分 析 证 书 经 质 量 检 验 确 定 该 产 品 不 含 脱 氧 核 糖 核 酸 内 切 酶 脱 氧 核 糖 核 酸 外 切 酶 和 核 糖 核 酸 酶 以 人 类 基 因 组 DNA 10 倍 梯 度 稀 释 液 为 模 板, 按 照 25 µl 平 行 反 应 体 系 进 行 实 时 PC

产 品 信 息 Thermo Scientific Maxima SYBR Green/ROX qpcr 预 混 液 (2 ) #K0222 25 µl 体 系 可 进 行 1000 次 反 应 批 号 有 效 期 -20 避 光 储 存 www.thermoscientific.com/onebio 1

分 析 证 书 经 质 量 检 验 确 定 该 产 品 不 含 脱 氧 核 糖 核 酸 内 切 酶 脱 氧 核 糖 核 酸 外 切 酶 和 核 糖 核 酸 酶 以 人 类 基 因 组 DNA 10 倍 梯 度 稀 释 液 为 模 板, 按 照 25 µl 平 行 反 应 体 系 进 行 实 时 PCR 产 品 性 能 检 测, 证 明 线 性 分 辨 率 超 过 5 个 数 量 级 的 动 态 范 围 质 量 授 权 人 : Jurgita Zilinskiene 2

目 录 页 码 产 品 组 分... 4 储 存 条 件... 4 产 品 描 述... 4 检 测 设 计 指 南... 5 模 板... 5 引 物... 5 必 要 对 照... 5 重 要 提 示... 6 实 验 方 案... 6 反 应 体 系 配 制... 6 热 循 环 条 件... 7 可 选 步 骤... 7 疑 难 解 答... 8 参 考 文 献... 9 须 知... 10 3

产 品 组 分 产 品 组 分 #K0221 #K0222 #K0223 25µL 200 次 反 应 25µL 1000 次 反 应 25µL 4000 次 反 应 Maxima SYBR Green/ROX qpcr 预 混 液 (2 ) 2 1.25 ml 10 1.25mL 4 12.5mL 无 核 酸 酶 的 水 2 1.25 ml 10 1.25 ml 2 30mL 储 存 条 件 -20 避 光 长 期 储 存 或 4 避 光 储 存 不 超 过 一 个 月 产 品 描 述 Thermo Scientific Maxima SYBR Green/ROX qpcr 预 混 液 (2 ) 是 一 种 针 对 实 时 定 量 PCR(qPCR) 反 应 和 两 步 法 RT-qPCR 反 应 进 行 优 化 的 通 用 即 用 型 溶 液 预 混 合 液 包 括 经 过 优 化 的 PCR 缓 冲 液 以 及 混 合 在 PCR 缓 冲 液 中 的 Maxima 热 启 动 Taq DNA 聚 合 酶 和 三 磷 酸 脱 氧 核 糖 核 苷 酸 (dntps) 预 混 液 中 含 有 SYBR Green I 染 料, 并 提 供 校 正 染 料 ROX 实 验 时 只 需 要 添 加 模 板 和 引 物 与 经 优 化 的 缓 冲 液 配 合 使 用 的 Maxima 热 启 动 Taq DNA 聚 合 酶 能 确 保 PCR 反 应 的 特 异 性 和 灵 敏 性 SYBR Green I 染 料 使 得 在 不 使 用 序 列 特 异 性 探 针 的 情 况 下 进 行 DNA 检 测 和 分 析 成 为 可 能 脱 氧 三 磷 酸 尿 苷 (dutp) 包 含 在 混 合 液 中, 可 选 择 配 合 使 用 尿 嘧 啶 DNA 糖 基 化 酶 (UDG), 用 于 残 余 污 染 控 制 在 qpcr 反 应 中, 使 用 Maxima SYBR Green/ROX qpcr 预 混 液 能 确 保 基 因 组 模 板 质 粒 模 板 