细 胞 凋 亡, 明 显 抑 制 肿 瘤 细 胞 的 生 长 50% 的 肿 瘤 p53 因 为 突 变 而 丧 失 细 胞 周 期 阻 断 的 功 能, 同 时 也 增 强 了 肿 瘤 细 胞 对 细 胞 周 期 阻 断 剂 和 细 胞 凋 亡 剂 的 药 物 抵 抗 作 用 1.3 受 体 酪

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1 中 医 药 调 节 肿 瘤 细 胞 信 号 传 导 的 研 究 进 展 李 姜 1 徐 力 1 李 烜 2 (1. 南 京 中 医 药 大 学, 江 苏 南 京 ; 2. 南 京 中 医 药 大 学 附 属 医 院, 江 苏 南 京 ) 摘 要 细 胞 信 号 传 导 的 调 节 异 常 是 肿 瘤 发 生 发 展 的 重 要 机 制 之 一, 是 分 子 遗 传 学 和 肿 瘤 生 物 学 研 究 的 热 点 目 前 肿 瘤 细 胞 中 主 要 的 信 号 通 路 包 括 :NF-κB 信 号 通 路 细 胞 周 期 调 节 通 路 RTKs 通 路 Wnt/β-catenin 信 号 通 路 Notch 信 号 通 路 研 究 中 医 药 对 肿 瘤 细 胞 信 号 传 导 通 路 的 影 响 及 作 用 机 制, 有 望 成 为 目 前 肿 瘤 预 防 及 治 疗 的 新 思 路 关 键 词 信 号 传 导 肿 瘤 细 胞 中 医 学 综 中 图 分 类 号 R273 文 献 标 志 码 A 文 章 编 号 X(2016) 随 着 肿 瘤 生 物 学 的 发 展, 人 们 对 肿 瘤 发 病 分 子 基 础 的 研 究 取 得 长 足 进 步 细 胞 信 号 修 饰 与 改 变 细 胞 的 功 能 和 生 物 学 行 为, 调 控 着 基 因 表 达 及 细 胞 的 增 殖 分 化 与 死 亡 肿 瘤 细 胞 生 长 失 调 是 以 信 号 紊 乱 为 特 征, 信 号 传 导 调 节 异 常, 细 胞 生 长 平 衡 失 控 调 节 细 胞 信 号 传 导 通 路 为 靶 点 的 新 药 研 究 已 成 为 可 能, 通 过 中 医 药 干 预 肿 瘤 细 胞 信 号 传 导 的 研 究 已 呈 现 出 良 好 的 发 展 前 景, 现 将 中 医 药 对 肿 瘤 细 胞 信 号 通 路 的 影 响 及 作 用 机 制 概 如 下 1 肿 瘤 细 胞 中 主 要 的 信 号 通 路 1.1 核 因 子 κb(nf-κb) 信 号 通 路 活 化 的 核 转 录 因 子 κb(nf-κb) 信 号 通 路 参 与 调 控 多 种 与 炎 症 抗 凋 亡 肿 瘤 形 成 和 转 化 有 关 的 基 因 表 达 静 息 状 态 下,NF-κB 无 活 性 存 在, 当 细 胞 受 到 诱 导 物 激 活 上 下 游 因 子 时 可 活 化 NF-κB 信 号 通 路, 促 进 疾 病 的 发 生 发 展 NF-κB 活 化 途 径 的 第 一 个 共 同 歩 骤 是 在 IκK 复 合 物 的 作 用 下,IκB 蛋 白 发 生 磷 酸 化, 第 二 个 步 骤 是 泛 素 - 蛋 白 酶 体 系 统 识 别 磷 酸 化 的 IκB 蛋 白, 并 促 使 其 发 生 降 解, 随 着 1κB 蛋 白 的 降 解,NF-κB 二 聚 体 从 IκB-NF-κB 三 聚 体 中 解 离 活 化 并 进 入 核 内 与 相 应 的 κb 位 点 结 合, 激 活 并 启 动 特 异 性 靶 基 因 转 录 与 表 达 NF-κB 活 化 可 诱 导 下 游 因 子 的 转 录, 炎 症 介 质 如 C 反 应 蛋 白 (CRP) 白 介 素 -8(IL-8) 肿 瘤 坏 死 因 子 -α (TNF-α) 细 胞 间 黏 附 分 子 -1 (ICAM-1) 及 集 落 刺 激 因 子 等 IκB 为 强 的 调 控 抑 制 因 子, 使 NF-κB 应 答 快 速 关 闭, 同 时, 作 为 NF-κB 的 反 应 基 因, 随 着 NF-κB 的 活 性 上 升,IκB 的 表 达 亦 被 上 调, 可 通 过 负 反 馈 方 式 阻 止 NF-κB 的 过 度 活 [1] 化 NF-κB 的 过 度 或 失 控 活 化 是 多 种 病 理 状 态 的 决 定 因 素, 