生 物 大 分 子 层 析 工 艺 中 高 载 量 离 子 交 换 填 料 TOYOPEARL GigaCap TM 系 列 产 品 的 介 绍
主 要 内 容 TOYOPEARL 填 料 的 基 本 性 质 生 物 分 离 中 的 三 步 层 析 工 艺 法 简 介 离 子 交 换 填 料 中 离 子 交 换 官 能 基 团 的 修 饰 TOYOPEARL 离 子 交 换 填 料 的 产 品 链 TOYOPEARL GigaCap 系 列 产 品 TOYOPEARL GigaCap Q-650M TOYOPEARL GigaCap S-650M TOYOSCREEN 层 析 工 艺 研 发 及 筛 选 用 预 装 柱 用 户 评 价 反 馈 信 息 单 克 隆 抗 体 纯 化 中 TOYOPEARL 填 料 的 产 品 链
TOYOPEARL 填 料 的 基 本 性 质 良 好 的 刚 性 ( 填 料 硬 度 ) 可 应 用 于 大 型 制 备 层 析 柱 (2000L), 并 可 获 得 更 高 的 流 速. 填 料 粒 径 分 布 范 围 窄 峰 型 尖 锐, 分 离 效 果 更 好 低 压 降 ( 特 别 适 合 于 填 料 的 装 填 和 大 型 层 析 柱 的 操 作 使 用 ) 良 好 的 化 学, 物 理 稳 定 性 收 缩, 溶 胀 小 耐 高 盐, 有 机 溶 剂, 碱 洗, 酸 洗 及 高 压 灭 菌 无 特 异 性 吸 附 对 生 物 分 子 有 更 好 的 分 离 效 果 和 回 收 率 可 靠 的 填 料 生 物 负 载 (Bioburden): 内 毒 素 水 平 低, 细 菌 计 数 产 品 系 列 齐 全 分 子 尺 寸 排 阻 层 析 填 料 (SEC), 离 子 交 换 层 析 填 料 (IEC), 疏 水 反 应 层 析 填 料 (HIC), 亲 和 层 析 填 料 ( AFC) 填 料 产 能 有 保 证 ( 50,000L/Y) 产 品 保 证 / 高 品 质 可 提 供 GMP 审 查 ( 工 厂 按 ISO-9000 运 行 )
工 业 规 模 生 产 中 TOYOPEARL 及 TSK-GEL 填 料 的 实 际 应 用 举 例 生 物 医 药 Β 牛 乳 糖 (Beta-Galactosidase) 红 细 胞 生 成 素 (EPO) 八 因 子 (Factor VIII) 表 皮 生 长 因 子 (EGF) 生 长 激 素 (r-hgh) 胰 岛 素 (Insulin) β 干 扰 素 (Interferon beta) 白 介 素 II(Interleukin-2) 单 克 隆 抗 体 (Monoclonal Antibodies ) 多 肽 (Peptides) 组 织 血 浆 酶 原 活 化 剂 (Tissue Plasminogen Activator) 乙 肝 疫 苗 和 其 他 疫 苗 (Hepatitis B Vaccine and other vaccines) 合 成 低 聚 核 苷 酸 (Synthetic oligonucleotide) 其 他 工 业 酶, 食 品 添 加 剂 等 氨 基 肽 酶 K(Aminopeptidase K) 胰 肽 酶 阻 断 剂 (Elastase Inhibitor) 低 聚 糖 (Oligosaccharide ) 多 酚 (Polyphenol) 蛋 白 酶 K(Proteinase K) 尿 素 酶 (Urease) 其 他 生 产 规 模 :10 L--- 2,000 L / 层 析 柱
生 物 分 离 中 的 三 步 层 析 工 艺 法 简 介 发 酵 液 填 料 粒 径 的 变 化 捕 获 阶 段 大 型 层 析 柱 粗 分 离, 浓 缩 高 流 速 操 作 大 (100-300 um) 中 间 纯 化 阶 段 去 除 主 要 杂 质 中 (50-150 um) 精 制 阶 段 去 除 含 量 较 低 的 杂 质 及 多 聚 体 小 (20-50 um) 目 标 产 品 ( 纯 度 ; 99.9-99.99%)