病 毒 模 板 和 cdna 模 板 定 量 的 可 重 复 性 灵 敏 性 和 特 异 性 该 预 混 液 与 需 要 ROX 校 正 染 料 的 实 时 定 量 PCR 仪 配 套 使 用, 如 Applied Biosystems 公 司 的 ABI PRISM 7000 7300 7900HT 以 及 StepOne TM Maxima 热 启 动 Taq DNA 聚 合 酶 是 一 种 经 过 化 学 修 饰 的 Taq DNA 聚 合 酶 通 过 对 氨 基 酸 残 基 添 加 热 稳 定 的 封 闭 基 团, 使 得 该 酶 在 室 温 下 失 活, 避 免 引 物 非 特 异 性 退 火 或 引 物 二 聚 体 的 延 伸, 提 供 更 高 的 DNA 扩 增 特 异 性 该 酶 可 在 室 温 下 进 行 反 应 体 系 的 配 制 Maxima SYBR Green/ROX qpcr 缓 冲 液 针 对 使 用 SYBR Green I 的 qpcr 进 行 了 专 门 优 化 其 中 含 有 氯 化 钾 KC1 和 硫 酸 铵 [(NH 4 ) 2 SO 4 ], 可 提 供 较 高 的 引 物 退 火 特 异 性 该 缓 冲 液 组 分 允 许 在 较 宽 的 氯 化 镁 (MgCl 2 ) 浓 度 范 围 下 进 行 PCR 反 应 因 此, 通 常 不 需 要 对 PCR 反 应 中 的 氯 化 镁 (MgCl 2 ) 浓 度 进 行 优 化 SYBR Green I 是 一 种 荧 光 嵌 入 染 料, 它 与 双 链 DNA 结 合 会 发 出 荧 光 信 号 在 qpcr 反 应 中,DNA 会 不 断 积 累, 荧 光 信 号 会 随 着 DNA 浓 度 的 上 升 而 成 正 比 例 增 加 SYBR Green I 的 激 发 和 发 射 最 大 值 分 别 在 494 nm 和 521 nm 处, 能 与 任 何 qpcr 仪 兼 容 ROX 校 正 染 料 也 含 在 预 混 液 中 在 使 用 能 够 检 测 ROX 的 qpcr 仪 时, 如 Applied Biosystems 的 仪 器,ROX 作 为 荧 光 信 号 标 准 化 内 参, 能 够 校 正 因 移 液 不 准 确 和 荧 光 波 动 而 造 成 的 孔 与 孔 之 间 的 差 异 ROX 的 存 在 不 会 干 扰 使 用 icycler iq 等 其 他 系 统 进 行 的 qpcr 反 应, 因 为 它 不 会 参 与 PCR 反 应, 并 且 具 有 不 同 于 SYBR Green I 的 发 射 光 谱 ( 激 发 / 发 射 最 大 值 分 别 在 580 nm/621 nm 处 ) 脱 氧 三 磷 酸 尿 苷 (dutp) 包 含 在 预 混 液 中, 在 累 积 的 PCR 产 物 中 部 分 替 代 dttp, 以 4

防 止 PCR 反 应 之 间 的 残 余 污 染 (1) UDG 预 处 理 能 够 除 去 先 前 反 应 中 残 留 下 来 的 所 有 含 du 的 扩 增 子 注 :Maxima SYBR Green/ROX qpcr 预 混 液 (2 ) 产 品 中 不 包 含 UDG, 需 要 单 独 购 买 检 测 设 计 指 南 模 板 DNA: 最 多 500 ng 的 基 因 组 DNA 和 10 ng 的 质 粒 DNA 可 用 于 使 用 Maxima SYBR Green/ROX qpcr 预 混 液 的 qpcr 反 应 中 RNA:RT-qPCR 所 用 的 模 板 RNA 应 避 免 DNA 污 染 推 荐 使 用 RNase-free 的 DNase I (EN#0521) 去 除 RNA 样 本 中 的 残 留 DNA 实 验 过 程 始 终 需 要 