间 接 或 直 接 地 激 活 机 体 的 非 特 异 及 特 异 性 免 疫 反 应, 造 成 组 织 损 伤 和 器 官 功 能 紊 乱, 导 致 癌 症 的 发 生 发 展 因 此,NF-κB 的 适 度 调 控 对 于 机 体 发 挥 免 疫 防 御 功 能 至 关 重 要 1.2 细 胞 周 期 调 节 通 路 细 胞 周 期 是 细 胞 进 行 生 命 活 动 的 基 本 过 程, 基 因 突 变 和 表 达 失 调 会 直 接 间 接 导 致 细 胞 周 期 紊 乱 细 胞 周 期 蛋 白 依 赖 性 激 酶 (CDKs) 是 一 类 直 接 调 节 细 胞 周 期 的 蛋 白, 是 由 一 个 催 化 亚 单 位 (CDK) 和 一 个 调 节 亚 单 位 (Cyclin) 组 成 的 二 聚 体, 是 参 与 细 胞 周 期 调 控 的 主 要 因 子 CDK 与 Cyclin 结 合 后 具 有 激 酶 的 活 性, 使 靶 蛋 白 磷 酸 化 而 产 生 相 应 的 生 理 效 应, 最 终 结 果 是 细 胞 周 期 不 断 运 转 研 究 发 现, 调 控 细 胞 周 期 G1 期 的 关 键 蛋 白 [2] CyclinD1 已 被 公 认 为 是 一 种 原 癌 基 因, 其 过 度 表 达 可 致 细 胞 增 殖 失 控 而 恶 性 化 CKIs 在 细 胞 周 期 中 起 负 调 控 作 用, 是 CDK 抑 制 蛋 白, 通 过 竞 争 性 地 抑 制 Cyclin 或 Cyclin/CDK 复 合 物, 导 致 Cyclin 生 物 学 功 能 丧 失, 对 细 胞 生 长 起 负 调 控 作 用, 具 有 抑 癌 基 因 的 活 性 CKIs 家 族 分 为 INK4 和 CIP/KIP 两 大 家 族 INK4 (inhibitor of CDK4) 家 族, 又 称 p16 家 族, 包 括 p15 p16 p18 p19, 它 们 同 CDK4 和 CDK6 结 合, 能 够 特 异 性 抑 制 CDK4 -CyclinD CDK6 -CyclinD1 的 活 性 CIP/KIP 族, 又 称 p21 家 族, 包 括 p21 p27 p57 等, 能 广 泛 抑 [3] 制 Cyclin-CDK 的 作 用 Rb 蛋 白 是 重 要 的 抑 癌 基 因, 非 磷 酸 化 的 Rb 蛋 白 能 够 结 合 转 录 因 子 E2F 并 抑 制 其 功 能, 从 而 阻 止 细 胞 进 入 S 期, 是 控 制 细 胞 通 过 G1 期 的 限 制 点 p53 基 因 也 是 一 种 抑 癌 基 因, 可 通 过 调 节 一 些 基 因 的 表 达 引 起 细 胞 周 期 阻 断 和 基 金 项 目 : 江 苏 省 高 校 优 势 学 科 建 设 工 程 资 助 项 目 81

2 细 胞 凋 亡, 明 显 抑 制 肿 瘤 细 胞 的 生 长 50% 的 肿 瘤 p53 因 为 突 变 而 丧 失 细 胞 周 期 阻 断 的 功 能, 同 时 也 增 强 了 肿 瘤 细 胞 对 细 胞 周 期 阻 断 剂 和 细 胞 凋 亡 剂 的 药 物 抵 抗 作 用 1.3 受 体 酪 氨 酸 激 酶 (RTKs) 通 路 RTKs 代 表 具 有 内 在 蛋 白 酪 氨 酸 激 酶 活 性 的 细 胞 表 面 受 体 的 一 个 大 家 族, 已 鉴 定 的 成 员 约 有 20 个, 除 了 胰 岛 素 受 体 (IR), 其 他 受 体 ( 如 EGFR,PDGFR) 都 是 以 单 体 形 式 存 在 于 细 胞 膜 与 配 体 结 合 后, 受 体 间 形 成 二 聚 体, 同 时 胞 质 区 发 生 自 身 磷 酸 化, 启 动 下 游 的 信 号 传 导 通 路 RTKs 是 信 号 传 导 通 路 的 最 初 调 节 器, 其 介 导 的 下 游 信 号 传 导 有 Ras/ERK PI3K/Akt 和 JAK/STAT 等, 这 些 信 号 通 路 最 终 激 活 或 沉 默 某 [4] 些 基 因, 促 使 细 胞 对 外 界 的 刺 激 信 号 作 出 反 应 Ras 蛋 白 逐 级 刺 激 信 号 传 导 级 联 反 应, 首 先 活 化 上 游 激 酶 Raf, 使 Raf 募 集 到 细 胞 膜 并 与 之 结 