江苏农业科学 2015 年第 43 卷第 11 期 309 亲本在试验前经 4 个月营养强化和性腺促熟培育而成 ; 每次试验鱼卵均采用同一批亲本同一时段所产受精卵, 所选受精卵颗粒饱满 (800~900 粒 /g) 颜色淡黄, 避免寡蛋等影响试验结果对照组采用该繁育场同一池塘水 ; 采用中性电化水

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裟洗寿
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1 308 江苏农业科学 2015 年第 43 卷第 11 期梁勤朗, 吴宗文, 李杰, 等. 中性电化水对孵化的影响 [J]. 江苏农业科学,2015,43(11): doi: /j.isn 中性电化水对孵化的影响梁勤朗, 吴宗文, 李杰, 王尚文, 鲍斌, 蒋礼平, 黄平 ( 通威股份有限公司, 四川成都 ) 摘要 : 制备有杀菌效力高氧化还原电位的中性杀菌电化水, 并采用不同浓度电化水组 ( 以池塘水孵化为对照组 ) 进行孵化试验结果表明,15.00% ~24.27% 中性电化水能有效提高孵化率, 其中 24.27% 浓度组孵化率为 82.9%, 比对照组高 9.7 百分点通过显微拍摄对照电化水组和对照组典型胚胎发育阶段可知, 电化水不影响的胚胎发育说明中性电化水可代替化学药品应用于孵化, 有效提高孵化率, 有较大的应用潜力关键词 : 中性电化水 ; ; 孵化 ; 杀菌中图分类号 :S 文献标志码 :A 文章编号 : (2015) 泥鳅隶属于鲤形目泥鳅属, 其肉质鲜嫩, 富含营养价值和大肠埃希菌试验结果与武汉工业学院朱玉婵教授等的研究药用价值 [1-3], 别称水中人参, 深受国内外消费者的喜爱结果相近, 其试验结果表明中性电解水能有效杀灭菌落对数近年来泥鳅市场需求量日益增大, 因此也带动了泥鳅苗种繁为 7.8lg(CFU/mL) 的枯草杆菌黑色变种芽孢和育产业的发展, 而孵化用水水质则往往决定其繁育是否成功 8.94lg(CFU/mL) 大肠杆菌 [5], 且该项技术成本较低, 主要关于孵化过程中由细菌以及剑水蚤水蚤为代表的浮设备为一次性投入, 操作简便, 根据养殖户实际需求现制现游动物和水生昆虫导致的孵化率与存活率低鳅苗活力差等用, 减免了运输费用该技术已逐渐应用于医疗卫生环保等病害时有报道 [4], 这已经成为泥鳅规模化人工繁殖技术亟待行业, 但在水产养殖行业国内外尚未见相关研究报道解决的问题中性电化水是一种新型的杀菌灭藻剂, 笔者研本研究采用中性杀菌电化水孵化, 以物理方式电究发现, 中性电化水作用 1min, 能完全杀灭菌落对数为絮凝电离净化过滤水中杂质, 通过产生强氧化性物质代替化 7.3lg(CFU/mL) 的金黄色葡萄球菌和 7.1lg(CFU/mL) 的学药品杀灭细菌水藻和寄生虫, 从食物源头杜绝药物残留, 避免造成二次环境污染通过对照比较孵化率, 确认收稿日期 : 中性电化水是否有助于鱼卵孵化, 且分次试验不同浓度电化基金项目 : 四川省科技成果转化项目 ( 编号 :13CGZHZX0191) 水, 以期探索最适孵化的, 为该技术在水产作者简介 : 梁勤朗 (1987 ), 男, 四川邛崃人, 硕士, 中级工程师, 从事设施渔业与养殖技术研究 Tel:(028) ; liangql 1 材料与方法通信作者 : 吴宗文 (1946 ), 男, 四川安岳人, 硕士, 研究员, 从事设施渔业与养殖技术研究 Tel:(028) ; wuzw@ 1.1 材料与仪器设备 tongwei.com 试验材料亲鱼选择四川省双流县万福省级繁育场, 櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄产生免疫保护性抗体和长时间免疫应答, 可以用作猪源乙脑灭活疫苗用毒株 [7] 章域震, 张海林, 俞永新, 等. 三带喙库蚊和致倦库蚊胸腔接种乙型脑炎病毒减毒活疫苗 SA 株的研究 [J]. 中华实验和临床病毒学杂志,2005,19(4): 参考文献 : [8] 张永欣, 符芳, 宋淑萍, 等. 中国东北地区株日本脑炎病毒株的分离 [1] 殷震, 刘景华. 动物病毒学 [M].2 版. 北京 : 科学出版社, 鉴定及基因分型 [J]. 东北农业大学学报,2009,40(6): : [9] 袁磊, 郑文亚, 贾静, 等. 两株乙型脑炎病毒的分离鉴定与生 [2] 郑浩, 张建武, 袁世山. 猪源乙型脑炎病毒的分离鉴定及其 E 物学特性研究 [J]. 中国兽医科学,2011,41(11): 基因分析 [J]. 中国兽医科学,2009,39(06): [10] 禹乐乐, 滕蔓, 罗俊, 等. 猪源乙型脑炎病毒河南分离株的全 [3] 胡勇. 流行性乙型脑炎的病原学和流行病学研究进展 [J]. 疾基因组测序及进化分析 [J]. 华北农学报,2012,27(5): 病控制杂志,2005,9(6): [11] 王兴涛, 罗俊, 藤蔓, 等. 猪流行性乙型脑炎病毒种猪精液 [4] 李春燕, 汤德元, 徐健, 等. 乙型脑炎的发病机理及毒力致病机分离株的鉴定及进化分析 [J]. 河南农业科学,2011,40(5): 理的研究进展 [J]. 中国兽药杂志,2008,42(4): [5] 许乐燕. 乙型脑炎病毒及疫苗研究进展 [J]. 国际生物制品学杂志,2006,29(6): [6] 刘志文, 俞永新, 张海林, 等. 乙型脑炎减毒活疫苗病毒 SA 株经三带喙库蚊胸腔接种后的生物学和分子生物学特性 [J]. 中国生物制品学杂志,2007,20(6): [12] 乔进平, 赵明秋, 张学涛, 等. 猪乙型脑炎病毒 3 种灭活疫苗的制备及免疫效果比较 [J]. 华南农业大学学报,2011,32(2): [13]YangDK,NakJ,KimHH,etal.Inactivatedgenotype1Japanese encephalitisvaccine forswine[j]. Clinicaland Experimental VaccineResearch,2014,3(2):

