说 明 书 Pierce 交 联 磁 珠 式 免 疫 沉 淀 / 免 疫 共 沉 淀 试 剂 盒 88805 2309.4 货 号 描 述 88805 Pierce 交 联 磁 珠 式 免 疫 沉 淀 / 免 疫 共 沉 淀 试 剂 盒, 包 含 足 够 完 成 40 个 反 应 的 试 剂, 每 个 反 应 使 用 25 µl 磁 珠 试 剂 盒 组 成 : Pierce 蛋 白 A/G 磁 珠 1 ml, 贮 存 于 含 有 0.05% NaN 3 的 水 中, 浓 度 为 10 mg/ml Pierce 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液,2 50 ml,ph 7.4,0.025M Tris,0.15M NaCl,0.001M EDTA, 1% NP40,5% 甘 油 20 交 联 缓 冲 液,25 ml, 稀 释 后 含 10 mm 磷 酸 钠, 150 mm NaCl;pH 7.2 DSS( 辛 二 酸 二 琥 珀 酰 亚 胺 酯 ),No-Weigh 形 式, 8 2 mg 微 型 管 中 和 液,1.0 ml,ph 8.5 洗 脱 液,25 ml,ph 2.0 电 泳 上 样 缓 冲 液, 非 还 原 性,(5 ), 5 ml,ph 6.8,0.3M Tris HCl,5% SDS,50% 甘 油, 泳 道 标 记 示 踪 染 料 目 录 贮 存 条 件 : 收 到 本 产 品 后 于 4 C 贮 存 冰 盒 运 输 产 品 简 介... 2 流 程 简 述... 2 重 要 产 品 信 息... 2 所 需 额 外 试 剂 和 仪 器... 3 Pierce 经 典 磁 珠 式 免 疫 沉 淀 试 剂 盒 流 程... 3 A. 将 抗 体 结 合 于 蛋 白 A/G 磁 珠 上... 3 B. 交 联 结 合 的 抗 体... 4 C. 哺 乳 动 物 细 胞 裂 解... 4 D. 手 动 抗 原 免 疫 沉 淀... 5 E. 自 动 免 疫 沉 淀... 5 问 题 解 决... 7 网 站 附 加 信 息... 7 Thermo Scientific KingFisher 仪 器 的 常 见 问 题... 8 Thermo Scientific 相 关 产 品... 8 1
产 品 简 介 Thermo Scientific Pierce 交 联 磁 珠 式 免 疫 沉 淀 / 免 疫 共 沉 淀 试 剂 盒 通 过 共 价 键 将 抗 体 交 联 于 Thermo Scientific Pierce 蛋 白 A/G 磁 珠 上 能 够 高 效 完 成 抗 原 免 疫 沉 淀 (IP) 及 免 疫 共 沉 淀 (Co-IP) 实 验 本 试 剂 盒 首 先 将 抗 体 结 合 到 磁 珠 上, 再 通 过 使 用 化 学 交 联 剂 辛 二 酸 二 琥 珀 酰 亚 胺 酯 (DSS) 共 价 交 联 在 磁 珠 上 抗 体 交 联 了 的 磁 珠, 再 通 过 漂 洗 去 除 未 共 价 结 合 的 抗 体 将 已 准 备 好 的 磁 珠 与 抗 原 样 品 孵 育, 通 过 漂 洗 去 除 未 结 合 物 质, 并 用 低 ph 的 洗 脱 液 将 结 合 的 抗 原 从 抗 体 交 联 的 磁 珠 上 分 离 下 来 本 试 剂 盒 包 含 了 优 化 的 缓 冲 液, 免 疫 沉 淀 可 使 用 最 少 2 µg 抗 体 免 疫 共 沉 淀 可 使 用 最 少 5-10 µg 抗 体, 即 可 获 得 大 量 抗 原 同 时 还 含 有 为 SDS-PAGE 分 析 准 备 的 样 品 缓 冲 液 抗 体 结 合 和 交 联 通 过 借 助 磁 力 架 的 手 动 方 式 实 现, 而 免 疫 沉 淀 和 免 疫 共 沉 淀 均 可 通 过 手 动 或 自 动 方 式 完 成, 自 动 方 式 使 用 如 Thermo Scientific KingFisher Flex 系 统 的 仪 器 实 现 流 程 简 述 1. 用 1 改 良 交 联 缓 冲 液 预 洗 磁 珠 两 次 2. 将 抗 体 与 磁 珠 结 合 15 分 钟 3. 用 1 改 良 交 联 缓 冲 液 洗 磁 珠 三 次 4. 