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1 中成藥品質及安全檢測技術培訓班 常用有毒藥材簡介及其毒性成分分析 22 Jan 2016 喬春峰 1

2 曾與香港不良事件有關的中藥材參考資料網址 : 2

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4 香港中藥中毒事件舉例 烏頭鹼事件 2010 年 5 月 10 日, 香港衛生防護中心公佈一宗烏頭鹼中毒個案 患者服用處方中並無烏頭類藥材, 但病人煮服药後兩小時, 即出現口腔及四肢麻痹 暈眩及暈厥等較為典型的烏頭鹼中毒症狀, 入住深切治療部, 並從血液中檢出烏頭鹼 單就烏頭鹼類生物鹼中毒, 年共有 62 宗中毒個案發生 當中 41 宗顯性烏頭鹼中毒, 是處方中含有烏頭類藥材, 但因劑量過大 未按規定使用炮製品 煎煮程序出錯等原因, 導致中毒 ; 另 21 宗是隱性烏頭鹼中毒, 即是處方中沒有烏頭類藥材, 但因 執錯藥 藥材混淆等原因, 導致病人在不知情下服食中毒 洋金花事件 1999 年, 荃灣一間中藥房錯誤將凌霄花與洋金花混合, 出售予一名婦人煲成涼茶,8 人飲用後中毒不適 罌粟殼事件 2000 年, 灣仔一間中藥房用罌粟殼當作碧桃乾出售 馬兜鈴酸事件 2003 年, 有病人服用細辛發生馬兜鈴酸中毒事件, 導致腎功能衰竭 事件的主要原因是: 本該只用根及根莖的細辛卻用了全草 2004 年, 有病人長期自行服用名為 白英 的中藥, 出現腎衰竭的症狀, 並患有尿道癌病 經鑒定, 該病人所服用的是含馬兜鈴酸的 尋骨風 蟾酥事件 2007 年, 一男子在國內求醫, 得處方治療食道癌, 回港後發現處方中的蟾皮遍尋不獲, 誤信藥行東主, 將蟾酥替代蟾皮, 一字之差, 鬧出人命案 斷腸草事件 2009 年, 市民用在內地購買的五指毛桃煲湯, 一家四口發生鉤吻鹼中毒 經過考察發現五指毛桃生長的周圍伴生有茂盛的斷腸草 ( 即鉤吻 ), 懷疑採挖五指毛桃根時混入了斷腸草根 蒼朮事件香港曾三次在中藥蒼朮中驗出阿托品 菊科植物蒼朮中本不含阿托品, 但現在原因未明, 還有再次發生的隱患 4

5 國家中醫藥管理局等規定的 28 種毒性中藥材品種 1995 年 2 月 13 日, 國家中醫藥管理局 國家醫藥管理局 衛生部 國家工商行政管理局制定了 整頓中藥材專業市場的標準, 明確規定中藥材專業市場嚴禁 28 種毒性中藥材品種進場交易 28 種毒性中藥材品種如下 : 砒石 ( 紅砒 白砒 ) 砒霜 水銀 生馬錢子 生川烏 生草烏 生白附子 生附子 生半夏 生南星 生巴豆 斑蟊 紅娘蟲 青娘蟲 生甘遂 生狼毒 生藤黃 生千金子 鬧羊花 生天仙子 雪上一支蒿 紅升丹 白降丹 蟾酥 洋金花 紅粉 輕粉 雄黃 5

6 中華人民共和國藥典 ( 一部 ) 收載的有毒中藥材品種 有小毒 (25 種 ): 丁公藤 九裡香 土鼈蟲 川楝子 小葉蓮 水蛭 艾葉 北豆根 地楓皮 紅大戟 兩面針 吳茱萸 苦木 苦杏仁 草烏葉 南鶴虱 鴉膽子 重樓 急性子 蛇床子 豬牙皂 綿馬貫眾 綿馬貫眾炭 蒺藜 鶴虱 有毒 (37 種 ): 乾漆 土荊皮 山豆根 千斤子 千斤子霜 制川烏 天南星 木鱉子 甘遂 仙茅 白附子 白果 半夏 朱砂 華山參 全蠍 芫花 蒼耳子 兩頭尖 附子 苦楝皮 金錢白花蛇 京大戟 制草烏 牽牛子 輕粉 香加皮 洋金花 常山 商陸 硫磺 雄黃 蓖麻子 蜈蚣 罌粟殼 蘄蛇 蟾酥 有大毒 (10 種 ): 川烏 馬錢子 馬錢子粉 天仙子 巴豆 巴豆霜 紅粉 鬧羊花 草烏 斑蝥 6

7 香港 中医药条例 附表 1 收载的 31 种烈性 / 毒性中药材 毒性中藥的藥性十分強烈, 並含有毒成分, 若藥量稍不當或誤服, 即可引致中毒, 甚至死亡 其中 31 種毒性較強的中藥材已列入 中醫藥條例 附表 1 使用毒性中藥注意事項 : 中醫藥條例 附表 1 列明的 31 種毒性中藥, 須經註冊中醫處方才可購買 必須遵從中醫指示的煎煮和使用方法 如發現有中藥中毒情況應盡快求醫 急性中藥中毒 : 消化系統症狀, 例如噁心嘔吐 燒灼樣腹痛 腹瀉 甚至嘔血 大便出血等 呼吸系統症狀, 例如呼吸困難 口唇青紫等 循環系統症狀, 例如感列胸悶 心慌 心跳不規則等 神經系統症狀, 例如感到頭暈頭痛 口舌四肢和身體麻木 視聽模糊, 甚至昏迷 癱瘓等 泌尿系統症狀, 例如尿痛 血尿 水腫等 慢性中藥中毒 : 可能引致貧血 肝臟或腎臟損傷等 7

8 植物類 山豆根 生千金子 生川烏 生天仙子 生天南星 生巴豆 生半夏 生甘遂 生附子 生白附子 生狼毒 生草烏 生馬錢子 生藤黃 洋金花 雪上一枝蒿 鬼臼 鬧羊花 動物類 青娘蟲 紅娘蟲 斑蝥 蟾酥 礦物類 水銀 白降丹 朱砂 砒石 砒霜 紅粉 雄黃 輕粉 雌黃 8

9 有毒中藥材或中藥毒性成分的專著 9

10 青木香 Radix Aristolochiae 來源 馬兜鈴科植物馬兜鈴 Aristolochia debilis Sieb. et Zucc. 的乾燥根 主要毒性成分 馬兜鈴酸 A (aristolochic acid A) 毒性及中毒反應 馬兜鈴酸有較強的腎臟毒性, 易在體內蓄積 可降低腎小球濾過率, 引起急性腎功能衰竭和腎間質損害, 嚴重者可致死亡 此外, 馬兜鈴酸還具有致突變 致癌和肝臟毒性 過量服用青木香而産生的不良反應表現爲少尿 無尿 全身浮腫 蛋白尿血尿等腎功能衰竭症狀 ; 也伴有噁心嘔吐 腹脹腹瀉 頭暈痙攣 肌肉鬆弛等症狀 青木香已禁用 10

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12 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 甲苯 乙酸乙酯 甲酸 (20:10:1); 檢視 : 紫外光燈 (254 nm) 1.2 樣品製備 : 取青木香藥材粉末 ( 過三號篩 )2 g, 置圓底燒瓶中, 加乙醇 50 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 5 ml 使溶解, 作為供試品溶液 另取馬兜鈴酸 A 對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.25 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 254 nm 紫外光燈下檢視 青木香的 TLC 色譜圖 1. 青木香 2. 馬兜鈴酸 A 3. 青木香 12

13 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18, 5 m, mm; 流動相 :0.1% 冰醋酸溶液 - 甲醇 (45:55); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :315 nm 2.1 樣品製備 : 供試品溶液同薄層色譜法 另取馬兜鈴酸 A 對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液 20 ml, 在上述色譜條件下進樣分析 13

14 廣防己 Radix Aristolochiae Fangchi 來源 馬兜鈴科植物廣防己 Aristolochia fangchi Y. C. Wu ex L. D. Chou et S. M. Hwang 的乾燥根 主要毒性成分 馬兜鈴酸 A (aristolochic acid A) 廣防己用藥劑量過大或用藥時間過長可造成中毒, 引起急性腎功能衰竭, 嚴重者可致死亡 其中毒反應表現爲全身倦怠 多飲多尿 頭痛胸悶 嘔吐腹瀉 全身浮腫 神志不清等 14

15 廣防己的 TLC 色譜圖 1. 廣防己 2. 馬兜鈴酸 A 3. 廣防己 15

16 天仙藤 Herba Aristolochiae 來源 馬兜鈴科植物馬兜鈴 Aristolochia debilis Sieb. et Zucc. 或北馬兜鈴 Aristolochia contorta Bge. 的乾燥地上部分 主要毒性成分 馬兜鈴酸 A (aristolochic acid A) 長期或過量服用天仙藤, 可引起腎功能衰竭, 誘發尿道癌 16