2 江苏农业科学 2015 年第 43 卷第 11 期 309 亲本在试验前经 4 个月营养强化和性腺促熟培育而成 ; 每次试验鱼卵均采用同一批亲本同一时段所产受精卵, 所选受精卵颗粒饱满 (800~900 粒 /g) 颜色淡黄, 避免寡蛋等影响试验结果对照组采用该繁育场同一池塘水 ; 采用中性电化水设备制备的中性杀菌电化水, 其有效氯含量 75mg/L 臭氧 30mg/L 双氧水 25mg/L, 氧化还原电位 824mV 阳极反应 : 阴极反应 : Cl - -2e+H 2 O =HClO+H + ; 2H 2 O-4e=4H + +O 2 ; 3H 2 O-6e=6H + +O 3 O 2 +2H + +2e=H 2 O 2 ; 2H 2 O+2e=H 2 +2OH 仪器设备通威中性电化水设备 (TW -FC/ EC200L); 便携式 ph 测定仪 ; 广州明美 ML10 显微镜 ;MD30 数字摄像头 ; 相同规格相同颜色孵化桶 12 个 (595mm 490mm 340mm) 1.2 试验设计表 2 不同中性处理孵化试验设计预试验设计本研究预试验设计 4 组不同浓度电化水, 在不同繁殖时段, 进行静水孵化对照组 (D 组 ) 选择原池塘水进行孵化, 电化水组采用处理原池塘水, 现场现制电化水, 配制不同浓度, 各浓度组无平行组 ( 表 1) 每组浓度孵化用水质量及粒数均保持一致表 1 中性电化水处理孵化预试验设计 A B C D( 对照 ) 重复验证试验在预试验基础上分别采用不同浓度电化水, 在不同繁殖时段分别进行 4 次重复验证孵化试验 ( 表 2), 每个浓度组均设 3 个重复, 每个重复投放 1000 粒其中第 3 次试验设置 15% 浓度 2 组 : 一组为提前 12h 制水 (15% 前 ), 一组是试验前 30min 制水 (15% 后 ) 并且根据华罗庚 - 优选法 ( 黄金分割点 0.618), 在 15% 浓度组基础上设定 24.27% 浓度组第 1 次试验 (2012 年 7 月 22 日 ) 第 2 次试验 (2012 年 8 月 9 日 ) 第 3 次试验 (2012 年 8 月 21 日 ) 第 4 次试验 (2013 年 2 月 21 日 ) A A A1 15( 前 ) 1000 A A A A2 15( 前 ) 1000 A A A A3 15( 前 ) 1000 A B B B1 15( 后 ) 1000 B B B B2 15( 后 ) 1000 B B B B3 15( 后 ) 1000 B C C C C C C C C C C C C D D D D D D D D D D D D 胚胎发育观察试验过程中, 每隔 0.5h 分别取电化水组和对照组 5 粒卵, 在显微镜下观察胚胎发育情况, 显微拍摄典型时期照片 2 结果与分析 2.1 中性电化水孵化预试验预试验孵化结果表明, 电化水组孵化率均高于对照组, 以 10% 组孵化率最高, 为 62.7%, 且随升高, 孵化率呈递减趋势 ( 表 3 图 1) 表 3 中性电化水孵化预试验结果投放孵化出泥鳅苗 ( 尾 ) 孵化率 A B C D 不同浓度中性电化水孵化试验结果由表 4 图 2 至图 5 可知, 第 1 次孵化试验结果中除 5% 浓度组外, 其余电化水组孵化率均高于对照组,15% 浓度组孵化率最高, 为 75.1%; 第 2 次孵化试验中, 随电化水浓度升高孵化率呈下降趋势, 孵化率最高为 15% 浓度组 ; 第 3 次重复试验中, 电化水组孵化率均高于对照组, 其中电化水 15%( 后 ) 组孵化率略高于 15%( 前 ) 组,24.27% 组孵化率最高, 达 73.3%; 第 4 次重复验证试验中,24.27% 浓度组孵化率最高, 达 67.7% 2.3 中性电化水与池塘水孵化胚胎发育对照情况本研究对胚胎发育观察从受精卵开始, 根据文献 [6-9], 分别记录 24.27% 浓度电化水组与对照组的受精卵

