生物安全概述

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1 实 验 室 生 物 安 全 基 本 概 念 与 危 险 因 子 复 旦 大 学 BSL-3 实 验 室 叶 荣

2 今 晚 还 要 上 课 呀

3 分 子 病 毒 学 实 验 课 通 知 第 三 节 : 病 毒 核 酸 的 提 取 与 扩 增 调 整 到 10 月 16 日 ( 星 期 六 ) 有 问 题 请 联 系 : hanwendong@fudan.edu.cn

4 生 物 安 全 概 况 传 染 源 新 现 病 原 重 现 病 原 自 然 人 为 生 物 武 器 生 物 恐 怖 人 群 预 防 治 疗 检 疫 隔 离 检 测 研 究 ( 病 原 ) 实 验 室 生 物 安 全 生 物 技 术 动 物 病 原 食 物 危 机 物 种 危 机 植 物 病 原

5 实 验 室 生 物 安 全 的 主 要 内 容 01 生 物 危 险 因 子 种 类 与 分 级 02 生 物 安 全 防 护 原 理 与 分 级 03 实 验 室 生 物 安 全 设 施 04 实 验 室 生 物 安 全 管 理 05 病 原 微 生 物 安 全 操 作 06 样 品 与 菌 种 管 理 与 运 输 1. 卫 生 部 生 物 安 全 培 训 教 材 : 病 原 微 生 物 实 验 室 生 物 安 全 ( 第 二 版,2006) 2. WHO: 实 验 室 生 物 安 全 指 南 ( 第 三 版,2004) 3. 美 国 CDC/NIH: 微 生 物 和 生 物 医 学 实 验 室 生 物 安 全 指 南 ( 第 四 版,1999)

6 内 容 序 言 致 谢 - 第 一 部 分 : 生 物 安 全 指 南 - 第 二 部 分 : 实 验 室 生 物 安 全 保 障 - 第 三 部 分 : 实 验 室 设 备 - 第 四 部 分 : 微 生 物 学 操 作 技 术 规 范 - 第 五 部 分 : 生 物 技 术 介 绍 - 第 六 部 分 : 化 学 品 火 和 电 的 安 全 - 第 七 部 分 : 安 全 组 织 和 培 训 - 第 八 部 分 : 安 全 清 单 - 第 九 部 分 : 参 考 文 献 附 录 和 索 引 CONTENTS Foreword Aknowledgements -Part I- Biosafety Guidelines -Part II- Biosecurity Guidelines -Part III- Laboratory equipment -Part IV- Good microbiological techniques -Part V- Introduction to biotechnology -Part VI- Chemical, fire and electrical safety -Part VII- Safety organization and training -Part VIII- Safety checklist -Part IX- References, annexes and index

7 生 物 安 全 的 不 同 方 面 I- 临 床 实 验 室 的 生 物 安 全 : 临 床 诊 断 实 验 室 解 剖 与 法 医 学 实 验 室 医 院 感 染 II- 生 物 医 学 实 验 室 的 生 物 安 全 : 重 组 DNA 技 术 细 胞 系, 病 毒 载 体 实 验 动 物 与 动 物 实 验 III- 环 境 相 关 的 生 物 安 全 : 植 物 病 害 转 基 因 植 物 生 物 毒 素 与 食 品 安 全 IV- 社 会 相 关 的 生 物 安 全 : 生 物 武 器 生 物 恐 怖

8 本 课 程 的 内 容 日 期 主 题 内 容 1 9 月 7 日 专 题 * 实 验 室 生 物 安 全 的 实 践 探 索 与 未 来 挑 战 2 9 月 14 日 专 题 * 生 物 武 器, 生 物 恐 怖 3 9 月 21 日 生 物 安 全 基 础 基 本 原 理, 生 物 因 子 种 类, 危 害 评 估 4 9 月 28 日 生 物 安 全 政 策 法 规 实 验 室 生 物 安 全 管 理 5 10 月 12 日 生 物 安 全 防 护 -1 设 施 防 护 生 物 安 全 柜 6 10 月 19 日 生 物 安 全 防 护 -2 实 验 室 管 理 菌 毒 种 保 管 运 输 7 10 月 26 日 生 物 安 全 防 护 -3 个 人 防 护 消 毒 与 废 弃 物 处 理 8 11 月 2 日 见 习 ** BSL-3 设 施 生 物 安 全 柜 操 作 9 11 月 9 日 实 习 ** 个 人 防 护 消 毒 与 废 弃 物 处 理 月 16 日 专 题 * 医 院 感 染? 月 23 日 专 题 * 实 验 动 物 安 全 操 作? 月 30 日 考 试 40% 笔 试 +30% 课 外 作 业 考 勤 +30% 见 实 习

