喘 净 威 -- 重 筑 猪 群 呼 吸 道 防 线 呼 吸 系 统 疾 病 是 当 前 困 扰 我 国 规 模 猪 场, 尤 其 保 育 育 肥 猪 群 最 为 严 重 的 一 类 疾 病 其 病 原 多 样 传 播 迅 速 发 病 率 高 病 情 复 杂 损 失 严 重 控 制 呼 吸 道 疾 病 是 一 项 系 统 工 程, 硬 件 设 施 的 改 善 是 基 础, 还 猪 一 个 健 康 完 整 有 自 我 防 护 能 力 的 呼 吸 道 则 更 为 关 键 一 猪 呼 吸 系 统 猪 呼 吸 道 分 上 下 两 部 分 : 上 呼 吸 道 包 括 鼻 腔 和 咽 喉, 行 过 滤 及 润 化 功 能 ; 下 呼 吸 道 包 括 气 管 支 气 管 及 肺 脏 气 管 粘 膜 表 面 附 有 纤 毛, 纤 毛 具 有 定 向 摆 动 功 能, 可 将 阻 挡 的 灰 尘 病 毒 等 异 物 排 出 体 外 纤 毛 一 旦 被 破 坏, 会 导 致 物 理 过 滤 功 能 的 下 降, 增 加 进 入 肺 脏 的 致 病 因 子 数 量, 加 重 肺 脏 防 御 负 担, 增 大 疾 病 感 染 风 险 二 猪 呼 吸 系 统 疾 病 的 危 害 等 级 致 猪 呼 吸 道 疾 病 的 病 原 感 染 无 特 定 顺 序, 感 染 的 发 生 取 决 于 猪 群 免 疫 状 态 及 环 境 中 的 病 原 量 但 病 原 的 危 害 性 却 有 明 显 差 异 : 猪 肺 炎 支 原 体 单 独 感 染 仅 致 干 咳, 即 使 肺 部 有 明 显 病 变 也 不 会 致 全 身 症 状 ; 伪 狂 犬 病 毒 单 独 感 染 即 可 造 成 肺 脏 大 面 积 出 血, 危 及 生 命 ; 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 病 毒 感 染 4 周 左 右 即 可 恢 复, 并 不 明 显 损 伤 肺 脏, 但 是 混 感 猪 肺 炎 支 原 体, 则 引 起 致 死 性 的 肺 炎 这 主 要 是 猪 肺 炎 支 原 体 感 染 致 肺 脏 广 泛 的 非 特 异 性 炎 症, 肺 脏 处 于 过 敏 状 态, 病 毒 的 感 染 随 即 将 局 部 炎 症 发 展 到 全 身 因 此 猪 肺 炎 支 原 体 是 猪 严 重 呼 吸 道 疾 病 的 催 化 剂, 也 被 称 作 呼 吸 系 统 疾 病 的 钥 匙 病 控 制 猪 场 呼 吸 道 病 需 重 视 猪 肺 炎 支 原 体 的 防 控
三 猪 支 原 体 肺 炎 1 病 原 猪 肺 炎 支 原 体 是 一 类 大 小 介 于 细 菌 与 病 毒 之 间 的 微 生 物, 无 细 胞 壁, 因 此 对 青 霉 素 磺 胺 类 药 物 不 敏 感 但 对 渗 透 压 敏 感 支 原 体 在 环 境 中 抵 抗 力 较 强, 猪 的 鼻 腔 分 泌 液 中 可 分 离 到, 但 易 受 猪 鼻 支 原 体 污 染 和 抗 生 素 的 影 响 以 及 对 营 养 要 求 比 较 苛 刻, 故 分 离 和 培 养 比 较 困 难 2 流 行 病 学 特 征 本 病 呈 世 界 范 围 分 布, 仅 丹 麦 等 少 数 国 家 实 现 了 净 化, 国 内 猪 场 感 染 率 高 达 100% 由 于 支 原 体 一 旦 感 染, 难 以 清 除, 因 此 确 诊 1 头 阳 性 母 猪 即 可 宣 告 整 场 属 高 危 猪 群 100 100 95 发 病 率 ( % ) 80 60 40 47 80 80 40 60 50 56 60 60 60 50 70 70 20 0 澳 大 利 亚 比 利 时 加 拿 大 捷 克 法 国 德 国 荷 兰 匈 牙 利 爱 尔 兰 挪 威 西 班 牙 瑞 典 英 国 中 国 美 国 图 1. 