3 310 江苏农业科学 2015 年第 43 卷第 11 期卵裂囊胚原肠胚神经胚器官发生和孵化 7 个阶段及典型的发育时期 ( 表 5 图 6) 第 1 次试验表 4 不同处理对孵化率的影响第 2 次试验 ~ ~ 第 3 次试验第 4 次试验 ( 前 ) ~ ~ ( 后 ) 表 % 电化水组与对照组胚胎发育对照情况主要发育阶段特征描述电化水组胚胎对照组胚胎受精卵 / 胚盘形成期卵球分化动物极和植物极, 原生质集中到动物极, 隆起形成帽状胚盘卵裂 / 桑椹期胚盘经细胞器, 多细胞期持续分裂后, 细胞数几何级数上升, 呈桑椹状

4 江苏农业科学 2015 年第 43 卷第 11 期 311 续表 5 主要发育阶段特征描述电化水组胚胎对照组胚胎囊胚期囊胚层高度下降, 并有下包趋势原肠期 / 初期囊胚层下包卵黄 1/3~1/2, 内卷形成胚环原肠期 / 中期囊胚层下包卵黄 1/2~2/3 原肠期 / 晚期囊胚层下包卵黄 2/3~5/6 神经胚期胚层几乎包围全部卵黄, 头部雏形可见神经胚期 / 胚孔封闭期胚盘完全包裹卵黄, 胚体开始形成器官发生 / 尾泡出现期尾部出现圆形亮点, 即尾泡器官发生 / 尾芽出现期尾部变圆, 出现锥形尾芽器官发生 / 耳囊出现期出现透明的泡状耳囊

312 江苏农业科学 2015 年第 43 卷第 11 期续表 5 主要发育阶段特征描述电化水组胚胎对照组胚胎器官发生 / 肌肉效应期肌节 22 对, 胚体中断出现间歇性肌肉收缩孵化期胚胎即将出膜, 胚体在膜内不时滚动 3 讨论 3.

