1 ChinJEvidBasedPediatr June014,Vol9,No3 Withinhto1hafterHIinsult,ΔΨmofHIBDgrouprecoveredtosomeextent,butΔΨmofHIBD+HBOgrouprecoveredto almostnormallev

Size: px

Start display at page:

Download "1 ChinJEvidBasedPediatr June014,Vol9,No3 Withinhto1hafterHIinsult,ΔΨmofHIBDgrouprecoveredtosomeextent,butΔΨmofHIBD+HBOgrouprecoveredto almostnormallev"

穰电火杭
5 years ago
Views:

中国循证儿科杂志 014 年 6 月第 9 卷第 3 期 11 论著 DOI:10.3969/j.isn.1673 5501.014.03.

1 中国循证儿科杂志 014 年 6 月第 9 卷第 3 期 11 论著 DOI: /j.isn 高压氧对缺氧缺血 1 周内新生大鼠脑皮质细胞线粒体膜电势的影响 1 张小春黑明燕罗娅丽李媛媛戴津津摘要目的研究高压氧 (HBO) 对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)1 周内脑皮质细胞线粒体功能的影响, 探讨 HBO 对 HIBD 可能的保护作用及其机制方法新生 SD 大鼠 360 只分为正常对照组 HIBD 组和 HIBD+HBO 组, 每组 10 只 HIBD 组和 HIBD+HBO 组结扎左侧颈总动脉后暴露于 8% O +9% N 低氧环境中 h 制备 HIBD 模型 HIBD+ HBO 组在缺氧缺血后立即予 HBO 干预 ( 压力为 ATA, 每次持续 60min, 每日 1 次, 连续 7d),HIBD 组不予 HBO 干预, 正常对照组不予结扎左侧颈总动脉和 HBO 干预以 HIBD 模型建立后设为缺氧缺血后 0h 时点,3 组于 0h h 4h 6h 1h 1d d 3d 4d 5d 6d 和 7d 时点断头处死 ( 各组各时点 n=10), 取损伤侧脑皮质制备单细胞悬液, 予细胞线粒体膜电势 (ΔΨm) 标记物罗丹明 13(Rho13) 孵育, 用流式细胞仪检测 Rho13 的平均荧光强度 (MFL), 并以该 MFL 值作为 ΔΨm 值结果 1 正常对照组脑皮质细胞 ΔΨm 值为 (4.66±0.80)MFL,HIBD 组各时点脑皮质细胞 ΔΨm 值均低于正常对照组相应时点, 且最低为 0h 时点 [(.85±0.56)MFL], 各时点差异均有统计学意义 (P<0.05);HIBD 组及 HIBD+ HBO 组脑皮质细胞 ΔΨm 均呈现降低恢复再降低的变化规律, 两组 ΔΨm 初次降低时间均为缺氧缺血后 0h 时点, 初次恢复时间均为缺氧缺血后 ~1h, 再次降低的时间均为缺氧缺血后 1~4d,HIBD+HBO 组 ΔΨm 的再次降低程度更明显且最低为缺氧缺血后 3d 时点 [(.6±1.03)MFL];3HIBD 组脑皮质细胞 ΔΨm 在再次降低后未再回复, 而 HIBD+HBO 组 ΔΨm 在再次降低后, 于缺氧缺血后 5d 时点后开始恢复,6 和 7d 时点 ΔΨm 值逐渐趋近但低于正常对照组水平, 差异无统计学意义 (P<0.05) 结论 HBO 在 HIBD 后 0h 至 3d 内不能改善缺氧缺血损伤侧脑皮质细胞的线粒体功能,HIBO 后过早开始 HBO 治疗可能导致受损脑皮质细胞的进一步损伤, 但 HBO 可能在 HIBD 后 5~7d 内可通过改善脑皮质线粒体功能促进 HIBD 受损细胞功能恢复关键词高压氧 ; 缺氧缺血 ; 一周内 ; 脑 ; 线粒体功能 ; 新生大鼠 Efectofhyperbaricoxygenationonmitochondrialmembranepotentialofcortexneuronalcels ofneonatalratsinthefirstweekafterhypoxicischemicbraindamage ZHANGXiao chun 1,HEIMing yan,luoya li,liyuan yuan,daijin jin (1DepartmentofPediatrics,CentralHospitalof