猪 肺 炎 支 原 体 在 世 界 各 国 的 流 行 情 况 -- 摘 自 Thacker EL Mycoplasmal diseases 产 房 仔 猪 在 15 日 龄 后 多 发, 主 要 通 过 与 母 猪 鼻 对 鼻 的 接 触 或 者 飞 沫 感 染 ; 约 20% 的 仔 猪 在 断 奶 前 后 感 染, 到 育 肥 前 期 达 到 发 病 高 峰, 部 分 猪 只 在 40 日 龄 左 右 有 明 显 的 干 咳 并 渐 进 性 消 瘦, 疾 病 进 程 缓 慢 者 要 到 17 周 龄 左 右 才 表 现 咳 嗽 症 状, 此 时 多 与 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 病 毒 猪 圆 环 病 毒 等 混 合 感 染 形 成 猪 呼 吸 道 疾 病 综 合 征 (PRDC) 猪 感 染 肺 炎 支 原 体 可 致 饲 料 转 化 率 降 低 10-25%, 日 增 重 减 少 17.4%, 推 迟 出 栏 至 少 30 天, 给 猪 场 带 来 的 经 济 损 失 超 过 10% 猪 肺 炎 支 原 体 的 净 化 比 较 困 难, 剖 腹 产 早 期 隔 离 断 奶 空 气 过 滤 舍 饲 养 等 方 式 不 适 用 于 经 济 动 物, 且 由 于 病 原 在 环 境 中 广 泛 存 在, 飞 沫 即 可 传 播, 难 以 保 证 生 长 阶 段 不 被 感 染 3 猪 肺 炎 支 原 体 的 致 病 机 理 猪 肺 炎 支 原 体 表 面 有 粘 附 素 蛋 白 P97, 可 致 纤 毛 凝 结 成 束 脱 落 丧 失 摆 动 功 能 脱 落 的 纤 毛 混 杂 吸 入 的 病 原 不 断 进 入 肺 脏, 导 致 肺 脏 发 生 炎 症 反 应, 进 而 引 起 支 气 管 扩 张 困 难, 迫 使 猪 增 加 呼 吸 频 率, 表 现 气 喘 症 状 主 要 病 变 在 肺 脏 尖 叶 及 心 叶, 呈 明 显 的 对 虾 样 病 变 图 2-3. 猪 肺 炎 支 原 体 引 起 肺 虾 肉 样 病 变
支 气 管 扫 描 电 镜 图 图 4. 正 常 纤 毛 图 5. 支 原 体 感 染 引 起 纤 毛 损 伤 脱 落 ( 摘 自 Qiyan Xiong.The veterinary Journal,2014) 肺 组 织 切 片 (HE 染 色 ) 图 6. 正 常 肺 组 织 图 7. 肺 炎 支 原 体 引 起 肺 实 变 ( 摘 自 C.Deblanc.Veterinary Microbiology,2012) 由 于 支 原 体 将 纤 毛 破 坏, 细 菌 及 病 毒 的 继 发 感 染 变 得 很 容 易, 如 支 原 体 与 胸 膜 肺 炎 放 线 杆 菌 混 发 感 染, 表 现 为 典 型 的 地 方 流 行 性 肺 炎 ; 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 病 毒 活 跃 时, 过 度 敏 感 的 