17 天仙藤的 TLC 色譜圖 1. 馬兜鈴酸 A 2. 天仙藤 天仙藤的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 天仙藤 1. 馬兜鈴酸 A 17

18 關木通 Caulis Aristolochiae Manshuriensis 來源 馬兜鈴科植物木通馬兜鈴 Aristolochia manshuriensis Kom. 的木質莖 主要毒性成分 關木通用藥劑量過大可造成急性中毒, 引起腎功能衰竭, 甚至死亡 中毒反應表現爲食欲不振, 腹脹腹痛, 面部浮腫, 尿頻尿急, 神志不清等 18

19 關木通 TLC 色譜圖 1. 馬兜鈴酸 A 2. 關木通 關木通 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 關木通 1. 馬兜鈴酸 A 19

20 馬兜鈴 Fructus Aristolochiae 來源 馬兜鈴科植物北馬兜鈴 Aristolochia contorta Bge. 或馬兜鈴 Aristolochia debilis Sieb. et Zucc. 的乾燥成熟果實 主要毒性成分 馬兜鈴酸 A (aristolochic acid A) 服用馬兜鈴過量可引起腎功能衰竭 中毒反應表現爲頭暈嗜睡 知覺麻痹 噁心嘔吐 腹瀉便血 少尿無尿 蛋白尿血尿和貧血等 20

21 馬兜鈴的 TLC 色譜圖 1. 馬兜鈴 2. 馬兜鈴酸 A 3. 馬兜鈴 21

22 尋骨風 Herba Aristolochiae Mollissimae 來源 馬兜鈴科植物綿毛馬兜鈴 Aristolochia mollissima Hance 的乾燥全草 主要毒性成分 馬兜鈴酸 A (aristolochic acid A) 長期或過量服用尋骨風, 可引起腎功能衰竭, 誘發尿道癌 22

23 尋骨風的 TLC 色譜圖 1. 尋骨風 2. 馬兜鈴酸 A 3. 尋骨風 23

24 川烏 Radix Aconiti 來源 毛茛科植物烏頭 Aconitum carmichaeli Debx. 的乾燥母根 生川烏 製川烏 24

25 主要毒性成分 烏頭鹼 ( aconitine ) 新烏頭鹼 ( mesaconitine ) 和次烏頭鹼 (hypaconitine) 毒性及中毒反應 烏頭鹼的小鼠靜脈注射 LD 50 為 0.27 mg/kg, 皮下注射 LD 50 為 0.32 mg/kg, 對人的致死量爲 3-5 mg 烏頭類生物鹼的毒性主要爲對心臟和神經系統的毒性, 表現爲心律紊亂, 血壓下降, 體溫降低, 呼吸抑制, 肌肉麻痹和中樞神經功能紊亂 川烏中毒多爲誤用 用量過大或炮製不當 中毒者先有唇舌發麻 噁心 繼之運動不靈 嘔吐, 間有抽搐 急性心源性腦缺血綜合症, 可致突然死亡 生川烏爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 25

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27 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 環己烷 乙酸乙酯 (1:1), 氨蒸氣飽和 ; 檢視 : 改良碘化鉍鉀試液顯色 1.2 樣品製備 : 取川烏藥材粉末 2 g, 加乙醚 20 ml, 振搖 10 分鐘, 加氨試液 2 ml, 振搖 30 分鐘, 放置 2 小時, 分取乙醚層, 蒸乾, 殘渣加無水乙醇 2 ml 溶解, 作爲供試品溶液 另取烏頭鹼 新烏頭鹼 次烏頭鹼對照品適量, 分別加甲醇製成每 1 ml 各含 0.3 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 分別吸取上述溶液各 8 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以改良碘化鉍鉀試液顯色 川烏的 TLC 色譜圖 1. 生川烏 2. 烏頭鹼 3. 生川烏 4. 新烏頭鹼 5. 製川烏 6. 次烏頭鹼 7. 製川烏 27

28 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 甲醇 - 乙腈 -0.2% 醋酸 ( 含 0.5% 三乙胺 ) 水溶液 (20:40: 40); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :240 nm 2.2 樣品製備 : 取生川烏藥材粉末 ( 過三號篩 )1 g 製川烏藥材粉末 5 g, 分別置 100 ml 圓底燒瓶中, 加氨試液適量使濕潤, 加乙醚 50 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 濾液蒸乾, 殘渣加 0.01 M 鹽酸 10 ml 溶解, 濾過, 取續濾液作為供試品溶液 另取烏頭鹼 新烏頭鹼 次烏頭鹼對照品適量, 加 0.01 M 鹽酸分別製成每 1 ml 各含 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 20 L, 在上述色譜條件下進樣分析 28

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30 草烏 Radix Aconiti Kusnezoffii 來源 本品為毛茛科植物北烏頭 Aconitum kusnezoffii Reichb. 的乾燥塊根 主要毒性成分 烏頭鹼 (aconitine) 新烏頭鹼 (mesaconitine) 和次烏頭鹼 ( hypaconitine) 人口服生草烏 0.3 g 即可出現中毒症狀, 表現爲口舌及全身麻木 噁心 心律失常等 重度中毒者可見神志不清或昏迷, 口唇指端發紺, 二便失禁, 最後可因呼吸抑制而死亡 生草烏爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 生草烏 製草烏 30

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32 附子 Radix Aconiti Lateralis Preparata 來源 毛茛科植物烏頭 Aconitum carmichaeli Debx. 或北烏頭 Aconitum kusnezoffii Reichb. 的子根的加工品 主要毒性成分 烏頭鹼 (aconitine) 新烏頭鹼 (mesaconitine) 和次烏頭鹼 (hypaconitine)( 化學結構式見川烏項下 ) 附子中毒多因煎法不當, 用量大, 或與酒同用, 中毒劑量為 g 中毒反應主要表現爲煩躁不安 流涎 雙側瞳孔增大 對光反應遲鈍 血壓下降 産生血液循環衰竭及中樞抑制等 生附子爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 生附子生草附子黑顺片白附片 32

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34 雪上一枝蒿 Radix Aristolochiae 來源 毛茛科植物短柄烏頭 Aconitum brachypodum Diels 鐵棒錘 A. pendulum Busch (A. szechenyianum Gay.) 或宣威烏頭 A. subrosullatum Hand. Mazz. 等的塊根 主要毒性成分 烏頭鹼 (aconitine) 新烏頭鹼 (mesaconitine) 和次烏頭鹼 (hypaconitine) 雪上一枝蒿中毒往往因用量很大, 未經炮製或與酒同服 誤服等引起 其中毒的主要表現爲心悸胸悶 脈緩 心律不齊, 眼底檢查可見視網膜貧血呈灰白色 視盤境界不清 視網膜動脈細小 ; 中毒的輕重與視網膜細小的程度成正比 中毒者還會出現噁心嘔吐 腹痛腹瀉 尿少浮腫 蛋白尿或腎功能損害 本品爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 34

35 雪上一支蒿的 TLC 色譜圖 1. 烏頭鹼 2. 新烏頭鹼 3. 雪上一支蒿 4. 次烏頭鹼 35

36 關白附 Radix Aconiti Coreani 來源 毛茛科植物黃花烏頭 Aconitum coreanum (Lévl.) Raipaics 的乾燥塊根 主要毒性成分 烏頭鹼 (aconitine) 新烏頭鹼 (mesaconitine) 和次烏頭鹼 (hypaconitine) 服用關白附過量會造成烏頭樣中毒, 主要表現爲對心臟和循環系統的毒性, 能造成心律失常及呼吸抑制 症狀爲唇舌發麻 噁心嘔吐和頭昏等 本品爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 36

37 關白附的 TLC 色譜圖 1. 烏頭鹼 2. 新烏頭鹼 3. 關白附 4. 次烏頭鹼 關白附的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 關白附 1. 烏頭鹼 2. 次烏頭鹼 3. 新烏頭鹼 37

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39 鬼臼 Radix rt Rhizoma Sinopodophylli 來源 小檗科植物桃兒七 Sinopodophyllum emodi (Wall.) Ying 的乾燥根和根莖 主要毒性成分 鬼臼毒素 (podophyllotoxin) 毒性及中毒反應 鬼臼毒素表現爲細胞毒性, 能抑制細胞分裂, 對皮膚黏膜刺激性很大 內服過量可引起嘔吐 劇烈腹瀉 呼吸興奮 運動失調, 甚至導致休克死亡 本品爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 39

40 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 乙酸乙酯 (6:4); 檢視 :10 % 硫酸乙醇溶液 1.2 樣品製備 : 取鬼臼藥材粉末 ( 過三號篩 )1 g, 置 50 ml 錐形瓶中, 加甲醇 25 ml, 精密稱重, 超聲提取 30 分鐘, 放冷, 補足重量, 取上清液, 作爲供試品溶液 另取鬼臼毒素對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以 10% 硫酸乙醇溶液, 置 110 C 加熱 10 分鐘顯色 40

