学习使用体积计量设备的基本方法 实验室的液体体积测量 F I R S T C L A S S B R A N D
介绍 GMBH + CO KG P.O. Box 11 55 97861 Wertheim/Main Germany Telephone: +49 9342 808-0 Fax: +49 9342 808-236 E-Mail: info@brand.de Internet: www.brand.de GMBH + CO KG
内容 液体体积计量仪器 纵览 玻璃液体体积计量仪器的生产 6 8 9 使用液体体积计量仪器进行工作 10 11 12 13 15 15 16 17 18 5 6 10 使用移液设备进行工作 22 24 25 29 30 21 精准度的定义 量具的监控 34 36 36 32 33 Conformity 证书与校准证书 IVD 指令 质量管理 实验设备的清洗 安全信息 37 38 39 40 42
液体体积计量仪器 纵览 液体体积计量仪器 纵览 液体体积计量设备玻璃 / 塑料 容量瓶胖肚移液管刻度移液管刻度量筒滴定管 移液设备 瓶口分液器 瓶口分液器 瓶口滴定器 单通道空气活塞移液器 多通道空气活塞移液器 外置活塞移液器连续分液器, 手动连续分液器, 电子 5
玻璃体积计量仪器 生产 玻璃液体体积计量仪器的生产 从原料到精确的仪器 毛坯 AR-Glas DURAN BLAU SILBER 250 C 校准 2 SPC A CV TC In TD Ex 量入 校准 (TC, In): 200 µl 量出 校准 (TD, Ex): 参考温度 20 C 提示 : 6
玻璃体积计量仪器 生产 丝网印刷 ISO 1769 丝网油墨 蓝色釉料 : BLAU A/AS 白色釉料 : SILBER B 棕色扩散染料 : BLAU -ETERNA A/AS SILBER-ETERNA B 烘制 质量保证 400 550 C 39 7
玻璃体积计量仪器 生产 体积计量仪器的辨识 举例 : BLAU 胖肚移液管 A/AS B H Conformity Eichordnung DIN 12 600 20 C 5 TD, Ex A S ml cm³ 20 C Ex In A, AS B Ex + 5 s BLAU ISO 648 8
玻璃体积计量仪器 生产 准确度分类 A/AS 级 DIN EN ISO AAS PFA PMPPMP A AS TD, Ex S AS 11 A/AS 级 S A/ASConformity 90% B 级 BB A/AS TD, Ex B 级 A/AS 20%- 40% 体积计量仪器的选择 玻璃还是塑料? PP PMP PFA PP B PMP PFA A PMP/ PFA PMP PFA PMP A 9
玻璃体积计量仪器 量液 使用液体体积计量仪器进行工作 液体的 凹 液面 液面设置 重要提示 : Schellbach Schellbach Schellbach 液面的读取 环形标记 / 刻度标记 液面 10
玻璃体积计量仪器 量液 排液时间与等待时间 TD Ex 可能的体积误差 : 13 排液时间 AS 等待时间 AS AS 5 s 5 s 8 不同级别的排液与等待时间举例 25 ml Aconformity 25 50 s ASconformity 15 20 s 5 s B 10 50 s 11
玻璃体积计量仪器 操作 使用液体体积计量仪器进行工作 移液管, 概述 TD TD Ex 200 µltc In 胖肚移液管 AS Ex + 5 s B Ex 刻度移液管 AS Ex + 5 s B Ex 2 1 3 2 毛细移液管, 比如 : BLAU intramark 毛细管 TC, In 毛细移液管, 比如 : BLAU intraend 毛细管 TC, In 12
玻璃体积计量仪器 操作 移液管的使用 TD, Ex 校准移液管 25 ml 2 AS3 ml 18 吸液 1. 5 mm 胖肚移液管单刻度 2 类完全排出, 标称量程位于顶部 1 类部分排出, 零刻度位于顶部 3 类完全排出, 零刻度位于顶部 2. 3. 2 2 4. 1 排液 5. 6. 5 s AS 7. 10 mm 注意 : 1 1 类和 3 类 13 1.) 2.) 5 s 2 13 2 13
玻璃体积计量仪器 操作 移液管的使用 TC, In 校准移液管 18 吸液 排液 2 3 14
玻璃体积计量仪器 操作 容量瓶的使用 AB(TC, In) 50 ml 2 1. 2. 3. 4. 5. 刻度量筒与混合量筒的使用 刻度量筒 : 混合量筒 AB (TC, In) TC, In 注意 : (TD, Ex) 30 s 注意 : 15
玻璃体积计量仪器 操作 滴定管的使用 TD, Ex 校准 AS Ex + 30 s B Ex AS 30 s 操作 1. 2. 3. 5 mm 4. 5 mm 5. 6. 7. AS30 s 8. Pellet Dr. Schilling 16
玻璃体积计量仪器 操作 密度瓶的使用 TD 操作 1. 2. 1/3 3. 20 C 4. 5. 6. 20 C ρ m(v) 注意 : 17