肺 泡 巨 噬 细 胞 成 为 病 毒 最 优 的 寄 生 地, 引 发 典 型 的 呼 吸 道 疾 病 综 合 征 研 究 证 实, 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 病 毒 与 支 原 体 共 感 染 可 使 病 毒 导 致 的 病 毒 血 症 维 持 至 少 45 天, 给 全 身 性 败 血 症 的 发 生 及 大 群 呼 吸 道 疾 病 的 爆 发 提 供 便 利 因 此 猪 肺 炎 支 原 体 严 重 破 坏 了 猪 群 呼 吸 系 统 的 免 疫 防 线, 是 引 起 猪 群 PRDC 的 钥 匙 病 图 8.PRDC 感 染 模 式 图
四 猪 场 呼 吸 道 疾 病 控 制 方 略 鉴 于 呼 吸 道 疾 病 的 复 杂 性, 控 制 猪 场 呼 吸 道 疾 病 需 有 的 放 矢, 系 统 安 排 : 1 针 对 性 地 做 好 病 毒 性 疾 病 的 基 础 免 疫 近 两 年 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 病 毒 猪 圆 环 病 毒 伪 狂 犬 病 毒 的 普 遍 免 疫 提 升 了 猪 场 应 对 病 毒 性 呼 吸 道 疾 病 的 水 平 猪 圆 环 疫 苗 不 仅 有 效 降 低 了 残 次 猪 的 比 例, 在 某 些 呼 吸 道 疾 病 严 重 的 地 区 还 有 效 地 减 轻 了 当 地 猪 场 的 呼 吸 道 疾 病 ( 浙 江 省 农 业 科 学 院 王 一 成 研 究 员 ) 2 做 好 猪 支 原 体 肺 炎 的 防 控, 防 止 肺 炎 的 发 生 目 前 大 多 猪 场 母 猪 群 定 期 进 行 药 物 保 健, 感 染 的 商 品 猪 群 脉 冲 式 给 药, 不 同 程 度 减 轻 咳 嗽 等 呼 吸 道 症 状 药 物 有 效 成 分 进 入 血 液 达 到 合 适 的 血 药 浓 度 且 直 达 患 部 后 才 可 发 挥 作 用, 但 大 群 给 药 多 采 用 拌 料 或 饮 水 的 方 式, 寄 生 于 纤 毛 顶 端 的 肺 炎 支 原 体 很 难 被 药 物 杀 灭, 故 药 物 控 制 气 喘 病 经 常 面 临 复 发 的 风 险, 所 以 综 合 防 控 肺 炎 支 原 体 还 需 借 助 有 效 的 疫 苗 免 疫 ( 第 九 版 猪 病 学 ) 图 9. 药 物 与 肺 炎 支 原 体 相 互 作 用 模 式 图 五 猪 肺 炎 支 原 体 疫 苗 的 种 类 目 前 市 场 上 有 进 口 灭 活 苗 和 国 产 活 疫 苗 两 类 灭 活 疫 苗 : 由 于 肺 炎 支 原 体 免 疫 原 性 较 差, 自 然 感 染 免 疫 力 产 生 慢 且 弱, 故 通 过 人 工 培 养 提 升 抗 原 含 量, 辅 以 免 疫 佐 剂 解 决 以 上 问 题 但 灭 活 疫 苗 只 能 刺 激 产 生 有 限 的 细 胞 免 疫 及 体 液 免 疫, 仅 具 有 降 低 病 原 数 量, 减 轻 发 病 程 度 的 作 用, 却 难 以 阻 断 野 毒 定 植 ( 美 国 明 尼 苏 达 大 学 Maria Pieters) 活 疫 苗 : 猪 支 原 体 肺 炎 弱 毒 活 疫 苗 是 我 国 科 技 工 作 者 经 过 长 期 不 懈 的 努 力 研 制 出 的 独 具 特 色 的 疫 苗, 此 类 疫 