KWIK-STIK Microorganisms

操作前请仔细阅读使用说明 KWIK-STIK Microorganisms 产品的使用说明 防范与限制 (PRECAUTIONS AND LIMITATIONS) 这类产品仅适用于体外实验 这些设备以及后来在培养基上生长出的微生物属生物危害材料 (biohazard material ) 这些设备含具有活性的微生物, 在一定的环境下可能致病 需使用适当的技术避免任何微生物的暴露和接触 微生物实验室需有相关实验装备, 且有可接收 处理 储存 丢弃生物危害材料的设备 使用这类设备的微生物实验室工作人员必须在生物危害材料的操作过程, 维护, 储存, 丢弃等方面接受过培训, 具备一定经验, 能熟练示范 相关机构和法规对生物危害材料的处理作了规定 各实验室需了解并遵守该生物危害材料处理规定 储存与有效期 (STORAGE AND EXPIRATION) 在原装密封瓶或含干燥剂的袋中的 LYFO DISK KWIK-STIK 和 KWIK-STIK Plus Microorganisms 三类产品应存放在 2 C -8 C 冻干的微生物制剂在有效期内将保持其规格和性能, 有效期在设备标签上标明 若出现以下情况,LYFO DISK, KWIK-STIK and KWIK-STIK Plus Microorganisms 三类产品不能使用 : 储存不正确 ; 有过度暴露在湿热环境中的迹象 ; 已过有效期

KWIK-STIK TM 操作流程 从凹口处撕开产品包装 撕掉标签上的拉片, 将其贴于 初级培养平板或 QC 记录上 捏管帽处安瓿瓶中部 ( 仅一次 ), 使其释放水合液体 垂直握住试管并 轻拍之, 使液体流 入含小球的管底 通过挤捏压碎 小球, 使其与 液体混合 立即将拭 子浸于水 合悬液中 采用适合的生物危害处理法 丢弃 KWIK-STIK TM 挤压并旋转拭子, 接种于初级培 养平板, 接种圈的直径约 25mm 用一无菌接种环在先前接种区 域划线 10-20 次, 促使其分离出 单菌落 立即培养接种好 的初级培养平板 注 : 请严格按照 操作流程 推荐生长条件 和 推荐培养方法 活化标准菌株, 不建议使用实验室自己的方法及文献方法活化标准菌 株, 否则菌种供应商不保证菌株的质量且不提供相应的售后服务 2 1

操作流程 注 : 请严格按照 操作流程 推荐生长条件 和 推荐培养方法 活化标准菌株, 不建议使用实验室自己的方法及文献方法活化标准菌 株, 否则菌种供应商不保证菌株的质量且不提供相应的售后服务 3 1

推荐生长条件 ( 适用于 LYFO DISK 和 KWIK-STIK TM 产品 ) 如何选择最适合的菌种生长条件 1. 最初的生长最好是在非选择性琼脂培养基上 除非特殊情况或特别推荐, 最初的生长一般不考虑液体 培养基 这是由于在液体培养基中获得冻干菌株的 纯种比较困难, 污染所带来的杂菌可能会过度生长, 影响得到目标菌株的纯种 2. 以下列出可供选择的琼脂培养基和相应的生长条件, 供各实验室培养菌种时参考 方法 1 胰蛋白胨大豆琼脂, 非选择性羊血琼脂, 标准计数平板, 或营养琼脂 -----35, 正常环境,24-48 小时 方法 2 非选择性羊血琼脂 ----- 35, 正常环境,24-48 小时 方法 3 巧克力琼脂 ( 含血红蛋白和 NAD)-----35,5%- 10% CO 2 环境,24-48 小时 方法 4 厌氧血琼脂 -----35, 厌氧环境,48-72 小时 ; 部分专性厌氧菌可能需要 5-7 天, 才能充分生长 ; 对于梭菌, 以下新鲜配制的平板也可选用 : 营养琼脂, 胰蛋白胨大豆琼脂和标准平板计数琼脂 ( 标准方 法琼脂 ); 只是需额外培养 24 小时 方法 5 沙保氏葡萄糖 Emmons 琼脂 -----25, 正常环境,2-7 天 ; 沙保氏葡萄糖琼脂 -----25, 正常环境,2-7 天 ; 非选择性羊血琼脂也可选用 ; 以下培养基也可选用 : 营养琼脂, 胰蛋白胨大豆琼 脂, 马铃薯葡萄糖琼脂和标准平板计数琼脂, 只是 需额外培养 24 小时 方法 6 巧克力琼脂 ( 含血红蛋白和 NAD)-----35, 微需 氧环境,48-72 小时 方法 7 Lowenstein Jensen 琼脂或 Middlebrook 琼脂 -----35,5%-10% CO 2 环境或正常环境,7 天 方法 8 缓冲活性炭酵母提取物琼脂 -----35, 正常环境,3-5 天 方法 9 V 琼脂或巧克力琼脂 -----35,5%-10% CO 2 环境,48 小时 方法 10 脑心浸出液肉汤, 胰蛋白胨大豆肉汤, 或 0.85% 生 理盐水均可选用 非选择性羊血琼脂或胰蛋白胨大豆琼脂 -----35, 正常环境,24-48 小时 方法 11 先接种于 MRS 肉汤中 -----35, 正常环境,48 小时 ; 然后接入含羊血的哥伦比亚 CNA 培养基中 -----35,5% CO 2 环境,48 小时 方法 12 马铃薯葡萄糖琼脂 -----45, 正常环境,48-72 小时 方法 13 取一颗冻干颗粒于 10 B 精氨酸肉汤中, 若是 KWIKSTIK 则溶于自带的培养基中 作系列梯度稀释 ( 例如,1:10,1:100,1:1000,1:10000) 在 35 下, 正常环境中培养 精氨酸瓶中液体一旦变成粉 红色 (24-48 小时 ), 转接 0.1 ml 到 A-8 琼脂, 划线 分离 人型支原体,35,5-10%CO 2 环境 ; 解脲支 原体,35, 厌氧环境, 培养 96 个小时 使用显微镜观察平板菌落 方法 14 取一颗冻干颗粒于 SP4 葡萄糖肉汤中, 若是 KWIKSTIK 则溶于自带的培养基中 作系列梯度稀 释 ( 例如,1:2,1:4,1:8,1:16,1:32) 在 35 下, 正常环境中培养 一旦肉汤从红色变成黄色 (1-4 周 ), 转接 0.2 ml 到 SP4 葡萄糖琼脂, 划线分离 不要使用棉质拭子或木质棒 35,CO2 环境中, 可以使用烛缸, 培养 5-15 天 使用显微镜观察平板 菌落 方法 15 4 1

取一颗冻干颗粒于 10 B 精氨酸肉汤中, 若是 KWIKSTIK 则溶于自带的培养基中 作系列梯度稀 释 ( 例如,1:10,1:100,1:1000) 在 35 下, 正常环境中培养 一旦肉汤从黄色变成粉红色 (48-72 个 小时 ), 转接 0.2 ml 到 SP4 葡萄糖琼脂, 划线分离 不要使用棉棒或者木质棒, 将平板至于 35 厌氧环 境中培养 3-6 天 使用显微镜观察平板菌落 方法 16 Leeming Notman 琼脂,30 下, 正常环境中培养 72 个小时 各类菌株的推荐培养方法见下页

以下列出各类菌株的推荐培养方法 : A Acinetobacter sp. 不动杆菌属方法 1 养基 在最初的 48 小时培养期内不要揭开接过种的平皿 Acetobacter sp. 醋杆菌属方法 3 Candida sp. 念珠菌属方法 5 注 :25 培养 3-4 天 Capnocytophaga sp. 噬二氧化碳菌属方法 3 Actinobacillus sp. 放线杆菌属 方法 3 Actinomyces sp. 放线菌属 方法 4 Aerococcus sp. 气球菌属 方法 1 Aeromonas sp. 气单胞菌属 方法 2 注 :Aeromonas hydrophila ( 嗜水气单胞菌 ) 应在 30 培养 Aeromonas salmonicida( 杀鲑气单胞菌 ) 应在 25 培养 Alcaligenes sp. 产碱杆菌 方法 1 Alicyclobacillus sp. 脂环酸芽孢杆菌 方法 12 Alloiococcus sp. Method 2 D Cellulosimicrobium sp. 纤维微细菌 方法 1 Chryseobacterium sp. 