目 录 Contents 母猪年生产力的概念与提高母猪年生产力的主要途径和措施 / 赵宏志 李千军 王文杰, 等... 1 国外母猪的繁殖性能及年生产力水平 / 傅 衍... 从繁殖方面提高种猪生产能力的综合措施 / 刘火良, 吴同山 刘庆辉... 7 母猪营养与饲养系统概念 / 池永哲... 9

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1 1st China Swine Breeding Symposium & International Forum on Breeding Technology and System 主办单位 北京市畜牧兽医总站 承办单位 北京市生猪产业技术体系创新团队 北京养猪育种中心 北京六马养猪科技有限公司 北京顺鑫农业小店种猪分公司 支持单位 北京市农业局 全国畜牧总站 中国畜牧兽医学会养猪学分会 中国畜牧业协会猪业分会 国家生猪产业技术体系 协办单位 湖南省生猪产业技术体系创新团队 安徽省生猪产业技术体 (排名不分先后) 系创新团队 山东省生猪产业技术体系创新团队 山西省生 猪产业技术体系创新团队 四川省生猪产业技术体系创新团 队 云南省生猪产业技术体系创新团队 福建省生猪产业技 术体系创新团队 广东省生猪产业技术体系创新团队 陕西 省生猪产业技术体系创新团队 猪业科学 编辑部 212 年 6 月 北京

2 目 录 Contents 母猪年生产力的概念与提高母猪年生产力的主要途径和措施 / 赵宏志 李千军 王文杰, 等... 1 国外母猪的繁殖性能及年生产力水平 / 傅 衍... 从繁殖方面提高种猪生产能力的综合措施 / 刘火良, 吴同山 刘庆辉... 7 母猪营养与饲养系统概念 / 池永哲... 9 瘦肉型种母猪繁殖管理 / 张守全 母猪舍建设与环境控制 / 吴中红 王新谋 猪分子育种研究进展 / 刘 榜 猪抗病和免疫相关候选基因的研究进展 / 杨海玲 曾勇庆 王 慧... 2 母猪胎次对断奶仔猪生长性能的影响 / 李凯年 编译 不同杂交组合猪肥育性能与肉品质的研究 / 郭志明 配种前后营养水平对母猪繁殖性能的影响 / 张 亮 张利娟 美国巴杜杂交模式对中国现代商品瘦肉猪生产的参考价值初试 / 张伟力 张似青 张磊彪 OPN 和 BMP15 基因与大长杂交一代母猪产仔数的关系 / 孙敬礼 武 磊 黄 涛, 等 母猪早期妊娠诊断技术的研究进展 / 陈 芳 石放雄... 3 生殖营养对后备母猪发情及受孕的影响 / 刘自逵 朱中平 罗柏荣 等 猪卵母细胞体外成熟的研究 / 郝子悦 刘忠慧 种猪育种中常见问题及对策 / 孙晓超 聂玲琦 新美系杜洛克猪近交效应初探 / 叶道武 王 胜 张伟力.... 左旋肉碱和维生素对公猪精液品质的影响 / 单 妹 王燕桃 朱才兴 等... 6 三品五元杂交商品猪配套系之构想 / 喻传洲 李文献... 9 公猪效应及其在猪繁殖中的应用 / 王怀禹 猪排卵数性状研究进展 / 黄 涛 李大全 孙敬礼 等... 5 美国原种猪在粤西地区的繁育试验初报 / 黄如渠 卢荣洲 贺佳伟 等 授精后高营养水平对高产母猪胚胎存活率和生长性能没有影响 / 朱勇文 编译 公猪试情对母猪发情征兆的影响 / 郑梦奇 魏全伟 石放雄 编译 人工授精技术在生猪遗传改良中的作用 / 陈 斌 解决公猪异味问题的新进展 遗传选育方法 / 李凯年 孟 丹 孟 昱 编译 长白猪概述 / 张伟力 种猪早期选育探讨 / 李成渤 吴洪琴 王友盛 等 维生素 A 与 β- 胡萝卜素对母猪生殖机能的影响 / 姜洪起 赵向红 丁君辉 谈种猪场内测定及注意事项 / 王家圣 朱昌友 韩安勤 等... 8 影响猪人工授精效果的原因 / 刘俊峰 王晋晋 彭 峰 等 应激对猪繁殖性能的影响 / 石放雄 编译... 89

3 深部输精在大白纯繁中的应用效果 / 董斌科 孙 华 李良华 等 猪的分子育种及其应用前景 / 柳小春 影响肉品嫩度的因素及其候选基因的研究进展 / 李欣蔚 张 勇 猪冷冻精液在规模化猪场中的应用实践 / 才永娟, 贺佳伟, 黄如渠, 等 外种猪遗传改良进展与发展趋势 / 刘 榜 蒋腾飞 樊 斌 等 全国生猪遗传改良计划 解读及实施中有关问题的讨论 / 彭中镇 微卫星 DNA 标记技术在养猪业中的应用 / 杨 虎 徐兴莉 胰岛素对母猪发情的影响 / 丁 兰 张 勇 王 艳 猪的氧化应激及其遗传育种的研究进展 / 陈 伟 曾勇庆 确立地方猪肉特色品牌的配套加工技术 / 张伟力 制订地方猪种保种方案应注意的问题 / 王林云 大白母猪用于纯繁和杂交在产仔数上的差异 / 喻传洲 猪人工授精技术的优点 影响因素及提高措施 / 杨 群 韦启鹏 周泉勇 等 又是一个引种高峰年 / 孙德林 猪精子体外获能的研究概况 / 闫益波 李文刚 申 超 后备猪选择方法指要 / 闫之春 新目标 母猪年提供 35 头断奶仔猪 / 胡锦义 对我国生猪遗传改良工作现状的思考与建议 / 彭中镇... 1 克隆技术在养猪生产中的应用概况 / 薛振华 肖 炜 朱振营 等 猪印记基因的研究现状及其应用前景 / 周泉勇 唐艳强 赵书红 猪人工授精技术和生猪遗传改良 / 朱健彬 张守全 基因组选择与猪育种 / 唐国庆 李学伟 我国种猪进口现状与进口政策解读 / 张开展 种公猪系统饲养管理要素 / 张伟力 张陈华 科学管理确保种公猪高度健康 / 郑忠志 宋向阳 张 俊 一种公猪人工受精三位一体养殖方法及装置 研究与示范 / 陈顺友 胡光华 潘飞 刘艳 人工授精技术中种公猪的繁殖管理 / 贾 同 陈预明 张守全 人工授精技术在生猪遗传改良中的作用 / 陈 斌 猪繁殖相关性状遗传标记研究进展 / 赵志超 黄 涛 李大全 我国转基因猪的研究进展 / 潘登科 影响斯格猪繁殖性能的因素分析 / 任丽琴 芦春莲 曹洪战等 猪 FATP1 基因 5 调控区多态性及其与脂肪性状的相关分析 / 华绪川, 张金枝 张立凡等 金属硫蛋白 MT 基因的表达与肉猪的健康生长 / 董彬 王 慧 曾勇庆

4 目 录 Contents 猪 A-FABP 基因 5 调控区多态性及与肉质性状的相关分析 / 高 妍 张嘉保 赵志辉等 不同公猪配种产仔数上的亲和力 / 金访中 胡金平 李湘芹等... 2 微卫星与营养互作对宁乡猪肉质影响的研究 / 谢菊兰 朱吉 孙建帮 SREBP1 及其靶基因在胆固醇生物合成过程中作用机理的研究 / 蒋越 何侃 高运臻等 若干精子抗原基因在猪生殖道及成熟精子中的 mrna 表达研究 / 宋成义 高波 吴晗等 聚合多样性 一种联合品种内和品种间多样性的新多样性方法 / 翻译 李成渤 王建民 母猪后肢形态学评定的复合育种值估计与应用 / 刘顺德 李娜 刘孟洲 等 OB 基因对安徽四个地方品种猪产仔性能的影响 / 王中才 严燕 张陈华 等 圩猪 H-FABP 基因多态性分析及其与 IMF 含量的相关性 / 张陈华 王阳 丁月云等 猪 CuZnSOD 基因的克隆 表达及功能分析 / 杜金芳 曾勇庆 陈伟等 猪肌肉中胶原蛋白特性及其与肉质性状关系的研究 / 李华 杨海玲 曾勇庆等 利用体细胞核移植技术生产优秀公猪 / 薛振华 肖 炜 罗学明等 猪生长和背膘厚相关基因的多基因标记遗传效应研究 / 韩雪蕾 杨华威 蒋腾飞等 科学选留后备公猪 / 孙晓超 ESR 基因在苏姜猪选育中的遗传变异及与公猪繁殖性状的关联研究 / 王宵燕 经荣斌 宋成义等 利用氯前列烯醇控制母猪白天分娩的效果观察与分析 / 吴同山 吴云燕 胡毅军 养猪业要从传统养猪的劳动密集型转移向资本密集型 / 孙德林 规模化种猪场种猪选种育种流程 / 林善波 刘芳 开展联合育种加速我国生猪遗传改良进展 / 王丽娟 马振强 范安泽 母猪利用年限的选择 / 王丽娟 马振强 范安泽 制定育种场种猪育种方案之我见 / 彭中镇 贵州白香猪的育种原理与方法 / 刘培琼 刘若余 张依裕 持续准确的进行猪第 1 肋处测定的重要性 / 冯细钢 原种猪场育种工作的实践开展 / 贺佳伟 才永娟 黄如渠 加强基层畜禽品种改良工作的思考 / 翟诗明 关于开发利用我国黑猪资源的意见 / 李锦钰 关于母猪生产力情况的调查报告 / 李志强 舒知魁 人工授精和基因组技术在猪育种中的应用 / 王相生 黄洪武 胥学新 基于家系的种猪选配方案制定及在生产中的应用 美国 Whiteshire 公司育种方案在湖南美神育种有限公司的实施应用 / 陈锋剑 郑飞燕 尹德明 等 松辽黑猪种公猪繁殖性能简介 / 李兆华 王晓伟 张树敏 等

5 母猪年生产力的概念与提高母猪年生产 力的主要途径和措施 赵宏志1 李千军1 王文杰1 韩玉环2 李俊奇2 周志山2 张广学2 董志万2 刘乐荣2 1.天津市畜牧兽医研究所 天津 天津市宁河原种猪场 天津 315 在养猪生产实践中 一般用平均每头每年内所提供的断 奶仔猪数来表示母猪的年生产力 Sow Productivity 作 为综合指标 母猪年生产力涉及到种猪的繁殖性能 仔猪的 生长性能以及整个繁殖猪群的饲养管理 几乎囊括了 除保 育 育肥阶段 养猪生产的全部内容 现阶段提高母猪年生 产力是养猪业发展的核心问题 1 年前 国外 1 头母猪年 生产断奶仔猪一般是 2 头 性能优良的母猪 良好的营养 和管理能达到 2 头 1 年来 通过营养和饲养管理改善 品种改良和设备改善等 现在母猪的年生产力已获得惊人的 图1 提升 据报道 丹麦顶级猪场的母猪 每年每头可得 3 头 母猪年生产力解析图 断奶仔猪 目前国内许多规模化猪场 1 头母猪一生提供的断 年每头母猪分娩胎数核心问题就是减少母猪的 损失日 和 奶仔猪大约在 3- 头 只有很少部分母猪达到 6 头 母 非工作日 我们通常把母猪处在妊娠期和哺乳期称为母猪 猪繁殖力没有得到真正发挥 另外 由于母猪抚育能力差生 工作日 空怀期为 非工作日 把母猪返情 流产 怀 产的的仔猪成活率也很低 平均每头母猪每年提供的断奶仔 孕期死亡淘汰造成的时间称为 损失日 应该强调的是 损 猪不足 2 头 据查 北京某猪场 29 年基础母猪 1 8 头 失日 是造成母猪年分娩胎次低的重要因素 Legault C. 等 年出栏 2 7 头 平均每头母猪提供 15.5 头合格商品猪 1975 年 提出度量母猪年生产力公式是针对每头母猪个体 平均每头母猪年提供断奶仔猪不足 18 头 母猪年生产力低 单胎次计算而言的 计算母猪群体多胎次 公式中一定要加 下 成为制约养猪业生产发展的瓶颈 上 损失日 而且应该占有很高的权重 我们都清楚我国北 1 母猪年生产力的概念 方地区规模化猪场母猪的实际分娩率平均 75% 8% 南 母猪年生产力是指每头母猪一年能提供多少断奶仔猪 方 8% 85% 母猪的返情率很高 有人试图从缩短母猪 数 法国学者 Legault C. 等 1975 年 提出度量母猪年生 哺乳期来提高母猪年分娩胎数进而改善母猪年生产力 这些 产力 Pn 公式如下 工作是徒劳的 国外大量试验报道 将母猪哺乳期从 3 d Pn=[Ls 1-Pm / G+L+Iwc ] 365 降低到 17 d 以提高母猪年生产力 结果是两种情况差异 这里 G= 妊娠期 日 L= 哺乳期 日 Iwc= 断乳 不显著 至配种的间隔时间 日 Ls= 初生窝活仔数 头 Pm= 提高母猪年生产力具有重大的经济意义 母猪年生产力 初生至断乳时的仔猪死亡率 % 在养猪生产实践中 妊 提高后 可在不提高母猪数和不降低出栏率的条件下 减少 娠期 日 =11 d 恒定 哺乳期 日 =21 28 d 断 饲养量 从而节约饲料 减少猪舍和劳力 降低成本 据计算 乳至配种的间隔时间 日 =5 7 d 对该公式的解读 见 1 头母猪 1 年需要 1 t 饲料 加其他费用 饲养成本约 2 图 1 元 若 1 头母猪提供 2 头断奶仔猪 每头断奶仔猪分摊成本 母猪年生产力 每头母猪每年生产断奶仔猪头数 = 每 为 1 元 若 15 头 则 133 元 一个年出栏 l 万头断奶仔猪 头母猪年断奶仔猪头数 每年每头母猪分娩胎数 增加每 的规模化种猪场 假如每头母猪年可提供 2 头仔猪 则需要 头母猪每年生产断奶仔猪头数 就要从增加每胎产活仔数 5 头母猪 若每头母猪年提供 16 头 则需要 625 头母猪 减少死胎 木乃伊胎 降低断奶前仔猪死亡率着手 增加每 比前者多 125 头母猪 每年多花费的饲养费用至少要

6 万元 新进的猪有机会从运输和环境的双重应激中恢复 并在接触 2 有控制的病菌刺激时 建立起完全的免疫能力 提高母猪年生产力的主要途径和措施 依据母猪年生产力的概念可以得出要提高母猪年生产 3 免疫 新进的猪的防疫程序应和现有的猪群一样 所 力的主要途径就是 提高母猪利用强度 增加年产胎数和使 有的青年母猪都注射疫苗 建议所有新猪应和老猪群采纳一 用年限 提高窝产仔数 降低哺乳仔猪死亡率 在规模化 致的免疫方案 同时采用适当的药物保健及驱虫 包括弓形 主场主要采取如下措施 体和附红细胞体 2.1 保持母猪群合理的年 胎 龄结构 目的是及时淘汰繁殖性能差的母猪 使母猪群保持稳产 高产状态 同时也使大量母猪在最高生产力 3 6 胎时 产 活仔数达到最大量 后备母猪第一次配种的基本要求 1 体重和体型 研究表明推迟配种至 13 kg 对第一窝产仔数会有很大 的影响 同时也会增加以后胎次的产活仔数 母猪每胎的表现对猪群生产力有重要含义 母猪年 胎 2 配种年龄 龄影响的因素 初配日龄和产仔的关系并不完全一致 但有充分证据显 每胎产活仔数 3 6 胎高峰 每胎产死胎数 随着胎数增加 5 6 胎后增长迅速 3 背膘厚 产仔重 2 5 胎稳定 此后下降 体况特别是背膘厚是显示初配最合适状态的一个因素 抚育能力 2 胎峰此后下降 母猪死亡 青年母猪最高 第二次发情周期配种 生产失败 青年母猪最高 第一次发情等待 21 d 后配种 每胎大约能够增加 2 头 非生产日 青年母猪最高 仔猪 如果等到第三个发情周期还可以增加每胎仔猪头数 分娩量 2 6 胎高峰 此后下降 但经济上不一定划算 因此 一个合理的母猪群年龄结构应接近以下母猪循环 示 d 最好 建议应在 mm 时配种 最低不低于 16 mm 3 分 2.3 后备母猪饲养 分配 催情补饲 在配种前 1 d 增加能量摄入将潜在地增 胎次 猪群中比例 加 排 卵 量 这 是 因 为 兴 奋 的 作 用 配 种 前 1 d 增 加 至 1 18% 2% kg/d 配种后立即限制饲喂 妊娠料饲料蛋 2 16% 18% 白要达到 16% 并添加 L- 肉碱 5 mg/kg 甲基吡啶铬 3 15% 17% 2 mg/kg 有助于缩短母猪的发情期 提高母猪分娩率 1% 16% 和两个繁殖周期的出生活仔数 5 13% 15% 3 6 1% 2% 3.1 查情 使用正确的配种程序 从一个基础母猪开始建立到一个稳定的猪群年龄结构 健康母猪在一生都会不断发情 除了怀孕和哺乳外 自 的转变或真正地保持一个稳定的胎表象并不容易 但有时也 然交配和人工授精 配种时间的选择是唯一获得好的生育力 随品种 饲养管理水平饲养条件等有所变化 如品种繁殖能 的重要因素 准确查情是成功的关键 力和哺育能力强 营养状态好 饲养水平较高的条件下 胎 3.2 适时交配和人工授精 龄高的优秀母猪也可多留些 2.2 加强后备母猪的管理 科学合理地管理后备母猪将延长母猪的使用寿命 降低 淘汰率 充分发挥母猪的繁殖潜力 正确的管理方式对母猪 排卵时间易变 尽管断奶到发情期和发情持续时间很明 显 断奶后管理也影响排卵时间 为了掌握适当的配种时间 和人工授精必须了解下列母猪的繁殖生理知识 多 数 经 产 母 猪 在 发 情 后 2 56 h 排 卵 变 化 范 围 第 1 窝及终生生产性能将产生深远影响 2 72 h 卵子生存时间很短 在输卵管内生存达 h 后备猪的引入 精子出现在母猪生殖系统必须提前于排卵 以便运输到壶腹 1 隔离 新引进的猪应尽可能地远离猪场区 远离其他 部并获能 精子在子宫内保持活力 2 h 任何配种管理程 猪舍并有独立空间 要有八个星期的隔离期 应每天观察 序目的在于保证母猪生殖系统存有适当数量的活精子 在此 新猪群是否有感染疾病的症状 期间可能排卵 而且卵子是活的 2 适应 目的是防止新猪群发生临床上的疾病和老猪群 的疾病爆发 目标是控制接触感染的比例和数量 在此期间 查返情 尽管断奶到配种是造成母猪 非生产日 的主要因素

7 但查返情对改善母猪 非生产日 也有很大潜力 18 的室温产仔的母猪热应激较小 产仔较快 死胎较少 减少妊娠期胚胎及分娩过程中的胎儿死亡 5 近年来 国外的研究认为子宫内环境与胚胎成活率有很 5.1 产房要实行全进全出 提高哺乳仔猪的成活率 大关系 一般认为 猪胚胎的死亡时期有 3 个高峰 第一是 为仔猪提供清洁的环境 是提高仔猪成活率的最基本保 在受精第 9 13 d 合子附植的初期 易受各种因素的影响 证 做法是 在母猪进入之前彻底空栏 清扫 清洗 用 3 5 死亡 第二是在妊娠后大约第 3 周 即器官形成期 这两个 的烧碱水浇泼栏圈墙壁 地面 2 h 最后用高压水枪清 时期的胚胎死亡大约占合子的 3% % 在妊娠后期约 洗并空栏一周 6 7 d 时 胎盘停止生长 而胎儿迅速生长 这时也可 5.2 仔猪的护理 要把握的关键环节 引起胎儿死亡 这是胚胎死亡的第 3 个高峰 减少妊娠期胚 一是确保适量的初乳吸吮量 仔猪在出生后 12 h 内吃 胎死亡的普遍做法是 一是对妊娠母猪限制饲喂 尤其在妊 上初乳 最基本的初乳量 5 ml 初乳可为仔猪提供抵抗猪 娠 1 3 d 每头母猪的饲喂量为 kg 以提高血 场现有病原微生物的免疫性 也可作为后备能量 二是满足 液中孕酮的含量维持妊娠 二是母猪配种 25 d 内不转群不 新生仔猪对较高环境温度的要求 即最低临界温度为 3 混群 避免应激紧迫 通过这两种措施猪的死胎数可以减少 三是在仔猪出生的 2 h 内寄养小猪 营养不良和饥饿是小 头 猪死亡的主要原因 寄养使弱小的仔猪有更好的生存机会 据统计 世界上许多国家的总产仔数中 包括木乃伊 四是在仔猪出生 2 3 d 内补 1 2 ml 的葡聚糖铁针剂以 胎 死胎平均数为.8 头 占 7% 8% 除非生产群中有 防贫血 特殊疾病 死胎中 85% 为分娩过程中的死亡 有许多可能 5.3 哺乳母猪的饲养 因素造成分娩过程中死亡 生产群的年龄 随着母猪变老 目标是最大程度地提高母猪的产奶量 确保哺乳仔猪正 生产胎次增加死亡的可能性也将增加 第 5 胎后 死胎数 常的生长发育 同时也限制母猪泌乳期失重 保证母猪下一胎 明显增加 夏季母猪在怀孕后期 妊娠 d 遭遇 最佳的繁殖性能 据计算 窝产仔数为 1 头的母猪在产仔后 3 以上的热应激也会产生死胎 弱仔 弱仔在分娩过程中 第 8 d 需要消耗 7.3 kg 饲料 要保证泌乳母猪足够的采食量 极易死亡 不同生产群的死胎数有极大的差别 因此 在许 5. 实行隔离式早期断奶 多猪场还有潜力将每窝猪的死胎数减少.2-.5 头 减少 使乳猪在还未失去获得性被动免疫能力之前 就与母猪 死胎 应采取的措施包括 1 管理 加强怀孕母猪管理 免 分开和隔离饲养 减少了疾病传染的机会 降低仔猪发病率 遭热应激 2 助产 死胎猪的蹄端有完整的 象靴子一样的 目前普便认为 若能在 18 日龄内断奶 可获得较好的效果 凝胶, 对正在产仔的母猪进行检查很重要 以便在母猪发生 5.5 饲养抗病力强的仔猪 问题时给以适当的助产 在此重要时期助产 可明显降低 在商品猪生产中 采用 杜 长 大 三元杂交组合 死胎数及断奶前的死亡数 3 诱导分娩 在必要时候诱导母 产生的仔猪抗病力强 成活率显著高于其他形式杂交组合产 猪分娩 对怀孕 d 的母猪 肌肉注射前列腺素 生的仔猪 杜 长 大 三元杂交组合生产商品猪繁育 确保产房的适宜环境 舒适的分娩环境 无外界干扰 在 模式已经推行了近 3 年 现在仍然值得传承 3

8 国外母猪的繁殖性能及年生产力水平 傅 1.浙江大学动物科学学院 浙江 杭州 衍1,2, 浙江加州国际纳米技术研究院 浙江 3.PIC中国 上海 长期以来猪的育种工作主要是对肥育性能和胴体性能 杭州 高 以前单纯对排卵率的选择 尽管使排卵数有了明显的提 的选择 直到 8 年代中期 繁殖性能的遗传改进才越来越 高 但是并没带来产仔数的提高 Cunningham 等 1979 被重视 人们开始意识到连续高强度的瘦肉率及生长速度的 Lamberson 等 1991 人工诱导的超数排卵也没带来产仔数 选择会对繁殖性能带来负面的影响 猪的繁殖性能可以用一 的增加 Polge 1982 其原因是胚胎存活力有所下降 美 系列性状及经济指标来表示 育种上我们感兴趣的主要有 国内布拉斯加大学同时考虑排卵率 胚胎存活率 子宫容 某一时间段内的产仔总数以及特定时间 如断奶时 仔猪的 量及产仔数进行选择 取得了明显的效果 1 个世代后选 育成数 当然这些性状同时又受寄养等管理因素的影响 另 择组与对照组比 窝产仔数增加了 3 头 Johnson 1999 外 象产仔间隔和头胎月龄也具有重要的经济意义 但它们 对猪的生长和胴体性状则没有产生任何影响 法国农科院 受生产技术及管理因素的影响更大 也通过选择排卵数及胚胎存活率取得了提高产仔数的明显 繁殖性状的遗传力较低 受环境因素影响很大 这里 所指的环境不光是气候 温度和自然环境 也包括营养 疾病 猪舍 设备及管理水平等 母猪的年生产力主要由 产仔数 仔猪存活率及产仔间隔所决定 由于遗传力低 效果 Rosendo 等 27 3 高选择强度及大群体的选择 Hyperprolific育 种计划 繁 殖 性 状 不 光 遗 传 力 低 <.1 还 面 临 着 个 体 环境影响大 产仔数的选择进展很慢 国外在猪的肥育和 性 状 表 现 迟 至 少 第 一 胎 产 仔 后 才 有 个 体 记 录 及 单 胴体性能有了很大提高后 才开始重视繁殖性能的选择 性 别 表 现 等 限 制 所 以 有 必 要 通 过 大 群 体 及 高 选 择 强 所做的尝试主要有 度 来 选 择 产 仔 数 以 加 快 选 择 进 展 Legault 等 高繁殖力中国地方品种的利用 Bidanel 等 199 Sorensen 等 2 Noguera 等 22 国外的育种工作者希望利用我国地方品种性成熟早 发 许多育种公司大幅度地增加了繁殖性状的测定数量 特别 情明显 繁殖力高 母性好等优点来改良欧美高生长速度和 是增加了对核心群外 如扩繁场 个体的测定 有的甚至 高胴体品质的品种 许多国家 如法国 美国等 选择引进 表 1 Agri-Stats 母猪生产力行业基准 了我国著名的梅山猪 金华猪等 研究者们希望找到决定繁 殖性状的主效基因 这样就有可能把这个 ( 些 ) 主效基因用 性状 平均 最好的 25% 最好的 最差的 非转基因的手段导入到高性能的欧美品种中去 从而培育出 产仔总数 / 头 产活仔数 / 头 本就不存在 这样通过导入主效基因快速提高母猪繁殖力的 断奶前死亡率 /% 愿望没能实现 然而导入部分中国猪血液的杂交育种方法却 断奶仔猪数 / 头 得到了应用 当然也有研究发现当中国地方品种猪的基因比 母猪年产窝数 / 头 母猪年产断奶仔猪 / 头 断奶日龄 高繁殖力 高生长速度 高饲料报酬 高屠宰性能的优秀品 种 事实上人们所期望的主效基因至今还未能发现 也许根 例下降到 25% 或 12.5% 时 高繁殖力的优势就会明显下降 甚至消失 2 对排卵率 胚胎存活率及子宫容量的选择 排卵率常常被看成是潜在的产仔数 人们希望通过育种 的手段加以提高 排卵率有中等大小的遗传力 通过选择可 以提高 而子宫容量又常常被看成是产仔数的限制因素 如 果子宫容量不够大 就是排卵数及胚胎数的增加 也会由于 胚胎在子宫中拥挤及得不到足够的营养而使胚胎死亡率提 25.5 断奶重 lb 母猪死亡率 /% 替换率 /% 每头断奶猪费用 / 美元

9 表 2 Agri-Stats 母猪生产成本行业基准 表 3 北美 PIC 商品场大群体 28 年统计的母猪生产率 League List Data 性状 平均 最好的 25% 每头断奶猪费用 美元 / 头 母猪数 / 万头 母猪费用 美元 / 头 平均胎次 精液 美元 / 头 分娩率 /% 饲料原料 美元 / 头 窝产活仔数 / 头 断奶前死亡率 /% 饲料加工和供料 美元 / 头 窝断奶仔猪数 / 头 设备 美元 / 头 窝数 / 配种母猪 / 年 药品和疫苗 美元 / 头 断奶仔猪 / 母猪 / 年 后备母猪运输 美元 / 头 母猪死亡率 /% 农场管理费 美元 / 头 断奶日龄 最好的 最差的 性状 合计 最好的 1/3 最差的 保留所有的候选个体直至产仔后才做选择决定 这样就充 死胎 1 个标记 断奶窝重 11 个标记 分利用了信息量更高的个体记录 这些措施使得繁殖性状 6 育种值估计的准确性得到了大大的提高 产仔数的遗传进 最好的 1% 11.3 培育专门化的母系及充分利用杂交优势 几乎所有大的育种公司 都从原有的品种中 分化出 展也非常明显 如法系大白通过 Hyperprolific 育种计划 了母系 公系等专门化品系 这使得对母本用途的专门化 15 年的产仔数增加了 3 头 Tribout 等 23 许多国家 如 品系的选择目标更加明确 选择性状更加集中 进展也就 丹麦 法国 美国等 有报道 母猪产仔数的年遗传进展 更快 另一方面 专门化品种 系 总是通过杂交配套 达到了.3 头左右 Gill 27 应用 欧美的养猪生产也从原来的纯种商品猪过渡到了杂 加大对仔猪断奶前存活率的选择力度 交商品猪 繁殖性状遗传力低 杂交优势则非常明显 不 断奶仔猪数是决定母猪年生产力的关键指标 但种猪 光有个体杂交优势 即在杂交胚胎 杂交仔猪上体现的生 场普遍采用的寄养模式限制了对断奶仔猪数的直接选择 活力更强的优势 还有母本杂交优势 即杂交母猪所表现 而对初生产仔数的选择提高 又常常导致仔猪死亡率的增 的更多的产仔数 更明显的发情 更好的母性及更高的泌 加 Johnson 等 1999 Lund 等 22 为 了 加 大 对 仔 猪 乳力等 综合大量的文献报道 产仔数的个体杂交优势在 存活率的选择力度 丹育以产后 5 天的活仔数为选择性状 5% 2% 母本杂交优势可达 7% 25% 对母猪繁殖 Gill 27 Su 等 27 这一选择指标是基于仔猪出生后 性状来说 在多元杂交体系中 甚至还有父本杂交优势和 前 5 d 的死亡率最高的现象而确定的 PIC 公司则通过选择 祖代杂交优势可以利用 这些杂交优势的充分利用 可以 断奶窝重来提高仔猪的存活率 断奶窝重是母猪泌乳量的一 大大提高母猪的年生产力 个指标 通过选择提高母猪泌乳量 可以改进仔猪断奶前的 7 国外的母猪生产力水平 存活率 Randolph 26 种猪公司所采取的这些选择措施 1 母猪生产水平的行业基准 Industry Benchmark 部分地克服了产仔猪与仔猪存活率的负相关 为了了解国外先进的养猪企业生产水平 我们可以 5 分子标记辅助选择 通过 Agri Stats 公司发布的行业基准来看母猪的性能及 近 年 来 许 多 与 母 猪 产 仔 数 相 关 的 的 分 子 标 记 如 生 产 力 这 更 有 普 遍 性 和 代 表 性 Agri Stats 公 司 成 立 ESR PRLR RBP 得到了开发和利用 有关的研究和 于 1985 年 是一家专业化的为养殖业 包括肉鸡 蛋鸡 报道非常多 但常规育种中的应用并不多见 主要有 PIC 火鸡 猪 肉牛 奶牛等 及其加工业提供行业基准的公 公司 199 年开始使用的 ESR 标记等 在孟山都公司及 PIC 司 该公司通过每月收集加盟企业的数据 给出分析报告 公司的育种措施中 分子标记的应用已非常多 如 PIC 公 Agri Stats 公司用于分析母猪生产力的数据来自 19 多万 司已有 6 多个标记应用于对繁殖性能的选择 具体性状及 头母猪 表 1 和表 2 是该公司 27 年 11 月至 28 年 11 所用的标记数量为 断奶前死亡率 仔猪性状 11 个标记 月发布的行业基准 仔猪存活率 母猪性状 16 个标记 产仔总数 16 个标记 2 大公司的生产水平 5

10 根据 League List 联盟名单 收集的 PIC 父母代母 表 5 丹育的目标 35 头断奶仔猪 / 母猪 / 年 猪的数据显示 表 3 PIC 北美客户大群体统计的生产水 平为每头母猪每年提供 2.35 头断奶仔猪 其它一些大公 28 年水平 26.7 PSY 35PSY 差距 司的母猪生产力水平 由于没能收集到足够多的数据 不能 窝产仔数 / 头 给出大群体的统计结果 但从这些公司的网页及手册中可知 窝产活仔数 / 头 母猪的生产力水平都很高 如丹育 产品手册中介绍其 F1 断奶仔猪数 / 头 母猪年产窝数 代母猪 21 的年断奶仔猪数达 3 头 3 部分欧盟国家的生产水平.3 表 6 建议母猪生产目标 表 是 部 分 欧 盟 国 家 25 年 统 计 的 母 猪 年 生 产 力 British Pig Executive 26 丹麦的母猪年产断奶仔猪 数 达 到 了 26.1 头 上 市 商 品 猪 为 2.3 头 提 供 瘦 肉 为 母猪替换率 /% 35 分娩率 /% 85 母猪年产窝数 2.3 窝产活仔数 / 头 11.3 年 产 断 奶 仔 猪 数 PSY 的 目 标 设 定 在 了 35 头 表 5 断奶仔猪数 / 头 1.2 并希望在 215 年实现这一目标 对产仔数的选择也还有 母猪年断奶仔猪数 / 头 23.5 潜力 特别是目前标记辅助选择方法及下一步全基因组 仔猪断奶重 23 d /kg 7. 选择方法的应用 低遗传力性状的遗传改进会更快 另 断奶窝重 23 d /kg 71 一方面 随着产仔数的提高 仔猪初生重会下降 弱仔 猪用料 / 断奶仔猪 /kg 5 数量会增加 这又会导致仔猪断奶前死亡率的提高 常 母猪终身产仔窝数 kg 母猪生产力的提高并没有终止 已有育种公司把母猪 常弱小仔猪还会影响种猪或商品猪后期的生长发育 有 研究认为这种影响是不可补偿的 即产前就已确定了的 prenatal programming Foxcroft 26 当 然 高 产 的母猪对饲养管理的要求也更高 管理和营养水平满足不 了要求时 养猪生产的效益反而会受影响 正如 Foxcroft 26 在综述了众多研究后指出 当使用产仔数特别高 的母猪时 要慎重评估其对养猪生产总体效益的影响 我国养猪生产中母猪年生产力水平低的主要原因并不 表 部分欧盟国家 25 年统计的母猪年生产力 在遗传上 更多的是在饲养管理上 我们也许首先应该关 丹麦 荷兰 法国 爱尔兰 英国 注增加每头母猪的年产窝数 与管理有关 特别是哺乳期 母猪年产窝数 的长短及哺乳期的营养 第二步要考虑提高活产仔数 与 母猪年断奶仔猪数 / 头 母猪年上市商品猪数 / 头 胴体重 /kg 母猪年提供瘦肉 /kg 怀孕期的管理有关 特别是怀孕后期的营养 第三步要设 法降低断奶前的死亡率 与管理有关 特别是怀孕后期及 哺乳期的营养 针对我国那些饲养管理水平较好的养猪 场 我们是否可以设定如下的具体目标 表 6 以加快母 猪年生产力水平的提高

11 从繁殖方面提高种猪生产能力的综合措施 刘火良 吴同山 刘庆辉 广东省东莞市畜牧科学研究所 广东 东莞 现在制约母猪生产能力的因素主要有两个问题 一是生 除了日常管理因素和疾病外 母猪死胎 木乃伊胎的比 的少 繁殖力低 二是活的少 成活率低 这样可以把制约 例偏高 正常二者之和占总产仔数的比例为 6% 7% 超 母猪年生产率水平的因素归纳为两个方面 一是繁殖问题 出属于异常情况 主要和防疫工作有关 种猪的免疫要有 一个是疾病问题 在繁殖方面 造成种猪生产能力差 生的 合理的免疫程序 主要参考正规猪场的做法 并长期坚持 少 的原因 根据生产实际情况 除了种猪原有的自身遗传 不能朝令夕改 但要经常根据具体情况 如疫病 疫苗的效 因素外 主要还是人为原因 生产母猪或后备母猪久不发情 果 周围疫病的变化等 进行更新 疫苗不是越贵越好 注 但一直饲养 无效饲养时间长 各种原因造成的母猪情期受 意种猪注射后的应激反应 也不是越便宜越好 要注意效果 胎率低 返情多 胎均总产仔数或活产仔数少 死胎和木乃 后备种猪 无论是买回来的还是自己留种的 在进生产群前 伊胎的比例高 母猪流产或早产的多 在日常管理中 通过 进行上述抗体的检测 不合格的不能入群 生产种猪每年要 加强饲养管理 注意种公猪的合理使用和人工授精前精液品 进行 2 次抗体水平检测 根据自己猪场情况 主要检测猪瘟 质的检查 加强发情鉴定 提高种猪发情和配种受胎率 减 伪狂犬 口蹄疫和蓝耳病的抗体水平 不合格的要及时补打 少仔猪出生前不正常的比例 可以提高种猪的产仔数 疫苗 中小型规模的猪场在使用疫苗前要留意疫苗的生产日 1 期和有效期 保存方法 有无沉淀等 异常的疫苗不能使用 种猪的日常管理 1.1 保证充足的采食量 2 在营养合理的情况下 1 kg 体重以后的后备种猪饲 种公猪的使用和有效的精液品质 大部分猪场现在均使用人工授精技术 公猪需要采精 喂料量应为 2 kg/d. 头 生产种猪配种后的前 8 d 每天 由于公猪数量减少了 使用期的公猪就要保证不能出现问 喂料量不超过 2 kg/ 头 之后喂 kg/ 头左右 哺 题 精液品质差 四肢出现问题 精液中无精子等困扰公猪 乳期间 母猪平均夏季要保证吃到 5 kg / 头 如果采 的问题要注意 尽量减少发生的机会 食量下降 可以通过饲料中添加酸化剂提高食欲或添加植物 其实 社会上大型的商业化公猪站 由于公猪数量多 油来提高营养水平 冬季吃到 6 7 kg / 头 注意控制种 技术强 可以减少或避免上述现象的发生 从而保证公猪精 猪的膘情 坚持 看猪给料 的原则 避免偏肥或偏瘦 液的品质 因此 如果购买 运输比较方便 中小型规模猪 1.2 加强运动 场最好不要养使用的公猪 试情的公猪除外 直接商业公 除了怀孕的种猪外 加强种猪的运动 减少因肢蹄病的 猪站或大型养猪企业购买 这样既可以保证公猪的优良和后 发生而引起的淘汰 种猪运动场尽量用沙质地面或土 不要 代的优势 提高了母住的受胎率 又减少了饲养管理等费用 铺水泥 保持里面没有砖头 石块等异物 放猪运动时 可 场场都有公猪站的现象 某种程度上会限制养猪业的发展 以群放 也可以单放 每 1 h 可以轮换 1 次 保证 2 3 d 种公猪的使用 如果没有采用人工授精技术的 每个月 运动 1 次 夏季选在比较凉爽的早晚 冬季选在比较暖和的 至少要检查一次精液 本交时接取 通过显微镜观察精子 早上 1 点以后至下午 点以前 尽量减少应激 的活力和密度 不行的就不要配种 不要等到母猪配种后几 1.3 做好各种生产相关记录 个月观察到没有怀孕才追踪公猪的原因 损失就大了 包括后备母猪第一次发情 母猪断奶时间 返情时间 以备以后分析原因 母猪一胎总产仔数少于 8 头的也要做好 3 后备种猪的选留与管理 3.1 后备种猪的挑选 记录 以备以后查验 连续两胎总产仔数均 8 头以下的 要 不同品种种猪的挑选首先要符合各自品种的品种特征 及时淘汰 这里强调的是总产仔数 因为死胎 木乃伊胎等 如毛色 耳形等最基本的特征 不然容易造成品种间的混淆 多数是人为原因造成的 如防疫 饲料 管理等 不能把责 其次要完全健康 健康的种猪精神状态好 皮毛光滑 大部 任全部归结到种猪的身上 分好动 尾巴摇来摇去 泪斑比较明显 无精打采 走路不 1. 加强防疫工作 正常的种猪不能要 再次 生殖器官要明显 外阴大 乳头 7

12 大小适中 排列对称 有效乳头在 6 7 对 避免多无效乳 适时输精 进行母猪授精时 新鲜精液和保存精液有一 头的现象 最后 后备种猪的体型也比较关键 有许多初次 个时间的差别 新鲜精液因精子活力强 死精率低 故配种 购买种猪的客户 挑选后备母猪时专门要后躯大 体型丰满 时母猪受胎率高 保存精液随着保存时间的延长 精子活力 的 而其他却作为次要条件 其理由是这样的种猪生产出来 逐渐变弱 死精子数增多 母猪受胎率偏低 一般上午发现 的后代体型也会好 会受到客户的欢迎 其实不然 虽然公 站立反应的母猪 下午应输精 1 次 第 2 天下午再进行第 2 猪 母猪对后代的影响各占 5% 作为母本 其关键作用是 次输精 下午发现站立反应的母猪 第 2 天上午输精 1 次 良好的繁殖性能 而后代的体型主要是靠公猪来改善 因此 第 3 天上午再进行第 2 次输精 挑选后备种猪要选腹部呈弧线 生殖器官正常的健康猪 后备种猪的发情和配种 母猪乏情的处理 1 断奶后久不发情的经产母猪 根据不同原因区别对 一般来说 瘦肉型种猪从出生到自身第 1 次产仔 都要 待 属于疾病问题的 如子宫炎等 及时对症治疗 属于 1 年的时间 因此 做好后备种猪初次发情记录 对正常配 极度瘦弱或肥的 通过增加或减少饲料进行调整 先让猪只 种工作非常重要 通过控制在 8 月龄以上配种 可以提高种 体况恢复到正常水平 没有什么可见原因不发情的 通过经 猪利用率和生产效率 常调栏 换栏 减少饲料喂量 加强运动 公猪刺激等刺激 后备种猪在 8 月龄以前配种的 由于自身虽然性成熟了 但身体还没有完全发育成熟 产后母猪容易严重失重 奶水 母猪发情 2 断奶后不发情的第一胎母猪 一般主要是在哺乳期 分泌异常 断奶后发情不正常 一般多会难发情 淘汰率高 间体重失重太多造成的 特别是管理不是很完善的中小型猪 十月龄以后配种的 延长了无效饲养时间 浪费成本 有的 场 有的头胎母猪断奶后 6% 左右的不能正常发情 淘汰 猪场 同一批的后备猪已经生小猪了 但个别没有配上种的 的比例也非常大 这类猪只 在加强营养的同时 一定要放 母猪还在饲养 造成了无谓的浪费 到运动场多运动 并经常调栏 换栏 3.3 配种方式的选择 目前配种的方法主要有自然交配和人工授精两种类型 刚开始饲养的 最好先采用自然交配形式配种 将发情稳定 3 没有出现过发情症状的后备种猪 在体况正常的情 况下 可以并栏 公猪刺激 减少饲料喂量等刺激发情 以上三个类型的异常不发情经处理实在没有效果时 的后备母猪和性欲旺盛的公猪赶到配种栏配种就行了 为了 才通过注射催情药来刺激母猪发情 如 PG 6 但有效率 减少母猪生殖道疾病的发生 配种前要将母猪的外阴及公猪 一般也不高 正常为 5% 6% 的阴部用清水清洗并擦干净 以免将大量猪粪或细菌等异物 5 冬季特别冷 南方 左右 北方有保暖措施可能 带入母猪阴道 不过 目前大部分猪场都采用人工授精技术 不明显 夏季特别热 35 以上 的时候 种猪异常发情 进行配种 若是刚开始的新场 特别是后备种猪 采用该技 会有明显表现 不能正常发情是正常现象 除了积极改善环 术时先 1 次本交再 1 次人工授精效果会好些 等技术成熟之 境外 千万不要使用催情药处理 以免引起母猪正常生理机 后再全面铺开 就是水到渠成的事了 确实能达到节约开支 能的变化 提高生产率 增加经济效益的目的 6 促进母猪发情期间 每天坚持饲喂.5.75 kg/ 母猪的发情鉴定和配种 头的青绿多汁饲料 如生长速度快 产量高的黑麦草 狼尾 母猪的发情 后备猪比生产母猪难于鉴定 长白母猪比 草 橡草 红薯藤 青菜等 大约克 杜洛克母猪等难于鉴定 一般可通过下面的方法进 行鉴定 发情的母猪 外阴开始轻度充血红肿 若用手打开阴户 7 久不发情的种猪 无论生产还是后备 一发现发情 稳定就要马上配种 然后隔 12 h 再配 1 次 8 公猪刺激母猪发情 一般上 下午在喂料前各进 则发现阴户内表颜色由红到红紫的变化 部分母猪爬跨其他 行 1 次 让性欲旺盛的公猪和母猪放在一起 每次控制在 母猪 也任其他母猪爬跨 当饲养员用手压猪背时 母猪会 15 2 min 然后把公猪赶走 由不稳定到稳定 当赶一头公猪至母猪栏附近时 耳多竖立 9 正常情况下 断奶后的生产母猪 3 个情期仍然没有发 发抖 母猪会表现出强烈的交配欲 当母猪阴户呈紫红色 情或屡配不孕的 后备种猪 月龄仍然没有发情或屡 压背稳定时 则说明母猪已进入发情旺期 配不孕的 都要及时淘汰 以尽量减少种猪的无效饲养时间 对于集约化养猪场来说 可采用在母猪栏两边设置挡 板 让试情公猪在两挡板之间运动 与受检母猪沟通 检查 人员进入母猪栏内 逐头进行压背试验 以检查发情程度 8 综合措施可以提高种猪的繁殖性能 加强管理始终是最 主要和最有效的手段

13 母猪营养与饲养系统概念 池永哲 美国嘉吉公司 中国 动物营养 北京 中国是养猪大国 存栏量和出栏量均居世界第一 29 2 年中国生猪年末存栏 万头 肉猪出栏 6 57 万头 112 妊娠早期 妊娠早期 配种 - 妊娠 3 d 的饲养管理目标是提高 猪肉产量 889 万吨 通过多年的持续发展 中国的养猪生 受精卵的存活率 仔猪出生后平均损失约每窝 2.5 头 占整 产取得了长足的进步 但必须承认 我国的养猪生产相对养 体损失的 2% 但排卵到出生阶段平均损失为 1 头 占整 猪发达国家来说还是比较落后 每年每头母猪出栏育肥猪 体损失的 8% 尤其是着床期间损失最严重 因此妊娠早期 MSY 差异甚至高达 5% 以上 即妊娠 3 d 的饲养管理极其重要 表 2 已受胎的经产母 猪场生产效率的核心就是繁殖猪群的生产效率 但是 猪从配种到妊娠 25 d 为止约 3% 5% 受精卵会死亡 空 国内繁殖母猪年周转率低 断奶仔猪头数少 从而影响了 胎吸收 早期流产 而妊娠 周期间约 1% 的胎儿也 整个猪场出栏率 其原因主要是广大的养殖户忽视对繁殖 会死亡 因此 实际产仔数只有 8-15 头 妊娠早期饲喂过 猪群的饲养管理 没有严谨而科学的后备猪 妊娠母猪 多的饲料会增加胚胎的死亡率 表 3 配种后过多的能量 哺乳母猪 种公猪的管理程序 大部分养殖户凭自己的经 摄取将增加体内胰岛素的含量从而降低子宫内能量的利用 验去饲喂 导致后备猪育成期管理不当 引起不发情 配 并且降低血中孕酮的浓度 表 种失败 一产综合征 妊娠母猪膘情管理失败 哺乳母猪 妊娠早期需要特别注意母猪的应激因素 从配种到妊 体损失过大 泌乳量少 无乳综合征 断奶至发情延迟 娠 3 d 时母猪需要绝对的安静和细心的管理 尽量减少 配种率下降 导致母猪淘汰率增高 种公猪精液不良 趾 转群 要用单体栏 并维持舒适的环境 尤其高温应激对 蹄病等一系列问题 妊娠早期受胎率的影响最严重 因此夏季应有效降低妊娠 正确的母猪饲养管理程序应建立在准确地了解不同阶 段母猪的繁殖及营养生理特性基础上 科学的母猪饲养管 舍的温度 表 5 3 妊娠中前期 理程序应是分阶段饲喂 具体讲母猪的饲养阶段应分为配 妊娠中前期 妊娠 31 d- 妊娠 75 d 的饲养管理目标 种 前 妊 娠 早 期 ( 配 种 - 妊 娠 3 d) 妊 娠 中 前 期 妊 娠 是调整母猪的体形 因此饲料饲喂重点应放在母猪体形的调 31 d 妊娠 75 d 妊娠中后期 妊娠 76 d 妊娠 95 d 整上 母猪体形管理与饲料饲喂有密切的相关 为维持母 妊 娠 末 期 妊 娠 96 d 妊 娠 11 d 分 娩 前 后 分 娩 前 猪最佳的状态 需要提供适合母猪体形和环境的营养 防止 5 d 分娩后 5 d 和哺乳期 分娩 6 d 断奶 等 7 个阶段 过肥 背膘 25 mm 以上 此阶段妊娠母猪空腹感会增加 每个阶段应注重饲养管理目标及饲料的饲喂方法 可适当饲喂青草既补充各种维生素和微量元素 也可减少 1 饲料量 配种前 配种前饲养管理目标是排卵数的提高 排卵数的增加是 母猪的体形状态对维持妊娠及下一个胎次的繁殖成绩 提高产仔数的前提 后备母猪和经产母猪配种前提高能量摄 起重要作用 掌握繁殖母猪体脂肪沉积对维持母猪高生产 取量 可有效提高排卵数 数据表明后备母猪配种前 1 d 效率尤其重要 因为体脂肪是母猪繁殖活动所需的重要 左右开始提高采食量时其效果最佳 表 1 能量源 为有效管理母猪体形可以采用背膘测定和 BCS 表 1 配种前强化能量摄取量的时间与排卵数 Body Condition Score 等方法 背膘测定是通过背膘测 试验次数 摄入高能量天数 /d 排卵数 定仪在 P2 位置上直接测定其皮下脂肪的厚度 因此需要专 表 2 从排卵到出栏过程个体损失 阶段 排卵 授精 着床 头数 / 头 损失 / 头 断奶 头数 出栏 头数 胎儿 产仔数 9

14 表 3 妊娠早期 1 2 d 饲料采食量和胚胎死亡率关系 饲料采食量 /kg 胚胎存活率 (1-1 d %) 胚胎存活率 (1-2 d %) (Dutt and Chaney, 1986) 表 妊娠早期饲料采食量 胚胎存活率 血液孕酮浓度的关系 饲料采食量 /kg 胚胎存活率 /% 血液孕酮浓度 /ng/ml 例如不同的操作员给同一个母猪会打出不同的分数 一个操 作员在不同时间给同样的母猪打出的分数也会有所不同 导 致不正确的饲料饲喂 最终引起背膘的巨大差别 母猪体重 管理 Sow Weight Management SWM 能有效避免 BCS 方法主观性的差异 较客观的掌握母猪体重 根据母猪的体 重提供最佳的饲喂程序 它是通过特殊的格尺测定配种时母 猪的三维 长 宽 高 来推测母猪实际体重 图 之 后根据不同妊娠阶段营养需求和体重的相关性来计算出妊 娠每个阶段母猪的最精确的饲喂量 (Dyck 等, 198) 表 5 高温与胚胎存活率的关系 妊娠中后期 妊娠中后期 妊娠 76 d- 妊娠 95 d 的饲养管理目标 是促进乳腺细胞的发育 如果母猪过肥会抑制乳腺发育 导 项 目 差异 致哺乳期泌乳量的减少 降低哺乳仔猪的发育 加大哺乳期 受精卵存活率 /% 母猪体损失 研究结果表明妊娠中后期过多的营养摄取导致 产仔数 / 头 母猪过肥 减少乳腺细胞内 DNA 的含量 从而影响乳腺产 (Dyck 等, 198) 乳能力 最终乳腺细胞数的减少 降低泌乳量 表 7 妊 娠中期的过肥不仅浪费饲料导致经济损失 而且增加胚胎死 表 6 BCS 分数范围 体形分数 状态 背膘 /mm 髋骨位置 外观形态 5 过肥 25 触摸不到 圆形 肥 2 触摸不到 基本圆形 3.5 稍肥 很难触摸到 椭圆形 3 正常 18 易触摸到 椭圆形 2.5 开始消瘦 注意 肉眼可观察到, 且很容易触摸到 倒锥形 1 瘦 <15 肉眼可观察到 露出骨骼 ( 肋骨 / 脊椎 ) 亡率 影响哺乳期采食量 表 8 5 妊娠末期 妊娠末期 妊娠 96 d- 妊娠 11 d 饲养管理目标是胎儿 体重的极大化 胎儿体重的 2/3 会在此阶段生长 随着子宫 用的仪器来测定 图 1 BCS 方法是通过目测 图 2 和触诊髋骨突起部位 图 图1 背膘测定仪 3 给予分数 表 6 之后增减饲料饲喂量 最终得到最佳 体形的方法 假设妊娠中期母猪 BCS 为 1.5 此时 3. 为正常 那 么增加其饲喂量 1 kg/d 直到 BCS 分数 3. 假设妊娠 3 d 的母猪 BCS 为 3.5 此时 2.5 或 3. 为正常 那么减少其 饲喂量.5 kg/d 如果恢复到正常水平的时间较长可追加 图2 目测母猪体形 减少.5 kg 但妊娠母猪最低日采食量不应低于 1.8 kg 如果采食量过低会引起维生素和微量元素摄取的严重不足 母猪分娩时正常 BCS 为 3.5 分娩后 5 d 其 BCS 接近 3. 如果分娩 7 d 之后 BCS 分数急速下滑到 2.5 以下时应 迅速采取措施 BCS 在 2. 以下会直接影响下一个胎次的 繁殖成绩 如微弱发情 发情延迟 产仔数减少 出生体重 减少等 过肥的母猪不会引起严重的繁殖障碍 但会造成 15% 25% 的饲料浪费 BCS 方法简便并且实用性比较强 但缺点是主观性强 1 图3 触诊髋骨突起部位

15 图6 图 测定母猪三维 长 宽 高 高能量 低能量 P-2 背膘 /mm DNA/mg/g.5 2 乳腺细胞数 / 百万 cells/g 69.8 哺乳期体重损失与下一个胎次产仔数 此阶段孕酮和雌激素在脂肪组织中高浓度蓄积 如果妊娠末 表 7 能量摄取与母猪体组织 DNA 乳腺细胞数的变化 饲养体系 1.7 期采食量过低 会促使两种激素的释放 影响乳汁生成和采 食量下降 6 分娩前后 分娩前后 分娩前 5 d- 分娩后 5 d 饲养管理目标是 预防母猪疾病 此阶段饲料饲喂重点放在有效预防母猪疾 病 如便秘 无乳综合征 MMA 等 分娩前后 1 d 应限 表 8 妊娠期采食量对哺乳期采食量的影响 量饲喂 其正确饲喂方法是分娩前 5 d 开始每天减少饲喂量 饲喂量 阶 段 高 中 妊娠期 /kg/d 哺乳期 /kg/d 低 防止因分娩过程中消化作用的减弱而引起的消化不良 分娩 Mullan and Williams 活仔数 / 头 出生体重 /kg 断奶头数 / 头 断奶体重 /kg 窝平均成绩 后 5 d 逐渐增加饲喂量 当自由采食时达到最大采食量 7 哺乳期 分娩6 d -断奶 哺乳期饲养管理目标是泌乳量的极大化和体损失的最 小化 哺乳期间采食量不足 导致母猪消耗体内所蓄积的营 表 9 妊娠末期采食量和分娩成绩 日采食量 /kg 分娩当天如母猪需要可喂.5 1. kg 通常也可以不喂 Cromwell 等 1989 养成分 而导致体重损失过大 延迟发情 图 5 并直接影 响下一个胎次产仔数 ( 图 6) 此期间饲喂蛋白质含量高 营 养丰富的哺乳母猪饲料 并且使母猪采食量极大化 提高泌 乳量和质量 增加断奶仔猪体重 延长母猪生产寿命 通常 产奶高峰和采食量成正比 但因管理不当饲喂量未能达到泌 乳所需量时 母猪会急剧消瘦 背膘厚度快速下降 乳汁内 乳脂肪发生变化 最终导致仔猪腹泻 通常哺乳母猪饲喂标 准是以每天 2 kg 饲料的基础上每头仔猪要增加.5 kg 如 母猪所带哺乳仔猪 1 头 则哺乳母猪每天要饲喂 7 kg 饲料 母猪就像一台精密的机器 使它维持最佳的状态 生产 出高品质的 商品, 首先要在准确地掌握母猪的特性基础 上 根据母猪的状态精心饲养才能够充分挖掘其潜力 获得 最佳的经济效益 切记母猪管理是个体管理 并非群体管理 所以需要努力学习和研究母猪的生理特性 了解各阶段营养 d 需求和管理目标 并通过有效的管理机制提高猪场员工的积 极性和参与度 真正实现理论和实际相匹配的管理 图5 哺乳期采食量与发情时间 羊膜 乳腺等的发育 母猪自身体重要增加 36% 因此要充分 提供胎儿生长所需的营养成分 通过增量饲喂 能够促进胎儿 d 生长及存活率 减少弱仔 力求获得更多健康的仔猪 表 9 11

16 瘦肉型种母猪繁殖管理 张守全 华南农业大学动物科学学院 广东 广州 5162 我国瘦肉型猪的饲养比例已达到空前水平 尤其是规模 和产肉性能的选育显著提高 13 日龄达 1 kg 瘦肉率达 猪场 随着国内外育种理论和育种技术的不断提高 越来越 7% 以上的猪只时有所见 并当作优秀的种猪选留下来 对 追求快速生长 不断提高瘦肉率 结果导致瘦肉型种猪的 猪来说 这样的生长速度和瘦肉率本身就是异常 畸形 它 生长速度越来越快 瘦肉率越来越高 但是其繁殖性能却 完全没有必要长这么快 生长性能通常与繁殖性能是一对 明显下降 经验性的母猪繁殖管理措施突显力不从心 为此 矛盾 这样高的生长性能留下种用 其繁殖性能低是可以理 笔者将近几年有关母猪繁殖管理研究进展和实践经验介绍 解和 同情 的 瘦肉型猪初情期推迟 达到配种要求的体 如下 重时 才第一 或第二个情期 甚至不发情 已成为猪场广 1 后备母猪 泛存在的头痛问题 1.1 饲养管理 通过适当技术措施 使后备母猪初情提前到来已是养 后备母猪体重达 85 9 kg 要求停止自由采饲 开始 猪生产关注的主要问题 成年公猪的诱情可有效解决该问 限饲 饲喂量约为自由采饲的 8% 左右 以期维持中等体况 题 由表 1 可见 后备母猪 9 kg 体重开始用成年公猪诱 限饲直至配种前的一个情期 配种前要求自由采饲以达到较 情 如果每天 2 次对后备母猪诱情 达到初情期的时间比 多的卵泡发育和较多的排卵数 因此要求后备母猪 85 kg 前 对照组提早 29 d 初情期出现较早的母猪 预示它的繁 转移至配种舍 由配种员饲养管理 购买后备母猪时 体 殖性能较高 因此 如果有条件 公猪诱导后备母猪初情 重在 5 6 kg 内较为理想 不赞成购买或调入体重超过 期的提前出现已成为养猪生产的操作规程 尤其是广泛采 9 kg 的后备母猪 因为其种用价值较低 后备母猪配种怀 用人工授精技术之后 孕后的饲喂水平应比经产母猪高 因为前者不仅有胎儿发育 1.3 发情鉴定 的需要 还有自身生长的需要 但应避免过肥 后备母猪产 后备母猪进入发情前期时 外阴红肿明显 没有皱褶 分 后 如有可能尽量少带仔猪 减少产房失重 保证断奶后发 泌的粘液多而稀薄 这个阶段母猪不允许公猪爬跨 为发情前 情的比例和体况 期 不能输精 随后 后备母猪外阴红肿稍有消退 由原来的 1.2 诱情 潮红变为紫红 出现皱褶 分泌的粘液较粘稠 拉丝性好 允 随着育种理论和育种技术的不断发展 对种猪生长速度 许公猪爬跨 该阶段为发情期 即站立发情 可以输精 表 1 接触公猪对小母猪初情期的影响 对照 上午 1 次 下午 1 次 上 下午各 1 次 接触开始日龄 SEM 开始体重 /kg SEM 至初情期天数 */d a 28.9a 16.b SEM * 仅计算接触公猪开始后 6 d 内到达初情期的小母猪 不同上标字母标示差异显著 P <.5 Hughes PE Thorogood KL Anim Reprod Sci

17 2 经产母猪 % 2.1 饲养管理 母猪饲喂采用配种前优饲 配种后劣饲的方式 配种前 优饲原因在于 可降低类固醇激素的负反馈 增加促性腺激 素的水平 并通过代谢激素直接对卵巢起作用 进而增加排 卵的数量 配种后劣饲的目的在于 降低肝内物质代谢和肝 P-5 水平 增加黄体的体积和重量 提高外周血液孕酮的 水平 增加子宫腺的分泌 为早期胚胎发育提供充足的营养 d 物质 增加胚胎着床的机会 配种后 3 周内母猪采饲量一般 图1 不超过 1.8 kg/d 要求在母猪妊娠后 5 6 d 达到中等体 断奶至发情出现时间间隔的变化 况 3 分膘情 2.2 发情鉴定 经产母猪断奶后发情的时间 发情的持续期和排卵时间 三者有相关关系 母猪断奶后发情时间一般集中在断奶后的 6 d 图 1 经产母猪发情的持续期一般为 32 6 h 图 2 母猪断奶后发情出现时间越早 发情持续时间越长 排 卵时间越迟 母猪断奶后发情出现时间越迟 发情持续时间 越短 排卵时间越早 图 3 3 输精 h 3.1 适时输精 图 首次输精时间的确定 母猪首次输精对当胎仔猪的贡献率超过 6% 首次输精 站立发情持续时间的变化 h 时间的确定非常重要 对于经产母猪 断奶后出现发情的时 间主要分布在第 d 5 d 6 d 约占 85% 母猪发情的持 h 续期一般在 32 6 h 约占 78% 母猪断奶后出现发情的 h 时间越早 例如第 3d 出现发情 则发情的持续期也就越长 62 h 母猪断奶后出现发情的时间越迟 例如第 6 d 出现 发情 则发情的持续期也就越短 38 h 发情期持续时间 d 越长 62 h 则排卵开始的时间越迟 发情开始后 2 h 发情期持续时间越短 38 h 则排卵开始的时间越早 发 情开始后 28 h 因此 首次输精时间应根据排卵开始的时 图3 断奶至发情出现时间间隔 发情平均持续期和排卵平 均出现时间之间关系 间确定 即断奶后母猪出现发情时间较早 6 d 之内 首次 输精时间应为观察到稳定的站立发情后 12 2 h 断奶后 输精可在第 2 次后的 8 12 h 进行 母猪出现发情时间较迟 7 d 以后 则观察到稳定站立发情 3.2 输精方法 后立刻进行输精 后备母猪 返情母猪 流产母猪等观察到 输精栏 稳定站立发情后也应立刻进行输精 输精次数 输精栏最好为定位栏 每 3 个输精栏为一组 输精母 猪能与试情公猪口鼻部接触 但是输精栏不能只是普通的 经过大量统计发现 每个发情期 2 次输精的效果优于 3 妊娠母猪栏 妊娠母猪栏通常有 3- 个横向钢管固定整 次输精 可能是由于多次输精影响子宫内环境和早期胚胎的 个栏设 尤其是母猪尾部的横向钢管 妨碍输精员在输精 发育 精子在母猪生殖道维持受精能力的时间为 2 8 h 时对母猪压背 按摩肋部及抚摸乳头等刺激 影响输精效 卵子排出后具有受精能力时间为 6 8 h 因此 首次输精后 果 因此输精栏后部不应有横向钢管阻拦 保证输精员对 第 2 次输精的时间间隔应为 2 h 如果需要输 3 次 第 3 次 母猪做足按摩刺激 13

18 3.2.2 试情公猪的作用 试情公猪要求行动缓慢 口水多 善交谈的老公猪担任 请勿拍打母猪的后躯 3.2. 母猪假孕 输精时要求试情公猪在场 且能保证公母猪之间口鼻部的接 卵子受精后至附植之前 早期胚胎产生激素信号 传给 触 可刺激发情母猪分泌高水平的催产素 催产素可促进子 母体 母体产生相应反应 识别胎儿存在 并与之建立密切 宫收缩 产生负压将精液吸纳至子宫 减少精液倒流的机会 联系的生物现象 在妊娠全过程 母子之间保持 热线对话 输精时应先将待配母猪清洗干净 准备好输精器具和精液 母猪配种后 1 1 d 胚胎可分泌雌激素 作为早期妊娠信 之后才赶公猪出场 试情公猪应固定在输精母猪前面 不能 号 雌激素可促进黄体功能 改变子宫分泌 PGF2α 的去向 让公猪在走道上来回走动 母猪输精前 1 h 不能接触任何 从子宫静脉 进入卵巢动脉 溶黄体 改变为向子宫腔 保 公猪 以保证输精效果 证黄体不被溶解 并使外周血液维持高水平的孕酮 雌激素 输精过程 不仅是胚胎发出的妊娠信号 也是发育较快的胚胎用来抑制 为预防和减少母猪子宫炎的发病机会 母猪在输精前要 发育较慢胚胎发育的信使 进而导致发育较慢的胚胎没有机 进行清洗消毒 正确的做法是用.1% 的高锰酸钾溶液清洗 会着床而死亡 使发育较快的胚胎有更大的子宫内环境和充 外阴部 再用清水洗去高锰酸钾残留 用干净的干毛巾擦干 足的营养 即可 或者直接以清水清洗母猪外阴部 再用干净的干毛巾 母猪在发情后的 11 1 d 接触到雌激素及其类似物如 擦干即可进行输精 有些场为保证消毒彻底 高锰酸钾溶液 已烯雌酚 催情散等之后 可引起配种没有配上的母猪 没 达到.5% 1% 清洗后不再用清水洗 高锰酸钾残留将 有配种的母猪出现假妊娠 自然情况下母猪是不会出现假孕 杀死不少精子 有些是不用干毛巾擦干 水同样也可杀死精 现象的 雌激素也可导致窝产仔数明显减少 每窝 3-6 头 子 造成不应有的损失 输精时间要求不少于 5 min 母猪 建议母猪任何时候都应远离雌激素及其类似物如已烯雌酚 的 2-3 个宫缩波吸纳完毕 输精时间过短 增加精液倒流 三合激素 催情散等 由于发霉饲料原料 如玉米 产生的 的机会 对母猪的分娩率和产仔数都有一定的影响 17 霉菌毒素如玉米赤霉烯酮 与雌激素结构和功能相似 也会 保存箱中取出的精液不用升温即可直接输精 输精后在防止 造成母猪假妊娠和产仔数明显下降等繁殖障碍 这已成为引 空气进入的情况下将输精管滞留在母猪的生殖道内 输精后 起种猪繁殖性能低下的主要原因之一 1

19 母猪舍建设与环境控制 吴中红 王新谋 中国农业大学动物科技学院 北京 我国生猪生产水平明显低于畜牧业发达国家 据调查 1193 好场区绿化 绿化可以调节场区温湿度 风速 减少空气中 目前疫病频发和母猪繁殖力低下是制约我国生猪生产的主 恶臭 细菌 尘埃含量和 CO2 排放量 改善场区空气质量 要因素 母猪 含后备 空怀 妊娠 哺乳母猪 与其他猪 猪场建筑物布局应考虑功能关系和防疫 根据风向 地势 群一样 其生产力和健康取决于种 饲料 管理 疫病和环 安排三个场区及各类猪舍 注意猪舍间距 朝向和选猪 出 境五大因素 其中环境已成为我国养猪生产中变数最大 最 猪设施的位置 猪场的合理规划布局既方便生产 又有利于 关键的因素 如猪舍过热 过冷 潮湿 昼夜温差太大等不 猪场防疫 良环境条件 可直接引起猪感冒 腹泻或呼吸道疾病 而猪 1.2 具有一定规模的猪场可采取 多点式 专业场建设 舍空气中的飞沫和粉尘又是微生物繁殖和传播疫病的媒介 较大规模猪场可分别建繁殖场 保育场和育肥场 场间 此外 环境条件差 福利状况不佳引起的应激 不仅是造成 相距 1 km 以上距离 以避免猪群间的垂直和交叉感染 有 母猪繁殖力差和仔猪成活率低的重要原因 也可以导致猪机 利于疫病控制 尤其有利于仔猪生长 而保育场和育肥场都 体免疫力和抵抗力下降 易感性提高 容易引发各种疫病 可以做到整栋猪舍的 全进全出 有利于猪舍彻底消毒和 猪所处的是猪舍环境 而猪舍舍内环境状况除取决于猪 防疫 舍建筑和环境调控设备外 也受猪场场区环境 场地周围环 1.3 采取 全进全出 转群 并配套 单元式 猪舍 境的制约 因此猪舍环境的改善就必须从多方面采取措施 建筑 对此 我国各地 不同性质 规模的猪场 已在实践中取得 具有一定规模并实行常年均衡产仔的猪场 可将一周或 不少成功经验 但也还存在一些问题和认识上的误区 笔者 半周内需要转群的某猪群的头数设计为一栋 1 2 头母猪 愿就此发表以下浅见与同行们商榷 或更大规模 或一个单元 2 6 头母猪 在限定的 1 猪场建设整体规划 时间内转进装满 该猪群饲养阶段结束时同时转出 之后 正确选择猪场场址 合理规划布局猪场场地 搞好场区 该栋或该单元猪舍空舍一周进行彻底清洗消毒 准备再转入 绿化规划设计 是猪场建成投产后获得良好环境效果的保障 新群 规模较小 如 2 3 头基础母猪 的场 这种 全 1.1 合理选址和规划布局 进全出 的转群方式应至少用于产房和保育舍 以 3 头母 选择猪场场址 应从地形地势 与工厂 居民点及其他 猪场产房为例 产前 7 d 进产房 哺乳 28 d 空圈消毒 7 d 牧场的相对位置和距离 交通 水源和土壤卫生 能源饲料 则产房需设 6 个单元 每单元 12 个产栏 一周内装满 第 供应 粪污就地消纳 产品销售等多种因素综合考虑 选择 5 周末同时断奶 同时转出 然后对该单元产房进行彻底的 适宜场址可减少或防止周围环境和牧场之间的相互污染 合 清洗消毒 保育期为 35 d 时 保育舍也设置和产房相同数 理规划场地 一般将场区分场前区 生产区 隔离区三个功 量的单元 同一批断奶仔猪转入保育舍同一单元 这样产房 能区 道路分设净道和污道 尤其在人工清粪的猪场 做 和保育舍都能做到整单元舍的 全进全出 便于卫生防疫 和消毒 2 母猪各饲养阶段的生产工艺 采用合理的生产工艺 不仅是保障猪的福利 减少应激 提高猪的生产力的需要 也是改善猪舍环境的需要 特别是 饲养方式 饲养密度 清粪方式等 更是环境改善必须考虑 的措施 2.1 母猪的饲养方式 1 哺乳母猪 为防止哺乳母猪躺卧时压死 压伤仔猪 图 1 产房有管道纵向通风 图 2 产房有管道纵向通风 供暖空调系统 图示进风端 供暖空调系统 图示送风管道 目前我国绝大部分猪场和养殖户哺乳母猪均采用防压架产 栏饲养 目前 m 规格的产栏 除去竖放保温箱所 15

20 内饲养 目前欧洲动物福利好的猪场较多采用空怀 妊娠母猪的 智能化大群饲养管理系统 采用个体识别技术实现单体精确 饲喂 自动发情鉴定 自动分离管理 既满足了母猪群体交 流的行为需求 又能做到对每个个体的精细管理 提高了母 猪繁殖效率 我国已有厂商经销该系统的设备 少数种猪场 也投巨资引进了该系统 但根据目前我国大多数猪场建设资 金投入有限的现实情况 建议空怀 妊娠阶段母猪养殖 至 少其中一个阶段 还是采用小群饲养方式为宜 并将每头占 图3 保育猪舍无管道横向通风 供暖空调系统 栏圈面积扩大到 m2 占面积 防压架两侧的仔猪活动区仅宽 5cm 左右 限制了 3 后备母猪 后备母猪与育肥猪饲养方式相同 多为实 小猪游 的行为需求 建议加宽至 m 保温箱 体地面群养 故我国多数猪场后备母猪与生长育肥猪在同栋 横置 则大大增加该侧的仔猪活动空间 产房和保育舍除可采用上述 全进全出 周转工艺外 舍饲养 与肥猪出栏同时转入空怀母猪舍 饲养至 8 月龄 体重 12 kg 以上开始配种 为方便对后备母猪和育肥猪饲 为避免断奶 转群和突然改变生活环境等应激因素叠加 产 喂不同饲料 以及对后备母猪进行更精细管理 可分别将后 房亦可采用 产育两用栏 其母猪防压架可拆卸或翻转 备母猪和育肥猪在同一栋舍的不同猪栏或单元饲养 断奶后将母猪转走 将防压栏拆卸或翻转收起 仔猪原窝 2.2 清粪方式 留原产栏多养 1 周后再转群 须多设一个产房单元 而少设 猪舍空气质量 猪场粪污处理利用的难易 在很大程度 一个保育单元 也有的场设置产育两用猪舍或单元 仔猪 上取决于猪舍的清粪工艺 我们提倡所有猪舍采用 干清粪 断奶后留产育两用栏内完成保育期饲养 取消了断奶后转 工艺和设施 使粪和尿 污水在猪栏内得以分离 粪便和污 群 产育两用单元数应为分设产房 保育时两者所需单元 水及时清除和排出猪舍 立即进入堆肥和污水处理设备 既 数之和 北京市不少猪场实践认为 该工艺可降低仔猪发 可保障猪舍和场区环境卫生和空气质量 还能保存粪便中肥 病率 提高成活率 但也有业内人士担心增加仔猪垂直感 分 大大减少污水产生量 减小污水污染物浓度 降低粪便 染的几率 污水处理和利用的难度 调查表明 采用水冲粪 水泡粪 此外 如果仔猪断奶后合并为大群饲养 为减少并群引 和干清粪工艺的 6 头基础母猪的猪场 日排污水量分别为 起的激烈争斗 有丰富养猪经验者介绍 可以在仔猪出生 2 25 m m3 和 5 8 m3 污 水 BOD5 3 d 后 打通产床隔栏 允许哺乳仔猪 窜圈 让不同窝 浓度分别为 7 mg/l 8 12 mg/l 和 的仔猪互相认识 可减少以后的并群应激 同时 母猪奶水 mg/l 因此 干清粪工艺是实现猪场资源节 不足的仔猪可以到其他母猪栏吃奶 保证仔猪均匀生长 约和循环利用 改善舍内外环境 防止环境污染的有效措施 2 空怀 妊娠母猪 目前空怀 妊娠母猪主要有单体限 得到了业内人士的普遍认可 位栏和小群饲养等方式 少数采用大群饲养 自上世纪 8 年代起 我国引进集约化饲养方式 传统 采用水冲或水泡粪工艺既耗水耗能 同时舍内环境调控 和粪污处理设备不配套时 往往严重污染周围环境 并对猪 的空怀 妊娠母猪小群饲养逐渐为单体限位栏饲养代替 据 场自身造成很大威胁 29 年调查 北京市空怀 妊娠母猪限位栏饲养占了 8% 3 限位饲养便于对空怀 妊娠母猪进行发情鉴定 输精 妊娠 猪舍建筑 不同气候区对猪舍的防寒防暑要求不同 则猪舍建筑材 检查 定量饲喂等日常管理 提高了饲养密度和圈舍利用率 料选择 保温隔热设计及猪舍样式也应区别对待 猪舍建筑 但是限位饲养限制了母猪运动 使肢蹄病增多 缩短了母猪 不能单纯追求低投资 必须从投资和运行成本 环境效益 的利用年限 同时 限位饲养导致其饲养环境贫瘠 是一种 节能减排等方面综合考虑 长期应激 不仅使猪产生许多异常行为 也降低了母猪的生 3.1 加强猪舍围护结构的保温隔热设计 实现建筑节能 产力 抵抗力和免疫力 欧盟动物福利相关规定已限制并逐 猪舍建筑要重视并提高猪舍外围护结构的热工性能 即 步取消限位饲养方式 向群养方式过渡 欧盟宣布在 213 保温隔热性能 这是改善舍内环境 实现节能减排的根本 年禁止使用限位栏饲养母猪 除分娩母猪和公猪外 一般要 措施 即使一次性投入有所增加 综合效益也是合理的 目 求群养 而妊娠后期 临产母猪 必须在单独的自由活动栏 前在民用建筑中已非常注重并强化节能设计 但在畜舍建筑 16

21 很少通风或不通风 舍内空气污浊潮湿 有害气体和微生物 含量严重超标 长期生活在这样的空气环境条件下 猪抵抗 力 免疫力降低 对舍内温度的变化很敏感 易感各种疾病 夏季高温引起的公 母猪繁殖性能大幅下降 则是我国夏季 炎热地区普遍存在的问题 猪舍环境调控措施是改善环境的末端治理措施 它既要 大量设备投资 又会增加运行费用和耗能 在猪舍环境调控 中我们建议在采取上述改善环境的综合措施的前提下 设备 调控既要节约投资 还要考虑节能减排的原则 选用调控设 图 可翻转母猪分娩栏 哺乳 保育仔猪一阶段饲养 上却尚未提上日程 建议进行相关研究 如猪舍建筑热工参 数和计算等 和应用 备应尽量利用太阳能 地能 回收猪舍排出空气余热等.1 猪舍降温 猪舍降温设备有给猪体淋水 喷雾 湿帘 畜舍空调 利 目前复合彩钢聚苯板因其保温性能好 施工快捷 被广 用地下水循环 等 在夏季湿度不很高的地区 给猪淋水的 泛用于临时性建筑和工农业厂房等 也广泛用做畜舍墙体和 作用不在降温而在促进猪体蒸发散热 故须结合通风 效果 屋顶 但须改变不根据当地气候决定保温层厚度的做法 砖 不错 喷雾和湿帘的作用在于水蒸发吸收空气中热量而降低 墙还是各地应用较多的猪舍材料 若在猪舍砖墙外贴保温 气温 降温效果取决于空气相对湿度 风机 湿帘系统效 板 则保温性能会大大提高 公 母猪繁殖性能受夏季高温 果好 猪舍使用较普遍 畜舍空调降温不增加舍内湿度 不 影响很大 屋顶传热是导致舍内高温的重要原因 建议炎热 失为在高湿地区有效的降温措施 地区必须做好公 母猪舍的屋顶隔热设计和采取减少屋顶传.2 猪舍环境综合调控 热的措施 3.2 猪舍样式 朝向 跨度 层高等对环境的影响 传统的猪舍环境调控是供暖 降温 通风换气等分别调 控 一栋猪舍要配备几套环境调控设备 不仅设备投入高 从猪舍样式上建议繁殖母猪舍采用有窗密闭式猪舍 便 同时几套设备在调控运行中难以协调产生矛盾 比如负压纵 于冬夏季环境调控 开放式猪舍 尤其大棚猪舍 舍内温差 向通风冬季进风端空气新鲜但温度过低 出风端温度较高但 太大 用于养殖繁殖母猪时 夏季高温严重影响母猪繁殖性 空气污浊 冬季供暖设备提供的热量被通风系统排出室外 能 要根据当地气候特点慎重选择 目前在许多地区推广的 换进的冷空气再耗能加热等等 因此 应当改变单一环境因 发酵床养猪方式多用于养殖保育和生长育肥阶段的猪 有少 素的调控理念 综合考虑通风换气 降温 供暖等因素 提 部分猪场发酵床也用于养殖繁殖母猪 如果垫料管理不善 高环境调控效率 降低猪舍环境调控投入和运行成本 猪舍建筑和环境调控不配套 往往导致夏季猪舍内和床面温 度过高 对母猪的繁殖性能影响很大 有管道正压送风供暖降温一机多用的畜舍空调就是一 种多环境因素综合调控设备 可将猪舍通风与供暖 降温结 根据各地区气候特点 选择适宜的母猪舍朝向 综合考 合起来 冬季用热水锅炉 换热器加热空气 用风机将热空 虑日照和通风 猪舍纵墙和屋顶冬季多接受太阳辐射 夏季 气送入舍内 污浊 潮湿的空气被排出舍外的同时 与进来 减少太阳辐射 尽量减少猪舍冬季冷风渗透 使夏季通风均 的冷空气在余热回收装置中进行热交换 能回收一部分热 匀 避免冬季和夏季盛行风与猪舍纵墙垂直 我国多数地区 量 提高供暖效率 夏季同一套设备利用深井水或经其他方 以坐北朝南 或南偏东 西不超过 3 为宜 式处理的冷水通过换热器降低气温 风机将冷空气送入猪舍 猪舍跨度越大 外墙面积相对越小 有利于保温 但完 全采用自然通风 自然光照时 猪舍跨度不宜超过 8 m 自 然与机械通风结合的猪舍跨度不宜超过 12 m 猪舍越高 外墙面积越大 不利于保温 但有利于防暑 降温 污浊潮湿空气被排出舍外 目前我国已有不少猪场使用不同品牌的畜舍空调 均取 得了较好的效果 但市场上的这些环境调控设备仍存在冬 季通风量偏低 耗电耗能量较高 设备投资偏大等不足 进 和通风 因此 寒冷地区猪舍可适当降低高度 m 一步研制改进此类设备的性能和配套通风方式 降低设备成 炎热地区适当增加猪舍高度 m 本 将在猪舍环境调控中具有广阔的应用前景 猪舍环境调控 目前我国北方地区猪舍冬季保温与通风换气的矛盾非 常突出 为了保温 猪舍 尤其是产房和保育舍 门窗紧闭 综上所述 给繁殖母猪创造好的环境条件 必须从猪场 的整体规划 各阶段母猪生产工艺的选择 猪舍建筑设计及 环境调控措施的配套等多个方面综合考虑和采取措施 17

22 猪分子育种研究进展 刘 榜 华中农业大学动物科技学院动物分子生物学与育种实验室 农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 湖北 武汉 37 分子育种主要是一种利用 DNA 水平上的分子标记对生 受体基因 ryanodine receptor 1, RYR1 胰岛素样生长 物群体进行遗传改良 动物分子育种方法主要包括标记辅助 因子 2 型基因 insulin-like growth factor 2, IGF2 黑皮 育种 转基因育种和体细胞克隆育种 本文主要从标记辅助 质素受体 melanocortin receptor, MCR 基因和肌肉 育种和转基因育种两个方面综述猪分子育种的研究进展 生长抑制素 myostatin, MSTN 基因 1 标记辅助育种 RYR1 参与了猪肌肉生长发育过程 与骨骼肌肌质网 标记辅助育种是利用 DNA 水平上的分子标记进行猪 中主要钙离子释放通道 在该基因 183bp 位置发生的一 的遗传改良 现阶段 DNA 标记辅助育种技术仅仅是一种 个 CT 突变 导致编码蛋白在这个位置从精氨酸到半胱氨 辅助手段 还必须与常规育种技术特别是数量遗传学方 酸 的 改 变 Fujii J 等 1991 在 不 同 的 猪 品 种 中 这 个 法相结合 故称之为标记 辅助 育种 标记辅助育种 碱基的改变与瘦肉率和体重呈显著相关 23 年 与猪肌 中 DNA 标记的鉴定是基础 目前虽然有大量的猪经济性 肉发育相关的第二个 QTN 在印记表达的 IGF2 基因中发现 状候选基因多态性以及关联分析结果 但真正已经鉴定的 Van Laere A 等 23 在 IGF2 的第三内含子中的一个 QTN 却甚少 QTN 鉴定需要利用大规模的资源群体和基 进化保守的 CpG 岛区域 372 位置的 GA 突变导致了该基 因组信息 现对猪基因组研究进展 可以利用的 QTN 及 因表达量升高三倍 并增加了猪的肌肉生长速度和心脏体 标记辅助选择方法进行介绍 积与减少了脂肪的沉积 MCR 是一个 G 蛋白偶联受体 1.1 猪基因组计划研究进展 参与了一个与采食量和能量平衡的重要通路 Kim KS, 等 猪基因组研究已经从单个基因的克隆和功能研究发展 2 在 MCR 中发现 893 位 GA 错义突变导致了其编码 到对整个基因组的研究 中国科学院北京基因组研究所 的天冬氨酸改变成天冬酰胺 这个变异被证实是影响背膘 (Beijing Genomic Institute) 与丹麦动物科学研究所 (Danish 厚 日增重的 QTN 第 个可能的 QTN 是 MSTN 启动子 Institute of Animal Science) 皇家兽医与农业大学 (the Roy 中的 7 位 AG 突变 Stinckens A 等 28 发现该突变 al Veterinary and Agriculture University(KVL)) 丹麦养猪 导致了肌细胞增强子 3 MEF3 的结合位点的丢失 并发 业的代表共同于 2 年 1 月 2 日签署猪基因组测序计划 现发生突变的四周龄仔猪比野生型的 MSTN 基因的表达水 协议 至 25 年 该计划完成了 38 万个鸟枪法测序反应 平低 推测该位点可能是影响肌肉生长的 QTN 上述 个 结果 覆盖了.66 个基因组 Wernersson, R 等 25 QTN 对猪日增重与肌肉生长性状有较大影响 均可作为标 并建立了 97 个非标准化的 cdna 文库 提供了大约 1 万 记在选种中应用 但在应用的过程中应考虑他们之间的相互 条 EST 序列 Gorodkin, J. 等 27 在继 2 年先后 作用 有关 个基因间的互作 Stinckens, A 等 29 在 完成了鸡和牛的基因组测序后 美国农业部 (USDA) 展开了 长白猪和大白猪中发现了他们之间的关系 猪基因组研究计划 26 年获得了 USDA 首批 1 万美 1.3 标记辅助选择方法 元的基金支持 正式在 Sanger 基因组测序中心开始以杜洛 标 记 辅 助 选 择 Marker Assisted Selection, MAS 克猪为材料的基因组测序工作 到 29 年 1 月 2 号 已完 是通过寻找对动物特定性状有较大影响的数量性状位点 成了猪 98% 的基因组草图 所有序列都已经释放 可以通 Quantitative Trait Loci, QTL 附 近 的 分 子 标 记 并 通 过 Pre-ensemble( 过判断标记的基因型对种畜进行选择的方法 利用 MAS Info/Index) 获得 可 以 做 出 早 期 选 种 缩 短 世 代 间 隔 提 高 选 择 的 准 确 1.2 已经应用于标记辅助育种的 QTN 性 提 高 选 择 强 度 降 低 育 种 成 本 加 快 遗 传 进 展 特 QTN 是指通过改变某个特定核苷酸 能够使个体的表 别对于遗传力低的性状 晚期表现性状 以及活体难于 型从一种转变到另外一种 Glazier, 22 可以说 QTN 是 度量的性状更具有价值 目前 依据选择标记与性状控 性状产生变异的基础 是 QTL 对表型影响的根本原因 目前 制 位 点 的 关 系 MAS 可 分 为 标 记 距 离 较 远 的 连 锁 平 衡 在猪中已经鉴定出 3 个与肌肉发育和日增重相关的 QTN 和 Linkage Equilibrium, LE MAS LE-MAS 标 记 距 离 1 个可能的影响肌肉生长的 QTN 他们分别是兰尼定 1 型 较 近 的 连 锁 不 平 衡 Linkage Disequilibrium, LD MAS 18

23 LD-MAS 以及标记本身即为 causal 位点的基因辅助选 括种内和种间 整合到猪的基因组中或者将猪自身的基因 择 Gene Assisted Selection, GAS 这三种方法都已经在 敲除或沉默 借此来定向改变猪的性状 以转基因材料进行 动物育种上进行了应用 此外 最近还出现了一种全基因 的育种 转基因技术作为育种技术的优点在于 不但可以打 组选择的方法 预计将是未来标记辅助选择发展的重要方向 破物种界限导入其他物种的优良基因 也可以通过对物种内 之一 但目前因为检测成本过高暂时还不能大面积推广使用 现有基因组的 精细手术 获得依靠自然选择与人工选择 同时全基因组选择亦还有部分理论和方法问题尚未完全解决 无法新基因组合 目前 转基因技术主要用作生物工程手段 作为分子育种技术尚处于探索阶段 但随着国家转基因重大 连锁平衡 MAS 连锁平衡 MAS 使用的是连锁平衡标记 LE 标记 LE 专项的实施 转基因技术将会成为家畜分子育种的重要内容 标记都是在一些对性状有较大影响的 QTL 区域附近 是一类 转基因技术已成功运用于猪 获得了一些转基因猪 与 QTL 连锁的标记 由于 LE 标记相对 LD 标记和直接标记 1985 年 Hammer 等 通 过 显 微 注 射 的 方 法 将 由 小 鼠 它与形成 QTL 中的致因突变位点相隔还较远 只是与 QTL 有 MT-1 启动子驱动的人生长激素基因 hgh 注射到猪 一定程度的连锁 选择效果不能保证 特别是不能保证所有家 羊和兔卵细胞的原核中 该融合基因成功地整合到了猪和 系中都存在这种连锁关系 所以 在实施选种中 不能跨越家 兔的基因组上并能正常表达 1991 年 Shamay 利用同样 系去使用 LE 标记 这限制了连锁平衡 MAS 的使用范围 的方法 将小鼠乳清酸性蛋白基因 mwap 转入到猪 mwap 基 因 在 猪 的 乳 腺 中 成 功 表 达 1992 年 Swanson 连锁不平衡 MAS 连锁不平衡 MAS 使用的是连锁不平衡标记 LD 标记 等成功获得了能生产人血红蛋白的转基因猪 Muller 等将 这类标记主要是通过精细定位或者候选基因的方法得到的 小鼠的 MX1 基因转入猪体内 试图生产抵抗流感病毒的 Rothschild and Soller,1997 由于 LD 标记与对性状影响 转基因猪 1995 年 Rosengard 等将人的补体抑制因子和 的功能突变位点紧密连锁 所以选择的有效性大大地提高 衰退加速因子 (hdaf) 转移至猪胚中 有 27 头转基因猪的 而且通常能在不同的家系中应用连锁不平衡 MAS 进行选种 hdaf 在其内皮细胞 血管平滑肌和鳞状上皮细胞等细胞中 对现阶段而言 LD 标记应是分子育种使用的主要标记类型 有不同程度的表达 21 年 加拿大 Guelph 大学 Golovan 等人通过显微注射原核胚的方法 培育出转植酸酶的转基 基因辅助选择 基因辅助选择使用的是直接标记 这种标记直接来自对 因环保型猪 使得粪便中磷的排放量减少了 75% 23 年 性状有较大影响的 QTN 由于这种标记直接来源于影响性 Ramsoondar 等将 α(1,3) 半乳糖苷转移酶基因敲除的猪 状的基因的功能突变位点 所以能够用于不同情形 包括不 试图解决器官移植时的免疫排斥反应 2 年 日本克隆 同家系的辅助选择 但是 目前已经在猪中鉴定的 QTN 数 出体内含有水母基因的转基因猪 26 年 Lai 等奖秀丽线 量甚少 实际能用于基因辅助选择的标记并不多 虫的编码 ω-3 脂肪酸去饱和酶 FAT-1 基因克隆到猪中 1.3. 显著地提高了组织中不饱和脂肪酸的含量 全基因组选择 由 于 多 个 物 种 的 测 序 完 成 和 SNP 芯 片 的 出 现 一 我国的转基因猪也已取得了重要成果 1989 年 中国 种 新 的 选 择 方 法 全 基 因 组 选 择 在 21 年 被 提 出 农业大学陈永福与湖北省农科院生物技术研究所合作 将猪 Meuwissen 21 全基因组选择是指使用覆盖全基因组 生长激素基因 GH 转入湖北白猪中 显著提高了生长速 上的标记来进行选择 与之前的 MAS 相比 不依赖于对性 度与饲料利用率 湖北省畜牧所与中国农科院兰州兽医所合 状影响较大的标记的数目 并能对多个性状进行同时选择 作 将抗猪瘟病毒 HCV 基因导入猪中 获得了抗猪瘟 提高了选择的准确性 通常 全基因组选择的方法有两步 的转基因猪 郑新民 魏庆信等 年 郑新民 首先是通过对资源群体进行全基因组的 SNP 芯片扫描和各 魏庆信等用显微注射的方法 生产出来能够合成人血清蛋白 个性状表性值的测定统计 估计出基因组不同组分对目标性 HAS 的转基因猪 26 年底 东北农业大学刘忠华教授 状的影响程度 并构建出育种值的预测模型 然后根据育种 带领的团队研制出中国首只转基因 荧光猪 28 年 中 群体中多 SNP 单倍型 单倍型域 染色体区段等综合构 国农科院北京畜牧兽医研究所李奎教授等人 继美国之后培 成的全基因组基因型信息进行估计 得到个体的基因组估计 育出了转 FAT-1 基因的保健猪 这些转基因材料一旦经过 育种值 Genome EBV, GEBV 然后依据 GEBV 进行选种 生物安全评价就可以作为育种素材进行新品种的培育 目前 由于全基因组选择利用的信息量最大 选择的准确性将极大 我国转基因生物新品种重大专项的启动将进一步推动转基因 地提升 这将是今后家畜分子育种的主要发展方向 猪的研究进程 2 转基因育种 转基因育种是指通过转基因的方法 将外源的基因 包 19

24 猪抗病和免疫相关候选基因的研究进展 杨海玲1, 2 曾勇庆1 王 慧1,* 1. 山东农业大学动物科技学院 泰安 青岛市畜牧兽医工作站 青岛 2661 摘 要 通过育种选择提高猪的抗病性 不仅可以为我们提供品质更优良的肉产品 还可以最大限度地减小因 疫病给养猪业带来的经济损失 尤其是近年来 随着病害造成的危害和损失越来越严重 抗病育种研究成为 各国育种学家倍加关注的焦点 猪的基因组计划和遗传连锁图谱的发展以及DNA分子标记密度的增加 使许 多控制猪经济 数量 性状的QTL逐渐被发现 并显示出巨大的应用前景 本文概述了猪抗病性或免疫相关候 选基因的研究进展 综述了动物抗病育种研究的现状 存在问题与前景 关键词 猪 QTLs 候选基因 免疫性状 抗病育种 目前 影响我国养猪业的瓶颈除饲料和市场问题 还有 克隆等方法进行 直接选择具有直观和准确等优点 但由于 各种疫病所带来的威胁 免疫接种 药物防治 卫生隔离和 疾病性状的遗传力较低 世代间隔长 尤其是有些抗病性状 改善环境等措施 虽取得一定的效果 但仍不能完全控制或 和生产性状往往存在负的遗传相关等 使得直接进行抗病选 消灭疫病的蔓延 药物和疫苗的大量使用使得病原微生物变 育十分困难 异加快 疫病控制更加困难 在这种背景下 借助于现代分 间 接 选 择 法 是 通 过 疫 苗 攻 击 体 外 实 验 基 因 组 扫 子遗传育种的理论和手段 通过生物技术等综合育种措施 描 筛选遗传标记和 QTL 定位等方法进行的 近年来 国 培育抗病力强的新品种 成为控制病害的最有效途径和最终 内外陆续发表了许多有关资源家系中与抗病力或免疫相关 目标 的 QTL 定 位 的 研 究 成 果 Anderson 等 1998 年 完 成 了 对 1 抗病育种的遗传基础 免疫反应的若干参数的研究 并查明了一些免疫力 QTL 猪的抗病力可分为一般抗病力和特殊抗病力 其遗传 Edfors-Lilja 等 1998 年定位了影响猪免疫性状的 QTL 其 基础不同 一般抗病力不限于抗一种病原体 它受多基因 中 个达到染色体水平的显著效应 Edfors-Lilja 等 2 及环境的综合影响 具体体现在机体对疾病的防御机能和 在野猪与约克夏猪的杂交 F2 代群体中定位了猪应激状态下 对抗原的免疫应答能力的不同 较少受病原体来源 类型 白细胞计数的 QTL 同时也定位了 个在染色体水平呈显 和入侵方式的影响 研究表明 当一般疾病的抗性转为特 著效应的 QTL 25 年 Wattrang 等进一步确认影响猪白 殊免疫反应时 由于抗体反应一般有较高的可遗传性 其 细胞数 血液参数和白细胞功能的 QTL 在 1 号和 8 号染色 遗传力会增加 Morris 等研究认为 对特殊疾病抗病性状 体上 这些抗病基因或 QTL 的发现和定位 为开展动物抗 的选择类似于对生产性状的选择 所以 在猪的抗病育种 病育种研究奠定了重要基础 中 既要针对特殊抗病力进行选择 又要针对一般抗病力 3 猪免疫或抗病相关的候选基因 进行选择 二者同等重要 特殊抗病力可通过特殊病原体 猪抗病育种的最终目标是培育出整体免疫力高的品种 直接攻毒试验进行测定 一般抗病力则比较复杂 如何衡 或品系 要借助于标记辅助选择培育和提高猪的抗病力 需 量目前尚无统一标准 由于一般抗病力体现了机体对疾病 要首先找到与抗病性或免疫相关的候选基因 的整体防御功能 因此 提高机体的一般抗病力也就是提 3.1 MHC 超基因族 高机体的整体免疫机能 2 主组织相容性复合体 MHC 是由紧密连锁的高度多 抗病育种的技术方案和选择方法 态性的基因位点所组成的染色体上的一个遗传区域 广泛 抗病育种是一项复杂的系统工程 必须从筛选抗病突 存在于脊椎动物 在猪中又称为 SLA SLA 复合体基因由 变基因或基因型 提高机体免疫应答能力 提高总体抗病 Vaimin 等首次发现 随后 Rabin 等将其定位于猪 7 号染色 力等方面着手 抗病育种的技术方案包括直接选择法和间 体 Smith 等进一步将其定位于猪 7 号染色体着丝粒两边 接选择法 由 3 个基因簇或区域组成 SLA 一般分为 3 大类 即 I 类 直接选择法是通过筛选抗病个体 同胞和后裔 或通过 2 基因 II 类基因和 III 类基因 其中 I 类基因具有高度多态性

25 大量研究表明 SLA 与抗病力和免疫应答密切相关 Tissot 3. 氟烷 RYR1 基因 等发现遗传性皮肤恶性黑瘤与 SLA 复合体有关 Renard 等 氟 烷 基 因 是 导 致 猪 应 激 综 合 征 PSS 的 遗 传 基 础 发现腹泻造成的断奶前死亡率与 SLA 的单倍型类型有关 应 激 敏 感 猪 在 应 激 状 态 下 产 生 PSE 等 劣 质 猪 肉 同 时 Lunney 等发现 SLA 的不同单倍型对寄生虫的抗性存在类型 C183-T183 突变改变了 Hha I 酶切位点 因而可通过此 的差异 姜范波等发现 SLA 基因在二花脸猪免疫系统的 突变位点判断猪对应激的敏感性 据报道 Haln 基因型频 高表达可能是该猪种高抗逆性的基础之一 预计在不远的将 率随猪胴体瘦肉率的提高在群体中呈上升趋势 在我国地方 来 育种工作者可以利用 SLA 作为一种遗传标记进行标记 品种中 Haln 基因频率很低或不存在 Haln 基因 但部分品 辅助选择 以培育出一般抗病力强且高产的猪品种 种中也有 Haln 基因存在 在育种过程中 可通过基因检测 3.2 天然抗性相关巨嗜蛋白 NRAMP1 基因 技术将氟烷敏感基因从群体中剔除 比利时 Hanset 已成功 NRAMP1 定位于猪的第 15 号染色体 15q23-26 吴 地利用分子标记辅助导入将抗应激的氟烷阴性基因导入皮 宏梅研究了猪 NRAMP 基因 PCR-RFLP 多态性与免疫指 特兰猪中 标的关系 发现在第 6 内含子区遗传变异对免疫功能有一定 3.5 MX1 蛋白 的影响 可作为一个很有价值的一般抗病力的候选基因 3.3 K88 受体和 F18 受体基因 肠毒素型大肠杆菌 ETEC 是引起仔猪腹泻的主要病 MX1 蛋白是一种 GTPase 结合蛋白 具有抗病毒作用 Muller 等从猪的细胞中分离克隆了全长 MX1 cdna 序列 包括一个 663 个氨基酸开放阅读框 预测分子量 75.6kDa 原菌 可引发仔猪黄痢 白痢 水肿病等多种大肠杆菌病 Morozumi 等报道了在猪 MX1 基因第 1 外显子发现 2 个新 ETEC 的致病能力决定于它们在宿主小肠上皮细胞的定居能 的多态性位点 在不同品种中等位基因频率呈现很大差别 力和产生肠毒素能力 而定居能力则由菌体表面的特异菌 3.6 干扰素 IFN 基因 毛 称为黏附素 介导 按黏附素的性质 抗原性 可将 干扰素是 1957 年 Isaacs 和 Lindenmann 从病毒感染细 E.coli 分为 K88 F K99 F5 F1 F6 F17 和 F18 胞培养中分离到的一种生物活性物质 因这种因子可干扰其 等 房海 1997 Sellwood 等首次发现对 E.coli K88ac 粘 他病毒的复制 故命名为干扰素 目前所发现的猪干扰素包 附素引起的腹泻具有抗性的猪是由于小肠粘膜缺乏相应的 括 INF-α β ω δ 和 INF-γ 并且 IFN-δ 未在其 受体 ETEC K88ac 粘附素受体按孟德尔两等位基因方式遗 它物种中发现 Domeika, 23 由于 INF-γ 不但具有 传 显性表现粘附性 隐性表现为抗性 研究表明仔猪体内 抗病毒作用 而且具有广泛的免疫调节作用 因此可作为疾 如果缺乏 E.coli K88 受体或 F18 受体 就会对相应的血清 病抗性的良好候选基因 INF-γ 作为抗病性候选基因研究 型大肠杆菌引起的腹泻产生抗性 进一步的研究发现 在猪 正在广泛展开 小肠上皮细胞分离到的两种粘液型唾液糖蛋白 分子量分别 3.7 其他候选基因 为 21KDa IMTGP-1 和 2KDa IMTGP-2 被认为 免疫球蛋白及其受体基因 C5 基因 白细胞介素基因 是猪对 K88ab 和 K88ac 易感性和抗性重要的决定因子 用 Toll 样受体基因等作为抗病候选基因正在进行广泛的研究 外切糖苷酶消化 IMTGP-1 和 IMTGP-2 试验表明 β- 半 补 体 蛋 白 C3 Complement 3, C3 是 补 体 的 一 个 重 乳 糖 是 K88ac 识 别 IMTGP-1 和 IMTGP-2 的 重 要 成 分 要成分 参与猪的免疫调节 C3 基因的多态性与补体有 而 K88ad 受体是一种中性糖鞘脂 命名为 IGLad K88 粘 显著关系 所以 C3 基因是抗病原微生物的重要候选基因 附素识别受体的最少氨基酸序列可能是 β-n- 乙酰己糖胺 Wimmers 等, 23 Mekchay 等, 23 补 体 蛋 白 C5 β-hexnac 而 HexNAC 末 端 β- 半 乳 糖 的 存 在 会 Complement 5, C5 也是补体的一个组成成分 该基因在 增强 K88 粘附素的结合 Ecoli F18 是引起断奶仔猪腹泻及 细胞免疫和体液免疫以及炎症反应中起重要作用 C5 蛋白 水肿病的主要病原菌, Bertschinser 发现 断奶前后仔猪水 基因的 SNP 与免疫学参数之间有显著的关联 所以 Kumar 肿病是 F18 菌株与细胞表面受体结合释放肠毒素而引起的 等 2 认为 C5 蛋白基因是一个重要的抗病候选基因 缺乏受体能抗腹泻和水肿病 F18 受体基因定位于猪的 6 号 此外 范志勇等 25 研究发现 表皮生长因子 EGF 染色体 并与血型抑制因子 S 红细胞酶系统及氟烷基因紧 谷氨酸胺 (Gln) 和 pgrf 基因质粒的不同组合形式在增强仔 密连锁 Meijerink 等发现 岩藻糖转移酶基因 1 FUT1 猪兔疫功能方面表现出良好效果 可作为 Ecoli F18R 的候选基因 AA 型为抗性基因型 据 此进行标记辅助选择和标记辅助交配 有可能提高群体中 A 基因频率 培育抗病品系 实现抗病育种 结语 尽管与抗病 免疫能力有关的 QTL 和候选基因研究在 猪上已经取得了一些进展 但是 抗病育种还面临诸多困难 21

26 首先 多数情况下 疾病感染是数量性状 是由多个微效基 环境因素的影响较大 这给研究带来极大的不便 第五 培 因控制的 且这种数量性状的遗传力很低 通过常规育种选 育抗病性和易感性极端差异的动物品系很困难 尽管如此 择 进展缓慢 第二 基因的表达调控一般受控于一个复杂 利用动物的遗传特性来培育抗病品种仍具有很大的现实意义 的基因网络 通常不会单独起作用 这给分子标记辅助选择 对动物抗病性的研究也会受到遗传育种学家们的高度关注 带来了极大的干扰和难度 第三 抗病性或易感性指标难以 致 谢 本 文 受 国 家 发 改 委 生 物 育 种 高 技 术 专 项 测定 且在兽医临床上对某些疾病的准确诊断通常非常困 山东省农业良种工程重大课题 27LZ13 难 如仔猪腹泻可以由不同类型的大肠杆菌 沙门氏菌等多 山东省自然科学基金项目 Y28D32 和山东省教育厅科 种病原微生物引发 第四 抗病性的遗传机制非常复杂且受 技计划项目 J7WF8 资助 22

27 母猪胎次对断奶仔猪生长性能的影响 李凯年 编译 吉林出入境检验检疫局 吉林 长春 1362 近 几 年 来 欧 美 国 家 提 出 了 一 种 养 猪 生 产 的 新 模 段进行 第 1 阶段 7 d 第 2 阶段 8 21 d 第 3 式 即对母猪实行按胎次隔离饲养 将头胎的新母猪放 阶段 22 2 d 将猪饲养于温控猪舍中 每个猪栏中设 在 同 一 地 点 分 娩 将 二 胎 以 上 的 母 猪 放 在 另 一 地 点 分 置一个乳头饮水器和一个自动加料器 便于猪自由采食和饮 娩 新母猪在其第一窝仔猪断奶后或再配种后移至经产 水 7 d 21 d 和 2 d 时记录猪的体重和饲料消耗量 并根 舍 其 主 要 目 的 是 为 了 提 高 仔 猪 的 生 产 性 能 和 健 康 水 据体重和饲料消耗量计算平均日增重 ADG 平均日采食 平 并在生产实际在中收到了良好的效果 虽然以前对 量 ADFI 和 ADG ADFI G F 来源于不同胎次母猪的断奶仔猪生长性能和健康状态 1.2 统计分析 的 研 究 与 评 估 不 多 但 是 有 一 些 观 察 表 明 来 源 于 将每个猪栏作为一个试验单位 使用完全随机设计模型 第 1 胎 次 P1 母 猪 的 后 代 生 长 性 能 和 健 康 状 态 低 于 进行统计学分析 用日粮处理和胎次作为模型的主要影响 来 源 于 第 2 胎 次 P2 母 猪 的 后 代 在 29 年 内 布 拉 用猪栏作为随机影响 用 SAS 的 MIXED 方法分析生长数据 斯 加 养 猪 报 告 29 Nebraska Swine Report 中 在统计学分析中 用 d 时猪的 BW 作为变量 Erin E. Carney 及 其 同 事 发 表 的 一 篇 研 究 报 告 表 明 1.3 研究结果和讨论 母猪胎次可以影响断奶仔猪的生长性能 体重和生长性能如表 2 所示 虽然在本试验期间对于 因为生长性能降低和有较高的死亡率 来源于第 1 胎次 BW 没有日粮处理 胎次互作 但是 当将日粮处理中的平 P1 的后代常常与成年母猪 P2 的后代隔离 在一些商 均值进行平均时 在 d 7 d 21 d 和 2 d P 后代的体重 品养猪场实行按胎次隔离饲养的做法 虽然母猪胎次对后代 高于 P1 的后代 P <.2 当将胎次中的平均值进行平均时 生长性能的影响还不完全清楚 但是 人们普遍接受的是 表 和 3 阶段日粮的组成 按照饲喂计算 % 与成年母猪的后代比较 P1 的后代生长性能降低 这可能 是由于 P1 的后代健康状态下降 导致其平均日增重 ADG 降低和死亡率上升 未发表的数据表明 与 P2 的后代比较 P1 的后代断 奶重低 保育和肥育 ADG 低 死亡率高 本研究的目的 是评估在仔猪保育阶段母猪胎次对 P1 和 P 后代生产性 成分 玉米 对照 抗生素 1 阶段 2 阶段 3 阶段 1 阶段 2 阶段 3 阶段 豆柏 7.5%CP 乳清 干燥 鱼粉 动物血浆 玉米油 确反映从产仔舍取出猪的体重 BW 平均胎次 P1 或 P 磷酸氢钙 内的 BW 根据每个胎次的平均 BW 选择仔猪 P1 和 P 猪 石灰石 盐 猪维生素预混料 猪 TM 预混料 AB 的 CTL 日粮 这产生了 种供保育期研究的日粮处理 L- 赖氨酸 HCL 其组成为 1 P1 CTL 2 P1 AB 3 P CTL 和 D- 蛋氨酸 P AB 表 1 所有日粮都以粉料的形式饲喂 配制可以 Mecadox2.5 g/ 磅 能的影响 1 材料与方法 1.1 实验设计 在 2 d 的研究中共使用了 96 头仔猪 为了获得可以准 的初始 BW 平均分别为 12.56±.1 和 13.98±.1 磅 在每个猪栏中饲养 6 头猪 每种处理设 个重复 将 每种胎次的猪分配到两种日粮处理 一种处理为对照日粮 CTL 另一种处理为添加抗生素 Mecadox 5 磅 / 吨 满足或超过 NRC 对生长营养需要的建议量 饲喂分 3 个阶 23

28 表 2 母猪胎次和日粮处理对断奶仔猪平均体重 BW 平均日增重 ADG 平均日采食量 ADFI 和饲料转化率 G F 的影响 日 粮 处 理 SEM 胎次 1 1 日粮 CTL AB CTL AB 猪数 / 头 d d d d 55.6 ADG / 磅 P- 值 1a 2b 3c ADFI / 磅 G F 磅 磅 ADG / 磅 ADFI / 磅 G F 磅 磅 ADG / 磅 ADFI / 磅 G F 磅 磅 ADG / 磅 ADFI / 磅 G F 磅 磅 BW / 磅 1 阶段 -7 d 2 阶段 8-21 d 3 阶段 (22-2 d) 全阶段 (-2 d) 在 d 7 d 21 d 和 2 d 日粮处理 CTL 或 AB 对体重 后代 在第三阶段 P 后代的 ADFI 高于 P1 的后代 P <.2 有没有影响 但是 2 d 时 饲喂 CTL 日粮猪的体重倾向 并且饲喂 CTL 日粮的猪比饲喂 AB 日粮的猪有更高的 G F 于比饲喂 AB 日粮的猪高 P =.5 对 于 生 长 性 能 在 整 个 研 究 期 间 没 有 发 现 ADG ADFI 或 G F 有显著的胎次 日粮处理互作 在第一阶段 P <.5 和倾向于有更高的 ADG P =.8 2 研究结论 母猪胎次可以影响整个保育期间断奶仔猪的生长性能 虽然胎次或日粮处理对 ADG 或 ADFI 没有显著的影响 但是 提高断奶仔猪的生长性能 但是 本研究没有发现对健康状 与 P 的后代比较 P1 后代的 G F 倾向于 P =.8 增 态的影响 还需要进一步研究以确定母猪胎次对保育期仔猪 加 在第二阶段 虽然胎次或日粮处理对 ADG 或 G F 没 健康的影响以及对整个生长和肥育期猪健康的影响 有主要影响 但是 P 后代的 ADFI 高于 P <.5 P1 的 2

29 不同杂交组合猪肥育性能与肉品质的研究 郭志明 甘肃畜牧工程职业技术学院 甘肃 武威 7336 摘 要 本试验选用二元大长 Y L 三元杜长大(D LY) 杜大长(D YL) 三元皮大长(P YL)四个杂交组合 作为试验动物 进行生长发育性能 胴体品质性状测定 旨在为优质肉高效配套杂交组合筛选提供理论依据 研究表明 D LY D YL日增重 料重肉比及屠宰率最优 日增重 屠宰率与L Y差异显著(P.5) D YL屠宰 率 眼肌面积分别为 cm2 为四组合中最高 并与Y L差异显著(P.5) 与D LY P YL组差异 不显著 (P.5) 关键词 杂交组合 生长发育性能 肉品质 为充分利用现有优良猪种资源 推进武威市及周边地区 表 1 试验猪日粮配方及营养水平 肉猪业的发展 增强养猪业市场核心竞争力 本试验选择瘦 肉型商品猪生产中常用配套杂交组合二元大 长 Y L 三元杜 长大 D LY 杜 大长 D YL 皮大 长 P YL 分析和研究杂交效果 就上述 种杂交组合生 长发育性能 胴体品质性状进行分析与评价 旨在推进当地 优质猪肉生产筛选高效配套杂交组合体系 1 试验材料与方法 原 料 组 成 1.1 试验地点及时间 本试验所选的四个杂交组合试验猪均来自学院畜禽养 殖中心猪场 试验从 27 年 1 月 -29 年 6 月 1.2 试验猪只的选取 试验猪只为四个杂交组合模式 二元大长 (Y L) 三 元杜长大 D LY 三元杜大长 D YL 三元皮大长 P YL 共计有 1 头猪 试验的预试期 1 d 正式期 9 d 各组试验猪都来自分娩日龄相近的同一批母猪所产仔 营 养 水 平 猪 每组 25 头 试验猪选取的依据 精神状态良好 体重 相近 25±1.5 kg 健康无病 其体重差异不显著 P > 日粮配方及营养水平 试验猪日粮配方根据美国 NRC 生长肥育猪标准 结合 玉米 / 麸皮 / 11 1 豆粕 / 菜粕 / 3 3 预混料 / 食盐 /.3.3 石粉 /.7.7 磷酸氢钙 / 消化能 /MJ 粗蛋白质 /MJ Ca/ P/.5.5 Ca P/ 应数据 1..2 称重测定 我国肉猪饲养标准以及我国饲料成分及营养价值表配制 试 试验猪在开始育肥 转阶段时期结束时各进行称重 选 验采用同一阶段同一营养水平饲料 整个肥育期划分为前后 择在早晨饲喂前空腹进行 并对照称重记录进行复查 遇 两阶段 前期 25 6 kg 后期 6 9 kg 不同阶段日 有疑问时重新称重 确定无误之后再饲喂 粮组成及营养成分见表 测定指标与方法 生长育肥性状指标 1. 试验方法 1..1 饲养管理 选择同一栋猪舍进行试验 预试期阶段对猪只统一编 号 驱虫 免疫 肥育期间 试验猪自由采食和饮水 记录 各组每天的耗料量 日清扫 冲洗圈栏 2 次 观察并记录相 试验前期 后期 整个育肥期平均日增重 饲料总耗量 料重比 胴体品质性状指标 宰前活重 屠宰率 背膘厚 眼肌面积 瘦肉率等各项 25

30 表 2 不同杂交组合猪生长育肥性能比较 组 合 试验头数 / 头 天数 /d 平均始重 / 平均末重 / 日增重 /g 料重比 / 大 长 ± ±2.3 68± 皮 大长 ± ± ± 杜 长大 ± ±2. 786± 杜 大长 ± ± ± 表 3 不同杂交组合胴体性状比较 猪 别 测定头数 / 头 宰前体重 /kg 屠宰率 / 背膘厚 /cm 眼肌面积 /cm2 瘦肉率 / 大长 ± ± ± ± ±3.32 皮大长 3 9.6± ± ± ± ±.2 杜长大 ± ± ± ± ±3.5 杜大长 ± ± ± ± ±3.62 表 肉质性状指标测定 组别 测定头数 / 头 肉色评分 大理石纹评分 PH 背最长肌 失水率 / 大长 ± ±.8 6.2± ±1.5 皮大长 ± ± ± ±1.3 杜长大 3 2.9± ± ± ±1.83 杜大长 3 3.± ± ± ±2.7 异明显 P.5 指标 肉质性状指标 2.3 肉质性状测定 屠宰后 取倒数第 2 3 肋骨处背最长肌 测定肉色 由表 可见 个杂交组合的肉质均处在正常范围 表 大理石纹 ph 值 失水率等常规指标 明 个组合的肉质优良 无 PSE DFD 肉 肉色评分 大 1.6 统计分析 理石纹和失水率表现为稍有差异 但均不显著 (P.5) 本试验用 Excel 23 对实验数据进行整理 统计分析 2 结果与分析 2.1 生长育肥性能 由 表 2 可 见 个 杂 交 组 合 中 日 增 重 料 重 比 达 3 讨论与分析 通过本次试验可以看出 D LY 和 D YL 商品猪优良 的性状主要表现在体型外貌 日增重 料重比 背膘厚 眼 肌面积 D LY D YL 三元杂交组合模式是养猪业中普 9 kg 体重均以杜长大 杜大长最好 二者与皮大长差异 遍应用的杂交模式 有研究结果表明 在日增重 料重比 显著 P.5 与大长差异极显著 P.1 杜长 眼肌面积 瘦肉率等主要性状的杂种优势率上 表现出三品 大组日增重比杜大长组高 11 g 料重比降低. 两组育 种杂种 两品种杂种的规律 这与本试验的结果相一致 如 肥效果差异不显著 P >.5 表明杜洛克猪作为终端父 D LY 组的日增重比 L Y 组的高出了 95 g 组间差异显 本最理想 而皮特兰猪做终端父本生长速度较杜洛克猪慢 著 P.5 料重比从表型值观察 D LY 组比 L Y 2.2 胴体性状 组的降低了.39 因此 可以看出 D LY 和 D YL 杂交 育 肥 猪 试 验 结 束 后 每 组 随 机 选 择 3 头 猪 进 行 屠 宰 组合猪在一定程度上继承了杜洛克猪的肉品质稳定遗传的 测定 结果见表 3 由表 3 可以看出 杜长大组屠宰率为 特性 L Y 杂交组合在日增重 料重比及胴体品质性状等 75.6 背膘厚 2.1 cm 瘦肉率 6.37 杜大长组分别 许多指标上与三元杂交组合均存在较大的差距 因此 有条 为 cm 和 6.1 两组比较 胴体性状差异 件种猪场应加强长白 大白猪的选育 以提高畜群整齐度 不明显 P.5 二者与皮大长各指标差异也不明显 配套杂交生产大长母猪作为母本 而不适宜将其直接作为商 只是皮大长的眼肌面积略高一点 与大长相比 胴体形状差 品猪肥育出售 26

31 配种前后营养水平对母猪繁殖性能的影响 张 亮 张利娟 重庆市畜牧科学院 重庆 荣昌 26 摘 要 讨论配种前营养水平对后备母猪 哺乳母猪以及配种后营养水平对母猪的繁殖性能的影响 配种前优 饲 配种后劣饲被认为是提高母猪繁殖力较科学的策略 关键词 营养水平 母猪 繁殖性能 母猪的饲养是现代集约化养猪生产中的重要组成部 在 第 19 d 将 母 猪 进 行 屠 宰 发 现 高 营 养 水 平 组 卵 巢 上 分 随 着 规 模 养 猪 的 进 一 步 发 展, 饲 料 价 格 也断上涨, 直 径 大 于 mm 的 卵 泡 数 量 高 低 水 平 分 别 为 17.8 饲养成本的增加直接影响养猪生产的经济效益 在母猪 和 1.8) 极显著的高于低营养水平组 从卵泡中取出卵 饲养的不同阶段对营养水平进行调整 不仅可以维持母 母 细 胞 和 卵 泡 液 在 体 外 培 养 6 h 后 发 现 到 高 营 养 水 猪的繁殖性能 而且提高饲料的利用率 卵巢是母猪生 平 组 达 到 第 2 次 减 数 分 裂 中 期 (metaphase II) 的 卵 母 殖过程中发挥重要的作用 卵泡和黄体是发情周期中卵 细胞比例显著高于低水平组 并且卵泡液中雌激素浓度 巢的功能单位 卵泡发育所分泌的雌激素不仅刺激母猪 血 液 中 IGF-I 和 LH 浓 度 显 著 高 于 低 水 平 组 该 结 果 产 生 发 情 表 现 而 且 为 卵 母 细 胞 的 成 熟 创 造 有 利 条 件 再 一 次 说 明 营 养 因 素 是 通 过 雌 激 素 LH FSH 以 及 提供优质的卵母细胞 卵泡排卵后在卵巢上形成的黄体 IGF-I 来发挥其作用的 分泌性腺激素参与调控母猪的妊娠和分娩 在断奶后又 1.2 营养水平对排卵率的影响 开始新一轮的卵泡发育 在整个发情 妊娠以及哺乳过 排卵率是母猪繁殖性能的重要指标 它决定母猪的 程当中母猪对于营养的需求各不相同 所以在繁殖周期 最大产子数 提高排卵率将增大获得较多产子数的可能 的不同阶段对母猪的营养水平以适当的调整有助于提高 卵母细胞排出卵母细胞的多少直接取决于其卵巢上成熟 母猪的繁殖性能 卵泡的个数 并且与 LH 峰的强弱也有密切关系 提高 1 母猪营养水平能够增强 LH 的分泌 不仅促进卵泡发育 配种前营养水平对后备母猪繁殖性能的影响 1.1 营养水平对卵泡发育的影响 卵巢上卵泡发育状况决定了母猪的排卵率和胚胎的 也 能 提 高 排 卵 率 据 Almeida 的 21 报 道 将 后 备母猪分为前期限饲组 发情周期的第 1 周限饲 和后 存活率 这主要表现在 2 个方面 一是卵泡大小和数量 期饲喂组 发情周期的第 2 周限饲 排卵后 2 h 屠宰 直接影响卵母细胞质量和排卵的数量 二是排卵后黄体 发现后期限饲组排卵率显著高于前期限饲组 所以 限 功能如分泌孕酮的能力对胚胎在子宫存活的影响 饲不但降低排卵率 而且前期限饲对排卵率的不利影响 目前大部分的研究都认为黄体期较高营养水平对母 猪卵泡的大小以及卵母细胞的成熟率有积极的影响 众 所 周 知 卵 泡 的 生 长 卵 母 细 胞 的 发 育 及 成 熟 与 FSH 要大于后期限饲 1.3 营养水平对胚胎存活率的影响 在取得较大排卵率后 受精胚胎能在妊娠早期成功 LH 的 释 放 有 着 密 切 联 系 目 前 多 数 研 究 认 为 必 须 有 完 成 附 植 胚 胎 存 活 率 增 加 能 够 进 一 步 提 高 产 子 数 FSH 的 存 在 卵 泡 才 能 在 2 3 mm 阶 段 继 续 发 育 营养因素提高胚胎的存活率可能是因为排卵卵泡的数量 而在卵泡发育超过 mm 以后 必须在 LH 的作用下才 的 增 加 从 而 产 生 更 多 的 黄 体 使 得 孕 酮 的 浓 度 升 高 能 发 育 至 排 卵 也 有 研 究 表 明 在 发 情 周 期 中 饲 喂 较 高 为胚胎提供良好的生存环境 Ashworth 等将初 产母猪 营 养 水 平 的 饲 粮 的 母 猪 LH 的 分 泌 频 率 以 及 FSH 在 配种前 1 个情期分别饲喂高营养水平 3.5 kg/d 和低 血 液 中 的 平 均 浓 度 均 较 低 营 养 水 平 组 高 这 也 很 好 的 营养水平 1.15 kg/d 于妊娠 12 d 屠宰 结果表明 证明了高营养水平对母猪卵母细胞发育具有积极影响的 配种前高水平组有较多的黄体数 孕酮水平差异极显著 观 点 在 Ferguson 等 (23) 的 研 究 中 他 们 将 后 备 而且胚胎具有更多的细胞数量 另外 在 Almeida 的研 母 猪 每 天 饲 喂 2.3 kg 饲 粮 直 到 第 3 个 情 期 然 后 从 第 究中也得出了在黄体后期限饲的母猪胚胎存活率低于前 1 d( 发 情 为 ) 到 第 18 d 分 别 饲 喂 1.35 kg 和 3.5 kg 期限饲的母猪 并且孕酮水平出现相同的变化趋势 也 27

