱导后的细胞可表达神经元特异性烯醇化酶 (neuronespecificenolase,nse) 神经巢蛋白 (nestin) 等神经元特异性标志物研究表明不同种类不同浓度的生长因子对干细胞分化的影响不 [13] 同佟雷等发现碱性成纤维细胞生长因子在质量浓度为 10μg/L 时, 可以促进神经干细胞向神经元分化, 而在质量浓度为 20μg/L, 对神经干细胞的分裂增殖有明显促进作用神经生长因子 (nerve growthfactor,ngf) 在质量浓度为 100μg/L 时能有效促进神经干细胞向神经元分化神经干细胞经维甲酸处理后, 能显著提高向神经元分化的比例, 且在浓度为 1 0μmol/L 时其促进定向分化的效果达到 [14] 最高水平 Hatori 等发现维甲酸和成纤维生长因子 2(fibroblastgrowthfactor 2,FGF 2) 能促进猕猴 [15] 胚胎干细胞向神经元分化 Bauer 等研究发现, 白血病抑制因子对神经细胞具有保护作用, 能诱导内源性神经干细胞向神经元分化, 促进损伤后的轴突再生细胞共培养法研究表明, 干细胞的分化与其所处的微环境密切相关, 目前细胞共培养法诱导神经元分化的研究已经取得一定成果体外将 NSCs 与 BMSCs 在 Transwel 小室共培养 5d 后, 通过免疫荧光染色检测 BMSCs 中神经元的特异性标志物 NSE 为阳性, 与对照组单纯 BMSCs 培养结果相比差异有统计学意义 (P<0 05), 表明 NSCs 提供的微环境对 BMSCs 分化为神经元具有诱导分化作用 [16] [17] 金玉玲等将小胶质细胞与 NSCs 分别按比例共培养发现在 4 1 共培养组, 胆碱乙酰化转移酶阳性细胞表达率达 14 19% 左右, 与单纯 NSCs 培养相比升高幅度显著高于其他接种密度 (P<0.05), 证实了与一定比例小胶质细胞共培养可明显提高 NSCs 向胆碱能神经元 [18] 的分化 Shin 等在体外将人类胚胎干细胞与骨骼肌细胞共培养, 对人类 ESCs 进行免疫荧光染色, 在运动神经元轴索末端可检测到突触小泡膜相关蛋白, 表明源自人类 ESCs 的运动神经元的轴索末端形成有功能的突触前结构导入外源基因已经有大量研究证实, 导入外源基因可以调控干细胞分化, 诱导其分化为特定 [19] 的细胞类型曲德伟等发现 NT 3 基因转染可促进 BMSCs 的增殖, 并诱导其向神经元方向分化贺 [20] 峰等应用脂质体法将外源性 TrkA 基因导入神经

3 176 转化医学杂志 2014 年 6 月第 3 卷第 3 期 TranslationalMedicineJournal,Vol.3No.3,Jun2014 干细胞中, 选用质量浓度为 100ng/mL 的特异性配体 NGF 孵育细胞结果显示, 转染组有约 26% 的神经干细胞被诱导分化为胆碱能神经元, 而非转染组仅有 9%, 差异有统计学意义 (P<0 05), 说明 TrkA 基因修饰可促进神经干细胞向胆碱能神经元分化 Wnt 信号在中枢神经系统发育过程中起重要的作用, 控制着细胞的增殖与分化将重组 Wnt3a 腺病毒转入神经干细胞中, 可定向诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化, 用 Wnt7a 腺病毒表达载体转染 BMSCs, 发现其对 BMSCs 增殖及向神经元方向分化 [21] 均有促进作用 Setoguchi 等应用 Noggin 基因转染神经干细胞移植治疗脊髓损伤, 结果表明 Noggin 基因转染能够促进神经干细胞向神经元方向分化, 对脊髓损伤的治疗提供了新的方向诱导多能干细胞 2006 年,Takahashi 和 Ya manaka [22] 利用病毒载体将 4 个转录因子 (Oct4 Sox2 KLF4 和 c Myc) 的组合转入分化的体细胞中, 将其重编程逆转其发育潜能而得到的类似于 ESCs 的一种多能性干细胞, 称之为诱导多能干细胞 (in ducedpluripotentstem cels,ipscs) ipscs 通过悬浮培养形成拟胚体, 然后进一步分化为玫瑰花环样结构, 机械性分离并扩增形成 NSCs 的聚集体, 在加 [23] 入特定的培养基后即可分化为神经元 Falk 等研究发现, 人 ipscs 源性神经上皮干细胞可以稳定地向功能性神经元分化, 且在加入 FGF 2 和表皮生 [24] 长因子后能持续扩增 Jensen 等通过在培养基中添加胰岛素样生长因子 