41 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 ; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 mm, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 mm, mm; 流動相 : 乙腈 - 水 (35:65); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :285 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下的供試品溶液 1 ml, 加甲醇稀釋至 10 ml, 作爲供試品溶液 另取鬼臼毒素對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.02 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 取上述溶液用 0.45 mm 濾膜過濾 精密吸取對照品溶液和供試品溶液 10 ml, 在上述色譜條件下進樣分析 41

42 八角蓮 Rhizoma Et Radix Dysosmatis 來源 小檗科植物八角蓮 Dysosma versipellis (Hance) M. 或六角蓮 D. pleiantha (Hance) Woodson (Podophyllum pleianthum Hance) 的乾燥根莖 主要毒性成分 鬼臼毒素 (podophyllotoxin) 毒性及中毒反應 本品爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 八角蓮 六角蓮 42

43 台灣的八角蓮中毒事件報道 43

44 八角蓮的 TLC 圖 1. 八角蓮 2. 八角蓮 3. 鬼臼毒素 4. 六角蓮 5. 八角蓮 八角蓮的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 八角蓮 C. 八角蓮 D. 六角蓮 1. 鬼臼毒素 44

45 防己 Radix Stephaniae Tetrandrae 來源 防己科植物 Stephania tetrandra S. Moore 的乾燥根 主要毒性成分 粉防己鹼 (tetrandrine) 毒性及中毒反應 粉防己服用劑量過大時, 會産生嚴重的局部組織刺激 肝臟毒性和淋巴組織壞死 中毒反應表現爲噁心嘔吐 肌張力增加 四肢麻痹, 可因呼吸抑制而死亡 粉防己鹼靜脈滴注劑量較大或滴注速度太快時可引起注射部位疼痛 靜脈炎 急劇血壓下降 血紅蛋白尿 輕度貧血 呼吸困難和腎小管壞死等症狀 45

46 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件:薄層層析板:硅膠 GF 254 ; 展開劑:乙酸乙酯 甲醇 水 (6:1:0.2); 檢視:紫外燈 (254 nm) 1.2 樣品製備:取防己藥材粉末 ( 過三號篩 )1 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加氨試液適量使濕潤, 放置 30 分鐘, 加乙醚 25 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 5 ml 溶解, 作為供試品溶液 ; 另取粉防己鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 254nm 紫外光燈下檢視 防己的 TLC 色譜圖 1. 防己 2. 粉防己鹼 3. 防己 46

47 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件:高效液相色譜儀 :Agilent 1100; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18, 5 mm, mm; 保護柱 ZORBAX SB-C 18,5 mm, mm; 流動相 : 水 -0.1% 三乙胺乙腈溶液 (20:80); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :282 nm 2.2 樣品製備:取薄層色譜法項下的供試品溶液 1 ml, 加甲醇稀釋至 10 ml 作為供試品溶液 ; 另取粉防己鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 取上述溶液用 0.45 mm 濾膜過濾 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 ml, 在上述色譜條件下進樣分析 47

48 苦參 Radix Sophorae Flavescentis 來源 豆科植物苦參 Sophora flavescens Ait. 的乾燥根 主要毒性成分 苦參鹼 (matrine) 氧化苦參鹼 (oxymatrine) 和金雀花鹼 (-)- cytisine 毒性及中毒反應 苦參急性中毒主要表現在對中樞神經系統的影響 中毒反應有頭暈噁心 嘔吐便秘 步態不穩 呼吸急促 痙攣驚厥等, 嚴重者可出現呼吸抑制, 有時危及生命 48

49 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 矽膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 甲醇 (8:2), 氨蒸氣飽和 ; 檢視 : 改良碘化鉍鉀試液顯色 1.2 樣品製備 : 取苦參藥材粉末 2 g, 加濃氨試液 2 ml 潤濕, 靜置 10 分鐘, 加氯仿 50 ml, 超聲 30 分鐘, 取濾液蒸乾, 殘渣加氯仿 1 ml 溶解, 作爲供試品溶液 ; 另取苦參鹼 氧化苦參鹼 金雀花鹼對照品適量, 加甲醇分別製成每 1 ml 各含 0.2 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 吸取上述溶液各 2 L, 分別點於同一矽膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以改良碘化鉍鉀試液顯色 苦參的 TLC 色譜圖 1. 苦參鹼 2. 苦參 3. 氧化苦參鹼 4. 苦參 5. 金雀花鹼 49

50 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100; 色譜柱 :XTerra RP 18,5 m, mm; 保護柱: XTerra RP 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 M 磷酸二氫鈉 ( 含 0.01 M 磷酸和 0.02 M 庚烷磺酸鈉 ) 溶液 (15:85); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 : 220 nm 2.2 樣品製備 : 稱取苦參藥材粉末 ( 過三號篩 )0.5 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加氨試液適量使濕潤, 放置 30 分鐘, 再加氯仿 25 ml, 加熱回流 2 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加 50% 甲醇 10 ml 溶解, 為供試品溶液 ; 另取苦參鹼 氧化苦參鹼 金雀花鹼對照品適量, 加甲醇分別製成每 1 ml 各含 0.5 mg 的溶液, 分別取上述三種對照品溶液 2 ml 混合並加甲醇稀釋至 10 ml, 作爲混合對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾, 精密吸取對照品溶液和供試品溶液 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 50

51 山豆根 Radix Sophorae Tonkinensis 來源 豆科植物越南槐 Sophora tonkinensis Gapnep. 的乾燥根及根莖 主要毒性成分 苦參鹼 (matrine) 氧化苦參鹼 (oxymatrine) 和金雀花鹼 [(-)-cytisine] 毒性及中毒反應 山豆根可使膽鹼能自主神經系統興奮, 並對胃腸道有較強的刺激作用, 可引起胃腸功能紊亂, 表現爲噁心嘔吐 食欲不振 腹痛腹瀉等 對神經系統表現爲初期興奮, 繼以麻痹的作用, 表現爲頭暈眼花 步態不穩 意識不清 抽搐驚厥等 嚴重中毒有時可因呼吸衰竭而死亡 本品爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 51

52 山豆根的 TLC 色譜圖 1. 山豆根 2. 苦參鹼 3. 山豆根 4. 氧化苦參鹼 5. 金雀花鹼 52

53 狼毒 Radix Euphorbiae 來源 大戟科植物狼毒大戟 Euphorbia fischeriana Steud. 或月腺大戟 E. ebracteolata Hayata 的根 主要毒性成分 岩大戟內酯 A 和 B(jolkinolide A, B) 毒性及中毒反應 服用狼毒不當會出現噁心嘔吐 出血性下痢 血壓下降等症狀 ; 嚴重者可致眩暈 站立不穩 抽搐痙攣等 本品爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 狼毒大戟 月腺大戟 53

54 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 正己烷 - 乙酸乙酯 (9:1), 二次展開 ; 檢視 : 紫外光燈 (254nm) 1.2 樣品製備取狼毒大戟藥材粉末 4 g, 加乙醇 40 ml, 回流 1 小時, 冷卻, 濾過, 取濾液 20 ml 置水浴中, 濃縮至乾, 加甲醇 1 ml 溶解, 作爲供試品溶液 ; 另取岩大戟內酯 A 和 B 對照品適量, 分別加甲醇製成每 1 ml 各含 0.1 mg 的溶液, 分別吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 254 nm 紫外光燈下檢視 狼毒大戟的 TLC 色譜圖 1. 岩大戟內酯 A 2. 狼毒大戟 3. 岩大戟內酯 B 54

55 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件高效液相色譜儀 :Agilent 1100; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 - 水 (75:25); 流速 : 1.0 ml/min; 檢測波長 :250 nm 2.2 樣品製備取狼毒大戟藥材粉末 ( 過三號篩 )2 g, 置 50 ml 燒瓶中, 加甲醇 25 ml, 精密稱定, 加熱回流 1 小時, 放冷, 加甲醇補足重量, 取上清液 1 ml 加甲醇稀釋至 10 ml, 作爲供試品溶液 另取岩大戟內酯 A 和 B 對照品適量, 加甲醇分別製成每 1 ml 各含 0.1 mg 的溶液, 分別吸取上述兩溶液各 1 ml 置同一 10 ml 容量瓶中, 加甲醇稀釋至刻度, 作爲對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 狼毒的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 狼毒大戟 C. 月腺大戟 D. 月腺大戟 1. 岩大戟內酯 B 2. 岩大戟內酯 A 55

56 雷公藤 Radix Tripterygii Wilfordii 來源 衛矛科植物雷公藤 Tripterygium wilfordii Hook. f. 的根 主要毒性成分 雷公藤甲素 (triptolide) 毒性及中毒反應 雷公藤有很強烈的胃毒作用, 可使胃黏膜充血 水腫, 降低前列腺素的保護作用而損傷胃黏膜 雷公藤還有致突變及誘發染色體畸變等作用 雷公藤中毒表現爲胃痛 口乾 腹部燒灼感 噁心嘔吐 劇烈腹瀉等, 嚴重者可出現皮膚黏膜 造血系統 神經系統和泌尿系統等多方面症狀 56