Loudi,Loudi417000,China;DepartmentofPediatrics,TheThirdXiangyaHospitalofCentralSouthUniversity,Changsha ,China) CorespondingAuthor:HEIMing yan,e mail:heiming_yan@aliyun.com AbstractObjectiveTheinitialinsultofhypoxic ischemic(hi)braindamage(hibd)isthedeprivationofoxygen(o ) tothebraincels,folowedbyacascadeofbrainceldamageincludingmitochondrialdysfunction.theoreticaly,hyperbaric oxygenation(hbo)couldafecttherecoveryofmitochondrialfunctioninhibdbygreatlyincreasingtheo deliverydifusion gradient.theobjectiveofthisstudywastoprovethehypothesisthathbomayreducehi inducedbraininjuryviaafectingbrain celmitochondrialfunction,andtounderstandthechangingpaternsofmitochondrialfunctionfolowinghbotreatmentinthefirst weekafterhi.methodsinthepresentstudy,hibdratmodelandflowcytometerwereusedtoexplorethechangeofδψm,the indicatorofmitochondrialfunctionofcortexneuronalcelsofneonatalratsafterhibd.neonatalspraguedawley(sd)ratpups wererandomlydividedintonormalcontrol,hibd,andhibd+hbogroups.theendofhiwasconsideredtobe0htimepoint. TheHBOtreatmentwasgivenat0htimepoint,andthenonceadayforconsecutive7days(in4hintervals).Animalswere euthanizedat0,,4,6,1htimepoints(inordertostudytheδψmchangesattheveryearlystageafterasingledoseofhbo treatment),andat,3,4,5,6,and7dtimepoints(inordertostudytheδψm changesafteraseriesofhbotreatment). ResultsThechangeofΔΨmoftheipsilateralcortexinbothHIBDandHIBD+HBOgroupsshowedfluctuatingchangepatern. 基金项目湖南省自然科学基金课题 :11J6067 作者单位 1 湖南省娄底市中心医院儿科娄底,417000; 中南大学湘雅三医院儿科长沙, 通讯作者黑明燕,E mail:heiming_yan@aliyun.com

2 1 ChinJEvidBasedPediatr June014,Vol9,No3 Withinhto1hafterHIinsult,ΔΨmofHIBDgrouprecoveredtosomeextent,butΔΨmofHIBD+HBOgrouprecoveredto almostnormallevel.asecondarydropofδψm wasobservedinbothgroupsat1-4dafterhiinsult.thesecondarydropof HIBD+HBOgroupwasmoreseverethanthatofHIBDgroup.TherewasasecondaryrecoveryofΔΨmobservedinHIBD+HBO groupin5-7dafterhiinsult,butnotinhibdgroup.theδψmofhibd+hbogrouprecoveredagaintoalmostnormallevelat 