1 脑源性神经营养因子环腺苷酸等因子后成功地将人 ipscs 转化为早期阶段的 NSCs, 并移植入脑缺血大鼠模型中, 发现其可以在大鼠缺血损伤的脑组织中存活, 且能分化为神经元 3 中枢神经系统药物对干细胞定向分化的作用 3 1 法舒地尔盐酸法舒地尔是一种新型的 Rho 激酶抑制剂,1995 年 6 月在日本上市进入临床, 静脉注射主要用于防治慢性缺血性脑血管痉挛它具有舒张平滑肌扩张血管增加缺血区的脑灌注量抑制粒细胞及单核细胞在内皮上的集聚及减少炎症反应引起的脑组织损伤抑制细胞凋亡等作用近年来, 有研究者发现法舒地尔对中枢神经系统神经 [25] 再生有促进作用赵二义等通过小干扰 RNA 转染技术检测舒地尔对 BMSCs 定向分化为神经元的影响及其机制, 通过荧光显微镜检测转染 BMSCs 的荧光表达, 逆转录聚合酶链检测 Notch1mRNA Hes1mRNA 和丝裂原活化蛋白激酶 1mRNA 在 BMSCs 中的表达, 免疫组化检测 Notch1 蛋白神经巢蛋白神经丝蛋白的表达实验结果显示, 法舒地尔可以诱导 BMSCs 定向分化为神经元, 且在转染组有更高效率, 与非转染组相比转染组的 BMSCs 中 Notch1mRNA 和 Hes1mRNA 表达明显减少, 故推测法舒地尔可以通过抑制 Notch 信号诱导 BMSCs 定 [26] 向分化为神经元 Ding 等将法舒地尔应用于小鼠缺血再灌注损伤模型, 结果发现法舒地尔可以促进小鼠内源性神经干细胞向缺血再灌注区调动, 并且能促进内源性神经干细胞向神经元分化赵二义 [25] 等研究发现, 法舒地尔可以诱导 BMSCs 向神经元分化, 且推测可能与其抑制 NF κb 信号通路有关 3 2 神经节苷脂神经节苷脂是从神经节细胞中 [27] 分离出的鞘糖脂, 由 Klenk 等首先发现在患 Tay Sachs 病的小儿脑中有蓄积, 在脑灰白质中含量很多, 所以对这类糖脂命名为神经节苷脂有研究表明, 神经节苷脂对神经细胞修复有重大促进作用 [28] Lim 等研究发现, 神经节苷脂具有促进神经损伤后再生, 促进神经分化轴突生成, 增强内源性神经 [29] 营养因子活性等重要生理功能李红星等采用神经干细胞移植联合神经节苷脂治疗脑损伤大鼠, 造模 4 周后处死大鼠行免疫组化苏木素和伊红染色组织学观察免疫组化结果显示, 神经干细胞联合神经节苷脂组大鼠损伤灶脑组织中的 BrdU 阳性细胞数高于损伤组和神经干细胞移植组, 神经干细胞联合神经节苷脂组苏木素和伊红染色出现典型的 [30] 神经细胞样形态学改变且软化灶消失张婷勇将 Wistar 大鼠应用线栓法建立大脑中动脉阻塞模型后随机分为梗死组骨髓间充质干细胞移植组细胞移植联合神经节苷脂组 2 周后, 细胞移植联合神经节苷脂组 BrdU 免疫组化苏木素和伊红染色切片中的神经元数量多于细胞移植组, 细胞移植组多于梗死组 (P<0 05), 提示神经节苷脂可以促进神经干细胞向神经元分化 3 3 依达拉奉依达拉奉为新型的氧自由基清除剂, 不仅可以清除自由基抑制氧化反应, 还可避免血管内皮细胞损害, 改善神经功能, 临床上多用于缺血 [31] 性脑梗死和脊髓损伤的治疗 Zeng 等通过实验研究依达拉奉体外定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞, 并探讨依达拉奉诱导大鼠 BMSCs 分化为神经细胞的电生理特性该实验从膜通道蛋白水平和细胞电生理功能上证实了依达拉奉诱导大鼠 BMSCs 分 [32] 化的细胞具有神经细胞电生理特性 Kim 等发

4 转化医学杂志 2014 年 6 月第 3 卷第 3 期 TranslationalMedicineJournal,Vol.3No.3,Jun 现骨髓间充质干细胞移植联合依达拉奉治疗大鼠脑梗死, 可使移植的骨髓间充质干细胞在损伤部位更好地存活增殖分化与迁移, 并可有效减轻脑水肿, [33] 提高细胞移植治疗的有效率 Itoh 等发现依达拉奉可以促进内源性神经干细胞向大鼠脑缺血损伤处迁移, 并分化为神经元 3 4 氟西汀抗抑郁药物氟西汀是一种选择性 5 羟色胺再吸收抑制剂, 其抗抑郁作用的起效与其逆转神经再生有关研究发现, 氟西汀能上调磷酸化的细胞外调节蛋白激酶 1/2 表达水平, 激活的细胞外调节蛋白激酶 1/2 可以协调神经元的重塑分化及生存 [34] [35] Chang 等通过实验发现氟西汀对神经干细胞的分化和增殖有促进作用, 使 Tuj1 和神经元特异性核蛋白阳性细胞数目增多, 