合, 活 化 的 Ras -Raf 激 活 并 磷 酸 化 下 游 底 物 MEK ERK ERK(MAPK) 磷 酸 化 后 进 入 细 胞 核, 可 启 动 一 些 转 录 因 子 的 表 达 (NF-κB c-jun c-fos 等 ), 促 使 细 胞 恶 性 增 殖 因 此 通 路 的 任 何 一 个 环 节 出 现 异 常 均 可 导 致 通 路 的 异 常 激 活, 引 起 细 胞 的 异 常 增 殖 及 分 化 PI3K/Akt 信 号 通 路 活 化 可 以 加 快 细 胞 周 期 进 展, 是 RTKs 下 游 重 要 信 号 分 子,RTKs 可 直 接 激 活 PI3K, 而 PI3K 可 将 PIP2 磷 酸 化 成 PIP3, 进 一 步 磷 酸 化 Akt 将 信 号 传 至 细 胞 核, 通 过 促 CyclinD 的 表 达 引 起 细 胞 从 G0/G1 期 向 S 期 过 渡 1.4 Wnt/β-catenin 信 号 通 路 目 前 已 经 发 现 Wnt/ β-catenin 信 号 通 路 主 要 通 过 激 活 其 下 游 靶 基 因 而 导 致 癌 症 的 发 生 与 发 展 在 有 Wnt 信 号 时,βcatenin 多 聚 复 合 体 不 易 形 成,β-catenin 基 因 突 变 导 致 蛋 白 结 构 改 变, 与 转 录 因 子 TCF/LEF 结 合 成 异 源 二 聚 体, 介 导 靶 基 因 的 转 录 已 知 多 种 基 因 能 被 β- catenin/tcf 异 源 二 聚 体 激 活, 包 括 c-myc c-jun cyclin D1 血 管 内 皮 生 长 因 子 (VEGF) 等, 导 致 细 胞 [5] 的 异 常 增 殖 显 然,β-catenin 在 此 信 号 通 路 中 扮 演 着 极 其 重 要 角 色, 是 整 条 通 路 的 关 键 枢 纽 分 子 分 析 发 现,β-catenin 突 变 在 肝 癌 中 是 频 发 事 件 肝 细 胞 癌 的 转 移 侵 袭 与 Wnt/β-catenin 信 号 通 路 密 切 相 关,β-catenin 是 Wnt/β-catenin 信 号 传 导 途 径 中 的 关 键 调 控 因 子, 其 表 达 程 度 与 患 者 淋 巴 结 转 移 及 肝 内 转 移 呈 正 相 关, 此 外,Wnt/β-catenin 信 号 通 路 下 游 因 子 T 细 胞 因 子 4(Tcf-4) 基 因 表 达 与 肝 癌 的 转 移 密 切 相 关, 因 此 Wnt/β-catenin 信 号 通 路 成 员 基 因 突 变 和 ( 或 ) 异 常 表 达 奠 定 了 肝 癌 细 胞 转 移 和 侵 [6] 袭 的 分 子 学 基 础 亦 有 研 究 证 实 胃 癌 的 发 生 与 该 [7] 途 径 活 化 异 常 有 关 1.5 Notch 信 号 通 路 Notch 信 号 通 路 是 在 进 化 过 程 中 高 度 保 守 的 信 号 传 导 机 制, 由 跨 膜 的 Notch 受 体 Notch 配 体 和 胞 内 DNA 结 合 蛋 白 及 靶 基 因 组 [8] 成 Notch 信 号 通 过 与 配 体 结 合 而 启 动, 有 序 被 γ- 分 泌 酶 裂 解,Notch 受 体 活 化,Notch 受 体 胞 内 域 (NICD) 释 放 入 细 胞 质 中, 并 易 位 转 移 至 细 胞 核 与 转 录 因 子 结 合, 从 而 调 控 靶 基 因 进 一 步 研 究 证 实, Notch 信 号 通 路 反 复 参 与 调 节 细 胞 增 殖 分 化 和 凋 亡, 与 其 肿 瘤 的 发 生 发 展 关 系 密 切 研 究 表 明, Notch 信 号 通 路 在 胃 癌 发 生 中 是 重 要 的,Notch 信 号 通 路 的 活 性 与 胃 癌 患 者 生 存 率 密 切 相 关,Notch 受 体 胞 内 结 构 可 直 接 结 合 环 氧 合 酶 -2(COX-2) 启 动 [7] 子, 并 与 COX-2 传 导 途 径 存 在 串 活 作 用 2 中 医 药 调 节 肿 瘤 细 胞 主 要 信 号 通 路 的 研 究 2.1 中 药 对 NF-κB 信 号 通 路 的 影 响 及 作 用 机 制 中 药 