蜂王浆中27种药物残留的
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- 民慧 终
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1 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 * 对 蜂 王 浆 中 27 种 药 物 残 留 的 同 时 测 定 周 萍 1, 李 英 华 2, 钮 灵 铃 1, 王 立 华 1, 赵 薇 1, 罗 安 1, 胡 福 良 (1. 杭 州 蜂 之 语 蜂 业 股 份 有 限 公 司, 浙 江 桐 庐 ; 2. 浙 江 经 贸 职 业 技 术 学 院, 浙 江 杭 州,310018; 3. 浙 江 大 学 动 物 科 学 学 院, 浙 江 杭 州 ) 3** 摘 要 : 本 试 验 建 立 了 蜂 王 浆 中 氯 霉 素 磺 胺 类 磺 胺 增 效 剂 氟 喹 诺 酮 类 林 可 胺 类 硝 基 咪 唑 类 大 环 内 酯 类 等 七 大 类 27 种 药 物 残 留 的 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 的 同 时 测 定 方 法 对 蜂 王 浆 中 药 物 残 留 的 提 取 溶 剂 提 取 ph 值 色 谱 柱 流 动 相 质 谱 条 件 进 行 了 优 化 选 择 本 方 法 以 信 噪 比 S/N=3 对 应 浓 度 确 定 27 种 残 留 的 检 出 限, 氯 霉 素 的 检 出 限 为 0.1µg/kg, 其 余 均 匀 为 1µg/kg; 氯 霉 素 在 线 性 范 围 0.3µg/kg~10µg/kg, 其 余 26 种 药 残 在 线 性 范 围 2µg/kg~ 100µg/kg 内, 回 收 率 达 70.1%~118.9%, 相 对 标 准 偏 差 在 4.3%~14.9% 该 方 法 满 足 蜂 王 浆 中 27 种 药 物 残 留 的 同 时 测 定 要 求, 具 有 样 品 预 处 理 简 单 灵 敏 度 高 分 析 时 间 短 的 优 点 中 图 分 类 号 :S896.8; O657 文 献 标 识 码 :A 文 章 编 号 :T 关 键 词 : 蜂 王 浆 ; 药 物 残 留 ; 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 ; 同 时 测 定 Simultaneous Determination of 27 Medicine Residues in Royal Jelly Using High Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry Zhou Ping,Li Yinghua,Hu Fuliang, Niu Lingling,Wang Lihua,Zhao Wei,Luo An (1.Zhejiang Beewords Apiculture Group Co. Ltd. Tonglu, , China; 2. ZheJiang Economic & Trade Polytechnic, Hangzhou, , China; 3. College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou, , China) Abstract: A method has been developed to simultaneously determine chloramphenicol,sulfonamide,trimethoprim, fluoquinolones, lincosmide, nitroimidazole and macrolides residues in royall jelly by hydrophilic interaction chromatography with tandem mass spectrometry. The experimental conditions such as residues extracting solvents, ph value, the chromatography column, eluant and mass spectrometry condition were optimized. The limits of detection to chloramphenicol was 0.1µg/kg and to