57 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 乙醚 氯仿 (1:2); 顯色 : 稀硫酸試液 1.2 樣品製備 : 取雷公藤藥材粉末 ( 過三號篩 )5 g, 置 100 ml 圓底燒瓶中, 加氯仿 50 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 10 ml 溶解, 作爲供試品溶液 ; 另取雷公藤甲素對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以 10% 濃硫酸溶液, 80 加熱約 10 分鐘顯色 雷公藤的 TLC 色譜圖 1. 雷公藤 2. 雷公藤甲素 57

58 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 ; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 mm, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 mm, mm; 流動相 : 甲醇 - 水 (45:55); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :225 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下的供試品溶液 5 ml, 加甲醇稀釋至 10 ml, 作爲供試品溶液 ; 取雷公藤甲素對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.01 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 取上述溶液用 0.45 mm 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液 10mL, 在上述色譜條件下進樣分析 雷公藤的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 雷公藤 1. 雷公藤甲素 58

59 紫金皮 Cortex Tripterygii Hypoglauci 來源 衛矛科植物昆明山海棠 Tripterygium hypoglaucum(levl)hutch 的根皮 主要毒性成分 雷公藤甲素 (triptolide) 毒性及中毒反應 昆明山海棠的不良反應主要表現在消化道及生殖系統方面, 會出現胃痛, 食慾減退, 腹瀉或便秘, 女性月經減少及閉經, 男性精液減少或無精等症狀 59

60 紫金皮的 TLC 色譜圖 1. 紫金皮 2. 雷公藤甲素 紫金皮的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 紫金皮 1. 雷公藤甲素 60

61 菊三七 Radix Gynurae Segeti 來源 菊科植物三七草 Gynura segetum (Lour) Merr. 的根 主要毒性成分 千里光鹼 (senecionine) 毒性及中毒反應 千里光鹼等雙稠吡咯啶 (pyrrolizidine) 類生物鹼, 對人肝臟有毒性, 可引起肝硬化和蔓延性肝靜脈內膜炎等 61

62 62

63 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 甲醇 (9:1), 氨蒸氣飽和 ; 檢視 : 改良碘化鉍鉀試液 1.2 樣品製備 : 取菊三七藥材粉末 3 g, 加濃氨試液 3 ml 潤濕, 放置 10 分鐘, 加氯仿 30 ml, 超聲 30 分鐘, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加氯仿 1 ml 溶解, 作為供試品溶液 ; 另取千里光鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 1 mg 的溶液作為對照品溶液 吸取上述溶液各 15 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以改良碘化鉍鉀試液顯色 菊三七的 TLC 色譜圖 1. 千里光鹼 2. 菊三七 63

64 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 mm, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 - 甲醇 M 磷酸氫二鈉 ( 含 0.1% SDS) 溶液 -0.1% 磷酸 (40:10:40:10); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :220 nm 2.2 樣品製備 : 取菊三七藥材粉末 ( 過三號篩 )2 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加氨試液適量使濕潤, 加氯仿 25 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 50 ml 溶解, 作爲供試品溶液 另取千里光鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 菊三七的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 菊三七 1. 千里光鹼 64

65 百部 Radix Stemonae 來源 百部科植物直立百部 Stemona sessilifolia(miq.)franch. Et Sav, 蔓生百部 S. japonica(bl.)miq. 和對葉百部 S. tuberosa Lour. 的根 主要毒性成分 對葉百部鹼 (tuberostemonine) 毒性及中毒反應 百部生物鹼對胃腸道有較強的刺激作用, 大劑量可降低呼吸中樞興奮性, 繼而使呼吸中樞麻痹 口服百部後偶見噁心嘔吐, 腹痛腹瀉, 膽絞痛, 頭昏頭痛, 面色蒼白, 呼吸困難等 嚴重者可出現抽搐 昏迷, 甚至呼吸中樞麻痹而死亡 65

66 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 矽膠 GF 254 ; 展開劑 : 環己烷 乙酸乙酯 (1:1), 氨蒸氣飽和, 二次展開 ; 顯色 : 改良碘化鉍鉀試液 1.2 樣品製備 : 取百部藥材粉末 ( 過三號篩 )2 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加氨試液適量使濕潤, 放置 30 分鐘, 再加氯仿 25 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣用 5 ml 甲醇溶解, 作爲供試品溶液 ; 另取對葉百部鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.5 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 分別吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一矽膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以改良碘化鉍鉀試液顯色 百部的 TLC 色譜圖 1-3. 百部 4. 對葉百部鹼 5-6. 百部 66

67 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 M 庚烷磺酸鈉水溶液 (55:45); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :230 nm 2.2 樣品製備 : 同薄層色譜法 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 百部的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 百部 C. 百部 D. 百部 1. 對葉百部鹼 67

68 虎杖 Rhizoma Polygoni Cuspidati 來源 蓼科植物虎杖 Polygonum cuspidadum Sieb. et Zucc. 的乾燥根莖和根 主要毒性成分 白藜蘆醇苷 (polydatin) 毒性及中毒反應 給大鼠腹腔注射白藜蘆醇苷, 可引起不同程度的肝細胞壞死 腹膜炎症和骨髓脂肪增生, 並伴有白細胞減少 口服虎杖及其製劑, 有時出現口乾 噁心嘔吐等症狀 68

69 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 - 甲醇 (2:1); 檢視 : 紫外光燈 (254nm) 1.2 樣品製備 : 取虎杖藥材粉末 0.3 g, 置索氏提取器中, 加甲醇 100 ml, 加熱回流 2 小時, 取提取液加熱濃縮至 5 ml, 作為供試品溶液 ; 另取白藜蘆醇苷對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.3 mg 的溶液, 作為對照品溶液 分別吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 254 nm 紫外光燈下檢視 虎杖的 TLC 色譜圖 1. 虎杖 2. 白藜蘆醇苷 3. 虎杖 4. 虎杖 69

70 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 高效液相色譜儀 :Agilent 1100; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 - 水 (20:80); 流速 : 1.0 ml/min; 檢測波長 :306 nm 2.2 樣品製備 取薄層色譜法項下的供試品溶液 0.1 ml, 加甲醇稀釋至 10 ml, 作為供試品溶液 ; 另取白藜蘆醇苷對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.03 mg 的溶液, 作為對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 虎杖的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 虎杖 C. 虎杖 D. 虎杖 1. 白藜蘆醇苷 70

71 北豆根 Rhizoma Menispermi 來源 防己科植物蝙蝠葛 Menispermum dauricum DC. 的根莖 主要毒性成分 蝙蝠葛蘇林鹼 (daurisoline) 和蝙蝠葛鹼 (dauricine) 毒性及中毒反應 在過量服用北豆根或其生物鹼製劑導致重度中毒時, 可出現驚厥 嚴重心律紊亂和呼吸肌麻痺等症狀 71

72 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 矽膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 - 甲醇 (7: 3); 檢視 : 改良碘化鉍鉀試液顯色 1.2 樣品製備 : 取北豆根藥材粉末 ( 過三號篩 )1 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加氨試液適量使濕潤, 放置 30 分鐘, 加氯仿 25 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 10 ml 溶解, 作為供試品溶液 ; 另取蝙蝠葛鹼和蝙蝠葛蘇林鹼對照品適量, 分別加甲醇製成每 1 ml 各含 0.2 mg 的溶液, 作為對照品溶液 分別吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一矽膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以碘化鉍鉀顯色 北豆根的 TLC 色譜圖 1. 蝙蝠葛鹼 2. 北豆根 3. 蝙蝠葛蘇林鹼 72

73 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm;zorbax SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 -0.2% 醋酸 ( 含 0.5% 三乙胺 ) 溶液 (50:50); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :284 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下的供試品溶液 2 ml 加甲醇稀釋至 10 ml, 作為供試品溶液 ; 另取蝙蝠葛鹼 蝙蝠葛蘇林鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 各含 0.02 mg 的溶液, 作為對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 北豆根的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 北豆根 1. 蝙蝠葛蘇林鹼 2. 蝙蝠葛鹼 73

74 延胡索 Rhizoma Corydalis 來源 罌粟科植物延胡索 Corydalis yanhusuo W. T. Wang 的乾燥塊莖 主要毒性成分 延胡索乙素 (dl-tetrahydropalmatine) 毒性及中毒反應 大劑量服用延胡索及其製劑會産生中毒反應, 主要表現爲頭昏 面色蒼白 嗜睡 四肢乏力, 嚴重者可見呼吸困難 抽搐 血壓下降 脈搏減弱, 甚至引起休克及強直性驚厥 74

75 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 矽膠 GF 254 ; 展開劑 : 乙酸乙酯 46% 乙酸 三乙胺 (8:1:1); 顯色 : 碘顯色 1.2 樣品製備 : 取延胡索藥材粉末 ( 過三號篩 )0.5 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加氨試液適量使濕潤, 加氯仿 25 ml, 加熱 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 10 ml 溶解, 作為供試品溶液 另取延胡索乙素對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.5 mg 的溶液, 作為對照品溶液 延胡索的 TLC 色譜圖 1. 延胡索 2. 延胡索乙素 3. 延胡索 75