逆 转 录 酶 - 负 对 照 来 确 保 DNA 的 完 全 去 除 对 于 两 步 法 RT-PCR, 在 反 转 录 中 最 多 使 用 5 μg 总 RNA 用 于 cdna 的 合 成 合 成 的 cdna 第 一 链 转 移 到 另 一 个 PCR 管 作 为 qpcr 的 模 板 加 入 的 cdna( 来 自 反 转 录 过 程 ) 量 不 应 超 过 qpcr 总 体 积 的 10% 对 于 cdna 第 一 链 的 合 成, 推 荐 使 用 我 们 的 Maxima First Strand cdna Synthesis Kit, #K1641 引 物 qpcr 的 引 物 设 计 是 实 现 有 效 扩 增 避 免 引 物 二 聚 体 形 成 的 最 重 要 因 素 之 一 使 用 引 物 设 计 软 件, 如 PrimerExpress 或 Primer3 (frodo.wi.mit.edu), 或 遵 循 下 列 PCR 引 物 设 计 的 一 般 建 议 : GC 含 量 :30-60% 长 度 :18-30 个 核 苷 酸 最 佳 扩 增 子 长 度 :70-150 bp 最 佳 解 链 温 度 (Tm):60 两 个 引 物 之 间 的 Tm 差 不 应 超 过 2 3' 端 最 后 5 个 核 苷 酸 中 的 为 G 或 C 核 苷 酸 避 免 超 过 2 个, 以 降 低 引 物 非 特 异 性 结 合 的 可 能 性 避 免 扩 增 子 中 含 有 二 级 结 构 避 免 引 物 自 身 互 补 引 物 间 的 互 补 和 引 物 中 的 正 向 重 复, 以 防 止 发 夹 结 构 和 引 物 二 聚 体 的 形 成 大 多 数 情 况 下, 每 个 qpcr 反 应 的 最 佳 引 物 浓 度 为 每 条 引 物 0.3 μm 对 于 单 个 引 物, 其 浓 度 最 优 范 围 为 0.05-0.9 μm, 并 且 依 据 使 产 生 扩 增 子 的 Cq 值 最 低 和 引 物 二 聚 体 形 成 ( 如 果 存 在 ) 的 Cq 值 最 高 的 原 则 来 选 择 引 物 浓 度 必 要 对 照 无 模 板 对 照 (NTC) 对 于 评 估 试 剂 污 染 或 引 物 二 聚 体 来 说 是 非 常 重 要 的 NTC 反 应 应 包 含 除 模 板 DNA 以 外 的 所 有 组 分 5

逆 转 录 酶 负 (RT-) 对 照 在 所 有 RT-qPCR 实 验 中 都 很 重 要, 用 来 检 测 RNA 样 品 中 的 DNA 污 染 此 对 照 反 应 应 安 排 在 第 一 链 cdna 合 成 期 间, 包 含 除 RT 酶 以 外 的 所 有 逆 转 录 组 分 之 后, 将 对 照 RT- 反 应 的 样 品 加 入 到 qpcr 反 应 中, 样 品 体 积 不 超 过 qpcr 反 应 体 积 的 10% 重 要 提 示 因 预 混 液 中 含 有 Maxima Hot Start Taq DNA 聚 合 酶, 故 可 在 室 温 下 完 成 反 应 体 系 的 配 制 我 们 建 议 反 应 体 系 为 25 μl 对 于 某 些 特 定 的 仪 器, 按 照 该 仪 器 的 推 荐, 可 使 用 其 他 反 应 体 积 预 混 液 的 制 备, 包 含 了 除 模 板 DNA 以 外 的 所 有 反 应 组 分, 有 助 于 避 免 移 液 错 误, 是 qpcr 反 应 中 很 关 键 的 一 步 PCR 循 环 从 在 95 初 始 变 性 10 分 钟 步 骤 开 始, 活 化 热 启 动 Taq DNA 聚 合 酶 处 理 期 间, 应 尽 可 能 避 免 Maxima SYBR Green/ROX qpcr 预 混 液 (2 ) 溶 液 暴 