9 1. 背 景 : 实 验 室 获 得 性 感 染 2. 实 验 室 生 物 安 全 防 护 原 理 3. 生 物 危 害 因 子 的 种 类 与 评 估

10 实 验 室 安 全 1 导 言 2 应 急 3 实 验 室 设 计 与 装 备 4 实 验 室 操 作 5 非 化 学 实 验 室 6 个 人 防 护 设 备 内 容 : 消 防 安 全 放 射 线 化 学 危 险 品 意 外 伤 害 生 物 安 全

11 高 士 其 原 名 高 仕 錤, 福 州 人, 生 物 学 家, 化 学 家, 著 名 科 普 作 家 1925 年 毕 业 于 清 华 大 学, 1927 年 获 美 国 芝 加 哥 大 学 化 学 学 士 学 位 1930 年 毕 业 于 美 国 芝 加 哥 大 学 医 学 研 究 院 1931 年 回 国 1934 年 开 始 发 表 作 品 1937 年 去 延 安 1952 年 加 入 中 国 作 家 协 会

12 1928 年, 他 在 美 国 芝 加 哥 大 学 医 学 研 究 院 攻 读 博 士 课 程 在 学 科 实 验 中 他 多 次 吞 食 食 物 毒 病 菌 做 自 身 感 染 的 试 验, 老 师 同 学 为 他 的 献 身 精 神 深 感 敬 佩 不 幸 在 一 次 实 验 中, 一 个 装 有 脑 炎 病 毒 的 瓶 子 突 然 破 裂, 病 毒 通 过 左 耳 耳 膜 进 入 小 脑, 破 坏 小 脑 的 中 枢 运 动 神 经, 造 成 终 身 无 法 治 愈 的 残 疾 1934 年 : 第 一 篇 作 品 细 菌 的 衣 食 住 行 1935 年 年 : 我 们 的 抗 敌 英 雄 抗 战 与 防 疫 细 菌 与 人 菌 儿 自 传 1941 年 : 微 生 物 大 观 细 菌 学 发 展 史 1949 年 以 后 : 揭 穿 小 人 国 的 秘 密 生 命 的 起 源 和 传 染 病 作 斗 争 等 18 本

13 Barry J. Marshall & J. Robin Warren The Nobel Prize in Physiology or Medicine 2005 "for their discovery of the bacterium Helicobacter pylori and its role in gastritis and peptic ulcer disease"

14 实 验 室 获 得 性 感 染

15 实 验 室 生 物 安 全 概 念 的 建 立 Pike 1979: the knowledge, the techniques, and the equipment to most laboratory infection are available 实 验 室 感 染 的 防 护 概 念 与 方 法 CDC Office of Biosafety 1974: Classification of Etiologic Agents on the Basic of Hazard CDC: Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (93-3;99-4;07-5) 四 级 分 类 法 : 病 原, 生 物 安 全 水 平, 动 物 生 物 安 全 水 平 J.Y. Richmond & R.W. McKinney

16 其 它 实 验 室 生 物 安 全 问 题 NCI, Laboratory Safety Monograph: A Supplement to the NIH Guidelines for Recombinant DNA Research. NIH Guidelines for Research Involving Recombinant DNA Molecules. 重 组 DNA 技 术 的 生 物 安 全 性 问 题 CDC Universal Precautions for Prevention of Transmission of HIV,Hepatitis B Virus and Other Bloodborne Pathogens in Healthcare Settings. U.S. Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration Occupational Exposure to Bloodborne Pathogens 艾 滋 病 与 血 液 传 播 疾 病 U.S. Congress, Medical Waste Tracking Act of 医 学 废 物 处 理

17 生 物 因 子 危 险 分 级 ( CDC/NIH 1999) 危 险 1 级 : 被 充 分 认 识 的 生 物 危 害 因 子, 始 终 被 认 为 不 可 导 致 健 康 成 年 人 群 疾 病 ; 对 实 验 室 工 作 人 员 和 环 境 只 有 最 小 的 潜 在 危 害 危 险 2 级 : 对 实 验 室 工 作 人 员 和 环 境 有 中 等 潜 在 危 害 的 生 物 危 害 因 子 危 险 3 级 : 通 过 吸 入 途 径 ( 用 于 临 床, 诊 断, 教 学, 科 研 或 生 产 实 验 室 ) 接 触 可 能 导 致 严 重 或 潜 在 致 死 性 疾 病 的 本 土 或 外 来 生 物 危 害 因 子 危 险 4 级 : 通 过 悬 浮 微 粒 传 播 的 实 验 室 感 染 和 危 害 生 命 的 疾 病, 从 而 形 成 高 度 个 体 风 险 的 外 来 生 物 危 害 因 子