76 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 mm, mm;zorbax SB-C 18,5 mm, mm; 流動相 : 乙腈 -0.01M 磷酸氫二鈉 ( 含 0.1%SDS) 溶液 -0.1% 磷酸水溶液 (50:25:25); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :280 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下的供試品溶液 1 ml 加甲醇稀釋至 10 ml, 作為供試品溶液 另取延胡索乙素對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 mg 的溶液, 作為對照品溶液 取上述溶液用 0.45 mm 濾膜過濾 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 20 ml, 在上述色譜條件下進樣分析 76

77 石菖蒲 Rhizoma Acori Tatarinowii 來源 天南星科植物石菖蒲 Acorus tatarinowii Schott 的根莖 主要毒性成分 - 細辛醚 ( -asarone) 毒性及中毒反應 石菖蒲中毒表現爲興奮脊髓神經, 引起抽搐, 外界刺激可誘發或加劇 77

78 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 矽膠 GF 254 ; 展開劑 : 苯 (100%); 檢視 : 紫外燈 (366 nm) 1.2 樣品製備 : 取石菖蒲藥材粉末 5 g, 加石油醚 30 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 濾液蒸乾, 加甲醇 10 ml 溶解作為供試品溶液 ; 另取 α- 細辛醚對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.1 mg 的溶液, 作為對照品溶液 分別吸取上述溶液各 15 L, 分別點於同一矽膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 254 nm 和 366 nm 紫外燈下檢視 石菖蒲的 TLC 色譜圖 1. 石菖蒲 2. 石菖蒲 3. α- 細辛醚 4. 石菖蒲 78

79 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 - 水 (50:50); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :256 nm 2.2 樣品製備 : 取石菖蒲藥材粉末 ( 過三號篩 )0.5 g, 置圓底燒瓶中, 加甲醇 25 ml, 稱定重量, 加熱回流 1 小時, 放冷, 加甲醇補足重量, 取上清液 1 ml 加甲醇稀釋至 10 ml 作為供試品溶液 另取 α- 細辛醚對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.01 mg 的溶液, 作為對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 79

80 重樓 Rhizoma Paridis 來源 百合科植物雲南重樓 Paris polyphylla Smith var. yunnanensis (Franch.) Hand. Mazz. 或七葉一枝花 Paris polyphylla Smith var. chinensis (Franch.) Hara 的乾燥根莖 主要毒性成分 重樓皂苷 A (pariphyllin A) 毒性及中毒反應 服用重楼剂量过大可致中毒, 主要表现为恶心 呕吐和头痛等症状, 严重者可见痉挛 80

81 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 - 甲醇 - 水 (7: 3:0.5); 檢視 :10 % 濃硫酸乙醇溶液,80 C 加熱顯色 1.2 樣品製備 : 取重樓藥材粉末 ( 過三號篩 )1 g, 置 50 ml 錐形瓶中, 加甲醇 25 ml 超聲提取 30 分鐘, 取上清液, 作為供試品溶液 另取重樓皂苷 A 對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.5 mg 的溶液, 作為對照品溶液 吸取上述溶液, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以 10 % 濃硫酸乙醇溶液, 80 C 加熱顯色 重樓的 TLC 色譜圖 1. 重樓皂苷 A 2. 重樓 3. 重樓 81

82 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18, 5 m, mm; 流動相 : 乙腈 : 水 (55:45) 檢測波長 :210 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下供試品溶液 對照品溶液, 用 0.45 mm 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 5 ml, 在上述色譜條件下進樣分析 重樓的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 重樓 C. 重樓 D. 重樓 1. 重樓皂苷 A 82

83 仙茅 Rhizoma Curculiginis 來源 石蒜科植物仙茅 Curculigo orchioides Gaertn. 的乾燥根莖 主要毒性成分 仙茅苷 (curculigoside) 毒性及中毒反應 傳統上認爲仙茅有小毒, 臨床上少見仙茅中毒反應報告 83

84 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 醋酸乙酯 - 甲醇 - 甲酸 (10:1:0.1); 檢視 : 紫外光燈 (254 nm) 1.2 樣品製備 : 取仙茅藥材粉末 ( 過三號篩 )0.5 g, 置於 50 ml 錐形瓶中, 加水飽和的正丁醇 25 ml, 冷浸 12 小時, 超聲提取 30 分鐘, 濾過, 濾液蒸乾, 殘渣加 40% 甲醇 5 ml 溶解, 作爲供試品溶液 ; 另取仙茅苷對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 2 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 分別吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 254 nm 紫外光燈下檢視 仙茅的 TLC 色譜圖 1. 仙茅 2. 仙茅苷 3. 仙茅 84

85 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 -1% 醋酸水溶液 (22:78); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :283 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下的供試品溶液 1 ml 加甲醇稀釋至 10 ml 作爲供試品溶液 ; 另取仙茅苷對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.02 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 85

86 青風藤 Caulis Sinomenii 來源 防己科植物青藤 Sinomenium acutum 及毛青藤 Sinomenium acutum var. cinereum 的乾燥藤莖 主要毒性成分 青藤鹼 (sinomenine) 毒性及中毒反應 青藤鹼的中毒反應表現爲心率加快 血壓下降 呼吸困難 白細胞減少和藥物性皮炎等, 嚴重者會出現呼吸衰竭和循環衰竭 86

87 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 醋酸 - 甲醇 - 三乙胺 (8:1:1); 檢視 : 紫外光燈 (254 nm) 1.2 樣品製備 : 取青風藤藥材粉末 ( 過三號篩 )0.5 g, 精密稱定, 置具塞錐形瓶中, 加 70% 乙醇 25 ml, 密塞, 稱定重量, 超聲提取 30 分鐘, 放冷, 用 70% 乙醇補足重量 搖勻, 濾過, 取續濾液作為供試品用溶液 另精密稱取青藤鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 青風藤的 TLC 色譜圖 1. 青風藤 2. 青藤鹼 87

88 2. 高效液相色譜法 2.1 高效液相色譜儀 : Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 水 -0.1% 三乙胺乙腈溶液 (70:30); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :262 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下的供試品溶液 1 ml, 加甲醇稀釋至 10 ml 作爲供試品溶液 ; 另取青藤鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.18 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 青風藤的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 青風藤 1. 青藤鹼 88

89 芫花 Flos Genkwae 來源 瑞香科植物芫花 Daphne genkwa Sieb. et Zucc. 的花蕾 主要毒性成分 芫花酯甲 (yuanhuacine) 毒性及中毒反應 過量內服芫花會産生中毒反應, 表現爲口腔灼痛 惡心 劇烈嘔吐 腹痛腹瀉 脫水 肌肉痙攣 血壓下降和休克等症狀 89

90 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 - 甲醇 (20:1); 檢視 : 紫外光燈 (254 nm) 1.2 樣品製備 : 取芫花藥材粉末 8 g, 加甲醇 50 ml, 超聲處理 1 小時, 過濾, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 1 ml 溶解, 作為供試品溶液 ; 另取芫花酯甲對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 1 mg 的溶液, 作為對照品溶液 吸取上述溶液各 3 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 254 nm 紫外燈下檢視 芫花的 TLC 色譜圖 1. 芫花 2 芫花酯甲 3. 芫花 90

91 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : Alltima C 18,5 mm, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 mm, mm; 流動相 : 乙腈 - 水 (85:15); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :240 nm 2.2 樣品製備 : 取芫花藥材粉末 ( 過三號篩 )0.5 g, 置圓底燒瓶中, 加甲醇 25 ml, 加熱回流提取 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加 10 ml 甲醇溶解, 作為供試品溶液 ; 另取芫花酯甲對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 mg 的溶液, 作為對照品溶液 取上述溶液用 0.45 mm 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 20 ml, 在上述色譜條件下進樣分析 91

92 洋金花 Flos Daturae 來源 茄科植物白曼陀羅 Datura metel L. 的乾燥花 主要毒性成分 東莨菪鹼 (scopolamine) 和莨菪鹼 (hyoscyamine) 毒性及中毒反應 洋金花中毒表現爲頭暈 嗜睡 站立不穩 肢體無力, 隨後出現一系列興奮現象, 如抓空 譫語等無意識動作 其中毒症狀還包括口乾 皮膚潮紅 心跳加快 瞳孔散大 步態不穩 神志模糊 高燒昏迷 大小便失禁和陣發性抽搐等 本品爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 92