用 DSS 进 行 抗 体 与 磁 珠 的 交 联 30 分 钟 5. 用 洗 脱 液 漂 洗 磁 珠 三 次, 之 后 用 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 洗 磁 珠 两 次 6. 将 细 胞 裂 解 液 与 抗 体 交 联 的 磁 珠 在 室 温 下 孵 育 1-2 小 时, 或 4 ºC 过 夜 7. 用 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 洗 磁 珠 两 次, 之 后 用 纯 水 洗 一 次 8. 洗 脱 结 合 的 抗 原 重 要 产 品 信 息 抗 体 的 偶 联 与 交 联 步 骤 通 过 磁 力 架 手 动 实 现 免 疫 沉 淀 可 以 手 动 完 成, 亦 可 使 用 自 动 化 仪 器 平 台 如 KingFisher Flex 仪 器 请 勿 离 心 干 燥 或 冷 冻 磁 珠, 这 些 操 作 会 导 致 磁 珠 聚 集 而 降 低 结 合 能 力 为 获 得 最 佳 结 果, 尽 量 使 用 亲 和 纯 化 后 的 抗 体 尽 管 也 可 使 用 血 清, 但 血 清 样 品 中 针 对 目 的 抗 原 的 特 异 性 抗 体 含 量 可 能 仅 占 IgG 总 量 的 1-2%, 因 此 将 导 致 抗 原 的 产 量 低 Pierce 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 在 多 种 具 代 表 性 的 细 胞 类 型 测 试 过 其 中 包 括 ( 但 不 限 于 ) 如 下 细 胞 系 : HeLa,Jurkat,A431,A549,MOPC,NIH 3T3 和 U2OS 通 常 情 况 下,10 6 HeLa 细 胞 可 产 生 约 10 mg 的 细 胞 团 块, 使 用 100 μl 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 裂 解 得 到 约 3 μg/μl ( 或 300 μg) 的 裂 解 产 物 为 尽 可 能 避 免 蛋 白 质 的 降 解, 应 该 在 细 胞 裂 解 液 的 制 备 过 程 中 加 入 蛋 白 酶 抑 制 剂 ( 例 如 Thermo Scientific Halt 一 次 性 蛋 白 酶 抑 制 剂 Cocktail, 无 EDTA, 产 品 货 号 78425) IP 裂 解 / 洗 涤 缓 冲 液 可 兼 容 Thermo Scientific Pierce BCA 蛋 白 定 量 分 析 试 剂 盒 ( 产 品 货 号 23225) 低 ph 洗 脱 的 最 佳 孵 育 时 间 为 5 分 钟 如 未 获 得 预 期 的 抗 原 产 量, 重 复 一 次 低 ph 洗 脱 有 助 于 洗 脱 剩 余 的 结 合 抗 原 2
所 需 额 外 试 剂 和 仪 器 1.5 ml 离 心 管 偶 联 / 交 联 所 需 抗 体 免 疫 沉 淀 所 需 抗 原 样 品 磁 力 架 ( 例 如 Thermo Scientific MagnaBind Magnet, 针 对 6 1.5 ml 离 心 管, 产 品 货 号 21359) 磷 酸 盐 缓 冲 液 (PBS,100 mm 磷 酸 钠, 100 mm 氯 化 钠 ;ph 7.2; 产 品 货 号 28372) 对 于 自 动 免 疫 沉 淀 : KingFisher Flex 系 统, 具 有 96 深 孔 顶 部 ( 产 品 货 号 5400630) Thermo Scientific Microtiter 96 深 孔 板,V 型 底, 聚 丙 烯 (100-1000 µl; 产 品 货 号 95040450) KingFisher Flex 96 Tip Comb for Deep Well Magnets( 产 品 货 号 97002534) Pierce 经 典 磁 珠 式 免 疫 沉 淀 试 剂 盒 流 程 A. 将 抗 体 结 合 于 蛋 白 A/G 磁 珠 上 注 意 : 以 下 实 验 方 案 经 过 优 化, 偶 联 5 µg 抗 体, 而 通 过 适 当 调 整 方 案 可 以 偶 联 2-10 µg 抗 体 1. 