苗 通 过 胸 腔 或 肺 内 注 射 直 接 定 植 呼 吸 道 粘 膜 表 面, 发 挥 占 位 作 用, 阻 断 野 毒 粘 附 并 激 发 局 部 粘 膜 免 疫, 进 一 步 杀 灭 病 原 但 肺 内 免 疫 对 操 作 人 员 要 求 较 高, 易 给 肺 脏 带 来 机 械 损 伤 且 存 在 传 播 疾 病 的 风 险, 因 此 活 疫 苗 的 临 床 应 用 受 到 了 限 制 由 于 以 上 原 因, 市 面 上 急 需 一 种 免 疫 方 便 效 果 可 靠 的 支 原 体 肺 炎 活 疫 苗, 浙 江 诺 倍 威 生 物 技 术 有 限 公 司 联 合 中 国 兽 医 药 品 监 察 所 通 过 长 期 攻 关, 历 经 790 代 兔 化 与 48 代 无 细 胞 培 养 联 合 筛 选, 终 于 获 得 一 株 适 合 喷 鼻 免 疫 的 猪 支 原 体 肺 炎 弱 毒 活 疫 苗 RM48 株 该 疫 苗 无 需 肺 内 注 射, 喷 鼻 免 疫, 效 果 理 想, 操 作 方 便 安 全 喘 净 威 作 为 全 球 第 一 个 可 用 于 喷 鼻 免 疫 的 猪 支 原 体 肺 炎 活 疫 苗 (RM48 株 ), 可 模 拟 自 然 感 染, 在 呼 吸 道 粘 膜 表 面 建 立 牢 固 的 占 位 免 疫, 在 源 头 上 建 立 起 第 一 道 保 护 屏 障 同 时, 喘 净 威 创 新 性 添 加 粘 膜 免 疫 诱 导 因 子, 充 分 诱 导 粘 膜 免 疫, 激 发 动 物 体 全 面 的 免 疫 防 御, 实 现 良 好 的 免 疫 效 果
中 监 所 着 力 研 发 灭 活 苗 研 发 重 心 由 灭 活 苗 转 为 活 疫 苗 20 世 纪 50 年 代 兔 化 弱 毒 苗 培 育 成 功 并 进 行 改 进 20 世 纪 60 年 代 喘 净 威 上 市 20 世 纪 80-90 年 代 21 世 纪 图 10. 喘 净 威 的 前 世 今 生 RM48 株 种 毒 兔 体 传 790 代, 具 有 很 强 的 组 织 亲 嗜 性 Lps 专 利 培 养 基 传 48 代, 抗 原 含 量 高 达 10 9.0 CCU 采 用 新 型 抗 原 活 力 稳 定 剂, 添 加 粘 膜 免 疫 诱 导 因 子 喷 鼻 免 疫 成 为 可 能! 抗 原 含 量 足 够 高, 适 用 于 喷 鼻 免 疫! 建 立 牢 固 的 占 位 免 疫! 图 11. 喘 净 威 独 特 之 处 表 1. 喘 净 威 喷 鼻 免 疫 攻 毒 保 护 试 验 试 验 组 疫 苗 批 次 免 疫 方 式 数 量 攻 毒 后 肺 部 病 变 平 均 指 数 保 护 率 (%) 1 SY-2014001 喷 鼻 25 头 0.876 76.6% 2 SY-2014002 喷 鼻 25 头 0.740 81.5% 3 SY-2014003 喷 鼻 20 头 0.796 78.8% 4 生 理 盐 水 喷 鼻 30 头 3.75 -- -- 中 国 兽 药 监 察 所 宁 宜 宝 研 究 员 图 12. 喷 鼻 免 疫 示 范 图 13. 诺 倍 威 专 用 喷 鼻 器