每次试验进行组内比较, 甄选最适电化水孵化浓度, 已有结果表明, 15.00% ~24.27% 为最适电化水孵化浓度范围, 其中与对照组相比孵化率最多可提高 9.7 百分点在第 1 次孵化试验中 5% 组孵化率低于对照组, 第 4 次试验中 75% 电化水组孵化率 59.

因此对孵化率也存在一定影响 (2) 水温本研究为确保该项技术的可推广性, 全程模拟该繁育场常规操作流程, 试验点选择其孵化车间, 水温不可控而已有研究表明, 水温变化对泥鳅繁殖有重要影响 [10-11] 水温在 22~ 24 范围内, 泥鳅孵化率为 73.

5, 且昼夜水温不一致, 因此水温也是影响孵化率的一个主要因素 (3) 试验环境 4 次孵化试验的时间前后相差 8 个月 ( 表 2), 因此试验环境也略有不同, 包括水质状况, 如池塘水中的溶氧量水生生物的种类及数量等, 孵化车间的采光强度室温等也都会影响的孵化率

2 中性电化水对孵化率的影响因素鱼卵孵化用水关系繁育成败戈贤平等研究发现, 池塘水中卵苗的敌害生物很多, 其中以剑水蚤 ( 本研究中也有发现, 图 7) 水蚤轮虫霉菌等最为常见 [12], 它们不仅消耗水中氧气, 且对卵苗的攻击力极强, 能破坏卵膜损害胚胎

5 312 江苏农业科学 2015 年第 43 卷第 11 期续表 5 主要发育阶段特征描述电化水组胚胎对照组胚胎器官发生 / 肌肉效应期肌节 22 对, 胚体中断出现间歇性肌肉收缩孵化期胚胎即将出膜, 胚体在膜内不时滚动 3 讨论 3.1 中性电化水对孵化率的影响本研究的预试验结果显示,100% 50% 10% 孵化率均高于对照组, 其中 10% 组孵化率最高 ( 表 3 图 1), 因此, 以预试验结果为基础, 进行 4 次重复验证试验分别试验不同浓度梯度电化水对的孵化效果 ( 表 2) 每次试验进行组内比较, 甄选最适电化水孵化浓度, 已有结果表明, 15.00% ~24.27% 为最适电化水孵化浓度范围, 其中与对照组相比孵化率最多可提高 9.7 百分点在第 1 次孵化试验中 5% 组孵化率低于对照组, 第 4 次试验中 75% 电化水组孵化率 59.23%, 接近对照组 58.5%( 表 4 图 2 至图 5) 综合不同组孵化率分析, 过低过高均不能有效提高孵化率, 甚至可能产生负面效应在本试验中不同批次相同浓度组孵化率不尽相同, 如第 1 次 15% 浓度组孵化率为 75.1%, 第 2 次 15% 浓度组孵化率为 67.4% 4 次重复验证试验使用池塘水孵化的对照组孵化率也均不相同 ( 表 4), 其原因主要为以下 3 点 :(1) 亲本不同为保证本次试验具有代表性, 每次取卵均在亲鱼统一催产后, 随机选择同一批亲本进行收集, 而不同亲本的体质受精卵活性均有差异, 因此对孵化率也存在一定影响 (2) 水温本研究为确保该项技术的可推广性, 全程模拟该繁育场常规操作流程, 试验点选择其孵化车间, 水温不可控而已有研究表明, 水温变化对泥鳅繁殖有重要影响 [10-11] 水温在 22~ 24 范围内, 泥鳅孵化率为 73.5%;24~26 时, 孵化率达 77.4%, 温度升至 26~28 时, 孵化率降低为 60.1% 孟庆磊等也报道水温对孵化的畸形率死亡率均存在较高影响 [8] 而本研究中,4 次试验的分别为 , 且昼夜水温不一致, 因此水温也是影响孵化率的一个主要因素 (3) 试验环境 4 次孵化试验的时间前后相差 8 个月 ( 表 2), 因此试验环境也略有不同, 包括水质状况, 如池塘水中的溶氧量水生生物的种类及数量等, 孵化车间的采光强度室温等也都会影响的孵化率 [12] 综上所述, 由于亲本水温试验环境的因素, 孵化存在外界影响因素, 但通过比较各批次试验组组内孵化率, 一定浓度的电化水用于孵化是可行的 3.2 中性电化水对孵化率的影响因素鱼卵孵化用水关系繁育成败戈贤平等研究发现, 池塘水中卵苗的敌害生物很多, 其中以剑水蚤 ( 本研究中也有发现, 图 7) 水蚤轮虫霉菌等最为常见 [12], 它们不仅消耗水中氧气, 且对卵苗的攻击力极强, 能破坏卵膜损害胚胎啄死鱼苗, 严重时可造成卵苗全军覆没, 且剑水蚤等幼体繁殖速度快, 因此必须在孵化前进行根治传统鳅卵孵化操作常需在孵化过程中多次应用 90% 晶体敌百虫或亚甲基蓝灰黄霉素制霉菌素克霉唑等泼洒浸泡处理在本研究中均未使用任何化学药品, 而对照组中发现有卵感染水霉菌 ( 图 8), 同时在对照组孵化池水发现有较多的剑水蚤轮虫等水生动物 ( 图 7), 而在电化水组中, 则未出现上述现象有研究表明, 中性电解水 3min 内能有效杀灭鸡蛋表面鸡白痢沙门氏菌 [ 初始菌落对数为 6.19~6.26lg(CFU/g)], 大肠杆菌 O157 H7[ 初始菌落对数为 6.12~6.19lg(CFU/g)], 且处理废液中无残存菌无二次污染问题 [13-14] 在蛋种鸡场应用中性电化水喷雾灭菌时发现, 其效果优于过氧乙酸 / 双氧水消毒剂与聚维酮碘消毒剂笔者利用池塘水含多种水生