32 进一步证明了胚胎存活率与妊娠早期孕酮的浓度有着密 限 饲 对 母 猪 卵 泡 发 育 的 影 响 较 大 目 前 被 认 为 是 营 养 切关系 代谢与繁殖性能信号分子的胰岛素对卵母细胞的发育 1. 营养水平对母猪乳腺发育的影响 并没有影响 在哺乳期间母乳是新生仔猪唯一的营养来源 在提 2.3 营养水平对胚胎存活的影响 高产仔数的同时, 通过改善配种前营养水平对于母猪乳 断 奶 母 猪 胚 胎 存 活 率 是 生 产 中 一 个 较 重 要 的 指 标 腺的发育能起到良好的促进作用, 母猪较高产奶量才能 它直接影响母猪的活产子数 但目前的研究通常认为哺 提 高 断 奶 仔 猪 存 活 率 Farmer 等 (2) 报 道, 后 备 乳期营养水平对胚胎的存活有没有太大影响 但对卵母 母 猪 在 9 日 龄 之 前 (56 kg) 饲 喂 相 同 的 饲 粮, 然 后 分 细 胞 的 受 精 有 较 大 影 响 在 Zak 等 的 研 究 中 头 胎 母 为 四 组 T1 高 蛋 白 水 平 HP = 13.8 MJ of ME, 1. 猪 在 28 d 哺 乳 期 分 成 自 由 采 食 组 前 期 限 饲 组 前 3 % total lysine, 18.7% CP + 自由采食,T2: 高蛋白 周限饲 后期限饲组 最后 1 周限饲 断奶配种后自 水 平 + 低 蛋 白 水 平 15 屠 宰 T3 低 蛋 白 水 平 组 由 采 食 哺 乳 期 饲 粮 结 果 显 示 妊 娠 28 d 后 期 限 饲 组 HP = 13.8 MJ of ME,.7% total lysine, 1.% C 胚胎成活率显著低于其他组 说明在断奶最后 1 周的营 P + 自 由 采 食 T 高 蛋 白 水 平 组 +8 % 自 由 采 食 养水平对胚胎存活率有较大的影响 另外 Vinsky 等报 在第 1 次或第 2 次发情后 8 d 屠宰,T 乳腺实质组织量 道营养水平对胚胎存活的作用具有性别差异 他们将哺 极 显 著 低 于 其 他 组 (P<.1) 外 周 乳 腺 组 织 质 量 有 降 乳期母猪分为自由采食和后期限饲 哺乳期的最后 1 周 低趋势 结果表明营养限饲不利于乳腺发育 而蛋白水 限 饲 组 所 有 母 猪 在 发 情 配 种 后 3 d 屠 宰 检 测 胚 平对乳腺发育的影响并不大 胎存活率以及对胚胎进行性别鉴定 结果显示限饲组的 2 胚胎存活率显著低于自由采食组 并且减少雌性胚胎的 哺乳期营养水平对哺乳母猪繁殖性能的影响 2.1 营养水平对断奶 发情间隔的影响 缩短断奶 - 发情间隔 一方面将提高母猪的利用效 存活率 3 率 另一方面减少饲养成本 1987 年 Kirkwood 就报道 配种后营养水平对胚胎存活率的影响 目前多数研究者认为配种后即妊娠早期营养水平 在哺乳期对母猪进行限饲 会延长发情间隔 多数研究 对 胚 胎 的 存 活 率 有 影 响 但 这 种 效 应 受 其 他 因 素 的 影 表明 在哺乳期对母猪进行限饲会延长断奶 - 发情间隔 响 较 大 最 近 国 内 的 研 究 也 证 实 了 前 面 的 观 点 郭 海 后 来 的 研 究 表 明 断 奶 - 发 情 间 隔 与 LH 脉 冲 高 度 相 关 燕 将 63 头 母 猪 分 成 2 倍 高 1.2 倍 中.6 倍 Van den Brand 等对 8 头母猪饲喂不同营养水平饲粮 低 维 持 能 量 水 平 三 个 营 养 水 平 组 分 别 在 母 猪 妊 娠 在 下 1 个 发 情 周 期 来 临 前 饲 喂 相 同 的 营 养 水 平 的 饲 料 第 12 d 25 d 和 35 d 取血后屠宰母猪测定胚胎存活率 在 哺 乳 期 的 d 取 血 样 测 定 其 LH 的 脉 冲 频 结 果 显 示 胚 胎 存 活 率 在 妊 娠 第 12 d 25 d 和 35 d 中 率 葡萄糖 胰岛素的浓度 结果显示在高营养水平组 营 养 水 平 组 均 显 著 高 于 高 营 养 水 平 组 而 妊 娠 第 25 d 的母猪断奶后 1 d 内发情的头数 LH 脉冲频率以及胰 和 35 d 的 胚 胎 存 活 率 显 著 高 于 低 水 平 组 所 以 母 猪 岛素浓度均显著高于低营养水平组 所以 Prunier 认为 发情配种后适当降低能量水平对胚胎存活有利 但严重 胰岛素是介导营养因素与繁殖性能的信号分子 研究表 限饲同样会降低早期胚胎的存活率 明 胰岛素与卵丘细胞上 LH 受体的形成以及有腔卵泡 分泌雌激素有密切关系 并且能够使得 1 d 内发情的母 小结 总的说来 母猪配种前的营养水平对母猪繁殖性能 猪增多 的影响较配种后 妊娠初期 影响大 配种前营养水平 2.2 营养水平对卵泡发育的影响 主要是对卵泡的发育产生影响 而配种后营养水平则主 哺乳期限饲延缓卵泡发育并降低卵母细胞质量 此 要是影响胚胎的附植以及胎盘的形成过程 目前的研究 外有研究表明营养水平对卵母细胞的成熟率也有较大影 支持这样的观点 在提高配种前 1 个情期最后 1 周或哺 响 Zak 等将处于哺乳期内 28 d 的母猪分成前期限 乳期最后 1 周的营养水平 将促进卵泡的快速发育 获 饲 第 1 周 限 饲 和 后 期 限 饲 最 后 1 周 限 饲 2 组 得较高的产子率 在配种后的 1 2 周内适当的降低营 在 发 情 前 38 h 屠 宰 取 出 卵 巢 观 察 卵 泡 大 小 后 将 卵 母 养水平则有助于胚胎的附植 而在 2 周后提高营养水平 细胞体外进行 成 熟 培 养 结 果 显 示 前 期 限 饲 的 母 猪 有利于胎盘的形成 卵 巢 上 有 直 径 大 于 m m 的 卵 泡 数 量 较 多 且 卵 母 细 胞 的 体 外 胚 胎 成 熟 率 也 较 高 进 一 步 说 明 在 哺 乳 后 期 28

33 美国巴杜杂交模式对中国现代商品瘦肉猪 生产的参考价值初试 张伟力1 张似青2 张磊彪3 1.安徽农业大学 安徽 合肥 上海农林职业学院 上海 3.上海万谷种猪育种有限公司 上海 新世纪国际养猪生产的战略方向已从纯粹瘦肉产业 松江 松江 和杜洛克猪 旋即回国 试验饲养于万谷种猪育种公司 型开始向瘦肉精品质量型过渡 以美国为例 从传统的 于 28 年末用巴克夏公猪配杜洛克母猪 29 年 3 月 杜长大 杜大长 或以杜长大为基础的配套系杂交转向 产幼仔 于 29 年 12 月 1 日进行屠宰试验 将其初步 特色猪专业化的培育 其中 以巴克夏猪为父本 杜洛 结果奉与同仁明鉴 克 猪 为 母 本 的 的 杂 交 是 向 肉 质 精 品 化 发 展 的 一 个 典 型 1 美 国 是 杜 洛 克 的 超 级 大 国 鼎 盛 时 期 计 有 32 万 头 纯 种 材料与方法 中等性能的巴杜一代 图 1 头 2 阉 2 母 初生 杜洛克猪登记在册 其中生产的种公猪遍及全世界的高 重 1.75±.19 kg 28 日龄断奶重 7.7±.7 kg 级终端父本 而几十万 上百万的母猪则充作育肥商品 7 日 龄 下 床 重 26.9±2.3 kg 生 长 肥 育 期 日 增 重 猪 已被熟视无睹百年有余 而今世界市场呼唤优质肉 73±36 g 成肥活重 13±7 kg 如饥似渴 美国杜洛克母猪重新被利用成母本 用于和 巴克夏公猪杂交 生产巴杜杂一代商品猪 既开发利用 了杜洛克母猪又生产了具有优质肉的巴杜一代 创新于 美洲市场 中国近年来连续引进杜洛克猪 群体规模成 几何级数攀升 而今也成为杜洛克超级大国 目前中国 的数十万杜洛克母猪已充作商品育肥猪直接上市 其价 位等同于杜长大甚至低于杜长大 实在可惜 美国的巴 杜模式能否借鉴于中国 中国如效法美国 把原本充作 商品的杜洛克母猪利用为种猪来开发巴杜一代优质肉是 否 具 有 现 实 可 能 性 为 此 笔 者 于 28 年 去 美 国 专 程 考 察 巴 杜 的 杂 交 育 种 进 程 并 带 回 28 版 美 系 巴 克 夏 猪 图1 巴杜一代 表 1 巴杜胴体性状测定结果 平均数 ± 标准差 头数 花油重 /% 空腹活重 /kg 胴体长 /cm 屠宰率 /% 头重 /% 蹄重 /% 心重 /% 肝重 /% 脾重 /% 肺重 /% 肾重 /% 胃重 /% 小肠 /% 126.± ± ±.5 6.8±.9 1.7±.16.38± ±.12.16±.1.95±.3 31±..72±.5 1.8±.2 板油重 /% 胴体瘦肉率 胴体骨重率 胴体皮重 胴体脂肪率 最后肋膘厚 最大膘厚 背部皮厚 腹部皮厚 眼肌面积 /% /% /% /% /mm /mm /mm /mm /cm2.7± ± ± ± ± ± ± ±.2 2.3±.3 大肠 /% 大肠净重 /kg 1.6± ± ±.7 2.8±.78 表 2 巴杜肉质性状测定结果 平均数 ± 标准差 肉色评分 Kauffman 系水 8 h 贮存损失率 力 /% /% L* a* b* 饱和度 肌纤维直径 /μ 1.75± ± ± ± ± ± ± ±7.1 肌内脂肪 /% 蛋白质 /% 灰分 /% 磷 /% 钙 /% 还原糖 /% 大理石纹 主观评定 2.6± ±.31.96±.3.17±.1.17± ±. 1.62±.19 爆炒鲜嫩感明显 29

34 2 宰前肥育期饲粮配方营养浓度 DE= MJ/kg CP=13.9% 单 列 式 通 栏 舍 饲 自 由 采 食 宰 前 停 料 16 h 手 工 屠 宰 宰 前 空 腹 体重 126±6.8 kg 3 巴杜外貌描述 巴杜杂交猪头中等大 耳型前倾略上举 介于巴克夏 图5 小排切块断面 图7 股四头肌切块 图6 五花肉切块 和杜洛克之间 额宽适度 面微凹 腮中等大 无明显赘 肉 颈中等长 粗壮有力 背腰修长紧凑 后躯丰满而不 夸张 瘦肉型外貌体征明显 四肢结实有力 较粗壮 胴体测定 图2 从 表 1 可 以 看 出 巴 杜 的 屠 宰 率 颇 高 达 76.7% 胴 体 瘦 肉 率 亦 高 达 6.71% 而 花 油 板 油 比 例 甚 图8 股二头肌切块 低 体 现 了 典 型 的 瘦 肉 商 品 猪 特 点 其 最 后 肋 膘 厚 达 带 米 黄 色 如 杜 洛 克 猪 特 征 眼 肌 硕 大 可 达 5 cm2 级 19.5 mm 并有较发达的眼肌 体现了烧烤用肉猪的背 别 厚大型眼肌丰满适度 切面为纯瘦肉纤维 色如桃 脂 和 大 排 切 块 特 点 其 胃 重 和 大 肠 重 百 分 比 极 为 低 下 花 理石纹和雪花极其微量 彩虹轻度 弹性适度 可 测定数据提示用作爆肚和肥肠制品的产出率有限 用于西餐嫩煎 不适于长时间炖 烤 切面保水力略弱 小排切块 图 5 肉质测定 骨重中等 色红 肋间肌肉雪花丰富 大理石纹明显 表 2 肉质测定结果提示巴杜肉色稍微偏浅 其白度 红度 黄度 饱和度皆处于鲜肉正常范围 其系水力指 切面干爽 具有巴克夏特点 为上等佐餐佳肴之原料 标 提 示 系 水 力 中 等 偏 下 但 无 PSE 迹 象 其 肌 纤 维 直 6. 五花肉切块 图 6 该切块三红三白对仗明显 而且是红多白少 肌层 径 尚 细 巧 提 示 嫩 度 优 良 本 数 据 中 肌 内 脂 肪 2.6% 提示该肉质特点适合西餐烧烤和嫩煎 丰富 皮亦细薄 对于喜食瘦肉型红烧肉者 此切块正 6 中下怀 切块点评 6.5 股四头肌切块 图 前肩切块 图 3 色泽玫瑰红 水晶感不明显 无彩虹 弹性良 纹 肉呈中等玫瑰红 色鲜艳 有弹性 未见明显大理 石纹和雪花 纹理结构清晰 组织较为细致 可用为美 理细致 表面尚干爽 无大理石纹 式 BBQ 上 等 原 料 在 28 油 温 8 s 爆 炒 的 中 式 烹 6.6 股二头肌切块 图 8 色 泽 淡 微 弱 彩 虹 干 爽 度 不 足 纹 理 不 够 细 致 饪条件下 主观品尝口感细嫩爽滑 6.2 大排 T 骨切块 图 类似杜洛克 此切块可充作包子 饺子馅和熏肉制品 以上切块质地良好 无腥味 异味 无表面黏液 皮 厚 适 度 膘 厚 2 mm 左 右 膘 白 膘 皮 界 面 略 7 小结 本 试 验 1 3 k g 级 烧 烤 型 胴 体 测 定 提 示 巴 杜 杂 一 代 猪基本具有普通杜长大的生长育肥速度和胴体瘦肉生 产 性 能 肉 质 方 面 巴 杜 一 代 略 优 于 一 般 杜 长 大 从 本 试 验 数 据 分 析 巴 杜 杂 交 后 肉 质 优 势 不 明 显 肉 质 参 图 3 前肩肉切块 数 基 本 体 现 杜 洛 克 猪 的 特 点 适 合 西 餐 烧 烤 和 嫩 煎 未 能 与 杜 长 大 形 成 明 显 差 异 是 否 符 合 中 国 市 场 行 情 有 待 于 进 一 步 的 可 行 性 研 究 从 另 一 个 侧 面 发 现 巴 杜 一代公猪的砖型肉用体型可能成为一个值得试验的课 题 从本试验中超高的屠宰率已暗示出这种组合的魅 力 作 为 巴 杜 组 和 1 1 k g 级 标 准 重 的 胴 体 肉 质 测 定 有待于大样本后续试验 图2 3 巴杜一代肥猪胴体 图 大排切块

35 OPN和BMP15基因与大长杂交一代母猪 产仔数的关系 孙敬礼1 武 磊2 黄 涛1,李大全1 刘贤侠1 1.石河子大学动物科技学院 新疆 石河子 2.新疆克拉玛依瑞恒畜牧开发有限责任公司 新疆 8323 克拉玛依 83 摘 要 用PCR和PCR-RFLP方法对119头大长杂交一代母猪的OPN和BMP15基因进行分型 分析了OPN BMP15不同 基因型母猪的产仔数差异 结果表明 在所检测的大长杂交一代猪群体中 OPN和BMP15基因对大长杂交一代 母猪产仔数均有显著影响 P<.5 OPN基因对母猪产仔数呈现出BB AB AA的趋势 BMP15基因中A等位基 因为增加产仔数的基因 并呈现出AA AB BB的趋势 关键词 大长杂交一代母猪 OPN BMP15 产仔数 母 猪 的 产 仔 数 是 一 个 重 要 的 经 济 性 状 产 仔 数 的 高 低 直 接 影 响 到 猪 场 的 经 济 效 益 因 此 有 效 地 提 高 猪 的 产 仔 数 特 别 是 提 高 猪 的 产 活 仔 数 一 直 是 科 学 于 -2 冰箱中保存备用 1.3 引物设计 本 研 究 所 用 引 物 分 别 参 照 Knoll 等 [3] 候 振 平 等 [] 研 究 和 养 猪 生 产 的 主 要 任 务 之 一 近 年 来 随 着 分 子 所 发 表 的 引 物 序 列 由 上 海 生 工 生 物 技 术 公 司 合 成 引 物 生 物 学 技 术 和 现 代 繁 育 理 论 的 不 断 发 展 从 基 因 水 平 OPN-F 5 -TCACCGATTTCCCCACCGACAC-3 对 猪 高 繁 殖 力 机 制 进 行 探 讨 已 成 为 一 研 究 主 题 骨 桥 OPN-R 5 -TGGCTGCGGGTTTCCACACTG-3 蛋 白 osteopontin OPN 是 一 种 含 精 氨 酸 - 甘 氨 BMP15-F 5 -GATGCGTCTGCCACCTACAT -3 酸 - 天冬氨酸的分泌型糖基化磷蛋白, 广泛存在于乳 BMP15-R 5 - CCGGAACTCAAGAATCTCAC -3 汁 子 宫 胎 盘 等 组 织 和 体 液 中, 具 有 多 种 生 物 学 活 1. PCR 扩增 性 鉴 于 其 在 动 物 繁 殖 中 的 重 要 功 能 近 年 来 它 成 为在猪繁殖性状的重要候选基因之一 [1] 骨形成蛋白 15 bone morphogenetic protein-15 BMP15 是 由 卵 母细胞分泌的一种生长因子 对早期卵泡的生长 分化 和 排 卵 起 重 要 作 用 许 多 研 究 表 明 BMP15 可 能 具 有 促 进卵泡发育 防止黄体早熟的生物学功能 [2] 目前 许 多学者都将其作为控制产仔数的候选基因加以研究 本 文 主 要 分 析 大 长 杂 交 一 代 母 猪 OPN 和 BMP15 不 同 基 OPN FSHβ 和 ESR 基 因 采 用 相 同 的 反 应 体 系 1 Buffer 2.5 μl dntp2μl, 上 下 游 引 物 各.5 μl 1μmol/L 5 ng/μl 模 板 DNA 1μL Taq 酶 1U Mgcl2 2 μl 加双蒸水至 25 μl OPN 基 因 的 PCR 扩 增 反 应 条 件 9 变 性 min 35 次 循 环 9 s 6 1 min min,72 延伸 1 min BMP15 基 因 的 PCR 扩 增 反 应 条 件 :9 变 性 因型以及合并基因型对经产母猪的产仔数差异 为利用 min, 35 次循环 9 3 s 58 3 s 72 DNA 标记辅助选择方法提高母猪综合繁殖性能提供理论 3s,72 延伸 1 min 依据 1.5 多态性检测 1 材料和方法 1.1 试验动物 产仔 2 胎以上且记录完备的大长杂交一代母猪样本 OPN 基 因 由 片 段 插 入 造 成 琼 脂 糖 电 泳 检 测 PCR 产 物 即 可 见 多 态 性 PCR 产 物 经 1.5% 的 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 检 测 在 凝 胶 上 显 示 为 3 种 带 型 1295 bp 119 头, 采自瑞恒公司猪场 前腔静脉采血 EDTA 抗凝 1295/99 bp 和 99 bp 分 别 为 AA AB 和 BB 型 1.2 DNA 提取 BMP15 基因采用 PCR-RFLP 进行分析 8.5μL PCR 产 采 用 苯 酚 - 氯 仿 - 异 戊 醇 抽 提 方 法 提 取 DNA 置 物 加 入.5 μl Spe Ⅰ 及 1.5 μl 1 Buffer 37 水 31

36 表 1 OPN 和 BMP15 基因的基因型分布和频率 浴 h 酶 切 产 物 用 2% 的 琼 脂 糖 电 泳 检 测 分 型 显 示 1 条 带 53 bp 的 为 AA 型 显 示 2 条 带 277 bp 226 bp 的 为 BB 基 因 型 显 示 3 条 带 53 bp 277 bp 226 bp 为 AB 基因型 1.6 数据处理 整 理 基 因 型 数 据 计 算 所 测 猪 群 体 OPN 和 基因型分布 基因 AB BB OPN BMP BB A B 基因型 产仔数 产活仔数 AA ± a±2.9 AB 1.688Ab± ab±2.39 BB b± b±2.56 结果与分析 2.1 基因型频率和基因频率 根 据 OPN BMP15 基 因 型 检 出 个 数 计 算 基 因 型 频 率 和 基 因 频 率 见 表 1 OPN 基 因 AA 型 频 率 最 大 AB 表 2 OPN 基因与产仔数的关系 据用平均数 ± 标准差表示 2 AA 基因频率 AA BMP15 基 因 不 同 基 因 型 的 基 因 型 频 率 基 因 频 率 用 SPSS13. 分 析 产 仔 数 在 各 基 因 型 间 的 差 异 显 著 性 数 基因型频率 A 注 : 同列肩标字母相同者表示差异不显著 P >.5 不同 者表示差异显著 P <.5 下同 BB 型频率最小 AB 在两者之间 且 A 等位基因占优势 表 3 BMP15 基因与产仔数的关系 分别为.673 和.327 BMP15 基因 BB 型较少 AA 基因型 产仔数 产活仔数 AA 11.1a± a±1.832 根 据 大 长 杂 交 一 代 猪 群 中 OPN 基 因 和 BMP15 基 AB 1.65b± b±2.52 因各基因型及其合并基因型检出个数和对应的经产产仔 BB 9.913b± b±2.75 型最多 A 基因频率为.613 为优势等位基因 2.2 OPN 和 BMP15 基因与产仔数关系 数资料 计算 OPN 基因和 BMP15 基因与产仔数关系 表 BMP15 和 OPN 合并基因型与产仔数的关系 从表 2 可以看出 BB 型产仔数比 AA 型高 头 产 活 仔 数 比 AA 型 高 头 不 同 基 因 型 间 产 仔 数 BMP15 OPN 头数 频数 产仔数 产活仔数 表 现 出 BB>AB>AA 的 趋 势 AA 型 与 BB 型 对 猪 的 AA AA ± a±1.368 产 仔 数 差 异 极 显 著 P <.1, 但 对 猪 的 产 活 仔 数 差 AA AB ab± ab±1.772 异显著.1<P <.5 AA BB a± a±1.889 由表 3 可以看出 AA 和 AB 型个体对猪的产仔数和产 AB AA 活仔数均高于 BB 型个体 AA 型与 AB 型 BB 型对猪的 AB AB ab± ab±2.229 产仔数和产活仔数差异显著.1<P <.5 AB 型与 BB AB BB ab± ab±2.35 型差异不显著 P>.5 BB AA 12.1 BB AB aC± aC±2.5 BB BB a± a±1.915 从表 可以看出 BMP15 和 OPN 合并基因型中 BBBB 合并基因型对猪的产仔数 产活仔数最高 分别为 a 9.C± C± bC± C±1.832 和 11.5 BBAA 合并基因型产仔数 产活仔数最低 产 仔数只和 BBAA ABAA 合并基因型差异不显著 P >.5 猪上 A 等位基因占优势.57 和.82, 而大白猪和杜 和其他合并基因型差异极显著 P <.1 洛 克 猪 的 B 等 位 基 因 占 优 势.7 和.8 而 本 实 验 3 讨论 结果表明 A 和 B 两个等位基因在大长杂交一代母猪群体 OPN 基因的多态性非常丰富 有研究表明 骨调素基 中均有分布 且 A 等位基因占优势 就基因型分布而言 因启动子区存在 9 个 TG n 双核苷酸的交替重复序列 AA 基 因 型 频 率 最 大 BB 基 因 型 频 率 最 小 AB 在 两 者 是骨调素基因转录速率的主要区域 [5] Liaw[6] 在约克夏 之间 从表 2 可以看出 BB 和 AB 型个体对猪的产仔数 杜洛克 盘克夏和蓝瑞斯母猪群体中共发现 27 种基因型 高于 AA 型个体 这与罗仍卓么等 Southwood 发现了 13 个等位基因 此外 在 OPN 基因 白和大白猪种中 OPN 优良基因型为 BB 型是一致的 的内含子上也存在多态 Knoll [3] 研究发现猪 OPN 基因的 第 6 内含子上有 35 bp 的缺失 并发现长白猪 皮特兰 32 [5] 的研究指出的在长 关于 BMP15 基因位点对繁殖性能的影响已有相关报道 许多研究表明在绵羊中 BMP15 基因突变杂合体能引起排卵

37 数的增加 储明星等 [7] 研究表明 BMP15FecXG 突变杂合 录和生产性能 选择 OPN 为 BB 基因型和 BMP15 为 AA 基因型小尾寒羊平均产羔数比野生纯合基因型多.62 只或 基因型的母猪和后备猪 改善生产母猪繁殖力的遗传基础.55 只 侯振平等 加快繁殖力性状的遗传进展 增加母猪的窝产仔数 以提 [] 研究发现 AA 型母猪群体中 二花 脸 梅山猪的产仔数和产活仔数极显著高于 BB 型母猪群体 高生产水平和经济效益 AB 型梅山猪群 头胎产仔数和产活仔数极显著高于 AA 型 参考文献 和 BB 型母猪群体 本研究中 BMP15 基因的 3 种基因型 [1] Yin Li, He Z Q and Zhong G.Osteopontin, it s 个体都检测到了 另外 本研究表明 大长杂交一代猪的不 receptor and the reproduction (J). Progressin Obstetrics 同基因型母猪的总产仔数和产活仔数间差异显著 从表 3 可 and Gynecology, 25,1(3):239 2 以看出 AA 产活仔数比 BB 高 头 不同基因型间产 仔数表现出 AA>AB>BB 的趋势 这与侯振平等 [] 和吴井 生等 [6] 的研究指出的在梅山和大白猪种中 AA 型母猪的产 仔数和产活仔数显著高于 BB 型母猪群体是一致的 [2] 吴井生 朱孟玲 骨形成蛋白 15 基因 BcuI 多态性对猪产仔性 能的影响 J 畜牧与兽医 [3] K n o l l A, S t r a t i l A, C e p i c a S a n d D v o r a k J. Lengthpolymorphism in an intron of the porcine 从 表 可 以 看 出 BMP15 和 OPN 合 并 基 因 型 中 osteopontin (SPP1)gene is caused by the presence or AABB 和 BBBB 合并基因型产仔数 产活仔数均高于其它 absence of a SINE (PRE-1)element (J). Animal Genetics, 合并基因型 BBBB 合并基因型最高 理论上应是 AABB 1999, 3:66 合并基因型的最高 在本次研究中却是 BBBB 合并基因型 最高 这可能因为 BBBB 合并基因型的样本量太少有关 [] 候振平 印玉龙 等 猪骨形成蛋白 15 基因编码区序列的克隆 及测序研究 J 广西农业科学 头数只有 个 其与产仔数的关系需进一步加大样本量 [5] 罗仍卓么 王立贤 孙世铎 猪 OPN 基因与繁殖性状的关联 BBAA 合并基因型产仔数 产活仔数最低 这与理论上是 分析 J 农业生物科技学报 一致的 因此 对于 OPN 基因而言 B 等位基因均可视 [6] Liaw R B, Chang H L, Lai Y Y, Liu C T and Wu 为增加产仔数的优势基因 这和单独应用 OPN 基因型的 M C. Influence of sows' osteopontin alleles to their 分析结果 [8] 一致 对于 BMP15 基因而言 A 等位基因可 litter performance (J).Journal Chinese Society of Animal 视为增加产仔数的优势基因 Science, 2, 29(Suppl.): 131 从 本 次 检 测 结 果 来 看 被 检 测 的 大 长 杂 交 一 代 猪 [7] 储明星 桑林华 王金玉 等 小尾寒羊高繁殖力候选基因 BMP15 基 因 的 有 利 基 因 A 频 率 较 高 为.613 但 是 BMP15 和 GDF9 的研究 [J] 遗传学报 OPN 基因的有利基因 B 频率较低 仅为.327 在随后的 [8] 孟庆利 刘铁铮 猪骨调素基因多态性对产仔性状的影响 J 育种生产实践中 我们将根据基因检测结果 结合产仔记 家畜生态学报

38 母猪早期妊娠诊断技术的研究进展 陈 芳 石放雄* 南京农业大学动物繁育研究所 江苏 南京 2195 随着集约化养猪业的发展 母猪早期妊娠诊断对提高母 超声波检测技术的发展 B 超的体积缩小 重量减轻 操作 猪繁殖率和养猪场的经济效益方面的作用越来越明显 对母 变简便 YBT8 掌上 B 超只有 8 g 兽医们可以随时 猪妊娠做出及时而准确的判断 可以减少空怀 并对空怀的 地对动物进行检测 母猪进行补配 从而减少因无效饲养增加的饲料成本 本文 2 就母猪早期妊娠诊断技术作一概述 1 激素注射诊断法 母猪妊娠后会产生功能性黄体 当注射外源性 PMSG 超声波诊断 和雌激素时 功能性黄体分泌的孕酮会抵消其产生的生理反 超声波具有频率高 波长短 声束有极好的方向性 在 应 使母猪不表现为发情 妊娠母体内传播过程中遇到不同声阻抗介质时会发生反射 2.1 PMSG 法 以及遇到不同脏器时会发生多普勒效应等特性 动物妊娠的 林峰等 21 注射外源性 PMSG 制剂对 52 头配种后 超声波诊断技术可分为超声示波诊断法 A 超 超声多普 1 26 d 母猪进行早期妊娠诊断 观察 5 d 后母猪的发情 勒探查法 D 超 和实时超声显像法 B 超 表现进行诊断 妊娠和未妊娠的确诊率均达 1 % 该方法 1.1 超声示波诊断法 A 超 简便 诊断时间早 成本低 安全 并具有妊娠诊断与促进 超声示波诊断法 A 超 是利用超声波在母体内传播 过程中遇到不同声阻抗的子宫壁 羊水 胎体等介质时产 未孕母猪发情的双重效果 2.2 乙烯雌酚法 生反射 其回声信号在示波器上显示出不同的波形特点来 韩义龙 1995 对配种后 d 的母猪 肌肉注 诊断动物是否妊娠 A 超除了通过波形显示是否妊娠外还 射乙烯雌酚 1 ml 或.5 % 丙酸乙烯雌酚和丙酸睾丸酮各 可以通过警报示警 如美国 Ranco 公司的Ⅱ型妊娠报警仪.2 ml 的混合液 如注射后 2 3 d 无发情表现 说明已 李云峰等 1989 年曾用此仪器在配种后 6 1 d 检测时 经妊娠 李永泗 198 在配种后第 d 注射乙烯 发出报警声的 15 头母猪有 13 头妊娠并产仔 其余 2 头误 雌酚对母猪早期妊娠诊断的安全性进行了探讨 认为该药物 诊的母猪患有子宫内膜炎 对妊娠期 产仔数及死胎率无明显影响 1.2 超声多普勒探查法 D 超 2.3 其他外源性激素诊断法 超声多普勒探查法 D 超 是利用超声多普勒检测仪探 渊锡藩等 1993 报道于母猪配种后 d 肌注雌 查妊娠动物 当发射的超声遇到母体子宫动脉 胎儿心脏和 二醇 缬草酸盐 2 mg 和睾酮 庚酸盐 8mg 混合油剂 2 5 d 胎动时 会产生各种特征性多普勒信号音, 从而进行妊娠诊 内不发情者为妊娠 准确率在 98% 以上 断 陈兆英等 1981 用国产医用 CDZ-21 型超声多普勒 HMG 绝经后妇女尿中提取的一种激素 主要作用与 诊断仪 从腹壁诊断母猪早期妊娠 认为在配后 2d 即可 PMSG 同 据王前 22 报道 使用南京农大生产的母 探到胎心 胎心包括胎儿动脉和脐带脉管血流音, 且配种 猪妊娠诊断液 在广东数个猪场试用 1 胎次 诊断准确 后 3d 以上诊断准确率可达 95 % 以上 率达 1 % 1.3 实时超声显像法 B 超 3 实时超声显像法 B 超 是具有二维图像的断层扫描 血浆孕酮测定法 未妊娠的母猪没有形成功能性的黄体 在下一发情周期 能在活体实时影像观察早孕的子宫 胚囊 胚胎发育 B 超 会表现发情 在发情期的第 16 d 左右外周血浆中孕酮浓度会 检测准确率高 时间早 对机体无损害 并可以用于检测 下降 因此 可在配种后 16 2 d 根据母猪血浆中孕酮浓 胚胎数和排卵监测等 陈兆英等 1995 用此技术在配种后 度进行诊断 猪妊娠 22 d 时孕酮含量一般在 5 mg/ml 以上 d 诊断母猪是否妊娠的总符合率为 98.7 % 由于医 由于此法在样品采集 保存 运输方面较麻烦 我们实 用黑白 B 超比兽用 B 超有价格上的优势 张道中等 29 验室研制了一种检测血液孕酮含量的纸片法 该方法已经用 用医用黑白 B 超进行妊娠诊断 检出准确率达 99 % 随着 于奶牛和肉牛血液和奶汁孕酮的测定 我们期待下一步用于 3

39 母猪妊娠诊断 浮于同质透明液中 说明母猪已妊娠 现在有一种排卵测定仪 在配种后 21 d 左右可以通过 血浆中硫酸雌酮浓度检测法 妊娠母猪血液中的硫酸雌酮前体物来自胚胎 在妊娠早 检测动物阴道黏液的电阻变化检测动物是否发情 从而判断 期达到可测水平 蔡正华等 1989 的研究表明 在配种后 母猪是否妊娠 该仪器使用方便 只要把试管插入动物阴道 25 3 d 妊娠母猪与未妊娠母猪血液中硫酸雌酮含量水平 读取数值即可 存在显著的差别 以.5 ng/ml 为界线作为判断妊振与否 8 的标准 妊娠诊断的准确率是 1% 且妊振母猪的血浆硫 早孕因子检测法 早孕因子 EPF 是目前最早确认妊娠的生化标志之 酸雌酮水平和胎儿数呈正相关 一 对妊娠母体具有很高的特异性 母猪受精后 2 h 可在 5 尿液检测法 血清中检测到 EPF 活性 且在猪体内几乎持续整个孕期 5.1 尿液碘化检测法 一旦妊娠终止 血清中 EPF 立即消失 因此 EPF 对母猪 在配种 1 d 后 取母猪清晨的尿液 1 ml 放入玻璃杯 中 加入 1 ml 5% 7% 的碘酊 煮沸后如尿液自上而下出 现红色 说明母猪已经妊娠 5.2 尿中雌激素诊断法 早期和超早期妊娠诊断有着重大的意义 现在检测 EPF 活 性的经典方法是玫瑰花环抑制实验 其含量以玫瑰花环低度 RIT 表示 9 取尿液 15 ml 加入浓硫酸 3 ml 然后加热到 1 阴道活检法 阴道活组织检验技术是通过刮取阴道前部的上皮细胞 5 min 后冷却到室温 加入 15 ml 苯 振荡以后 把上层 作组织切片 观察受孕酮影响的上皮细胞排列情况进行妊娠 液体倒掉 分出雌激素层 然后加入浓硫酸 1 ml 加热 诊断 Walker 1972 用此方法对配种后 d 的母 8 25 min 以后观察 出现豆绿色荧光者为妊娠 准确 猪进行诊断 准确率达 95% 率达 95% 以上 1 6 血小板计数法 母猪配种后 1d 血小板数会降低 到第 7 d 后降到最低 外表观察法 母猪配种后如果妊娠会有一系列的外部表现 可以作为 判断母猪妊娠的一种办法 一般妊娠母猪表现为性情温顺 点 第 11 d 回到正常水平 而未孕的母猪无此变化 李玉 食欲渐增 膘情好转 皮毛变得光亮紧凑 阴户下联合处逐 龙 1995 通过此方法对对配种后母猪进行早期妊娠诊断 渐收缩紧闭 明显地向上翘 阴道颜色由潮红变为白色 并 以降低值大于 3 13 作为妊娠诊断的依据 总符合率达 附有浓稠粘黏液 触之干涩而不润滑 配种后 21d 左右用 9 % 但此方法容易受到其他可能导致血小板数减少的疾病 手按压腰部不下塌反而上弓 也没有发情表现 的影响 因此 检测前应排除这类干扰 7 近几年来 母猪妊娠诊断技术向时间早 准确率高 成 检查阴道粘液法 本低 操作简便 安全等方向发展 各场应根据各自的条件 取配种后 1 d 母猪阴道内的粘液少许 放入试管中加 选择合适的方法 从而提高母猪的繁殖力和猪场的经济效益 适量蒸馏水摇匀 加热 1 min 如粘黏液呈云雾状碎絮物悬 35

40 生殖营养对后备母猪发情及受孕的影响 刘自逵1 2 朱中平2 罗柏荣2 成霞林3 王文龙3 吴尚雨2 1.湖南农业大学动物医学院 湖南 长沙 3.湖南新五丰股份有限公司永安分公司 湖南 伟嘉集团 湖南农大动物药业有限公司 湖南 浏阳 1323.湖南省兽药工程技术研究中心 湖南 浏阳 长沙 摘 要 为考察生殖营养对后备母猪发情和受孕的影响 选择日龄 体况较一致的二元杂 长白 大白 后备母 猪56头 随机分为3个组 母猪头数依次为 头 试验1组添加有机硒生殖营养75 g/t饲料 试验2组添 加纳米硒生殖营养75 g/t饲料 第3组为空白对照组 在配种前饲喂2 d 结果显示 在开始给药至用药结束 后2 d 试验1 2组已分别有19 15头后备母猪发情 发情率依次为76 %和6 % 与对照组相比 差异显著 P.5 两试验组相比 差异显著 P.5 其中试验1 2组后备母猪的发情多集中在给药第5天至给药后 1 d的这段时间 分别占各组发情母猪头数的89.5 %和73.3 % 其中给药后1 d的母猪发情率最高 所有发情 母猪均无返情病例出现 试验表明 生殖营养在促进后备母猪发情和受孕方面效果较好 关键词 生殖营养 发情 返情 发情时间 后备母猪 目前 规模化猪场后备母猪不发情 受孕率低等情况比 较常见 郑宝亮等 [1] 从饲养管理 气候环境 营养 运动 等方面对其进行了阐述 探究其原因 除与育种造成的安静 的发情 配种情况等 并进行汇总 2 结果与分析 经过 2 d 的饲养试验 在饲料中添加药物生殖营养 发情 管理不到位有关外 由于疾病和饲料中霉菌毒素的存 在试验用药的过程中和试验结束后 2 d 内 先后有 3 头后 在 致使营养成分被破坏或需求增加 而直接造成生殖营养 备母猪出现发情 且已经配种 具体结果如表 2 所示 的缺乏是一种主要的诱因 梁明振等 [2] 对在后备母猪饲粮 2.1 后备母猪发情的情况 中添加与生殖相关的营养性成分 从而加快初情期的到来也 由表 2 可知 通过在后备母猪每吨饲粮中添加生殖营 有积极的报道 为探讨生殖营养的临床疗效 特开展了以下 养 75 g 到用药结束后 2 d 为止 添加有机硒生殖营 试验 1 材料与方法 1.1 试验药物 药物 有机硒生殖营养粉剂 纳米硒生殖营养粉剂 伟 表 1 试验母猪日粮配方组成 项目 含量 配方原料 /% 项目 含量 营养水平 玉米 71.7 代谢能 ME/Mcal/kg 2.89 豆粕 粗蛋白 CP/% 麦麸 5.8 赖氨酸 Lys/%.816 公司永安分公司 猪场 提供 56 头长大杂交二元后备母猪 赖氨酸.12 钙 Ca/%.78 其年龄为 9 月龄以上 体重超过 12 kg 不发情或发情不 苏氨酸.1 总磷 TP/%.359 食盐. 有效磷 AP/%.131 预混料. 食盐 NaCl/%.9 合计 1 嘉集团湖南农大动物药业有限公司馈赠 1.2 试验猪群 29 年 9 月 22 日至 1 月 17 日由湖南新五丰股份有限 明显 1.3 试验设计与日粮组成 将上述 56 头不发情的后备母猪随机分为 3 组 各组猪 头数依次为 其中第 1 组和第 2 组分别在每吨饲 料里面添加 75 g 的有机硒生殖营养 纳米硒生殖营养 拌 料饲喂 连用 2 d 第 3 组为空白对照组 不添加药物 沿用猪场试验日粮 见表 1 1. 管理与记录 采用专人负责配种管理并填写每日报表 详细记录猪群 36 注 预混料可为每千克全价料提供 维生素 A 25 KIU 维 生 素 D 3 8 KIU 维 生 素 E mg 维 生 素 K 3 6 mg 维 生 素 B 1 17 mg 维 生 素 B 2 15 mg 维 生 素 B 6 25 mg 维 生 素 B 12.6 mg 氯 化 胆 碱 1 11 mg Fe 3 32 mg Cu 5 1 mg Zn mg M n m g I m g S e m g 钴 mg Ca 12 2% P 5.%

41 表 2 后备母猪发情试验结果 素 一方面诱导其他原始卵泡的发育 另一方面通过反馈信 评价指标 试验组 1 试验组 2 空白对照组 发情母猪数 / 头 返情母猪数 / 头 发情率 /% 76% 6% 33.3% 息给下丘脑 垂体 性腺 卵巢 轴系来调控性激素的分泌 由于补充了生殖营养 解除了对下丘脑发生促性腺激素释放 因子的抑制 使腺垂体能及时分泌促卵泡素和促黄体生成 素 促进卵泡的成熟 发育和适时排卵 从而表现为母猪发 情 本试验总结了王妙林 [5] 用纯中草药粉剂催情散来治疗 养的试验 1 组发情率已达到 76 % 纳米硒生殖营养试验 后备母猪不发情的成功经验 在配方中辅以催情助孕中药提 2 组的发 情率也已达到 6 % 两者与空白对照组相比差 取物 因为中药具有温肾 壮阳 滋阴的作用 对卵巢功能 异 显 著 P.5 试验 1 组的发情率高于试验 2 组 静止 内分泌紊乱具有一定的调理功效 两者相比差异显著 P 对后备母猪返情的影响 2.2 后备母猪返情的情况 后备母猪的返情除了与公猪精液品质不佳有关外 母猪 生产中常以母猪配种后 18 2 d 作为母猪是否返情的 不完善的生殖内环境是其主要的影响因素 具体表现在 子 时间界定范围 试验 1 2 组的发情母猪在上述时间范围内无 宫内组织营养素的分泌不足 子宫内膜不成熟 子宫颈肌肉 返情的病例出现 说明生殖营养能明显提高母猪的配种受胎率 闭合等 2.3 后备母猪给药后不同阶段发情的情况 据外文资料报道 子宫内组织营养素 子宫分泌蛋白 由表 3 可知 试验 1 2 组后备母猪的发情多集中在给 UPS s 如子宫铁结合蛋白和视黄醇结合蛋白会帮助胎儿 药第 5 天至给药后 1 d 的这段时间 分别占各组发情母猪 的发育 从而影响胚胎存活率 本实验在配种前给母猪补饲 头数的 89.5 % 和 73.3 % 其中 试验 1 组的后备母猪又多 生殖营养 其功效成分加速了子宫内组织营养素的分泌 促 在用药第 d 给药后 1 d 这 2 个阶段发情 分别占 进胎儿发育和着床 从而降低了返情的发生 试验 1 组发情母猪头数的 26.3 % 和 31.6 % 试验 2 组各阶 生殖营养中的功能性成分通过参与花生四烯酸的代谢 段的发情母猪头数分布较均匀 在用药第 6 1 d 和给药 调节前列腺素的合成 使子宫颈肌肉松弛 促进精子在雌性 后 1 d 发情母猪占总发情母猪的比率均为 26.7 % 对照 生殖道中运行 从而有利于受精 组在用药第 d 和给药后 1 d 各有 1 头母猪发情 3 再者 部分成分直接参与了子宫内膜中黏膜上皮和固有 讨论 层细胞的合成与分化 同时又可引起动情素和孕激素的分 3.1 对后备母猪发情的影响 泌 使子宫内膜产生蜕膜的能力 便于受精卵的着床 也降 规模化猪场后备母猪不发情的现象比较常见 部分学 者多以外源性激素来进行催情 张守全 [3] 低了后备母猪返情的发生 用氯前列烯醇 生殖营养改善子宫内环境 促进着床 减少胚胎死亡 PG6 等生殖激素对后备母猪进行诱导催情 结果发情率依 从而减少返情发生 使得在返情的时间界定范围内无病例出 次为 3.3 % 和 38.2 % 钱新岚等 现 [] 对后备母猪肌注 HCG 催情 结果发情率为 % 但受孕率却只有 % 3.3 对后备母猪发情时间的影响 说明后备母猪不发情并不是单纯的缺乏性激素 而是生殖内 周平 [6] 等指出 营养不足是造成后备母猪繁殖紊乱的 分泌机能紊乱的结果 主要原因 而又突出表现在对生殖器官发育和生殖内分泌的 本试验组的发情率明显优于对照组 后备母猪的发情是 影响上 通过分析表 3 的结果 可以知道 母猪发情多集中 以成熟的生殖器官发育 正常的内分泌机能状态为基础 给 在给药第 6 d 开始直至试验结束后 1 d 的这个阶段 母猪 后备母猪在配种前提供生殖营养 它能够活化卵巢 改变其 在用药 5 d 后有部分母猪发情 可能是添加的生殖营养逐步 静止状态 生殖营养中的成分参与相关的酶促催化反应 诱 完善了生殖内分泌机能 使母猪的性腺轴系能正常地发挥作 导原始卵泡的发育 随着卵泡的分化 内外卵泡层分泌性激 用 而生殖营养在改善内分泌的同时又在促进生殖腺发育的 表 3 给药后不同阶段后备母猪发情头数 组别 1 5d 6 1 d d 16 2 d 21 3 d 31 d 试验 1 组 试验 2 组 对照组

42 情况下 将会适当地延长母猪初情期的到来 也就表现在试 2 梁明振 梁贤威 卢克焕 等. 饲粮锌 硒和维生素 E 水平对 验结束后 1 d 这一阶段的发情 后备母猪生长发育及生殖激素的影响 J. 广西农业生物科学 结论 在 1t 饲料中添加生殖营养 75 g 对促进后备母猪发情 3 张守全. 应配未配后备母猪的激素诱情配种试验 J. 养猪 改善配种受胎率方面效果显著 其中 发情多集中在用药结 束后 1 d 这一时间段 钱新岚 蔡东苹. 利用外源激素提高母猪繁殖力的试验 J. 新疆畜牧业 参考文献 1 郑宝亮 边传周 兰国俊 饲养管理性因素造成母猪不发情的 5 王妙林. 后备大龄母猪药物诱情配种试验 J. 浙江畜牧兽医 原因 J. 郑州牧业工程高等专科学校学报 周平 吴德 王延忠 等. 营养对母猪卵泡发育的影响 J 饲料博览

43 猪卵母细胞体外成熟的研究 郝子悦 刘忠慧 江苏畜牧兽医职业技术学院 江苏 泰州 2253 摘 要 研究了培养时间和激素对猪卵母细胞体外成熟的影响 结果表明 以NCSU-23为基础培养基的成熟培 养液对卵母细胞分别培养36 h h h 8 h 在培养 h后 成熟率最高为81.% 不同激素培养 成熟培养 液培养22 h后置于无激素培养液中继续培养22 h的成熟率最高 添加性腺激素培养的成熟率显著高于不添加 性腺激素的 P<.5 关键词 猪 卵母细胞 体外成熟 猪卵母细胞体外成熟是猪胚胎体外生产技术以及体细 显微镜下, 用口吸管挑选卵丘包裹 3 层以上 而且胞质均匀 胞核移植生产克隆猪中十分重要的环节 卵母细胞的质量是 的卵丘细胞 - 卵母细胞复合体 cumulus-oocyte-complexes 决定猪胚胎体外生产效率的关键环节 目前认为 卵母细胞 COCs 用成熟培养液洗涤 3 遍 转入培养箱中 39 的成熟不单纯是指核成熟 还包括了细胞质的成熟 [1] 在培 5%CO2 至少已经平衡 h 的四孔培养板成熟培养液滴内 ( 每 养基中添加生长因子 [2] 激素 [3] 卵泡液 [] 和卵泡细胞共培 1 μl 液滴放 25 枚 ) 用胚胎级矿物油覆盖 将 COCs 先 养 在成熟培养液中培养 2±2 h 然后转移到无激素的成熟培 [5] 等许多旨在提高细胞质成熟效率的方法相继建立 本 试验研究了不同培养时间和不同激素对猪卵母细胞体外成 养液中继续培养 2±2 h 熟的影响 目的是为猪卵母细胞体外成熟研究提供适宜的培 1.3 实验设计 培养时间对卵母细胞体外成熟的影响 养条件 1 材料与方法 1.1 试剂 成熟培养液 NCSU-23 无 BSA +1% pff 猪 卵 泡 液 +1 IU/Ml hcg+1 IU/mL 在成熟培养液中分别培养 36 h h h 8 h 39 5%CO 激素对猪卵母细胞体外成熟影响 实验组 1 不含 EGF 的成熟培养液 NCSU-23 成熟 培养液 全程培养 COCs h PMSG+.1 mg/ml L- 半胱氨酸 +.5 mg/ml 谷氨酰胺 实验组 2 成熟培养液全程培养 COCs h +.1 mg/ml 实验组 3 成熟培养液先培养 COCs22 h 后 再除去全 亚牛磺酸 +1 ng/ml EGF Hoechst3332 Hoechst3332 储 存 液 用 超 纯 水 过 滤 后 1 ml 溶 解 1 mg 浓度为 1 mg/ml 2 冻存 取此浓度溶 液 1 ml 稀释到 1 ml 浓度为 1 mg/ml 如果工作浓 度为 5 μg/ml 时, 则每毫升溶液添加 5μL 1.2 实验方法 从屠宰场取卵巢 放入 3 35 含青霉素和硫酸链 部激素继续培养 22 h 实验组 基础培养液 +pff+egf+l- 半胱氨酸 + 谷 氨酰胺 + 亚牛磺 +rpgh 1 μg/ml 培养 h 对照组 基础培养液 +PFF 培养 COCs h 1. Hoechst 染色观察成熟效果 将 39 5%CO2 1% 湿度培养 h 的 卵 母 细 胞 移 至 5 μg/ml Hoechst3332 的 NCSU23+.%BSA 中孵育 15 2 min 在荧光显微镜下观察第 霉素的生理盐水中 2 h 内运回实验室 用配有 18 号针头 一极体和纺锤体 的 2 ml 注射器抽吸卵巢上 3 6 mm 的卵泡 将抽取液 1.5 统计分析 放于 5 ml 离心管中 37 水浴静置 15 min 放入捡卵杯 为降低季节 卵巢来源和试验批次造成的误差 试验表 中 过滤去上清 加入 PVA-TL-HEPES 重悬沉淀 再静 格中的数据均在同一季节 相同卵巢来源和试验条件下获 置 15 min 将重悬液放入直径 6 mm 的塑料培养皿中 在 得 数据结果用均数 ±SEM 表示 利用 SAS 中 ANOVA 39

44 表 1 不同培养时间对卵母细胞体外成熟培养的影响 Cran 等 [6] 认 为 核 成 熟 在 37 h 完 成 而 胞 质 成 熟 在 2 h 以后的研究认为 [7] 培养 2 h 5 h 为宜 以 8 h 成熟培养时间 /h B 级以上 COCs 数 重复次数 n 成熟率 /% ±.7% c 胞质成熟及体外受精时精子的穿卵速度 确定合适的体外成 ±2.3% a,c 熟培养为 2 h 5 h 目前培养以 8 h 为最高 在猪卵母 ±1.6% a 细胞体外培养的不同时间加入蛋白质合成阻断剂 研究在不 ±2.1% a,c 为最高 吴光明 [8] 根据卵母细胞体外成熟时的核成熟率 同培养时间段阻断蛋白质合成对卵母细胞发育的影响 认为 在培养 29 h 36 h 蛋白质的合成是绝对必要的 而在 36 h 注 a 与 b 之间差异显著 P <.5 a 与 c 之间差异极显著 P <.1 b 与 c 之间无显著差异 推测体外成熟时间至少应在 36 h 以上 [9] 目前猪卵母细胞 表 2 培养基中不同激素组合对卵母细胞体外成熟培养的影响 添加物 加入蛋白合成阻断剂导致受精后雄原核的形成率降低 由此 B 级以上 COCs M Ⅱ期卵 数 重复次数 n 母细胞数 的体外成熟时间主要选用 36 h 3 5 h 6 h 8 h 等 3.2 激素影响 成熟率 /% 激素是哺乳动物卵母细胞成熟的重要物质 它们在体 试验组 1 不含 EGF 的成熟 培养液 ±2.5% a 试验组 2 含 EGF 的成熟培 养液 ±.58% a 试验组 3 成熟培养 22 h 后 换液组 ±1.% 试验组 加入 rpgh 组 ±1.5% b 试验组 5 无激素组 ±.68% b 内调节卵母细胞成熟的作用机理已比较清楚 促性腺激素 被认为对成熟的启动发挥主要作用 一般成熟培养液都要 添 FSH 和 LH 是成熟培养液中使用较多的促性腺激素 但对 LH 是否有作用 不同的研究有不同的结论 PMSG/ hcg 具有与 FSH/LH 相似的效果 是小鼠 猪卵母细胞 a 体外成熟中通常添加的激素 [1] 邓满齐等 [11] 在猪卵母细 胞 卵丘细胞复合体体外成熟研究中 加入 PMSG 培养 注 a 与 b 之间差异显著 P <.5 a 与 c 之间差异极显著 P <.1 b 与 c 之间无显著差异 8 h 卵丘细胞大部分膨胀 86.% 8.1% 12/295 的卵母细胞排出第一极体 Zhu J 等 [12] 添加 hcg FSH 效果都很明显 本研究结果表明 含 PMSG hcg 的试验组 卵母细胞体外培养成熟率要显著高于不含 PMSG hcg 组 过程对数据进行分析处理 说明促性腺激素对卵母细胞体外成熟培养是必须的 EGF 2 结果与分析 当与 PMSG hcg 协同作用时对卵母细胞的体外成熟有支 2.1 不同培养时间对卵母细胞体外成熟的影响 持作用 而生长激素 rpgh 则似乎作用不大 进一步研究 将卵母细胞用以 NCSU-23 为基础培养基的成熟培养 rpgh 的浓度不同对体外成熟影响表明 rpgh 对卵母细胞 液对 B 级以上卵母细胞在 39 5%CO2 和饱和湿度下分别 的体外成熟影响不大 也可能是与其他激素联合使用时还没 培养 36 h h h 8 h 结果显示 在培养 36 h 后 有形成最佳比例 而激素在培养中是全程应用 h 或者 第一极体排出率极低 为 7.3% h 为最高 为 81.% 是半程应用上 先 22 h 作用 后 22 h 不作用 的影响效果 h 8 h 分别为 61.2% 和 66.2% 并无显著差异 但半程应用的成熟率要偏高 说明半程应用 2.2 激素对卵母细胞体外成熟影响 效果可能会更好 基础培养液中按添加激素的类型分成 3 个试验组 与不 结论 含激素组进行对照比较 结果显示 组 3 即成熟培养液培 利 用 本 实 验 所 采 用 的 NCSU-23 成 熟 培 养 液 体 外 养 22 h 后换无激素培养液中继续培养 22 h 至成熟的 第一 成 熟 培 养 h 达 到 最 佳 成 熟 效 率 在 NCSU-23 成 极体排出率最高 添加 EGF 与不添加 EGF 组 1 与组 2 熟 培 养 液 中 添 加 EGF 对 成 熟 效 率 影 响 不 大 在 成 熟 培养 22 h 换液与不换液 组 1 与组 3 在成熟率上差异不 培 养 液 NCSU-23 无 BSA + 1 % p F F + 1 I U / 显著 P >.5 添加性腺激素组 1 组 2 组 3 的成熟率 m L h C G + 1 I U / m L. P M S G +.1 mg/ml L- 半 显著高于不添加性腺激素的组 和组 5 P <.5 胱 氨 酸 +.5 mg/ml 谷 氨 酰 胺 +.1 mg/ml 亚 牛 磺 酸 3 讨论 +1 ng/ml EGF 中成熟培养 22 h 后 换为无激素培养至 3.1 培养时间的影响 h 的效果 略好于不换液直接全程培养 h 但差异不

45 显著 ing pig oocyte maturation [J] J Reprod Fert 参考文献 [1] Day BN Reproductive biotechnologies current status in po rcine reproduction. Anim Reprod Sci[J] [2] Abeydeera LR In vitro production of embryos in swine Theriogenology[J] [3] Onish A Lwamato M Akita T.etc Pig cloning by Mi croinjection of fetal Fibroblast Nuclei e[j] Scienc [] Liangxue L DonmaKS Kwang WP Production of1,3galatosyl transferase Knockout Pigs by Nucear Transfer Cloning.Science,22,295(8), [5] L e e J W T i a n X C Y a n g X Optimization of parthenogenetic activation protocol in porcine [J] Mol Reprod Dev [6] Cran DG Qualitative and quantitative structural changes dur [7] Rath D Niemann H In vitro maturation of porcine oocytes i n follicular fluid with subsequent effects on fertilization [8] 吴光明 猪卵母细胞体外成熟的研究 华东师范大学学报自 然科学版 [J] [9] Bing Y Che L Hirao Y et al Optimization of parthe nogenetic activation and subsequent development of porcine o ocytes activated by a combined electric pulse and butyrolacto ne I treatment[j] Reprod Dev [1] L Lai JX Kang R Li et al Generation of cloned transgen ic pigs rich in omega-3 fatty acids[j] Nat Biotechnol [11] 邓满齐 谢成侠 牛树理 猪卵巢卵母细胞的体外成熟和体外 受精 [J] 畜牧兽医学报 [12] Zhu J Telfer E Fletcher J et al Improvement of an electrical activation protocol for porcine oocytes[j] Biology of Reproduction

46 种猪育种中常见问题及对策 孙晓超 聂玲琦 (河南省谊发牧业有限责任公司 河南 鹤壁 种猪的不断选育提高是保障养猪业持续发展的重要条 是行驶的高速路 一些大型种猪场曾一度忽略了核心群和生 件 尤其是集约化瘦肉型养猪企业的发展 对种猪质量提出 产群的概念 忽略了核心群继代选育的作用 过分强调全群 了更高的要求 一方面要求有良好的繁殖性能 即产仔数 测定 择优选留 从而造成无论是公猪还是母猪独立血缘数 受胎率等性状 另一方面要求有良好的肥育性能 即生长速 目减少 群体近交系数增大 猪群整体质量提高困难等问题 度快 瘦肉率高 料肉比低等性状 目前很多企业都非常重 核心群应在全群测定及综合评定的基础上选择优秀个体进 视育种工作 并且也在坚持不懈的进行着 但这其中也出现 入 核心群的生产性能应高于生产群的平均水平 并有较宽 一些问题 只有正确 长期的进行育种工作 才是不断提高 的血统及丰富的遗传基础 同时父系指数应达 1 以上 世 本场种猪质量 赢得市场的先决条件 代间隔不必强求一致 对特别优秀的个体允许适当的世代重 1 端正对育种工作的态度 叠 在封闭育种期间 在保证不丢失种猪血缘的基础上 通 有些种猪企业认为 育种对自己来说没什么好处 还多 过不断合理调整 优化核心群的结构来进一步选育提高种猪 了些工作 开支 有些企业为了应付上级的检查 做些表面 的各项生产繁殖性能 很多猪场并未能真正的建立核心群 文章 有些较大的种猪企业甚至连育种员都没有 有育种员 或者没有很好的利用到它 核心群常混于一般育种群 未能 也往往是兼职 在这些育种员头脑中根本没有育种的概念 集中种猪场育种群中的精华而形成优势 难于起到繁育体系 更别谈怎么样去做好育种工作 有些企业认识到了育种的重 顶层作用 所以作为种猪场或者原种场必须真正建立使用核 要性 但是做的很差 有些企业认为不做育种工作我的猪照 心群 核心群建立后还要不断地调整 优进劣出 留种比例 样能卖个好价钱 殊不知 育种确实能提高本场的生产成绩 至少占到 8% 核心群使用头胎母猪 以加快世代更新 提 育种工作做好了 各项生产成绩自然会提高 拍卖 测定成 高育种速度 作为种猪育种工作者 应当充分了解和认识大 绩也会提高 种猪价格也会提高 收入自然会提高 收入是 型种猪场尤其是新建的种猪场在封闭育种期间可能碰到的 其次 做好育种工作提高种猪质量 一个种猪场品牌的树立 选育种问题 分析原因并找到其相应的解决措施 以期提高 才是最重要的 种猪育种水平 2 5 长期坚持做好育种工作 配种计划的制定 育种是一项需要长期坚持才会有效果的工作 因为只有 根据系谱资料 种猪的体形及生产性能测定资料进行同 长期坚持 择优选良 才会在群体内固定由选育带来的遗传 质选配 以保证其后代的一致性 很多公司是仅看猪的体型 进展 才会一代比一代的性能好 一般的种猪企业都有自己 就制定配种计划 也有的公司只看育种软件的近交系数 父 的育种软件 这些软件都依赖于场内种猪的实时数据 对这 系指数来制定 正确的制定方法应该是现场观看每批断奶母 些数据进行计算 所以 只有保证长期稳定的数据来源 并 猪 根据公猪使用情况合理的进行同质选配 再通过育种软 是真实有效的 育种软件才能测算准确 进而正确选择种猪 件进行筛选 以确定最佳公猪 同时 在保种的基础上 准 3 科学制定选育目标 确细致的选择优质的核心群后备公猪是做好母猪选配计划 目前 我国商品猪价格持续下跌 但种猪销售市场一直 的前提 在制定配种计划的同时 应考虑本场的纯繁比例 看好 并且呈现出一片繁荣景象 因此 种猪企业要抓住机 本场的选育改进侧重点 有的放矢地制定配种计划 遇 从长远发展的角度出发 制定完善的种猪选留方案 科 6 耳号 学制定选育目标 为将来赢得市场做好准备 父系选育目标 育种工作根本来源于数据的分析 而数据的准确前提就 应以日增重 瘦肉率为主攻目标 母系选育以总产仔数 日 是每头种猪的耳号正确 不管是耳缺号 刺墨号 还是电子 增重 瘦肉率为主攻目标 以培育繁殖性能优秀 生长速度 耳标 都要真实准确的打好 一般国内猪场采用的是出生打 快 瘦肉率高 适应性强和高健康水平的种猪为目的 耳缺 建议出生即打耳标 或者下保育前打耳标 这样可防 核心群利用 止因耳缺打错 或后期刮伤等出现耳号错误 导致育种数据 如果说种猪群育种是走的普通路 那么核心群的建立就 不准确 2

47 7 种猪选留 8 种猪使用与淘汰 种猪选留可分为出生 去势 断奶 下保育前 始测体 每个猪场应根据自身情况设定母猪存栏 进入生产群 重和留种等 7 个阶段 并伴随着淘汰那些不符合品种特征和 体后 种母猪使用一般不要超过 8 胎或出生后 年 在管 种用条件的猪只 理到位 营养水平合适的情况下 严格执行每年正常淘汰 7.1 出生 25% 3% 的淘汰比例 对年老 无效生产时间长 久不发情 同窝仔数低于 6 头 初生重 1 kg 以下 有明显外观缺陷 屡配不孕 多次返情 连续多胎低产 患病等没有使用价值 同窝内有遗传疾患 不予留种 其他的可考虑留种 的母猪 要及时淘汰 种公猪使用年限应不超 2 年 从出生 7.2 去势 之日算起 一般为 1.5 年 及时淘汰性欲低 精液品质低 每窝选留 2 头 其余的进行去势 有明显外观缺陷 不 配种受胎率低 患肢蹄病的公猪 很多猪场并不愿意淘汰老 符合品种特征 产仔少 有遗传缺陷的不予选留 公猪 其实及时淘汰老公猪选择新公猪 也是加快育种速度 7.3 断奶 的有效措施 同时针对本场遗传有所需要改进的方面可考虑 有明显外观缺陷 断奶个体重低于 5 kg 不于选留 7. 下保育前 适当引种 或者引进精液 但须注意健康问题 9 进行仔细挑选 有明显外观缺陷 不符合品种特征 生 系间杂交 有些种猪场在先后引进了不同的 系 往往不想进行 长速度慢不予选留 母猪根据产仔情况等每窝选留 2 头 系间杂交 原因是怕别人说他猪场的猪不纯 根据遗传育种 7.5 始测 理论 不同血统来源的品系之间杂交 不但没有坏处 反而 7 日龄始测体重低于 2 kg 不予选留 有明显外观缺 能发生基因交流 性状互补 产生一定程度的杂种优势 特 陷不予选留 别是在产仔 胚胎成活率等方面会有一定提高 所以种猪场 7.6 结测 可以考虑适当系间杂交 但需要注意后代可能会发生分离 体重达 kg 称重 利用 B 超测活体背膘 眼 肌面积 一定要做好后代选留工作 留种 利用育种软件计算综合育种值 成绩好的留种 差的淘 汰 另外还要结合体形外貌选择 联合育种 目前开展的联合育种工作是全国性的 应该说具有范围 广 参加的种猪场多 种猪数量大的优势 开展联合育种工 作具有良好的基础 但从现在操作情况看 联合是比较松散 最重要的就是留种 种公猪选留要求品种特征明显 肢 的 育种是停留在表面的 没有实质性的工作 主要是因为 蹄结构优秀 背臀肌肉丰满 睾丸发育正常 性欲好 精液 经济利益的原因 谁都不想将最好成绩的猪只交流给其他的 质量优秀 种母猪选留要求品种特征明显 肢蹄结构优秀 场家 谁都想卖最高的价钱 但联合育种在全国来说是件好 外阴发育正常 乳头数量 7 对以上 排列整齐 发育良好 事 是大势所趋 必行之事 对我们种猪场来说也是绝对的 在对所有种猪进行测定完毕 对欲留后备种猪进行外貌评 好事 所以应该摈弃以往观点 积极开展种猪场疾病净化 定 采用多人评分制 评分内容为肢体 生殖器官 品种特 及时上交真实育种数据 积极与各场参加种猪或精液交换以 征 体型等 应根据本场实际情况有所侧重的进行比分分配 提高本场种猪生产性能 全国各大型种猪场在全国育种协作 在进行完评分后 一定要结合父系指数进行选留 因为很多 组的指导下 建立起广泛的遗传联系 实现真正意义上的联 种猪场往往以 貌 选留 比如双肌臀的种猪往往会发生泌 合育种 只有这样才能提高本场猪群的质量 同时也能提高 乳力差 难产 产仔低 后代生长慢等一系列问题 在选留 我国猪的整体水平 核心群后备母猪时 要注意保留血缘 也不要过多的选留某 11 小结 一头公猪的后代 因为一个种猪场核心群数量有限 容易导 对于一个大型种猪场来说 育种工作任重而道远 育种 致近交系数上升 某血缘确实优秀者 后代适当多留 但也 人才的选留也非常重要 除了育种人才培养外 还应聘请育 要靠结合种猪各世代的选育 逐步优化种群结构来实现选育 种专家做技术后盾 以及时有效指导场内工作开展 育种工 提高 外貌评定结束公猪要对预留血缘后代进行父系指数 作是一项细致 繁琐而又十分艰巨的工作 但是只要我们坚 母系指数计算 所选后代父系指数 11 以上 同时父系指数 持不懈地向一个既定的目标努力 总结经验 查漏补缺 寻 不能低于其父亲 母系指数不能低于 9 结合外貌评分进 找出一个适用于本场的行之有效的育种方法 在育种工作中 行选留 母猪父系指数不低于 1 同时设立相关本场指数 及时发现问题 解决问题 积极坚持开展场内种猪选育以及 设定加权值 结合外貌评分进行选留 联合育种 就一定能够取得成效 3

48 新美系杜洛克猪近交效应初探 叶道武1 王 胜2 张伟力3 (1.安徽长风华多种猪养殖有限公司 安徽 合肥 南京九州互联 江苏 3.安徽农业大学 安徽 合肥 南京 美系杜洛克猪引入中国后 其生长速度快 健壮 产仔 多的特点逐步被国内养猪界认可 饲养规模不断扩大 由于 进口的新美系杜洛克猪多半来自美国杜洛克协会所属的著名 图1 品牌场家 国内各批次引入的原种杜洛克在血缘上有相似的 D5 猪系谱 可能 美国国内的各著名场家的某些主配公猪也有可能有一 定的亲缘关系 例如 Kobe 的后代作为名谱 可以在诸多场 家中找到 因此国内引入的原种猪在以优培优的原则下很可 能遇到温和近交选配的问题 本文就原种猪的近交选配效果 作一调查 以供各原种场家参考 1 图2 材料与方法 D711 猪系谱 注 D717 谱系同 测定材料 将 近 交 种 公 猪 D5 原 种 进 口 近 交 系 数 统计与配母猪所产活仔在生长到 8 15 kg 体重时用 fx=.625 系谱见图 1 和 D711 D717 三世代 电子笼秤称重 然后根据校正公式校正到达 1 kg 体重的 种猪 近交系数 fx=.9375 系谱见图 2 与全场同类同 时间 校正公式 校正日龄 = 测定日龄 -[ 实测体重 -1 期后裔测定性能作一对比 D5 为国外原种猪 在体重达 /CF] 其中 5 kg 左右以后进入国内某场 D711 D717 为国外 CF= 实测体重 / 测定日龄 公猪 原种猪的后代 D711 D717 公猪和全场其他类型的 CF= 实测体重 / 测定日龄 母猪 猪均经过我国传统的产房 保育和生长舍 最后到公猪舍 kg 体重活体背膘厚 产房为铸铁高床 内设加热板和保温箱 夏季利用排风机负 在测定达 1 kg 体重时间的同时测定 1 kg 体重活体 压通风和滴水降温 保育舍为铸铁高床 内设加热板 夏季 背膘厚 采用 A 超测定腰荐结合部沿背中线左侧 5 cm 处的 利用排风机负压通风 生长舍为漏缝地板 夏季利用排风机 二点膘厚平均值 即 P2 背膘 然后根据校正公式校正到 负压通风 公猪舍为水泥地面 外设运动场 夏季实行滴水 1 kg 体重的活体背膘厚 校正公式 校正背膘厚 = 实测 降温 背膘厚 CF 其中 CF=A {A+[B 实测体重 -1 } A 1.2 测定项目与方法 产仔数 B 值公猪为 母猪为 在仔猪出生时统计有遗传缺陷的头数 例如 脐疝 隐 统计与配母猪的产仔数包括死胎 木乃伊胎 初生重 统计与配母猪所产活仔的重量 逐个用弹簧秤称重 秤称重 1.2. 睾 封肛等 亡的猪数 统计分析 将近交公猪本身的性能与同期全场均值作一对比 电子笼秤称重 达 1 kg 体重的时间 体长 两耳连线的中点沿背中线至尾根的长度 7 日龄重 统计与配母猪所产活仔生长到 7 d 时的重量 逐个用 死亡率 统计与配母猪所产活仔在生长到 8 15 kg 体重时死 28 日龄重 统计与配母猪所产活仔长到 28 d 时的重量 逐个用杆 遗传缺陷 2 结果

49 表 1 近交公猪与非近交公猪后裔生长性能对比 体重 /kg 组别 窝数 28 日龄 7 日龄 表 6 近交公猪与非近交公猪体长发育情况比较 死亡 达 1 kg 体 率 /% 重的时间 /d 近交 ±.8 33.± ±7. 非近交 1 8.± ± ± 日龄 7 日龄 达 1 kg 体重的 时间 /d 3 8.1±1. 33.± ± ± ± ±11.1 组别 头数 近交 非近交 组别 头数 近交 非近交 组别 窝数 近交 11 产仔数 活产仔数 断奶数 初生重 /kg 遗传缺陷 /% 1. 非近交 ± ± ± ±..7 表 近交公猪本身与非近交公猪繁殖性能比较 头数 近交 3 产仔数 活产仔数 断奶数 1 月龄 12 月龄 3 1±1 155±9 158±9 1 15±1 15±12 159±1 窝数 近交 非近交 mm 背膘厚 /mm 6 月龄 1 月龄 12 月龄 11 12±1.8 1±1. 15± ±2. 15±2.2 15±2. 表 8 近交公猪本身与非近交公猪背膘发育情况比较 11.2±1.1 1± ± ±.3 组别 6 月龄 组别 表 3 近交公猪与非近交公猪后裔繁殖性能比较 cm 体长 /cm 表 7 近交公猪本身与非近交公猪后裔背膘发育情况比较 表 2 近交公猪本身与非近交公猪生长性能对比 体重 /kg mm 6 月龄背膘厚 / 1 月龄背膘厚 / 12 月龄背膘厚 / mm mm mm 组别 头数 近交 3 13±1.8 1±1. 15±1.5 非近交 1 12±2. 1±2.2 15±2. 能非常接近 初生重 遗传缺陷 /% 11.± ±1.6 1±1. 1.7± 非近交 ±2. 1.3± ± ±..8 表 5 表明 近交公猪后裔的体长发育与非近交公猪后裔的 体长发育非常接近 表 6 表明 近交公猪的体长发育与非近交公猪的体长发 育非常接近 表 5 近交公猪与非近交公猪后裔体长发育情况比较 组别 窝数 cm 体长 /cm 6 月龄 1 月龄 表 7 表明 近交公猪的后裔背膘发育与非近交公猪的后裔 背膘发育非常接近 表 8 表明 近交公猪的背膘发育与非近交公猪的背膘发 12 月龄 近交 11 15±9 15±8 159±8 育非常接近 非近交 1 15±12 155±11 159±12 3 讨论 从以上 8 个表格中的数据可以看出 杜洛克温和近交公 从表 1 中可以看出 近交公猪后裔性能要比非近交公猪 后裔性能稍好一点 但不存在明显差异 从表 2 中可以看出 近交公猪生产性能与非近交公猪的 生产性能没有明显差别 有 2 头近交公猪还进入了核心群 表 3 表明 近交公猪后裔的繁殖性能与非近交公猪后裔 的繁殖性能相差不多 二者非常接近 表 表明 近交公猪的繁殖性能与非近交公猪的繁殖性 猪及其后裔的生长性能 繁殖性能 体长发育 背膘发育情 况与非近交公猪及其后裔的生长性能 繁殖性能 体长发育 背膘发育情况非常接近 没有太大差别 杜洛克猪适度近交尚未构成对生产性能的严重影响 但 近交对公猪遗传性的稳定是非常有利的 因此 在遗传育种 上 在近交系数不太高的情况下 可以利用适度近交来固定 我们所选育的优良性状 5

50 左旋肉碱和维生素对公猪精液品质的影响 单 妹 王燕桃 朱才兴 黄亚平 李 (华农温氏畜牧股份有限公司 广东 新兴 冰 527 摘 要 以大白和长白成年种公猪为研究材料 研究添加左旋肉碱和维生素对公猪精液品质的影响 试验采用单 因子随机试验设计 试验1选择2头平均为18月龄的大白种公猪 按照体重 月龄随机分为2组 每组12头 饲喂期 9 d 试验2选择2头平均为18月龄的长白种公猪 按照体重 月龄随机分为2组 每组1头 饲喂期9 d 试验1结 果表明:添加左旋肉碱和维生素组公猪精液量 精子活力和精子的畸形率改善显著(P<.5) 试验2的结果表明 添加左旋肉碱和维生素组 精子密度和精子的畸形率改善显著(P<.5) 关键词 左旋肉碱 维生素 精液品质 L- 肉碱是 Krimberg 于 195 年在肌肉提取物中发现的 又称为肉毒碱 LCN 是一种类似维生素的营养物质 肉 碱有左旋 (L- 型 ) 右旋 (D- 型 ) 和混旋 (DL- 型 )3 个光 霉素 ( 产品批号为 66) BTS 稀释粉 蒸馏水等 1.3 试验时间 设预试期 2 周 预试期内所有公猪饲喂对照组基础日 学异构体 其中只有 L- 左旋肉碱有生物活性 D- 右旋和 粮 试验 1 正式期从 28 年 11 月 2 日 29 年 2 月 2 日 DL- 混旋存在毒害作用 不可与左旋肉碱混淆 L- 肉碱与 共 9 d 试验 2 正试期从 29 年 5 月 1 日 29 年 8 月 动物体内脂肪酸的代谢有关 有携带长链脂肪酸通过线粒体 1 日 共 9 d 膜的功能 长链脂肪酸只有与 L- 肉碱酯化后才能进入线粒 1. 试验设计和日粮 体内进行 β- 氧化 如果 L- 肉碱的浓度不够 将严重影响 试验设计采用随机分组法 按年龄 体重随机分成 2 细胞的能量代谢 [1] L- 肉碱还参加亮氨酸 异亮氨酸 缬氨 组 基础日粮相同 试验组在基础日粮的基础上每吨添加 酸等氨基酸代谢产物的运输 保证这些氨基酸的正常代谢 3 g 5% 的左旋肉碱和维生素 见表 1 表 2 由于公猪 近年来的研究发现 左旋肉碱在附睾中浓度很高 它同 精液生成周期约为 6 周 故饲喂 5 d 后采集的数据作试验 [2] 时具有抗氧化剂 保护精子免遭活性氧基片段 ROS 损害 表 1 饲粮组成及营养水平 的作用 [3] L- 肉碱也参与精子的成熟过程 精子中肉碱的 量与精子的存活率 精子活力和精子密度存在着正相关性 原料名称 添加量 /% 营养成分 含量 /% 肉碱能促进维生素 氨基酸等在体内有效的吸收转化 还有 玉米 粗蛋白 16.5 豆粕 2.16 赖氨酸.9 小麦麸.1 蛋氨酸.35 旋肉碱和维生素对公猪精液品质的影响 鱼粉 3 钙 1 1 豆油.28 磷.58 钙 1.52 可利用磷.1 磷酸氢钙 1.6 预混料 2 人认为在使用左旋肉碱的同时 配合增加适量的维生素 可 以促进维生素的吸收 转化和利用 从而提高精子活力 密 度和精液量 [] 本试验在大生产的基础上 研究额外添加左 材料和方法 1.1 试验动物 试验 1 选华农温氏太平猪场的成年大白种公猪为试验动 物 要求其身体健康 体重为 25 3 kg 15 2 月龄 平均 18 月龄 试验 2 选用华农温氏石望猪场的成年长白种 公猪为试验动物 要求其身体健康 体重为 25 3 kg 备注 ① 29 年 1 月 5 日根据 温氏猪用原料营养标准 的 15 2 月龄 平均 18 月龄 数据计算而得 ②预混料为公司内添加剂厂统一设计 每千克饲粮 1.2 试验试剂 提供锰 35. mg 铁 1. mg 锌 9. mg 铜 1. mg 碘.3 mg 5% 的左旋肉碱 青霉素钠 ( 产品批号为 662) 链 6 硒.3 mg ③消化能 13 kj/kg

51 表 2 每吨日粮中维生素含量 组别 VA/ 万 IU VD/ 万 IU 叶酸 /g VB1/g VB2/g VB6/g VB12/g VPP/g D- 泛酸 /g 对照组 试验组 后的数据用来分析 表 3 试验 1 公猪精液品质变化情况 1.5 饲养环境与管理 全部猪群饲养在密闭猪舍中 有风机 水帘降温 室 温保持在 28 以下 每头公猪都单栏饲养 采取自由饮水 每天两餐 每头每天 2.6 kg 全价料 每 3 d 采精 1 次 舍 内每天进行清理 消毒 按正常程序进行免疫接种 每天对 猪的精神状态 采食 饮水等情况进行观察记录 1.6 统计的指标 精液量 用电子天平称量精液 以每克 1 ml 计 精 子 活 力 检 查 用 恒 温 载 物 台 将 精 液 加 热 至 差异显著水平 P 处理 指标 公猪数 精液量 /ml 试验组 对照组 试验组 VS 对照组 ± ±1.3 精子活力 /%.3.7±.2.68±..8 密度 / 亿 /ml 2.12± ± 精子畸形率 /%.18±.9.36 a.12±.6 备注 精子活力为稀释后的活力 在 1 和 倍显微镜下观察精子 直线前进 表 试验 2 公猪精液品质变化情况 运动的精子所占的百分率即表示精子的活力 用.1 1. 这 1 个数表示 精子的密度 精子的密度指每毫升精液中所含的精子 数 用丹麦 NucleoCounter SP-1 精子密度仪测定 公猪数 精子的畸形率 伊红染色 用普通显微镜测定 精液量 /ml 1.7 数据处理 精子活力 /% 件进行方差分析 2 结果 试验 1 试验 5 d 后到试验 9 d 的结果表明 见表 3 试验组 对照组 试验组 VS 对照组 ± ± ±.5.68±.7.63 密度 / 亿 /ml 2.6± ±.1.7 精子畸形率 /%.1±.5.2 a 数据采用 Excel(23) 软件进行整理 运用 sars1. 软 P <.5 处理 指标.11±.3 备注 精子活力为稀释后的活力 与对照组相比 添加左旋肉碱和维生素的试验组 精液量和 为载体 以酰基肉碱的形式将长链脂肪从线粒体外运送到 精子的活力提高 差异显著 (P <.5) 精子的畸形率改善 膜内 促进脂肪酸的 β- 氧化 因而影响动物体内能量代 差异显著 (P <.5) 密度也有改善趋势 但效果不明显 谢的正常进行 本次两次试验的结果略有出入 是不是与 (P >.5) 猪的品种及背膘等体况有关 值得进一步研究 肉碱也是雄性动物附睾上皮的一种分泌物 有利于精 肉碱能促进维生素 氨基酸等在体内有效的吸收转化 子的成熟和储存 高浓度的肉碱是精子成熟和维持活动所 配制饲料的蛋白质中往往存在缺乏蛋氨酸和赖氨酸的问题 必须的 早期的试验表明在瘦肉型种公猪饲粮中添加 L- 而添加单体氨基酸存在不同步吸收的问题 而添加 L- 肉碱 肉毒碱能增加精液产量和活精细胞含量 [5] 王国富等 28 后能通过反馈抑制作用 进一步调节氨基酸平衡 是不是添 报道了饲喂大白公猪和长白公猪左旋肉碱 可显著提高公 加左旋肉碱后 氨基酸得到更好的平衡 维生素得到更好的 猪原精子活力和精子稀释活力 然而 Kozink 等 2 转化吸收 从而提高精液品质的原因 [6] 分别在 18 头 258 日龄和 18 头 5 日龄的种公猪饲粮中添 目前市场已有多种 L- 肉碱的饲料添加剂商品 多为预 加 5 mg L- 肉毒碱 试验结果没有发现 L- 肉毒碱对种 混剂产品 因此 在选用时应注意其有效成分和有效含量 公猪精液产量和质量有改善作用 本次试验结果表明 添 市场上的所谓纯左旋肉碱有些是不可靠的 因为混旋和右旋 加左旋肉碱和维生素有改善 但指标不统一 可能与公猪 不仅没有活性还有破坏作用 建议购买质量有保证的产品 本身的体况和遇到的环境应激不同有关 本次没有对左旋肉碱和维生素的添加量进行更细致的梯度 3 讨论 研究 其具体的添加量和效果之间的互作关系还有待下一步 左旋肉碱具有广泛的生理活性 它最重要的功能是作 研究 7

52 参考文献 [1] Fritz I B. Action of carnitine on long-chain fatty acid oxidation by liver. Am [J].Physiol : [2] Tanphaichitr V Broquist H P. Role of lysine andε-ntrimethyllysine in carnitine biosynthesis. Studies in the rat[j].biol.chem : [3] 李铮 陈国武 商学军 等. 左旋肉碱和乙酰左旋肉碱联合应 用治疗少弱精子症有效性与安全性的多中心随机对照临床研究 8 ( 附 21 例报告 ) [M]. 第十二届全国 第七届全球华人泌尿外 科学术会议论文汇编 ( 上册 ).25: [] 胡梦红 王有基. 新型水产饲料添加剂 -- 左旋肉碱 [J]. 现代 渔业信息 [5] 高玉龙 包红梅 沈政 等. 新型多功能饲料添加剂 L- 肉碱 的研究进展 [J]. 黑龙江畜牧兽医 2(1) [6] 王国富 高树新 刘明玉 等. 左旋肉碱类营养液对猪精液活 力的影响 [J]. 中国畜牧兽医 :

53 三品五元杂交商品猪配套系之构想 喻传洲 李文献 (华中农业大学动物科技学院 湖北 武汉 37 在全世界的商品猪生产中 杂交配套系已经是通用模 式 杂交猪与纯繁猪比较 除了两者都具有基因的加性 育 种值 效应 即性状本身的性能 外 前者比后者还多有基 因非加性效应 包括显性效应 即杂交优势效应 和互作效 应 在非加性效应中主要是杂交优势效应 商品猪杂交配套 系之优劣 就在于能使这 2 种效应表现之程度 在参与配套系的各系加性效应优良的基础上 在很大程 度上 参与配套的品系的数量与杂交优势呈正向关联 实践 和理论证明 五元杂交优于四元杂交 四元杂交优于三元杂交 三元杂交优于二元杂交 其重要原因可能是 配套系中涉及 猪的品系越多 商品猪群利用杂交优势的次数就越多 商品 猪群体中杂合子类型和比例越高 因此 杂交优势越明显 根据猪杂交配套系的本质 作者分析了现行国内外猪配 图1 三品五元杂交商品猪配套系构想 1 具有相同的五元杂交优势 套系的优势与问题 结合国情提出了三品五元杂交商品猪配 2 制种成本远比 PIC 低 这是因为 套系的构想 见图 1 ① PIC 的曾祖代均为合成系 为此至少需要维持 1 个 1 三品五元杂交商品猪配套系构想要点 1 在种猪场的杜洛克 长白 大白 3 个品种群体均须 建曾祖代群体 2 在曾祖代中 对于杜长大商品猪模式 应在杜洛克 以上的原种品系 ② PIC 种猪的销售一般是配套的 而本构想中的种猪 可以配套销售 也可以单系 如曾祖代中的父系 母系 销售 ③在生产祖代时 曾祖代的父系和母系作系间杂交时 和大白种猪中分别建立父系和母系 对于杜大长商品猪模 可行正反交 即父系公猪与母系母猪或父系母猪与母系公猪 式 则应在杜洛克和长白种猪中分别建立父系和母系 在第 均可选配 一母本设父系和母系 以此杂交优势保证其良好适应性和繁 殖力 在终端父本中设父系和母系 是因为它对商品猪的 遗传贡献占一半 利用其杂交优势更可提高商品猪生产效 益 第一父本不设父系和母系是为了简化杂交模式 降低 制种成本 可与长白 或大白 正反交 总之 在三品五元配套系中 种猪资源可以充分利用 降低了种猪以肥猪出售的风险 在三品五元配套系中 曾祖代和祖代都是纯种 这符合 3 曾祖代中建立核心群和非核心群 国人购买祖代猪追求 纯 的习惯 而 PIC 配套系中曾祖 核心群自繁保证曾祖代的提高和世代延续 代就是杂种 更不用说祖代之杂了 这里有一个概念需要明 5 曾祖代的非核心群父系和非核心群母系杂交得到祖代 确的是 同品种内不同品系的杂交后代仍然是纯种 故该构 6 大白 或长白 祖代父系和母系杂交的后代与长白 想中的祖代是同一个品种的曾祖代的父系和母系系间杂交 杂交生产出 2 品 3 元父母代 2 ④在生产父母代时 大白 或长白 祖代中的公母猪也 后代当然是纯种 事实上 同一品种不同品系间的杂交优势 该构想与 PIC 杂交配套系很相似 如图 2 往往比不同品种间的杂交优势更大 因为品系内往往比品种 三品五元杂交商品猪配套系构想具备的特点 内的纯合度更高 杂交亲本越纯 杂交优势越大 三品五元杂交商品猪配套系构想与 PIC 杂交配套系比 较有如下特点 该构想给国内外优良的种猪资源的利用提供了很大空 间 许多国外优良品系可以直接进入该模式中的曾祖代或 9

54 可能有人质疑 培育配套系哪能如此简单 连最基础 的杂交组合试验都没做 请质疑者注意 配套系并非神秘 作者提出的三品五元 配套系是以现在国内诸杂交模式中占优势地位的杜长大组 合为基础的 这一组合推行几十年经久不衰的事实本身就证 明杜长大是一个优秀杂交组合 顺便指出 近年来 国内某 些地区兴起野猪热 土猪热和黑猪热等 但作者认为 以杜 长大商品猪为主的模式是国人养得起 吃得起的组合 图2 PIC 配套系猪配套模式与繁育体系示意图 实际上 我们只需要将所需要选择的性状 分别交由配 套系中不同的父系和母系去完成 最后组装到商品猪群中 参与曾祖代父系和母系的合成 优良的中国猪地方品种可 即可 即使当初的杂交组合是最优的 但随着时间推移 消 参与曾祖代母系合成 在终端父本的选择上 也并非仅限 费者和生产者需求改变 对最优的杂交组合需要不断加以调 于杜洛克 皮特兰 汉普夏也在选择之列 整 作者倡导的三品五元配套系就是一个容许不断调整 不 三品五元配套系与传统的杜长大组合比较 因为参与 断优化的商品猪生产杂交配套系 调整 优化的重点应放在 杂交的品系多 利用杂交优势的次数多 商品猪的杂交优 曾祖代各系本身性状的改良提高上 因为这才是配套系效益 势只会更好不可能倒退 加之前述基于种猪资源的充分利 之基础 实无必要作那些劳民伤财 结论又不尽科学的杂交 用 制种成本不会有太多增加 因此 三品五元配套系是 组合试验之徒劳 可行的 5

55 公猪效应及其在猪繁殖中的应用 王怀禹 (南充职业技术学院 四川 南充 公猪效应是指公猪的刺激对母猪繁殖机能的影响 公 理成熟期的小母猪 突然引入公猪可使性成熟并同期化 群 猪刺激分外部和内部刺激 外部刺激包括嗅觉 触觉 视 养的 2 日龄至 7 月龄猪 比单饲的较早达到性成熟 受胎 觉和听觉刺激 内部刺激包括交配刺激和精清中某些成分 率也较高 青年母猪切除嗅球后 因不能感受公猪外激素刺 的刺激等 在猪生产中 利用 公猪效应 既可以提早青 激 而推迟了初情期 前苏联学者研究表明 公猪和青年 年母猪的初情期 又可以解决成年母猪不发情或发情缓慢 母猪定期接触 可引起母猪的外感受器兴奋 并传入大脑 问题 不但可以促进母猪多排卵 确定发情母猪交配或人 皮层和下丘脑激活腺垂体 垂体活动的增强又促进甲状腺 工授精的最佳时机 提高母猪的受胎率和窝产仔数 而且 和肾上腺机能 母猪由于和公猪接触 其性器官的发育增 还可以缩短母猪的发情 繁殖周期 对提高母猪的饲养效 强 卵巢中成熟的卵泡数量增加 每百头母猪 1 2 和 3 次 益意义极大 产仔时分别多产 6 7 和 9 头仔猪 与公猪接触的母猪对 1 公猪效应的作用机制 生产管理的应激反应较稳定 因此 培育后备母猪时 可利 在公猪求偶过程中 其颌下唾液腺分泌泡沫状唾液 用公猪的强烈生物学刺激 每次与公猪的接触时间至多为 频频排尿 成年公猪唾液和尿中含大量具有特殊气味的激 3 min 若超过上述时间 则公猪对母猪的反应和母 素 如雄烯酮 雄烯醇等 能引起发情母猪的特异性静立 猪对公猪的反应均降低 反应 公猪包皮腺分泌物也能引起发情母猪的性接受反应 2.2 公猪刺激对母猪断奶至发情间隔时间的影响 有人报道 交配前的刺激尤其是交配行为 能引起公猪外 研究表明 母猪每天与公猪接触能缩短从断奶至再次发 周血浆中雄烯酮的含量增加 与发情母猪接触后 9 min 达 情的间隔时间 提早母猪的排卵和发情 研究表明 公猪的刺 最高浓度 求偶时公猪发出的特异叫声可能有听觉刺激作 激对断奶后发情延迟的母猪 如初期母猪缩短发情间隔时间是 用 交配时部分生殖器官接触的刺激 射入精液对部分子 比较重要的 这对在生产实践中母猪发情时能及时配种也具有 宫颈 子宫和输卵管的刺激 精液中的特殊成分如雌激素 重要意义 如果不与公猪接触 则母猪产后很可能会使从断 对生殖过程也有影响 奶至排卵的间隔时间延长 在泌乳的最后 1 周接触公猪 会 公猪效应的作用机制比较复杂 其内分泌机制还不是 出现泌乳性发情 有人研究表明 如果在泌乳的最后 8 d 每 很清楚 早期的研究表明 在小母猪与公猪的接触中 嗅 天与公猪接触 1 h 可使从断奶至发情的间隔时间缩短.9 d 觉对初情期的诱导发挥作用 如果破坏小母猪的嗅觉系统 2.3 公猪刺激对母猪 LH 释放和卵泡发育的影响 则公猪效应可以完全消除 但后来的研究表明 公猪唾液 公猪能刺激母猪断奶后发情的提早开始 主要是通过刺 中的外激素 3α- 雄烯酮 5α- 雄甾酮及唾液中的其他成 激垂体释放 LH 发挥作用的 断奶后正常情况下 LH 的释放 分在公猪效应上发挥主要作用 公猪效应的嗅觉刺激可能 增加 其主要特点为 LH 释放的频率增加 但幅度较低 这 牵涉到公猪不同来源外激素的综合作用 再后来的研究表 种增加能刺激卵泡生长 断奶后 LH 的高频分泌能缩短断奶 明 公猪效应是由于多种刺激共同作用所引起的 例如小 至发情的间隔时间 反之 如果断奶后 LH 释放的频率太低 母猪身体接触的触觉刺激对外激素发挥嗅觉刺激也发挥重 则会使该时间延长 要作用 嗅觉刺激可能是由尿液中的一些不明成分及唾液 公猪的嗅觉刺激能引起中枢神经系统释放激素和神经 16- 雄烯二酮 3α- 雄烯酮和 5α- 雄甾酮等共同发挥作 肽 这些因素都参与对 LH 释放的调节 断奶后的乏情母猪 用 因此 目前普遍比较认同的观点是 各种因素可能共 在引入公猪后 3 h 其 LH 的波动频率就会增加 初情期 同作用影响公猪刺激的效率 的小母猪也有这种效果 断奶后 LH 释放频率低的母猪 如 2 果引入公猪促进 LH 的释放 可以引起卵泡迅速生长而排卵 公猪效应对母猪繁殖机能的影响 2.1 公猪刺激对青年母猪繁殖生理的影响 上述结果表明 断奶后能够产生足够量 LH 的母猪 能 饲养在有成年公猪地方的后备母猪 性成熟比隔离饲养 够出现正常的卵泡发育 因此 从断奶至发情的间隔时间较 的母猪提早 3 d 5 7 d 后出现情期高潮 进入生 短 短于 6.5 d 许多断奶后 LH 释放频率低的母猪公猪刺 51

56 激之后会启动 LH 的释放 进一步引起卵泡发育和排卵 也 影响公猪效应的主要因素是母猪年龄 如果开始接触公 存在有些母猪在公猪刺激之后不能引起足够的 LH 释放 而 猪的年龄太小 性发育可能延迟 因为在接受刺激时生理年 表现为持续性乏情 龄太小而无反应 小母猪对公猪的刺激会变得习惯 只有在 2. 公猪刺激对母猪发情表现及发情期的影响 母猪接近初情期时 公猪的刺激作用对促进母猪初情期的到 公猪刺激对母猪发情表现有一定影响 这种作用的发挥 来才明显 青年母猪应该有 2 2 周龄大小 2 周龄之 可能与嗅觉和触觉刺激有关 绝大多数母猪表现发情时 即 前的小母猪对刺激的反应很小 而 2 周龄以后的反应并无 使没有公猪存在 也可对压背刺激发生静立反应 但如果有 显著提高 公猪的嗅觉和视觉刺激 则 9% 以上的母猪会出现这种反应 由此表明 嗅觉刺激在公猪效应的发挥上具有重要作用 公猪的年龄 公猪的年龄也是影响刺激效果的关键因素之一 年幼公 如果公猪的刺激增加 则发情行为表现加强 因此 有 猪 小于 9 月龄 ) 的刺激效果很差甚至无效 一般来说 9 1 人研究 如果发情鉴定时有多个公猪刺激 则可使发情期延 月龄的公猪和大龄公猪的刺激效果没有什么差别 但是 并 长半天 公猪对发情期的影响在一定程度上可能是通过促乳 非所有这一猪龄或更大猪龄的公猪都对小母猪有同样的刺激 素发挥作用 发情时引入公猪可引起促乳素浓度升高 而发 效果 在实践中 公猪中约有 2 以下的刺激能力很差 可 情期的长度与促乳素的浓度呈正相关 应激和公猪刺激可能 以通过定期轮换公猪的方法减小这种现象产生的影响 是不同养殖场发情期长短差别很大的原因 公猪精液成分对母猪排卵的影响 与公猪接触的时间频度 青年母猪每日多次接触公猪 比低频率接触更为有 母猪在发情开始时经子宫颈输入精清可以提早排卵 研 效 每日接触 2 次或 3 次 比 1 次可得到更为有效的刺激 究发现 发情时经过子宫颈输入 1 ml 精清 可使输入精 每日接触的持续时间应根据猪群中青年母猪的数量而定 清同侧卵巢的排卵率比对侧提早 8 1 h 但对 LH 的分 Caton 等 1986 和 Paterson 等 (1989) 指 出 青 年 母 猪 泌没有明显影响 说明精清可能通过雌性生殖道局部发挥作 与公猪接触 5 l5 min/ 次足以达到效果 为获得最大的 用 对排卵提前的程度取决于发情早期注入精清的时间 而 反应 必须每日有较长的时间与公猪接触 尤其是青年母 且效果在从发情开始到排卵时间比较长的小母猪上最为明 猪群较大时 大的猪群需要接触较长的时间 使每头小母 显 在观察到发情开始后 2 h 输入精清则不再有效果 说 猪有直接接触公猪的机会 明精清不影响卵母细胞的成熟和受精过程 精清的活性成分 石旭东 23 将后备母猪达 16 日龄起每天以栏为单 为小分子质量的蛋白 位与成年公猪同栏接触 2 次 每次 15 2 min 直至初情 2.6 雄激素对卵泡发育的影响 期到来 结果表明 试验组后备母猪 18 日龄内的发情率比 雄激素 睾酮和雄烯二酮 在卵泡发育中具有重要的调 对照组提高了 25 个百分点 初情期比对照组提前 18.3 d 节作用 雄激素能刺激卵泡的发育 注射雄激素能促进卵泡 证实利用成年公猪与性成熟前的后备母猪接触 可促进后备 的提早发育 卵泡期注射雄激素能增加小母猪的排卵率 由 母猪提前达到初情期 效果明显 加拿大的研究表明 如果 于睾酮能提高排卵率和孕体的存活率 因此能增加胚胎数量 小母猪与公猪连续接触 1 d 或者每天 3 min 接触 1 d 可 3 公猪效应在猪繁殖中的应用 以明显提早初情期的出现 而且效果比用其他与公猪接触的 3.1 诱发青年母猪发情 提早初情期 方法好 澳大利亚的研究也表明 如果将与公猪的接触限 大量研究表明 将初情期前的小母猪定期与成年公猪 定于 1 d 或者连续 1 d 虽然能获得刺激效果 但要获得最 接触可提早初情期 公猪效应可使第 1 次配种 第 2 或第 好的刺激反应 必须每天都与公猪接触 德国的研究表明 3 次发情 的年龄提前数周 因此可以减少饲料消耗 生 日龄的小母猪 如果与公猪有直接身体上的接触 产实际中应用公猪效应时 可将小母猪在 16 日龄之前完 以 3 周为一个周期 连续接触或限定接触时间 在诱导初情 全与公猪的视线 声音和气味等隔离 从 16 日龄开始通 期的开始上效果比只与公猪隔圈接触要好 过改变环境而与性成熟的公猪接触 这样可使其提早表现 3.1. 发情 然而 许多养猪者很难使公猪刺激充分发挥其效力 公猪的性欲 公猪的性欲对公猪效应的效率也有明显的影响 性欲低 原因通常是实施方法不当 因为有效的接触不仅仅是将小 的公猪对青年母猪的刺激比性欲高的公猪差 因此 与青年 母猪与公猪放在一起就万事大吉了 充分发挥公猪效应的 母猪接触的成年公猪的性欲要好 效率取决于以下几个方面的因素 青年母猪的年龄 公母猪的饲养方式 同时将公猪和母猪饲养于同栋猪舍并不是最好的方法

57 表 1 不同公猪刺激因子对母猪发情时站立反应的影响效果 乏情即不发情 一般指青年母猪 6 8 个月 或经产母 猪断奶后 1 15 d 后仍不发情 其卵巢仍处于相对静止状 刺激因子 静立反射 人工压背 8 人工压背 + 公猪声音 7 效应 因此 防治母猪乏情对于提高母猪正常的繁殖力和养 人工压背 + 公猪气味 8 猪的经济效益意义极大 在实际生产中 可利用公猪效应进 人工压背 + 声音 + 气味 + 视觉 97 行辅助治疗 与公猪的物理接触 1 态的一种生理现象 在养猪生产中 乏情会降低母猪的年产 胎次 降低母猪的利用率 增加养猪成本 影响养猪的经济 诱导发情 后备母猪应在初情期到来之前的 1 个月 每 5 头猪 特别是不可以用养在隔壁栏的公猪来侦测青年母猪发情 这 组成一个小群进行饲养 后备母猪从 5.5 月龄开始与空怀母 是因为青年母猪太熟悉这公猪的气味以致效果不佳 母猪初 猪一起每天用试情公猪试情 2 次 通过公猪的气味 声音及 情期前与发情周期的成熟母猪一起圈养对初情期的到来也 与其接触刺激母猪的性腺发育 促进卵泡发育和发情表现 有影响 单独圈养的母猪比合群圈养的到达初情期晚 因此 此法简便易行 是一项有效的措施 应改善小母猪的房舍 任何时候 只要有可能 处于初情期 前后的小母猪都应实行群养 每群 头 ) 每头的占 种公猪气味 外激素 刺激法 成年公猪的尿液 包皮液 唾液 泡沫 精液中均含 地面积至少应为 1.5 m2 最好应达到每头 2 m2 有丰富外激素 这些外激素能够刺激母猪的性腺发育和发情 3.2 用于母猪发情鉴定及预测排卵 表现 试用方法 将成年公猪的尿液 包皮液 唾液或精液 母猪的 静立反射 是母猪发情的重要标志 而发情母 注入小瓶中 并加入抗生素以延长保存期 在低温下保存 猪出现 静立反射 的比率与试情公猪的接触程度有直接关 每天 1 次将其喷入乏情母猪的鼻孔中少量 每头母猪喷入量 系 见表 1 试验结果表明 无公猪存在时 母猪多不出 约合鲜精 2 ml 以刺激鼻中受体 促进母猪发情 现静立反应 但只要有与公猪有关的因子存在时 母猪出现 种公猪调情法 静立反应的比例会大大增加 最为重要的刺激是交配时公猪 将不发情母猪组成小群 每日上午和下午 将公猪驱赶 的声音 以及来自于公猪包皮腺及唾液腺的性气味 一般情 沿母猪头部走廊走动 或将公猪赶入母猪群内 每天用试情 况下 只有公猪的刺激达到最大程度时母猪才表现完整的发 公猪追爬调情 每次 2 min 左右 通过异性刺激 爬跨刺 情行为 如果公猪的刺激较低 则发情行为会受到抑制 因 激来促进母猪发情 此时需有人旁边看护 此在母猪发情鉴定中 应使母猪与试情公猪直接物理接触 3.3. 母猪对不同的公猪的反应是不相同的 每天反复接触不同的 成熟公猪 可使这种 公猪效应 达到最大 强制输精法 种公猪的精液中含有多种生殖激素 将公猪的精液输 入到不发情母猪的阴道内 能够促进黄体的退化和卵泡的 猪的受精效果在很大程度上取决于输精与排卵的间隔 发育 使母猪表现发情 具体方法是 将 5 ml 未经稀 时间 大量的研究表明 如果用高质量的精液在排卵前 释 鲜精液加入氯前列烯醇.1 mg+ 青霉素 8 万 IU+ 链霉素 12 h 输精 一般可获得较高的受精率 因此 为了提 5 万 IU 装入精液瓶中 用一次性输精导管缓缓将其输入到 高在有限的时间内输精的受精率 最为重要的是预测排卵的 母猪的子宫颈内 输完后 15 min 内注意不要让母猪卧下 以 时间 母猪在接近排卵时 体温 阴道温度 阴道黏液的导 防止倒流 一般输入后 7 d 之内母猪发情 可安排正常配种 电率等均与排卵的直接关系不是很密切 也与站立发情开始 用公猪精液诱导母猪发情 方法简单 实用 效果好 一般情 的时间关系不大 虽然各品种猪对公猪刺激发生站立反应的 况下 采用此法后母猪发情率高达 1% 受胎率可达 85% 时间与排卵之间间隔的时间差别不大 一般为 35 8 h 3. 用于增强人工授精的效果 但个体之间排卵的时间可在发情开始后 1 85 h 如果鉴 仿生法输配是现代猪人工授精中一项重要的技术措施 定发情时无公猪存在而采用压背法试验 则这种关系更差 就是模仿自然状态下公母猪交配的情景 状态 加强对母猪 大量的研究表明 如果有公猪存在的情况下用压背法 的刺激 诱导母猪正常排卵和主动接纳精液 从而达到提高 进行发情鉴定 排卵一般发生在整个发情期的 2/3 阶段 受胎率和窝产仔数的目的 每次开始进行人工输配时 都要 因此 猪场可根据发情的持续时间以及断奶至发情的间隔 有公猪在场 公猪一般位于有栏杆的开放式圈舍前端 口鼻 时间与发情持续时间的关系预测发情开始后的排卵时间 和母猪接触 最好选择性欲旺盛的公猪 这样可增加对母猪 3.3 治疗母猪乏情 的刺激 提高授精效果 53

58 猪排卵数性状研究进展 黄 涛 李大全 孙敬礼 赵志超 (石河子大学动物科技学院 新疆 石河子 832 摘要 排卵数是窝产仔数的第一个决定因素 在育种实践中对排卵数进行选择可以提高母猪的繁殖力 目前 在 号等染色体上都有猪排卵数性状的QTL定位 但主效基因研究较少 高排卵数品系和低 排卵数品系之间的卵泡发育动力学差异可能是其排卵数差异的原因 对其差异表达基因进行研究将能为阐明 高猪繁殖力的机理提供新的途径 关键词 排卵数 猪 数量性状位点 基因 卵泡发育动力学 猪的繁殖力是影响养猪业生产效益的主要因素 对猪 产仔数性状的选育和改良是猪育种工作的主要目标之一 SSC8 检测到排卵数或黄体数 QTL Sato 等 [8] 用一个梅山猪和杜洛克猪组建的参考家系 由于猪繁殖性状是由多基因控制的数量性状且遗传力很低 在 猪 SSC3 上 的 SW72 和 SWR1637 之 间 发 现 一 个 黄 体.1 h2.15 因此很难通过常规育种技术取得进 数 QTL 此前 Rohrer 等也用一个梅山和大白参考家系在 一步提高 从生殖的角度来说 排卵数是窝产仔数的第一 SSC3 相同区域也发现了排卵数 QTL 个决定因素 决定了产仔数的上限 对排卵数进行选择可 Cassady 等 [9] 发现 9 号染色体上的 SW21 附近有排卵 能是提高猪繁殖力的有效途径 本文对猪排卵数性状的选 数 QTL 估计显性效应为 1.16 个排卵数 Holl 等 [1] 也在 择进展 高排卵数母猪与低排卵数母猪的卵泡发育动力学 9 号染色体上检测到有排卵数 QTL 另外在 差异 猪排卵数性状的 QTL 定位和相关基因研究 卵泡发 15 号染色体上也有控制排卵率的 QTL[11] 育重要阶段的基因差异表达等方面的研究进展进行综述 1 不同研究者得到的 QTL 定位结果不同可能与各研究小 猪排卵数性状选择进展 组所使用的资源群不同有关 同时也证明了排卵数是多基因 Johnson 等 控制的数量性状 [1] 对母猪排卵数进行了 1 代的指数选择 使排卵数提高了 7. 个 产活仔数提高了 1. 头 Petry 等 [2] 卵泡刺激素 β 亚基 (FSHβ) 在卵泡发育过程中发挥 对 Nebraska Index line (I) 猪群的排卵数和存活率进行了 重要作用 其不同基因型对窝产仔数有较大影响 是产 19 代的指数选择 使总产仔数和产活仔数分别提高了 3.53 仔数的重要候选基因, 可能也是排卵数的候选基因 但 和 2.53 头 Rosendo 等 FSHβ 基因位于 2 号染色体 并不在上述排卵数 QTL 所 [3] 对大白猪的排卵数和胚胎存活 率进行指数选择也获得了一定的遗传进展 这些研究表明 对排卵数进行选择可以提高母猪的产仔数 在的染色体上 Campbell 等在猪 SSC8p 的排卵数 QTL 区域获得一个 但排卵数的直接测定却非常困难 因而对该性状的 候 选 基 因 mannosidase 2B2 (MAN2B2) 发 现 c.157a>g QTL 定位和基因筛选工作一直是动物遗传学家研究的重点 多态性对排卵数有显著影响 其中 A 等位基因的加性效应 内容 为 -.89 个卵子 2 现有的研究虽能解释控制产仔数的部分遗传效应但还 猪排卵数性状的QTL定位和相关基因研究 Wilkie 等 [] 首先发现在猪 8 号染色体上存在控制排卵率 不能阐明造成排卵数差异的原因与分子机理 因而需要一些 的 QTL, 对排卵数的加性效应 ( 偏离各纯合子均数的值 ) 达 新的途径来发掘排卵数相关基因 +3.7 个卵 之后 Rathje 等 [5] 和 Rohrer 等的研究也证实了 这一结果 Rathje 等还将该 QTL 定位在和标记 sw79 相 3 高排卵数母猪与低排卵数母猪的卵泡发育动 力学差异 距 3cm 的区域内 Wilkie 等认为 该 QTL 位于 8 号染色体 在哺乳动物正常发情周期中一个卵子排出要经历下列过 靠近着丝点的区域 Rathje 等和 Rohrer 等 [6] 则分别定位于 8 号染色体长臂和短臂的端粒末段 此后 Campbell 等 5 [7] 也在 程 : 募集 选择 优势化 周转或排卵 猪的卵泡募集发生 在发情周期的第 1 16 天或断奶后不久 而选择发生在第

59 16 2 d 在第 16 天 在两个卵巢中各有 5 个直径 了一个比对照组排卵数多 6.7 个的高排卵数品系 用含有 2 6 mm 的有腔卵泡 这些卵泡大部分经闭锁过程退化并 68 个探针的基因芯片研究卵泡期 2 6 d 在指数选择系 从卵巢上消失 只有小部分被选择发育成熟排卵 选择的过 与对照系母猪卵巢和卵泡组织间差异表达的基因 分析鉴定 程持续到邻近排卵时才停止 最终排卵的卵泡数决定于募集 了 88 和 7 个特有的探针 代表 71 和 59 个特异基因 分别 的卵泡数和被募集卵泡持续生长 避免闭锁的能力 在两个品系卵巢和卵泡间差异表达 [18] 另一项研究用差异 有的研究者认为高产母猪的高排卵数可能是因为其能 够募集更多的卵泡 [12] 但更多证据表明高产母猪的排卵数 优势与卵泡期起始阶段更多的卵泡无关, 增加的排卵数是由 显示技术研究指数选择系与对照系母猪卵巢和卵泡组织组 织间差异表达的基因 分离鉴定了 8 个基因 以人基因芯 片研究发现 21 个表达差异显著的基因 于高排卵数母猪与低排卵数母猪的卵泡发育动力学存在差 高产的中国地方猪种与西方猪种母猪在排卵数和卵泡 异 高排卵数母猪卵泡期选择时段的延长产生了较多的卵泡 发育动力学上均有显著的差异 是研究猪繁殖力遗传基础最 数 佳的模型 但目前关于中国地方猪与西方瘦肉型猪种母猪卵 [13-15] 发 现 WL-2 系 对 排 卵 数 和 出 生 前 存 活 巢和卵泡组织间差异表达基因的研究还未见报道 mrna 率进行选择 母猪在卵泡期中后段维持一个更大的中等 Yen 等 差异显示 抑制性消减杂交方法 基因芯片 实时定量 mm 卵泡库 且其保持持续发育排卵的潜力由 PCR 高通量测序技术和其他一些分离 研究基因差异表 WL-1 随机选择对照系 的 3 d 延长至 d 认为 WL-2 达的方法的出现 给揭示中外猪品种间差异的遗传基础带来 母猪获得的排卵数优势源于卵泡期第 天雌激素活性卵泡数 了希望和活力 有助于深入探讨卵巢 卵泡生理和生殖数量 量的优势 Vatzias 等也发现指数选择系 对排卵数和妊娠 遗传控制的潜在途径 5 d 胚胎数进行选择 母猪在卵泡期中后段维持更多的直 参考文献 径为 mm 的雌激素活性卵泡 并持续从中选择和发 [1] Johnson R K,Nielsen M K and Casey D S. Responses 育成熟至排卵卵泡 法国高产母猪和普通大白猪在排卵卵泡 in ovulation rate, embryonal survival,and litter traits 的生长模式上也有差异 因为在卵泡期第 3 天两种猪的所有 in swine to 1 generations of selection to increase litter 排卵卵泡都很明显 但在第 3 天到第 5 天 高产母猪又发育 size[j]. Anim. Sci : [16] 出另外 7 个排卵卵泡 Miller 等 [17] 认为在发情周期第 19 天 [2] Petry D B,Johnson R K.Responses to 19 generations of litter 梅山母猪有更多的排卵卵泡数 梅山和大白分别为 29. 个 size selection in the Nebraska Index line.i. 和 17.7 个 是因为梅山母猪在卵泡期维持了大量的卵泡数 responses estimated in pure line and crossbred litters[j]. 而大白杂种猪的卵泡数量在第 天却在下降 Anim. Sci. 2 82:1-16. Reproductive 可见 高排卵数母猪与低排卵数母猪的排卵数差异源于 [3] Rosendo A,T Druet,et al.direct responses to six generations 其卵泡发育动力学差异 高排卵数母猪在卵泡期中后段可以 of selection for ovulation rate or prenatal survival in Large 维持一个更大的中等卵泡库 其卵泡期选择时段延长并产生 White pigs[j]. Anim.Sci. 27,85: 的更多的排卵前卵泡 [] Wilkie P J,A A Paszek,et al.scan of eight porcine 卵泡发育重要阶段的基因差异表达 chromosomes for growth, carcass and reproductive 正常卵巢生命周期中单个的阶段是高度同步和精巧的 traits reveals two likely quantitative trait loci[j]. Anim. 基因表达的层叠 高排卵数品系的排卵优势是在发情周期中 Genet.1996, 27(Suppl.2): 卵泡期阶段卵泡成熟的动态变化的结果 卵泡与卵子成熟的 [5] Rathje T A,G A Rohrer,R K Johnson. Evidence for 调控是一个非常复杂的多因子调节的过程, 需要特定的基因 quantitative trait loci affecting ovulation rate in pigs[j]. 在特定的时期准确地表达 Anim.Sci 转录组方法能够通过研究与卵泡生成有关基因的表达 [6] Rohrer,G A,J J Ford,et al. Christenson.Identification of 来挖掘参与这些过程的基因 研究处于卵泡发育重要时期不 quantitative trait loci affecting female reproductive traits 同猪种卵泡中差异表达的基因将能发现一些在卵泡和卵子 in a multigeneration Meishan-White composite swine 生长发育过程中起重要作用的基因和造成排卵数差异的基 因 这些排卵特异基因有助于更好地理解排卵的分子机制 有助于发展新的途径以提高繁殖力和繁殖控制 Nebraska 大学经长期对排卵性状进行指数选择获得 population[j].anim.sci.1999,77: [7] Campbell E M G,Nonneman D,G A Rohrer.Fine mapping a quantitative trait locus affecting ovulation rate in swine on chromosome 8[J].Anim. Sci.23 81:

60 [8] Sato S,Atsuji K,et al.identification of quantitative [1] Driancourt M A,M.Terqui.Follicular growth and trait loci affecting corpora lutea and number of teats maturation in hyperprolific and large white sows[j].anim. in a Meishan x Duroc F2 resource population[j].anim Sci : Sci.26 8: [15] Yen H W.Follicular development,maturation and atresia [9] Cassady J P,R K Johnson,et al.identification of during the estrous cycle in gilts expressing high and quantitative trait loci affecting reproduction in pigs[j]. low ovulation rates. Ph[D].Dissertation,University of Anim. Sci : Nebraska, Lincoln,NE,1999. [1]Holl J W,J P Cassady,et al.a genome scan for [16] Yen H W,Ford J J,et al.follicular development and quantitative trait loci and imprinted regions affecting maturation in gilts selected for an index of high reproduction in pigs [J]. Anim. Sci.2 82: ovulation rate and high prenatal survival[j].anim. [11] 王鲜萍. 猪繁殖性状主基因和ＱＴＬ研究进展 [J]. 遗传育 种,26,(3): Sci.25 83: [17] Miller A T,Picton H M,et al.follicle Dynamics and [12] F o x c r o f t G R, H u n t e r M G. B a s i c p h y s i o l o g y o f Aromatase Activity in High-Ovulating Meishan Sows follicular maturation in the pig[j].j Reprod Fertil and in Large-White Hybrid Contemporaries[J].Biology of Suppl,1985,33:1-19. reproduction, , [13] Vatzias,G,C H Naber,D R Zimmerman.Pattern of [18]Alexandre R C,Rodger K.Johnson,et al.microarray follicular development and atresia differ between gilts Profiling for Differential Gene Expression in Ovaries and selected for high ovulation rate and control line gilts[j]. Ovarian Follicles of Pigs Selected for Increased Ovulation Anim.Sci 71(Suppl. 1), 1993, 69. Rate[J].Genetics,2,168:

61 美国原种猪在粤西地区的繁育试验初报 黄如渠1 2 卢荣洲1 贺佳伟2 才永娟2 杨峰松1 钟日聪1 (1.广东省湛江农垦畜牧有限公司 广东 湛江 湛江广垦沃而多原种猪有限公司 广东 湛江 5238 摘 要 湛江农垦从美国引进新美系杜洛克 大约克 长白种猪 通过近2年的繁育试验 一代种猪初生均重达 1.7 kg 28日龄断奶均重9.3 kg 77日龄转群均重35.5 kg 分别比原来提高21.%.3 kg 2% 1.8 kg 31.5% 8.5 kg 校正至1 kg日龄平均为16 d 比原来缩短1多天 该场繁育出来第1代新美系种猪最好指标为 28日 龄断奶重最大的个体达16 kg 77日龄达5 kg 至1kg日龄为131 d 实践证明 新美系种猪在炎热的粤西地区仍 然能够发挥其优秀遗传性能 关键词 粤西地区 湛江农垦 引进 新美系种猪 繁育试验 湛江地处我国大陆最南端的雷州半岛 属于亚热带 区 域 年 均 温 度 23.2 绝 对 最 高 气 温 39 最 低 2. 每年有半年以上白天温度在 28 以上 属典型的 长夏短冬地区 28 年 3 月 湛江农垦畜牧公司与美国著 名 Waldo 种猪场合资建设的广垦沃而多原种猪场建成投入 使用 从美国 Waldo 农场引进 3 头新美系杜洛克 大 约克 长白种猪 种猪在广州国家定点检疫隔离场隔离一 个月后运回猪场 经注射猪瘟 口蹄疫 伪狂犬 细小病 毒 乙脑病毒等疫苗后 当年 5 月初开始配种 至 21 年 6 月 共繁育出原种一代种猪 6 多头 一代种猪初 图 1 广垦沃而多美系杜洛克超级猪 28 日龄断奶重达 16kg 生均重达 1.7 kg 28 日龄断奶均重 9.3 kg 77 日龄转群 均重 35.5 kg 分别比原来提高分别提高 21.%.3 kg 饲养 头公猪每周至少采精 次 以满足本场需要和 2% 1.8 kg 31.5% 8.5 kg 校 正 至 1 kg 日 龄 对外销售是一项必须高效率才能完成的工作 与后备小公猪 平均为 16 d 比原来缩短 1 多天 从本场繁育出来第 1 建立相互信赖的人畜关系 是高效率完成大量采精工作的前 代新美系种猪最好指标为 28 日龄断奶重最大的个体达 提 在 6 7 月龄应通过饲喂 清粪的时机来与小公猪交 16 kg 图 1 77 日龄达 5 kg 至 1 kg 日龄为 131 d 流 7.5 月龄开始调教后备公猪采精工作 采精员这时应发 29 年 6 月 经农业部种猪测定中心 广州 测定 杜洛 出固定的命令口令让其渐渐熟悉口令 调教具体方法 可先 克公猪生长性能指数达 kg 饲料报酬为 从性欲好的开始调教 让其他公猪在隔壁观察 在晴朗早晨 充分显现了新美系种猪的优秀遗传性能 21 进行调教 每次调教 15 min 左右 时间过长公猪会失去兴 年 6 月 在农业部种猪质量监督检验测试中心和广东养猪 趣 在此期间采精员需要耐心 禁止打骂公猪 另外采精时 行业协会共同举办的首届健康养猪技术大赛中 广垦沃而 要保证环境尽量安静 对于性欲差的可将发情母猪尿液 其 多猪群健康指数达到 获得本次大赛一等奖 充分 他公猪副性腺分泌物放在假母猪台上 采精前用抹布 放在 印证广垦沃而多种猪不但具有优秀生长性能 而且具有非.1% 高锰酸钾溶液浸泡后晾干 擦拭公猪包皮内尿液 后 常高的健康度 现将本场引进新美系种猪饲养 繁育试验 备公猪 7.5 月龄前每日保证 2.5 kg 采食量 采精公猪日采 报告如下 供同行参考 食量保证 3 kg 此外 美国资深育种专家 Socha 博士建议 1 为新引进美系种猪 量身定做 饲养管理方案 在保持良好体况下美系杜洛克公猪可比大白 长白公猪每日 1.1 引进种猪的管理 规范公猪采精和饲养管理制度 少喂.25 kg 适时配种 57

62 表 1 妊娠和泌乳母猪饲喂方式比较 后备母猪 6 月龄之前不要限饲 12 kg 之后按 2.5 kg/ d 饲喂 以保持每天.5 kg 的增重 并加强运动 月龄体重达 kg 配种 这样做是为保证后备母猪 有一个发育较完善的消化系统和宽大骨盆 另外查情时多接 触并按压其背部有利于母猪发情 提供与美系杜洛克相匹配的妊娠采食量 与传统的妊娠母猪采食量提供方法不同 表 1 美系 新美系种猪饲喂方式 饲喂时间 /d 阶 段 配种期 d 而攻胎期相对较短 一般 7 9 d 妊 娠 在保证日粮的消化能和蛋白质含量能满足需要的前提 下 还要保证氨基酸 维生素 矿物质平衡 美系杜洛克由 于生长速度较快 日粮中的钙 磷含量要比其他品种猪高一 些 才能更好发挥美系杜洛克的优秀遗传性能 以下是广垦 沃而多育种总监 Socha 博士提供的美系杜洛克母猪哺乳和 1 kg 配种 妊娠中期 妊娠后期 产前 7 d 分娩 哺乳期 21 或 以上 空怀期 断奶 配种 断奶至配种 表 2 哺乳和妊娠期日粮配方 原料 哺乳期饲粮 /% 妊娠期饲粮 /% 玉米 豆粕 /6.5%Pro 磷酸二氢钙 21%P 石粉 赖氨酸 食盐 预混料 主要为维生素和矿物质 合计 1 1 甚至不发情 母猪采食量下降 产程长 奶水质量差等等 由于本场配备有湿帘降温系统和负压通风系统 能够有效 降低舍温 并保证舍内空气清新 为猪群提供舒适的生活 kg 自由采食 每天增加 2 3 kg 直至 哺乳期 自由采食 大约 7 8 kg 由于美系猪对热应激非常敏感 在炎热的夏天 如果 环境 后备种猪 喂料量 /kg/ 头 d 妊娠前期 分娩当天 1.3 加强种母猪的饲养管理 加强猪舍降温 为猪群提供舒适环境 大的影响 主要表现在公猪精液质量下降 母猪发情推迟 饲喂时间 /d 阶 段 2 妊娠期日粮配方 表 2 和生长育成期配方 表 3 猪舍没有很好的降温设施 对种公猪 母猪的性能都有很 喂料量 /kg/ 头 d 后备 12 kg 以前 自由采食 种猪 12 kg 配种 2.5 杜洛克怀孕 3 3 d 需要相对较大的采食量 kg/ 1.2 为猪群提供全面均衡营养 传统饲喂方式 加强运动 营养成分含量 由于美系杜洛克体型较大 应适当加强运动 建议配种 至怀孕前 d 定位栏饲养 1 d 到预产期之前的 7 d 和断 赖氨酸 /% 奶母猪至断奶发情放都在大栏饲养 每栏 5 头 每头 蛋白质 / m2 要注意的是分栏时要按体况 大小并栏 并 钙 / 1..9 磷 /.9.8 蛋氨酸 + 胱氨酸 /.7.2 食盐 /.5.5 留意每头猪的秉性 增加采食量 促进泌乳 产前产后母猪日粮中加柠檬酸 小苏打, 帮助母猪尽快 恢复采食 产后 1 周要保证 5.5 kg 以上的采食量 ) 为仔猪 提供充足的奶水 伤性乳房炎 抓好接产工作 产前对产床清洗 消毒 并对母猪乳房 后躯及腿内侧 合理确定母猪带仔数 根据母猪的泌乳能力来决定带仔头数 通过合理的寄 的粪便清洗后用.1% 高锰酸钾消毒 助产时应减少产道 养来保证优秀的断奶重 外阴损伤 产后用中药冲洗液清洗产道 消除炎症使母猪尽 快恢复 新生仔猪剪牙 提供一个安静 卫生 舒适的小环境 分娩舍最佳温度是 湿度则在 65% 75% 之间较为适宜 为此 分娩后必须在仔猪活动区域保温箱内 给新生仔猪剪牙时 断面要剪平整 但不伤牙龈 目 挂上保温灯 最好在保温区垫上麻袋 以吸引小猪离开母猪 的是防止其互相争斗奶头时咬伤哺乳母猪奶头 从而减少外 身边 还有值得注意的发现仔猪大部分在保温区外休息时要 58

63 表 3 生长育肥阶段日粮配方 原料 冬季应当使用红外线保温灯 电热板 暖气等保温措施 生长第Ⅰ阶段 生长第Ⅱ阶段 肥育阶段 2 2 kg /% 2 7 kg /% 7 11 kg /% 保证舍内温度在 27 以上 栏内 3 以上 并杜绝贼风 降低湿度 6% 75% 减少冲洗栏舍次数 舍内应无湿 玉米 冷感觉 豆粕 /6% Pro 脂肪 磷酸二氢钙 /21%P 石粉 /38%Ca L 赖氨酸盐酸盐 DL 蛋氨酸.3.. 食盐 维生素矿物质预混料 总计 及早分栏饲养 及时根据性别 体况对断奶仔猪进行分栏, 要注意减少 并窝次数 降低打架次数 1.. 创造一个干燥 洁净 适温的保育仔猪的生 长环境 周龄仔猪的生长环境适宜温度为 28, 以每周降低 1 2 直到 21 为止 注意保持舍内地面清洁 干燥 夏季加强通风 及时撤掉垫板 1..5 降低舍内氨气浓度 降低饲养密度 每栏 15 头 加大通风 对粪便每天 清理 2 次 采用优质断奶仔猪料 消化率高 标准营养水平 把保温灯关掉 避免仔猪被母猪压死 要注意日夜温差 天 1..6 气凉时 下班前挂上保温灯 舍温超过 28 时实施降温措 加强育成期的饲养管理 减少环境应激 施 ( 实施滴水降温的 水的流速不得超过 3 L/h 滴水频率 6 月龄前采取自由采食每日添加饲料 6 次 避免抢 一般情况下每 3 分钟给母猪滴水 1 2 分钟 如通风条件 食应激 南方春秋两季日夜温差较大 注意天气变化通风与 好或干燥天气 每 15 分钟滴水 1 2 分钟 水珠滴在母猪 保温的关系要处理得当 夏季要防暑降温中午安排喷雾降 的颈部或肩膀上 要绝对确保没有水花溅到仔猪身上 ) 正 温 另外坚持公 母分栏饲养 方便管理 确处理好母猪和哺乳仔猪对温度要求不同的问题 以免影响 仔猪和母猪的健康 减少噪音应激 解决爬跨问题 随着育成猪体重日渐增加 互相爬跨致残导致猪群种用 率下降 平时要加强这方面的管理 发现爬跨现象要及时阻止 对于引进美系种猪的猪场通过生产实践避免噪音应激 经过采取以上各项管理措施 本场生长性能优秀的 是提供优质断奶仔猪重要的管理环节 一个安静的分娩环 美系种猪的各项生长性能指标已经达到 21 日龄断奶重 境 哺乳环境和生长环境是至关重要的 首先工作人员在 7.5kg 6 日 龄 重 27 kg 1 日 龄 重 59 kg 15 舍内进行生产劳动时 减少突然声响及噪音 并减少不必 日 龄 重 15 kg 本 场 29 年 第 1 批 测 定 5 月 龄 体 重 要的入舍 生人禁止进入舍内 其次哺乳仔猪注射疫苗时 最好成绩 个体 公猪 15 日龄体重 12 kg 校正为达到 应 一人保定 一人注射 尽量避免对仔猪的惊吓 1 kg 体重为 131 日龄 已选定为第 1 批自留后备公猪 1. 2 合理做好保育 育成饲养管理措施 1..1 抓好断奶仔猪第 1 周的管理 种猪繁育选育管理 2.1 测定和记录性状 断奶第 1 周的仔猪容易产生诸多应激 管理不当将会造 本场种猪测定评估全部与美国现行测定标准与方法一 成仔猪健康水平下降 甚至出现体重负增长 对断奶仔猪的 致 必测性状有 6 个 1 达 1kg 体重日龄 2 达 1kg 精心管理 细心照顾是非常必要的 首先减少断奶应激 断 体重的活体背膘厚 3 眼肌厚度 产活仔数 5 总产 奶当天仔猪不转群在原产床停留 3 d 并在料槽内提供电解 仔数 6 断奶窝重 备选测定性状 11 个 1 21 日龄窝重 多维水 其次减少食物由母乳过渡到饲料带来的应激 断奶 2 产仔间隔 3 初产日龄 平均日增重 5 饲料转化 后 1 2 d 内让仔猪吃半饱 断奶后 5 d 内可将哺乳仔 率 6 达 5kg 体重日龄 7 后腿比例 8 肌肉 PH 值 9 猪料加水拌成湿料给其采食 在垫板上撒少量哺乳仔猪料 肌肉颜色 1 肌肉滴水损失 11 肌间脂肪大理石纹分布等 让仔猪抢食促进其食欲 5 次 /d 饮水中添加柠檬酸 2.2 测定与记录方法 测定 1 kg/t 保健 1..2 做好保暖工作 做好保温工作选用优质光滑 洁净 干燥的木质垫板, kg 体重猪的终末测定 在 85 15kg 时进行空腹称重 由育种软件校正为 59