而不增加胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数目, 说明氟西汀能促进神经干细胞向神经元分化而不向神经胶质细胞分化 [36] Malberg 等发现, 氟西汀可以促进成年雄鼠海马颗粒下层神经前体细胞增殖并向神经元分化 Zu [37] so 等研究发现, 氟西汀能诱导离体小脑的神经前体细胞向神经元分化 3 5 中药近年来, 已经有大量研究表明, 在一定的诱导条件下, 运用单味中药或中药有效成分可以促进干细胞在体内移植或体外培养后分化为神经 [38] 元张建平等用人参皂苷 Rg1 诱导新生大鼠海马神经干细胞向神经元分化, 并通过图像扫描分析, 结果显示 15mg/kg 人参皂苷 Rg1 干预组海马神经 [39] 干细胞向神经元分化比例最高魏会平等通过实验探讨大鼠 BMSCs 经川芎嗪诱导为神经元样细胞后对大鼠脑损伤模型修复的影响, 结果显示经川芎嗪诱导骨髓间充质干细胞 24h 后可见较多神经元样细胞, 部分细胞间可见网络状连接, 且 Nestin 和 [40] NSE 表达阳性李珊等研究发现银杏叶提取物可以促进人脂肪间充质干细胞增殖, 并向神经细胞分化除此之外, 还有许多其他关于中药诱导干细胞向神经元样细胞分化的研究, 如黄芪诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化 [41] 丹参诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化 [42] 清脑灵诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化成神经元样细胞等 [43] 3 6 其他除上诉药物之外, 还有其他中枢神经系统药物对诱导干细胞分化为神经元具有促进作用 [44] 如 Ling 等发现尤瑞克林可以抑制神经细胞凋亡, 促进脑缺血后神经干细胞增殖迁移, 并分化为成熟神经元, 从而起到神经修复作用抗躁狂药氯化锂在低浓度 (1 3mmol/L) 时能促进 NSCs 分化为神经元, 其促进分化作用主要通过调节细胞外调节蛋白激酶 camp 反应单元结合蛋白途径及 Wnt 信号通路来实现 [45 46] 丙戊酸作为添加剂诱导神经干细胞向 γ 氨基丁酸能神经元分化褪黑素具有神经营养作用, 在临床上主要用于改善失眠 Kong [47] 等发现褪黑素能增加 NSCs 培养基中脑源性神经生长因子胶质细胞源性神经生长因子等神经营养因子的含量, 促进 NSCs 分化为神经元还原性谷胱甘肽对帕金森病有辅助性治疗作用, 且能诱导 BMSCs 分化形成神经元, 如对其能否诱导人 BMSCs 分化为多巴胺能神经元进行深入研究, 将为帕金森病的治疗开辟一条新的道路近年来, 中枢神经系统药物联合干细胞移植治疗各种神经系统疾病受到了越来越多的关注, 虽然在诱导分化方法方面已经取得了很大进展, 但也存在着多方面的问题 :1 体外干细胞向神经元诱导分化的分子模式和相关基因的调控机制还不清楚, 移植产生疗效的确切机制也不清楚 2 干细胞移植的安全性移植治疗的时机和剂量以及移植后干细胞能否在体内长期生存并无限增殖分化, 还需进一步研究 3 定向诱导分化的神经元在体内是否能够存活并发挥正常神经细胞的生理功能, 尚有待进一步证实尽管如此, 中枢神经系统药物联合干细胞移植治疗中枢神经系统损伤性疾病是一种极有前景的治疗策略随着对干细胞分化移植及药物干预等的深入研究, 干细胞移植一定会为神经系统疾病的治疗带来更为广阔的前景 [ 参考文献 ] [1] DingalPC,DischerDE.Materialcontrolofstem cel diferentiation:chalengesin nano characterization[j]. CurOpinBiotechnol,2013,28C: [2]HuY,TanHB,WangXM,etal.Bonemarowmesenchy malstemcelsprotectagainstretinalganglioncellosin agedratswithglaucoma[j].clinintervaging,2013,8: [3]SongM,MohamedO,GuX,etal.Restorationofintracorti caland thalamocorticalcircuitsaftertransplantation of bonemarow mesenchymalstem celsintotheischemic brainofmiu[j].celtransplant,2013,22(11): [4] ChaudhuriA,BhatacharyaN.Humanneuralstem cel transplantsinneurologicaldisorders:curenttrendsand futureoptions[m].springerlondon:humanfetaltisue Transplantation,2013:

5 178 转化医学杂志 2014 年 6 月第 3 卷第 3 期 TranslationalMedicineJournal,Vol.3No.3,Jun2014 [5]HansonC,HardarsonT,Elerstr m C,etal.Transplanta tionofhumanembryonicstemcelsontoapartialywoun dedhumancornaeinvitro[j].actaophthalmol,2013,91 (2): [6] KobayashiT,KageyamaR.Hes1regulatesembryonicstem celdiferentiationbysuppresingnotchsignaling[j]. GenesCels,2010,15(7): [7]AzimK,RiveraA,RaineteauO,etal.GSK3βregulatesoli godendrogenesisinthedorsalmicrodomainofthesubven tricularzoneviawnt β cateninsignaling[j].glia,2014, 62(5): [8]YuQ,LiuL,DuanY,etal.Wnt/β cateninsignalingregu latesneuronaldiferentiationofmesenchymalstem cels [J].BiochemBiophysResCommun,2013,439(2): [9] MongJ,Panman L,AlekseenkoZ,etal.Transcription factor inducedlineageprogrammingofnoradrenalineand motorneuronsfromembryonicstemcels[j].stem Cels, 2014,32(3): [10] 宋革, 张阳, 郑炜炜, 等. 恒河猴骨髓源性神经样细胞分化分子机制的基础研究 [J]. 中华显微外科杂志,2011, 34(6): [11]LiuQ,FanX,ZhuJ,etal.Co culturingimprovesthe OGD injuredneuronrepairingandnscsdiferentiationvia Notchpathwayactivation[J].NeurosciLet,2014,559:1 6. [12] WoodburyD,SchwarzEJ,ProckopDJ,etal.Adultratand humanbonemarowstromalcelsdiferentiateintoneurons [J].JNeurosciRes,2000,61(4): [13] 佟雷, 季丽莉, 解大龙, 等. 碱性成纤维生长因子和神经生长因子联合应用培养成年大鼠海马经干细胞向神经元样细胞的分化 [J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2011,15(1): [14] HatoriM,ShimozawaN,YasminL,etal.Roleofretinoic acidandfibroblastgrowthfactor2inneuraldiferentiation fromcynomolgusmonkey(macacafascicularis)embryonic stemcels[j].compmed,2014,64(2): [15]BauerS,PatersonPH.Leukemiainhibitoryfactorpro motesneuralstemcelself renewalintheadultbrain[j]. JNeurosci,2006,26(46): [16] 匡, 王雷, 宋文, 等. 体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化 [J]. 