other residues was 1µg/kg (S/N=3). Recoveries at three different levels ranged from 70.1%-118.9%. Relative standard deviation (n=3) ranged from 4.3%-14.9%. The method is simple, accurate and suitable for analysis of 27 residues in royal jelly. Key words: royal jelly; medicine residue; HPLC-MS/MS; simultaneous determine 氯 霉 素 磺 胺 类 磺 胺 增 效 剂 氟 喹 诺 酮 类 林 可 胺 类 硝 基 咪 唑 类 大 环 内 酯 类 等 药 物 是 目 [1-2] 前 养 蜂 生 产 中 的 治 疗 蜂 病 时 常 用 的 几 类 药 物 由 于 这 几 类 药 物 具 有 导 致 过 敏 反 应 和 使 人 体 产 生 抗 药 性 等 副 作 用, 因 此 欧 盟 美 国 日 本 等 发 达 国 家 和 组 织 将 这 几 类 药 物 列 为 王 浆 中 残 留 检 测 的 重 点 监 控 药 物 或 者 即 将 列 为 监 控 药 物 的 范 围, 对 这 几 类 药 物 有 着 严 格 的 限 量 要 求 因 此, 监 测 王 浆 中 多 种 药 物 的 残 留 对 促 进 王 浆 出 口 贸 易 和 保 证 动 物 源 性 食 品 安 全 有 着 积 极 的 意 义 * 基 金 项 目 : 浙 江 省 分 析 测 试 基 金 资 助 项 目 (No. 2007F70038); 浙 江 省 自 然 科 学 基 金 项 目 (No.R ) 作 者 简 介 : 周 萍,(1968- ), 男, 浙 江 桐 庐 人, 工 程 师, 主 要 从 事 蜂 产 品 分 析 检 验 工 作 ** 通 讯 作 者 : 胡 福 良, 男, 教 授, 主 要 从 事 蜂 产 品 药 理 与 质 量 安 全 研 究, flhu@zju.edu.cn, Tel:
2 从 目 前 国 内 外 关 于 药 物 残 留 检 测 的 文 献 报 道 来 看, 由 于 这 几 大 类 化 合 物 的 结 构 和 化 学 性 质 不 同, 导 致 多 类 药 物 在 动 物 组 织 中 残 留 的 同 时 检 测 技 术 难 度 加 大, 检 测 方 法 的 报 道 以 检 测 肉 蛋 乳 鳗 鱼 果 蔬 水 等 食 品 中 氯 霉 素 磺 胺 类 喹 诺 酮 类 大 环 内 酯 类 的 单 类 药 物 残 留 为 主 [3-9] 迄 今 为 止, 关 于 利 用 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 法 同 时 测 定 蜂 王 浆 中 多 类 药 物 残 留 的 方 法 未 见 报 道 因 此, 本 文 在 文 献 研 究 的 基 础 上 [10-15], 对 蜂 王 浆 样 品 前 处 理 工 艺 进 行 优 化, 并 应 用 电 喷 雾 正 负 离 子 扫 描 和 多 反 应 监 测 技 术, 建 立 了 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 法 同 时 测 定 蜂 王 浆 中 氯 霉 素 磺 胺 类 磺 胺 增 效 剂 氟 喹 诺 酮 类 林 可 胺 类 硝 基 咪 唑 类 大 环 内 酯 类 等 共 7 大 类 27 种 药 物 残 留 的 方 法 本 方 法 操 作 简 便 选 择 性 和 灵 敏 度 高 分 析 时 间 短 检 测 成 本 低, 可 满 足 进 出 口 王 浆 中 多 种 药 物 残 留 量 检 测 分 析 和 确 证 工 作 的 需 要 1 实 验 部 分 1.1 仪 器 与 试 剂 安 捷 伦 1200 高 效 液 相 色 谱 仪 ( 美 国 安 捷 伦 公 司 );API3200 串 联 四 极 杆 质 谱 仪 ( 美 国 应 用 生 物 系 统 公 司 );Sartorius BS224S 分 析 天 平 ( 德 国 赛 多 利 斯 公 司 );PHS-3C 雷 磁 精 密 ph 计 ( 上 海 自 动 化 仪 表 公 司 );RJ-TDL-40B 低 速 台 式 大 容 量 离 心 机 ( 无 锡 市 瑞 江 分 析 仪 器 有 限 公 司 );Organomation N-EVAP 111 氮 吹 仪 ( 