露 于 光 下, 以 防 荧 光 信 号 强 度 损 失 每 次 qpcr 分 析 需 重 新 调 整 阈 值 当 使 用 Bio-Rad icycler iq 或 MyiQ 时, 可 按 照 仪 器 制 造 商 的 建 议, 在 每 次 实 验 开 始 时 通 过 外 部 孔 间 差 异 系 数 矫 正 板 收 集 孔 间 差 异 系 数 勿 把 荧 光 素 溶 液 加 入 到 反 应 混 合 液 中 孔 间 差 异 系 数 可 用 来 补 偿 系 统 误 差 或 移 液 误 差 实 验 方 案 反 应 体 系 配 置 1. 解 冻 后, 轻 轻 涡 旋 和 短 暂 离 心 所 有 溶 液 2. 室 温 下, 按 照 下 列 组 分 ( 除 了 模 板 DNA) 制 备 反 应 混 合 液 Maxima SYBR Green/ROX qpcr 预 混 液 (2 )* 12.5 μl 正 向 引 物 0.3 μm** 反 向 引 物 0.3 μm** 模 板 DNA 500 ng 无 核 酸 酶 的 水 至 25 μl 总 体 积 25 μl * 提 供 最 终 浓 度 为 2.5 mm 的 MgCl 2 ** 大 多 数 情 况 中, 最 终 引 物 浓 度 为 0.3 μm 最 佳, 但 有 些 个 例 中 可 以 将 浓 度 设 定 在 0.05 μm 到 0.9 μm 范 围 内 3. 完 全 混 合 预 混 液, 分 配 至 PCR 管 或 板 中 6

4. 将 模 板 DNA( 500 ng/ 反 应 ) 加 入 到 含 有 预 混 液 的 单 个 PCR 管 或 板 中 注 意 : 对 于 两 步 法 RT-qPCR, 来 自 RT 反 应 的 cdna 体 积 不 应 超 过 最 终 qpcr 体 积 的 10% 5. 轻 轻 混 合 反 应 液, 防 止 产 生 气 泡 ( 不 要 涡 旋 ) 如 果 必 要, 可 进 行 瞬 时 离 心 气 泡 可 会 干 扰 荧 光 检 测 6. 按 照 下 面 的 建 议, 设 置 qpcr 热 循 环 程 序, 把 样 品 放 进 qpcr 仪 中, 启 动 程 序 热 循 环 条 件 热 循 环 可 按 照 三 步 法 或 两 步 法 方 案 进 行 三 步 法 循 环 方 案 步 骤 温 度, 时 间 循 环 次 数 可 选 :UDG 预 处 理 50 2 min 1 初 始 变 性 95 10 min 1 变 性 95 15 s 退 火 60 30 s 40 延 伸 72 30 s 数 据 采 集 应 在 延 伸 步 骤 进 行 两 部 法 循 环 方 案 步 骤 温 度, 时 间 循 环 次 数 可 选 :UDG 预 处 理 50 2 min 1 初 始 变 性 95 10 min 1 变 性 95 15 s 退 火 / 延 伸 60 60 s 40 数 据 采 集 应 在 延 伸 步 骤 进 行 可 选 步 骤 UDG 预 处 理 如 果 需 要 去 除 残 余 污 染, 在 预 变 性 步 骤 前, 在 50 用 UDG 处 理 2 分 钟 熔 解 曲 线 分 析 可 以 帮 助 确 定 PCR 产 物 的 特 异 性 和 一 致 性 如 果 引 物 设 计 不 理 想, 可 能 在 PCR 中 产 生 引 物 二 聚 体 引 物 二 聚 体 的 解 链 温 度 和 PCR 产 物 的 解 链 温 度 是 不 同 的, 引 物 二 聚 体 的 解 链 温 度 比 PCR 产 物 低, 因 此 可 以 将 引 物 二 聚 体 与 PCR 产 物 区 分 开 来 PCR 产 物 的 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 当 设 计 一 对 新 引 物 时, 建 议 利 用 凝 胶 电 泳 检 验 PCR 产 物 的 特 异 性 因 为 若 序 列 组 成 相 同, 特 异 PCR 产 物 和 引 物 二 聚 体 的 解 链 温 度 可 能 会 相 同 7