三 步 层 析 工 艺 法 对 应 的 TOYOPEARL 离 子 交 换 填 料 Processstep Feedstock Beadsize Process media 200 m Toyopearl MegaCap SP-550EC Capture 100 m Toyopearl GigaCap Q-650M Toyopearl SuperQ-650C Toyopearl DEAE-650C Toyopearl QAE-550C Toyopearl GigaCap S-650M Toyopearl SP-650C Toyopearl SP-550C Toyopearl CM-650C 65 m Toyopearl GigaCap Q-650M Toyopearl SuperQ-650M Toyopearl DEAE-650M Toyopearl GigaCap S-650M Toyopearl SP-650M Toyopearl CM-650M Intermediate Purif ication 35 m Toyopearl SuperQ-650S Toyopearl DEAE-650S Toyopearl SP-650S Toyopearl CM-650S 30 m TSKgel SuperQ-5PW (30) TSKgel DEAE-5PW (30) TSKgel SP-5PW (30) Polishing 20 m TSKgel SuperQ-5PW (20) TSKgel DEAE-5PW (20) TSKgel SP-5PW (20) QC Same selectivity HPLC columns are available for most process media Pure Product 10 m TSKgel SuperQ-5PW7.5mmIDx7.5cm TSKgel DEAE-5PW7.5mmIDx7.5cm TSKgel SP-5PW7.5mmIDx7.5cm TSKgel CM-5PW7.5mmIDx7.5cm
产 品 的 连 续 性 (10 um-200 um)
生 物 分 离 中 的 离 子 交 换 层 析 工 艺 离 子 交 换 填 料 的 应 用 60% 的 层 析 工 艺 会 使 用 到 离 子 交 换 填 料 在 捕 获 这 一 步 可 以 大 量 处 理 进 料 ( 样 品 ) 价 格 ( 投 资 成 本 ) 远 比 疏 水 和 亲 和 填 料 便 宜 工 艺 中 在 位 清 洗 (GIP) 方 便 某 些 时 候 分 离 效 果 比 疏 水 和 亲 和 填 料 差 一 些 三 步 层 析 工 艺 :AIEC-HIC-SEC,AIEC-CIEC-HIC,AIEC-AFC- HIC 层 析 工 艺 中 阴 离 子 交 换 填 料 (AIEC) 更 受 欢 迎 可 以 直 接 从 捕 获 步 骤 进 入 最 后 的 精 制 步 骤 ( 即 可 以 省 去 中 间 一 步 的 纯 化 步 骤 ) 阴 离 子 交 换 填 料 (AIEC) 可 以 有 效 去 除 核 酸 和 内 毒 素 阳 离 子 交 换 填 料 (CIEC ) 可 以 有 效 去 除 细 胞 培 养 液 中 的 宿 主 细 胞 蛋 白 (HCP) 来 源 的 杂 质
填 料 中 离 子 交 换 官 能 团 的 多 种 修 饰 方 式 及 特 征 蛋 白 管 能 团 单 层 修 饰 嫁 接 式 修 饰 网 络 式 修 饰 官 能 团 : 单 层 修 饰 嫁 接 式 修 饰 网 络 式 修 饰 载 量 : 较 低 高 高 填 料 收 缩 性 : 不 明 显 明 显 明 显 柱 压 : 低 较 高 低
TOYOPEARL 离 子 交 换 填 料 的 产 品 链 GigaCap Q-650M 最 高 载 量, BSA (> 162 mg/ml) 适 用 于 各 种 分 子 量 的 蛋 白 捕 获 阶 段 高 分 离 效 果 ( 高 分 辨 率 ) SuperQ-650S,M,C 高 载 量 (-155mg/ml) OligoDNA, sirna 适 用 于 低 分 子 量 和 中 等 分 子 量 的 蛋 白 高 分 离 效 果 QAE-550C 高 载 量 (-78 mg/ml) 适 用 于 低 分 子 量 和 中 等 分 子 量 的 蛋 白 强 吸 附 能 力 DEAE-650S,M,C 载 量 ;-35mg/ml 高 分 离 效 果 适 用 于 中 等 分 子 量 和 高 分 子 量 的 蛋 白 GigaCap S-650M 高 载 量, IgG (>136mg/ml) 适 用 于 IgG 和 各 种 分 子 量 大 小 的 蛋 白 捕 获 阶 段 高 分 离 效 果 ( 高 分 辨 率 ) MegaCap SP-550EC 高 载 量 (-120mg/ml) 高 流 速 适 用 于 多 肽 ( 胰 岛 素 ) 及 小 分 子 量 的 蛋 白 捕 获 阶 段 SP-550C 高 载 量 (-120mg/ml) 多 肽, 小 分 子 量 的 蛋 白 强 吸 附 能 力 SP-650, CM-650S, M, C 载 量 ; -60mg/ml 高 分 离 效 果 适 用 于 中 等 分 子 量 和 高 分 子 量 的 蛋 白 我 们 还 可 以 提 供 粒 径 更 小 (20, 30 um), 可 适 用 于 高 分 离 效 果 的 中 高 压 制 备 型 TSK-GEL PW 系 列 的 散 装 填 料
TOYOPEARL GigaCap 系 列 填 料 的 应 用 血 清, 血 浆 蛋 白 生 产 厂 家 白 蛋 白,ϒ 球 蛋 白, 凝 血 因 子 等 生 物 制 药 企 业 单 克 隆 抗 体, 基 因 重 组 蛋 白, 胰 岛 素 等 诊 断 试 剂 公 司 单 克 隆 抗 体, 基 因 重 组 蛋 白, 酶, 多 肽 等 食 品 工 业 基 因 重 组 蛋 白, 酶, 多 肽 等 合 同 企 业 经 济 型 层 析 工 艺 高 性 价 比 工 艺
TOYOPEARL GigaCap Q-650M 基 本 物 性 主 要 特 点 及 其 他 公 司 同 类 产 品 的 比 较
Toyopearl GigaCap Q-650M 的 基 本 物 性 蛋 白 载 量 ; 牛 血 清 白 蛋 白 (BSA) 静 态 吸 附 载 量 (SBC); >162 g/l ( in 50 mmol/l Tris-HCl (ph 8.5)) GigaCap Q-650M 填 料 的 静 态 吸 附 载 量 高 于 SuperQ-650M 填 料 动 态 吸 附 载 量 (DBC); >150 g/l 离 子 交 换 容 量 0.1 0.2 mequiv./ml 填 料 粒 径 分 布 50 100 um (>80%) 生 物 负 载 (Bioburden) 细 菌 记 数 ;<100 CFU/mL 内 毒 数 ;<10 EU/mL 不 溶 性 物 质 提 取 物 ; < 0.2 % 杂 质 < 6 颗 粒 /100 ml 产 品 规 格 与 其 他 类 型 的 Toyopearl 填 料 相 似. 碱 性 稳 定 性 与 其 他 阴 离 子 交 换 填 料 相 似 至 少 可 以 在 0.5 N NaOH 中 保 存 两 周 而 无 变 化
主 要 特 点 及 其 他 公 司 同 类 产 品 的 比 较 GigaCap Q-650M 填 料 具 有 更 好 的 机 械 稳 定 性, 更 高 的 蛋 白 载 量 和 更 好 的 选 择 性, 洗 脱 峰 型 尖 锐. 静 态 吸 附 载 量 (SBC);BSA > 162 g/l ( 实 测 结 果 ; 191 g/l) 动 态 吸 附 载 量 (DBC);BSA > 150 g/l ( 实 测 结 果 ;175 g/l) Q Sepharose XL (GE) 多 交 联 琼 脂 糖 类 填 料 相 似 的 载 量 和 选 择 性 缺 点 : 由 于 填 料 基 质 较 软, 不 适 用 于 使 用 大 型 层 析 制 备 柱, 同 样 也 不 适 于 在 高 流 速 下 使 用. Capto Q (GE) 高 多 交 联 琼 脂 糖 类 填 料 : 较 Q Sepharose XL 的 刚 性 好, 硬 度 与 Toyopearl 填 料 相 似 载 量 与 GigaCap Q-650M 填 料 相 似 缺 点 : 由 于 填 料 粒 径 分 布 范 围 较 宽, 填 料 的 分 离 效 果 稍 差. 由 于 质 量 迁 移 较 低, 洗 脱 峰 形 展 宽. 这 可 能 与 填 料 上 官 能 团 的 空 间 结 构 有 关.