6dtimepoint.TheΔΨmofHIBDgroupin-7dafterHIstayedatlowlevel,showingslowlydecreasingtendency.Conclusion HBOintheearlystageafterHImightnotbeagoodtherapytoimprovethemitochondrialfunctioninthecerebralcortex.The secondaryrecoveryobservedinhibd +HBO groupindicatedthathbo treatmentmayprotecthi inducedbraindamageby improvingneuralcelmitochondrialfunctioninthecerebralcortexduringsub acutestageafterhi. Keywords Hyperbaricoxygenation; Hypoxic ischemic; Thefirstweek; Brain; Mitochondrialfunction; Neonatal rat 新生儿缺氧缺血性脑损伤 (HIBD) 在许多国家依然高发且易导致儿童神经系统后遗症 [1], 而临床上除了亚低温治疗外还没有其他有效治疗手段 [,3] HIBD 的根本病因是脑细胞氧及能量的缺失, 缺氧引发的 NMDA 受体被激活细胞内游离钙聚集线粒体功能障碍和其他一系列细胞内外生化指标的改变均参与了缺氧缺血导致的 HIBD 过程中, 最终导致受损脑细胞凋亡或坏死 [4] 理论上, 可逆转上述病理生理过程的干预手段可以用于治疗 HIBD, 其中包括改善线粒体功能的干预手段 [5] 由于 HIBD 与缺氧有直接的关联, 而高压氧 (HBO) 可通过高压力的氧疗来影响细胞内能量代谢, 因此 HBO 有可能在缺氧缺血损伤后对抗缺氧所致的脑细胞线粒体功能障碍临床研究已证实 HBO 在治疗急性脑水肿时可同时增加受损脑细胞氧供增加脑血流, 同时降低颅内压 [6] ; 动物实验研究发现 HBO 可通过增加氧弥散梯度和改善无氧代谢过程而修复受损伤后的脑细胞线粒体功能 [7] 本研究假设 HBO 可通过改善 HIBD 受损部位脑细胞线粒体功能而减轻缺氧缺血所致的脑损伤以代表线粒体功能的线粒体膜电势 (ΔΨm) 为主要观察指标, 建立 HIBD 新生大鼠模型, 以了解 HBO 对 HIBD 后新生大鼠脑皮质细胞线粒体功能的影响, 为临床应用 HBO 治疗 HIBD 找寻可能的实验室依据 1 方法 1.1 实验动物出生后 7 日龄的新生清洁级 SD 大鼠 360 只, 体重 (1.11±1.19)g 由湖南省人民医院动物实验中心提供本研究遵循中南大学动物实验研究指南规定, 并获得中南大学湘雅三医院医学伦理委员会审批 1. 分组将 360 只大鼠均分为正常对照组 HIBD 组和 HIBD+HBO 组, 每组 10 只 [9,10] 1.3 HIBD 动物模型制备 HIBD 组参照文献方法建立 HIBD 大鼠模型, 结扎新生大鼠的左侧颈总动脉后, 回母鼠身边恢复 h, 再暴露于室温 34 8% O +9% N 环境中 h 1.4 干预本研究以 HIBD 动物模型建立后设定为缺氧缺血后 0h 时点 (0h) 1HIBD+HBO 组干预措施 :HIBD 大鼠每舱 10 只 0h 时点进入特制的透明高压氧舱, 舱内径为 5cm 50cm, 舱内温度 34, 舱内氧浓度 >85%, 舱内压力经过 15min 达到个大气压 (ATM,0.MPa) 并持续 60min 出舱, 每日 1 次, 连续 7 日 ( 次间间隔 4h); HIBD 组干预措施 :HIBD 大鼠 10 只 0h 时点进入特制的透明高压氧舱, 舱内常温空气和正常气压环境下持续 60 min 出舱 ;3 正常对照组干预措施 : 新生大鼠每舱 10 只, 同 HIBD 组干预措施 1.5 流式细胞仪检测脑皮质细胞 ΔΨm 脑皮质单细胞悬液制备各组大鼠在缺氧缺血后 0h h 4h 6h 1h 4h( 为了解单次 HBO 干预后 4h 内 ΔΨm 的变化规律 ) 和 1d d 3d 4d 5d 6d 和 7d 时点 ( 为了解连续多次 HBO 干预后 1 周内 ΔΨm 的变化规律 ) 断头处死 ( 各组各时点 10 只大鼠 ), 冰上操作取左侧大脑皮质制备单细胞悬液 [11], 单细胞悬液浓度为 10 6 ml -1, 活细胞数量采用台盼蓝染色光镜检测法, 以保证实验中活细胞数量占流式细胞仪检验细胞的 99% 以上 1.5. 