疑 难 解 答 问 题 无 扩 增 曲 线 和 凝 胶 电 泳 无 明 显 PCR 产 物 无 扩 增 曲 线, 但 凝 胶 电 泳 可 见 PCR 产 物 无 模 板 对 照 有 扩 增 信 号 可 能 的 原 因 和 解 决 方 案 反 应 混 合 液 中 存 在 PCR 抑 制 剂 再 次 纯 化 模 板 DNA 引 物 设 计 不 理 想 检 查 引 物 设 计, 采 用 专 业 的 引 物 设 计 程 序 或 使 用 经 过 验 证 的 预 设 计 引 物 加 入 过 量 RT 产 物 造 成 的 RT-qPCR 抑 制 加 入 到 qpcr 反 应 中 的 RT 产 物 体 积 不 应 超 过 qpcr 反 应 总 体 积 的 10% 移 液 错 误 或 漏 加 试 剂 重 复 PCR 反 应 ; 检 查 模 板 和 引 物 的 浓 度 ; 确 保 所 有 试 剂 的 储 存 条 件 正 确 ; 重 新 连 续 稀 释 模 板 DNA 或 重 新 合 成 cdna 引 物 降 解 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 检 测 PCR 引 物 是 否 降 解 退 火 温 度 不 是 最 佳 在 3 增 量 范 围 内 优 化 退 火 温 度 UDG 存 在 的 PCR 方 案 中 退 火 温 度 较 低 当 用 常 规 的 UDG 进 行 预 处 理 时,PCR 循 环 期 间 的 温 度 应 总 是 高 于 55 如 果 退 火 温 度 必 须 低 于 55, 请 使 用 热 敏 型 UDG qpcr 仪 器 设 置 不 正 确 检 查 仪 器 设 置 是 否 正 确 ( 染 料 选 择 校 正 染 料 和 滤 光 器 ) 荧 光 检 测 未 激 活 在 热 循 环 程 序 的 的 延 伸 或 退 火 / 延 伸 步 骤 激 活 荧 光 检 测 仪 器 问 题 参 考 仪 器 手 册 的 疑 难 解 答 试 剂 的 DNA 污 染 遵 守 建 议 指 南, 避 免 残 余 物 污 染 丢 弃 使 用 过 的 试 剂, 使 用 新 试 剂 进 行 重 复 实 验 RT-qPCR:RNA 中 含 有 基 因 组 DNA 污 染 在 内 含 子 / 外 显 子 边 界 上 设 计 引 物, 逆 转 录 之 前 用 DNase I,RNase-free (#EN0521) 处 理 RNA 样 品 引 物 二 聚 体 通 过 熔 解 曲 线 判 断 是 否 存 在 引 物 二 聚 体 ( 通 常 引 物 二 聚 体 的 熔 链 温 度 比 扩 增 子 要 低 ) 如 果 确 定 存 在 引 物 二 聚 体 : 按 照 建 议 重 新 设 计 引 物 ( 见 p.5) 或 使 用 经 过 验 证 的 预 设 计 引 物 在 3 增 量 内 通 过 增 加 温 度 来 优 化 退 火 温 度 8

PCR 效 率 大 于 110% PCR 效 率 小 于 90% 标 准 曲 线 较 差 荧 光 强 度 不 均 一 非 特 异 产 物 利 用 熔 解 曲 线 和 凝 胶 电 泳 鉴 定 非 特 异 扩 增 子 优 化 引 物 设 计, 避 免 非 特 异 产 物 或 使 用 经 过 验 证 的 预 设 计 引 物 反 应 混 合 物 中 存 在 PCR 抑 制 剂 再 次 纯 化 模 板 DNA PCR 条 件 不 理 想 检 验 引 物 / 探 针 浓 度, 检 验 qpcr 预 混 合 液 的 储 存 条 件 引 物 设 计 检 验 引 物 设 计, 采 用 引 物 设 计 程 序 或 