18 我 国 生 物 安 全 现 状

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20 1. 背 景 : 实 验 室 获 得 性 感 染 2. 实 验 室 生 物 安 全 防 护 原 理 3. 生 物 危 害 因 子 的 种 类 与 评 估

21 生 物 安 全 水 平 分 级 (IV 类 ) (III 类 ) (II 类 ) (I 类 )

22 实 验 室 生 物 安 全 程 序 the knowledge, the techniques, and the equipment to most laboratory infection are available 微 生 物 及 实 验 内 容 危 险 评 估 生 物 安 全 防 护 水 平 实 验 室 生 物 安 全 设 施 个 人 防 护 装 备 生 物 安 全 操 作 技 术

23 生 物 安 全 实 验 室

24 实 验 室 生 物 安 全 的 实 现 the knowledge, the techniques, and the equipment to most laboratory infection are available I. 生 物 安 全 的 硬 件 方 面 : 基 本 防 护 : 个 人 防 护 装 备 基 本 防 护 : 生 物 安 全 柜 高 级 防 护 : 负 压 设 施 HEPA Filter II. 生 物 安 全 的 软 件 方 面 : 实 验 室 管 理 与 人 员 培 训 生 物 样 品 运 送 与 保 藏 消 毒 与 灭 菌 与 废 弃 物 仪 器 设 备 的 使 用 防 止 气 溶 胶 操 作 技 术 动 物 实 验 管 理 与 操 作 技 术 紧 急 事 故 处 理 程 序

25 生 物 安 全 防 护 原 理 次 级 防 护 初 级 防 护 废 物 处 理 HEPA I. 人 病 原, 环 境 三 者 关 系 个 人 防 护 : 保 护 人 生 物 安 全 柜 : 保 护 病 原 设 施 : 保 护 环 境 II. 设 施 系 统 的 有 效 性 基 本 设 计 : 根 据 需 要 设 施 维 护 : 定 期 与 不 定 期 设 施 的 正 确 使 用 III. 实 验 室 的 管 理 标 准 化 操 作 : 意 外 事 故 的 防 止 与 处 置 人 员 培 训

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27 1. 背 景 : 实 验 室 获 得 性 感 染 2. 实 验 室 生 物 安 全 防 护 原 理 3. 生 物 危 害 因 子 的 种 类 与 评 估

28 朊 病 毒 感 染 : 感 染 性 疾 病 与 传 染 病 病 毒 感 染 : 病 毒 性 肝 炎 病 毒 感 染 性 腹 泻 脊 髓 灰 质 炎 流 行 性 感 冒 禽 流 感 麻 疹 / 风 疹 水 痘 和 带 状 疱 疹 流 行 性 腮 腺 炎 肾 综 合 症 出 血 热 流 行 性 乙 型 脑 炎 登 革 热 传 染 性 单 核 细 胞 增 多 症 狂 犬 病 艾 滋 病 传 染 性 非 典 型 肺 炎 细 菌 性 感 染 : 伤 寒 和 副 伤 寒 细 菌 性 食 物 中 毒 细 菌 性 腹 泻 霍 乱 弯 曲 菌 病 细 菌 性 痢 疾 布 氏 菌 病 鼠 疫 炭 疽 白 喉 百 日 咳 猩 红 热 流 行 性 脑 脊 髓 膜 炎 结 核 病 败 血 症 感 染 性 休 克 真 菌 感 染 : 隐 球 菌 病 念 珠 菌 病 曲 霉 病 螺 旋 体 感 染 : 钩 端 螺 旋 体 病 回 归 热 莱 姆 病 原 虫 感 染 : 阿 米 巴 病 疟 疾 黑 热 病 弓 形 虫 病 隐 孢 子 虫 病 蠕 虫 感 染 : 日 本 血 吸 虫 病 并 殖 吸 虫 病 华 支 睾 吸 虫 病 姜 片 虫 病 丝 虫 病 钩 虫 病 蛔 虫 病 娆 虫 病 旋 毛 虫 病 肠 绦 虫 病 囊 尾 蚴 病 棘 球 蚴 病 蠕 虫 蚴 移 行 病 传 染 病 学 杨 绍 基 主 编 ( 8/7 年 制 教 材, 人 民 卫 生 出 版 社,2005 )