每 个 免 疫 沉 淀 反 应 准 备 2 ml 的 1 改 良 的 偶 联 缓 冲 液, 即 将 0.1 ml 的 20 偶 联 缓 冲 液 和 0.1 ml 的 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 稀 释 于 1.8 ml 超 纯 水 中 2. 将 Pierce 蛋 白 A/G 磁 珠 瓶 涡 旋, 以 获 得 均 匀 的 悬 液 向 离 心 管 中 加 入 25 µl 磁 珠 将 离 心 管 置 于 磁 力 架 上 1 分 钟, 收 集 磁 珠 去 除 存 储 液 3. 向 离 心 管 中 加 入 步 骤 1 所 准 备 好 的 1 改 良 的 偶 联 缓 冲 液 500 µl 轻 柔 混 匀, 室 温 下, 在 旋 转 器 上 孵 育 1 分 钟 通 过 磁 力 架 收 集 磁 珠, 去 除 上 清 重 复 此 步 骤 一 次 4. 将 抗 体 用 20 偶 联 缓 冲 液 和 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 以 1:20 稀 释, 使 抗 体 的 终 浓 度 为 5 µg 每 100 µl 例 如, 为 制 备 100 µl 抗 体 液, 将 抗 体 原 液 稀 释 于 5 µl 的 20 偶 联 缓 冲 液, 5 µl 的 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液, 再 加 入 超 纯 水 使 终 体 积 为 100 µl 注 意 : 对 非 5 µg 抗 体 的 反 应 相 应 调 整 抗 体 液 用 量 5. 向 磁 珠 中 加 入 100 µl 已 准 备 好 的 抗 体 液, 轻 柔 混 匀, 室 温 下, 在 旋 转 器 上 孵 育 15 分 钟 孵 育 过 程 中, 每 5-10 分 钟 轻 微 涡 旋 磁 珠, 使 磁 珠 处 于 悬 浮 状 态 6. 用 磁 力 架 收 集 磁 珠 去 除 上 清 7. 加 入 100 µl 的 1 改 良 偶 联 缓 冲 液, 轻 微 涡 旋 或 颠 倒 混 匀 用 磁 力 架 收 集 磁 珠 去 除 上 清 8. 加 入 300 µl 的 1 改 良 偶 联 缓 冲 液, 轻 微 涡 旋 或 颠 倒 混 匀 用 磁 力 架 收 集 磁 珠 去 除 上 清 重 复 此 步 骤 一 次 3
B. 交 联 结 合 的 抗 体 注 意 : 常 规 免 疫 沉 淀 无 需 交 联 亦 可 完 成 ; 而 不 进 行 交 联, 洗 脱 过 程 中 抗 体 可 能 与 抗 原 一 同 洗 脱 下 来 注 意 : DSS 交 联 剂 对 湿 度 敏 感 将 未 使 用 的 DSS 保 存 于 铝 袋 中 使 用 前 立 即 将 DSS 溶 解 于 DMSO 或 DMF 中 DSS 不 可 与 含 氨 基 酸 的 缓 冲 液 ( 例 如,Tris,glycine) 同 时 使 用 1. 用 移 液 枪 头 刺 穿 一 管 DSS 的 铝 袋, 加 入 217 µl 的 DMSO 或 DMF, 制 成 10 的 储 液 (25 mm) 用 枪 头 彻 底 混 合 溶 液 ( 即, 吸 入 并 打 出 溶 液 ), 直 到 DSS 溶 解 2. 将 DSS 以 1:100 稀 释 于 DMSO 或 DMF (10 µl 的 10 DSS 加 入 990 µl 溶 剂 ), 使 DSS 浓 度 为 0.25 mm 3. 向 磁 珠 中 加 入 2.5 µl 的 20 偶 联 缓 冲 液,4 µl 的 0.25 mm DSS 和 43.5 µl 的 超 纯 水 溶 液 终 体 积 为 50 µl 加 入 的 DSS 为 10 过 量 于 Pierce 蛋 白 A/G 磁 珠, 工 作 浓 度 为 20 µm 4. 室 温 下, 用 旋 转 器 或 搅 拌 器 孵 育 交 联 反 应 30 分 钟 孵 育 过 程 中, 每 5-10 分 钟 轻 微 涡 旋 磁 珠, 使 磁 珠 处 于 悬 浮 状 态 5. 用 磁 力 架 收 集 磁 珠 移 出 并 保 留 液 体 以 确 证 抗 体 交 联 6. 