流式细胞仪检测 ΔΨm 在大脑皮质单细胞悬液中加入线粒体膜电势标记物罗丹明 (Rho)13(1mmol L -1 ) ( 美国 Sigma 公司 ), 孵育时间为 45min, 孵育温度为 37, 孵育后将标本置于冰上, 采用流式细胞仪 (CytomicsFC500, 美国贝克曼库尔特有限公司 ) 检测 Rho13 的平均绿色荧光强度 (MFL), 并以此作为该标本的平均脑细胞 ΔΨm 值, 激发波长为 488nm, 散发波长为 55nm 为确保大脑皮质单细胞悬液中活细胞 ΔΨm 检测有效, 每次检测时在孵育前随意选取 1 份标本加入终浓度为 100mmol L -1 的非耦合剂氢化甲基氯苯基腙 (mciccp, 美国 Sigma 公司 ) 作为阳性对照 1.6 统计学方法数据的统计学处理由中南大学公共卫生学院医学统计学系完成采用 SPSS13.0 软件进行统计分析计量资料采用 x±s 珋表示, 组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用 SNK 法 P<0.05 为差异有统计学意义结果如表 1 和图 1 所示, 缺氧缺血后 0h 至 7d 各时点正常对照组 ΔΨm 值基本无变化,HIBD 组和 HIBD+HBO 组各

3 中国循证儿科杂志 014 年 6 月第 9 卷第 3 期 13 时点 ΔΨm 值均低于正常对照组 HIBD 组和 HBO+HIBD 组 ΔΨm 值均以 0h 时点最低 ;~6h 时点 ΔΨm 值有所恢复,HIBD+HBO 组均高于 HIBD 组 (P<0.05); 之后在 1h 至 3d 时点又再次降低, 且 HBO+HIBD 组 ΔΨm 值降低程度更大, 两组 ΔΨm 值在 1h 4h d 和 3d 时点差异均有统计学意义 (P 均 <0.05) 缺氧缺血后 4~7d 时点 HIBD 组 ΔΨm 值呈现平稳趋势,HBO+HIBD 组在 4~7d 时点 ΔΨm 值再次开始恢复,6 和 7d 时点 ΔΨm 值逐渐趋近但低于正常对照组水平, 差异无统计学意义表 1 正常对照组 HIBD 组和 HBO+HIBD 组在缺氧缺血后 0h 至 7d 内各时点的损伤侧脑皮质 ΔΨm 的变化 (MFL, 珔 x±s) Tab1 ΔΨm changesoftheipsilateralcortexofnormalcontrol,hibdandhbo+hibdgroupsat0hto7dtimepointsafterhi damage(mfl, x±s) 珔 Groups 0h h 4h 6h 1h 4h d 3d 4d 5d 6d 7d Normal 4.70± 0.34 HIBD.85± 0.56 HIBD+HBO.58± ± ± ± ± ± ± 4.08± ) ± ± ± ± ± ± ± ± 3.73± 3.40± 3.35± 3.3± ) ) 0.8 1) ) ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± 3.7± ) ) 4.55± ±.44 t P Notes HIBD:hypoxicischemicbraindamage;HBO:hyperbaricoxygenation;1):comparedwithHIBD+HBOgroup,P<0.05.n=10ateach timepointineverygroup 图 1 缺氧缺血后 0h 至 7d 各时点正常对照组 HIBD 组和 HIBD +HBO 组损伤侧脑皮质细胞 ΔΨm 的变化 Fig1 ΔΨm changesoftheipsilateralcortexofhibd and HBO+HIBDgroupsat0h-7dtimepointsafterHI damage 3 讨论本研究结果显示,HIBD 组 0h 至 7d 时点损伤侧脑皮质细胞的 ΔΨm 值呈现降低恢复再降低的变化规律, 给予 HBO 干预后 1h 至 3d 时点 ΔΨm 值降低程度更为明显, 提示该期间 HBO 不能通过改善脑细胞线粒体功能而减轻 HIBD, 但 HBO 干预后 4 ~7d 时点 ΔΨm 值再次恢复且可接近正常对照组的水平, 提示 HBO 在 HIBD 损伤后 7h ( 即亚急性期 ), 可能通过改善线粒体功能而达到减轻 HIBD 的目的脑细胞 ΔΨm 是线粒体功能的标志 [1], 本研究采用 Rho13 