对 牛 血 清 白 蛋 白 (BSA) 的 动 态 吸 附 载 量 (DBC) 离 子 交 换 填 料 粒 径 分 布 离 子 交 换 容 量 DBC (BSA) 回 收 率 (μm) (meq/ml) (mg/ml-gel) (%) Toyopearl GigaCap Q-650M 50-100 0.16 175 98 Toyopearl SuperQ-650M 50-150 0.12 149 98 Toyopearl QAE-550C 50-150 0.33 70 98 Q Sepharose XL 50-150 NA 220 96 Capto Q 90 NA 166 98 Fractogel TMAE HiCap 40-90 NA 138 95 Eluent;50 mmol/l Tris-HCl (ph 8.5) Flow rate; 212 cm/hr, DBC calculated by capacity at 10%Breakthrough curve.
动 态 吸 附 载 量 (DBC) 与 流 速 的 依 存 关 系 对 牛 血 清 白 蛋 白 (BSA) 的 动 态 吸 附 载 量 (DBC) (g/l-gel) 线 性 流 速 212 cm/hr 500 cm/hr 800 cm/hr 1060 cm/hr GigaCap Q-650M 175 168 164 NA Capto Q 171 161 155 NA Fractogel TMAE Hicap(M) 138 NA 120* 106 *: 测 定 Fractogel TMAE Hicap(M) 填 料 对 牛 血 清 白 蛋 白 的 动 态 吸 附 载 量 时, 使 用 了 636 cm/hr 的 线 性 流 速 ( 代 替 500 cm/hr 的 线 性 速 度 ). 数 据 表 明 : GigaCap Q-650M 填 料 在 高 流 速 下 具 有 高 的 动 态 吸 附 载 量. Fractogel TMAE Hicap (M) 填 料 在 高 流 速 下 使 用 时 动 态 吸 附 载 量 相 对 较 低.
对 多 种 蛋 白 静 态 吸 附 载 量 (SBC) 的 比 较 大 豆 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 (Mw: 22KDa) (pi 4.5) 静 态 吸 附 载 量 (g/l-gel) 牛 血 清 白 蛋 白 (Mw: 66KDa) (pi 4.9) 伽 玛 球 蛋 白 (Mw: 160KDa) (pi 5.8-7.3) 甲 状 腺 球 蛋 白 (Mw: 660KDa) (pi 4.5) GigaCap Q-650M 202 210 138 95 Capto Q NA 236 139 89 Q-Sepharose XL NA NA 127 71 吸 附 条 件 (Binding conditions); 大 豆 胰 蛋 白 酶 抑 制 剂 (STI); 15 mmol/l Tris-HCl (ph 9.0) 牛 血 清 白 蛋 白 (BSA); 15 mmol/l Tris-HCl (ph 9.0) + 15 mmol/l NaCl 伽 玛 球 蛋 白 (IgG); 15 mmol/l Tris-HCl (ph 8.7) 甲 状 腺 球 蛋 白 (Thy); 15 mmol/l Tris-HCl (ph 8.7) + 100 mmol/l NaCl 对 蛋 白 的 静 态 吸 附 载 量 是 会 随 着 蛋 白 分 子 量 大 小, 淋 洗 液 的 ph 值 及 离 子 强 度 ( 如 盐 浓 度 ) 变 化 而 变 化 的.
蛋 白 吸 附 载 量 与 蛋 白 分 子 量 大 小 的 相 关 关 系 BSA (MW: 66,000) IgG (MW: 160,000) Thyroglobulin (MW: 660,000) GigaCap Q-650M SBC 191 g/l 138 g/l 95 g/l DBC 175 g/l 108 g/l 49 g/l Capto Q SBC 179 g/l 139 g/l 89 g/l DBC 166 g/l 95 g/l 7 g/l 动 态 吸 附 载 量 (DBC) 测 定 所 使 用 的 线 性 流 速 为 212 cm/hr. 随 着 蛋 白 分 子 量 的 增 大, 不 同 填 料 的 吸 附 载 量 (SBC&DBC) 的 差 别 趋 于 明 显. 对 于 大 分 子 量 的 甲 状 腺 球 蛋 白,CaptoQ 填 料 的 静 态 吸 附 载 量 (SBC) 虽 然 较 高, 但 动 态 吸 附 载 量 (DBC) 很 低.