29 甲 类 传 染 病 : 鼠 疫 霍 乱 我 国 法 定 传 染 病 乙 类 传 染 病 : 传 染 性 非 典 型 肺 炎 艾 滋 病 病 毒 性 肝 炎 脊 髓 灰 质 炎 人 感 染 高 致 病 性 禽 流 感 麻 疹 流 行 性 出 血 热 狂 犬 病 流 行 性 乙 型 脑 炎 登 革 热 炭 疽 细 菌 性 和 阿 米 巴 性 痢 疾 肺 结 核 伤 寒 和 副 伤 寒 流 行 性 脑 脊 髓 膜 炎 百 日 咳 白 喉 新 生 儿 破 伤 风 猩 红 热 布 鲁 氏 菌 病 淋 病 梅 毒 钩 端 螺 旋 体 病 血 吸 虫 病 疟 疾 丙 类 传 染 病 : 流 行 性 感 冒 流 行 性 腮 腺 炎 风 疹 急 性 出 血 性 结 膜 炎 麻 风 病 流 行 性 和 地 方 性 斑 疹 伤 寒 黑 热 病 包 虫 病 丝 虫 病 感 染 性 腹 泻 中 华 人 民 共 和 国 传 染 病 防 治 法 第 三 条 (2004 年 12 月 1 日 起 施 行 )

30 2005 年 甲 乙 类 法 定 报 告 传 染 病 发 病 死 亡 病 死 疾 病 名 称 发 病 率 (1/10 万 ) 疾 病 名 称 死 亡 率 (1/10 万 ) 疾 病 名 称 病 死 率 (%) 1 肺 结 核 肺 结 核 0.26 狂 犬 病 病 毒 性 肝 炎 狂 犬 病 0.19 人 禽 流 感 细 菌 性 和 阿 米 巴 性 痢 疾 艾 滋 病 0.10 鼠 疫 淋 病 病 毒 性 肝 炎 0.09 艾 滋 病 梅 毒 9.67 新 生 儿 破 伤 风 0.02 新 生 儿 破 伤 风 麻 疹 9.42 流 行 性 出 血 热 0.02 流 行 性 脑 脊 髓 膜 炎 疟 疾 3.03 流 行 性 乙 型 脑 炎 0.02 流 行 性 乙 型 脑 炎 伤 寒 和 副 伤 寒 2.65 流 行 性 脑 脊 髓 膜 炎 0.02 钩 端 螺 旋 体 病 猩 红 热 1.92 细 菌 性 和 阿 米 巴 性 痢 疾 0.01 登 革 热 流 行 性 出 血 热 1.60 梅 毒 0.01 炭 疽 2.26

31 危 险 评 估 原 理 I 病 原 特 性 : 1. 致 病 性 2. 感 染 剂 量 3. 感 染 途 径 4. 来 源 与 宿 主 范 围 5. 稳 定 性 II 感 染 的 后 果 : 1. 动 物 实 验 报 告 2. 临 床 感 染 报 告 3. 预 防 与 治 疗 措 施 III 实 验 带 来 的 变 化 : 1. 实 验 浓 度 与 剂 量 2. 气 溶 胶 化 的 强 度 3. 实 验 导 致 的 新 的 感 染 途 径 4. DNA 技 术 的 使 用

32 生 物 因 子 危 险 分 级 ( WHO 1993) 危 险 1 级 ( 无 或 低 个 体 及 群 体 风 险 ): 不 太 可 能 致 人 或 者 致 动 物 疾 病 的 微 生 物 危 险 2 级 ( 中 等 个 体 风 险, 低 群 体 风 险 ): 可 以 致 人 或 动 物 疾 病, 但 对 实 验 室 工 作 人 员, 群 体, 家 畜 或 环 境 不 太 可 能 构 成 严 重 危 害 的 病 原 体 实 验 室 接 触 可 能 会 导 致 严 重 感 染, 但 是 有 效 治 疗 及 预 防 措 施 是 可 行 的, 而 且 这 种 感 染 的 传 播 是 有 限 的 危 险 3 级 ( 高 个 体 风 险, 低 群 体 风 险 ): 通 常 可 以 致 人 或 动 物 严 重 疾 病 但 一 般 不 会 从 一 个 感 染 个 体 传 播 到 另 一 个 体 的 病 原 体 有 效 治 疗 及 预 防 措 施 是 可 行 的 危 险 4 级 ( 高 个 体 风 险, 高 群 体 风 险 ): 通 常 可 以 致 人 或 动 物 严 重 疾 病 而 且 容 易 从 一 个 个 体 直 接 或 间 接 地 传 播 至 另 一 个 体 的 病 原 体 有 效 治 疗 及 预 防 措 施 常 常 不 可 行