93 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件:薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 - 甲醇 (7: 3), 氨蒸氣飽和 ; 檢視 : 改良碘化鉍鉀試液 1.2 樣品製備 : 取洋金花藥材粉末 1.5 g, 用 2 ml 濃氨試液潤濕, 靜置 30 分鐘, 加氯仿 15 ml, 超聲 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加氯仿 0.5 ml 溶解, 作爲供試品溶液 ; 另取鹽酸東莨菪鹼 莨菪鹼對照品適量, 加甲醇分別製成每 1 ml 各含 0.6 mg 的溶液作爲對照溶液 分別吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以改良碘化鉍鉀試液 洋金花的 TLC 色譜圖 1. 洋金花 2. 莨菪鹼 3. 洋金花 4. 莨菪鹼 5. 洋金花 93

94 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件:高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18, 5 m, mm; 保護柱 : ZORBAX SB-C 18, 5 m, mm; 流動相 : 乙腈 -0.02M 庚烷磺酸鈉水溶液 (30:70); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :216 nm 2.2 樣品製備 : 稱取洋金花藥材粉末 ( 過三號篩 )1 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加氨試液適量使濕潤, 放置 30 分鐘, 再加氯仿 25 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣以流動相 10 ml 溶解, 做為供試品溶液 ; 另取鹽酸東莨菪鹼 莨菪鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含二者各 0.1 mg 的溶液, 作爲混合對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 25 L, 在上述色譜條件下進樣分析 洋金花的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B-D. 洋金花 1. 鹽酸東莨菪鹼 2. 莨菪鹼 94

95 天仙子 Semen Hyoscyami 來源 茄科植物莨菪 Hyoscyamus niger L. 的乾燥成熟種子 主要毒性成分 東莨菪鹼 (scopolamine) 和莨菪鹼 (hyoscyamine) 毒性及中毒反應 天仙子中毒表現爲口渴 唇舌乾燥 咽食困難 皮膚乾燥潮紅 瞳孔散大 心動過速 狂燥 幻覺 譫語 運動失調 視力模糊等 嚴重者可見大小便失禁 昏迷, 因呼吸中樞麻痹 缺氧而死亡 本品爲香港 中醫藥條例 附表 1 ( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 95

96 天仙子的 TLC 色譜圖 1. 茛菪鹼 2. 天仙子 3. 鹽酸東茛菪鹼 天仙子的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 天仙子 1. 鹽酸東莨菪鹼 2. 莨菪鹼 96

97 罌粟殼 Pericarpium Papaveris 來源 罌粟科植物罌粟 Papaver somniferum L. 的乾燥成熟果殼 主要毒性成分 嗎啡 (morphine) 和罌粟鹼 (papaverine) 毒性及中毒反應 過量服用罌粟殼會産生中毒反應, 表現爲煩躁不安 譫妄 全身乏力 頭暈嗜睡 瞳孔縮小等症狀, 嚴重者出現體溫下降 手腳發冷 肌肉鬆弛等, 甚至因呼吸麻痹而死亡 慢性中毒主要爲成癮, 可見厭食 便秘 早衰 陽痿 消瘦 貧血等症狀 97

98 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 - 甲醇 (7:3); 檢視 : 改良碘化鉍鉀試液顯色 1.2 樣品製備 : 取罌粟殼藥材粉末 ( 過三號篩 )2 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加氨試液適量使濕潤, 加氯仿 25 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 5 ml 溶解, 作為供試品溶液 另取嗎啡 罌粟鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 各含 1 mg 的溶液, 作為對照品溶液 分別吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以碘化鉍鉀顯色 1. 嗎啡 2. 罌粟殼 3. 罌粟鹼 98

99 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 M 磷酸氫二鈉 ( 含 0.1% SDS)-0.1% 磷酸 (30:50: 20); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :210 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下的供試品溶液 2 ml, 加甲醇稀釋至 10 ml 溶解, 作為供試品溶液 另取嗎啡 罌粟鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含各 1 mg 的溶液, 作為對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 罌粟殼的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 罌粟殼 1. 嗎啡 2. 罌粟鹼 99

100 吳茱萸 Fructus Evodiae 來源 芸香科植物吳茱萸 Evodia rutaecarpa 石虎 Evodia rutaecarpa var. officinalis 或疏毛吳茱萸 Evodia rutaecarpa var. bodinieri 的乾燥近成熟果實 主要毒性成分 吳茱萸鹼 (evodiamine) 和吳茱萸次鹼 (rutaecarpine) 毒性及中毒反應 服用吳茱萸劑量過大, 會出現胸悶 頭痛 眩暈 腹痛腹瀉 視力障礙等不良反應 100

101 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 正己烷 - 氯仿 - 丙酮 - 甲醇 - 三乙胺 (6:2:1.4:0.2:1), 兩次展開 ; 檢視 : 紫外光燈 (366 nm) 1.2 樣品製備 : 取吳茱萸藥材粉末 1 g, 15 % 碳酸鈉溶液 3 ml 潤濕, 加氯仿 10 ml, 冷浸 24 小時, 濾過, 氯仿液濃縮至 1 ml, 作爲供試品溶液 ; 另取吳茱萸鹼 吳茱萸次鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含二者各 mg 的溶液, 作爲混合對照品溶液 分別吸取上述溶液各 3 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 366 nm 紫外燈下檢視 吳茱萸的 TLC 色譜圖 1. 吳茱萸 2. 吳茱萸鹼 3. 吳茱萸 4. 吳茱萸次鹼 5. 吳茱萸 101

102 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件高效液相色譜儀 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 甲醇 - 水 (70:30); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :225 nm 2.2 樣品製備 : 取吳茱萸藥材粉末 ( 過三號篩 )0.5 g, 置 50 ml 錐形瓶中, 加甲醇 25 ml, 精密稱重, 超聲 1 小時, 放冷, 加甲醇補足重量, 取上清液 2.5 ml 加甲醇稀釋至 10 ml, 作爲供試品溶液 ; 另取吳茱萸鹼和吳茱萸次鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含二者各 mg 的溶液, 作爲混合對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 吳茱萸的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B-D. 吳茱萸 1. 吳茱萸鹼 2. 吳茱萸次鹼 102

103 川楝子 Fructus Toosendan 來源 楝科植物川楝 Melia toosendan Sieb. Et Zucc. 的乾燥成熟果實 主要毒性成分 川楝素 (Toosendanin) 毒性及中毒反應 川楝子中毒多因誤服苦楝子 或用量大 炮製不當而引起, 表現爲對胃腸道的强烈的刺激性 對中樞系統的抑制作用等 中毒反應有胃黏膜發炎 潰瘍, 神志恍惚, 煩躁不安, 呼吸急促, 尿頻 蛋白尿血尿等, 嚴重者可因循環系統衰竭而死亡 103

104 104

105 105

106 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 苯 - 丙酮 (9:1); 檢視 :0.125% 二甲氨基苯甲醛硫酸試液 1.2 樣品製備 : 取川楝子藥材粉末 1 g, 加乙醚 4 ml, 浸泡過夜, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 1 ml 溶解, 作爲供試品溶液 ; 另取另取川楝素對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 吸取上述溶液各 10 L, 分別點于同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以 0.125% 二甲氨基苯甲醛硫酸試液顯色 川楝子 TLC 色譜圖 1. 川楝子 2. 川楝素 3. 川楝子 4. 川楝子 106

107 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 甲醇 水 (20:20:60); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :215 nm 2.2 樣品製備 : 取川楝子藥材粉末 ( 過三號篩 )2 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加甲醇 25 ml, 精密稱重, 加熱回流 1 小時, 放冷, 加甲醇補足重量, 取上清液供試 另取川楝素對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 5 L, 在上述色譜條件下進樣分析 川楝子 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 川楝子 1. 川楝素 107

108 苦楝皮 Cortex Meliae 來源 楝科植物川楝 Melia toosendan Sieb. et Zucc. 或楝 M. azedarach L. 的乾燥樹皮及根皮 主要毒性成分 川楝素 (Toosendanin) 苦楝皮的 TLC 色譜圖 1. 苦楝皮 2. 川楝素 3. 苦楝皮 108

109 喜樹果 Fructus Camptothecae Acuminatae 來源 藍果樹科植物旱蓮木 Camptotheca acuminate Decne. 的果實 主要毒性成分 喜樹鹼 (camptothecine) 毒性及中毒反應 抗癌藥 過量使用喜樹果及其製劑的中毒反應表現在消化系統 造血系統和泌尿系統等多方面, 可引起食慾不振 噁心嘔吐 腸胃炎 出血性膀胱炎 尿痛尿頻 血尿等症狀, 還可抑制骨髓, 使白細胞 血小板和血色素下降 109

110 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 - 甲醇 - 三乙胺 (7:3:0.3); 檢視 : 紫外光燈 (366 nm) 1.2 樣品製備 : 取喜樹果藥材粉末 2 g, 加 80% 乙醇 30 ml 回流 30 分鐘, 放冷, 濾過, 取濾液減壓蒸去乙醇, 濾過, 濾液加氯仿 - 乙醇 (9:1) 溶液 30 ml 萃取, 取氯仿層加熱濃縮至 5 ml, 作為供試品溶液 ; 另取喜樹鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 2 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 分別吸取上述溶液各 1 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 366 nm 紫外光燈下檢視 喜樹果的 TLC 圖 1. 喜樹果 2. 喜樹鹼 3. 喜樹果 110