mv 不 同 填 料 的 分 离 选 择 性 及 分 离 效 果 的 比 较 250 200 1. Transferrin 2. Ovalbumin 3. Trypsin Inhibitor Q Sepharose XL Rs TF/OV OV/TI GigaCap Q-650M 1.18 1.34 SuperQ-650M 1.11 1.31 150 Capto Q QAE-550C 1.16 1.45 Capto Q 0.99 1.19 Q Sepharose XL 1.12 1.34 GigaCap Q-650M 100 50 1 2 3 SuperQ-650M QAE-550C 0 0 10 20 30 40 50 60 Elution time (min) GigaCap Q-650M 填 料 同 时 具 有 较 高 的 载 量 和 较 高 的 分 离 效 果.
mv 牛 血 清 白 蛋 白 (BSA) 阶 段 性 洗 脱 的 峰 宽 比 较 195 145 GigaCap Q-650M Capto Q 95 45-5 150 170 190 210 230 Time(min.) Elution started GigaCap Q-650M 填 料 的 洗 脱 峰 峰 形 较 Capto Q 填 料 的 洗 脱 峰 峰 形 尖 锐 (>2 倍 ), 这 表 明 在 工 业 层 析 工 艺 中 使 用 GigaCap Q-650M 填 料 时 可 以 获 得 更 高 的 生 产 效 率. 对 于 IgG 或 更 高 分 子 量 的 蛋 白,GigaCap Q-650M 填 料 可 以 获 得 更 为 尖 锐 的 洗 脱 峰.
SBC[mg/mL-gel] 淋 洗 液 中 盐 浓 度 与 填 料 对 高 分 子 量 蛋 白 ( 甲 状 腺 球 蛋 白 ) 的 静 态 吸 附 载 量 之 关 系 120.0 100.0 GigaCap Q Capto Q Q Sepharose XL 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 0 10 20 30 40 50 Conductivity [ms/cm] Comparison of SBC (protein : Thyroglobulin) 比 起 不 含 盐 的 淋 洗 液,GigaCap Q-650M 填 料 在 下 列 条 件 下 [ 0.1-0.15 mol/l in 15 mmol/l Tris-HCl (ph 8.7)], 对 蛋 白 的 静 态 吸 附 载 量 更 高. 对 大 分 子 量 的 蛋 白, 当 缓 冲 液 中 含 有 0.1 mol/l 的 盐 时, 有 利 于 加 强 蛋 白 与 GigaCap Q-650M 和 其 他 离 子 交 换 填 料 间 的 吸 附 力.
Pressure drop (MPa) 不 同 离 子 交 换 填 料 压 降 与 流 速 的 关 系 ( 填 料 刚 性 比 较 ) 0.30 0.25 SuperQ-650M Capto Q Q-Sepharose XL GigaCap Q-650M 0.20 0.15 0.10 GigaCap S-650M 填 料 有 更 低 的 压 降, 可 以 使 用 于 大 型 层 析 柱 并 获 得 高 流 速. 0.05 当 线 性 流 速 达 到 600 cm/hr 时,Q-Sepharose XL 填 料 将 可 能 会 发 生 柱 床 蹋 陷 的 现 象. 这 限 制 了 此 种 填 料 使 用 于 大 型 层 析 柱 的 可 能 性. 0.00 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 Linear velocity (cm/hr)
Degradation rate GigaCap Q-650M 填 料 碱 性 条 件 下 的 保 存 稳 定 性 1.20 1.00 0.80 0.60 0.40 GigaCap Q (0.1N) GigaCap Q (0.5N) GigaCap Q (1.0N) 0.20 0.00 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Storage(days) 当 GigaCap Q 填 料 保 存 在 0.1 N, 0.5 N, 1.0 N 的 NaOH 中 35 天 后, 填 料 的 载 量 分 别 会 下 降 5 %, 20 %, 和 29 %.