检测 ΔΨm 值,Rho13 是一种可与活细胞线粒体膜特异性结合的阳性荧光染料, 由于 Rho13 与线粒体膜结合的程度与 ΔΨm 呈正相关, 因此 Rho13 被认为是脑细胞线粒体功能的生物标记 [13], 可通过流式细胞仪检测其荧光强度值定量测定线粒体功能 [14,15], 但 ΔΨm 值反映的是存活细胞受损伤后线粒体功能的改变, 并不能反映出所有的受损伤神经元, 特别是死亡的神经元 HBO 很可能并未纠正能量代谢衰竭, 而只是促进了损伤但尚存活细胞的线粒体功能的恢复大鼠脑皮质以神经元细胞为主, 本研究采用的单细胞悬液的制备方法与其他类似研究一致 [11~14], 仅能控制流式细胞仪标本的单细胞悬液浓度为 10 6 ml -1, 活细胞数量采用台盼蓝染色光镜检测法以保证实验中活细胞数量占流式细胞仪检验细胞的 99% 以上, 但由于本试验方法的限制, 目前无法从形态学角度明确给出活细胞的获得能代表多少皮质神经元的具体数据哺乳动物对氧的摄入依赖肺泡内外的压力梯度, 给予高压力的氧可增加这一压力梯度并有助于提高供应脑组织的氧, 动物实验证实 1.5ATA 的 HBO 可使溶解于血浆中的氧含量提高 10 倍 [16] 使脑组织中氧分压达到 00~300 mmhg [17] 临床上最常采用的 HBO 治疗方案为 1.8~.8 ATA 60~90min [18,19], 本研究 HBO 干预条件采用 ATA 60min,ATA 的 HBO 可以使得实验动物血浆中氧含量增加 10 倍以上 HBO 已在临床上用于治疗多种神经系统疾病 [0,1], 并有动物实验报道单次 HBO 干预可减轻缺氧缺血导致的新生大鼠脑损伤 [], 其作用机制可能一方面与

4 14 ChinJEvidBasedPediatr June014,Vol9,No3 HBO 提高脑组织内的氧分压促进氧与线粒体内的氧化还原酶结合从而改善线粒体功能有关 [7,3], 另一方面与 HBO 可抑制细胞凋亡过程有关 [4,5] 应用成年大鼠动物模型实验研究也证实大脑中动脉梗塞 6h 内给予 HBO 干预可减轻脑缺血性损伤 [6], 认为干预越早则治疗效果越好但本研究结果显示, 在新生 SD 大鼠 HIBD 后给予 HBO 干预并未在早期改善脑细胞的线粒体功能, 而是在缺氧缺血后 3d 时点损伤侧脑细胞的线粒体功能才得到改善, 在 1h 至 3d 时点 HBO 干预后脑细胞线粒体功能反而更进一步降低, 提示 HIBD 后给予 HBO 干预可能并不是越早效果越好, 分析导致这一结果的原因可能与氧自由基损伤或组织再灌注损伤等机制相关脑损伤后, 氧自由基和氮自由基大量产生, 在细胞防御系统功能降低的情况下自由基的升高可导致脂质过氧化反应, 最终导致细胞功能障碍 [7], 而脑组织对脂质过氧化反应尤其敏感, 并需要更高的耗氧量来维持正常功能 [8], 同时由于脑组织清除氧自由基的能力有限脑组织的过氧化氢酶活性较低以及脑组织内富含诱发产生自由基的铁元素, 故脑组织对抗自由基损伤的自然防御能力更差 [3] 本研究结果显示 HIBD+HBO 组在缺氧缺血后 4~7d 时点损伤侧大脑皮质的 ΔΨm 值明显高于 HIBD 组, 由此推断在度过 HIBD 最初的急性期之后,HBO 可能通过改善线粒体功能而减轻 HIBD 早产儿视网膜病变和高氧肺损伤是临床医生高度重视的问题, 因此在应用 HBO 治疗 HIBD 时, 必然会考虑到 HBO 的安全性问题一项随机临床试验结果显示每 4h 间断给予 ATA 的 HBO 治疗 ~3 次 ( 每次 60min) 对于外伤导致的脑损伤患者是安全的 [3], 动物实验结果显示给予早产新生大鼠 HBO 治疗 1h 不会导致与视网膜病变相关的视网膜结构改变或视网膜血管增生 [1] [9], 而 Yoles 等应用不同日龄的新生狗研究发现, 在脑代谢脑血流稳定性脑细胞电生理方面, 日龄越小的新生狗对 HBO 导致的氧毒性耐受力越强本研究采用的是 7 日龄的新生 SD 大鼠, HBO 的压力为 ATA 时间为 60min, 未在 HBO 氧毒性方面进行相关观察, 仅根据现有研究报道推测, 本研究采用的 HBO 干预方法对新生 SD 大鼠产生氧毒性的可能性较小本研究的局限性 :1 各组各时点样本量较小 (n=10), 数据标准差较大 ;HBO 对 HIBD 长期后遗症 ( 如记忆认知能力大运动功能行为异常等 ) 的影响没有进行评估 ; 3 本研究 HBO 干预是在 HIBD 后 0h 时点开始, 不能回答关于 HBO 治疗的时间窗问题 ;4HBO 干预后 Δψm 呈现降低恢复再降低再恢复变化规律的机制尚不明确, 这些机制可能牵涉到氧自由基损伤 NMDA 受体激活或细胞内游离钙聚集致谢 : 真诚地感谢中南大学湘雅医院儿科杨于嘉教授为本研究无偿提供动物实验专用高压氧舱! 