经 过 验 证 的 预 设 计 引 物 避 免 在 DNA 富 含 二 级 结 构 区 内 进 行 引 物 设 计 模 板 过 量 不 要 超 过 模 板 DNA 的 最 大 推 荐 量 (200 ng DNA/20 μl 反 应 ) 模 板 量 不 理 想 如 果 可 能, 增 加 模 板 量 加 入 RT 反 应 产 物 过 量 造 成 的 RT-qPCR 抑 制 加 入 到 PCR 反 应 中 的 RT 反 应 产 物 的 体 积 不 应 超 过 qpcr 反 应 总 体 积 的 10% qpcr 仪 污 染 按 照 供 应 商 的 说 明, 对 qpcr 仪 进 行 去 污 清 洁 qpcr 仪 校 准 不 佳 按 照 供 应 商 的 说 明, 对 qpcr 仪 进 行 校 准 参 考 文 献 1. Longo, M.C., et al., Use of uracil DNA glycosylase to control carryover contamination in polymerase chain reactions, Gene, 93, 125-128, 1990. 9

须 知 买 方 须 知 : 有 限 许 可 使 用 本 产 品 必 须 遵 守 下 列 一 项 或 多 项 美 国 专 利 和 US: 6,127,155, 5,677,152( 仅 权 利 要 求 1-23) 和 5,773,258 ( 仅 权 利 要 求 1 和 6),5,994,056,6,171,785 之 外 对 应 的 专 利 权 利 要 求 购 买 本 产 品 包 括 一 项 有 限 的 非 转 让 的 免 予 起 诉 权 利, 本 产 品 仅 用 于 买 方 自 己 的 内 部 研 究 不 管 是 含 蓄 地 声 明 还 是 公 开 禁 止, 都 不 得 明 确 表 示 任 何 其 他 专 利 权 利 要 求 书 中 的 权 利, 也 不 能 进 行 任 何 类 型 的 商 业 服 务, 包 括 但 不 限 于 买 方 活 动 结 果 的 收 费 报 告 或 其 他 商 业 考 虑 本 产 品 仅 供 研 究 使 用 按 照 罗 氏 公 司 专 利 进 行 的 诊 断 使 用 需 要 从 罗 氏 公 司 取 得 一 份 单 独 的 许 可 证 书 欲 了 解 更 多 关 于 购 买 许 可 的 信 息, 可 联 系 美 国 ABI 公 司 的 许 可 证 负 责 人 索 取, 地 址 :850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA 本 产 品 根 据 Molecular Probes 公 司 (Molecular Probes, Inc.) 和 Thermo Fisher Scientific 公 司 达 成 的 协 议 提 供, 制 造 使 用 销 售 或 进 口 本 产 品 应 受 一 项 或 多 项 美 国 专 利 及 相 应 的 国 际 专 利 的 制 约, 这 些 专 利 归 Molecular Probes 公 司 (Invitrogen 旗 下 的 全 资 子 公 司 ) 所 有 购 买 本 产 品 意 味 着 赋 予 了 买 方 不 可 转 让 的 权 利, 买 方 仅 能 在 其 进 行 的 研 究 中 使 用 本 产 品 及 产 品 组 分, 而 所 提 到 的 研 究 不 包 括 每 个 测 试 基 础 上 作 为 补 偿 第 三 方 而 进 行 的 测 试 分 析 或 筛 选 服 务 买 方 不 能 销 售 或 转 让 (a) 本 产 品 及 (b) 其 组 分 或 (c) 利 用 本 产 品 或 其 组 分 制 造 的 材 料 给 第 三 方, 也 不 能 基 于 商 业 目 的 使 用 本 产 品 或 其 组 分 或 利 用 