TOYOPEARL GigaCap S-650M 基 本 物 性 主 要 特 点 及 与 其 他 公 司 同 类 产 品 的 比 较
TOYOPEARL GigaCap S-650M 的 基 本 物 性 对 IgG 的 吸 附 载 量 静 态 吸 附 载 量 (SBC): 136 g/l 176 g/l 动 态 吸 附 载 量 (DBC): 122 g/l 165 g/l 离 子 交 换 容 量 0.1 0.2 mequiv./ml 填 料 粒 径 分 布 50 100 um (>=80%) 生 物 负 载 (Bioburden) 细 菌 计 数 : <= 100 CFU/mL 内 毒 素 : <=10 EU/mL 不 溶 性 物 质 提 取 物 :<=0.2 % 杂 质 <= 6 颗 粒 /100 ml 产 品 规 格 与 其 他 类 型 的 Toyopearl 填 料 相 似 ( 除 了 对 蛋 白 有 更 高 的 吸 附 载 量 )
主 要 特 点 及 与 其 他 公 司 同 类 产 品 的 比 较 TOYOPEARL GigaCap S-650M 填 料 具 有 良 好 的 选 择 性 和 刚 性, 对 IgG 具 有 更 高 的 载 量. 动 态 吸 附 载 量 (DBC) : IgG(140 g/l); lysozyme(190 g/l): insulin(130 g/l) SP Sepharose XL (GE) 多 交 联 琼 脂 糖 类 填 料 相 似 的 载 量 和 选 择 性 缺 点 : 由 于 刚 性 较 弱, 不 可 以 在 大 型 层 析 制 备 柱 或 柱 床 较 高 的 层 析 柱 条 件 下 进 行 高 流 速 的 操 作. Capto S (GE) 高 多 交 联 琼 脂 糖 类 填 料, 克 服 了 SP Sepharose XL 填 料 刚 性 差 的 弱 点 相 似 的 选 择 性 和 刚 性 缺 点 : 由 于 填 料 粒 径 分 布 范 围 宽, 致 使 峰 型 展 宽 ; 对 CHOP 表 达 的 单 克 隆 抗 体 选 择 性 较 差. Fractogel SE HiCap (Merck) 相 似 的 填 料 基 质 和 刚 性 缺 点 : 载 量 仅 为 GigaCap S-650M 填 料 的 一 半 ; 选 择 性 较 差 使 用 含 盐 的 淋 洗 液 时 填 料 易 发 生 收 缩, 限 制 了 其 在 大 型 层 析 制 备 柱 或 柱 床 较 高 的 层 析 柱 条 件 下 的 使 用.
单 克 隆 抗 体 的 层 析 工 艺 简 介 Protein A 亲 和 层 析 工 艺 常 用 工 艺 (70% 单 克 隆 抗 体 层 析 工 艺 采 用 ProteinA 亲 和 层 析 ) 优 点 ; 在 捕 获 阶 段 便 可 获 得 高 纯 度 的 单 克 隆 抗 体 产 品. 缺 点 : 填 料 昂 贵 ; 亲 和 填 料 不 是 很 稳 定 Protein A 亲 和 填 料 的 价 格 :;$5,000 12,000/L 层 析 工 艺 举 例 : AFC-CIEC-AIEC, AFC-HIC-CIEC 非 Protein A 亲 和 层 析 工 艺 优 点 : 填 料 投 资 成 本 低 ; 填 料 碱 洗 稳 定 IEC/HIC 填 料 的 价 格 : $500 2,000/L 缺 点 : 需 要 多 步 才 能 获 得 高 纯 度 的 单 克 隆 抗 体 产 品 层 析 工 艺 举 例 :CIEC-AIEC-HIC, CIEC-HIC-AIEC-SEC, CIEC-HAC- HIC, HCIC-CIEC-HIC-HAC 备 注 CHO 宿 主 蛋 白 (CHOP) 和 单 克 隆 抗 体 的 多 聚 体 需 要 使 用 IEC 和 HIC 层 析 填 料 去 除 其 他 还 有 HCIC 类 ( 混 合 模 式 ; Pall), 羟 基 磷 灰 石 (Bio-Rad) 等 填 料 可 以 应 用 在 单 克 隆 抗 体 的 纯 化 工 艺 中
对 ϒ 球 蛋 白 (ϒ IgG) 的 动 态 吸 附 载 量 (DBC) 离 子 交 换 填 料 粒 径 分 布 离 子 交 换 容 量 动 态 吸 附 载 量 (IgG) 回 收 率 (μm) (meq/ml) (mg/ml-gel) (%) TOYOPEARL GigaCap S-650M 50-100 0.16 145 98 TOYOPEARL SP650C 50-150 0.12 12 98 TOYOPEARL SP550C 50-150 0.13 14 98 SP Sepharose XL 50-150 0.17 140 98 Capto S (90) 0.13 138 NA Fractogel SE HiCap 40-90 0.08 68 97 Flow rate; 212 cm/hr, DBC was calculated by 10 % height of Breakthrough curve.