向 磁 珠 中 加 入 100 µl 洗 脱 缓 冲 液, 并 室 温 下, 在 旋 转 器 上 轻 柔 混 匀 5 分 钟, 以 去 除 未 交 联 的 抗 体 并 终 止 交 联 反 应 用 磁 力 架 收 集 磁 珠, 去 除 上 清 7. 向 磁 珠 中 加 入 100 µl 洗 脱 缓 冲 液, 轻 微 涡 旋 或 颠 倒 混 匀 用 磁 力 架 收 集 磁 珠, 去 除 上 清 重 复 一 次 8. 向 磁 珠 中 加 入 200 µl 预 冷 的 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液, 轻 微 涡 旋 或 颠 倒 混 匀 用 磁 力 架 收 集 磁 珠, 去 除 上 清 重 复 一 次 9. 转 到 手 动 或 自 动 抗 原 免 疫 沉 淀 实 验 方 案 如 果 需 要, 已 交 联 抗 体 的 磁 珠 可 保 存 于 4 C. 哺 乳 动 物 细 胞 裂 解 方 案 I: 单 层 培 养 ( 附 着 ) 细 胞 的 裂 解 1. 小 心 去 除 单 层 细 胞 的 培 养 基 2. 用 PBS 洗 细 胞 一 次 3. 根 据 表 1 的 推 荐 体 积 向 细 胞 中 加 入 冰 浴 预 冷 的 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 冰 上 孵 育 5 分 钟, 期 间 混 匀 几 次 表 1. 针 对 各 种 标 准 培 养 皿 的 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 的 推 荐 使 用 体 积 培 养 皿 大 小 / 表 面 积 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 体 积 100 100 毫 米 500-1000μL 100 60 毫 米 250-500μL 6 孔 板 每 孔 200-400μL 24 孔 板 每 孔 100-200µL 4. 将 裂 解 液 转 移 至 一 个 新 的 离 心 管 中, 约 13000 g 离 心 10 分 钟, 沉 降 细 胞 碎 片 5. 将 上 清 转 移 到 一 个 新 管 中, 进 行 蛋 白 浓 度 测 定 及 后 续 实 验 方 案 II: 细 胞 悬 液 培 养 的 裂 解 1. 将 细 胞 悬 液 以 1000 g 离 心 5 分 钟, 收 集 细 胞, 弃 上 清 2. 用 PBS 洗 细 胞 一 次, 即 用 PBS 重 悬 细 胞 团, 后 将 细 胞 悬 液 以 1000 g 离 心 5 分 钟, 收 集 细 胞, 弃 上 清 4
3. 向 细 胞 团 块 中 加 入 冰 浴 预 冷 的 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 每 50 mg 细 胞 团 块 使 用 500 μl 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 ( 即 10:1 体 积 / 质 量 比 ) 如 果 细 胞 量 很 大, 首 先 向 细 胞 团 中 加 入 终 体 积 10% 的 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液, 用 移 液 器 反 复 吹 打 混 匀 后, 再 将 剩 余 的 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 加 入 细 胞 悬 液 中 4. 将 裂 解 液 在 冰 上 孵 育 5 分 钟, 期 间 混 匀 几 次 以 约 13000 g 离 心 10 分 钟, 去 除 细 胞 碎 片 5. 将 上 清 转 移 到 一 个 新 管 中, 备 蛋 白 浓 度 测 定 及 后 续 实 验 D. 手 动 抗 原 免 疫 沉 淀 1. 用 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 将 裂 解 液 稀 释 至 500 μl 2. 