美 国 Organomation 公 司 ) 27 种 标 准 品 ( 纯 度 >99.0%, 德 国 Dr.Ehrenstorfer 公 司 ); 乙 腈 乙 酸 铵, 正 己 烷 冰 乙 酸 均 为 色 谱 纯 ( 德 国 Merck 公 司 ); 乙 酸 乙 酯 ( 农 残 级 ); 水 为 Millipore-Q 超 纯 水 ; 其 余 试 剂 均 为 分 析 纯 乙 酸 乙 酯 - 乙 腈 溶 液 : 分 别 量 取 乙 酸 乙 酯 和 乙 腈 各 50mL 混 合 即 得 SAS 提 取 液 :10g 偏 磷 酸 用 水 定 容 至 100mL, 溶 解 过 夜, 加 入 10mL 甲 醇 混 均 即 得 流 动 相 : 乙 腈 -0.1% 乙 酸 水 溶 液 ( 含 0.5 mmol/l 乙 酸 铵 )=5+95 标 准 溶 液 : 精 密 称 取 26 种 标 准 品 各 10mg 用 乙 腈 定 容, 配 制 为 1000mg/L 的 标 准 储 备 液, 氯 霉 素 按 上 述 方 法 单 独 配 制 -18 避 光 保 存 1.2 样 品 处 理 称 取 蜂 王 浆 5g 于 100mL 离 心 塑 料 瓶 中, 加 入 50mL SAS 提 取 液, 混 合 均 匀 后 超 声 提 取 3min; 3500r/min 离 心 5min, 取 上 清 液 的 续 滤 液 20mL 于 50mL 的 茄 形 瓶 中, 加 5mL 正 丙 醇 混 合 后 40 下 于 旋 转 蒸 发 仪 上 减 压 浓 缩 至 8mL-12mL, 加 入 2.0g 氯 化 钠 进 行 破 乳, 再 用 1mol/L 氢 氧 化 钠 调 节 ph=6.0 ±0.1, 加 入 10mL 乙 酸 乙 酯 乙 腈 溶 液 充 分 混 合 提 取, 提 取 3min 后 3500rpm 离 心 5min, 移 取 上 清 液 于 50mL 茄 形 瓶 ; 重 复 上 述 提 取 操 作 一 次, 合 并 于 同 一 50mL 茄 形 瓶 中 ; 加 入 5mL 正 丙 醇 混 合 后 40 下 旋 转 蒸 发 仪 上 减 压 浓 缩 至 干 ; 加 入 流 动 相 1ml, 超 声 溶 解 后 转 移 到 10ml 离 心 管 中, 重 复 上 述 溶 解 操 作 2 次 ; 加 入 正 己 烷 2ml, 充 分 混 合 去 脂,800rpm 离 心 2min, 取 下 层 样 液 过 0.22µm 滤 膜, 保 存 待 测 1.3 色 谱 条 件 色 谱 柱 :Intersil C mm,5μ m( 日 本 GL science 公 司 ); 流 动 相 : 乙 腈 -0.1% 乙 酸 水 溶 液 ( 含 0.5 mmol/l 乙 酸 铵 )=5+95; 流 速 :0.6Ml/min; 柱 温 :30 ; 进 样 量 :20µl; 梯 度 洗 脱 程 序 见 表 1
3 表 1 流 动 相 梯 度 洗 脱 程 序 Table 1 Gradient elution program Time t/min Acetonitrile Ф/% 0.1% acetate solution(including 0.5mmol/L Ammonium acetate) Ф/% 质 谱 条 件 串 联 质 谱 : 电 喷 雾 离 子 源, 氯 霉 素 采 用 负 离 子 扫 描 模 式, 其 余 采 用 正 离 子 扫 描 模 式, 所 使 用 的 质 谱 仪 可 检 测 二 次 正 负 离 子, 离 子 源 自 动 切 换, 反 应 监 测 模 式 (MRM); 雾 化 气 气 帘 气 辅 助 加 热 气 碰 撞 气 均 为 高 纯 氮 气 ; 雾 化 气 GS1 压 力 为 65 PSI; 辅 助 加 热 气 GS2 压 力 为 65PSI; 气 帘 气 CUR 压 力 为 20 PSI; 碰 撞 气 CAD 压 力 为 5PSI; 电 喷 雾 电 压 为 3900V; 离 子 化 温 度 为 种 药 物 残 留 的 其 他 质 谱 条 件 见 表 2 Compoud ( 化 合 物 ) Sulfaquinoxaline ( 磺 胺 喹 恶 啉 ) Sulfachlorpyridazine ( 磺 胺 氯 哒 嗪 ) Sulfadiazine ( 磺 胺 嘧 啶 ) Sulfadoxine ( 磺 胺 多 辛 ) Sulfapyridine ( 磺 胺 吡 啶 ) Sulfabenzamine ( 苯 酰 磺 胺 ) Sulfamethoxypyridazine ( 磺 胺 甲 氧 哒 嗪 ) Sulfamerazine ( 磺 胺 甲 基 嘧 啶 ) Sulfamonomethoxine ( 磺 胺 -6- 甲 氧 嘧 啶 ) Sulfamethazine ( 磺 胺 二 甲 嘧 啶 ) Sulfamethoxazole ( 磺 胺 甲 基 异 噁 唑 ) Sulfaisoxazole ( 磺 胺 二 甲 异 噁 唑 ) Sulfathiazole ( 磺 胺 噻 唑 ) Sulfadimethoxine ( 磺 胺 间 二 甲 氧 嘧 啶 ) Trimethoprim ( 甲 氧 苄 氨 嘧 啶 ) Ofloxacin ( 氧 氟 沙 星 ) Norfloxacin ( 诺 氟 沙 星 ) Ciprofloxacin ( 环 丙 沙 星 ) Danofloxacinmesylate ( 甲 磺 酸 达 氟 沙 星 ) Enrofloxacin ( 恩 诺 沙 星 ) Oxolinic acid ( 恶 喹 酸 ) Lincomycin ( 林 可 霉 素 ) 表 2 27 种 残 留 药 物 的 LC-ESIMS/MS 仪 器 参 数 Table 2 LC-ESIMS/MS parameters for 27 medicine residue Formula ( 分 子 式 ) MRM transition (MRM 离 子 对 )m/z Cone voltage ( 锥 孔 电 压 )V/V Collision energy ( 碰 撞 能 量 )V/eV Retention time ( 保 留 时 间 )t/min C 14H 12N 4O 2S 301.3/156.1, 301.3/ , C 10H 9 Cl N 4O 2S 285.1/156.1, 285.1/ , C 10H 10N 4O 2S 251.4/156.1, 251.4/ , C 12H 14N 4O 4S 311.4/156.2, 311.4/ , C 11H 11N 3O 2S 250.3/156.2, 250.3/ , C 13H 12N 2O 3S 277.2/156.1, 277.2/ , C 11H 12N 4O 3S 281.3/156.1, 281.3/ , C 11H 12N 4O 2S 265.5/156.3, 265.5/ , C 11H 12N 4O 3S 281.2/108.1, 281.2/ , C 12H 14N 4O 2S 279.4/156.2, 279.4/ , C 10H 11N 3O 3S 254.3/156.2, 254.3/ , C 11H 13N 3O 3S 268.3/156.2, 268.3/ , C 9H 9N 3O 2S /156.1, 256.3/ , C 12H 14N 4O 4S 311.4/156.2, 311.4/ , C 14H 18N 4O /123.2, 291.4/ , C 18H 20N 3O 4F 362.3/318.3,362.3/ , C 16H 18FN 3O /302.3,320.3/ , C 17H 18FN 3O /314.2,332.0/ , C 20H 24FN 3O 6S 358.2/340.3, 358.2/ , C 19H 22FN 3O /245.3, 360.2/ , C 13H 11NO /244.3, 262.3/ , C 18H 34N 2O 6S 407.4/359.6, 407.4/ ,
4 Tylosin ( 泰 乐 菌 素 ) Chloramphenicol ( 氯 霉 素 ) Metronidazole ( 甲 硝 唑 ) Ronidazole ( 洛 硝 哒 唑 ) Dimetridazole ( 地 美 硝 唑 ) C 46H 77NO /407.6, 916.8/ , C 11H 12Cl 2N 2O /152.0, 321.0/ , C 6H 9N 3O /128.1, 172.2/ , C 6H 8N 4O /55.2, 201.2/ , C 5H 7N 3O /96.2, 142.2/ , 结 果 与 讨 论 2.1 色 谱 条 件 的 优 化 由 于 柱 子 的 性 质 流 动 相 中 的 有 机 溶 剂 含 量 离 子 强 度 以 及 ph 值 的 大 小 都 会 对 药 物 残 留 的 离 子 化 强 度 溶 解 性 能 以 及 在 色 谱 柱 上 的 分 离 产 生 影 响 [7] 本 实 验 为 了 保 证 不 同 性 质 的 多 种 药 物 残 留 在 色 谱 柱 上 的 分 离 效 率, 比 较 了 Hypersil Akasil Venusil