6 江苏农业科学 2015 年第 43 卷第 11 期 313 杂质, 产生强氧化性物质代替化学药品杀灭细菌水藻寄生虫的中性电化水, 有助于提高鳅卵孵化率, 其最适孵化浓度范围在 15.00% ~24.27%,24.27% 浓度组孵化率为 82.9%, 比对照组高 9.7 百分点, 且不会影响的胚胎和鳅苗的发育参考文献 : 生物的导电特性, 通过钛电极板输送电能至水体, 改变水体理化特性, 产生电气浮电离净化电絮凝等效能, 通过精密介质过滤器将原水中藻类寄生虫等残渣凝物清除, 同时产生 75mg/L 有效氯 30mg/L 臭氧以及 25mg/L 双氧水,pH 值在 6.5~8.0, 氧化还原电位在 800~1300mV 的中性杀菌电化水, 经试验验证, 该中性杀菌电化水作用时间 5min, 可定量杀灭水产养殖常见菌嗜水气单胞菌落对数 8.82lg(CFU/g) 维氏气单胞菌落对数 8.64lg(CFU/g) 豚鼠气单胞菌落对数 7.79lg(CFU/g) 不动杆菌菌落对数 8.94lg(CFU/g) 且保存 24h 后对上述病菌杀灭率依然达 100%, 表明中性杀菌电化水能有效杀灭养殖水体中的细菌通常好氧菌生长环境的适宜 ORP 值范围在 200~ 800mV, 厌氧菌适宜 ORP 值范围在 -700~200mV 而中性电化水具有的高氧化还原电位改变病菌生存条件, 杀灭抑制细菌生长, 达到物理杀菌效果电化水中有效氯主要为次氯酸分子 (HClO), 有研究表明, 相同有效氯浓度和处理时间, 次氯酸对大肠杆菌的杀灭能力是次氯酸根离子的 80~150 倍 [15], 且由于强氧化性物质及高氧化还原电位均不稳定, 杀菌后可还原成普通水, 对环境无污染 [16-17] 笔者在相关研究中尝试用中性电化水孵化卵径较大卵膜较薄的南方大口鲇卵, 结果发现在 100% 75% 下, 细胞膜在 2~4h 内卵膜破裂, 这也印证了中性电化水具有与化学药物相近的杀灭细菌水藻寄生虫的能力, 适宜的有助于提高孵化用水品质, 有效降低病菌寄生虫等对卵孵化的影响, 且避免使用化学药品, 降低养殖成本, 确保持续产出质量安全的水产品, 杜绝二次污染目前, 笔者所在的项目组开展相关研究探索中性电化水的效用时间影响因子等, 进一步改进电化设备, 以期将该技术扩展应用于更多名优鱼种的鱼卵孵化, 减轻环境污染, 提高养殖户效益 3.3 中性电化水孵化胚胎发育影响通过对照 24.27% 电化水组与对照组不同胚胎发育阶段以及苗种的形态观察, 适宜浓度的中性电化水不会对胚胎发育造成不良影响而针对电化水是否影响鳅卵胚胎发育阶段时程, 将在后续研究中进一步探索 4 结论本试验结果显示, 通过物理方法絮凝过滤池塘水中污物 [1] 赵振山, 高贵琴, 印杰, 等. 泥鳅和大鳞副泥鳅营养成分分析 [J]. 水利渔业,1999,19(2): [2]ChewSF,JinY,IpYK.TheloachMisgurnusanguilicaudatusre ducesaminoacidcatabolism andaccumulatesalanineandglutamine duringaerialexposure[j].physiologicalandbiochemicalzoology, 2001,74(2): [3] 钦传光, 黄开勋, 徐辉碧, 等. 泥鳅多糖对化学性肝损伤的保护作用 [J]. 