将 500 µl 稀 释 后 的 裂 解 液 加 入 含 有 抗 体 交 联 磁 珠 的 离 心 管 中 室 温 下, 在 旋 转 仪 或 混 合 器 上 孵 育 1 小 时 孵 育 过 程 中 每 10-15 分 钟 轻 微 涡 旋 磁 珠, 以 保 证 磁 珠 处 于 悬 浮 状 态 3. 用 磁 力 架 收 集 磁 珠, 除 去 未 结 合 的 样 品, 保 存 以 备 分 析 4. 向 离 心 管 中 加 入 500 µl 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液, 轻 柔 混 匀 收 集 磁 珠, 弃 上 清 重 复 此 操 作 一 次 5. 向 管 中 加 入 500 µl 超 纯 水, 轻 柔 混 匀 用 磁 力 架 收 集 磁 珠, 弃 上 清 6. 向 离 心 管 中 加 入 100 µl 洗 脱 液 旋 转 混 匀, 室 温 下, 在 旋 转 仪 或 混 合 器 上 孵 育 离 心 管 5 分 钟 通 过 磁 力 分 离 磁 珠, 保 留 含 有 目 的 抗 原 的 上 清 洗 脱 后, 在 每 100 µl 洗 脱 液 中 加 入 10 µl 中 和 液 来 中 和 低 ph 为 获 得 更 多 的 抗 原, 可 以 重 复 洗 脱 一 次 E. 自 动 免 疫 沉 淀 注 意 : 以 下 实 验 方 案 针 对 KingFisher Flex 仪 器 的 使 用 设 计 实 验 方 案 可 根 据 需 要, 使 用 仪 器 提 供 的 Thermo Scientific BindIt 软 件 进 行 修 改 1. 使 用 外 部 计 算 机, 按 照 表 2 将 交 联 免 疫 沉 淀 实 验 方 案 输 入 到 BindIt 软 件 2. 将 实 验 方 案 从 外 部 计 算 机 导 入 KingFisher Flex 实 验 方 案 的 导 入 请 参 考 BindIt 软 件 用 户 手 册 的 详 细 介 绍 3. 根 据 表 2 设 置 样 品 板 表 2. 针 对 使 用 Microtiter 深 孔 96 孔 板 的 免 疫 沉 淀 实 验 方 案 移 液 指 导 样 品 板 # 样 品 板 名 称 内 容 体 积 时 间 / 速 度 1 磁 珠 蛋 白 A/G 磁 珠 25 µl 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 175 µl 5 秒 2 磁 珠 漂 洗 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 1000 µl 1 分 钟 / 慢 3 结 合 抗 体 / 抗 原 样 品 500 µl 1 小 时 / 慢 4 漂 洗 1 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 500 µl 30 秒 / 慢 5 漂 洗 2 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 500 µl 30 秒 / 慢 6 漂 洗 3 超 纯 水 500 µl 30 秒 / 慢 7 低 ph 洗 脱 洗 脱 液 变 性 洗 脱 电 泳 上 样 缓 冲 液 100 µl 10 分 钟 / 中 等 8 端 样 品 板 针 对 深 孔 磁 珠 式 KingFisher Flex 96 Tip Comb - 10 秒 / 快 5
4. 通 过 仪 器 的 方 向 键 选 择 实 验 方 案, 点 击 开 始 详 细 信 息 请 查 阅 KingFisher Flex 仪 器 的 用 户 手 册 5. 打 开 仪 器 防 护 罩 的 滑 动 门 6. 根 据 实 验 方 案 要 求, 将 样 品 板 放 置 于 仪 器 中, 各 样 品 板 放 置 同 样 的 方 向 确 认 各 操 作 后 点 击 开 始 7. 样 品 处 理 完 成 后, 根 据 仪 器 显 示 的 指 导 移 动 样 品 板 移 出 每 个 样 品 板 后 点 击 开 始 移 出 所 有 样 品 板 后 点 击 结 束 注 意 : 每 100 µl 洗 出 液 在 孵 育 后 直 接 向 每 个 孔 中 加 入 10 µl 中 和 液 来 中 和 低 ph 洗 脱 液 如 果 所 用 到 的 孔 少 于 96 个, 每 个 样 品 板 使 用 同 样 的 孔 例 如, 如 果 使 用 A1 到 A12 孔, 则 所 有 样 品 板 均 使 用 同 样 的 孔 联 接 Tip Comb 和 深 孔 96 孔 板 更 多 指 导 请 参 阅 仪 器 用 户 手 册 为 减 少 液 体 蒸 发, 在 副 标 题 加 热 反 应 下 选 择 混 匀 和 慢 速 6