本 产 品 或 其 组 分 制 造 的 材 料 所 谓 的 商 业 目 的 指 的 是 一 方 基 于 商 业 考 虑 进 行 的 任 何 活 动, 包 括 但 不 限 于 :(1) 在 生 产 中 使 用 本 产 品 或 其 组 分 ;( 2) 使 用 本 产 品 或 其 组 分 提 供 服 务 信 息 或 数 据 ;(3) 使 用 本 产 品 或 其 组 分 进 行 治 疗 诊 断 或 预 防 ; 或 (4) 转 售 本 产 品 或 其 组 分, 不 管 本 产 品 或 其 组 分 是 否 是 用 于 研 究 转 售 欲 了 解 更 多 关 于 研 究 之 外 的 产 品 购 买 许 可 信 息, 请 联 系 Molecular Probes 公 司 业 务 拓 展 部, 地 址 :29851 Willow Creek Road, Eugene, OR 97402, USA 电 话 :(541) 465-8300, 传 真 :(541) 335-0354 根 据 美 国 犹 他 大 学 研 究 基 金 会 和 / 或 Idaho Technology 公 司 拥 有 的 一 项 或 多 项 美 国 专 利 的 明 确 权 利 要 求 书, 购 买 本 产 品 包 括 购 买 一 份 有 限 的 非 转 让 许 可, 以 按 照 指 定 方 案 使 用 所 附 数 量 的 产 品 不 管 是 含 蓄 声 明 还 是 公 开 禁 止, 都 不 得 明 确 表 示 可 根 据 该 美 国 专 利 的 任 何 权 利 要 求 书 将 此 处 规 定 的 产 品 量 以 外 的 产 品 用 于 任 何 仪 器 或 系 统 买 方 须 知 : 有 限 许 可 本 产 品 中 使 用 校 正 染 料 的 方 法 必 须 遵 守 美 国 专 利 5,928,907( 权 利 号 12-24, 27-28) 及 相 应 的 美 国 以 外 的 专 利 购 买 本 产 品 包 括 一 项 有 限 的 非 转 让 的 免 予 起 诉 权 利, 在 使 用 校 正 染 料 的 方 法 中 使 用 本 产 品 量 仅 用 于 买 方 自 己 的 内 部 研 究 不 管 是 含 蓄 地 声 明 还 是 公 开 禁 止, 都 不 得 明 确 表 示 任 何 其 他 专 利 权 利 要 求 书 中 的 权 利, 也 不 能 进 行 任 何 类 型 的 商 业 服 务, 包 括 但 不 限 于 买 方 活 动 结 果 的 收 费 报 告 或 其 他 商 业 考 虑 本 产 品 仅 供 研 究 使 用 欲 了 解 更 多 关 于 购 买 许 可 的 信 息, 可 联 系 美 国 ABI 公 司 的 许 可 证 负 责 人 索 取, 地 址 :850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA 产 品 使 用 限 制 本 产 品 的 开 发 设 计 及 销 售 专 供 研 究 和 体 外 试 验 使 用 本 产 品 不 得 用 于 诊 断 试 验 或 药 物 开 发, 也 不 适 合 向 人 或 动 物 注 射 了 解 本 产 品 的 材 料 安 全 数 据 表, 请 浏 览 www.thermoscientific.com/onebio 2011 Thermo Fisher Scientific 公 司, 版 权 所 有 SYBR 是 Molecular Probes, Inc. 的 注 册 商 标 ABI PRISM 是 Applied Biosystems 公 司 的 注 册 商 标 StepOne 和 PrimerExpress 是 Applera 公 司 的 注 册 商 标 其 他 商 标 均 归 Thermo Fisher Scientific 公 司 或 其 子 公 司 所 有 10