金黄杆菌属 方法 1 Citrobacter sp. 柠檬酸杆菌属 方法 1 Cladosporium sp. 枝孢霉属 方法 5 Clostridium sp. 梭菌属 方法 4 注 :Clostridium baratii( 巴氏梭菌 ) 只在厌氧血平板上生长 Corynebacterium sp. 棒杆菌属 方法 1 Cryptococcus sp. 隐球菌属 方法 5 注 :Cryptococcus( 隐球菌 ) 需在 25 培养 Deinococcus sp. 异常球菌属 方法 1 Delftia sp. 代尔夫特菌属 方法 1 Aneurinibacillus sp. 硫胺素芽孢杆菌属 方法 1 E Edwardsiella sp. 爱德华菌属 方法 1 Eggerthella sp. 埃格特菌 方法 4 Aquaspirillum sp. 水螺菌属方法 1 Eikenella sp. 埃肯菌属方法 3 注 :25 培养 6 天 Enterobacter sp. 肠道细菌属方法 1 Arcanobacterium sp. 隐秘杆菌属方法 2 Enterococcus sp. 肠球菌属方法 1 Arthrobacter sp. 节杆菌属方法 1 Erysipelothrix sp. 丹毒丝菌属方法 2 Escherichia coli 大肠杆菌方法 1 B Aspergillus sp. 曲霉菌属 方法 5 Bacillus sp. 芽孢杆菌属 方法 1 注 : 一些芽孢杆菌属经证明在室温下保存后的传代恢复率高于在 2-8 中保存的 F Exiguobacterium sp. 微小杆菌属 方法 1 Finegoldia sp. 芬戈尔德菌属 方法 4 注 : 厌氧环境中培养 72-96 小时 Flavobacterium sp. 产黄菌属 方法 1 Bacteroides sp. 拟杆菌属方法 4 注 :30 培养 注 :Bacteroides ureolyticus( 解尿素拟杆菌 ) 应培养 5 天, 菌落很小 有时 Fluoribacter sp. 荧光杆菌属方法 8 需要多传 1 代以得到足够的供试菌落 Fusarium sp. 镰刀菌属方法 5 Bifidobacterium sp. 双岐杆菌属方法 4 Fusobacterium sp. 梭杆菌属方法 4 Bordetella sp. 博德特氏菌属方法 3 注 : 可能需要一周的培养时间 ; 正常环境也可 G Gardnerella sp. 加德纳氏菌属 方法 9 Gemella sp. 兼性双球菌属 方法 4 注 :Bordetella pertussis ( 百日咳杆菌 ) (MicroBioLogics 目录号 0843) 需添 Geobacillus sp. 地芽孢杆菌属方法 1 加了 15% 去纤维蛋白羊血的包姜氏 (Bordet Gengou) 培养基 注 :Geobacillus stearothemophilus ( 嗜热脂肪地芽孢杆菌 ) 需在 55 培养 Brevibacillus sp. 短芽孢杆菌属方法 1 Geobacillus stearothemophilus,mbl 货号为 0137, 在羊血琼脂上不 Brevundimonas sp. 短波单胞菌属方法 1 能生长 C Brochothrix sp. 环丝菌属 方法 1 Budvicia sp. 布戴约维采菌属 方法 1 Burkholderia sp. 伯克霍尔德菌属 方法 1 Campylobacter sp. 弯曲杆菌属 方法 6 注 : 巧克力琼脂是 Campylobacter jejuni( 空肠弯曲杆菌 ) 的最适普遍生长培 H I K Geotrichum sp. 地丝菌属 方法 5 Haemophilus sp. 嗜血杆菌属 方法 3 Hafnia sp. 哈夫尼菌属 方法 1 Issatchenkia sp. 伊萨酵母属 方法 5 Kingella sp. 金氏杆菌属 方法 2 注 : 在 5-10% CO2 环境下培养 Klebsiella sp. 克雷伯氏菌属 方法 1