MP Shim-pack VP Intersil 等 不 同 型 号 的 C 18 和 C 8 色 谱 柱 对 药 物 残 留 的 分 离 效 果, 发 现 Intersil C 8-3 色 谱 柱 对 各 种 药 残 的 分 离 度 高, 灵 敏 度 好, 峰 形 尖 锐, 故 采 用 Intersil C 8-3 色 谱 柱 进 行 分 离 并 通 过 研 究 流 动 相 中 添 加 不 同 浓 度 的 甲 酸 乙 酸 和 挥 发 性 的 盐 类 对 分 离 效 果 和 离 子 化 效 率 的 影 响, 发 现 0.1% 乙 酸 水 溶 液 中 加 入 0.5mmol/L 的 乙 酸 铵 时 色 谱 信 号 最 强, 灵 敏 度 最 高 因 此 本 方 法 以 Intersil C 8-3 色 谱 柱 为 分 离 柱, 以 乙 腈 和 添 加 了 0.5mmol/L 的 乙 酸 铵 的 0.1% 的 乙 酸 水 溶 液 作 为 流 动 相 进 行 梯 度 洗 脱, 发 现 这 27 种 药 物 分 离 良 好, 峰 形 对 称 信 号 强 度 大, 灵 敏 度 高 具 体 色 谱 图 见 图 1 图 1:27 种 标 准 品 的 总 离 子 流 图 Fig 1:Total ion chromatogram of 27 analytical standard 2.2 质 谱 条 件 的 优 化 实 验 首 先 采 用 1mg/L 的 各 种 药 物 残 留 标 准 溶 液 在 电 喷 雾 正 离 子 模 式 下 进 行 母 离 子 全 扫 描, 确 定 准 分 子 离 子 峰 [M+H] +, 调 节 离 子 源 电 压 DP EP 参 数, 再 以 分 子 离 子 峰 作 为 母 离 子, 进 行 子 离 子 扫 描, 调 节 CE 参 数, 使 母 离 子 的 强 度 占 子 离 子 强 度 的 1/ 3~1/ 4 为 最 佳, 从 质 谱 图 中 选 择 2-4 个 信 号 较 强 的 子 离 子 作 为 定 性 离 子, 离 子 丰 度 最 强 的 子 离 子 为 定 量 离 子, 再 进 行 锥 孔 电 压 和 碰 撞 能 量 等 质 谱 参 数 优 化 质 谱 参 数 确 定 后, 取 2µg/kg 的 混 标 溶 液 在 优 化 好 的 液 相 色 谱 条 件 下, 逐 个 进 行 优 化 微 调, 使 各 种 物 质 的 灵 敏 度 峰 形 达 到 最 佳 在 质 谱 条 件 中, 除 氯 霉 素 采 用 [M-H] - 外, 其 余 各 化 合 物 均 选 用 [M+H] + 作 为 母 离 子 2.3 前 处 理 条 件 的 优 化
5 大 多 数 蜂 药 在 中 性 水 溶 液 中 不 溶, 在 酸 碱 溶 液 中 溶 解 度 增 加, 易 溶 于 有 机 溶 剂 的 特 性 为 调 节 ph 环 境 进 行 药 残 的 提 取 提 供 了 理 论 支 持 本 试 验 对 沉 淀 剂 提 取 剂 提 取 ph 值 以 及 脱 脂 剂 进 行 了 优 化 沉 淀 剂 优 化 时 比 较 了 三 氯 乙 酸 高 氯 酸 偏 磷 酸 三 种 蛋 白 质 沉 淀 剂 的 沉 淀 效 果, 发 现 用 偏 磷 酸 作 为 沉 淀 剂 时 提 取 效 果 比 较 理 想, 提 取 的 最 终 样 液 呈 无 色, 样 品 的 净 化 程 度 大 为 改 善 ; 提 取 剂 优 化 时 对 丙 酮 甲 醇 乙 腈 乙 酸 乙 酯 二 氯 甲 烷 或 是 它 们 的 混 合 物 提 取 残 留 效 果 进 行 了 比 较, 结 果 乙 酸 乙 酯 和 乙 腈 的 1:1 混 合 溶 剂 作 为 提 取 剂 提 取 效 果 较 好, 使 27 种 药 物 均 被 有 效 提 取 ; 提 取 ph 优 化 时 发 现 ph 为 6 时, 各 药 物 提 取 效 率 最 好 脱 脂 剂 以 正 己 烷 为 最 好 样 品 前 处 理 条 件 的 优 化 结 果 为 : 调 节 提 取 ph 为 6, 提 取 剂 为 乙 酸 乙 酯 和 乙 腈 的 1:1 混 合 溶 剂, 沉 淀 剂 为 偏 磷 酸 溶 液, 脱 脂 剂 为 正 己 烷 时,27 种 药 物 残 留 提 取 效 率 最 高, 回 收 率 达 到 70.1%-118.9%, 相 对 标 准 偏 差 为 4.3%-14.9%, 药 物 残 留 可 以 在 仪 器 上 产 生 较 大 响 应, 能 达 到 需 要 的 检 测 灵 敏 度 且 该 处 理 方 法 不 增 加 溶 剂 用 量, 不 采 用 固 