提 取 物 - 姜 黄 素 可 以 通 过 抑 制 IκBα 的 磷 酸 化 阻 断 NF-κB 信 号 通 路, 促 进 细 胞 凋 亡, 抑 制 细 胞 增 殖, [9] 同 时 增 加 细 胞 对 5-FU 的 敏 感 性 薏 苡 仁 是 一 种 药 食 两 用 的 中 药, 荧 光 显 微 发 现, 其 能 阻 断 NF-κB 的 转 录 是 通 过 减 少 NF-κB 的 RelA/p65 亚 基 的 转 位 和 降 低 蛋 白 激 酶 C 的 活 性 起 作 用, 而 且 蛋 白 激 酶 C 也 是 NF-κB 信 号 传 导 和 激 活 的 主 要 调 控 因 子, 这 有 可 [10] [11] 能 是 薏 苡 仁 作 为 抗 癌 药 的 基 础 陈 赐 慧 从 肿 瘤 炎 性 微 环 境 是 影 响 肿 瘤 细 胞 的 转 移 潜 能 和 转 移 靶 向 入 手, 研 究 肺 瘤 平 膏 含 药 血 清 降 低 TNF-α 的 含 量, 降 低 IκKα p-iκkα/β p-iκbα 蛋 白 的 表 达 量, 升 高 IκBα 浓 度 从 而 影 响 NF-κBp65 核 转 录, 从 分 子 水 平 证 实 肺 瘤 平 膏 从 调 控 肿 瘤 炎 性 微 环 境 NF-κB [12] 信 号 通 路 防 止 肺 癌 转 移 的 机 制 王 亚 等 研 究 通 莲 汤 对 胃 癌 MGC803 细 胞 生 长 周 期 的 调 节 作 用 及 细 胞 核 转 录 因 子 NF-κB 信 号 通 路 的 影 响, 结 果 显 示 通 莲 汤 能 够 降 低 MGC803 细 胞 IKKβ 和 NF-κB 的 蛋 白 表 达, 对 其 生 长 有 抑 制 作 用, 该 作 用 机 制 与 阻 滞 于 细 胞 有 丝 分 裂 的 G2 期, 下 调 细 胞 内 IKKβ 和 NF-κB [13] 的 蛋 白 表 达 有 关 骆 殊 从 mrna 和 蛋 白 水 平 研 究 了 黄 芪 与 莪 术 配 伍 对 COX-2 PPARγ 和 NF-κB 的 影 响, 体 外 研 究 结 果 表 明 黄 芪 与 莪 术 配 伍 促 进 PPARγ 的 表 达 可 以 通 过 降 低 NF-κB 进 而 降 低 COX-2 的 表 达, 这 一 机 制 可 能 是 部 分 通 过 PPARγ/NF-κB 信 号 途 径 实 现 对 COX-2 表 达 的 调 控, 同 样 该 结 论 在 荷 瘤 裸 [14] 鼠 人 原 位 胃 癌 模 型 体 内 也 得 到 证 实 曾 光 等 在 前 期 研 究 基 础 上, 进 一 步 证 明 了 幽 门 螺 旋 杆 菌 (H.pylori) 感 染 人 胃 腺 癌 细 胞 (AGS) 加 入 七 方 胃 痛 颗 粒 药 物 血 清 组 三 叶 肽 因 子 1(TFF1)mRNA 蛋 白 表 达 明 显 增 加, 且 核 蛋 白 EMSA 实 验 中 条 带 较 空 白 对 照 组 清 晰, 说 明 H.pylori 可 以 激 活 NF-κB 信 号, 而 七 方 胃 痛 颗 粒 82

3 可 以 抑 制 NF-κB 与 DNA 结 合 活 性, 并 呈 浓 度 依 赖 性 初 步 表 明 其 调 控 H.pylori 感 染 AGS TFF1 的 表 达 可 能 是 通 过 NF-κB 信 号 通 路 来 实 现 的 2.2 中 药 对 细 胞 周 期 调 节 通 路 的 影 响 及 作 用 机 制 [15] 骆 叶 在 研 究 小 檗 碱 ( 又 名 黄 连 素 ) 对 人 高 转 移 性 肺 癌 PG 细 胞 Cyclin D1 的 表 达 有 抑 制 作 用 基 础 上, 进 一 步 从 分 子 机 制 上 研 究 其 对 Cyclin D1 相 关 信 号 通 路 的 作 用, 结 果 显 示 小 檗 碱 能 降 低 PG 细 胞 内 与 Cyclin D1 转 录 密 切 相 关 的 AP-1 转 录 因 子 组 分 c-jun 含 量, 并 抑 制 Cyclin D1 基 因 启 动 子 区 与 AP-1 转 录 因 子 的 结 合, 从 而 抑 制 Cyclin D1 基 因 的 转 录 水 平, 抑 制 周 期 进 展 关 键 蛋 白 Cyclin D1, 进 而 阻 滞 肿 瘤 细 胞 周 期 进 展 研 