动 态 吸 附 载 量 (DBC) 与 流 速 的 依 存 关 系 动 态 吸 附 栽 量 (DBC) (human IgG, g/l) 线 性 流 速 212 cm/hr 424 cm/hr 636 cm/hr 1060 cm/hr GigaCap S-650M 145 114 99 75 SP Sepharose XL 138 NA 108 85 SP Sepharose FF 21 NA 8 5 Fractogel SE Hicap(M) 69 NA 39 27 GigaCap S-650M 和 SP Sepharose XL 填 料 在 高 于 600 cm/hr 的 线 性 流 速 下 仍 然 可 以 获 得 很 高 的 载 量, 然 而 对 于 SP Sepharose XL 填 料 来 讲 在 大 型 的 层 析 柱 下 是 很 难 获 得 如 此 高 的 线 性 流 速 的, 其 他 填 料 在 高 线 性 流 速 下 对 IgG 的 动 态 吸 附 载 量 是 很 低 的.
mau 分 离 选 择 性 和 分 离 效 果 比 较 (1) 160 Cyto C Lysozyme 120 RNase A 80 GigaCap S-650M 40 0 SP Sepharose XL 1. リボヌクレアーゼA 2. シトクロムc Fractogel SE HiCap 3. リゾチーム 0 10 20 30 40 Retention time[min.] GigaCap S-650M 填 料 的 分 离 选 择 性 与 SP Sepharose XL 填 料 相 似.
Peak(mV) Elu. B (%) 分 离 选 择 性 和 分 离 效 果 比 较 (2) 490 Lysozyme 390 Cyt. c RNase 290 SP Seph XL 190 Capto S 90 GigaCap S-650M -10 0 5 10 15 20 25 30 35 40 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Elu. Time (min) GigaCap S-650M 填 料 的 洗 脱 峰 型 较 为 尖 锐.
圧 損 [MPa] Pressure drop (Mpa) 不 同 离 子 交 换 填 料 压 降 与 流 速 的 关 系 ( 填 料 刚 性 比 较 ) 0.4 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 SP Sepharose XL 0 500 1000 1500 線 速 [cm/h] Linear velocity (ch/hr) SP-650M GigaCap S-650M 在 这 一 部 分, 琼 脂 糖 凝 胶 基 质 的 填 料 有 很 大 的 背 压, 这 最 终 会 造 成 层 析 柱 柱 床 塌 陷 层 析 柱 尺 寸 :22 mmid x 20 cm GigaCap S-650M 填 料 有 最 低 的 压 降, 可 使 用 于 大 型 层 析 制 备 柱, 并 可 以 获 得 更 大 的 操 作 流 速.
GigaCap S-650M 填 料 碱 性 条 件 下 的 保 存 稳 定 性 使 用 1.0 N NaOH 保 存 周 0 1 周 3 周 5 周 离 子 交 换 容 量 meq/ml 0.159 0.157 0.158 0.156 动 态 吸 附 载 量 (DBC) (IgG, 10%breakthrough) mg/mlgel 143 144 140 135 IgG 的 回 收 率 % 99 101 100 99 GigaCap S-650M 可 以 保 存 于 1.0 N 的 NaOH 中 一 个 月 而 保 持 稳 定, 对 蛋 白 的 离 子 交 换 容 量 和 载 量 均 可 保 持 不 变.
mv 对 溶 菌 酶 及 ϒ 球 蛋 白 阶 段 式 洗 脱 时 的 峰 宽 比 较 Protein recovery curve 1200 1000 800 600 400 200 0 75-200 125 175 225 Time(min.) GigaCap S-650M(Lysozyme) Capto S(Lysozyme) GigaCap S-650M(hIgG) Capto S(hIgG) GigaCap S-650M 填 料 对 ϒ 球 蛋 白 阶 段 式 洗 脱 时 峰 形 更 尖 锐, 峰 宽 较 窄.