问 题 解 决 问 题 可 能 原 因 解 决 方 洗 脱 的 抗 原 中 可 检 测 交 联 过 程 后 的 洗 涤 未 能 充 分 去 除 未 交 联 增 加 交 联 后 用 洗 脱 液 洗 案 脱 的 次 数 到 抗 体 的 抗 体 抗 原 没 有 免 疫 沉 淀 下 来 在 免 疫 沉 淀 或 洗 脱 步 骤 中, 抗 体 偶 联 磁 珠 会 经 过 还 原 剂 ( 例 如,DTT) 处 理, 从 而 将 未 与 磁 珠 共 价 结 合 的 抗 体 片 段 还 原 并 洗 脱 下 来 样 品 中 所 含 的 抗 原 过 少, 不 足 以 被 检 测 抗 体 无 法 结 合 抗 原 使 用 不 含 还 原 剂 的 缓 冲 液 通 过 SDS-PAGE 或 蛋 白 免 疫 印 迹 验 证 裂 解 液 中 蛋 白 的 表 达 和 / 或 裂 解 效 率 ; 如 果 需 要, 加 大 样 品 量 使 用 新 生 产 的 特 异 性 抗 体, 或 者 选 择 另 一 种 识 别 不 同 抗 原 表 位 的 抗 体 免 疫 沉 淀 裂 解 / 漂 洗 缓 冲 液 中 的 成 分 干 扰 了 抗 原 与 抗 体 的 结 合 获 得 的 蛋 白 量 低 蛋 白 质 被 降 解 加 入 蛋 白 酶 抑 制 剂 所 使 用 的 磁 珠 量 不 够 样 品 中 的 目 标 蛋 白 量 不 够 使 用 其 它 缓 冲 液 进 行 免 疫 沉 淀 和 漂 洗 ( 例 如, 含 有 0.5% CHAPS 的 TBS) 提 高 捕 获 免 疫 复 合 物 所 使 用 的 磁 珠 量 提 高 抗 原 样 品 量 蛋 白 未 洗 脱 下 来 洗 脱 条 件 过 于 温 和 延 长 洗 脱 液 的 孵 育 时 间 至 10 分 钟 使 用 强 度 更 高 的 洗 脱 液 多 条 非 特 异 条 带 有 非 特 异 性 的 蛋 白 结 合 在 磁 珠 上 在 结 合 / 漂 洗 和 洗 脱 缓 冲 液 中 加 入 50-350 mm NaCl 重 新 获 得 的 蛋 白 失 活 洗 脱 条 件 过 于 剧 烈 使 用 相 对 温 和 的 洗 脱 液 ( 例 如 Thermo Scientific 温 和 洗 脱 液, 产 品 货 号 21034) 磁 珠 聚 集 磁 珠 被 冷 冻 或 离 心 过 依 据 使 用 说 明 指 导 正 确 处 理 磁 珠 缓 冲 液 和 磁 珠 不 兼 容 网 站 附 加 信 息 常 见 问 题 技 术 提 示 #43: 蛋 白 质 稳 定 性 及 贮 存 技 术 提 示 #34: 免 疫 球 蛋 白 与 蛋 白 A, G, A/G and L 磁 珠 之 间 的 结 合 特 性 有 关 KingFisher 的 产 品 信 息 请 访 问 网 站 www.thermoscientific.com/kingfisher 在 美 国, 从 Fisher Scientific 购 买 KingFisher 用 品 美 国 以 外 购 买 KingFisher 用 品, 请 联 系 当 地 的 Thermo Fisher Scientific 办 公 室 7