究 显 示 枸 杞 多 糖 (LBP) 对 人 食 管 癌 TE-13 细 胞 的 生 长 增 殖 具 有 抑 制 作 用, 并 呈 剂 量 和 时 间 依 赖 性, 同 时 使 去 磷 酸 化 Rb 蛋 白 的 表 达 增 加, 且 去 磷 酸 化 Rb 蛋 白 的 表 达 量 与 LBP 诱 导 TE-13 细 胞 凋 亡 率 呈 正 相 关, 可 见 LBP 诱 导 细 胞 凋 [16] 亡 和 周 期 阻 滞 与 Rb 蛋 白 表 达 有 关 吴 茱 萸 碱 对 人 肝 癌 细 胞 HepG2 发 挥 抗 肿 瘤 作 用 途 径 之 一 为 对 细 胞 周 期 产 生 阻 滞, 将 其 阻 滞 于 G2/M 期, 导 致 肿 瘤 细 胞 的 增 殖 抑 制, 而 发 生 这 种 周 期 阻 滞 的 机 制 可 能 是 吴 茱 萸 碱 上 调 G2/M 期 细 胞 周 期 调 控 因 子 CyclinB [17] [18] 和 CDK1 的 转 录 表 达 包 永 睿 等 研 究 发 现 白 茅 根 提 取 物 对 人 肝 癌 细 胞 SMMC-7721 细 胞 的 生 长 抑 制 率 呈 线 性 增 大, 并 呈 明 显 的 时 间 和 剂 量 依 赖 效 应, 且 对 细 胞 的 抑 制 作 用 是 通 过 抑 制 G2/M 期 细 胞 [19] 比 例, 将 细 胞 周 期 阻 滞 在 S 期 实 现 的 郑 展 等 在 细 胞 水 平 上 检 测 肺 岩 宁 颗 粒 中 剂 量 组 能 有 效 阻 断 肺 癌 细 胞 从 G0/G1 期 到 S 期 的 演 进, 并 进 一 步 在 核 酸 转 录 水 平 表 明 肺 岩 宁 颗 粒 能 够 明 显 抑 制 Lewis 肺 癌 组 织 MDM2 mrna 表 达, 增 强 P53 mrna 表 达, 从 而 干 预 细 胞 周 期 G1/S 检 测 点 信 号 通 路 中 的 MDM2-P53 生 [20] 物 轴 抗 肺 癌 增 殖 苗 学 红 用 不 同 剂 量 的 补 肾 疏 肝 方 含 药 血 清 处 理 肺 腺 癌 A549 细 胞 72h 的 总 蛋 白, 通 过 Western Blot 手 段 检 测 其 对 P53 Bcl-2 表 达 的 影 响, 联 合 组 72h 补 肾 疏 肝 方 含 药 血 清 显 著 诱 导 A549 细 胞 激 活 P53 从 而 促 进 细 胞 凋 亡, 与 此 同 时 补 肾 疏 肝 方 含 药 血 清 能 下 调 凋 亡 抑 制 蛋 白 Bcl-2, 这 些 结 果 初 步 表 明 补 肾 疏 肝 方 可 以 通 过 激 活 P53 活 性 下 调 Bcl-2 的 活 性 来 表 现 其 抗 癌 活 性 2.3 中 药 对 RTKs 级 联 信 号 通 路 的 影 响 及 作 用 机 制 姜 黄 素 通 过 抑 制 PI3K/Akt 的 活 性 而 促 进 膀 胱 [21] 癌 EJ 细 胞 的 凋 亡 及 乳 腺 癌 细 胞 MCF-7 凋 亡, 通 [22] 过 调 控 PI3K/Akt 信 号 通 路 而 抑 制 结 肠 癌 的 增 殖 [23] 毛 蜀 等 发 现 在 姜 黄 素 髓 母 细 胞 瘤 Daoy 处 理 后, PI3K p-akt 蛋 白 和 mrna 表 达 水 平 降 低,Akt 的 磷 酸 化 水 平 可 以 作 为 衡 量 PI3K 活 性 的 指 标, 反 映 PI3K 信 号 通 路 的 活 性, 因 此, 姜 黄 素 可 能 通 过 抑 制 PI3K/Akt 信 号 通 路 的 活 性 而 抑 制 髓 母 细 胞 瘤 的 增 殖 与 生 长 研 究 表 明, 雷 公 藤 红 素 可 显 著 抑 制 Akt 的 磷 酸 化 水 平, 同 时 其 下 游 Survivin Bcl-2 的 磷 酸 化 水 平 亦 显 著 受 抑 25Lmol/LPI3K-Akt 抑 制 剂 WORT 可 明 显 增 强 雷 公 藤 红 素 的 凋 亡 诱 导 作 用 进 一 步 检 测 Akt 磷 酸 化 水 平 时 发 现 单 独 应 用 25Lmol/LWORT 可 显 著 抑 制 K562 细 胞 Akt 的 磷 酸 化, 表 明 PI3K- Akt 抑 制 剂 与 雷 公 藤 红 素 诱 导 凋 亡 协 同 作 用 的 关 键 [24] [25] 因 素 潘 磊 等 以 体 外 培 养 胃 癌 SGC-7901 细 胞 为 研 究 对 象, 以 丝 裂 原 活 化 蛋 白 激 酶 (MAPK) 信 号 通 路 为 切 入 点, 探 讨 蛇 六 谷 提 取 物 对 胃 癌 SGC-7901 细 胞 增 殖 的 分 子 作 用 机 制 结 果 显 示, 蛇 六 谷 提 取 物 可 能 通 过 同 时 激 活 MAPK 信 号 传 导 通 路 中 的 ERK JNK P38 的 磷 酸 化 水 平, 或 激 活 MAPK 信 号 其 中 某 一 通 路, 从 而 发 挥 抑 制 人 胃 癌 SGC-7901 细 [26] 胞 增 殖 的 作 用 刘 静 等 采 用 体 外 实 验 方 法, 探 索 健 脾 复 方 对 PI3K/Akt 信 号 通 路 表 达 的 影 响, 结 果 显 示 健 脾 复 方 可 显 著 下 调 PI3K/Akt 蛋 白 的 表 达, 提 示 健 脾 复 方 治 疗 大 肠 癌 的 机 理 可 能 通 过 调 控 这 一 信 号 通 路, 下 调 其 下 游 诸 多 肿 瘤 相 关 因 子 的 表 达, 促 进 细 胞 [27] 凋 亡, 从 而 发 挥 其 治 疗 肿 瘤 的 作 用 宋 竖 旗 等 研 究 前 列 消 癥 汤 对 前 列 腺 癌 PC-3 细 胞 PI3K/Akt 信 号 通 路 影 响, 结 果 显 示 前 列 消 癥 汤 含 药 血 清 能 下 调 PI3K/Akt 信 号 通 路 中 mtor 和 NF-κB 表 达, 上 调 PTEN 表 达, 实 现 PI3K/Akt 信 号 通 路 的 负 性 调 节, 这 可 能 是 中 药 复 方 治 疗 前 列 腺 癌 的 分 子 机 制 之 一 2.4 中 药 对 Wnt/β-catenin 信 号 通 路 的 影 响 及 作 用 [28] 机 制 何 小 进 等 用 姜 黄 素 处 理 骨 肉 瘤 MG63 细 胞, 探 讨 其 对 细 胞 内 Wnt/β-catenin 信 号 通 路 相 关 基 因 表 达 影 响 以 及 分 子 机 制 结 果 表 明, 姜 黄 素 能 显 著 抑 制 MG63 细 胞 增 殖, 且 呈 剂 量 - 时 间 依 赖 性 ; 姜 黄 素 处 理 后,MG63 细 胞 中 β-catenin 和 CyclinD1 基 因 mrna 和 蛋 白 的 表 达 水 平 均 显 著 下 降, 且 呈 剂 量 - 时 间 依 赖 性, 表 明 外 源 性 的 姜 黄 素 对 MG63 细 胞 生 长 的 抑 制 作 用 是 通 过 阻 断 内 源 性 Wnt/β-catenin 通 路 的 活 性 实 现 的,β-catenin 信 号 通 路 是 治 疗 骨 肉 瘤 [29] 的 一 个 潜 在 靶 点 任 建 琳 等 研 究 健 脾 复 方 是 否 对 肠 癌 Wnt/β-catenin 信 号 通 路 有 影 响, 采 用 免 疫 组 化 检 测 该 信 号 通 过 关 键 分 子 β-catenin 蛋 白 表 达 情 况 结 果 显 示, 健 脾 复 方 能 够 下 调 β-catenin 表 达 水 平, 呈 剂 量 依 赖 性 认 为 健 脾 复 方 能 够 抑 制 人 肠 癌 裸 鼠 皮 下 移 植 瘤 的 生 长 和 转 移, 其 机 制 可 能 是 通 过 抑 制 Wnt/β-catenin 信 号 通 路 而 发 挥 作 用 贺 松 其 [30] 等 以 肝 癌 细 胞 HepG2 为 模 型, 运 用 血 清 药 理 学 方 83

4 法 检 测 肝 癌 细 胞 中 β-catenin 蛋 白 含 量, 实 验 结 果 显 示 鳖 甲 煎 丸 对 细 胞 中 β-catenin 蛋 白 的 表 达 有 显 著 抑 制 作 用, 并 呈 浓 度 依 赖 性, 且 能 显 著 下 调 Wnt/ β -catenin 通 路 抑 制 基 因 DKK -1 的 表 达, 阻 断 Wnt/β-catenin 信 号 通 路, 从 而 发 挥 抑 制 肿 瘤 的 生 长 黏 附 和 转 移 的 作 用 研 究 发 现, 左 金 丸 能 够 明 显 抑 制 幽 门 螺 杆 菌 感 染 的 人 胃 癌 MKN45 细 胞 的 转 移 能 力, 抑 制 β-catenin 