33 生 物 因 子 危 险 分 级 ( 澳 大 利 亚 / 新 西 兰 标 准 AS/NZS :1995 ) 危 险 1 级 ( 低 个 体 及 低 群 体 风 险 ): 不 太 可 能 致 人, 植 物, 或 者 致 动 物 疾 病 的 微 生 物 危 险 2 级 ( 中 等 个 体 风 险, 有 限 群 体 风 险 ): 可 以 致 人, 植 物, 或 动 物 疾 病, 但 对 实 验 室 工 作 人 员, 群 体, 家 畜 或 环 境 不 太 可 能 构 成 危 害 的 微 生 物 实 验 室 接 触 可 能 会 导 致 感 染, 但 是 有 效 治 疗 及 预 防 措 施 是 可 行 的, 而 且 这 种 感 染 的 传 播 是 有 限 的 危 险 3 级 ( 高 个 体 风 险, 有 限 群 体 风 险 ): 通 常 可 以 致 人 或 动 物 严 重 疾 病, 而 且 对 实 验 室 工 作 人 员 意 味 着 严 重 危 害 的 微 生 物 如 果 在 人 群 播 散 开 来 这 将 是 一 个 极 大 危 险, 通 常 有 有 效 治 疗 及 预 防 措 施 危 险 4 级 ( 高 个 体 风 险, 高 群 体 风 险 ): 通 常 可 以 致 危 害 人 或 动 物 生 命 的 疾 病, 对 实 验 室 工 作 人 员 意 味 着 严 重 危 害, 而 且 容 易 从 一 个 个 体 直 接 或 间 接 地 传 播 至 另 一 个 体 的 病 原 体 有 效 治 疗 及 预 防 措 施 常 常 不 可 行

34 生 物 因 子 危 险 分 级 ( 病 原 微 生 物 实 验 室 生 物 安 全 管 理 条 例 2004) 第 四 类 病 原 微 生 物 : 通 常 情 况 下 不 会 引 起 人 或 者 动 物 疾 病 的 微 生 物 第 三 类 病 原 微 生 物 : 能 够 引 起 人 或 者 动 物 疾 病, 但 一 般 情 况 下 对 人 动 物 或 环 境 不 太 可 能 构 成 严 重 危 害, 传 播 风 险 有 限, 实 验 室 感 染 后 很 少 引 起 严 重 疾 病, 并 且 具 备 有 效 治 疗 及 预 防 措 施 的 微 生 物 第 二 类 病 原 微 生 物 : 能 够 引 起 人 或 动 物 严 重 疾 病, 比 较 容 易 直 接 或 间 接 在 人 与 人, 动 物 与 人, 动 物 与 动 物 间 传 播 的 微 生 物 第 一 类 病 原 微 生 物 : 能 够 引 起 人 或 动 物 非 常 严 重 疾 病, 以 及 我 国 尚 未 发 现 或 已 经 宣 布 消 灭 的 微 生 物

35 动 物 病 原 微 生 物 分 类 名 录 ( 二 五 年 五 月 二 十 四 日 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部 制 定 ) I 类 10 种 ;II 类 8 种 ;III 类 85 种 其 中 共 患 18 种 ; 牛 7 种 ; 羊 3 种 ; 猪 12 种 ; 马 8 种 ; 禽 17 种 ; 兔 4 种 ; 水 生 动 物 22 种 ; 蜜 蜂 6 种 ; 其 它 动 物 8 种

36 人 间 传 染 的 病 原 微 生 物 名 录 ( 二 六 年 一 月 十 一 日 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部 制 定 ) 病 毒 160 种 I 级 29 种, II 级 51 种, III 级 74 种, IV 级 6 种 朊 病 毒 6 种 : II 级 5 种, III 级 1 种 细 菌 及 其 它 病 原 155 种 II 级 10 种, III 级 145 种 真 菌 59 种 II 级 4 种, III 级 55 种