玻璃体积计量仪器 辅助移液 移液管助吸器的使用 移液管助吸器的类型 : 直接使用嘴或者接一根管子使用嘴进行移液操作是绝对不允许的 辅助吸液一定要使用移液管助吸器 这样能够极大地减少感染或受伤的风险 马达驱动的移液管助吸器 例如, 出品的 accu-jet pro 0.1 200 ml 操作 吸液 排液 重力排液 电动排液 排液 : 重力还是电动? 重力排液 电动排液 18
玻璃体积计量仪器 辅助移液 手动移液管助吸器 例如, 出品的大量程移液管助吸器 macro Pipette Controller macro 0.1 200 ml 操作 制造负压 吸液 设置凹液面 / 重力 排液 吹出 吸耳球 操作 吹出 注意! A 1. 2. A 3. S S 4. E E 19
玻璃体积计量仪器 辅助移液 用于低于 1 ml 的小量程移液管的手动移液管助吸器 1 ml 直接使用嘴或者接一根管子使用嘴进行移液操作是绝对不允许的 辅助吸液一定要使用移液管助吸器 这样能够极大地减少感染或受伤的风险 例如, 出品的微量移液管控制器 micro Pipette Controller 操作 吸液 / 排液 TC, In 重力 排液 TD, Ex 弹出 例如, 出品的微量移液管控制器 micro-classic Pipette Controller 操作 安装移液管 吸液 排液 TC 量入 校准的移液管 TD 量出 校准的移液管 20
移液设备 使用移液设备进行工作 瓶口分液器 瓶口分液器 瓶口滴定器 单通道空气活塞移液器 多通道空气活塞移液器 Dispensette seripettor Titrette Transferpette S () Transferpette S -8/-12 () 电子单通道空气活塞移液器 电子多通道空气活塞移液器 外置活塞移液器连续分液器电子连续分液器 Transferpette electronic Transferpette -8/-12 electronic Transferpettor HandyStep () HandyStep electronic 21
移液设备 分液 使用瓶口分液器进行液体移取 分液 的定义 : 瓶口分液器功能原理 浮筒 摩擦密封 使用 浮筒 活塞的瓶口分液器 例如, 出品的瓶口分液器 Dispensette 应用范围 H 3 PO 4 H 2 SO 4 NaOH KOH Dispensette III chlorinated fluorinatedhydrocarbons trichlorotrifluoroethane dichloromethane HClHNO 3 TFA THFperoxides Dispensette Organic HF 52% Dispensette HF 材料 ETFE PFA 22
移液设备 分液 安全第一! 计量仪器的监测 / 校准 ISO GLP 33 使用 摩擦密封 活塞的瓶口分液器 例如, 出品的 seripettor 瓶口分液器 0.2 25 ml 应用范围与材料 seripettor pro seripettor seripettor pro 23
移液设备 滴定 使用瓶口滴定器进行滴定 滴定 的定义 如何做滴定? 3 0.1 M NaOH 瓶口滴定器的功能原理 读取体积 例如 : 出品的数字瓶口滴定器 Titrette 应用范围 1 M 材料 PTFE 24
移液设备 移液 使用空气活塞移液器移液 功能原理 校准 ISO GLP 33 优势 手动单通道移液器 例如, 出品的手动单通道空气活塞移液器 Transferpette S 操作 ➀ ➁ ➀ ➁ 吸取试剂 1. 1 2 mm 2. 排出试剂 1. 2. 10 mm 褪除吸头 25
移液设备 移液 手动多通道移液器 812 8x1296 应用领域 分析技术 IF RIA EIA, ELISA 例如, 出品的多通道手动空气活塞移液器 Transferpette S -8/-12 操作 ➀ ➀ ➁ ➁ 吸取试剂 1. 1 2 mm 2. 排出试剂 1. 2. 10 mm 褪除吸头 26
移液设备 移液 人体工程学与拉伤 RSI repetitive strain injuries 电子单道与多道移液器 操作原理 电子移液器的优势 RSI 例如, 出品的电子单道与多道移液器 Transferpette electronic 操作 吸取试剂 排出试剂 10 mm 褪除吸头 27
移液设备 移液 微量电子移液器 Transferpette electronic 的移液程序 显示 移液程序 其他功能 移液 Transferpette electronic 样品混合 反相吸液 凝胶电泳上样 GEL 反相 的含义? 第二停顿 第一停 28
移液设备 移液 使用外置活塞移液器移液 功能原理 优势 例如, 出品的 Transferpettor 外置活塞移液器 应用范围 操作 量程设定 吸取试剂 排出试剂 29
移液设备 移液 使用连续分液器进行液体分配 连续分液器的类型 : 功能原理 PD- 手动连续分液器 例如, 出品的 HandyStep 49 2 µl 5 ml1-5 10PD- 外置活塞吸头 (PD- 吸头 ) 可提供的量程组合 档数设定 1 2 3 4 5 分液步数 49 24 15 11 9 PD- 吸头量程 ml 分液体积 µl 0.1 2 4 6 8 10 0.5 10 20 30 40 50 1 20 40 60 80 100 1.25 25 50 75 100 125 2.5 50 100 150 200 250 5.0 100 200 300 400 500 10 200 400 600 800 1000 12.5 250 500 750 1000 1250 25.0 500 1000 1500 2000 2500 50.0 1000 2000 3000 4000 5000 30