在 MKN45 细 胞 核 中 表 达 水 平 和 下 调 MKN45 细 胞 培 养 上 清 液 中 下 游 靶 基 因 MMP-7 表 达, 从 而 抑 制 Wnt/β-catenin 信 号 通 路 抑 制 幽 门 螺 杆 菌 感 染 的 人 胃 癌 细 胞 转 移 提 示 左 金 丸 防 治 幽 门 螺 杆 菌 诱 发 胃 癌 细 胞 转 移 的 机 制 可 能 与 通 过 Wnt/β-catenin 信 号 通 路 抑 制 MMP-7 表 达 有 [31] [32] 关 刘 宣 等 选 用 10μmol/L 的 丹 参 酮 ⅡA 从 蛋 白 水 平 进 行 深 入 研 究 其 对 人 肠 癌 细 胞 VEGF 表 达 的 调 控 机 制,Western Blot 结 果 发 现, 丹 参 酮 ⅡA 能 够 下 调 COX-2 和 β-catenin 表 达 进 一 步 实 验 研 究 发 现, 丹 参 酮 ⅡA 通 过 COX-2 途 径 下 调 β-catenin 表 达, 导 致 细 胞 中 β-catenin 降 解 增 加,β-catenin 核 移 位 量 减 少, 从 而 抑 制 Wnt/β-catenin 信 号 传 导 通 路, 下 调 VEGF 的 转 录 表 达, 可 能 是 丹 参 酮 ⅡA 抗 大 肠 癌 血 管 新 生 的 作 用 机 制 之 一 2.5 中 药 对 Notch 信 号 通 路 的 影 响 及 作 用 机 制 研 究 表 明 补 肾 疏 肝 方 含 药 血 清 能 有 效 促 进 肺 癌 A549 细 胞 凋 亡 和 下 调 Notch1 Notch 配 体 (Delta4) VEGF 基 因 mrna 的 表 达, 并 随 着 时 间 的 延 长 和 浓 度 的 升 高, 其 抑 制 作 用 逐 渐 增 强, 导 致 Notch1 [20] Delta4 VEGF 蛋 白 的 表 达 继 发 下 调, 同 时 含 药 组 癌 细 胞 有 明 显 的 凋 亡 现 象, 其 凋 亡 率 与 对 照 组 比 有 显 著 性 差 异 实 验 研 究 采 用 补 肾 益 精 中 药 熟 地 黄 的 有 效 成 分 地 黄 多 糖 成 功 诱 导 骨 髓 间 充 质 干 细 胞 (BMSCs) 向 神 经 细 胞 分 化, 导 致 Notchl 蛋 白 和 其 胞 内 段 NICD 表 达 降 低, 并 影 响 Notch 信 号 通 路 相 关 分 子 mrna 的 表 达, 推 测 这 与 地 黄 多 糖 抑 制 Notch 信 号 通 路 的 活 化 有 关, 即 抑 制 Nocthl 蛋 白 的 表 达, 从 而 抑 制 Hesl 的 表 达, 进 而 解 除 了 对 编 码 碱 性 螺 旋 - 环 - 螺 旋 (basic helix-loop-helix,bhlh) 转 录 调 节 因 子 抑 制 作 用, 最 终 结 果 促 进 干 细 胞 向 神 经 细 胞 [33] [34] 分 化 刘 少 琼 等 探 讨 了 姜 黄 素 抑 制 大 肠 癌 细 胞 增 殖 的 分 子 基 础 可 能 是 通 过 Notch 信 号 通 路 来 实 现 的, 认 为 姜 黄 素 可 抑 制 Notch 信 号 通 路 中 Notch 受 体 和 Jagged 配 体 蛋 白 表 达 抑 制 γ 一 分 泌 酶 抑 制 Notch 信 号 下 游 的 靶 基 因 Skp2 及 影 响 与 其 相 关 的 其 他 通 路, 最 终 达 到 抑 制 大 肠 癌 增 殖 与 转 移 的 目 [35] 的 付 航 等 以 胃 癌 前 病 变 大 鼠 为 模 型, 敦 煌 平 胃 丸 浸 膏 掺 入 饲 料 中 喂 养 给 药, 观 察 12 周 后 大 鼠 胃 黏 膜 病 理 组 织 学 变 化, 结 果 显 示 敦 煌 平 胃 丸 能 明 显 下 调 胃 癌 前 病 变 大 鼠 胃 黏 膜 组 织 中 Notch2 Jagged1mRNA 及 蛋 白 表 达 水 平, 推 测 Notch2 作 为 受 体 Jagged1 作 为 配 体 激 活 了 Notch 信 号 通 路, 促 进 了 胃 黏 膜 腺 体 萎 缩 肠 化 增 生 敦 煌 平 胃 丸 治 疗 胃 癌 前 病 变 可 能 与 下 调 Notch 信 号 通 路 中 