64 1kg 时日龄 5 kg 测定方法参照 8 15kg 的测定 2 背膘和眼肌厚度测定 受测猪体重为 8 1kg 时 使用 B 超扫描测定倒数 第 3 肋骨间距背中线 5cm 处的背膘厚和眼肌厚度或眼肌 面积 = 眼肌厚度 cm 眼肌宽度 cm.7 为保 证瘦肉率指标的真实性 背膘厚和眼肌厚测定缺一不可 3 胴体品质测定 选测 受测猪体重为 1kg 时 停食 2 h 后称重屠宰 测定 其屠宰率 眼肌面积 后腿比例等胴体性能 肌肉品质 选测 参照全国遗传评估性状测定规程进行测定 重视劣质肉 图 2 美国著名育种专家 Socha 博士在广垦沃而多指导种猪测定选育 PSE 和 DED 及应激敏感基因的出现 a. 肌肉 ph 值 在屠宰后 5 6 min 内测定 采用 本场运用美国先进的 Herdsman 育种软件对现场测定 ph 计 将探头插入倒数第 3 肋间处的眼肌内 待读数 数据进行处理 获得终端父系育种值和母系指数 为种猪 稳定 5 秒以上 记录 ph 值 下一代选育和加快遗传进展提供依据 b. 肌肉颜色 在屠宰后 5 6min 内测定 以倒数 2. 引进现代的选种理念, 确保后备猪拥有优秀的遗 c. 滴水损失 在屠宰后 5 6 min 内 取 样 切 取 倒 传性能 现在我国在种猪选育上还处于个体选择的初级阶 数第 3 肋间处眼肌 将肉样切成 2cm 厚的肉片 修长 段 但目前的个体选择不仅对于小群体育种有相当的 5cm 宽 3cm 的长条 称重后用细铁丝钩住肉条的一端 使 重要意义 而且可以将有关测定参数纳入将来的联合 肌纤维垂直向下 悬挂于塑料袋中 肉样不得与塑料袋壁接 育种的 GBS 或 Herdsman 软件 这样就要求育种技 触 扎紧袋口后吊挂于冰箱内 在 条件下保持 2 h 术员准确测定和判定待定后备公 母猪遗传素质 选 取出肉条称重 按下式计算结果 种需要我们关注以下内容 第 3 肋间处眼肌横切面用 5 分制目测对比法评定 滴水损失 1% = 吊挂前肉条重 - 吊挂后肉条重 / 吊挂前肉条重 1% 2..1 测定初生重 旧美系进口杜洛克初生重为 1.7 kg 初产 和 1.8 kg 经 d. 大理石纹 以倒数第 3 肋间处眼肌为代表 用 5 产 新美系的杜洛克初生重 kg 也不稀罕 初生 分制目测 对比法对一块肌肉范围内可见脂肪的分布情况进 重大是向体大快长方向育种的必然结果 优秀种公猪后代的 行评定 初生重往往落在 kg 之间 为保证种猪测定结果的一致性 提高基础数据的可靠 性 项目的组织单位将逐步为参加单位统一配置测定仪器 日龄初选 28 日龄断奶重在 kg 身高体长无单睾 隐 统一培训 并组织有关专家对场内测定数据和录入进行初 睾 毛色符合本品种特点 金黄 大红 棕红 棕 深棕 接 步评价 剔除无效数据 近黑色 此毛色在初生时带条状斑纹 都属正常 测定记录与数据录入 为遗传评估提供原始数据信息 关系到估计育种值的真 77 日龄选种 选择 77 日龄体重在 37 kg 以上的个体 骨架高大 身 实性 要确保场名 品种等基本情况记录齐全 系谱 耳号 材修长伸展而无厚重之感 将有疝气 包皮过大 耳血肿 日期 性状性能 疫病处理等现场记录及时 全面 字迹清 蹄匣过长 两蹄叶大小不一 母猪阴户异常的个体淘汰 晰工整 准确无误 减少或避免数据录入误差 有效数字的 2.. 字段长度 以头数 次数 如胎次等 为计量单位的取整数 5 月龄测定成绩 生 长 猪 5 月 龄 时 测 定 其 背 膘 眼 肌 深 度 体 重 通 以千克为计量单位的末尾保留 2 位小数 以克为计量单位的 过 Herdsman 软 件 得 到 其 终 端 指 数 成 绩 并 参 考 其 背 膘 末尾取整数 以厘米为计量单位的末尾保留 2 位小数 以毫 9 11 mm 眼肌深度 (5 6 mm) 28 日龄个体重 米为计量单位的 如背膘厚度 末尾取整数 在测定与记录 77 日龄个体重 达到 1 kg 的日龄结合外观评定 此时 过程中 如发生技术问题 要及时纠偏 保证数据质量 的后备公猪应具有的外部特点是 身高体长 背阔肉厚 2.3 测定数据处理 深胸圆肋 四肢宛如立柱四蹄蹋地有力 眼大额阔 鼻直 6

65 口宽 一对下垂小耳 精神充沛泡沫满口 气宇轩昂 稳 秀遗传性能得到很好印证 并使美系种猪优秀基因得到延续 重矫健无与伦比 后备母猪眼大有神 口鼻清秀 脸腮圆 和提升 广垦沃而多通过与美国 WALDO 农场合资 将美 润而不臃肿 颈清秀而不单薄 腰身修长有力而不下塌 国先进的饲养技术 种猪育种理念和选育技术引进国内 实 腹线紧收排列 7 对奶头整齐 臀宽而丰满阴户大而下垂 行全群测定 在育种上保持与美国同步 种猪繁殖性能 生 四肢有力步态轻盈 长性能 胴体品质等各项性能都达到美国水平 为促进我国 长期坚持选种工作是育种成功 后备猪拥有优秀的遗传 种猪育种水平的提高 公司通过不断选育 加快种猪各项性 性能的基本保障 另外建议从核心群繁殖的第 1 胎仔猪中开 能的遗传进展 避免了 引种 退化 再引种 再退化 的 始进行性能测定留种 现象发生 3 小结 我们通过 2 年来饲养和繁育美系种猪 新美系种猪的优 61

66 授精后高营养水平对高产母猪胚胎存活率 和生长没有影响 朱勇文1,2 编译 (1.中国农业科学院畜牧兽医研究所 北京 母猪胚胎存活率受日粮营养水平的影响 部分研究 华南农业大学 广州 51) 1 d( 营养水平 12.5 MJ/kg, 13.5% CP 和.5% Lys) 然 发 现 高 营 养 水 平 降 低 了 胚 胎 成 活 率 (DenHartog 和 van 后随机分成 2 组 一组为高营养水平组 日采食量 kg Kempen,198;Jindal 等,1996; De 等,29) 也 有 相 升为原来的 2 倍 反 研 究 结 果 报 道 (Pharazyn,1991;Prunier 等 1999 持不变 (n 15) 持续 7 d 个别收集剩料 最后集中一起 Gerritsen 28) 胚胎成活率的降低对中产母猪产仔数 脱水称重 计算平均日采食量 7 d 后 所有母猪重新回到 来说是不利的 而高产母猪并不受影响 相反高胚胎成活 日采食量 2 kg 水平 率增加了胎儿发育迟缓 平均初生重下降的风险 ( Foxcroft 1.3 屠宰测定 (n 15) 另一组为对照组 采食量维 等, 26, 29) 而且 胚胎的存活率越高 胚胎发育的 妊娠的第 和 28 天在当地屠宰场进行屠宰 因为 变异系数越大 因为子宫着床阶段胚胎死亡率的波动有利 这一时期母猪刚刚进入着床期 (Johnson 等, 29) 子宫 于胚胎变异系数的降低 (Pope 等,1986) 因此 在着床前 方面还不是胚胎存活率的限制因素 (Fenton 等, 197) 因此 高产母猪胚胎存活率下降的同时 降低了胚胎早期的变异 只有营养因素 ( 排除了潜在的子宫拥挤因素 ) 对高产母猪排 系数和子宫拥挤 有利于改善仔猪出生性能 本实验旨在 卵率有影响 屠宰后立即收集生殖道 称重双侧卵巢 黄体 研究妊娠第 1 周高营养水平饲粮对高产母猪胚胎存活率和 计数称重 分离子宫角和阔韧带 测量子宫长度 从一侧卵 均匀度的影响 母猪受精后营养和孕酮水平对胚胎的影响 巢纵切 收集胚胎 每个胚泡由胚膜包着胚液 精心与子宫 已 有 报 道 (Den Hartog 和 van Kempen, 198; Dyck and 内膜分离 然后从胚泡中分离出胚胎 称重 用卡尺测量胚 Strain, 1983 Ashworth, 1991; Jindal 等, 1996) 尽 管 胎长度 最后 计数活胚胎数 死胚胎数 ( 尿囊和羊膜中有 高排卵率对经产老母猪来说容易造成子宫拥挤 但排卵数 黑色液体 ) 以及被吸收胚胎数 胚胎和液体消失 高达 2 个甚至以上时 也会限制高产母猪胎盘发育 造成 1. 数据统计分析 子宫拥挤 (Almeida 等, 2) 1 材料与方法 1.1 实验动物 3 头在产仔数方面经过 1 代以上品种选育的大白高产 胚胎存活率的计数标准 活胚胎数 / 黄体数 着床后 胚胎存活率 活胚胎数 / 总胚胎数 每窝胚胎重量和长度 的平均值和变异系数 子宫密度 活胚胎数 / 子宫角长度 (m) 每个活胚胎数或黄体可利用空间 子宫角长度 (cm)/ 母猪 (INRA herd Nouzilly, France) 比一般大白母猪至 活胚胎数 妊娠 27 d 之前 不管是着床之前 期间和之后 少多产 3 头仔猪 黄体数多 个以上 每 6 头一圈 自然 的胚胎存活率与受精率有关 而着床后的胚胎存活率专指附 光照 漏缝地板 母猪第 1 次或第 2 次发情后 连续 18 d 着胎盘的胚胎存活率 大约 d 之间 妊娠 27 d 基 口服烯丙孕素 然后每天 2 次赶公猪检查母猪的发情迹象 ( 早 本可以确定宫内发育迟缓 ( 子宫内生长阻滞 ) 统计弱胚胎 上 9 点和下午 点各 1 次 ) 发情的第 1 天定为第 天 人 数 即活胚胎重低于每窝平均值减去两个标准差的重量 工授精 2 次 每次每圈使用同一头皮特兰种猪新鲜稀释精液 全部数据采用 SAS(SAS Inst. Inc., Cary, NC) 进行方差 早上第 1 次出现站立不动发情现象 8 h 后进行第 1 次人工 分析 模型包括组内和组间效应 某些参数引入黄体数或妊 授精 2 h 后进行第 2 次 当第 1 次发情是在下午检测到 娠年龄的分析变项 P <.5 差异显著 结果显示为平均 16 h 后进行第 1 次人工授精 第 2 次 8 h 后 授精时发情母 值 ± 标准误 猪的平均日龄为 (227±1) d 活重 (133±2) kg 饲养管理 2.1 饲粮营养水平对胚胎存活率和发育的影响 第 1 次 人 工 授 精 后 母 猪 标 准 日 采 食 量 2 kg 预 饲 62 结果分析 表 1 授精后第 1 周不同营养水平对高产母猪妊娠 27 d

67 繁殖性状的影响 标准差 ± 标准误 高营养水平组 2 头母猪出现剩料现象 7 d 的平均日采 表 1 授精后第 1 周不同营养水平对高产母猪妊娠 27 d 繁殖性状的 影响 标准差 ± 标准误 ( 对照组 2 kg/d 高水平组 kg/d) 食量分别为 3.8 kg 和 3.9 kg 因此屠宰了 28 头母猪 ( 高营 营养水平 养水平组 13 头 对照组 15 头 ) 从表 1 可以看出 两组的 繁殖性状 母猪妊娠率没有差异性 P >.1 妊娠 27 d 两组母猪繁殖 P值 高营养水平 对照组 性状也没差异性 平均排卵数为 (21.±.5) 个 波动范围 n 胚胎存活率 85.% (55% 1%) 着床后的胚胎 屠宰日龄 27.±.6 27.±.5.86 子宫长度 /cm 37±7 378±7.38 间为 21.3 cm/ 个 黄体可利用空间 18.6 cm/ 个 结果表 活胚胎数 a 2.5± ± 明 高产母猪妊娠第 1 周饲粮营养水平高低对以上指标没有 黄体数 a 17.8± ±2.8.1 活胚胎数 + 死胚胎数 18.1± ± 子宫密度 ab.9±1.2.6±1..22 胚胎存活率 /% 87±9 8±11.37 着床后胚胎存活率 /% 97±3 97±7.62 存活率 96.7% (77% 1%) 平均子宫密度 单位长度子 宫角的活胚胎数 为.7±1.1 个 /m 活胚胎可利用空 影响 差异不显著 从表 2 可以看出 胚胎的平均重量为 (.88±.17) g 平均长度为 (2.6±1.1) mm 每窝胚胎重量和长度的平均 变异系数分别为 11% 和 5% 两组间的这些指标都没有差 异性 几乎一半的母猪 ( 高营养水平组 6/13 对照组 6/15 P >.1) 都会出现 1 个弱胚胎 是否出现弱胚胎的 a 黄体数校正值 b 单位长度子宫角的活胚胎数 母猪无论是在排卵率 活胚胎数还是子宫密度 都没有差异 性 (P >.1) 表 2 授精第 1 周后不同营养水平对高产母猪妊娠 27 d 胚胎性状的 影响 标准差 ± 标准误 ( 对照组 2 kg/d 高水平组 kg/d) 2.2 繁殖参数之间的关系 营养水平 对 2 个处理组间的相互关系进行了统计分析 发现营 胚胎性状 养水平对胚胎性状没有显著影响 从表 3 可以看出 总体 P值 高营养水平 或着床后的胚胎存活率与排卵率或子宫长度没有显著的相 胚胎重量 a/g 关性 与母猪不同的年龄阶段体重 ( 断奶时 15 日龄或烯 对照组.92 ±.2.8 ±.16.1 丙孕素治疗结束时 表 3 数据未显示 ) 和其他胚胎性状平均 变异系数 CVweight/% 11 ± 3 1 ±.69 值都没有显著的相关性 妊娠 27 d 活胚胎数与排卵率正相 胚胎长度 a/cm 2.8 ± ± 变异系数 CVlength/% 5±2 5±2.61 关 与胚胎重量和大小无关 平均胚胎重与妊娠时间显著相 关 (r =.67, P <.1) 平均胚胎长度与子宫长度负相关 与子宫密度正相关 胚胎重量或长度的变异系数与排卵率 a 进行了屠宰时黄体数和妊娠天数的校正值 总胚胎数 子宫密度和胚胎存活率不存在显著相关性 胚胎存活率不受影响 (Dyck 和 Kennedy, 1995;Ashworth 3 讨论 等, 1995) 本 实 验 妊 娠 早 期 未 进 行 采 血 以 避 免 产 生 过 人工授精后第 1 周饲粮营养水平对高产母猪妊娠 多的应激因此 饲粮营养水平对高产母猪孕酮的影响仍 3 d 胚 胎 存 活 率 没 有 影 响 一 般 交 配 后 高 营 养 水 平 对 是 未 知 数 就 胚 胎 重 量 和 长 度 来 说 饲 粮 营 养 水 平 ( 采 胚胎存活率的不利影响可能由于循环中孕激素浓度的降 食 量 和 能 量 水 平 ) 对 妊 娠 早 期 (9 12 d) 母 猪 胚 胎 生 低 所 导 致 (Den Hartog 和 van Kempen, 198; Dyck 和 长 及 胚 胎 大 小 和 存 活 率 变 异 系 数 没 有 影 响 (Ashworth Strain,1983; Jindal 等, 1996; De 等, 29) 首 先 营 等, 1999; Cassar 等,199) 据推测高营养水平通过影响母 养水平导致肝血循环速度发生变化 从而改变猪代谢过 猪妊娠早期的胚胎存活率 可能进一步影响胚胎发育的变异 程 中 孕 酮 的 清 除 速 度 (Prime 和 Symonds, 1993; Mille 系数 当营养水平不影响高产母猪胚胎存活率时 胚胎发育 等 1999) 交配后补充孕激素可以提高早期胚胎存活率 的变异系数差异性也体现不出来 (Ashworth, 1991;Jindal 等, 1997) 和低营养水平饲粮比 不考虑营养因素 妊娠 27 d 胚胎存活率与排卵率和 较 妊娠早期高营养水平降低了孕酮浓度 母猪胚胎存活 子宫角长度也无关 这与以往的研究结果是一致的 妊娠 率随之下降 (Jindal 等, 1997;Virolainen 等, 25) 然而 25 3 d 母猪子宫容量大小并不是产仔数的限制因素 (Fento 也有报导称交配后饲粮营养水平影响了循环中孕酮水平 等, 197) 而排卵超过 2 22 个例外 (Blasco 等, 1996) 63

68 表 3 各繁殖参数之间的关系 ( 皮尔森相关系数和 p 值 n=28) 存活率 第 27 天屠宰时平均活胚胎数达 17.5 个 但着床 稳定完成一般 35 d(chen 和 Dziuk,1993; Vonnahme, 22) 繁殖参数 黄体数 a 活胚胎数 b 胚胎重量 胚胎长度 CVweightc 子宫长度 子宫密度 d 活胚胎数 胚胎质量 < <.1 或 5 5 d(foxcroft 等, 26) 完成 所以并不代表第 27 天所有的活胚胎数都能存活下来 妊娠 27 d 或少于 35 d 总胚胎数与胚胎重量和长度无 ０ 关 (Knight 等,1977 Patterson 等, 28) 活胚胎数与胎 盘重量成反比关系 意味着子宫拥挤对早期胚盘发育影响高 于胚胎发育 高产母猪妊娠 35 d 后出现子宫拥挤 (<25 cm/ CL) 能显著降低胚胎重量和长度 (Chen 和 Dziuk, 1993) 对 胚胎存活率 着床后胚胎 -.17 存活率 d 活胚胎数超过 16 个 子宫长度并没有增加 但胚胎进 一步被吸收和生长迟缓的风险增加了 胚胎长度 于老母猪 妊娠 d 活胚胎数达到 15 或 16 个时就会 出现子宫拥挤 增加胚胎死亡和发育迟缓的风险 (Vonnahme 等, 22; Town 等,25) 本 实 验 /5 的 高 产 母 猪 妊 娠 高产母猪妊娠 27 d 窝内胚胎重量变异系数和胚胎存 注 a 黄体的数量 b 存活的胚胎数 c 胚胎重量窝内变异系数 活率无关 尽管着床时胚胎死亡率的波动可以降低弱胎的机 Patterson 等 (28) 指出 对经产母猪来说 排卵率和妊 率 但对定植后胚胎变异系数影响不确定 此外 实验过 娠 27 d 胚胎存活率呈负相关 一方面 由于这些母猪平均 程中没有发现与胚胎低死亡率有关因素 因为胚胎存活率 排卵率高 (>22) 接近 1/3 的母猪排卵超过 25 个 另一方 和胚胎异质性的关系需要更大规模母猪群和可能需要观察 面 Chen 和 Dziuk (1993) 研究发现当子宫可利用空间小 妊娠后期阶段 Quesnel 等 (28) 研究发现妊娠 27 d 胚胎 于 25 cm/cl 时 胚胎存活率则受子宫容量大小的影响 重量的变异系数为 11% 出生时为 21% 说明在胚胎发育的 虽然本实验高产母猪也出现早期子宫拥挤现象 但胚胎存 过程中胚胎异质性提高了 1 倍 最后 研究结果还显示妊 活率与子宫可利用空间没有相关性 娠 27 d 就可以检测出弱胚胎 与 vander Lende 等 (199) 和 考 虑 到 本 实 验 都 是 青 年 高 产 母 猪 其 排 卵 率 Ferguson 等 (26) 研究结果一致 弱胚胎与排卵率和胚胎 高 胚 胎 存 活 率 能 达 到 85% 非 常 不 错 了 经 产 2 胎 可用空间之间并没有关系 而早期发育迟缓更可能是由于卵 或 3 胎 的 母 猪 平 均 排 卵 数 为 21 个 平 均 胚 胎 存 活 率 为 母细胞质量受损 而不是妊娠早期子宫拥挤 75% (Patterson 等, 28) Østrup 等 (29) 调 查 显 示 结论 LR LW 高产母猪平均胚胎存活率可达到 82% 本实验在 妊娠早期饲粮高营养水平没有降低高产母猪 27 d 胚胎 妊娠 27d 后很少发现死胚胎 而子宫着床定植的过程只需要 成活率 对胚胎大小和变异系数也不存在利弊性 不考虑营 d(johnson 等, 29) 说明妊娠的第 1 个月大多数 养因素 如果高产母猪出现高的胚胎存活率可能导致胚胎拥 胚胎死亡率在着床之前或开始之时发生 由于高的早期胚胎 挤 对胚盘和胚胎后期阶段的发育带来不利影响 6

69 公猪试情对母猪发情征兆的影响 郑梦奇 魏全伟 石放雄* 编译 南京农业大学动物繁育研究所 南京 2195 摘 要 评述了公猪试情和公猪与母猪接触的不同时机对断奶母猪发情的启动及发情征兆的影响 有证据表 明公猪试情能影响母猪LH的释放 卵泡发育的启动和断奶后的定时发情 公猪与母猪接触的不同时机和频度 对诱发母猪发情的效果有显著的差异 关键词 发情征兆 发情启动 公猪试情 人工授精技术在世界范围内的应用越来越广 与此同时 试情 进行公猪试情的母猪组在断奶第 2 天开始接触 1 头公 也限制了公猪在母猪群内的使用 然而 公猪除了生产精液 猪 1 min 从第 3 天开始每天接触 3 次 每次 3 min 结 外 还能给母猪提供非常有用的触觉 嗅觉 听觉和视觉环 果表明 经试情的母猪在断奶 9 d 内排卵的头数增加 试验 境 本文论述了公猪以及公猪在母猪舍内出现的不同时机和 组与对照组排卵的母猪比例分别为 51% 和 3% P <.5 频度对母猪繁殖生产的影响 本文主要针对的是断奶母猪 需要指出的是 初产母猪在断奶 9 d 内表现出的不排 而事实上公猪能被应用到母猪繁殖的不同阶段 例如断奶后 卵比例较高 即便是在公猪试情组 9% 的母猪在断奶 9 d 断奶后卵泡生长的启动和排卵 发情鉴定期 发情的检测 内没有排卵 更进一步的分析表明试验组与对照组相比 和预测排卵期 和授精期 优化授精进程 等 此外 本文 接受公猪试情的母猪更多的在断奶第 天排卵 这 还叙述了公猪在母猪断奶后和发情鉴定中的作用 个研究结果表明公猪试情主要对有着较长 断奶 - 排卵 1 间隔的母猪有效 公猪试情对断奶后母猪发情启动的影响 在大部分母猪群中 多数母猪在断奶后 7 d 开始发 Walton 1986 描述了公猪对泌乳期的最后 1 周母猪 情 然而对于初产母猪 断奶后发情延迟的比例却非常高 的影响 与公猪隔栏接触 每天 2 次 每次 3 min 结果 这个问题在哺乳期实施限制饲养的情况下尤为明显 公猪试 表明 试情组表现出更短的断奶到发情间隔 Newton 等 情能否引起这些母猪发情的及时启动值得关注 1.1 公猪对母猪断奶到发情间隔的影响 1986 发现与对照组相比将母猪在泌乳期的最后 8 d 每天 接触公猪 1 h 能缩短断奶到发情时间间隔.9 d Petchey 到目前为止已经有诸多关于初情期前母猪接触成年公 和 English 对 舍 养 的 泌 乳 期 母 猪 从 泌 乳 期 第 3 周 进 行 分 猪后初情期提前的报道 早先已有研究证实断奶母猪每天接 组 在分组后第 天对其中一半母猪进行公猪试情 结果 触公猪可以缩短断奶到发情的间隔 在这些研究中 如有较 表明 公猪试情导致断奶到配种受孕的时间间隔为.7 d 高比例的断奶母猪在断奶 1 16 d 以内表现出发情征兆 而没有公猪试情的对照组为 1 d Walton 1986 发现断 对照母猪断奶到发情间隔所需平均时间比较长 1 d 以上 奶后公猪试情更为有效 而且断奶前后公猪试情有叠加效 而接触公猪的母猪断奶到发情间隔显著缩短 间隔所需的平 应 然而 泌乳期的公猪试情可能会诱发泌乳期发情 在 均时间减少了 3 d Petchey 和 English 198 的研究中 泌乳期接受公猪试 总体来说 大多数数据表明 公猪试情对断奶到发情间 隔时间较长的母猪 ( 例如初产母猪 ) 尤为重要 然而 研究 情的母猪中有 1% 出现泌乳期发情 因此 泌乳期过早接 触公猪可能会增加母猪泌乳期发情比例 公猪试情对断奶到排卵的时间间隔的影响比研究断奶到发 总之 对于较长断奶到发情间隔的母猪来说 公猪试情 情的时间间隔更为重要 因为这可以避免母猪安静发情的 对排卵和发情启动是有效的 泌乳期最后 1 周与公猪接触可 影响 能有叠加效应 但这增加了泌乳期发情的危险 Langendijk 等 2 用 9 头杂交初产母猪进行了一 1.2 公猪对母猪 LH 释放和卵泡发育的影响 项试验来验证公猪试情对断奶母猪断奶到排卵时间间隔的 公猪对断奶母猪的发情启动可以通过对垂体 LH 释放的 影响 半数的母猪在断奶后 2 d 进行公猪试情 其余不进行 刺激作用来解释 紧接着断奶 LH 释放通常会增加并且以 65

70 高的脉冲频率和低的波幅为特征 断奶后增加的垂体释放 乎对这些母猪有益 LH 的功能是刺激卵泡发育 在一些研究中发现 高频率的 依据有关 LH 和卵泡发育的文献报道 断奶后产生足够 LH 脉冲可以缩短断奶到发情的时间间隔 如果断奶后 LH LH 维持卵泡发育的母猪断奶到发情时间间隔比较短 对于 脉冲频率过低 就会导致断奶到发情时间间隔延长 尤其 这些母猪 公猪试情没有发现叠加效应 断奶到发情时间间 在这种情况下 母猪能通过使用额外的 LH 促使卵泡发育 隔少于 6.5 d 的母猪 然而 一些断奶后低量释放 LH 的 来获益 母猪受益于公猪试情触发的 LH 释放 导致了持续的卵泡发 公猪出现时的嗅觉刺激会引起母猪中枢神经系统释 放 与 调 节 LH 脉 冲 相 关 的 激 素 和 神 经 肽 类 Vander Wiel 育并排卵 显然 如果有些母猪的 LH 释放不能有效地被公 猪试情所触发 这些母猪就会表现为乏情 和 Booman 发 现 对 断 奶 后 乏 情 母 猪 进 行 公 猪 试 情 可 在 接 从这些数据可以得出断奶后母猪接触公猪能缩短断奶 触 后 3 h 后 就 引 起 LH 脉 冲 持 续 释 放 Kingsbury 和 到发情时间间隔 尤其是对于断奶到发情时间间隔延长的母 Rawlings 也报道了有关初情期母猪接触公猪导致 LH 释放 猪 有研究报道公猪试情尤其对季节性乏情的母猪和初产母 的结果 猪效果尤其明显 综合的资料表明 低 LH 脉冲频率的母猪断奶后马上接 究竟公猪试情多强效果最好仍然还不清楚 Hughes 的 触公猪能促进额外的 LH 释放并刺激卵泡的进一步生长并最 研究表明 对于青年母猪每天施以 3 到 次的公猪诱导对诱 终排卵 Langendijk 等就母猪进行公猪试情与否对卵泡发 发发情比每天 1 次或隔天 1 次更为有效 Van der Wiel 和 育的动力学的研究结果如表 1 所示 Booman 的研究数据表明 母猪似乎在公猪试情后的 3 h 断奶后 6.5 d 内出现排卵的母猪 其卵泡发育与公猪试 引起 LH 释放 至少有 7 h 的时间 7 h 以后 LH 的含量 情与否没有发现差异 这些母猪断奶后卵泡持续生长直至排 就不能被检测到了 所以公猪触发 LH 释放究竟能持续多长 卵 给予公猪试情后 有更多的母猪在断奶后 d 排 时间仍不清楚 总的来说 这些数据表明每天进行 2 3 次 卵 1:3 在 d 之间排卵的母猪在断奶后第 天 公猪试情或者让群养母猪与公猪毗邻可以取得较好的效果 与具备短的断奶排卵时间间隔的母猪相比卵泡较小 但卵泡 然而 这需要进一步探索 仍然持续发育直到排卵 对于断奶 9 d 内没有排卵的母猪 1.3 公猪在发情征兆中的作用 发情征兆所需的公猪试情水平 也能观察到一些卵泡的生长启动 但从第 天以后没有持续 生长 Lucy 等 21 也发现没有排卵的母猪断奶后卵泡 一般来讲 母猪发情的定义为 当对其实施按压后背检 发育减少而且这些卵泡未能达到排卵时的大小 公猪试情似 测 BPT 时出现静立反应即为发情 在 BPT 期间 饲养 员对母猪模拟公猪的触觉 爬跨 试情 挤压母猪后背两 表1 断奶后 6.5 d 以内排卵母猪和断奶后 d 之间排卵母猪以及断奶后 9 d 内不排卵母猪断奶后每隔 2 d 卵巢中存在的最大卵泡直径 mean±s.e. 断奶排卵 母猪 间隔 /d 头数 第天 h 6±15 Soede 等发现 55 个农场母猪的平均 第6天 第8天 < ±.2 5.8±.3a 7.±.3a ±.2.7±.3b > ±.2 3.7±.3.3±.3 c 序时 安静发情所占比例为 % 2.3% Soede 等研究发现 当不利用公猪进行按压后背检测 BPT 时 18% 的母猪的 6.5±. b 3.9± >9 32 发情期短于 2 h 发情鉴定通常要求每天 3 次 而每天只 进行 1 次集中鉴定时这些母猪发情征兆可能会被错过 公猪试情对母猪的发情征兆有重要影响 尽管关于公 无公猪试情 11 发情持续期为 8 h 各个农场介于 31 6 h 对安静发情 的状况研究较少 Kemp 实验室发现运用细致的发情鉴定程 公猪试情 <6.5 立反应 这时母猪弓背竖耳 不同母猪之间发情持续时间 差别很大 Weitze 等对 83 头母猪研究发现发情持续期在 卵泡直径 /mm 断奶当天 侧且摩擦和按压母猪后背 当母猪呆立不动即为有良好的静 猪对母猪发情征兆的诱导作用的确切生理机制仍不清楚 2.6±. 5.3±.2a 6.6±.a 尤 其 是 当 涉 及 到 公 猪 的 嗅 觉 和 触 觉 接 触 时 Signoret 和 Du Mesnil du Buisson 报道在缺少公猪试情时只有 6% 的 2.7±.1.2±.2b.2±.2b 3.8±.2 注 ①同列字母不同表示差异显著 P <.5 ②无公猪试情 断奶排卵间隔 d 的母猪因仅 3 头 数量太少而没有检测 66 发情母猪会表现出静立反应 BPT 嗅觉和触觉接触都存 在时 该比例升至 9% 给这些母猪增加公猪的视觉和触 觉 接 触 可 导 致 1% 的 发 情 征 兆 Signoret 和 Bartiteau

71 表２ 母猪在公猪试情下的发情表现 Reed 等 Perry 等证实了嗅觉信号的重要性 Langendijk 等 研 究 了 3 个 水 平 的 试 情 BPT 饲 养 员 的 接 触 试 情 发情性状 缺少公猪试情 a 公猪试情 b 发情检出率 /% 86 1 发情启动到排卵间隔 /h 29±11 37±7 发情持续时间 /h 39±12 56±9 BPT 与嗅觉 5α- 雄烯酮 的联合试情或 BPT 时公猪与 母猪隔栏相望 他们发现 当公猪出现时所有母猪静立反应 剧烈 而单独的后背按压检测和与嗅觉试情相结合时引发剧 烈静立反应的仅占所有母猪的 3% 为了进一步证实上述数据 Langendijk 等研究了没有 公猪试情 仅 BPT 和公猪隔栏试情 在母猪面前放置 1 注 同行字母不同表示差异显著 P <.5 测时建议使用相同的检测方法 对 青 年 母 猪 的 试 验 结 果 表 明 允 许 连 续 的 鼻 子 碰 头公猪 时对初产母猪发情表现的影响 结果如表 2 所示 不使用公猪时导致低的发情检出率和比较短且不稳定的发 鼻 子 接 触 的 群 养 母 猪 降 低 了 发 情 检 出 率 Tilbrook 和 情表现 这些实验是在高频率的发情检查情况下得到的 如 Hemsworth 199 研究发现青年母猪与一只公猪毗邻 以 果采用较低的检测频率 如一天 1 次或 2 次 时 如果没有 编织网隔开 比分开饲养的与公猪相隔 1 m 宽走廊的母猪 公猪试情 预计母猪发情检出率会更低 相比发情检出率降低 在这项研究中 采用了按压后背检 总之 不同强度和时机的公猪试情对诱导母猪发情的效 测进行发情鉴定时把公猪放在编织网后面 Caton 等 1986 果不一 但是 直接和频繁地接触公猪常能取得最好结果 对在有公猪环境下 21 日龄内的青年母猪的发情比例进行 通常 公猪被带到母猪面前或母猪一起被带到公猪围栏 了研究 与公猪毗邻群养的母猪与每天仅接触公猪 3 15 前进行诱导发情和检测 在有些试验中 母猪被赶到配种区 或 5 min 的母猪相比发情比例明显减低 然而 当青年母 DMA 配种区由 6 头放在围栏里的公猪包围着 从 猪被带到另一个围栏进行发情鉴定并每天暴露在另一头公 而使发情检测的公猪刺激最大化 这些试情公猪是否强化了 猪环境下 15 min 青年母猪的发情比例与每天接触公猪 1 发情征兆仍还是一个疑问 次的母猪相似 这似乎表明圈养的青年母猪与公猪毗邻如 在 Langendijk 等对多产的母猪进行的一项实验中 每 果利用新的公猪就不会出现问题 然而 相关数据表明母 天进行 3 次发情检测 在 8, 16 和 2 其 猪跟公猪毗邻时与每天在限定的时间与公猪接触的母猪相 中 1 组把公猪在母猪前面固定 然后对母猪进行按压后背 比较发情持续时间短 在这些研究中 进行发情检测时母 检测 BPT 而在另一组 母猪被引到配种区 DMA 猪被引入公猪舍或公猪被引入母猪舍 为了得到最优的发 5 min 后进行压背检测 BPT 记录发情母猪的排卵百分 情征兆 公猪母猪在舍内毗邻似乎并不明智 比和发情检出率 结果表明 2 组母猪的发情持续时间和断奶 2 到发情时间间隔相似 在这个研究中 压背检测 BPT 时与公猪隔栏接触可 公猪在排卵预测中的作用 受精效果很大程度上依赖于授精和排卵的间隔时间 对 世界范围内相关数据的分析表明在大多数情况下 排卵前 以给予足够的公猪试情来使得母猪反应最大化 然而 用单 2 h 之间用好的精液进行授精能获得最优的效果 因此 独的公猪接触时母猪的发情行为效果欠佳 配种区 DMA 为了利用有限的授精次数来优化受精效果 预测排卵时间就 可弥补这一缺陷 非常重要 发情检测方法 Soede 和 Kemp 1997 的 综 述 描 述 了 用 以 预 测 排 卵 在一些研究中 使用公猪或不使用公猪对同一些母猪连 的身体上和行为上的特征 简言之 身体上的变化例如体 续地进行发情检测 Langendijk 等 2 在母猪同一发 温 阴道温度和阴道黏液导电率与预测排卵时间关系不 情周期使用不同发情鉴定方法时发现 较低强度的公猪试情 大 这对于出现静立反应情况也是一样的 尽管母猪对公猪 刺激使得发情征兆受抑制 试情刺激强度加大时发情征兆变 出现静立反应后排卵的平均时间在不同的文献中差异不大 明显 这暗示了发情鉴定时综合使用不同的发情检测方法 35 8 h 之间 但母猪个体之间的排卵时间可以在发情 例如早上公猪在场时压背检测母猪和下午检测时不使用公 猪 并不可取 Walton 1986 发现 27% 的母猪在泌乳期 后的 1 85 h 在没有公猪在场时 按压后背检测 BPT 出的静立反应与排卵时间的关系更加不密切 而不是断奶后接受公猪试情 在断奶后表现出安静发情 而 在发情过程中 母猪对试情所表现的发情行为的唤起 在泌乳期和断奶后受到公猪试情影响的母猪中 断奶后安静 静立反应 一开始增强 继而减弱 这意味着发情的早期 发情的百分比仅为 3% 这再一次表明母猪会对高强度的公 和晚期 母猪仅对强的试情刺激有反应 在发情中期母猪才 猪试情习惯化且发情征兆不明显 因此 在连续进行发情检 能对低水平的试情刺激 如无公猪时的压背检测 有反应 67

72 在发情过程中对母猪应用不同水平的试情刺激 母猪反应会 好的预测排卵指标 有显著差异 3 结论 大量文献表明 在公猪在场时所做的按压后背检测 排 很明显公猪试情可能促进了断奶母猪的发情启动 发情 卵发生在发情期的后 2/3 阶段发生 发情持续期是一个可 检测 发情行为和发情征兆 因此 发情鉴定时应用公猪试 重复的参数 发情持续期与母猪的断奶到发情的时间间隔有 情是非常值得推荐的 总的来说 仅仅应用一部分公猪试情 关 这就意味着 有关发情持续期的信息和断奶到发情时间 如压背检测或公猪气味喷雾 效果不如利用全面的公猪试 间隔与发情持续期的关系可以用来预测有不同断奶到发情 情 不同的公猪对上述过程的试情作用是不同的 一般选用 时间间隔的母猪发情启动后的排卵时间 迄今 这似乎是最 善于 交谈 唾液分泌旺盛 行动缓慢的老公猪效果比较好 68

73 人工授精技术在生猪遗传改良中的作用 陈 斌 湖南农业大学动物科技学院 长沙 我国是世界第一养猪大国 生猪养殖是我国的传统优势 1128 的低水平 而 1997 年则超过 5% Ollivier 1998 目前 产业 据相关报道 21 年全国生猪存栏.5 亿头 出栏 在发达国家如美国 丹麦 瑞典 法国等 均在养猪生产中 生猪 6.67 亿头 猪肉产量 5 7 万 t 约占全世界的一半 大规模使用人工授精技术 如丹麦 9% 95% 的母猪采用 猪肉是我国人民动物蛋白的主要来源 猪肉消费量保持在肉 人工授精 类消费总量的 6 以上 所以 猪肉生产直接影响到人们 猪人工授精技术早于 年在我国推广 但由 的生活水平 同时 随着农业结构的调整 养猪业已成为农 于当时设备落后 技术水平较低 导致受胎率 产仔性能 民致富的重要途径 逐渐成为农业经济的支柱产业 随着经 疾病控制等均受到较大影响 未能在规模养猪生产中应用 济与社会的发展 我国养猪业既面临着良好的机遇 又面临 自 1995 年以后 国外猪人工授精技术 设备相继进入我国 着严峻的挑战 必须大力提高养猪业的科技水平 向科技要 各大规模化养猪场逐步开展人工授精 取得了满意的效果 产量 向科技要效率 人工授精技术得到迅速普及 大 中 小养殖户都使用该 我国养猪业生产水平不高 出栏生猪数量多 但质量差 项技术 以减少公猪饲养成本 目前 在规模化养猪较发 其根源在于种猪行业基础薄弱 长期存在重引种轻选育倾 达地区 各大型种猪场纯种猪群中 9% 采用人工授精 商 向 认为进口种猪便捷 立竿见影 选育费钱费时收效不大 品猪生产也达到 6% 7%[5] 从而花费大量资金盲目进行重复 大批量引进种猪 引进后 1 [1] 缺乏继续选育的动力 导致种猪退化 这对于我国养猪业的 可持续发展不利 [2,3] 近 2 年来 我国猪的育种技术水平有 采用人工授精技术 加快猪的育种进展 在猪的育种实践中 通常要考虑每年所能获得的遗传进 展 即用每世代的选择反应除以世代间隔 用 Gt 表示 了很大提高 对猪的生产性能的提高和养猪业的发展做出了 重要贡献 但从总体上看 仍落后于发达国家 主要表现为 育种技术水平低 良种繁育体系不够完善 种猪质量不高和 良种率低等 郭万库等 2 通过简要分析我国近几十年来的猪育 种情况 发现我国引进的优良瘦肉型品种 经选育后还是赶 该公式表明 为了加快选育进展 必须考虑 增加可利 用的遗传变异 提高选择强度 增加育种值估计的准确度 缩短世代间隔 其中 σa 是加性遗传效应标准差 通过人工授精技术 不上同时代国外的猪种 主要有 8 个方面原因 其中的一个 可以扩大群体规模 公猪的来源更加广泛 从而增加群体的 重要原因是人工授精技术推广和普及率不高 尽管猪的人工 遗传变异性 在同样的选择强度下 大规模育种群将较长时 授精技术已经推行了多年 但仍有相当多的种猪场还在使用 间保持较理想的可利用遗传变异度 自然交配 这阻碍了优良基因的扩散速度和各种猪场间遗传 联系的建立 [] 选择强度 i 是不受性状影响的通用参数 选择强度与留 种率间存在直接对应关系 留种率越低 选择强度越大 如 猪人工授精技术是用人工方法采集公猪精液 经过检验 留种率为 1% 时 i=2.66 留种率为 5% 时 i=2.6 留种 和处理 将合格的精液输送到发情母猪体内使其受胎 人工 率为 1% 时 i=1.755 留种率为 15% 时 i=1.55 采用 授精技术在猪育种中的应用已有 7 多年的历史 迄今为止 人工授精时 所需种公猪数大大减少 从而使公猪留种率降 仍是猪育种中重要的生物技术之一 Sellier 和 Rothschild 低 大大提高公猪的选择强度 加快遗传进展 Vangen 和 1991 通过对不同国家采用猪人工授精技术地区的回顾 Sehested 1997 认为 若在纯种繁育中 1% 地使用人工 推断 1991 年以前 人工授精技术保持在一个平均的低水平 随后 由于精液运输服务的改进及农场主可以进行本场的 授精 公猪的选择强度可提高 1 倍 [6] rai 是指选择的准确性 采用人工授精技术时 公猪的 人工授精工作 人工授精技术在很多国家都有较快的推广 后代数量增加 对公猪进行遗传评估时可利用的信息增加 速度 如在法国 人工授精的比例直到 1987 年还维持在 3% 育种值估计的准确度提高 对于遗传力偏低的性状尤为重 69

74 要 公猪选择的准确性提高了 有利于发现顶尖公猪 从而 个猪群的平均关联度应大于 3% 对 2 个有较多遗传物质交 加快改良速度 换的猪群 关联度应大于 5% 畜群间的关联度定义为畜群 L 是世代间隔 采用人工授精技术时 核心群种公猪使 效应的相关系数 Mathur 等根据加拿大猪的遗传改良实践 用年限可得到有效控制 更容易提高公猪更新率 当后备公 提出了场间遗传联系的措施 即 使用良好遗传联系的人工 猪的估计育种值超过种公猪时 现有核心群种公猪就可以转 授精公猪 从良好遗传联系的猪群中选择人工授精公猪 从 移到繁殖群或者商品群使用 这样可以有效缩短育种群世代 良好遗传联系的公猪获取足够比例的后代 [8] 间隔 改善育种效率 加快年遗传进展 3 2 采用人工授精技术 缩短遗传时距 猪的繁育体系呈 金字塔 形 其中 金字塔 顶部 采用人工授精技术 开展猪的联合育种 育种群种公猪头数越少 公猪选择强度越大 育种进展 是育种场 原种场 核心群在育种场里选育 对已选择的 也越高 但由于目前我国种猪场的种猪核心群规模普遍偏 品种 品系进行纯繁提高 金字塔 中部是繁殖场 饲养 小 留种公猪数少 会加快群体的近交速度 为了克服这个 繁殖群 它的基本任务是将来自核心群的纯种扩群繁殖 缺点 有必要开展猪的联合育种 以实现我国养猪业的可持 向商品场提供后备种母猪或提供品种 品系杂种母本 金 续发展 字塔 的底部是商品场 饲养商品代 它的任务是按照育 联合育种是现代动物育种理论的精髓 世界养猪业发 种计划规定的杂交摸式 生产优质的商品猪上市 达国家的共同经验表明 联合育种是加快动物群体遗传改 在繁育体系中 核心群的遗传改进需要通过繁殖群传 良 提高育种效益的重要途径 张勤 27 国际上 递到商品群 此过程是核心群的优良基因传递到商品群的 种猪育种的主流趋势就是以不同组织方式的联合育种体系 流程 这里有一个遗传时距的问题 遗传时距是指一次选 即便类似 PIC 这样的大型跨国种猪公司在其体系内也是实 择的遗传进展从核心群全部传递到商品群的时间 繁育体 行跨国联合育种 因此 可以预见 我国未来的种猪育种 系中优良基因的流向是从塔顶向塔底 而且是不可逆的 体系将是以全国性和区域性联合育种为主的模式 遗传时距有 2 种不同的传递模式 1 逐级传递 公畜 母 [7] 猪的联合育种就是将相同或相近育种目标的种猪场有 畜严格按级传递 公畜取得的遗传进展由核心群传递到繁 组织地联合起来建立的良种繁育体系 形成一个大的核心 殖群 再由繁殖群传递到商品群 2 公畜越级传递 母畜 群, 即 超级核心群 每个猪场 群 相当于一个子核心 逐级传递 公畜取得的遗传进展可以由核心群直接传递到 群 各猪场 群 开放 整个群体 育种系统 闭锁繁育 商品群 这种模式的遗传时距比逐级传递模式缩短一半 必要时才导入基因 以达到加快育种进展和提高群体性能 通过人工授精技术 核心群的公猪可以扩大利用 很容 水平的目的 猪的联合育种内容包括 建立相应的育种 易做到宝塔形杂交繁育体系的繁殖群和商品群都能利用核 组织 统一对性状的定义 实施统一的育种方案 建立 心群的优良公猪的精液 从而使核心群的改良成果能更快地 科学 规范的性能测定体系 应用先进的遗传评估方法 传递到商品群 缩短遗传时距 让商品群提前受益 从而加 (BLUP) 应用人工授精技术 建立和加强场间遗传联系 速商品群的改良 大幅度提高养猪业的经济效益 实现区域性和全国性的联合遗传评估 实现种猪的跨场 跨区域选择 在猪的联合育种中 人工授精技术是必不可少的重要组 成部分 采用人工授精技术 提高良种利用率 在自然交配的情况下 1 头公猪 1 年负担 3 头母 猪的配种任务 繁殖仔猪 6 8 头 而采用人工授精技 术 1 头公猪可负担 5 头母猪的配种任务 繁殖仔 自从 BLUP 理论问世以来 各国均纷纷将该理论用于 猪 8 1 头 极大地提高公猪的利用率 利用人工 区域性甚至全国性遗传评估 大大提高了选种的准确性 但 授精技术 使得养猪生产者可以最大限度地利用优秀的公 由于缺乏场间遗传交流 该方法的使用存在很大的局限性 猪 让它们生产更多的后代 将它们的优良基因迅速扩散 人工授精技术的广泛使用 使场间可通过种猪精液进行遗传 提高其优良基因在群体中的频率 同时 人工授精技术可使 交流 为区域性或全国性联合育种奠定了坚实基础 公猪的使用较少地受到时间和地点的限制 使得养猪生产者 人工授精技术是建立和加强场间遗传联系的有效途径 可以在较大的范围内选择所需要的优秀公猪 使优秀公猪的 采用人工授精技术 实现优良种公猪的跨场使用 进行基因 影响范围扩大 从而促进生猪的品种改良和商品猪生产性能 交换 中心测定站及各育种群之间建立了遗传联系 遗传联 的提高 系可以为育种者对不同环境下的动物进行选择决策时提供 在农村 只有依靠有组织 有计划地普及人工授精技 依据 Mathur 等对加拿大猪改良方案猪群的研究表明 一 术 才有助于畜牧主管部门将全县所要的地方品种公猪和外 7

75 种公猪的规划权掌握在自己的手中 以便推行既定的杂交模 理布局人工授精技术服务点 用于社会化遗传改良与生猪良 式 推行有计划的杂种优势利用 提高出栏率 人工授精技 种补贴工作 生猪良种补贴项目优先选用经过性能测定和遗 术是推行既定杂交模式的根本保证 彭中镇 27 [9] 传评估的种公猪 我 国 于 21 年 开 始 实 施 全 国 生 猪 遗 传 改 良 计 划 5 采用人工授精技术 推进全国生猪遗传改良 年已遴选出 2 家国家生猪核心育种 计划的实施 为推进生猪品种改良进程 提高生猪生产水平 促进生 场 标志着全国性的生猪遗传改良计划迈出了实际性的步 猪产业持续健康发展 农业部于 29 年组织制定了 全国 伐 随着全国生猪遗传改良计划的逐步深入 人工授精技术 生猪遗传改良计划 该计划明确提出了建设 将发挥越来越重要的作用 种公猪站和人工授精体系 其内容主要包括 1 根据全国 生猪优势区域布局规划和国家生猪核心育种场的分布情况 参考文献 完善区域性种公猪站建设 种公猪站的公猪来源于经性能测 [1] 彭中镇. 改进外种猪育种工作的几点建议 [C]. 中国动物遗传 定 遗传评估优秀的公猪 鼓励核心育种场和种猪生产性能 育种研究进展. 北京 : 中国农业科技出版社, 25, 3-8. 测定中心将测定评估优秀的公猪提供给种公猪站 2 依托 [2] 陈瑶生. 中国的猪育种研究现状与发展趋势 [J]. 华南农业大学 国家生猪良种补贴项目 加快普及猪人工授精技术 将优良 学报, 25, 26( 增刊 ): 种猪精液迅速推广应用到生产中 核心育种场优良母猪通过 [3] 陈瑶生 刘海良 刘小红 等. 我国种猪遗传评估与联合育种 扩繁不断地将良种母猪推广至生产中 从而带动商品猪生产 进展与策略 [C]. 中国动物遗传育种研究进展. 北京 中国农 水平的提升 215 年起 种公猪站饲养的种公猪必须经过 性能测定 猪人工授精技术服务点布局合理 服务到位 为 了 贯 彻 落 实 全 国 生 猪 遗 传 改 良 计 划 农业部于 21 年制定了 全国生猪遗 传改良计划 实施方案 该方案要求国家 核心育种场开展遗传交流 遗传交流以种猪精液交流为主 每个国家生猪核心育种场至少应与其他 3 个核心育种场保 持持续的遗传交流 遗传交流方式主要有 2 种 一是直接 将他场优秀种猪引入本场育种群 二是将他场优秀种公猪 业科学技术出版社, [] 郭万库 师守堃 鲁绍雄. 我国猪育种结构及其发展的探讨 [J]. 中国畜牧杂志, 2, 36(5): [5] 朱健彬 张守全. 猪人工授精技术和生猪遗传改良 [J]. 猪业科 学 [6] Vangen O Sehested E. Swine production and research in Norway Pig News Info[J] 1997,18(1) [7] 张勤. 猪的人工授精与联合育种 [J]. 猪业科学 精液引入本场育种群 应保证 5% 以上的育种群母猪用他 [8] Mathur P K, Sullivan B P, Chesnais J P. Measuring 场种公猪配种 经全国遗传评估评定最优秀的种公猪应根 connectedness: concept and application to a large industry 据场间遗传交流计划参与场间遗传交流 breeding program[j]. Proc. 7th World congress. Geneie [1,11] 根据全国生猪优势区域布局规划和国家生猪核心育种 场的分布情况 212 年前选出 1 家种公猪站用于核心育 种群的公猪精液交换 公猪站的种公猪主要来源于国家生 猪核心育种场 且必须是经性能测定 遗传评估优秀的种 公猪 为推进国家生猪良种补贴项目的实施与国家生猪核心 育种场纯种猪的推广 22 年前建设 家种公猪站 合 Applied Livestock Prodcon, 22,32: [9] 彭中镇 刘榜 赵书红 朱猛进. 大型猪人工授精中心与育种 值的跨群比较 [J]. 猪业科学 [1] 中华人民共和国农业部. 全国生猪遗传改良计划 29-22) [S] 农业部. 农办牧 [29]55 号. 北京 出版者 29 [11] 中华人民共和国农业部. 全国生猪遗传改良计划 29-22) 实施方案 [S] 农业部. 农办牧 [21]1 号 71

76 解决公猪异味问题的新进展 遗传选育方法 李凯年1 孟 丹2 孟 昱3 编译 1.吉林出入境检验检疫局 吉林 长春 吉林市动物疫病预防控制中心 吉林 3.吉林市动物卫生监督所 吉林 吉林 吉林 摘 要 来源于性成熟未阉割公猪的肉或肉制品在烹调或食用时常常会出现异味 许多消费者对这种异味难以接 受 因此 长期以来 生猪生产者一直采用手术阉割的方法来预防公猪异味 近几年来 主要由于对动物福利的 关注 促使人们努力寻找可以替代手术阉割消除公猪异味的方法 继免疫阉割方法之后 遗传选育方法又应运而 生 研究人员认为 通过遗传标记辅助选育方法生产无公猪异味而拥有公猪生长优势的品系才是解决公猪异味 问题的长久之计 关键词 公猪 阉割 抗GnRH疫苗 遗传标记 遗传选育 在 21 年 伦 敦 养 猪 大 会 上 加 拿 大 奎 尔 夫 大 学 的 来几年中禁止进行手术阉割 即使采用麻醉也不允许 荷 E.J.Squires 和 F.S.Schenkel 介绍了解决公猪异味问题特 兰的一些大型零售商则已经决定不再销售采用手术阉割公 别是通过遗传学方法解决公猪异味问题取得的新进展 猪生产的猪肉 荷兰快餐连锁店麦当劳也宣布不再销售含 在猪肉生产中 未阉割公猪的肉及肉制品在烹调和食 有手术阉割公猪肉的产品 澳大利亚 新西兰 英国和南 用时可能会出现异味 让许多消费者难以接受 为了防止 非等一些国家规定 供新鲜肉类消费的公猪必须在完全性 产生公猪异味 通常要对公猪进行阉割 但是 阉割不仅 成熟之前进行屠宰 因此 利用手术阉割以外的方法生产 会降低饲料转化率和瘦肉率 而且还会对动物福利产生负 可以为消费者接受的猪肉产品将会成为一种趋势 面的影响 传统的阉割方法是手术阉割 由于手术阉割的 2 负面影响日益受到关注 探索替代方法成为公猪阉割的一 个研究热点 目前 可替代的方法包括免疫阉割和遗传标记 公猪异味是如何产生的 公猪异味是由于雄烯酮和粪臭素 3- 甲基吲哚 2 种 化合物在脂肪中蓄积而产生的 雄烯酮是在接近性成熟时 研究人员认为 通过遗传学方法解决公猪异味问题可以 公猪睾丸中产生的一种类固醇 作为一种性信息素 雄烯 免去对公猪进行阉割特别是手术阉割的必要 这将会显著提 酮可以调节青年母猪的繁殖系统发育 并在交配过程中诱 高养猪生产的经济效益 降低对环境影响 同时又能消除在 发母猪的静立反射 雄烯酮的生成受公猪性成熟的控制 动物福利方面对手术阉割越来越多的担心与指责以及对公 因此 调整日粮不会对雄烯酮造成的公猪异味产生明显的 猪肉进入市场的限制 效果 虽然使公猪在体重较轻时提前出栏屠宰可以降低雄 1 烯酮的水平 但是 这种做法在经济效益上是不可取的 为什么要对公猪进行阉割 如果不进行阉割 在达到出栏体重时公猪肉有异味 粪臭素是肠道中的氨基酸 色氨酸 被细菌降解的产物 阉割就是为了防止产生这种异味 而未阉割公猪的饲料转 虽然公猪和母猪肠道中粪臭素的产生数量是相同的 但是 化率 氮利用率和瘦肉率又都高于阉割公猪 这可以给生 公猪对粪臭素的代谢和清除能力差 因此造成这种物质在脂 产者带来更高的经济效益 但是 如果利用未阉割公猪生 肪中蓄积 粪臭素造成的公猪异味受日粮和环境 管理 的 产猪肉不仅会带来公猪异味的问题 而且未阉割公猪比阉 影响 产生粪臭素的色氨酸主要来自于肠黏膜新陈代谢脱落 割公猪具有更强的攻击性 Lundström 等 29 从而增 的上皮细胞 可以通过增加日粮中可发酵碳水化合物的水平 加管理的难度 抑制这一过程 此外 猪粪中产生的粪臭素还可以通过皮肤 促使养猪业采用未阉割公猪的原因主要在于手术阉割 产生的动物福利问题越来越被关注 一些欧盟国家将在未 72 或肺被猪直接吸收 因此 在有大量粪 尿积存特别脏的环 境中饲养的猪 不论公母都会在脂肪中蓄积较多的粪臭素

77 研究表明 消费者不喜欢的未阉割公猪异味主要来自于高粪 的代谢 在品种内和品种间都能观察到这种影响 例如 杜 臭素水平 粪臭素的浓度达到.2 mg/kg 或.5 mg/kg 时 洛克猪的雄烯酮水平就比白色品种的猪高得多 在同品种 就能产生公猪异味 内 不同个体之间的公猪异味水平也有很大差异 虽然雄烯 3 解决公猪异味问题的可选方法 酮和粪臭素水平的遗传力为中度至高度水平 但是 以往 在防止产生公猪异味方面 传统的方法是进行手术阉 试图以降低公猪异味为目标的选育结果都造成了繁殖问题 割 由于手术阉割产生的负面影响 近几年来 人们在积极 Zamaratskaia 等 29 而针对公猪异味进行特异性遗 探索可以替代手术阉割的方法 目前 有前途的可替代方 传标记研究则可以最大限度的降低选育对繁殖性能造成的 法主要有 2 种 一种是免疫阉割方法 Dunshea 等 21 不良影响 Moore 等 29 Pauly 等 29 另一种是通过遗传标 研究人员认为 通过遗传标记技术生产没有公猪异味而 记辅助选育方法生产没有公猪异味的品系 Zamaratskaia 拥有公猪生长优势的品系才是解决公猪异味问题的长久之 等 29 计 大量的研究已经证实 在异味水平高与低的个体之间 3.1 手术阉割方法 以及不同品种之间 表达编码参与异味化合物代谢的酶的 对公猪进行手术阉割 也称为 去势 在我国有着非 候选基因不同 单核苷酸多态性 SNP 是人类和动物基因 常悠久的历史 目前 全世界大多数的国家都采用这种方 组中普遍存在的一种分子标记 但是 只有极少数研究报 法 例如 亚洲 北美 欧盟的许多国家都采取在断奶前 告了与公猪异味水平相关基因中的 SNP 最近 来自挪威 对公猪进行手术阉割的做法以解决公猪异味问题 在欧盟 的一份研究报告 Moe 29 首次比较了杜洛克猪和挪 每年要对约 1 亿头公猪进行手术阉割 约占公猪群的 8% 威长白猪品种中大量 SNP 与公猪异味的关联情况 他们发 EFSA 2 手术阉割的方法即切开阴囊 摘除睾丸 现 杜洛克猪的脂肪雄烯酮含量具有显著的标记效应 而 使其不能产生精子和雄性激素 附性器官 附睾 精囊腺 在长白猪中则没有发现 在 2 个品种中都发现脂肪粪臭素 前列腺 输精管 不能发育 从而降低公猪体内的雄性激 具有显著的标记效应 单个标记表达占这种性状总变异的 素水平 达到防止产生异味 改善猪肉品质的目的 2.5% 16.3% 3.2 免疫阉割方法 加拿大奎尔夫大学的研究人员根据编码参与雄烯酮和 用免疫阉割替代手术阉割是解决公猪异味问题的一种 粪臭素这 2 种异味化合物合成与降解的酶的候选基因研究出 具有广阔前景的方法 免疫阉割的原理是通过接种疫苗刺激 了公猪异味的各种遗传标记 他们建立了一个以 1 3 头猪 机体产生抗促性腺素释放激素 GnRH 的抗体 GnRH 由 为样本代表 8 个不同品系涉及 6 个品种猪 杜洛克 汉普 下丘脑产生 可以促使脑垂体分泌促黄体素和促卵泡素 这 夏 长白 大白 皮特兰和约克夏 的数据库 用这些数 2 种激素可以刺激睾丸的发育 GnRH 抗体可以使 GnRH 据来寻找并确认遗传标记 主要是 DNA 中的单核苷酸多态 失活 从而中断睾丸的发育 其效果与手术阉割相同 由 性 SNP 他们对从每个品系中有公猪异味表型极值个体 于是在接近出栏屠宰时进行疫苗接种 因此 猪的大部分 DNA 库中获得的候选基因进行序列对比 以便找出 SNP 生长期的生长速度都与正常公猪一样 从而保留了未阉割公 然后 确定了数据库中所有个体的每个 SNP 的基因型 并 猪的生长性能优势 免疫程序采用 2 次接种 第 1 次接种可 对每个 SNP 与公猪异味表型即雄烯酮和粪臭素进行关联程 以让免疫系统 做好准备 第 2 次接种 屠宰前 6 周 度分析 在这种遗传标记的辅助下可以更加准确地对性状进 可以大幅提高抗 GnRH 抗体水平 这种抗体可以有效阻断 行选择 GnRH 对睾丸的刺激作用 不仅可以控制公猪异味 而且 到目前为止 已经从 28 个公猪异味的候选基因中找到 还能在肥育阶段保留住公猪优秀的增重性能 许多国家的消 了约 8 个有效的 SNP 在不同的品系中 SNP 与脂肪中粪 费者团体的品尝结果表明 接种疫苗公猪的肉吃起来与母猪 臭素和雄烯酮水平之间的关联程度不一 虽然在一些品系 和手术阉割公猪的肉品质一样高 欧洲猪肉生产商想通过接 中 有一些 SNP 是有效的 但是 在 8 个品系的猪中 与 种疫苗来消除公猪异味 而非采用手术阉割 辉瑞动物保健 脂肪粪臭素和雄烯酮相关联的 SNP 数存在差异 在各品系 公司发表声明 瑞士将成为欧洲第 1 个注册该公司 Improvac 中 粪臭素和雄烯酮效应显著的 SNP 个数分别为 5 17 个 疫苗 除异味疫苗 的国家 该产品利用猪自身的免疫系统 和 3 16 个 暂时阻止睾丸功能 从而降低异味物质产生的水平 3.3 遗传选育方法 遗传既能影响异味化合物的产生又能影响异味化合物 各 品 系 中 大 部 分 有 效 SNP 与 粪 臭 素 和 雄 烯 酮 关 联 65% 这与以前关于这 2 种公猪异味之间存在中度正遗传 相关的报道 如 Tajet 等 26 一致 利用这些标记生产 73

78 含有有利等位基因的纯合体猪可以将脂肪粪臭素含量降低 在商品养猪场还可以造成动物福利的问题 为了提高动物福 2% 53% 脂肪雄烯酮含量降低 26% 61% 降幅取决 利 避免动物遭受不必要的痛苦 手术阉割方法将会越来越 于具体的品系 研究人员还证实 这些标记均不会对公猪的 多地受到禁止 因此 需要寻找手术阉割的替代方法 生产性能造成负面影响 目前 他们正在与一家商业性公司 虽然利用免疫阉割的方法可以有效防止公猪异味 但 JSR 育种公司 进行合作 在该公司的品系中对这些 SNP 是 研究表明 通过遗传标记辅助选育方法生产既无公猪 进行确认 最终目标是从少量最重要的基因中找出一些关键 异味又拥有公猪生长优势的品系才是解决公猪异味问题的 的变异 然后将这些标记运用到育种程序中去 以便培育出 长久之计 在养猪生产中 不再需要对公猪进行手术阉割 没有公猪异味而拥有正常公猪生长性能的品系 将可以改善猪肉的品质 提高经济效益 降低对环境的影 这些研究成果标志着 通过遗传选育方法解决公猪异味 响 提高动物福利水平 在生产效率方面 按照 De Lange 问题取得了显著的进展 研究仍在继续 其中包括在商品猪 等 1995 以前进行的分析 并根据 21 年的经济情况进 群中寻找更多的公猪异味 SNP 并对其进行确认 通过遗传 行校正计算表明 如果采用未阉割的公猪 每头猪的利润将 标记辅助选育方法防止公猪异味将不再需要对公猪进行手 能够提高 5 美元 此外 由于未阉割的公猪排粪量少 粪中 术阉割或免疫阉割 这将会显著提高养猪生产的经济效益 氮和磷的排放也会相应减少 从而可以降低养猪生产对环境 又能消除动物福利方面对手术阉割越来越多的担心 的影响 结论 利用手术阉割的方法防止公猪异味不仅会影响生产力 7 本文根据 E.J.Squires 等的文章编译 可供我国养猪生 产者及相关人员参考

79 长白猪概述 张伟力 安徽农业大学 安徽 1 合肥 2336 育成简史 堪称世界之冠 但四肢较为软弱 肢蹄病发生率较高 对营 长白猪原产丹麦 原名 Landrace 有本地品种之词义 养和温度较敏感 长白猪的体型外貌颇有特色 头小嘴长而 该猪在我国文献中最早的译名为伦特瑞斯 兰德瑞斯 兰坠 尖 垂耳修长前倾 下颌无赘肉 眉清目秀 其眼珠有天蓝 斯 兰德拉斯 前三者从英文发音译成中文 后者从俄文发 色 玉石眼 和灰褐色 2 种 是有别与于一般猪种的 其颈 音译成中文 由于其发音与汉语差别较大 饲养员常将兰德 细长 肩丰满 身腰细长 椎骨较一般猪种多 2 节 后臀丰满 拉斯误读为懒得要死 后来国人用最简洁的中文表达将其命 四肢细巧 腹浅修长 乳头 7 对以上 全身白色 偶有青斑 名为长白猪 意为又长又白的猪种 符合其品种特征 其外貌特征有诗为证 丹麦王国堪称世界养猪育种之典范 其养猪生产从来都 胡猪长白名 修长椎骨成 是以先进的育种科技为先导的 19 世纪初 丹麦的养猪业 银披双耳炯 金莲四蹄轻 可以分为 2 种类型 其一是以西兰岛为中心用丹麦本地猪和 所向无肥硕 真乃瘦肉身 多种外国品种杂交生产商品猪上市和出口 其二是以日德兰 种质有如此 万里可传铭 岛为中心对本地猪进行原种的封闭选育提高 即长白猪的原 长白猪的育种也曾走过弯路 2 世纪中叶 由于向高 始材料 1887 年丹麦对德出口肥猪肉的生意极度疲软从而 瘦肉率方向的极度选育曾导致了隐形氟烷基因的纯合 使 转向出口英国 英国市场要求瘦肉不要肥肉 因此 丹麦本 PSE 和 DFD 劣 质 肉 发 生 率 一 度 攀 升 在 年 地猪的育种方向必须迎合瘦肉市场 以提高瘦肉产量为战略 通过肉质测定协助选种才加以克服 长白猪的育种史证实了 方向 丹麦地处北欧 依大西洋暖流而居 夏无酷暑 冬无 主攻选育目标与其他协助性状之间保持动态平衡的重要性 严寒 盛产大麦与乳品 就其天时地利 猪的饲粮以脱脂牛 2 奶和大麦为主要成分 非常适合瘦肉猪的鲜嫩瘦肉和薄膘硬 2.1 比利时长白猪 长白猪的类群和品系 脂的发育 瘦肉型长白猪初步育成于 1896 年 197 年开始 该国长白猪育种史始于 193 年 从德国引入的德系长 进行同胞和后裔测定 1931 年成立全国猪育种委员会 专 白猪 二战后又引入荷系长白猪 比利时的市场强调鲜肉为 攻长白猪的育种 委员会班子共 9 人 3 人来自国立瘦肉加 主 腌肉不入主流 因此以瘦肉产量和料重比为选育目标 工厂 1 人来自私人瘦肉加工厂 2 人来自丹麦猪农协会 2 其育种测定的闭锁群体达 5 头 / 年 比利时长白猪采用 人来自丹麦小股东协会 1 人为丹麦国立畜牧所主任兼顾问 3 周断奶模式 强调产仔性能和哺乳性能 更强调体型外貌 这是一个投资商加科学家与猪农和肉厂结合的理想模式 把 其体型较一般长白的更丰满更短 其肌肉凸起 条块分明 科学育种和产供销有机地结合起来 在全国形成以长白猪为 瘦肉率极高 比利时长白猪用作母本和父本皮特兰杂交生产 纯种选育 并与大白猪杂交生产瘦肉猪的生产模式 长白猪 商品猪上市 皮长一代母猪也用来和比利时长白猪回交生产 育种的同胞和后裔测定多年一贯坚持 在 2 世纪曾一度禁 商品猪 此种北欧模式在比利时最为典型 止出口活种猪而形成品种垄断 也曾一度阻碍了长白猪向全 2.2 英国长白猪 世界的普及 在解禁之后 长白猪顺应瘦肉猪的发展潮流迅速推向 英 国 长 白 猪 育 种 始 于 199 年 从 丹 麦 引 入 品 种 群 1953 年再度进口并成立长白猪育种协会 1978 年该育种协 全世界 成为现代瘦肉猪主体模式杜长大三强鼎立之一 会被纳入英国的全国猪育种协会 如今英国已成为长白种猪 长白猪早在 2 世纪 8 年代就达到日增重 76 g 瘦肉率 出口国 出口量仅次于大白猪 在英国 长白猪主要用于杂 6% 的水平 现代版的长白猪更有 大猪快猪 风格 日 交制种提供长大或大长二元杂母猪 目前 主要生产群体分 增重可达 8 9 g 瘦肉率可达 68% 公猪成年体重 布于英格兰东部和约克郡以及北爱尔兰 苏格兰 5 kg 母猪相应为 3 kg 左右 产仔一般在 11 头 2.3 加拿大长白猪 / 窝左右 专门化母系可达 13 头 / 窝 长白猪的泌乳性能 加拿大地处北美 沃野千里 牧场辽阔 盛产麦类和乳 75

80 图1 长白猪 21 年高大体型 图 2 长白母猪身形 图3 下床小公猪身形 图 长白后备母猪身形 品 其饲养条件与北欧颇为相似 因此 加拿大引入长白猪 良好 为了适应 年的养猪规模体制变更 从 15 进行风土驯化和育种比温热地区的国家要相对顺利 此外 万农户养 3 万头猪过渡到 万农户养 1 万头猪 到本 加拿大在现代育种技术和肉品科学方面与欧美诸国多有交 世纪已发展到年产 1 万 1 6 万头生猪 其中 6% 用 流 对改进长白猪遗传素质起到了良好的推进作用 现代的 于瘦肉出口 基于上述形势 荷兰长白猪被用作母本 然后 加拿大长白猪在瘦肉率 生长速度 繁殖性能方面都有良好 用大白公猪配 生产二元母猪 此后用大白猪 长白轮回杂 表现 交提供商品猪 笔者在荷兰客座研究时曾测得纯种长白猪 2. 芬兰长白猪 1 g 日增重的好成绩 几乎是每分钟长 1 g 体重 该长白猪起源于斯堪的那维亚诸国进口的长白猪种群 芬兰长白猪以形体清秀著称 从而被诸多国家引入参与经济 2.8 意大利长白猪 意大利长白猪与北欧瘦肉型长白猪的育种方向有所相 杂交 芬兰长白猪的育种注重生产第一线的测定 国家级的 同而又有所不同 相同之处是大家都把瘦肉率 生长速度 育种改良计划是为猪农的生产第一线的育种和良种系谱登 产仔数 泌乳力作为选育目标 不同之处是意大利将瘦肉品 记服务的 质 培根 bacon 质量作为首选 以适应南欧肉制品如火腿 2.5 法国长白猪 香肠 皮扎的加工条件 而北欧则强调鲜肉的技术质量 法国自 193 年开始引入长白猪种群 二战后从瑞典大 2.9 美国长白猪 量引进长白猪种群 因为届时丹麦禁止出口种猪 法国长白 197 年美国首次引入丹麦长白猪用在美国农业部试验 猪的育种目标针对环境适应性和市场对猪肉的胴体品质需 站作杂交育种试验 当时的美国长白猪是引入的丹麦长白猪 求 因此重选骨骼健壮性 瘦肉发育和产仔性能 该猪眼 与波中猪混血的后代 波中猪占 1/16 1/6 血液 其后 肌硕大 腿臀肌肉发达 每头母猪每年提供 19.7 头育肥猪 又有 8 头挪威 丹麦 瑞典的种猪注入新的血液 故美国长 在法国 长白猪被称为法式丹麦猪 通常作三元杂交的终端 白猪的基因来源较广泛 美国长白猪的背线平直或略有凹 父本 或生产二元母猪的父本 目前广为出口到欧洲诸国 腰 与大多数其他国家的弓背长白猪形成明显的外型差异 法国长白猪早在 1965 年就已输入中国 其体形修长 有 对肋 下颌清秀 水平尻长而丰满 2.6 德国长白猪 但肌肉不过度凸显 其中躯特点为胸深腹广 腹线长而低沉 19 年德国下萨克森州开始有长白猪的饲养 198 其乳腺发育良好 较适应于 5 周断奶的生产周期 美国长白 1958 年又进口了丹麦长白猪和荷兰长白猪 其育种方向聚 猪偶有青斑 当视为正常 美国长白猪在高能高蛋白的玉米 焦于产肉性能 屠宰率 产仔数 哺育性能 饲料利用率 大豆型饲粮条件下 遗传潜力得以充分表现 选种进展神速 而对体长和体尺并不苛求 德国长白猪在经济杂交利用方面 目前 美国长白猪的父系和母系都有庞大的选种群体 而且 做得十分成功 每年约有 1 头纯种长白猪出口 两系分化得泾渭分明 令国际同仁瞩目 在德国长白猪中有一支在 Pfaiz Rhineland 地区培育的 B 系长白猪 其血统起源于比利时长白猪和荷兰长白猪 以 2.1 瑞典长白猪 瑞典长白猪素以体格健壮 身材结实 四肢坚强而著称 宽背肥臀为特点 用于特殊的经济杂交 因此普通的德国长 其动物福利水平和健康水平在当今世界是屈指可数的 有鉴 白猪和 B 系德国长白猪在血缘上相互独立 一旦用于经济 于此 瑞典长白猪被许多国家引种 其中包括中国 美国曾 杂交可以产生杂种优势 多量引入瑞典长白猪 大大提高了美国长白猪的育种档次 2.7 荷兰长白猪 瑞典长白猪在瘦肉率 生长速度 繁殖性能 肉质和抗应 荷兰长白猪起源于丹麦长白猪和德国长白猪与荷兰本 土地方品种的混血 其体型厚重宽大 身长而丰满 母性 76 激能力各方面的发展是平衡的 这与瑞典的高科技育种密 切相关

81 2.11 中国长白猪 中国引进长白猪始于 196 年 由瑞典进口 2 头 饲于 河北农垦部涿县农场和浙江 广东等原种场 当时引进的 猪以高瘦肉率的 55 号系和体大快长的 955 号系为主 55 号 系耳大咀尖 额窄腮小 头颈清秀 身躯细长 后躯丰满 整体呈子弹状流线型 其繁殖性能颇佳 公猪采精量常在 5 ml 以上 955 号系身体高大魁伟 骨架粗大 胸深腹广 长速超群 身上多有鸡蛋大的青斑 长白猪引入中国初期最 大的困惑有二 一是不能适应中国当时青粗饲料为主的饲养 方式 二是不能适应中国漫长的夏季酷暑 笔者 1965 年负 责农垦部涿县农场首批进口长白猪的饲养工作 当时不得不 模拟北欧的条件以大麦 发酵小麦 豆饼 玉米 苜蓿干草 粉为精料 另将胡萝卜打浆调鲜奶 幸亏当时农场里有 5 图5 余头西门塔尔奶牛和黑白花奶牛 夏天用红薯秧加西瓜饲 长白猪 1965 年 喂 并不断给猪冲凉才使该种群得以在中国扩群繁衍 由于 当时中国的饲料条件和猪舍条件比较艰苦 长白猪在农村推 广往往生长速度还不如本地猪或大本一代和巴本一代 更有 甚者 中国当时的消费者吃惯了中国风味浓厚的本地猪或杂 交猪 对寡淡无味 纤维粗糙的长白猪肉多有微词 故长白 猪在中国的异乡侨居并非一帆风顺 倒是在 年 国人猪肉消费理念开始攀升 从 有肉求量 到 有肉求质 从 以肥为质 到 以瘦为贵 的市场需求拉动了长白猪在 中国的生产 长白猪的高瘦肉率 高生长速度和高繁殖率三 大特点顺应了中国 2 世纪 8 年代开始的快速经济发展和瘦 肉市场需求的急剧攀升 另一方面从 8 年代起中国饲料工业的兴起 饲养工艺 和猪舍硬件的现代化给长白猪在中国的发展提供了物质基 础 从技术力量方面 中国在 1972 年成立了全国猪育种科 研协作组 而后又专门成立了全国的长白猪育种协作组 使 图6 美系青年长白公猪 21 年 长白猪的育种技术能得以和国际接轨 眼下 全国生猪遗传 / 窝水平 长白猪引入中国迄今 21 年 已有 6 年历史 改良联合育种在全国开展 不到半世纪的时间长白猪从一个 196 年首次引入长白时 其 18 日龄达 9 kg 的速度已是当 踏入国门的异乡猪客一跃而成为当今中国瘦肉猪三大主力 时国内之最 为此 特将 1965 笔者在农垦部涿州农场负责 之一 在中国的洋猪种发展史中 长白猪的发展速度是独占 长白猪育种工作的照片 图 5 和 21 年在安徽安泰原种猪 鳌头的 场负责育种的照片 图 6 作一对比 同样的人同样的猪种 中国自 196 年后不断从法国 荷兰 英国等国进口长 5 年的时间跨度使一个帅哥变成了老头 同时也把一个猪老 白猪 198 年后直接从丹麦进口 近年来从北欧和北美进口 头变成了猪帅哥 5 年前新进口的种公猪舍不得淘汰 养到 的数量有增无减 数量以美国和丹麦居多 中国的现代长白 老用到老 而现在公猪不到 2 岁 有 儿子 配种就被淘汰 猪几乎囊括世界各国的长白猪精英 基因库十分丰富 对中 为了加快选择进展 很多育种场争取一年一世代 因此场里 国不同地理环境可以求其所适 中国目前最好的长白猪父系 的种公猪越来越年青了 这也意味着中国长白猪的育种速度 个体可达 119 日龄 1 kg 的生长速度 最佳母系可达 13 头 已步入一个崭新的时代 77

82 种猪早期选育探讨 李成渤1 吴洪琴1 王友盛1 朱 晖2 孟 和3* 1.桂林美冠原种猪育种有限责任公司 广西 桂林 桂林市水产畜牧兽医局 广西 3.上海交通大学农业与生物学院 上海 桂林 摘 要 为了探讨种猪早期选育的可行性 本研究选择21头系谱清晰 性能测定齐全的大白母猪做为实验材料 利 用GBS种猪场管理与育种分析软件对5 kg体重阶段和1 kg体重阶段育种值进行估计并检测2阶段育种值排序的 一致性 运用SAS统计软件对2阶段的育种值进行相关分析 结果表明 5 kg体重阶段和1 kg体重阶段估计育种 值排序一致性很高 2阶段体重估计育种值相关性也很高 达到极显著水平 因此利用种猪5 kg阶段体重ebv 估 计育种值 对种猪进行早期选育准确性是很高的 关键词 猪育种 早期选育 表 1 试验猪测定日龄和测定体重 猪的早期选育能够获得较快的遗传进展 因为高产动物 往往在生命的早期就优于其他动物 因而生长速度就比较快 [1] 在我国 种猪市场的销售环节已基本形成一个通用规则 个体号 即种猪出售时体重一般在 5 6 kg 而根据 全国种猪 5 kg 阶段 1 kg 阶段 1 kg 阶段 测定日龄 测定体重 测定日龄 测定体重 遗传评估方案 的要求种猪的主选阶段在 1 kg 体重阶段 YYGLMG 在这个阶段大部分种猪都已经出售 数量有限的测定群体基 YYGLMG 本上都是企业自己选留的 全程测定的群体很小 导致选育 YYGLMG 强度减小 选育的准确性降低 由此导致种猪群体的遗传进 YYGLMG 展缓慢 甚至退化 种猪早期选育能够扩大测定的规模 增 YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG 育提供依据 对加大种猪选育群体 提高选育的准确性 YYGLMG 提高种猪生产企业的利润具有重大的意义 YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG 种猪达 5 kg 体重阶段 约 3 月龄 和 1 kg 体重阶 YYGLMG 段 约 5 6 月龄 时测定其体重 5 kg 体重阶段测定时 YYGLMG 要求种猪在 6 kg 之间 1 kg 体重阶段测定时要求 YYGLMG YYGLMG YYGLMG 加选择的强度 特别是对繁殖性能等低遗传力性状 能获得 较快的遗传进展 因此种猪早期选育对当今经济实力较弱的 我国种猪生产企业来说是实用的 是种猪终测选育的重要补 充 本课题通过对种猪早期选育的研究 为种猪的早期选 材料与方法 1.1 实验材料 桂林美冠原种猪育种有限责任公司大白种猪群体 1.2 生长性能测定及数据收集 选择符合新美系大白猪品种特征 无遗传缺陷 健康的 母猪进行测定 种猪在 8 15 kg 之间 表 1 不在此范围内称重的种 猪数据剔除不要 种猪测定前空腹 12 h 在称重时要求电子称显示稳定 78

83 再读取数据 记录测定日期和测定体重输入 GBS 软件 1.3 试验仪器 电子秤 SCS-2T 称猪笼 GBS 种猪场管理与育种 分析软件 图 1 1. 统计分析 运用 GBS 种猪场管理与育种分析软件计算 5 kg 体重 日龄阶段和 1 kg 体重日龄阶段育种值 然后检测 2 阶段 估计育种值排序的一致性 运用 SAS 8.1 统计分析软件相关分析 CORR 过程 对 5 kg 体重阶段日龄 EBV 和 1 阶段体重日龄 EBV 进行 图1 简单相关分析 2 结果与分析 表 2 5 和 1 kg 体重日龄 EBV 排序 阶段 EBV 排序一致性分析 将 5 kg 体重日龄 EBV 和 1 kg 体重日龄 EBV 按育 种值大小进行排序 育种值排在前 5 名的个体顺序是一致的 育种值排在后面的几个个体 2 阶段的育种值排序稍有差异 GBS 种猪场管理与育种分析系统 5 kg 体重 个体号 日龄 日龄 EBV 1 kg 体重 排序 日龄 日龄 EBV 排序 YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG EBV 进行简单相关分析 结果显示 2 阶段的估计育种值 YYGLMG 相关性达.88 相关性极显著 P <.1 表 3 分析 YYGLMG 结果说明 利用 5 kg 体重日龄 EBV 对种猪进行早期选育 YYGLMG 准确性也很高 YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG YYGLMG kg 阶段仔猪受母体影响逐渐消失 其本身遗传性能开始 YYGLMG 显现 因此在这个阶段进行早期选育的准确性还值得进一步 YYGLMG 研究 YYGLMG 用 5 kg 体重估计育种值进行选择的弊端 YYGLMG 对于在配套系中作母系的大白猪品种 其主选的性 YYGLMG 状除了生长性能还有繁殖性能 [2] 如果在 5 kg 体重阶段 YYGLMG 但总体来说 2 阶段育种值排序一致性很高 表 2 因此 按 5 kg 体重日龄 EBV 进行选择基本上可以选出 1 kg 体重 日龄 EBV 高的个体 根据 5 kg 体重日龄 EBV 对种猪进行 早期选育准确性还是很高的 阶段 EBV 相关性分析 将 实 验 个 体 5 kg 体 重 日 龄 EBV 和 1 kg 体 重 日 龄 讨论 kg 体重阶段做为种猪早期选育的探讨 鉴于 全国种猪遗传评估方案 中将 3 kg 体重日龄 阶段作为种猪选育过程的 1 个阶段 本课题也应对此阶段 进行相关研究 由于 GBS. 版软件还未给出 3 kg 体 重阶段日龄的计算模型 因此本课题也未能对其进行探讨 只根据其生长速度进行选择 其繁殖性能的优良基因就 有可能丢失 因此在 5 kg 体重阶段进行早期选育应借鉴 的情况下可以先根据母猪的生产力指数 SPI 和 5 kg 体 1 kg 阶段的方法将繁殖性能也考虑进去 但国内现在还 重日龄估计育种值 2 个指标进行选择 未见这方面的研究 因此要进行种猪的早期选育有必要在 kg 体重测定与后备种猪限饲关系 这一方面进一步深入研究 现阶段没有一个综合选择指数 国内传统的养猪思想认为 为了使后备种猪生殖系统充 79

84 表 3 5 和 1 kg 体重日龄 EBV 相关分析 言 我们担心的不是其生殖系统不能充分发育 而是其发情 太迟 鉴于以上 2 方面的原因 笔者认为外来瘦肉型猪品种 在 1 kg 之前不应限饲 结论 本研究发现种猪 5 kg 体重阶段的估计育种值与 1 kg 体重阶段估计育种值排序一致性很高 2 阶段的估计育种值 相关性也很高 因此利用 5 kg 体重阶段估计育种值对种猪 进行早期选育是可行的 分的发育 6 kg 以后就要限饲以控制其生长速度 因此种 猪普遍在 6 kg 以后开始限饲 在这个阶段对种猪进行限饲 参考文献 直接影响种猪遗传性能的发挥 种猪限饲的程度不同也会对 [1] Palmer J.Holden M.E.Ensminger Swine Science 育种值的估计产生很大的影响 对于引进的杜长大等瘦肉型猪品种 其性成熟晚 基 本上 1 kg 以后才开始发情 按照习惯再等 2 个情期配种 SeventhEdition [M] 王爱国 第 7 版 北京 中国农业大 学出版社 [2] 彭中镇 再议当前场内种猪的测定与选择 中国动物遗传育种 种猪配种时体重一般在 12 kg 之后 在这个阶段其生殖系 研究进展 [M] 第 1 版 北京 中国农业科技出版社 23 统完全可以得到充分的发育 因此 对于外来瘦肉型品种而

85 维生素A与β-胡萝卜素 对母猪生殖机能的影响 姜洪起1 赵向红2 丁君辉2 1.天津市泰康饲料厂 天津 3 2.北京博农利生物科技有限公司 北京 185 摘 要 总结了关于维生素A和β-胡萝卜素对母猪繁殖性能影响的一些研究结果 主要将维生素A和β-胡萝卜 素影响母猪生殖机能的作用方式 添加剂量及其作用机制做一个综述 关键词 母猪 维生素A β-胡萝卜素 繁殖性能 母猪的繁殖性能决定着生产的效率和利润 在现代养猪 1989 近些年大多数研究结果表明 通过在母猪繁殖过程 生产中 常通过营养调控手段来促进母猪繁殖性能的提高 的关键阶段对其快速补充维生素 A 可提高母猪的繁殖性能 近些年 关于维生素 A 和 β- 胡萝卜素对母猪繁殖性能的 Coffey 1993 Lindemann 28 Brief 和 Chew 1985 影响 国内外已经做了很多研究工作 以年产仔猪数量衡量 研究了给缺乏维生素 A 的初产母猪饲喂或注射维生素 A 母猪的繁殖性能是现代养猪生产最重要经济变量之一 给母 或 β- 胡萝卜素对其繁殖性能的影响 结果表明妊娠早期 猪提供适量的维生素 A 或 β- 胡萝卜素 可提高受胎率和 注射 β- 胡萝卜素或维生素 A 的初产母猪其窝初生仔猪数 胚胎成活率 保证胎儿和初生仔猪发育良好 从而提高母猪 和断奶仔猪数均提高了 然而 Pusateri 1999 从仔猪 繁殖性能 断奶到母猪分娩期间任一个阶段给母猪注射 1 万 IU 的 1 维生素 A 却没能提高母猪的窝产仔数 这可能与维生素 A 维生素A与母猪繁殖 1.1 生理机能 维生素 A 有视黄醇 视黄醛和视黄酸 3 种衍生物 视 的注射剂量有关 过高的注射剂量没能带来母猪繁殖性能 的改善 黄醇作为维生素 A 主要运载形式 当其被脂化时在肝脏中起 NRC 1998 推荐母猪维生素 A 的需要量为每千克日 贮藏的作用 维生素 A 的来源主要存在于动物界 植物中 粮 1 3 IU 在实际生产中维生素 A 是以注射的方 所含的维生素 A 数量极少 式应用的 实践表明注射比日粮补充更为有效 日粮中若缺 维生素 A 是维持上皮组织健全所必需的物质 参与组 乏维生素 A 则不能保证母猪最大程度的发挥其繁殖能力 织间黏多糖的合成 调节上皮细胞的增殖和发育 维生素 A 在注射优于饲料添加的情况下 生产中维生素 A 的注射量 参与母猪卵巢发育 卵泡成熟 黄体形成 输卵管上皮细胞 为标准的 2 1 倍 而注射时间一般为仔猪断奶 配种和 功能的完善 通过促使胎盘的上皮细胞发育而达到促进胚胎 妊娠前期 Coffey 和 Britt( 1993 在母猪日粮中添加了远 发育的目的 维生素 A 作为免疫佐剂 还具有免疫调节作 高于 NRC 1998 需求水平的维生素 A 结果表明要提高 用 非特异性地增强母猪特异性免疫机能 增强机体的抗病 胚胎的成活率 在胚胎发育的关键阶段可能需要较高水平的 能力 维生素 A 这一水平可能显著高于要防止出现明显缺乏症所 母猪缺乏维生素 A 时 内分泌腺萎缩 结构受损 内 需的水平 莫延新 27 在仔猪断奶和母猪配种的当天及 分泌功能发生紊乱 激素分泌不足 减少或完全停止 生殖 配种后的第 7 天 给每头母猪肌肉注射维生素 A 5 万 IU 后 系统上皮受影响严重 引起炎症 可能会造成母猪发情失败 提高了经产母猪产仔数和成活率 这和唐斌 1998 得到的 胎儿被吸收或成为死胎 McDowell 1989 结果相同 Lindemann 28 在母猪断奶和配种时给其注 1.2 应用效果 射 2.5 万 IU 或 5 万 IU 的维生素 A 后 对第 1 胎和第 2 胎 在母猪日粮中补充添加维生素 A 非常重要 维生素 A 缺乏会导致母猪不发情 胎儿发育不良或死胎 McDowell 的母猪而言 窝产仔数呈线性增加 但对第 3 6 胎的母猪 而言 窝产仔数没有受到显著影响 由此表明母猪获得最大 81

86 繁殖性能所需的维生素 A 需求量随其年龄的不同而不同 维生素调控母猪的繁殖性能可能是通过影响卵巢内类 给母猪额外补充维生素 A 后 会改变母乳中视黄醇的 固醇激素的合成和改变子宫内环境实现的 ①维生素 A 可 浓度 从而可能通过给仔猪哺乳来改变维生素 A 在仔猪体 能通过影响卵巢内类固醇激素的合成而间接发挥其对繁殖 内 的 沉 积 Valentine 和 Tanumihardjo 25 给 哺 乳 母 机能的作用 Talavera 和 Chew 1988 缺乏维生素 A 后 猪分别补充高剂量 2.1 mmol 和低剂量 1.5 mmol 孕酮合成和分泌量减少 Ganguly 1971 ②维生素 A 还 的维生素 A 待仔猪持续哺乳 3 d 或 1 d 后 再分别自由 可以直接影响子宫内环境 来改变胚胎的发育 而这种作用 采食含维生素 A 的日粮 d 结果提高了后代仔猪肝脏中维 形式需要借助视黄醇结合蛋白 RPB Harney 199 报 生素 A 的含量 但对仔猪血液中维生素 A 的含量没有显著 道在妊娠 1 15 d 之间 猪胚胎可产生 RPB Adams 1981 性的影响 Penniston 2 发现在含维生素 A 充足的日 研究发现当母猪血液中孕酮水平提高时 子宫液中维生素 粮中再额外分别补充高剂量或低剂量的视黄基酯 饲喂母猪 A 的含量也得到提高 并且发现由子宫内膜和孕体的 RPB 后 高剂量组能诱发更多的维生素 A 代谢 并在循环中产 含量都有提高 他们认为 RPB 对于将维生素 A 从子宫转 生更高浓度的视黄基 β- 葡萄苷酸 视黄醇的一种代谢产 运到胚胎中发挥着重要的作用 ③维生素 A 可直接或以维 物 和视黄酰 β- 葡萄苷酸 视黄酸的一种代谢产物 这 生素 A 酸的形式调控细胞的分化与增殖以及特定基因的转 和 Valentine 25 得到的结果相似 但未改变血清中视 录 从而调节新陈代谢和胚胎的发育 Bedo 1989 Wolf 黄醇的浓度 从以上研究也可以得到在含维生素 A 充足的 199 Chew 1993 日粮的中再补充高剂量的维生素 A 母猪可以通过体内转化 2 作用来降低视黄酸的生成 从而消除高剂量维生素 A 带来 2.1 生理机能 β-胡萝卜素与母猪繁殖 的毒性 而当母猪长期采食缺乏维生素 A 的日粮后 或许 类胡萝卜素来源于植物的前体型维生素 A 而 β- 胡 在其体内不能有效合成类维生素 A 代谢相关酶 因此 再 萝卜素是具有最大生物活性的维生素 A 原 多数动物能在 补充维生素 A 时要控制剂量 以免发生视黄酸毒性作用 肠壁内或肝脏中把 β- 胡萝卜素转化为维生素 A 但因物 1.3 作用机制 种不同其转化效率有差异 猪摄入含 β- 胡萝卜素较高的 从过去的研究结果来看 维生素 A 对母猪繁殖性能特 别是窝产仔数有较好的改善作用 但作用机制并未得到阐 食物转化为维生素 A 的效率较低 1 mg β- 胡萝卜素仅相 当于 26 5 IU 的维生素 A NRC 1988 明 Brief 1985 和 Whaley 2 用 维 生 素 A 处 理 小 β- 胡萝卜素作为维生素 A 源 具有维持动物正常的 母猪 未能提高母猪排卵期的排卵数 因此 维生素 A 可 视觉 保护上皮组织完整的作用 β- 胡萝卜素通过与自由 能不通过增加母猪的排卵数来提高其繁殖性能 而是通过 基反应生成无毒产物或者中断自由基的连锁反应来清除体 降低胚胎早期死亡率来提高窝产仔数 Lindemann 28 内自由基 Britton 1995 保护机体组织或细胞免受自由 Downie 25 通过小鼠试验发现维生素 A 对胚胎肌肉发 基和脂质过氧化损伤等作用 同时 β- 胡萝卜素具有良 育和后代肌肉功能有重要的作用 从另一方面也说明了维生 好的通透性 能够透过卵泡膜进入卵泡内 调节生殖活动 素 A 对胚胎发育的改善作用 为了能有效的评估维生素 A 影响母猪窝产仔数的潜 在机制 Whaley 等 1997 建立了一个以饲喂高能日粮 来降低母猪胚胎成活率的实验模型 给初产母猪从第 2 次 Liebler 1993 β- 胡萝卜素还与黄体生成素的合成有关 具有改善受胎率及缩短离乳至首次发情时间的作用 2.2 应用效果 关 于 β- 胡 萝 卜 素 对 母 猪 繁 殖 性 能 的 影 响 大 部 分 发情后第 7 天起至第 3 次发情后 d 饲喂代谢能为 研 究 结 果 表 现 的 是 正 面 效 应 Kostoglou 2 冯 俊 6.2 MJ/kg 的高能日粮或对照日粮 并在第 2 次发情后第 29 但 也 有 报 道 没 有 显 著 作 用 的 Rheaume 天和第 3 次发情配种当日即排卵前 给母猪肌肉注射维 这可能与 β- 胡萝卜素的添加方式和添加剂量有关 生素 A 或安慰剂 高能量日粮会减少胚胎数 降低胚胎成 Kostoglou 2 选择妊娠 99 d 的母 猪 在 饲 料 中 直 活百分比 提高胚胎直径的变异性 因此 维生素 A 会对 接添加 mg/kg β- 胡萝卜素 或分 次 妊娠 1 d 胚胎数量和胚胎成活率产生积极的影响 降低胚胎直径的变 分娩当天 断奶当天和发情第 1 天 给母猪注射 2 mg/ 异性 增大平均直径 Whaley 等 2 给小母猪饲喂相 kg β- 胡萝卜素 结果显示饲料添加组血清 β- 胡萝卜素 同的高能日粮后 用 1 万 IU 维生素 A 处理小母猪 可使 维生素 A 浓度无显著变化 而注射组这 2 个指标均有显著 减数分裂较早地恢复 在排卵前调整卵子发育 结果导致卵 提高 注射组和饲料添加组均提高了仔猪断奶重量 但注射 子发育成更加均匀 更成熟和早熟的胚胎 组与不添加组相比还提高了窝产仔数 这也说明通过注射 82

87 的方式给母猪补充 β- 胡萝卜素比直接在饲料中添加 能 处理可以提高窝产仔数 但产生这些效应的机制还未得到 增加其在体内的吸收 并能提高 β- 胡萝卜素向维生素 A 全部证明 也还未弄清楚它究竟是直接参与调节某些繁殖进 的转化 从而更有效的提高母猪的繁殖性能 但 Rheaume 程 还是只作为维生素 A 的来源 β- 胡萝卜素主要贮存 1986 却报道在母猪妊娠期注射 β- 胡萝卜素对繁殖力无 在黄体中 而维生素 A 则主要贮存在肝脏中 这可能是 β- 显著影响 通过在饲料中添加的方式给母猪补充 β- 胡萝 胡萝卜素在繁殖过程的独特作用 据推测 β- 胡萝卜素通 卜素 对母猪繁殖性能无显著影响 其原因可能是在母猪 过对繁殖过程中 1 个或多个关键阶段 包括卵子成熟 排卵 肠道中 β- 胡萝卜素的溶出度较低 难于被吸收 另外由 受精和胚胎的早期成活和发育 发挥积极的作用来提高窝产 于其分子结构的不稳定性 容易自身被氧化而失活 冯俊 仔数 Pope (199) 给母猪注射 β- 胡萝卜素提高了血浆孕 29 在妊娠后期母猪日粮中分别添加不同剂量的 β- 胡 酮水平 表明 β- 胡萝卜素可能通过作用于卵泡黄体改善 萝卜素微囊 保证了其稳定性 结果显著提高了仔猪的初生 重量 增强了妊娠母猪的总抗氧化能力以及血清和初乳中的 免疫球蛋白水平 并且添加 16 mg/kg 时效果最好 当日粮中维生素 A 已经满足母猪的繁殖需要时 再 其分泌功能 从而影响母猪繁殖过程 β- 胡萝卜素有改善母猪繁殖性能的作用 其可能的 机理是 ① β- 胡萝卜素具有抗氧化作用 是非常有效的 自由基清除剂 作为抗氧化剂可防止脂质过氧化 Burton 补充 β- 胡萝卜素也可以改善母猪的繁殖性能 Coffey 198 从而保护子宫及卵巢中合成类固醇的细胞免受氧 1993 Pope 199 研究发现胚胎死亡一般发生在母猪妊 化作用的损害 目前已了解 β- 胡萝卜素在低渗透压时 娠早期 即当胚胎从囊胚阶段向丝状阶段发育时 因此 在 如在滤泡颗粒层中 可起抗氧化作用 田允波 1996 这个阶段给母猪补充充足的维生素营养至关重要 Coffey ② β- 胡萝卜素可调控靶组织的核酸合成 ③ β- 胡萝卜 1993 在试验 1 中对初产和经产的长白母猪在断奶时一次 素被吸收后进入亚细胞结构 调节子宫环境或者内分泌反 性颈静脉注射 5 1 和 2 mg 的 β- 胡萝卜素 而 应 从而影响胚胎的附植 生长和发育等过程 能促进卵 基础日粮中维生素 A 的含量都为 1.1 万 IU/kg 结果得 巢中黄体细胞分泌孕酮 Pope 199 降低胚胎死亡率 到 β- 胡萝卜素对母猪血浆中孕酮和维生素 A 的含量以 ④刺激 子宫乳 分泌 Chew 1993 ⑤提高母猪所产 及初产母猪的繁殖性能没有影响 但提高了血浆中 β- 胡 仔猪体内淋巴细胞的增殖 Hoskinson 1989 和血浆中免 萝卜素的含量和经产母猪的产仔数 在试验 2 中他在仔猪 疫球蛋白的浓度 Brief 和 Chew 1985 从而提高了自 断奶和母猪配种的当天及配种后的第 7 天分别对母猪注射 身免疫力 降低了仔猪死亡率 2 mg β- 胡萝卜素和 5 万 IU 维生素 A 后 提高了母猪 影响母猪繁殖性能的营养因素较多 在生产中应以能 窝活仔数及初生窝重 但对初生重没有影响 此试验结果也 量 蛋白质 氨基酸和矿物质等营养平衡的日粮为基础来 表明在维生素 A 含量充足的母猪日粮中 再补充 β- 胡萝 研究维生素营养 维生素 A 和 β- 胡萝卜素作为其中比较 卜素比只添加维生素 A 可以进一步提高窝产活仔数 这是 重要的 2 种维生素 关于不同胎次的母猪对维生素 A 和 β- 因为 β- 胡萝卜素具有维生素 A 以外的生理功能 它对母 胡萝卜素的最适需要量 以及两者的配伍添加和添加时间 猪繁殖性能的影响可表现出不同于维生素 A 前体的独立作 还值得进一步探讨和研究 同时 在生产中还应该考虑饲 用 田允波 1996 养管理水平 动物品种及胎次 饲粮组成 环境条件等因素 2.3 作用机制 来研究维生素 A 和 β- 胡萝卜素对母猪的最佳饲喂量 从 很多研究已经表明 用 β- 胡萝卜素对断奶母猪进行 而更好的改善母猪的繁殖性能 83

88 谈种猪场内测定及注意事项 王家圣1 朱昌友2 韩安勤1 杨军3 黄祥春1 李继权1 向令保1 1.湖北省畜牧兽医局桑梓湖种猪场 湖北 荆州 31 2.湖北省畜牧良种场 湖北 3.长江大学动物科学学院 湖北 养猪业是畜牧业的支柱产业 良种是生猪生产发展的 荆州 荆州 种猪场内测定的对象是达到一定日龄的一批种公 母 基础 选育优良种猪最基本的手段是种猪性能测定 所谓 猪 同品种的种猪个体大小较接近 从外观上较难区分 要 种猪性能测定是按测定方案将种猪置于相对一致的标准化 得到准确的测定数据 待测种猪必须有规范的耳缺号或耳牌 条件下对目标性状进行度量的全过程 广义的讲 种猪测 号 做到数据与种猪一一对应 各种猪场间耳号编制方法不 定还应包括测定信息及测定结果的使用 如根据测定结果 尽相同 但各种猪场内所有种猪编号方案必须统一 每头种 按标准进行评估 分级及良种登记等 根据种猪测定的结 猪的耳缺号或耳牌号必须是唯一的 必须与电脑育种软件里 果 计算各性状的估计育种值 再将多性状的估计育种值 标准的 15 位种猪耳号一一对应 且待测种猪系谱信息完整 综合成一选择指数 以选择指数的高低进行种猪排序 确 清楚 [5-6] 定种猪的选留 从实施种猪测定的场所来分 可分为测 参与同期测定的种猪 体重应控制在某一范围之内 体 定站测定 station test 和场内测定 on-farm test 测 重过大或过小都直接影响育种值的估计和综合选择指数的 定站测定是指将所有种猪集中在一个专门的性能测定站或 排序 按 全国种猪遗传评估方案 试行 规定 测定的 某一特定的种猪场中 在一定时间内进行性能测定 如湖 3 个基本性状和 12 个辅选性状中 达 1 kg 体重的日龄 北 北京 广东 浙江和四川等省市定期对区域内种猪进 达 1 kg 体重活体背膘厚两性状测定时要求待测种猪体重 行集中测定和拍卖 场内测定是指直接在各个种猪场内进 在 8 15 kg 达 5 kg 体重的日龄性状测定时要求体重 行性能测定 且不要求在统一的时间内进行 我国种猪 在 6 kg 饲料转化率性状测定要求为 3 1 kg 期 测定采取的是 场内测定为主 测定站测定为辅 场内测 间的饲料转化率 定与测定站测定相结合 的测定方案 测定站测定时间集 1.2 测定部位 [1] [2] 中 测定种猪数量有限 而各场开展的场内测定紧跟种猪 测定人员对性状测定的部位尤其是活体性状测定部位 生产周期 测定批次多 总的测定样本量大 是联合育种 的把握 直接决定了测定数据的准确性 以达 1 kg 体重 进行性能测定和数据采集的主要方式 但各种猪场测 活体背膘厚为例 要求采用 B 超时扫描待测种猪倒数第 3 定规模不一 性能测定设备和设施配备不一致 测定人员 肋间处测得背膘厚 采用 A 超时测定胸腰结合部 腰荐结 素质也不尽相同 根据湖北省畜牧兽医局桑梓湖种猪场 15 合部沿背中线左侧 5 cm 处的二点膘厚平均值 对确切部位 年开展种猪场内测定的实践 我们认为 要获得准确无偏 的识别 测定人员除了参加正规的种猪性能测定培训外 还 的场内种猪测定数据 应从种猪 测定设施和测定人员三 应该多联系 熟能生巧 [7] 方面做好细致的工作 2 1 [3-] 各种猪生产企业由于生产规模和经济实力的差异 对种 种猪选择及测定部位 1.1 种猪耳号和日龄 图1 8 种猪测定专班 设备与设施 猪性能测定设备和设施的投入很不一样 但不论测定设备 图2 测定专用电子秤 图3 种猪背膘测定 图 测定数据计算机处理

89 这要求测定人员测定过程中始终保持很强的责任心 不松 懈 不推诿 不走形式 保证测定工作的完整性 同时 测定人员的责任感不光体现在测定技术上 也体 现在对待种猪的态度上 种猪是被测定的对象 也是种猪企 业的最终产品 测定人员在测定过程中应保持态度温和 不 图5 种猪测定设备 A 超 图 6 种猪测定设备 Ｂ超 能粗暴对待不配合的种猪 严禁踢 踹种猪 在称重过程中 必须耐心等待种猪相对安静下来以后再读取数据 同样 只 先进与否 测定设施是否完备 必须保证现有测定设备运作 有待种猪相对静立后进行活体背膘厚的测定 这样才能获得 正常 现有测定设施随时可用 就辅测性状饲料转化率而 的数据真实有效 言 笔者所在种猪场采用美国进口的 Osborne 自动记料系统 该系统运转需要专门的测定舍 需要专人操作和维护 如果 小结 场内测定是我国种猪性能测定的主体 其测定水平的高 对系统软硬件不定期进行维护 出现问题后不能及时维修 低决定了我国种猪选育进展 一定程度上也影响了行业主管 所得到的测定数据必定偏离真实值 甚至导致同一批次数据 部门对相关政策的制定 直接影响了种猪生产企业种猪的品 完全不可用 质 做好种猪的场内测定 贵在坚持 种猪场测定 1 kg 体重活体背膘厚 应采用便携式 B 超或 A 超 基本上都由操作面板和探头两部分组成 在场 内测定过程中 超声波仪操作人员必须对控制面板非常熟 悉 操作快速 准确 保质保量完成测定任务 对于呈圆弧 形的探头 必须保持探头与种猪体轴平行 待控制面板上所 呈图像稳定后再读取和保存数据 [8] 不论是进行称体重 测定活体背膘厚还是部分种猪场开 展的体尺测定 都要求测定过程中种猪保持相对安静状态 且种猪体轴保持与地面平行 因此场内种猪测定最好有专门 的测定台 限位栏或专用的测定秤 种猪在测定台上 栏内 只能顺向站立 不能前进 后退和转身 保持体姿的稳定 [9-1] 3 参考文献 [1] 熊远著 种猪测定与遗传评估 [J] 养殖与饲料 [2] 李剑豪 种猪场品种选育计划和场内测定 [J] 广东畜牧兽医 [3] 曹新民 徐涵 简述种猪生产性能测定 [J] 现代畜牧兽医 [] 陈玉明 白峰 谈种猪的性能测定 [J] 福建畜牧兽医 [5] 陈世清 范首群 郭宗义 等 规模化猪场猪群性能测定与种 猪选择方案探讨 [J]. 江西畜牧兽医杂志 人员 [6] 张沅 猪联合育种策略 [J] 中国猪业 测定人员是种猪场内测定的直接执行人 其业务素质和 [7] 张伟力 肖新良. 美国种猪场的管理经验 [J] 中国畜牧兽医文 责任心很大程度上决定了测定数据的有效性和真实性 农业 部种猪质量监督检验测试中心多次开办种猪性能测定培训 班 集中培训全国种猪企业专职测定人员 这使得场内性能 测定工作更加标准化 规范化 种猪企业专职测定人员并非完全意义上的专职 其除了 负责种猪的性能测定和选育以外 还分管一定范围的场内生 产 而场内测定工作一般都是集中进行 短期内工作量较大 摘 [8] 吴昊 肖运德 腾金峰 等 在生产条件下种猪性能测定的几 点建议 [J] 河南畜牧兽医 [9] 何志平 吕学斌 陈晓辉 等 种猪性能测定技术的研究与应用 [J] 四川畜牧兽医 [1] 何志平 吕学斌 段诚中 种猪性能测定技术在四川的研究与 应用 [J] 中国畜牧杂志

90 影响猪人工授精效果的原因 刘俊锋 王晋晋 彭 峰 吴志献 章四新 陈 辉 梁温秋 王永强 河南省诸美种猪育种集团有限公司 河南 近 2 年来 猪的人工授精技术在我国大中型养猪企业 驻马店 意精液不要接触过冷过热的物体 可用保温的软材料将精液 中被逐步接受并推广应用 成为提高猪场经济效益的重要措 和其他物体隔开 以免影响精液品质 施 也是猪品种改良和日常生产的重要手段 并且取得了明 1.5 公猪的饲养管理与使用制度 显的效果 比如母猪情期受胎率提高 产仔数增多 产科 营养是维持公猪生命活动 产生精子和保持旺盛配种能 疾病减少等 而有的猪场效果却不理想 母猪情期受胎率 力的物质基础 因此应喂给公猪营养价值高的日粮 富含充 和产仔数均比自然交配的低 患产科疾病的比例增多 同 足的能量 蛋白 矿物质 维生素 补饲青绿饲料 供给充 样都是人工授精 为什么效果却差别比较大呢 笔者将影 足清洁的饮水 实行合理的饲养与管理 调控适宜的环境 响猪人工授精效果的主要原因进行归纳总结 主要有以下 合理的调教与利用强度 按照青年公猪 5 7 天采精 1 次 几个方面 中年公猪 5 天 1 次 成年公猪一周 2 次的频率 才能使公猪 1 经常保持种用体况 体质结实 精力充沛 性欲旺盛 精液 公猪精液原因 1.1 精液品质 如果采集的精液没有经过检测 稀释处理后就直接进 行输精 有可能会导致母猪情期受胎率和产仔数降低或不 品质好 配种成绩高 2 母猪原因 除了公猪精液的原因外 母猪本身的状况也会影响人工 受孕 当精液中死精和畸形率超过 2% 或活力低于.7 时 授精的效果 母猪的受胎率和产仔数将会受到影响 因此 无论是什么精 2.1 体况 液 无论是否保存过 使用前均需要检查其品质 精子活力 如果母猪由于哺乳或其他原因导致太肥或太瘦 发情表 低于.5 时应废弃 现不明显 既使发情后输了精 也会容易返情 如果母猪日 1.2 稀释液质量 粮中部分营养物质缺乏 则容易造成胚胎早期死亡 从而导 如果释释液放置的时间过长 密封不好或被污染过 温 致母猪返情或产仔数少 因此 配种前要注意母猪日粮和体 度 渗透压和 PH 值不正确 都将会导致稀释后的精液品质 况的调节 下降 从而容易引起母猪情期受胎率和产仔数降低 2.2 传染性疾病 1.3 保存过的精液品质 由于稀释剂或恒温箱的温度原因 有时保存过的精液品 如果母猪患有猪瘟 乙型脑炎 细小病毒病 伪狂犬病 高致病性蓝耳病 巴氏杆菌病等 输精后也会很容易返情 质会明显下降 在无公猪可采精或无精液可选用的情况下 即使受胎 也容易造成胚胎早期死亡进而导致母猪产仔数 将保存过的精液品质低的精液输精给母猪 容易导致受胎率 少或者流产 和产仔数下降 在这种情况下 最好将母猪配种时间推迟一 2.3 生殖系统疾病 输卵管堵塞 个情期 以保证正常的繁殖性能 减少经济损失 1. 输精前精液的运送和保管 在炎热的夏天或寒冷的冬天 如果精液瓶在外界裸露的 时间太长 长距离运送或保存不善 由于热应激或冷应激的 如果母猪由于先天性或病理性的原因导致输卵管堵塞 那么输精后也不会有什么效果 卵巢疾病 影响 精液品质就会发生变化 精子活力将会降低 将这样 卵巢机能减退 萎缩 硬化 卵巢囊肿及其伴随的生殖 的精液输给母猪 最终会导致母猪的情期受胎率和产仔数下 内分泌机能紊乱等疾病 都会对母猪的受孕 妊娠 生产等 降 因此 在夏天或冬天运送和输精前 若数量较大 精液 带来不利影响 最好用保温箱盛放 夏天保温箱内放入装上凉水的瓶子 水 温在 18 冬天注意保温 保温箱内可以选用保温袋 注 86 子宫炎 如果母猪患有可见性或隐性子宫炎 无论怎样输精都不

91 会受胎 由此可见 当母猪自身有某些疾病发生时 人工授精的 效果就可能差 因此 有病的母猪应先治疗 痊愈后方可进 的受胎率和产仔数相平 因此 母猪配种时输精时间应控制 在 5 8 min 之内 3.5 配种方式 行输精 3 在人工授精技术不太成熟时 配种方式以 2 次本交 1 次 人为原因 人工授精为最好 之后逐步过渡为 1 次本交 1 次人工授精 配种员是影响母猪情期受胎率和产仔数的一个重要因 直至全部过渡为人工授精 素 不同配种员间的工作差异比较明显 主要表现在以下几 3.6 输精后母猪姿势 个方面 3.1 发情鉴定与输精时间 有的配种员只是观察母猪阴户的变化 有的在母猪出现 站立反应时即开始输精 有的则在发情接近结束时才观察 输完精液的母猪如果马上卧下 腹压增大 精液容易倒 流 影响人工授精效果 因此 输完精液后 要防止母猪卧下 让它们适当运动 但也不能对母猪有强烈的刺激 以免影响 产仔数 到母猪的发情表现 输精过晚 这些都会影响母猪的受胎 技术水平高的配种员 由于经验丰富 操作熟练 观察 率和产仔数 正常情况下 母猪出现发情症状后 2 36 h 母猪发情 输精等工作做的较好 所经手配的母猪受胎率和 内 表 现 出 站 立 反 应 2 36 h 开 始 排 卵 持 续 时 间 为 产仔数均较高 因此 一个猪场母猪繁殖性能的好坏 除与 1 15 h 一般卵子在 8 12 h 内有受精能力 而精子在 品种 公猪等直接相关外 还与配种员有很大关系 要注意 母猪阴道内可以存活 1 2 h 左右 因此 第 1 次输精时 从众多的配种员中选择责任心强 有耐心 并且踏实的进行 间应选择在母猪出现站立反应后的 12 h 内 太早或太 全面重点培养 优胜劣汰 以提高猪场的生产能力 经济效 迟都容易造成不良后果 然后间隔 12 h 左右再进行第 2 次 益以及社会效益 输精 3.2 输精前的准备工作 如果输精前不对母猪的外阴进行清洗和消毒 就很容易 通过输精管将细菌或病毒带入母猪的阴道或子宫内 进而引 其他原因 除了以上因素外 其他因素在某种程度上也会影响人工 授精的效果.1 天气 起母猪子宫炎等疾病 从而影响人工授精的效果 因此 在 观察发现 晴天输精的效果比阴雨天输精的效果好 可 每次输精前均应先清洗母猪的外阴 然后再用经消毒液浸泡 能由于阴雨天气圈舍环境湿度大 母猪适宜的相对湿度为 过并晾干的毛巾或卫生纸擦拭干净 消毒液最好选用广谱 5% 7% 以及母猪缺乏活动 兴奋性不高 从而容易 无腐蚀性 刺激性的溶液 并且无残留 方便使用 返情或产仔数减少 3.3 输精方法.2 温度 插入输精管时 应先在输精管头部涂上润滑剂 以利于 母猪适宜的温度范围是 最高一般不能超过 插入 要斜向上 5 左右旋转插入 防止插入尿道 也不 32 如果温度过高 精子 卵子结合 受精的时间就会缩 可以硬插 以免损伤母猪阴道 根据母猪体长 一般插入 短 使早期胚胎容易死亡 温度太低 母猪会受冷应激的影 3 cm 左右就到达了子宫颈口 往回拉有一定阻力时就可 响 也会影响人工授精的效果 因此 母猪配种时温度要适宜 以进行输精 输精时要抚摸母猪外阴或下腹部乳房 或者 注意防暑降温和防寒保暖 一般夏天炎热时 选择在早上 7 将母猪赶到公猪圈门口 以增强母猪的兴奋性 提高人工 以前或下午 6 以后温度适宜时再输精 切忌在中午 授精效果 气温超过 32 以上时输精 3. 输精时间.3 饱腹情况 输精时间与母猪情期受胎率和产仔数有很大关系 有时 如果母猪吃料后马上输精 由于血液循环主要集中在胃 配种员为了赶时间 一头母猪 2 3 min 便输完了精 也没 肠部 母猪不愿运动 性反应能力低 容易导致返情 因此 注意是否有倒流现象 输精管头部是否锁定 结果导致返情 最好在输完精后再喂料 母猪增多 产仔数少 有经验的配种员宁可在查情 发情鉴. 输精管 定 输精等方面多花时间 也不愿面对分娩时产仔数少所造 重复使用的输精管前端无膨大部 不易被子宫颈锁住 成的经济损失 试验表明 输精时间在 3 min 以内的母猪与 输精时容易倒流 并且不易彻底消毒 容易引起母猪疾病 5 8 min 的母猪相比较 前者的受胎率和产仔数远远低于 部分一次性输精管由于前端海绵头太硬或海绵头链接不牢 后者 且差异显著 输精时间 1 min 以上的母猪与 5 8 min 容易脱落 输精时容易损伤母猪阴道 从而造成母猪阴道炎 87

92 或子宫炎等 影响母猪的受胎率和产仔数 还有的一次性输 作用 优化的组合更可以达到较高的效率 从而取得更好的 精管的海绵头分为大头和小头 如果给后备猪输精时选用大 经济效益 头的输精管 由于后备猪子宫颈较窄 不易把大海绵头插到 综上所述 猪人工授精效果的优劣 既受到公猪精液 子宫颈的 2 3 个皱褶处 精液不能全部进入子宫 容易倒 母猪自身因素的影响 也受人为因素及其他方面因素的制 流 就会影响受胎率和产仔数 因此 选择输精管时应选择 约 只要各个因素协调得当 技术水平达到一定程度 措施 质量较好的适宜的一次性输精管 得当 人工授精就能取得良好的效果 使母猪情期受胎率和.5 管理 产仔数达到较高水平 从而提高猪场的生产能力 进而取得 规范化的管理 人性化的措施都可以发挥各方面的积极 88 更好的经济效益和社会效益

93 应激对猪繁殖性能的影响 石放雄 编译 南京农业大学动物科技学院 江苏 南京 2195 摘 要 应激对猪繁殖性能的影响取决于应激的种类 发生时间以及猪对该应激的敏感性和产生应答反应的 持续时间 长期或慢性应激通常会降低猪繁殖性能 然而在养猪生产中 利用急性应激刺激青年母猪和不发 情母猪发情是一项经济实用的方法 猪对应激敏感的繁殖阶段有排卵 动情行为的表达和胚胎的附植 关键词 应激 繁殖性能 猪 应激的定义和评估 的畸形率 MoNitt 和 First 197 发现公猪在室温 33 应激通常是指机体对危害机体稳态的一种生物学应答 和相对湿度 5 的条件饲养 72 h 后 公猪 2 周的 TSC 下 反应 应激刺激导致下丘脑 垂体 肾上腺 HPA 系统 降并且畸形精子率上升 公猪在 35 相对湿度下饲 的激活 并引起下丘脑释放一些肽类 主要是促肾上腺皮 喂 1 h 会导致精子产量下降 畸形率上升 但射精量和 质激素释放激素 CRH 和加压素 CRH 刺激垂体前叶 TSC 没变 larison 等 分泌促肾上腺皮质素 ACTH 和其他促阿黑皮质原引导 的肽如 β- 内啡肽 ACTH 作用于肾上腺引起糖皮质激 近 年 来 一 种 新 的 畜 舍 系 统 称 作 为 蒸 发 冷 却 系 统 EVAP 冷风机 或管道通风装置用来改善畜舍的小环境 素如皮质醇的分泌 ACTH 还能引起肾上腺分泌其他激素 效果不错 如孕酮 也许还有 PGF2α 的代谢物甚至抑制素 α 的分泌 2.2 母猪 应激还包含交感神经和肾上腺髓质的激活 并引起儿茶酚 据报道热应激会减低猪着床和损害胚胎发育 Edwards 胺 如肾上腺素和去甲肾上腺素分泌进入血液 促进肝糖 1968 发现小母猪配种后的 15 d 对热应激的敏感度比配种 原的分解从而提高血糖的供给 糖皮质激素还促进脂解和 后 15 3 d 更敏感 Omtvedt 等 1971 的实验发现配种 糖异生作用 ( 氨基酸转化为葡萄糖 ) 从而促进代谢增强 后 8 16 d 的热应激导致胚胎早期死亡数比配种后 8 d 对抗应激的能力 严重 表明着床阶段是妊娠热敏感阶段 如何评价和比较不同类型应激对动物 尤其是长期处 高的畜舍温度所引起的热应激是母猪繁殖性能的季节 于应激状态下的动物的影响有许多困难 应激反应可通过 性差异的主要原因 热应激会升高母猪血浆皮质醇浓度而 外周血液 尿液 唾液等分泌肽类的水平来评估 HPA 轴和 抑制排卵前 LH 峰 导致不排卵 / 或交感 肾上腺髓质系的激活 对行为反应如心跳 血 2.3 运输或换栏 压和习惯行为以及免疫应答的影响也可以用来评价应激反 应 笔者将就诸多应激原对猪繁殖性能的影响 着重就环 已经有一些有关急性应激对母猪繁殖性能的影响报道 Hughes 1982 的实验发现运输促进了母猪初情期的提 前 在 1 h 运输的情况下 大概 75% 初情期延后和 75% 出 境 管理和猪舍对公猪和母猪的繁殖性能作一概述 现乏情的小母猪 1 周内表现有排卵的发情 运输后 LH 的 2 脉冲频率立即增加 运输后 8 16 h 子宫 卵巢静脉或 应激对猪繁殖性能的影响 2.1 公猪 猪舍温度从 23 上升到 3 这一段时间 外界环境 2 36 h 颈静脉雌二醇浓度升高 运输后 LH 活性的升 高说明这些动物的下丘脑和 / 或更高级的大脑中枢对短 温度与阴囊和睾丸的温度密切相关 而猪的汗腺很有限 期 应 激 的 快 速 反 应 Dalin 等 1993 随 后 的 研 究 发 现 在一些国家已经发现在夏季开始后不久公猪就呈现低生育 运输升高了母猪血浆皮质醇和儿茶酚胺浓度 因此 运 力和 / 或低的精子数量 TSC 和低的射精量 夏季高温 输 / 换栏应激对青年母猪和乏情母猪可以认为是对下丘 地区 高温会显著降低公猪射精量 精子总数并增加精子 脑的正向刺激因子 在养猪生产中 对青年母猪或长期 89

94 不发情母猪进行运输 / 换栏等急性应激刺激是一种经济 也许会降低其生产性能甚至繁殖力 高等级的母猪发情时会 实用的方法 爬垮附属的母猪 会导致应激 Pedersen1998 一个新组 2. 管理 群的小群体母猪至少需要 2 d 才能建立起其等级关系 大群 现代生猪生产的管理包含一些可能成为动物应激源的 母猪需要 1 12 d 才能建立这种社会地位关系 因此 大 事件如 猪群拥挤 运输或差的人畜关系和热应激等 基于 多数哺乳母猪宜单养 动物福利的考虑 至少对非哺乳母猪 相对松散的饲养已变 2.5 猪群调查 得普通 这样的管理系统有诸多优点 动物更接近自然 然 Peltoniemi 等 1999 发现群饲母猪的复配率比单独 而这一系统也有一些问题 如多数情况下 人工松散饲养的 分栏饲喂母猪高 尤其是在夏季和秋季 Kongsted 2 母猪密度比野外密 母猪通常由一头或多头以及它的后代形 描述了猪场群饲母猪引起繁殖力降低成为一个日益严重的 成一个家族群 家族群内的母猪个体避免与其他不熟悉的母 问题 而且群饲母猪的产仔数也减少 此外 Pedersen 等 猪接触 在野外 野猪遇见不熟悉的母猪的机会很少 而在 23 还报道了群饲还妨碍热应激检测和对公猪接触刺 商品猪场 不熟悉母猪的混群不可避免 同时 群饲的另一 激 据报道 1 头受配的普通分栏饲喂母猪比大群饲喂 个缺点是很难避免重新组群 在有限的空间 一个新的社会 母猪断奶仔猪多 39 头 然而 传统的行为学观察表明 母 猪群的建立常常伴随着一些攻击性行为 依据动物群体内相 猪整个怀孕期均分栏饲喂也有缺点 Cassar 等 28 发 对地位的确立 不同个体采食和饮水的竞争过程中依据其能 现配种后 5 周内单独饲养或 15 头群饲本身对母猪产仔数或 力来确定领导者还是附属者 一头动物没有确定这样的关系 仔猪存活数没有影响 9

95 深部输精在大白猪纯繁中的应用效果 董斌科 孙 华 李良华 李明波 梅书棋 宋忠旭 湖北省农科院畜牧兽医研究所 武汉 36 摘 要 本试验在大白猪纯繁中引入深部输精技术 为探讨其实践应用效果 分别与本交 常规人工授精进行 对比试验 试验结果显示 本交分娩率最高 达到86.96% 常规人工授精的产仔数和产活仔数均最高 分别为 12.5±2.8 头和 11.±2.55 头 3个试验组间的产仔数和产活仔数差异均未达到显著水平 P.5 未 能体现深部输精技术的优越性 还有待于进一步试验研究 关键词 深部输精 分娩率 产仔数 产活仔数 猪人工授精因为具有提高商品猪整齐度 减少场内疫病 的传播 降低公猪饲养量 提高优良公猪利用率等方面的 优势 在规模化猪场乃至小型养殖户中得到越来越广泛的应 用 但是在实践中 常规人工授精也存在一些有待改善的问 题 如不能够刺激母猪排卵 容易造成精液倒流 致使受胎 率低 产仔数少 [1] 因此 人工授精技术需要进一步地改进 图1 提高 目前 一种新的人工授精技术开始得到应用 即深部 输精 将公猪精液送入子宫深部 接近母猪卵子受精的输 精液倒流 提高受胎率和产仔数 国外有研究报道 深部输精在保证输精效果的同时可以 图2 试验用大白公猪 完成 卵管部位 使公猪精子与母猪卵子结合距离缩短 从而防止 [2] 试验用大白母猪 本交和常规输精 2 个试验组的母猪发情后 用手按压 背部静止不动 方可进行交配或者输精 并于 8 12 h 后 进行复配或输精 减少输精量 并且有可能提高母猪的受胎率 国内研究者在 采用深部输精技术的母猪 必须是自然发情的母猪 输 二元杂交试验中发现深部输精能够提高母猪的受胎率 且产 精前不能对母猪进行刺激 按压母猪背部 用公猪引诱母 仔数和产活仔数比常规输精的均高出 1. 头 差异达到显著 猪等 在母猪放松的状态下输精 输精管在母猪体内停留 水平 [3-] 但国内还未见在大白猪纯繁中深部输精应用效果 2 min 后开始输精 输精时输精管需保持稳定 以免刺 的报道 因此 引入进行试验研究 期望改进人工授精的应 激母猪 母猪断奶后发情间隔不同 输精时间也不同 输 用效果 精时间选择依据 断奶后 1 d 发情的 发情后 2 h 输 1 精 第 1 次输精后 8 12 h 进行第 2 次输精 断奶后 5 6 d 试验方法和材料 1.1 试验材料 选取湖北省农科院畜牧兽医研究所原种猪育种场身体 发情的 发情后 12 h 输精 第 1 次输精后 8 12 h 进行第 2 次输精 7 d 后发情的 发情后立即输精 第 1 次输精后 健康的经产大白母猪 见图 1 5 头随机分为 3 组 分别 8 12 h 进行第 2 次输精 采用深部输精 常规输精 螺旋管 和本交进行配种 数据处理方法 年 5 月下旬至 6 月上旬断奶后集中完成配种 配种使用的是该场经检验精液品质优良的大白公猪 见 图 2 及其精液 使用的器材和试剂 美国 AMG 深部输精管 螺旋输精 管 稀释剂 市售保持 5 d 活力 双蒸水等 1.2 试验方法 稀释剂的配置与精子的采集和稀释按照常规操作方法 数据经 office27 初步整理 采用 SPSS1. 进行多重 比较 并进行显著性检验 2 试验结果与分析 2.1 不同配种方式对分娩率的影响 不同配种方式分娩率试验结果见表 1 本交的分娩率最高 常规输精的分娩率次之 深部输精的分娩率最低 可能是 由于深部输精的输精时间比较难以把握 其实际输精时间 91

96 熟 成熟的精子 12 h 内活力最强 是受精的最佳时期 配 表 1 不同配种方式的母猪分娩率 配种方式 配种头数 产仔窝数 分娩率 /% 深部输精 常规输精 本交 表 2 不同配种方式的产仔数及产活仔数 种的最佳时间为发情后的 3 h 即排卵前的 6 12 h 不 同胎次母猪的排卵时间也有一定的差异 [5-6] 母猪发情过 程的起始时间很难准确把握 为保证最多的卵子受精 通 常按压猪的背部静止不动时配种或输精 并于 12 h 后进行 复配 与通常鉴定的发情配种时间相比 深部输精的配种 时间有所延迟 有可能错过最佳配种时间 影响深部输精 配种方式 产仔窝数 窝产仔数 窝产活仔数 的预期效果 深部输精在实践的过程中还需要进一步的检 深部输精 ± ±2.21 验和探索 常规输精 ± ±2.55 本交 ± ± 不同配种方式的比较 本交和常规输精程序简单 易于操作 费用较低 深部 输精需要专门培训的人员来操作 且操作过程繁琐 不适合 与理论输精时间存在偏差 子宫颈狭小的母猪 并有可能造成母猪子宫的损伤和单子宫 2.2 不同配种方式对产仔数和产活仔数的影响 受精 相对于其优点 防止精液回流和减少输精量而言 从表 2 中可以看出 常规输精的产仔数和产活仔数均最 有可能代价过高 同时 深部输精成本相对较高 效果不稳 高 分别为 12.5 头和 11. 头 深部输精和本交的产仔数 定 但是输小剂量精液也可以取得较好的配种效果 可以用 和产活仔数差异不明显 结果表明 3 个试验组间的产仔数 来提高优秀种公猪的配种数量和降低引种费用 和产活仔数差异均未达到显著水平 P.5 但常规输 精的产仔数和产活仔数明显高于另外 2 组 表明常规输精应 参考文献 用效果较好 本交与深部输精的技术则有待提高 [1] 杨利国. 动物繁殖学 [M]. 北京 中国农业出版社, 讨论 3.1 样本量 样本量大小直接影响试验结果的准确性 本试验样本量 相对较小 与相关报道相比 未能体现深部输精相对于本交 和常规输精的优势 并且深部输精的分娩率 产仔数和产活 仔数都相对较低 为验证其真实效果 还有待于扩大样本量 进一步试验检验 3.2 发情配种时间 发情配种时间的把握也很关键 母猪的发情期通常持 续 5 h 其中 35 h 为排卵的高峰 卵子的成熟 大约需要 2 h 精子进入母猪的生殖道后需要 h 的时间成 [2] 艾德生. 人工授精技术中深部输精法的应用 [J]. 养殖技术顾 问,29(3) 28. [3] 夏天, 陆肖芬, 高金銮, 等. 母猪适度深部输精与常规输精比 较试验 [J]. 养猪,29(6) [] 夏天, 陆肖芬, 高金銮, 等. 适度深部输精基础上不同剂量输 精的对比试验 [J]. 养猪,21(5) [5] 张 守 全. 工 厂 化 猪 场 人 工 授 精 技 术 的 应 用 [J]. 辽 宁 畜 牧 兽 医,1999(6) 5-7. [6] 祝荣, 方敦明. 规模猪场人工授精存在的问题及改进措施 [J]. 中国畜牧杂志,26 2(16):61-62.