ToyoScreen TM 层 析 工 艺 研 发 及 筛 选 用 预 装 柱 方 便 选 择 最 有 效 的 层 析 工 艺 填 料 ( 填 料 筛 选 ) 方 便 进 行 选 择 性, 纯 度, 回 收 率, 载 量 的 确 认 和 洗 脱 条 件 的 优 化 ( 条 件 优 化 ) 有 阴 离 子 交 换, 阳 离 子 交 换, 疏 水 和 亲 和 填 料 的 套 装 及 各 种 填 料 的 单 一 包 装 可 提 供 1 ml 和 5 ml 两 种 包 装 规 格 可 以 与 HPLC 和 / 或 Bio-LC 系 统 相 连 ( 如 :AKTA Prime 系 统 )
用 户 评 价 反 馈 信 息 即 使 从 细 胞 培 养 液 中 直 接 进 行 单 克 隆 抗 体 的 纯 化, GigaCap S-650M 填 料 也 会 具 有 更 高 的 载 量, 对 CHOP 杂 质 具 有 很 好 的 选 择 性, 峰 形 尖 锐 ( 美 国 客 户 ) 即 使 在 很 高 的 流 速 下,GigaCap S-650M 填 料 对 单 克 隆 抗 体 具 有 更 高 的 载 量, 可 以 替 代 Protein-A 亲 和 填 料. ( 美 国 客 户 ) 在 市 场 上 可 以 获 得 的 7 种 离 子 交 换 填 料 中 ( 如 : SP Sepharose XL, Capto S, Fractogels 等 ), GigaCap S-650M 填 料 具 有 更 高 的 吸 附 载 量. ( 欧 洲 客 户 ) 对 于 小 分 子 物 质 如 胰 岛 素,GigaCap S-650M 填 料 同 样 具 有 很 高 的 载 量. ( 欧 洲 客 户 ) 胰 岛 素 层 析 工 艺 中 的 注 意 点 GigaCap S-650M 具 有 较 小 的 填 料 粒 径 (50-100 微 米 ), 即 使 与 专 门 为 胰 岛 素 纯 化 工 艺 中 用 于 捕 获 阶 段 而 设 计 的 TOYOPEARL MegaCap SP-II 550EC 离 子 交 换 填 料 相 比 也 具 有 更 高 的 吸 附 载 量. 由 于 MegaCap SP-II 550 EC 填 料 粒 子 径 更 大 (100-300 微 米 ), 其 更 容 易 操 作, 更 可 以 使 用 在 大 型 层 析 制 备 工 艺 中 的 捕 获 阶 段, 可 获 得 更 高 的 线 性 流 速. 如 果 需 要 获 得 更 高 的 分 离 效 果, 也 可 以 使 用 粒 径 更 小 (20, 30 微 米 ), 分 辨 率 更 高 的 TSK-GEL PW 类 型 的 散 装 离 子 交 换 填 料.
Attention to TOYOPEARL GigaCap Series Different type of functional group from SuperQ type Different spacer/extender from SuperQ-650M Capture resin but with smaller particle size Capture resin has 100-300 micron (i.e. EC grade), but GigaCap Q- 650M has relatively smaller 50-100 micron particles. Described as 650M grade, but the actual particle size on GigaCap Q-650M has slightly larger than regular M grade (40-90 um), which enables to operate at higher flow rate with lower pressure drop. Packed-bed use only GigaCap Q-650M is not applicable to fluidized bed nor suspended resin chromatography, due to smaller particles and light density of the resin. Explain to customers that this resin performs high chromatographic properties on packed column conditions. The product label and Handling Manual describe as PACKED BED USE ONLY, and/or applied to packed column use.
单 克 隆 抗 体 纯 化 中 TOYOPEARL 填 料 的 产 品 链 离 子 交 换 填 料 GigaCap S-650M 在 TOYOPEARL 系 列 填 料 中 对 1gG 有 最 高 的 载 量.. 疏 水 反 应 填 料 疏 水 填 料 对 单 克 隆 抗 体 及 其 多 聚 体 有 很 好 的 分 离 效 果. PPG-600M 对 单 克 隆 抗 体 有 中 等 强 度 的 吸 附 能 力 和 较 高 的 回 收 率, 这 可 以 大 大 提 高 生 产 效 率 ( 纯 化 工 艺 经 济 性 ). Butyl-600M 对 单 克 隆 抗 体 有 更 高 的 吸 附 载 量, 适 用 于 低 疏 水 性 单 克 隆 抗 体 的 纯 化 制 备. Phenyl-600M 对 单 克 隆 抗 体 有 更 高 的 吸 附 载 量 和 更 高 的 回 收 率.