相 萃 取 小 柱, 净 化 后 的 样 品 无 色 透 明, 在 质 谱 图 上 无 干 扰, 连 续 进 样 70 次, 离 子 源 气 帘 板 仍 保 持 干 净, 大 大 降 低 了 检 测 成 本 2.4 线 性 回 收 率 精 密 度 与 检 出 限 在 最 佳 分 离 条 件 下, 配 制 系 列 浓 度 的 混 合 标 准 溶 液 进 行 测 定, 以 各 化 合 物 峰 面 积 (y) 对 药 物 残 留 含 量 (x,ug/kg) 绘 制 工 作 曲 线, 见 表 3 结 果 表 明, 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 法 同 时 分 析 测 定 氯 霉 素 磺 胺 类 磺 胺 增 效 剂 氟 喹 诺 酮 类 林 可 胺 类 硝 基 咪 唑 类 大 环 内 酯 类 药 物 残 留, 氯 霉 素 在 0.3µg/kg-10µg/kg 范 围, 其 余 26 种 药 物 残 留 在 2µg/kg-100µg/kg 范 围 内 线 性 良 好, 相 关 系 数 在 之 间, 满 足 定 量 分 析 检 测 要 求 在 王 浆 空 白 样 品 中 添 加 3 个 水 平 的 27 种 药 物 残 留 的 混 合 标 准 溶 液, 按 照 1.2 方 法 做 回 收 率 实 验, 每 个 添 加 浓 度 重 复 6 次, 计 算 添 加 回 收 率 及 其 相 对 标 准 偏 差, 结 果 见 表 3 根 据 S/N 3 作 为 检 出 限, 除 氯 霉 素 的 检 出 限 为 0.1µg/kg 外, 其 余 均 达 到 1µg/kg 表 3 27 种 药 物 残 留 的 线 性 范 围 线 性 方 程 及 相 关 系 数 Table 3 Linear ranges,regression equation and related cofficient for 27 medicine residues Compound Linear ranges Regression Related Spiked Recovery RSD ρ/(µg L -1 ) equation coefficient r w/(µg kg -1 ) R/% Sr/% Sulfaquinoxaline y=628x ,20, ,104.5, ,12.7,8.7 Sulfachlorpyridazine y=3060x ,20, ,110.7, ,8.0,9.0 Sulfadiazine y=2880x ,20, ,115.4, ,6.9,10.3 Sulfadoxine y=4820x ,20, ,79.0, ,12.7,14.9 Sulfapyridine y=4590x ,20, ,72.7, ,14.0,12.6 Sulfabenzamine y=2390x ,20, ,77.5, ,6.9,5.9 Sulfamethoxypyridazine y=4890x ,20, ,99.8, ,3.2,13.6 Sulfamerazine y=1960x ,20, ,80.9, ,6.8,10.7 Sulfamonomethoxine y=2830x ,20, ,110.9, ,7.2,12.5 Sulfamethazine y=1730x ,20, ,114.5, ,14.8,12.1 Sulfamethoxazole y=2720x ,20, ,108.2, ,10.5,11.3 Sulfaisoxazole y=2990x ,20, ,79.4, ,13.7,7.3 Sulfathiazole y=1650x ,20, ,112.5, ,6.7,8.3 Sulfadimethoxine y=13600x ,20, ,89.6, ,11.4,10.7 Trimethoprim y=6350x ,20, ,94.3, ,14.0,7.0 Ofloxacin y=4300x ,20, ,79.9, ,13.5,12.0