L M N O M B L 技术资料 T I B. 0 8 1 Kloeckera sp. 克勒克酵母属 方法 5 P Paecilomyces sp. 拟青霉属 方法 5 Kocuria sp. 库克菌属 方法 1 Paenibacillus sp. 类芽胞杆菌属 方法 1 注 :K. 糠疹应在 25 培养 Parabacteroides 方法 4 Lactobacillus sp. 乳酸杆菌 方法 2 Pasteurella sp. 巴斯德菌属 方法 2 注 :L. acidophilus ( 嗜酸乳杆菌 ), L. casei ( 干酪乳杆菌 ), L. delbrueckii ( 德 Pediococcus sp. 片球菌属 方法 11 氏乳杆菌 ) 和 L.gasseri ( 加氏乳杆菌 ) 需用方法 11 注 :Pediococcus damnosus( 有害片球菌 ) 需从 MRS 肉汤转入 MRS 琼脂上 Lactococcus sp. 乳球菌属 方法 2 次代培养, 需在 25 培养 Leclercia sp. 勒克菌属 方法 1 Penicillium sp. 青霉菌属 方法 5 Legionella sp. 军团菌属 方法 8 Peptoniphilus sp. 嗜胨菌属 方法 4 Listeria sp. 李斯特菌属 方法 1 注 : 在厌氧环境中培养 72-96 小时 Macrococcus sp. 巨型球菌属 方法 1 Peptostreptococcus 消化链球菌属 方法 4 Malassezia sp. 马拉色氏霉菌属 方法 16 sp. Mannheimia sp. 曼海姆菌属 方法 1 Plesiomonas sp. 毗邻单胞菌属 方法 1 Methylobacterium sp. 甲基杆菌属 方法 1 Porphyromonas sp. 卟啉菌属 方法 4 在标准平板计数琼脂上生长最好 注 : 需在厌氧环境培养 5-7 天 Microbacterium sp. 细杆菌属 方法 1 Prevotella sp. 普雷沃菌属 方法 4 注 :30 培养 注 : 需在厌氧环境培养 5-7 天 Micrococcus sp. 微球菌属 方法 1 Propionibacterium 丙酸菌属 方法 4 注 : 胰蛋白胨大豆琼脂或非选择性的羊血琼脂对于货号 0337 和 0689 是最好的生长培养基 sp. 注 : 需在厌氧环境培养 3-5 天 Micromonas sp. 微单胞菌属 方法 4 Proteus sp 变形菌属 方法 1 注 :Micromonas Micros( 微小微单胞菌 ) 需在厌氧环境中培养 5-7 天 Prototheca sp. 原壁菌属 方法 5 Microsporum sp. 小孢菌属 方法 5 Providencia sp. 普罗威登斯菌属 方法 1 注 :Microsporum canis( 犬小孢子菌 ) 在沙保氏葡萄糖琼脂上生长困 Pseudomonas sp. 假单胞菌属 方法 1 难 Moraxella sp. 莫拉菌属 方法 2 注 :Pseudmonas fluorescens( 荧光假单胞菌 ) 应在 25 培养, 假单胞菌属 (MicroBioLogics 目录号 0162) 应在 30 培养 Morganella sp. 摩根 ( 氏 ) 菌属 方法 1 R Ralstonia sp. 雷尔氏菌 方法 1 Mycobacterium sp. 分枝杆菌属 方法 7 Raoultella sp. 拉乌尔菌属 方法 1 注 :Mycobacterium gordonae ( 戈氏分枝杆菌 ), Mycobacterium terrae ( 地分 Rhizopus sp. 