参考文献犤 1 犦 GlasHC 牞 BonifacioSL 牞 PeloquinS 牞 etal.neurocriticalcare forneonates.neurocritcare 牞 010 牞 1 牗 3 牘牶犤犦 MaH 牞 SinhaB 牞 PandyaRS 牞 etal.therapeutichypothermia asaneuroprotectivestrategyinneonatalhypoxic ischemic braininjuryandtraumaticbraininjury.curmolmed 牞 01 牞 1 牗 10 牘牶犤 3 犦 PietriniD 牞 PiastraM 牞 LucaE 牞 etal.neuroprotectionand hypothermiaininfantsandchildren.curdrugtargets 牞 01 牞 13 牗 7 牘牶犤 4 犦 VertP 牞 DavalJL.Celdeathandneurogenesisafterhypoxia 牶 abrainrepairmechanisminthedevelopingrat 牽 BulAcadNatl Med 牞 006 牞 190 牗牘牶犤 5 犦 CooperCE.Invivomeasurementsofmitochondrialfunction andceldeathfolowinghypoxic/ischaemicdamagetothe newbornbrain.biochemsocsymp 牞 1999 牞 66 牶犤 6 犦 SukofMH 牞 RagatzRE.Hyperbaricoxygenationforthe treatmentofacutecerebraledema.neurosurgery 牞 198 牞 10 牗 1 牘牶 9 38 犤 7 犦 ZhouZ 牞 DaughertyWP 牞 SunD 牞 etal.protectionof mitochondrialfunctionandimprovementincognitiverecoveryin ratstreatedwithhyperbaricoxygenfolowinglateralfluid percusioninjury.jneurosurg 牞 007 牞 106 牗 4 牘牶犤 8 犦 RiceJE 牞 VannucciRC 牞 BrierleyJB.Theinfluenceof immaturityonhypoxic ischemicbraindamageintherat.ann Neurol 牞 1981 牞 9 牗牘牶犤 9 犦 HeiMY 牞 TaoHK 牞 TangQ 牞 etal.decreasedlevelsofpnr1 S897proteininthecortexofneonatalSpragueDawleyratswith hypoxic ischemicornmda inducedbraindamage.brazjmed BiolRes 牞 01 牞 45 牗 10 牘牶犤 10 犦 HeiMY 牞 HuangWQ 牞 LiuFR.EfectofrhIGF 1on cytochromecandcaspase 3expresioninneonatalratswith hypoxic ischemicbraindamageinvivo.chinjcontemp Pediatr 牗中国当代儿科杂志牘牞 010 牞 1 牗 1 牘牶犤 11 犦 MaricD 牞 MaricI 牞 BarkerJL.Developmentalchangesincel calciumhomeostasisduringneurogenesisoftheembryonic cortex.cerebcortex 牞 000 牞 10 牗 6 牘牶犤 1 犦 SignoretiS 牞 MarmarouA 牞 AygokGA 牞 etal.asesmentof mitochondrialimpairmentintraumaticbraininjuryusinghigh resolutionprotonmagneticresonancespectroscopy.j