图 14. 喷 雾 前 的 支 气 管 纤 毛 图 15. 喷 雾 后 的 支 原 体 疫 苗 吸 附 于 纤 毛 上 六 免 疫 方 案 与 注 意 事 项 1 猪 肺 炎 支 原 体 感 染 一 般 发 生 在 仔 猪 15 日 龄 以 后, 原 则 上 免 疫 时 间 越 早 越 好 推 荐 免 疫 程 序 为 5-15 日 龄 喷 鼻 免 疫 1 头 份 /ml, 左 右 鼻 孔 各 0.5ml 2 喘 净 威 可 与 圆 环 病 毒 经 典 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 活 疫 苗 伪 狂 犬 猪 瘟 等 疫 苗 同 期 免 疫, 互 不 影 响 3 不 推 荐 与 高 致 病 性 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 活 疫 苗 同 期 使 用 建 议 间 隔 7 天 时 间 4 喘 净 威 喷 鼻 免 疫 前 3 日 和 免 疫 后 5 日 避 免 使 用 对 支 原 体 敏 感 的 药 物 ( 如 : 氟 苯 尼 考 恩 诺 沙 星 土 霉 素 强 力 霉 素 等 ), 确 有 需 要 保 健 的 可 考 虑 青 霉 素 头 孢 类 药 物 5 支 原 体 感 染 严 重 者, 尤 其 国 内 某 些 地 方 猪 保 种 场, 猪 肺 炎 支 原 体 发 病 造 成 的 损 失 更 加 巨 大, 建 议 仔 猪 在 70 日 龄 左 右 加 强 注 射 一 次 灭 活 疫 苗, 或 根 据 防 疫 投 入 效 益 核 算, 用 药 物 加 强 保 健 一 次, 关 键 在 于 灭 活 疫 苗 与 药 物 投 入 的 产 出 比 七 效 果 评 判 猪 支 原 体 肺 炎 是 一 种 广 泛 感 染 的 慢 性 消 耗 性 疾 病, 对 良 种 猪 致 死 率 不 高, 量 化 的 疾 病 表 现 周 期 太 长, 因 此 如 何 评 价 免 疫 效 果 一 直 是 困 扰 终 端 猪 场 的 难 题 当 前 我 国 生 长 育 肥 猪 慢 性 肺 炎 的 诊 断 主 要 依 靠 生 产 成 绩 ( 料 肉 比 日 增 重 等 ) 临 床 症 状 病 理 剖 检 实 验 室 检 测, 而 屠 宰 场 肺 部 病 变 评 分 法 是 生 长 育 肥 猪 慢 性 肺 炎 的 一 种 重 要 的 回 顾 性 诊 断 方 法, 在 美 国 法 国 和 丹 麦 等 国 家 广 泛 应 用, 但 在 我 国 却 很 少 应 用 和 报 道 生 产 成 绩 评 判 : 除 每 天 定 时 定 点 仔 细 观 察 并 记 录 猪 群 咳 嗽 指 数, 记 录 疫 苗 使 用 前 后 呼 吸 道 用 药 成 本 的 改 善 外, 有 条 件 的 猪 场 可 重 点 关 注 猪 群 65-150 日 龄 平 均 日 增 重 实 验 室 检 测 评 判 : 检 测 工 具 也 比 较 方 便, 有 商 品 化 猪 肺 炎 支 原 体 抗 体 检 测 试 剂 盒 和 细 胞 因 子 检 测 试 剂 盒 抗 体 检 测 进 口 灭 活 疫 苗 可 考 虑 评 估 80 日 龄 左 右 猪 群 体 液 抗 体,130 日 龄 后 的 体 液 抗 体 可 能 代 表 野 毒 感 染 并 不 足 信 ; 但 弱 毒 活 疫 苗 激 发 体 液 抗 体 不 具 优 势, 因 此 抗 体 检 测 不 适 用 于 评 判 支 原 体 肺 炎 弱 毒 苗 效 果 细 胞 因 子 检 测 弱 毒 苗 通 过 喷 鼻 免 疫 或 肺 内 注 射 可 诱 发 机 体 产 生 粘 膜 免 疫 和 细 胞 免 疫 等, 可 通 过 检 测 细 胞 因 子 (IL-1β IL-6 和 IFN-γ 等 ) 来 评 判 猪 支 原 体 肺 炎 活 疫 苗 免 疫 效 果 但 目 前 这 种 检 测 大 多 是 生 物 制 品 公 司 及 专 业 实 验 室 在 做