根霉菌属 方法 5 枝杆菌 ) 和 Mycobacterium Tuberculosis ( 结核病分枝杆菌 ) 可能需要 Rhodococcus sp. 红球菌属 方法 2 一个月的培养时间 Rhodotorula sp. 红酵母属 方法 5 支原体属 S Saccharomyces sp. 酵母菌属 方法 5 注 : Mycoplasma hominis ( 人型支原体 ) 必须按照方法 13 Mycoplasma orale ( 口腔支原体 ) 必须按照方法 15 注 : 沙保氏葡萄糖琼脂和沙保氏葡萄糖 Emmons 琼脂是 Saccharomyces sp.( 酵母菌属 ) 生长的最适培养基 Mycoplasma pneumoniae( 肺炎支原体 ) 必须按照方法 14. Salmonella sp. 沙门氏菌属 方法 1 Myroides sp. 香味菌属 方法 2 Scopulariopsis sp. 帚霉属 方法 5 Neisseria sp. 奈瑟 ( 氏 ) 菌属 方法 3 Serratia sp. 粘质沙雷菌 方法 1 注 : 巧克力平板是 Neisseria sp.( 奈瑟菌 ) 的最适普遍生长培养基 在最初 Shewanella sp. 希瓦氏菌属 方法 10 的 48 小时培养期内不要揭开接过种的平皿 Shigella sp. 志贺菌属 方法 1 Nocardia sp. 诺卡氏菌属 方法 1 Sordaria sp. 粪壳菌属 方法 5 Novosphingobium sp. 鞘脂单胞菌属 方法 1 注 :Sordaria sp.( 粪壳菌属 ) 在沙保氏葡萄糖 Emmons 琼脂上比在沙保 氏葡萄糖琼脂上更易形成孢子 Ochrobactrum sp. 苍白杆菌属 方法 1 Sphingobacterium sp. 鞘氨醇杆菌属 方法 1 Oligella sp. 寡源杆菌属 方法 2 Sphingomonas sp. 鞘氨醇单胞菌属 方法 1

Staphylococcus sp. 葡萄球菌属 方法 1 注 : 对于金黄色葡萄球菌,MBL 货号为 0158, 对万古霉素的耐受力随着 菌龄 培养基种类 传代数变化而降低, 传菌最适是在脑心浸出液 琼脂中加入 4 mg/l 万古霉素 Stenotrophomonas sp. 寡养单胞菌 方法 1 Streptococcus sp. 链球菌属 方法 2 注 :Streptococcus cricetus( 大鼠链球菌 ) 应在微需氧环境培养 Streptococcus sp.( 链球菌属 )(MicroBioLogics 货号 #0978) 应在 CO2 中生长 Streptomyces sp. 链霉菌属 方法 5 注 :Streptomyces sp.( 链霉菌属 ) 不能在马铃薯葡萄糖琼脂上生长 U V Y 45 C, 培养 72 小时 然后接种至厌氧血平板上培养,45 C,72 小 时, 厌氧环境培养 Trichophyton sp. 发癣菌属 方法 5 Trichosporon sp. 毛孢子菌属 方法 5 Ureaplasma sp. 脲原体属 方法 13 Veillonella sp. 韦荣球菌属 方法 4 Vibrio sp. 弧菌属 方法 10 注 : Vibrio alginolyticus( 溶藻弧菌 ) 应在哥伦比亚血琼脂或胰蛋白胨 大豆琼脂上培养 Virgibacillus sp. 枝芽孢菌属 方法 1 Yarrowia sp. 亚罗酵母属 方法 5 Yersinia sp. 耶尔森菌属 方法 1 T Thermoanaerobacterium sp. 高温厌氧芽孢杆 菌属 方法 4 Z Zygosaccharomyces sp. 接合酵母属方法 5 注 :T. thermosaccharolyticum ( 嗜热细菌热解糖热厌氧杆菌, MicroBioLogics 目录号 0728) 的最初生长培养基应为庖肉培养基