Neurosurg 牞 008 牞 108 牗 1 牘牶 4 5 犤 13 犦 SuredaFX 牞 EscubedoE 牞 GabrielC 牞 etal.mitochondrial membranepotentialmeasurementinratcerebelarneuronsby flowcytometry.cytometry 牞 1997 牞 8 牗 1 牘牶犤 14 犦 LiuJ 牞 YuZ 牞 GuoS 牞 etal.efectsofneuroglobin overexpresiononmitochondrialfunctionandoxidativestres folowinghypoxia/reoxygenationinculturedneurons.j NeurosciRes 牞 009 牞 87 牗 1 牘牶犤 15 犦 NolanJP 牞 DugganE 牞 LiuE 牞 etal.singlecelanalysisusing surfaceenhancedramanscatering 牗 SERS 牘 tags.methods 牞 01 牞 57 牗 3 牘牶 7 79 犤 16 犦 JainKK 牞 BaydinSA.TextbookofHyperbaricMedicine.3rd edition.seatle 牶 Hogrefe&HubeCompany 牞 1999 犤 17 犦 DaughertyWP 牞 LevaseurJE 牞 SunD 牞 etal.efectsof hyperbaricoxygentherapyoncerebraloxygenationand mitochondrialfunctionfolowingmoderatelateralfluid percusioninjuryinrats.jneurosurg 牞 004 牞 101 牗 3 牘牶犤 18 犦 BenedetiS 牞 LamorgeseA 牞 PiersanteliM 牞 etal.oxidative stresandantioxidantstatusinpatientsundergoingprolonged exposuretohyperbaricoxygen.clinbiochem 牞 004 牞 37 牗 4 牘牶犤 19 犦 LipskyBA 牞 BerendtAR 牞 DeeryHG 牞 etal.infectiousdiseases SocietyofAmerica.Diagnosisandtreatmentofdiabeticfoot infections.clininfectdis 牞 004 牞 39 牗 7 牘牶

5 中国循证儿科杂志 014 年 6 月第 9 卷第 3 期 15 犤 0 犦 OstrowskiRP 牞 ColohanAR 牞 ZhangJH.Neuroprotectiveefect ofhyperbaricoxygeninaratmodelofsubarachnoid hemorhage.actaneurochirsuppl 牞 006 牞 96 牶犤 1 犦 CalvertJW 牞 ZhouC 牞 ZhangJH.Transientexposureofrat pupstohyperoxiaatnormobaricandhyperbaricpresuresdoes notcauseretinopathyofprematurity.expneurol 牞 004 牞 189 牗 1 牘牶犤犦 FreibergerJ 牞 SulimanHB 牞 ShengH 牞 etal.acomparisonof hyperbaricoxygenversushypoxiccerebralpreconditioningin neonatalrats.brainres 牞 006 牞 1075 牗 1 牘牶 13 犤 3 犦 RockswoldSB 牞 RockswoldGL 牞 ZaunDA 牞 etal.a prospective 牞 randomizedclinicaltrialtocomparetheefectof hyperbarictonormobarichyperoxiaoncerebralmetabolism 牞 intracranialpresure 牞 andoxygentoxicityinseveretraumatic braininjury.jneurosurg 牞 010 牞 