97 猪的分子育种及应用前景 柳小春 湖南农业大学动物科技学院 长沙 1128 摘 要 常规育种与分子育种相结合已成当前猪的品种改良及育种的主要途径 本文撰述了猪的分子育种主要 领域 结合我们的科研介绍了利用5个基因提高猪产仔数 5个基因提高生长速度 剔除Haln基因防止应激综合 症 以及肠毒素大肠杆菌病抗病育种的成效 分析了应用前景 关键词 猪 分子标记辅助选择 分子标记辅助渗入 分子抗病育种 分子标记辅助保种 1 猪种选育方法回顾 虽然投资较大 但可以解决一直困扰人们的群饲猪的料重比 世界各国猪的选种方法大体上可归纳为表型选择 基因 指标 还可分析采食行为和计算日增重 为选择提供更准确 型选择和标记辅助选择三大类型 有效的数据 大量测定数据仍然是表型值 但可通过 BLUP 1.1 表型选择 法估算出育种值 还可利用遗传评估体系进行场内个体间遗 这个阶段经历了很长时间 196 年前基本上都采用表 传评估和场问联合遗传评估 场间联合遗传评估必须以准确 型选择 从遗传学诞生算起 花了 6 年时间 从我国最早 的数据信息和遗传联结为前提 这方面的工作虽然在我国已 的 伯乐相马 算起 历时 2 6 多年 由于使用方便 不 试点多年 但困难较多 需要特别的仪器和计算 现在仍被广泛使用 特别是外形选 1.3 标记辅助选择 择 仍是客户在选购种猪时的一种主要选种方法 应该说 1986 年 后, 随 着 分 子 生 物 技 术 的 发 展, 人 们 逐 渐 将 外形在某种程度上可以反映生产性能高低 如前面所说的父 DNA 重组技术 转基因技术 分子标记技术用于猪育种领域 系和母系猪的不同外形要求 就反映了父系与母系猪不同的 形成了分子育种技术 将有利基因的分子标记用于选种 形 生产性能要求 因此有必要对不同品种 不同用途的种猪提 成了标记辅助选择 出较可操作的外形标准 而且要着重与生产性能关系大的外 2 形性状 而不过多地拘泥于 猪毛蒜皮 还需指出 外形 2.1 标记辅助选择 选择毕竟是一种 见好就留 的表型选择 没有涉及遗传基 分子育种技术主要领域 标记辅助选择 marker assisted selection, MAS 是 础 因此遗传进展较慢 目前应用最多的一个领域 将现代分子生物技术与常规育种 1.2 基因型选择 方法相结合 借助分子标记选择某一座位基因来改变该座位 随着对基因型有关理论的了解和计算机技术的发展 人 基因频率的过程 其主要优点是可以用于肉质性状和抗病力 们可以透过复杂的表面现象 ( 表型与表型值 ) 剖析其遗传 等活体很难度量或活体测量花费很大的性状 以及繁殖等在 基础 估算其能遗传的部分 为了取得准确可靠的数据 性 生命活动中表达较晚的限性性状 由于 MAS 不易受环境影响 能测定制度应运而生 包括生长发育性能测定 繁殖性能测 且不受性别 年龄限制 可以进行早期选择 从而缩短世代 定和肥育与肉质测定 与此相应 研制了一批新的电子设备 间隔 提高选择强度 提高选种效率和准确性 因此在动物 如测活体背膘厚的超声波测膘仪 测背膘及眼肌面积的 B 超 育种中具有广阔的应用价值 测料重比的种猪性能测定自动化系统 法国 ACEMO 公司 2.2 标记辅助渗入 推出的 ACEMA6 新一代自动化性能测定系统 可以准确 标记辅助渗入 或称标记辅助导入 marker assisted 记录自由采食条件下群饲猪的个体采食量 料槽内的电子测 introgression, MAI 就是通过遗传标记将某一基因从一 量系统可使猪的采食量精确到 2 g 美国 OSBOME 公司生 个品种渗入到另一个品种 这不同于改良品种某一缺陷时采 产的 FIRE 系统具有相似的功能 除了可测采食时间 采食 用传统的导入杂交方法 在 MAI 时 当供体品种与受体品 量外 还可测猪的体重 并通过计算机自动计算 形成猪测 种杂交后 在每次回交前先根据标记信息选出携带有渗入基 定期的日增重 采食量 饲料转化率等数据报表 这套设备 因的个体 并用这些个体与受体品种进行回交 可以保证在 93

98 回交过程中要渗入的基因不会丢失 大大提高基因渗入的效 遗传标记有位于 6q 的猪应激综合征的 RYRI 基因 率 Hanset 等 1995 已经将大白猪的正常的等位基因固 位于 13q3.1 区段的 E.coli F 的受体基因 位于 6q1.1 区 定在皮特兰中 并在 3 次回交后获得氟烷阴性的皮特兰品系 段的与 E.coli F18 受体位点紧密连锁的 α 1 2 岩藻糖 2.3 标记辅助保种 转移酶基因 FUT 1 FUT 2 以及与疾病抗性有关的位于 7 畜禽遗传资源保护是世界各国面临的艰巨任务 据 号染色体上的 SLA 基因等 利用与疾病抗性有关的基因或 FAO 1995 统计 全世界有猪品种 353 个 其中亚太地 基因标记进行抗病力选择 实行标记辅助抗病育种 将可大 区占 157 个 我国猪的品种数约占亚太地区的一半 目前 大加快抗病育种进度 达到根除某些疾病的目的 全球处于濒危状态的品种约占 26% 保种的方法不外乎活体 3 保种 保全套基因 或所谓系统保种 保有利基因 由于 3.1 通过标记辅助选择提高猪的产仔数 分子育种的应用前景 保种经费的拮据 使保种群不可能太大 这就大大增加了基 为了比较不同基因对猪产仔数效应大小 在相同的大 因丢失的可能性 利用整个基因组标记进行监控 可在保种 白 158 头 长白 22 头 猪群中采用 PCR-RFLP 法进 中使基因丢失的概率大大减少 这就是标记辅助保种 这对 行 了 ESR FSHβ PRL PRLR NCOA1 5 种 与 产 仔 数 于防止基因丢失 特别是一些濒危品种的遗传特性的保护有 相关基因的基因型频率检测及不同基因型的总产仔数和产活 重大现实意义 仔数效应分析 结果表明 对相同母猪群产仔数影响效应最 2. 标记辅助抗病育种 大的是 PRLR 和 NCOA1 基因 AA 型比 BB 型母猪总产仔 疾病不仅给畜牧生产带来巨大经济损失 也危害生产性 数高 头 P <.1 产活仔数高 状的遗传改进 使选择的效率降低 疾病的防治虽可采用免 头 P <.1 其 次 为 ESR 和 FSHβ 基 因 BB 型 比 AA 疫接种 药物 卫生和隔离等措施 但从遗传上根治某些疾 型母猪总产仔数高 头 P <.5 长白例外 病 始终是人们追求的目标 目前已发现猪的疾病主基因或 产活仔数高 头 P <.5 PRL 基因对产仔数 表 1 5 种基因不同基因型的总产仔数与产活仔数 长白 基因座 基因型 ESR AA b± b± ± ±.17 AB b± ab± ± ±.25 BB ± ± AA ± ± ±.8 8.5c±.79 AB b± a± b ±.2 9.7b±.2 BB a± a± a± a±.17 AA ± ± ± ±.68 BB ± ± ±.5 1.5±.5 CC ± ± ± ±.23 AB ± ± AC 5 1.± ± ± ±.89 BC ± ± ±.81 1.±.87 AA A± A± A± A±. AB B± B± B± B±.23 BB C± c± C±.58 8.C±.6 AA A± A± A± A±.6 AB B± B± B±.9 9.8A±.9 BB C± C± C± B±.3 FSHβ PRL PRLR NCOA1 胎数 总产仔数 ±Se a c 产活仔数 ±Se a b 胎数 总产仔数 ±Se 产活仔数 c ±Se 注 同列中肩注字母不同者为差异显著 / 极显著 P <.5/.1 相同者为差异不显著 P >.5 未标注者为差异不显著 P >.5 9

99 效应不显著 见表 1 EE 为有利基因型 在 IGF2 基因座 AA 型达 1 kg 活重 猪的产仔数是一个非常重要的经济性状 但由于该性 日龄最小 d BB 型的活体背膘厚最薄 mm 状是遗传力低的限性性状 常规选择很难奏效 采用分子 AA 型的生长性能指数最高 12.1 综合评价 AA 为 标记辅助选择 则可大大加快产仔数的提高 世界著名动 有利基因型 在 MCR 基因座 AA 型达 1kg 活重日龄 物遗传育种学家 Chris Haley 估计 猪的产仔数提高 1 头 最小 d 生长性能指数最高 AA 为有 可给英国养猪业每年增加 7 亿英磅利润 而整个欧盟每年 利基因型 至少可增利 2 亿英磅 我国现有约 5 万头母猪 采用 3.3 剔除氟烷敏感基因防治猪应激综合征 此项技术使每头母猪每胎增加 1 头 则每年可增加约 8 氟烷敏感基因是猪中发现最早的主基因之一 该基因的 亿元人民币利润 若以推广采用面 1% 计 每年也可增收 隐性纯合子 Hal nhal n 易产生应激综合征 PSS Hal n 8 亿元 还有导致产仔数下降 生长慢 胴体短 瘦肉率高和发生 3.2 通过标记辅助选择提高猪的生长速度 PSE 肉的效应 给世界各国造成很大经济损失 美国由于 杜洛克猪在杂交体系中是著名的父系品种 主选性状为 PSE 肉造成的经济损失每年在 3.2 亿美元以上 分子生物 生长速度和背膘厚 为此 我们在杜洛克父系选育中检测了 技术研究表明 PSS 是一种分子缺陷病 其机制是位于第 PIT1 HDAC1 UCP3 IGF2 MCR 基因的多态性 估 6 号染色体上 q 的 CRC 或称 RYRI cdna 上 算了这些基因的不同基因型对生长性状的效应 见表 2 的第 183 碱基由 C 突变成 T 造成编码氨基酸由 Arg615 变 由 表 2 可 见 经 显 著 性 检 验 PIT1 基 因 CC 型 达 成 Cys615 根据这一改变目前已可设计一对引物 用 PCR- 1 kg 活重日龄最小 d 活体背膘最薄 9.92 mm RFLP 法得到 3 种不同基因型图谱 为养猪业中及早检出氟 生 长 性 能 指 数 最 高 18.7 CC 型 为 有 利 基 因 型 烷敏感基因携带者 Hal NHal n 和纯合子 Hal nhal n 带来 HDAC1 基 因 GG 型 达 1 kg 活 重 日 龄 最 小 d 极大方便 我省在引进的杜洛克猪群中发现 Hal n 基因频率 校 正 活 体 背 膘 厚 最 薄 13.1 mm 生 长 性 能 指 数 最 高 达.3766 正在通过检测剔除 1.1 GG 为有利基因型 UCP3 基因 EE 型的校正活 体背膘厚最薄 mm 生长性能指数最高 肠毒素大肠杆菌病的抗病育种 猪病给养猪生产带来的经济损失约占总产值的 表 2 5 种基因对杜洛克猪生长性状的效应估计 基因座 基因型 样本头数 /n 达 1kg 日龄 活体背膘厚 /mm 校正活体背膘 /mm 生长性能指数 PIT1 CC ± ± ± ±6.7a CD ±.3ab 12.8±1.53b 13.1± ±7.86b DD ±6.18b 11.96±.8b 13.3± ±5.7b AA ±11.1b 12.85± ±3.3b 95.2±13.33b AG ±6.62ab 12.3± ±.26b 1.97±17.92ab GG ±15.2a 11.29± ±2.72a 1.1±12.68a EE ± ± ±1.38b 1.55±1.5a Ee ± ± ±1.9ab 12.9±1.15a ee ± ± ±2.13b 96.53±9.35b AA ±838a 13.75±1.7b 13.82± ±6.77a AB ±1.7b 13.68±1.b 13.32± ±7.5b BB ±851b 12.79±1.67a 12.98± ±7.1b AA a a AB b b BB b b HDAC1 UCP3 IGF2 MCR a a 注 ①表中同列肩注字母不同者表示差异显著 P.5 标相同字母表示差异不显著 P >.5 未标注者差异不显著 ② MCR 基因的生长性状效因应值为最小二乘均数 95

100 12% 15% 在猪病中 仔猪泻痢是最普遍而重要的疾病 此 我们已从多方面开展了研究 取得了初步成效 由腹泻使仔猪的死亡率达 11% 29.5% 其中由肠毒素大 ETEC F18 具有类似的遗传机制 目前进展更快 已找 肠杆菌 enterotoxigenie E.coli ETEC 引起的发病率和 到 α 1 岩藻糖转移酶基因 FUT 1 可作为 ETEC F18 死亡率约占 56.2% 和 2.7% 值得提出的是 ETEC 的抗原 受体的候选基因 该基因的 Hin 6I RFLP 位点的 M37 特性是可变的 已发现的 E.coli 菌体抗原血清型就有 1 处 G 突变为 A 时 形成抗性型 AA 而 GG AG 为敏感型 多种 给研究疫苗及药物治疗带来很大困难 因此 从根 我们检测中外猪种 867 头样品发现 总的来说抗性型个体 本上开展对 ETEC 抗性遗传机制研究 进行抗病育种已成 AA 较少 在大白 长白 杜洛克猪中平均为 6% 其余 为近几年的一个研究方向 ETEC 有很多种抗原型 其中危 全部是敏感型 GG AG 而本地猪种宁乡猪 大围子猪 害最大的主要有引起 1 2 周龄仔猪黄 白痢的 E.coli K88 沙子岭猪全部属敏感型 无抗性型 这一结果与这些猪种 F 和引起断奶后仔猪腹泻和水肿病的 E.coli F18 已知 均易感染 ETEC 病的实际情况一致 但证明了 ETEC 是可 E.coli F 是否致病决定于仔猪小肠黏膜上皮细胞有无受体 以通过遗传学方法控制的 只要及早对猪只采样检测分型 无受体的猪在受到 E.coli F 感染时不发病 表现为抗性 将 AA 型留种 淘汰或逐步淘汰 GG 型 AG 型 久而久之 有受体的猪则表现发病 而有无受体受一对等位基因控制 将可使 AA 型频率升高 GG AG 型频率下降 达到抗病 显性基因 S 控制有受体 隐性基因 s 为无受体 据此机制 育种之目的 寻找控制受体的基因或标记已成为解决这个难题的关键 为 96 参考文献 略

101 影响肉品嫩度的因素 及其候选基因的研究进展 李欣蔚 张 勇 沈阳农业大学畜牧兽医学院 沈阳 摘 要 肉品嫩度是评价肌肉食用品质的一项重要指标 同时 也是消费者评价肌肉质量高低的标准 结合国 内外对肉品嫩度研究的现状 系统总结影响猪肉嫩度的因素 同时 着重对决定猪肉嫩度的候选基因及其致嫩 机理加以综述 关键词 猪肉 嫩度 候选基因 人类对肉食质量的感知是在咀嚼的过程中 肉食发生复 任何组织中 含量少 大量研究证实 肉品嫩度同结缔组织 杂物理化学变化 并刺激口腔和鼻腔内感觉神经末梢而产生 中的胶原纤维和弹性纤维的含量显著相关 Aberle 等 1981 的 在诸多的主观感觉因素中嫩度是最重要的 嫩度是猪肉 发现 牛肉胶原蛋白的溶解性降低时 牛肉的嫩度随之下降 [7] 品质结构特性的反映 客观评定嫩度通常用肉的剪切力值来 此外 肌肉中的结缔组织含量 结缔组织中胶原蛋白的 表示 种类和交联程度是影响肉嫩度的重要因素 胶原蛋白中最 1 骨骼肌结构与肉品品质的关系 重要的交联反应是赖氨酸分子在赖氨酰氧化酶作用下 氧化 1.1 肌纤维直径与肉质 脱氨形成醛基 与另一赖氨酸分子的氨基缩合形成醛亚胺键 诸多研究表明 肌纤维直径越小 肉质越嫩 肌纤维直 CH=N-CH2 这种分子键的交联作用是使胶原蛋白具有必 径越大 肉质越差 川井田博 曾勇庆 吴德等分别对猪的 要的韧性和强度 随着动物年龄增长 体内胶原蛋白的总量并 纤维直径与肉质之间的关系进行了研究 结果表明 纤维直 不明显增加 但胶原蛋白的交联更加稳定 因而肌肉就更粗糙 径与肉品的柔嫩度密切相关 且我国地方猪种肌纤维直径比 嫩度更低 引进猪种的肌纤维直径要细 相应的肉品嫩度较好 [1-3] 与 此同时 肌纤维直径与肌肉嫩度的关系已被广大学者应用于 脂肪的含量和分布 一般认为 肌内脂肪含量对猪肉品质影响较大 尤其是 禽肉嫩度的研究中 经试验证实后得到相同结论 嫩度和多汁性 Herry 等 1963 报道 猪肉大理石纹与肉 1.2 肌纤维密度与肉质 嫩度的相关系数 r=.62 Fernandez 等 1999 研究了杜 有研究证明 随着肌纤维的增粗 肌肉间结缔组织与脂 洛克 大白杂种阉公猪腰大肌肌内脂肪对大理石纹评分及 肪含量增加 肌纤维密度下降 骨骼肌肌纤维越细 肌束内 肉嫩度的影响 结果表明 随着肌内脂肪含量的增加 大理 肌纤维越密 肉质也越嫩 Ashmore,Suzuki 和 Johnsfone 在 石纹评分也相应的提高 且显著 P.1 [8] 肌肉中的 所建立的动物肌肉生长模式中指出 动物出生后肌纤维数保 脂肪组织大部分分布在肌束膜上 肌间脂肪对肌肉的嫩化作 持不变 因此 家畜出生后肌肉体积的增加主要是由于已 用有一种解释 它分割并稀释了结缔组织纤维 使其更适合 存在肌纤维体积的增大 热处理 热加工时 脂肪细胞破裂 脂肪显著的进行再分布 近年来 诸多学者针对肌纤维 [-6] 密度与肉质的关系 以猪 牛等为实验动物进行大量实验 融化的脂肪会产生令人满意的口感增加肉的美味 Wood 等 Veiseth-Kent,E 等认为肌纤维越细 肌纤维密度大 肌肉脂 认为 肌肉内脂肪是通过 2 方面的作用来改善肉的嫩度 一 肪含量高 肉质越嫩 [5] 是切断了肌纤维束间的交联结构 二是有利于咀嚼过程中肌 1.3 结缔组织 脂肪组织的分布与肉质 结缔组织的性质和含量 纤维的断裂 [9] 构成结缔组织的主要成分是胶原纤维蛋白 存在于肌外 1. 肌纤维类型与肉品嫩度 肌纤维类型可直接通过肌纤维直径或间接通过对肌内 膜 肌束膜和肌内膜 肌腱中更多 且在酸碱环境中可膨胀 脂肪的影响 在一定程度上影响肌肉的嫩度 就肌纤维直 弹性纤维蛋白存在于肌肉血管壁 韧带等 网状蛋白存在于 径而言 I 型纤维直径较细 而 2b 型纤维直径较粗 因此 97

102 在相同屠宰和储藏条件下 肌肉 2b 型纤维比例增大 会增 细肌丝的肌原蛋白和原肌球蛋白及粗肌丝的 C- 蛋白降解 加肌肉的剪切力 从而降低肉品嫩度 汉普夏猪与瑞典约克 分别解离出肌球蛋白和肌动蛋白 释放出的粗肌丝和细肌丝 夏猪相比 肉质更嫩 就是由于约克夏猪种酵解型肌纤维所 可与母体或其他肌原纤维重新装配 也可以被胞质蛋白酶或 占比例较高 溶酶体降解 导致肌原纤维的有序结构被破坏 从而有利于 2 肉的嫩化 但在宰后成熟的过程中 m-calpain 的活性几乎 钙蛋白酶系统的研究进展与致嫩机理 2.1 钙蛋白酶的结构与生物学特性 广泛存在的钙蛋白酶 calpain 有 2 种 μ- 钙蛋白酶 不变 而 μ-calpain 的活性则显著下降 因此 人们普遍 接受 μ-calpain 而不是 m-calpain 参与了肉的嫩化 并 和 m- 钙蛋白酶 两者均由不均一的二聚体蛋白构成 其大 且 μ-calpain 的自溶和失活是分子间过程 即使自溶程度 小亚基的分子质量分别为 8 和 3 ku 大亚基具有催化活 很大 它也能完全失活 m-calpain 的自溶是分子内过程 性 μ-calpain 与 m-calpain 的 大 亚 基 分 别 由 CAPN1 和 自溶会导致 m-calpain 不完全失活 所以 μ-calpain 是 CAPN2 基因编码 小亚基具有调节功能 尽管 μ-calpain 蛋白质降解过程中引起肉嫩化的主要酶 和 m-calpain 大亚基氨基酸序列有明显差异 但是其高级结 钙蛋白酶抑制蛋白是通过抑制钙蛋白酶的自溶作 构基本相同 都由 个结构域组成 从 N 端起分别命名为Ⅰ 用 而 发 挥 作 用 的 且 这 种 抑 制 作 用 并 不 受 ph 的 影 响 Ⅱ Ⅲ Ⅳ结构域 在大亚基中 结构域Ⅰ由 1 8 位氨基 Koohmaraie 指出 可用牛肉宰后 2 h 钙蛋白酶抑制蛋白 酸残基组成 约占全部分子的 1% 在蛋白酶激活的情况下 的浓度来预测最终嫩度 Senky 指出猪肉宰后 1 h 的钙蛋白 很容易发生自溶 由此推测其可能起钙蛋白酶的活性调节作 抑制蛋白浓度与成熟肉的嫩度正相关 相关系数 r=.263, 用 μ-calpain 和 m-calpain 仅在结构域Ⅰ中不同 结构 即可用钙蛋白酶水平预测 6% 的嫩度水平 域Ⅱ含有 位氨基酸残基 约占全部分子的 35% 是 3 表现钙蛋白酶水解活性的关键部位 在未被激活的条件下含 3.1 MyoD 基因家族 有 2 个次级区域 结构域Ⅲ由 位氨基酸残基组成 影响嫩度的候选基因的研究进展 哺乳动物肌纤维在胚胎形成过程中受到 MyoD 家族的 约占全部分子的 35% 其功能为结合钙离子和磷脂 与蛋白 调 控 MyoD 家 族 包 括 MyoD Ⅰ MYOD myogenin, 肌 酶调控亚基或其他调控蛋白有关 结构域Ⅳ由 位 细胞生成素 myf-5 和 myf-6 它们编码碱性螺旋 环 氨基酸残基组成 占全部分子的 2% 是结合钙离子的部位 螺旋蛋白 通过调节肌肉分化阶段特异性蛋白的表达来参 含有 个钙结合蛋白所持有的 EF- 手型结构 与肌细胞的分化 其中 myf-5 和 MyoD Ⅰ在肌细胞增殖过 钙蛋白酶抑制蛋白 calpastatin 是细胞内专一抑制 程中表达 MyoD Ⅰ在肌细胞分化末期表达 而 myf-6 主 Calpain 活性的蛋白质 通过抑制 Calpain 的活性 可抑 要在生后表达 Soumillion 等利用 种人 MyoD cdna 混 制肌肉内蛋白质降解 参与肌肉生长过程中蛋白质的更新 合片段扫描猪基因组确定了 MYOG 基因 并发现了 3 个 Calpastatin 蛋白共由 5 个部分 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 组成 Msp Ⅰ多态性位点 [1] MYOG 可能与出生重 生长速度 其中 个是 Calpastatin 蛋白的活性中心 当 Calpain 被钙 胴体瘦肉率有关 Liu 等研究发现 p2 蛋白对成肌纤维 离子激活后 如果附近有 Calpastatin 存在 则将迅速与之 分化是必须的 是通过解除 Id 蛋白 DNA 结合抑制剂 对 结合而抑制 Calpain 活性 从而保证 Calpain 对底物只进行 MyoD 和 E7 蛋白活动的抑制而实现的 [11] 局部的特定位点的水解 3.2 宰后肌肉蛋白水解因子 组织蛋白酶 B 2.2 钙蛋白酶致嫩机理 作为一类重要的蛋白酶 组织蛋白酶在生物体内最重要 μ-calpain 和 m-calpain 都能水解肌原纤维 其可能 的生理功能就是水解特定的蛋白质 在活体内主要承担水解 机制是 钙蛋白酶被激活后 首先攻击肌原纤维的肌节 2 胞内代谢废物以及异物的功能 Calkins 等报道 组织蛋白 个相邻 Z 盘之间的一段肌原纤维 的部位 释放肌丝使降 酶 B 在牛肉成熟的 1 1 d 和 3 6 d 内 对剪切力降低 解为小片段 然后被溶酶体所捕获而进一步降解 由于连接 的贡献率分别为 35% 和 58% 另外 组织蛋白酶能将肌肉 蛋白和半肌动蛋白分别以 N C 末端和 Z 盘结合 其多肽 中的某些蛋白质成分分解成质量不等的肽类和游离氨基酸 链分别从 I 带延伸到 A 带 起着使粗丝 细丝和 Z 盘牢固 进而降解成醛类和酮类化合物 这些成分均是食品肉类 干 结合的作用 但近期研究发现 钙蛋白酶首先水解的是 N2 腌火腿中的风味成分 Russo 等提出应该将组织蛋白酶 B 线 据报道 N2 线是连接蛋白和半肌动蛋白所在区域 它们 作为影响猪肉嫩度性状的候选基因加以研究 分别连接粗肌丝和细肌丝 最终通过 I 带伸向 Z 盘 在降解 N2 线的同时也会降解一些骨架蛋白 使肌纤维释放肌丝 98 组织蛋白酶 B 具有限制底物进入它们的活性中心的特 征 其成熟蛋白结构中有一 18 个氨基酸长的闭塞环 阻止

103 底物进入位于主要结合区的活性位点 并且提供 2 个组氨 同源性 CAPN1B cdna 开放读码框架约 191bp 它与 酸 His119 和 His111 来结合底物 C- 末端的带有阴性电荷 CAPN1A cdna 前 191 个碱基完全相同 用 2 点连锁分 的羧基团 这可以部分解释组织蛋白酶 B 比该家族其他成 析法 μ-calpain 基因被定位于 2 号染色体上 员具有相对较弱的内肽酶活性和其独特的羧肽酶活性 参考文献 3.3 肌内脂肪的候选基因 心脏脂肪酸结合蛋白基因 [1] 王楚瑞 陈清明 长白猪北京黑猪及民猪肌肉组织学特性研 心脏脂肪酸结合蛋白 H-FABP 主要在心肌和骨骼 肌中表达 Gerbens 等用猪 / 鼠细胞杂交克隆板的方法将 H-FABP 定位于 6 号染色体 他们对纯种杜洛克猪的研 究 [J] 中国畜牧杂志 [2] 川井田博 郁明发泽 猪肉肌纤维粗细与肉质关系 [J] 国外畜 牧学 - 猪与禽 [3] 吴德 杨凤 周国安 等 不同比例梅山猪血缘生长育肥猪肉 究发现 3 个与肌内脂肪有显著相关的 H-FABP 多态性位 品质及肌纤维组织学特性研究 [J] 四川农业大学学报 21 点 他们的研究还表明 肌内脂肪与 H-FABP 存在显著相 关 国内的林万华等对中外 1 个猪种 H-FABP 遗传变异 [] Ashmore CR DoerrL Comparative aspects of muscle 进行了研究 发现 6 个地方猪种均表现为 dd 型 而外国 fibre in differentspecies[j] ExpermentalNeurology 猪种和培育猪种南昌猪则表现出多态性 这些多态性是否 8-18 可作为遗传标记还有待于进一步研究 这些研究结果提示 [5] SuzukiA Cassens KG A histochemical study of myofiber H-FABP 极有可能是肌内脂肪的候选基因 types in muscle of the growingpigs[j] Anim.Sci 脂肪组织脂肪酸结合蛋白基因 Gerbens 等分离了脂肪组织脂肪酸结合蛋白 A-FABP 基 因 并 进 行 了 测 序 A-FABP 在 人 小 鼠 和 大 鼠 之 间 [6] J o h n f o n e D. M I n f l u e n c e o f b r e e d t y p e s s e x feeding systems and muscle undle size on bovine 高度保守 尤其是所有功能部位的氨基酸序列都是高度保 fibertypesharacteristics[j] Food.Sci 守 的 A-FABP 被 定 位 于 猪 号 染 色 体 Gerbens 等 对 [7] Aberle ED Palatability and muscle characteristics of cattle 纯 种 杜 洛 克 猪 的 研 究 表 明 A-FABP 多 态 性 与 IMF 间 with controlled weight gain:time on ahigh energydiet[j] 存在显著相关 Gerbens 等在 1 个基因型猪群中检测到 AnimSci 个 微 卫 星 等 位 基 因 其 中 A6A9 较 其 他 基 因 型 的 肌 内 [8] FernandezX MoninG TalmantA etal Influence of 脂肪含量较高 巧合的是这 2 个 A6A9 基因型个体与其 intramuscular fat content on the quality of pig meat- MspI PCR RFLP 的 aa 基因型表现相同 他们还研究了 1.Composition of the lipid fraction and sensory H-FABP A-FABP mrna 和蛋白质表达水平与肌内脂 characteristics of m.longissimusluborum[j] MeatSci 1999 肪含量的关系 结果表明 A-FABP mrna 和蛋白质表 达水平与肌内脂肪之间没有显著相关 H-FABP mrna [9] Wood JD Warriss PD Enser MB Effect of production 表达水平与肌内脂肪含量之间没有显著相关 H-FABP factors on meat quality in pigs[a].the Chemistry of mrna 表达水平与肌内脂肪含量差异有关 但在蛋白质表 Muscle-based Foods[C]. Royal Society ofchemistry 达水平上各基因型间没有显著差异 总之 还不能从其表达 Cambridge 水平上解释 2 种 FABP 与肌内脂肪遗传变异之间的关系 [1] Sounillion A,Erkens JHF,Lenstra J A,et al.genetic 但他们仍然认为 FABP mrna 和蛋白质表达水平与肌内 Genetic variation in the porcine myogenin genelocus[j] 脂肪含量有关 MammalianGenome 钙蛋白酶家族基因 [11] Liu CJ Dib-Hajj SD DattaB MyoD-dependent 根 据 钙 蛋 白 酶 表 现 半 最 高 活 性 所 需 的 Ca 2+ 浓 度 induction during myoblast differentiation of a protein also 的不同 可以将普遍存在的钙蛋白酶分为 2 种 一种为 inducible byinterferon[j] MolecularCellular Biology 2 μ-calpain ( 又称 calpaini) 激活所需 Ca 2+ 浓度为微 2 72 摩尔级 另一种为 m-calpain ( 又称 calpainii) 激活所 需 Ca 2+ 浓度为毫摩尔级 已经鉴定了 μ-calpain-1 两 种同工型 cdna 的核苷酸序列 猪 CAPN1A cdna 开放 读码框架约 212 bp 与人和牛的分别有 92% 和 9% 的 99

104 猪冷冻精液在规模化猪场中 的应用实践 才永娟,贺佳伟,黄如渠*,邓东养,钟日聪 湛江广垦沃尔多原种猪有限公司 广东 湛江 5238 摘 要 阐述了猪冷冻精液的发展简史及在养猪业生产中的的实际应用价值及其局限性 着重表述了从冻精 保存 稀释液的配制 冻精的解冻 冻精的稀释至用于配种的整个过程 及冷冻精液在规模化猪场实践应用过 程中的操作情况和效果 关键词 猪 冷冻精液 实践应用 猪的人工授精技术已经广泛应用于畜牧业生产 所用 2 猪精液冷冻保存的意义 精液多为常规液态保存精液 但液态精液不便于远距离运 由于冻精可以使优良基因得到无限期的保存 延长公 输 不能充分利用优良的种公猪 所以人们的视线逐渐转 猪使用年限 而不受该公猪死亡 损失 采精间隔或繁殖 移到冷冻精液上 猪冷冻精液技术是指利用干冰 -79 不育的限制 有利于人为地使用高性能水平的种公猪与较 液氮 -196 液氦 -269 等作冷却源 将精液特 多数量的母猪配种 获得更大的遗传进展 引进国外高性 殊处理后冷冻 保存在超低温的液氮 196 状态下 达 能公猪冻精取代活体公猪的引进 使种猪选择扩大到世界 到长期保存的目的 并且解冻后输精的过程 自 Polge 等 范围的各群体进行成为可能 不受时间和地理位置差异的 1956 年开始猪的冻精研究试验以来 许多国家相继开展了 限制 可节省外汇支出 生物安全的保证 有利于人工授 此项技术的研究 目标是提高它的繁殖成绩 达到现实生 精体系的完善 公猪冷冻精液可以在后裔测定或疾病检测 产可接受的水平 我国养猪业已从传统到副业型转变到效 后才开始大量供应 为稳定的遗传发展和严格的生物安全 益型 专业化的瘦肉产品生产 猪的常温液态保存精液技 提供额外保障 从健康角度考虑 冻精为疾病检测提供了 术已经被大面积的推广和应用到养猪生产实践中 精液冷 足够的时间 冻精还为大型的人工授精站暴发疾病时提供 冻保存是人工授精的一项重大变革 不但解决了精液长期 了稳定的精液供应保障 保存的问题 有利于本地猪种资源保护 还使精液不受时间 3 [1] 猪精液冷冻保存的局限性 地域的限制 便于开展省际 国际之间的协作 提高优良 当前 猪的冻精应用估计占世界人工授精不到 1% 的 种猪的利用率 而且极大地延长了种猪基因物质的使用寿 比例 这个比例在许多年里都没有大的变化 [] 其原因 命 使优良种猪在短期进行后裔测定 保留和恢复精液供 1) 冻 精 没 有 得 到 大 面 积 应 用 的 主 要 原 因 是 繁 殖 应 血统更新 引种降低生产成本等方面均有重要意义 成 绩 不 理 想 与 常 规 液 态 保 存 精 液 相 比 较 分 娩 率 为 随着全国性 区域性种猪联合育种工作的深入开展 猪的 % 7% 低 2% 3% 仔猪数为 7 1 头 少 2 3 头 [2] 冷冻精液技术研究越来越显得迫切 1 猪精液冷冻技术研究简史 从意大利人 Spallanzani 最早开始研究哺乳动物精液 冷冻开始至今有 2 多年的历史 猪的精液冷冻研究是从 199 年英国人 Polge 等发现甘 油 ( 丙三醇 ) 对牛精子具有抗冻保护作用后开始的 ) 冻精的体外活力和解冻后受精能力在不同的公猪个 体之间存在很大的差异 3) 液态保存精液每剂只需要 2 亿 3 亿精子数 而 冻精每剂需要更多的精子 一般为 5 亿 6 亿 ) 成本高 从工作量和实验室设备考虑 冷冻和解冻 是一个耗费资金的过程 年 他首次报道了应用这个原理进行猪精液的冷冻操作 5) 需要可靠的实验室设备以供准确测试精液质量 最 并进行人工授精 1957 年 Hess 等将猪冻精经子宫颈输入 大的问题是解决体外精子的活力与其实际的受精力 受胎 并产下仔猪 1975 年 Pursel 等发明了简便的猪精液冷 效果的相关性 [1] [3] 冻和解冻方法 从此打开猪冷冻精液的商品化之路 1 6) 把握适当输精的时机 冻精输入母猪体内后的理想

105 图1 用长钳子快速将冻精 管从液氮罐中取出 图 2 将冻精管放入 5 蒸 馏水的水浴锅中计时 5s 受精时间比液态保存精液大大缩短了 图3 冻精管的稀释 图 冻精解冻稀释后取少 量用于镜检 可以浮动 1 同时将恒温水浴锅内的蒸馏水调至 5 因此 继续改进猪精子的冷冻和解冻操作方案仍是养 上下可以浮动 1 如操作过程中使用的是普通温度计 猪业面临的一个课题 猪精子与其他家畜相比 有许多不 因普通温度计存在 ±2 以上的误差 所以一定要使用精确 同之处 猪一次射精量大 采精后对外界温度的突然改变 水银温度计或电子温度计对普通温度计进行调正 相当敏感 所谓的 冷休克 反应 冷冻精液技术的成功.3 冻精的解冻 与否 关键在于影响猪精子在冷冻和解冻过程中失去活力 将液氮罐靠近解冻用的恒温水浴锅或其他解冻设备 保持受精能力等多因素的理解和监控 这些因素包括外界 这样能够尽量缩短冻精管从液氮罐转至解冻设备过程中处 因素 精子本身生物学特性 种公猪个体差异和每次采精 于室温下的时间 将液氮罐内装有冻精的提桶提升到液氮 的质量差异 外界因素有稀释液的组成成分 抗冻剂的选 罐颈部上方能够用钳子将冻精管取出为宜 用长钳子或大 择及其质量浓度 稀释比例和冷却或缓冲速度 冷冻和解 镊子迅速取出一管 1 头份 精液 当提桶内还保存有其他 冻所采取的方法 遗憾的是我们只能通过改变外界因素来 冻精时 避免冻精管离开液氮环境并暴露于室温环境不要 优化冷冻精液操作过程和提高繁殖成绩 超过 5 s 否则将导致精液质量下降 在快速将冻精管从液 [5-6] 为了适应猪肉的高效 优质生产需要 全世界的种猪 氮罐取出的同时 需要核查公猪的编号是否正确 快速将 都在不断地更高遗传水平的群体所更新 在一个国家和地 冻精管放入 5 蒸馏水的水浴锅中 冻精管在水浴锅中的 区范围内 采用保存 3 5 d 的液态精液或者活种猪进行 时间需要使用秒表计时 5 s 快速取出 解冻时无需用手 遗传物质传递已经足够 但从我国幅员辽阔的地域 种猪 或工具拿着冻精管 如同时需要解冻 1 管以上冻精 须确 的跨国贸易和在遗传交流时减少疾病传播的角度考虑 猪 保水浴温度维持 5 稳定 如解冻时发生密封球弹出冻精 的冷冻精液技术需要非常迫切 管 致使冻精管爆裂 需废弃此管冻精. 冻精的稀释 冻精解冻及应用的实践操作.1 设备和材料 将冻精管从水浴中取出后 可用干净的纸巾将表面的 冻精稀释粉 SGI 购买 蒸馏水 输精瓶 有刻度 蒸馏水擦干 剪断冻精管一端的密封球并插入到 2 的稀 容量至少为 8 ml 烧杯或塑料杯 无菌 1 2 L 容量 释液瓶底 同时剪断另一端的密封球以使精液顺利快速流 恒温水浴锅 计时器 长钳子或大镊子 纸巾 剪刀 精 入瓶底 稀释完成 建议稀释时上下快速抽动冻精管避免 确温度计 因为精液黏稠而大量附着在管内壁而被遗弃 可以使用经.2 冻精稀释液的配制 预热的凝胶块或咖啡因包被的载玻片来对精液质量进行分 将蒸馏水预热至 3 3 后加稀释粉 为所购买冻 精配制的稀释粉 一包可配制 1 L 的稀释液 充分搅拌或 用磁力搅拌器混匀 在室温条件下 待稀释液 2 min 析 5 精液配种使用 精液解冻后存放在隔热的精液保存箱内 2 27 稳定化 稳定化后的稀释液分装到 12 个带有刻度的塑料输 及时配种使用 因解冻后精液的精子活力会随着时间的延 精瓶中 每瓶至少 8 ml 然后在输精瓶上标明稀释液的 长而下降 所以解冻 1 h 后将不能使用 保鲜精液输精时 配制日期 用完的烧杯等材料都要用清水洗涤干净后 再 间为经产母猪断奶 3 d 早上发现发情第 2 天早上配种 用蒸馏水漂洗 6 次 最后煮沸或用干燥箱灭菌 保存以待 2 h 后 配种 2 次间隔 12 h 经产母猪断奶 7 d 早 下次使用 配制好的稀释液如当天未能用完可放在 5 条 上发现发情下午配种 12 h 后 配种 2 次间隔 12 h 经 件下保存或 -2 条件下保存 产母猪断奶 7 d 以上早上发现发情立即配种 配种 3 次间 将当天配制的或冷冻保存的稀释液调至 2 上下 隔 12 h 后备猪早上发现发情下午配种 12 h 后 配种 11

106 表 1 应用冷冻精液配种建议输精时间 h 内用完 稀释后越短时间内用于配种越好 配种时间宜在 两次输精 配种母猪 子活力会随着时间的延长而下降 所以配种必须在解冻 1 h 傍晚凉爽或夜间配种 用于冻精配种的母猪应具备健康度 单次输精 第1次 第2次 高 发情特征明显 繁殖性能高 且是第 2 胎至第 6 胎的母猪 运用冻精配种的母猪配种后的饲养管理与常温液态人工授 后备母猪 经产母猪 注 ①此表中的数字是母猪第 1 次静立反应后的时间 ②建 议 2 次输精为好 精母猪相同 夏季高温季节需做好防暑降温工作 6. 受胎及分娩情况 笔者经过近 1 年的猪冷冻精液在本场的应用实践 应 用大白 长白 杜洛克公猪的冻精共 72 头份配种 其受胎 2 次间隔 12 h 而冷冻精液输精时间应根据母猪发情情况 率为 87% 分娩后平均窝产活仔头数为 7.6 头 杜洛克为 参考冷冻精液建议输精时间 如表 头 大白 长白为 9.1 头 比鲜精配种减少 18% 左右 6 可能是笔者首次应用冻精配种 操作上以及稀释粉配制上有 实践操作情况 6.1 液氮冻精的保存 待进一步改进 以缩小两者之间差距 提高冻精应用效果 为确保冻精保存质量和冷冻精液配种工作的顺利开展 要经常检查液氮罐的有效性 保温性能下降或性能损失时 参考文献 要及时停用 液氮冻精保存时要根据液氮罐的性能要求 [1] Polge C Artificial insemination in pigs[j] Yet Pec 每天定期添加液氮 确保罐内冻精不能露在液氮面外 防 止因缺少液氮致使罐内温度回升而导致精子死亡 储存液 氮和冻精的液氮罐应放置在阴凉 干燥 通风好的房间内 运输液氮和冻精时 严禁用任何物品将液氮罐口密闭 以 [2] 禚艳书 王坚 刘铁铮 猪精液冷冻保存研究进展 [J] 江苏 农业科学 26 (3) [3] P u r s e l V G J o h n s o n L A. F r e e z i n g o f b o a r 免引起爆炸 spermatozoa Fertilizing capacity with concentrated 6.2 冻精稀释后镜检精子活力 semen and a new thawing Procedure [J] Anim 冻精解冻稀释后取少量用于镜检即可 提前将用于镜 Sci, 检精液的玻片预热 镜检合格后立即将存放在隔热的精液 [] Thibier M Wagner H G World statistics for artificial 保存箱内的精液拿至配种岗位配种 用预热后的玻片检查 insemination in cattle[c] Proc 1th Intern Conf Anim 时可以观察到视野中精子从少到多的开始蠕动至游走的全 Reprod 2,22 76 过程 1 min 内会观察到镜检视野内精子全部苏醒 精子 [5] 李青旺 江中良 王立强 等 猪精液冷冻保存的初步研究 游走速度与常温稀释后保存的精液精子游走速度基本相同 [J] 西 北 农 林 科 技 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 23 31() 精子活力为 配种及配种率 冻精解冻稀释后应快速用于配种 因解冻后精液的精 12 [6] 杜立银 曹少先 刘铁铮. 猪精液.5mL 细管快速冷冻和解 冻方法的优化 [J] 中国农业科学 29 2(5):

107 外种猪遗传改良进展与发展趋势 刘 榜1,2 蒋腾飞1,2 樊 斌1,2 彭中镇1,2 1.华中农业大学动物科技学院 武汉 37 2.农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 武汉 表 年我国引进种猪情况 中国已多年成为世界养猪和猪肉生产第一大国 养猪业 是我国农业与农村经济的重要组成部分 21 年 全国出 栏生猪达 6.67 亿头 猪肉产量达 5 7 万 t 均占世界生猪 出栏总数和猪肉产量的.6% 以上 中国畜禽肉总产量中 猪肉的比重已占 6.59% 猪肉在中国肉类市场中的重要地 位推动了中国种猪业的兴旺和发展 目前种猪市场仍然以国 外品种杜洛克 长白 大白猪占绝对优势 对于这些外种猪 的生产水平 育种措施以及猪育种发展趋势是猪育种工作者 美国 加拿大 法国 英国 丹麦 合计 数量 / 头 比例 /% 注 根据孙德林 25 和焦纯青 26 的数据进行整理 表 2 加拿大种猪达 1 kg 日龄和 1 kg 背膘厚的平均水平 (29 年 月 1 日至 21 年 3 月 31 日 ) 关心的重要问题 本文就相关内容进行综述 供育种工作者 参考 1 目前三大引入品种猪的生产水平 目前 我国种猪市场以杜洛克 长白 大白 3 个品种为 主导 三大品种的生产水平直接影响到我国生猪市场 近 年来 我国分别从美国 加拿大 英国 丹麦等国引进的品 品种 约克夏 长 白 杜洛克 三品种 平均 麦核心群纯繁长白猪窝产仔数达到 1.7 头 见表 由表 1 至表 所示不同国家的种猪生产水平可以发现 母猪 背膘 / 头数 mm 种猪 见表 1 主要来自于美国和加拿大 加拿大生猪改良 1.6 mm 见表 2 大白猪窝产仔数达 13 头 见表 3 丹 公猪 日龄 总计 猪为 155 d 达 1 kg 体重背膘厚公猪 1.2 mm 母猪为 猪场 测定总 数 头数 头数 种主要是杜洛克 长白和大白品种 年引进的 中心 CCSI 年报中达 1 kg 体重日龄公猪为 17 d 母 日龄 背膘 /mm 注 数据来自加拿大生猪改良中心 CCSI 年报 residual feed intake, 残留采食量 的新概念并对 sow longevity 母猪利用年限 性状重视了起来 以便更准确 科学地对生长和繁殖相关性状开展选择和改良 无论是生长速度 背膘厚度还是产仔数 其性能都已经非常 一些国家由于 B 型超声仪器 自动记料饲喂系统 脂 优良 然而对这些性状的选择一直没有停止 因为选择一旦 肪肌肉厚度测定仪 Fat-O-Meter 等先进测定仪器的 停止 群体平均水平就会下降 因此 育种工作是保持和提 使用 一些性状的测定过程更为自动化 测定结果更为准 高种猪生产水平的根本 确可靠 同时 以 BLUP 和综合选择指数为基础的遗传评 2 估软件如 PIGBLUP GBS 等的使用 公 母猪的重要经 遗传改良措施 2.1 常规育种 在猪的育种工作中 对于生长速度 背膘厚度 产仔 济性状改良获得了显著效果 从 2 世纪 3 年代至今 主 要商业猪品种的背膘厚度从 5 mm 下降到 mm 数等可以进行直接度量的性状利用常规选择的方法已能成 生长速度加快了 5% 甚至近年来达上市体重日龄的遗传 功地进行遗传改良 只不过对于产仔性状要采取特殊的常 进展年缩短. d 上市体重从 8 kg 增加到 125 kg 这些 规选择法 即使对于眼肌面积 瘦肉率 肌内脂肪含量等 性状的遗传改良一方面归功于数量遗传学理论的指导 以及 这类活体难以度量的性状 近年来借助仪器设备也可以 常规育种新技术的发展 育种手段的不断革新与其推广应用 进行测定了 根据这些测定结果亦可对这类性状利用常 另一方面也归功于分子育种技术与常规育种技术相结合 规选择法进行遗传改良 此外 随着对饲料转化效率及 2.2 分子育种 经产母畜繁殖性能研究的深入 研究者又提出了 RFI 主要是一种利用 DNA 水平上的分子标记对生物群体进 13

108 在美国的一些育种公司常进行检测的基因有 HAL ESR 表 3 加拿大母猪的产仔数 (29 年 ) 品种 测定头数 总产仔数 测定头数 产活仔数 大白 长白 杜洛克 平均 11.7 EPOR KIT MC1R MCR FUT1 RN AFABP HFABP PRKAG3 CAST IGF2 一 些 加 拿 大 的 猪 育 种公司常进行检测的基因有 HAL KIT MCR RN HFABP PRKAG3 CAST IGF2 SLCA3 FOS 见 表 5 1. 注 数据来自加拿大生猪改良中心 CCSI 年报 随着 29 年底猪全基因组序列测定及单倍型计划的实 施和完成 以及猪全基因组 6K SNP 芯片的成功研制和应 用 猪重要经济性状的全基因组关联研究 genome wide 表 丹麦核心群纯种母猪的产仔数 association study, GWAS 和 全 基 因 组 选 择 genomic 品种 总产仔数 产后第 5 天存活仔猪数 selection 正在逐步开展 这将是猪遗传育种研究领域的一 大白 次重大革命 目前 利用 GWAS 策略已对猪产肉 繁殖 长白 体况 肢蹄结实度评分 猪蓝耳病 PRRS 抗性等性状进 杜洛克 行了研究 初步获得一批与这些性状相关联的候选基因和基 注 数据来自丹育国际网站 DanZucht/zuchtarbeit/verbesserungen/397/Index.htm?ID=397 表 5 美国和加拿大猪育种公司常检测的基因 因组区域 猪全基因组选择尚处于理论和模拟数据研究阶 段 实际应用还未展开 3 最近及未来猪育种目标中应加强选择的性状 近 年 来 国 际 上 猪 育 种 目 标 性 状 主 要 包 括 生 长 速 度 美国 加拿大 基因中文名称 基因用途 饲料利用率 肌肉品质 母猪繁殖力和年育成率 乳头 HAL HAL 氟烷基因 肉质, 商业化 数 肢蹄结实度和抗逆性等 在不同国家育种目标有所 KIT KIT 猪显性白毛调控基因 白色毛色 未商业化 MCR MCR 黑素皮质素受体 - 背膘厚 生长速度 和采食量, 商业化 RN RN 酸肉基因 肉质, 商业化 AFABP, HFABP 组织脂肪酸结合蛋白 HFABP 肌内脂肪含量 心脏脂肪酸结合蛋白 一磷酸腺苷酸激活蛋 PRKAG3 PRKAG3 肉质, 商业化 白激酶 γ3 亚基 CAST CAST IGF2 IGF2 钙蛋白酶抑制蛋白 嫩度, 商业化 胰岛素样生长因子 -2 胴体组成, 商业化 ESR, EPOR 雌激素受体基因 红细胞生成素受体 窝产仔数, 商业化 MC1R 黑素皮质素受体 1 红 / 黑毛色 FUT1 水肿大肠杆菌 F18 未商业化 溶质载体家族 第 肉色 ph 滴水 3 成员 损失 墨角藻糖基转移酶 1 不 同 如 丹 麦 猪 育 种 目 标 性 状 包 括 生 长 速 度 ( 日 增 重 kg 3 1 kg 体重阶段 ) 料重比 瘦肉率 母猪利用年限 产后第 5 天存活仔猪数 体型和屠宰损失率 在澳大利亚 各性状在育种目标中所占比例分别是 平均 日增重 19% 背膘厚度 5% 饲料转化率 25% 腹脂重 3% 眼肌重量 18% 腹脂率 16% 滴水损失率 1% 在育种目 标中 除对生长速度和背膘厚保持改良外 繁殖性状 肉 质性状及健康性状应是将来加强改良的性状 3.1 繁殖性状 目前对猪繁殖性状的关注已逐渐由单胎次单性状转移 到 母 猪 年 生 产 力 sow productivity per year 甚 至 母 猪 的终生繁殖性能 如前 6 胎综合 与利用年限 母猪年生 产力是指每头母猪每年提供多少头断奶仔猪 被认为是繁 殖效率的最佳估计值 世界养猪业先进国家每头母猪年提 供断奶仔猪多在 2 26 头 极优秀母猪个体能够达到 3 头 影响母猪年生产力的基本因素主要包括产活仔数 断 注 数据来自 Rothschild 21 和加拿大生猪改良中心 CCSI 奶前仔猪死亡率 哺乳期天数 仔猪断奶日龄 断奶至受 年报 胎间隔 可理解为非生产天数 重视和加强对这些重要 行遗传改良的技术 动物分子育种方法主要包括标记辅助 性状的选择将有助于提高生猪出栏率 降低生产成本 美 育种 转基因育种和体细胞克隆育种 目前在育种企业常 国依阿华州立大学 Kenneth Stadler 研究认为 生产母猪 用的分子育种技术是标记辅助选择 MAS 利用 MAS 已 需利用 3 胎以上 且每胎产活仔数达到 1 头以上 才能够 经在一些群体中成功清除了氟烷敏感 等位 基因 在不 开始给生产者提供利润 母猪利用年限除了与繁殖性状相 同的国家和不同的育种公司用于 MAS 的检测基因不同 如 关外 还与肢蹄结实度及传染性疾病导致的繁殖障碍有关 1

109 这说明不仅需要对繁殖性能进行选择改良 还应注意其他 免疫抑制使疫苗使用无效 因此 对于严重影响养猪业生 环境方面因素的影响 产的重要传染病还应从宿主的角度开展抗病育种研究 培 3.2 肉质性状 育对某些传染病具有特异抗病力并具有较强一般抗病力的 随着过分强调加快生长速度 降低背膘厚度及提高瘦 新品系 品种 成为目前猪育种的新趋势 各国都相继发 肉率 猪肉品质存在下降趋势 主要表现在肌内脂肪含量 现一些地方品种对某些传染病具有特异抗病力的特点 发 下降 系水力变差 肉色不正常 风味物质 如肌苷酸 现非洲野猪 疣猪和南非野猪 对肉胞子虫感染 对口蹄 硫胺素 含量降低 肉质下降已经给养猪业带来很大的经 疫 蓝耳病 圆环病毒相关疾病及非洲猪瘟等都无临床症 济 损 失 例 如 美 国 PSE 肉 发 生 率 从 1996 年 的 1% 提 高 状 具有抗病力 在某些国家也发现一些地方品种对某些 到 23 年的 15% 每年美国养猪业由此所造成的损失达 传染病具有抗病力 例如在我们的研究中发现通城猪对高 9 万美元 由于肌内脂肪含量下降 丹麦长白猪和英国 致病性蓝耳病具有一定抗病力 近年来 在猪的抗病遗传 大白猪的肌内脂肪含量已经不足 2% 由此而发生屠宰后肌 方面不同国家都投入了大量经费开展研究 美国农业部作 肉失水率提高 使肉品加工企业蒙受很大的经济损失 因 为重大攻关项目立项研究了猪蓝耳病病毒宿主的遗传 研 此 肉质性状的改良 特别是以提高肌内脂肪含量为育种 究群体有近 2 头的规模 意大利已经收集了包括杜洛 目标的猪育种正在成为发展趋势 克 大白 长白和皮特兰 个品种在内的 18 个世代的超 3.3 健康性状 过 5 头个体的 DNA 样品和性能数据 包括健康性状 在养猪业生产中 疾病一直严重威胁着猪的健康和 与生产性状 利用 6KSNP 芯片进行扫描后将会发现一 影响养猪业经济效益 应对疾病的花费在总的生产成本 批与 PRRS 抗性相关的 SNP 并可进一步鉴定出相关抗 中占着相当大的比例 发达国家占 17% 发展中国家占 病基因 在不久的将来可以利用鉴定的抗病基因进行抗病 35% 5% 特别是近年来猪病种类繁多 猪瘟 高致病 育种 有可能从根本上解决猪蓝耳病的危害问题 性蓝耳病 伪狂犬病 口蹄疫 圆环病毒相关疾病等传染 由此可见 无论从降低生产成本提高经济效益 还是从 病严重制约着养猪业的健康发展 对于猪的传染病的防治 改善动物福利降低疫苗和抗生素等药物的使用 提高畜产品 策略是疫苗免疫 但这种被动免疫策略有时会因为机体的 的安全性角度考虑 采取遗传途径提高猪的抗病力 实施抗 各种原因而失败 如高致病性蓝耳病因病毒所致的机体的 病育种都是一项治本的解决措施 15

110 全国生猪遗传改良计划 解读及实施中有 关问题的讨论 彭中镇 华中农业大学动物科技学院遗传育种系 武汉 37 摘 要 对 全国生猪遗传改良计划 以下简称 计划 进行了评价 简介了 计划 制定的 部分背景 阐述了制定与实施 计划 的必要性 综合 计划 全国生猪遗传改良计划实施方案 与 国家 生猪核心育种场管理办法 试行 等3个文件概述了 计划 的六大内容 试着用自己的学习体会概括出 计 划 的指导思想是 一个目标 一条主线 一个重点和两个基础 以及该 计划 的九大亮点 最后就提高国 家生猪核心育种场的育种工作水平 种猪性能的场内测定 种猪登记 协同提高对人工授精 AI 公猪的选择 水平 种公猪站建设以及地方猪遗传资源的保护 选育与利用等的进一步实施提出了不成熟建议 供决策部 门 企业家与同行参考 关键词 全国生猪遗传改良计划 评价 背景 意义 基本内容 指导思想 亮点 讨论与建议 全国生猪遗传改良计划 农办牧 29 6 号 这为进一步实施外种猪联合育种奠定了基础 是我 55 号 及其配套文件 全国生猪遗传改良计划实施方案 国猪育种发展史上的一个里程碑 方案 试行 对遗传评 农办牧 21 1 号 下称 实施方案 估测定性状 种猪测定数量 统一遗传评估方法 实现计算 相继于 29 年 8 月和 21 年 3 月公布并启动实施 这是我 机联网与信息共享等做出了规定 另附有遗传评估性状测定 国第 1 份全国性的猪遗传改良计划 它的制定和实施是我 规程 遗传评估数据记录系统标准 含全国统一的 15 位种 国从事养猪业和种猪产业的生产者 经营者和科技工作者期 猪个体编号系统 和遗传评估模型 盼已久的一件大事 是我国猪育种发展史上的一个新的里程 22 年 7 月 全国畜牧总站出版 全国种猪遗传评估结 碑 这一 计划 反映了现代猪育种科技水平 且切合国情 果 21 年度评估结果 评估结果表 按种猪场和品种分开 具有我国特色 并在主要方面开始与国际接轨 它的落实 含序号 个体号 性别 父系指数 母系指数 日龄 EBV 对于统一业界认识 凝聚各方资源 促使生猪改良工作有重 背膘 EBV 总产仔数 EBV 父亲编号 15 位 母亲编号 15 点和有序地推进 推动主要经济性状的全国平均遗传水平的 位 出生日期等共 11 项 但由于不能对各场间的环境差异进 提高 以及对于稳定和满足特定市场需求以及强农惠农都将 行校正 对各场的评估是分别进行的 因而不能将公布的种猪 起到重要作用 估计育种值在场间进行比较 1 过去的1年我国猪联合育种工作的发展历程 [1] 1993 年 根据农业部畜牧兽医局 1993 农 牧种 23 年 中国地方猪种保种与利用协作组 成立 至 21 年已召开 7 次协作组大会 黄瑞华 21 [5] 字第 17 号文件精神 于 1993 年 5 月 8 月和 199 年 9 月 2 年 农业部 98 重大专项 猪遗传评估技术的 先后成立全国大白猪 杜洛克猪和长白猪育种协作组 截至 引进与中国优秀种猪核心群繁育体系的持续发展 启动 在 25 年 1 月 11 月和 12 月 已分别召开 1 11 和 9 次协 该项目支持下 全国种猪遗传评估中心在北京成立 作组大会 陈清明 21 [2-] 1997 年 全国双肌臀大白猪联合育种协作组成立 截 至 25 年已开过 9 次协作组大会 1997 年 开始在全国开展种猪生产性能测定与遗传评 估培训工作 2 年 5 月 全国畜牧兽医总站颁布 关于印发 全 国种猪遗传评估方案 试行 的通知 牧站 种 年 12 月 中华人民共和国畜牧法 颁布 第三 章对种畜禽品种选育与生产经营做出了规定 将遗传改良工 作纳入法制化轨道 25 年 12 月 全国畜牧兽医总站和全国种猪遗传评估 中心出版 全国种猪遗传评估报告 25 年度 26 年 1 月 全国猪联合育种协作组 成立 截至 21 年已召开 次大会

111 27 年 月 由北京市畜牧兽医总站和北京浩邦猪人 条件走 适度引进 改造创新 自主选育 形成特色 之路 工授精服务有限责任公司联合发起并主办的首届全国猪人 提高种猪自给率 提升种猪与猪肉产品的国际竞争力 逐步 工授精关键技术研讨会召开 211 年已是第 5 届 从这 5 改变瘦肉型种猪长期依赖进口的局面 届研讨会的内容和参会人员可看出 研讨会既是猪人工授精 新中国建立以来 特别是改革开放以来 我国生猪生 行业的专业学术会议 又是交流 宣传人工授精与猪联合育 产水平有了极大提高 但与国际先进水平相比仍有较大差 种 生猪遗传改良的一个很好的平台 距 肉猪的出栏率 胴体重以及每头母猪年产商品猪头数与 [6] 27 年 5 月 开始草拟 瘦肉型猪联合育种方案 并征 求意见 为 全国生猪遗传改良计划 初稿的编写奠定了基础 生产的猪肉量仍不高 要进一步提高生猪生产水平 根本出 路还在于猪群本身的遗传结构的改变 加拿大约克夏品种达 27 年 8 月 国家启动生猪良种补贴项目 对全国生 1 kg 体重的日龄 1995 年较 198 年缩短了 2 d 其中 7 猪主产区 2 个县的 9 万头能繁母猪应用人工授精技术进 成 1 d 得益于遗传进展 而猪群健康 饲料营养与管理 行补贴 29 年又新增 2 个县 725 万头能繁母猪 项目 等因素的影响仅占 3 成 6 d 1 kg 活体背膘厚同时期的 规定 按每头能繁母猪年繁殖 2 胎 每胎配种使用 2 份精液 表型进展 降低. mm 中竟有 89% 3.9 mm 的进展 每份精液补贴 1 元 每头能繁母猪年补贴 元 让养殖户 属遗传进展 表明遗传改良在养猪生产中贡献巨大 在当今 低价使用精液配种 该政策已成为加快生猪改良的重要抓手 中国 在猪群健康与饲料营养等呈现良好发展趋势情况下 27 年 农业部 财政部关于印发 现代农业产业技 术体系建设实施方案 试行 的通知 农科教发 [27]12 号 下达 遗传改良工作在养猪业发展中的主导作用将日益显现 我国种猪业和猪肉产品正面临全球激烈竞争 必须改 变我国已成为国外种猪大市场的局面 改变瘦肉型种猪长 28 年 7 月起 农业部畜牧业司委托全国畜牧总站组 期依赖进口的状况 发达国家的育种实践表明 实施以 织成立 全国生猪遗传改良计划编写专家组 编写专家参 加速重要经济性状的遗传改进为目标的猪遗传改良计划 照全国畜牧总站拟定的 全国生猪遗传改良计划编写工作方 是推动这一问题解决的根本手段 加拿大 1985 年开始实 案 与 编写提纲 起草 全国生猪遗传改良方案 初稿 施 加拿大猪改良计划 CSIP 给猪的品种带来了深刻 再召开工作会议讨论修改 形成征求意见稿 接着由专家讨 变化 年的 9 年期间 杜洛克公猪达 1 kg 体 论会讨论修改 再将征求意见稿转发国内有关专家 各省畜 重的日龄提前了 13.8 d 每增重 1 kg 耗料减少 177 g 背 牧行政和技术支撑部门征求意见 膘厚降低 3. mm 估计瘦肉量增加 1.19% 它的商品肉猪 29 年上半年 国家畜禽遗传资源委员会专家对 全 market hogs 性能也有显著改善 在原有基础上的遗传改 国生猪遗传改良计划 征求意见稿进行论证 报农业部畜 进量分别达到 d -161 g -3. mm 和 +.98% 在 牧业司 年 5 年期间 加拿大的杜 约 长 商品 29 年 8 月 农业部办公厅关于印发 全国生猪遗 猪平均每年的遗传进展为 上市时间提早 1.28 d 瘦肉率 传 改 良 计 划 的 通 知 农 办 牧 提高.8% 眼肌面积加大.26 cm2 每千克增重耗料减 号 下达 21 年 3 月 全国生猪遗传改良计划 29 少.17 kg 背膘厚减薄.17 mm 产仔数提高.23 头 22 实施方案 农办牧 21 1 号 下达 窝 加拿大的 3 个品种在同一时期其日龄和背膘厚的平均每 21 年 8 月 3 日 国家生猪核心育种场遴选的现场评 年的遗传变化见表 1[7] CCSI,29 21 年报 正由于坚 审正式启动 当年 1 月 25 日 第 1 批 16 个国家生猪核心 持了对产肉性状的遗传改良 其种猪和猪肉在世界上的声誉 育种场的名单公布 农办牧 号 同年 11 月 23 大增 以至成为世界上最大的种猪和猪肉出口国之一 又据 日又公布了第 2 批 8 个国家生猪核心育种场的名单 农办牧 28 年丹麦猪生产年报 [8] 报道 从 2 年到 28 年 例 号 211 年 3 月 国家生猪核心育种场管理办法 试行 牧站 牧 号 下达 如 3 1 kg 日增重其遗传进展平均每年的提高量 杜 洛克为 19.2 g 长白猪为 8 g 大白猪约为 -.1 g 美国和 丹麦分别制定的猪改良计划指南 Guidelines for uniform 211 年 月 农业部畜牧业司 全国畜牧总站和全国 swine improvement programs 和丹麦猪育种计划 Danish 种猪遗传评估中心出版 国家生猪核心育种场遗传评估报 pig breeding programme, Danbred 的实施已成为其养猪 告 211 年第 1 次 业取得成功的关键因素 2 制定与实施 计划 的必要性 1 有利于提高我国生猪生产水平和效益 有利于创造 我们必须以实施 计划 为契机 抓住机遇 逐步改变 对国外种猪的依赖 主要依靠自己的力量 结合优良遗传资 17

112 源的适度引进 培育出有自主知识产权 有竞争力的新群体 评估结果公 母猪报告的公布及群间 2 个主要性状 日龄与 新遗传材料和中国的大白 长白和杜洛克猪及其特色品系 背膘厚 育种值与管理值等的排名等 第三部分是猪群健康 逐步变种猪进口国为种猪出口国 计划 第四部分是纯种猪的登记 注册 其余部分有纯种 2) 有助于加强国家对全国生猪遗传改良工作的宏观调 控 提高我国生猪遗传改良的组织工作水平 猪的标识 个体标号方法等 还附有 9 个报告 在 澳 大 利 亚 其 全 国 猪 改 良 计 划 National Pig 我国生猪遗传改良的组织工作水平有了很大提高 但相 Improvement Program, NPIP 于 1995 年 制 定 NPIP 对于育种理论与技术的进步而言 仍然滞后 制定 全国生 的 内 容 就 是 一 个 猪 的 跨 群 遗 传 评 估 系 统 across- 猪遗传改良计划 肯定有助于组织工作水平的进一步提高 [9] herd genetic, evaluation system 这是该计划的一大特色 国外或境外在猪改良的组织工作方面的成功经验仍然 跨场遗传评估贯穿整个计划 说明跨场遗传评估 即我们所 值得我们研究和借鉴 只不过需要结合国情予以创新 做出 说的联合遗传评估 应是一条主线 可见 缺乏它, 我们的 全 自己的特色 逐步走出自己成功之路 国生猪遗传改良计划 便无多大意义 在 美 国 猪 改 良 计 划 指 南 出 台 于 1976 年 1981 年 在中国台湾省 虽未发现全省性猪改良计划 但从一本 1987 年和 1996 年又经 3 次修订 每次修订都有新的发展 厚书 台湾农家要览畜牧篇 [1] 的第一章 猪 可看出台 1996 年版 正文有 6 个部分 绪言 遗传的基本原理 涉 湾十分重视生猪改良 全章 11 节中的前 5 节是 ①主要品 及选择原理 育种值与 EPD 值 遗传进展预测 场内测定 种 含本土性地方品种 ②检定 包括种公猪性能 中心 计划 上市猪的评价 中心测定计划 种猪测定后种猪的管 检定站 种猪性能场内检定 二品种杂种母猪性能检定 三 理 最后是 6 个附录 可见 美国的猪改良计划十分重视种 品种杂种肉猪生长及胴体性能检定 用种猪性能检定制度 猪测定 对跨群遗传评估也十分重视 只是未显示在标题上 改良品种始于 197 年 先是建立前 2 项检定计划 后为了 美国还出版了可与 改良计划 配套的 猪遗传学习手册 解核心群纯种猪改良效果的传递情形 1983 年起又开始进 共有 17 个部分 种猪测定体系 遗传品质估计 跨群遗传 行二品种杂种母猪和三品种杂种肉猪的抽样检定 ③种猪登 评估 父系和母系的遗传改良 种猪的选择计划均在其中 录, 这一制度始于 1975 年 ④种猪场评鉴 ⑤国家核心种 在 加 拿 大 1993 年 的 安 大 略 省 猪 改 良 计 划 Ontario 猪场 分北场与南场 2 个场 说明台湾的生猪改良组织工 Swine Improvement Program, OSIP 有其特色 绪言部 分就开始接触估计育种值 EBV 及其准确性的度量 EBV 的重复率 还指出 AI 公猪的育种值估计的准确性随着其 后代头数的增加而提高 第二部分是 OSIP 计划 包括场内 测定 中心测定以及母猪生产力及其管理计划 还涉及测定 表 1 应用冷冻精液配种建议输精时间 h 作抓住了要害 3 有利于适应生猪生产方式的转变 有利于满足多元 化和不断变化的猪肉和种猪市场的需求 我国养猪业的生产方式正在向规模化 集约化 标准化 饲养方式和产业化模式转变 向区域集中 产业整合转变 上述转变 在一定程度上要靠生猪遗传改良计划来推动 以我国地方猪资源为母本的杂交利用以及用地方品种 品种 约克夏 长白 杜洛克 年份 头数 EBV 日龄 猪为母本母系培育出的有中国特色的配套系商品猪 对于满 背膘厚 足特定市场对优质猪肉的需求 满足不同地区和消费群体的 不同消费习惯 形成多样化 优质化和特色化的猪肉产品市 场也将起到重要作用 平均年遗传变化 平均年遗传变化 开测与终测体重 与选择方法的不同 ④供辅助选择的分子 标记种类的变动 ⑤专门化品系与配套系的多样化等来适应 这种变化 平均年遗传变化 注 数据来自加拿大猪改良中心 CCSI 年报 [8] 18 种猪市场和猪肉产品市场有时也处于动态变化中 生猪 遗传改良计划的实施将有助于通过 ①选择目标的调整 ② 父系指数 母系指数 母猪生产力指数所包含的性状种类与 加权值的不同 ③性状测定方法 如测定仪器 测定部位 有利于增强我国养猪业的可持续发展能力 实施生猪遗传改良计划 将可通过 ①宝塔式猪群结构 与基因传递方式的调整 ② AI 公猪地位与作用的提升 ③

113 能繁母猪数量的有效控制与母猪生产力水平的提高 ④猪群 对变化着的生态环境适应能力与抗病力的增强 ⑤地方猪优 异遗传资源利用率的提高等 有力地推动我国养猪业的持续 发展 质量提高 效益增进 生态良好 农民增收和农村富裕 遗传改良工作难于在短期内评估其绩效 因此 必须避 即 2 个工作基础 一是种猪性能的场内测定 二是公猪 的遗传选择 三大育种技术的核心技术是选种 在场里做选种工作要 抓好 个环节 即 科学测定 准确评估 强度选择 适 速更新 个环节均甚重要 但相对而言 测定最为重要 免短期行为 摆脱急功近利观念束缚 以可持续发展思想为 也是最难迈好的一步 测定必须按照统一的规范 对较大规 指导 走出一条具有中国特色的生猪遗传改良事业发展之路 模的测定猪群 在标准的人员 设备条件 合理且一致的环 3 计划 的指导思想 境 且能避免任何系统误差的情况下才能获得正确 准确 3.1 对 计划 中的精神与指导思想概括的认识 个体间有可比性的性能数据 否则 育种值的估计再准确 笔者研读 计划 概括其指导思想为 3 个 1 2 个基础 个目标 计划 的总目标 指走 适度引进 改造创新 自主选育 形成特色 的 留种率再小 猪群年更新率再高都是徒劳的 即使是在场间 种猪遗传联系较大的情况下 跨场遗传评估结果也不能用来 进行场间种猪的比较 更不能进行跨场选种 有悖 计划 中国瘦肉猪改良之路 力争拥有世界上最大的瘦肉型纯种核 扩大我国育种群的初衷 心猪群 逐步提高种猪质量与自给率 变种猪进口国为出口 3.2 为何公猪的遗传选择也是全国生猪遗传改良的基 国 提高生猪生产水平 满足日益多元化和不断变化的消费 础工作 市场需求 提高养猪综合效益 在国外 已有公猪的遗传选择 公猪的选择指南 AI 为了更新血统 扩大遗传基础 开发种业新产品和某一 计划中的公猪选种等内容的文章出现 [11,12] 有的国家在公布 育种工作之需 适时 适量 适当地引进优良种质资源或其 跨群遗传评估结果时 公母猪的列表是分开的 各品种 AI 冻精十分必要 但引入至本猪群后怎么办 建议对其加以消 公猪的评估结果是集中在一起的 母猪选种一般只依据本身 化和改造 利用其变异大 不同引入国和不同家系可能各有 性状的育种值或育种值指数 几个性状育种值的综合 有的 其特点的有利条件 通过设计式的 持续的 有一定新意的 则称为选择指数如父系指数 母系指数等 而对 AI 公猪 场内测定 选择与选配措施 提高核心群的平均遗传水平并 特别是大型种公猪站或 AI 中心的 AI 公猪 则要收集其后 形成具有自己特点的新的家系 新的小群体 或新的核心群 代的性能数据 以对 AI 公猪进行再评估并试图发掘顶级公 必要时尚可形成用于多场联合培育配套系中的某一个有特 色的亲本品系 前述中国瘦肉猪改良之路的 十六字 中 猪 top boar 公猪的遗传选择在 计划 中亦属生猪改良的 2 个基础 的 形成特色 应涵盖我国独特的地方猪遗传资源 在改造 工作之一尚可从以下两方面看出 国外引进品种中的利用或在配套系中 作为亲本品系加以利 用的内容 拔应格外重视和谨慎 条主线 指联合育种 具体说是指统一 规范的场内测定及其基础 上的联合遗传评估 联合遗传评估亦即国外所称的 跨群遗传评估 acrossherd genetic evaluation 这一名称源于同一品种内不同 核心群之间所进行的群间遗传评估 育种值的跨群比较和统 一排名 为通俗起见我们常称之为跨场遗传评估 不贯穿这 条主线 制订 计划 实质上的意义就将失去 种猪性能的 对公猪的选择远比母猪重要 故对公猪的选 1) 公猪的遗传影响远大于母猪 俗语说 公猪好好一坡 母猪好好一窝 2) 公猪的选择强度比母猪大 公猪少 留种率低 公 猪更优 选择差加大 3) 公猪的选择准确性比母猪高 可利用的后代信息量 增加 尤其是种公猪站的公猪 ) 种猪跨场比较条件下群体变异度扩大 选择范围广 公猪血统增多 场内测定与联合遗传评估是目前 计划 实施中的第一难点 5) 公猪的年更新率比母猪高 世代间隔更短 必须以攻关的精神度过这一难关 把握这一主线 由以上 5 点及年遗传进展公式可知 大力加强公猪的选 个重点 指的是遴选和建设国家生猪核心育种场 以其作为 计 划 实施的重点是因为它是开展联合育种的主体力量 是实 现生猪改良的核心基地 以其为重点依据充分 个基础 择可望大大加快改良速度 注 年遗传进展又称为改良速度 顶级公猪的发掘对猪群改良极为重要 随着 计划 的深入实施以及以下条件的逐步成熟 发掘对猪群改良极为重要的顶级公猪的可能性愈来愈大 1) 核心场规模和全国瘦肉型纯种猪核心群总规模将扩大 19

114 2) 有场间遗传交流计划和遴选出的 1 家大型种公猪站 加上核心场和大型种公猪站的紧密结合 可大大提高共同使 用优秀公猪的机会 场间遗传联系将增强 政策 资金和技术支持 优先使用遗传交流优秀公猪精液.2 组织开展种猪登记 计划 规定 在国家生猪核心育种场开展种猪登记 3) 已掌握联合 场间 跨场 遗传评估技术 但要建 建立健全种猪系谱档案 要求 在 216 年前完成 1 家国 立在持续测定 科学测定 测定量增加 数据真实 及时上 家生猪核心育种场在群纯种猪登记 逐步形成连续完整的种 报的基础上 猪系谱档案 并动态跟踪种群变化情况 ) 随着 AI 公猪后代数量的增多与其 EBV 的收集以及 由全国畜牧总站建立国家种猪数据库并指导各地对核 场间种猪性能可比性的增强 公猪的动态评估及其准确性的 心育种场纯种猪进行登记 畜牧兽医主管部门按照 种猪登 提高将成为可能 记技术规范 NY/T 82-2 的要求 组织技术推广部 5) 引种工作可能更为理性 优秀的公猪及其精液在引 门具体对本辖区内国家生猪核心育种群纯种猪进行登记并 种中所占比率将可能提高 将登记数据及时传送国家种猪数据库.3 建立种猪性能测定与遗传评估体系.3.1 种猪性能测定 计划 的六大内容 现将 计划 实施方案 与 国家生猪核心育种场管 理办法 试行 等 3 个文件中有关 计划 所规定的 6 个 种猪性能测定采取场内测定为主 中心测定站测定为辅 方面的基本内容归纳如下 的方式.1 遴选国家生猪核心育种场 年前分批完成 1 家国家生猪核心育种场的评估 种猪遗传评估 ①全国种猪遗传评估中心负责全国种猪遗传评估工作 遴选 其中 年遴选 5 家 筛选出核心育种群 ②全国遗传评估中心采用多性状动物模型 BLUP 法 模型 纯种基础母猪 5 万头 年 形成纯种基础母猪 参见 全国种猪遗传评估方案 对核心育种场或种猪生产 总存栏数达 1 万头的国家生猪核心育种群 性能测定中心报送的测定数据 进行种猪遗传评估 ③核心 计划 要求核心场 ①对纯种猪进行登记 ②每窝纯 育种场于每周四前将新的测定数据上报到全国遗传评估中 繁后代至少有 1 公 2 母开展完整的生产性能测定 体重达 心 全国遗传评估中心于下周一将结果反馈至核心育种场 1 kg 有条件的实施全群测定 至少每 2 周进行 1 次性 ④全国种猪遗传评估中心在网络平台上每季度公布一次全 能测定 要求年测定种猪 2 头以上 ③确保测定数据和 国种猪遗传评估综合分析结果 ⑤核心育种场参考评估结果 场间遗传联系的真实性 确定专职育种技术员 具体负责种 进行种猪选留 ⑥全国遗传评估中心利用种猪测定中心和核 猪配种 性能测定等育种工作 每周将相关育种数据及时上 心场报送的测定数据进行场间性能比较 评价场内测定数据 传至全国种猪遗传评估中心 包括配种 分娩等繁殖记录 的准确性 评估场间关联度 生长性能测定记录 种猪选留淘汰记录等. 开展遗传交流 计划 强调 要严格执行场间遗传交流计划 参与场 全国种猪遗传评估中心会同全国猪育种协作组专家组 间遗传联系工作 自建或参与建立相对独立的种公猪站 国家生猪核心育种场 根据种猪遗传评估结果制定场间遗传 基础设施设备符合种猪精液生产要求 按要求选用其他核 交流计划 经全国畜牧总站审核后组织实施 遗传交流以种 心育种场测定的优秀种公猪精液 每个核心育种场至少应 猪精液交流为主 与其他 3 个核心育种场保持持续的遗传交 流 并提供完整 每个核心育种场至少应与其他 3 个核心育种场保持持续 的信息资料 计划 规定 必要时 委托国家级种畜质检 的遗传交流 应保证有 5% 以上的育种群母猪用其他场种公 中心对场间遗传交流后代进行 DNA 亲子鉴定 对遗传交 猪配种 经全国遗传评估评定为最优秀的种公猪应根据场间 流的真实性实施有效监督 遗传交流计划参与场间遗传交流 计划 鼓励核心育种场和性能测定中心将测定评估为 优秀的公猪提供给种公猪站 计划 指出 对核心育种场进行 动态监管 当国家 生猪核心育种场出现 种情况之一者 取消 国家核心育种 场资格 计划 表示 国家支持生猪核心场建设 生猪 产业政策适当向生猪核心育种场倾斜 国家生猪核心育种 场管理办法 试行 规定 核心场 优先享受 计划 相关 11.5 种公猪站和人工授精体系 根据全国生猪优势区域布局规划和国家生猪核心育种 场的分布情况 212 年前选出 1 家种公猪站用于核心育种 群的公猪精液交换 这 1 家种公猪站的种公猪主要来源于国家生猪核心育 种场 且必须是经性能测定 遗传评估优秀的种公猪 为推进国家生猪良种补贴项目的实施与国家生猪核心

115 育种场纯种猪的推广 22 年前建设 家种公猪站 合 白猪的品种登记册也相继于 年出版 品 理布局人工授精技术服务点 用于社会化遗传改良与生猪良 种登记册的出版 是执行品种登记制度的成果之一 种补贴工作 生猪良种补贴项目优先选用经过性能测定和遗 5. 首次提出要 建立种猪性能测定与遗传评估体系 传评估的种公猪.6 地方猪种的保护 选育与利用 在以 计划 体系 方案 等命名的文件中 将 猪的性能测定与遗传评估摆在一起这在我国正式文件中是 计划 表示 支持列入国家级和省级畜禽遗传资源保 第 1 次 除说明两者的紧密联系以及都具重要性外 也表 护名录地方猪种的保护和选育工作 充分利用和发挥我国地 明生产性能测定是为遗传评估打基础的 或者说种猪测定 方猪种资源肉质 繁殖性能与适应能力等优良特性 采用杂 是选种甚至是遗传改良工作最基础性的工作 交选育与本品种选育相结合的方法 逐步培育遗传性能相对 计划 提出 种猪生产性能测定坚持场内测定和生产 稳定的专门化品系 鼓励有计划进行地方品种的杂交利用和 性能测定中心相结合 以场内测定为主要形式 实施方案 参与配套系培育 满足多样化的市场消费需求 也指出 种猪性能测定 采取场内测定为主 中心测定站测 计划 的 主要任务 部分指出 充分利用优质地方 种猪资源 在有效保护的基础上开展有针对性的杂交利用和 新品种 / 配套系培育 5 计划 的九大亮点 5.1 定位于 遗传改良计划 易于公众认知 计 划 被 称 为 遗 传 改 良 计 划 而 不 是 育 种 计 划 或 选育计划 对我国公众来讲 遗传改良 (genetic 定为辅的方式 这在指导思想上和实施中均具有意义 5.5 明确提出要建立全国种猪遗传评估中心 建立全国种猪遗传评估中心对实施联合 跨场 遗传评 估是一大组织保证 而且 计划 对核心育种场 性能测 定中心 种猪遗传评估中心之间信息的相互连接方式与时间 都做了规定 十分具体 5.6 在我国首次提出 遗传交流 这个名词 improvement) 通俗易懂 容易理解 避免了有人对 育 计划 明确提出每个核心场必须与其他 3 个核心场保 种 (breeding) 或 选育 (breeding) 涵义的误解 引导公 持持续的种猪或精液的遗传交流 这从一个方面 另一个方 众认识到不仅种猪要改良 肉猪也要改良 不仅育种场要进 面是种公猪站 有力地增强了场间遗传联系 为场间 跨场 行改良工作 生猪良种繁育体系中的其他层次和这个体系的 遗传评估有效地进行创造了较好条件 这一措施不仅具有可 其他组成部分也需要做育种工作 操作性 也具有重要意义 遗传改良 与 育种 选育 是同义词 育种不仅仅 是培育新品系和新品种 新品系 / 新品种培育只不过是育种 工作的三大技术 [ 核心技术选种加上选配 或称 交配系统 5.7 突出了遗传改良三大技术措施中的核心措施 种 猪生产性能测定 计划 突出了遗传改良三大技术措施中的核心措施 和杂交 ] 的综合运用 育种最重要的工作是选种 而不是培 选种以及选种的基础工作种猪生产性能测定 也抓住了联合 育新品系和新品种 选种最重要的工作是生产性能测定 育种的实质性工作 统一规范的种猪生产性能测定及其基础 5.2 专门设立 国家生猪核心育种场 上的种猪性能的联合遗传评估 当然 联合育种的实质性工 计划 规定要专门设立 国家生猪核心育种场 并强 调其重要性 这反映国家在实施对种猪场的分级管理和有效 作还包括共同使用优秀的 AI 公猪 5.8 关于种公猪站和人工授精体系 管理 抓住了我国生猪遗传改良工作的重点 正确地指出国 将 种公猪站和人工授精体系 作为 计划 的主要内 家生猪核心育种场是联合育种的主体力量 对核心育种场的 容之一 且首次在文件中规定要选出用于核心育种场公猪精 管理措施也较具体 对它的规模与测定量首次作出了规定 液交换的 1 家种公猪站 意义非凡 并给 测定量 下了定义 5.3 首次提出要 组织开展种猪登记 第 1 次在正式文件中提出要 组织开展种猪登记 且排 计划 还规定 1 家种公猪站的种公猪来源主要来自 国家核心育种场 且必须是经性能测定 遗传评估优秀的种 公猪 这对解决大型种公猪站的公猪来源走出了重要一步 在 计划 的第 2 位, 可见其重要地位 长期以来 我国 对大型种公猪站引种工作提出了新要求 且为种公猪站的 多次提出 良种登记 工作 但很少坚持或只停留在低级水 AI 公猪的再评估和进一步的选种工作创造了条件 平上 这次 计划 提出先在核心育种场进行 是一可行办 5.9 关于地方猪的保护 选育与利用 法 这也是我国猪育种工作借鉴发达国家成功经验及与国际 将 地方猪的保护 选育与利用 作为 计划 的六大 接轨的表现之一 在猪中 最早有品种登记册 Herd Book 内容之一 并指出选育利用必须建立在 有效保护的基础 的品种是约克夏猪 出版于 188 年 杜洛克 汉普夏 长 上 把握住了地方猪工作的方向 说明 计划 不仅重视 111

116 引入品种的改良 也重视使我国生猪遗传改良能 形成特色 核心群以外的组成 一般育种群 但仍需测定与选择 核 的优质地方猪遗传资源的保护与利用 另外 计划 对纠 心群的成员组成是变化的 正当前出现的一些倾向也有帮助 6 计划 实施中几个问题的讨论 6.1 提高国家生猪核心育种场的育种工作水平 建议首先摸清育种群的家底 身在从事育种群工作的技术人员 对育种群家底不一定 了解得十分清晰全面 建议摸底步骤为 1) 从种猪个体档案中挖掘出有用信息 ①分析来自不 ２ 一般育种群由下列优良种猪组成 ①在核心群用过 1 或 2 胎的母猪以及用过 1 个配种季节的公猪 ②因失配 流产 1 次 等原因未列入核心群但经鉴定为合格 并想再 观察者 ③一般育种群内选育出的少数优良后代 6.1. 抓关键选育措施 即 科学测定 准确评估 准确估计育种值 强度选 择 严格选留 适速更新 适当缩短世代间隔 提高年更 同国家 场 血统的种猪性能有无差异 有无各自特点 新率 精心选配 ②有无特别突出的家系或个体 尤为公猪 ③较普遍存在 什么缺点 ④变异程度如何 ⑤拟要重点利用哪个家系 哪头公猪 保留什么优点 改良什么缺点? 2) 编制猪群系谱图 从不同角度计算平均近交系数 个体间的亲缘系数以及各个体的近交系数 3) 分析猪群遗传基础的广泛度 ( 即共有多少个血统 ) 限定每个核心育种场的选育品种数量 建议一个国家核心育种场的选育重点要放在一个品种 上 最多两个品种 6.2 关于种猪性能的场内测定 建议早日出台 全国种猪场场内种猪性能测 定规程 ) 集体至现场观察外形体质 注意观察分析来自不同 现 有 的 行 业 标 准 种 猪 生 产 性 能 测 定 规 范 NY/ 国家 场 血统种猪的外形体质特点 直至发现突出个体 T 内容系针对中心测定而制定的 如有对送测 5) 讨论修改前面由档案得出的初步结论 写出各品种 纯 猪的要求 必测 3 1kg 平均日增重 而无达 1kg 体 种猪群现有基础 报告 重日龄 测定结束期进行胴体和肉质测定等 场内测定与 中心测定在测定目的 测定程序 测定性状 测定方法 测 认真制订种猪育种方案 笔者建议包括以下内容 ①基本情况 包括种猪场全称 定环境等上都有较大差异 建议早日出台 计划 中已提到 地址 生产经营范围 经济性质 占地面积 猪群结构及数 的 全国种猪场场内种猪性能测定规程 并暂作为 试行 量与血统数 育种条件等 ②纯种猪群现有基础 ③育种 予以发布 之所以 试行 旨在待试行一段时间后便于集中 目标 总体目标 重点性状的具体指标 指明时限 注意 问题予以修改完善 区分 改良性状 与 选择性状 ④育种方法 ⑤引种 急需针对当前场内测定尚存在的问题加以规范 [1] ⑥核心群的组建 ⑦选择方案 [ 选种总要求 各阶段的选择 1) 测定环境 目前涉及场内测定的文章以及文件很少 种猪性能测定 此处指 断奶后性状 postweaning traits 指出这个问题 为能正确地排出名次 测定环境上必须 合 的测定 母猪生产力测定与记录体系 种猪遗传评估 种 理且一致 目前问题主要在 一致 上 即各受测猪不一定 猪选留与留种率 年更新率 ] ⑧选配 ⑨场内公猪站建设 处于相对相同的条件下 结果增大了环境方差 降低了遗传 及场间遗传交流 ⑩营养方案与饲养管理 健康养猪 生 力从而降低了一代遗传改进量 通俗讲 人为地 环境 搅 物安全与疫病防治方案 种猪推广与销售策略 含优质优 乱了客观存在的排队顺序 比如 ①部分场的老测定舍与新 价 技术人员配备与培训 保障措施 附件 测定舍在结构 测定栏面积与每栏测定猪头数等方面均不一 致 未考虑从建立统一的场内测定站来解决 ②测定猪自由 组建核心群 [1] 即将现有育种群划分为核心群与一般育种群 采食十分重要 强夺弱食难于反映个体间的遗传差异 但部 １ 建议从现有纯种猪群中挑出最好的公母猪组成 核 分场未设置自动饲槽 自由采食槽 或变相执行自由采食 心群 这叫重点中还有重点 但当主选性状平均水平偏低 限食 较普遍的问题还有在饲槽上不统一 同一批测定猪 变异度小 血统数过少时 应先引种 然后才组成 核心群 中 一部分猪使用全自动种猪生产性能测定计料系统 另一 对其进行选育 一般只有 核心群 的后代才能用来更新 核 部分猪使用常规自动饲槽 小环境差异太大 两处猪无可比 心群 甚至用来更新一般育种群 性 但由系统误差造成的这些测定成绩经估计育种值后仍放 核心育种场要把主要精力放在核心群的测定 选择和选 配上 核心群的规模依情况而定 但应打破老框框 可比传 统的大 有必要进行新品系培育时也应在 核心群 内进行 112 在一块排队 比较 系统误差是无法用统计方法排除的 2) 测定性状 从经济价值 选择效果 性状间的遗传相关 可操作性 与国际接轨看 目前规定主测性状为达 1 kg

117 日龄 1 kg 活体背膘厚是合理的 但有些场测定性状过 的情况下 更具有现实意义 因此在登记过程中应严格审查 多 使测定人员精力分散 无法测好主测性状 建议对体尺 系谱 一旦发现不纯个体 指育种学上的 或其来源存在疑 暂时不测 对瘦肉型种猪而言 3 1 kg 个体饲料转 问 即不让其登记 化率目前虽定为辅测性状 但仍建议不以任何形式变相鼓励 性能登记是一种在性能测定后有了日龄和活体背膘厚 测定 因无此必要 生长速度与饲料转化率的遗传相关高 等表型数据及其育种值和选择指数后 经体型外貌审查 可达 -.67 选择生长速度已可带动饲料转化率的改良 发 被认定符合性能登记标准的种猪登记方式 达国家一般至今仍不将饲料转化率列为选择性状 也不具 性能登记旨在使育种者更了解本育种群的性能现状与 备条件 性能测定的付出已很高 大批量购进 全自动种猪 发展动态 也使性能登记过的个体能得到更好的利用 生产性能测定 设备对绝大部分核心育种场而言经济上无法 种猪登记对象 接受 在一般条件下度量误差又很大且很麻烦 直接选择 饲料转化率不合算 只要有群体饲料转化率数据即可 3) 结测体重允许范围和校正所用标准体重问题 目前 对种猪场内 含核心场 测定群结束测定的体重范围规定 为 8 15 kg 据说结测体重的允许范围今后还要扩大 ①国家生猪核心育种场的种猪进行种猪登记 ②建议在 条件成熟时将大型种公猪站的 AI 公猪也包括在种猪登记的 范围内 建议出台全国统一的种猪登记编号系统 1) 获得登记的每头种猪 必须有其登记号 在 全国 笔者认为允许范围是否偏宽 另外 目前将测定群各头猪 种猪遗传评估方案 试行 中创立的全国统一的 15 位种猪 在 8 15 kg 体重范围内称重时记录的实际 日龄 与 个体编号系统 一是为了解决耳缺号的重号问题 二是为了 测得的 背膘 校正到 1 kg 体重时的 日龄 和 膘 在全国顺利推行联合 跨场 遗传评估 但由前述种猪登记 厚 是否合理 在这种情况下 所产生的事实上存在的系 的根本目的与意义可见 种猪个体编号系统与种猪登记编号 统误差是不可能用校正法避免的 在全国畜牧兽医总站于 系统的任务有较大不同 因此 获得注册的每头种猪 除有 2 年 5 月颁布 全国种猪遗传评估方案 试行 以前 全国统一的 15 位个体编号外 还必须有其登记号 15 位个 我国规定种猪结测体重为 9 kg 若结测体重范围规定为 体编号系统不能代替种猪登记编号系统 8 15 kg 那么校正到 9 kg 到还可以 至于结测体重 2) 几个可资借鉴的国外 境外例子 ①美国猪测定与 范围问题是另一回事 因此 若坚持结测体重的允许范围为 遗 传 评 估 体 系 同 期 群 报 告 STAGES pig contemporary 8 15 kg 则建议都校正到 9 kg 基础上的 日龄 和 膘 group report 列表中 每头猪在第 1 列填写耳缺号 最后 厚 等时机成熟时再来讨论校正到 1 kg 时的结测体重范 一列填写登记号 Registration # ②美国猪登记协会出 围问题 若继续维持 1 kg 为校正用的标准体重 则建议 具的登记证 certification of registry 中 其个体资料除 讨论结测体重范围可否修改的问题 含有耳缺号外还有由 8 位数字构成的登记号 ③我国台湾省 顺便建议 每头测定猪的结测 终测 体重必须如实记 录 以便于今后分析问题 的 公猪冷冻精液工作报告暨推广目录 中每头种公猪除有 耳号外 尚有 登录号码 6.3 关于种猪登记 建议在系谱登记过程中考虑如何进行下一步 应是登记种猪的后代 应填写 登记号 ②种猪展评申请 的性能登记 种猪出售系谱证明 AI 公猪精液推广名录 公布的种猪遗 3 ) 品种登记号的应用 ①送交测定中心测定的猪一般 种猪登记一般分为两步走 第 1 步是系谱登记 也叫血 传评估报告应填写 登记号 ③ 性能登记 种猪比例应 统登记 第 2 步是性能登记 系谱登记旨在保护系谱的准确 是未来对核心场的检查指标之一 ④逐年统计和公布的全国 性和保持品种的纯度 只有系谱准确无误 特别是系谱中品 性能登记种猪数在一定程度上能说明遗传改良工作的成效 种的名称是真实的 该个体来源可靠 即可初步认为系谱登 也是对良种规模的一个基本估计 记合格 但须经现场观察证实该个体符合该品种外貌特征 6.3. 在有了优良的性能表现后即可申请第 2 步的性能登记 系谱 登记是种猪登记最基础的工作 只有系谱登记合格后 才具 备申请性能登记的资格 建议从管理层面制订 种猪登记管理办法 现有农业行业标准 种猪登记技术规范 NY/T 822 主要是从技术角度制订的 尚须从管理层面解决以下问题 1 有针对性地解决当前种猪市场所售种猪有的品种不 目前在国家生猪核心育种场进行的种猪登记是系谱登 纯的问题 ①应要求所填系谱清晰 齐全 ②检查每个祖先 记 不过在系谱登记过程中可考虑下步如何进行性能登记 所记载的品种名称 或代码 是否真实 ③制定抽检办法 系谱登记在当前种猪市场出现以其他种猪冒充本品种 2) 种猪登记管理办法 须含 性能登记 条件 性 113

118 能 外形与血统在选种中均有一定意义 种猪登记的第一 信息 从表 2 可知 A 公猪达 1 kg 日龄的 EBV 重复率为 阶段虽只进行系谱登记 但在全国联合 跨场 遗传评估 35% 真实育种值的范围为 -1±6.5 = d 有效开展后即将进行第二阶段的种猪登记即性能登记 故 而 B 公 猪 重 复 率 为 89% 真 实 育 种 值 的 范 围 管理办法 尚须含 性能登记 条件 目前做好性能记录 为 -1±2.7 = d 变异范围明显缩小 也就 并不等于进行了性能登记 3) 建议 种猪登记管理办法 中含有全国种猪登记编 是说 B 公猪该性状的 EBV 的准确性 可靠性大大高于 A 公猪 虽然它们的 EBV 值是一样的 号系统和有关登记证的内容 ３ EBV 重复率的用途 国外养猪业发达国家在其一 6. 提高对 AI 公猪的选择水平 协同培养和选拔优秀 些材料中如加拿大 OSI AI 中心杜洛克公猪一览表 一头种 公猪 发掘顶级公猪 6..1 动员种猪繁育体系的各组成部分协同努力做 猪的遗传评估表 公母猪报告 其性状育种值后 或 EBV 好优秀公猪的选拔工作 母系指数之后 常有 EBV 重复率 缩写为 Rep 因此 [15,16] 指数后 或父系指数后 甚至每个性状的 EBV 加上父系指数 可能的做法是 ①在核心群内 通过优秀公猪与优秀 不断收集公猪的后裔信息 持续 动态地对公猪进行遗传评 优良母猪配种 后代中有可能分离出优秀公猪 此时再实施 估十分重要 对大型种公猪站的 AI 公猪进行持续评估是发 场内测定 小部分送中心测定站测定 测定数据上传全国种 掘顶级公猪的好办法 猪遗传评估中心 再由全国评估中心依据来自各方的亲属资 ４ 验 证 公 猪 验 证 公 猪 proven boar; proved 料估计其育种值 场站还结合其外形 含肢蹄结实度 以尽 boar; progeny-proven boar 意指一头公猪经数次遗传评 可能小的留种率选出较好公猪 并将全国排名靠前的优秀公 估 并随着其后代数目与性状信息的增多 其估计育种值在 猪一部分供应给种公猪站 一部分留在本场公猪站或用作更 逐步变化 在一定限度内 至该公猪被认定为最优公猪时 新本核心群 ②中心测定站将经过遗传评估中心评估排名在 即可称之为 验证公猪 有了验证公猪 便可加强其利用 前 3% 5% 假设数字 的最好公猪供给种公猪站 ③种 可多留其后代 也可作为半同胞信息对新公猪进行评估 公猪站对每头优秀公猪尽可能让其在多个核心群和扩繁群 6.5 关于种公猪站的建设 使用 再调查了解其后代的表现 并随时传输给遗传评估中 1 建议进一步明确大型种公猪站在核心场间遗传交流 心由其对存栏和已离群的 AI 公猪定期进行动态评估 估计 及增强场间遗传联系中的地位 研究如何发挥其在这些方面 其新的育种值与 EBV 重复率 EBV 重复率值愈大 就说明 作用的具体措施 [16,17] EBV 的准确性愈高 6..2 建议条件成熟时计算 EBV 的重复率 １ EBV 重 复 率 的 定 义 EBV 重 复 率 估 计 育 种 值 的 重 复 率 repeatability of EBV 也 叫 做 EBV 可 靠 力 reliability of EBV 指 EBV 准确性的平方 而 EBV 准 确性的定义是真实育种值与估计育种值之间的相关 ｒ Ａ Â EBV 重复率说明的是同一个个体不同次遗传评估所 得 EBV 值之间变化的可能性 变化越小 说明 EBV 值越 稳定 越可靠 ２ 影响 EBV 重复率的因素 : ① 估计育种值时所利用 的亲属信息量 利用的亲属信息愈多 EBV 值的准确性愈高 2 从制度上进一步落实 212 年前遴选出的 1 家大型 种公猪站的 AI 公猪的来源 优化和稳定大型种公猪站种源 [16] 在各方努力下使这些种公猪站拥有较大比例的一流 顶 级 种公猪 建议制定这 1 家种公猪站的遴选标准 并对 其进行动态管理 3 建议对 22 年前产生的 用于社会化遗传改良和生 猪良种补贴项目的 家种公猪站实行分级管理和分类指导 建议种公猪站自愿组成类似于协会的非牟利 AI 行 业团体 以服务会员 交流如何推动国家生猪核心育种场间 的遗传交流以及如何才能更快地改良猪群 5 建议大型种公猪站为 AI 公猪的动态评估开展其后 反映在重复率值上就会愈大 即 EBV 值愈稳定 若重复率 裔的性能调查 以发现更好的公猪 已达 9 说明即使再进行遗传评估 再增加新的亲属信息 6.6 关于地方猪遗传资源的保护 选育与利用 EBV 值也不会有大的变化 若在 5 以下 则 EBV 值是 不可靠的 表 2 和表 3 以及下面的例子可资说明 ②性状的 遗传力 遗传力越高 EBV 的重复率就越高 EBV 重 复 率 与 可 利 用 的 亲 属 信 息 量 的 关 系 一 例 1 重新唤起人们的资源保护意识 树立保种的紧迫感 与责任感 当前突出的问题是 我国地方猪面临的遗传资源危机虽 有减轻 但仍在继续 表现在有些省级和国家级保护品种其 譬 如 有 A B2 头 公 猪 达 1 kg 日 龄 的 EBV 值 均 母猪数量特别是公猪头数与血统数 3 代之内彼此无亲缘关 为 -1 d 但 A 公猪缺乏后代信息 B 公猪有 5 头后代的 系的家系数 仍在下降 有的甚至成为濒危品种 11

119 2 将办好国家级猪遗传资源保种场作为保种工作的重 中之重 [18] 会第五次全国会员代表大交流材料. 桂林 21 年 11 月. [2] 孙德林 云鹏主编.21 年中国养猪业发展研究报告.211 年 2 月. 在全国办好 3 个国家级猪保种场作为保种的核心基地 [3] 陈清明. 全国大约克猪育种协作组光辉历程 全国长白猪育种 和主要场所 建议制定 国家级猪遗传资源保种场管理办 协作组十三年 全国杜洛克种猪选育技术协作组大事记. 见 法 实行动态监管 王林云 陈健雄主编. 养猪三十年记. 北京 中国农业出版社 3 竭尽全力保存好现有的公猪血统 若按保存品种内 遗传多样性的要求现有公猪血统数不足时 还应适当增加公 猪的血统数 可用彭中镇与曹建华于 29 年提出的回交法 [] 黄瑞华. 地方猪种资源保护与利用协作组的成立与活动. 见 王林云 陈健雄主编. 养猪三十年记. 北京 中国农业出版社 [19] 自行创 建新血统公猪 但用此法须抢时间 因产区内的地方纯种母 猪数和其中与现有公猪不同血统的母猪数可能愈来愈少 甚 至可能消失 开展地方品种公猪的集中测定是本品种选育的重要 手段 [18] 目前 加强地方猪种选育 几乎已成口号 文章或文 件中不算少见 选种是选育的核心措施 但由于保种场经济 比较困难 致使对地方猪的测定与选择在实践中难于办到 还很少拿得出实际可行的办法与成功的范例 值得讨论 统 一认识 提出措施 建议在中心产区产区试建地方建立地方品种公猪性能 测定站 或由国家级猪遗传资源保种场兼办 每年测定 [5] 孙德林. 奏响一曲猪 AI 技术推广的世代赞歌 见 孙德林等主编 猪人工授精研究进展 中国农业出版社 29:1-. [6] 王俊勋. 国家生猪良种补贴项目现状与发展 见 提高母猪 年生产力暨第四届全国猪人工授精关键技术研讨会. 21:1-9. [7] Sample K. Canadian swine genetics the Canadian success story. Ontario Swine Improvement Inc. [8] Canadian Centre for Swine Improvement Annual Report www. ccsi. ca/meetings/annual/ann21.pdf [9] Annual Report 28. Danish Pig Production. 28. www. danbredint. Dk. [1] Crump R, Hermesch S. The National Pig Improvement 次 只测公猪本身的 断奶后性状 不进行同胞的屠宰测 Program- 定 旨在使中心产区内用来更新的地方品种公猪的某些性状 2,Armidale 逐步获得一定程度的遗传改进 办地方品种公猪性能测定站的必要性与可行性在于 ① 公猪的遗传影响远大于母猪 公猪的选拔最为重要 ②在产 update. Pig Genetics Workshop, [11] 丰年社编著. 台湾农家要览畜牧篇. 台北 丰年出版社 [12] Safranski TJ. Genetic selection of boars. Theriogenology. 28, 7: 区开展 AI 情况下 加上出于保种需要世代间隔又较长 年 [13] Baas TJ., Goodwin RN., Christian LL. et al. Design 更新率不高 每年测定的公猪数不会太多 测定投资不会太 and standards for genetic evaluation of swine seedstock 大 也较易操作 populations. J Anim Sci. 23, 81: 另外 笔者认为 对地方母猪 断奶后性状 进行测定 是不现实的 故测定公猪即可 5 在做好地方猪资源保护工作的基础上 务必抓好开 发利用工作 以利用促保种 考虑到家畜新品种培育远难于作物 并要有利于地方猪 的保护以及利用好 F1 母猪母本杂种优势能带来大的经济效 [1] 彭中镇 再议外种猪的遗传改良 在 28 年全国猪联合育种 协作组会议 ( 北京,28.12 北京 ) 上所作特邀报告, 载于 会议 会刊 :2-28. [15] 彭中镇. 对我国生猪遗传改良工作现状的思考与建议. 猪业科 学 [16] 彭中镇 赵书红 刘榜 樊斌 朱猛进. 人工授精与生猪遗 益这三点 笔者认为开发利用主要指 ①以地方猪为母本的 传改良. 第三届猪人工授精关键技术研讨会交流材料. 北京 F1 母猪的利用 ②地方纯种与 F1 肉猪的极品 精品猪肉及 29 年 5 月. 其肉产品的开发 ③在地方纯种中培育专门化品系并参加到 配套系的培育中 出于上述理由 不宜大力倡导通过杂交法培育新品种 也不宜对新品种命名为 新 地方品种名称 参考文献 [1] 王志刚. 全国生猪遗传改良计划. 中国畜牧兽医学会养猪学分 [17] 彭中镇 刘榜 赵书红 朱猛进 大型猪人工授精中心与育种 值的跨群比较 猪业科学 27 2(5) [18] 彭中镇 刘榜 樊斌 赵书红. 进一步加强我国地方猪保护利 用工作的几点建议. 中国畜牧学杂志 [19] 彭中镇. 曹建华 保持或增加公猪血统数是保种工作的当务之 急. 养猪

120 微卫星DNA标记技术在养猪业中的应用 杨 虎 徐兴莉 宜春学院生命科学与资源环境学院 江西 1 宜春 336 大多数微卫星具有保守性或家系保守性 特别是一些亲 微卫星DNA的结构 微卫星 DNA 又称短串联重复或简单重复序列 由侧翼 缘关系相近的物种当中如牛与羊 马属动物以及家禽与火 序列和重复串联的核心序列 2 部分组成 核心序列长度一 鸡间都具有一定的保守性 即在一些亲缘关系相近的物种中 般为 1 6 个碱基 首尾相连组成重复串联序列 其中 其重复单位和重复次数具有一定的相似性 这就使得在某 最常见的是 2 个碱基的双核苷酸重复 即 (TG)n 和 (CA)n 些不同物种之间微卫星引物可以通用 避免重新寻找引物 每个微卫星 DNA 的核心序列结构相同 重复单位数目为 Mattapallil[7] 曾用牛的微卫星引物分别在羊 马及人的基因 1 6 个 [2] 微卫星 DNA 广泛存在于各种真核生物的基 组中进行扩增发现 在羊中 56% 的引物可扩增出特异产物 因组当中 而且分布比较均匀 平均每 1 kb 的 DNA 序列 其中 2% 的扩增产物表现多态 而在马和人中则未扩增出 中就会出现一个微卫星序列 多态产物 龚明川 [8] 利用 16 对鼠微卫星位点的引物 以家 2 兔的基因组为模板进行扩增 有 5 对引物扩增出产物 并呈 [1] [3] 微卫星DNA标记的特点 2.1 微卫星 DNA 数量多且在基因组中分布均匀 微卫星 DNA 广泛分布于真核生物基因组中 不仅存在 现一定的多态性 2. 微卫星标记呈共显性遗传 于内含子或非编码区 也存在于编码区及染色体上的其它任 微卫星标记的等位基因遵循孟德尔遗传规律 能够稳 一区 在哺乳动物中几乎每个基因都至少存在一个微卫星标 定地从上一代传递给下一代 并且等位基因间呈共显性遗 记 据估计 真核生物平均每 5 15 个碱基就存在一 传 容易区分出纯合型和杂合型 这使其在物种起源 遗 个微卫星位点 这一特点为在整个基因组定位更多的基因提 传图谱 连锁分析及基因定位等研究中具有更高的精确性 供了极大的方便 这是其他标记所远远不及的 和可靠性 2.2 微卫星标记具有丰富的多态性 2.5 微卫星标记易于检测 [] 微卫星结构中各位点上不同等位基因的重复单位数目 微卫星 DNA 的长度一般为 2 bp 左右 很容易进行 是高度变异的 而且重复单位的序列也可能不完全相同 因 PCR 扩增 PCR 扩增的高度灵敏性 高度特异性及操作简 此微卫星显示了高度多态性 通过对微卫星 DNA 多态性的 便省时使微卫星标记的检测非常方便而且准确 利用微卫 研究可在生产中选取数个与生产性能相连锁的微卫星标记 星序列两端的侧翼序列 将微卫星定位于基因组的特定部 在这些位点上对所研究的品种或品系进行分析 计算父本与 位 这样微卫星可作为一种序列示踪位点 STS 其检测 母本间的遗传距离来进行杂种优势预测 也可以直接利用统 方便 适合于通过 PCR 进行自动化或半自动化分析 微卫 计模型来计算分析生产性状与微卫星的相关性及其他方面 星位点的检测多采用互补于两个侧翼序列的寡核苷酸作为 的研究 引物 通过 PCR 扩增 然后再通过凝胶电泳分离检测 [5] 微卫星的多态性分析有 2 种方式 [6] 一种是对于已经发 现的微卫星 DNA 可在数据库中直接寻找合适的引物 对基 因组进行 PCR 扩增和测序来分析微卫星 DNA 的多态性 另 3 微卫星在遗传育种中的应用 3.1 对生产性状位点进行连锁分析及数量性状定位 家畜多数的经济性状是数量性状 QTL 如体重 饲 一种是对于未知序列 要先建立基因文库 然后用人工合成 料利用率 肉质 生长速度等 每个性状都是由多个基因调控 寡聚核苷酸探针杂交 获得阳性克隆 提取质粒后利用载体 而且这些基因对性状的影响大小是不均衡的 这些基因中有 插入位点两端的已知序列设计引物 再测定插入片断的序列 的是主效基因 有的是辅助基因 微卫星在染色体上是随机 即可知道某一微卫星位点及其侧翼序列的结构 最后按微卫 分布的 如果某一微卫星位点与控制某一性状主效基因之间 星 DNA 两端侧翼序列选出合适的引物 检测基因组样品中 是连锁遗传的 那么 微卫星标记的位置就可以辅助定位该 微卫星 DNA 的多态性 进一步分析计算等位基因频率及杂 主效基因 [9] Haly[1] 对遗传连锁分析研究时指出 选用的标 合度 记越多 设定的连锁遗传距离越大 则找到一个与生产性状 2.3 微卫星标记具有保守性 主效基因连锁的标记位点的可能性就越大 利用 QTL 微卫 116

121 星标记与某些功能基因或 QTL 间的连锁关系 可将一些功 山猪和滇南小耳猪亲缘关系较近 3 个外来品种为一类 这 能基因或 QTL 定位在染色体上或连锁群中 曾昭顺对家猪 一研究结果同地理分布和品种来源一致 的 Atrn 基因研究发现 该基因与 17 号染色体的 SW131 连 参考文献 锁遗传 而且 Atrn 基因的 BB 型对湘黄猪的日增重 背膘厚 [1] Vaiman D, Pailhoux E, Payen E, et al. Evolutionary 瘦肉率等性状有显著的正效应 [11] 张陈华利用 13 个微卫星 conservarion of a microsatellite in the Wilms Tumpour 标记定位了影响猪血常规的 QTL 发现这些 QTL 集中在 1 WT gene mapping in sheep and caitle[j]. Cylogenet 号染色体 cM 区域 [12] Cell Genet, 1995,(1): 构建遗传图谱 [2] 管 峰. 微 卫 星 的 构 成 及 其 检 测 技 术 [J]. 生 物 学 杂 志, 生物体基因功能的表达及调控是受基因组本身的结构 即基因组 DNA 中碱基顺序组成和指导的 而构建基因图谱 是了解基因组的组成 结构以及性状控制的分子基础的基本 方法 对于育种来说 构建基因图谱的意义在于可详细了解 控制有价值的数量性状或抗病性状的位点组成和表达调控机 制 通过对这些表达调控机制的了解便于操纵这些基因 采 用标记辅助选择或基因型选择法改良畜群 借助已建立的基 因图谱鉴定和克隆影响经济的 QTL 也可以研究不同动物种 间基因型及进化关系等 Zhao 等 [13] 为了寻找猪兰尼定受体 基因区域更多的微卫星标记 采用显微分割的方法在 6 号染 色体上又发现和定位了 22 个微卫星标记 Groenen 等 2,(2):1-3,13. [3] 何平. 真核生物中的微卫星及其应用 [J]. 遗传, 1998():27. [] 孙 伟. 微 卫 星 DNA 的 研 究 与 应 用 [J]. 黑 龙 江 畜 牧 兽 医, 21(3):1-11. [5] 唐辉. 从数量性状基因座作图到标记辅助选择 [J]. 中国畜牧杂 志,23,39(2):-5. [6] 宋九洲, 张沅. 分子遗传标记和数量性状位点 (QTL) 间的连 锁分析 [J]. 农业生物技术学报, 199,(2):17-2. [7] Mattapallil M J. Analysis of conserved microsatillite 从 sequences suggests closer relationship between water 猪的基因文库中分离了 3 个微卫星克隆 其中 1 个可作为 buffato Bubalis and sheep Ovis aries[j]. DNA Cell Bi-ol, 微卫星标记 通过与其他 365 个微卫星位点的连锁分析 将 1999,18(6): [1] 这 1 个微卫星位点分别定位在了不同的染色体上 其中 1 个 微卫星位点与 X 染色体连锁 利用微卫星构建遗传连锁图谱 是以微卫星位点为基础 在基因组中每隔一定距离找一个多 态的微卫星标记 当这些标记达到足够多后 就可借助微卫 [8] 龚明川. 肉兔微卫星标记遗传多样性分析及其与体重性状的相 关研究 [D] 四川 : 四川农业大学, 2. [9] 马洪雨, 岳水生 微卫星 DNA 分子标记及其在动物遗传育种 中的应用 [J]. 畜牧兽医杂志, 2, (5):16-19 星标记找到基因组中的功能基因及 QTL 选定 QTL 在图谱 [1] Hally M R, et al. The International SNP Map Working 上的位置与标记之间的遗传距离和 QTL 的表型效应 并对其 Group.A map of human genome Sequence variation. 进行操作和利用 containing1.2millionsingle, Nucleotide polymorphisms[j]. 3.3 鉴定个体亲缘关系或品系间的遗传结构 Nature. 21,(9): 由于微卫星位点具有高度的个体专一性和多态性 已经 [11] 曾 昭 顺, 杨 仕 柳, 施 启 顺, 等. 家 猪 Atrn 基 因 与 微 卫 代替了人们最早使用的血型 血液蛋白多态性和血缘鉴定控 星 标 记 遗 传 连 锁 及 对 经 济 性 状 效 应 的 分 析 [J]. 遗 传 学 报, 制 这就使它在亲缘关系分析和品种遗传纯度分析上变得十 2,31(12): 分重要 23 年 张桂香等利用 26 个微卫星标记对我国 56 [12] 张 陈 华, 蔡 绍 倩, 巩 元 芳, 等 猪 1 号 染 色 体 上 影 响 血 个地方猪品种和 3 个引进猪种的遗传结构进行了分析 研究 常 规 指 标 的 数 量 性 状 基 因 座 QTL 定 位 [J]. 中 国 农 业 科 发现 中国 56 个地方猪品种在 26 个微卫星座位上的等位基 学,211,(2): 因数非常丰富 变异范围远高于引入猪种 其中以广西东兰 [13] Zhao F, Ambady S, Ponce de leon F A, et al. 猪的遗传变异最大 PIC 达到了.86 是所研究猪种中最 Microsatellite markers from a microdissected swine 高的 这一结果说明我国地方猪品种遗传变异范围远大于引 chromosome 6 geno-mic library[j]. Anim Gene, 入品种 育种潜力大 姚绍宽等利用微卫星标记对我国 7 个 1999,(3): 小型猪品种和杜洛克 长白 大白 3 个外来品种进行了亲缘 [1] Groenen M A M, Ruyter D, Verstege E J M, et al. 关系分析 结果表明 这些猪可以分为 3 类 久仰香猪 剑 Development and mapping of ten porcine 白香猪 从江香猪和环江香猪亲缘关系较近 黑香猪 五指 markers[j]. Anim Genet,1995,(26): microsatellite 117

122 胰岛素对母猪发情的影响 丁 兰1 张 勇1* 王 艳2 1.沈阳农业大学畜牧兽医学院 辽宁 沈阳 凌源禾丰牧业有限责任公司 辽宁 凌源 1225 摘 要 胰岛素在体内具有重要生理作用 不仅可以调节糖代谢 还可以对母猪发情起到一定作用 胰岛素可 以通过促进促性腺激素分泌直接影响发情 还可以通过影响其他激素间接影响发情 并且胰岛素还对卵泡 子宫等生殖器官具有一定作用 关键词 胰岛素 发情 生殖器官 影响 1 胰岛素分泌与调控 通过垂体细胞外培养试验揭示了胰岛素可能对垂体前叶具 胰岛素是由胰腺中具有内分泌功能的胰岛 B 细胞分泌 有直接作用 刺激 FSH 和 LH 的分泌 的一种小分子蛋白质 含有 51 个氨基酸 由 A 链和 B 链组成 2.2 胰岛素对母猪发情的间接影响 其间靠 2 个二硫键平行连接 如果二硫键被打开 则失去活 胰岛素样生长因子又称为生长介素 是由 7 个氨基酸 性 胰岛 B 细胞首先合成一个大分子的前胰岛素原 再加 组成的单链多肽 由生长激素刺激产生 是一类与胰岛素 工成胰岛素原 在分泌颗粒中再经酶的作用水解成为胰岛素 有着高度同源性的物质 并且 IGF-1 受体与胰岛素受体有 以及游离的连接肽 连接肽无胰岛素活性 约 6% 的同源性 IGF-1 和胰岛素与彼此受体间存在交叉 在影响胰岛素分泌的诸多因素中 血糖浓度是最重要 性结合 体外试验及临床试验证实 胰岛素水平的升高可以 的调节因素 B 细胞对胞外葡萄糖浓度的变化十分敏感 当 降低血浆及组织中胰岛素样生长因子结合蛋白的合成 从而 胞外葡萄糖浓度升高时 B 细胞通过膜上的葡萄糖转运体 导致 IGF-1 活性增加 胰岛素可促进肝脏产生 IGF-1 也 摄入葡萄糖 把其转变成 ATP 这样 ATP/ADP 的比值增 可刺激卵泡颗粒细胞合成 IGF-1 胰岛素样生长因子与母 大 ATP 敏感的钾通道 KATP 关闭 K 外流减少 细 猪生殖密切相关 几乎参与了其生殖过程的各个方面 在 胞去极化 结果导致电压依赖性钙离子通道开放 Ca 内流 小鼠胚胎体外培养时 在培养液中加入外源性 IGF-1 可使 胞内 Ca 浓度升高 进而触发含胰岛素的囊泡释放胰岛素 胚泡发育加速 蛋白质合成增加 IGF-1 可独立或协同促 还有一些胃肠激素如胃泌素 胰泌素 胆囊收缩素 抑胃肽 性腺激素调节卵巢功能 其与 FSH 协同作用时 可显著 和胰高血糖素样多肽均有促进胰岛素分泌的作用 其中抑胃 提高 FSHR mrna 水平 并且 IGF-1 可增加颗粒细胞中 肽和胰高血糖素样多肽作用最强 生长激素 甲状腺激素 FSHR mrna 的表达 加强 FSH 对腺苷酸环化酶的刺激作 皮质醇等可通过升高血糖浓度间接引起胰岛素的分泌 用 提高颗粒细胞芳香化酶活性 促进 LHR 的表达 增加 2 LH 的浓度 胰岛素对母猪繁殖性能的调控 2.1 胰岛素对母猪发情的直接影响 母猪达到一定年龄时 由卵巢上的卵泡发育所引起的 增加胰岛素的摄入量 可提高血浆生长激素浓度 生长 激素与繁殖性能之间有密切联系 特别是对卵巢发育的影 受下丘脑 - 垂体 - 卵巢轴系调控的一种生殖生理现象称为 响 生长激素可促进早期卵泡发育 阻止卵泡闭锁 同时增 发情 母猪生长发育到一定阶段 其下丘脑对性腺类固醇激 强卵泡对促性腺激素的敏感性 有利于排卵 素的负反馈敏感性降低 使促性腺激素释放激素 GnRH 2.3 胰岛素对生殖器官的影响 分泌增加 同时 垂体和性腺对 GnRH 的敏感性增加 从 胰岛素可能会保持和促进排卵期之前卵巢上卵泡的 而发情 经证实 胰岛素及其受体存在于下丘脑正中隆起 发育能力 防止其退化和闭锁 但是对已经退化和闭锁 处和 GnRH 分泌神经元附近 下丘脑结合胰岛素区域参与 的卵泡无能为力 胰岛素通过减少卵巢上卵泡的闭锁和 GnRH 的释放 胰岛素可增强母猪 GnRH 的释放频率 胰 增加 可能发育到排卵阶段的卵泡数量来影响卵泡发育 岛素还可能会改变垂体前叶对 GnRH 的敏感性 Adashi 等 Matamoros 等 发 现 外 源 胰 岛 素 可 以 降 低 发 情 周 期 第 118