111 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18, 5 m, mm; 保護柱 : ZORBAX SB-C 18, 5 m, mm; 流動相 : 乙腈 M 磷酸氫二鈉 ( 含 0.1%SDS)-0.1% 磷酸 (25:45: 30); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :360 nm 2.2 樣品製備 : 取喜樹果藥材粉末 ( 過三號篩 )2 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加氨試液適量使濕潤, 加氯仿 25 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 25 ml 溶解, 作爲供試品溶液 另取喜樹鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.2 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 111

112 蛇床子 Fructus Cnidii 來源 傘形科植物蛇床 Cnidium monnieri(l.)cusson 的果實 主要毒性成分 蛇床子素 (osthol) 和花椒毒素 (xanthotoxin) 毒性及中毒反應 服用蛇床子有時會出現輕微口乾 嗜睡及胃部不適等症狀 外用有時會出現皮膚過敏 112

113 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 正己烷 乙酸乙酯 (2:1); 檢視:紫外光燈 (254 nm) 1.2 樣品製備 : 取蛇床子藥材粉末 ( 過三號篩 )0.5 g, 置錐形瓶中, 加乙醇 25 ml, 稱定重量, 放置 2 小時後, 超聲處理 30 分鐘, 放冷, 補足重量, 取上清液作為供 TLC 和 HPLC 試品用溶液 另取花椒毒素 蛇床子素對照品適量, 加乙醇製成每 1 ml 含二者各 0.5 mg 的溶液, 作爲混合對照品溶液 分別吸取上述溶液各 [?] ml, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 254 nm 紫外燈下檢視 蛇床子的 TLC 色譜圖 1. 蛇床子 2. 花椒毒素 3. 蛇床子 4. 蛇床子素 5. 蛇床子 113

114 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 - 水 (50:50); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :300 nm 2.2 樣品製備 : 供試品溶液的製備同薄層色譜法 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液 1 L 供試品溶液 3 L, 在上述色譜條件下進樣分析 蛇床子的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 蛇床子 C. 蛇床子 D. 蛇床子 1. 花椒毒素 2. 蛇床子素 114

115 肉豆蔻 Semen Myristicae 來源 肉豆蔻科植物肉豆蔻 Myristica fragrans Houtt 的種仁 主要毒性成分 肉豆蔻醚 (myristicine) 和甲基丁香酚 (methyleugenol) 毒性及中毒反應 肉豆蔻醚對大腦有興奮和致幻作用 服用過量肉豆蔻會出現心慌 視綫模糊 嘔吐 眩暈頭痛 行為異常等症狀 115

116 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 正己烷 醋酸乙酯 (5:1); 檢視 : 香草醛濃硫酸試液顯色 1.2 樣品製備 : 取肉豆蔻藥材粉末 ( 過三號篩 )0.5 g, 置圓底燒瓶中, 加甲醇 25 ml, 稱定重量, 加熱回流 1 小時, 放冷, 用甲醇補足重量, 取上清液作為供試品溶液 另各取甲基丁香酚 肉豆蔻醚對照品適量, 分別加甲醇製成每 1 ml 各含 0.05 mg 的溶液, 作為對照品溶液 分別吸取上述溶液各 8 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以香草醛濃硫酸試並加熱 10 分鐘顯色 肉豆蔻的 TLC 色譜圖 1. 肉豆蔻 2. 甲基丁香酚 3. 肉豆蔻醚 4. 肉豆蔻 116

117 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 - 水 (45:55); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :235 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下的供試品溶液 1 ml, 加甲醇稀釋至 10 ml, 作為供試品溶液 另取甲基丁香酚 肉豆蔻醚對照品各適量, 分別加甲醇製成每 1 ml 各含 10 g 的溶液, 作為對照品溶液 取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 117

118 苦杏仁 Semen Armeniacae Amarum 來源 薔薇科植物山杏 Prunus armeniaca L. var. ansu Maxim. 西伯利亞杏 Prunus sibirica L. 東北杏 Prunus mandshurica(maxim.) Koehne 或杏 Prunus armeniaca L. 的乾燥成熟種子 主要毒性成分 苦杏仁苷 (amygdalin) 毒性及中毒反應 苦杏仁苷可水解産生氫氰酸, 氫氰酸有劇毒, 對延腦各生命中樞先刺激後麻痹, 並能抑制酶活性, 阻礙新陳代謝, 導致組織細胞的窒息, 因呼吸衰竭而死亡 其毒性與給藥途徑有關, 若非腸道給藥, 苦杏仁苷是一種安全的藥物 服用過量苦杏仁産生的中毒反應表現爲頭暈流涎, 噁心嘔吐, 心悸胸悶, 呼吸困難, 嚴重者可見全身痙攣, 四肢冰冷, 因呼吸麻痹而死亡 118

119 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 乙酸乙酯 甲醇 水 (6:2:0.5); 檢視: 10% 濃硫酸溶液,80 o C 加熱 10 分鐘顯色 1.2 樣品製備 : 取苦杏仁藥材粉末 ( 過二號篩 )0.5 g, 置具塞錐形瓶中, 加甲醇 25 ml, 稱定重量, 放置 2 小時後, 超聲 30 分鐘, 放冷, 加甲醇補足重量, 取上清液作為供試品溶液 ; 另取苦杏仁苷對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 分別吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以 10% 濃硫酸溶液, 並置 80 o C 加熱 10 分鐘顯色 1. 苦杏仁 2. 苦杏仁苷 3. 苦杏仁 119

120 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 :0.1% 磷酸水溶液 - 乙腈 (90:10); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :207 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下的供試品溶液 1 ml, 加甲醇稀釋至 10 ml 作爲供試品溶液 ; 另取苦杏仁苷對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 0.1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 分別取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 120

121 郁李仁 Semen Pruni 來源 薔薇科植物歐李 Prunus humilis Bge. 郁李 Prunus japonica Thunb. 或長柄扁桃 Prunus pedunculata Maxim. 的乾燥成熟種子 主要毒性成分 苦杏仁苷 (amygdalin) 121

122 郁李仁的 TLC 色譜圖 1. 郁李仁 2. 苦杏仁苷 3. 郁李仁 122

123 桃仁 Semen Persicae 來源 薔薇科植物桃 Prunus persica(l.)batsch 或山桃 Prunus davidiana(carr.) Franch. 的乾燥成熟種子 主要毒性成分 苦杏仁苷 (amygdalin) 123

124 桃仁的 TLC 色譜圖 1. 苦杏仁苷 2. 桃仁 124

125 馬錢子 Semen Strychni 來源 馬錢科植物馬錢 Strychnos nux-vomica L. 的乾燥成熟種子 主要毒性成分 馬錢子鹼 (brucine) 和士的寧 (strychnine) 毒性及中毒反應 馬錢子中毒後會出現典型的驚厥症狀, 表現爲頭暈 煩躁不安 呼吸急促 肌肉強硬等, 隨後出現角弓反張 牙關緊閉 四肢挺直等症狀 嚴重者驚厥反復發作多次後, 常因呼吸麻痹 窒息或心力衰竭而死亡 生馬錢子爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 砂炒馬錢子 油炸馬錢子 生馬錢子 125

126 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 乙酸乙酯 氯仿 三乙胺 (8:1:1); 檢視:紫外光燈 (254 nm) 1.2 樣品製備 : 取馬錢子藥材粉末 ( 過三號篩 )1 g, 置 50 ml 圓底燒瓶中, 加氫氧化鈉試液適量使濕潤, 放置 30 分鐘, 再加氯仿 25 ml, 加熱回流 2 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣用甲醇 10 ml 溶解, 作為供試品溶液 ; 另取馬錢子鹼 士的寧對照品適量, 分別加甲醇製成每 1 ml 各含 0.1 mg 的溶液, 作爲對照品溶液 吸取上述溶液各 10 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 置 254 nm 紫外燈下檢視 TLC 色譜圖 1. 制馬錢子 2. 士的寧 3. 生馬錢子 4. 馬錢子鹼 5. 油炙馬錢子 126

127 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 : Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 M 磷酸二氫鉀溶液 ( 含 50% 的 0.01 M 庚烷磺酸鈉, 用 10% 磷酸調 ph 值為 2.8)(25:75); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :260 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜項下的供試品溶液 1 ml, 加甲醇稀釋至 10 ml 為供試品溶液 ; 另分別取薄層色譜項下的對照品溶液各 1 ml, 置於同一 10 ml 量瓶中, 加甲醇至刻度, 作爲對照品溶液 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 127