屠 宰 场 肺 部 病 变 评 分 法 : 该 方 法 具 有 操 作 简 单 易 行, 执 行 成 本 低 且 可 进 行 连 续 性 监 测 等 优 点, 但 也 具 有 较 强 的 主 观 性, 需 对 评 分 人 进 行 统 一 培 训 以 确 保 结 果 的 一 致 性 食 品 加 工 一 条 龙 企 业 及 有 条 件 全 程 跟 踪 至 屠 宰 场 观 察 猪 肺 部 病 变 的 公 司 可 考 虑 安 排 专 门 人 员 进 行 猪 肺 部 病 变 指 数 的 对 比, 评 价 疫 苗 免 疫 效 果 评 估 方 法 与 标 准 支 气 管 肺 炎 评 分 方 法 : 如 图 所 示, 根 据 各 肺 叶 的 体 积 占 整 个 肺 体 积 的 比 例 对 各 个 肺 叶 定 义 分 数 : 左 尖 叶 (5%) 右 尖 叶 (6%) 左 心 叶 (7%) 右 心 叶 (9%) 左 膈 叶 (32%) 右 膈 叶 (36%) 副 叶 (5%) 然 后 依 据 各 肺 叶 肉 眼 所 见 的 实 变 组 织 的 表 面 积 占 该 肺 叶 表 面 积 的 比 例 计 算 该 肺 炎 的 得 分 例 如 : 左 尖 叶 ( 总 分 为 5%) 有 30% 的 表 面 积 出 现 实 变, 那 左 尖 叶 的 实 变 评 分 为 1.5%; 然 后 将 各 个 肺 叶 的 实 变 得 分 相 加 求 和, 并 根 据 表 2 的 判 断 标 准 进 行 评 级 表 2. 支 气 管 肺 炎 病 变 比 例 与 等 级 判 定 左 尖 叶 :5% 右 尖 叶 :6% 病 变 比 例 病 变 等 级 5% 0 左 心 叶 :7% 右 心 叶 :9% 5%-15% 1 15%-25% 2 Cardiac lobe 副 叶 5% 左 膈 叶 :32% 右 膈 叶 :36% 25%-35% 3 35%-45% 4 > 45% 5 图 16. 肺 叶 占 整 个 肺 部 的 比 例 根 据 以 下 计 算 公 式 计 算 具 有 肺 实 变 的 猪 只 比 例 严 重 肺 实 变 的 猪 只 比 例 肺 部 实 变 平 均 得 分 等 三 个 参 数, 以 评 估 支 气 管 肺 炎 在 该 猪 群 中 的 严 重 程 度 具 有 肺 实 变 的 猪 只 比 例 = 肺 脏 具 有 实 变 的 猪 只 数 目 / 被 评 估 猪 的 总 数 严 重 肺 实 变 的 猪 只 比 例 = 实 变 评 级 在 4 级 与 5 级 的 猪 只 数 量 / 被 评 估 猪 的 总 数 平 均 肺 评 级 = 各 肺 的 评 级 数 的 总 和 / 被 评 估 猪 的 总 数 结 语 : 猪 呼 吸 道 疾 病 的 控 制 是 一 项 系 统 工 程, 作 为 其 中 关 键 因 素 的 钥 匙 病 猪 肺 炎 支 原 体 的 防 控, 良 好 的 饲 养 管 理 是 基 础, 疫 苗 免 疫 是 保 障 方 便 且 高 效 活 疫 苗 的 使 用 为 猪 场 肺 炎 支 原 体 的 防 控 提 供 了 有 效 手 段, 随 着 健 康 养 殖 理 念 深 入 人 心, 对 猪 支 原 体 肺 炎 的 防 控 措 施 将 更 加 便 捷 科 学!