Notch2 Jagged1 表 达, 促 进 胃 黏 膜 组 织 修 复 与 重 构 有 关 3 结 语 综 上 所, 细 胞 信 号 传 导 通 路 交 互 繁 复, 研 究 中 医 药 对 不 同 信 号 传 导 通 路, 及 信 号 通 路 串 话 的 调 控 作 用, 将 可 能 揭 示 中 医 药 抗 肿 瘤 的 多 途 径 多 靶 点 的 机 制 和 优 势 但 对 信 号 通 路 的 激 活 和 阻 断 信 号 通 路 后, 中 医 药 作 用 效 率 方 面 的 研 究 还 很 少 中 医 药 对 信 号 传 导 通 路 中 的 上 下 游 因 子, 中 医 药 作 用 后 肿 瘤 细 胞 详 细 的 信 息 传 递 途 径 尚 有 待 深 入 系 统 的 研 究 如 何 全 面 剖 析 中 医 药 调 控 肿 瘤 细 胞 信 号 传 导 途 径, 将 是 我 们 今 后 深 入 挖 掘 的 方 向 与 目 标 参 考 文 献 [1] FERREIRP D U,KOMIVES E A. Molecular mechanisms of system control of NF -kappab signaling by IkappaBalpha[J]. Biochemistry, 2010, 49(8):1560. [2] 卢 梦 玲, 闫 超, 赖 多, 等.Cyclin D1 与 细 胞 周 期 调 控 [J]. 生 物 技 术 通 报,2011(10):55. [3] 邹 向 阳, 李 连 宏. 细 胞 周 期 调 控 与 肿 瘤 [J]. 国 际 遗 传 学 杂 志,2006,29(1):72. [4] 马 晓 方, 杜 晓 光, 辛 现 良, 等. 肿 瘤 细 胞 恶 性 增 殖 和 细 胞 周 期 调 控 改 变 的 分 子 机 制 [J]. 现 代 生 物 医 学 进 展,2009,9(5):950. [5] 郑 勤, 徐 瀚 峰.Wnt/β-catenin 信 号 通 路 在 肝 癌 中 的 研 究 进 展 [J]. 国 际 消 化 病 杂 志,2010,30(2):76. [6] 贺 松 其, 姚 飞 龙, 吕 志 平, 等.Wnt/β-catenin 信 号 通 路 在 肝 癌 转 移 侵 袭 中 的 调 控 机 制 [J]. 中 国 实 验 方 剂 学 杂 志, 2011,17(7):251. [7] 罗 振, 陈 洁, 潘 勇. 细 胞 信 号 通 路 在 胃 癌 中 的 进 展 [J]. 中 国 医 药 指 南,2013,11(7):76. [8] FIUZA U M,ARIAS A M. Cell and molecular biology of Notch[J].J Endocrinol,2007,194(3):464. [9] 田 芳, 宋 敏, 许 培 荣, 等. 姜 黄 素 阻 断 NF-κB 信 号 通 路 促 进 食 管 鳞 癌 细 胞 凋 亡 的 体 外 研 究 [J]. 癌 症,2008,27(6):566. [10] WOO J H, LI D, WILSBACH K, et al. Coix seed extract, a commonly used treatment for cancer in China, inhibits NFkappaB and protein kinase C signaling[j]. Cancer Biol Ther, 2010,6(12):2005. [11] 陈 赐 慧. 肺 瘤 平 膏 调 控 NF-κB 相 关 炎 性 信 号 通 路 防 止 肺 癌 转 移 的 分 子 机 制 研 究 [D]. 北 京 : 北 京 中 医 药 大 学,2013. [12] 王 亚, 贾 永 森, 喇 孝 瑾, 等. 通 莲 汤 对 胃 癌 MGC803 细 胞 周 期 及 NF-κBs 信 号 通 路 的 影 响 [J]. 中 国 实 验 方 剂 学 杂 志,2013,19(22):213. [13] 骆 殊. 黄 芪 莪 术 配 伍 的 增 效 作 用 及 通 过 PPARγ/NF-κB 信 号 途 径 调 控 胃 癌 细 胞 COX-2 表 达 机 制 的 研 究 [D]. 南 84

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