123 17 19 天中等卵泡的闭锁率 Meurer 等发现 患糖尿病 脂肪的日粮的哺乳母猪血浆胰岛素浓度低 尽管不同试验组 的小母猪停止胰岛素治疗后中等卵泡和大卵泡的闭锁率增 间的这种差异仅表现在进食后 并伴有黄体生成素的轻微减 加 血浆中高浓度的葡萄糖 胰岛素和 IGF-1 加强了卵巢 弱 但其研究结果证实了用脂肪替代淀粉做为哺乳母猪的能 对促性腺激素的反应 量来源对其后的繁殖性能不利的假说 因此 在给经产母猪 3 补充能量时 要给予淀粉为主要能量来源的日粮 Vanden 影响胰岛素分泌的因素 3.1 脂肪酸 Brand 等用 3 种不同能量来源的日粮饲喂初产母猪 研究发 长链脂肪酸 如亚油酸 通过与细胞膜上特异性受体结 现 葡萄糖能快速提高母猪血液葡萄糖浓度 淀粉次之 脂 合 对胰腺 B 细胞电压依赖性 K 电流及 Ca 电流产生影响 肪酸最慢 这说明能量来源可以显著提高母猪血液葡萄糖的 刺激胰岛素的分泌 浓度 且以葡萄糖来源最快 在体内 葡萄糖可直接由小肠 3.2 饲料来源 上皮细胞吸收 为机体活动提供能量 多余的葡萄糖则以糖 + 2+ 血浆胰岛素是反映繁殖营养状况的化学信号 不同能量 原的形式储存在肝脏 研究表明 卵泡体细胞和卵母细胞之 底物对血浆胰岛素水平的影响不同 因此 饲料的能量来 间的相互作用是通过间隙连接的 它对提供能量代谢底物以 源可能影响动物发情 故能量来源在日粮中有很重要的作 及卵母细胞的发育是必需的 重要的是 卵母体细胞首要的 用 在动物日粮内 葡萄糖 氨基酸和脂肪是组成日粮能量 内源能量来源是糖原 甘油三酯等 因此 糖原在卵母体细 的 3 个基本部分 血液中葡萄糖浓度升高能够刺激胰腺分泌 胞发育中有重要作用 胰岛素 从而促进机体吸收葡萄糖 降低血糖浓度 脂肪来 总结 源的日粮分解不能产生葡萄糖 故不会出现促胰岛素分泌作 综上所述 胰岛素是繁殖所必需的 胰岛素作为机体代 用的现象 因此 用脂肪代替碳水化合物作为哺乳母猪的能 谢体况的指标之一 对动物生殖系统有信号功能 可直接作 源物质可能对后期的繁殖性能不利 哺乳母猪断奶后 要 用于动物生殖轴上 血糖浓度是影响胰岛素分泌的最重要 提高饲喂水平 可补充母猪母乳期的体重损失 缩短母猪断 因素 因此 在饲粮中添加一定含量的葡萄糖 能迅速提 奶和发情的时间间隔 提高断奶后 1 d 内的发情比例 荷 高血糖浓度 从而增加胰岛素分泌 进而影响经产母猪的 兰 Wagebningen 农业大学 Kemp 用经产母猪验证了饲喂含 繁殖性能 119

124 猪的氧化应激及其遗传育种的研究进展 陈 伟 曾勇庆* 山东农业大学动物科技学院 山东 泰安 摘 要 氧化应激不仅降低猪体的抗氧化能力 免疫力和抗病力等 导致猪生产性能的下降 同时还可对宰后 猪肉品质形成不利影响 所以 通过提高抗氧化性能的营养措施和遗传改良策略 不仅可以减小因氧化应激 给养猪业造成损失 而且还可以改善商品猪的肉质 近年来 提高猪的抗应激性能和遗传选育抗病 抗氧化猪 成为遗传育种领域的研究热点之一 概述了氧化应激对养猪业的危害及养猪生产中抗氧化应激的策略 同时 还综述了猪主要抗氧化基因的研究进展 关键词 猪 氧化应激 抗氧化性能 遗传选育 随着我国畜牧业特别是现代养殖业集约化程度的提高 应激在商品猪生产中的危害已大量显现 氧化应激可负面影 然产生大量自由基 过量的自由基将超过抗氧化体系的还原 能力 使机体处于氧化应激状态 结果会导致机体损伤 响活体动物的免疫机能 抗病力和宰后肉质特性等 而猪体 在养猪生产实践中 诱导猪体产生氧化应激的因素很 内的抗氧化酶等可缓解或者抑制这种负面效应 提高商品猪 多 如饲粮中脂肪酸 尤其是多不饱和脂肪酸含量过高 营 的抗氧化能力 改善商品猪的肉质 从长远角度来看 采用 养性因素 如维生素 E 维生素 C 类胡萝卜素以及矿物元 现代分子遗传育种学的方法和技术 可以从遗传基础上改善 素硒 铜 锌或锰的缺乏等 环境因素 如高温 缺氧或化 和提高猪对氧化应激的抗性 因此 提高猪的抗应激性能和 学试剂等 都可导致猪机体氧自由基过量生成或细胞内抗氧 抗病 抗氧化性能的遗传改良便成为遗传育种领域的热点研 化防御系统受损而产生氧化应激 研究发现 外源性的和内 究课题之一 源性的氧化应激均会影响动物体内自由基平衡性动态 而 1 自由基与氧化应激 氧化应激对养猪业的危害主要包括两方面 即氧化应激对 1969 年 McCord 和 Fridovich 发现了清除超氧化物的 活体猪的危害和对宰后猪肉品质的影响 超 氧 化 物 歧 化 酶 superoxide dismutase, SOD 在这之 2.1 氧化应激对活体猪的危害 后 人们逐步认识到自由基 free radical 对生物体的重 在养猪生产中 氧化应激对猪体的危害主要表现为以 要性 自由基是细胞呼吸及正常代谢过程中产生的高活性分 下几方面 第一 抗氧化能力下降 李丽娟等 27 研 子 与动物生理病理过程密切相关的自由基主要是活性氧族 究发现氧化应激导致猪脾脏损伤 丙二醛 MDA 含量显 reactive oxygen species, ROS 其中 活性氧族自由基主 著上升 血浆中 SOD 谷胱甘肽过氧化物酶 glutathione 要包括超氧阴离子 superoxide anion radical, O 羟基 ˉ 2 peroxidase, GPX 过氧化氢酶的活性显著降低 [3] 第二 自由基 hydroxyl radical, OH 及过氧化氢 H2O2 等 生产性能降低 采食量降低 如袁施彬等 27 采用氧化 氧化应激 oxidative stress, OS 是指猪体自由基产 鱼油应激仔猪发现 应激猪平均日增重降低 8.16% 蛋白质 生过多或者机体抗氧化能力降低 造成氧化系统与抗氧化 表观消化率下降 21.91% 第三 免疫力下降 袁施彬等 28 系统平衡紊乱 从而导致潜在性损伤的病理过程 生理浓 研究发现氧化应激可使断奶仔猪红细胞参数 血小板参数 度的 ROS 可以维持正常细胞的功能 猪体内的抗氧化系 和淋巴细胞数量下降 而中性粒细胞数量上升 此外 氧化 统能及时清除以维持自由基的代谢平衡 然而过量的 ROS 应激导致猪体内淋巴细胞转化率以及免疫球蛋白 G IgG 可对细胞产生毒性 导致代谢障碍 生物大分子的损坏以 IgM 和 IgA 的含量降低 第四 生物大分子损伤 大量研 及氧化与抗氧化平衡状态的破坏 究表明 氧化应激导致细胞膜磷脂过氧化 蛋白质过氧化以 2 氧化应激对养猪业的危害 及 DNA 的氧化损伤 脂质 蛋白质和 DNA 的氧化会对生 当猪只遭受应激刺激或患病时 机体代谢出现异常而骤 物体造成不同程度的危害 从而影响机体的生长 发育 衰 12

125 老等过程 2.2 氧化应激对猪宰后肉质的影响 猪抗氧化应激的候选基因 动物在长期的进化过程中形成了一套完整的抗氧化体 动物体内存在着氧化和抗氧化系统 肌肉组织中的氧 系 猪体内的抗氧化系统包括非酶类抗氧化剂和酶类抗氧 化和抗氧化系统可以通过对肌肉细胞结构 肌内脂肪含量 化剂 非酶类抗氧化剂主要有维生素 E 维生素 C 谷胱 与代谢 风味前体物质的形成等产生重要影响 从而会直 甘肽等 酶类抗氧化剂主要有超氧化物歧化酶 SOD 过 接对肉质产生重要影响 Stahly 和 Williams 等研究发现 氧化氢酶 catalase, CAT 及谷胱甘肽过氧化物酶 GPX 氧化应激不仅会影响猪的生产性能 而且还将改变猪体的 等 与抗氧化性能有关的候选基因主要是猪体抗氧化系统 胴体组成 使蛋白质的沉积降低 从而影响宰后猪肉品质 中抗氧化酶类基因 要培育具有高抗氧化能力的品种 系 此外 国内外大量研究表明 不同猪种肌肉的氧化和 抗氧化能力差异显著 致使肉质各异 这除了受动物体的 生理状况 性别 饲料和环境因素的影响外 遗传因素的 首先要借助分子生物学技术鉴定或找到相关的候选基因.1 超氧化物歧化酶 SOD 基因家族 目前对于 SOD 的研究 已从抗氧化及抗衰老机制拓 作用最为关键 抗氧化性能强的肉品不仅肉色鲜红 肉品 展到化妆品 食品和医药等方面的应用研究 研究发现 质优良 具有良好的加工性能和较长的货架期 而且食用 根据 SOD 中心金属原子的不同将超氧化物歧化酶基因家 后对人体的健康有益 具有保健功能 如李华等 21 族 分 为 如 下 6 种 基 因 CuZnSOD MnSOD FeSOD 研究发现 地方猪种莱芜猪宰后在 贮存 1 5 d MnFeSOD FeZnSOD 和 NiSOD 基因等 肌肉的抗氧化性能始终显著高于引进品种大约克夏猪 而 徐 春 兰 等 27 克 隆 了 杜 长 大 猪 肝 脏 部 分 且 肌肉的抗氧化性能越强 其系水力越高 肉色越鲜艳 CuZnSOD 基 因 片 段 并 且 发 现 在 猪 不 同 的 生 长 阶 段 肉质越细嫩 CuZnSOD 基因在肝脏组织中的 mrna 表达水平呈现不 3 同的变化趋势 研究发现 1 2 kg 的仔猪由于受到断 养猪生产中的抗氧化应激策略 3.1 抗氧化的营养措施 现代养猪生产中 对抗氧化应激最常用的措施是在饲 奶应激 导致其 CuZnSOD 基因 mrna 表达量降低 而 随着仔猪年龄的增长 机体各组织器官功能不断完善 机 粮中添加矿物元素硒或维生素 E 等 研究发现 添加硒可 体抗氧化能力不断增强 表达量呈上升趋势 杜金芳等 促进抗氧化应激 提高仔猪生长和增强免疫功能 表现出 21 克 隆 得 到 了 猪 CuZnSOD 基 因 cdna 全 长 序 列 全期日增重提高 另外 饲粮添加硒还提高了肥育猪 GPx 包含完整的 CDS 结构 通过表达谱分析发现 CuZnSOD SOD 的活力 降低了血清和肌肉中丙二醛水平 显著提高 基因表达具有广谱性 说明 CuZnSOD 蛋白保护细胞免受 血清的总抗氧化能力 因此 在消除各种因素诱导的氧化应 自由基的侵害 相对心脏和肌肉 肾脏产生大量自由基 激中 抗氧化营养措施有助于预防或减轻氧化应激的威胁与 所以肾脏中 CuZnSOD 基因的表达量相对较高 同时还发 氧化损伤对机体的危害 现 CuZnSOD 基因的表达受到品种的影响 并且通过影 3.2 抗氧化的遗传改良策略 响 SOD 活性和肌肉抗氧化能力来影响猪肉品质 尽管饲粮中添加硒等可以起到抗氧化应激的功效 但.2 过氧化氢酶 CAT 基因 这并不能从根本上发生改变 近年来 随着现代分子生物 CAT 是一类广泛存在于动物 植物和微生物体内的 学技术 生化遗传技术以及分子遗传学技术的发展 猪的 末端氧化酶 是以过氧化氢为底物 通过催化一对电子 分子育种技术有了较快发展 同时 遗传育种学家对地方 的转移而最终将其分解为水和氧气 Goldberg 等按照结 猪种在抗病性 抗氧化性等方面的研究也取得了较大进展 构和序列水平的异同将过氧化氢酶划分为三类 即单功能 例如 一些研究发现 莱芜猪等地方猪种肌肉的抗氧化能 catalase 双功能 catalase 和锰 catalase 所以 目前已知 力显著高于大白猪 长白猪等国外引进猪种 甚至显著高 的过氧化氢酶基因有单功能 CAT 基因 双功能 CAT 基因 于以地方猪种为育种素材的杂交培育猪种 可见 我国地 和 MnCAT 基因 3 种 CAT 基因可被过氧化氢诱导表达 方猪种在抗氧化性等方面具有独特的资源优势 是培育高 目前 CAT 已广泛应用到牛奶的消毒中 在牛奶保存 抗氧化和高抗病性优质肉猪的较为理想遗传素材 抗氧化系统与生物体的免疫力密切相关 其各成分的 或奶酪制造前用过氧化氢对牛奶进行消毒 然后用过氧化氢 酶去除残余的过氧化氢 因为这一过程可在低温下进行 从 活性或含量的变化往往与某些疾病有关 因此 对于抗氧 而避免高温处理造成蛋白质变性 化系统中重要基因的研究正日益受到重视 现在 猪抗氧.3 谷胱甘肽过氧化物酶 GPXs 基因家族 化性能遗传育种工作主要集中在抗氧化候选基因的鉴定 GPXs 家族是一类重要的抗氧化酶类 根据亚细胞定 121

126 位 氨基酸序列不同以及结合底物的特异性 目前发现 GPX- 具有 GPX 家族共有的清除 ROS 的作用 抗氧化作 GPXs 至少有 种同工酶 在 GPXs 的活性中心都含有硒 用是最基本的功能 此外 GPX- 还有其他功能 如在细 代 半 胱 氨 酸 SeCys 所 以 GPXs 又 被 称 为 硒 谷 胱 甘 肽 胞凋亡调控中发挥着重要作用 同时 GPX- 作为精子的 过 氧 化 物 酶 Mills 1957 第 一 次 从 牛 的 红 细 胞 中 发 现 结构蛋白 与精子的发育和成熟密切相关等 了 GPX 的功能是防御红血球氧化而引起溶血 将其命名. 其他抗氧化基因 为谷胱甘肽过氧化物酶 现在把这种酶命名为 GPX-1 除了上述的几个主要抗氧化酶基因家族外 其他被 第 2 种 是 胃 肠 型 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 物 酶 gastrointestinal 研 究 的 抗 氧 化 基 因 还 有 谷 胱 甘 肽 还 原 酶 glutathione GPX, GPX-2 它与 GPX-1 有 65% 的氨基酸序列同源性 reductase 基因 Peroxiredoxin Prx 基因家族等 和 6% 的核酸序列同源性 第 3 种是血浆谷胱甘肽过氧化 Peroxiredoxin 蛋白家族是近年来发现的一类抗氧化 物酶 plasma GPX, GPX-3 它是一种糖蛋白与胞外功 酶系 其催化活性和蛋白序列与其他抗氧化剂完全不同 能相一致 GPX-3 在 GPX-1 发现多年以后才从肝脏和其 广泛存在于各种生物体内 作为近年来研究的热点 它在 他器官中分离出来的 第 种是磷脂氢谷胱甘肽过氧化物 清除活性氧族中具有重要作用 哺乳动物的 Peroxiredoxin 酶 phospholipid hydroperoxide GPX, GPX 家 族 包 括 6 个 成 员 即 Prx I II III IV V 和 VI 刘 年 Ursini 等从猪肝脏中分离获得并把它描述为 过氧化作 阳等 211 通过对猪 PRDX6 基因多态性的研究发现 用抑制蛋白 1985 年才纯化并确定为含硒的谷胱甘肽过氧 在该基因编码区第 外显子有 2 个潜在的 SNP 并推测这 化物酶 此外 Kühn 等认为精子细胞核谷胱甘肽过氧化 2 个位点很可能是影响猪肉质性状 尤其是肌肉嫩度 的 物酶 sperm nuclei GPX, GPX-5 是第 5 种含硒抗氧化酶 分子标记 克 隆 GPX- 显 示 它 是 理 论 分 子 质 量 大 约 19 ku 5 小结与展望 由 17 个 氨 基 酸 组 成 的 水 溶 性 蛋 白 与 GPX-1 有 在现代猪育种实践中 多采用分子生物技术对猪只进 3% % 的序列同源性 GPX- 基因全长由 7 个外显 行早期检测 这样可以采取相应措施减少应激所带来的不 子和 6 个内含子组成 3 非翻译区有 SeCys 插入序列 5 利影响 有利于提高猪只的生产性能 猪的氧化应激与其 非翻译区的激素应答元件可能与 GPX- 在精巢中的功能 健康状态 环境条件等密切相关 所以 养猪生产中提高 有关 Kelner 等利用染色体荧光原位杂交技术已将人类的 猪群的抗氧化性能 不能仅从遗传选育角度出发 还应考 GPX- 基因定位于 19 染色体 p13.3 处 在高等动物中 虑到饲养环境 猪舍条件 饲养管理 饲料配方和饲喂方 GPX- 已经被确定为具有多个转录和翻译起始位点的单拷 式等因素 随着猪基因组计划的顺利进行 猪的基因功能 贝基因 有些调控位点因物种而不同 如在猪的 GPX- 将会逐渐被揭示 这将会为猪生长发育规律 生殖机理 基因中 5 侧翼区不具有典型真核生物启动子的上游调 抗氧化性能以及抗病机理的揭示奠定基础 从而为猪的分 控 位 点 其 启 动 子 只 有 1 个 GATA1 GATA1 binding 子育种提供更多可用的基因 protein 元件 目前 尽管在猪抗氧化基因研究方面取得了一定进展 研究发现 GPX- 在不同组织中的表达差异较大 如 但是还不够深入 表现在已识别的抗氧化基因有限 基因 陈伟等 211 研究发现 GPX- 基因 mrna 在莱芜猪组 的结构与功能尚需深入研究等 但是 随着高新技术的迅 织中表达量差异变化趋势为 脑 心 肝 脾 > 肌肉 > 脊 猛发展 现代分子生物学技术在猪育种中的应用前景十分 髓 大肠 背膘 小肠 > 肺 在灵长类动物中 GPX- 在 广阔 将为我们提供一种遗传改良的新手段 预示着猪的 精巢中高丰度表达 而在肺 心脏和小脑中表达量非常低 抗病 抗氧化 抗应激育种的新时代正在到来 122

127 确立地方猪肉特色品牌的配套加工技术 张伟力 安徽农业大学动物科技学院 安徽 合肥 2336 由于品牌猪肉的主要原料来自中国地方猪种 而这种地 方猪种一直按中国传统模式加工 即半夜屠宰 清晨上市 顾客直接在热胴体上取肉 当天杀猪当天卖完是中国延续了 两千年的习俗 故杀猪现场可以露天 任风沙吹拂 烟熏火 燎 屠夫可以不戴口罩 不戴纱帽 夏则赤膊上阵 冬则油 污满身 脚下污水泥浆踏浪有声 这种传统屠宰方式加工的 胴体表面细菌污染严重而难以贮存 然而中国传统消费者是 在当天把热胴体上的肉下到锅中 细菌还未来得及增殖到高 峰阶段 中国的传统饮食文化掩盖了传统屠宰中的不卫生弊 端 时值 21 世纪 品牌猪肉是要经过排酸熟化在专卖店或 图1 超市冷柜中 以冷却肉形式售予顾客 货架保鲜 尽量接近安乐死等 期要求长达 5 7 d 这样本地猪的传统屠宰必须改造成现 北京黑猪国际 11 公斤级雪花梅肉 品牌猪肉必须有可追溯认证 市售品牌猪肉属可追 代与时俱进的先进屠宰硬件和技术 如宰前沐浴 无应激击 溯猪肉 traceable meat 具有合法的品牌注册证明 执照 昏 快速烫毛与火燎胴体表面 开膛劈半车间要求基本上是 及其公证 无菌操作 所有操刀手必须洗手 换装消毒后进入车间 剔 骨 切割 包装工序对无菌程度要求更严 排酸间的风速 温度 清洁卫生条件都极有讲究 只有如此 本地猪肉才能 5 必须由相对稳定的品种或配套系形成相当规模的批 量货源 足以满足专卖店和超市的常年需求 6 必须具有独特风味特长和稳定的品牌质量 在包装 成为规范的熟化好的品牌肉 品牌肉的包装也是一大学问 上注明主要营养成分含量和有关肉质参数 包装材料的选用要求无毒 透气 透光 可降解 美观等因素 2 切块质量评定是现代特色品牌肉质量评定管 理的必然趋势 中国传统的荷叶包装既环保 可降解 又美观 绿叶衬托红 肉 又芳香 荷叶天然香味 已有上千年历史 水浒传 现代冷却肉销售特点要求明码标价 按质论价 中国的 中鲁提辖拳打郑关西一回有生动描述 如能解决鲜荷叶的灭 肉市和发达国家的肉市一样 有一个从个体屠宰户到超市冷 菌保鲜工艺 荷叶衬里的小包装品牌肉将震憾国际肉市 柜的标准化产品的历史过程 这种变化是随着饲养专业化 1 品牌猪肉的基本新概念 屠宰集中化 检疫规范化的进程日益凸显 过去传统的个体 新世纪品牌猪肉有着全新的新时代概念 它是在系谱猪 屠宰户卖肉属于小作坊经营 不存在质量 标准化的问题 肉 pedigree pork 的传统概念基础上向规模化商业生产 屠户将半边胴体挂起 由顾客指定部位 挑肥拣瘦 屠户按 方向的拓展 品牌猪肉必需具备以下条件 顾客的意愿 现割现卖 故不少地方的百姓把买肉叫割肉 1 必须符合安全肉的所有规范 符合动物检疫条款 这种模式可以在宋朝的故事水浒传里的鲁提辖拳打镇关西一 无人畜共患的传染病病原微生物和寄生虫 无腐败变质现 文中找到 也可以在十八世纪欧洲风俗油画中见证 上半世 象 有政府授权的兽医官 veterinary official 发证盖章 纪上海肉市效法西方肉市较早将猪的半胴分为前肩 南方人 2 必须基本符合有机 绿色的素质要求 猪肉中不 称为夹心 即前肩肉去肩胛骨 前劈骨 大排 T 骨大排 得检出抗菌素药残 β 兴奋剂药残 重金属含量 铅 汞 即带骨大排 小排 五花肉 腿肉 后腿去骨盆 股骨 等 砷 铬等 不得超标 不得含有任何危害消费者健康的污染 大切块 而且各是各价 这是向小切块方向的进步 但还不 物 如二噁英 完善 例如前肩肉中部背最长肌与肩背肌肉交织处的质量最 3 提供品牌猪肉的生猪生前应享有一定程度动物福利 好 肌内脂肪高 剪切力小 羟脯氨酸含量高 此处切块与 不得囚禁于限喂栏 每头猪必须享有一定活动空间 不能 臂二头肌 臂三头肌 前肩下方 定为同等价位是定价的粗 受到体罚或者虐待 宰前运输不得超过 6 小时 屠宰手段应 糙或不合理 同理 后腿肉中股四头肌和臀中肌以及臀大肌 123

128 的切块质量优于股二头肌和半腱肌 其切块价位理应有所区 3.2 评定程序 别 欧美发达国家的养猪产业 屠宰厂家和大型超市已走过 如 同 胴 体 测 定 胴 体 开 剥 时 屠 宰 间 温 度 宜 控 了一个标准化的磨合阶段 屠宰厂家的分割车间会对现行各 制 在 8 由 热 胴 体 上 分 割 出 的 切 块 大 约 种品种或标准化杂交组合的胴体进行详细的切块分割 如 T 1 cm 1 cm 1 cm 应立即置于 冰箱中冷却 骨大排 通脊 里脊 小排 颈肉 肩肉 前臂肉 五花肉 待切块温度降至 间置于室内非直射自然光下即可用 带骨五花 胸骨肉 股四头肌与臀肌 股后肌群等 胴体不 于评定 评定室内忌用红 黄 兰等彩色窗帘 切块评定属 同部位的瘦肉标价不同 其中标价差异很大程度上取决于以 主观评定 要求评定者具有多年的肉质研究经验 切块评定 市场需求为基点的切块评定 由于发达国家屠宰厂相对集中 与客观肉质测定项目之间的对应关系列于表 1 根据冷柜货 如美国 6 万头猪的规模只有 3 家主要屠宰厂 荷兰 16 万 架期的需要 切块评定的作业时间可设为屠宰当日 宰后 头猪的规模也只有 3 家屠宰厂 因此 在切块的分割标准和评 2 h 宰后 8 h 宰后 72 h 等 成为一个评定系列 定标准方面较容易统一规范和执行 中国目前的屠宰厂还是千 3.3 切块取样部位 家万户型 屠宰工艺和硬件条件差异悬殊 分割技术尚不能到 切块取样部位取决于冷却肉销售市场的需要 其分割精 位 但小切块冷却肉在超市的雏形已建立 在京沪宁等大都市 细程度应能满足消费者的爱好和烹饪习惯 因此切块的分类 发展较快 基本做到了按品种和主要切块部位 前肩 后腿 方法和精细程度可以随地域饮食文化的不同而有所变化 有 大排 小排 五花 论价 由于中国地方猪的品种结构是全世 些基本切块是通用的 界最复杂的 因此 对各种地方猪及其杂交组合商品猪的切块 1 前肩切块 此切块包含背阔肌 眼肌胸段 半棘肌 评定将是未来 5 1 年肉猪产业链中必须解决的问题 和部分肩部肌群 此切块是大理石纹和肌内脂肪最丰富的切 3 块 以霜花状或雾状大理石纹和深红肉色为佳 此切块是亚 切块评定的实施 3.1 取材 洲人特别是韩国人的最爱 特定品种 或特定杂交组合 体重为 1 kg 或 11 kg 2 T 骨大排 是西式大餐中的首选 此切块包括一块 或该品种 或特定杂交组合 的最适屠宰体重 建议最小样 T 形椎骨 棘间肌和一片眼肌和适度背膘组成 要求棘间肌 本量为 6 头阉公和 6 头阉母以上 同品种同批次的肉切块 与眼肌间有适度肌间脂肪 眼肌切面圆润饱满 边界清晰 质量也会有一定程度的变异 作为规模化厂家 样本量以 大理石纹丰富 纹理细致 造型美观者为上品 三角形眼肌 头为宜 切面为下品 表 1 切块主观评定与客观评定的对应关系 切块性状 肉色 系水力 纹理质地 主观评定的正面特征 主观评定的负面特征 苍白青灰 PSE 肉 肉面有水样折光 紫红 还原型肌红蛋白 紫黑昏暗 (DFD 肉 ) 或 鲜 红 氧 合 肌 红 蛋 黄疸 白 有水晶般透明感 彩虹斑 褐色 变性肌红蛋白 肉面干爽 客观评定的对应测定项目及变异范围 参数类别 L* 值 (3-6) a* 值 (-1) b* 值 (-8) 饱和度 -2 肌红蛋白 以 Pigment 浓度表示为.5-1.2mg/g TBARS 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 物 酶 产 物 MDA=.1.nmol/mg prot SOD(2-3 u/mg prot) C C C C A B B 储存损失 -15% 肉面红色挂水 (RSE) 烹饪损失 1-3% 肉面白色挂水 (PSE) 拿破率 Napole yield=6-9% ph(5.5-7.) 1 大理石纹分值 -5 美制 -6 日制 大 理 石 纹 细 致 而 丰 富 大理石纹粗糙而稀松 2 肌内脂肪 -2% 呈霜花或云雾状 呈叶脉状 3 肌纤维直径 3-8 微米. 剪切力 2-8 牛顿 1.C 2.C 3.B.C 手感 有弹性 爽滑 无弹性 粘手 微生物学检测 菌落计数 B 气味 清香 略带苦腥 膻味 异味 尸胺 吲哚 痕量 B 优 劣 蛋白组学模板定性标记 - 总体印象 注 A 表示数值越高肉质越好, B 表示数值越低肉质越好, C 表示数值适中肉质较好 12 B B B A

129 3 眼肌全段无 T 骨切块 又叫通脊 即背最长肌 可 质差异显著 应置疑饲养工艺 特别是大面积发生肉色苍白 以是整条眼肌 约 2 g 也可以是节段切块小包装 其 松软应核查倒计时饲粮配方中硒 铁 铜 镁 维生素 E 分割方法取决于市场顾客的主观倾向 眼肌应带有完整筋膜 维生素 C 硫胺素 核黄素 叶酸的含量是否到位 特别是 和肌外膜 眼肌横断面上干爽而有弹性 大理石纹细而密而 维生素 E 对肉色的作用需要 2 mg/kg 以上浓度饲喂 2 d 且呈现剔透玲珑的水晶紫为上品 以上才能奏效 而维生素 C 和镁离子在宰前数日饲喂即能 小排 是从第 1 肋骨到第 1-16 肋骨连同肋间肌切下 生效 此外 异常肉色常与宰前饲料有关 如切块中有黄疸 剁成的小切块 要求骨细 浆 膜薄 肋间肌饱满 小肌束 现象 要追究宰前配方中有无变质鱼粉 蚕蛹 棉子粕等杂 间脂肪丰富 肌束膜薄如蝉翼 膜内映出深红或紫红束状肌 粕 纤维 此外 胸骨与胸部肌肉一起斩为切块后外观酷似小排 6 切块评定对地方猪屠宰工艺的反馈 但肉色较浅 该部分切块的骨块较粗大 虽瘦肉丰厚却不如 如切块有淤血或小静脉充血 渗出粘液 或肉色暗黑却 小排的肋间肌细嫩多汁 由于外观靓丽并脆骨含量 胸骨与 不干爽 可置疑待宰猪的动物福利水平 屠宰工艺中电击强 肋骨交接处 较高 也颇受市场青睐 故胸部切块可能根据 度 烫毛温度与时间 开膛剔骨的刀功水平 开膛劈半取下 市场需要或与小排等价 或独立论价 红白脏时切忌割破消化道后用水冲洗分割 从事切块的技工 5 五花肉 为三层脂肪和三层瘦肉一层皮组成七个层 务求刀法熟练 炉火纯青 要求分割小切块尽量做到一刀准 次 瘦肉红似火 脂肪白如玉 红白对仗分明 界线清晰 忌反复修边切割造成肉面发粘 纹理模糊 色泽暗淡 肉块挺立而有弹性者为上品 五花肉分布于腹部胴体中部含 7 切块评定的实施是地方猪肉产业质量评估体 系成熟的标志 腹内斜肌 腹外斜肌和腹直肌的切块有七层 靠近膁部缺腹 直肌的五花肉则为二肥 脂肪 二瘦 红肉 一皮 实际为 现代市场流通中 猪肉产业进入市场的大宗终端产品将 五层 故名五花肉 靠胸腔软肋部分的五花肉则多了软肋 以小切块冷却鲜肉的形式在冷柜中与消费者见面 消费者决 和残余隔肌 在原有的七个层次上多一片脆骨和一部分残余 策是否购买猪肉有两大因素 隔肌 是某些美食家的最爱 第一 猪肉切块的表观印象 即时因素 6 里脊 即腰大肌 为整条肌束 不能切块分割 是 第二 品牌效应 长期因素 即顾客买回去食用后对 胴体中肌纤维最细嫩 筋膜和间质最少的纯瘦肉 属胴体中 其食用质量的认可 这两个因素都取决于切块给顾客带来的 之精华 以红度 a 高 黄度 b 低 弹性强者为优 感受 是现代猪肉企业家老总日理万机中的首要因素 可起 7 股前肌群切块 以股四头肌为主 筋膜少而肉面纹 理细致 鲜亮如水晶 殷红如玛瑙者为上品 8 股后肌群 以股二头肌为代表 此部肌纤维粗大 到牵一发而动全军的作用 切块制品是育种 饲养 管理 屠宰加工 HACCP 全程监控和全体员工敬业精神的总效应 一个精明的猪肉企业家会通过切块评定追踪出产业中的薄 筋膜老韧 是整个胴体瘦肉中最差的部分之一 另一部分是 弱环节 不断改善猪肉产品质量以保持产品竞争中的不败记 血脖 横切股二头肌可以清晰看到红肌与白肌两个层面泾 录 时下中国的猪肉产业正处在一个盲目无序向理性标准化 渭分明 以红肌多白肌少 肌纤维多筋膜少者为上品 除以 产业过渡的特殊历史时期 饲料加工的规范化标准化 品种 上切块以外 还有肘部和胫部切块 以趾深屈肌为主 此 的筛选和杂交配套的优化 屠宰硬件的改善和 HACCP 操 处肌肉随猪肘 蹄膀出售价格更优 故一般不做评定处理 作程序的逐步规范使猪肉切块形成稳定的品牌质量具有可 上述第 ) 6) 项可酌情省略 行性 这种可行性需要一个历史过程 在这个过程中 千家 切块评定对地方猪杂交育种的反馈 万户的屠宰企业将通过淘汰重组合并形成几个拿定九州天 在切块评定中 如果发现来源于同一猪场或种源的不同 下的品牌巨头 无疑这些品牌巨头必然是最早悟出切块评定 批次的猪频频发生 PSE DFD 肉 应首先置疑父母代种猪 和质量控制体制的精英 这是一条被发达国家验证如铁的客 中可能携带氟烷基因 Hn 酸肉基因 RNˉ 等不良因 观规律 在经济和科技飞速发展的中国 我们欣喜地看到一 子 进而追踪到祖代猪中携带上述因子的个体 现代的实验 批优质肉精英企业的发展壮大 北京黑猪黑六品牌的火爆 室 PCR 分子生物学手段已足以解决对上述因子的鉴定 所 山东莱芜猪极品肉特种小包装的市场化 安徽圩猪肉和皖南 以通过猪肉生产和评定系统发现 追踪进而剔除种群中的劣 黑猪肉的专卖 江西玉山猪的品牌猪饮食文化理念先导工 质肉因子是一项可行的技术 作 厦门园香杂交黑猪肉的规模化 2 头黑母猪生产群 5 切块评定对地方猪饲养工艺的反馈 辽宁新丹系黑猪的生产开发 江苏的苏太猪肉专卖等企业行 在切块评定中如果发现同种源不同批次不同季节的肉 为已折射出中国品牌猪肉的春天 125

130 制订地方猪种保种方案应注意的问题 王林云 南京农业大学 江苏 1 南京 2195 我国地方猪种的现状 的要求 母猪在 1 头以上 公猪 12 头以上 三代之内没 根据 年农业部组织的全国第 2 次大规模的 有血缘关系的家系数不少于 6 个 畜禽遗传资源的调查 我国目前有猪地方品种资源 76 个 有 采用活体保种技术是目前也是今后相当长时间内的重 的品种内还包含有多个类群 如淮猪 两广小花猪 华中两 要保种方式 每个猪品种的主要性状 外形毛色 公 母 头乌 乌金猪 湖川山地猪 藏猪等 是世界上地方猪品 猪成年体重 产仔数 肥育期日增重 屠宰率 胴体瘦肉率 种资源最多的国家 6-7 肋背膘厚 肌内脂肪含量等 保持现有性状基本不变 我国地方猪品种资源有很多特色 如繁殖性能好 肉质 优良 对当地环境适应性强 能较多的利用青粗饲料 抗病 基因库 精子库 细胞库 冷冻胚胎等保种技术 尚在实验 室阶段 要有一定条件 人才 技术 设备 经费 等 力比外国猪种强等 从这次调查结果看 我国地方猪品种数量已大大减少 要根据保种场自身的条件去搞保种方案 种猪场自己去 搞 冷冻精液 基因库 细胞库 冷冻胚胎 分子 有的公猪已找不到 2 世纪 8 年代之后 我国的地方猪种 克隆 转基因 等是没有人才 技术和设备条件的 也是 数量急剧减少 如分布于江苏 浙江 上海太湖流域的太 不现实的 这些研究性的保种技术和试验应让高等院校和研 湖猪 198 年统计 产区共有太湖种猪 6 多万头 而 26 究单位去搞或和他们结合起来搞 年调查 只有 5 万头左右 分布于东北地区的民猪 1982 要采用多点保种 保种场和保护区相结合的保种方式 年统计 有母猪 2 万头 26 年调查 只有 1 余头 分 有条件的核心保种场除已有保种群外 还要建立一个备份 布于珠江三角洲的大花白猪 1979 年统计有母猪约 万 群 鼓励一个地方猪种建立多个保种场 或建立不同类群的 头 26 年调查只有 2 万余头 分布于我国西北的八眉猪 保种场 保护区也要多个 多点分散 防止因天灾人祸使地 1981 年统计有 7 万余头 26 年调查只有 1 7 余头 分 方猪种全群覆灭 多个保种场和多个保护区可使不同群体 布于浙江的金华猪 198 年时有母猪 6.7 万头 26 年调 或类群 之间产生一定差异 可以交换血统 有利于防止 查时只有 1 万头 有的猪种或类群甚至接近濒危 没有公猪 血统过近而被迫近交 也有利于该猪种的发展 或接近消亡 在地方猪品种中 有 个品种公猪在 5 头以下 3 其中 2 个品种公猪只有 3 头 有的猪品种在 2 年我国政府向 FAO 提交的 中国 制定保种指标的项目和依据 制订一个地方猪种的保种指标时 要注明保种期限和条 件 如 保种期限为 年 产仔数要注明初产或 畜禽遗状资源状况 中国地方猪品种名录 中出现过 但在 经产 日增重要注明体重阶段 胴体性状要注明宰前体重 这次调查时已找不到或未被发现 如福建的福州黑猪 平潭 公 母 猪体重要成年 2 个月龄以上 等 黑猪 浙江的虹桥猪 潘郎猪 雅阳猪 北港猪 龙游乌猪 指标只要写主要的 项目不要多而细 越多越细 越不 甘肃的河西猪 河北的深州猪 山东的沂蒙黑猪 江苏的横 好检查 自己给自己带来不必要的麻烦 如成年猪的生长只 泾猪 辽宁的新金猪 辽 吉 黑三省的东北花猪 山西的 要体重和体长 不要胸围 体高 对地方猪种 一般不要 太原花猪 辽宁黑猪 黑龙江的黑花猪 浙江的温州白猪 月或 6 月龄的生长速度 屠宰性状只要屠宰率 瘦肉率 6-7 河南的泛农花猪等 肋背膘厚 不要眼肌面积 后腿比 肌肉水分 蛋白质 肌 2 保种原则 纤维 等 有些指标在验收报告上可写上 但保种方案上不 由于目前多数地方猪种的群体的数量已不多 因此 地 一定写上 方猪品种总的保种原则是扩大群体 增加血统 保持现有性 状不提高也不降低 首先要增加公猪数和公猪的血统数 根据 畜禽遗传资 制订保种指标要以现有性状为基础 最好是近 3 年的平 均数 没有近 3 年的平均数时 也要用最近测定的数字 不 要凭空想象 在保种指标后面要注明现有性状和测定时间 源保种场保护区和基因库管理办法 起实行 指标不要与近年来测定的数字相差太大 如有一个地方猪 的要求 作为一个国家级遗传资源保种场 单品种基础猪群 种的肥育期日增重选育指标为 27 g 而该猪种 1978 年时 126

131 测定就有 1 g 有一个猪种的保种指标的瘦肉率为 5% 时 则可引入某一地方猪种 也可引入外国猪的血统 但最 这么高的瘦肉率 在我国地方猪种中是没有的 说明它混入 好还是要保留一部分纯种地方猪群 了外血 与外种猪杂交了 1 可否选育提高某些性状 保种指标不要太精细 一般可不用小数点 如 某地方 可否将地方猪种的某些性状改进或提高 这是许多人 猪种经产母猪窝产总仔数 12 头左右 该场 28 年测定 平 关心的问题 如地方猪种的肉质好 但瘦肉率较低 能否通 均 头 不要写 头 6-7 肋背膘厚 33 mm 左右 该 过本品种选育提高其瘦肉率 应该说是可以的 从国外的经 场 2 年测定 平均 33.6 mm 不要写 33.6 mm 验来看 杜洛克猪 波中猪 巴克夏猪等都是通过本品种选 交配方式 育从脂肪型变为瘦肉型的 选育的方法是①杂交 ②分离 由于保种目标是保持现有性能水平 所以 一般采用随 ③性能测定 ④选留符合目标的个体 但时间较长 1 15 机交配 或把公 母 猪分为 A B C D E F 等几组 年 经费要有保证 车轮式交配 尽量避免近交 有的人认为 我场的猪品种有 11 耐近交的特性 不怕近交 实际上是它没有进行连续几代近 11.1 优质肉开发 交 如果真的连续几代近交 它还是要退化的 5 地方猪种某些性状的研究和开发利用 由于地方猪的生长期长 一般在 1 月龄后 (3 d 以上 ) 世代间隔 肌内脂肪含量较高 某些猪种的不饱和脂肪酸较多 可作为 要延长世代间隔 采用交叉世代间隔 不要学外种猪或 优质猪肉生产 一头 8 kg 肉猪 产肉 35 kg 计 每千克 培育新品种时 用一年一个世代的办法 不搞群体继代选育 8 元 产值 元 利润在 元 公猪可 3 年 1 个世代 母猪 5 年 1 个世代 主要是要开发市场 要有专卖店 要有品牌 要深加工 6 留种方法 合理的包装 等 根据群体平均数来留种 不是留最好的 也不是留最差 11.2 改良外国猪种 的 这样才能保持原有性状不变 一般不必搞选择指数 不 在外国猪中引入一定比例的地方猪血统 在 12.5% 以 搞性能测定 不要用外国猪的选留方法来养地方猪 下 可以改善外国猪的繁殖 肉质 适应性 抗病力 耐 7 饲养条件 粗饲等性能 在国内外均有很多例子 如近年进口的法国 尽量采用原有的在群众中的饲养条件 多用青粗饲料 大白猪 丹麦长白猪 等 能量 蛋白质水平不要太高 在猪场内或猪场周边要多种牧 草和青饲料 如山芋 杂交狼尾草 黑麦草 三叶草等 提 11.3 医学研究 治疗人的糖尿病 糖尿病是由于胰岛 B 细胞损伤 萎缩后 胰岛素分泌 倡地面平养 不要搞限位栏 高架床饲养 不要用养外国猪 不足 全球有上亿人患糖尿病 可否将猪的胰岛细胞分离后 的方法来养地方猪 有条件的地方要放牧 让后备猪群养 移植到人身上 来治疗人的糖尿病 这是很值得研究的课 通过争斗增强体质 题 至今已有 2 个医院试验成功的报道 8 种猪场的档案记录 做好档案记录是地方猪种保种方案的重要部分 种猪的 档案记录主要有 ①系谱记录 ②配种记录 必须 ③母 猪生产哺乳记录 必须 ④屠宰测定记录 必须 ⑤肉质 据 中国医学论坛报 1993 年 11 月 18 日报道 同济 大学附属医院 将猪的胰岛细胞分离后 注射到人的肌肉里 病人 3 d 后出院 据 扬 子 晚 报 25 年 1 月 2 日 报 道 湖 南 中 南 分析记录 ⑥猪舍饲料消耗 ⑦防疫记录 ⑧疫病诊疗记录 大学湘雅三院将沙子岭猪的胰岛细胞通过股动脉注射到病 等 记录必须是原始记录 按照统一的表格 最好用 Excel 人的肝动脉 治疗人的糖尿病成功 最近 又有材料报 电子表格, 用手写 不要重抄一遍 也不要改为电脑输入 道 中南大学湘雅三院王维教授团队从 25 年至 21 年 后再打印 断奶时必须个体称重 不要以窝称重 已 做 了 22 例 成 功 21 例 据 研 究 报 道 沙 子 岭 猪 群 有 9 保种群体是否可引入外血 93.5% 个体缺失 env-c 基因 有利于异种移植成功 它的 地方猪种的保种群体一般不能引入外血 但在群体内血 白细胞中 SLA-DRA 和 SLA-DRB 基因与人类的 SLA- 统太近 公猪的血统数太少时 可以从保护区内引入母猪或 DRA 和 SLA-DRB 基因核苷酸序列的同源性均达到 83% 公猪 也可引入同品种内的其他类群的公猪或母猪的血统 编码氨基酸序列的同源性分别达到 83% 和 79% 但目前要 进行引入杂交 如要改进某一项性状 培育新的品系或类群 应用于临床治疗 还要做更多的试验 还有很长的时间 127

132 大白母猪用于纯繁和杂交在产仔数上的差异 喻传洲 (华中农业大学,湖北 1 材料与方法 武汉 37 表 1 大白母猪用于纯繁和杂交时总产仔数差异显著性检验 作者分析了河南豫鸣公司种猪场 21 年至 29 年期间 长白 大白窝总产 大白 大白窝总产 仔数 仔数 的繁殖记录资料 对大白母猪用于纯繁以及与长白公猪杂交 项目 生产二元 父母代 时的窝总产仔数和窝活产仔数进行了差 平均窝总产仔数 异显著性分析 即 t 检验 分析方法是采用 office 23 年版 方差 软件中的电子表中统计软件 在对被检测的 2 组产仔数数据 样本数 的方差同质性验证后 分别对 2 组的产仔数进行双样本等方 df 916 t值 P (T<=t ) 双尾.29 差的 t 检验 2 结果与分析 如表 1 所示 和长白公猪杂交的大白母猪的窝总产仔 数达到 1.7 头 而大白纯繁的窝总产仔数为 1.51 头 表 2 大白母猪用于纯繁和杂交时窝活产仔数差异显著性检验 前者比后者多.23 头 t 检验显示 P.5, 两者差异 达到显著水平 项目 长白 大白窝活产 大白 大白窝活产 仔数 仔数 平均窝活仔数 / 头 产 仔 数 达 9.6 而 大 白 纯 繁 的 窝 活 产 仔 数 为 方差 前 者 比 后 者 多. 3 5 头 t 检 验 显 示 P. 5,2 组 样本数 / 头 如 表 2 所 示 与 长 白 公 猪 杂 交 的 大 白 母 猪 的 窝 活 活产仔数差异远远超出极显著水平 3 讨论 在以往母猪产仔数的杂种优势的研究中 父母代二元 df 916 t值 P (T<=t ) 双尾.9 包括长大和大长 杂种母猪本身在窝总产仔数和窝活产仔 数方面比纯繁母猪表现出杂种优势的现象常有报道 但用于 纯繁和用于杂交时的母猪在产仔数方面的差异却未见报道 二是环境的影响 本场用于杂交和纯繁的母猪是随机混 合饲养的 饲料和环境不会造成系统误差 本文通过对大样本的现场资料的分析表明 大白母猪用于纯 三是公猪的差异影响 在群公猪对母猪的纯繁和杂交的 繁和杂交时 无论是窝总产仔数还是窝活产仔数都显示出显 使用中基本上是均衡的 尽管纯繁母猪数量相对杂交的母猪 著或极显著差异 大白母猪在与长白猪杂交中窝总产仔数 数量较少 但为了不轻易丢失血统 在群公猪在纯繁中也会 显著差异 是否是因为 异品种精子与同品种精子相比具有 较均衡使用 用于杂交的母猪群体大 公猪的使用就更为均 更强的授精能力 的原因所致尚有待更多的研究证明 根据 衡 因此 用于纯繁和杂交母猪产仔数的差异因公猪配种不 两者在窝活产仔数方面的极显著差异 是否能得出 杂合子 均衡所致的可能性很小 胚胎比纯合子胚胎有更强的生活力 的结论也有待进一步研 究证明 作者认为这种解释在科学上符合杂种优势的机理 本研究选取的数据是真实的 采用的统计方法是科学 的 本文结论可排除下列因素的影响 一是样本含量的影响 本研究分析了长达 9 年的累计资 料 样本数超千近万 这也是在统计学上 2 组差异达到显著 的基础 128

133 猪人工授精技术的优点 影响因素 及提高措施 杨 群1 韦启鹏1 周泉勇1 邹志恒1 唐艳强1 熊兴华2 (1.江西省农科院畜牧兽医研究所 南昌 中牧股份江西生物药厂 南昌 3366 摘 要 猪人工授精技术(AI)在大部分规模养殖场和养殖农户中已逐步被接受和推广应用 并且大部分效果明 显 具有提高优良公猪的利用率 减少疫病传播风险 降低猪场成本等优点 但是 此项技术在生产中的应用 也受到各种人为因素的影响 诸如公猪精液的原因 母猪的自身原因等 因此 结合生产实践详细阐述了AI的 影响因素及相应的对策措施 关键词 猪人工授精 优点 影响因素 提高措施 猪的人工授精技术 (AI) 是现代国内外养猪业中一项先 1. 供精灵活及时 有利于提高配种质量 进的生猪繁殖技术 它是利用器具或徒手 人工采集公猪精 采用 AI 可以有效地克服种公猪配种运输和种公猪不足 液 经过试验室检查 稀释处理和保存 再输入发情母猪子 地区母猪的配种问题 且公猪精液经过处理后能保存一定时 宫内的一种辅助配种技术 这一技术是以种猪的培育和商品 间 可随时供发情母猪输精配种 特别是通过显微镜对精子 猪的生产为目的 具有操作简单 效果显著等优点 是科学 质量的检查 保证公猪精液质量 同时可以运用重复输精和 养猪 提高养猪生产力的重要手段 据统计 目前国内养 混合输精等繁殖技术 这样就大大提高了母猪的受胎率和产 猪采用 AI 的比率 在大中型种猪场约为 8% 9% 小型 仔数 种猪场约为 5% 6% 农村散养户约为 % 5% 可 1.5 减少公猪饲养量 降低猪场生产成本 [1] [2] 以说 猪的人工授精技术在我国养猪生产中的应用十分普遍 1 人工授精的优点 1.1 提高优良公猪的利用率 AI 有利于综合效益的提高 人工授精和自然交配相比 饲养公猪数量相对减少 在自然交配情况下 1 头公猪只能 负担 2 25 头母猪的配种任务 而在人工授精情况下可以 采用 AI 能够扩大良种覆盖率 有利于品种改良 AI 是 负担 15 2 头母猪的配种任务 大大提高了种公猪的配 加速猪种改良的最有效手段 通过人工授精技术 可将优良 种效率 吴纯柱报道 [3] 以 1 头母猪的猪群计算 采用本 公猪的优质基因迅速推广 将劣质公猪淘汰 留优汰劣 从 交配种方式 平均每头母猪年分摊公猪费用为 元 而促进品种的更新和商品猪群质量及其整齐度的提升 而采用 AI 时 平均每头母猪年分摊公猪费用为 元 1.2 优良公猪的利用不受时间和距离的限制 人工授精比本交费用降低 32.8% 有效地节省了人工 饲 AI 的推广应用能克服时间和区域的差异 只要母猪发 料 栏舍及资金 并且 AI 的效果也丝毫不亚于本交 陈国 情稳定 就可以克服因种公猪体重 体形过大或母猪生殖道 富等 [] 对 328 头 l 3 胎的大白母猪实施了人工授精 (2 次 异常和公母猪的偏好造成的配种困难 根据需要进行适时配 3 次 ) 和自然交配 (3 次 ) 比较了 2 种配种方法和输精方式 种 从而有利于优质种猪的利用和杂种优势的充分发挥 对母猪受胎率和产仔数的影响 结果表明 2 种配种方法和 1.3 减少公猪疫病传播和引种疫病风险 输精方式对 3 个胎次母猪的受胎率和窝均产仔数影响均不显 利用 AI 可以有效地减少接触性传染病的传播 特别是 著 (P >.5) 说明人工授精可以取代本交在规模化猪场推 生殖器官疾病的传播 进行人工授精的公母猪 一般都是经 广应用 并且在规模化猪场实施 2 次人工授精也是可行的 过抽血检查为健康的猪只 只要严格按照人工授精操作规程 因此 猪人工授精技术是发展养猪生产提高猪场经济效益最 进行配种 尽量减少采精和精液处理过程中的污染 就可以 有效的方法 防控疫病的传播 达到提高母猪的受胎率 产仔数和利用率 2 的目的 但部分通过精液传播的疾病可通过人工授精传染 因此 应定期对公猪进行严格的疾病检测 严禁带病采精 生猪人工授精的影响因素 猪的人工授精技术 (AI) 虽然是一项比较成熟的技术 在大部分规模养殖场和养殖农户中已逐步被接受和推广应 129

134 用 并且取得了不错的效果 但是在实践中 由于种公猪 母猪以及配种操作不当等原因 导致人工授精受胎率得不到 观察发情 有的配种员只是观察母猪阴户的变化 有的在母猪出现 提高 这主要是与一些影响 AI 的因素有很大关系 总结起来 站立反应时即开始输精 有的差不多在发情结束时才观察 有以下方面 到 这些做法都会影响母猪的受胎率和产仔数 2.1 种公猪精液原因 精液品质问题 事先准备 输精前 如果不对母猪外阴进行清洗 消毒 很容易通 一般情况下 当精液中死精率超过 2 或活力低于.6 过输精管将细菌或病毒带入母猪阴道或子宫 引起母猪子宫 时 母猪的受胎率和产仔数就会受到影响 在生产实践中 炎等疾病 从而影响人工授精效果 因此 每次输精前要先 有的精液质量达不到要求 如有的精子密度不够 精子活 清洗母猪外阴 然后用经消毒液浸泡后晾干的毛巾擦拭干净 力达不到.6 有的精液酸碱度大于 8 或小于 6 等 主要 输精方法 原因有 3 个方面 一是稀释液的质量问题 二是种公猪采 插入输精管时 注意是否插入了尿道 要斜向上 5 精过频 有的公猪一天采一次或多次 三是种公猪营养水 左右旋转插入 不能硬插 以免损伤母猪阴道 并且在输精 平达不到要求 [5] 管头部事先涂上润滑剂 以利于插入 根据母猪体长 一般 精液在保存期内受损老化或在在运输途中受损 插入 3 cm 左右就到了子宫颈口 往回拉有一定阻力时就可 精液采集稀释后都要分装放入恒温冰箱中冷贮待用 由 以进行输精 输精时要抚摸母猪外阴或下腹部乳房 以增强 于冷贮期间温度不恒定或保存时间过长都会造成精液在冷 母猪的兴奋性 提高人工授精效果 贮期间受损老化降低精液质量 受损老化的精液输给母猪也 2.3. 导致受胎率和产仔率下降 精液从冷贮室取出到输精地点若 关系 路程较远 在运输途中没有采取有效防护措施 精液受到外 输精时间与母猪情期受胎率和产仔数有很大 据统计 输精时间在 3 min 以内的母猪与 5 min 以上 界冷 热应激和激烈震动都会受损降低活力 影响母猪受胎率 的母猪相比较 前者的受胎率和产仔数远远低于后者 且 2.2 母猪自身的原因 母猪患有疾病 差异显著 有的配种员为了赶时间 1 头母猪 2 3 min 便 输完了精 也没注意是否有倒流现象 结果返情的多 产 目前养猪生产中许多母猪患有可见性或隐性子官炎 无 仔数少 因此 母猪配种时输精时间应控制在 5 min 以上 论怎样输精都不会受胎 有的母猪患有猪瘟 乙型脑炎 巴 但也不要太长 以免影响工作的正常进行 氏杆菌病等 输精后很容易返情 即使受胎 也容易造成胚 配种方式 胎早期死亡而导致母猪产仔数少 有的母猪输卵管堵塞 输 在人工授精技术不太成熟时 配种方式以 1 次本交 1 次 精后也不会有什么效果 因此 在母猪本身有某些疾病发生 人工授精为最好 除非纯繁时全部用人工授精 生产杂交猪 时 人工授精的效果就差 影响母猪受胎 也应以 1 次本交 1 次人工授精 以充分利用杂交优势的影响 [6] 母猪体况较差 有的养殖户母猪哺乳或其他原因导致太肥或太瘦 发情 输精后母猪姿势 输完精液的母猪如果马上卧下 精液容易倒流 影响人 表现不明显 输精配种后也返情 有的母猪日粮中部分营养 工授精效果 因此 输完精后 拍打一下母猪臀部 让它运动 物质缺乏 造成胚胎早期死亡 导致母猪经常返情或产仔数 不要立即躺卧下去 减少 母猪品种的影响 配种员差异 技术水平高的配种员 由于经验丰富 观察母猪发情 在实践中 一般认为 我国的地方品种猪如玉山黑猪 输精等工作比技术水平低的做得好 所以经其配种的母猪 乐平花猪 太湖猪等 往往发情明显 配种时间容易掌握 受胎率和产仔数均高 因此 一个猪场母猪繁殖性能的好 而外来品种如长白 大约克 杜洛克等 则发情不十分明显 坏 除与品种 公猪等有很大关系外 还与配种员有重要的 配种时间不容易掌握 因此 母猪品种也影响人工授精配种 关系 猪场管理者要从众多的配种员中选择责任心强 有耐 效果 心的进行重点培养 选优汰劣 以提高猪场的经济效益 2.3 人为原因 2. 环境原因 2..1 天气 配种员在人工授精中起着非常重要的作用 也是影响母 猪情期受胎率和产仔数高低的重要因素 [7] 配种员工作好与 差主要表现在以下几个方面 13 根据观察发现 晴天输精的母猪比阴雨天输精的效果 好 可能由于阴雨天周围环境湿度大 ( 适宜的相对湿度为

135 7% 8%) 母猪缺乏运动 兴奋性不强 导致容易返情 保精液质量 活力检查以精子作直线运动为标准 1% 作 或产仔数少 直线运动的评分为 1 分 9% 者为 9 分 8% 者为 8 分 % 者为 7 分 合格精液的活力应保持在 7 分以上 低于 6 温度 母猪适宜的温度范围是 最高一般不能超过 分的精液应废弃 密度检查以精液在显微镜视野下 精子间 32 温度太高 精子 卵子结合的受精时间缩短 早期 的空隙大小为标准 精子间的空隙小于 1 个精子的为密级 (3 胚胎容易死亡 温度太低 母猪会受寒冷刺激的影响 因此 亿以上 ml) 空隙小于 1 2 个精子的为中级 (1 亿 3 母猪配种时温度要适宜 注意防暑降温或冬天保温 一般夏 亿 ml) 空 隙 小 于 2 3 个 精 子 的 为 稀 级 (1 亿 以 下 天炎热时 选择在早上八点以前或下午六点以后温度较低时 ml) 稀级以下或无精的精液应废弃 [9] 输精 切忌在中午气温超过 37 以上时输精 [7] 提高猪人工授精效果的技术措施 3.1 保证精液质量 加强采精公猪的饲养管理 一是加强营养 种公猪的日粮要好 每千克配合饲料应 确保精液稀释质量 采集的原精液必须加稀释液稀释后保存 稀释的目的是 扩大配种头数 延长精子寿命 保持精子活力 根据精子活 力和密度确定稀释倍数 密度为密级 活力 8 分以上的可稀 释 2 倍 密度为中级 活力 8 分以上的稀释 1 倍 密度为稀级 含粗蛋白 15 消化能 MJ 注意添加适量的钙 活力 8 7 分者 可稀释.5 倍 稀释后精液保证每毫升应 磷 食盐和微量元素 补充富含维生素的青绿饲料 增强公 含有 l 亿个以上的活精子 活力不足 6 分的精液不宜稀释保存 猪性功能和精子的活力 二是注意饲喂方法 公猪的饲喂应定时 定量 要做到 恒温保存精液 稀释分装后的精液应在 17 的恒温冰箱中保存 保存时 勤喂 喂好 不喂饱 一般夏天喂 3 次 冬天 2 3 次 间最长不超过 72 h 保存超过 72 h 的应检查其活力 活力达 每顿喂八九成饱即可 以免饱食后贪睡 每天要供给充足的 不到标准的不能输精使用 应废弃 饮水 在配种繁殖的季节 配种任务重的公猪 可增加饲料 3.2 做好母猪的发情鉴定 观察阴门变化 量 15% 2% 和日喂鸡蛋 1 2 个 使公猪精力旺盛 提 高配种受精率 三是增加种公猪的运动 公猪要经常运动 坚持每天驱 仔细观察发情期间母猪的阴门颜色和状态 阴门由潮红 变成浅红 由水肿变为稍有消失出现微皱 阴门较干 此时 赶 自由行走 2 km 有条件的最好结合放牧适当增加 可以实施配种 如果阴门水肿没有消失迹象或已完全消失 运动量 [5] 说明最佳配种期不到或已过 控制采精频率 合理利用 观察阴道黏液 公猪的年龄及采精间隔对精液的生产及精液的质量有 仔细观察发情期间母猪阴道口的底端 当阴道口底端流 明显的影响 合理控制好对种公猪的利用强度 以利于提高 出的黏液由稀薄变成黏稠 用医用棉签蘸取黏液 其黏液 精液品质及受胎率 一般是 1 2 岁公猪可隔 1 d 采 1 次 不易与阴道口脱离 拖拉成黏液线时 说明此时是最佳配 2 岁 公 猪 可 每 天 采 1 次 但 连 续 5 d 应 休 息 1 d 种时间 1 d 内每头公猪采精次数不应超过 2 次 在 2 次之间至少隔 h 长期未采精的公猪 衰老或死精较多 对开始几 静立反应观察 用力按压发情母猪的背部 如母猪站立不动 出现神情 次采的精液应废弃不用 待精液品质检查质量合格 密度 呆滞 两耳竖立 两腿叉开 尾巴甩向一侧 出现接受配种 活力符合要求了才可以重新利用 这样效果更好 [8] 迹象 说明此时可以进行配种 适时配种 防止采精时精液被污染 采精前将采精器械煮沸消毒 3 min 采精室保持清洁 配种时机把握是否准确 直接关系到人工授精能否成功 卫生 并用紫外线灯室内杀菌消毒 用.1% 高锰酸钾水擦 及产仔多少 因此 在母猪发情期间何时配种 就成为人工 洗公猪包皮四周 抹干 擦净 采精人员穿戴工作服 手戴 授精的一个关键技术环节 实践中配种时间以对母猪的发情 双层一次性消毒手套 外层手套擦洗完公猪包皮后摘掉 用 鉴定为依据 结合母猪的年龄和胎次而定 在生产中 1 2 内层手套手握采精 防止采精过程中污染精液 被污染的精 胎母猪 一般发情后的 8 72 h 之间配种 3 6 胎母猪 液应废弃 一般发情后的 2 8 h 之间配种 7 胎以上母猪 一般发 3.1. 情后的 2 h 之内配种 镜检精液质量 每次采集精液后必须用显微镜检查精子活力和密度 确 3. 正确的输精方法 131

136 3..1 尾部打折 插入去盖的精液瓶或袋孔内 这样既可防止空气 母体清洗和消毒 输精前必须严格消毒清洗母猪外阴部 先用.1% 的高 锰酸钾溶液清洗外阴部污垢 再用.9% 的生理盐水冲去高 锰酸钾溶液 为了防止阴道损伤 在输精管顶部涂少许消毒 进入 又能防止精液倒流 过 3 5 min 后再将输精管缓慢 取出 输精管拨出后轻轻拍打母猪尾部 有利于母猪子宫颈收 润滑剂 使其容易导入母猪阴道内 缩 使精液更好地进入到子宫中 与卵子结合受胎 [9] 其他技术措施 加强母猪的饲养管理 精液的准备 输精用的精液最好是当天采集制成的 保存时间最长不 超过 72 h 输精前 1 min 将精液瓶放入 35 温水中 升 母猪饲养管理要分成 3 个不同繁殖时期 即空怀期 妊 温后即可用于输精 娠期和哺乳期 这 3 个阶段的饲养管理要点有所不同 但总 3..3 输精量与输入的有效精子数 的原则是保证母猪的体况良好 无繁殖疾病 膘情适中 根 中国本地品种猪的体型都比外来品种猪小 尤其是中国 南方的地方猪 其子宫体积和子宫腔的容量较小 王丕建等 据母猪 3 个繁殖阶段 提供能满足营养需求的全价 营养平 衡的饲料 如能提供部分青绿饲料则更好 通过对输精量 2 8 ml 的比较试验发现 2 6 ml 的 一是空怀母猪 管理目的是促进发情 管理要点是短 输精量均获得可接受的受胎率和产仔数 但以 6 ml 期优饲 在饲料供给上要满足需要 使母猪保持 7 8 成 较好 少于 2 ml 时效果稍差 多于 8 ml 会有大量精液 的膘情 对断奶后特别消瘦的母猪加强营养 使其尽快恢 倒流 可能是中国南方母猪子宫腔较小和输精管管径太小的 复体况 同时要并圈 以每圈 6 头为宜 采用试情公 缘故 每次输入精子数从 1 亿 6 亿 均不影响受胎率 猪催情 [1] 因此 2 世纪 9 年代以前 猪人工授精每次输精量一般在 二是妊娠母猪 为妊娠母猪提供良好的环境条件 包括 2 ml 均可取得较高的受胎率 甚至输精量 1 ml 适宜的温 湿度 充足的光照 清洁卫生 空气新鲜 通风 都不影响受胎率和产仔数 但目前猪场已经很少饲养地方品 良好 在管理上 妊娠母猪栏舍内保持安静 喂料及时迅速 种母猪 大部分是外来品种母猪 其子宫腔的体积较大 原 以减少对妊娠母猪的应激 达到减少流产 早产 提高仔猪 来的输精量不能保证每侧子宫角都有足够精液进入 故难以 个体重和均匀度的目的 保证正常的受胎率和产仔数 所以 在目前规模化猪场普遍 三是哺乳母猪 对哺乳母猪的饲喂要做到少食多餐 提 接受的输精量是 8 1 ml 有效精子数为 3 亿 5 亿 供充足的营养 对难产母猪采取适当的助产方式 注意清洁 3.. 与消毒 为防止母猪产后患子宫炎 阴道炎 乳房炎等疾病 输精持续时间及次数 试验证明 输精时间持续的长 短 ( 注入精液速度快 产后 12 h 内注射 1 次长效抗菌素 从而达到提高仔猪成活率 慢 ) 直接影响受胎率和产仔数 输精持续时间在 3 min 以内 维持母猪体况和延长利用年限的目的 [11] 的母猪与 5 min 以上的母猪相比较 前者受胎率和产仔数 远远低于后者 差异显著 因此每次输精的持续时间应为 搞好疾病预防 遵循 预防为主 防重于治 的方针和原则 根据疫病 5 1 min 输精次数 2 3 次 每次相隔 8 l2 h 的流行病学特征制定相应的免疫程序 并严格按计划做好常 3..5 规的免疫工作 每头公猪每年进行 3 次的血清学检测 输精方法 输精时先用手把母猪的阴唇分开 将输精管头部向上倾 检测的疫病包括猪瘟 猪伪狂犬病 猪蓝耳病 乙脑 细 斜 5 插入阴道 当输精管插入到子宫颈口时会感到有很 小病毒病等 淘汰野毒呈阳性的公猪 避免通过配种环节感 大的阻力 此时应将输精管逆时针旋转向前推进 当输精管 染给阴性的母猪 [12] 如果在精液检查中发现有血精 少精 插入 3 cm 左右 3 6 胎 3 cm 左右 7 胎以上 35 cm 左右 死精和无精 以及其他疾病发生 应及时诊治 使公猪尽快 2 胎以内 25 cm 左右 进入子宫颈口 2 3 cm 处 此时便 恢复健康 对母猪也要加强对上述疫病的免疫 同时对猪舍 可停止推进 然后将输精管轻轻后退 2 3 cm 感到阻力很 场地和用具进行定期消毒 防止疫病侵入 [13] 大 轻轻松手后输精管能自然缩回阴道内 表明输精管已插 加强人工授精技术培训 入到位 此时即可输精 输精过程中如母猪走动 配种员要 畜牧兽医职能部门应当定期对从事生猪人工授精技术人 跟着走动 要尽量避免使用用力挤压的输精法 当输精困难 员进行培训 指导 让他们真正全面掌握并严格按猪人工授精 时 可通过抚摸母猪的乳房或按压腰部吸纳精液 增加输精 技术操作规程作业 以保证和提高生猪人工授精配种效果 [1] 效果 可防止精液倒流 输完精后 不要急于拔出输精管 参考文献 应在防止空气进入的情况下 将精液瓶或袋取下 将输精管 [1] 李群康 猪人工授精技术探讨 [J] 畜禽业

137 [2] 凌泽继 伏彭辉 张家庆 等 中国猪人工授精的研究及应用 状况 [J] 养猪 [3] 吴纯柱 猪人工授精技术推广应用效果分析 [J] 现代农业科技 [] 陈国富 范玉晶 丛树发 等 猪人工授精与自然交配的受胎 效果比较 [J] 黑龙江动物繁殖 [5] 陈光国 浅谈生猪人工授精受胎率低的原因及对策 [J] 畜牧市 场 28 (6) 8-9 [6] 刘俊锋 王晋晋 彭峰 等 影响猪人工授精效果的原因 [J] 猪业科学 [7] 李香洲 王铁柱 荣柏庆 等 影响猪人工授精效果的主要原因 [J] 黑龙江动物繁殖 [8] 徐光明 如何提高猪人工授精受胎率 [J] 中 国 猪 业 28 3(8) 33 [9] 高玉品 王健 提高猪人工授精改良效果的技术措施 [J] 当代 畜禽养殖业 [1] 徐章龙 等 猪精液冷冻技术研究 [M]// 家畜繁殖与人工授精 北京 农业出版社 [11] 付开琴 杨梅 张桦 影响猪人工授精效果的原因及技术措施 [J] 云南农业 [12] 戴江 陈仕强 许丽霞 等 生猪人工授精工作中存在的问题 及对策 [J] 中国猪业 [13] 李元山 提高猪人工授精受胎率的措施 [J] 现代农业科技 21(13) [1] 李颖芳 猪人工授精存在的问题及对策 [J] 畜牧兽医杂志

138 又是一个引种高峰年 孙德林 中国种猪信息网 北京 112 据中国海关统计 28 年中国进口种猪 头 而 29 年我国种猪进口量则明显回落 29 年农业部审批进 口种猪数量为 7 12 头 实际进口 2 88 头 21 年进口 头 211 年进口 头 其原因是受甲型 H1N1 流感的影响 国家质监总局和 农业部发布公告 暂停进口疫区的猪及其产品 主要涉及 图1 21 年种猪进口情况 图2 211 年种猪进口情况 墨西哥 美国和加拿大 29 年 7-11 月份我国种猪进口量 为零 21 年计划进口 3 头 进口国家及数量分布 北美洲 美 加 25 头左右 欧洲 1 头左右 不 确定国别 头左右 但截至 6 月底 只进口了大约 8 头 从法国进口 3 头 丹麦 5 头 据中国种猪信息网不完 全统计 211 进口 头主要国为法国 美国 加拿大 和丹麦 是继 28 年后的一个引种高峰年 211 年种猪进口表现有如下特点 一是引种国家结构 性变化 从 21 法国 美国 加拿大 丹麦分别为 833 年以来的引种高峰 主要是 年间养猪效益比较好 头 图 1 到 211 年 种猪企业有能力花巨资到国外引种 三是引种企业大多为后 和 138 头 图 2 主要是 21 年美国出口没有解冻 也说 起之秀 呈现出一批新兴 实力雄厚的种猪企业 明中国种猪企业比较看好美国种猪 二是 211 年是继 28 13

139 猪精子体外获能的研究概况 闫益波 李文刚 申 超 山西省农业科学院畜牧兽医研究所 太原 332 摘 要 精子获能现象的发现大大促进了体外受精技术的发展 近年来 在精子体外获能的研究过程中不断加 深了人们对精子获能机理的认识 同时也不断提高了精子体外获能的效果 进一步推动了体外受精技术的发 展 就当前猪精子体外获能研究概况进行综述 希望能对进一步深入研究有所启示 关键词 精子 体外获能 效果 生殖生物学通过对生物生殖过程的各个具体环节进行 高 Ca2+.72 mm 和高 ph ph7.8 的改良的 TCM199 深入的研究 从而阐明生殖的本质 进而可以人工控制生物 培养液 mtcm199 预孵育 5 h 后与体内或体外成熟 的生殖过程 在对动物生殖过程尤其是哺乳动物生殖过程的 的卵母细胞结合 穿透率高达 89% Yoshida 报道采用改良 研究中 精子获能现象的发现及其机理的研究便是一个很好 的 Tyrode 液 mtalp 能使猪射出的精子获能 在无需 的研究案例 从刚开始对体外受精效率低下的困惑到意识到 预孵育的情况下体外受精并移植后产仔 另外有报道 在精 雌性生殖道孵育的重要性认识 再到体外用其他体液孵育获 子穿透前加 1% 咖啡因 可以延长精子的存活 提高精子的 能 最后到用化学成分明确的培养液获能 这就是一个从现 穿透力 Funahashi 和 Nagai 报道 受精液中咖啡因的影响 象到机理认识不断深化的过程 同时也使得人们可以在体外 会引起数量相当多的精子处于自发顶体反应早期 其活力和 实现精子的高效获能 穿透能力都很强 但是这也可能成为猪 IVF 系统中多精子 1 精子获能现象的发现及其生理机制 穿入卵母细胞的主要原因 现在研究认为 精子体内获能的 动物体外受精的研究尽管早在 1878 年就已经开始 但 机理是 雌性动物生殖道内的获能因子中和精子表面的去能 直到 1951 年由 M.C.Chang 与 Austin 发现哺乳动物的精 因子 并促使精子质膜的胆固醇外流 导致质膜的通透性增 子的获能现象后才有了突破性进展 之后 体外受精的研究 加 而后 Ca2+ 进入精子内部 激活腺苷酸环化酶 抑制 进展很快 许多动物的体外受精相继成功 现在一般认为 磷酸二酯酶 诱发 camp 浓度的升高 进而导致膜蛋白的 在精卵结合之前 精子必须具备如下能力 1 有能力到达 重新分布 膜的稳定性进一步下降 从而使精子获能最终 卵母细胞并穿过透明带 2 有能力进行获能和顶体反应 完成 但详细的获能机理还有待于进一步研究阐明 可以说 3 成熟过程中获得的结合蛋白位点适时暴露给卵母细胞以 任何导致精子被膜蛋白脱除 质膜的稳定性下降 通透性 结合透明带 可以与卵母细胞结合并进入到卵质中 精 增加和 Ca2+ 内流的处理方法 都可能诱发精子的获能 子通过附睾时已获得上述的大部分能力 但精子必须在雌性 2 生殖道或体外培养液中停留一段时间获能以后才具备受精 2.1 动物的种类 能力 随着对获能现象的研究不断深入 精子由最初的在同 影响精子体外获能效果的因素 动物精子的获能因动物种类的不同而表现出较大的差 种或异种雌性生殖道内孵育获能发展到用子宫液 卵泡液 异 有些动物的精子不需要添加特别的成份 在基本的平 子宫内膜提取液或血清等在体外培养获能 最后用化学成分 衡盐溶液中加上适当的能量和蛋白质即可实现获能 而另 明确的溶液培养获能 经过多年深入的研究人们发现射出的 外一些物种的精子则需要添加特殊的物质才能使获能成功 精液中含有去能因子 并认识到获能的实质是去除精子表面 进行 同时 不同物种体外获能所需的最少时间也有所不 的去能因子 这些去能因子就是来源于附睾的精子表面包被 同 一些物种 如小鼠 猫 人 的精子获能时间在 1 h 内 物质 一级表面包被 和来源于精浆的精子表面包被物质 二 而另一些物种 如兔 则需要几个小时 这一差异可能主 级表面包被 雌性生殖道内的 α 和 β 淀粉酶被认为是获 要是精子质膜的理化特征的本质差异造成的 但获能所需 能因子 可以除去精子的表面的去能因子 Nagai 首次报道 最短时间并非一成不变 获能培养液的理化成份和动物的 猪精子体外获能的成功 Cheng 采用类似方法对猪射精精 生理状态均可能对获能所需时间产生影响 精子质膜的稳 子进行获能 即 将高浓度 2 1 /ml 的猪射精精子在 定条件对精子获能时间可能有重要影响 8 135

140 2.2 获能培养液的温度 尽管附睾尾精子和射出精子被认为具有同等的成熟度 精子的体外获能与孵育温度有关 可以说是一个温度依 和受精率 但大量的研究表明 两类精子在体外的表现并不 赖的过程 大多数实验室采用温度为 这一温度 完全一致 一般而言 附睾精子要比射出精子更容易进行体 对于大多数动物精子获能是比较适宜的 Cheng 在猪的体 外受精 这可能是因为射出精子的质膜要比附睾精子的质膜 外受精研究中发现 39 时精子容易获能 在此温度下进行 更稳定的缘故 尽管附睾精子的质膜已很稳定 但因接触精 精卵共孵育的受精率可达 89% 37 时受精率不到 1% 温 浆而吸收或整合了附睾糖蛋白后 它可能变得更加稳定 从 度对体外获能的影响可能在于 细微的温差能使得精子膜脂 而使精子的获能更为不易 的物理性状发生很大变化 获能培养液的 ph 精子获能前精液的处理方法 由于精液中含有大量的精浆 其中不乏精子获能的抑制 一般来讲 精子获能的最适 ph 为 低于 6.7 因子 对于冷冻精液除此之外还含有其他诸如冷冻剂 营 时获能时间会大大延长 高于 8.2 时 虽可缩短精子获能时 养剂等等之类的成分 这些成分都有可能干扰正常的受精过 间 但不利于精子生存 而猪的体外受精研究中精子获能最 程 有必要在受精前将其除去 而且精子的活力是影响受精 适 ph 值为 7. 高于或低于 7. 时 多精受精率都有增多 效果的重要因素 所以为了提高精子的受精效果 往往要采 的趋势 取各种措施来提高精子的活力 2. 获能培养液的渗透压 3.1 筛选活精子的方法 渗透压对精子获能也产生着重要的影响 低于 27 osm/ 最常用的方法就是上游法 swim up 是根据精子 kgh2o 或高于 33 osm/kgh2o 则影响精子获能的进程 最适 运动浮游的特性而将高活力的精子与死的精子和其他精浆 宜的渗透压为 osm/kg H2O 成分分开 并且是筛选高活力精子最有效的一种方法, 适 2.5 获能培养液的组成 用于精子活力较差的精液 但精子的可利用率大大降低 研究表明 在精子获能培养液中没有一种绝对必需的成 Purvis 和 Egdetveit 1993 的研究表明 如将悬浮的试 份精子才能获能 也就是说 培养液中某一成分的存在与否 管倾斜 3 则能提高精子的可利用数量 5% 1% 并不是获能的关键 只要培养液中的其他成分或内源性能量 后来又有人将上游法改为潜游技术 swim down 即将 保证精子存活 获能就能进行 只是获能的效率有所降低 精子置于悬浮液的顶部 让活的精子向下游动 这样可以 许多动物的精子在简单培养基中存活并获能 而另一些动物 提高精子的利用率 且更为简单省时 过滤法可以过滤掉 却需要在培养基中添加某些成分才能获能 如金黄仓鼠精子 精液中的死精子 分离效果比较好 但由于其器材来源和 的获能就需要牛磺酸或亚牛磺酸才能进行 目前 常在获能 成本等的原因 目前在体外受精中并未广泛应用 Percoll 液中添加一些特殊成分来提高精子的获能效率 常见的添 密度梯度法也常用来分离高活力的精子 它是根据形态正 加物有 Ca 载体 Ionophore A23187 IA 肝素 咖啡 常精子的密度高于异常精子的原理 经平衡离心后 形态 因 血清白蛋白等 这些均可有助于精子的体外获能 其中 正常的活精子聚集于高密度的哌可区 从而分离得到高活 Ca 载体和肝素最为常见 Ca 载体可与 Ca 形成复合 力的精子 但此法易受哌可质量的影响 此外 离心洗涤 物 携带 Ca 进入精子内从而诱发精子的顶体反应并激活 法也常用于筛选高活力的精子 它可以有效地去除精浆蛋 顶体酶 Ca 载体应用于牛 猪 羊和山羊精子的体外获 白 尤其是冷冻精液中的其他添加成分 方法简单 对精 能 已取得很好的效果 刘健等的报道中讲到 咖啡因有加 子的利用率高 只是对精子没有分选作用 不适用于活力 强 IA 的作用 其主要功能是提高精子的呼吸率和线粒体对 比较差的精子 在掌握好离心转速和时间的情况下 可以 Ca2+ 的吸收率 增强精子的运动能力 肝素是一种高度硫 结合上游法来提高分选效果 已经越来越多地应用于体外 酸化的氨基多糖 能促进对 Ca 的吸收 从而诱导精子顶 受精的精子的制备 体反应 Parrish 等首次成功将肝素用于牛的体外获能 继 3.2 提高精子活力的方法 而他们又在 1989 年的研究中指出 引起精子获能的活性物 体外受精实践中 常常通过添加一些化学试剂来刺激并 质是来自发情期输卵管液中的肝素样氨基多糖化合物 并据 保持精子的活力 比如咖啡因 环核苷酸磷酸二酯酶的抑 Lee 和 Ax 等的报道 推测输卵管液中氨基多糖化合物的浓 制剂 就可作为精子活力促进剂 它通过抑制磷酸二酯酶而 度为 78 mg/l 并且认为这是一种接近于体内获能的生理 导致胞内 camp 的积累 进而促进精子的活力 Abeydeera 性方法 现已在各种动物体外受精中广泛应用 等检验了 mtbm 中咖啡因对猪体外受精的影响 发现添加 2.6 采集精液的位置 mmol/l 咖啡因的精子穿卵率无显著差异 无咖 136

141 啡因的对照组精子可以穿入卵子 但效率比添加咖啡因的 基多糖类化合物 与精子结合后 能引起 Ca2+ 进入精子细 显著低 PHE 青霉胺 亚牛磺酸和肾上腺素的汇合物 ) 添 胞内部而导致精子获能 认为这是一种接近于体内获能的 加于体外受精液中也能显著提高精子的活力和穿卵率 但 生理性方法 自 198 年被 Parrish 首次成功应用于牛精子 效果还需要更多的试验来进一步证实 而且 PHE 的准备 的体外获能之后 已经成为动物体外受精中应用最为广泛 和储存也很关键 稍有不慎 就会产生毒性作用 血小板 的一种精子获能方法 激活因子 PAF 经许多研究表明对多种动物精子的活力.2 精子获能效果的评价 顶体反应和体外受精均有促进作用 但其具体机制尚不明 精子获能后将发生一系列明显的变化 最明显的表现为 了 另外 透明质酸 谷胱甘肽 己酮可可碱和茶碱等也 其运动类型发生显著改变 精子头部侧摆幅度和频率明显 曾被尝试用来提高精子的活力 均在一定范围有利于精子 增加 而尾部振幅加大 频率加快 呈现一种特殊的超激 活力的提高 活运动 Hyper-activated motolity HAM 或鞭打样运 动 Whiplash motility 精子的 HAM 运动有利于穿越输 精子获能常用的处理方法和获能效果的评价.1 常用的精子获能处理方法 卵管峡部 克服输卵管上皮细胞阻力 最后穿过卵丘细胞及 目前常用于精子获能的处理方法有以下几种 1 血 其细胞外基质和透明带 另外 获能后的精子代谢上表现为 清白蛋白法 将精子与血清白蛋白溶液长时间孵育 利用 活力增强 耗氧量增加 同时 精子质膜的膜脂和膜蛋白发 血清白蛋白具有很强的结合精子膜表面胆固醇和 Zn2+ 的能 生了变化 尤其是胆固醇的丢失最为明显 导致膜的流动性 力 从而降低胆固醇在精子膜中的比例 进而改变精子质 增加 原有的离子平衡被打破 精子内 Ca2+ 含量增加 当 膜的稳定性 导致精子获能 该法需时较长 且获能作用 Ca2+ 含量达到阈值时即可诱发顶体反应 此外 通过检测 不强 目前仅作为精子获能的辅助手段 2 高渗盐法 利 精子的顶体反应和受精实验也可以间接反映精子获能效果 用高离子强度溶液处理精子 使精子被膜覆盖的所谓 去 精子获能作为生殖生理学的重要现象 是体外受精技 能因子 的被膜蛋白脱落下来 从而降低膜的稳定性使精 术的关键环节之一 其复杂的生理过程还需要通过对体内 子获能 由于高渗溶液对精子具有渗透打击作用 会影响 精子获能的深入研究来进一步阐明 尤其是需要在相关分 精子的活力 所以限制该法的进一步应用 3 钙离子载体 子机制和信号通路方面有所突破 从而有助于体外受精技 法 Ca2+ 载体 A23187 能直接诱发 Ca2+ 进入精子内 提高 术的成熟和完善 这对于推动整个动物胚胎工程技术深入 细胞内的 Ca2+ 浓度 从而导致精子获能 该法最重要的是 发展具有重要的研究价值 控制好 A23187 的工作浓度和作用时间 否则会导致精子 参考文献略 活力下降和死亡 肝素法 肝素是一种高度硫酸化的氨 137

142 后备猪选择方法指要 闫之春 美国谷物协会 北京 1 时再计算育种值会更为精密 1 前言 后备猪的选留方法是最近几年养猪先进国家的研究热点 商品母猪场的情况则不相同 根据育种值和测定资料基 目前 多数集约化养猪的大国 种猪 / 后备猪的生产 本选择难以开展 虽然出栏肉猪性状改良的一半来源于母 基本集中到了少数专业化育种公司 商品猪场的后备猪基本 猪 但是 即便后备猪是场内自繁 公猪精液往往是用混精 是外购 大型种猪公司纯繁群的后备猪即使来自本集团公司 除非拥有较大的核心群又能够利用杂交母猪信息 不然商品 的内部 也往往是来自其他的分场 尤其是母猪群与保育肥 母猪场后备猪将来的生产表现主要依靠外购的种猪场的选 育猪分开饲养的公司 更不用说施行跨场间遗传评估的大型 育水平来提高 种猪公司内的后备猪交流了 与其他研究一样 后备猪选择 选留的后备猪不携带猪瘟和伪狂犬野毒抗原是基本的 方法的研究之所以成为重点热点 也是为了解决在养猪生产 健康要求 但是猪繁殖与呼吸综合征 PRRS 大大增加了 经营过程中遇到的新问题 后备猪选择的难度 PRRS 病毒流行程度对母猪群的繁殖效 种猪场与商品场后备猪的选择重点很不相同 表 1 率影响很大 几乎从根本上改变了猪场及其生产流程的设 进行纯种选育的猪场 场内自产的后备猪 最后的选留决策 计 有条件的猪场 都设法将易感的保育育肥猪群从母猪场 主要基于完成生长性能测定之后评估出的育种值 进行多品 分离出去 即使是自产的后备猪 重新回到母猪群的过程也 系纯种猪选育的种猪场 作为终端父本与母本的育种值选择 变得十分复杂 由于目前对 PRRS 病毒的交叉保护机理尚 重点不同 大多数国家通过给不同的性状以不同的经济加权 不明了 病毒活跃的阳性母猪群也不愿引入新的未知毒株 值来制定综合选择指数 并根据指数的高低来决定后备猪的 大型母猪场引进的后备猪都要求 PRRS 抗原阴性 取舍 近 年 来 的 研 究 表 明 仔 猪 感 染 PRRS 病 毒 后 的 散 毒 仔猪断奶时 可加入断奶窝重的资料 后备猪的选择就 期 可 能 长 达 157 d Nilubola Detc 2 [1] 如 果 要 保 证 可以开始了 利用现有种猪群的记录资料 计算出父母各性 后备猪在配种时不再散毒 后备母猪要在断奶后不久就 状育种值 父母育种值各一半相加 选择指数高的窝仔作为 要 引 进 除 非 推 迟 2 3 个 情 期 再 配 种 不 然 像 我 国 目 备选后备进入测定 当然这一切 在其父母选配时即初步确 前这种 5 kg 左右引进后备猪的做法几乎不能防止 PRRS 定了 只是由于新测定母猪资料的增加 在最近的这批断奶 引入 这就是国外母猪场要求建立独立的后备猪培育舍 Gilt Development Unit, GDU 的 原 因 Patterson[2] 表 1 不同情形下后备猪的选择要点 J. etc, 25 GDU 带有保温保育设施 引进刚刚断奶的 猪场类型 主要指标 场内自留 场外引进 种猪场 根据亲本育种值 窝选留 应做 无遗传联系不能做 生长性能测定后 评估育种值 应做 无遗传联系不能做 母猪舍相隔不远 但往往需要分间隔离 独立通风 需要有 肢蹄乳头等 外貌早期评价 应做 难以进行 保温保育舍和公猪诱情舍 在 PRRS 的防控没有真正的进 外貌选母猪利用年限 不如育种 值重要 很重要 展之前 建立科学设计的 GDU 是有效控制后备猪引入疾病 蓝耳病毒清除 应做 应做 后备猪 分批进行病毒检测 驯化 测定 免疫 直至通过 诱情发现第 1 次明显的发情 才转入母猪群 GDU 可以与 的关键措施 更为重要的是 国外集约化养猪的母猪死亡率 淘汰率 商品母猪场 138 根据亲本育种值 窝选 难以进行 不能做 生长性能测定后 评估育种值 应做 不能做 肢蹄乳头等 外貌早期评价 应做 难以进行 外貌选母猪利用年限 很重要 很重要 蓝耳病毒清除 应做 难以进行 动物福利要求等方面的问题近年来变得十分突出 母猪的年 均淘汰率加死亡率远超过 5% 母猪的生产利用年限已成为 直接影响母猪群经营效果的大问题 表 2 美国母猪的平 均淘汰胎龄均约 3.8 胎 Stalder K 29 这里需要注意的 是 美国的生产纪录标准里 后备从母猪进群直至临近分娩 记为 胎 如果依此计算 中国母猪群的平均淘汰胎龄并不

143 表 2 母猪死淘率 (PigChamp Bechmark 28) 主要指标 加拿大 无乳 高达 18% 肢蹄腿病 9% 死亡占 % 这从另一方面 说明了 后备母猪选择时肢蹄 乳头整齐度等外貌选择的重 美国 年份 年均母猪死亡率 /% 最好的 1% 年均母猪淘汰率 /% 最好的 1% 注 以上为 28 年共约 36 个母猪场的资料 比美国的好 提高母猪的生产寿命需要精确指标来分析母猪淘汰离 要性 设计合理的猪场管理软件均应对母猪淘汰原因预设科 学分类 至少在大的类型上分为繁殖障碍 含不孕 产仔 泌乳问题 肢蹄 体况 死亡等等 对母猪管理和后备猪 选择是有意义的 母猪的生产利用年限有很多指标 : 平均淘汰胎次 母 猪群平均胎次 后备母猪在群体中的比例 母猪年更新率 母猪一生在群天数 sow herd life days 母猪一生生产天 数 sow productive herd life day 等等 自后备母猪进群 场的原因 Mote[3] 及 Mabry 等 (29) 利用美国中西部一家 直至其淘汰离群期间 总的在群天数即母猪一生在群天数 12 万头母猪的 3 个猪场随机选出的 2 头母猪进行了为期 其中总的妊娠 + 泌乳天数即使所谓母猪一生总的生产天数 2 个月的分析 这项研究将母猪的淘汰原因分成了生产人 应考虑用母猪一生生产天数衡量母猪利用年限 而用母猪一 员易于识别的几大类型 : 生在群日平均提供的合格断奶仔猪头数衡量母猪群的生产 繁殖 连配不孕 异常流产 流脓等 效率 这些指标说来起来似乎复杂 使用电脑管理软件很容 结构 肢蹄病 不能站立等 易实现 也是进行母猪利用年限选择时必须考虑的 通过对 采食 萎靡 停料 体况差 北美 1996 至 2 年期间 51 万多头母猪的分析 Stalder 及 胃肠 出血肠病 胃溃疡 肠扭转等 Mabry, PigChamp Benchmark 29 母猪一生平均在群 太老 : 的天数为 579 d 期间总产仔 51.8 头 产活仔 6. 头 断 突然死亡 奶.6 头 但是最好的 1% 的母猪群 上述指标分别为 其他等等 727 d 62.6 头 56. 头和 9.3 头 差距十分明显 一般 试 验 开 始 时 将 母 猪 分 成 2 类 一 类 是 从 后 备 猪 进 的群体有很大的改进潜力 场直至临近分娩分娩的 胎青年母猪 以及试验期间 5 胎 作为重要的固定资产投资 后备猪的投资多年逐步折旧 以 上 的 母 猪 3 个 猪 场 两 类 猪 的 数 量 相 等 重 要 的 发 现 中国一般折 3 年 亦即投资的汇报需要在多个会计期间实 是 那些能够在群 5 胎以上的母猪在其第 1 胎与青年母猪 现 有没有汇报 回报率的高低会受到不同商品猪价 饲料 的 相 同 胎 次 相 比 总 产 仔 数 12.3 vs. 12. P <.2 饲养成本 母猪产仔表现 母猪一生在群时间 进群至配种 活 产 仔 数 11.3 vs. 1.8, P <.1 断 奶 至 发 情 间 隔 前的培育成本 淘汰母猪的残值等等因素的影响 进行了投 6.3 vs. 7. d, P <.1 等繁殖表现均要好 图 1 能 资回报的净现值及其风险因素分析之后 大多数情况下 母 留群 3 胎以上的母猪在其第 1 胎时窝产活仔 1.6 头 而在 猪需要平均在群 胎以上才具有证的经济回报 Rodriguez- 产晚第一胎后由于各种原因淘汰的青年母猪 同样是第一 Zas, S. L. 23, 26 [5] 这给后备猪的选留提出了很高的 胎 的窝均活仔只有 9.7 头 利用年限长的母猪 一生的产 要求 母猪场的生产效率及其经营效果很大程度上取决于母 活仔数要远远优于利用年限短的母猪 不仅仅是一生总产量 高 而且单产也高 这说明母猪利用年限性状的选择具要重 大的经济意义 这项研究还发现 青年母猪在前 5 胎淘汰的主要原因是 繁殖障碍 35.1% 和结构 22.1% 而超过 5 胎后主要因 为太老淘汰 繁殖障碍和结构肢蹄原因只占 12.2% 和 7.5% 瑞 典 的 1 项 在 21 家 猪 场 2 万 余 头 母 猪 的 研 究 Engblom[] L. etc. 29 将母猪的利用年限定义为第 1 次分娩至淘汰的天数 淘汰原因细分为生产水平降低 繁殖 紊乱 泌乳问题 肢蹄腿病和死亡 与北美的情况有所不同 繁殖原因淘汰的比例仅为 27% 泌乳问题 乳房炎 少乳 图1 青年母猪与 5 胎以上母猪在相同胎次时的产仔表现 139

144 表 3 后备猪选择的步骤及要求 时机 同的企业在后备猪选择时所具有的时机 可以施加的影响及 其强度有很大的不同 如下的步骤和选择要点是一般性的 头数占本批所 需后备猪总 数% 要点 而且针对健康状况 正常 的猪群 可能最适用于母猪育肥 亲本配种时 育种 : 优配优原则计划配种生产 断奶时 出生一周内个体标识 育种 : 1 使用母猪群最新产仔成绩 + 已完 成测定的后备测定成绩 重新计算 全群育种值 按育种值综合指数排 序 不在排最后的 25% 的窝留种 2 同窝无畸形仔 3 母猪无难产 母猪肢蹄乳头发育正常 5 初产母猪窝活仔 7 头 保育期结束 约 25 kg 体重 测定结 束 1 kg, 1 日龄 GDU 结束 约 12 kg 23% 选择进入生长性能测定舍的群体 育种 至少剔除 1% 生长慢的弱仔 肢蹄 初选 淘去明显发育畸形 外伤者 乳头 已明显发育的超过 12-1 只 外貌 无疝气 18% 选择进入后备猪培育舍 GDU 期 间 6 kg 左右集中淘汰眼观评估不 达标的个体 育种 : 按测定结果 + 种猪群记录 重新计算育种值 商品场按平均日 增重排序 肢蹄 乳头 外貌 终选 作为独 立淘汰标准 眼观评估 育种值选 择指数排序靠前的后备猪 13% 使用公猪诱情后 全部出现了 1 次 明显发情 其间初次 28 d 诱情未 发情的集中激素处理再诱情 1% 一条龙的大型种猪场来自留后备母猪 表 3 选择的指标 里没有包括遗传标记的基因检测 可待这方面的研究取得进 一步进展之后再做讨论 实践证明 在各个选择时机留出足够的头数十分重要 尤其是在窝选和选择进入测定舍时 夏季留种 仔猪成活率 有问题时 更应该留够数量 在断奶日龄的仔猪阶段 按计 划需要量的 2 % 的留出是最基本的要求 25 kg 左右的仔 猪生长到 6 kg 期间 蹄型 乳头外阴的型状有很大的变化 有时要淘汰一大部分 1 kg 左右的后备猪 如果按传统 的诱情方法 75% 能有明显的初情期便很不错 更不用说炎 热的夏天了 要想满足母猪群的配种目标 留够初选的后备 头数是关键 后备猪的测定舍应尽量模仿商品场的生产条件 包括饲 料 设备设施 温风环境等等 在太过适宜的测定环境中选 到的后备猪 很可能不适应实际的生产条件 测定群体一般 要大于 3 头 但通常不超过 5 头 (Todd See, 27) 近年来 国外养猪业者非常重视肢蹄的选择 特别是在 测定结束后 1 kg 左右的后备做最终选择的时候 肢蹄的 原因是母猪在 3 胎以内淘汰的第 2 大原因 对在限位栏饲养 的母猪更明显 直接影响母猪的利用年限 对后备猪肢蹄的基本要求是关节有缓冲 不要太直 间距合理便于起卧和行走 图 3 中的 M N 角度都不太大 猪的生产水平及使用寿命 更新率 总之 后备猪的选育方法影响猪群的遗传进展 繁殖效 太大时腿太直 起立行走困难 D 处有合理弯曲缓冲 已 率 健康状况 进而影响母猪的生产寿命 对猪场的经营效 经证明轻度的卧系有利于提高母猪利用年限 C/G 处的膝 果具有重要的意义 本文的目的是总结近年来国外的研究进 跗不突出 凸膝的母猪在限位栏里易擦伤 E 上面的尻骨 展 综述后备猪选择方法的进展 读者诸君可根据自己猪场 较平宽 不要选留后腿 后视 X 型的后备猪 趾部不平 大小不匀极易在限位栏的地板上磨损 在 的具体情况选择性参考 动物年龄大时 出现撕裂和肢蹄底部损伤 影响母猪群 2 步骤及要求 由于猪场类型 后备猪来源 GDU 等方面的不同 不 身较长 臀部长且平 背腰平直 尾根高 后腿深长且 肋骨结实且有弹性 肌肉丰满 身较深 肩部平滑 面颊齐整 胸底面平且宽阔 的使用寿命 根据爱澳华州立大学分向选择研究结果表 乳头突出 间隔合理 跗关节结构合理 膝关节合理 到球节有缓冲 图2 1 后腿骨骼粗实 后备猪外貌眼观评估的一般要求 据 Stalder 29 USGC training material 图3 理想后备猪骨骼结构的缓冲 据 Stalder 29, USGC training material

145 明 Rothschild and 面 水泥地面 漏缝 半漏缝地板 通风方式 赶猪方式等等 Christian 1988 良 对母猪的利用年限也有很大影响 Stalder, 27 [8] 母猪 好肢蹄结构选择的遗 的饲喂 尤其是泌乳期母猪的营养和饲养的不同 断奶后母 传 力 为.29 不 好 肢 猪的淘汰率也有差异 Hewitt 28 [9] 钙 磷 生物素 蹄结构选择的遗传力 锌等对肢蹄强度的影响则早有报道 为.2 说 明 后 备 图 理想的趾应较宽 大 两趾大小均匀 间距合 理 Stalder, 29, USGC training material 猪选择肢蹄是可以 改 参考文献 进 的 如 果 不 选 优 [1] Nilubola D, etc 2, The effect of a killed porcine 肢蹄不好的母猪更易 reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) 增加 这几年还发现 vaccine treatment on virus shedding in previously PRRSV 与骨骼强度有关的基因 infected pigs. Veterinary Microbiology. Volume 12, 也可能影响肢蹄强度 Issues 1-2, 19 August 2, Pages 猪的乳头数为中 [2] Patterson, J. etc, 25, Setting new benchmarks for 等遗传力 (.2 -.7) efficient gilt development: 1) Gilt selection and prebreeding 性 management. 状 McKay and Rahnefeld 199 Banff Swine Conference Proceedings 25. [3] Mote, B. E. etc 29. E valuation of Current Reasons 通过后备猪独立淘汰选育是可以改良的 后备猪应该在断 for Removal of Sows from Commercial Farms. The 奶 保育末期进行初选 以免浪费以后的测定资源 终选时 Professional Animal Scientist 25 (29):1-7. 有 6 对以上间距合理 突出 发育良好的乳头是基本要求 避免内陷 过度细小的乳头 由于不能观察子宫大小 后备母猪的外貌评估需要选择 外阴较大且不明显上翘的 以推测子宫容量 在实际操作中 在育种值 生长速度等选择之后 外观 评分的先后 重要 顺序应该是 外阴 > 乳头 > 后蹄 > 后 肢 > 前蹄 > 前肢 > 身宽 > 身平且长 外购后备猪时 外 观的评估变得十分重要 但我国的养猪业者对 5 kg 左右后 备猪的外观评估仍有很多误区 总试图能通过外观看出瘦肉 [] Engblom, L. etc. (29), Factors affecting length of productive life in Swedish commercial sows. J Anim Sci 28.86:32-1. [5] Rodriguez-Zas, S. L. 26. Impact of biological and economic variables on optimal. J Anim Sci 26. 8: [6] Beltranena, E.etc Effects of pre- and post- pubertal feeding on production traits at first and second estrus. J. Anim. Sci., 69, 率高 生长快的猪来 但已有多项的研究证明 早期体形选 [7] Foxcroft, G. 25. PHYSIOLOGICAL LIMITS TO 择与达到上市日龄时的情形相关并不大 早期体形选择通常 MAXIMIZING SOW PRODUCTIVITY London Swine 只是选到了早期发育的猪 Conference - Production at the Leading Edge 6-7 做好肢蹄外貌选择并独立淘汰之后 2 22 周龄左右 的后备猪即可转入 GDU 里的培育区 并使用公猪诱情 3 周龄左右发现第一次明显发情的母猪可转入繁殖群 后备母 [8] Stalder, K. J, 27, The Impact of Gestation Housing Systems on Sow Longevity. Iowa Sow Housing Forum. [9] Hewitt, R. 28. Management strategies to maximize sow 猪的选择才结束 GDU 中母猪的饲料 饲养 健康检测 诱 longevity and lifetime 情模式的方面 近年均有较大研究进展 本文则不予赘述了 Research Center, Australia. 3 讨论 Performance. Pork Cooperative [1] Mote, B. E., etc. 26. The Holy Grail for pigs: 如果场内自留 后备猪的选择应在断奶时开始 保育 Candidate genes affecting sow productive life. Proc. 育肥阶段平均日增重高的小母猪达到初情期的日龄也更早 8th World Congress on Genetics Applied to Livestock Beltranana 1991 [6] 将 来 的 留 群 时 间 更 长 Foxcroft Production, Belo Horizonte, Brazil. Paper [7] 后备猪的乳头外阴肢蹄结构是否合理直接影响母 [11] Rodriguez-Zas, SL, etc, 23, Bioeconomic evaluation 猪的利用年限 当然 除了母猪本身的原因之外 妊娠栏舍 of sow longevity and profitability, J. Anim. Sci. 23. 的设计 全限位 半限位 大栏 电子记录大栏 厚垫料地 81:

146 新目标 母猪年提供35头断奶仔猪 原作者 Bjarne Kornbek Pedersen 译 胡锦义 校 苏 祥 李 勇 广西商大科技有限公司 广西 南宁 5315 在丹麦 母猪年产仔达到 35 头的目标已指日可待 经 济危机的冲击使丹麦养猪业处于困难时期 这让更多养猪 者更加关注于提高猪生产效率和经济收益 目前 有 5% 的母猪年产仔已达到 32 3 头 但更多人认为还有提高 的空间 达到年产仔 35 头的新目标 令人吃惊的是 15 年前的目标才只有 25 头的年产仔数 这是因为在 2 世纪中叶前 对增加每窝产仔数只考虑到猪 的遗传性能 其关注点只考虑到提高母猪胎产仔数 现在 大家关注到对产后 5 d 的活仔数的控制 养猪业进入高速发展期 图 1 表达了从窝产仔数成为 选育性状以来丹麦产活仔数的发展 很明显 这些努力是 丹麦的遗传学和管理方法在全世界很多国家都有应用 有成绩的 丹麦 25% 的养猪企业平均年产仔数已上升到 无论是什么地方 合适的产床大小的设计可以提高动物的 29.9 头 生产能力和经济产出 之后在俄罗斯 白俄罗斯和塞尔维 1 关注活仔猪 亚的试验表明 在各项参数都达到最佳的时候 母猪年产 最初目标是关注母猪胎产多少小猪 但增加产仔数并 仔数达到 3 31 头是完全有可能的 不能保证它们都能存活下来 产后 5 d 的小猪存活率受母 猪的母性和小猪的健康情况影响 较高的产仔数对产后猪舍和管理都有一定的影响 因 2 提高活仔数 在很多国家 产仔数的增加也导致了更多仔猪出生时 死亡或死胎 在丹麦 基本上平均每胎出现 头的 为 一 般 产 床 的 规 格 为 1.5 m 2.6 m 保 温 箱 长 1.9 m 死胎 而同样用丹麦生产管理系统的东欧其他国家只有平 所以 每头仔猪的生活空间就只有.55.6 m2 均.5.7 的死胎率 这可能相当于 15 年后的生产水 过去 2 年以来 母猪体长增加了 1 母猪体重增 长了 2 与此同时 每胎产仔数以由原来的 1 头提高 到 1 头 这些都显示现在需要更大的产床 最新的加大产床 有着更大的保温箱 能为小猪和母 猪的休息和活动以及护理提供更多空间 平了 这个差别的出现可能是因为东欧国家规定产房工作人 员要一天 2 h 在场工作 因此 才会有大量的小猪被挽救 回来 而没有人在场接生的则可能导致死胎数增加 这启示我们应该开发一种电子工具帮助工作人员有效 的监测母猪的分娩情况 期望对每头母猪的监测 每胎可 以至少减少.5 头的死胎数 这就相当于每头母猪每年提 高了 3 欧元 ($) 的利润 交叉寄养技术是由丹麦近 1 年来研究提出 一旦母猪 产仔数超过乳头数 就要进行小猪的寄养 由其他母猪进 行哺乳 这一般分为 2 个步骤 第一 小猪吃完初乳就可 转往分娩 1 周的母猪处进行哺乳 第二 将这头寄养母猪 的小猪寄养到产后 3 周或已断奶的母猪处进行哺乳 大量寄养母猪占用产仔栏舍空间 另外 大量小猪的 图 1 从 2 世纪 9 年代初到 28 年丹麦母猪窝产活仔数增长图 12 寄养易引起交叉感染 因此 寄养的目的是要哺育尽可能

147 多的仔猪 但尽量少混群 3 超级母猪管理 超现代遗传学可能与赛车相似 如果保时捷用一般的 可以多运动 也能提高母猪的性能 水的供应是另外一个经常被忽视的因素 缺水立即会 减少乳汁的分泌 饮水器水流过小也会对泌乳有不良的影 汽油 可能也跑得不好 同样 母猪和小猪如果不在正确 响 为了保证奶水 饮水器流量必需控制在每分钟 1 L 的饲养管理下 也不可能表现出优秀的生产成绩 高生产性能的母猪在产奶高峰期也就是分娩 3 周时 日饮 一 头 母 猪 如 果 提 供 1 16 头 小 猪 则 每 天 需 提 供 1 15 L 乳汁 那么就要喂给它好的日粮才能达到 丹 水量要超过 L 这些细节可能就是提高一年产活仔数最为关键的几点 麦的最新研究表明 日粮如果分为 6 次饲喂会大大提 当然寄养用的母猪必需健康和强壮 它可是能获取利润的 高母猪的采食量 也就是说可以达到 1 12 kg/d 从传 重要部分 我们相信年产 35 头小猪是可以实现的 我们可 统的 2 3 次饲喂到现在 6 次 或更多次 饲喂 可 以从中获得更大的利润 以使母猪经常站起来 这样也可以减少肩部受伤 因为它 就不会长时间保持一个姿势侧躺着 也就是说 多喂养就 注 本 文 译 自 Bjarne Kornbek Pedersen.New target:35 pigs per sow per year.pig international,21,2:

148 对我国生猪遗传改良工作现状的 思考与建议 彭中镇 华中农业大学动物科技学院 武汉 笔者在 27 年 11 月于湘潭召开的 中国改革开放养猪 37 选育 提高种猪生产性能 逐步缩小与发达国家差距 改变 3 年纪念大会 上曾以 3 年来我国猪育种工作进展与展 我国优良种猪长期依赖国外的格局 望 为题综述了新中国建立以来特别是改革开放以来我国猪 1.2 国家生猪良种补贴项目的启动 遗传改良工作所取得的成就与重大变化 本文则试图概述近 27 年 8 月国家启动了生猪良种补贴项目 对全国生 3 年来我国生猪遗传改良工作所取得的新进展 并对当前存 猪主产区 2 个县的 9 万头能繁母猪应用人工授精技术 在问题及今后工作提出粗浅看法与建议 供决策部门与相关 进行补贴 29 年又新增加 2 个县共 725 万头能繁母猪 机构 企业参考 项目规定 按每头能繁母猪年繁殖 2 胎 每胎配种使用 2 份 1 3年来我国生猪遗传改良工作的新进展 精液 每份精液补贴 1 元 每头能繁母猪年补贴 元 即 1.1 全国生猪遗传改良计划 的制订与实施 低价让生猪养殖户使用精液配种 实践证明 生猪良种补贴 重要文件 全国生猪遗传改良计划 农 政策是加快生猪品种改良的重要手段 在推动猪人工授精网 办牧 [29 55 号 及其配套文件 全国生猪遗传改良计 络建设与人工授精站点基础设施设备建设 在改变过去忽视 划实施方案 农办牧 [21 1 号 相继于 种公猪质量状况 增强生猪养殖户良种意识 在提高猪人工 29 年 8 月和 21 年 3 月公布并启动实施 这是我国第 1 授精普及率等方面都起到了不可替代的作用 份全国性的猪遗传改良计划 它的制订与实施是我们从事猪 1.3 我国第 2 次全国性猪遗传资源调查工作的结束与 遗传改良工作一代科学人与实践人期盼已久的一件大事 是 中国猪遗传资源志 的即将出版 我国猪育种工作上的一个新的里程碑 尽管 全国生猪遗传 26 年启动的全国猪遗传资源调查所取得的成果与 中 改良计划 下称 改良计划 会随着时间的推移 情况的 国猪遗传资源志 的出版, 必将为进一步评估与合理利用我 变化 实施经验的积累而修改 完善和充实 国特有的猪遗传资源 为建立全国猪遗传资源动态监测体系 这份 改良计划 反映了现代猪育种科技水平 且切合 和濒危资源预警机制 为宏观决策提供重要信息与科学依 国情 具有我国特色 并在主要方面开始与国际全面接轨 据 它的落实 必将在统一业内认识 凝聚各方资源 促使生猪 1. 第 1 批国家级猪遗传资源保种场 35 个 与保护区 3 改良工作有重点和有序地推进 并首次有可能使我国生猪相 个 的确定 关性状在全国范围内逐步取得真实的遗传进展 从而使这一 进展在稳定和满足特定市场需求 强农惠农中起到更大作用 农业部 28 年 7 月 7 日发布的第 158 号公告 是继 2 年和 26 年我国公布 3 个国家级猪保护品种之后的 改良计划 明确地提出了 6 项关键性建设内容 1 遴 在加强地方猪遗传资源保护与管理工作方面的又一重大举 选国家生猪核心育种场 作为开展生猪联合育种的主体力 措 如果这些保种单位 -- 保种场和保护区的作用都得到 量 2 组织种猪登记 3 建立种猪性能测定体系 开 充分发挥 则必将在终止我国地方猪正面临着的全局性遗 展遗传交流与遗传评估 建立稳定的场间遗传联系 由全国 传资源危机 以及不少地方猪品种或类群数量特别是公猪 种猪遗传评估中心进行场间性能比较 5 完善种公猪站与 头数与血统数急剧下降趋势中起到重要作用 人工授精体系建设 6 支持地方猪遗传资源的保护 选育 1.5 各组织的建立和会议推动生猪改良事业的发展 与利用工作 在有效保护的基础上 鼓励有计划地进行地方 品种的杂交利用和参与配套系培育 改良计划 还在 总体目标 中指出 加强种猪持续 1 全国猪育种协作组的建立 国家现代生猪产业技术体系 的建设 中国地方猪保种与利用协作组年会以及连续 届全 国猪人工授精关键技术研讨会的召开 对于提升科技对生猪

149 改良事业发展的贡献率起到了独特作用 1.6 法律法规建设进一步得到加强 中华人民共和国畜禽遗传资源进出境和对外合作研究 利用审批办法 国务院第 533 号令 28 年 8 月 28 日 家 畜遗传材料生产许可办法 农业部 21 年第 5 号令 以 及农业部 关于加强种畜禽生产经营管理的意见 农办牧 [21 2 号 的发布与实施 对于保护和合理利用猪遗传资源 防止其流失 对于减少引种的盲目性 对于规范种猪生产经 营市场秩序 遏制以杂种猪 非本品种猪和假劣种猪冒充纯 种猪 冒充客户所要的品种猪和良种猪等现象 维护养殖场 户合法权益 推进生猪种业持续健康发展均具有重要意义 2 当前存在的主要问题 如上所述 近年来 我国生猪改良事业又上了一个新 台阶 取得了前所未有的进步 只要沿着既定思路走下去 图1 定会取得实质性的改良成果 但当前仍然存在一些困难与 问题 1 由于主客观原因 不少育种场对性能测定和自主选 育仍然徘徊不前 积极性不高 地方猪种 通城猪 3 对当前我国猪遗传改良工作的建议 3.1 关于 改良计划 中核心育种群总产仔数年均遗 传进展.15 头指标的实现 2 对一个完整的生猪良种繁育体系所维系的几个重要 上述指标意味着 从 21 年开始的 1 年内总产仔数总 环节或者工具 一是育种猪场最重要的基础工作 场内 共要有 1.5 头总产仔数的选择进展 这是一个非特殊措施很 性能测定 二是场间关联的建立与估计育种值在场间的可比 难达到的非常高的平均指标 建议及早论证 规划 要达到 性 三是种公猪站的公猪质量及其人工授精推广体系 以及 这一改良指标 经纯选 所应采用的方法与组织措施 生猪良种繁育体系由 个主体部分组成的认识不够深刻和全 建议 1 跳出国家级核心育种场的范围 把选择群体 面 因此 延缓了这些环节或工具在遗传改良工作中的有效 扩展到极大 扩展到繁育体系的下面层次 有条件时 实施 运用 也缺乏有效措施使 个主体组成部分形成一个利益共 总产仔数的跨群遗传评估与总产仔数育种值的跨群比较 用 同体 这些已经并将阻碍生猪良种繁育体系在遗传改良中作 极高的选择强度弥补猪总产仔数遗传力低 一般约为.1 用的发挥 的缺陷 3 对种猪登记 在 中国奶牛群体遗传改良计划 28 2 采用自行设计的公母猪总产仔数育种值估计模型 22 中称为 品种登记 或 良种登记 的目的 长远 将其父母亲的尽可能多的亲属 不限于该育种群 种类与头 与现实意义 登记办法 登记 注册 号 登记内容 登 数且为多个胎次的产仔信息复合于家系指数 又称 复合育 记结果在评估中心网络平台上的公布 登记证书与应用场 种值 中于断奶阶段据此选择小公 母猪 只有总产仔数 合在认识上尚不一致 现有的 种猪登记技术规范 NY/ 复合育种值很高者才能进入 断奶后性状 的比较测定 T 82-2 对以上重要问题多未涉及 3 由国家种猪遗传评估中心重复对同一头公猪和母猪 我国地方猪遗传资源所面临的全局性危机 [1] 尚未解 包括场内外种公猪 AI 公猪 能繁母猪 终生性地估计 除 但人们对面临的这种危险的程度与速率估计不足 在列 其总产仔数的育种值 要求种公猪站配合该站 AI 公猪的 入国家级猪遗传资源保护名录中的品种也不乏数量仍在下 后裔总产仔数的调查 降的例子 另外 某些地方目前还存在不重视地方猪保护工作 放 估计总产仔数单性状的育种值 忌用一般由 日龄 膘厚 总产仔数构成的 母系指数 松在地方猪保护基础上的杂种优势利用以及参与配套系的 5 由全国种猪遗传评估中心和大型种猪育种公司分别 培育工作 但又出现集中资源利用地方良种作为育种素材大 主持建立窝记录体系或公母猪生产力记录系统及相应的中 力培育含 5% 外血 遗传性稳定的 新品种 并以此代替 心数据库 注 法国称为 窝记录系统 litter recording 地方良种来使用的倾向并有蔓延之势 改良计划 几次提 system 芬 兰 叫 做 窝 记 录 方 案 litter recording 到地方良种参与配套系培育 但缺乏具体做法方面的引导 scheme PIC 公司则早已将分散于英 德 美等国的大量 15

150 龄 与 膘厚 测定值的可比性 ⑤测定工具与测膘部位 ⑥测定环境 力争一切条件相对一致 同批入测猪出生日期 相近 特别要规定必须采用自由饮水与自由采食 ⑦测定人 员 由总场技术部门专人统一测定 分场选育员配合 3 建议国家生猪核心育种场坚持 科学引进种猪 改 良引进种猪并与发挥国内地方良种资源优势相结合 的选育 方针 每个国家核心育种场都必须制定适用于本场的种猪育 种方案 有无 全自动种猪生产性能测定系统 不应作为或 意向作为认定 批准 遴选国家生猪核心育种群的条件 以 便将有限的测定经费用在刀口上 并可在全国倡导一种勤俭 办场精神 养成实事求是不攀比的优良作风 从而有利于在 全国顺利普及和坚持场内测定 这样做亦可避免一种现象即 图2 活体测膘 为求得此 系统 而以牺牲测定规模为代价的现象发生 至 于个体饲料转化效率 料重比 数据的收集 全国不应也无 母猪的窝记录存于中心数据库 以备选择产仔数等性状时之 必要强求统一 因为选择 日龄 与 膘厚 会带来饲料转 用 实行信息互通 资源共享 供参加该体系的各育种场 化效率性状的改良 在国外 至今也未强求全国统一 3.3 关于生猪良种繁育体系问题 完整的生猪良种繁育体系应由４个主体部分 6 在全基因组水平上 如采用 全基因组关联研究 方法 搜寻不同胎次总产仔数相关候选基因或基因组区域 组成 公司选择改良总产仔数服务 并结合特殊的常规选择法尝试性地实施全基因组选择法 此 笔者认为 生猪良种繁育体系由以下４个主体部分组 法若能成功 将可为缩短世代间隔 加速年遗传进展提供有 成 或者说 生猪良种繁育体系实际上是一遗传改良路径 利条件 而这一路径含有四大要素 缺一不可 1 育种群 核心群 3.2 关于国家生猪核心育种场的场内性能测定 及以其为核心的含数个层次的宝塔形猪群结构 即狭义的繁 1 生猪疫病防控形势依然严峻 必须设法提高疫病防 育体系 2 种猪性能测定中心 公猪中心测定站 3 种 控水平 强化主要疫病净化工作 倡导健康养猪理念 从 公猪站 猪人工授精中心 种猪遗传评估中心 笔者曾 源头上提高种猪健康水平 为核心群的测定选择创造前提 设计 生猪良种繁育体系组成及遗传改良路径示意图 如 条件 图 3 [2], 以说明各组成部分的作用与彼此间关系 该图以 2 建议及早制定全国种猪场场内性能测定规程 现有 行业标准 种猪生产性能测定规程 NY 仅 适用于中心性能测定站种猪的测定 三元杂交为例 各主体部分的作用 首先要提到核心群 核心群头数虽少 但在良种繁育体 全国种猪场场内性能测定规程 的内容建议包括 ① 系中以及宝塔形猪群结构中起着十分重要的基础与核心作 测定规模 可按 实施方案 要求 育种群纯繁后代每窝至 用 每个大场都可能有几个核心群 它们均须按照各自在杂 少测定 1 公 2 母 但补充 全国种猪遗传评估方案 试行 交体系中所起作用持续地进行选择 选择按以下程序进行 中十分有意义 值得肯定的一条 1 kg 测定结束时必须 科学测定 准确评估 严格选留 高强度选择 适速更新 保证有 1 公和 1 母 另外 有条件的场还可按 实施方案 然后进行精心选配 力求获得快的改良速度 即大的年遗传 规定实施全群测定 ②测定性状 ③终测体重 建议在体重 进展 有条件的核心群尚可有计划地培育专门化父系或专 95 kg±5 kg 范围内 或在其他 ±5 kg 范围内进行 日龄 门化母系 为配套系培育准备亲本系 有的猪育种公司将担 和 膘厚 的测定 但全国须统一 再对实测值进行校正 负专门化品系培育任务的核心群称之为 遗传核心群 核 ④测定设施 须有专用的测定站或测定舍 有条件时全场实 心群 之上还有一个 遗传核心群 按 改良计划 要求 施公母猪的集中性能测定或公猪的集中性能测定 必须配备 不同场的核心群间尚需严格执行场间遗传交流计划 选用其 自动饲槽 测定期间必须实施自由采食 以增加个体间 日 他核心群经测定评估为优秀的种公猪精液 以便增强场间的 关联度 总之 没有核心群 整个繁育体系将成为无本之木 16

151 围 愈大 即参加跨场排队的核心群愈多 选拔出的个体就 愈好 而这需要建立和增强群间的关联才能办到 群间关联 包括 3 类 一是环境关联 系共同环境即处于同一同期群 contemporary group 或 管 理 群 management group 所造成的关联 比如同在中心测定站测定就可使来自各场个 体有一定的可比性 二是遗传关联 即遗传联系 系由血 缘关系造成的关联 如使用共同的 AI 公猪 引种和种猪遗 传交换可使不同群体产生遗传联系 三是信息关联 朱猛进 个人通讯 29 系由亲属信息量增加所造成的关联 动 态评估可随着亲属信息量的增加使育种值的估计准确性得 到提高从而增强可比性 从以上描述不难看出专司人工授精 的公猪站 boar stud 在其中所起的作用 具体讲 1 改良猪群 如果公猪站拥有全国一流公猪 且其精 液使用面广和深入 深入到繁育体系的塔底 则可将优良 基因较快地扩散到各猪群中去 加速猪群改良 加拿大魁 北克省目前约有 9% 的商品猪群用鲜精配种 使得 年 间 的 背 膘 厚 降 低 了 7 mm 达 1 kg 日 龄 提 前 了 26 d Bailey 等 28 [3] 公猪站在改良猪群中的作用还 在于 AI 能大大提高公猪的选择强度 Vangen 等 1997 报道 图3 生猪良种繁育体系组成及遗传改良路径示意图 引自 彭中镇等 29 注 ① 代表信息流 输出数据并反馈遗传评估结果 若在纯繁中 1% 地使用人工授精 可使公猪的选择强度提 高 1 倍 [] 2 增强遗传联系 当一些 AI 公猪在不同猪场都有后 代表输精所用精液的来源 ②核心 代时 那么猪场间遗传联系就开始建立起来了 如果公猪站 群送猪至测定中心测定 场间的精液交流 以及扩繁群 商品群母 布局合理 且各公猪站重视场间遗传联系的建立 较有计划 猪配种所用精液来自公猪站图中未标明 地开展人工授精工作 这种遗传联系就更能增强 因此 公 代表优秀公猪的来源 种猪测定中心在某种程度上可起到比较各核心群种猪 猪站在建立和增强场间遗传联系方面的作用广泛 快速而持 包括公猪站优秀 AI 公猪后裔的作用 并可能选出最好的公 久 是繁育体系其他组成部分无法比拟的 猪供给公猪站 测定中心还可测定核心群不能测定的性状如 各主体部分彼此间的关系与良性互动 实测瘦肉率与肉质等 在增强场间关联性 connectedness 上也将起到重要作用 从图 1 中的遗传改良路径特别是图中各种箭头的说明即 可看出各主体部分彼此间的关系与 良性互动 的大致情况 全国种猪遗传评估中心负责全国种猪场间的联合遗传 1) 公猪站公猪的来源必须来自种猪测定中心和国家核 评估 即各核心群种猪进行跨场估计育种值 跨场排队 跨 心育种群的优秀公猪 以及来自全国排名处于前列的最好公 场比较 遗传评估中心将按照国家种猪遗传评估方案汇集 猪 优秀公猪 存储 处理来自各个核心群 测定中心和公猪站的信息并将 遗传评估结果定期反馈和公布 下面要特别讨论一下公猪站在生猪良种繁育体系中将 会起到的 为其他繁育体系组成部分无法比拟的作用 生猪良种繁育体系实际上是优良基因的聚合 传递 2) 给核心群与国家核心育种群母猪配种应充分利用种 公猪站优秀公猪的精液 以及来自全国排名处于前列的最好 公猪 3) 各核心群与国家核心育种群选送至种猪测定中心的 进行集中测定的小公猪应争取为优秀种猪的后裔 扩散以及这一体系各组成部分互动的体系 良种繁育体系 ) 种猪测定中心 公猪站 核心群与国家核心育种群 建设的主要目的是要采用选择手段改良所有的种用和商品 将相关信息及时提供给全国种猪遗传评估中心进行信息交 用个体 从而最终获得最大的经济效益 其中最有效的办 融与统计处理 遗传评估中心再将处理结果反馈给上述单位 法是要在大范围内依据各个体的基因型或基因型值 育种 使用 实行信息交流与共享 值 进行跨场排队择优选拔种猪特别是种公猪 这种 范 5) 为实现各主体部分间的良性互动 研究如何使各主 17