37 1 规 定 病 原 微 生 物 防 护 级 别

38 高 致 病 性 微 生 物 : 一 类 病 毒 病 原 (29 种 ) 沙 粒 病 毒 科 黄 病 毒 科 痘 病 毒 科 披 膜 病 毒 科 丝 状 病 毒 科 副 粘 病 毒 科 疱 疹 病 毒 科 布 尼 亚 病 毒 科 1 Flexal virus Flexal 病 毒 2 Guanarito virus 瓜 纳 瑞 托 病 毒 3Hanzalova virus Hanzalova 病 毒 4 Junin virus 鸠 宁 病 毒 5 Lassa fever virus 拉 沙 热 病 毒 6 Machupo virus 马 秋 波 病 毒 7 Tacaribe virus Tacaribe 病 毒 8 Mopeia virus Mopeia 病 毒 ( 和 其 他 Tacaribe 病 毒 ) 9 Sabia virus Sabia 病 毒 1 Hypr virus Hypr 病 毒 2 Kumlinge virus Kumlinge 病 毒 3 Kyasanur Forest disease virus 卡 萨 诺 尔 森 林 病 病 毒 4 Louping ill virus 跳 跃 病 病 毒 5 Omsk hemorrhagic fever virus 鄂 木 斯 克 出 血 热 病 毒 6 St.Louis Encephalitis virus 圣 路 易 斯 脑 炎 病 毒 7 Yellow fever virus 黄 热 病 毒 8 Tick-borne encephalitis virus 蜱 传 脑 炎 病 毒 1 Alastrim virus 类 天 花 病 毒 2 Monkeypox virus 猴 痘 病 毒 3 Variola virus 天 花 病 毒 1 Eastern equine encephalitis virus 东 方 马 脑 炎 病 毒 2 Venezuelan equine encephalitis virus 委 内 瑞 拉 马 脑 炎 病 毒 3 Western equine encephalomyelitis virus 西 方 马 脑 炎 病 毒 1 Ebola virus 埃 博 拉 病 毒 2 Marburg virus 马 尔 堡 病 毒 1 Nipah virus 尼 巴 病 毒 2 Hendra virus 亨 德 拉 病 毒 1 Herpesvirus Simiae 猿 疱 疹 病 毒 1 Crimean- Congohemorrha gic fever virus (Xinjiang Hemorrhagic fever virus) 克 里 米 亚 - 刚 果 出 血 热 病 毒 ( 新 疆 出 血 热 病 毒 )

39 高 致 病 性 微 生 物 : 二 类 病 毒 病 原 (51 种 ) 病 毒 (51 种 ) 30 Bunyamwera virus 布 尼 亚 维 拉 病 毒 31 California encephalitis virus 加 利 福 利 亚 脑 炎 病 毒 32 Chikungunya virus 基 孔 肯 尼 雅 病 毒 33 Dhori virus 多 里 病 毒 34 Everglades virus Everglades 病 毒 35 Foot-and-mouth disease virus 口 蹄 疫 病 毒 36 Garba virus Garba 病 毒 37 Germiston virus Germiston 病 毒 38 Getah virus Getah 病 毒 39 Gordil virus Gordil 病 毒 40 Hantaviruses,other 其 它 汉 坦 病 毒 41 Hantaviruses 汉 坦 病 毒 ( 肺 出 血 热 ) 42 Hantaviruses 汉 坦 病 毒 ( 肾 出 血 热 ) 43 Herpesvirus saimiri 松 鼠 猴 疱 疹 病 毒 44 High pathogenic avian influenza virus 高 致 病 性 禽 流 感 病 毒 45 HIV typy1 and 2 virus 艾 滋 病 毒 (I 型 和 II 型 ) 46 Inhangapi virus Inhangapi 病 毒 47 Inini virus Inini 病 毒 48 Issyk-Kul virus Issyk-Kul 病 毒 49 Itaituba virus Itaituba 病 毒 50 Japanese encephalitis virus 乙 型 脑 炎 病 毒 51 Khasan virus Khasan 病 毒 52 Kyzylagach virus Kyz 病 毒 53 Lymphocytic choriomeningitis (neurotropic) virus 淋 巴 细 胞 性 脉 络 丛 脑 膜 炎 ( 嗜 神 经 性 的 ) 病 毒 54 Mayaro virus Mayaro 病 毒 55 Middelburg virus 米 德 尔 堡 病 毒 56 Milker s nodule virus 挤 奶 工 结 节 病 毒 57 Mucambo virus Murcambo 病 毒 58 Murray valleyencephalitis virus (Australia encephalitis virus) 墨 累 谷 脑 炎 病 毒 ( 澳 大 利 亚 脑 炎 病 毒 ) 59 Nairobi sheep disease virus 内 罗 毕 绵 羊 病 病 毒 60 Ndumu virus 恩 杜 姆 病 毒 61 Negishi virus Negishi 病 毒 62 Newcastle disease virus 新 城 疫 病 毒 63 Orf virus 口 疮 病 毒 64 Oropouche virus Oropouche 病 毒 65 orthopoxviruse 其 他 正 痘 病 毒 属 病 毒 66 Paramushir viru Paramushir 病 毒 67 Poliovirus 脊 髓 灰 质 炎 病 毒 68 Powassan virus Powassan 病 毒 69 Rabbitpox virus (vaccinia variant) 兔 痘 病 毒 ( 痘 苗 病 毒 变 种 ) 70 Rabies virus (street virus) 狂 犬 病 毒 ( 街 毒 ) 71 Razdan virus Razdan 病 毒 72 Rift valley fever virus 立 夫 特 谷 热 病 毒 73 Rochambeau virus Rochambeau 病 毒 74 Rocio virus 罗 西 奥 病 毒 75 Sagiyama virus Sagiyama 病 毒 76 SARS- associated coronavirus SARS 冠 状 病 毒 77 Sepik virus 塞 皮 克 病 毒 78 Simian immunodeficiency virus 猴 免 疫 缺 陷 病 毒 (SIV) 79 Tamdy virus Tamdy 病 毒 80 West Nile virus 西 尼 罗 病 毒