中医药学报,2001,29(4):31-32,0. [4] 王武, 雷慧僧, 薛镇宇, 等. 池塘养鱼新技术 [M]. 北京 : 金盾出版社,2008: [5] 朱玉婵, 任占冬, 陈红梅, 等. 中性氧化电解水杀菌剂制备新工艺及杀菌作用 [J]. 农药,2010,49(12): ,894. [6] 张玉明, 田秀娥, 王永军, 等. 安康地区泥鳅胚胎发育研究 [J]. 安徽农业科学,2010,38(23): [7] 杨荣华, 朱逸仁. 泥鳅胚胎与鱼苗发育的研究 [J]. 辽宁师范大学 : 自然科学学报,1991,14(1): [8] 孟庆磊, 朱永安, 王玉新, 等. 大鳞副泥鳅胚胎发育观察 [J]. 齐鲁渔业,2010,27(11):8-10. [9] 艾炎军, 曾庆韬. 温度对大鳞副泥鳅胚胎发育的影响 [J]. 实验室研究与探索,2007,26(2): [10] 施颂发. 稻田养殖黄鳝泥鳅 [M]. 北京 : 中国农业出版社,1999: [11] 吴宗文, 高启平, 吴青, 等. 泥鳅养殖 [M]. 成都 : 四川科学技术出版社,2011: [12] 李彩娟, 凌去非, 葛摇辰, 等. 中国 4 大湖泊大鳞副泥鳅群体遗传多样性分析 [J]. 江苏农业学报,2014,30(5): [13] 戈贤平, 赵永锋. 大宗淡水鱼 [M]. 北京 : 中国农业出版社, 2013: [14] 郑炜超, 李保明, 尚宇超, 等. 蛋种鸡场中性电解水带鸡喷雾消毒试验研究 [J]. 农业工程学报,2010,26(9): [15] 朱志伟, 李保明, 李永玉, 等. 中性电解水对鸡蛋表面的清洗灭菌效果 [J]. 农业工程学报,2010,26(3): [16]AnonymousS.Principleofformationofwater[M].Sakae,Toyoake, Aichi,Japan:HoshizakiElectricCoLtd,1997. [17]AbadiasM,UsalJ,OliveiraM,etal.Eficacyofncutralelectrolyzed water(new)forrcducingmicrobialcontaminationonminimaly- procesedvegetables[j].intemationaljoumaloffoodmicrobiology, 2008,123(112): [18]Gómez-LópezVM,RagaertP,RyckeboerJ,etal.Shelf-lifeof minimaly procesed cabbage treated with neutralelectrolysed oxidisingwaterandstoredunderequilibrium modifiedatmosphere [J].InternationalJournalofFoodMicrobiology,2007,117(1):

人工催产干法授精孵化胚胎发育观察

人工催产干法授精孵化胚胎发育观察金万昆俞丽杨建新张慈军高永平赵宜双王春英人工催产干法授精孵化胚胎发育观察胚盘隆起细胞期细胞期细胞期细胞期细胞期多细胞期囊胚早期囊胚中期囊胚晚期原肠早期原肠中期原肠晚期神经胚期胚孔封闭期眼泡出现期尾芽期晶体出现期肌肉效应期心脏搏动期孵出期日龄仔鱼日龄仔鱼日龄仔鱼日龄仔鱼感谢中国水产科学院黑龙江水产研究所沈俊宝研究员的悉心指导