152 体部分形成利益共同体十分重要 建议在生猪良种繁育体系 猪的良种登记册也相继于 年出版 乳牛 规划或计划中含有这部分内容 包括相关鼓励政策与具体办 品种中 最早的是 1871 年在美国出版的荷斯坦 弗里生品 法 种 在发达国家 目前一般有 8% 以上的农民的奶牛群体 3. 关于种猪登记问题 3..1 种猪登记 品种登记 良种注册 的根本目 参加了品种登记 只要是登记 注册 了的奶牛 其数代祖 的与意义 种值和体型外貌都一目了然 曾获得的奖励也登记在册 我 根本目的在于 1 保护系谱的准确性和保持品种的纯 度 特别是在当前种猪市场出现以假劣种猪冒充纯种与良种 先 可以达到 5 1 代 的名字 注册号 生产状况 育 国早年也曾有某些猪品种开展过品种登记工作 但不规范 持久 的情况下 更具有现实意义 因此在登记过程中一旦发现不 因此 种猪登记首先要做好血统登记 这是品种登记最 纯个体 指育种学上的 或其来源存在疑问的个体 即应将 基础的工作 其次 要做好血统登记中合格种猪的性能登记 其排除在登记之外 2 在血统登记 血统审查工作基础上 工作 所进行的所谓 性能登记 即对纯种个体中的优良及优秀 3..2 种猪登记的对象 个体 即全面符合登记条件的个体 进行注册 其目的则 第一批登记对象除国家核心育种场的优良种猪外 建 在于使注册个体受到应有的重视 得到合理的利用 使核 议将有一定规模的种公猪站的优良 AI 公猪也包括在内 心群的组建与更新计划 动态遗传评估计划 选配计划以 以后再逐步向其他原种猪场和公猪站开放 及 AI 公猪的推广计划等的制定能更加科学 有据地进行 3..3 出台全国统一的种猪登记编号系统 无疑 规范的种猪登记制度的持续开展将有利于该品种的 推行 全国种猪遗传评估方案 试行 中的全国统一 的 15 位种猪个体编号系统 一是为解决耳缺号的重号问 遗传改进 种猪登记如果跟场内种猪性能测定 遗传评估用到的系 题 二是为全国进行种猪遗传评估所必需 由前述可见 种 谱档案与性能记录没有区别 那么就失去了种猪登记的真正 猪个体编号系统与种猪登记编号系统的目的与意义有所不 意义 系谱档案在种猪登记中是非常重要的 而且要比一般 同 个体编号系统并不能代替登记编号系统 但它是申请 系谱更详尽 否则发现不了 假冒 祖先 发现不了祖先中 种猪登记的基本条件之一 因此 获得注册的每一头种猪 是否存在非本品种个体 除有全国统一的 15 位个体编号外 还必须有种猪登记的注 猪的品种登记制度的推行在欧美发达国家已有较长历 册号 国外 境外的经验可供借鉴 美国猪测定与遗传评 史 一直延续至今 经久不衰 此必有个中道理 猪中最早 估 体 系 同 期 群 报 告 STAGES pig contemporary group 出台良种登记并汇集成良种登记册出版的品种是约克夏猪 report 列表中 每头猪的第 1 列为耳缺号 最后一列为 其良种登记册出版于 188 年 杜洛克猪 汉普夏猪 长白 登记号 Registration # 美国猪登记协会出具的登记证 certification of registry 中 其个体资料除含有个体耳缺 号外还有由 8 位数字构成的登记号 我国台湾省的 公猪冷 冻精液工作报告暨推广目录 中每头种公猪除有个体耳号 外 尚有 登录号码 [2,5] 3.. 登记证与品种登记号的应用与作用 例如 1 送交种猪测定中心的送测猪一般应是注册登 记猪的后代 2 种猪展销申请 种猪出售系谱证明 AI 公 猪精液推广名录 公布的种猪遗传评估报告等应填写 品种 登记号 3 性能登记 种猪的比例应是种猪场等级评审 指标之一 逐年统计公布的全国或各地的注册种猪数在 一定程度上和范围内能说明致力于遗传改良工作的成效 也 是对良种规模的一个基本估计 3..5 建议出台 种猪登记管理办法 并修订 种 猪登记技术规范 建议制定既实际可行又与国际接轨的 种猪登记管理办 图 18 人工授精 法 必要时 再制订更具体的 中国 猪品种登记

153 规程 登记管理办法 的内容须有 1 制定与实施全国 项目 生猪良种补贴项目纳入 十二五 畜禽遗传资源保护 统一的种猪登记编号系统 2 设计登记专用的个体系谱表 和利用规划以及畜禽良种工程 十二五 建设规划 实施畜 该表对每个祖先均须详细填写其来源 品种 个体号 登记 禽良种工程项目 争取有关项目进入 十二五 科技支撑计 号与性能 3 全国统一的种猪登记证格式 种猪登记的 划中的项目 基本条件等 3.5 关于地方猪遗传资源的保护与开发利用 当前地方猪遗传资源保护工作面临的紧迫任务是要迅 速采取行动 遏制大量地方良种数量在继续下降的势头 1 及早建立全国地方猪遗传资源动态监测体系和濒危 ６) 在做好地方猪遗传资源保护工作的基础上务必抓好 开发利用工作 以利用促保种 笔者认为 利用主要指杂种 优势利用 特色产品开发以及在地方纯种中培育专门化品 系并参与到配套系培育中去 不宜鼓励通过杂交去培育新品 种 更不宜对新品种命名为 新 地方品种名称 资源预警机制并启动防资源危机较高级别应急响应 ２ 建议每个国家级猪保护品种和国家级猪遗传资源保 种场在近期内参照 陈伟生等主编 中国畜禽遗传资源保护 与利用技术手册 农业部畜牧业司 全国畜牧总站 国家畜 禽遗传资源委员会 中的 猪遗传资源保护技术 规范 试行 制定出各自的保护利用方案 ３ 数量正在减少的地方良种 特别是其中的国家级猪 保护品种 应竭尽全力保存好现有的公猪血统 若公猪血统 数不足 尚须争取项目与经费 尽可能地增加公猪的血统数 参考文献 [1] 彭中镇 刘榜 樊斌 等. 关于保护利用我国地方猪遗传资源 的若干建议 [J]. 猪业科学 [2] 彭中镇 赵书红 刘榜 等. 人工授精与生猪遗传改良 [C]. 第 3 届全国猪人工授精关键技术研讨会 29.5 北京 PPT 挂在中国种猪信息网 第 3 届全国猪人工授精会 PPT 中 [3] Bailey J L, Lessard C. Jacques J, et al. Cryopreservation of b 可试用回交法 [6] 自行创建新血统公猪 但采用回交法须抢 oar semen and its future importance to the industry[j]. Therio 时间 因社会上的地方纯种母猪和其中的血统数可能愈来愈 genology, 28, 7: 少 甚至可能消失 ４ 建议全国畜禽遗传资源委员会和省级相关部门为每 个国家级或省级猪遗传资源及其保种单位确定一名联系人 和一名联络专家 对联系单位定期开展调研与交流 并帮助 提出对策建议 ５ 建议将生猪良种繁育体系中涉及利用地方品种纯繁 培育专门化品系以及参与配套系培育的项目 有关肉品开发 [] Vangen O,Sehested E. Swine production and research in Norway[J]. Pig News and Information, (1):29N-3N. [5] 彭中镇. 再议外种猪的遗传改良 //28 年全国猪联合育种协 作组会议会刊 北京 [6] 彭中镇 曹建华. 保持或增加公猪血统数是保种工作的当务之 急 [J]. 养猪

154 克隆技术在养猪生产中的应用概况 薛振华１ 肖 炜1* 朱振营2 云 鹏1 1.北京市畜牧兽医总站 北京 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所 北京 129 摘 要 克隆技术结合成熟的胚胎生物技术 为家畜的生产性能提高 品种改良和资源保护提供了新的途径 也为大量复制优秀种猪提供了可能 尽管体细胞核移植技术仍有需要完善之处 但许多科研机构和企业还是 对克隆技术的发展充满了信心 并取得了一些突破 结合国内外在该领域的研究和开发现状 对克隆技术在 养猪生产中的应用进行总结 关键词 猪 克隆 细胞核移植 应用 为了提高优秀种畜的利用率 通常采用人工授精 胚胎 移植等技术去实现 2 世纪末出现的克隆技术也是提高优 秀种畜利用率的重要方法之一 自 1997 年克隆羊 Dolly 出生以来 体细胞核移植技术已相继在 17 种动物中获得成 功 而体细胞克隆猪也已在多个国家和地区获得成功 [1-2] 应用体细胞克隆技术 可以使优良个体得以复制 扩大其利 用范围 延长利用时间 1 动物克隆技术及存在的问题 动物克隆技术也被称作细胞核移植技术 广义上讲就是 制作克隆动物的方法 对于高等哺乳动物 比如克隆猪 细 胞核移植技术是最为有效的克隆技术 制作过程就是通过显 微操作技术把细胞核 ( 供体 ) 移入去除遗传物质的成熟卵母 图1 悉心照料克隆猪 细胞 ( 受体 ) 中 细胞核在受体细胞质的支持下 发生发育 25 年 Mir 等 [] 分别对 5 头克隆母猪及其后代在 15 程序重编 形成重组胚 经细胞分裂 分化 并在代孕母猪 周龄和 27 周龄时的体重和血液进行了检测 结果显示 与 子宫内发育成一个新的个体 目前 猪体细胞核移植技术形 对照组相比无显著差异 美国 Via Gen 是专门从事动物克 成了一套比较完善的程序 主要包括 核供体细胞的选择和 隆的科技公司 对 2 头克隆猪后代和普通猪后代的血液临 处理 核受体胞质的准备 重构胚构建 激活和培养 以及 床指标以及生长速度进行同期对比 得出了和 Mir 等相似 胚胎移植等过程 的结论 随后 Via Gen 公司用 头克隆公猪和 3 头普通公 近年来 动物克隆技术取得了一定的进展 获得了多 猪进行种用性能的对照试验 [5] 结果显示 克隆猪和普通猪 种克隆动物 但体细胞核移植技术仍需进一步完善 进而 的精液在精子密度 精子活率 能动性及非正常精子数方面 解决目前存在的克隆效率低 克隆动物生理缺陷和早衰严 均无显著差异 将精液进行人工授精后 克隆猪精液配种 重 X- 染色体灭活不完全 克隆胚胎某些基因的程序化 后产仔率为 73.5% 高于普通猪精液的 62.5% 学者认为产 异常 以及重新编程和基因印记机理不清等问题 仔率的差异 是由于人工授精技术操作和配种母猪的个体差 2 克隆技术在国外养猪生产中的应用 异造成的 美国另一家科技公司 Cyagra 组织科学家对 1 国外将克隆技术用于养猪生产比国内开始的早 美国 头新生克隆猪 6 头断奶克隆仔猪和 18 头成年克隆猪的血 欧盟 新西兰 澳大利亚和加拿大先后将该技术引入到动物 液和尿液进行检测 结果显示 和普通猪相比无显著差异 生产中 尤其是美国和欧盟发达的国家和地区 其研究已经 Via Gen 公司还对克隆猪及其后代的肉质进行了评定 [6] 用 深入到动物源性产品的层面 美国 FDA 和欧盟 EFSA 还出 头克隆公猪的精液给 89 头母猪配种 获得克隆猪后代 22 台了克隆动物肉 奶制品的安全草案 保守地推动该技术在 头 对其进行多达 1 36 项的肉质检测 涵盖了蛋白质构成 养猪产业中的应用和推广 [3] 脂肪酸分析等 结果显示 与对照组肉质相比 其中

155 图2 单胎获得 11 头克隆猪 创下国内单产纪录 图3 源自同一供体的两头克隆猪外貌近乎相同 项指标无显著差异 3 项存在差异 1 项 1 份样品的含锌量 都要经过实验室研究 小范围试验 安全机构评价 中试验 超出了美国农业部规定的正常范畴 证和推广等过程 方可实现商业化和市场化 目前 克隆猪 此外 美国 FDA 历时 6 年 对克隆动物的肉和奶的 和克隆牛的产品已经走出实验室 并通过多个国家安全机构 安全性进行了独立研究 在此期间 科学家检测了 6 多 的评价 现正处于中试验证和推广阶段 随着人们认识的提 头克隆动物 ( 如猪 牛等 ) 的肉和奶 经过化验和对比 高 克隆动物的产品走上货架 完全市场化只是一个时间问 克隆动物食品中维生素 脂肪 蛋白质 氨基酸等的含量 题 与普通动物制品并无两样 而且对实验鼠进行了饲喂试验.1 产品在养殖业中已经商业化 使用克隆动物食品喂养长大的实验鼠生命体征正常 且无 在养殖行业中 利用克隆技术生产高附加值的动物 不良反应 已经实现 截至到去年 美国 2 家最大的克隆科技公司 3 克隆技术在国内养猪生产中的应用 Via Gen 和 Trans Ova Genetics 已经为美国的饲养者们培育 [7] 中国已有数家实验室具备了克隆动物的能力 并使克隆 了 6 多头克隆动物 但还有很多养殖场的订单无法得到满 动物健康存活下来 中国农业大学李宁教授已于 25 年成 足 这些动物绝大部分都是优良个体的 复制品 作为相 功培养出我国首例克隆猪 这意味着我国已经掌握了制作 同基因型的种畜来使用 用以增加养殖场顶端高质量种畜数 克隆猪的相关技术 但是将克隆技术运用到实际生产却进 量 进而提高中下游生产链中商品猪的健康程度 生产性能 展缓慢 和肉质品质 从而获得较大的生产效益 28 年 5 月 中国农业大学李宁教授的实验室和温氏.2 克隆动物源性食品有待推广 集团合作 在温氏集团原种猪场获得 5 头克隆猪 至此中国 随着美国 欧盟和日本等国的安全报告的公布 [3,7] 克 的养猪业才敲开了克隆技术的大门 同年 8 月 中国科学院 隆动物源性食品的安全性已明朗化 但是 克隆动物食品的 院士杨焕明教授在深圳市种猪场获得 8 头手工克隆猪 并极 安全性与消费者的接受度不一定能画上等号 美国皮尤食物 力推动生产大量优质 廉价的猪肉食品 29 至 21 年 和生物技术项目组织的调查显示 6% 的欧洲消费者对该类 北京市畜牧兽医总站与中国农科院北京畜牧兽医研究所合 食品表示不安和担心 6% 的美国消费者表示不适应 食品 作 成功克隆出 53 头种猪 此项研究的目的就是利用克隆 供应商考虑到消费者的利益和接受度 以及自身利益 表示 技术复制优秀种公猪 再结合人工授精技术来扩大优秀种猪 不会在短期内使用该类产品 克隆科技公司认为普通消费者 的种用价值 以上工作得益于科研机构 技术推广部门和生 的担忧源自对该类食品生产链条的不了解 由于克隆动物生 产企业的合作 实现了科研和实际生产的结合 我国已迈出 产成本高 每头售价约 1.5 万美元左右 直接用其作为食品 应用克隆技术的第 1 步 但是总的来讲仍是起步阶段 真正 太过 奢侈 生产者 难以承受 消费者也 难以接受 把克隆技术引入到养猪生产 为广大养猪者服务 还需要更 直接上市的该类产品大都是用传统手段培育出的克隆动物 多的技术资料和成果来支持 的后代及其后代的产品 消费者并不能直接接触到克隆动物 克隆动物及其产品的商业化 本身 克隆动物的产品如同其他的生物技术创造的产品一样 使克隆动物源性食品商业化还需要时间 一方面消费者 151

156 和市场要认识进入市场的主要是用克隆动物的后代制造的 23. 产品 而非用克隆动物本身制造的产品 另一方面 推广的 [3] Scientific Opinion of the Scientific Committee Food 力度要加大 因为从用克隆技术培育优良动物品种到它们大 Safety, Animal Health and Welfare and Environmental 批量繁殖后代 这一过程可能需要几年的时间 Impact of Animals derived from Cloning by Somatic 5 展望 Cell Nucleus Transfer (SCNT) and their Offspring and 在养猪生产上 获得饲料转化效率高 肉质好 产肉量 Products Obtained from those Animals (Question No 高 生产周期短 繁殖力强且具有抗病性的种猪 始终是养 EFSA-Q-27-92)[J].The EFSA Journal 28 6:1-9. 猪生产者的目的 克隆技术不仅可以对具备上述优点的个体 [] Bashir M, Gretchen Z, Greg S, et al. Progeny of 进行复制和扩群 而且结合遗传修饰技术 还可以在传统遗 Somatic Cell Nuclear Transfer (SCNT) Pig Clones Are 传育种技术的基础上有目的的培育新的品种 对于中国的养 Phenotypically Similar to Non-Cloned Pigs[J]. Clone and 猪业 通过克隆技术获得高品质种公猪 可以打破养猪发达 Stem Cells,25,2(7): 国家对顶级种猪市场的垄断 突破种猪引进的贸易壁垒 还 [5] Williams N, Walker S, Reeves D, et al. A Comparison 可以降低种猪选育成本和生猪养殖成本 提高商品猪生产性 of Reproductive Characteristics of Boars Generated 能和肉质品质 从而改善养猪生产链条 全面提高养猪效益 by Somatic Cell Nuclear Transfer to Highly Related 相信随着克隆效率的不断提高 克隆技术将更好的为养猪生 Conventionally Produced Boars[J]. Clone and Stem Cells, 产服务 26,3(8): [6] Walker S, Christenson R, Ruiz R, et al. Comparison 参考文献 of meat composition from offspring of cloned and [1] Polejaeva I, Chen S, Vaught T, et al. Cloned Pigs conventionally produced boars[j]. Theriogenology,27,67 Produced by Nuclear Transfer from Adult Somatic Cells[J].Nature,2,7(68):86-9. : [7] Animal Cloning: A Draft Risk Assessment. Center for [2] Vajta G, Zhang Y, Machaty Z. Somatic Cell Nuclear Veterinary MedicineU[S]. Food and Drug Administration Transfer in Pigs: Recent Achievements and Future Department of Health and Human Services 75 Standish Possibilities[J].Reprod Fertile and develop, 27,19(2):3- Place Rockville, MD

157 猪印记基因的研究现状及其应用前景 周泉勇1 唐艳强1 赵书红2 1.江西省农业科学院畜牧兽医研究所 江西 南昌 华中农业大学动物科技学院 湖北 武汉 37 摘 要 印记基因是违背孟德尔遗传规律的一类特殊存在基因群 其在猪的研究与应用 正在成为家畜发育遗 传学研究的一个重要内容 本文介绍了印记基因的概念 发现过程 特征 建立 维持和印记机制 并对其在猪 中的研究现状和应用前景进行了描述 关键词 猪 印记基因 研究进展 1 印记基因的概念及其发现过程 记基因就位于该区域 2 DNA 复制的不同步性 印记亲 基因印记是指来自父方和母方的等位基因在通过精子 源等位基因的复制是不同步的 细胞周期中的复制时间常 和卵子传递给子代时发生了甲基化 蛋白乙酰化等修饰 与基因的表达水平有关 早复制的基因有活性 但印记基 从而导致只转录表达亲本一方的遗传信息 而另一方处于 因不遵循这一原则 即使有的基因是母源表达基因 但其 关闭状态 其中 父系来源等位基因表达 母系来源等位 可能父源基因复制较早 3 表达的时空特异性 时间特 基因不表达的基因称为母系印记基因 反之则称为父系印 异性是指一个基因的印记情况随着动物发育时期的变化而 记基因 Helen Crouse 于 196 年发现在 Sciara 昆虫中的 改变 空间特异性是指该基因的印记情况存在着组织特异 X 染色体双链中 母系等位基因有表达活性 而父系等位 性 即一个基因在有的组织中是印记表达 但在其他的组 基因则处于静止状态 不具有表达活性 这是关于基因组 织上又呈现非印记 例如 位于小鼠 15 号染色体的母系印 印记现象的最早报道 而哺乳动物基因组印记现象是在 2 记基因 Slc38a 在所有组织均表达 但是在肝脏和肠并 世纪 8 年代对小鼠进行细胞核移植时发现的 McGrath 不表现印记 真兽亚纲哺乳动物中的保守性 大部分印 等在进行细胞核移植实验时 发现两原核分别来自父和母 记基因在哺乳动物中具有相同的印记状况 例如 母系印 方是必须的 如果两原核同时来自父方或者同时来自母方 记基因 MEST/PEG1 已经验证了该基因的同源基因在人 这种组合胚初始阶段可以发育 但是后期会死亡 不能形 小鼠 大鼠 牛 羊中都表现印记 5 编码 RNAs 许多 成一个正常的个体 至 1991 年 DeChiara 等人在小鼠中 印记基因根本不编码蛋白质 只编码 RNAs 如在小鼠 12 通过基因敲除技术发现了第 1 个内源性印记基因 胰岛素 号染色体上就有包括印记基因 Gtl2 在内的一系列的不编码 生 长 因 子 Ⅱ IGF2 该 基 因 为 母 系 印 记 基 因 同 年 蛋白质的基因 6 印记基因都有一个或几个印记中心 IC 父系印记基因胰岛素生长因子Ⅱ受体 IGF2R 和 H19 基 imprinting center 即差异甲基化区 DMR differentia [1] 因同时在小鼠上被发现 2 [2-3] lly methyiated region 在印记基因的 DMR 内 有富含 印记基因的特征 CpG 的 CpG 岛 (CpG island) CpG 岛中胞嘧啶的甲基化 印记基因是违背孟德尔遗传规律的一类特殊存在基 在印记的维持中起重要作用 是印记所必需的 因 群 它 们 有 着 一 些 特 殊 的 特 征 1 成 簇 分 布 在 小 鼠 中 目 前 检 测 发 现 的 印 记 基 因 主 要 分 布 在 个体发育过程中印记基因的建立和维持 哺乳动物基因的印记过程包括印记去除 印记形成和 和 X 染 色 体 上 它 们 在 基 因 组 中 印记维持 3 个过程 印记的去除和形成均发生在生殖细胞 的 的 分 布 不 是 单 一 基 因 分 布 而 是 具 有 一 定 的 群 聚 性 发育成精子或者卵子的时候 对大多数印记基因而言 在 倾 向 例 如 在 小 鼠 7 号 染 色 体 存 在 3 个 印 记 基 因 富 消除的过程中 生殖细胞基因组有明显的去甲基化过程 [] 集 区 PEG3 印 记 区 域 在 该 区 域 内 主 要 有 印 记 基 因 这个过程在小鼠妊娠期间完成 [5] 但关于这个时期的去甲 Zim1, Zim2, Zim3, PEG3, Usp29 和 Zfp26 中 央 印 记 基化过程是主动完成还是被动完成 现有研究还不清楚 区 域 在 该 区 域 内 主 要 有 Snrpn, Magel2 和 Ndn 等 9 个 基因组去甲基化在这个时期完成非常重要 因为这说明从 印记基因 IGF2 印记区域 IGF2, H19 和 Ins2 等 13 个印 亲本遗传的印记情况对子代是没有影响的 印记基因甲基 153

158 化建立的完成时间在精细胞和卵母细胞中不具有一致性 精细胞甲基化的建立是在减数分裂时期前完成的 [6-7] 同时 是依赖于阻遏因子 / 边界元件的 如 CTCF 因子 它是 CCCTC 序列特异性结合因子 其在父源表达的 IGF2 基 与精细胞不同的是 卵母细胞在常染色体和 X 染色体上的 因和与其交互印记的母源表达 H19 基因中研究得较为深 印记甲基化建立时间基本上是一致的 在生殖细胞甲基化 入 IGF2/H19 中 印记中心位于 H19 和 IGF2 之间 为 建立的过程中 哪个酶起决定作用研究的尚不是很清楚 一长约 2 kb 的片段 在母源等位基因中 印记中心没有 Dnmt1 Dnmt3a 和 Dnmt3b 均有可能对这一过程起着重 被甲基化 边界元件 CTCF 与之结合 阻止了增强子 E 与 要作用 比较有趣的是 在生殖细胞时期 有的印记基因 IGF2 启动子的作用 增强子与 H19 启动子互作 使 IGF2 甲基化的建立并不发生 而是在受精后直接对单等位基因 转录受抑而 H19 被转录 在父源等位基因上 印记中心被 去甲基化或者甲基化来完成 同时 在受精后 基因组 甲基化 CTCF 因不能与之结合而使增强子先作用于 IGF2 有一个重新去甲基化和在附植时重新甲基化的过程 这 基因 于是 IGF2 开始转录而 H19 被抑制 个时期的去甲基化过程是主动和被动同时参与完成的 不. 沉默 [8] [9] 同的是 父系基因组通过主动机制在受精后几小时迅速完 有些印记基因的 DMR 内 活性等位基因存在高度甲 成去甲基化过程 这个时候双亲的细胞核还是呈现分开状 基化情况 于是 人们推测在这段高甲基化区域内含有沉 态 [1-11] 而母系基因组则是由于在 DNA 复制的过程中不能 默子 沉默子的高甲基化导致其失活从而调控目的基因的 维持甲基化而被动完成去甲基化 [12] 在基因组甲基化完全 表达 这个假设在 IGF2 的 DMR1 被验证 该区域内含有 完成后 一直到下一轮的生殖细胞的产生 印记甲基化的 一个沉默子 当父系来源的 DMR1 高甲基化时 IGF2 正 维持均由 Dnmt1 完成 常父系表达 而当敲除 DMR1 时 母系来源的 IGF2 也会 基因印记与甲基化 表达 现有研究表明印记基因的形成与染色质结构以及其他 5 的修饰有关 例如甲基化修饰 组蛋白修饰等 对于组蛋 印记基因对胎儿胎盘生长发育的影响 印记基因对哺乳类动物胎盘和胚胎的发育起着极为重 白修饰和染色质结构在基因印记中起的作用还没有直接的 要的作用 在小鼠胚胎实验中 McGrath 和 Surani 198 证据 但 DNA 甲基化在印记维持中的重要作用已经从遗 等利用核移植技术使小鼠受精卵单独从母源或父源获得 2 传学上得到了证明 [13] 套染色体 形成单亲二倍体受精卵 并使其在子宫内继续.1 启动子甲基化 发育 分别称之为雌核发育和雄核发育 这种单亲二倍体 启动子甲基化是最常见的导致单等位基因沉默的方式 受精卵均不能完成发育的全过程 雄核发育者胎盘发育相 印记基因的启动子富含 CpG 岛 而且其中的一个等位基因 对良好, 而胚胎生长不良 雌核发育者则与之相反 胚胎 中常常高度甲基化 当 CpG 二核苷酸甲基化不足时 启动 生长良好 胎盘发育较差 于是他们推测 父系来源基因 子仍能与转录因子相结合 使其转录正常进行 而 CpG 二 促进胎盘生长 而母系来源基因则有利于胚胎生长 两者 核苷酸高甲基化时 则抑制了转录因子的结合 使其转录 在胚胎正常发育过程中均起着极为重要的作用 基于此 受抑 Moore and Haig 于 1991 年提出了营养冲突假说理论 该.2 反义转录本 假说认为印记的产生是亲本之间争夺营养的结果 即在胎 约有 15% 的印记基因其印记机制与反义转录本相关 生动物的不同胎次之间 母亲与每个子女的关系相同 而 大多数的反义转录本是非编码蛋白基因 主要起调控作 父亲可能只与其中一个有关 因此 父源基因促使自己后 用 其调控基因印记研究的比较清楚的是 IGFR2 Air 和 代尽量多地吸收母亲的营养 而母亲为了其他后代的生长 KCNQ1 Kcnq1ot1 两基因 反义转录本起源于对应顺式 或自身以后的生殖 则尽量减少某个个体过多的吸收营 基因的内含子 其启动子区域富含 CpG 并且其中一个等 养 [1] Beechey 等 1997 通过染色体易位株小鼠的试验 位基因高甲基化 其单等位基因表达会导致顺式基因对应的 研究进一步证实了该理论 通过选择性繁育 他们筛选了 等位基因不表达 缺失反义转录本会导致顺式基因印记的失 不同染色体 和 17 上印记基因的单亲 败 关于反义转录本的表达是如何干扰顺式基因的转录现在 源 性 二 倍 体 uniparentaldisomy,upd 发 现 父 源 性 的 还不是很清楚 UPDs 如小鼠 11 号染色体的 UPDs 可以促进胚胎的生.3 边界元件 长 ; 而母源性 UPDs 则抑制胚胎生长 同时 因为多数的 有些印记基因 DMR ( 差异甲基化区域 ) 的甲基化会 诱 导 自 身 等 位 基 因 的 活 化 这 种 DMR 诱 导 作 用 的 发 挥 15 UPD 最后会导致胚胎死亡 也说明了印记基因对于胚胎正 常发育是必须的 [15]

159 6 猪中印记基因的研究现状及其在育种中的应用 印 记 基 因 主 要 存 在 于 人 类 和 真 哺 乳 动 物 内 据 预 良的新工具 今后畜牧业的杂交育种方案中也要考虑基因 的印记效应 测 印 记 基 因 总 数 为 2 个 左 右 到 目 前 为 止 在 小 鼠 和人中检测已发现了 7 多个 在猪中有研究报道的仅 18 参考文献 个 分 别 为 IGF2 IGF2R H19 IGF2-AS PLAGL1 [1] DeChiara T M, Robertson E J, Efstratiadis A. Parental PEG1 PPP1R9A XIST PEG1 NAP1L5 PEG3 imprinting of the mouse insulin-like growth factor II ASCL2 PEG5 DIRAS3 DLX5 INPP5F SLC38a gene[j]. Cell, 1991, 6: 和 GATM 基因 和人 小鼠中的研究相比较 印记基因 [2] Bartolomei M S, Zemel S, Tilghman S M. Parental 在猪中的研究尚集中在印记验证 不同猪种和组织的差异 imprinting of the mouse H19 gene[j]. Nature, 1991, 表达及 SNP 关联性分析 对其功能和发生机制的研究尚不 351: 够完善 但从近几年的文献报道来看 人们对猪基因组印 [3] Barlow D P, Stöger R, Herrmann B G, Saito K, Schweifer N. The mouse insulin-like growth factor 记的研究已逐步展开并将更加深入 印记基因大多是调控动物生长发育的主基因 对动 物胚胎的早期发育与出生后的生长都有重要影响 例如 type-2 receptor is imprinted and closely linked to the Tme locus[j]. Nature, 1991, 39:8-87. Diras3 基因能够抑制胎儿生长 通过转基因研究发现 该 [] Brandeis M, Kafri T, Ariel M, Chaillet J R, McCarrey Plagl1 基因 J, Razin A, Cedar H. The ontogeny of allele-specific 编码一个生长抑制蛋白 它能够导致生长迟缓和新生儿短 methylation associated with imprinted genes in the 暂性糖尿病的生长障碍 mouse[j]. EMBO J, 1993, 12: 基因的不正常表达会导致小身材鼠的产生 [17] [16] 同时 该基因能够调控一个控 制胎儿生长的印记基因网络 [18] DCN 基因在胎盘上高表 [5] Tada M, Tada T, Lefebvre L, Barton S C, Surani M A. 达 是一个胎盘生长的重要候选基因 [19] 由于人 小鼠和 Embryonic germ cells induce epigenetic reprogramming 猪中印记基因的保守性 因此 这些基因对猪的胎盘发育 of somatic nucleus in hybrid cells[j].embo J, 1997, 和 或 胎儿及其出生后的生长发育同样具有重要的调控 16: 作用 因此 印记基因能否作为动物生产性能的分子标记 也逐渐成为人们研究的主要目的之一 [6] Ueda T, Abe K, Miura A, Yuzuriha M, Zubair M, Noguchi M, Niwa K, Kawase Y, Kono T, Matsuda 此外 由于印记基因单亲表达的特性 可以解释过去 Y, Fujimoto H, Shibata H, Hayashizaki Y. The 许多无法解释的遗传现象 在育种过程中 如果有些与生 paternal methylation imprint of the mouse H19 locus 产性状呈重要相关的基因为印记基因 则遵循传统的遗传 is acquired in the gonocyte stage during foetal testis 学规律应用这些基因对性状的改良将不能起到预期的作 development[j]. Genes Cells, 2, 5: 用 同时 在猪育种工作中亲本的选择上 不必为了更好 [7] Davis T L, Yang GJ, McCarrey JR, Bartolomei MS. 的遗传稳定 从而一味地追求纯合基因型 可以根据该基 The H19 methylation imprint is erased and reestablished 因的表达情况 仅仅考虑父本或者母本 这样在亲本的选 differentially on the parental alleles during male germ 择上具有更加宽广的来源 可以更好的融合更多的优良性 cell development[j]. Hum. Mol. Genet, 2, 9:2885- 状基因 例如 关于养猪业中印记基因的利用 荷兰的猪 289. 育种者就提出 如果找到控制瘦肉率或肉质相关的母系印 [8] Robertson K D, Uzvolgyi E, Liang G, Talmadge C, 记基因 即仅父亲的等位基因表达 则后代的产肉性状在 Sumegi J, Gonzales F A, Jones P A. The human DNA 很大程度上取决于父本 那么用于生产商品猪的繁殖母猪 methyltransferases (DNMTs) 1, 3a and 3b: coordinate 可以降低对其背膘厚等胴体性状的要求 如可以应用产仔 mrna expression in normal tissues and overexpression 数高的中国猪作为母本而不降低后代的胴体品质 这将大 in tumors[j]. Nucleic Acids Res, 1999, 27: 大提高养猪业的经济效益 这些都是对传统遗传育种理论 [9] Monk M, Boubelik M, Lehnert S. Temporal and 的一个扩展和补充 对猪育种工作中选择有利性状 淘汰 regional changes in DNA methylation in the embryonic, 不利性状等有一定的指导意义和参考价值 extraembryonic and germ cell lineages during mouse 总之 猪印记基因的研究与应用 正在成为家畜发育 遗传学研究的一个重要内容 而且极有希望成为猪遗传改 embryo development[j]. Development, 1987, 99:

160 [1] O swald J, Engemann S, Lane N, Mayer W, Olek [16] Xu F, Xia W, Luo R Z, Peng H, Zhao S, Dai J, A, Fundele R, Dean W, Reik W, Walter J. Active Long Y, Zou L, Le W, Liu J, Parlow A F, Hung M C, demethylation of the paternal genome in the mouse Bast R C Jr. The human ARHI tumor suppressor gene zygote[j]. Curr. Biol, 2, 1: inhibits lactation and growth in transgenic mice[j]. [11] M ayer W, Niveleau A, Walter J, Fundele R, Haaf T. Demethylation of the zygotic paternal genome[j]. Nature, 2, 3: [12] R ougier N, Bourc'his D, Gomes D M, Niveleau A, Plachot M, Pàldi A, Viegas-Péquignot E. Cancer Res, 2, 6: [17] T emple I K, James R S, Crolla J A, Sitch F L, Jacobs P A, Howell W M, Betts P, Baum J D, Shield J P. An imprinted gene(s) for diabetes[j]. Nat Genet, 1995, 9: Chromosome methylation patterns during mammalian [18] K as K, Voz M, Roijer E, Astrom A K, Meyen E, preimplantation development[j]. Genes Dev, 1998, Stenman G, Van de Ven W. Promoter swapping 12: between the genes for a novel zinc finger protein and [13] Li E, Beard C, Jaenisch R. Role for DNA methylation in genomic imprinting[j]. Nature, 1993, 366(653): bcatenin in pleiomorphic adenomas with t(3;8)(p21;q12) translocations[j]. Nat Genet, 1997, 15: [19] M izuno Y, Sotomaru Y, Katsuzawa Y, Kono T, [1] Moore T, Haig D. Genomic imprinting in mammalian Meguro M, Oshimura M, Kawai J, Tomaru Y, development: a parental tug-of-war[j]. Trends Genet, Kiyosawa H, Nikaido I, Amanuma H, Hayashizaki Y, 1991, 7: 5-9. Okazaki Y. Asb, Ata3, and DCN are novel imprinted [15] Beechey C V, Cattanach B M. Genetic and physical genes identified by high-throughput screening using imprinting map of the mouse[j]. Mouse Genome, 1997, RIKEN cdna microarray[j]. Biochem Biophys Res 95:1-15. Commun, 22, 29:

161 猪人工授精技术和生猪遗传改良 朱健彬1 张守全2* 1.惠州市源茵畜牧科技有限公司 广东 惠州 华南农业大学动物科学院 广东 广州 5162 猪人工授精技术是在人工条件下采集种公猪精液 经过 品质检验 稀释保存等适当的处理后 再用器械将合格的精 液输送到发情母猪生殖道内 使其受胎的配种方法 在 2 世纪末世界范围内接近 5% 的母猪都是通过人工授精受孕 的 且这个比例还在逐年上升 在一些欧洲国家 如比利时 意大利 荷兰 挪威和西班牙 超过 8% 的母猪是人工授精 在北美 美国 加拿大和墨西哥 和巴西的大型农场这个比 例已经接近 75% 图1 我国的猪人工授精技术 最早是 195 年在广西桂县开 展的猪人工授精试验 在 1997 年 12 月份一批广东 广西等 猪人工授精 遗传进展的扩散速度 省区的专业技术人员赴美国考察和学习猪场人工授精技术 3 提高公猪的选择强度 由于种公猪的需要量大幅度 之后 以广东等为基地 人工授精技术逐步被集约化大型养 减少 从而使公猪的选留比例大幅度下降 自然交配下种猪 猪企业所认可和使用 并呈现出良好的发展趋势 [1] 21 世 核心群中的公母比例一般为 而在人工授精下 纪初 该项技术已得到广泛的推广应用 全国已建起了多家 这个比例至少下降到 1 1 假设每头母猪每年产 2 窝 商业性人工授精站 国家于 27 年正式启动实施 生猪良 从每窝仔猪中选择 1 头公猪参加性能测定 从参加测定的公 种补贴 政策以来 良种补贴政策得到有效地落实 政策的 猪中选留种公猪 留种率可达到.25% 扶持力度也不断地加大 补贴资金由原来的 3.6 亿元增加至 提高选择的准确性 这是由 2 个方面的因素造成的 6.5 亿元 补贴项目县由 2 个增加至 个 据初步统计 一方面 由于公猪的需要量减少 在保证一定选择强度的 全国生猪人工授精率提高了 8 1 个百分点 改良商品猪 前提下 可适当减少公猪的测定数量 但测定更为细致和 出栏日龄提前 5 1 d 共带动全国农民增收约 23 亿元 准确 另一方面 人工授精使每头公猪有更多的半同胞和 1 猪人工授精技术是生猪遗传改良的主要措施 后裔 在进行公猪遗传评估时可利用的信息量大大增加 选种是遗传改良 育种 的核心技术 而选种最重要的 提高了遗传评估的可靠性 就是选育优秀公猪 要实现公猪对猪群的快速改良 生产水 5 通过控制公猪的使用建立一个均衡的群体结构 提 平的整体提升必须依靠人工授精的技术优势 加拿大魁北克 高遗传参数及育种值估计效率 和本交相比 5% 1% 省约有 9% 的商品猪群用人工授精配种 使得 人 工 授 精 分 别 使 1 年 选 择 的 累 积 遗 传 进 展 提 高 1% 及 年间背膘厚降低了 7 mm 达 1 kg 日龄提前了 26 d 人 17%[2] 工授精对猪育种的重要性主要表现在以下几个方面 2 猪人工授精是联合育种的重要组成 1 通过保存优良种公猪或濒危品种公猪的精液 使公 联合育种是现代育种的精髓 也是我国猪育种的必然发 猪的使用不受其生理年限的限制 实现遗传资源的保存 尤 展方向 [3-5] 然而 实现联合育种的前提条件是一定程度的 其对于我国众多地方品种的保种工作具有重大意义 场间关联性 只有当不同场间具有一定程度关联时 场间的 2 最大限度发挥优秀种公猪的遗传优势 首先 由于 个体才具有可比性 场间关联性越高 进行场间个体比较的 人工授精技术的不断发展 可使公猪的使用较少地受到时间 准确性也越高 Mathur 等对参与加拿大猪改良计划猪群的 和地点的限制 公猪跨群或跨地区使用更为方便 经济 安 研究表明 一个猪群的平均关联度 ( 畜群间的关联度定义为 全 便于引入外源群体的基因 使优秀公猪的影响范围得到 畜群效应的相关系数 ) 应大于 3% 对 2 个有较多遗传物质 扩大 其次 人工授精能最大限度利用优秀公猪 让它们生 交换的猪群 关联度应大于 5%[6] 场间关联性由遗传关联 产更多的后代 提高其优良基因在群体中的频率 从而加快 性和环境关联性两部分构成 由于测定站的规模一般较小 157

162 通过测定站产生的场间关联是很有限的 因此 场间关联性 遗传特性 以及进行血统更新 引种 降低生产成本等方 主要是遗传关联性 而遗传关联主要靠种公猪的跨场使用产 面都有重要的意义 现有的研究大多集中在 2 个方面 一 生 由于人工授精是公猪跨场使用的主要途径 因此 人工 是对冷冻保护剂和冷冻方法进行细致的筛选与优化 二是 授精就成为建立和增加场间遗传关联性的关键 具体措施包 探索冷冻对精子损伤的机理 目前 世界上商品化冷冻精 括 ①使用具有良好遗传联系的 AI 公猪 ②从具有良好遗 液只占全球人工授精的 1% 左右 传联系的猪群中选择 AI 公猪 ③从具有良好遗传联系的公 3.2 宫内授精 猪获取足够比例的后代 由于冷冻 - 解冻精液的品质下降 猪冷冻精液人工授 人工授精技术的广泛使用 使场间可通过种猪精液进 精的剂量一般是常规人工授精的 2 倍 但受孕率与分娩率仍 行遗传交流 增加场间的遗传联系 为区域性或全国性联 然很低 因此 猪冷冻精液的有效推广和应用需要在常规授 合育种开辟新的途径 正如 Haley 所指出的那样 随着人 精方式上有所改进 发展低剂量人工输精技术是解决该问题 工授精提供越来越多的畜群间遗传联系的信息 国家的和 的关键 公司的育种规划可以在未来得到融合 评估将采用相近 [7] 的方法集中进行 数据来源是多渠道的 包括了育种场 商品场和屠宰场 例如 丹麦 9% 95% 的母猪采用人工 授精 通过人工授精 中心测定站及各育种群之间建立了 遗传联系 养猪业发达国家的先进经验无不例外的说明着联合育 种的组织形式应该是将数量众多的种猪场联合起来 成立 各品种或者多品种区域性或全国性的猪联合育种组 各场 之间通过人工授精建立遗传联系 采用分散核心群育种的 育种结构 即该育种结构由各种猪场组成的核心群 繁殖 图2 一种宫腔内人工授精输精管 DeepgoldenpigTM 宫 腔 内 人 工 授 精 intrauterine insemination, IUI 群 商品群 测定站 种公猪站 屠宰场组成 为缩短改 简 称 为 宫 内 授 精 也 称 为 子 宫 颈 后 人 工 授 精 post- 良时距 可采用开放式核心群育种并调整育种结构的层次 cervical artificial insemination, post-cai 是 在 常 规 输 和各层次的规模 精管的基础上 内部加有一支细的和半软的 长度大约 猪人工授精技术可建立场间遗传联系 是实现联合育种 的关键环节 并且将中心测定站 国家遗传评估中心和各核 15 2 cm 的导管 能够延伸以通过子宫颈进入子宫体 使得精液不用经过子宫颈直接到达子宫 [8] 心育种群有机地联系在一起 是我国联合育种体系必不可少 Waston 等 人 于 22 年 在 英 国 通 过 对 3 2 头 经 产 的组成部分 同时也是实现场间遗传交流 扩大遗传改良效 母猪的大型商用性输精实验发现 使用宫腔内人工授精 果的重要手段 人工授精在联合育种的各个方面都起着重要 每 次 输 精 精 子 数 为 1 亿 的 实 验 组 分 娩 率 为 88.7% 作用 可以说 没有人工授精 联合育种的优越性就难以体 窝 产 仔 数 为 12.1 头 与 常 规 的 宫 颈 授 精 的 分 娩 率 现 没有人工授精 就无法开展实质的联合育种 91.3% 窝产仔数 12.5 头相比无显著差异 [9] 这个结果 3 猪人工授精技术的新进展 与 Rozebcom 等人在美国研究报道一致 现代育种对人工授精技术提出了越来越高的要求 同时 试更少输精数量时 即每次输精 5 亿精子 分娩率和窝产 也促进了该技术的不断发展 反过来 人工授精技术的进步 仔数明显降低 这些结果与 Roberts 于 25 年在匈牙利和 同样能带来遗传改良的巨大效果 克罗地亚所作研究的结果相似 对 头经产母猪分别 3.1 猪精液冷冻保存 使用 1 亿精子宫内授精和 3 亿精子宫颈授精 尽管两者 [1] 然而 当尝 猪精液冷冻保存是人工授精技术的一项重大革新 解 在受孕率和分娩率上相似 但宫内授精的母猪窝产仔数却 决了精液长期保存的问题 使精液不受时间 地域和种猪 明显减少 ( 前者 1.2 头 后者 12.3 头 ) 将精子输入量减 生命的限制 极大的提高了优良公猪的利用率 加速了品 少到 5 亿个时 母猪的分娩率和窝产仔数 78% 9. 头 种的育成和改良 精液冷冻保存使育种场可对正处于后裔 均发生明显的下降 [11] 测定期间的种公猪进行精液的采集与保存 并可及时淘汰 3.3 子宫深部授精 完成采精任务的公猪 缩短种猪生产的世代间隔 提高遗 传改良进程 同时 对于保留和恢复某一品种或个体优良 158 子 宫 深 部 授 精 deep intrauterine insemination DUI,DUI 输精管是由改良的柔韧纤维内窥镜管内置入常

163 之为精子介导的转基因法 (SMGT)[16] Sato 等通过直接注 射外源 DNA 到小鼠睾丸内完成转基因 发展了一种新的转 基因途径 即睾丸介导的转基因法 (TMGT)[17] 以后关于利 用精子载体法进行转基因研究的成功多有报道 并有多种 动物获得了转基因后代 到 2 年 根据 Gandolfi 的统 计 已经有 2 多种动物 ( 包括鱼类 鸟类 哺乳动物及 人 ) 的精子被证明具备吸附整合外源基因的能力 [18] 本课 题组已采用精子介导方法 获得数头携带 GFP 基因的转 基因猪 图3 猪的人工授精体系在欧美国家已经比较完善 世界上 子宫深部授精输精管 畜牧业发达国家在种猪生产管理方面已为我们提供了许多 规的输精管而制成的 这种 DUI 输精管长 1.8 m 外周直 可以借鉴的经验 社会化的公猪站 人工授精站 是人工 径 mm 内圈直径 1.8 mm 能够顺着子宫腔前进 可将 授精体系的核心 必须完善区域性种公猪站建设 依托国 精子输送子宫角近端 1/3 处 家生猪良种补贴项目 加快普及猪人工授精技术 将优良 Vazquez 等在西班牙对 329 只经产母猪使用子宫深部 种猪精液迅速推广应用到生产中 实现社会化的遗传改良 [12] 授精 (1.5 亿精子 / 次 )1 次 2 次或 3 次以及宫颈授精 (3 推动国家联合育种的实施和实践 亿 精 子 / 次 ) 产 仔 率 为 83.3% 87.3% 窝 产 仔 数 在 参考文献 头 虽然 2 种授精方式间无统计差异 子宫深 [1] 张守全. 美国猪人工授精技术应用现状及启示 [J]. 黑龙江动物 部授精的窝产仔数总是最低的 [13] Day 等在美国对 15 头 经产母猪分别采用 2 次子宫深部授精 1.5 亿精子或者宫颈 繁殖 (2) 1-. [2] 王爱国 李力 梅克义 等. 加强联合育种提高种猪质量 [J]. 授精 3 亿精子 虽然在产仔率 ( 子宫深部授精 83% 宫颈 授精 9%) 上没有差异 但子宫深部授精的母猪每胎产仔 中国畜牧杂志 2 (3):5-7. [3] 陈瑶生. 中国的猪育种研究现状与发展趋势 [J]. 华南农业大学 猪数较少 ( 前者 1.5 头 后者 12.9 头 ) 与宫颈授精组差 学报 异显著 P <.5 繁殖性能上的下降可以通过增加每 [] Chesnais J P. The Canadian swine improvement 次授精的精子数量克服 子宫深部输精出现的单侧受精现 system[c]. Ontario Canada Proc NSIF Conference 象明显高于常规的人工授精 因此 在实际生产中应用该 Ottawa [1] 技术时必须加以重视 [5] Rydhmer L. Swine breeding programmes in the Nordic 3. 精子介导的转基因技术 countries[c]. Ontario Canada Proc NSIF Conference 精 子 介 导 的 转 基 因 技 术 (sperm-mediated gene Ottawa 25. transfer SMGT) 即精子载体法 是将精子适当处理 使 [6] Mathur P K Sullivan B Chesnais J. A practical method 其携带外源目的 DNA 片段 通过受精把外源目的片段导入 for estimating degree of connectedness in large livestock 动物胚胎 从而使外源基因进入子代的基因组中 由于精子 populations with application to Canadian swine herds[m]. 载体法简便 实用 人们只需利用人工授精程序就可以得到 Chengdu CCSI Training Course on Swine Genetic 大量可供商业利用的转基因动物 因此 精子载体法在生产 Improvement 转基因动物方面显示出优越性和良好的前景 [7] Haley C S. Considerations in the development of future 1971 年 Brackett 等 将 兔 的 精 子 与 用 H3- 胸 苷 标 记 pig programmes[j]. Asian-Aust J Anim Sci 1991 的 SV-DNA 共处理培养后 在精子头部检测到了放射 性物质 用该方法处理过的精子进行人工授精 受精卵和 2- 细胞时的胚胎都检测到由病毒 SV 引起的病变 证实 外源基因可以进入精子细胞 并能在受精后表达 [15] [8] Krueger C Rath D. Intrauterine insemination in sows with reduced sperm number[j] Reprod Fertil 年 Lavitrano 等利用小鼠附睾内精子与含 CTA 基因的线 [9] Watson P F Behan J R Intrauterine insemination 性体质粒 psv2cat 共孵育后体外授精 移植 2- 细胞时的 of sows with reduced sperm numbers results of a 胚胎到宿主小鼠子宫 获得的后代鼠 3% 为转基因鼠 称 commercially based field trial[j]. Theriogenology

164 [1] R o z e b o o m K J R e i c k s D L W i l s o n M E T h e reproductive performance and factors affecting on-farm application of low dose intrauterine deposit of semen in sows[j]. Anim Sci [11] Roberts P K Bilkei G Field experiences on post cervical artificial insemination in the sows[j]. Reprod Domest Ani [12] Martinez E A Vazquez J M Roca J et al. Minimum number of spermatozoa required for normal fertility after deep intrauterine insemination in non-sedated sows[j]. Reproduction [13] Vazquez J M. Deep intrauterine insemination in natural post-weaning oestrus sows[j]. Proceedings of the 6th International Conference of Pig Reproduction Columbia MO [1] Day B N. Deep intrauterine insemination in sows first field trial in USA commercial farm with newly developed device[j]. Theriogenology [15] Brackett B G Boranska W Sawicki W et al. Uptake of heterologous genome by mammalian spermatozoa and its transfer to ova through fertilization[j].proc Nat Acad Sci USA (1) [16] Lavitrano M Camaioni A Fazio V M et al. Sperm cells as vector for introduction foreign DNA into eggs genetic transformation of mice[j]. Cell [17] Sato M. Testis-mediated gene transfer (TMGT) in mice successful transmission of introduced DNA from F to F2 generations[j]. Transgenics 1999(3) [18] G a n d o l f i F. S p e r m - m e d i a t e d t r a n s g e n e s i s [ J ]. Theriogenology

165 基因组选择与猪育种 唐国庆 李学伟 四川农业大学动物科技学院 四川 雅安 6251 随着高通量基因芯片和测序技术的快速发展 促使个 那样的突变具有一个很大的主效应 猪这方面典型的例子 体 SNP 基因型的判型成本快速下降 基因组范围的高密度 是氟烷基因 它能够促进猪的肌肉生长 但是容易引起猪 SNP 标记数据已经在家畜群体内使用 传统的 LE-MAS 应激综合征 这种 MAS 选择的目的通常是从群体中直接 LD-MAS 或 G-MAS 预测育种值的能力是有限的 这是 消 除 有 害 等 位 基 因 第 2 种 MAS 是 直 接 使 用 与 QTL 呈 因为传统的 MAS 只使用很少的被证明是有效标记 而这 LD 状态的 SNP 标记 首先 估计与 QTL 呈显著关联的 些标记只解释复杂性状很小比例的遗传变异 1% 2% 标记等位基因效应 为了避免偏差 估计效应的群体应当 为 了 克 服 传 统 MAS 的 缺 陷 Meuwissen 等 21 建 独立于原先进行标记显著关联分析的群体 在此基础上 议了一种新的 不同的方法 这种方法被叫做基因组选择 候选个体的育种值将通过综合系谱 标记和表型信息进行 GS 该方法的具体实施包括 2 个步骤 首先 在一个包 估计 这种类型的 MAS 已经被用于各种畜群的繁殖率 含基因型和表型数据的训练数据集 参考群 中估计标记 饲料消耗 生长速率和屠宰性状的遗传改良 例如 在猪 效应 然后 在非参考群 验证群体 中根据个体的基因 上 这种类型的 MAS 常用于猪商业品系的肉质改良 [6-7] 型直接预测个体的基因组 EBV GEBV 而不需要个体 在实际育种中应用 MAS 的关键问题是它预测育种值的能 的表型数据 相对于传统的 MAS GS 最大的差别是使用 力是非常有限的 因为它使用很少数目的有效标记 而这 基因组范围高密度标记模板数据估计 QTL 效应 因此 影 些显著标记只能够解释数量性状很小比例的遗传变异 响一个复杂性状所有的 QTL 应当至少与这些标记中的一个 2 基因组选择 [1] 标记处于连锁不平衡 LD 状态 [2] 相对于传统的 MAS 为了克服传统 MAS 的缺陷 21 年 Meuwissen 等 GS 最大的优势是在没有个体表型记录的条件下 它能够非 提出了一种新的方法 即基因组选择 GS GS 可以被定 常准确地预测个体的 GEBV 因此 能够很大程度地降低 义为许多标记 数万到数百万的标记 的同时选择 这些 成本和缩短世代间隔 本文对 GS 的最新研究进展以及 标记以一种高密度的形式覆盖整个基因组 以至于影响数 GS 在猪育种产业中的应用作简单的综述 量性状的所有基因都被期望至少与这些标记中的一个处于 1 标记辅助选择 LD 状态 在某种意义上 GS 是基于全基因组范围尺度的 [3] 传统的遗传改良方法只使用表型和系谱信息预测个体 扩展的标记辅助选择 [8] GS 在 21 年听起来是一个疯狂 的育种值 通过育种值最好的个体与最好的个体交配 已 的想法 因为当时标记辅助选择首要的研究任务还是尽量 经快速地提高了家畜的生产性能 尽管我们知道传统的数 减小个体基因判型的成本 随着基因判型技术不可思议的 量遗传学存在一定的缺陷 即我们对影响数量性状的基因 快速发展 该方法自 26 年被 Schafferr 指出在奶牛育种 数目 效应和传递行为都是不知道的 只能将有关基因和 中的巨大应用价值后 就使其成为家畜育种最热门的研究 基因型的信息作为一个 黑箱 black box 来看待 但 领域 现在 GS 在家畜育种已经变得可行 GS 有 2 个优 是这些方法却是高度有效的 迄今为止 畜禽绝大部分经 势 首先 一个复杂性状所有的遗传方差都能被标记模板 济数量性状的遗传进展都是通过表型和系谱信息采用常规 捕获 因为这些标记是均匀分布在整个基因组范围内 其 的 BLUP 评估方法取得的 然而 如果在遗传评估模型中 次 标记等位基因的效应是在群体基础上估计的 而不是 加入动物个体间 DNA 序列变异 标记辅助选择 应该能 在每个系内 因为标记和 QTL 处于群体范围 LD 状态 [9] 更好估计动物个体的育种值 [] 根据使用方式的不同 有 值得提出的是 GS 具有一个非常好的统计特性 因为它 2 种 类 型 的 标 记 辅 助 选 择 MAS 形 式 [5] 第 1 种 MAS 在一个模型中同时估计所有的 SNP 标记效应 所以 由于 直接使用已经定位在某一个基因或调节区域的功能突变 多次检测而造成的 QTL 效应过估计问题在 GS 中不会发生 161

166 Hayes 28 GS 与 MAS 的最大差别在于 MAS 着眼 群中被重新获得 这种策略尤其对猪和家禽有利 因为它 于小数目的显著标记 而 GS 使用基因组范围的高密度标 们都是使用配套系进行生产 每头种公畜相对于生产群来 记模板 实施基因组选择 首先需要一个具有标记基因型 说其育种经济价值非常巨大 和性状表型记录的动物群体 即参考群体 在此基础上 3 基因组选择在猪育种产业中的应用前景 分析这个参考群体获得一个预测方程 然后 这个预测方 在奶牛育种产业 近一二年几个国家已经开始使用基 程可以被应用于实际的候选群体 有基因型 没有表型记 因组选择评估方法估计基因组育种值 基因组育种值在奶 录 中根据个体的标记基因型直接预测个体的基因组育种 牛育种中主要用途是对年青后备公牛进行分型 以便决定 值 而不需要个体的表型记录 因此 作为另外一种形式 哪些年青公牛应该进入后裔测定程序 一些 AI 人工授精 的 MAS,GS 在性状早期难以记录时尤其具有优势 当然 种公牛站也开始直接根据年青公牛基因组育种值推销精液 GS 的成功要直接依赖于预测方程在候选群体中预测的准确 而不需要年青公牛完成它们的后裔测定 [15] 除此以外 小 率 而后者又直接决定于参考群的群体大小和性状遗传力 母牛和成年母牛的基因分型 决定哪些个体可被用来育种 的高低 现在也发展得越来越迅猛 基因组选择的主要优势是能够 [1] 在 模 拟 数 据 集 Meuwissen 等 21 发 现 基 因 组 极大地缩短世代间隔和育种成本 因为公牛的育种值能够 育种值的准确率 基因组育种值与真实育种值的相关 是 在一个非常小的年龄阶段 比如刚出生 就进行估计 这.85 真实数据集中的研究结果没有达到这个水平 但是 一点能够极大地加快奶牛遗传改良的速度 在猪育种产业 VanRaden 等 在荷斯坦 - 黑白花牛群体中研究了多个 领域 与猪基因组测序相关的技术发展相对滞后 但现在 性状的基因组选择 平均准确率也达到.71 他们的参考 也发展得非常迅速 整个猪基因组测序工作已于 29 年底 群体有 头公牛 每头公牛判型的标记数目为 完成 目前这些数据分析正在进行 完整了解这些测序数 个 SNPs 公牛表型数据是他们女儿所有记录的平均值 据所表示的意思还需要很多年的工作 然而猪育种工作者 Harris 等 已经能开始使用当前的测序数据 作为猪基因组测序的副 [11] [12-13] 在新西兰荷斯坦 - 黑白花牛群体的基因组 选择中也报道了一个近似的基因组育种值准确率 基因组 产品 一个 6 K 的猪 SNP 芯片已经于 28 年底完成 但是 选择面临的最大问题是收集用于准确估计预测方程的大参 与奶牛产业相比 基因组选择还不能够真正在猪育种产业 考群体 在一些国家 这个问题正在被逐渐解决 例如 中应用 当前一头动物的 SNP 芯片的判型成本约为 2 美 美国农业部正在研究的一个基因组选择项目已经收集了 元 对奶牛育种来说这是可以承受的 因为奶公牛的后裔 6 7 头的奶公牛参考群 而且 这个数字还在逐年增加 测定成本很高 每头约为 5 美元 同时每头奶公牛 这样大的参考群直接导致奶公牛的基因组育种值的准确率 的育种经济价值很大 一头公牛可以配上万头母牛 但 超过.8 这个准确率非常高 以至于美国的一些奶牛 是 对猪育种来说这个成本还是太高 尽管如此 基因组 育种公司已经开始单独基于年青公牛的 DNA 和系谱信息 选择还是在猪育种产业中有重要的应用机会 这些机会主 来销售它们的精液 在澳大利亚 新西兰和荷兰 一些相 要存在于创造遗传进展的核心育种场 而不是在生产群体 [1] 对更小的参考群也已经相继建立 随着参考群的逐年累积 Goddard 和 Hayes 29 另外一个在猪育种领域使用 这个问题应当会很快解决 Hayes 29 基因组选择另 GS 的可能途径是使用低密度的 SNP 标记模板 [16] 全基因 外一个主要的问题是多品种问题 这个问题尤其对肉牛 组关联分析 GWAS 的研究结果显示对某一具体性状来 绵羊 家禽和猪等多品种家畜影响巨大 在给定的跨品种 说 这里存在大量标记对性状是没有影响的 因此 可以 有限 LD 程度条件下 在基因组选择实施之前 必须收集 在 GWAS 的基础上对不同的选择性状分别设计特定的芯片 多品种的大参考群 同时 也需要一个更高密度 >3 模板 这可以很大程度降低基因分型成本 在猪的常规育 的标记模板 Goddard 和 Hayes 29 除此以外 GS 种中对猪的生长速率和背膘进行选择是比较有利的 因为 的具体实施还存在其他几个问题 例如 多久必须重新估 这些性状能够在猪生长早期进行记录 同时测定的成本也 计标记效应 多久必须更新的标记 高昂的基因型判型成 相对较低 然而 与常规选择相反 基因组选择在性状表 本也可能延迟 GS 在绵羊 家禽和猪中实施 因为在这些 型在早期难以获得或获得的成本非常高昂或只在一个性别 家畜群体中 单个公畜个体的育种经济价值远没有奶公牛 中表达时却更有优势 因此 基因组选择在猪育种领域更 高 然而 即使在这些畜种内 GS 在繁育金字塔的顶层实 适合对繁殖性状 产仔数 肉质性状和抗病性状进行选择 施应当能够产生一定利润的 因为 GS 的优势虽然在核心 当前 Hypor 已经开始尝试在实际的猪商业育种中应用基 选育群难以体现 但是它的优势可以在大的繁殖群和生产 因组选择对繁殖性状 肉质性状和抗病性状进行选择 [17-18] 162

167 总之 虽然基因组选择在猪育种中还处于初始阶段 但是它具有加快猪遗传改良速率的潜在能力 尤其是当前 on a genome wide scale [J]. Anim. Breed. Genet,27. [9] Hayes B J et al. Genomic selection in dairy cattle: 常规 BLUP 选择困难的性状 这种优势表现得更加明显 Progress and challenges [J].Dairy Sci, 29, 92:33- 可以预计 随着高通量测序技术与芯片技术的快速发展和 3. 判型成本的进一步降低 基因组选择将会在不久的将来在 猪育种产业中真正实施 [1] M euwissen T H. Accuracy of breeding values of unrelated individuals predicted by dense SNP genotyping [J]. Genet Sel Evol 29,1:35. 参考文献 [1] Meuwissen T H et al. Prediction of total genetic value using genome-wide dense marker maps[j]. Genetics, 21,157: [2] Goddard M E Hayes B J. Genomic selection [J]. Anim. Breed. Genet. 27,12: [3] H a y e s, B J Q T L M a p p i n g, M A S, a n d G e n o m i c Selection. Course Notes, Lelystad, Netherland,28. [] Dekkers J C M.Commercial application of markerand gene-assisted selection in livestock: strategies and lessons [J]. Anim. Sci. 2 82: [11] V a n R a d e n P M e t a l. R e l i a b i l i t y o f g e n o m i c predictions for North American Holstein bulls[j]. Dairy Sci, 29, 92:16-2. [12] H arris B L Johnson D L.Genomic predictions for New Zealand dairy bulls and integration with national genetic evaluation [J].Dairy Sci, 21, 93: [13] H arris B L et al. Interbull Meeting, Bulletin[C]. Niagara Falls, Canada, 28:39. [1] D a l t o n R. N o b u l l : g e n e s f o r b e t t e r m i l k [ J ]. Nature,29,57:369. [15] A guilar I et al. A unified approach to utiliz e [5] Goddard M E Hayes B J. Mapping genes for complex phenotypic, full pedigree, and genomic information traits in domestic animals and their use in breeding for genetic evaluation of Holstein final score [J].Dairy programmes[j]. Nature Genetics Reviews, 29,1:381- Sci,21,93: [6] Van Arendonk J A M et al. In From Jay L. Lush to Genomics: Visions for Animal Breeding and Genetics[C]. Iowa State Univ [7] Plastow G S et al. In Proceedings 28th Annual Meeting National Swine Improvement Federation[C]. Iowa State Univ., 23: [8] Meuwissen T H. Genomic selection: marker assisted selection [16] 张勤. 基因组选择. 第十五次全国动物育种学术讨论会专题 报告 [R], 29. [17] S chaeffer L R.Strategy for applying genome-wide selection in dairy cattle [J].Anim. Breed. Genet, 26, 123: [18] C haraqu P Alber G.Genomic selection for pigs and poultry. In from Genomics and Livestock Quality Improvement: Bringing it All Together [C]

168 我国种猪进口现状与进口政策解读 张开展 北京中地种畜有限公司 北京 笔者多年来一直从事种猪进口的相关工作 现将对我国 朝阳 128 ① 农业部种用畜禽遗传资源引进申请表 种猪进口现状和国家关于种畜进口的有关政策的理解与大家 ②畜禽遗传资源外贸合同 复印件 分享 旨在解读我国种猪进口现状与政策 为大家提供参考 ③ 种畜禽生产经营许可证 复印件 1 进口种猪的审批机关 有关的法律法规及需 要办理的批文 ④出口国家法定机构出具的种畜禽系谱 复印件 1.1 三个审批部门 经审批合格后发给 中华人民共和国农业部动植物 苗种进 出 口审批表 1 农业主管部门 农业部畜牧业司 2.2 办理 中华人民共和国进境动植物检疫许可证 2 检验检疫部门 国家质量监督检验检疫总局动植物 的程序 监管司 其历史沿革 1998 年国家三检合并 动植检 卫检 分为利用国家口岸隔离场和国家质检总局指定隔离场 商检合并成立中华人民共和国出入境检验检疫局 21 年 两种情况 与国家质量监督局合并成立国家质检总局 主管部门国家 质检总局动植物监管司 国家质检总局对地方下属局是垂 国家隔离场 目前 国家口岸隔离场有 个 分别位于北京 上海 直领导 有 3 多个直属局 名称为 XX 出入境检验检疫局 天津 广州 用于隔离猪 马 牛 羊等大中型动物 法定 直属局下设若干分支局 隔离期为 5 d 2 批动物之间的间隔不少于 3 d 理论上计 3 海关 进口地海关和口岸海关 1.2 部法律法规 算每个隔离场利用批次为.8 次 实际上利用 3 次就很不错 了 个隔离场年隔离动物也就 12 次左右 使用情况非常 包括 中华人民共和国畜牧法 中华人民共和国进出 紧张 排队时间很长 一般在 1 年以上 利用国家隔离场 境动植物检疫法 中华人民共和国畜禽遗传资源进出境和 等待时间长 申请时申请单位需提交 中华人民共和国进 对外研究利用审批办法 中华人民共和国海关法 境动植物检疫许可证申请表 和邀请国家质检总局委托兽 个政府批文 医官员出国的函电 经审批合格后发给 中华人民共和国 1 中华人民共和国农业部动植物苗种进 出 口审 批表 2 中华人民共和国进境动植物检疫许可证 2 进境动植物检疫许可证 指定隔离场 近年来 我国畜牧业发展迅速 对外种的需求逐年增加 3 进出口货物征免税证明 个国家隔离场不能满足引种的需求 国家质检总局于 29 如何获得3个批文 年 7 月 22 日颁布了 进境动物隔离检疫场使用监督管理办 2.1 办理 中华人民共和国农业部动植物苗种进 出 法 并于 29 年 12 月 1 日起施行 该办法允许符合条件 口审批表 的程序 1 引种企业首先要向所在县及地区申请并填写 农业 的新建猪场通过直属检验检疫局向国家质检总局申请作为 进口猪的一次性指定隔离场 经批准后的动检许可证的申报 部种用畜禽遗传资源引进申请表 俗称 四联单 经 程序与使用国家隔离场相同 省级人民政府畜牧兽医行政主管部门审核并签署意见报农 业部 2 无进出口权的申请人 需委托有进出口代理权的单 位办理 3 需报送以下材料 16 办理 进出口货物征免税证明 的程序 进口单位是享受免税政策的主体 种猪到货前 1 周向所 在地申请 需要的文件包括 1 进出口货物征免税申请表

169 2 农业部动植物苗种进 出 口审批表 月底只进口了大约 8 头 法国进口 3 头 丹麦 5 头 3 申请免税的说明 为什么实际进口与计划数量差距如此大 企业营业执照或事业单位法人证书 29 年之前企业进口种猪不用报计划 进口前向农业 5 进出口合同 发票以及相关货物的情况说明 部直接申请即可 29 年发生了变化 财政部 26 年 1 3 我国对种猪进口的税收政策及享受政策的条件 月 22 日下发的财关税 26 3 号文件对 十一五 进口 为了促进我国畜牧业的发展 我国对种畜进出口实行税 种畜免税政策作了说明 在此文件的基础上 每年还要专 收优惠 关于进口种畜的税收问题 财政部 国家税务总局 门发文 明确当年的政策 每年的发文时间都在 3 月份之后 26 年 1 月 22 日专门发布了财关税 [26] 第 3 号文件 该 3 月份之前进出口的种畜享受上一年的政策 29 年 3 月 文件对 十一五 期间种畜的免税要求 数量作了明确规定 海关总署下发了 海关总署办公厅关于暂停办理进口种子 海关总署 21 年 9 月 3 日发布的署税发 [21]3 号文件 苗 种畜 禽 鱼种 苗 和种用野生动植物种源减免税 对进口种畜免税问题作了具体要求 进口非种用遗传资源需要交纳海关税和进口环节增值 审批手续的通知 署办函 号 要求各海关 暂停受理进出口种源的减免税审批申请 29 年 11 月 2 税 普惠国关税税率为 1% 进口环节增值税税率为 13% 日海关总署税管函 号文发出通知 恢复办理 综合税率为 2.3% 进口种子 种畜免税手续 但与往年不同 财政部对农业 在财政部批准的进口数量以内 经农业部批准的享受进 口免税政策的企业 享受免关税和免增值税的政策 部上报的进口计划进行核减 致使 29 年进出口的种畜 包 括种猪 只有部分数量享受免税政策 以猪为例 农业部 办理免税手续的程序 审批进口 7 12 头 实际进口 2 88 头 免税额度 头 凭 农业部动植物苗种进 出 口审批表 及相关文件 23 头没有享受免税 如果不是因为甲型 H1N1 影响 进 到进口企业所在地海关办理 进出口货物征免税证明 凭 口的数量还会多 享受不了免税政策的数量更大 进口种 此证明在货物到达前在进境口岸海关办理免税 牛的情况更差 29 年审批进口种牛 9. 万头 实际进口.2 万头 免税额度 2.8 万头 1.22 万头未能享受政策 我国种猪进口现状及新变化.1 种猪进口现状 于是 29 年 1 月 3 日农业部畜牧业司向各省区 直辖 目前 与我国签订检疫条款的国家有美国 加拿大 丹 市下发了农牧畜便函字 号文 要求各省区于 麦 法国 英国 比利时 挪威 澳大利亚等国 我国种 29 年 12 月 1 日前上报 21 年度进口计划 估计今年 猪主要从加拿大 美国 丹麦 法国等国进口 去年因甲型 进口数量不会超过 28 年 原因有几点 H1N1 暂停 今年获复的国家有加拿大 丹麦 法国 英国 就要获复 美国还没有消息 主要是关于条款增加检疫甲型 1 对美国种猪的需求量比较大 条款最终能否达成不 得而知 H1N1 2 英国出口场家符合中英条款的猪场少 每批次进口 近 3 年种猪进口情况 量超过 2 头 质量难以保证 估计近期才有可能签订补充 1 28 年进口种猪 12 头 条款 2 29 年农业部审批进口种猪数量 7 12 头 实际进 口 2 88 头 免税额度 头 3 丹麦种猪价格高 丹麦国家种猪育种委员会还要求 在合同中注明收取基因费 3 21 年计划进口种猪 3 头 其中北美洲 美 加 采用包机进口 申请使用新猪场作为指定隔离场 25 头左右 欧洲 1 头左右 不确定国别 头左右 需要时间长 且受很多条件制约 ①新猪场的布局及防疫条.2 进口种猪的新变化 件是否符合国家质检总局对指定隔离场的要求 ②猪场离机 27 年以前进口种猪企业数量少 每批次进口的种猪 数量少 大多在 2 头左右 主要利用国家隔离场 近 3 年 场的距离 ③机场能否降落波音 77 大型货机 机场有无装 卸平台 ④进口数量少 6 头以下 价格上不划算 来进口种猪的企业增多 每批次进口数量增多 主要利用 5 国家隔离场容量小 档期满 北京隔离场周边环境 新建猪场申请指定隔离场 临时隔离场 采用包机形式进 改变 不能隔离进口猪 口 例如 广东温氏 PIC 中国 山东六和 江西艾格菲 5 正邦科技 武汉中粮 每架次进口数量在 8 1 头.3 21 年种猪进口形势 前面已经讲过 21 年全国计划进口 3 头 截至 6 种猪进口的操作周期及操作流程 种猪进口是一项复杂的系统工程 操作周期长达 5 个 月左右 具体流程如下 1 国内客户将拟购买种猪的数量 品种 质量要求 165

170 图1 进口种猪流程 拟进口国家告知代理公司 代理公司按客户要求向国外供货 5 国家质量监督检验检疫总局选派兽医官 代理公司 商询价 还价 与国内客户共同确定最终价格及质量条款 协助办理兽医出国手续 并为客户选种人员办理出国相关手 并与国内客户签订代理进口合同 续 收到国家质量监督检验检疫总局出具的 中华人民共和 2 代理合同签订后 代理公司与外商签订外贸进出口 合同 3 代理公司负责为客户申请办理隔离场使用手续和 中 华人民共和国进境动植物检疫许可证 并向国家质量监督检 验检疫总局发出兽医的邀请函 同期国内客户向当地省级农业主管部门 农业厅或 农牧厅 申请 农业部种用畜禽遗传资源引进申请表 俗 称四联单 审批后将此原件连同 种畜禽生产经营许可证 复印件递至代理公司 由代理公司负责向国家农业部申请 中华人民共和国农业部动植物苗种进 出 口审批表 此 批文很重要 是办理海关免税批文的重要文件 获得海关免 税批文后即可免 1% 的关税和 13% 的进口环节增值税 166 国进境动植物检疫许可证 后 安排有关人员出国选种 6 有关人员选种结束后 种猪在国外进行农场检疫及 隔离场检疫 7 国内客户持农业部批复的 中华人民共和国农业部 动植物苗种进 出 口审批表 和及相关文件到当地海关办 理 进出口货物征免税证明 8 国外检疫合格的种猪装机运往中国 到货以前的 7 d 左右 经体检合格的饲养管理人员进驻口岸隔离场 9 种猪到达中国口岸由代理公司负责办理报检报关及 提货手续 种猪运往口岸隔离场进行为期 5 d 的隔离检疫 检疫合格后将种猪运往客户种猪场

171 种公猪饲养管理要素 张伟力 张陈华 安徽农业大学 合肥 公猪营养需要与配方原则 场方必然给饲养员下达明确的投喂量标准 并随之检查执 一 般 种 公 猪 每 次 配 种 射 精 量 在 2 ml 左 右 变 动 行情况 比如一般地方品种公猪饲粮在 2 3 kg/d 而流 范 围 依 品 种 年 龄 可 在 5 5 ml 之 间 种 公 猪 在 配 种 行瘦肉品种相应在 kg/d 这只是纸上的计划方 期间消耗极大 如按 2 次 /d 的频率 每日排出精液量为 案 在生产实际中几乎没有 1 头健康公猪会按定量吃 公猪 1 1 ml 故在营养设计方面需十分讲究才能维持公 吃多少全凭自己的心气 心情愉悦之时可以 1 d 吃掉 1 kg 猪持久有效的配种能力 心情一郁闷 1 d 就吃几口甚至绝食 2 h 以上也是常有之事 公猪饲粮配方的原则是浓度高 体积小 营养全 酸 这种猪坚强的生物学本性在公猪表现得十分突出 当我们 碱平 一般公猪饲粮的粗蛋白水平在 16% 左右 能量水 面对猪场的一大排公猪栏时就会发现有的公猪槽已被舔得 平 在 MJ/kg 钙 >.75% 总 磷 >.6% 有 效 磷 精光 而另一些猪槽还有不少剩料 公猪对之 视而不见 >.35% 钠.15% 氯.12% 镁.% 钾.2% 铜 而是远离食槽东张西望 满口白沫 口中振振有声 完全是 5 mg/kg 碘.1 mg/kg 铁 8 mg/kg 锰 2 mg/kg 要出门寻花问柳的心境 哪有心思进餐 可见给公猪设定的 硒.15 mg/kg 锌 5 ppm 维 生 素 A IU 维 生 素 饲养标准是一回事 而公猪实际摄入的营养却是另一回事 D3 2 IU 维 生 素 E IU 维 生 素 K.5 mg/kg 生物 由于公猪摄入的营养直接影响到精液品质 所以有经验的饲 素.2 mg/kg 胆 碱 1 25 mg/kg 叶 酸 1.3 mg/kg 尼 养员从不遵循教条主义按计划规定投料而是细心观察诱导 克酸 1 mg/kg 遍多酸 12 mg/kg 核黄素 3.75 mg/kg 公猪采食 这是我们生产中要强调的公猪个性化 人性化 硫 胺 素 1 mg/kg 吡 醇 素 1 mg/kg 维 生 素 B12 15 μg/ 猪性化的辩证饲养 一个万头规模的猪场中几乎找不出食欲 kg 亚油酸.1% 完全相同的 2 头公猪 所以养公猪的饲养员应当是全场最精 要满足上述营养需要 饲粮配方基本是一个精料型组 明能干而又通晓公猪生理健康和心理健康的行家里手 合 而且以玉米豆粕为主糠麸为辅 配合以 % 的预混 才 公猪的投料形式相当讲究 冬季以颗料或膨化料为好 能完成配方的营养指标 由于公猪数量有限 不便专门为公 春秋以湿拌粉料为好 夏季气温超过 2 则以稀料为宜 猪开动一次搅拌机 为有限的公猪拌出 1 年以上的饲粮存入 该稀料不是凉水冲拌的粉料 而是青料打浆后与粉料混合 仓库而招致公猪饲粮的霉变或过度氧化导致的维生素失效 或青浆与发酵变酸的粉料混合成稀料喂公猪效果亦佳 公猪 一个比较简单的变通方法是用哺乳母猪的饲粮代替公猪饲 每次只能喂八成饱 切忌一次喂到十成饱导致公猪撑大肚皮 粮 其原因是哺乳母猪饲粮周转较快可以保持新鲜 同时 影响配种 公猪可日喂 3 次以上 每次掌握在七八成饱 投 哺乳母猪和公猪的营养要求十分接近 只是公猪饲粮要求更 料后的 1 h 应看到槽底被舔干净 如 1 h 后槽底还有剩料说 精一些 为此 对公猪可以通过以下手段额外加强营养 1 明投料过量或公猪食欲有问题了 应立即清理食槽 在非上 鸡蛋每日 2 8 枚 饲喂时直接打入饲粮 2 胡萝卜打浆 槽采食时间 3 次 /d 每次 1 h 左右为正常上糟时间 食 后按 1 2 与羊奶混合 每头补饲 1.5 L/d 一个万头猪场 槽永远是空而净的 剩料变质和公猪采食无规律是公猪拉稀 养 5 只萨能母山羊可以满足全场种公猪的额外补饲需求量 的最常见因素 3 青饲料 每头 1 kg/d 以叶菜类效果最佳 如韭菜 紫 3 花苜蓿 白菜 苋菜 红薯叶等 汤类 用杂鱼煲汤 种公猪的运动 传统的公猪很少有不配种和肢蹄病的问题 而现代猪场 原料以河中杂鱼 或人工养殖的河蚌肉煨汤 适当配入鸡架 的公猪无性欲和肢蹄病加起来占到种公猪存栏的 25% 左右 枸杞 山药适量 食盐少许 每头公猪每日喂量可按河鲜加 品种的变更固然是原因之一 但最主要的原因是现代公猪缺 鸡架总重 1 kg 为妥 常用此剂公猪精神抖擞 性欲感极强 乏足够的运动 有些猪场的公猪甚至被养在限喂栏里 除了 2 种公猪的饲喂方式方法 配种之外基本没有运动 这样的公猪衰老很快 一般不到 3 生产第一线的饲养员经常与种猪场的技术员和场长就 岁就被淘汰出局 作为原种场加快世代间隔 3 岁公猪或 2 公猪饲喂问题争得面红耳赤 原因很简单 从技术领导出发 岁公猪有了后代的成绩就可以从原种场淘汰 这种淘汰公猪 167

172 如果性生理健康依然可以在商品场继续发挥作用到 5 岁以 图 2 公猪对饲养员有敏锐的感觉和记忆力 一旦建立良 上 目前许多原种猪场淘汰的 2 3 岁公猪由于伤病已无配 好和谐的人猪关系 公猪会很温顺地配合饲养员的指挥 主 种能力十分可惜 因此 公猪的保健和运动当引起有关场家 动和饲养员接近 有个别猪场甚至可以把公猪训练得拉小架 的足够重视 子车运送饲料 堪称绿色环保种猪之楷模 公猪对负面刺激 一头性成熟的公猪大约需要多大的运动量才能有效地 的感觉和记忆甚至更加强烈 有些公猪对打过它甚至于骂过 保证体格强健和性欲旺盛呢 据笔者过去在北京黑猪育种 它的人记得刻骨铭心 一旦机会成熟就会对它的 仇人 发 场的经验 每日 3 m 的驱赶运动较为合适 此 3 m 起攻击 这种攻击的凶猛程度可以如狼似虎 所谓 机会成 的路程大约有 1 m 的漫步 启动 +1 m 快步 小跑 熟 是指公猪对它的 仇人 通过嗅觉和视觉验明正身之后 + 1 m 漫步 动松 总计耗时约 3 min 中国传统的 会处心积虑地与之周旋相互的地势位置 并寻找有利的地形 养公猪户经常赶公猪走村串户给附近农户的母猪配种 一走 和进攻角度 胆小的公猪会尽量避开与 仇人 直面相对并 就是好几里地 故运动量也足矣 半个世纪前的中国传统饲 保持距离 如果公猪被逼到墙角或成狭路相逢之势 公猪 养公猪模式使当时的公猪可以利用到 5 1 岁 由于人与 会低头挑目而形成敌视站姿 口嚼白沫 叭嗒有声 其锋犬 公猪同时运动 饲养员中也极少有 三高 病例发生 倒是 齿直举向前如同 2 把匕首 公猪发起冲锋攻击是瞬间爆发的 一种人猪和谐共同健康的模式 动作 其冲刺速度接近职业运动员百米起跑的速度 因此公 驱赶公猪走动和跑动有技术讲究 一般是在早上饲喂前 猪一旦攻人往往十拿九稳 因为在相同矢量方向上人的 2 条 或配种前空腹运动 或者下午太阳落山时 饲喂或配种前也 腿没有猪的 条腿快 大型种猪场中被种公猪的利齿送进医 可进行 忌中午烈日当空 饱食或配钟后进行驱赶运动 驱 院的饲养员时有发生 从未断绝 说明我们在种公猪的饲养 赶运动要掌握好 慢 快 慢 三步节奏 公猪刚一出门时 管理方面还有不少不到位之处 至少对种公猪的生理行为特 就容易猛跑 撒欢 要多加安抚 如给公猪擦痒 梳毛 刷 点认识得不够深刻 为了避免公猪伤人事件的发生 可以从 拭背部可使公猪慢慢安静下来 徐徐而行 也可故意将公猪 以下几点入手 1 不打骂公猪 2 不与公猪争风吃醋 不 赶至有木桩 树干等路边大目标边 公猪有对路边物体探索 要在公猪配种时令其强行退下或强行将其赶走 3 专人饲 性嗅觉辨认 舐啃 擦痒的习性 从而放慢了速度 公猪行 养公猪 不要随便换人 饲养员绝不参与给公猪打针 上鼻 程当中 1/3 路程要加快速度 跑成快步或对侧步 使公猪 捻子 捆绑 保定 采血等负面刺激 上述负面刺激要尽量 略喘粗气达到一定的运动量 1 周岁以下的青年公猪体质强 避免或减少 要做也是由兽医人员执行 使公猪记得那不是 健者可以用袭步疾跑冲刺 1 2 m 在行程的后 1/3 路 主人干的事 有些负面刺激是可以避免的 比如把公猪捆起 段要控制猪的速度使之逐步放慢成逍遥漫步 并达到呼吸平 来修蹄匣 这是不得已才干的事 应该从每天保证公猪在粗 稳 此时一般不加人为驱赶 猪在小跑 1 m 之后略有疲 砂地面运动自然磨损蹄匣来主动预防蹄匣过长的问题 再如 乏之感会主动放慢步速 公猪在回程路上既要平稳慢行又不 免疫注射是公猪总要 挨扎 的技术性负面刺激 有的饲养 可停留 要争取直奔原圈 如果停留时间过长 公猪易起异 员把公猪堵在笼子里打针 甚至捆起来或上鼻捻子打针 给 心 会向配种舍或母猪舍方向奔袭 使局面不易控制 公猪 公猪造成极大应激 直接影响精液品质 先进的猪场 兽医 运动通常是单人单猪 专人专猪 切忌几头公猪同时放牧运 利用公猪熟睡之际 用 飞针手法 将针头用极快速度猛插 动 即使这几头公猪是从小一起长大的 更切忌 2 头公猪 入皮下或肌层 然后用注射器跟进疫苗或药物 此动作大约 对面相逢 如有此事 势必是一山难容二虎 2 头公猪中必 2 3 s 完成 现代创新的无针注射也有异曲同工之美 公 有 1 头被咬死 另 1 头不致残也要有所外伤 在国外为了节 省人工 每头公猪栏外设有 3 3 m 的公猪逍遥运动场 任公猪自行运动玩耍 有一定作用 但成年公猪往往贪睡不 动而导致运动量不足 现代猪场有设公猪跑道运动场 使公 猪在狭窄通道上自行运动 省人工省力 但存在公猪容易在 狭道中睡觉的弊端 公猪的管理 放牧公猪时是培养人猪亲和的极好机会 有经验的饲养 员能抓住机会主动与公猪套近乎 比如刷拭 抚摸 轻唤公 猪的名字 有的饲养员能骑在猪背上或站在猪背上 图 图 1 人猪亲和

173 猪的感觉是梦中被牛虻叮了一口 醒来还没明白是怎么一回 事 苗已注射完毕 再一看来者不是主人 日后这个负面印 象不会与饲养员有所牵连 如此 饲养员才能安全地在公猪 左右伺候 包括采精 5 公猪的利用 5.1 中国地方品种的传统利用方式 中国传统养公猪的模式是小农经济的专门化公猪户养 猪 通常的公猪户是养一大一小 大公猪游乡串户给附近农 图 2 优秀白杜洛克公猪身段 户的发情母猪配种 小公猪通常是大公猪的嫡传后代 留作 接班 大公猪通常日配 1 2 头发情母猪 每头母猪通常只 配 1 次 其产仔数亦不少 配种繁忙的季节 老公猪可以日 配 头以上 曾有过日配 7 头全部怀胎的记录 待老公猪数 年之后精力衰退时就淘汰换一头年轻公猪 中国地方品种中 的老公猪使用年限较长 超过 5 年者不在少数 笔者调查过 的一头圩公猪生于 1999 年 犬齿长成半个圆圈依然精力旺 盛 传统公猪配种利用还有更为经济的形式 即小公猪 3 月龄即用于配种 充分利用中国猪种的性早熟 一旦确认母 猪怀胎 约 月龄的小公猪立即阉割去势供作肥育商品猪 这样基本省去了大公猪的饲养成本 同时由于 3 月龄的 小公猪大约只有 kg 重 一把就可以抓在手里放入 竹笼或麻袋 乘车乘船时宛如提一个手提箱 运输十分方便 可以送到较远的农村给母猪配种 5.2 现代公猪的利用方式 现代公猪通常是通过测定本身和父母代日增重 背膘 厚 眼肌面积 饲料利用率等后选出的顶级公猪 这些公猪 图 3 优秀圩公猪身段 型猪 八眉猪除外 2 一般攻击型 巴克夏猪 高加索猪 汉普夏猪 皮 特兰猪 中国华中型猪的大部分 3 较弱攻击型 中国华南型猪的大部分 以文昌猪 桂墟猪为典型 中国江海型猪的一部分 以太湖猪为典型 6.2 后备公猪调教要领 后备公猪初次参加配种是建立公猪自信心的关键 许多 生产性能超群 最优秀的公猪 18 日龄已达到 1 kg 活重 公猪的良好条件反射和动力定型或恶癖皆由首次配种造就 其料重比只有 1.9 但是 性能越优秀的公猪越脆弱 其繁 故小公猪第 1 次配种务必尽量减少环境应激 将身材娇小的 殖性能尤其低下 通常这种公猪在良好的猪舍饲养 运动条 后备发情母猪先赶至干净的配种栏 然后再将小公猪徐徐赶 件下只能每周配种或采精 1 2 次 好在这种顶级公猪在 1 出公猪栏并途中经过众多母猪栏舍以唤醒性兴奋 待公猪开 年之后就会被它的儿子取代 这是育种工作争取短世代间隔 始兴奋口嚼白沫 摇头摆尾之时将其轻轻赶入小母猪栏 此 大遗传进展的需要 所以顶级公猪需要保持性机能旺盛至少 时小公猪乘兴而上 争取一次成功 此举对该公猪一生一 1 年以上 世的配种能力打下良好基础 初次配种有两大忌 1 切忌 6 公猪调教 将小公猪突然从公猪栏赶出 未经母猪调情直奔配种栏 公猪个性差异 切忌小公猪与成年身高马大的发情母猪配对 大型母猪出于 公猪调教的第一步是建立人猪亲和关系 必须做到公猪 自然本性偏爱高大威猛的公猪而嫌弃瘦小公猪 如果小公猪 把饲养员当成自己的主人 允许饲养员接近 伴随和采精等 初次面唔发情大母猪讨不得欢心 被大母猪一个调头回马枪 操作 由于公猪的个性差异极大 故饲养员的人猪亲和工作 猛咬一口势必吓得落荒而逃 并从此埋下深刻的自卑 这种 务必循序渐进 从给猪抓痒 刷拭开始 逐渐增加语言口令 初恋失败打击可导致该公猪终身害怕大母猪或见了母猪就 这对调教采精尤其重要 调教成功的可能性与公猪的攻击性 有三分怵 从而每次配种都不顺利 严重影响受胎率和产仔 成负相关 故饲养员对公猪的攻击性要明察秋毫 公猪的攻 数 如果是调教人工采精 可在小公猪性兴奋起来时用台猪 击性与品种有一定关系 但同一品种内差异也很大 就不同 或台猪加发情小母猪同时挑逗 争取一次成功 采精人员不 品种而言攻击性排序如下 要变更 公猪很认人 1 较强攻击型 杜洛克猪 含白杜洛克猪 中国华北 169

174 科学管理确保种公猪高度健康 郑忠志 宋向阳 张俊峰 高永恒 河南省黄泛区鑫欣牧业有限公司 河南 1 后备公猪的饲养 1.1 后备公猪的饲喂 体重在 12 kg 以下时日喂 kg 的全价颗粒料 冬 季增加 1% 2% 此期间实行限量饲喂 8 kg 以前日 喂量占体重 2.5% 3.% 8 12 kg 期间的日喂量占其 周口 年公猪的饲喂方式 每天 2 次为宜 饲料中严禁有发霉变质 的饲料混入 并且保持良好的适口性 以保证公猪正常体况 满足配种的需要 2.2 成年公猪的管理 适当的运动 单圈饲养 防暑防寒是科学管理公猪的 3 体重的 2.% 2.5% 适 宜 限 量 饲 喂 即 可 保 证 后 备 公 猪 个重要方面 良好的生长发育 又可控制体重的高速度增长 保证各器 官系统的充分发育 当体重达到 12 kg 及以上时 日喂 运动 每天运动.5 1 h 可促进公猪的新陈代谢 增加体 kg 的全价颗粒料直到参加配种 质 强壮四肢 避免肥胖 并可防止蹄病的发生 可令公猪 1.2 后备公猪的管理 分群管理 在较大场地自由活动 也可在较小的场地驱赶其行走 夏季 当后备公猪挑选好后 为保证后备公猪的正常生长发 早晚凉爽时进行, 冬季在午后温度较高时进行 配种旺季适 当减少运动量或暂停运动 配种预备期和非配种期要加强运 育 必须有适当的饲养密度 每圈饲喂 1 2 头 最好单圈 动量 饲喂 防止密度过大 发生咬斗 自淫等恶癖 运动 单圈饲养 成年公猪宜单圈饲养 每圈面积 6 1 m2 安置在 运动对促进后备公猪的骨骼和肌肉的正常生长和发育 场内向阳安静和远离母猪舍的地方 可避免因母猪的声味 保证良好而结实的种用体况和性行为具有非常重要的作用 等刺激而造成公猪精神不安 食欲减退 甚至个别公猪自 饲养后备公猪的圈舍最好配有运动场或提供足够大的活动 淫等降低种用价值的后果 工作人员与公猪相处过程中要 空间 保持适当距离 不要背对公猪 不要粗暴对待公猪 避免 定期称重 每月对后备公猪测量 1 次体重 既能观察生长速度 又 激怒公猪而引发攻击行为 特别对正在爬跨的公猪 更不 能人为强制驱赶或敲打公猪的头部和肩部 应耐心 小心 能根据长势及时调整营养水平和饲料喂量 保证具有良好的 地哄其下来 严防公猪咬斗 种用体况 初步调教 防寒防暑 公猪最适宜的温度为 18 2 冬季猪舍要防寒 保 在后备公猪的日常饲喂当中要人为有意识地调教 形成 暖 以减少饲料的消耗和疾病的发生 夏季要防暑降温 舍 和睦的人猪关系 为以后的采精 配种 防疫等操作奠定良 内温度最好不超过 26 因为公猪个体一般较大 皮下脂 好的基础 肪厚 汗腺不发达 最不耐热 舍内可安装淋浴等降温设施 2 最好安置在有湿帘降温的舍内能较好的控制温度 减少公猪 成年公猪的饲喂 2.1 成年公猪的饲喂 的热应激 因为高温刺激后 公猪的食欲减退 采食量减少 成 年 公 猪 的 日 粮 以 精 料 为 主 非 配 种 期 日 喂 量 从而导致精液的品质变差和射精量的减少 有试验表明 公 kg 每 kg 饲 料 含 可 消 化 能 12.9 MJ 精 蛋 白 猪生活在 33 的环境条件下 72 h 然后又降到 23 的环 15% 在冬季日喂量增加 1% 2% 另外 在配种频繁时 境下 结果公猪的精液品质受到严重影响 表现出精子活力 期的日粮中可适量增加鱼粉或每天加喂生鸡蛋 1 2 个 成 下降 总精子数和活精子数减少 畸形精子数增加 与配母 17

175 猪的妊娠率下降 胚胎成活率降低 份 蚊蝇出来之前和秋季都应各接种 1 次 伪狂犬病苗每年 3 接种 2 次 口蹄疫苗每年的 9 1 月必须接种 2 次 并视 公猪的使用 3.1 青年公猪的调教与使用 疫病流行态势有必要接种 3 次 对于其他的细菌性疫苗如链 后备公猪生长到 8 12 月龄时 一般有性行为或性冲 球菌 梭菌等根据实际情况而定 近年来流行的蓝耳病 圆 动 个别有爬跨意愿 此时宜选择发情良好或是发情旺盛期 环病毒感染等免疫抑制性疫病要慎重考虑 活苗的免疫接 的后备母猪或 1 胎母猪来调教训练 当青年公猪有爬跨意愿 种 防止疫苗毒的带入 疫苗的免疫接种只是预防疫病的有 时 要人为地抓住尾巴有意识地调整公猪与母猪的方向和角 效手段 要真正保证猪群的健康 还需要结合平时的日常管 度 把二者调整到合适的位置 辅助青年公猪将其阴茎插入 理和适时的保健预防工作 阴道内 并辅助公猪完成射精过程 一旦爬跨成功 完成射.2 保健.2.1 卫生与环境控制 精过程 要连续训练 3 d 巩固爬跨加强配种记忆 青年公猪在调教爬跨配种成功后 并不能因其性欲旺而 种公猪的最适宜温度为 18 2 在冬季应尽可能改 过度使用 在 1.5 岁以前 每周宜隔 3 d 使用 2 次 不得超 善圈舍的环境和温度 湿度 并注意通风换气 夏季防暑 过 3 次 每周的休养时间不少于 3 d 在其熟练配种时 要 降温 舍内温度最高不宜超过 26 每天打扫室内外卫生 人为有意识地减少辅助 防止公猪形成依赖行为 保持良好干燥的卫生环境 以增强种公猪自身的抗病能力 3.2 成年公猪的使用 对种公猪要定期刷洗体表 减少螨虫滋生 维护好公猪四肢 遵循营养 运动 利用三者平衡的原则 成年公猪的使 用应按品种 年龄 体质合理使用 掌握一定的使用强度 防止肢蹄病的发生.2.2 消毒 既能获得较好的精液质量 又能延长公猪的使用年限 一般 每周带猪消毒至少 1 次 并定期做好圈舍内的空气消毒 情况下 1.5 岁以上的公猪每周可参加配种 5 次 休息 和消毒药的药敏筛选试验 用敏感的消毒药对圈舍内全方位 3 d 2 5 岁的公猪每周可配种 5 6 次 休息 2 d 每次 的立体喷雾消毒 工作人员每次进入圈舍内部应先洗澡 然 配种时间隔 8 12 h 为宜 若是采用人工授精 宜间隔 1 2 d 后更换场内工作服 胶鞋方能进入 采精 1 次 每周采精不得超过 3 次 正常使用的公猪休息时.2.3 间不得超过 2 周 以免发生繁殖障碍 对久未使用的公猪参 定期驱除体内外寄生虫 种公猪应每季度至少驱除体内外寄生虫 1 次 驱除体外 加配种后 要加强复配 对于性欲差的公猪 可肌注前列腺 寄生虫一般用 2% 的敌百虫溶液喷洒或用螨净 贝特亦可 素或律胎素 促进性欲 每头肌注氯前列烯醇 175 mg 或律 驱除体内寄生虫可用盐酸左旋咪唑粉 虫克星 虫力黑剂等 胎素 2 ml, 间隔 1 2 min 内可增强交配行为 拌料或辉瑞生产的通灭针剂 按每 33 kg 体重按 1 ml 的剂 量肌肉注射 公猪站种公猪的防疫与保健.1 防疫 疫苗接种是预防猪群发病的有效措施 但疫苗的接种不.2. 定期或不定期的药物预防保健 每次使用药物预防之前 先抽血送检 进行敏感药物筛 是越多越好 而是应结合养殖场当地的疫病流行史和近期 选 选用药物敏感程度高的进行拌料预防 疫病的流行态势 有的放矢地预防接种 不生搬硬套别人的.2.5 定期灭鼠和蚊蝇 免疫计划和免疫程序 制定出适合本场的免疫计划和免疫程 要尽可能地降低老鼠传播疾病的可能 其次 在每年的 序 以下几种病毒病的疫苗种公猪必须接种 猪瘟 每年春 蚊蝇起来之前 定期的喷洒敌敌畏 敌百虫溶液或虫蝇净等 季和秋季至少各接种 1 次 细小病毒病和乙脑于每年的 3 月 药物 减少蚊蝇的滋生 降低蚊蝇的危害 171

176 一种公猪人工授精三位一体养殖方法及 装置 研究与示范 陈顺友1 胡光华2 潘 飞1 刘 艳1 1.华中农业大学动物科技学院,武汉 37 2.湖北新光农牧科技股份有限公司,湖北 广水 327 摘 要 随着国家和地方政府 畜禽良种工程 建设力度加大 涉及良种补贴 设施标准化建设 GAP制订和实 施 良种精液推广等一系列政策性补贴额度增加 如何积极回应政府 对行业支持做好工作 意义十分重大 猪标准化人工授精站建设 仪器设备配置 种猪科学利用及技术操作标准化 值得深入地研究 关键词 人工授精 三位一体 标准化建设 养殖工艺 环境调控 背景分析 加速了繁殖机能退化 缩短使用时间 相应地在冬季低温期 性能优越 高效扩繁的种公猪是一种先进的生产力 已 间 冷应激 发生在 1 以下 临界值 18 饲料消耗 为业内所认同 在人工授精条件下 生猪杂交改良公母性别 增加约 15% 伴有精神沉郁或不安 呻吟 食欲亢进 躯体 配比以 得以实现 切实加大了种猪遗传改良 寒颤 肌肉紧缩 性功能迟缓 采精延长 射精量减少 精 对商品群的质量贡献 然而 在瘦肉型猪高强度人工选择背 子密度或 云雾状 明显下降等 有鉴于此 无论夏日 高温 景下 一方面极大地提高了产肉率和饲料转换效率 另一方 或冬季 低温 公猪养殖环境温度控制成为 瓶颈 只有 面也因为 厄尔尼诺 和 拉尼娜 影响 加之种猪养殖环 改进公猪养殖工艺和人工授精环境 实现标准化建设 方能 境的劣势 导致高产公猪抗逆性和繁殖力下降 进而迫使其 保障种猪繁殖效率 遭受淘汰 环境 应激 困扰 一直以来 公猪生存环境及种用价值受到生产者关注 创新工艺设计 由笔者研究提供的发明专利 一种公猪人工授精三 位一体养殖方法及装置 公开号 属于动物 特别是瘦肉型种猪在高强度人工选择条件下既增加了产肉 养殖环境工程领域 适用于原种场 扩繁种猪场 养殖小区 量 提高了日增重和饲料转换效率 同时也无可避免地造成 及专业人工授精站建设 具有明显优势 抗逆性和繁殖力下降 有研究发现 由于动物体多性状存在 本发明具体涉及 一种公猪人工授精 三位一体 养殖 抗性关系 人工选择使种畜性能得以提高 也导致高产种猪 工艺及装置 其从养殖方法上 实现种公猪人工授精 三 生活力和繁殖力下降 对高温高湿和低温湿冷 应激 更加 位一体 从建筑工艺及材料选择上 解决夏季和冬季养殖 敏感 2 种极差环境温度隔热和保温性能 夏季小气候环境控制 当自然温度达 3 以上 高产个体 25% 3% 有不 同程度的生理机能障碍 采食量减少 烦躁不安 呼吸急 采用 负压 + 湿帘 降温系统 使车间温度调控在适宜范围 种猪安全过夏 促 肌肉颤抖 睾丸长度和宽度分别扩张 3 cm 体温升高 该装置构建连接 实验室与采精室连接 采精室与公猪.5 1. 呼吸增加 次 /min 特别是繁殖机 栏连接 公猪栏地坪下安装供暖管 屋顶上方安装无助力风 能低下 冲动抑制 射精量减少 精子密度低 畸形和死精 机连接 公猪栏与栅栏门连接 采精室南 北墙与窗户连接 子数增多 活力减退 引发大量母猪受胎率下降 低达 65% 窗户与湿帘安装位连接 供暖管末端与总进水口连接 总进 正常 9% 即或是高温气候短期影响 这种现象发生后 水口与加压泵连接 加压泵与无压力锅炉连接 其管理方便 3 5 个月难于恢复 迫使 应激 公猪遭受淘汰 严重影 使公猪饲养 精液采集 检测与分装的 3 个环节紧密相扣 响到繁殖 我们将这种现象引起的公猪繁殖机能性障碍 称 以提高养殖及人工授精效率 之为条件性 受高温环境影响 障碍 很难从药物选用恢复 3.1 技术构建 精液品质 精液量 精子密度 活力 正常精子数 反而 172 一种公猪人工授精 三位一体 养殖工艺及装置 可

177 改善原有公猪 养殖 采精 管理 分离现象 一方面使其 域 湿区域 3 个部分 实验室位于采精室相邻一侧 采精后 管理更方便 公猪饲养 精液采集和品质检测分装 3 个环节 精液递入实验室检测 减少精液送检时受外因影响 紧密相扣 提高了人工授精效果 另一目的在于提供了人工 3. 构建及连接 授精三位一体养殖方法及装置 比较原有方法可完成饲养 一种公猪人工授精 三位一体 养殖工艺及装置 其 采精和精液检查全过程 改变了驱赶公猪异地采精 易于受 连接关系 值班室 1 与实验室 2 连接 实验室 2 的一端与采 到舍外物理 化学和生物环境应激和疫病干扰 公猪保持正 精室 3 连接 采精室 3 的一侧与公猪栏 15 连接 公猪栏 15 常繁殖生理行为 以及采精和品质检查与保存的优良环境 地坪下装有供暖管 1 公猪栏 15 靠墙端与粪沟 16 连接 为了上述目的 将 15 头公猪饲养在同一单元 采精公 粪沟 16 上面与铸铁漏缝板 17 连接 公猪栏 15 上方与无助 猪赶入同车间采精区 采精后直接在车间实验室检测 分装 力风机 2 连接 公猪栏 15 前面与栅栏门 7 连接 西墙风 和保存备用 机安装位 5 与金属门 6 采精室 3 南墙与窗户 8 连接 窗户 3.2 环境调控 8 的一端与湿帘安装位 连接 湿帘安装位 另一端连接地 一种公猪人工授精 三位一体 养殖工艺及装置 将 下水池 23 连接供暖管 1 末端连接总进水口 11 总进水口 公猪集中饲养 环境温度控制在 适宜范围 车间 11 与加压泵 13 连接 加压泵 13 与锅炉 1 连接 锅炉 1 内配备公猪采精室 精液检查和实验室以及饲养员休息室 另一端与总出水口 12 连接 锅炉 1 下面与锅炉房 9 连接 从而达到养殖 采精检查及管理一体化要求 在人工小气 锅炉房 9 下面装有室内地坪 18 室内地坪 18 另一端与室外 候环境下饲养公猪 减少极差环境对公猪繁殖和精液品质影 地坪 19 连接 采精室 3 地上装有假母台 21 和镀锌管立柱 响 提高了公猪繁殖能力 采精过程在同一车间完成 减少 22 如图 1 图 2 图 3a 图 3b 图 3c 图 a 图 b 图 了外环境因素 如阳光 温度 粉尘 微生物 对精液品质 c 图 5 影响 夏季高温 3 时 采用 负压湿帘 降温系 统调节车间环境温度 将其控制在 范畴 调控下.1 夏季环境调控 降 5 7 保障安全过夏 冬季寒冷 1 时 采 条件配置 一种公猪人工授精 三位一体 养殖工艺及装置 夏 用地坪下热水循环供暖 以燃煤或沼气热源的无压力锅炉提 季小气候环控 车间采用纵向通风 根据猪只适宜风速要求 供热水在地坪下管道循环 同时配备加压泵使热水快速循环 按下式计算通风量 提高热效值 地坪下热水循环供暖仅需无压力热水炉 安全 通风量 m3/h 36 猪只适宜风速 m/s 猪 可靠 使床面温度达到 建筑材料选择 2 种极差温度 隔热 和 保温 使人工授精站屋面和 墙体减少热传导和热扩散 处在舒适环境里 低碳环保 一 般来讲 屋面为 双层金属彩瓦.2.35 cm + 夹层 PVC 复合材料 5 cm 轻钢压模板 有良好密封性和 图1 图2 隔热保温性能 便于夏季 负压 + 湿帘 降温 冬季 地 坪下热水循环 供暖 公猪在采精区 同样享受 优良环境 并在采精室假母台两侧装有安全防护栏 防止公 猪采精时对人员进行攻击 夏季小气候环境控制 采用 负压 + 湿帘 降温系统 湿帘型号 CELdek79 普通型 风机型号 FP5 型系统 图 3a 将车间温度控制在 冬季小气候调控以 地坪式 热水循环 供暖 采用常压锅炉燃烧 型号 GLHG-A Ⅱ型 助燃热水 利用自然落差使系统热水循环 在管道循环过程 中也可视线路长短或配备加压泵 型号 PUN-6E 热水 快速循环提高供热效果 保持温区床面温度达 3 38 精检实验室按卫生标准建设和维护 人工授精实验室主要设 备和仪器配置操作要求 按实验室布局分为干区域 分装区 图 3b 图 3c 173

178 图 a 图 b 图 c 舍横断面积 m2 图5 在 18 以上 该系统封闭运行 加水 1 次可用 1 年 利用 猪群夏季适宜风速参数 成年种公猪约 m/s 沼气或燃煤作为能源 能耗费用为耗电的 1/3 方便易行 应考虑车间长短 截面积大小 风速快慢 有无死角等情况 一次投入长期受益 具有增温速度快 操作简便易控的特点 当猪舍较长 通风量宜偏大一些 猪舍较短时 风量可偏小 地坪式热水循环供暖系统由热水循环管道和锅炉两 根据数据选配风机 考虑运行中调节风量需要 安装大 部 分 组 成 热 水 循 环 管 道 采 用 DN2 国 标 (GB ) 小 2 组风机能有选择性地分组运行 风机性能参数为 一般 镀 锌 焊 管 埋 设 于 水 泥 地 面 下 5 7 cm 处 管 道 间 距 按静压 25 Pa 一栏确定 见表 cm 管道可用循环泵增压 常压锅炉供暖 每小时 湿帘降温系统设计运行参数 生产 15 L 开水 每小时耗煤.2 kg 常压锅炉安装在锅炉 1 湿帘面积 湿帘 m 通风量 m /s / 过湿帘 2 3 风速 m/s 过湿帘风速取 1 2 m/s 房内 热利用率高 实现可控式 均匀 稳定供暖 保证适 温安全过冬 2 湿帘尺寸 湿帘厚 1 15 mm 高 1.5 m 1.8 m 2 种 如安装猪舍现成窗口 则根据窗口尺寸确定高度 最大.3 车间内配置 在车间设立种公猪饲养及采精区 将养殖与采精 同置 不超过 2 m 湿帘高度确定后 所需湿帘宽度按下式计算 一室 减少了异地采精和驱赶过程遭受冷 热环境 应激 湿帘宽度 湿帘面积 / 湿帘高度 也减少了疫病感染和环境污染 3 水 泵 选 取 选 用 扬 程 为 1 15 m 离 心 式 水 泵 1) 种公猪饲养栏位 配备 15 个公猪栏位 也可据实增 按 湿 帘 注 入 水 量.1.5 m /h 确 定 水 泵 流 量 跨 度 减 栏位隔墙以实体和漏花栅栏 1+1 配置 以 6 cm 9 1 m 车间高 m 长 3 m 根据上述估算 总风量约 高 2/ 砖墙 水泥砂浆抹面 上部安装 6 cm 金属栅栏 1 m /h, 需大风量时可选用 φ1 25 mm 风机 需小 从而保证舍内空气流动 3 3 风量时可选用 φ 6 mm 风机 湿帘按占地表面积 5% 6% 约 15 2 m 配置 钢 管 制 作 护 栏 一 般 防 护 栏 在 假 母 猪 的 左 侧 距 墙 壁 表 1 负压抽风 + 湿帘降温 系统选配风机参数 7 1 cm 护栏立柱净间距为 26 3 cm 形成公猪不 静压 /Pa 风机 直径 / 转速 型号 mm /(r/min) EM36 型 915 2) 采精区以一个栏位同等面积配置 中间位置安装 采 精 台 假 母 台 以 直 径 15 cm 高 出 地 面 7 cm 功率 /kw 能进入 人员可安全进出的格局 防止公猪攻击采精员 3) 假母猪 一般为木制或复合材料制作台面 用金属 风量 /(m3/h) 管材作支架 台面宽 26 cm 长 1 cm 高度 5 55 cm 能实时调整高度 假母台面呈圆弧形 相当于圆 1/ 在 FP5 型 冬季环境调控 采用 地坪式 热水循环 供暖 利用特殊装置水位 落差使整套系统热水循环 在密闭式管道循环过程中配备 加压泵使热水快速循环提高供热效果 热水供应以常压热 水炉 安全 可靠 保持受益区床面温度达到 3 38 假母台后部公猪阴茎伸出地方 将其下部削薄 便于公猪阴 茎伸出 并防止其受损伤 假母台后端至后支架应有 3 cm 距离 以方便公猪阴茎伸出和采精操作 假母台应固定在地 面 防止滑动或偏移 防滑垫 在假母台后方地面安置 1 6 cm 防滑垫 使公猪采精时站立舒适 防止滑倒 5 精液检测 分装 稀释 储存室 人工授精站实验 猪只腹部感觉舒适 减少了体热消耗 维持种猪日耗料 室规格 3 1 cm 靠墙安装试验台 其宽高为 (12 8) kg 室内温度可由该系统和猪群自体散热量保持 cm 用于操作和实验仪器安置 17

179 人工授精站实验室要按卫生标准建设和维护 实验室内 布局分为干区域 分装区域 湿区域 3 个部分 干区域用于.3 m 污水沟的最小坡度.5% 达到一次冲洗洁净.5 生产管理操作 放置显微镜 恒温载物台 精子密度计等 湿区域用来安置 一种公猪人工授精 三位一体 养殖工艺及装置 设 恒温水浴锅 电子称 磁力搅拌器 双蒸馏水器 连接水管 计理念和实践操作在于实现了 三位一体 即公猪饲养 / 水池等 分装区域则用以放置装瓶 分装机 冷却 包装 采精 实验室检验 一体化 改变了原有公猪饲养 采精 恒温冰箱等 实验室异地操作模式 新工艺设计与生产管理 适于 2 人操. 车间清洁化 作管理 2 个员工常年在某车间操作管理 避免了猪病传入 养殖区清洁沟起始端分别安装两套获得国家实用新型 与传出 减少疾病感染机会 猪群异动工作量小 节省时间 专利压差虹吸式冲洗水箱 专利号 ZL 提高了劳动生产效率 冲洗粪沟 对排放粪污进行自动化 节水型 高效率冲洗 5 以减少粪尿滞留 堆积发酵 腐败 异味扩散和有害气体 5.1 屋面 CO2 HS2 NH3 等 对空间的污染 保证清洁化生产 本研究小组提供 HN KY125-5 型畜禽舍节水型虹 车间护围及选材 采用 双层金属彩瓦.2.35 cm + 夹层 PVC 复 合材料 5 cm 轻钢压模结构 具有良好密封性和隔热 吸式冲洗水箱 完全改变 GB/T 中 小型 保温性能 集约化养猪设备 中收录的 虹吸胆式结构的虹吸水箱 手 5.2 护围结构 动拉杆式的虹吸水箱 翻斗式水箱 工作原理 应用了更 地平上墙体位 9 cm 砖墙 上部采用砖墙或轻钢压模墙 先进的流体动力学技术和制造技术 成本低 经久耐用 效益 体 窗体距地面 6 cm 更有良好通风性能 在窗体内侧采用 显著 克服了这 3 种水箱的缺点 第一 虹吸胆式结构的虹吸 6 cm 金属铁栅栏保护装置 这样能够充分享受最经济的自 水箱虹吸管直径不能大于 DN5 限制了水量冲力 虹吸胆容 然通风 保持车间内空气新鲜 易老化 密封效果不好 漏水浪费水资源 虹吸管口不易打开 5.3 铝合金窗户 产品性能不好 产品使用寿命短 经济效果差 第二 手动拉 南北窗户规格为 cm 外置式双门梭窗 改 杆式虹吸水箱 占有一定工作时间 增加员工工作量 漏水 变原有开启度 5 达到 1% 安装高度离地面 6 cm 配有 磨损现象重 第三 翻斗式水箱占用畜禽舍面积大 铁栅栏防护装置 保证外界自然风在舍内对流 HN KY125-5 畜禽舍节水型虹吸式冲洗水箱具有 5. 屋顶 3 大优点 第一 虹吸水箱虹吸管的直径能够达到 DN1 安装无助力风机 型号 TG-88 型 使有害气体及 增加了水的冲力 实现了大冲力的目的 冲洗效果好 全金 时排除 通过涡轮叶壳叶片捕捉迎风面上的风力推动叶壳旋 属钢体结构 产品性能好 终生不用维修 产品使用寿命长 转 涡轮叶壳旋转产生离心力 将涡壳叶壳内空气由背风叶 ( 设计使用寿命 2 年 ) 经济效果好 第二 全自动无需人 片间诱导排出 由于空气排出 使涡轮壳内下部附件区域产 工操作 减少了饲养员的工作量 第三 当注水达到压力差 生负压 维持空气动态平衡 正压区域空气就会自然地向负 位平衡状态后 翻水斗一次下水即时发生虹吸现象 节约用 压区流动 从而实现通风换气 无动力自然通风器由涡轮叶 水 是一种节水型新产品 轮 中心轴系统 切风片 泛水切口 支座等组成 不仅 设 备 选 用 技 术 参 数 1 HN KY-5 型 水 箱 尺 可以采光 而且防水性能可达 1% 无动力风机无需电力 寸 mm 虹 吸 管 直 径 9 mm 水 量 利用自然风和室内外温差 轻易驱动涡轮叶片转动 无成本 5 kg 翻水斗容积 7 L 适用范围 污水沟的最大长度 运转 无噪音 无污染 节能 可为用户节约能源和人力 5 m 污水沟的最大宽度.5 m 污水沟的最小坡度.5% 从而降低产品运行成本 改善车间工作环境 提高工作效率 达 到 一 次 冲 洗 洁 净 2 HN KY-25 型 水 箱 尺 寸 也提高了产品质量 mm 虹吸管直径 76 mm 水量 25 kg 6 推广应用 翻水斗容积 5 L 适用范围 污水沟的最大长度 25 m 污水 一种公猪人工授精 三位一体 养殖方法及装置 在 沟的最大宽度. m 污水沟的最小坡度.5% 达到一次 湖北新光农牧科技股份有限公司 湖北阳新猪婆湖养殖有限 冲洗洁净 3 HN KY-125 型 水箱尺寸 6 55 公司 湖北鑫东生态农业有限公司 湖北楚越生态农业有限 mm 虹吸管直径 6 mm 水量 125 kg 翻水斗容积 L 公司 湖北黄冈天意种猪扩繁场等数十家大型养殖企业得到 适用范围 污水沟的最大长度 1 m 污水沟的最大宽度 了推广应用 产生了理想效果 175

180 人工授精技术中种公猪的繁殖管理 贾 同1 陈预明2 张守全3 1 深圳康达尔养猪有限公司 广东 深圳 广东广宁广三保畜牧有限公司 广东 3 华南农业大学动物科学学院 广州 为了适应现代化养猪生产的需要 保证人工授精技术中 猪 的种公猪进行调教及管理 2.1 种公猪的调教方法 刺激法 种公猪的选择 1.1 种公猪的来源 龄以下的种公猪调教成功率显著高于 1 18 月龄的种公 种公猪精液的质量 需要对入群的种公猪进行选择 入群后 1 广宁 5162 调教前, 每天收集发情母猪的分泌物 尿液和种公猪的 种公猪品种通常选择杜洛克猪 长白猪 大约克夏猪 精液 尿液 包皮冲洗液等泼洒于假台畜背部和后躯上 然 等优良品种 以及培育品种 配套系 种公猪来源于取得 后将待训公猪每天放进采精室接触假台畜 1 min 以刺激 省级 种畜禽生产经营许可证 的原种猪场 具有完整系 待训公猪, 激发待训公猪性冲动, 使其主动爬跨假台畜 谱和性能测定记录 评估优良 符合种猪要求 种公猪健康 无国家规定的一 二类传染病 1.2 系谱审查选择 根据三代系谱 考察其生产成绩和体型外貌指标 进行 观摩法 让待训公猪隔栏观摩采精种公猪的爬跨和采精过程, 或是公母猪自然交配过程, 并配合按摩待训公猪阴茎部 位, 使待训公猪对采精 ( 交配 ) 过程有一个感观认识 经旁 种公猪初选 观 2 3 次后, 再让其试爬假台畜进行采精 1.3 外貌评定 引诱法 从公猪的正面 侧面 后面观察公猪的体质结实度 整 选择发情旺盛 发情明显的后备母猪, 让待训公猪爬 体发育程度 品种特性和精神状态 再对公猪部分器官重点 跨, 等待训公猪阴茎伸出未进入母猪阴道时, 将其拽下, 如 观察 此反复几次后, 当待训公猪性欲达到最高潮时, 将母猪赶 睾丸 左右两侧睾丸基本对称 大小基本符合所处月龄要求 阴囊皮肤松紧适中 能够适应日后的增长以及在不同气温 下的收缩与松弛 睾丸下垂 远离尾根的公猪 一般抗热 走, 诱导待训公猪爬跨假台畜, 待训公猪阴茎伸出后, 用手 握住螺旋阴茎头, 有节奏地刺激阴茎螺旋体部, 进行采精 2.1. 人工助性法 对于比较难调教的待训公猪, 可以先挤掉待训公猪包皮 应激能力强 的积尿, 轻轻地隔着包皮抚摸待训公猪阴茎, 使其变硬, 促 使阴茎伸出包皮, 然后握住阴茎, 使其达到性高潮, 靠近假 肢蹄 要求四肢粗壮有力 蹄叉不分开 蹄壳无裂纹 特别要 台畜拍打待训公猪的屁股 一般情况下, 待训公猪会跃起爬 注意后肢的选择 跨假台畜, 最后在假台畜上完成射精过程 种公猪调教过程中应注意的问题 乳头 符合品种要求 长白 大白猪的有效乳头 7 对以上 杜 洛克 6 对以上 作为终端父本的公猪对此可适度放宽 还要求公猪尾根粗大 摆动有力 阴茎包皮处大小适 中 无关节肿大 身体无赘肉等 2 种公猪的调教 种公猪性成熟后即开始调教 一般外来品种 7 8 月 龄性成熟 8 9 月龄开始调教训练 国内品种 6 月 龄性成熟 7 8 月龄开始调教训练 有研究表明 1 月 采精员必须操作规范 熟练, 有耐心 细心 恒心 和爱心, 给种公猪营造一个和谐的环境, 尽量减少对种公猪 的不良刺激 2 种公猪调教要在进食后 1 h 或进食前进行, 有利于 保持种公猪大脑的清醒 3 每次调教种公猪时间以 1 min 左右为宜 同时, 调 教前待训种公猪最好不予本交, 使之无交配史 待训种公猪初次调教成功后, 每隔 1 2 d, 按照

181 图1 杜洛克公猪 图2 长白公猪 初次调教成功的程序进行再次调教, 以加深待训种公猪对 假台畜的认知, 经过 1 个星期的加强训练, 待训种公猪就 会形成固定的条件反射 5 调教人员要注意自身健康安全防范 特别是注意防 控人畜共患病, 如布氏杆菌病等 3 种公猪的饲养管理 3.1 种公猪的饲养 种公猪的营养水平 满足种公猪各种营养物质正常生理需求 是养好种公 图3 大约克夏公猪 合理的更新换代 在规模化育种猪场 为了快速积累遗传进展 种公猪使 用 1 年左右即应淘汰或赶至扩繁场继续使用 而在一般商品 猪场 种公猪使用年限可适度延长 防寒防暑 冬季要防寒保温 可减少饲料的消耗和疾病的发生 夏 季要防暑降温 高温影响尤为严重 轻者食欲下降 性欲降 低 重者精液品质下降 甚至会中暑死亡 防暑的措施有很 多 以水帘降温最为有效 适当配以通风 洒水 洗澡 遮 猪的物质基础 营养水平过高 过低可使种公猪变得肥胖 阳等方法 可因地制宜进行 和消瘦而影响配种 饲养种公猪的日粮不仅要注意蛋白质 3.2. 的数量 更要注意蛋白质的质量 如日粮中缺乏蛋白质 精液检查 实行人工授精的猪场 种公猪每次采精都要检查精液品 氨基酸不平衡 对精液品质有不良影响 如长期饲喂含蛋 质 根据精液品质的好坏 调整营养和配种次数 这是保证 白质过多的日粮 同样会使精子活力降低 密度小 畸形 种公猪健壮和提高受胎率的重要措施之一 精子多 饲养方式 目前猪场以规模化猪场为主 种公猪常年担负配种任 控制好采精频率 在实行人工授精的规模化猪场 要求种公猪的精液量大 且品质好 采精频率一般以 2 次 / 周为宜 且过段时间应 务 宜采取 一惯加强 的饲养方式 从而均衡地保持种公 适当调整至 3 次 /2 周 以便给种公猪适当的休息时间 猪配种所需的高营养水平 保证公猪在生长阶段每天都有增 重 直到达 3 kg 体重 饲喂技术 分批次卫生防疫制度 为保证种公猪精液正常使用 平时加强卫生等消毒工 作 如对种公猪驱虫或注射疫苗时应分批次进行 已驱虫或 种公猪日粮应以精料型为主 适当配以青绿饲料 体积 注射疫苗的种公猪 2 周内精液尽量不用 但仍需按正常程序 不易过大 以免把种公猪喂成草腹影响配种 饲喂种公猪应 进行采精 2 周后再对未驱虫或疫苗注射的种种公猪进行驱 定时定量 每日 2.5 kg 日喂 2 次 自由饮水 并根据品种 虫或注射疫苗 体重 采精次数增减料量 种公猪的管理 单栏饲养 成年公猪不需运动 针对不同阶段的公猪要采取不同的管理办法 成年公猪 不需运动 种 公 猪 一 般 实 行 单 栏 饲 养 公 猪 可 以 在 定 位 栏 在实行人工授精的规模化猪场 种公猪的好坏直接关系 m 和大栏 m 饲养 单栏饲养 到整个猪场的生产水平及经济效益 所以应加强对种公猪的 种公猪安静 减少外界的干扰 食欲正常 杜绝了爬跨其 选择 调教及管理工作 他公猪和养成自淫的恶习 177