Thermo Scientific KingFisher 仪 器 的 常 见 问 题 问 题 哪 些 样 品 板 是 与 KingFisher Flex 仪 器 匹 配 的 运 行 过 程 中 可 以 浓 缩 样 品 么? 解 答 KingFisher Flex 与 KingFisher 24 深 孔 样 品 板, Microtiter 深 孔 96 孔 板, KingFisher 96 和 96 PCR 板 相 匹 配 深 孔 样 品 板 和 KingFisher 96 孔 板 均 可 以 在 同 一 运 行 中 使 用 因 此, 使 用 较 大 体 积 ( 在 深 孔 样 品 板 中 ) 开 始 进 程, 之 后 将 纯 化 的 样 品 洗 脱 至 一 个 较 小 体 积 ( 在 KingFisher96 孔 板 中 ) 是 可 能 的 运 行 过 程 中 可 以 加 热 样 品 仪 器 中 设 置 有 加 热 器, 可 以 在 相 同 过 程 中 自 动 使 用 么? 所 有 与 KingFisher Flex 仪 器 匹 配 的 样 品 板 均 可 以 使 用 特 殊 设 计 且 可 更 换 的 加 热 器 加 热 每 孔 的 试 剂 体 积 严 格 么? 为 获 得 最 佳 结 果, 保 证 指 定 体 积 在 限 定 范 围 内, 避 免 溢 出 Thermo Scientific 相 关 产 品 88802-3 Pierce 蛋 白 A/G 磁 珠 88804 Pierce 经 典 磁 珠 式 免 疫 沉 淀 / 免 疫 共 沉 淀 试 剂 盒 88816-7 Pierce 链 霉 素 磁 珠 88826-7 Pierce N- 羟 基 琥 珀 酰 亚 胺 活 化 磁 珠 88828 Pierce 直 接 磁 珠 式 免 疫 沉 淀 / 免 疫 共 沉 淀 试 剂 盒 24615 Imperial 蛋 白 染 色 液,1L 34075 SuperSignal 持 久 性 化 学 发 光 底 物 78440 Halt 蛋 白 酶 和 磷 酸 酶 抑 制 剂 Cocktail(100 ) 78430 Halt 一 次 性 蛋 白 酶 抑 制 剂 Cocktail(100 ) 28348 磷 酸 盐 缓 冲 液 (20 ) 87787 Pierce 免 疫 沉 淀 裂 解 液 39001 电 泳 上 样 缓 冲 液, 非 还 原 性 21658 DSS ( 辛 二 酸 二 琥 珀 酰 亚 胺 酯 ), 无 重 量 形 式 25200-44 Precise 蛋 白 胶, 完 整 列 表 请 查 阅 目 录 或 网 站 自 产 品 文 件 说 明 书 和 / 或 产 品 包 装 内 所 附 文 件 ( 文 件 ) 中 所 说 明 的 销 售 之 日 起, 本 公 司 担 保 本 产 品 ( 产 品 ) 的 运 行 或 性 能 完 全 符 合 已 公 布 的 产 品 说 明 书, 并 且 担 保 产 品 在 材 料 和 工 艺 上 没 有 缺 陷 除 非 另 外 以 书 面 形 式 进 行 明 确 授 权, 本 产 品 仅 可 用 于 研 究 目 的 本 产 品 不 适 合 应 用 于 FDA 监 管 的 领 域 只 有 当 本 产 品 由 经 过 适 当 培 训 的 人 员 使 用 时, 此 处 所 提 供 的 担 保 才 有 效 除 非 在 文 件 中 另 有 说 明, 否 则 本 担 保 只 限 于 从 产 品 装 运 之 日 起 一 年 本 担 保 不 会 扩 展 至 除 了 本 产 品 的 原 始 购 买 方 ( 买 方 ) 之 外 的 任 何 一 方 公 司 不 提 供 其 它 任 何 明 示 或 暗 示 的 保 证 条 款, 包 括 但 不 限 于 商 业 适 售 性 特 定 目 的 之 适 用 性 或 者 非 侵 权 证 明 等 暗 示 性 保 证 在 质 保 期 间, 买 方 对 于 不 合 格 产 品 的 唯 一 赔 偿 仅 限 于 更 换 不 合 格 的 产 品 或 者 退 回 货 款 如 果 由 于 下 述 原 因 之 一 造 成 产 品 故 障, 本 公 司 没 有 义 务 对 产 品 进 行 更 换 :(i) 事 故 灾 难 或 不 可 抗 力 事 件 ;(ii) 买 主 的 错 误 使 用 过 错 或 疏 忽 ;(iii) 将 该 产 品 以 其 设 计 范 围 之 外 的 方 式 使 用 ; 或 者 (iv) 不 正 确 储 存 和 操 作 该 产 品 如 果 需 要 传 真 的 复 印 件, 请 拨 打 800-810-5118 或 与 当 地 经 销 商 联 系 2011 Thermo Fisher Scientific Inc. 版 权 所 有 除 非 另 有 说 明, 所 有 商 标 均 归 Thermo Fisher Scientific Inc. 及 其 子 公 司 所 有 8