中国组织工程研究,2012, 16(19): [17] 金玉玲, 刘锲, 刘静静, 等. 小胶质细胞对体外培养神经干细胞向胆碱能神经元分化的影响 [J]. 中国组织工程研究与临床康复,2010,14(23): [18]ShinS,DaltonS,SticeSL.Humanmotorneurondiferentia tionfrom humanembryonicstem cels[j].stem Cels Dev,2005,14(3): [19] 曲德伟, 欧阳长杰, 胡涛, 等.NT 3 基因转染对骨髓间充质干细胞增殖及向神经元分化的影响 [J]. 中国老年学杂志,2012,32(8): [20] 贺峰, 刘中霖, 叶剑虹, 等.TrkA 基因修饰诱导神经干细胞分化为胆碱能神经元 [J]. 中华神经医学杂志, 2007,6(1):2 4. [21] SetoguchiT,NakashimaK,TakizawaT,etal.Treatmentof spinalcordinjurybytransplantationoffetalneuralprecur sorcelsengineeredtoexpresbmp inhibitor[j].exp Neurol,2004,189(1): [22] TakahashiK,YamanakaS.Inductionofpluripotentstem celsfrom mouseembryonicandadultfibroblastcultures bydefinedfactors[j].cel,2006,126(4): [23]FalkA,KochP,KesavanJ,etal.Captureofneuroepithelial likestemcelsfrompluripotentstemcelsprovidesaver satilesystemforinvitroproductionofhumanneurons[j]. PLoSOne,2012,7(1):e [24]JensenMB,YanH,Krishnaney DavisonR,etal.Survival anddiferentiationoftransplantedneuralstem celsde rivedfromhumaninducedpluripotentstem celsinarat strokemodel[j].jstrokecerebrovascdis,2013,22(4): [25] 赵二义, 贾延稢, 文国强, 等. 核因子 κb 在盐酸法舒地尔诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经细胞的作用 [J]. 中国实用医刊,2011,38(23): [26]DingJ,LiQY,YuJZ,etal.Fasudil,aRhokinaseinhibi tor,drivesmobilizationofadultneuralstemcelsafterhy poxia/reoxygenationinjuryinmice[j].molcelneurosci, 2010,43(2): [27] KlenkE,VaterW,BartschG.Thestorageofgangliosides innervoustisueintay Sachsdiseaseandthechangesin materialpreserved in formalin[j].jneurochemistry, 1957,1(3): [28]LimST,EsfahaniK,AvdoshinaV,etal.Exogenousgang liosidesincreasethereleaseofbrain derivedneurotrophic factor[j].neuropharmacology,2011,60(7/8): [29] 李红星, 赵宗茂, 金耀东, 等. 神经节苷脂联合神经干细胞移植对颅脑损伤大鼠海马的作用 [J]. 中国组织工程研究,2012,16(10): [30] 张婷勇. 骨髓间充质干细胞移植并用单唾液酸神经节苷脂治疗大鼠脑梗死 [J]. 中国组织工程研究与临床康复,2011,15(14): [31] ZengR,HuZB,GuoWT,etal.Electrophysiologicalstudy ondiferentiationofratbonemarow stromalstem cels intoneuron likecelsinvitrobyedaravone[j].chinj Traumatol,2009,12(3): [32] Kim SS,YooSW,ParkTS,etal.Neuralinductionwith neurogenin1increasesthetherapeuticefectsofmesenchy malstem celsintheischemicbrain[j].stem Cels, 2008,26(9):