182 人工授精技术在生猪遗传改良中的作用 陈 斌 湖南农业大学动物科技学院 长沙 我国是世界第一养猪大国 生猪养殖是我国的传统优势 1128 速度 如在法国 人工授精的比例直到 1987 年还维持在 3% 产业 据相关报道 21 年全国生猪存栏.5 亿头 出栏 的低水平 而 1997 年则超过 5% Ollivier 1998 目前 生猪 6.67 亿头 猪肉产量 5 7 万 t 约占全世界的一半 在发达国家如美国 丹麦 瑞典 法国等 均在养猪生产中 猪肉是我国人民动物蛋白的主要来源 猪肉消费量保持在肉 大规模使用人工授精技术 如丹麦 9% 95% 的母猪采用 类消费总量的 6 以上 所以 猪肉生产直接影响到人们 人工授精 的生活水平 同时 随着农业结构的调整 养猪业已成为农 猪人工授精技术早于 年在我国推广 但由 民致富的重要途径 逐渐成为农业经济的支柱产业 随着经 于当时设备落后 技术水平较低 导致受胎率 产仔性能 济与社会的发展 我国养猪业既面临着良好的机遇 又面临 疾病控制等均受到较大影响 未能在规模养猪生产中应用 着严峻的挑战 必须大力提高养猪业的科技水平 向科技要 自 1995 年以后 国外猪人工授精技术 设备相继进入我国 产量 向科技要效率 各大规模化养猪场逐步开展人工授精 取得了满意的效果 我国养猪业生产水平不高 出栏生猪数量多 但质量差 人工授精技术得到迅速普及 大 中 小养殖户都使用该 其根源在于种猪行业基础薄弱 长期存在重引种轻选育倾 项技术 以减少公猪饲养成本 目前 在规模化养猪较发 向 认为进口种猪便捷 立竿见影 选育费钱费时收效不大 达地区 各大型种猪场纯种猪群中 9% 采用人工授精 商 从而花费大量资金盲目进行重复 大批量引进种猪 引进后 品猪生产也达到 6% 7%[5] 缺乏继续选育的动力 导致种猪退化 这对于我国养猪业的 1 [1] 可持续发展不利 [2,3] 近 2 年来 我国猪的育种技术水平有 了很大提高 对猪的生产性能的提高和养猪业的发展做出了 采用人工授精技术 加快猪的育种进展 在猪的育种实践中 通常要考虑每年所能获得的遗传进 展 即用每世代的选择反应除以世代间隔 用 Gt 表示 重要贡献 但从总体上看 仍落后于发达国家 主要表现为 育种技术水平低 良种繁育体系不够完善 种猪质量不高和 良种率低等 郭万库等 2 通过简要分析我国近几十年来的猪育 种情况 发现我国引进的优良瘦肉型品种 经选育后还是赶 不上同时代国外的猪种 主要有 8 个方面原因 其中的一个 该公式表明 为了加快选育进展 必须考虑 增加可利 用的遗传变异 提高选择强度 增加育种值估计的准确度 缩短世代间隔 其中 σa 是加性遗传效应标准差 通过人工授精技术 重要原因是人工授精技术推广和普及率不高 尽管猪的人工 可以扩大群体规模 公猪的来源更加广泛 从而增加群体的 授精技术已经推行了多年 但仍有相当多的种猪场还在使用 遗传变异性 在同样的选择强度下 大规模育种群将较长时 自然交配 这阻碍了优良基因的扩散速度和各种猪场间遗传 间保持较理想的可利用遗传变异度 联系的建立 [] 选择强度 i 是不受性状影响的通用参数 选择强度与留 猪人工授精技术是用人工方法采集公猪精液 经过检验 种率间存在直接对应关系 留种率越低 选择强度越大 如 和处理 将合格的精液输送到发情母猪体内使其受胎 人工 留种率为 1% 时 i=2.66 留种率为 5% 时 i=2.6 留种 授精技术在猪育种中的应用已有 7 多年的历史 迄今为止 率为 1% 时 i=1.755 留种率为 15% 时 i=1.55 采用 仍是猪育种中重要的生物技术之一 Sellier 和 Rothschild 人工授精时 所需种公猪数大大减少 从而使公猪留种率降 1991 通过对不同国家采用猪人工授精技术地区的回顾 低 大大提高公猪的选择强度 加快遗传进展 Vangen 和 推断 1991 年以前 人工授精技术保持在一个平均的低水平 Sehested 1997 认为 若在纯种繁育中 1% 地使用人工 随后 由于精液运输服务的改进及农场主可以进行本场的 授精 公猪的选择强度可提高 1 倍 [6] 人工授精工作 人工授精技术在很多国家都有较快的推广 178 rai 是指选择的准确性 采用人工授精技术时 公猪的

183 后代数量增加 对公猪进行遗传评估时可利用的信息增加 系可以为育种者对不同环境下的动物进行选择决策时提供 育种值估计的准确度提高 对于遗传力偏低的性状尤为重 依据 Mathur 等对加拿大猪改良方案猪群的研究表明 一 要 公猪选择的准确性提高了 有利于发现顶尖公猪 从而 个猪群的平均关联度应大于 3% 对 2 个有较多遗传物质交 加快改良速度 换的猪群 关联度应大于 5% 畜群间的关联度定义为畜群 L 是世代间隔 采用人工授精技术时 核心群种公猪使 效应的相关系数 Mathur 等根据加拿大猪的遗传改良实践 用年限可得到有效控制 更容易提高公猪更新率 当后备公 提出了场间遗传联系的措施 即 使用良好遗传联系的人工 猪的估计育种值超过种公猪时 现有核心群种公猪就可以转 授精公猪 从良好遗传联系的猪群中选择人工授精公猪 从 移到繁殖群或者商品群使用 这样可以有效缩短育种群世代 良好遗传联系的公猪获取足够比例的后代 [8] 间隔 改善育种效率 加快年遗传进展 3 2 采用人工授精技术 缩短遗传时距 猪的繁育体系呈 金字塔 形 其中 金字塔 顶部 采用人工授精技术 开展猪的联合育种 育种群种公猪头数越少 公猪选择强度越大 育种进展 是育种场 原种场 核心群在育种场里选育 对已选择的 也越高 但由于目前我国种猪场的种猪核心群规模普遍偏 品种 品系进行纯繁提高 金字塔 中部是繁殖场 饲养 小 留种公猪数少 会加快群体的近交速度 为了克服这个 繁殖群 它的基本任务是将来自核心群的纯种扩群繁殖 缺点 有必要开展猪的联合育种 以实现我国养猪业的可持 向商品场提供后备种母猪或提供品种 品系杂种母本 金 续发展 字塔 的底部是商品场 饲养商品代 它的任务是按照育 联合育种是现代动物育种理论的精髓 世界养猪业发 种计划规定的杂交摸式 生产优质的商品猪上市 达国家的共同经验表明 联合育种是加快动物群体遗传改 在繁育体系中 核心群的遗传改进需要通过繁殖群传 良 提高育种效益的重要途径 张勤 27 国际上 递到商品群 此过程是核心群的优良基因传递到商品群的 种猪育种的主流趋势就是以不同组织方式的联合育种体系 流程 这里有一个遗传时距的问题 遗传时距是指一次选 即便类似 PIC 这样的大型跨国种猪公司在其体系内也是实 择的遗传进展从核心群全部传递到商品群的时间 繁育体 行跨国联合育种 因此 可以预见 我国未来的种猪育种 系中优良基因的流向是从塔顶向塔底 而且是不可逆的 体系将是以全国性和区域性联合育种为主的模式 遗传时距有 2 种不同的传递模式 1 逐级传递 公畜 母 [7] 猪的联合育种就是将相同或相近育种目标的种猪场有 畜严格按级传递 公畜取得的遗传进展由核心群传递到繁 组织地联合起来建立的良种繁育体系 形成一个大的核 殖群 再由繁殖群传递到商品群 2 公畜越级传递 母畜 心群, 即 超级核心群 每个猪场 群 相当于一个子 逐级传递 公畜取得的遗传进展可以由核心群直接传递到 核心群 各猪场 群 开放 整个群体 育种系统 闭 商品群 这种模式的遗传时距比逐级传递模式缩短一半 锁繁育 必要时才导入基因 以达到加快育种进展和提 通过人工授精技术 核心群的公猪可以扩大利用 很容 高群体性能水平的目的 猪的联合育种内容包括 建立 易做到宝塔形杂交繁育体系的繁殖群和商品群都能利用核 相应的育种组织 统一对性状的定义 实施统一的育种 心群的优良公猪的精液 从而使核心群的改良成果能更快地 方案 建立科学 规范的性能测定体系 应用先进的遗传 传递到商品群 缩短遗传时距 让商品群提前受益 从而加 评估方法 (BLUP) 应用人工授精技术 建立和加强场间 速商品群的改良 大幅度提高养猪业的经济效益 遗传联系 实现区域性和全国性的联合遗传评估 实现种 猪的跨场 跨区域选择 在猪的联合育种中 人工授精技术是必不可少的重要组 成部分 采用人工授精技术 提高良种利用率 在自然交配的情况下 1 头公猪 1 年负担 3 头母 猪的配种任务 繁殖仔猪 6 8 头 而采用人工授精技 术 1 头公猪可负担 5 头母猪的配种任务 繁殖仔 自从 BLUP 理论问世以来 各国均纷纷将该理论用于 猪 8 1 头 极大地提高公猪的利用率 利用人工 区域性甚至全国性遗传评估 大大提高了选种的准确性 但 授精技术 使得养猪生产者可以最大限度地利用优秀的公 由于缺乏场间遗传交流 该方法的使用存在很大的局限性 猪 让它们生产更多的后代 将它们的优良基因迅速扩散 人工授精技术的广泛使用 使场间可通过种猪精液进行遗传 提高其优良基因在群体中的频率 同时 人工授精技术可使 交流 为区域性或全国性联合育种奠定了坚实基础 公猪的使用较少地受到时间和地点的限制 使得养猪生产者 人工授精技术是建立和加强场间遗传联系的有效途径 可以在较大的范围内选择所需要的优秀公猪 使优秀公猪的 采用人工授精技术 实现优良种公猪的跨场使用 进行基因 影响范围扩大 从而促进生猪的品种改良和商品猪生产性能 交换 中心测定站及各育种群之间建立了遗传联系 遗传联 的提高 179

184 在农村 只有依靠有组织 有计划地普及人工授精技 育种场纯种猪的推广 22 年前建设 家种公猪站 合 术 才有助于畜牧主管部门将全县所要的地方品种公猪和外 理布局人工授精技术服务点 用于社会化遗传改良与生猪良 种公猪的规划权掌握在自己的手中 以便推行既定的杂交模 种补贴工作 生猪良种补贴项目优先选用经过性能测定和遗 式 推行有计划的杂种优势利用 提高出栏率 人工授精技 传评估的种公猪 术是推行既定杂交模式的根本保证 彭中镇 27 [9] 我 国 于 21 年 开 始 实 施 全 国 生 猪 遗 传 改 良 计 划 5 采用人工授精技术 推进全国生猪遗传改良 年已遴选出 2 家国家生猪核心育种 场 标志着全国性的生猪遗传改良计划迈出了实际性的步 计划的实施 为推进生猪品种改良进程 提高生猪生产水平 促进生 猪产业持续健康发展 农业部于 29 年组织制定了 全国 伐 随着全国生猪遗传改良计划的逐步深入 人工授精技术 将发挥越来越重要的作用 生猪遗传改良计划 该计划明确提出了建设 种公猪站和人工授精体系 其内容主要包括 1 根据全国 参考文献 生猪优势区域布局规划和国家生猪核心育种场的分布情况 [1] 彭中镇. 改进外种猪育种工作的几点建议 [C]. 中国动物遗传 完善区域性种公猪站建设 种公猪站的公猪来源于经性能测 育种研究进展. 北京 : 中国农业科技出版社, 25, 3-8. 定 遗传评估优秀的公猪 鼓励核心育种场和种猪生产性能 [2] 陈瑶生. 中国的猪育种研究现状与发展趋势 [J]. 华南农业大学 测定中心将测定评估优秀的公猪提供给种公猪站 2 依托 学报, 25, 26( 增刊 ): 国家生猪良种补贴项目 加快普及猪人工授精技术 将优良 [3] 陈瑶生 刘海良 刘小红 等. 我国种猪遗传评估与联合育种 种猪精液迅速推广应用到生产中 核心育种场优良母猪通过 进展与策略 [C]. 中国动物遗传育种研究进展. 北京 中国农 扩繁不断地将良种母猪推广至生产中 从而带动商品猪生产 业科学技术出版社, 水平的提升 215 年起 种公猪站饲养的种公猪必须经过 性能测定 猪人工授精技术服务点布局合理 服务到位 为 了 贯 彻 落 实 全 国 生 猪 遗 传 改 良 计 划 农业部于 21 年制定了 全国生猪遗 传改良计划 实施方案 该方案要求国家 核心育种场开展遗传交流 遗传交流以种猪精液交流为主 每个国家生猪核心育种场至少应与其他 3 个核心育种场保 持持续的遗传交流 遗传交流方式主要有 2 种 一是直接 [] 郭万库 师守堃 鲁绍雄. 我国猪育种结构及其发展的探讨 [J]. 中国畜牧杂志, 2, 36(5): [5] 朱健彬 张守全. 猪人工授精技术和生猪遗传改良 [J]. 猪业科 学 [6] Vangen O Sehested E. Swine production and research in Norway Pig News Info[J] 1997,18(1) [7] 张勤. 猪的人工授精与联合育种 [J]. 猪业科学 将他场优秀种猪引入本场育种群 二是将他场优秀种公猪 [8] Mathur P K, Sullivan B P, Chesnais J P. Measuring 精液引入本场育种群 应保证 5% 以上的育种群母猪用他 connectedness: concept and application to a large industry 场种公猪配种 经全国遗传评估评定最优秀的种公猪应根 breeding program[j]. Proc. 7th World congress. Geneie 据场间遗传交流计划参与场间遗传交流 [1,11] Applied Livestock Prodcon, 22,32: 根据全国生猪优势区域布局规划和国家生猪核心育种 场的分布情况 212 年前选出 1 家种公猪站用于核心育 种群的公猪精液交换 公猪站的种公猪主要来源于国家生 猪核心育种场 且必须是经性能测定 遗传评估优秀的种 公猪 为推进国家生猪良种补贴项目的实施与国家生猪核心 18 [9] 彭中镇 刘榜 赵书红 朱猛进. 大型猪人工授精中心与育种 值的跨群比较 [J]. 猪业科学 [1] 中华人民共和国农业部. 全国生猪遗传改良计划 29-22) [S] 农业部. 农办牧 [29]55 号. 北京 出版者 29 [11] 中华人民共和国农业部. 全国生猪遗传改良计划 29-22) 实施方案 [S] 农业部. 农办牧 [21]1 号

185 猪繁殖相关性状遗传标记研究进展 赵志超 黄 涛 李大全 石河子大学动物科技学院 新疆 石河子 8323 摘 要:在猪繁殖性状的选育中遗传标记辅助选择具有常规育种技术不可比拟的优势 对与产仔数 排卵数 初情期 子宫长度 乳头数 精液品质等有关的数量性状基因 QTL 和与猪繁殖性状候选基因ESR FSH-β PRLR OPN RBP NCOA1等的研究进展进行综述 关键词 猪 繁殖性状 QTL 候选基因 猪的繁殖力是影响养猪业生产效益的主要因素 对猪产 影响活产仔数位点 该位点并对仔猪出生总数存在着潜在 仔数性状的选育和改良是猪育种工作的主要目标之一 由 影响 另外有研究报道, 在猪的 号 6 号 7 号 8 号和 于猪繁殖性状是限性表达的低遗传力性状 通过常规育种技 15 号染色体上也存在着显著影响产仔数的 QTL 术选育很难在短期内获得较大的遗传进展 随着分子生物学 1.3 排卵数相关 QTL 和分子遗传学理论和技术的不断发展, 从分子水平上寻找控 Wi lki e 等 B r a u n s c h w e i g 等 和 Campbell 等 在 制猪产仔数的主基因并应用到育种实践中, 进行标记辅助选 SSC8 检测到排卵数或黄体数 QTL Sato 等和 Rohrer 等在 择, 已成为可能 本文对与猪繁殖力相关的 QTL 和候选基 SSC3 上发现了排卵数 QTL Cassady 等和 Holl 等检测到 9 因研究进展进行综述 号染色体上有排卵数 QTL 另外在 13 号染色体 15 号染色 1 体和 1 号染色体上也有控制排卵数的 QTL 猪繁殖性状QTL定位情况 1.1 精液品质相关 QTL 1. 初情期 QTL Xing 等利用 5 个全同胞家系的 26 头 F2 代白色杜洛 rohrer 等 [2] 利用梅山猪和合成品系猪进行杂交而建立 克 二花脸种公猪 针对 183 个微卫星标记 定位了可能 的资源群 针对 57 个微卫星标记 定位了与初情期有关 影响种公猪射精量和射精次数的 QTL 分别位于 15 号和 17 的 QTL 在 1 号 1 号 染 色 体 上 而 且 1 号 染 色 体 上 的 号染色体 Sironen 等利用 SNP 芯片将精子圆形顶体缺失 QTL 所跨区域的遗传距离初步估计为 125 cm 加性效应 症 knobbed acrosome defect KAD 定位在猪 15 号染 为 d 其遗传效应要远大于同群体中位于 1 号染色 色体上.7 Mbp 的区域内 体上的 QTL 加性效应为 9.35 d YANG 等证明分别在 1.2 产仔数相关 QTL SSC1 上 1 cm 处和 SSC7 上 5 cm 处存在影响猪初情期的 Paszek 等利用基因组扫描的方法发现在猪 7 8 号染色 QTL 位点 并第 1 次报道了在 SSC17 上存在影响母猪的初 体上可能存在影响死胎数的 QTL Wilkie 等的研究证实了 情期的 QTL Cassady 等报道在 SSC7 8,12 和 15 上存在 存在该 QTL 并将其定位于 8 号染色体末段靠近 SO227 标 影响初情期的 QTL 位点 记 1 cm 的区域内并估计其加性效应为 -.31 头 显性效应 1.5 子宫长度 QTL 为 -.57 头 Yasue 等利用小型猪和梅山猪杂交发现 在 Wilkie 等 研 究 发 现 5 号 染 色 体 上 可 能 存 在 影 响 子 宫 6 号染色体上可能存在个终止胎儿发育的基因或基因群 并 长 度 的 QTLs, 该 QTLs 对 子 宫 长 度 性 状 的 加 性 效 应 为 证实该区域位于标记 SW855 和 SW122 之间约 7 cm 的染色 (87.2±27.39)cm 显性效应为 (-31.5±5.11)cm Rohrer 体片段上 José L Noguera 等在对一个 Iberian 梅山的 等对 7 号染色体基因组进行扫描时发现该染色体上可能存 资源群的研究中发现了基因组水平极显著的 QTL SSC13 在影响子宫长度的 QTLs, 但是加性效应比 5 号染色体上的 上 的 QTL 来 源 于 梅 山 加 性 效 应 为 +.71 产 活 仔 数 和 QTLs 要小得多 Rathje 等研究发现在 X 染色体上也可能存 +.61 总产仔数 SSC17 上的 QTL 来源于 Iberian 猪 效 在影响子宫容量的 QTLs 目前, 通过基因组扫描发现, 在猪 应为 +.73 产活仔数和 +.68 总产仔数 K. Li 等 [1] 用基 的 18 条常染色体中有 11 条可能存在影响繁殖性状的 QTLs 因组扫描的方法对猪的染色体进行分析 并用最小二乘法 在 X 染色体上尽管连锁分析的结果没有达到阈值, 但仍可能 对 QTL 进行分析显示在猪染色体 SSC15 的 88cM 上存在着 存在影响排卵数和子宫容量的 QTLs Kim 等发现 SSC8 上存 181

186 在影响子宫容积的 QTL 数高.37 头 (P <.5) 在长白猪中 BB 型的这两性状相应 1.6 乳头数 地比 AA 型高 1.18 和 1.2 头 目前 FSH-β 基因已用于辅 Wada 等 发 现 在 1 7 号 染 色 体 上 有 乳 头 数 的 QTLs Hirooka 等对梅山猪和 Dutch 构建成的商品猪资源家系进 助选种以提高种群的产仔数性状 取得了明显的改良效果 2.3 催乳素受体 (PRLR) 基因 行全基因组扫描时发现 SSC2 和 SSC12 上有父本印记的乳 催乳素是动物繁殖所必需的垂体前叶肽类激素 其 头数 QTL 在 SSC1 和 SSC12 上, 梅山猪具有增加乳头数 功能受到催乳素受体的调控 Vincent 等将 PRLR 基因作 的 QTL 而在 SSC2 上则有减少乳头数的 QTL King 等 [3] 为 5 个 PIC 品系窝产仔数性状的候选基因进行了研究 发 扫描 8 号染色体影响母猪繁殖性状的 QTL 时把乳头数 QTL 现这个基因与其中 3 个品系的总产仔数和活产仔数显著相 定位在 SSC8 短臂 关 P <.5 在 纯 合 基 因 型 之 间 效 应 大 小 是 每 窝 增 2 加.66 1 头以上的仔猪 Putnova 等同时运用 Alu I 和 候选基因 2.1 雌激素受体 (ESR) 基因 Hpa Ⅱ限制性内切酶对 PRLP 基因进行基因分型 与 12 雌激素受体 (ESR) 基因是第 1 个比较成功的猪产仔数候 胎次产仔记录进行关联分析 表明 AluI 酶切位点在长白 选基因 Rothschild 等发现 ESR 基因与产仔数主效基因紧 品系中主要与窝产仔数相关 它影响猪的头胎产仔数 而 密连锁 并将猪 ESR 基因定位于 1 号染色的 P2 P25 区 Hpa Ⅱ酶切位点也与窝产仔数有关 但它主要影响长白猪 域 用含 5% 梅山血的 2 个合成系母猪为材料 对 ESR 基 的断奶时仔猪数目 Van 等发现 PRLR 基因显著地影响初 因进行 RFLP 分析发现 Pvu Ⅱ酶切位点的有利基因 B 与高 情期 受精年龄和体重 对总产仔数和产活仔数也有明显影 初生窝仔数相关联 纯合子 BB 母猪第一胎产仔数和产活仔 响 施启顺等 [6] 研究表明 PRLR 基因 AA 型为有利基因型 数都比纯合 AA 母猪多 2.3 头 P <.1 所有胎次多 1.5 在大白猪中 AA 型比 BB 型总产仔数高 2.1 头 (P <.1) 头 P <.1 陈克飞等 对 5 个不同品种 262 头母猪进行 产活仔数高 2.77 头 (P <.1) 在长白猪中 AA 型母猪的这 基因多态性分析表明 ESR 基因在这些种群中对产仔数均 两性状相应地比 BB 型高 3.33 和 3.3 头 ( 均 P <.1) 孙 有极显著影响 P <.1 ESR 位点 BB 基因型母猪与 AA 敬礼等 [7] 研究表明 PRLR 基因对大长杂交一代母猪产仔数 基因型母猪相比 每胎总产仔数平均多 头 每 有显著影响 ( P <.5) 对母猪产仔数呈现出 AA>AB>BB 胎产活仔数多 头 张淑君等报道 ESR 基因的 的趋势 ) Pvu Ⅱ位点在二花脸 大白猪和长大母猪中存在多态性 且 2. 骨桥蛋白 (OPN) 基因 [] 对产仔数的影响趋势是 BB>AB>AA 目前已有很多研究 OPN 基因编码的蛋白是一个分泌型糖基化磷蛋白, 广 结果表明 ESR 与猪产仔数显著相关 但与生长发育性状和 泛存在于乳汁 子宫 胎盘等组织和体液中, 与猪的繁殖密 胴体性状之间无显著的负遗传相关 因而可以利用 ESR 基 切相关 Southwood 等研究了 3 个梅山猪合成系 3 个大白 因同时改良猪的繁殖性状与生长发育和胴体性状 ESR 基因 猪合成系以及 1 个长白猪合成系的产仔数与 OPN 位点的关 在猪育种中已经得到广泛应用 系, 结果发现在 13 个等位基因中, 有 5 个等位基因与产仔 2.2 猪卵泡刺激素 β 亚基 FSH-β 基因 数显著相关 Liaw 等证明了 (TG)13 (TG)1 (TG)21 和 赵要风等 发现 FSH-β 亚基基因有一长度为 292 bp 的 (TG)2 交替基因与 NBA 和产仔成活率有关 孟庆利和刘铁 逆转座子 由于此逆转座子的插入造成了该基因位点的多态 铮在二花脸猪和苏钟猪上也得到了相似的结果 Korwin- 性 并对几种猪种的个体进行了 FSHβ 亚基基因位点的基因 Kossakowska 对 99 头合成系母猪进行了研究, 结果表明其 多态性分析证明 FSHβ 亚基基因座位在约克夏 长白 杜洛 AA 型经产母猪个体的 TNB NBA 21 日龄仔猪数, 断奶 克等商业猪种中与控制猪产仔数的主效基因紧密连锁 优势 仔猪数,21 日龄窝重和断奶窝重均显著的高于 AB 和 BB 型 基因型 BB 纯合子比 AA 型纯合子母猪平均每胎多产仔 1.5 头 个体 (P <.5), 但对初产母猪的产仔性能无显著影响 张 杜立新等研究也发现 FSH-β 基因座位在猪种中与控制猪 淑君等人的结果表明, OPN 的效应不受 ESR 制约, 提示可 产仔数的主效基因紧密连锁 并证明在莱芜猪种中优势基因 同时对 ESR 和 OPN 两标记来进行选择以提高窝产仔数的 AA 纯合子比 BB 纯合子母猪平均每胎多产仔 1.2 头 这可能 遗传进展 是不同品种猪插入序列的主要差异是末端的 poly(a) 长短不 2.5 视黄酸受体 γ 基因 RARG [5] 同 进而导致产仔数不同 施启顺等 的结果表明 FSH-β 和 视 黄 醇 结 合 蛋 白 RBP 基 因 Messer 等 把 各基因型对产仔数影响大小依次为 BB AB AA 在大白猪 RARG 和 RBP 基因作为猪窝产仔数的 2 个候选基因来加 中 BB 型母猪总产仔数比 AA 型高.83 头 P <.5) 产活仔 以研究 发现在法国超高产大白猪 LWH 中 RARG 和 182 [2]

187 RBP 基因分别可以控制.21 头 / 窝.52 头 / 窝的 rate (PDR)(P=.8) 和畸形率 (P=.21) 显著相关 产仔总数 在普通大白猪 LW 2 个群体中可分别控制.1 inhibin beta A INHBA 与 plasmadroplets rate (PDR) 头 / 窝.5 头 / 窝的产仔总数 Rothschild 等统计分 (P=.318) 和畸形率 (P =.67) 显著相关 inhibin 析 6 个商品系的 2 5 窝猪的数据, 结果发现 RBP 纯合 beta B (INHBB) 基因与精子浓度显著相关 (P=.36) 基因型与缺失基因型间接差异为.5 头 / 窝 ( TNB ) 和 Lin 等发现猪 BETA-ACTIN 的 个突变位点的不同单倍.26 头 / 窝 (NBA) TNB 加性效应为.23 头 / 窝,NBA 型影响精子活力 畸形率和出生活仔猪数 HUANG 等发 加性效应为.15 罗仍卓么等采用 PCR RFLP 方法对 现在不同气温下 热应激蛋白 7.2 基因 5' 调控区部分突 北京黑猪进行多态性分析发现 RBP 基因存在 Msp1 多态 变与精子活力 精子密度和畸形率等性状显著相关 位点且所研究的群体在该位点均处于中度多态和 Hardy- 3 Weinberg 遗传平衡状态 赵伟等首次在 RARG 基因内含 展望 在过去几十年里 通过常规育种技术, 猪的生长性状 子 3 上检测到 1 个 SNPs 位点 并对该位点的基因型进行 胴体性状等重要经济性状在遗传上都得到了很大的提高 但 了检测并发现不同群体间的基因型频率和等位基因频率差 对繁殖性状的改良依然很有限 因为产仔数是限性表达的低 异极显著 遗传力性状 随着遗传标记技术的发展, 猪的产仔数性状 2.6 核受体辅激活蛋白 1(NCOA1) 基因 可以通过标记辅助选择的方法进行改良 与产仔数 排卵数 施启顺等研究表明,NCOA1 基因 RsaI 酶切多态性对 初情期 子宫长度 乳头数 精液品质等有关的 QTL 相继 母猪产仔性状有显著影响, 在总产仔数和产活仔数上都出 被定位在染色体上 ESR FSH-β 等重要的候选基因相 现 AA>AB>BB 趋势, 基因型间差异极显著 (P <.1) 继被发现, 为提高猪的繁殖性能打下了坚实的基础 随着 如大白猪 AA 型母猪平均总产仔数和产活仔数分别比 BB 新的性能测定技术和新一代的高通量猪 SNP 芯片的出现 型高 2.66 和 1.57 头 长白猪中, 这 2 项指标相应高 2.28 对猪繁殖性状分子标记的研究将会大大加速 和 2.7 头 颜华等 参考文献 [8] 研究表明 NCOA1 基因的优势基因是 A 等位基因 其基因型对初产母猪产仔性状有显著影响 如 [1] LiK, RenJ, XingY, etal.quantitative trait loci for litter 大白猪 NCOA1 基因 AB 基因型个体总产仔数 TNB 产 size and prenatal loss in a White Duroc Chinese Erhualian 活仔数 NBA 和出生窝重 BLW 分别比 AA 基因型个 resourcepopulation [J].Animal Genetics,29,: 体少 1.12 头 1.8 头和 1.71 kg 差异显著 P < 骨形态发生蛋白 15 BMP15 BMP15 在卵母细胞中特异性表达 推动哺乳动物体内 卵母细胞卵泡生长 同时阻止黄体成熟 从而对排卵有重要 的调节作用 侯振平等对猪 BMP15 基因 exon2 区域 SpeI [2] Roh rer G A, Fo rd J J, Wise T H, et al. Identification of quan2 titative trait loci affecting female reproductive traits in a multi2genetation M eishan2w h ite composite sw ine population [J]. J A nim Sci, 1999,77 (6): [3] King A H.Mapping quantitative traitloci affecting female 酶切位点进行多态性分析, 发现不同品种间头胎产仔数 reproductive traitson porcine chromo some8 [J].Biology 头胎产活仔数 经产产仔数 经产产活仔数存在极显著的差 of Reproduction,23,68(6): 异 (P <.1) 宋一苹等研究发现不同品种间总产仔数和活 产仔数存在显著差异 P <.5 吴井生等研究表明小梅山 猪不同基因型的经产母猪的总产仔数和产活仔数间差异显 著 P <.5 白猪中不同基因型母猪在头胎总产仔数和经 产总产仔数方面差异显著, 其他方面差异均不显著, 但都 呈现出 AA>AB>BB 的趋势 2.8 种公猪精液品质相关基因 Lin 等对皮特兰和皮特兰 汉普夏杂种公猪中 9 个 候选基因进行多态性分析 发现促性腺激素释放激素受 体 (GNRHR) 与 精 子 活 力 (P=.161) plasma droplets [] 陈克飞 黄路生 李宁 等 雌激素受体 ESR 基因对产仔 数的影响 [J]. 遗传学报 [5] 赵要风 李宁 猪 FSHβ 亚基基因 RFLPs 研究初报 [J] 畜 牧兽医学报 (1) [6] 施启顺, 柳小春, 刘志伟, 等. 5 个与猪产仔数相关基因的 效应分析 [J]. 遗传, 26(6) [7] 孙敬礼, 武磊, 李大全, 等. 大长杂交一代母猪 PRLR FSH-β 和 ESR 基因多态性与产仔数的关系 [J]. 石河子大学 学报 自然科学版, 211(1) [8] 颜华, 王立贤, 王立刚, 等. 六个候选基因多态性与母猪繁 殖性状关联分析 [J]. 农业生物技术学报,29(2)

188 我国转基因猪的研究进展 潘登科 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 北京 1193 摘 要:自1997年首例体细胞克隆羊 多莉 获得成功以后 转基因家畜在生物反应器 异种器官移植和提高动 物生产性能等方面得到了广泛的应用 由于猪在解剖 生理和营养代谢等方面与人类很接近 又是一种重要家 畜 所以转基因猪的研究越来越受重视 该文综述了我国转基因猪在生产性能改良 器官移植和疾病模型等 方面的研究进展 关键词 猪 转基因 体细胞克隆 异种器官移植 抗病育种 多少年来 育种学家梦寐以求可以按照我们的需求定向 我国大规模制备转基因猪是在 25 年体细胞克隆猪获得 地培育人们需要的品种 但是这太难了 一个新品种的培育 成功之后 中国农业大学李宁院士团队获得了我国首例体细胞 通常要 1 年甚至更长的时间 传统育种 本质上是利用天 克隆猪和转溶菌酶克隆猪 开创了我国转基因猪育种的序幕 然的有性生殖过程把有用的基因从一个品种转到另一个品 转基因体细胞克隆技术的出现和日趋成熟为培育转基因猪新品 种 但转移过程是随机的 把有用的基因转移了 同时也可 种提供了技术支撑 25 年以来 我国在转基因克隆猪方面取 能把不好的基因转过去了 那就再通过不断地选育来获得所 得了引人瞩目的进展 先后获得了富含 Omega(ω)-3 脂肪酸 需的育种材料 随着现代分子生物学技术和繁殖技术的发 的转基因克隆猪 抗猪瘟的转基因猪 敲除肌肉生长抑制素的 展 转基因育种已成为短时间培育品种的新选择 转基因技 双肌猪 转植酸酶的减磷环保猪等 由于猪在解剖 组织 生 术就是在实验室操纵基因 把需要的基因搬到需要改良的品 理和营养代谢等方面与人类非常相近 因此 我国科研人员将 种中去 转基因育种只是增加或者改造了一个我们需要的性 目光瞄准了转基因异种器官移植猪和人类疾病模型猪的研究 状 这是传统育种办不到的 21 年成功获得了人类亨廷顿舞蹈症的转基因猪模型和抗超 转基因猪的制备就是将目的基因首先整合到生殖细胞 急性免疫排斥反应的基因敲除猪 或体细胞 然后通过原核注射法 精子载体法和体细胞核移 目前国际上仅有美国 日本 德国 中国等少数几个国 植法获得转基因胚胎 最后胚胎移植到同期发情的受体母猪 家掌握转基因克隆猪技术 我国在转基因猪的应用上已处于 体内发育 出生的仔猪通过分子生物学鉴定是否为转基因 国际领先水平 转基因猪的研究效果比较显著的进展主要集 猪 目前 转基因猪的研究主要是改变猪在生长 抗病和肉 中在以下 3 个方面 品质等性状 人类疾病的动物模型或者使猪的组织器官能够 成为人类器官的替代品 转基因猪已成为农业和医学研究及 1 通过转基因技术提高猪肉品质 培育优质猪 新品种 开发的重要领域 并逐渐发展成为很有商业前景的高新技术 ω-3 和 ω-6 多不饱和脂肪酸人体不能自然合成 只能 产业 原核注射法和精子载体法制备转基因猪因整合效率低 通过食物摄取 人类最早食用的基本都是野生植物和散养动 物 食物中的 ω-3 和 ω-6 有着严格的比例 和遗传不稳定等缺点 目前很少使用 1997 年首例体细胞 而且基本保持平衡 进入工业化时代后 人类大量食用加工 克隆羊 多莉 获得成功以后 体细胞克隆技术在转基因家 和养殖食品 造成体内所含的 ω-6 越来越多 ω-3 越来 畜的制备上成为一种有效的方式 转基因家畜在生物反应 越少 比例严重失调 目前美国等发达国家里 人体体内的 器 异种器官移植和提高动物生产性能等方面得到了广泛的 ω-6 和 ω-3 比例可能达到 3 比 1 而目前中国正面临转 应用 转基因体细胞克隆技术在体细胞水平进行转基因 从 型阶段 这个阶段正是各种慢性病的高发时期 据有关方面 理论上讲 转基因成功率 1 目前已成为制备转基因猪 的统计 中国糖尿病患者 万 体重超重者超过 2 亿人 的主要方式 肥胖人数多达 6 万 中国有可能成为世界第二大糖尿病 18

189 国家 器官无论是在体积上还是在功能上都和人的比较接近 人们 长链的多不饱和脂肪酸的营养学重要性及其在人体发 希望能利用猪来提供人所需要的各种器官 开展异种器官移 育和多种疾病的预防作用已经确立 特别是 ω-3 多不饱和 植 然而 猪的基因组上有表达 α-1,3 半乳糖苷转移酶 (Gal) 脂肪酸对心血管疾病和与代谢综合症有关的疾病的预防 治 这种人和灵长类动物所缺少的基因 这样 一旦移植 将导 疗作用更是受到重视 在当前深海鱼油仍然是 ω-3 的主要 致超急性排斥 HAR 来源 ( 事实上该来源正在不断地下降 ) 通过转基因方式对 23 年 Phelps 等利用同源重组技术获得了世界上第 1 头 猪种质进行改良 可以在猪肉中提供自然界中分布极为稀少 双敲除 alpha-1,3-gal GGTA1 基因的转基因克隆猪 开 和生理上具有重要意义的 ω-3, 可持续地满足对其不断上 启了利用体细胞基因打靶技术生产异种器官移植供体的先例 升地需求 在提供重要营养物质地同时 也提升了猪肉的嫩 此后 日本和澳大利亚等国的几个科研小组也相继获得了敲 度和风味 26 年美国制备出了转 ω-3 脂肪酸去饱和酶基 除 GGTA1 基因的转基因克隆猪 将敲除 GGTA1 基因的猪心 因 Fat-1 克隆猪 这种克隆猪体内各种 ω-3 不饱和脂肪酸 脏和肾脏分别移植到免疫抑制的狒狒体内 移植后的异种器官 含量较普通猪有大幅度地提升 提高了 5 倍以上 此类肉食 可以在狒狒体内正常存活 2 6 个月 最长的个体生存期长达 可降低人类心血管病等疾病 对提高免疫力有着积极的作 179 d 用 因此 获得的鱼油猪是世界上第 1 种真正值得去进行市 场开发的转基因大动物食品 21 年 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所潘登科 领导的科研团队成功研制出敲除 -1, 3 半乳糖苷转移酶基 28 年 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所等单位 因 GGTA1 单敲除的近交系五指山小型猪 图 2 为我 成功获得了富含 -3 不饱和脂肪酸转基因猪 图 1 通过 国创建器官移植猪迈出了关键的一步 此次获得的基因敲除 转 sfat1 基因生产的克隆猪将 ω-6 转换为 ω-3 多不饱和脂 猪使用的是我国培育的实验用近交系五指山小型猪 小型猪 肪酸 该转基因猪与普通猪相比 在肌肉和脂肪中不饱和 在解剖 生理结构 代谢机制 器官发育等多方面与人更为 脂肪酸 (EPA 和 DHA) 的含量提高 13 倍以上 该基因具 相近 近交系猪具有基因高度纯合 遗传稳定 表型均一和 有我国自主知识产权 为我国优质猪的培育提供了良好的 遗传背景清楚等优点 适宜人源化基因猪改造 便于异种器 育种材料 官移植临床前试验研究 若运用转基因技术进行育种 猪肉将成为有益于心脏的 利用转基因技术 可以利用猪制备人体的各器官和组 美食 高血压和糖尿病患者将可以放心的摄取这些美食 这 织 如心脏 肝脏 肺 肾脏 骨骼 筋腱 韧带 皮肤 对人们的健康有着革命性的意义 虽然转基因食品还面临着 角膜 小肠和胰岛细胞等 如此可以为人类不断地提供异体 一些质疑 安全评价还有很长的路要走 但这毕竟是一项有 器官移植的供体器官 利于全人类的研究成果 最终一定会得到世界的认可 3 建立人类疾病的转基因猪动物模型 揭示人 类疾病的发病过程 机理及探索治疗途径 2 利用转基因猪生产人体器官 为人体器官移 植提供供体 猪的心血管系统 消化系统 皮肤 营养需要 骨骼发 当前 全球等待器官移植的患者越来越多而能够捐献器 育以及矿物质代谢等都与人的情况极其相似 猪的内脏器官 官的人却非常有限 远远无法满足医疗上的需要 鉴于猪的 及其功能也与人的器官类似 例如脉搏 在静止状态下 人 图1 富含 ω-3 多不饱和脂肪酸的克隆猪 图2 敲除 GGTA1 基因的近交系五指山小型猪 185

190 的脉搏每分钟 6 9 次 猪的脉搏为 65 8 次 猪的动 脉循环系统几乎是人的动脉循环系统的复制品 另外 其繁 殖周期短 生产力高 窝产仔多 因此 猪就被认为是开展 人类医学临床前试验的最佳模型 如猪可以作为皮肤烧伤 肿瘤 免疫学 糖尿病等代谢性疾病的医学研究的动物模型 21 年 中科院广州生物医药与健康研究院赖良学领 导的科研团队成功获得了人类亨廷顿舞蹈症的转基因猪模 型 图 3 并首次在转基因猪大脑中发现与人类亨廷顿舞 蹈症患者脑中类似的神经细胞凋亡现象 211 年 赖良学 图3 人类亨廷顿舞蹈症的转基因猪模型 研究组成功敲除了猪内源性 PPARγ 基因 在世界上首次 建立了对糖尿病和心血管并发症的研究有重要应用价值的 PPARγ 基因敲除猪模型 ( 图 ) 结语 转基因猪的研究在短短几年的时间内 已取得很大成 就 目前仍处于发展阶段 能够获得的转基因猪数量少 还 存在这样那样的问题 抗病育种的转基因猪如抗口蹄疫 抗 蓝耳病猪已经获得 但还需要较长时间去验证 总之 转基 因猪的研究是一项复杂的系统工程 前途无量 随着时间的 推移和科学技术的发展 转基因猪研究将惠及养猪生产 尤 图 186 敲除了猪内源性 PPARγ 基因猪 其在抗病育种方面为人类带来更大的利益

191 影响斯格猪繁殖性能的因素分析 任丽琴 1 芦春莲 1 曹洪战 1*, 吕志强 1 张少华 1 闫恒普 2 梁竟开 2 商青艳 2 (1 河北农业大学动物科技学院 河北保定 河北老白干酒业股份有限公司京安养殖分公司 河北安平 536) 摘 要 本文利用京安斯格种猪场 五个品系母猪的765窝繁殖记录 建立模型 用最小二乘法 分析胎次 产仔季节 不同品系对斯格猪繁殖性能的影响 结果表明 胎次 分娩季节 品系等对主要繁殖性 状的影响均达到极显著水平 关键词 斯格猪 繁殖性能 胎次 产仔季节 品系 斯格猪配套系育种工作开始于 6 年代初 已有 年的 节 分 成 春 季 (3-5 月 ) 夏 季 (6-8 月 ) 秋 季 (9-11 月 ) 历史 它们一开始是从世界各地 主要是欧美等国 先后引 冬季 (12-2 月 ) Pk 为第 k 品系的固定效应 e 为随机误差 进 2 多个猪的优良品种或品系 作为遗传材料 经过系统 2 结果与分析 的测定 杂交 亲缘繁育和严格选择 分别育成了若干个专 下面是胎次 产仔季节 品系三个影响因子分别对各繁 门化父系和母系 这些专门化品系做为核心群 进行继代选 殖性状的影响程度的分析 结果以图表形式显示 在此 对 育和必要的血液引进更新等 不断地提高各品系的性能 河 三个影响因子分别加以分析 北斯格种猪有限公司根据中国市场的需要选择引进 繁殖性状各影响因素方差分析 这两个父系和 这三个母系组成了五系配套的繁 表 1 为繁殖性状各影响因素方差分析结果 由此可见 育体系 从而开始在我国繁育推广斯格瘦肉型配套系优种猪 胎次 分娩季节 品系等对主要繁殖性状的影响均达到极显 和配套系杂交猪 著水平 在斯格猪的饲养管理中 必须考虑影响繁殖性能的因 素 繁殖性状是属于低遗传力的性状 繁殖性状的高低除了 受遗传因素的影响 在很大程度上受到外界环境因素的影 响 这些影响因素主要包括胎次 产仔季节 品系等 为了 准确合理的安排生产 必须明确了解这些影响因素的程度 有鉴于此 本文主要针对不同胎次 不同产仔季节 不 表 1 繁殖性状各影响因素方差分析 F 值 影响因素 自由度 总产仔数 产活仔数 胎次效应 ** 21.95** 5.5** 8.35** 季节效应 ** 21.3** 39.21** 1.6** 品种效应 9.22** 8.99** 7.59** 111.7** 同品系的斯格母猪繁殖性能进行统计分析, 探讨胎次 产仔 注 表示差异极显著 P<.1 季节 品系对斯格母猪繁殖性能的影响 为全面认识更好的 2.2 胎次对斯格猪繁殖性状的影响 利用资源提供参考依据 1 材料与方法 初生窝重 21 日龄窝重 各胎次繁殖性能的最小二乘均值和方差分析结果见表 2 由表可见 不同胎次繁殖性能间差异极显著 总产仔 资料取自京安种猪试验场 2 28 年间斯格五个 数第 1 胎最低 从第 2 胎呈上升趋势直到第三胎达到最高 品系母猪的繁殖记录共 765 窝 ( 其中 36 系 118 窝,12 系 12.2 头 之后呈下降趋势 但是 2--6 胎次都维持在 窝,15 系 138 窝 23 系 1189 窝 33 系 3185 窝 ) 五 头以上 7 胎后呈明显下降趋势 头也维持在 11 头 个品系的母猪饲养环境相同, 营养水平和管理方法一样, 分 以上 产活仔数为 3 胎最高 初生窝重第 3 胎最高 第 析的性状为 : 总产仔数 活仔数 初生窝重 21 日龄窝重 胎后呈下降趋势 21 日龄窝重第 3 5 胎最高 第 5 胎后 全部数据资料用 SAS 软件进行最小二乘分析 呈下降趋势 由此可见 斯格猪的繁殖性能一般在第 2 7 统计分析模型为 胎较高 高峰期在第 3 胎 Yijk=μ + Ti + Jj + Pk + e 2.3 季节对所有繁殖性状的影响 式中 μ 为群体平均数 Ti 为第 i 胎次的固定效应 将胎次分为 1-1 胎 Jj 为第 j 季节的固定效应 将分娩季 表 3 列出了不同产仔季节斯格猪繁殖性能的最小二乘均 值和方差分析结果 由表可见 总产仔数 活仔数 初生窝重 187

192 表 2 不同胎次各繁殖性状的最小二乘均值 表 3 不同季节各繁殖性状的最小二乘均值 胎次 窝数 总产仔数 活仔数 初生窝重 21 日龄窝重 季节 窝数 总产仔数 活仔数 dec 1.7dc 1.1dc 66.72cd 春 a 11.37a abcd 11.5ab 16.6ab 71.a 夏 b a 11.75a 16.76a 69.92ab 秋 ab 11.65ab 16.1ab 69.32ab 冬 abc 11.9abc 16.17ab 69.78ab abc 11.56ab 16.9ab 67.8ab 品系 窝数 总产仔数 活仔数 cd 系 de 1.79dc 15.29bc 68.81ad 12 系 e f 9.77e 13.69d 62.29e bcde bdc d bc bc ad 注 同一列字母右上角不同者表示差异显著 P <.5, 下同 初生窝重 21 日龄窝重 a 69.35a 11.7b 15.b 69.1b 12.6a 11.33a 15.37a 68.76a 12.13a 11.5a 15.78a 68.92a 表 不同品系各繁殖性状的最小二乘均值 初生窝重 21 日龄窝重 a a 72.32a b 1.79b 15.35b 69.27b 15 系 a 11.5c 15.6b 69.78b 23 系 b 1.98b 15.3b 68.11b 33 系 b 11.23d 15.6b 68.6b a 21 日龄窝重均以春 秋 冬较高 夏季较低 春 秋 冬 在斯格猪的饲养过程中要加强母猪妊娠和分娩的管理 注意 三个季节之间繁殖性能差不异显著 春 秋 冬与夏季之间 夏季防暑降温 合理调整饲喂和配种时间 保证充足饮水 差异显著 显然夏季热应激对斯格猪的繁殖性能影响很大 调整日粮的营养结构来减小热应激 2. 品系对所有繁殖性状的影响 由表 可见 母系猪 系中 36 系的繁殖性 参考文献 能较高 产仔数为 头, 活仔数 初生窝重 21 日龄 [1] Clark L k,leman A D. Factors that influence litter size in 窝重与 系差异显著 父系猪 系中 23 系的 pigs:part1[j].pig News and Information,1986a,7 (3):33- 繁殖性能最高 33 系次之 差异不显著 讨论 [2] Moeller S J, Goodwin R N, Johnson R K, et al. The 繁殖性能是猪的重要性能之一 在种猪育种中 都很重 national pork producers council maternal line national 视对它的提高 尤其是在瘦肉型猪的选育中 希望在保持高 genetic evaluation program: a comparison of six maternal 瘦肉率和生长速度的前提下有较高的繁殖性能 以便提高养 genetic lines for female productivity measures over four 猪业的综合经济效益 parities [J]. J Anim Sci, 2, 82: 我们分析了胎次 季节 品系对斯格配套系猪繁殖性状 [3] Irgang R, Favero J A, Kennedy B W. Genetic 的影响 由分析结果可知 斯格猪在 胎时产 parameters for litter size of different parities in Duroc, 仔数较高 之后缓慢下降 这与 Clark 等 [1] 报道基本一致 Landrace, and Large White sows[j]. J Anim Sci, 199, 另外 全世界几个国家大规模数据研究的一致结果 [2-] 是窝 72(9): 产仔数在第 1 胎时最小, 在第 3, 和 5 胎达到最大, 然 [] 李加琪, 陈文广. 利用现场测定资料分析瘦肉型猪的繁殖性能 [J]. 华南农业大学学报, 1997, 18(3): 后随着胎次增加几乎保持不变或缓慢下降 也与我们的结果 相符 这为我们斯格猪生产中制定生产计划及合理规化猪群 [5] Vazquez C,Menaya C,Benito J,et al. The influence of 提供了参考 就斯格猪生产场家而言, 要想获得母猪高产, parity and season on the prolificacy and maternal ability 生产母猪群结构中第三胎至第六胎的母猪应占大多数 of Iberian sows[j ]. Pig Nes and Information,199, 15 :121N - 12N. 斯格猪五个品系繁殖性能分析显示 母系猪 36 系最高 ; 父系猪 23 系较高但差异不显著 斯格猪不同季节繁殖性能分析结果显示 夏季产仔数较 低 说明斯格猪受夏季热应激影响比较大 有报道热应激 [3] 会造成母猪窝产仔数 产活仔数下降, 增加死胎头数 所以 188 [6] 吴结革, 茹达千等, 热应激对猪繁殖性能的影响及防止措施 畜牧兽医杂志

193 猪 FATP1 基因 5 调控区多态性及其 与脂肪性状的相关分析 华绪川, 张金枝 张立凡, 蔡兆伟, 徐宁迎 浙江大学动物科学学院 杭州 3129 摘 要 脂肪酸转运蛋白1 (Fatty acid transport protein 1, FATP1)是脂肪酸转运蛋白家族 FATPs 的一员 它能 够促进脂肪细胞对长链和极长链脂肪酸的吸收利用 从而在脂肪沉积过程中发挥着重要的作用 本研究采 用直接测序法寻找FATP1基因5 调控区 bp片段的单核苷酸多态性 首次在-586 bp处发现一个snp 位点 该SNP位点发生T C突变 可被限制性内切酶Hha I识别 利用PCR-RFLP的方法检测了该位点不同基因型 在皮特兰 金华猪和金皮F2代资源群体中的分布情况 结果发现该位点在皮特兰和金皮F2代猪群中存在多态 性 而在金华猪则表现为TT基因型 建立混合模型分析该位点对188头金皮F2代脂肪性状的效应 结果显示 猪FATP1基因g-586T C位点的不同基因型与肩背膘厚 6 7肋背膘厚 最后肋骨处背膘厚和板油重都呈显著 相关 P.5 而与腰荐结合处背膘厚 平均背膘厚和后腿脂肪重差异不显著 表明FATP1基因5 调控区的 g-586t C突变对猪脂肪沉积有一定的影响 关键词 猪 脂肪酸转运蛋白1 FATP1 基因 脂肪性状 PCR-RFLP 脂肪酸 fatty acid, FA 在生命过程中具有非常重要 各种需要利用脂肪酸的组织中 均有不同类型的 FATPs 表 的作用 它不仅是构成动物体内脂肪和类脂的基本物质 同 达 并且不同类型的 FATPs 具有组织特异性表达的特点 [1] 时也能通过在体内的氧化分解产生能量供机体利用 脂肪 其中 FATP1 是最早被发现的 FATPs 家族成员 它主要在 酸依其碳链长度的不同可分为短链 n 6 中链 n=6 脂肪和肝脏组织中表达 [-6] Schaffer 等 [5] 报道 FATP1 12 长链 n 12 和极长链脂肪酸 中链和短链脂肪 在哺乳动物细胞中的过量表达能够显著提高细胞摄取脂肪 酸可以直接穿过细胞膜 而长链脂肪酸则需要在多种转运 酸的能力 而 Hatch 等 [7] 发现 FATP1 可以直接合成脂酰 载体的协助下才能通过细胞膜进入细胞内被机体利用 目 CoA 并与甘油三酯的合成相耦联 从而促进脂肪在相关组 前已发现了多种载体蛋白共同构成一个协助长链脂肪酸转 织的沉积 因此 FATP1 被认为是参与脂肪酸转运和代谢的 运的有机体系 其中包括脂肪酸转运蛋白家族 fatty acid 最关键的因子 transport proteins, FATPs 脂肪酸易位酶 fatty acid 本研究将 FATP1 基因作为影响猪脂肪代谢和沉积相 transporter, FAT/CD36 长链脂酰辅酶 A 合成酶 long- 关性状的候选基因 通过直接测序法和比较基因组学寻找 chain acyl-coa synthetase, LACS 和 膜 脂 肪 酸 结 合 其 5 调控区可能存在的单核苷酸多态位点 再利用 PCR- 蛋 白 plasma membrane fatty acid binding protein, RFLP 的方法检测这些位点在皮特兰 金华猪和金皮资源家 FABPpm 系中的多态 同时分析其对 188 头金皮 F2 代猪脂肪性状的 [1,2] 其中细胞膜上的 FATPs 对脂肪酸的摄入 储存和氧化利用起着重要的调节作用 被认为是参与脂肪酸 影响 从而为进一步探讨猪 FATP1 基因的结构 功能及其 跨膜转运的主要蛋白 多态性与生产性能的关系奠定基础 FATPs 是一类结构完整的跨膜蛋白 目前已经发现了 6 种亚型 即 FATP1 FATP6 不同亚型的 FATP 均含 [3] 1 材料和方法 1.1 材料 有 311 个高度保守的氨基酸信号序列和一段 AMP 结合序列 金华猪 31 头 皮特兰 2 头 和金皮 F2 代资源家 大量研究证实 FATPs 的主要生理功能是促进长链和极 系猪 188 头 血样均取自浙江大学实验牧场 其中金皮 长链脂肪酸进入细胞内 并根据代谢需要很快地协调游离 F2 代猪在相同的饲养管理条件下 按照正常的饲养标准饲 脂肪酸的摄取 从而在脂质代谢中发挥重要作用 在机体 养至 85 kg 7 1 kg 左右时进行屠宰并测定其脂肪性 [] [] 189

194 状 利用常规酚 / 氯仿抽提法从血液中提取基因组 DNA 37 水浴.5 6. 小时 产物用 2.5% 琼脂糖凝胶电泳 溶于 TE 缓冲液中 贮于 -2 冰箱备用 检测 凝胶成像系统观察并记录其基因型 1.2 实验方法 引物设计 1.3 统计分析 根据酶切结果统计基因型 并计算其基因和基因型频 根 据 GenBank 中 公 布 的 猪 FATP1 基 因 mrna 序 列 率 同时以活重为协变量 窝效应为随机变量 出生年份 NM_ 利 用 NCBI 和 Sanger 上 的 BLAST 程 性别 年龄 基因型作为固定效应 建立混合线性模型并用 序进行在线比对获得猪 FATP1 基因 5 调控区的基因序列 SAS(v9. 版本 ) 软件的 MIXED 过程作统计分析 进行金 位于 EMBL 数据库 CU 克隆 利用引物设计网站 皮 F2 代猪中各类脂肪性状与基因型的关联分析 混合线性 进行在线引物设计 其中引 模型如下 物 F1 用于 PCR 产物的直接测序 引物 F-A 用于 PCR- Yijklmo=μ+bWi +Bj+Sk +Dl+Gm+Lo+eijklmo RFLP 检测 引物信息见表 1 式中 Yijklmo 表示脂肪性状测定值 μ 为群体均值 Wi 为活重, Bj 为出生年份 Sk 为性别 Dl 为屠宰日龄 PCR 扩增 Taq DNA 聚合酶 dntp 和 Marker 等均购自北京天 Gm 为基因型 Lo 为窝效应 eijklmo 为随机误差 根生化科技有限公司 引物 F1 和 F-A 的 PCR 反应总体系 2 结果 均 为 2μl 包 括 上 下 游 引 物 (2μmol/L) 各.15 μl 2.1 猪 FATP1 基因测序片段的 PCR 扩增结果 1 PCR 缓冲液 ( 含 Mg2+) 2.μl dntp 2.5 umol/l 用所设计的 PCR 引物 F1 对金皮 F2 代的基因组进行扩 2.μl Taq 聚合酶 2.5U/ul.2 ul DNA 模板 2.μl 增 得到的 PCR 产物用 2.% 琼脂糖凝胶电泳检测 结果 其余用超纯水补齐 PCR 扩增条件为 9 预变性 5 min 表明 扩增片段与目的片段的大小一致且特异性好 图 1 9 变性 3 s 退火 3 s 退火温度见表 1 72 延伸 可以用于测序 经测序分析 扩增片段为目的片段 3 5 s 共 35 个循环 最后 72 延伸 7 min 保存 2.2 FATP1 基因 5 调控区的 SNP 位点 PCR 产物进行 2.% 琼脂糖凝胶电泳检测 将 引 物 F1 的 PCR 产 物 经 测 序 获 得 的 序 列 在 生 物 学 软 件 DNAStar 中 进 行 比 对 结 果 发 现 存 在 第 -586 位 上 PCR 产物测序 在金皮 F2 代资源群体中选择 个具有不同亲本的个 的 T C 突变 g-586t C 和第 61 位的 A G 突变 体用引物 F1 进行扩增 取 2 ul 扩增产物用 2.% 的琼脂糖 g-61a G 其 中 g-586t C 位 点 经 DNAMAN 软 凝胶电泳检测 选取特异性高 条带单一明亮的 PCR 产物 件分析发现可以被限制性内切酶 Hha I 识别 测序图谱见 进行测序 测序反应由南京金思特生物技术有限公司完成 图 多态位点的寻找 2.3 猪 FATP1 基因 5 调控区多态性基因型的检测 通过生物学软件 DNAStar 对 PCR 产物正反测序结果 利 用 PCR-RFLP 的 方 法 对 猪 FATP1 基 因 5 调 进行比对寻找 SNP 位点 利用 DNAMAN 软件分析确定限 控 区 在 不 同 实 验 群 体 中 的 多 态 性 进 行 检 测 图 3 酶 制性内切酶的酶切位点 用 PCR-RFLP 方法分析金皮 F2 切 结 果 显 示 g-586t C 位 点 含 有 CC(+163 bp) 代资源群体基因型的多态性 CT( bp) 和 TT(23 bp) 三种基因型 PCR-RFLP 分析 2. FATP1 基因在不同猪种中的基因和基因型频率 酶切反应总体系为 1ul 包括 1 NEB Buffer 缓 经酶切判型后 统计所检测得到的不同位点的基因和基 冲液 1ul 1 BSA.1 ul 2 U/ul 的 Hha I 内切酶 (NEB 因型频率见表 2 FATP1 基因 g-586t C 位点在皮特兰 公司产品 ).25ul PCR 产物适量 其余的用超纯水补齐 和金皮 F2 代猪群中存在多态性 其中 C 等位基因在皮特兰 表 1 PCR 引物信息 引物名称 F1 F-A 引物序列 5 3 PCR 产物 退火温度 F:GAAGGTGGTGACTGGTTCAAAG 787bp (+6bp -723bp) 65 23bp (-57bp -79bp) 62 R:ACCCCAGCAACCATAGCAG F:TTGCTAGGTGGGACGAAATAAG R:CAAGAACCAAGTTGGAACTATGAC * 引物由上海英俊生物技术有限公司合成 19

195 图 1: 引物 F1 扩增的 PCR 产物电泳图谱 图 2 猪 FATP1 基因上游 -586 图 3 猪 FATP1 基因的 PCR- 位不同基因型的序列比较 RFLP 检测结果 中频率为.292 而金华猪群里则不含有 C 等位基因 13.75% TT 与 CC 基因型个体之间的板油重差异不显著 2.5 猪 FATP1 基因 5 调控区多态性与脂肪性状的相 不同基因型个体的腰荐结合处背膘厚 平均背膘厚和后腿脂 关性分析 肪重的差异不显著 采用 SAS 统计软件 对 188 头金皮 F2 代猪的 FATP1 基因各位点不同基因型对个体脂肪性状效应进行了显著性 3 讨论 3.1 FATP1 基因作为脂肪性状候选基因的可行性 检验和多重比较 结果见表 3 由表 3 可知 猪 FATP1 基 人的 FATP1 是一个含有 66 个氨基酸的跨膜蛋白 横 因 g-586t C 位点的 TT 基因型个体与 CC 型个体的肩背 跨多于 13 kb 的基因组 DNA [8] FATP1 基因是一种对胰 膘厚 6 7 肋背膘厚和最后肋骨处背膘厚差异显著 分别 岛素敏感的长链脂肪酸转运蛋白 脂肪细胞中的胰岛素可以 增加了 9.38% 1.13% 和 12.7% 而 CT 型个体与 CC 型 诱导鼠的 FATP1 从细胞内核周腔转移到质膜 并且这种转 以及 TT 型个体之间的差异不显著 ; TT 和 CT 基因型个体 移与增加的长链脂肪酸吸收相符合 提示 FATP1 可能在体 的板油重与 CC 基因型的差异显著 分别增加了 18.83% 和 内的脂肪代谢中起着重要的作用 [6] 迄今为止 许多研究都 表 2 不同猪群中 FATP1 基因 g-586t C 位点的基因型频率和基因频率 基因型频率 Genotype frequency 等位基因频率 Allele frequency 猪种 Breed CC CT TT C T 样本数 No 金皮 F2.16(3).68(88).372(7) 皮特兰.167().25(6).583(1) 金华猪 () () 1.(31) 注 括号内的数字是个体数 表 3 FATP1 基因不同基因型对金皮 F2 群体脂肪性状的效应 性状 最小二乘均数 ± 标准误 LSM±SE CC 3 CT 88 后腿脂肪重 1.93± ±.8 肩背膘厚.115± 肋背膘厚 P TT ± ±.111 a.51± ±.15b 3.127±.1ab 3.292±.15a.393 最后肋骨处背膘厚 2.121±.12b 2.289±.88ab 2.12±.89a.2 腰荐结合处背膘厚 2.295± ± ±.1.27 平均背膘厚 2.88± ±.87 a 3.153± 板油重.628±.55a.729±.39b.77±.39b.26 b ab b ab 注 同一行中具有不同字母肩标的平均值间差异显著 (P<.5) 191

196 揭示了 FATP1 基因在能量平衡和脂肪代谢中的重要角色 FATP1 基因对猪的皮下脂肪沉积可能具有重要的影响 而 Schaffer 等 这是否是因为 5 调控区的单核苷酸改变导致 FATP1 基因 [5] 报道 稳定转染 FATP1 的鼠 3T3-L1 脂肪前 体细胞对油酸的转运速度是对照组的 5 倍 转基因过量 在细胞中的表达量变化所致 还需要进行进一步的研究 表达 FATP1 的小鼠心肌细胞摄取游离脂肪酸的水平增加了 倍左右 [9] 肖方喜等 [1] 研究发现 高脂喂养的大鼠其骨骼 参考文献 肌中的 FATP1 mrna 水平显著增强 同时游离脂肪酸水 [1] Stahl A. A current review of fatty acid transport proteins 平也显著上升 Lobo 等 [11] 在使用逆转录病毒载体 RNA 技 (SLC27) [J]. Pflugers Arch, 2, 7(5): 术研究 FATP1 的功能时发现 敲除 FATP1 基因能够显著 [2] Pelsers MM, Stellingwerff T, van Loon LJ. The role of 减少脂肪细胞中甘油三酯的沉积水平 同时促进其对 2 型脱 membrane fatty-acid transporters in regulating skeletal 氧葡萄糖的吸收 由此可见 FATP1 与细胞的脂肪沉积密切 muscle substrate use during exercise[j]. Sports Med, 28, 相关 目前 国内外对猪 牛等家畜 FATP1 基因的研究比 38(5): 较缺乏 Shu 等 [12] 通过克隆得到了猪 FATP1 基因的 cdna [3] Ohnishi A, Hashimoto K, Imai K, et al. Functional 全长序列 发现猪 FATP1 基因的 mrna 存在 5 种不同的 characterization of the Bombyx mori fatty acid transport 剪切体 各剪切体广泛分布在肌肉和脂肪等组织中 在以红 protein (BmFATP) within the silkmoth pheromone 肌纤维为主的咬肌和斜方肌等肌肉中表达水平最高 并且 gland[j]. J Biol Chem, 29, 28(8): FATP1a 编码的蛋白与人类和鼠的相似性分别达到了 91.6% [] Hirsch D, Stahl A, Lodish H F. A family of fatty acid 和 87.5% 上述研究表明 FATP1 在哺乳动物的脂肪沉积和 transporters conserved from mycobacterium to man[j]. 代谢过程中发挥着重要的作用 将其作为猪脂肪性状的候选 Proc Natl Acad Sci U S A, 1998, 95(15): 基因是可行的 3.2 FATP1 基因多态性对猪脂肪性状的效应 FATP1 基 因 单 核 苷 酸 多 态 性 丰 富 它 的 改 变 有 可 [5] Schaffer J E, Lodish H F. Expression cloning and characterization of a novel adipocyte long chain fatty acid transport protein [J]. Cell, 199, 79(3):27-36 能会影响动物体内的脂肪代谢 在人体中的研究表明在 [6] Stahl A. Evans J G, Pattel S, et al. Insulin causes fatty FATP1 基因第 8 内含子的多态性和细胞甘油三酯水平密切 acid transport protein translocation and enhanced fatty 相关 并且对极低密度脂蛋白 1(VLDL1) 与极低密度脂蛋白 acid uptake in adipocytes[j]. Dev Cell, 22, 2():77-2(VLDL2) 的比率有着显著影响 [13,1] 本实验利用直接测序 88 的方法在猪 FATP1 基因 5 调控区发现了 g-586t C 和 [7] Hatch G M, Smith A J, Xu F Y, et al. FATP1 channels g-61a G 两个 SNP 位点 其中前者的突变频率较高达 exogenous FA into 1,2,3-triacyl-sn-glycerol and down- 到 37.5% 而后者的突变频率较低仅为 7.5% 因此我们选 regulates sphingomyelin and cholesterol metabolism in 择 g-586t C 位点进行后续实验 利用 PCR-RFLP 的 growing 293 cells[j]. J Lipid Res, 22, 3(9): 方法检测该位点在不同猪种中的分布情况, 结果显示仅在皮 [8] Martin G, Nemoto M, Gelman L, et al. The human 特兰和金皮 F2 代猪群中检测到多态性 而在金华猪群体中 fatty acid transport protein-1 (SLC27A1; FATP-1) cdna 则表现为 TT 单态型 我们知道金华猪具有生长速度慢 肉 and gene: organization, chromosomal localization, and 质优良 瘦肉率不高的特点 而皮特兰猪具有生长速度快 expression[j]. Genomics, 2, 66(3):296-3 瘦肉率较高的特点 目前的结果发现等位基因 C 仅存在于 [9] Chiu HC, Kovacs A, Blanton RM, et al. Transgenic 皮特兰猪和金皮 F2 代猪群中 因此推测 C 等位基因可能与 expression of fatty acid transport protein 1 in the heart 皮特兰猪的高瘦肉率有关 但由于本研究是在国内外首次检 causes lipotoxic cardiomyopathy[j]. Circ Res, 25, 测到此位点 样品量有限 且所研究的猪种较少 因此本突 变的频率分布尚需在其它国内外猪种中做进一步的分析 96(2): [1] 肖方喜 孙晖 陈璐璐. 高脂喂养诱导大鼠骨骼肌胰岛素抵抗 本实验的结果显示在金皮 F2 代猪群中 FATP1 基因的 的机制研究 [J]. 华中科技大学学报 医学版, 28: TT 基因型个体的肩背膘厚 6 7 肋背膘厚和最后肋骨处 [11] Lobo S, Wiczer BM, Smith AJ, et al. Fatty acid 背膘厚均大于 CC 型个体 而 TT 和 CT 基因型个体的板油 metabolism in adipocytes: functional analysis of fatty acid 重大于 CC 基因型 由此可以初步推测该位点的 TT 基因 transport proteins 1 and [J]. J Lipid Res, 27, 8(3) 型具有脂肪沉积效应 而 CC 型个体的效应不明显 表明 192

197 :69-62 [12] Shu G, Zhu XT, Wang XQ, et al. Identification and a French population[j]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2, 2(5): gene expression of porcine fatty acid transport protein 1 [1] Gertow K, Skoglund-Andersson C, Eriksson P, Boquist isoforms[j]. J Anim Physiol Anim Nutr (Berl), 28, [Epub S, et al. A common polymorphism in the fatty acid ahead of print ] transport protein-1 gene associated with elevated post- [13] Meirhaeghe A, Martin G, Nemoto M, et al. Intronic polymorphism in the fatty acid transport protein 1 gene prandial lipaemia and alterations in LDL particle size distribution[j]. Atherosclerosis, 23, 167(2): is associated with increased plasma triglyceride levels in 193

198 金属硫蛋白 MT 基因的表达与肉猪 的健康生长 董彬 1 2 王 慧 * 1 曾勇庆 * 1 (1. 山东农业大学动物科技学院 山东 泰安 日照原种猪场 山东日照 2768) 摘 要 金属硫蛋白 MT 是一类广泛存在于动物体中的金属结合蛋白 具有广泛的生物学功能 如参与猪体内 微量元素的储存 运输和代谢 参与重金属的解毒 清除多种自由基 保护细胞膜 拮抗电离辐射 增强机体的 免疫力和抗应激能力等 还可参与DNA的复制 转录和能量代谢的调节等 因此 MT对提高猪的抗氧化性 抗 应激能力和健康生长 以及提高猪肉产品的质量等都具有重要意义 本文综述了MT的结构 代谢特点 生物学 功能及其与肉猪的健康生长方面的应用研究进展 关键词 金属硫蛋白 养猪业 健康生长 抗应激 抗氧化 金属硫蛋白 (Metallothionein MT) 在猪的正常生理条 Cd 在 ph 时释出 而 Cu 在酸性条件下 则形成 件下主要存在于肝 肾 胰和小肠中 是一类富含半胱氨 Cu 的不溶性聚合物 因此 MT 的存在形式及其稳定性与 酸的金属结合蛋白 自 1957 年哈佛大学的 Margoshes 和 它是否结合了金属 所结合金属的种类以及环境的酸碱度 Valee 等在研究马肾脏蓄积镉的过程中首次发现并分离出 ph 等密切相关 MT 后 又相继在各类生物中发现并分离出 MT 在 1997 MT 的合成具有高度的可诱导性 实验表明 高剂量的 年的第四届国际 MT 会议上 被发现并确定氨基酸序列的 锌能诱导 MT 在杜长大三元杂交猪肝脏内大量合成 最佳 MT 共有 17 多种 MT 具有广泛的生物学功能 对动物的 累计锌诱导剂量为 33mg/kg 在对家兔的诱导实验中也得 健康生长 生殖 抗衰老 抗应激和增强免疫力等均具有 到了相似的结果 诱导后兔肉 血浆 肝 肾 肺和小肠中 重要作用 近年来 对 MT 的研究和应用已经涉及到农业 的 MT 含量比对照组有显著提高 P<.5 医药 保健 生物工程 环境保护等诸多领域 MT 的重要 MT 的合成也可通过激素 细胞因子和其它因素 如 作用和应用价值逐步被重视 对 MT 抗氧化和抗应激方面 camp 干扰素等 诱导 各种生理应激因素 饥饿 高温 的研究尤其显示出其诱人的应用前景 寒冷 精神紧张等 以及外伤因素 炎症因子和细菌内毒 1 金属硫蛋白的结构特征和可诱导合成特性 素等引起的组织损伤 均能使 MT 的合成增加 表明了 MT 金属硫蛋白 MT 的化学名称为金属硫组氨酸三甲基 在抗应激反应中的重要作用 另外 日粮中的半胱氨酸含量 内盐 是一种小分子的金属结合蛋白 在正常生理条件下 对 MT 的合成也具有明显的促进作用 主要是 Zn 或 Zn Cu 结合蛋白 其多肽链一般含 李小龙通过同位素示踪法发现 MT 在猪体内能被消化 个氨基酸残基 其中半胱氨酸 Cys 含量较高 有 2 个 道壁细胞完整地吸收 在各器官中存留浓度从大到小依次 之多 有 6 8 个 Lys 7 1 个 Ser 但不含芳香族氨基酸 为 消化道 > 皮肤 > 肾 > 肺 > 心 > 肝 > 脾 > 肌肉 > 骨骼 哺 乳 动 物 中 有 种 MT 异 构 体 其 中 MT- Ⅰ 和 MT- Ⅱ 2 存在于各种器官 MT- Ⅲ在脑组织 MT- Ⅳ仅发现在鳞 2.1 金属硫蛋白参与猪体内微量元素的代谢 状上皮组织 诱导后 肝 MT- Ⅰ和 MT- Ⅱ主要结合锌 金属硫蛋白基因的表达与猪的健康生长 MT 能 调 节 小 肠 对 Cu 和 Zn 等 金 属 的 吸 收 小 肠 中 肾 MT- Ⅰ 和 MT- Ⅱ 主 要 结 合 镉 铜 或 锌 MT- Ⅲ 和 MT 的水平与 Zn Cu 的吸收呈平衡关系 通过转基因鼠和 MT- Ⅳ主要结合锌和铜 MT 的氨基酸序列高度保守 均 细胞培养发现 MT 直接参与锌的储存 运输及其生物利用 含 Cys-X-Cys 三肽序列 MT 结合各种金属的能力顺 剔除 MT 基因的小鼠对锌的吸收降低 表明 MT 基因剔除 序由高到低依此为 Hg(II)>Ag(I)>Cu(I)>Cd(II)>Zn(II) 后破坏了体内锌的平衡 可见 一方面 MT 可通过生成含 MT 中的金属可以被脱去 脱去金属的硫蛋白在低 ph Zn 的硫蛋白保护细胞免受高水平锌的伤害 另一方面 可 值时较稳定 MT 中的 Zn 在 ph3.5.5 时能迅速释出 19 通过生成短暂的硫蛋白形式提供细胞吸收锌的驱动力

199 MT 通过与另一种富含 -SH 的肠道细胞蛋白 CRIP 不同猪种的肉质抗氧化能力有较大差异 这可能与 MT 的共同作用来调节 Zn 的吸收 当日粮中富含 Zn 时 MT 基因的可诱导性和 MT 基因的表达量有关 提高 MT 基因 水平升高 Zn 与 CRIP 的结合减弱 以降低 Zn 的吸收 的表达量 可以提高肉质的抗氧化能力 改善肉色 提高猪 相反 缺 Zn 时 MT 水平降低 Zn 与 CRIP 的结合加强 肉的系水力和肉的风味 延长猪肉的保质期 因而 在选育 以促进 Zn 的吸收 MT 与 Zn 向肠腔的排泄有关 Zn-MT 猪种时 应该考虑选择 MT 基因表达量较高的后备猪作为 可能在肠牯膜细胞脱落前被降解或排泄出细胞 所释放的 种猪 以改善肉品品质 Zn 可被吸收利用 补 Zn 的动物对 Cu 的吸收减少 可能是 2.3 金属硫蛋白能增强猪体的免疫功能 由于 Zn 诱导了肠 MT 的合成 而 MT 和 Cu 结合能力强于 MT 可以增强猪体内吞噬细胞的功能 从而提高猪的免 与 Zn 的结合能力 减少 Cu 跨基底膜内褶向血浆运转 因此 疫力 在猪体内发生肝损伤 炎症等病理条件下 各种类型 Cu-MT 可随粘膜细胞脱落到肠道内而排出于粪便中 的含氧自由基会突然增加 过多的自由基会损伤蛋白质和 MT 通过参与 Cu 和 Fe 的代谢来调节其它重要元素的 DNA 从而导致癌症 肝脏损伤 自身免疫性疾病以及衰 代谢 Cu 缺乏能改变奶牛肝脏中金属硫蛋白的代谢 当 老等 此时 猪体内的 MT 会与 SOD 等抗氧化物酶系协同 Cu 缺乏时 动物肠道粘膜上 Fe 的转运受到抑制 沉积的 作用 迅速清除体内过量的自由基 Fe 能诱导粘膜细胞合成 MT 从而阻止其他重要元素 如 MT 在 清 除 自 由 基 时 释 放 微 量 元 素 Zn Cu Fe Cu Zn Mn Fe 等 的吸收 Cr Se 等 促使干扰素的产生 并促进细胞代谢 提高机 2.2 金属硫蛋白能清除猪体内自由基 提高肉质的抗 体的免疫功能 改善神经系统和内分泌及消化系统的功能 氧化性 从而提高猪的抗炎和自我保护 修复和自我改善的能力 金属硫蛋白能够清除自由基 抑制肌肉中脂肪组织的过 MT 对 OH- 引起的 DNA 损伤也具有一定的保护作用 因而 氧化过程 保护细胞膜免于突变 从而提高肉质的抗氧化性 MT 在提高猪的免疫功能和增强抗病力方面具有重要作用 延长猪肉的保质期 2. 金属硫蛋白能增强猪的抗应激能力 在猪体内正常情况下的氧化还原反应可产生各种类型 通过 MT 增强猪体的应激能力以及应激保护作用的研 的含氧自由基 这些自由基除了参与细胞内的化学反应外 究发现 冷 热 禁食 饥饿等应激都可诱导猪体内 MT 还会损伤生物活性分子和 DNA 等 从而导致细胞膜受损和 的大量合成 同时使循环系统中的激素水平上升 Beattie 细胞的损伤 猪体内也存在一系列的抗氧化物酶系 SOD 等 等的研究表明 寒冷应激可诱导产热的棕色脂肪组织中的 和巯基化合物等 MT 与它们协同作用 可使体内积累的过 MT- Ⅰ大量表达 且还发现敲除 MT 基因后的小鼠显示一 量自由基转变为无害的氧气和水 定程度的肥胖 研究发现 饥饿应激状态下 Leptin 有诱 Thonalley 等实验表明 MT 具有强大的消除自由基的 导 MT 合成的作用 大鼠在禁食 2h 和 8h 后 肝 MT 和 能力 是有效的细胞保护剂 MT 捕获 OH 的能力是 GSH 过氧化物阴离子产物较对照组均显著增加 组织创伤和细菌 的 1 倍 而捕获氧自由基的能力是 GSH 的 25 倍 虽然 感染同样也可引起 MT 含量增加 大鼠创伤后 6h 肝 MT MT 对氧自由基的捕获能力不及 SOD 但 SOD 只能清除氧 含量较对照组增加 6 倍 创伤后 2h 降至正常水平 Brady 自由基 不能清除 OH 可见 MT 在清除自由基方面的 推测 应激因素诱导肝脏 MT 合成可能是肝脏再生锌的结果 作用更加广泛 此外 体力限制 剧烈运动 过度疲劳等同样也可使 MT - - MT 的 抗 氧 化 作 用 机 制 的 研 究 结 果 不 太 一 致 Thornalley 等 据 MT 与 OH- 反 应 速 率 较 高 的 事 实 认 为 的含量发生相应变化 2.5 金属硫蛋白可减少仔猪腹泻 提高生长速度 MT 主要是通过其分子中半胱氨酸残基上的 -SH 和自由基 Hahn 发现 在断奶仔猪饲粮中添加 3mg/kg 氧化 的相互作用来发生抗氧化作用的 另一些学者则认为 硫蛋 锌 对减少仔猪腹泻 提高仔猪生长速度有显著效果 随后 白本身的受氧化过程不是抗氧化的主要机制 起主要作用的 的大量应用试验也验证了这一结论 MT 作为动物机体内的 可能是 MT 被氧化后释放的金属离子 还发现 MT 在氧化 锌池 自然也成为高锌作用机理研究中的一大热点 如 时也可将氢原子供给附近被自由基作用过的部位 使这些部 高锌日粮可使鸡肝 Zn 和 Zn-MT 含量明显增加 这说明鸡 位恢复到末损伤状态 或在释放出原子的金属离子后再和 体内 Zn 的贮备主要是通过 Zn-MT 的形式实现的 在生长 Fe 等金属离子结合 使这些金属离子不易参与特定反应如 仔猪饲粮中添加不同化学形式的锌均显著提高肝脏 MT 的 Fenton 型反应的形式 从而阻止 H2O2 向 OH 的转变 抑 含量 这也说明 Zn 通过肠道进入机体 与血液中的白蛋白 制了脂质过氧化 谷胱甘肽等结合 被输送到脏器细胞 一部分锌通过细胞膜 - 195

200 与细胞内蛋白质结合进入细胞核 刺激 DNA 合成 MT 生 们所需金属是由 MT 提供有关 已有的研究发现 应激在 成的硫蛋白再从周围获取锌 成为金属硫蛋白 从而间接的 诱导 MT 合成的同时 循环系统中激素水平均上升 由此 显示仔猪的锌营养水平 营养性锌缺乏引起安静状态下大鼠 认为 激素可诱导产生 MT 进一步的实验证实 糖皮质激 肝 MT 下降 MT 具有保护细胞 促进动物健康生长的作用 素的诱导发生在转录初始水平 但诱导转录效率不高 在无 2.6 金属硫蛋白的水平测定值可用以预测猪的锌营养 活性的多甲基化 MT 基因中无诱导作用 糖皮质激素对 MT 状态 的诱导模式可能与激素同受体结合成激素受体复合物有关 由于 MT 的生物合成 诱导是在 MT 基因表达的转录 并直接作用于核 DNA 序列中的 MT 基因的激素反应元件 水平 而 Zn 对 MT 基因表达的调控正是通过影响 MT 基因 (HRE) 的转录达到的 所以 通过测定猪血浆红细胞的 MT 含量 2.8 金属硫蛋白与环境检测 来反映锌的营养状态是较为准确的 肝 MT 的变化直接与 研究表明 猪尿中 Cd-MT 的浓度与其体内金属浓度 饲粮锌有关 也可通过测定肝的 MT 水平来预测猪的锌营 存在相关性 所以 可以用检测猪尿中 MT 的浓度来取代 养状态 甚至可以评价不同锌源的猪群 检测动物血或尿中的金属来反映和评价周围水质或环境中 近年来 一些实验室已开始研制 MT 抗体 以建立灵 的 Cd 金属等是否超标 由于人和环境的关系密切 重金属 敏特异的检测方法 如利用兔肝 MT 的亚型之一的 rlmt 为 污染区中居民体内的金属含量异常也可通过检测尿中的 MT 抗原 免疫 Balb/C 小鼠 已成功制备了抗 MT 的特异性单 含量反映出来 因此 MT 可用于环境监测 克隆抗体 金慧英等制备了兔抗鼠 Cd-MT 的多克隆抗体 3 结语 研究表明 制备多抗或单抗 MT 以偶联体的形式免疫效果 对 MT 的研究自上世纪 5 年代末就开始了 研究成果 最佳 但制备单克隆抗体对实验室条件要求较高 一般生化 涉及生物化学 环境科学 病理学 毒理学 方法学及营养 实验室难以达到要求 学等诸多领域 但是 目前仍有许多有待加强研究的领域 2.7 金属硫蛋白对激素和发育过程起调节作用 如 MT 的检测方法较多 需要统一标准 MT 基因的表达与 在猪的胚胎发育过程中 有几种组织的 MT 基因表达 调控机制有待深入研究 MT 的提取方法有待改善 随着这 增加 提示 MT 在胚胎 生长发育及分化中起着重要作用 些研究的开展 MT 将在提高猪的抗氧化性能 增强猪的抗 这可能与参与这些过程的酶是需 Cu 或 Zn 的含金属酶 它 病力和生产优质肉猪方面发挥重要作用 参考文献略 196

201 猪 A-FABP 基因 5 调控区多态性及与 肉质性状的相关分析 高 妍 1 张嘉保 1* 赵志辉 2 孙博兴 2 张树敏 3 张永宏 2 (1. 吉林大学实验动物中心 吉林 长春 吉林大学畜牧兽医学院 吉林 长春 1362; 3. 吉林省农科院畜牧分院 吉林 公主岭 1361 摘 要 以松辽黑猪和军牧1号白猪为研究对象 采用PCR-SSCP方法检测A-FABP基因5 -调控区的多态 性 并将不同基因型与肉质性状进行相关分析 结果表明 在5 -调控区的 bp之间发现多态 性位点 有AA AB和BB三种基因型 测序结果表明在1321bp处存在C A的碱基突变 该位点的多态性对 松辽黑猪和军牧1号白猪的大理石纹均有显著影响 P<.5 BB型显著高于AA型或AB型 AA型和AB 型之间差异不显著 对IMF含量均有极显著影响 P.1 BB型或AB型极显著高于AA型 BB型和AB型 之间差异不显著 由此推断A-FABP基因可能是影响猪肉质性状的一个主效基因或是一个与影响肉质性 状的QTL连锁的基因 随着人们生活水平的不断提高 人们对肉质提出了更 采自吉林大学农学部原种猪场 耳号钳取耳组织 放入装 高的要求 不仅要求肉质鲜嫩 而且要求口味好 据报道 有 75% 乙醇的 Eppendorf 管带回实验室 用常规的酚 - 氯 IMF 含量直接影响着肉的品质和风味 特别是肉的多汁性 仿抽提法提取总基因组 DNA 并进行纯度和浓度检测 贮 [1,2] 研究表明 2%-3% 的 IMF 含量是新鲜猪肉产品的一个理想标 于 -2 冰箱备用 准 有研究 1.2 引物设计 [3] 发现 脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白 Adipocyte Fatty Acid-binding Protein A-FABP 基因对猪的 IMF 根据猪 A-FABP 基因 5 - 调控区的序列 GenBank 含量影响显著 因此 A-FABP 基因被认为可能是猪肌内脂 登 录 号 为 Y1639 利 用 软 件 Premier 5. 设 计 引 物 肪 intramuscular fat IMF 沉积的主效基因 A-FABP F:5 -GGGAAGATTTCAGGATACT-3 R:5 - 是 FABP 家族成员之一 又称为 FABP αp2 ALBP 脂 AATCAGAA GTGGTTTGGTCAC -3 引物由上海生物 肪细胞脂类结合蛋白 或 p22 分子量为 1.1KDa 主要在 工程有限公司合成 脂肪细胞中表达 1.3 PCR 产物的 SSCP 分析 哺乳动物的 A-FABP 是甘油三酯的贮 [,5] 存库 在甘油三酯的形成以及脂溶解的过程中 A-FABP 储 2µl PCR 产物与 5µl 变性 Buffer(98% 去离子甲酰胺 存或释放出大量的脂肪酸 从而参与调控脂肪生成及溶解的 1% 甘油 1 mm EDTA.25% 二甲苯青.25% 溴酚蓝 ) 生化循环 因此研究 A-FABP 基因的遗传变异对猪肉品 混匀 98 变性 1 min 迅速冰浴 1 min 用微量注射器 质的改善具有重要的实际意义 松辽黑猪是吉林省农科院畜 将变性样品点于 1% PAGE 中 15 V 电泳 1-16 h 取下 牧分院选育的北方地区第 1 个瘦肉型黑色母系 军牧 1 号 凝胶 置于 7% 乙醇中 轻摇 1-15 min 双蒸水洗胶 3 次 白猪是吉林大学农学部培育的瘦肉型新品种 [8] 目前 对两 将凝胶置于染色液中 轻摇约 2 min 去染色液 双蒸水 个品种肉质性状的研究还比较欠缺 因此本文采用 PCR- 洗胶 3 次 显色液显色至条带清晰出现 用双蒸水冲洗以终 SSCP 方 法 检 测 松 辽 黑 猪 和 军 牧 1 号 白 猪 A-FABP 基 因 止反应 5 - 调控区的单核苷酸多态性 同时对多态片段进行了克 1. 数据统计分析 [6] [7] 隆测序 以确定变异的位置和碱基的突变类型 并将多态性 利用 SPSS1. 软件的 GLM 程序进行 A-FABP 基因 位点与肉质性状进行相关性分析 为下一步松辽黑猪和军牧 型与肉质性状的关联分析 Duncan 多重比较检验差异显 1 号白猪的选种选育提供理论依据和实验基础 著性 1 2 材料方法 1.1 实验材料 松辽黑猪 65 头采自吉林省农业科学院畜牧分院原种猪 场 采集肝脏置于冰盒中带回实验室 军牧 1 号白猪 36 头 结果 2.1 PCR-SSCP 检测结果 PCR 产物经 1% 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 结 果出现三种基因型 AA AB 和 BB 如图 1 197

202 2.2 基因频率与基因型频率 检测结果发现 松辽黑猪和军牧 1 号白猪两个群体中 A-FABP 基因均为 AB 基因型的频率最高 其次是 BB 型 和 AA 型 松辽黑猪等位基因 A 和 B 的频率分别为.15 和.586 军牧 1 号白猪等位基因 A 和 B 的频率分别为 图1 A-FABP 基因 5 调控区 PCR-SSCP 电泳图谱.23 和.5977 等位基因 B 在两个群体中明显占优势 适合性 X2 检验结果表明 松辽黑猪 (X2=2.6, P >.5) 和军牧 1 号白猪 (X2=1.86, P >.5) 两个群体 A-FABP 基 因 5 - 调控区都处于 Hardy-Weiberg 遗传平衡状态 2.3 序列测定结果 图 2 AA 和 BB 基因型的测序峰图 将测序结果与 GeneBank 上序列 登录号 Y 进行同源性分析 结果发现 AA 型的序列与 GeneBank 中 控基因的表达水平 进而发挥对生长发育的调控作用 目 的序列相同 定义为野生型 BB 型第 1321 位的 C 突变为 A 前有关 A-FABP 基因 5 调控区多态性对松辽黑猪和军牧 定义为突变型 两个纯合基因型的测序结果见图 2 1 号白猪肉质性状影响的研究还未见报道 因此本实验以松 2. A-FABP 不同基因型与肉质性状的相关分析 辽黑猪和军牧 1 号白猪为研究对象 采用 PCR-SSCP 检测 将 A-FABP 基因多态位点与松辽黑猪和军牧 1 号白猪 A-FABP 基因 5 调控区的遗传多态性 以期为松辽黑猪 肉质性状进行最小二乘分析 结果显示 A-FABP 不同基因 和军牧 1 号白猪的选种选育提供理论依据和实验基础 结 型对大理石纹有显著影响 对 IMF 含量有极显著影响 大 果检测到多态性 通过测序发现在 1321bp 处发生 C A 理石纹为 BB 型显著高于 AA 型或 AB 型 P.5 AA 的碱基突变 统计分析结果表明此多态性位点与大理石纹 型和 AB 型之间差异不显著 P.5 IMF 含量为 BB IMF 含量呈显著相关 大理石纹为 BB 型显著高于 AA 型 型 或 AB 型 极 显 著 高 于 AA 型 P.1 BB 型 和 AB 或 AB 型 P.5 IMF 含量为 BB 型或 AB 型极显著 型之间差异不显著 P.5 其它肉质性状在不同基因 高于 AA 型 P.1 此结果提示 B 等位基因是松辽 型间差异不显著 黑猪和军牧 1 号白猪 IMF 含量和大理石纹的优势等位基因 3 讨论与结论 提高该等位基因在 5 调控区的含量 可能会提高松辽黑猪 5 侧翼区包含有基因的转录起始位点 启动子序列以 和军牧 1 号白猪的大理石纹和 IMF 含量 由此可以初步推 及多种转录调控因子的结合位点 对于基因转录 HnRNA 断 A-FABP 基因是影响猪肉质性状的一个主效基因或与主 拼接 mrna 稳定性及其转运和翻译都起着重要调控作用 效基因相连锁 另外 5 侧翼区 DNA 的多样性还显著影响到基因表达水 平 也影响到基因表达产物的多样性 [9] 关于不同畜禽 A-FABP 基因多态性及其对生产性能和 肉质性状影响的研究早有报道 多集中在内含子和外显子区 域 Gerbens 等 [1] 在猪 A-FABP 基因的内含子 1 发现了一 参考文献 [1] 姜延志 李学伟. 猪 A-FABP 基因 BsmI 位点多态性与肌内 脂肪含量的相关研究 [J]. 中国畜牧杂志,26,2(5):1-3 [2] 高 妍,张永宏,姜 宁,等. 猪 H-FABP 基 因 遗 传 个 (CA)21 的微卫星序列 并证实杜洛克群体中 A-FABP 多 态 性 及 与 肌 内 脂 肪 含 量 的 相 关 分 析 [J]. 中 国 兽 医 学 基因的此位点对 IMF 沉积有影响 王存芳 [11] 对猪 A-FABP 报,28,28(5): 基因进行了微卫星分析 检测到了 (CA)n 位点 共发现 [3] Gerbens F. Associatins of heart and adipocyte fatty acid 个等位基因 1 种基因型 还指出 CC 型对 IMF 含量的效 - binding pmtein gene expression with intramuscular fat 应值最大 王启贵 content in pigs[j]. Journal of Animal Science,21,79 (2) [12] 在鸡 A-FABP 基因的外显子 1 和内 含子 3 中检测到两个多态位点 并指出该基因多态性与鸡 体重 腹脂重和腹脂率等生长和体组成性状显著相关 姜延 志等 [1] 研究了 A-FABP 基因的内含子 1 区域 发现 BsmΙ 酶切位点具有多态性并与 IMF 含量密切相关 : [] Veerkamp JH & Maatman RGHJ. Cytoplasmic fatty acid binding proteins: their structure and genes[j]. Progress in Lipid Research,1995,3: 调控区是基因调控的重要区域 其变异可能对基因 [5] Fisher RM, Eriksson P, Hoffstedt J, et al. Fatty acid 的启动子活性和表达强度等产生影响 从而影响其下游调 binding protein expression in different adipose tissue 198

203 depots from lean and obese individuals[j]. Diabetolog ia,21,(1): [J]. 中国生物化学与分子生物学报,29,25 (7) : [1] Gerbens F, van Erp, AJM, et al.heart fatty-acid [6] Hertzel AV, Bennaars-Eiden A, Bemlohr DA. Increased binding protein gene variants are associated with lipolysis in transgenic animals over expressing the intermusucular fat content and back-fat thickness in epithelial fatty acid binding protein in adipose cells[j]. pigs. Proceeding 6th world congress genet app. livest Lipid Res,22,3(12): production,1998,26: [7] 曹阳, 梁桂英, 张树敏, 等. 松辽黑猪血液蛋白质多态性的研 究 [J]. 吉林农业科学,28,33(1) : [8] 吴永魁, 周艳红, 计 红, 等. 军牧 1 号白猪 猪 HSP7 基 因的克隆及序列分析 [J]. 中国兽医学报,28,28(6): [9] 部德群, 李秋玲, 王长法, 等. 牛 α1- 抗胰蛋白酶基因 5 [11] 王存芳. 猪 H-FABP 和 A-FABP 基因的多态性及其与肌内 脂肪性状关系的研究. 泰安 [ 硕士学位论文 ]. 山东农业大 学,22 [12] 王启贵. 鸡 FABP 基因克隆 表达特性及功能研究 :[ 博士学位 论文 ]. 哈尔滨 : 东北农业大学,2 侧翼区新 SNP 的鉴定及其与中国荷斯坦奶牛产奶性状的相关性 199

204 不同公猪配种产仔数上的亲和力 金访中 1 胡金平 1 李湘芹 1 杨茂成 2 * (1 杭州大观山猪育种有限公司 浙江 杭州 南京农业大学 动物科技学院 江苏 南京 2195) 摘 要 用杭州市种猪试验场2 29年间 长白猪 大约克 杜洛克三个品种 公猪的配种记录 母猪的分 娩记录 取每头公猪有3窝以上配种分娩记录的个体 长白公猪3头 大约公克37头 杜洛公克2头用于分 析 方法为 按每头公猪 将与配母猪仅产一胎的合并成对照组 与配母猪产二胎及以上的各为一组 用单因 子方差分析及组间LSD法检验 显著性概率P.5为一级亲和力.5 P.1为二级亲和力.1 P.15 为三级亲和力.15 P.2为四级亲和力 亲和力的统计特性有 1.普遍性 即不同品种中的公猪都存在亲和 力 在同一品种公猪中 大约有 6%的个体有亲和力 2.两面性 有些交配组合产仔很多 表现出正亲和 力 有些则相反呈负亲和力 3.专一性 有亲和力的公猪 亲和力仅表现在某些特定的母猪身上 关键词 公猪 产仔数 亲和力 交配组合 称一个试验组 求平均产仔数 前言 同一头公猪与不同母猪交配 其产仔数各不相同 同一 1.3 分析方法 交配组合产二胎或更多胎 其平均产仔数有的很多 有的则 很少 这种现象在繁殖学上用 受精选择性 精子蛋白对卵子透明带具有较高的亲和力 [1] 或 某种 用单因子方差分析和多重比较检验试验组内各交配组 合与对照组产仔 来解释 在 数的差异显著性 为防止可能有亲和力的交配组合被 生产中亲和力 必须通过试验或生产实践来发现 因此研究 过早淘汰 显著水平 α 定为.2 即 α=.2 第一次方差 者很少 也未见有关报导 有待人们去探索和利用 我们对 分析时将 P >.2 的交配组合删除 并将其并入到对照组中 本场 2 29 年间 长白猪 大约克 杜洛克三个品种 再次进行方差分析 直到所剩下的各交配组合 都达到显著 母猪的分娩记录 公猪的配种记录 用统计学的原理和方法 水平为止 进行整理和分析 揭示了公猪在配种产仔数性状亲和力的统 1. 产仔数亲和力的判定方法 [2] 计学特性 探讨了亲和力的判断方法和等级 为以后深入研 凡显著性概率 P.5 的交配组合 称为一级亲和力 究和利用提供参考.5 P.1 为二级亲和力.1 P.15 为 1 三级亲和力.15 P.2 为四级亲和力 交配组合平 材料与方法 1.1 材料 均值大于对照组为正亲和力 相反为负亲和力 资料来自杭州市种猪试验场 2 29 年间 长白猪 1.5 公猪配种产仔数的基本统计 大约克 杜洛克 以每头公猪为单位 对产仔数用 SPSS 软件的 Explore 三个品种种公猪的配种记录 母猪的分娩记录 取有 3 胎以上与配母猪分娩记录的公猪共 头进行分析 各 过程进行探索性分析 获取该公猪的配种产仔数的数学特 征 年度的种猪营养水平及饲养管理措施基本一致 配种方法 2 在控制近交的原则下实行随机自然交配 28 年 9 月开始 2.1 公猪配种产仔数探索性分析结果 采用人工授精 取总产仔数进行分析 资料删去仅产 1 2 结果与分析 为了解公猪配种产仔数的基本特征 对有 3 胎以上配 头的胎次 未作其它较正 种分娩记录的公猪 其中长白公猪 3 头 大约克公猪 37 头 1.2 分组方法 杜洛克公猪 2 头的配种产仔数 用 SPSS 软件的 Explore 以每头公猪为单位 将与配母猪进行分组 凡仅有产一 胎的与配母猪 过程进行探索性分析 部分公猪结果见表 1 由表 1 可见 同一品种 不同公猪间配种产仔数各不 合并为一组 求平均总仔数 以下称为产仔数 称对 相同 有的相差很大 如大约克 号公猪平均产仔 照组 作为比较的基准 代表该公猪的配种产仔数 再将产 数 达 1.26 头 而 5 15 号 公 猪 平 均 产 仔 数 仅 为 8.57 二胎或更多胎的与配母猪各成一组 即一头与配母猪为一个 头 两者相差 1.69 头 经 T 检验差异达到极显著水平 P < 2

205 Table 1 表 1 公猪配种产仔数探索性分析结果 Results of Exploratory Statistical analysis in boars 分娩胎数 品种 公猪耳号 Number of Breed Ear mark litter L Y D 平均数 ± 95% 置信区间 M 估计值 标准误 95%confidence M.Estimate Mean±S.E. interval 2.2 亲和力的分析结果 对三个品种共 95 头公猪均有 3 胎以上配种分娩记的个 体 用分析方法 1.2 分组及 方析计算后 所得部 分公猪配种产仔数的亲和力见表 ± 由表 2 可见 1 同一品种内不同公猪间产仔数亲和力 ± 的强弱差异很大 如大约克 6-69 号公猪在 28 个交配组 ± 合中 有 11 个组合具有亲和力 其中一级亲和力有三个 5-Y ± ± ± ± ± ± 大约克中发现有亲和力的组合较多 长白猪则较少 ± 有的差异虽然没有达到显著水平 但已十分明显 而 5-Y3 号公猪有 15 个交配组合 仅发现 6 个组合有较弱 的亲和力 有些公猪的交配组合没有发现亲和力 2 不同交配组合亲和力有正有负 并可出现在同一个 级别中 若该交配组合平均值低于对照组 则亲和力是负值 相反为正值 有的公猪只发现正亲和力 有的公猪则相反 3 每个品种的公猪都发现有亲和力 但强弱差异较大 讨论 3.1 关于产仔数的亲和力 同一头公猪与不同母猪交配 其产仔数各不相同 但当 这种差异在生产中能为提高产仔数的选择提供了机会 M 估计 又称稳健估计 它是不同权重的最大似然确定数 [3] 与配母猪数量足够多时 产仔数分布服从或接近正态分布 [] 用 M 估计量来代替代算求平均值 更符合公猪配种产仔数 这表明多数母猪的产仔数在平均数附近 多数母猪的平均产 的潜在能力 共有四种估计方法 其中 HUBER 法适用于 仔数与该公猪的平均产仔数间没有显著差异 然而 在生产 近似正态分布的资料 本文的 M 估计值由此法获得 实践中存在某些交配组合的产仔数特别多 有的则很少 它 表 2 不同公猪配种产仔数的亲和力 Table 2 对照组 control group 交配组合组数 品种 公猪耳号 total number 窝数 Breed Ear mark number of 平均数 ± 标准 of mating 误 Mean±S.E. combina-tions litter L Different boars on little size in mating affinity 有亲和力的交配组合数 number of affinity mating ombinations 一级 first grade 二级 second grade - - 三级 third grade 四级 fourth grade - - 合计 total ± ± MH ± ± ± Y ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± 注 positive negative 21

206 们与公猪平均产仔数间存在显著差异或接近显著差异 如 3.3 亲和力的统计学特点 Y5-69 号公猪 有 21 窝配种分娩记录 其中与同一头 分析资料表明 公猪配种产仔数亲和力具有以下特点 母猪产两胎或以上的组合有 28 组 发现有 2 对组合产仔数 1 普遍性 从表 2 可以看出 长白 大约克 杜洛克 很多 一对组合产仔数很少 这 3 对组合与公猪平均值间 三个瘦肉型品种中都存在公猪配种产仔数亲和力 说明品 有显著差异 P <.5 另有 8 对组合接近显著差异 长 种间有共性 在品种内 对有 3 头以上与配母猪分娩记 白猪 杜洛克猪中都存在这种现象 对形成这种差异的解 录的长白公猪进行分析 结果约有 62.5% 的公猪发现有亲 释 在繁殖学上称 猪的一种称为 zonaadhesin 的精子蛋 和力 而具有一级亲和力的公猪仅占 2.8% 大约克公猪 白对猪卵子 ZP 透明带 具有较高的亲和力 而这种亲和 中有 66.6% 公猪有亲和力 其中具有一级亲和力的公猪占 力具有特异性 也有学者认为精子与卵子相结合时有受.% 杜洛克中有 5% 公猪发现有亲和力 而具有一级亲 精选择性 可以看出亲和力是一对特定配偶间精子与卵 和力的公猪仅占 1.3% 这表明公猪配种产仔数的亲和力在 子的特别结合能力 它的发生概率并不高 在被分析的公 品种间有明显的差异 这些比例有随着产二胎及更多胎交配 猪中有 95 头公猪有这种情况 约占总数的 61.5 % 品 组合数的增加而上升的趋势 但有些公猪却未表现出亲和 种间有一定差异 这种亲和力目前无法预测 必须通过实 力 如 Y 公猪 共分娩了 93 胎 其中同一母猪产 践来发现 费时费力 因此研究者很少 从而留下大片空白 二胎以上的组合有 8 对 却未发现任何等级的亲和力 这是 待后人探索和开发 否意味着组合数还不够呢 这有待进一步探讨 [5] [1] 3.2 产仔数亲和力的衡量方法 2 两面性 是指亲和力的数值有正有负 负值是组合 表现在公猪配种产仔数上的亲和力是个数量性状 陆春 平均产仔数显著低于对照组的产仔数 这种现象在繁殖上称 延等将差异显著的交配组合称作 特殊交配组合 本研 为免疫性繁殖障碍 其原因是精子具有免疫原性 可以刺激 究根据亲和力的表现特点 借用平均数差异显著性检验原 异体产生抗精子抗体 抗体与外来精子结合而阻碍精子与卵 理 将差异显著性概率作为亲和力判断的标准 以此判断亲 子结合 引起屡配不孕 免疫性繁殖障碍主要表现为受精障 和力的存在与否及其等级的大小 计算方法 以公猪为单位 碍 胚胎早期死亡和胎儿死亡及新生儿死亡 引起动物屡配 将与该公猪交配仅产一胎的交配组合集合成一组 求得平均 不孕 流产或幼畜成活率低 [5] 两面性多在同一公猪中出现 值 称为对照组 作为比较的基准 代表该公猪的配种产仔 也有一些公猪仅发现正亲和力或负亲和力 这可能与产两胎 数 再将产有二胎或以上的组合各成一组 分别求其平均值 以上的组合数不够有关 [] 作为试验组 用单因子方差分析和多重比较 能方便地获得 3 专一性 产仔数亲和力仅表现在公猪与某一头特定 各试验组与对照组之间差异的显著性概率 凡是显著性概率 母猪的交配组合中 使该组合平均产仔数特多或特少 有亲 a 大于.2 的试验组拆消 并入对照组 再次进行重复分 和力的公猪不等于与每头母猪交配都有亲和力 表现出严格 析 直到所剩下的各检验组显著性概率 P 都小于.2 为止 的专一性 由于这种专一性的存在 大大降低了亲和力的应 这时 P.5 的交配组合 称为一级亲和力 表明该组合 用价值 加之无法预测 不能举一反三 这些都限制了人们 的产仔数与对照组有很显著的差异 从统计学上看它们代表 对探索亲和力的兴趣 在我们对资料的分析中 总结出一个 两个不同的总体 有别于一般的交配组合 该组合具有一级 对亲和力探索利用的简便方法 在对某青年公猪获得相应配 亲和力 判断错误的概率小于 5% 为避免某些优秀的组合被 种产仔窝数后 对产仔数多的交配组合可用该公猪再次进行 遗漏 我们将.5 P.1 为二级亲和力.1 P.15 配种 产仔数很少的交配组合 则应避免再配 等再配组合 为三级亲和力.15 P.2 为四级亲和力 判断错误 母猪全部分娩后 对该公猪的所有配种产仔窝数进行亲和力 的概率分别小于 1% 15% 2% 将一个具有三级亲和力的 分析 若没有发现亲和力的组合 则这些组合不应再用该公 组合 实施再配种 预计产仔多的可能性可达 8% 生产实 猪重复配种 这种方法不用成本 对提高产仔数水平是有积 践上有利用价值 当样本含量增大后 这些组合有达到显著 极意义的 水平 (P.5 的可能 参考文献略 22

207 微卫星与营养互作 对宁乡猪肉质影响的研究 谢菊兰 1 朱 吉 1 孙建帮 1 彭英林 1* 刘伯承 1 李述初 2 杨仕柳 1 邱美珍 1 (1. 湖南省畜牧兽医研究所, 长沙 湖南宁乡猪原种场, 宁乡 1635) 摘 要 选用微卫星基因座SW167 SW1329 SW2173 SW181 以宁乡猪 大约克夏猪和汉普夏猪为亲本 设置 宁乡猪 宁乡猪 宁宁 大约克夏猪 宁乡猪 大宁 汉普夏猪 宁乡猪 汉宁 等3个品种组合共86头试猪 按体重前期 15-3kg 中期 3-6kg 后期 6-9kg 3个阶段分别给予高 中 低不同蛋白质和能量水平 组合饲料 分析基因座的多态性分布 基因型与营养水平互作效应与肉质指标的相关性 结果表明 ⑴个微 卫星基因座中 仅SW167基因座在3个猪种中均检测到5个等位基因 种基因型 宁宁 大宁 汉宁猪SW167的 有效等位基因数分别为 其多态信息含量PIC 杂合度H分别为 和 ⑵基因型AA极显著降低了肌肉失水率 AC对肌肉滴水损失 肌内脂肪有显著效应 CE 极显著降低了熟肉率 P <.5或.1 在互作方面 部分基因型与营养水平互作对相关指标效应达到了显著 或极显著水平 P <.5或.1 关键词 宁乡猪 微卫星 营养水平 互作 肌肉指标 表１ 不同组合猪群数量 随着人们对回归绿色 增强营养的理念的提升 对猪肉 品质有了更高要求 [1-5] 影响肉质的因素很多 主要受品种 基因 环境及它们之间互作的影响 充分利用地方猪种肉嫩 营养水平 宁乡猪 宁乡 大约克夏猪 汉普夏猪 宁 猪 宁乡猪 F1 乡猪 F1 味美的特点 借助微卫星分子标记 设置不同营养水平对基 高 因 营养以及互作对猪肌肉相关指标效应进行研究 以寻求 中 宝贵的基因资源及优势的互作组合 可为地方猪种遗传资源 低 共计 和优良种质的有效保护和开发利用提供依据 1 [6-8] 材料与方法 1.1 试验材料 试猪分组及日粮 选择湖南宁乡猪原种场 以宁乡猪 大约克夏猪和汉 试验猪猪肉样 试验猪宰杀后 取左侧胴体背最长肌 1 3 腰椎间肌肉 组织样本 置食品薄膜包装袋内隔离空气保存 冻存于 -8 普夏猪为亲本 设置宁乡猪 宁乡猪 宁宁 大约克夏 的超低温冰箱 猪 宁乡猪 大宁 汉普夏猪 宁乡猪等 3 个品种组合 1.1. 猪肉品质性状的测定 根据窝别 日龄 体重均匀搭配和随机分组等原则进行分组 肌肉样品分析在湖南省畜牧兽医研究所和中国亚热带 合群和预试饲养 按试猪体重前期 15-3 kg 中期 3- 农业生态研究所进行 指标包括肉色 大理石纹 水分 肌 6 kg 和后期 6-9 kg 3 个阶段分别给予高 中 低 内脂肪等 不同蛋白水平和能量水平饲料 试验日粮为玉米 - 豆粕型 1.2 引物合成和 PCR 扩增 引物合成 并经蒸汽熟化制粒 试猪头数如表 1 生长肥育阶段的划分 和配方见表 试验猪 DNA 样品 取鲜耳组织置 1.5mTips 管冻存 按常规苯酚 / 氯仿抽 提法提取基因组 DNA 引物名称 序列及长度等见表 PCR 反应程序 9 预 变 性 5 min 35 个 循 环 9 变 性 3 sec 6 退火 3 sec 72 延伸 5 sec 72 后 23

208 表 2 日粮配方及主要营养成分 组别 高 表 3 引物名称及序列 中 低 名称 体重阶段 /kg 玉米 次粉 麦麸 米糠粕 豆粕 鱼粉 砻糠 预混料 合计 引物 (5 3 ) 数 TGCTGGCCAGTGACTCTG CCGGGGGATTAAACAAAAAG TTCTCGAATCTGACCATGACAC SW181 AGCTTCACTGATAAGGAAGTCACTG TTCCCTTTGATTAATTTGCTGG SW2173 CCATATGCCGTGGGAGAG GATCTCTCTCTGTCTTATCTACACAC SW1329 AACCTCGTCCTTTCTTAGCC SW167 长度 /bp 退火温 度 / 扩增结果 因此无法进行进一步的分析 在 SW181 微卫 星座位只检测到一种基因型 如图 1 所示 本试验只有 SW167 在 3 个猪种中都表现多态性 共 发现了 5 个等位基因 即 169 bp 172 bp 183 bp 189 bp 消化能 /MJ/kg 及 196 bp 变异范围在 169 bp 196 bp 之间, 扩增产物 代谢能 /MJ/kg 的部分聚丙烯酰胺凝胶电泳结果见图 2 粗蛋白质 /% 粗纤维 /% 赖氨酸 /% 1.9 蛋 胱 /% 苏氨酸 /% 位基因均处于遗传的极不平衡状态 作为杂交后代 遗传不 钙 /% 平衡是正常的 此外 样本含量较少也是重要原因 见表 总磷 /%.58.5 非植酸 /% 在 3 个猪种中均发现了 SW167 基因座 5 个等位基因 粗脂肪 /% 等位基因频率和基因型频率 变异范围在 bp 之间 位于报道的 bp 范 围内 三猪种中各等位基因频率相差较大 A 等位基因频 率最高 B D 等位基因频率较低 每个猪种均检测到了 种基因型 哈代 - 温伯格平衡检验结果表明 3 个猪种该等 表 多态信息含量 杂合度和有效等位基因数 注 预 混 料 为 每 公 斤 全 价 料 提 供 : VA 55IU, VD 322IU, VE 5mg,VK3 2.2mg, VB12 28 mg, 核 黄 素 5.mg, 硫胺素 1.5mg, 尼克酸 25mg, D- 泛酸 12mg, 胆 碱 8mg, Cu 22mg, Fe 11mg, Mn 3mg,Zn 16mg, I 2.3mg, Se.3mg, 赖氨酸 1mg, 蛋氨酸 35mg 图 1 SW181 PCR 扩增结果 延伸 8 min 保存 PCR 反应体系及电泳 PCR 反 应 体 系 的 总 体 积 为 1 ml 其 中 ddh2o 3.9 ml 1 Buffer 1. ml 25 mmol/l Mg2+1. ml 2 mmol/l dntp 1. ml 5 mmol/l 上 下 游 引 物 各 图 2 SW167 PCR 扩增结果 1. ml Taq DNA 聚合酶.5 U,DNA 5 1 ng 扩 表 SW167 的基因型频率 增结果于 1 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测 1.3 统计分析 所有数据均采用 SAS6. [1] 软件中的 GLM 过程进行 方差分析 2 结果与分析 2.1 PCR 扩增产物电泳检测结果 微卫星引物 SW1329 SW2173 位点没有检测到有效的 2 基因型频率 猪群 196/ /18bp 189/172bp 183/169bp X2 值 AA (AC) (BD) (CE) Pr 宁宁.22/6.37/1.11/3.3/ <.1 大宁.21/6.25/7.18/5.36/ <.1 汉宁.16/5.5/1.1/3.29/ <.1

209 表 5 SW167 的等位基因频率 猪群 多 态 信 息 含 量 分 别 为 等位基因频率.886 H 分别为 , 见表 bp/e 172 bp/d 183 bp/c 189 bp/b 196 bp/a 2. 微卫星与营养水平互作对肌肉常规性状的影响 宁宁 大宁 汉宁 由 表 7 可 见 基 因 型 AA 极 显 著 降 低 了 肌 肉 失 水 率 P<.1 AC 显著提高了肌肉滴水损失和肌内脂肪 CE 极显著降低了熟肉率 P <.5 在互作方面 AA 高水 平对熟肉率和粗蛋白效应显著 分别为 和 -5.2 AC 高 水 平 对 失 水 率 熟 肉 率 水 分 效 应 显 著 分 别 表 6 各猪种微卫星 SW167 的多态信息含量 杂合度和 有效等位基因数 猪种 宁宁 大宁 汉宁 平均值 等位基因数 为 AC 中水平互作效应显著提高 了熟肉率 BD 低水平显著提高了失水率 P <.5 其 它基因型与营养水平之间对猪肉质性状的互作效应不显著 3 讨论 有效等位基因数 Ne 微卫星的选择以及 SW167 的遗传多态性分析 Grindflek 等在对商品猪杂交群中 6 7 号 3 条染色 多态信息含量 PIC 体进行影响肉质性状的 QTL 的扫描时 发现 6 号染色体具 杂合度 (H) 有显著影响肌内脂肪的 QTL 本研究 表 7 基因型对肉质性状效应 肉色 均数,μ 3.6 分 大理石纹 ph 值 失水率 熟肉率 滴水损失 水分 粗蛋白 肌内脂肪 AC -.5 BD.1.1 CE ** * * * ** 基因型 营养水平互作效应 * 7 7cm 处 多态信息含量是等位基因频率和 等位基因数的变化函数 是衡量片段 基因型效应 AA 所选用的微卫星标记位于 6 号染色体.11 多态性的一个指标 Botstein 等提出了 PIC>.5 时 该基因座为高度多态基 因座.25 < PIC<.5 时为中度多态 基因座 PIC<.25 时为低度多态基因 座 本研究的微卫星 SW167 基因座 平均 PIC 为.7639 为高度多态基因 AA 高 *.2 座 这与彭英林等 [11] 在大围子猪 杜 AA 中 长大杂交猪中得到的结论相似 Ne 是 纯合度的倒数 它表明等位基因间的 * 相互影响 等位基因在群体中分布越 均匀 有效等位基因数越接近检测的 等位基因绝对数 本研究的 3 个猪种中 AA 低.2 AC 高 AC 中.1 AC 低 BD 高 BD 中 2.63 BD 低 1.68* CE 高 -.13 CE 中.1 AA 基因型对失水率 熟肉率 CE 低 有显著效应 AC 对滴水损失 肌内脂 -1.6* 5.37* ** -.39 Ne 大小依次为汉宁 > 宁宁 > 大宁 3.2 微卫星基因型效应及基因型与 营养水平的互作 四种基因型均对部分肉质性状产 生 了 显 著 或 极 显 著 效 应 P <.5 或 肪有显著效应 BD 对水分 粗蛋白有 多态信息含量 平均杂合度和有效等位基因数均是反映 显著效应 CE 则仅对熟肉率有显著负效应 互作效应分析 群体内遗传变异大小的度量 3 个猪种该位点的等位基因绝 可以看出 不同营养水平影响了基因型对肉质的作用 不同 对数为 5 宁宁 大宁 汉宁的有效等位基因数分别为.783 基因型也影响了营养水平对肉质的作用 此研究结果将对以 25

210 后宁乡猪及其杂种猪肉质特定指标分子选育提供一定的科 [5] Hodgson R.R., G.W.Davis, G.C.Smith, et al. 学依据 Relationships between pork loin palatability traits and 宁乡猪作为湖南的著名地方品种 肉质风味好 肌内脂 physical characteristics of cooked chops[j]. J.Anim. 肪高是其显著特点 [6] 本研究中的宁乡猪及其杂种猪分析结 果均显示了较好的肉质种质 尤其是汉宁在肉质方面表现出 Sci.,1991,69: [6] 朱吉 杨仕柳 孙建帮 等. 部分湖南地方猪种的肉质分析 [J]. 独特的的杂种优势 养猪 [7] 王林云 曾勇庆 高勤学等. 对我国地方猪种若干特性的分子 参考文献 [1] 曾勇庆 王林云 王根林. 猪肉质的影响因素及遗传调控与优 生物学研究 [J]. 猪业科学 26 23(1): [8] 姜勋平, 熊远著, 邓昌彦等. 猪微卫星座位杂合度与肌肉肌苷 质肉猪的培育 [J]. 猪业科学, 26,(6):7-77. [2] Ellis, M. The effects of genetic and nutritional factors on 酸含量的关系 [J]. 畜牧兽医学报 23 3(): [9] 陈润生. 优质猪肉的指标及其度量方法 [J]. 养猪业 22 pork quality (Review) [J]. Asian-Aus.J.Animal science, 1999, 12(2); (3):1-5. [1] [3] 倪德斌, 熊远著, 邓昌彦等. 影响猪肉质因素的探讨 [J]. 华 中农业大学学报 (5) 7-77 [] 经荣斌 宋成文 王宵燕 猪肌肉品质的影响因素及改善肉质 的方法 [J] 动物科学与动物医学 2 21(11): SAS, 199, SAS user's guide, Statistics (Version6, th Ed.) [C]. SAS, NC [11] 彭英林. 基因型与营养互作及其对猪肉质影响的研究 [D]. 湖南农业大学, 博士学位论文, 27.