40 高 致 病 性 微 生 物 : 二 类 细 菌 与 其 它 病 原 细 菌 及 其 他 微 生 物 (10 种 ) 1. Bacillus anthracis 炭 疽 芽 孢 杆 菌 2. Brucella spp 布 鲁 氏 菌 属 3. Burkholderia mallei 鼻 疽 伯 克 菌 4. Coxiella burnetii 伯 氏 考 克 斯 体 5. Francisella tularensis 土 拉 热 弗 朗 西 丝 菌 6. Mycobacterium bovis 牛 型 分 枝 杆 菌 7. Mycobacterium tuberculosis 结 核 分 枝 杆 菌 8. Rickettsia spp 立 克 次 体 属 9. Vibrio cholerae 霍 乱 弧 菌 10. Yersinia pestis 鼠 疫 耶 尔 森 菌 真 菌 (4 种 ) 朊 病 毒 (4 种 ) 1 Coccidioides mmitis 粗 球 孢 子 菌 2 Histoplasm farcinimosum 马 皮 疽 组 织 胞 浆 菌 3 Histoplasma capsulatum 荚 膜 组 织 胞 浆 菌 4 Paracoccidioides brasiliensis 巴 西 副 球 孢 子 菌 1 Bovine spongiform Encephalopathy (BSE) 疯 牛 病 2 Kuru disease Kuru 病 3 New variance Creutzfeldt-Jacob disease (nvcjd) 变 异 型 克 - 雅 氏 病 4 Creutzfeldt-Jacob disease (CJD) 人 克 - 雅 氏 病 5 Scrapie 搔 痒 病 因 子 6 Gerstmann-Straussler -Scheinker syndrome (GSS) 吉 斯 特 曼 - 斯 召 斯 列 综 合 征

41 2 规 定 实 验 活 动 a. 病 毒 培 养 : 指 病 毒 的 分 离 培 养 滴 定 中 和 试 验 活 病 毒 及 其 蛋 白 纯 化 病 毒 冻 干 以 及 产 生 活 病 毒 的 重 组 试 验 等 操 作 利 用 活 病 毒 或 其 感 染 细 胞 ( 或 细 胞 提 取 物 ), 不 经 灭 活 进 行 的 生 化 分 析 血 清 学 检 测 免 疫 学 检 测 等 操 作 视 同 病 毒 培 养 使 用 病 毒 培 养 物 提 取 核 酸, 裂 解 剂 或 灭 活 剂 的 加 入 必 须 在 与 病 毒 培 养 等 同 级 别 的 实 验 室 和 防 护 条 件 下 进 行, 裂 解 剂 或 灭 活 剂 加 入 后 可 比 照 未 经 培 养 的 感 染 性 材 料 的 防 护 等 级 进 行 操 作 b. 动 物 感 染 实 验 : 指 以 活 病 毒 感 染 动 物 的 实 验 c. 未 经 培 养 的 感 染 性 材 料 的 操 作 : 指 未 经 培 养 的 感 染 性 材 料 在 采 用 可 靠 的 方 法 灭 活 前 进 行 的 病 毒 抗 原 检 测 血 清 学 检 测 核 酸 检 测 生 化 分 析 等 操 作 未 经 可 靠 灭 活 或 固 定 的 人 和 动 物 组 织 标 本 因 含 病 毒 量 较 高, 其 操 作 的 防 护 级 别 应 比 照 病 毒 培 养 d. 灭 活 材 料 的 操 作 : 指 感 染 性 材 料 或 活 病 毒 在 采 用 可 靠 的 方 法 灭 活 后 进 行 的 病 毒 抗 原 检 测 血 清 学 检 测 核 酸 检 测 生 化 分 析 分 子 生 物 学 实 验 等 不 含 致 病 性 活 病 毒 的 操 作 e. 无 感 染 性 材 料 的 操 作 : 指 针 对 确 认 无 感 染 性 的 材 料 的 各 种 操 作, 包 括 但 不 限 于 无 感 染 性 的 病 毒 DNA 或 cdna 操 作