移液设备 移液 人体工程学与设计 马达驱动的电子连续分液器 功能原理 例如, 出品的电子连续分液器 HandyStep electronic PD- 1.01 ml 可选的工作模式 : 连续分液 ( 标准模式 ) 自动分液 移液 31
精准度 精准度的定义 在体积计量仪器中, 误差极限 Error Limit, 准确度 Accuracy, 偏差系数 Coefficient of Variation 以及精准度 Precision 各自代表什么含义? 精准度与准确度的图示 准确度差 重复性差 结论 : 准确度好 重复性差 结论 : 准确度差 重复性好 结论 : 准确度好 重复性好 结论 : Error limit Accuracy Coefficient of Variation [%] 误差极限 Error limit 准确度 Accuracy 偏差系数 s 100 EL V measured - V spec. A [%] = V - V spec. 100 CV [%] = V spec. V Error limit 误差极限与 A 和 CV EL A% + 2CV% 100 % V nominal Accuracy (A) (V _ ) (V spec. ) (CV) 精准度 ( 重复性 ) 部分体积 V A nominal part. [%] = A V nominal % part. CV part. % A CV (V nominal ) (V part. ) A CV ml) (EL) (V nominal ) A CV 32
计量仪器的监测 计量仪器的监测 什么样的设备需要监测? GLP DIN EN ISO/IEC 17 025 DIN EN ISO 9001 监测的时间与频率 测试 测试所需的时间 监测 conformity 认证仪器 ( DIN EN ISO 10 012) 原因 : 3-12 1-3 ISO 8655 ISO 4787 SOP SOP EASYCAL DIN ISO 12 600 conformity 监测计量仪器的关键词 校准 调教 33
计量仪器的监测 体积测试的方法 举例 :Transferpette 数字可调量程微量移液器, 20-200 µl 3-12 Transferpette A 准备 : C 重力测试 : 1. 2. 3. 4. 5. Transferpette 2 B 功能测试 : 1. 2. 3. 10 50 µl 1. 2. 3. 5 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 2. 9.10100% 50% 10% 重力测试值, 21.5 C (Z = 1.0032) 测试体积 (µl): 200.0000 指定值 (mg): 199.3620 x 1 200.2000 x 2 199.6000 x 3 199.4900 x 4 199.7000 x 5 199.7000 x 6 199.2900 x 7 199.3500 x 8 199.4100 x 9 199.2000 x 10 199.1900 www.brand.de 1. 计算平均体积 2. 计算准确度 (x _ ) Zµl/mg (V _ ) 21.5 C1013 mbar (hpa), Z = 1.0032 µl/mg V = x Z 从表中查找因子 Z A [%] = V - V spec. 100 V = x + x + x +... + x 19.5 1.00274 1 2 3 10 Z 20 1.00284 n 20.5 1.00294 A [%] = 0.076 V 21 1.00305 200.2 +199.6 +199.49 +... + 199.19 = 1.0032 21.5 1.00316 10 22 1.00327 V 22.5 1.00338 = 199.513 1.0032 23 1.00350 V = 200.1514 23.5 1.00362 24 1.00374 24.5 1.00386 25 1.00399 25.5 1.00412 26 1.00425 温度 C 因子 Z ml/g 18 1.00245 18.5 1.00255 19 1.00264 Vspec. 200.1514-200 A [%] = 100 200 34