11 牗 5 牘牶犤 4 犦 LouM 牞 ChenY 牞 DingM 牞 etal.involvementofthe mitochondrialatp sensitivepotasiumchannelinthe neuroprotectiveefectofhyperbaricoxygenationaftercerebral ischemia.brainresbul 牞 006 牞 69 牗牘牶犤 5 犦 PalzurE 牞 ZaaroorM 牞 VlodavskyE 牞 etal.neuroprotective efectofhyperbaricoxygentherapyinbraininjuryismediated bypreservationofmitochondrialmembraneproperties.brain Res 牞 008 牞 11 牶犤 6 犦 LouM 牞 EschenfelderCC 牞 HerdegenT 牞 etal.therapeutic windowforuseofhyperbaricoxygenationinfocaltransient ischemiainrats.stroke 牞 004 牞 35 牗牘牶犤 7 犦 LewénA 牞 MatzP 牞 ChanPH.FreeradicalpathwaysinCNS injury.jneurotrauma 牞 000 牞 17 牗 10 牘牶犤 8 犦 DemopoulosHB 牞 FlammES 牞 SeligmanML 牞 PietronigroDD 牶 Oxygenfreeradicalsincentralnervoussystemischemiaand trauma 牞 inautorap 牗 ed 牘牶 PathologyofOxygen.NewYork 牶 AcademicPres 牞 198 牶犤 9 犦 YolesE 牞 ZurovskyY 牞 ZarchinN 牞 etal.theefectof hyperbarichyperoxiaonbrainfunctioninthenewborndogin vivo.neurolres 牞 000 牞牗 4 牘牶 ( 收稿日期 : 修回日期 : ) ( 本文编辑 : 张萍 ) 首都医科大学附属北京儿童医院 014 年国家级继续医学教育项目项目名称项目编号负责人学分举办日期小儿脑性瘫痪的康复治疗护理新进展唐彩云 6 6 月 6~8 日儿童先天性心脏病围术期护理及管理新进展学习班曲斌 10 8 月 1~16 日儿科磁共振新进展学习班彭芸 10 8 月 0~4 日儿童 EB 病毒感染相关疾病及实验室诊断学习班谢正德 6 9 月 10~1 日全国儿童皮肤病诊疗进展学习班马琳 10 9 月 10~14 日小儿心脏病护理新技术及护理管理新进展学习班曲斌 10 9 月 10~14 日儿童营养及营养性疾病进展学习班齐可民 7 9 月 17~0 日儿童血液净化护理技术培训班杨军华 6 9 月 17~19 日儿童呼吸系统疾病护理新进展研讨学习班张琳琪 6 9 月 0~ 日第十一届全国儿科医学教育暨儿科继续医学教育研讨会倪鑫 10 9 月 5~9 日全国儿科感染性疾病诊疗新进展学习班刘钢月 7~11 日小儿心血管疾病进展学习班袁越 6 10 月 11~13 日第 7 届亚太儿童感染病会议杨永弘 8 10 月 11~14 日全国儿童呼吸系统疾病新进展学习班徐保平 8 10 月 16~19 日全国儿童风湿免疫性疾病学习班李彩凤月 3~7 日小儿麻醉学习班张建敏 8 11 月 6~9 日儿科手术室医护配合与安全管理刘美霞 4 11 月 8~9 日

2017 年医学院 ( 含转化院遗传所 ) 硕士研究生入学考成绩准考证号报考专业外语政治业务 1 业务 2 总成绩备注病理学与病理生理学病理学与病理生理学

2017 年医学院 ( 含转化院遗传所 ) 硕士研究生入学考成绩准考证号报考专业外语政治业务 1 业务 2 总成绩备注病理学与病理生理学病理学与病理生理学 2017 年医学院 ( 含转化院遗传所 ) 硕士研究生入学考成绩准考证号报考专业外语政治业务 1 业务 2 总成绩备注 103357000912484 病理学与病理生理学 72 72 242 0 386 103357000912003 病理学与病理生理学 71 72 242 0 385 103357000911503 病理学与病理生理学 77 73 234 0 384 103357000911098