42 III 实 验 带 来 的 变 化 : 1. 实 验 浓 度 与 剂 量 2. 气 溶 胶 化 的 强 度 3. 实 验 导 致 的 新 的 感 染 途 径 4. DNA 技 术 的 使 用 实 验 活 动 所 需 生 物 安 全 实 验 室 级 别 病 毒 培 养 动 物 感 染 实 验 未 经 培 养 的 感 染 材 料 的 操 作 灭 活 材 料 的 操 作 无 感 染 性 材 料 的 操 作

43 3 规 定 使 用 病 毒 重 组 体 在 卫 生 部 发 布 有 关 的 管 理 规 定 之 前, 对 于 人 类 病 毒 的 重 组 体 ( 包 括 对 病 毒 的 基 因 缺 失 插 入 突 变 等 修 饰 以 及 将 病 毒 作 为 外 源 基 因 的 表 达 载 体 ) 暂 时 遵 循 以 下 原 则 : (1) 严 禁 两 个 不 同 病 原 体 之 间 进 行 完 整 基 因 组 的 重 组 ; (2) 对 于 对 人 类 致 病 的 病 毒, 如 存 在 疫 苗 株, 只 允 许 用 疫 苗 株 为 外 源 基 因 表 达 载 体, 如 脊 髓 灰 质 炎 病 毒 麻 疹 病 毒 乙 型 脑 炎 病 毒 等 ; (3) 对 于 一 般 情 况 下 即 具 有 复 制 能 力 的 重 组 活 病 毒 ( 复 制 型 重 组 病 毒 ), 其 操 作 时 的 防 护 条 件 应 不 低 于 其 母 本 病 毒 ; 对 于 条 件 复 制 型 或 复 制 缺 陷 型 病 毒 可 降 低 防 护 条 件, 但 不 得 低 于 BSL-2 的 防 护 条 件, 例 如 来 源 于 HIV 的 慢 病 毒 载 体, 为 双 基 因 缺 失 载 体, 可 在 BSL-2 实 验 室 操 作 ; (4) 对 于 病 毒 作 为 表 达 载 体, 其 防 护 水 平 总 体 上 应 根 据 其 母 本 病 毒 的 危 害 等 级 及 防 护 要 求 进 行 操 作, 但 是 将 高 致 病 性 病 毒 的 基 因 重 组 入 具 有 复 制 能 力 的 同 科 低 致 病 性 病 毒 载 体 时, 原 则 上 应 根 据 高 致 病 性 病 原 体 的 危 害 等 级 和 防 护 条 件 进 行 操 作, 在 证 明 重 组 体 无 危 害 后, 可 视 情 降 低 防 护 等 级 ; (5) 对 于 复 制 型 重 组 病 毒 的 制 作 事 先 要 进 行 危 险 性 评 估, 并 得 到 所 在 单 位 生 物 安 全 委 员 会 的 批 准 对 于 高 致 病 性 病 原 体 重 组 体 或 有 可 能 制 造 出 高 致 病 性 病 原 体 的 操 作 应 经 国 家 病 原 微 生 物 实 验 室 生 物 安 全 专 家 委 员 会 论 证

44 无 致 病 性 病 毒 (6 种 ) 疱 疹 病 毒 科 Guinea pig herpes virus 豚 鼠 疱 疹 病 毒 Herpesvirus saimiri, Genus Rhadinovirus 松 鼠 猴 疱 疹 病 毒, 猴 病 毒 属 逆 转 录 病 毒 科 Hamster leukemia virus 金 黄 地 鼠 白 血 病 病 毒 - Mouse leukemia virus 小 鼠 白 血 病 病 毒 Mouse mammary tumor virus 小 鼠 乳 腺 瘤 病 毒 Rat leukemia virus 大 鼠 白 血 病 病 毒

45 思 考 题 实 验 室 生 物 安 全 的 基 本 原 理 是 什 么? 如 何 对 新 现 病 原 进 行 危 害 评 估 分 级? 意 义 何 在?

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