计量仪器的监测 3. 计算标准偏差, 是计算偏差系数的必要条件 s = Z (x 1 - x ) 2 + (x 2 - x ) 2 + (x 3 - x ) 2 +... + (x 10 - x ) 2 n - 1 s = 1.0032 (200.2-199.51) 2 + (199.6-199.51) 2 + (199.49-199.51) 2 +... + (199.19-199.51) 2 9 s = 1.0032 0.8393 9 s = 0.306 4. 计算偏差系数 CV [%] = s 100 V CV [%] = 0.306 100 200.1514 CV [%] = 0.153 计算举例的结果是 : 如果仪器不在厂方指定的误差极限之内怎么办? 测试体积 (µl): 200.0000 平均体积 (µl): 200.1514 准确度 A [%] 0.076 偏差系数 CV [%] 0.153 指定准确度 A [%]* 0.600 指定偏差系数 CV [%]* 0.200 注意 : A nominal [%] CV nominal [%] 20 µl 1. SOP 2. 3. * A 20 µl [%] = V nominal V 20 µl A nominal [%] 这支移液器符合指定参数要求 200 µl A 20 µl [%] = 0.5% 20 µl (A [%]) (CV [%]) A 20 µl [%] = 5% 20 µl CV 20 µl 35
计量仪器的监测 校准软件 GLP DIN ISO 9001 例如, 出品的 EASYCAL 校准软件 EASYCAL PC EASYCAL ISO 4787ISO 8655 www.brand.de CD-ROM 使监测更简单 EASYCAL GLP DIN ISO 9001 EASYCAL SOP 移液设备的校准服务 36
Conformity 证书与校准证书 Conformity 证书与校准证书 证书类型 : Conformity EichamtDKD Conformity 认证 'Eichordnung' 法令与 Conformity 认证 1988 8 12 Eichordnung Conformity 校准认证证书 官方校准证书 Eichamt 谁出具 conformity 认证 Conformity Eichordnung Annex 12 Conformity DIN 12 600 Conformity H B Eichamt Conformity Eichordnung conformity Conformity 注意 : conformity DKD 校准认证证书 * (DKD)1977 PTB DIN ISO 9001 ISO/IEC 17 025 DKD DKDDKD DKD DKD(European Cooperation for Accreditation, EA) DKD * 2010 1 1DKD DAkkS Deutsche Akkreditierungsstelle GmbH 性能认证证书 DIN ISO 9001 7 batch numberserial number 批次检验认证证书 个体检验认证证书 37
IVD 指令 IVD 指令 含义与衍生 欧盟的 IVD 指令 如何定义体外诊断医疗设备 (IVD)? 什么是医疗设备? CE 标志 1998 12 7 IVD 2000 6 7 IVD CE (European Directives) (IVD) PD Transferpette HandyStep 38
质量管理 质量管理 的质量管理 简要介绍移液产品以及 BLAU 体积计量仪器的质量管理 (Accuracy) (Coefficient of Variation) DIN ISO 3951 DIN EN ISO 9001 (AQL)0.4 99.6% PTB DIN EN ISO 9001 7 (batch number) (serial number) conformity Eichamt 39
实验器具的清洗 实验设备的清洗 手动或自动清洗 注意 : 擦拭与刷洗方法 浸泡法 20 30 超声波洗涤 仪器自动清洗 玻璃器具 70 C 塑料器具 PSPC 痕量分析中的清洗 1N HCl 1N HNO 3 6 1N HNO 3 1 40
实验器具的清洗 温和洗涤 70 C 有用信息 70 C1N NaOH 1 0.14 µm DURAN 100 C 1.4 µm 70 C DURAN c (NaOH) = 1 mol/l 1 DURAN 100 C3 SCHOTT AG, Mainz 消毒与灭菌 消毒 热抗力 蒸汽灭菌 DIN EN 285 121 C (2 bar) 须遵循以下几点 : PC PC BLAU SILBER 250 C 41
安全信息 安全信息 操作有害物质 DINISO 重要的安全信息 DIN 玻璃制品的使用 42
商标检索 accu-jet, BLAU,, Dispensette, EASYCAL, HandyStep, seripettor, Titrette, Transferpette, 以及这里描绘的标识设计, 都是 GMBH + CO KG, 德国的商标
普兰德 ( 上海 ) 贸易有限公司 789 12 F1 +86 21 6422 2318 +86 21 6422 2268 www.brand.cn.com info@brand.cn.com GMBH + CO KG P.O. Box 1155 97861 Wertheim Germany Tel.: +49 9342808-0 Fax: +499342808-236 E-Mail: info@brand.de Internet: www.brand.de