6 转化医学杂志 2014 年 6 月第 3 卷第 3 期 TranslationalMedicineJournal,Vol.3No.3,Jun [33] ItohT,SatouT,NishidaS,etal.Thenovelfreeradical scavenger,edaravone,increasesneuralstem celnumber aroundtheareaofdamagefolowingrattraumaticbrainin jury[j].neurotoxres,2009,16(4): [34] 赵宇, 谢鹏, 朱晓肇, 等. 大鼠神经干细胞中 MAPKK/ MEK MAPK/ERK 信号转导通路的实验研究 [J]. 中国医科大学学报,2010,39(1): [35] ChangKA,KimJA,KimS,etal.Therapeuticpotentialsof neuralstem celstreatedwithfluoxetineinalzheimer s disease[j].neurochemint,2012,61(6): [36]MalbergJE,EischAJ,NestlerEJ,etal.Chronicantide presanttreatmentincreasesneurogenesisin adultrat hippocampus[j].jneurosci,2000,20(24): [37]ZusoM,DebetoP,GuidolinD,etal.Fluoxetine induced proliferationanddiferentiationofneuralprogenitorcels isolatedfrom ratpostnatalcerebelum[j].biochem Phar macol,2008,76(3): [38] 张建平, 司银楚, 朱培纯. 人参皂苷 Rg1 诱导大鼠海马神经干细胞分化的实验研究 [J]. 神经解剖学杂志, 2009,25(3): [39] 魏会平, 朱登祥, 张爱兰, 等. 体外诱导的神经元样细胞对大鼠脑损伤模型修复的影响 [J]. 神经药理学报, 2013,3(6):2 24. [40] 李珊, 梁战华, 刘晶. 银杏叶提取物对人脂肪间充质干细胞神经向分化的影响 [J]. 神经解剖学杂志,2013,29 (5): [41] 王新生, 崔慧先, 李志鹏, 等. 黄芪诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的实验研究 [J]. 中国老年学杂志,2008,11(28): [42] 常宏, 蒋绍艳, 史玉朋, 等. 丹参注射液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的研究 [J]. 中国药房,2008,19(30): [43] 王金良, 薛卡明, 刘建国, 等. 清脑灵诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化成神经元样细胞 [J]. 湖北中医学院学报,2010,12(2): [44]LingL,HouQ,XingS,etal.Exogenouskalikreinen hancesneurogenesisandangiogenesisinthesubventricu larzoneandtheperi infarctionregionandimprovesneuro logicalfunctionafterfocalcorticalinfarctioninhyperten siverats[j].brainres,2008,1206: [45] Kim JS,ChangMY,Yu IT,etal.Lithium selectively increasesneuronaldiferentiationofhippocampalneural