128 麻黃 Herba Ephedrae 來源 麻黃科植物草麻黃 Ephedra sinica Stapf 中麻黃 Ephedra intermedia Schrenk et C.A. Mey. 或木賊麻黃 Ephedra equisetina Bge. 的乾燥草質莖 主要毒性成分 l- 麻黃鹼 (l-ephedrine) 和 d- 僞麻黃鹼 (d-pseudoephedrine) 毒性及中毒反應 麻黃中毒多表現爲血壓升高 神經系統興奮等 急性中毒可出現頭痛失眠 胸悶心悸 流淚流涕 大汗不止 噁心嘔吐等, 大劑量可抑制心臟, 引起心搏徐緩, 有時可因呼吸衰竭和心室纖顫而死亡 128

129 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 甲醇 三乙胺 (8:1:1); 檢視: 0.3% 茚三酮丙酮溶液顯色 1.2 樣品製備 : 取麻黃藥材粉末 ( 過三號篩 )1 g, 置圓底燒瓶中, 加氨試液數滴使濕潤, 再加氯仿 25 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾, 殘渣加甲醇 10 ml 溶解, 作為供試品溶液 另取 l- 麻黃鹼 d- 僞麻黃鹼對照品適量, 分別加甲醇製成每 1 ml 各含 0.05 mg 的溶液, 作為對照品溶液 吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以 0.3% 茚三酮丙酮溶液顯色 麻黃的 TLC 色譜圖 1. 麻黃鹼 2. 麻黃 3. 僞麻黃鹼 4. 麻黃 129

130 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 :0.1% 磷酸水溶液 - 乙腈 (94:6); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :207 nm 2.2 樣品製備 : 取薄層色譜法項下的供試品溶液 1 ml, 加甲醇稀釋至 10 ml, 作為供試品溶液 ; 另取 l- 麻黃鹼 d- 僞麻黃鹼對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 各含 0.01 mg 的溶液, 作爲混合對照品溶液 分別取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 130

131 細辛 Radix et Rhizoma ASARI 來源 馬兜鈴科植物北細辛 Asarum heterotropoides var. mandshuricum 漢城細辛 Asarum sieboldii Var. seoulense 或華細辛 Asarum sieboldii 的乾燥根及根茎 主要毒性成分 甲基丁香酚 (methyleugenol) 黃樟醚 (safrole) 和細辛醚 (asarone) 毒性及中毒反應 細辛的毒性成分主要爲揮發油, 其醇提取物的毒性遠大於水煎液 服用細辛過量或煎煮時間太短會引起中毒反應, 表現爲頭痛 嘔吐 煩躁不安 面赤 呼吸急促, 瞳孔散大, 體溫和血壓昇高等症狀, 嚴重者可見牙關緊閉 角弓反張 意識不清 四肢抽搐, 最後因呼吸麻痹而死亡 131

132 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 苯 100%; 檢視:香草醛濃硫酸試液, 加熱 10 分鐘顯色 1.2 樣品製備 : 取細辛葉 根粉末 ( 過三號篩 ) 各 2 g, 分別置圓底燒瓶中, 加乙醇 50 ml, 加熱回流 1 小時, 濾過, 取濾液蒸乾溶劑, 殘渣加甲醇 10 ml 溶解, 作為供試品溶液 另取甲基丁香酚 α- 細辛醚 黃樟醚對照品適量, 分別加甲醇製成每 1 ml 各含 0.05 mg 的溶液, 作為對照品溶液 吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以香草醛濃硫酸試液, 加熱 10 分鐘顯色 細辛的 TLC 色譜圖 1. 細辛根 2. 甲基丁香酚 3. 細辛葉 4. 黃樟醚 5. 細辛全草 6. 細辛醚 132

133 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 乙腈 - 水 (50:50); 流速 :1.0 ml/min 檢測波長 :235 nm 2.2 樣品製備:薄層色譜法項下的供試品溶液 1 ml 加甲醇稀釋至 10 ml 作為供試品溶液 ; 另取甲基丁香酚 α- 細辛醚 黃樟醚對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 各含 mg 的溶液, 作為對照品溶液 分別取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 細辛的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 細辛全草 C. 細辛根 D. 細辛葉 1. 甲基丁香酚 2. α- 細辛醚 3. 黃樟醚 133

134 蟾酥 Venenum Bufonis 來源 蟾蜍科動物中華大蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor 或黑眶蟾蜍 Bufo melanostictus Schneider 的乾燥分泌物 主要毒性成分 脂蟾毒配基 (resibufogenin) 華蟾蜍毒基 (cinobufagin) 和蟾蜍精 (bufalin) 毒性及中毒反應 臨床中毒主要因用藥過量或煮食蟾蜍所致 中毒反應多在服食後半小時出現, 表現爲噁心嘔吐 腹痛腹瀉 胸悶心慌 全身發麻 四肢無力 心率緩慢 血壓下降 昏迷虛脫等 外用若濃度過大, 會引起皮膚皰疹, 且有灼痛 本品爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 134

135 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 環己烷 氯仿 丙酮 (4:3:3); 檢視: 10% 濃硫酸溶液,80 o C 加熱約 10 分鐘顯色 1.2 樣品製備 : 取蟾酥藥材粉末 0.2 g, 加乙醇 10 ml, 加熱回流 30 分鐘, 濾過, 取續濾液作爲供試品溶液 ; 另取酯蟾毒配基 華蟾酥毒基 蟾蜍精對照品適量, 分別加甲醇製成每 1 ml 各含 1 mg 的溶液, 作為對照品溶液 吸取上述溶液各 10 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以 10% 濃硫酸溶液,80 o C 加熱約 10 分鐘顯色 1. 酯蟾毒配基 2. 華蟾蜍毒基 3. 蟾酥 4. 蟾蜍精 135

136 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 ZORBAX SB-C 18,5 m, mm 流動相 : 乙腈 -0.5% 磷酸二氫鉀溶液 (50:50); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :296 nm 2.2 樣品製備 : 取蟾酥藥材粉末 ( 過三號篩 )0.5 g, 置 50 ml 錐形瓶中, 加甲醇 25 ml, 超聲提取 1 小時, 放冷, 加甲醇補足重量, 取上清液 2 ml 加甲醇稀釋至 10 ml 作為供試品溶液 另取酯蟾毒配基 華蟾酥毒基 蟾蜍精對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 各含 0.1 mg 的溶液, 作為對照品溶液 分別取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 蟾酥的 HPLC 色譜圖 A. 對照品 B. 蟾酥 1. 蟾蜍精 2. 華蟾酥毒基 3. 酯蟾毒配基 136

137 斑蝥 Mylabris 來源 芫青科昆蟲大斑蝥 Mylabris phalerata Pallas 或黃黑小斑蝥 Mylabris cichorii Linnaeus 的乾燥體 主要毒性成分 斑蝥素 (cantharidin) 毒性及中毒反應 斑蝥口服中毒劑量成人爲 0.6 g, 致死量爲 1.5 g 斑蝥素 0.14 mg 能誘發皮膚起皰,10 mg 可産生嚴重中毒或致死 外用過量, 外敷面積過大, 時間過久, 也可經皮膚吸收而中毒, 嚴重者可致死 接觸斑蝥粉塵也會引起中毒, 出現皮膚水泡 粘膜充血 燒灼疼痛 嚴重者口 舌 咽部黏膜糜爛 潰瘍, 並見頭痛 噁心 嘔吐等症 本品爲香港 中醫藥條例 附表 1( 烈性 / 毒性中藥材 ) 收載品種 137

138 [ 色譜分析 ] 1. 薄層色譜法 1.1 色譜條件 : 薄層層析板 : 硅膠 GF 254 ; 展開劑 : 氯仿 - 丙酮 (98:2); 檢視 :0.1% 溴甲酚綠乙醇試液 1.2 樣品製備 : 取斑蝥藥材粉末 ( 過三號篩 )1 g, 加氯仿適量, 置索氏提取器回流提取 2 小時, 取提取液蒸乾, 殘渣加甲醇 10 ml 溶解, 作為供試品溶液 ; 另取斑蝥素對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 2 mg 的溶液, 作為對照品溶液 分別吸取上述溶液各 5 L, 分別點於同一硅膠 GF 254 薄層板上, 展開後晾乾, 噴以 0.1% 溴甲酚綠乙醇試液顯色 TLC 色譜圖 1. 斑蝥 2. 斑蝥素 3. 斑蝥 138

139 2. 高效液相色譜法 2.1 色譜條件 : 高效液相色譜儀 :Agilent 1100 系統, 配備二極管陣列檢測器 ; 色譜柱 : ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 保護柱 :ZORBAX SB-C 18,5 m, mm; 流動相 : 甲醇 - 水 (40:60); 流速 :1.0 ml/min; 檢測波長 :227 nm 2.2 樣品製備 : 取斑蝥藥材粉末 ( 過三號篩 )1 g, 加氯仿適量索氏提取 2 小時, 取提取液蒸乾, 殘渣加 10 ml 甲醇溶解, 作為供試品溶液 另取斑蝥素對照品適量, 加甲醇製成每 1 ml 含 1 mg 的溶液, 作為對照品溶液 分別取上述溶液用 0.45 m 濾膜過濾 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 10 L, 在上述色譜條件下進樣分析 139

140 謝謝! 140