6 Norfloxacin y=592x ,20, ,110.8, ,12.1,10.3 Ciprofloxacin y=871x ,20, ,89.9, ,12.9,9.3 Danofloxacinmesylate y=539x ,20, ,98.7, ,13.8,12.9 Enrofloxacin y=6980x ,20, ,96.5, ,11.0,13.8 Oxolinic acid y=2480x ,20, ,100.9, ,10.8,10.3 Lincomycin y=1350x ,20, ,89.0, ,7.7 Tylosin y=1090x ,20, ,110.3, ,14.1,8.9 Chloramphenicol y=0.0731x ,1, ,106.3, ,13.9,5.9 Metronidazole y=2710x ,20, ,79.8, ,10.7,8.6 Ronidazole y=4660x ,20, ,116.7, ,6.7,10.5 Dimetridazole y=3550x ,20, ,90.2, ,9.6,9.8 3 结 论 本 文 建 立 了 偏 磷 酸 沉 淀 调 ph 值 为 6 后 用 1:1 混 合 的 乙 酸 乙 酯 和 乙 腈 混 合 溶 剂 提 取 正 己 烷 净 化 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 同 时 测 定 王 浆 中 7 大 类 27 种 药 物 残 留 的 检 测 方 法 12min 内 可 完 成 这 27 种 药 物 残 留 的 快 速 分 离 检 测,27 种 药 物 残 留 在 王 浆 基 质 中 的 回 收 率 为 70.1%-118.9%, 相 对 标 准 偏 差 均 小 于 15% 本 方 法 简 便 快 速 重 复 性 好, 准 确 度 高, 是 王 浆 中 27 种 药 物 残 留 快 速 检 测 的 有 效 方 法 参 考 文 献 [1] 李 位 三, 王 维 明, 王 启 发, 等. 蜂 蜜 中 药 残 的 存 因 及 其 防 止 措 施 [J]. 蜜 蜂 杂 志, 2003, (7): [2] 冯 峰. 严 格 控 制 蜜 蜂 疾 病 及 药 物 残 留, 提 高 蜂 产 品 质 量 [J]. 蜜 蜂 杂 志, 2002, (4): [3] YE Z.Q, WENBERGH S. Trace analysis of trimthoprin and sulfonamide, macrolide, quinolone, and tetracycline antibiotics in chlorinated drinking water using liquid chromatography electrospray tandem mass spectrometry[j]. Anal Chem, 2007, 79: [4] AGUILERA-LUIZ M M, MARTNEZ-VIDAL J L, ROMERO-GONZLEZ R, et al. Multi-residue determination of veterinary drugs in milk by ultra-high pressure liquid chromatography-tandem mass spectrometry[j]. J Chromatogr. A, 2008, 1205: [5] HELLER D N, NOCHETTO C B, RUMMEL N G, et al. Development of multiclass methods for drug residues in eggs: hydrophilic solid-phase extraction cleanup and liquid chromatography/tandem mass spectrometry analysis of tetracycline, fluorquinolone, sulfonamide, and a-lactam residues[j]. J Agric Food Chem, 2006, 54: [6] 王 凤 美, 陈 军 辉, 林 黎 明, 等. UPLC-MS/MS 法 对 动 物 源 性 食 品 中 12 种 大 环 内 酯 类 抗 生 素 残 留 的 测 定 [J]. 分 析 测 试 学 报, 2009, 28(7): [7] 陈 莹, 陈 辉, 林 谷 园, 等. 超 高 效 液 相 色 谱 串 联 质 谱 法 对 鳗 鱼 中 大 环 内 酯 类 喹 诺 酮 类 和 磺 胺 类 兽 药 残 留 量 的 同 时 测 定 [J]. 分 析 测 试 学 报, 2008, 27(5): [8] 刘 艳 琴, 王 浩, 殷 晓 燕, 等. 高 效 液 相 色 谱 - 电 喷 雾 离 子 阱 质 谱 测 定 乳 品 中 氯 霉 素 甲 砜 霉 素 和 氟 甲 砜 霉 素 残 留 的 研 究 [J]. 食 品 科 学 2008, 29(4):
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