progenitorcelsbothinvitroandinvivo[j].jneuro chem,2004,89(2): [46] WexlerEM,GeschwindDH,PalmerTD.Lithium regulates adulthippocampalprogenitordevelopmentthroughcanoni calwntpathwayactivation[j].molpsychiatry,2008,13 (3): [47] KongX,LiX,CaiZ,etal.Melatoninregulatestheviability anddiferentiationofratmidbrainneuralstem cels[j]. CelMolNeurobiol,2008,28(4): ( 收稿日期 : 本文编辑 : 徐海琴 ) ( 上接第 161 页 ) [18] 江玉, 王明杰, 潘洪, 等. 蛭龙活血胶囊治疗不稳定型心绞痛的疗效及对血管内皮功能和血小板功能的影响 [J]. 中国实验方剂学杂志,2013,19(24): [19] 吴伟, 罗川晋, 李荣, 等. 清热活血方治疗急性冠脉综合征临床观察 [J]. 新中医,2012,44(8):9 12. [20] 林桂珍. 银丹心脑通软胶囊对冠心病 PCI 术后患者心功能的影响 [J]. 中西医结合心脑血管病杂志,2013,11 (2): [21] 杨忠奇, 冼绍祥, 杜志民, 等. 冠状动脉介入术前应用活血化瘀药对手术出血风险的影响 [J]. 广州中医药大学学报,2006,23(5): [22] 闫晓霞, 王建昌, 刘丽芳, 等. 活血化瘀类中成药与阿司匹林联合治疗慢性稳定性心绞痛的合理性用药 [J]. 中国老年学杂志,2011,31(5): [23] 陈静, 屈大展, 王瑞莹. 芪参益气滴丸干预冠心病患者阿司匹林抵抗现象有效性评价 [J]. 中草药,2008,39 (1): [24] 张秀丽. 通心络联合阿斯匹林治疗冠心病的疗效观察 [J]. 中国医药导刊,2012,14(5): [25] 李昊娲, 农一兵, 林谦. 丹参注射液与抗血栓药合用对急性冠脉综合征患者出血风险研究 [J]. 中华中医药杂志,2011,26(10): [26] 杨忠奇, 冼绍祥, 杜志民, 等. 冠状动脉介入术前应用活血化瘀药对手术出血风险的影响 [J]. 广州中医药大学学报,2006,23(5): [27] 王宝君, 张庆翔, 张蕾, 等. 益气活血中药配合双联抗血小板治疗对急性心肌梗死大鼠血栓形成的影响 [J]. 中医杂志,2013,54(14): [28] 刘志华, 孙晓波. 网络药理学 : 中医药现代化的新机遇 [J]. 药学学报,2012,47(6): [29] 黄明峰, 张燕玲, 任真真, 等. 网络药理学方法探讨活血化瘀中药治疗冠心病作用机制 [J]. 世界科学技术中医药现代化,2012,14(5): [30] 刘癑, 殷惠军, 陈可冀. 血小板蛋白质组学及其在血瘀证与活血化瘀中药研究中的探索应用 [J]. 中国科学 ( 生命科学 ),2013,43(8): ( 收稿日期 : 本文编辑 : 徐海琴 )

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159 之首因此, 冠心病的防治工作异常严峻, 而抗血小板治疗是其关键, 合理规范的抗血小板治疗可以有效减少心血管事件的发生 1 冠心病的抗血小板治疗抗血小板治疗是冠心 158 转化医学杂志 2014 年 6 月第 3 卷第 3 期 TranslationalMedicineJournal,Vol.3No.3,Jun2014 药物与转化活血化瘀中药与抗血小板药物联用治疗冠心病的研究吕仕超, 张军平 [ 摘要 ] 冠心病是临床常见的心血管疾病之一, 其患病

转化医学杂志 2014 年 6 月第 3 卷第 3 期 TranslationalMedicineJournal,Vol.3No.3,Jun 的组织细胞, 甚至可以跨胚层向外胚层及内胚层来源的组织细胞分化 由于 BMSCs 取材容易, 体外培养扩增速度快, 具有低免疫原性和免疫抑制的

转化医学杂志 2014 年 6 月第 3 卷第 3 期 TranslationalMedicineJournal,Vol.3No.3,Jun 的组织细胞, 甚至可以跨胚层向外胚层及内胚层来源的组织细胞分化由于 BMSCs 取材容易, 体外培养扩增速度快, 具有低免疫原性和免疫抑制的