211 SREBP1 及其靶基因在胆固醇生物合成过 程中作用机理的研究 蒋 越 何 侃 高运臻 王起山 俞沛初 ** 潘玉春 ** 上海交通大学 农业与生物学院 上海 22 摘 要 本文通过荧光定量PCR方法对不同蛋白质营养水平下宁乡猪和杜长大猪7个组织中的基因表达进行检 测 分析了SREBP1基因及其三个在胆固醇生物合成通路中的靶基因HMGCR IDI1和SCMOL的表达情况 结果表 明 ①猪群因素对基因在部分组织中的表达有显著影响 其中SREBP-1在皮脂中 HMGCR在背肌中 IDI1在小脑 背肌和肝中 SCMOL在大脑 背肌和肝中 SREBP-1基因在DLY猪中的表达量显著高于在宁乡猪中 HMGCR IDI1 和SCMOL这三个基因则是在宁乡猪中的表达量显著高于在DLY中 由于HMGCR IDI1和SCMOL都在宁乡猪中 高表达且均涉及到类固醇的生物合成 所以在追求高肌内脂肪的同时 可能必须注意胆固醇的含量 ②日粮营 养水平对这四个基因在部分组织中表达的影响都显著 但营养水平对基因表达的作用因组织不同而不同 对 SREBP-1是在小脑 皮脂 回肠 肝 肾 对HMGCR是在回肠 对IDI1是在肝 对SCMOL是在背肌 肝 肾 比较 同一种日粮 15.3%CP日粮 的作用 发现其对SREBP-1在小脑 皮脂 回肠中的表达影响不同 说明日粮与猪 群之间存在互作 比较添加精氨酸与否 15.3%CP和15.28%CP+1%精氨酸日粮 的作用 发现其对SREBP-1在 小脑 回肠中和SCMOL在肝中的表达影响不同 即加了精氨酸后显著降低SREBP-1在小脑 回肠中的表达量 而增加SCMOL在肝中的表达量 ③组织差异对这四个基因表达的影响都达到了差异显著水平 且SREBP-1 HMGCR IDI1和SCMOL基因都是肝中表达最高 ④在消除猪群与营养因素的影响之后 SREBP-1基因与其它三个 基因间的相关性没有特定的规律可循 但是HMGCR IDI1和SCMOL三个基因在小脑 背肌 回肠和肾四个组织 中的相关较高 关键词 胆固醇生物合成 固醇调节元件结合蛋白1 β-羟-β甲基戊二酰辅酶a还原酶 异戊烯二磷酸-δ-异 构酶1 C甲基固醇氧化酶 基因表达 脂肪代谢为三大物质代谢之一 涉及机体的能量供应 提供更充足的理论依据 及储存 生物膜的构成以及其它一些重要的生命过程 其 胆固醇合成是通过一个反馈机制调控来维持细胞的胆 信号转导具有复杂而精细的调控网络 脂代谢主要包括 固醇水平 与胆固醇合成不同 脂肪酸合成主要受碳水化 甘油三脂 TG 代谢 胆固醇及其酯的代谢 磷脂和糖脂 合物的有效性和激素如胰岛素作用的调控 尽管这些调控 代谢等 在这些代谢过程中 大量的蛋白酶 受体 转录 形式可能不同 研究也表明两个生物合成途径都能被一个 因子等参与其中 而它们又受一些信号转导途径的调控 共同的转录因子 SREBPs 调控 [] SREBPs 有 3 种同工型 [1] 形成了复杂而精细的调控网络 以维持细胞乃至整个机 SREBP-1a SREBP-1c 和 SREBP-2 三 种 SREBP 合 称 体的脂代谢平衡 脂代谢信号转导途径主要有 过氧化物 固醇调节元件结合蛋白家族 (SREBPs)[5] SREBP1 是脂肪 酶体增殖物激活受体 peroxisome proliferator activated 细胞分化过程中的一个转录因子 [6,7] 在脂肪酸和胆固醇生 receptors, PPARs 信 号 转 导 途 径 肝 X 受 体 liver X 物合成过程中起着重要作用 [5] [2] receptors LXRs 信号转导途径 固醇调节元件结合蛋白 为 了 更 好 地 了 解 SREBPs 在 猪 脂 肪 代 谢 过 程 中 的 作 sterol regulatory element binding proteins SREBPs 用 机 制 以 及 在 不 同 蛋 白 质 营 养 水 平 下 SREBPs 的 分 子 调 信号转导途径等 脂代谢信号转导途径错综复杂 每条途 控 机 理 我 们 选 取 SREBP1 基 因 和 它 的 三 个 参 与 胆 固 醇 径调控的下游靶基因众多 且各条途径之间相互也有调控 代 谢 过 程 的 靶 基 因 HMGCR IDI1 运 用 荧 光 定 量 PCR 其中许多问题尚有待阐明 同时 基因调控机制以及基因间 技 术 对 SREBP1 β- 羟 -β- 甲 基 戊 二 酰 COA 还 原 酶 相互关系的深入研究 将为胆固醇生物合成机理和脂肪沉积 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase [3] 27

212 HMGCR 异 戊 烯 二 磷 酸 -δ- 异 构 酶 1 isopentenyldiphosphate delta isomerase 1, IDI1 和 C 甲 基 固 表 2 预混料组成 Table 2 Pre-mixed compound feeds composition 每 kg 预混料 g 醇 氧 化 酶 sterol-c-methyl oxidase-like protein SCMOL 这四个基因在不同蛋白质营养水平下脂肪型猪 微量元素预混料 1 宁乡猪及瘦肉型猪杜长大 (Duroc Landrace Yorkshire, 维生素预混料 DLY) 三元杂交商品猪的大脑 小脑 背肌 皮脂 回肠 肝 氯化胆碱 5% 1 防霉剂 1 抗氧化剂 1 载体 659 总量 1 肾七个组织中 mrna 表达水平进行研究 1 材料与方法 1.1 试验设计 选用刚进入肥育期的杜长大三元杂种猪和宁乡猪 杜 长大猪重 7.±.2 kg 宁乡猪 55.6±7. kg 均为阉割 分成三个处理组 每组 头 分别饲喂 A B C 日粮 分 注 添 加 剂 预 混 料 为 每 千 克 全 价 料 提 供 Cu 1 mg; Fe 1 mg; Na.3 mg Zn 1 mg Mn 1 mg; VD3 386 IU; VA 386 IU; VE 15. IU; VK3 2.3 mg; VB2 3.9 mg; 泛酸钙 15. mg; 烟酸 23 mg ; VB1215. μg 别记为 NX1 NX13 和 NX16 杜长大三元杂交猪共 16 每天清扫猪栏 1 次 记录采食量 正式试验当天 d 空腹 禁 头 随机分成四个处理组 每组 头 分别提供 B C D 食 12h 称重 于屠宰前 1 天空腹称重 再正常饲喂 禁食 E 日 粮 ( 分 别 记 为 DLY13 DLY16 DLY19 和 DLY16-2 小时后屠宰 ( 屠宰时两种猪重约 9kg) 分别提取每个个 Arg) 体各脏器组织样品存放于实验室 -8 低温冰箱中 过的公猪 试验使用 5 种日粮 分别记为 A B C D E 5 种日粮配方如表 1 和表 2 所示 宁乡猪共 12 头 随机 各组试验猪均饲养于高床漏缝地板控温 17 通风的 猪舍内 单栏饲喂 预试 7 天 干粉料自由采食 自动饮水 表 1 试验日粮配方 (%) Table 1 Ingredient composition of the diets (%) 日粮组成 1.2 统计分析 第一 各个基因在各个组织中表达的单独分析 该分析 是对特定基因 特定组织 检验猪群不同 日粮不同是否 对该基因在该组织中的表达量有显著影响 我们采用 SPSS 日粮 V16 General Linear Model 中的单依变量 Univariate 方法 模型如下 A B C D E 玉米 豆粕 在此 yijk 为基因表达量 μ 为群体均值 Bi 为猪群 麦麸 效应 包括 DLY NX 两个水平 Fij 为猪群内日粮效应 包 豆油 括 DLY13 DLY16 DLY16-Arg DLY19 以 及 NX1 食盐 NX13 NX16 七个水平 eijk 为随机误差 磷酸氢钙 第二 各个基因在所有组织中表达的联合分析 该分析.97 是对特定基因 检验猪群不同 日粮不同尤其是组织不同 大 碳酸钙 精氨酸 1. 预混料 合计 总钙 TP 赖氨酸 营养成分 CP DE MJ/ kg 28 脑 小脑 背肌 皮脂 回肠 肝 肾 是否对该基因的表 达量有显著影响 我们采用 SPSS V16 General Linear Model 中的重复度量 Repeated Measures 方法 模型如下 式中 yijkl 为基因表达量 μ 为群体均值 Bi 为猪群 效应 Fij 为猪群内日粮效应 而 Tk 为重复度量的组织效应 (TB)ik 为组织与猪群间的互作效应 (TF)ijk 为组织与猪群 内日粮间的互作效应 eijkl 为随机误差 第三 各组织内不同基因间的剩余效应相关分析 该 分析的目的在于探讨在特定组织内 消除猪群和日粮影响 之后的各基因表达量之间的相关 我们采用 SPSS V16

213 General Linear Model 中的多变量 Multivariate 分析方法 个因素若经 F 检验显著 P <.5 则对各水平的边际均数 模型如下 用 Bonferroni 法进行多重比较 其中 同一列同一因素不 同水平的边际均数若标有相同的肩标 则表明二者间差异不 在此 上标 s 表示第 s 个性状 其它与模型 1-1 相同 显著 P >.5 否则意味着差异显著 P <.5 但有个 所谓两个性状 s t 间的剩余效应相关 即 与 间的相关 别情况是 F 检验显著 P <.5 而多重比较却无一对均数 需要指出的是 由于个别组织中个别基因检测值缺失 间达到 P <.5 的显著水准 对此我们在表 3-6 做了注明 所以在进行上述第二 第三两种分析时 我们采用了 SPSS 2.2 各个基因在所有组织中表达的联合分析 V16 中变量均数替代法替代了缺失值 2 依据模型 1-2 对各基因在全部组织中的表达进行联 结果与分析 合分析 发现 ①组织因素对 SREBP1 基因的表达存在显 2.1 各个基因在各种组织中表达的单独分析 著影响 但其与猪群以及猪群内日粮的互作效应不显著 ② 依据模型 1-1 对各基因在各组织中的表达分别进行 组织因素对 HMGCR 基因的表达存在显著影响 但其与猪 分析 结果如表 3 至 6 所示 表中所列数据为估计的校正群 群以及猪群内日粮的互作效应不显著 ③组织因素对 IDI1 体边际均数 Modified Population Marginal Means 一 基因的表达存在显著影响 其与猪群以及猪群内日粮的互作 表 3 SREBP1 基因在各组织中的表达分析结果 Table 3 Analysis results of SREBP1 gene expression in different tissues 效应 回肠 * 肝 肾 a b b b.58 b ab 1.269ab DLY a a 5.6 a b 1.123ab DLY16-arg b..8 ab.27 b.296 ab 1.8ab DLY b ab.99 b b.261b NX ab b.1 b.287 ab.82b NX b b.7 b a 2.15a NX b b.17 b ab.212b 猪群 日粮 大脑 小脑 背肌 皮脂 DLY NX.35 DLY13 注 在回肠中 群体内日粮间效应 F 检验显著 多重比较发现主要是 DLY16 与其它日粮的效应差异较大 但显著水平均在 之间 均未达到 P <.5 表 HMGCR 基因在各组织中的表达分析结果 Table Analysis results of HMGCR gene expression in different tissues 效应 猪群 日粮 大脑 小脑 背肌 1 皮脂 回肠 2 肝 肾 DLY b NX.56. a DLY DLY ab DLY16-arg b DLY ab NX ab.35.2 NX ab NX ab.2.16 a 注 1 此列数据为实际值的 1 倍 2 在回肠中 群体内日粮间效应 F 检验显著 但多重比较 DLY13 与 DLY16-arg 差异最大 但只达到 P <.97 的显著水平 29

214 表 5 IDI1 基因在各组织中的表达分析结果 Table 5 Analysis results of IDI1 gene expression in different tissues 效应 大脑 小脑 背肌 * 皮脂 回肠 肝 DLY.127.6b 2.9b b.66 NX.128 a.11 a a DLY b.79 DLY b.8 DLY16-arg b.75 DLY NX NX b.8 NX b.5 猪群 日粮 肾 b a.177 注 此列数据为实际值的 1 倍 表 6 SCMOL 基因在各组织中的表达分析结果 Table 6 Analysis results of SCMOL gene expression in different tissues 效应 猪群 日粮 大脑 小脑 背肌 * 皮脂 回肠 肝 肾 DLY.161b b b.163 NX a a a DLY ab c.26 a DLY b c.111 ab DLY16-arg ab b.155 ab DLY b b.122 ab NX ab a.239 ab NX a bc.119 ab NX ab bc.62 b 注 此列数据为实际值的 1 倍 效应也显著 ④组织因素对 SCMOL 基因的表达存在显著 影响 其与猪群以及猪群内日粮的互作效应也显著 表 7 列出了估计的各基因的组织校正群体边际均数 表 7 各基因在 7 个组织中的表达联合分析结果 Table 7 Jointanalysis results of each gene expression in the 7 kinds of tissues Modified Population Marginal Means 若组织因素经 检验显著 P <.5 则对各组织的边际均数用 Bonferroni 法进行多重比较 其中 同一列不同组织的边际均数若标有 相同的肩标 则表明二者间差异不显著 P >.5 否则意 味着差异显著 P < 各组织内不同基因间的剩余效应相关分析 SREBP1 HMGCR IDI1 SCMOL 大脑 5.38ab.5ab.131c.29c 依据模型 1-3 对各组织内基因间的剩余效应相关系 小脑.823c.38ab.7d.16cd 数进行分析 结果如表 8 所示 由表可见 四个基因间的剩 背肌.53d.c.3e.e 余效应相关在不同组织中几乎没有什么规律 但可以注意 皮脂 2.13b.31b.131c.66d 回肠.799bcd.35b 1.657b.73b 肝 13.5a.18a.69a.596a 肾.937c.21b.82c.151c 21 到的是类固醇生物合成通路上的三个基因 HMGCR IDI1 SCMOL 在小脑 背肌 回肠 肾中的相关较高 3 讨论与小结 3.1 猪群对基因表达影响的研究 宁乡猪是我国优良的地方品种 为脂肪型猪种 [8] 而

215 表 8 六个基因间的剩余效应相关系数 Table 8 Residual effect correlation coefficents of genes SREBP1 HMGCR SREBP1 大脑 -.2 背肌 皮脂 肾 脂肪沉积规律尤其是肌内脂肪含量存在本质上的差异 而且 更重要的是类固醇的生物合成存在本质上的差异 IDI SCMOL 及正常代谢的能力 有报道表明 日粮蛋白质水平对宁乡 猪的生长肥育性能和胴体性能有影响 以日粮蛋白 1% 为.22 最佳 [9] 也有研究指出 SREBPs 受到胰岛素 / 葡萄糖和瘦.163 HMGCR.156 IDI SCMOL SREBP HMGCR.716 IDI 现 胰岛素能促使 SREBP-lc 表达增强 并促进其蛋白水 SREBP IDI SCMOL IDI SCMOL HMGCR -.21 IDI SREBP HMGCR IDI SCMOL 激素 而且胰岛素对许多基因表达的调控均通过 SREBP1c 介导 精氨酸能影响胰岛素的分泌 在一定程度上也能影响 而由本试验的结果可以发现 ①日粮营养水平此四个基 因在部分组织中表达的影响都显著 具体说来 对 SREBP1 是在小脑 皮脂 回肠 肝 肾 对 HMGCR 是在回肠 对 IDI1 是在肝 对 SCMOL 是在背肌 肝 肾 可见营 养因素发挥作用的部位是不同的 ②对比 DLY16 与 NX 可 见 其 对 SREBP1 在 小 脑 皮 脂 回 肠 中 的 表 达 影 响 不.257 同 即同一种日粮 C 日粮 的作用不同 说明日粮与猪群 之间存在互作 ③对比 DLY16 与 DLY16-Arg 可见其对 SREBP1 在小脑 回肠中和 SCMOL 在肝中的表达影响不 同 即显著降低 SREBP1 在小脑 回肠中的表达量 而增 加 SCMOL 在肝中的表达量 说明饲料中添加精氨酸对基 SCMOL 解释放出活性形式 胰岛素不但是调节 SREBP-lc 的主要 SREBP-lc[1].18 HMGCR 日粮营养对动物体内代谢复杂的调控机制是动物在长 素等的调控 对暴露在胰岛素中的人脂肪细胞进行研究发.56 HMGCR 3.2 日粮蛋白质营养水平对基因表达影响的研究 期进化中逐渐形成的为适应生存 尽量维持体内内环境稳态 SCMOL -. SREBP1 肝 DLY 猪 尤其三者都涉及到背肌 可能意味着两类猪种的 -.2 SREBP1 回肠 SCMOL HMGCR IDI1 和 SCMOL 这三个基因的表达量显著多于 HMGCR SREBP1 小脑 IDI1 因表达存在显著作用 3.3 组织差异对基因表达的影响 Ding[11] 报 道 利 用 Northern 杂 交 的 方 法 检 测 了 以 -.15 Newsham 为父本和以杜洛克猪为父本的猪的脂肪组织 背.38 最长肌和肝组织 发现 SREBP1 基因高表达于猪肝脏及脂. 肪组织中 且其在肝中的浓度大约是脂肪组织中的 75% 但. 在背最长肌中没有发现表达 并且发现 SREBP1 基因在两 种猪中的的脂肪组织 背最长肌和肝组织中的表达差异不显 DLY 猪是我国常用的商品杂交猪 其生长速度较快 瘦肉 著 Tontonoz 也曾报道 [12]SREBP1 主要在脂肪组织和肝中 率较高 从本试验结果来看 宁乡猪和 DLY 猪由于遗传 表达 差异所引起的脂肪代谢过程中基因的表达变化也有所差异 Breitling[13] 报道了 IDI1 基因无所不在地表达于人类和 其中猪群对 SREBP1 在皮脂中 HMGCR 在背肌中 IDI1 老鼠组织中 Clizbe[1] 也报道了此基因表达于大脑 心脏 在小脑 背肌和肝中 SCMOL 在大脑 背肌和肝中 而 骨骼肌 肾和肝组织中 且 SREBP1 基因是 DLY 猪中的表达量显著高于在宁乡猪 本试验采用荧光定量 PCR 的方法 检测了猪的大脑 中 HMGCR IDI1 和 SCMOL 这三个基因则是在宁乡猪 小脑 背肌 皮脂 回肠 肝 肾七个组织 发现 SREBP1 中的表达量显著高于在 DLY 中 本研究得到 宁乡猪中 等四个基因在所检测的七个组织中均有表达 SREBP1 基因 211

216 在肝组织中表达最高 在背肌中表达最低 这样的结果同 Proteolysis of a Membrane-Bound Transcription Factor. Ding 等的结果基本一致 其中 组织差异对此四个基因表 Cell, (3) 达的影响达到了差异显著水平 其中 SREBP1 HMGCR [6] Briggs, M.R., Yokoyama, C., Wang, X., et al. IDI1 和 SCMOL 四个基因都是肝中表达最高 其原因可能 Nuclear protein that binds sterol regulatory element of 是胆固醇和脂肪酸是肝中主要的脂质生物合成过程 转录因 low density lipoprotein receptor promoter. I. Identification 子 SREBPs 调控这两个生物合成途径 又因为肝组织是胆 of the protein and delineation of its target nucleotide 固醇合成的主要器官 而 HMGCR IDI1 和 SCMOL 这三 sequence. Journal of Biological Chemistry, (19). 个基因参与胆固醇合成过程 所以肝中此基因的表达显著高 于其它各组织 [7] Yokoyama, C., Wang, X., Briggs, M.R., et al. 3. 各组织内不同基因间的剩余效应相关分析 SREBP-1, a basic-helix-loop-helix-leucine zipper 分析结果显示 SREBP-1 基因与其它的五个靶基因间 protein that controls transcription of the low density 的 相 关 性 没 有 特 定 的 规 律 可 循 但 是 HMGCR IDI1 和 lipoprotein receptor gene. CELL-CAMBRIDGE MA-, SCMOL 三个基因在小脑 背肌 回肠和肾四个组织中的 相关较高 这一方面说明 SREBP-1 基因对其它基因的调 控 特 别 复 杂 另 一 方 面 也 进 一 步 说 明 HMGCR IDI1 和 SCMOL 三个基因与类固醇生物合成的通路的关系 显然 本实验的完成对揭示猪脂肪代谢的机制 为猪遗 [8] 施启顺, 柳小春, 李元英. 宁乡猪生长发育性状的表型和遗 传参数研究. 1985(2) [9] 杨仕柳, 朱吉, 彭英林. 日粮蛋白质水平对宁乡猪肥育性能 的影响. 湖南饲料, 27(2) 传改良 饲料配合提供理论依据 但是必须指出的是 本实 [1] Kim, J.B., Sarraf, P., Wright, M., et al. Nutritional 验的重复数较少 实验中部分样品及其数据缺失 这些问题 and insulin regulation of fatty acid synthetase and leptin 对实验结果的可靠性存在一定影响 另外 通过本实验也可 发现 脂肪代谢极其复杂 许多问题值得进一步地研究 Expression of porcine transcription factors and genes 参考文献 [1] 杜静, 张连峰, 秦川. gene expression through ADD1/SREBP p [11] Ding, S.T., Schinckel, A.P., Weber, T.E., et al. INSIG SCAP SREBP 对脂质合成 related to fatty acid metabolism in different tissues and 调控的研究进展. 中国比较医学杂志, (12) genetic populations. 2, Am Soc Animal Sci. p [2] Brown, M.S. and Goldstein, J.L. A receptor-mediated [12] Tontonoz, P., Kim, J.B., Graves, R.A., et al. ADD1: pathway for cholesterol homeostasis. Science, a novel helix-loop-helix transcription factor associated 232(76) with adipocyte determination and differentiation. [3] 李龙江, 余瑜. 脂代谢的信号转导途径. 儿科药学杂志, 25, (1) Molecular and Cellular Biology, (8) [13] Breitling, R., Laubner, D., Clizbe, D., et al. [] Shimano, H., Yahagi, N., Amemiya-Kudo, M., et Isopentenyl-diphosphate isomerases in human and mouse: al. Sterol regulatory element-binding protein-1 as a key evolutionary analysis of a mammalian gene duplication. transcription factor for nutritional induction of lipogenic Journal of molecular evolution, (3) enzyme genes. Journal of Biological Chemistry, [1] Clizbe, D.B., Owens, M.L., Masuda, K.R., et al. 27(5) [5] Brown, M.S. and Goldstein, J.L. The SREBP Pathway: Regulation Review of Cholesterol Metabolism by 212 Characterization of IDI2, a second isopentenyl diphosphate isomerase in mammals. Journal of Biological Chemistry, 27. M619222v1.

217 若干精子抗原基因在猪生殖道及成熟 精子中的 mrna 表达研究 宋成义 1 高 波 1 吴 晗 1 王霄燕 1 王升智 1 周辉云 1 陈国宏 1 毛九德 2 1 扬州大学动物科学与技术学院 扬州 美国密苏里哥伦比亚大学动物科学系 密苏里州 美国 摘 要 目的 揭示若干精子抗原基因(SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11C和SPAG11E)在梅山公母猪生殖道及成 熟精子中的mRNA时空表达规律 方法 利用RT-PCR技术分析各基因在生殖道和精子中组织表达谱 利用半 定量RT-PCR分析其在初生至15天梅山公猪睾丸中的发育性表达特性 结果 5个基因在梅山公母猪生殖道 组织中呈现不同的表达特性 其中SPAG1在睾丸中表达丰度最高 在精囊腺 前列腺 附睾体 子宫角和输卵管 呈现中等丰度表达 而在附睾尾 子宫颈和卵巢的表达信号较弱 SPAG5在睾丸中表达丰度最高 在前列腺 附 睾体和子宫颈中表达信号较弱 而SPAG6在睾丸中高丰度表达 在输卵管中呈现中等丰度表达 在子宫角的表 达信号很弱 SPAG11C在附睾体和睾丸中高水平表达 而SPAG11E则在附睾体和附睾尾中低水平表达 在成熟 精子中只有SPAG11E有mRNA表达 SPAG1 SPAG5 SPAG6和SPAG11C基因在公猪睾丸中发育性表达分析表明 总 体上所检测的个精子抗原基因的表达水平都随着日龄增加而提高 但存在一些差异 其中SPAG1和SPAG11C呈 现相似的表达规律 在初生和3日龄时表达相对较低 但在6 9 15日龄都有显著提高 P <.5 而SPAG5 在初生和3日龄时表达也相对较低 在6和9日龄时均有显著提高 P <.5 但15日龄时略有下降 但差异 不显著 SPAG6在初生和3日龄时表达水平很低 至6日龄有显著提高 P <.5 9日龄时维持这一水平 而 到15日龄时则有显著下降 P <.5 结论 SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11C和SPAG11E在梅山公母猪生 殖道组织广泛表达 在睾丸组织中其mRNA表达水平变化与性发育相一致 SPAG11E在精子中存在低丰度mRNA 表达 关键词 猪 精子抗原 生殖道 精子 时空表达 动物精子是一类高度分化的细胞 其结构和功能都十 附睾蛋白 2 Epididymal protein 2, EP2 在人 猴 大 分复杂 在顶体膜及其它组成成分中含多种精子抗原 SPAG 鼠和小鼠上 SPAG11 基因在染色体上都位于 β 防御素基 Sperm-associated antigen 这些精子抗原具有多方面的 因簇内 通过不同启动子和外显子选择性拼接机制产生 2 生物功能 包括参与精子发生 精子运动 精卵识别与结合 多种 mrna 转录子 关于其生物功能研究报道比较少 但 以及质膜融合等 揭示这些精子抗原基因的表达规律有助 认为该蛋白参与精子在生殖道中的成熟过程 且有些异构 于深入了解动物的生殖机制 SPAG1 抗原在精原细胞 精 体与 β 防御素同源较高 具有抑菌活性 可能与生殖道免 母细胞 成熟精子和附睾表皮细胞上都有表达 在睾丸中 疫有关 [9-12] 关于猪精子抗原基因的研究报道很少 本研究 其表达信号位于生殖细胞的质膜上 而在成熟精子其表达 采用 RT-PCR 方法 分析了 SPAG1 SPAG5 SPAG6 和 信号位于顶体后质膜上 SPAG1 主要参与 GTP 信号转导 SPAG11 SPAG11C 和 SPAG11E 基因在梅山公母猪生殖 通路 可能参与精子发生和受精 道组织和成熟精子中的表达特性 并分析了其在睾丸中的 [1] [2 3] SPAG5 抗原主要在 精母细胞和圆形精子细胞中表达 其羰基端含两个亮氨酸 发育性表达规律 为揭示这些精子抗原在精子发生 成熟 拉链结构 与外周致密纤维 ODF1 Outer dense fiber 1 精子运动和精卵识别等过程的生物功能提供参考 SPAG 基 蛋白的互作 且 SPAG5 与有丝分裂纺锤体蛋白有很高的同 因 mrna 在梅山猪生殖道组织和成熟精子的空间表达特性 源性 因此 SPAG5 可能参与精细胞形态构成和减数分裂过 在公猪性成熟过程中表达的动态规律 程 并可能参与精子运动调节 1 材料与方法 [ 5] SPAG6 抗原蛋白被定 位于人精子尾部 参与精子鞭毛轴丝构成 在精子运动和维 1.1 样品采集 持成熟精子结构中有重要作用 SPAG6 基因沉默小鼠表现 选取 1(n=5) 3(n=) 6(n=3) 9(n=3) 和 15(n=3) 为脑水肿 精子活力损伤和雄性不育 [6-8] SPAG11 也称为 日龄的梅山公猪共 18 头 15 日龄梅山母猪 3 头 屠宰后 213

218 采集公母猪生殖道组织 公猪包括精囊腺 前列腺 尿道球 要步骤 在.2 ml 的 PCR 管中加入 3µg 总 RNA oligo 腺 附睾头 附睾体 附睾尾和睾丸组织 母猪包括子宫颈 (dt)18 引物.5µL 加 DEPC 处理水至总体积 35 µl 7 子宫角 输卵管和卵巢组织 液氮速冻以备 RNA 提取用 孵育 5 分钟 迅速置于冰上冷却 再加入 5 Reaction 选取成年大白公猪 长白公猪 姜曲海公猪和梅山公猪 Buffer (25 mm Tris-HCl ( ph 8.3), 25 mm KCl, 各 1 头 采集新鲜精液 16 层纱布过滤 检查精子活力和 2 mm MgCl2, 5 mm DTT) 1 µl, 1 mm dntp 活率后 将精液混合 用 1:1 CXM 比利时 稀释带回 2 µl RiboLockTM Ribonuclease inhibitor (2 U/µL) 再用 1:1 CXM 稀释后 5 度置于 CO2 培养箱中 39 上游 2 µl 37 孵育 5 分钟后加入 RevrtAidTM 2U/µL 1 小时 收集 3/ 上层精子 25rpm 离心 5 分钟 弃上清 1 µl 2 孵育 6 min 最后 7 15 min 终止反应 - 收集下层沉淀 用 1 ml CXM 再悬浮一次 并转至 1.5ml 2 保存备用 指形管中 再 12rpm 离心 1 分钟 收集沉淀 液氮速冻 1.3 RT-PCR 检测分析 以备 RNA 提取用 利用 RT-PCR 分析 SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11C 1.2 总 RNA 的提取和反转录 和 SPAG11E 基因在 15 天公母猪生殖道组织和成熟精子 组织总 RNA 提取时先将冻存组织放入研钵加液氮迅速 中的表达 其中持家基因 GAPDH 为 cdna 阳性对照 在 研成粉末 转至匀浆器中 加入 1ml Trizol 匀浆后室温静 对精子的 cdna 进行 RT-PCR 检测时 由于精液中可能 置 8 min 使核酸蛋白复合物充分裂解 然后加入.2ml 氯 存在一些体细胞的污染 导致 RT-PCR 假阳性结果 选 仿混匀 离心 2 分钟 取水相并用异丙醇沉淀 最后离 取 E-Cadherin CD 和 c-kit 基 因 分 别 作 为 表 皮 细 心弃上清 用 75% 酒精洗涤 RNA 产物 离心晾干后溶解 胞 血淋巴细胞和生殖细胞的污染标记 [13] 利用在线软件 于 3µl DEPC 处理水中 精子总 RNA 提取时将冻存精子 Primer3 进行引物设计 所有基因的引物序列见表 1 25ul 加入 1 ml Trizol 用 1 ml 注射器反复吸打至溶液无明显絮 的 PCR 反 应 体 系 主 要 包 括 2.5µl 1 缓 冲 液 2.5mM 状物 室温静置 8 min 使核酸蛋白复合物充分裂解 然后加 dntp 2µl 模板 cdna 2µl rtaq DNA 聚合酶 1U 上 入.2 ml 氯仿混匀 于 下 12 rpm 离心 15 分钟 取 下游引物各 1 µl 1µM PCR 反应条件为 9 预变 上清 加入等体积的异丙醇 室温静置 3 min 于 下 性 3 min 然后 9 变性 3 s 58 复性 3 s 72 延 12 rpm 离心 3 分钟 弃上清 用 75% 酒精洗涤 RNA 产物 伸 s 35 个循环 ( 其中扩增精子 cdna 时用 个循环 ) 于 下 75 rpm 离心 5 分钟 室温晾干后溶解于 3µl 最后 72 延伸 5 min 反应产物用 1.5% 琼脂糖凝胶电泳 DEPC 处理水中 用 NanoDrop 测定总 RNA 在 26 nm 和 EB 染色 在凝胶电泳成像系统 (Kodak) 下拍照 28 nm 下的吸光度 A 值 并计算 OD26/OD28 的值以确 以 GAPDH 基因作 为内参 利用半 定量 RT-PCR 技 认 RNA 的产量和质量 用 1% 琼脂糖凝胶电泳 溴化乙啶 术分析了 SPAG1 SPAG5 SPAG6 和 SPAG11C 基因在初 EB 染色观察 RNA 的完整性 生至 15 日龄的梅山公猪睾丸中的发育性表达规律 PCR 根 据 RevertAIDTM 反 转 录 试 剂 盒 (Fermentas, 反应条件和反应体系同上 但对每个基因的 RT-PCR 扩 Ontario, Canada) 提供的使用说明合成第一链 cdna 主 增的适宜循环数分别进行优化 确保 PCR 扩增处于线性范 表 1 实验中所用基因引物序列 21 基因 Gene 正向 Forward 反向 Reverse 产物大小 (bp) Product size 基因序列号 Access number GAPDH acccagaagactgtggatgg ccccagcatcaaaggtagaa 36 AF1779 CD tggaaacctgaccttggttc agaacccagcgagaaacaga 359 NM_1198 E-Cadherin ccccatgttcgaatatccac tgctgtgacaagccatcttc 396 NM_11636 c-kit ttgttgatgacctcgtggaa atggaatctgaggccttcct 37 L7786 SPAG1 tgagcccagaaaaggagaga cctcttggcccttcctaatc 7 EU35359 SPAG5 actgacactttcccctgtgg agttgggtctgggtctcctt 3 NM_ SPAG6 gagccattgctcacttagcc atcttctggctcttccgaca 25 NM_ SPAG11C acccttctccttgtggtcct gcacagatgacaaagcctca 36 BK5522 SPAG11E ccctatggcctttagggaag cctcctgcctgcttaggttt NM_

219 图 1 SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11C 和 GAPDH 基因的扩增曲线 以 3µg 睾丸总 RNA 反转录成第一链 cdna 从低到高进行适宜循环数优化 扩增产物在 1.5% 琼脂糖凝胶电泳 紫外灯下拍 照成像 利用 Gelquant 软件进行 PCR 产物条带灰度值定量 Fig. 1 Kinetics of PCR amplification of SPAG1, SPAG5, SPAG6, SPAG11C and GAPDH cdnas Three micrograms of testis total RNA were transcribed into cdna and amplification with an increasing number of cycles. After migration on 1.5% agrose gel, the PCR products were visualized under UV light, photographed and analyzed with GelQuant software. 围内 见图 1 最终 GAPDH SPAG1 SPAG5 SPAG6 和 SPAG11C 基因的适宜循环数分别为 和 3 PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳 EB 染色成像 利用 Gelquant 软件测定每个基因的 PCR 产物条带灰度值 以 GAPDH 为参照 进行比较获得相对表达水平 1. 统计分析 采用单因素方差分析检测基因的相对表达差异 LSD 法进行不同阶段的比较 P<.5 为差异显著 与前一阶段 相比 2 结果 2.1 SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11E 和 SPAG11C 基因在 15 天梅山公母猪生殖道组织的表达 利用 RT-PCR 技术对 15 天梅山公母猪生殖道 11 个 图 2 SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11E 和 SPAG11C 基因在 15 天公母猪生殖道组织中的表达 达进行检测 结果见图 2 从图 2 可以看出 5 个基因呈现 泳道 1 精囊腺 泳道 2 前列腺 泳道 3 尿道球腺 泳道 附睾头 泳道 5 附睾体 泳道 6 附睾尾 泳道 7 睾丸 泳道 8 子宫颈 泳道 9 子宫角 泳道 1 输卵管 泳道 11 卵巢 GAPDH 为 cdna 参照 DNA 分子量标记为 DL2 不同的表达特性 其中 SPAG1 的表达分布最广泛 除了尿 在前列腺 附睾体 睾丸和子宫颈组织中表达 在睾丸中表 道球腺和附睾头外 在其它的生殖道组织都有表达 但表达 达丰度最高 在其它三个组织表达信号较弱 而 SPAG6 主 丰度存在较大差异 在睾丸中表达丰度最高 在精囊腺 前 要在睾丸 子宫角和输卵管组织中表达 在睾丸中高丰度表 列腺 附睾体 子宫角和输卵管组织呈现中等丰度表达 而 达 在输卵管中呈现中等丰度表达 在子宫角中的表达信 在附睾尾 子宫颈和卵巢中的表达信号较弱 SPAG5 主要 号很弱 SPAG11E 则在附睾体和附睾尾组织中低水平表达 组织 ( 包括精囊腺 前列腺 尿道球腺 附睾头 附睾体 附睾尾 睾丸组织 子宫颈 子宫角 输卵管和卵巢 ) 的表 215

220 而 SPAG11C 在附睾体和睾丸组织中高水平表达 其中在附 因的表达水平都随着日龄增加而增加 但存在一些差异 其 睾体的表达丰度高于睾丸 图 2 中 SPAG1 和 SPAG11C 呈现一致的表达规律 在初生和 SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11C 和 日龄时表达相对较低 但 6 日龄后都有显著提高 P <.5 SPAG11E 基因在成熟精子中的 mrna 表达 与前一日龄相比 图 A 和 D 而 SPAG5 在初生和 3 日 SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11C 和 SPAG11E 基 龄时表达也相对较低 在 6 和 9 日龄时也都有显著提高 P < 因在成熟精子中的 mrna 表达检测结果见图 3 从图 3A.5 与前一日龄相比 图 B 但 15 日龄时略有下降 中可以看出 GAPDH 在精子 cdna 样本和睾丸组织 cdna 但差异不显著 P >.5 与 9 日龄相比 图 B SPAG6 都有扩增产物 但在阴性参照中没有产物 而 E-Cadherin 在初生和 3 日龄时表达水平很低 至 6 日龄有显著提高 CD 和 c-kit 基因 分别为表皮细胞 血淋巴细胞和生殖 P <.5 与 3 日龄相比 图 C 9 日龄时维持这一水 细胞的阳性标记 在精子样本和阴性参照没有检测出产物 平 而到 15 日龄时则有显著下降 P <.5 与 9 日龄相 但在其 cdna 阳性参照有扩增产物 表明所制备的精子 比 图 C RNA 没有这些体细胞污染 可以进行目标基因表达检测 3 讨论 以上述精子 cdna 进行 SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11C 精子抗原是一类重要的功能蛋白 在调控精子发生 精 和 SPAG11E 基因的 RT-PCR 检测 结果见图 3B 从图中可 子运动 精子获能 顶体反应和精卵融合等生物过程中发 以看出 SPAG11E 在精子中存在 mrna 表达 且表达水平 挥生理作用 有些与受精和胚胎的早期发育有密切关系 目 较低 其它基因在精子中均没有 mrna 表达 ( 图 3B) 前精子抗原分离鉴定的研究报道并不多 人 SPAG1 基因 2.3 SPAG1 SPAG5 SPAG6 和 SPAG11C 基 因 的 cdna 原称 HSD-3.8 于 1992 年被克隆鉴定 [1] 该 在睾丸中的发育性表达 基因位于人的 8 号染色体上 早期的 Northern 和点杂交研 SPAG1 SPAG5 SPAG6 和 SPAG11C 基 因 mrna 究表明人和大鼠的 SPAG1 只在睾丸中表达 原位杂交显示 在公猪睾丸中发育性表达的半定量 RT-PCR 分析结果见图 SPAG1 在精子发生各阶段的生殖细胞中都有表达 表达信 总体来看 在公猪性发育中 所检测的四个精子抗原基 号在精原细胞中最强 随着生殖细胞的分化 表达信号有所 图 3 SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11E 和 SPAG11C 基因在成熟精子中 RT-PCR 检测 A 表皮细胞 血淋巴细胞和生殖细胞的阳性标记基因 E-Cadherin CD 和 c-kit 的 RT-PCR 扩增检测精子 RNA 纯度 B SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11C 和 SPAG11E 基因在成熟精子中 RT-PCR 检测 泳道 泳道 1-3 为三个独立的精子 cdna 样本 泳道 为没有反转录 cdna 阴性对照 泳道 5 为阳性对照 其中 CD 阳性对照为血液中淋巴细胞 cdna E-Cadherin 阳性对 照为精囊腺 cdna c-kit SPAG1 SPAG5 SPAG6 和 SPAG11C 阳性对照为睾丸 cdna SPAG11E 阳性对照为附睾尾 cdna 图 SPAG1 (A) SPAG5 (B) SPAG6 (C) 和 SPAG11C (D) 基因在睾丸中的发育性表达 睾丸样本来自 1(n=5) 3(n=) 6(n=3) 9(n=3) 和 15(n=3) 日龄的梅山公猪 RT-PCR 产物在 1.5% 琼脂糖凝胶上电泳分离 目标基因的 PCR 产物的信号通过定量量化后 与用同一模板扩增的 GAPDH 的产物信号相比 获得相对表达水平 图中所示 数值为平均数 ± 标准误 差异显著用星号标记 *P <.5 与前一日龄相比 216

221 减弱 [15] 其重组蛋白能致大鼠不孕或受精率显著下降 [3 16] 不断增加 [2-23] 且有研究证明精子能够携带 RNA 进入卵 表明 SPAG1 可能与精子发生和受精有关 此外 SPAG1 基 子 在胚胎早期发育中发挥作用 [2] 有些精子 RNA 与精子 因还在胰腺肿瘤发生早期表达 并能促进癌细胞运动 因此 的运动能力有关联 [25] 由于 SPAG1 SPAG5 SPAG6 和 SPAG1 基因与肿瘤发生和细胞运动有关 [17] 目前尚没有关 SPAG11 与精子运动和精子形态结构等有关 本研究分析了 于猪 SPAG1 基因的研究报道 本实验中发现 SPAG1 基 其在成熟精子中的 mrna 表达 发现 SPAG11E 在精子中 因在公母猪生殖道广泛表达 在睾丸中表达丰度最高 在前 存在 mrna 低水平表达 这种表达可能是在精子代谢过程 列腺 附睾体 子宫角和输卵管组织也有中等水平的表达 对精子中 SPAG11E 的补充 提示该基因可能还有其它的生物功能 人 SPAG5 抗原于 结论 21 年被克隆鉴定 由 112 个规定氨基酸编码 主要在睾 本 文 揭 示 了 SPAG1 SPAG5 SPAG6 SPAG11C 和 丸中高丰度表达 但在肝脏 胎盘 胰腺 胸腺和结肠中也 SPAG11E 在梅山公母猪生殖道的组织表达特性和发育性表 表达 细胞定位表明该蛋白位于有丝分裂纺锤体上 其生物 达规律 发现了在睾丸组织中其 mrna 表达水平变化与性 功能可能与有丝分裂有关 发育相一致 SPAG11E 在精子中存在低丰度 mrna 表达 [18] 而大鼠的 SPAG5 研究表明该 基因也在多个组织表达 且与 ODF1 存在相互作用 参与 参考文献 精子尾部结构构成 可能与精子运动功能有关 [5] 本实验中 [1] Kerr L E, Paterson M, Aitken R J. Molecular 发现 SPAG5 主要在睾丸中表达 在前列腺 附睾体和子宫 basis of sperm-egg interaction and the prospects 颈有微弱表达 人和小鼠的 SPAG6 基因主要在睾丸中表达 for immunocontraception. Journal of reproductive 并被定位于精子头部和鞭毛中部 表明该基因参与精子运动 immunology. 1998, : 调节 本研究表明 SPAG6 不仅在睾丸表达 在子宫角和输 卵管也有表达 且在输卵管的表达水平也较高 提示该基因 除了参与精子结构构成 调节运动外 可能还参与受精过程 SPAG11 基因存在多种转录子 其不同转录子在同一物种内 的表达存在较大差异 而同一转录子不同物种间表达也不一 样 但主要集中在生殖道表达 其中人 SPAG11E EP2E [2] Kanazawa R, Komori S, Sakata K, Tanaka H, Sawai H, Tsuji Y, Koyama K. Isolation and characterization of a human sperm antigen gene h-sp-1. International journal of andrology. 23, 26: [3] Liu N, Qiao Y, Cai C, Lin W, Zhang J, Miao S, Zong S, Koide S S, Wang L. A sperm component, HSD-3.8 (SPAG1), interacts with G-protein beta 1 subunit and 主要在睾丸 附睾 精囊腺中表达 而 SPAG11C 则在附睾 activates extracellular signal-regulated kinases (ERK). 和前列腺中表达 猕猴的 SPAG11C 基因则在睾丸 附睾 Frontiers in bioscience. 26, 11: 精囊腺和前列腺中表达 而 SPAG11E 只在附睾中表达 [9- [] Fitzgerald C J, Oko R J, van der Hoorn F A. Rat 本实验中发现猪 SPAG11E 在附睾体和附睾尾中表达 而 Spag5 associates in somatic cells with endoplasmic SPAG11C 在睾丸和附睾体中表达 与人和猕猴等的表达模 reticulum and microtubules but in spermatozoa with outer 式存在一定差异 dense fibers. Molecular reproduction and development. 11] Horowitz 等 研 究 表 明 SPAG6 基 因 mrna 表 达 与 小 鼠早期性发育相一致 在睾丸中出现粗线期精母细胞时 SPAG6 表达有显著上升 并持续到性成熟期 [19] 大鼠的 SPAG11 表达也呈现年龄依赖性 与性发育相一致 [12] 本 研究发现所检测的 SPAG1 SPAG5 SPAG6 和 SPAG11C 基因在公猪性发育中大体呈现一致的表达规律 都表现为在 早期 1-3 天 时维持较低水平 而在梅山公猪精子发生 前后 5-6 天 表达水平都有显著提高 并随着初情期 和性成熟期的到来 表达水平持续升高并维持在高水平 这 与实验动物小鼠和大鼠的表达规律相一致 这些结果提示这 些基因的表达受到性激素的调控 可能与精子发生有关 26, 73: [5] Shao X, Xue J, van der Hoorn F A. Testicular protein Spag5 has similarity to mitotic spindle protein Deepest and binds outer dense fiber protein Odf1. Molecular reproduction and development. 21, 59: 1-6. [6] Neilson L I, Schneider P A, Van Deerlin P G, Kiriakidou M, Driscoll D A, Pellegrini M C, Millinder S, Yamamoto K K, French C K, Strauss J F 3rd. cdna cloning and characterization of a human sperm antigen (SPAG6) with homology to the product of the Chlamydomonas PF16 locus. Genomics. 1999, 6: [7] Sapiro R, Kostetskii I, Olds-Clarke P, Gerton G L, 传统的观点认为 成熟精子为高度分化的细胞 其染 Radice G L, Strauss III J F. Male infertility, impaired 色质为高度包装的 没有转录活性 成熟精子内几乎不存 sperm motility, and hydrocephalus in mice deficient 在 mrna 但近 2 年来 关于精子中 RNA 存在的报道 in sperm-associated antigen 6. Molecular and cellular 217

222 biology. 22, 22: [8] Sapiro R, Tarantino L M, Velazquez F, Kiriakidou M, Hecht N B, Bucan M, Strauss J F 3rd. Sperm antigen associated antigen 1 is expressed early in pancreatic tumorigenesis and promotes motility of cancer cells. Oncogene. 27, 26: is the murine homologue of the Chlamydomonas [18] Chang MS, Huang CJ, Chen ML, Chen ST, Fan reinhardtii central apparatus protein encoded by the PF16 CC, Chu JM, Lin WC, Yang YC. Cloning and locus. Biology of reproduction. 2, 62: characterization of hmap126, a new member of mitotic [9] Fröhlich O, Po C, Murphy T, Young L G. Multiple promoter and splicing mrna variants of the epididymis- spindle-associated proteins. Biochemical and biophysical research communications. 21, 287: specific gene EP2. Journal of andrology. 2, 21: [19] Horowitz E, Zhang Z, Jones B H, Moss SB, Ho C, [1] Yamaguchi Y, Nagase T, Makita R, Fukuhara S, Tomita Wood J R, Wang X, Sammel M D, Strauss JF 3rd. T, Tominaga T, Kurihara H, Ouchi Y. Identification of Patterns of expression of sperm flagellar genes: early multiple novel epididymis-specific beta-defensin isoforms expression of genes encoding axonemal proteins during in humans and mice. Journal of immunology. 22, 169: the spermatogenic cycle and shared features of promoters of genes encoding central apparatus proteins. Molecular [11] Avellar M C, Honda L, Hamil K G, Yenugu S, human reproduction. 25, 11: Grossman G, Petrusz P, French F S, Hall S H. [2] Dadoune J P. Spermatozoal RNAs: what about their Differential expression and antibacterial activity of functions? Microscopy research and technique. 29, epididymis protein 2 isoforms in the male reproductive 72: tract of human and rhesus monkey (Macaca mulatta). Biology of reproduction. 2, 71: [21] Yang C C, Lin Y S, Hsu C C, Wu S C, Lin E C, Cheng W T. Identification and sequencing of remnant [12] Yenugu S, Hamil K G, Grossman G, Petrusz P, French messenger RNAs found in domestic swine (Sus scrofa) F S, Hall S H. Identification, cloning and functional fresh ejaculated spermatozoa. Animal reproduction science. characterization of novel sperm associated antigen 11 29, 113: (SPAG11) isoforms in the rat. Reproductive biology and endocrinology. 26, 28: -23. [13] Lambard S, Galeraud-Denis I, Martin G, Levy R, Chocat A, Carreau S.Analysis and significance of mrna Robert C. A molecular analysis of the population of mrna in bovine spermatozoa. Reproduction. 27, 133: in human ejaculated sperm from normozoospermic donors: [23] Miller D, Briggs D, Snowden H, Hamlington J, Rollinson relationship to sperm motility and capacitation. Molecular S, Lilford R, Krawetz SA. A complex population of human reproduction. 2, 1: RNAs exists in human ejaculate spermatozoa: implications [1] Zhang M L, Wang L F, Miao S Y, Koide S S. Isolation and sequencing of the cdna encoding the 75-kD human sperm protein related to infertility. Chinese medical journal. 1992, 15: [15] 张梅林 周雪峰 曹登峰 缪时英 吴燕婉 邢志军 宗书东 王琳芳 一种与不育有关的人精子蛋白质的组织特异性及表达, [22] Gilbert I, Bissonnette N, Boissonneault G, Vallée M, for understanding molecular aspects of spermiogenesis. Gene. 1999, 237: [2] Boerke A, Dieleman S J, Gadella B M. A possible role for sperm RNA in early embryo development. Theriogenology. 27, 68 Suppl 1: S [25] Lambard S, Galeraud-Denis I, Martin G, Levy R, 中国医学科学院学报, 1999, 21: Chocat A, Carreau S. Analysis and significance of mrna Zhang M L, Zhou X F, Cao D F, Miao S Y, Wang in human ejaculated sperm from normozoospermic donors: L F. Studies on tissue specificity and expression of a relationship to sperm motility and capacitation. Molecular human sperm protein's gene BSD-2.. Acta Acad. Med. human reproduction. 2, 1: Sinicae. 1999, 21: (in Chinese) [16] Lin W, Zhou X, Zhang M, Li Y, Miao S, Wang L, Zong S, Koide SS. Expression and function of the HSD3.8 gene encoding a testis-specific protein. Molecular human reproduction. 21, 7: [17] Neesse A, Gangeswaran R, Luettges J, Feakins R, Weeks ME, Lemoine NR, Crnogorac-Jurcevic T. Sperm- 218

223 聚合多样性一种联合品种内和品种间 多样性的新多样性方法. 1. 桂林美冠原种猪育种有限责任公司 中国 桂林 山东农业大学动物科技学院 山东泰安 摘 要 通常认为 品种间的遗传多样性是确定家养动物保护优先顺序的重要标准 但是 这种方法存在争议 的 他忽略了多样性的品种内组分 或许并不是最佳方法 本文认为 以遗传标记为基础来估计品种内和品种 间的遗传多样性是很相似的 因此建议线性联合品种内和品种间的多样性而定义一种新的多样性即聚合多样 性 Aggregate diversity 这就需要定义每一个品种 群体 对品种内和品种间遗传多样的贡献 因为Wright固定 指数FST表示由群体间等位基因频率不同造成的遗传变异比例 所以定义聚合多样性时 可以通过FST和1-FST 来分别权衡品种间和品种内遗传多样性的贡献 当我们以遗传提高为目标在纯种内进行选择时 使用聚合多 样性的方法是有效的 但是在实际的动物选育中 如果存在杂交 互补和对特殊环境的适应性时 就要加大品 种间多样性的权重 要针对每一种特殊的环境给予合理的权重 在品种保护的长期规划中 根据聚合多样性 和品种的灭绝概率 可以估计每一个品种超低温保存的优先顺序 以18个微卫星基因座位标记的11个欧洲猪 品种为例可以阐明这个问题 关键词 生物多样性 遗传标记 保存 1 前言 在人类长期的历史实践中 形成了现存家养动物品种的 2 品种对遗传多样性贡献的研究方法 诺亚方 舟问题 Noah s ark 多样性 据报道 公元前 5 至公元前 年 人类文明 Weitzman (1998) 把对品种保护的优先顺序比喻成诺 刚刚开始的时候 埃及就开始使用牛拉犁地的设备了 Lush 亚方舟问题 需要确定每一个品种对多样性贡献的大小 本 1956 经过几个世纪传统方法的选择创造了众多的家养动 文用品种表示群体的概念 这样品种和亚群就都可以算作品 物品种 然而 最近 越来越多卓有成效的育种措施的实施 种 我们将估算品种对 (1) 品种间多样性 (2) 品种内多样性 形成了几个专门化的品种 而那些不适应当前需要的品种数 (3) 品种间和品种内的聚合多样性 遗传多样性由数量多基 量逐渐的减少 甚至消失 Barker 22 概括描述了发 因或质量单基因 或者遗传标记的基因型 确定 可以用多 达国家和发展中国家家养动物遗传资源的历史背景并对家 方法对这两种基因座品种间和品种内遗传多样性进行评估 养动物未来的表示担忧 他认为保护家养动物应该把重点放 下面的方法就是基于遗传标记对遗传多样性进行评估 这种 在品种的保护上 方法优点是不受环境变化的影响 被认为是平均遗传多样 因此 一般认为 当确定动物保护的优先顺序时 品种 间的多样性是一个很重要的标准 但是 对此也有很多争议 有人认为品种内的多样性也是品种保护优先顺序的重要标 性 2.1 品种间的多样性 根据遗传标记对多样性进行估计时 要计算一个品种对 准 Barker 21 Caballero and Toro 22 很多文 品种间多样性的贡献 需要计算出两两品种间的遗传距离 献中广泛讨论了多样性两组分的相对重要性 在保护遗传学 以物种保护为例 Weitzman (1992, 1993) 以一组物种 S 的 中 当选择合适的保护单元进行多样性分析时 也遇到了相 两两的遗传距离为基础 定义了多样性函数 V(S) 多样性 似的问题 Weitzman 1993 指出 多样性可以在个体水平 函数 V 可以估算由特定物种灭绝引起的多样性的损失 K 品种水平 生态系统水平或其他水平上进行分析 本研究的 物种的相对损失定义为 目的是联合品种内和品种间的多样性为 聚合多样性 聚 合多样性可用来指导动物的保护 本文用 Laval 等人 2 对猪的多样性分析为例来进行说明 Vk =1 V(S/k)/V(S) (1) V(S) 是整个物种的多样性 V(S/k) 是除了物种 K 之后 的所有物种的多样性 如 Thaon d Arnoldi 等 (1998) 所 219

224 提倡的 可以将这种方法扩展用于家养动物品种多样性的研 出 一 种 更 自 然 的 联 合 CB 和 CW 的 方 式 D=FSTCB+(1 究 当设定保护程序时可用于评估濒危品种的相对重要性 FST) CW 很容易看出 当 CB 和 CW 是以 Nei 基因多样 Vk 可定义为 品种 K 对品种间多样性 CB 的贡献 因 性为基础的 则 D 与 CT( Petit 等,1998) 相同 但是 如 此可被看做是每个品种遗传贡献的尺度 这种方法已广泛 同 Piyasatian 和 Kinghorn (23) 建议的不同条件需要给 用于家养动物品种 如 牛 (Thaon d Arnoldi 等,1998; 予不同的权重 公式 3 在定义多样性时可实现上述目标 Canon 等, 21; Reist-Marti 等, 23 羊 (Barker 等, 并具有灵活性 21) 猪 (Laval 等, 2; Ollivier 等, 21, 25) 所 2. 品种保护的优先顺序 有研究都证实了品种对多样性有不同的贡献 Weitzman 1993 建议用他的多样性函数 V 并且考虑 许多学者还提出了其他计算品种间遗传多样性的方法 灭绝的危险来制定长期的动物保护方案 以每个品种在一 Petit 等 (1998) 提出利用基因多样性的概念 (Nei, 1973) 计 定时间内灭绝概率为基础 可以定义一个期望多样性函数 E 算品种间多样性的贡献 需要注意的是这种方法是以变量为 V 在定义中假设灭绝 - 存活模型变化按给定的方式进行 基础 品种可能对多样性产生负的贡献 (Thaon d Arnoldi 并且假设这些事件是独立发生的 给定品种的品种间边际 等,1998) Eding 等 提出了以共祖率为基础的计算品种 多样性 MB 是品种间期望多样性 E V 的负偏导数 间多样性的方法 (Eding and Meuwissen, 21; Caballero 它与品种灭绝概率有关 相同的 品种内的边际多样性 E and Toro, 22) 这种方法也可能产生负贡献 相反 公 H 是品种内期望多样性的负偏导数 通过联合每个品种 式 1 函数 V 有明显的优点 也就是说 当减去一个品种时 的边际多样性 MB 和 MW 可以得到聚合边际多样性 MA 总的多样性不会增加 Weitzman 还提出一个有用的参数叫多样性弹性或保护 2.2 品种内多样性 的潜力 定义为灭绝概率每减少一个百分点期望多样性 E 遗传标记也可以用来评估品种内的多样性 期望杂合度 V 变化的百分数 因为 MB 与品种的灭绝概率是恒定的 一般被作为变异性的尺度 Petit 等. 1998) 和 Caballero 所以要使一个品种更安全可以增加品种的 E(V) 在家养动 and Toro 22) 用品种内的平均期望杂合度作为品种 物中 超低温保存是可以做到的 因此可以假设灭绝的概率 内的多样性函数 可以定义任何品种 K 对品种内多样性的 可设为零 参照 Weitzman 的保护潜力可以定义每一个品种 贡献 的超低温保护潜力 这样我们就可以确定品种的超低温保存 Hk 1 H S/K /H(S) (2) H(S) 是 整 个 组 合 S 中 的 平 均 内 部 杂 合 度 H S/K 的优先顺序 Ollivier 1998 这里同样可以品种间 品种 内聚合多样性为基础来定义保护的优先顺序 是整个组合中除了品种 K 外的平均杂合度 Hk 是品种 K 对 通过定义可知 由公式 2 定义的贡献之和超过了品 品种内多样性的贡献 由定义知 所有的贡献累计等于 种 而以 Weitzman 的 V 函数为基础的公式 1 则不会超 2.3 聚合多样性 过品种 当品种数量特别多的时候 要获得品种的边际多样 Petit 等 (1998) 提出了通过传统的基因多样性参数 性需要进行大量的计算 下面是一个简化的公式 如果品 来 计 算 每 个 群 体 对 总 的 多 样 性 (CT) 的 贡 献 CT 的 贡 献 种对多样性的贡献是增加的 就可以应用 对任意多样性 由群体内多样性 (CS) 和群体间多样性 (CD) 两部分组成 V 期望多样性 E V 可以表示成任何品种灭绝概率 PK CT=CS+CD Caballero and Toro (22) 基于共祖率 提 的函数 例如 E(V)= PkE(V breed k extinct)+(1 Pk) 出了相同的方法 显示以总的多样性为基础的排名不同于以 E(V breed k safe). 然 后 MBk= (V)/ Pk=E(V breed 品种间多样性为基础的排名 反对只考虑品种间多样性的排 k safe) E(V breed k extinct). 当增加品种对多样性的 名 贡献 E(V breed k safe) E(V breed k extinct)=cbk 在 Petit (1998) 和 Caballero and Toro (22) 的方法 因此 MBk=CBk MBs 与 CBs 相等与灭绝概率无关 同样 中 品种间多样性品种内多样性与总的多样性有关 可考虑 CPs 可通过 CPk=CBkPk 得出 在大多数情况下 品种贡 到多样性的通用性 表示品种间和品种内多样性分别对总的 献率的可加性在大的设定的品种中是被接受的 MB 和 CP 品种间和平均品种内多样性的贡献 Ollivier 等 2 将 可以从品种的贡献中很容易的推出来 这些可以通过软件来 聚合多样性定义为 CB 和 CW 相关贡献的线性组合 实现 (Derban et al., 22) D=αCB+βCW 3 3 应用 因 为 Wright 的 FST 与 Nei 的 GST 相 同 代 表 由 亚 猪的微卫星数据可以帮助我们阐明之前所描述的方 群之间等位基因频率不同引起的遗传变异的比例 可以得 法 以 18 个微卫星标记为基础来计算 11 个欧洲猪品种的 22

225 多样性 Laval 等 2 能够估算出由于每个品种的灭 杂和度造成的 (r=.66) 整体多样性 GD 与聚合多样性 绝导致的多样性的缺失 这些品种对品种间多样性的贡 D1. 呈显著的正相关 如之前所说的 这正是我们所期望的 献列在表 1 中 显示不同品种对品种间多样性的贡献不 因为两种方法给予品种间和品种内组分相同的权重 实际上 同 从 Belgian Pie train 的 3.82% 到 French Basque 的 GD 和 D1 的贡献只是品种间组分不同 因为 GD 中 CW 与 15.15% 表 1 还显示了相同的品种对品种内多样性的贡 品种内组分相关性期望是 1 而 CB 和 GD 的品种间组分有 献 这是由公式 2 计算出的 表 1 中还显示了由公式 3 计 非常显著的相关 (r=.91) 算出的两组聚合多样性的贡献 其中品种间多样性和品种 为推导出边际多样性和保护的优先顺序 灭绝的概率 内多样性分别由公式 1 和公式 2 得出 我们根据两组不同 假定如表 3 所示 给定的数据显示了国际品种 (LR, LW, 的系数来估算 11 个品种的多样性 根据 FST 的值是.27 and PI) 和野猪的灭绝概率很低 相比较 地方猪 (BA, 得 出 函 数 D1=.27CB+.73CW Laval et al. 2) GA, LI, NO, SH, and SO) 有相当大的灭绝危险 精确 依据建议品种间的权重是品种内权重的 5 倍得出函数 的计算品种间的边际多样性显示与品种的贡献 (CB) 非常接 D2=.83CB+.17CW (Piyasatian and Kinghorn, 23, 近 两者的相关系数达到了.987 这说明 了 Weitzman p. 1) 表 1 还给出了这些数据的整体多样性 Caballero 品种贡献的可加性的假设在特殊的例子中是正确的 与边际 and Toro (22) 在表 2 中给出了 5 种多样性的相关系数 多样性相反 超低温保存的优先顺序主要依靠假定的灭绝概 以表 1 的数据为基础的保护优先顺序与 CB 和 CW 的 相对重要性有关 如表 2 显示 CB 的贡献与 GD D1 呈弱 的相关 这是由于相对大的 CB 的贡献与相对小的品种内的 率 CP 最高的是 FRNO 而不是 MB 最高的的 FRBA 讨论和结论 应用实例证明 保护的优先顺序取决于品种间和品种 表 1 11 个欧洲猪品种的遗传多样性 (data of Laval et al., 2) Breed CB CW D1 D2 GD BEPI DKSO FRBA FRGA FRLI FRNO DELR DESH NLLW SELR SEWP Total 黑体 优先顺序最先 斜体 优先顺序最后 CB: 以 Weitzman (1992) 的多样性函数为基础的品种间多样性的贡献 平均超过 Reynolds and Nei 的标准距离 (from Table 6 of Laval et al., 2) CW: 以品种对平均的品种期望杂和度的贡献为基础的品种内多样性的贡献 (from Table 3 of Laval et al., 2) D1=.27 CB+.73 CW; D2=.83 CB+.17 CW. GD: Caballero 和 Toro 的总的多样性 global diversity of Caballero and Toro 22, after correction of their Table 5 for DESH). 品种代码 BEPI Belgian Pie'train, DKSO Danish Sortbroget, FRBA French Basque, French Gascon, FRLI French Limousin, FRNO French Normand, DELR German Landrace, DESH German Schwa bisch-ha llisches Schwein, NLLW Dutch Large White, SELR Swedish Landrace, SEWP Polish wild pig (provided by Sweden). 221

226 表 2 各种多样性的相关系数 CB CW D1 CW.663* D * D2.997*.63*.21 GD *.928* 的 相当于一个包含所有品种的混合群体 但是 当前的杂 D2 交系统中 品种间多样性在杂交优势和互补优势中起到更重 要的作用 例如 在一组近交系中 品种间和品种内的遗传 变异的比例是 2F;1 F 这个比例是在混合群中的两倍 因 为近交系数 F 和 FST 相等 是品系间的平均距离 因此 当以选择提高为目的来创造一个混合群体时 品种间的变异.57 应给予更大的权重 更一般的 为了能够快速适应市场的变 化 或者适应特殊的环境 还需要维持互相独立且各具特色 CB CW D1, D2, 和 GD 的数据在表 1 种给出 * 极显著 ( P<.1) 的品系 品种的内部多样性和品种分化的相互关系是很难预测 表 3 品种间的边际多样性和保护潜力 (%) 的 需要在不同的条件下进行检验 Barker (21) 重新分 Breeda Pr (ext) MB (exact) MB (approx.) CP BEPI DKSO FRBA AFLP 为基础的多样性中 两种组分多样性呈现弱的相关 FRGA 而微卫星中不同 (Ollivier et al., 21, 25) 这可能是 FRLI 由于不同的标记覆盖不同的基因组区域 或者是由于通过选 FRNO 择导致的 DELR 以遗传标记为基础的遗传多样性的普查现在已经在大 DESH 多数家养动物中实施 因为基因与相临的中性标记相连 NLLW 锁 因此 中性遗传标记丰富的多样性与基因变异增加有 SELR 关 (see for instance Bataillon et al., 1996) 因此 Petit SEWP Total 黑体 优先顺序最先 斜体 优先顺序最后 Pr(ext): 灭绝概率 MB (exact) 以 Weitzman 多样性函数 为基础的品种间边际多样性 MB (approx.): 品种间的边际多样性假定与以 Reynolds 距离 与表 1 中的 CB 稍微有点不同 以平均 Reynolds 和 Nei 距离为基础 为基础的 CB 相等 CP 以精确的 MB 为基础的超低温保护潜力 析了圆形 Morocco 树的例子 (Petit et al., 1998) 结果与 本文中的例子相反 显示 Weitzman 多样性与品种内多样性 没有显著的相关 欧洲猪品种的例子也说明 在同工酶和 et al. (1998) 和 Barker (21, 22) 提倡. 以 Nei 氏 基因多样性和等位基因丰度为基础的多样性都可以用来确 定保护的优先顺序 有趣的是 在 Petit et al. (1998) 的圆 形 Morocco 树的例子中 以等位基因丰度估计的分化水平 (.5) 比基因多样性估计的分化水平 (.18) 高 在 Ollivier et al. (21) 的数据中 总的和品种内每个基因座位的平 均等位基因数目分别是 1.6 和.6, 也表明在等位基因 丰度上有相当大的不同 另外 等位基因丰度的 FST 在 微卫星高于同工酶 Ollivier et al. (21) 这说明公式 内多样性的相对重要性和他们之间的相互关系 在动物 3 在定义聚合多样性时系数 α 比 FST 高是正确的 但是 生产中 品种内和品种间的遗传变异起到重要作用 品 Caballero and Toro (22) 认为最大的遗传多样性也应该 种间和品种内遗传变异的特性有很大的不同 (summarized 有最大的等位基因丰度 by Ollivier, 1996) 比 如 说 评 估 他 们 的 方 法 显 著 不 同 另外 如 Thaond Arnoldi et al. (1998) 提倡的 通 (e.g. heritabilities vs. crossbreeding parameters) 在 过遗传距离可以推出多样性函数 如公式 1 定义 Weitzman 动 物 育 种 应 用 中 有 区 别 (e.g. breed improvement vs. 方法的特点是品种的贡献为正 Petit et al. (1998) 基于变 crossbreeding systems) 在 动 物 长 期 的 演 化 中 的 作 用 不 异的多样性就没有这个特性 Eding and Meuwissen (21) 同 (e.g. gradual change vs. abrupt change in case of 和 C aballero and Toro (22). 的基于亲缘关系多样性 breed extinction) 和在动物管理中显著不同 (e.g. mating 也没有这个特性 如果多样性函数不是遗以传距离而是以 rules vs. breed preservation) 因此 需要认真考虑多样 品种等位基因的相似性为基础 也可以有 Weitzman 多样 性每一个组分的作用 在表 1 中定义的 GD 和 D1 代表总的 性的特征 我们应该注意 虽然在我们的实例中 Weitzman 基因多样性 这种多样性是通过品种以相同的比例混合构成 多样性方法在群体间水平上应用 但是通过利用个体间的 222

227 遗传距离也可以延伸到个体 或品种内 水平 例如 几 经被质疑 (Lynch et al., 1999; Pfrender et al., 2) 位学者就提出了以标记为基础的遗传距离或者亲缘关系 Ollivier (1998b) 还指出 当评估动物在相当长时期内 (Chevalet, 198; Lynch and Ritland, 1999; Eding and 的多样性时 还会遇到更多的困难 预测动物多样性是很困 Meuwissen, 21; Caballero and Toro, 22) 难的 因为这需要我们首先对现存品种受危害程度进行精确 总之 需要强调的是品种间的遗传距离只是给动物保 的估计 (Gandini et al., 2) 我们还假设 不同的品种 护策略提供了最基本的指导意见 要想更有效的进行保 和品系保持不同 就是说 他们之间的距离和内部的多样性 护 还需要更多具体的特性来进行完善 如 Piyasatian 和 在一定时期内不变 假设只有遗传漂变 用给定时期内的期 Kinghorn (23) 阐述的 我们要在遗传多样性和可预测的 望值代替现在的遗传距离和杂和度 就可以估算出品种间和 遗传优点之间寻找一个平衡 在定义多样性时 应根据是否 品种内的边际多样性 遗传漂变使群体间遗传距离趋向于增 优先考虑其遗传提高 品种的比较评估 濒危品种的保护而 加 使群体内的变异趋向于减小 对总的多样性的作用是有 给予不同的合适权重 (Barker, 22) 当利用标记的多样性 限的 在任何情况下 要想制定一个有效的保护方案 都需 时 暗含了一个假设即群体间和群体内分子和数量性状的变 要对动物遗传资源的持续监测 异相关性是一样的 这个假定在自然群体的适合度性状中已 参考文献略 223

228 母猪后肢形态学评定的复合育种值 估计与应用 刘顺德 1 李娜 1 刘孟洲 2 滚双宝 2 雷赵民 2 1. 宁夏大学农学院 宁夏 银川 甘肃农业大学动物科技学院 甘肃 兰州 737 摘 要 母猪后肢的结实程度和形态学结构影响母猪的使用年限 本研究利用母猪后肢作为形态学评定材料 附照片 采用5分制标准评定母猪后肢的健壮程度 根据被评定母猪母亲 本身 半同胞姐妹和全同胞姐妹 的性能评定资料 制定了后肢形态学复合育种值计算方法 利用宁夏某猪场头母猪及其各种亲属的后肢评定 材料 计算了的复合育种值 旨在为母猪后肢选种选配提供理论和实践依据 关键词 形态学 后肢 复合育种值 母猪 健壮协调的体型是种猪重要的经济特性和遗传特性 为 方法 供广大养猪 育种工作者和养猪企业在选种育种过程 了让母猪发挥最大生产价值和种用价值 最大限度地延长其 中参考 生产寿命 就可以提高终身的生产成绩 因此 健壮协调的 1 后肢是完成这些目标的基础和前提 种猪生产的实践表明 1.1 材料 母猪因腿部软弱造成的意外淘汰是母猪群大量更替的重要 原因 [1-3] 在种猪生产和选种实践中 对于那些达不到最低体型要 求的青年种猪 应在选种过程中严格地进行淘汰 如果一个 材料与方法 以宁夏银川某万头猪场 6 头生产母猪 育成和后备猪 为形态学评定材料 后肢评分选种的年龄为 6 月龄 12 月 龄 初产 和 36 月龄 3 周岁 1.2 后肢形态学评分方法 猪群中保留大量体型不合格的种用个体 这个猪群的总体生 后肢形态评定有四个要点 [] 产寿命就不长 每年因肢蹄等体格损症造成的母猪淘汰率一 一是从后向前看 后肢间距要宽 腿要正 直 定就高 渐进性造成的经济损失一定是巨大的 例如 培养 二是从侧面看 飞节角度要小 不能出现曲飞节 软系 1 头 1 月龄左右的母猪 需要消耗 7kg 左右的饲料和相 应的各项费用 目前 大多数育种程序都对选种后代进行表型值观察 按照观察与分析结果 将不能满足特定体型标准的个体淘汰 掉 这种根据体型性状进行独立淘汰的选种方法 可能会影 响其它遗传性状的育种进展 但这样做是维持种猪群健康与 卧系球突等损症 三是整体观察 后肢要粗壮 向下延伸渐细 至蹄末端 均发育良好 四是个体后肢评分从 1 分到 5 分 1 分代表很差 5 分 代表优秀 可参照图 1 和图 2 进行评分 1.3 复合育种值计算 有良好的种用价值 至少对维持猪群的种用寿命延续来说 复合育种值计算公式 群体延续必不可少的人工选择方法 没有健康的体格 就没 这种做法是正确的 复合育种值计算公式为 近年来 我们一直针对几个形态学性状进行标准化体型 评分 这种评分体系为遗传分析提供了非常有价值的数据资 Ax 表示 X 个体的复合育种值 分别表示母亲 本身 半同胞姐妹 源 通过对这些性状的遗传力估计 计算它们的方差分量 进一步计算体型性状的育种值 进行体型性状的遗传选育 全同胞姐妹的遗传力 分别表示母亲 本身 半同胞姐妹 从而提高了某场种猪群整体的体型育种精确性 在实践中收 到了良好的效果 使该场生产母猪群因肢蹄问题淘汰的比例 大幅度下降 使种母猪的种用价值 生产价值和经济价值都 得到显著提高 本文旨在提供母猪后肢形态学评定方法和育种值计算 22 全同胞姐妹的评分值 分别表示母亲 本身 半同胞姐妹 全同胞姐妹的平均评分值 表示群体平均评分值

229 图 1 从后向前观察后肢参考评分图 图 2 侧面观察后肢参考评分图 统计结果见表 1 试计算该场 1- 号母猪后肢形态学评分的 亲属遗传力参数计算 母亲不同记录次数遗传力参数计算公式为 育种值 育种值计算 按照公式 公式 1 中 为母亲不同记录次数的遗传力参数 n 计算 1- 号母猪后肢形态学评分的育种值计算结果如下 为记录次数 h 为遗传力 为重复力 2 A1= =3.985 A2= =3.963 本身不同记录次数遗传力计算公式为 2 A3= =3.927 A= =3.976 公式 2 中 为本身不同记录次数的遗传力参数 n 均值 并且不等于表型值 按个体育种值选种 可以有效地 为本身记录次数 h2 为遗传力 为重复力 半 同 胞 不 同 头 数 遗 传 力 参 数 计 算 公 式 为 为半同胞不同头数遗传力参数 n 为半 3 讨论 由于母猪后肢形态学评分属于低遗传力与高重复力性 同胞头数 h 为遗传力 2 全同胞姐妹不同头数遗传力参数计算公式为 状 h2<.2,re>.5 因此 通过复合育种值来预测种猪 形态学方面的种用价值 不但可以使种猪的后肢形态学结构 公式 中 利用各种亲属的性能信息 将精确选择出育种值高的个体而 不是表型值高的个体种用 3 公式 3 中 从计算结果可以看出 1- 号母猪的育种值均高于群体 为全同胞姐妹不同头数遗传力参数 n 获得准确切实的遗传改良 而且可以全面利用已有的 易获 2 为全同胞头数 h 为遗传力 得的群体遗传信息 并在确定个体体型选种指数的制定过程 后肢形态学评分遗传参数 中 既考虑个体本身性状的表型测定值 又可以充分照顾到 经 3 年对该群体后肢形态学评定 后肢评分的估计遗传 该个体的近亲个体的性状表现 使选种的准确性 精确性和 可靠性提高 力为 6% 重复力为 55% 即 h =.6 re=.55 2 考虑到目前绝大多数种猪场不具备分子育种条件 但有 2 应用实例 对宁夏银川某万头猪场生产母猪 育成和后备猪后肢形 PC 机或猪场管理软件的实际 这种方法可运用于一般猪场 态学评定结果表明 后肢评分的群体平均值 3.8 h =.6 进行方便 可视 直观 可靠 稳妥的体型育种与选种工作 re=.55 母猪本身及其亲属 年后肢形态学评分 实践 2 表 年被评定母猪及其亲属后肢形态学评分统计表 个体 号 母 亲 本 身 半同胞姐妹 全同胞姐妹 后肢平均得分 评定次数 后肢平均得分 评定次数 后肢平均得分 评定次数 后肢平均得分 评定次数

230 通过后肢形态学选种方法的演示 我们可以采用常规的 数量遗传学方法 有效地利用群体的各种遗传信息改良形态 学性状 使种猪后肢体型结构与健壮程度获得较好的遗传进 展 进一步提高猪育种的遗传与生产效益 参考文献 [1] Serenius,T.,Sevon-Aimónen, M.L., Kause,A., Mäntysaari,E.A., Mäki-Tanila,A.Gene-tic associations of prolificacy with performance,carcass,meat quality,and leg conformation traits in the Finnish Landrace and Large White populations[j].j. Anim.Sci.,2,82: [2] Serenius,T.,Stalder,K.J.Selection for sow longevity[j]. J.Anim.Sci.,26,8: E166-E171. [3] Tarrés,J.,Bidanel,J.P.,Hofer,A.,Ducrocq,V.An alysis of longevity and exterior traits on Large White sows in Switzerland[J].J.Anim.Sci.26,8: [] 李 学 伟, 朱 砺, 杨 光 希. 种 猪 的 外 貌 评 定 [J]. 猪 业 科 学,26,:

231 OB 基因对安徽四个地方品种猪产仔 性能的影响 1 王中才 2 严 燕 1 张陈华 1 王 阳 1 丁月云 1 殷宗俊① (1 安徽农业大学动物科技学院 合肥 安徽省畜牧推广总站 合肥 2336) 摘 要 本试验采用PCR-SSCP技术检测了安徽四个地方品种猪 安庆六白猪 皖南黑猪 皖南花猪 定远黑猪 OB基因第2 3外显子的多态性 同时研究该基因对安徽四个地方品种猪产仔性能的效应 试验结果 1 经检 测 安徽四个地方品种猪的OB基因外显子2上没有检测到多态性突变位点 而在外显子3上两对引物的扩增片 段均存在多态性突变位点 经克隆测序分析发现 外显子3在369bp处存在T C突变 在371bp处存在G T突 变 但这两突变位点均属于同义突变 2 T369C突变位点上检测到AA AB BB三种基因型 其中 等位基因A 基因频率分别为 G371T突变位点上检测到CC CD DD三种基因型 其中 等位 基因C频率分别为 A C等位基因占主导地位 3 最小二乘分析表明 T369C 和G371T位点三种基因型对四个地方品种猪在头胎产活仔数和经产产活仔数上的效应均为BB>AB>AA DD>CD>CC 关键词 OB基因; PCR-SSCP; 猪; 产仔性能 本试验以安徽四个地方品种猪 安庆六白猪 皖南黑 因型频率的差异显著性检验 χ2 独立性检验 基因杂合度 猪 皖南花猪 定远黑猪 为试验材料 采用聚合酶链反应 - 有效等位基因数 多态信息含量进行计算 单 链 构 象 多 态 性 Polymerase Chain Reaction-Single 1. OB 基因效应的统计分析 Strand Conformation Polymorphism PCR-SSCP 方法 根据影响性状的因素 采用以下固定模型 [2] Уijkl 对安徽四个地方品种猪 OB 基因进行单核苷酸多态性 Single μ+bi+sj+pk+eijkl 其中 Уijkl 为性状观察值 μ 为总体 Nucleotide Polymorphism, SNP 检测 并结合产仔性状 均值 Bi 为品种效应 Sj 为基因型效应 Pk 为胎次效应 进行关联分析 本试验旨在寻找与安徽地方猪产仔性能相关 eijkl 为随机残差效应 采用 SPSS13. 统计分析软件 GLM 的遗传标记 为安徽地方猪的种质特性研究奠定基础 并为 过程对本试验不同 OB 基因型与部分产仔性能的相关性进行 中国地方猪的分子遗传多样性研究和标记辅助选择提供科 分析 学依据 PCR-SSCP 结果 材料与方法 1.1 试验材料 结果与分析 对安徽四个地方品种猪的 PCR 扩增条带进行 SSCP 分 本试验共采集 213 头安徽四个地方品种母猪的耳组织进 析 发现四个品种在引物 1 扩增片段检测中上均无多态性 行试验 并统计对应个体的第 1 5 胎的产活仔数记录 经 而在引物 2 扩增片段检测中存在三种基因型 分别定义为 产指 2 5 胎的平均产活仔数 试验猪只包括 安庆六白 AA 型 AB 型和 BB 型 另外在引物 3 扩增片段检测中也 猪 3 头 来源于安庆六白猪保种场 皖南黑猪 51 头 来自 存在三种基因型 分别定义为 CC 型 CD 型和 DD 型 宁国市凤形农林开发公司种猪场 皖南花猪 55 头 来源于 2.2 测序结果 黟县皖南花猪保种场 定远黑猪 73 头 来源于定远县种畜场 1.2 DNA 多态性的检测 将测序结果与猪 OB 基因 DNA 序列 GenBank 登录 号为 U6625 进行比对 结果显示 在外显子 2 上无突变 采 用 常 规 方 法 进 行 DNA 多 态 性 检 测 即 耳 组 织 样 外显子 3 上 在 369 位点上存在 T C 的差异 从而形成 采集 基因组 DNA 提取 多态性引物筛选 PCR 扩增 两个等位基因 A 和 B 表现为三种带型 在 371 位点上存 PCR-SSCP 银染显带 在 G T 的差异 从而形成两个等位基因 C 和 D 表现为 1.3 试验群体中 OB 基因的动力学分析 三种带型 参照文献 [1] 对基因频率 基因型频率 基因频率和基 2.3 群体遗传学分析 227

232 在四个猪的群体中 均检测到六种基因型 其中等位 南花猪和定远黑猪中 DD 型在经产产活仔数上显著高于 基因 A 频率分别为 等 CD 型 P <.5 而极显著高于 CC 型 P <.1 而 CD 位 基 因 C 频 率 分 别 为 型也显著高于 CC 型 P <.5 因此 从表 5 中也可以得 等位基因 A C 占主导地位 经 χ2 适合性检验表明 在 出 等位基因 B D 为优势基因 尤其是 BB DD 纯合型 T369C 和 G371T 多态位点上四个品种猪基因频率和基因 对猪的经产产活仔数遗传效应最大 型频率均处于 Hardy-Weinberg 平衡状态 P >.5 这 3 可能是由于该群体在适应性方面具有遗传优势 并经过长期 讨论 OB 基因在机体内存在广泛的生理作用 不仅对人类的 进化和选择达到了平衡状态 除安庆六白猪在 G371T 多态 许多疾病有影响 还对动物的许多重要经济性状都有影响 位点的基因杂合度和有效等位基因数为 外 通过大量实验已证明 OB 基因表达产物 Leptin 可调节动物 其他三个品种猪在这两个多态位点上的基因杂合度和有效 生殖功能 Zamorano[3] 研究表明 在雌性小鼠下丘脑 垂 等位基因数都在 以上 多态信息含量均大于.33 体 性腺各部位均发现有 Leptin 受体 Leptin 可与下丘脑 - 均属中度多态 因此该试验结果可作为有效的遗传标记用于 垂体 - 性腺轴各部位上受体结合而调控生殖活动 也可与 该群体遗传资源评价的建议性指标 生殖轴上任一部位上 Leptin 受体结合实现其生殖调控的作 2. 安徽四个地方品种猪 OB 基因多态性与产仔性能 用 研究还发现 外源性 Leptin 能够促进雌性动物输卵管 的相关分析 上皮和子宫内膜的增生发育 从而使输卵管 卵巢和子宫的 1 在 T369C 位点三种基因型间 BB AB 型安庆六 重量增加 血清中黄体生成素 LH 水平增高 这些均说 白猪的头胎产活仔数极显著高于 AA 型 P <.1 而 BB 明 Leptin 可促进雌性动物生殖器官的发育成熟 为受精卵 型头胎产活仔数高于 AB 型 但差异不显著 P >.5 在 的着床 胚胎的发育奠定了良好的基础 另外 猪的 OB 基 皖南黑猪和皖南花猪中 BB 型头胎产活仔数显著高于 AA 因定位于 18 号染色体上 目前在该染色体已定位的与生殖 型 P <.5 其 他 均 未 达 到 差 异 显 著 水 平 P >.5 有关的基因为神经肽 Y NPY 基因 18q2 NPY 基因 但 呈 现 BB>AB>AA 趋 势 定 远 黑 猪 中 三 种 基 因 型 对 的表达产物是 NPY 它能增强促性腺激素释放激素 GnRH 头胎产活仔数的效应均未达到差异显著水平 P >.5 引起的 LH 释放 从而影响繁殖性状 [] OB 基因的表达 但 呈 现 BB>AB>AA 趋 势 在 G371T 位 点 三 种 基 因 型 产物 Leptin 可激发或降低下丘脑 NPY 的表达 从而调节 间 安庆六白猪和皖南花猪在头胎产活仔数上差异不显著 生殖激素的分泌 [5,6] 用 DNAstar 软件分析发现 OB 基因 P >.5 但呈现 DD>CD>CC 趋势 皖南黑猪中 基因 T369C G371T 位点分别发生 T C G T 突变 使 型 DD CD 头胎产活仔数显著高于 CC 型 (P <.5) DD 密码子 GUU 变为 GUC GCG 变为 GCU 前者均编码的 型高于 CD 但差异不显著 P >.5 定远黑猪中 基因 氨基酸为 Val 后者编码的氨基酸均是 Ala 因此 这两位 型 DD 头胎产活仔数显著高于 CC P <.5 其他均未达 点发生的突变均为同义突变 这与 Jiang[7] 的报道一致 以 到差异显著水平 P >.5 等位基因 B D 为优势基因 往的研究认为同义突变不能改变其编码的氨基酸序列 因而 尤其是 BB DD 纯合型对猪的头胎产活仔数遗传效应最大 不影响蛋白质的活性 但据 Kimchi-Sarfaty 等 [8] 研究发现 2 在 T369C 位点三种基因型间 BB AB 型安庆六白 虽然同义突变不改变氨基酸的组成 但改变了 mrna 的碱 猪的经产产活仔数极显著高于 AA 型 P <.1 而 BB 型 基顺序 有可能影响 mrna 本身的翻译速度和寿命 进而 平均经产产仔数高于 AB 型 但差异不显著 P >.5 改变这种蛋白质的表达量 甚至还可能会改变蛋白质的空间 在 皖 南 黑 猪 中 BB 型 经 产 产 活 仔 数 极 显 著 高 于 AA 型 结构 或者也可能通过影响 5 端调节区或 3 端非翻译区 P <.1 其 他 均 未 达 到 差 异 显 著 水 平 P >.5 但 来影响瘦蛋白的浓度 从而影响猪的繁殖 因此 OB 基因 呈 现 出 BB>AB>AA 趋 势 皖 南 花 猪 和 定 远 黑 猪 中 三 T369C 位点和 G371T 位点处的 T/C G/T 替换是否是 种基因型对经产产活仔数的效应均未达到差异显著水平 导致 OB 基因的表达效率发生改变 从而引起了 Leptin 量 P >.5 但 呈 现 BB>AB>AA 趋 势 在 G371T 位 点 的变化 进而间接对生殖激素 如 LH 促卵泡素 FSH 三种基因型间 安庆六白猪中 DD 型头胎产仔数显著高于 产生影响 并进一步影响排卵数 最终表现为产仔数的差异 CC 型 P <.5 其他均未达到差异显著水平 P >.5 等这一系列问题 将是下一阶段研究的重点 但呈现出 DD>CD>CC 趋势 皖南黑猪中 DD CD 型的 结论 经产产活仔数显著高于 CC 型 P <.5 其他均未达到差 本试验采用 PCR-SSCP 方法检测了安徽四个地方品种 异显著水平 P >.5 但呈现出 DD>CD>CC 趋势 皖 猪 安庆六白猪 皖南黑猪 皖南花猪 定远黑猪 OB 基 228

233 因第 2 3 外显子的多态性 同时研究了该基因对安徽四个 a1. The effect of the polymorphism of Leptin (LEP), 地方品种猪产仔性能的效应 发现安徽四个地方品种猪在 Leptin receptor (LEPR ) and osteopontin (OPN ) genes on OB 基因外显子 2 上没有检测到突变 而在外显子 3 上两对 selected reproduction traits of synthetic Line 99 sows[j]. 引物的扩增片段均存在多态突变位点 且表现出了丰富的多 Animal Science Papers and Reports,22,2: 态性 其多态性对安徽四个地方品种猪的产仔性能具有显著 [5] Chen C C, Chang T, Su H Y. Genetic polymorphismsin 的影响 这为寻找影响猪产仔数的标记基因座 为应用标记 porcine Leptin gene and their association with 辅助选择培育高繁殖率猪的品种或品系提供了基础数据 并 reproduction and production traits[j]. Australian Journal 为科研工作者的研究奠定了基础 of Agricultural Research,2,55: 参考文献 [1] 陈宏权, 王治华, 殷宗俊. 动物遗传学 [M]. 北京 : 中国农业 大学出版社,22: [2] 张 沅, 张 勤. 畜禽育种中的线性模型 [M]. 北京 : 北京农业 大学出版社,1993: [3] Zamorano P L, Mahesh V B, Sevilla L D, et al. Expression and localization of the Leptin receptor in endocrine and neuroendocrine tissues of the rat[j]. Neuroendocrinology, 1997,65(3): [] Korwin-Kossakowska A, Kamyczek M, Cieslak D, et [6] Terman A. Effect of the polymorphism of prolactin receptor(prlr ) and Leptin (LEP) genes on litter size in Polish pigs[j]. Journal of Animal Breeding and Genetics,25,122(6):-. [7] Jiang Z H, Gibson J P. Genetic polymorphism in the Leptin gene and their association with fatness in four pig breeds[j]. Mammalian Genome,1999,1(2): [8] Kimchi-Sarfaty C, Oh J M, Kim I W,et al. A Silent polymorphism in the MDR1 gene changes substrate specificity[j]. Science,27,315(5811):

234 圩猪 H-FABP 基因多态性分析及其与 IMF 含量的相关性 张陈华 1 王 阳 1 丁月云 2 殷宗俊 1* ( 安徽农业大学动物科技学院 合肥 2336) 摘 要 本试验采用PCR-RFLP HinfⅠ HaeⅢ MspⅠ3种限制性内切酶 分子标记技术 分析了123头圩猪H-FABP基 因5 -上游区和第二内含子区的遗传变异情况 结果表明 1 在5 -上游区 HinfⅠ位点上存在多态性 等位基 因H的基因频率为.655 表现为中度多态 PIC=.35 第二内含子区 HinfⅠ*位点上存在多态性 等位基因 B的基因频率为.7195 表现为中度多态 PIC=.3222 HaeⅢ位点上也存在多态性 等位基因D的基因频率为.631 表现为中度多态 PIC=.3575 而MspⅠ位点上尚未检测到多态 基因型均为AA型 2 被测猪群的基 因频率和基因型频率都处于Hardy-Weinberg平衡状态 P >.5 3 所检测的基因型对肌内脂肪 IMF 含量影 响的趋势为 HH>Hh>hh dd>dd>dd BB>Bb>bb 遗传效应值分别为 对H-FABP基因三个PCR-RFLP多态片段进行克隆测序分析发现 HinfⅠ-RFLP 是由于132bp处存在T C的突变引起 HaeⅢ-RFLP是由于1811bp处存在C G的突变引起 HinfⅠ*-RFLP是由于 197bp处存在T C的突变引起 测序结果与GenBank公布的X98558和Y1618序列有97.9% 98.3%的同源性 关键词 圩猪 H-FABP基因 IMF含量 序列分析 PCR-RFLP 本研究以圩猪为试验材料 采用 PCR-RFLP 方法检测 物序列见表 1 并送交上海生物工程技术有限公司合成 圩猪 H-FABP 基因 5 - 上游区和第二内含子区不同位点 PCR-RFLP 扩增产物 2.5% 琼脂糖凝胶电泳检测 的多态性 并检测突变位点的基因型 分析与 IMF 含量之 1.3 试验群体中 H-FABP 基因的动力学分析 间的相关性 本试验旨在寻找与圩猪 IMF 含量相关的遗传 参照文献 [1] 对基因频率 基因型频率 基因频率和基 标记 为肉质的分析工作探寻更为简便高效的方法 并进一 因型频率的差异显著性检验 χ2 独立性检验 基因杂合度 步为地方猪种中的 大熊猫 圩猪 的种质资源特性 有效等位基因数 多态信息含量进行计算 及 MAS 研究提供参考依据 1. H-FABP 基因对 IMF 含量的遗传效应分析方法 1 根 据 影 响 性 状 的 因 素 采 用 固 定 模 型 材料与方法 1.1 试验材料 Yijkl=μ+si+nj+mk+eijkl 式中 Yijkl IMF 含量测量值 μ 本试验猪只 123 头 的耳组织均来自安泰农业开发有 群体均值 si 性别效应 nj 基因型效应 mk 体重效应 限公司 eijkl 随机残差效应 [2] 采用 SAS(6.12 版本 ) 统计分析软件 1.2 DNA 多态性的检测 GLM 过程对本试验不同 H-FABP 基因型与 IMF 含量的相 采用常规方法进行 DNA 多态性检测 即耳组织样采集 基因组 DNA 提取 多态性引物筛选 PCR 扩增 引 关性进行分析 2 结果与分析 表 1 H-FABP 基因 PCR-RFLP 分析的引物序列产物大小及位置 扩增片段 限制性内切酶 PCR1 Hinf Ⅰ PCR2 Hinf Ⅰ * Hae Ⅲ Msp Ⅰ 23 引物 P1:5 -GGACCCAAGATGCCTACGCCG-3 5 -CTGCATCTTTGACCAAGAGG-3 P2:5 -ATTGCTTCGGTGTGTTTGAG-3 5 -TCAGGAATGGGAGTTATTGG-3 产物大小 (bp) 产物位置

235 图1 H-FABP 基因 693bp 的 PCR 产物 1 1 泳道是个体扩增产物 图 2 H-FABP 基因 816bp 的 PCR 产 图 3 Hinf Ⅰ酶切 693bp PCR 产物 物 1 1 泳道是个体扩增产物 的琼脂糖凝胶 2.5% 电泳图谱 图 Hinf Ⅰ * 酶切 816bp PCR 产物 的琼脂糖凝胶 2.5% 电泳图谱 图 5 Hae Ⅲ酶切 816bp PCR 产物的 图 6 Msp Ⅰ酶切 816bp PCR 产物的 琼脂糖凝胶 2.5% 电泳图谱 琼脂糖凝胶 2.5% 电泳图谱 2.1 圩猪 H-FABP 基因 PCR 产物的扩增结果 扩增 PCR 产物用 1.5% 的琼脂糖凝胶电泳进行检测 群体遗传资源评价的建议性指标 而 816bp 的 H-FABP 基 因片段被 Hinf Ⅰ酶切后检测杂合度偏低 为.36 可能 结果如图 1 2 PCR 结果显示 扩增片段与目的片段大小 由于近交现象导致杂合度偏低 然而 在 Msp Ⅰ位点上尚 一致且特异性较好 可直接进行 PCR-RFLP 未检测到多态性 仅发现 AA 基因型 可能原因是由于该 2.2 圩猪 H-FABP 基因 PCR PFLP 结果 见图 3-6 基因座比较保守或试验样本量较小所致 2.3 圩猪 H-FABP 基因频率及与 IMF 含量的相关性 2.5 圩猪 H-FABP 基因的同源性分布 分析 对比每种 PCR-RFLP 的两种纯合基因型的测序结果 经关联分析得出 Hinf Ⅰ -RFLP 位点的 HH 基因型 确定了三个变异位点的位置 分别是 132bp 处 T C 突 对 IMF 含量的影响显著高于 Hh 基因型 P <.5 而极显 变 1811bp 处 C G 突 变 和 197bp 处 T C 突 变 利 著高于 hh 型 P <.1 Hh 型显著高于 hh 型 P <.5 用 DNAStar 软件分析 H-FABP 基因与 GenBank 所公布的 Hae Ⅲ -RFLP 位 点 dd 型 对 IMF 含 量 的 影 响 显 著 高 于 X98558 和 Y1618 序列的同源性 693bp 816bp 片段分 Dd 型 P <.5 而 极 显 著 高 于 DD 型 P <.1 Dd 型 别与 X98558 Y1618 所公布的序列有 97.9% 98.3% 的 显 著 高 于 DD 型 P <.5 由 于 Msp Ⅰ -RFLP 位 点 仅 同源性 存在 AA 型 其对 IMF 含量的影响还需进一步试验证实 3 讨论 Hinf Ⅰ -RFLP* 位点的 BB Bb 基因型的 IMF 含量虽然 国外品种猪肉的 IMF 含量较低 为 2% 左右 我国地 未达到差异显著水平 但从本试验中各基因型对 IMF 含量 方猪种的 IMF 含量一般处于 3% 7% 之间 本试验采用的 的影响和最小二乘效应分析得出 BB>Bb>bb 等位基因 圩猪因其肉质鲜美而受到广大消费者的欢迎 并具有 肉 B 有使 IMF 含量增加的趋势 香可绕梁多日 之美誉 其 IMF 含量平均高达 3.7% 以上 2. 试验猪群群体遗传学分析 明显高于国外猪种 据 Gerbens 等 [3] 对杜洛克猪的分析表 经 χ2 适合性检验表明该群体基因频率和基因型频率都 明 每一种 PCR-RFLP 其纯合基因型间 IMF 含量差异 处于 Hardy-Weinberg 平衡状态 P >.5 这可能是由 显 著 约 为.% aaddhh 型 (Msp Ⅰ -a, Hae Ⅲ -d, 于该群体在适应性方面具有遗传优势 并经过长期进化和选 Hinf Ⅰ -H) 具 有 最 高 的 IMF 含 量 本 试 验 通 过 研 究 择达到了平衡状态 经统计分析 693bp 816bp 的 H-FABP Hinf Ⅰ -RFLP 位点中不同基因型对 IMF 含量的影响及用 基 因 片 段 被 Hinf Ⅰ Hae Ⅲ 酶 切 后 表 现 多 态 Hinf Ⅰ 最小二乘效应分析表明 基因型 HH 对 IMF 含量的效应值 Hae Ⅲ两位点纯合度分别为 杂合度分别 最大 该结果与 Gerbens 等 [] 研究结果一致 与杨文平等 [5] 为 有效等位基因数分别为 研究结果有所差异 本试验中圩猪 IMF 含量平均高达 3.7% 多态信息含量分别为 均属中度多态 因 以上 而杜洛克的 IMF 含量为 (2.7±1.) % 此该试验结果在一定程度上可作为有效的遗传标记用于该 基因 H 的频率高于杜洛克 也在某一程度上说明圩猪 IMF [3] 圩猪有利 231

236 含量高于杜洛克 经分析 Hae Ⅲ -RFLP 位点基因型 dd 大学出版社,22: 对 IMF 含量的效应值最大 该结果与郭松长 [6] 研究结果一 [2] 张沅. 家畜育种学. 北京 : 中国出版社,21. 致 本试验中 Msp Ⅰ -RFLP 位点尚未检测到多态 其对 [3] Gerbens F, Van Erp A J M, Harders F L, et al. Effect IMF 含量的影响有待进一步试验证实 在 Hinf Ⅰ *-RFLP of genetic variants of the heart fatty acid-binding protein 位点中 B 有使 IMF 含量增加的趋势 这一位点的多态是 gene on intramuscular fat and performance traits in pigs. 否与 IMF 含量有关也还需进一步深入研究 郭松长 曾 Journal of Animal Science, 1999, 77: [6] 鸿普等 Nechtelberger 等 等研究 H-FABP 基因遗 [] Gerbens F, Verburg F J, Van Moerkerk H T B, et al. 传多态性与生长和胴体性状之间存在一定相关性 同时该基 Associations of heart and adipocyte fatty acid-binding 因也是鼠 牛 人等培养乳腺上皮细胞的生长抑制因子 它 protein gene expression with intramuscular fat content in [7] [8] 的变异是否与圩猪体型小 生长速度缓慢等性状相关有待进 一步深入研究 结论 本试验通过对圩猪 H-FABP 基因 5 - 上游区和第二 内含子区的 PCR-RFLP 分析 发现 H-FABP 基因在 5 上游区和第二内含子区均存在丰富的多态性 其多态性对圩 猪 IMF 含量存在一定的影响 这为进一步开展圩猪肉质性 状分子育种提供了基础数据 并为科研工作者的研究提供一 pigs. Journal of Animal Science, 21, 79(2): [5] 杨文平, 曹果清, 刘建华, 等. 猪 H-FABP 基因多态性与肌内 脂肪含量的关联分析. 激光生物学报,27,16(5): [6] 郭松长. 氟烷基因 心脏脂肪酸结合蛋白基因对猪部分经济性 状影响的研究. 湖南农业大学硕士学位论文, 23. [7] 曾鸿普, 王东劲, 管 松, 等. 五指山猪 H-FABP 基因与 生长性状的关联分析. 西北农业学报, 29, 18(): [8] N e c h t e l b e r g e r D, P i r e s V, S ö l k n e r J, e t a l. 定的理论基础 Intramuscular fat content and genetic variants at fatty 参考文献 acid-binding protein loci in Austrian pigs. Journal of [1] 陈宏权, 王治华, 殷宗俊. 动物遗传学 [M]. 北京 : 中国农业 Animal Science, 21, 79(11):

237 猪 CuZnSOD 基因的克隆 表达及功能分析 杜金芳 曾勇庆 * 陈伟 崔景香 陈其美 杨伦 胡艳霞 山东农业大学动物科技学院 泰安 摘 要 为了进一步了解和认识CuZnSOD基因的结构和功能 揭示CuZnSOD对猪抗氧化机能的影响 寻找与肉质 性状相关联的分子标记 文章采用RACE rapid amplification of cdna end 方法 对莱芜猪CuZnSOD基因cDNA进 行克隆测序 分析其结构和功能 并用Real-time PCR检测CuZnSOD基因的表达 结果表明 CuZnSOD基因cDNA序 列全长658 bp GenBank登录号 GU9822 包含76 bp的5 UTR和12 bp的3 UTR序列 全部CDS序列62 bp 编码153个氨基酸 分子量为15.9 kda 等电点为6.3 CuZnSOD基因编码的氨基酸序列中 第3氨基酸残基处存 在1个O-糖基化位点 第86氨基酸残基处存在1个N-糖基化位点 二级结构中α螺旋仅占1.31% 在进化过程 中高度保守 与人 牛 小鼠和褐鼠的编码区同源性分别为87.7% 87.66% 83.%和83.23% 氨基酸序列同 源性分别为9.26% 9.12% 92.21%和91.5% CuZnSOD存在典型的金属结合配体结构域 GFHVHQFGDNT 基于蛋白序列所构建的分子进化树表明猪与牛的亲缘关系最近 在mRNA水平上 CuZnSOD是一个广谱表达基 因 在大脑 心脏 脾脏 肝脏 肾脏 肺 大肠 小肠 脊髓 肌肉 背膘和胃中都能检测到 其在肾脏 小肠和 肺中表达量较高 在心脏和肌肉组织中表达量较低 关键词 猪 CuZnSOD 基因克隆 表达分析 随着现代饲养业集约化程度的不断提高 氧化在商品 对 CuZnSOD 进行克隆 表达及功能分析 旨在进一步探索 猪生产中的危害已大量显现 可负面影响活体动物的免疫 猪 CuZnSOD 基因的结构和功能 为揭示 CuZnSOD 对猪抗 机能和宰后肉质特性等 抗氧化酶可缓解或者抑制自由基 氧化机能的影响 以及寻找与肉质性状相关联的分子标记提 的负面效应 提高商品猪的抗氧化能力 进而改善商品猪 供科学依据 的肉质 正常的细胞代谢可产生超氧阴离子 O 羟自 1 由基 OH 过氧化氢 H2O2 等活性氧 ROS 过多 1.1 实验动物 [1] 2- 的自由基如果不能被及时清除 它们将会攻击各种生物大 材料和方法 在同样饲养管理条件下饲喂至 11±2 kg 体重的莱芜 分子 引起 DNA 损伤 酶失活 脂质过氧化等一系列氧化 猪 随机屠宰 9 头 迅速采集大脑 心脏 脾脏 肝脏 肾脏 肺 损伤 进而引起生物体各种生理病变 大肠 小肠 脊髓 肌肉 腰部背最长肌 背膘和胃 12 种 [2-5] 超氧化物歧化酶 superoxide dismutase, SOD 是生物抗氧化系统中抗氧化 酶类的重要成员 是生物体有效清除活性氧的第一个重要抗 氧化酶类 它将超氧阴离子自由基快速歧化为 H2O2 和 O2 进一步在过氧化氢酶 CAT 和谷胱甘肽过氧化物酶 GPX 的作用下转化为 H2O 和 O2 组织 液氮速冻 -7 保存 1.2 方法 总 RNA 的提取 12 种组织各取 1 mg 样品在无 RNA 酶的离心管中匀 浆后使用 Trizol 法提取总 RNA 采用 1% 的琼脂糖凝胶电 [6] CuZnSOD Copper zinc superoxide dismutase 是 超 氧化物歧化酶 SODs 家族的成员之一 是集体防御氧化 泳验证 RNA 的完整性 -7 保存备用 引物设计 损伤的一种重要的金属酶 能转移性地清除超氧阴离子自 采 用 Primer 5. 引 物 设 计 软 件 根 据 AF39667 序 由基 在维持氧自由基平衡方面起着重要的作用 它广泛 列 设 计 猪 CuZnSOD 基 因 3 RACE 的 两 条 下 游 引 物 和 存在于细胞内 并且占总 SOD 的 9% 经鉴定 CuZnSOD 5 RACE 的两条上游引物 常规 PCR 的一对引物 扩增 基因存在于一百多个属中 例如鼠 牛 猪等 [8] 哺乳动 片段 217 bp 引物序列见表 1 根据 AF 序列设 物中 CuZnSOD 在肺 肾 胰脏和胎盘等多种组织中表 计 GAPDH 扩增引物 扩增片段为 1 bp 引物由上海生 达 [9-11] 其分布与功能有关 猪 CuZnSOD 的完整编码区和 物工程技术有限公司合成 全长 cdna 序列尚未见报道 本研究以莱芜猪为实验对象 [7] 逆转录 233

238 表 1 引物序列 引物名称 收 试 剂 盒 Tiangen China 将 产 物 纯 化 回收目的片段 取回收产物.5 μl 加入 引物序列.5 μl pmd-18t 载 体 Biotake China P1: GAAGTCGTTTGGCCTGTGGTGTAAT 3 RACE 5 RACE CuZnSOD GAPDH 温和混匀后加人 5μL Solution I 16 连接 P2: GACTCGAGTCGACATCGATTTTTTTTTTTTTTTTTT 过 夜 取 5μL 连 接 产 物 加 E.coli DH5a P3: CTTGGGCAGAGGTGGAAATGAAG Tiangen China 感 受 态 细 胞 33 μl 冰 P: GACTCGAGTCGACATCGAT 浴 3 min 2 热 冲 击 9 s 冰 浴 2 min P5: GGCCACGCGTCGACTAGTACGGGGGGGGGGGGGGG 加 入 8 μl LB 液 体 培 养 基 37 摇 床 放 P6: GGATTCAGGATTGAAGTGAGGACC 置 5 min 后将菌液铺在 LB 固体培养基上 P7: GGCCACGCGTCGACTAGTACG 37 生化培养箱中过夜 挑取克隆菌落进行 P8: CTAACACTGTCTTCTCTCCCTTCA 摇菌 用 M13 引物进行菌液 PCR 鉴定分离 P9: GGTCCTCACTTCAATCCTG 出有目的带的小管 取 1 μl 至试管中 加 3 ml LB 液体培养基 1.8 μl AMP+ 封口 P1: CTTCATTTCCACCTCTGC 37 摇菌 12 h 后菌液测序 另一部分用质粒 P11: ACTCACTCTTCTACCTTTGATGCT 酶切鉴定 再测序 P12: TGTTGCTGTAGCCAAATTCA 序列分析和结构预测 将获得的序列在 NCBI 上用 ORF Finder cdna 第 一 链 取 肌 肉 组 织 的 总 RNA 2 μl 以 Oligo-d (T)18 (5 μmol/l) 为 引 物, 用 M-MLV 程序进行开放阅读框预测 同时将序列在 GenBank 数据库 中进行 BLAST 初步比较分析 利用 ProtParam 在线工具 Biotake China 反转录合成, 其他操作按照说明进行 Translate ( expasy.org/tools/ dna.html) 推 3 RACE 的 cdna 第一链 取肌肉组织的总 RNA 2 μl 测编码蛋白质的氨基酸组成 使用在线软件 Compute pi/ 以 P1 和 P 为 引 物 1 μmol/l 用 SuperScriptTM II MW ( pi_tool.html) 分 Reverse Transcriptase 试 剂 盒 Invitrogen America 合 猪 CuZnSOD 的等电点 (pi) 理论分子量 使用在线软件 成 cdna 5 RACE 的 cdna 第 一 链 取 肌 肉 组 织 的 SMART ( 分 别 对 猪 总 RNA 2 μl 以 P7 和 P8 1 μmol/l 为 特 异 性 引 CuZnSOD 氨基酸序列进行结构功能域分析 从 NCBI 蛋白 物 用 SuperScriptTM II Reverse Transcriptase 试 剂 盒 数据库中下载人 牛 褐鼠和小鼠的 CuZnSOD 氨基酸序 Invitrogen America 合成 cdna 1.2. PCR 扩增 以合成的 cdna 第一链为模板 应用引物 P9 和 P1 扩 增 CDS 中间片段 PCR 扩增体系为 5 μl 扩增条件为 析 列 利用软件 DNAMAN 进行序列编辑和比对分析 利用 MEGA. PAM 矩阵模型计算不同物种 CuZnSOD 的遗传 距离 应用邻接法 (NJ) 建立系统进化树 Real-time PCR 95 预变性 2 min 95 变性 3 s 55 复性 3 s 72 延 采用 SYBR Green 染料法 在 Stratagene Mx3P 伸 1 min 35 个循环 最后 72 延伸 1 min PCR 产物经 荧 光 定 量 PCR 仪 上 进 行 反 应 以 GAPDH 基 因 作 为 琼脂糖凝胶电泳检测 内参 织 差 异 CuZnSOD 基 因 Real-time PCR 反 应 体 系 RACE 扩增 [12] 定 量 分 析 CuZnSOD 基 因 mrna 表 达 的 组 以 3 RACE 的 cdna 第一链为模板 P2 和 P3 为引 2 μl cdna 2 μl Plus Solution 1 μl SYBR Green 物 扩 增 3 UTR 序 列 以 5 RACE 的 cdna 第 一 链 为 P9 和 P1 各 2 μl 1 μmol/l 补 ddh2o 至 2 μl 模板 P5 和 P6 为引物扩增 5 UTR 序列 扩增条件为 GAPDH 基 因 Real-time PCR 反 应 体 系 2 μl cdna 95 预变性 2 min 95 变性 3 s 55 复性 3 s 72 延 2 μl Plus Solution 1 μl SYBR Green P11 和 P12 各 伸 1 min 35 个循环 最后 72 延伸 5 min PCR 产物经 1.2 μl 1 μmol/l 补 ddh2o 至 2 μl PCR 反应条件 琼脂糖凝胶电泳检测 95 预变性 3 s 95 变性 5 s 58 退火 1 s 72 延伸 s 个循环 最后 72 延伸 1 min 目的基因的克隆 测序和序列分析 将 PCR 扩 增 产 物 在 1% 琼 脂 糖 凝 胶 中 电 泳 分 别 回 检测中为每个待测样品 cdna 设置 3 个重复 对得到 收 RT-PCR 3 RACE 和 5 RACE 产 物 用 DNA 回 的 3 个 Ct 值取平均值 用 2-ΔΔCt 法进行计算 [13] 使用 23

239 SAS 统计分析各组织的相对表达量 以 P <.5 表示统计学 81 和 Asp8 Gly12 为 锌 结 合 位 点 Cys58 和 Cys17 是 差异 采用 One-way ANOVA 进行数据处理 形成二硫键的残基 Arg1 是酶活性位点必须存在的残基 2 结果与分析 利 用 NetNGlyc 1. 及 NetOGlyc 3.1 对 猪 CuZnSOD 进 行 2.1 目的基因的扩增 N- 连 接 和 O- 连 接 糖 基 化 位 点 预 测 发 现 猪 CuZnSOD 以莱芜猪肌肉组织的总 RNA 为模板 应用引物扩增部 氨基酸序列在第 3 位氨基酸残基处存在 1 个 O- 糖基化位 分 CDS 序列 217 bp 与预期片段大小相符 3 RACE 扩 点 第 86 位氨基酸残基处存在 1 个 N- 糖基化位点 用 增 CuZnSOD 基 因 mrna 的 3 UTR 获 得 了 25 bp 的 Netphos 2. 预 测 基 因 的 磷 酸 化 位 点 发 现 在 59 和 17 位 条带 5 RACE 扩增 CuZnSOD 基因 mrna 的 5 UTR 氨基酸有丝氨酸磷酸化位点 28 3 和 96 位氨基酸有苏 获得了 225 bp 的条带 经测序拼接后获得 CuZnSOD 基因 氨酸磷酸化位点 但没发现有酪氨酸磷酸化位点 通过 cdna 全长为 658 bp GenBank 登录号 GU9822 包 HNN 进行二级结构预测显示 α 螺旋 1.31% 无规则卷曲 含 62 bp 的 全 部 CDS 区 76 bp 的 5 UTR 和 12 bp 的 6.13% 3 UTR 序列 猪 CuZnSOD 基因 CDS 区长度为 62 bp 将 猪 CuZnSOD 基 因 编 码 区 核 苷 酸 序 列 分 别 与 包含起始密码子 ATG 和终止密码子 TAG GenBank 中人 NM_5. 小鼠 NM_113 褐 2.2 序列分析 家 鼠 NM_175 牛 NM_17615 的 CuZnSOD 基 对 猪 CuZnSOD 基 因 编 码 的 氨 基 酸 多 肽 进 行 理 化 性 因 进 行 比 较 通 过 DNAMAN 计 算 序 列 的 同 源 性 分 别 为 分 析 CuZnSOD 蛋 白 相 对 分 子 量 为 15.9 kda 通 过 87.7% 83.% 83.23% 87.66% 5 个物种的同源性为 ComputepI/MW ExPASy 分析其理论等电点 pi = % 亚细胞定位于细胞质 没有跨膜区 CuZnSOD 氨基酸序列 从 NCBI 网站下载人 NP_5.1 牛 NP_777.1 存在锚信号序列的概率为.% 存在信号肽的可能性为 褐 家 鼠 NP_ 和 小 家 鼠 NP_ % Gly5 Gly62 Pro75 Gly83 和 Gly139 为 立 体 活 CuZnSOD 的氨基酸多肽序列 对这些氨基酸多肽序列与 性位点 His7 9 6 和 121 为铜结合位点 His6 72 猪 CuZnSOD 氨基酸多肽序列进行同源性分析 图 1 猪 图 1 五个物种的 CuZnSOD 氨基酸序列比对分析 O-glycosylation 为 O- 糖基化位点 N-glycosylation 为 N- 糖基化位点 cu/zn 为金属配体结构域 s-s 为二硫键形成的残基 图2 猪 CuZnSOD 蛋白三维结构图 图 3 猪不同组织中 CuZnSOD 基因的相对表达量 不同的标记字母表示 CuZnSOD 基因表达水平差异显著 P<.5 235

240 CuZnSOD 氨基酸多肽序列与牛的相似性最高 为 9.12% 酶的活性 [19] 在 和 89 位氨基酸 NVTA 含 与 人 小 鼠 和 褐 鼠 的 相 似 性 分 别 为 9.26% 92.21% 有一个 N- 糖基化位点 在 3 位氨基酸 T 处含有一个 O- 91.5% 基于不同物种 CuZnSOD 氨基酸序列以 PAM 矩阵 糖基化位点 翻译后糖基化涉及蛋白质结构和功能的改变 模型计算不同物种的遗传距离 并用 NJ 法构建分子系统发 CuZnSOD 糖基化引起酶的活性降低 从而导致糖尿病病人 育树 结果显示 猪与牛亲缘关系较近 与人 小鼠和褐鼠 的生理问题 [2-22] Jackson 等人研究表明 CuZnSOD 基因的 的亲缘关系相对较远 利用在线软件构件 3D-JIGSAW 模 缺失将导致小鼠骨骼肌的肌肉萎缩 但是具体信号转导路径 型 用 Pymol 软件对 CuZnSOD 蛋白三级结构进行观测分 还有待进一步研究 [23] 析的结果见图 2 其中螺旋有 3 个 转角有 2 个 Cys58 Real-time PCR 结果显示 CuZnSOD 基因在猪 12 种 和 Cys17 在两个相同的亚基之间形成二硫键 将两个亚基 组织中均有表达 这与 Xu[2] 等人研究一致 CuZnSOD 基 结合成为功能蛋白 因表达具有广谱性 说明 CuZnSOD 蛋白保护细胞免受自由 2.3 CuZnSOD 基因组织特异性表达分析 基的侵害 它是一个大量存在的抗氧化酶 本研究所检测的 以 GAPDH 为 内 参 基 因 大 肠 作 为 对 照 组 织 对 猪 组织中表达水平存在明显差异 在肾中表达丰度最高 而在 CuZnSOD 基 因 在 12 种 组 织 中 的 表 达 进 行 定 量 分 析 将 心脏和肌肉组织中相对较低 相对心脏和肌肉 肾脏是产生 所 得 Ct 值 代 入 公 式 2-ΔΔCt 计 算 后 得 到 CuZnSOD 大量自由基的主要场所 [2] 研究提示 CuZnSOD 基因表达与 基 因 mrna 在 不 同 组 织 中 的 相 对 表 达 规 律 图 3 体内自由基的产生有关 Xu 等人研究 2 日龄猪 CuZnSOD CuZnSOD mrna 在肾中表达量最高 在小肠 肺 脑组 表达量最高的组织是肌肉 但本研究肌肉组织的表达量相对 织中表达量较高 而在心脏和肌肉组织中表达量较低 其他组织较低 说明 CuZnSOD 表达量与年龄体重相关 不 3 讨论 同的生长阶段 CuZnSOD 在组织中的表达模式不同 至于在 CuZnSOD 是机体活性氧清除反应过程中发挥作用的 各种组织中表达水平的高低则与猪的各个组织内的调控网 抗氧化酶 对防止氧自由基破坏细胞的组成 结构和功能 络有关 另外与健康状况 饲喂条件等外在因素有关 因此 保护细胞免受氧化损伤具有十分重要的作用 CuZnSOD 推测各个组织中的表达在不同氧化应激情况下也是变化的 是 人体清道夫 在医学临床可以治疗多种疾病 Orr 曾 本研究克隆得到猪 CuZnSOD cdna 全长序列 长度为 将 CuZnSOD 基因导入果蝇 导致转基因株具有多个复制的 658 bp GU9822 包含了完整的 CDS 结构 编码 153 CuZnSOD 基因 从而寿命比野生型长 1/3[1] 本研究通过 个氨基酸 它们的氨基酸序列中含有 CuZnSOD 家族特有的 RACE 技术成功克隆了 658 bp 的 cdna 序列 编码区序列 保守序列元件 生物信息学分析它与其他哺乳动物序列相比 为 62 bp 编码 153 个氨基酸 与其他物种一样氨基酸序 具有高度的同源性 猪 CuZnSOD 在各种组织中的表达量存 列都有保守残基 如与金属辅基相连的氨基酸残基 参与肽 在差异 猪 CuZnSOD 的克隆和表达分析为进一步研究基因 键内部二硫键形成部位附近的氨基酸残基和甘氨酸残基 功能奠定基础 17] [15- 它们的大量存在和均匀分布有利于形成酶分子的高级结 构 其中 CuZnSOD 家族特征序列 1 GFHVHQFGDNT 参考文献 [1] 李华, 曾勇庆, 魏述东, 陈其美, 宋一萍, 钱源, 董彬, -5 氨基酸残基之间 由组氨酸残基组成铜配体 特征 崔志锋. 猪宰后肌肉 SOD 与 MDA 的变化及其对肉质特性的 序列 2 GNAGSRLACGY 氨基酸残基之间 由 影响. 畜牧兽医学报, 21, 1(3): 半胱氨酸残基形成二硫键 CDS 序列同源性分析 与牛 人 小鼠和褐鼠的同源性分别是 87.66% 87.7% 83.% 和 [2] 傅晓龙, 刘洪珍. 运动性肾组织氧化损伤与抗氧化能力. 中 国临床康复, 26, 1(36): % 氨基酸同源性分别是 9.12% 9.26% 92.21% [3] Lu M, Daret KSC. Regulation of superoxide dismutase 和 91.5% 说明 CuZnSOD 在进化过程中具有较高的保守 genes: Implications in disease. Free Radical Biol Med, 性 猪 CuZnSOD 没有信号肽 亚细胞定位于细胞质 这与 29, 7(): 人的 CuZnSOD 定位一致 [18] 说明它是细胞质中的蛋白 用 Netphos 2. 预 测 基 因 的 磷 酸 化 位 点 发 现 在 59 和 17 位氨基酸有丝氨酸磷酸化位点 28 3 和 96 位氨基酸 有苏氨酸磷酸化位点 但没发现有酪氨酸磷酸化位点 在应 [] Crack PJ, Taylor JM. Reactive oxygen species and the modulation of stroke. Free Radical Biol Med, 25, 38(11): [5] Carter AB, Tephly LA, Venkataraman S, Oberley LW, 激过程中 O2- 数量增加 通过 G-CSF 调节细胞信号转导 Zhang Y, Buettner GR, Spitz DR, Hunninghake GW. 导致 CuZnSOD 翻译后的磷酸化 从而降低体内 CuZnSOD High levels of catalase and glutathione peroxidase activity 236

241 dampen H2O2 signaling in human alveolar macrophages. Am J Resp Cell Mol Biol, 2, 31(1): [16] Borders CL, Saunders JE, Blech DM, Fridovich I. [6] Bowler C, Van MM, Inze D. Superoxide dismutase and Essentially of the active site arginine residue for the stress tolerance. Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol, normal catalytic activity of Cu/Zn superoxide dismutase. 1992, 3: Biochem J, 1985, 23(3): [7] Noor R, Mittal S, Iqbal J. Superoxide dismutase- [17] Chaturvedi S, Hamilton AJ, Hobby P, Zhu G, Lowry applications and relevance to human diseases. Med Sci CV, Chaturvedi V. Molecular cloning, phylogenetic Moint, 22, 8(9): analysis and three-dimensional modeling of Cu/Zn [8] Wang CL, Wu CJ, Wang YR, Chen MH, Chen ZQ, Tian SR. Study progress of Cu/Zn superoxide disnmtasefrom gene to function. Progr Modern Biomed, 28, 8(5): [9] Folz RJ, Guan J, Seldin MF, Oury TD, Enghild JJ, Crapo JD. Mouse extracellular superoxide dismutase: superoxide dismutase from three varieties of Cryptococcus neoformans. Gene, 21, 268(1-2): [18] Crapo JD, Oury T, Rabouille C, Slot JW, Chang LY. Copper, zinc superoxide dismutase is primarily a cytosolic protein in human cells. Cell Biology, 1992, 89(21): primary structure, tissue-specific gene expression, [19] Csar XF, Wilson NJ, Strike P, Sparrow L, McMahon chromosomal localization, and lung in situ hybridization. KA, Ward AC, Hamilton JA. Copper, zinc superoxide Am J Resp Cell Mol Biol, 1997, 17(): dismutase is phosphorylated and modulated specifically by [1] Hausmann DH, Porstmann T, Weber I, Hausmann S, Dummler W, Liebe S, Emmrich J. CuZnSOD in human pancreatic tissue and pancreatic juice. Int J Gastrointest Cancer, 1997, 22Gastroi: granulocyte-colony stimulating factor in myeloid cells. Proteomics, 21, 1(3): [2] Arai K, Iizuka S, Tada Y, Oikawa K, Taniguchi N. Increase in the glucosylated form of erythrocyte Cu/Zn- [11] Akbar SA, Nicolaides KH, Brown PR. Measurement of superoxide dismutase in diabetes and close association of CuZnSOD in placenta, cultured cells, various fetal tissues, the nonenzymatic glucosylation with the enzyme activity. decidua and semen by ELISA. J Obstet Gynaecol, 1998, Biochim Biophys Acta, 1987, 92(2): Gastroi: [21] Arai K, Maguchi S, Fujii S, Ishibashi H, Oikawa K, [12] Robert DB, Dan WH, Robert AC, Clark BJ. GAPDH Taniguchi N. Glycation and inactivation of human Cu, as a housekeeping gene: analysis of GAPDH mrna Zn-superoxide dismutase. Identification of the in vitro expression in a panel of 72 human tissues. Physiol glycation sites. J Biol Chem, 1987, 262(35): Genomics, 25, 21(3): [13] Livak KJ, Schmittgen TD. Analysis of relative gene [22] Atalay M, Laaksonen DE. Diabetes, oxidative stress and expression data using real-time quantitative PCR and physical exercise. J Sports Sci Med, 22, 1(1): 1-1. the 2(-Delta Delta C(T)) Method. Methods, 21, 25(): [23] Jackson MJ. Lack of CuZnSOD activity: A pointer 2-8. to the mechanisms underlying age-related loss of [1] O r r W C, S o h a l R S. E x t e n s i o n o f l i f e - s p a n b y muscle function, a commentary on "Absence of CuZn overexpression of superoxide dismutase and catalase in superoxide dismutase leads to elevated oxidative stress and Drosophila melanogaster. Science, 199, 263(515): acceleration of age-dependent skeletal muscle atrophy" Free Radical Biol Med, 26, (11): [15] Malinowski DP, Fridovich I. Chemical modification of [2] Xu, CL, Wang YZ, Guo J, Liu JX, Feng J. Comparison arginine at the active site of the bovine erythrocyte of age-related differences in expression of antioxidant superoxide dismutase. Biochemistry, 1979, 18(26): 599- enzyme mrna and activity in various tissues of pigs. Comp Biochem Physiol, 27, 17(3):

242 猪肌肉中胶原蛋白特性及其与 肉质性状关系的研究 李华 1 杨海玲 2 曾勇庆 1 * 魏述东 3 陈其美 1 宋一萍 1 钱源 1 1. 山东农业大学动物科技学院 泰安 青岛市畜牧兽医工作站 青岛 山东省莱芜市畜牧兽医技术推广中心 莱芜 2711 摘 要 为了探讨肉质特性的形成和调控机制 为地方猪种的选育和利用提供依据 以莱芜猪 2头 鲁莱黑 猪 2头 和大约克夏猪 12头 共6头去势公猪为试验对象 研究肌肉中胶原蛋白特性及其与肉质性状的关 系 结果表明 莱芜猪肌肉总胶原蛋白 可溶性胶原蛋白 不溶性胶原蛋白和胶原蛋白溶解度均显著高于鲁莱 黑猪和大约克夏猪 鲁莱黑猪肌肉胶原蛋白含量及其溶解度显著高于大约克夏猪 P<.5 在肉质特性方 面 不同品种猪间的滴水损失 系水率 烹饪损失 超氧化酶歧化酶 Superoxide dismutase, SOD 活性和丙二醛 Malondialdehyde, MDA 含量具有极显著的差异 P<.1 与大约克夏猪相比 莱芜猪和鲁莱黑猪肌肉具有良 好的系水力 较强的抗氧化性 猪肌肉胶原蛋白含量和溶解度与系水力 嫩度和抗氧化性能等重要肉质性状间 存在不同程度的显著相关 P<.5或.1 结果提示 肌肉胶原蛋白含量的增加及其溶解度的下降 能够改善 肌肉的系水力 但同时也降低肌肉的嫩度 并且肌肉胶原蛋白含量的增加有利于提高肌肉的抗氧化性能 关键词 猪 肉质 胶原蛋白 系水力 嫩度 猪肉的质量及其调控近年来已受到猪肉生产者和消费 去势公猪为试验对象 为使测定结果具有可比性 3 个品种 者广泛关注 其重要性逐渐得到提高 现代肉质概念由丹 的试验猪是在同样的饲养管理条件下由 25 kg 饲喂至国际惯 麦学者 Anderson 归纳为食品质量 营养质量 技术质量 常采用的 11 kg 体重 考虑到莱芜猪和鲁莱黑猪成熟较早 卫生质量 人文质量五种属性 其中食品质量涉及色泽 风 因此 试验设计对莱芜猪加设 8 kg 体重组 对鲁莱黑猪则 味 嫩度 多汁性 技术质量包括系水力 抗氧化能力等 加设 9 kg 体重组 在饲喂至相应体重时 每组均屠宰 12 头 胶原蛋白 collagen 是肌肉中结缔组织的组成成分 由于 共 6 头试验猪 胶原能够在肌肉的肌纤维间和肌束周围广泛分布并形成微 1.2 测定项目及方法 取样及肉样处理 [1] 细的原纤维网 [2] 因此 其含量和性质在很大程度上影响肉 品的感官及加工品质 [2,3] 已有的研究表明 牛肌肉中胶原 蛋白的含量和性质与品种 性别 于胸段背最长肌取样 2 g 左右匀浆 -2 保存 用于胶原 等因素有关 进而很大程度上影响其肌肉的 蛋白含量测定 - 保存 2 h 取样 2-5 g 测定 SOD 活 食用质量和技术质量 莱芜猪是我国优良的地方猪种 鲁莱 性和 MDA 含量 取样 g 左右在 - 保存 2 h 测定 黑猪是在莱芜猪基础上培育而成 研究表明 莱芜猪具有肉 滴水损失 失水率 烹饪损失 拿破率 腰段背最长肌在 质细嫩 色泽鲜艳 系水力强 肉味香浓 抗氧化能力强等 15 保存 2 h 后 转移到 - 保存 8 h 用于嫩度测定 优良种质特性 [9,1] 是当前生产优质肉猪应予重视的宝贵种 及营养水平 [8] [,5] 体重 [5,6] 部位 试验猪屠宰后 1 h 内 在胸腰椎结合处分离背最长肌 [5,7] [] 肉质性状测定 [1, 11, 12, 13, 1] 质 但是长期以来对于地方猪种良好的食用质量和技术质量 肌肉系水力的测定按统一方法执行 其中 滴水损失采 缺乏深入的研究 为此 本文以莱芜猪 鲁莱黑猪和大约克 用吊挂处理法测定 失水率采用压力法测定 烹饪损失采用 夏猪为研究对象 研究肌肉胶原蛋白性质及对肉质特性的影 蒸煮法测定 拿破率采用腌制和加热处理法测定 嫩度采用 响 旨在探索地方猪种优良肉质特性的形成和调控机制 为 剪切测定法 测定前肉样经标准化处理 用 C-LM3 型肌肉 地方猪种资源的开发利用和优质猪肉的生产提供科学依据 嫩度计测量肌肉的剪切值 材料与方法 用南京建成生物工程研究所试剂盒测定宰后 2 h 的肌 1.1 试验猪分组 肉 SOD 活性和 MDA 含量 SOD 活性测定是通过黄嘌呤及 1 以莱芜猪 2 头 鲁莱黑猪 2 头 和大约克夏猪 12 头 238 黄嘌呤氧化酶反应系统产生氧自由基 自由基氧化羟胺形成

243 亚硝酸盐 在显色剂的作用下呈紫红色 用分光光度计测其 显著高于大约克夏猪相应性状的平均值 P<.5 8 kg 吸光度 MDA 含量测定是通过其与硫代巴比妥酸 TBA 莱芜猪肌肉 TC SC 和 IC 均高于 11 kg 莱芜猪 但是差 缩合形成红色产物 在 532 nm 处有最大吸收峰 用分光光 异 不 显 著 P>.5 9 kg 鲁 莱 黑 猪 肌 肉 TC SC 和 IC 度计测其吸光度 也是高于 11 kg 组 差异也不显著 P> 不同品种猪的肉质特性 胶原蛋白含量及性质的测定 精确称取 1 g 捣碎肉样于 2 ml 具塞试管中 用 6 mol/ 不同品种猪的肉质特性比较结果表明 表 2 除肌肉 L HCl 在 12 密闭酸解 2 h 另精确称取.5 g 肉样与 剪切值 嫩度 和拿破率无显著差异外 P>.5 其余 12 ml 稀 释 倍 的 Ringer 液 含.7% NaCl.3% KCl 所测肉质性状均具有极显著的差异 P<.1 总体上 莱 和.25% CaCl2 混 合 于 25 ml 离 心 管 中 77 水 浴 芜猪的肉质特性明显优于大约克夏猪 其中滴水损失 系 63 min 离 心 35 r/min 6 min 分 离 上 清 液 残 渣 中 水率 烹饪损失 SOD 活性和 MDA 含量表现为差异显著 再加入 8 ml 稀释 倍的 Ringer 液 振动混匀并离心分离 P<.5 鲁莱黑猪也表现出良好的肉质特性 其中滴水 上清液 两次上清液合并入 5 ml 具塞试管中 用 12 mol/ 损失 系水率 SOD 活性和 MDA 含量与大约克夏猪相比 L HCl 在 12 密闭酸解 2 h 两种酸解液采用分光光度 具有显著差异 P<.5 莱芜猪与鲁莱黑猪相比 肌肉的 法分别测定总羟脯氨酸和可溶性羟脯氨酸的含量 [15] 根据 滴水损失 系水率和烹饪损失存在显著差异 P<.5 研 Crouse 等 [6] 推荐的系数计算总胶原蛋白 TC 和可溶性胶 究结果表明 莱芜猪具有系水力和抗氧化能力强等优良肉质 原蛋白 SC 的含量 则不溶性胶原蛋白 IC = TC 特性 SC 胶原蛋白的溶解度 CS = SC / TC 1% 2.3 肌肉胶原蛋白与肉质性状间的相关分析 1.3 结果统计分析 肌肉胶原蛋白与肉质性状间的相关分析见表 3 结果表 试验数据运用 SAS 8. 软件的 GLM 程序进行统计 明 肌肉 TC 与系水率 剪切力值 SOD 活性 P<.1 分析 对不同品种猪肌肉的胶原蛋白含量 肉质性状进行最 和拿破率 P<.5 呈显著的正相关 与滴水损失 烹饪 小二乘分析 分析模型 Y =μ+ 品种效应 + 随机残差 其中 损失 P<.1 和 MDA 含量 P<.5 呈显著负相关 Y 为表型观测值 μ 为群体均值 运用 PROC CORR 程序 肌肉 SC 与滴水损失 烹饪损失以及 SOD 活性呈极显著的 对肌肉胶原蛋白含量及性质与肉质性状间进行相关性分析 2 正相关 P<.1 与系水率 MDA 含量呈极显著负相关 P<.1 肌肉 IC 与滴水损失 烹饪损失和 MDA 含量呈 结果与分析 2.1 不同品种猪肌肉胶原蛋白含量及性质 极显著的负相关 P<.1 与系水率 P<.1 SOD 活 不同品种猪间比较 表 1 总体上莱芜猪肌肉 TC 性 P<.5 呈显著正相关 肌肉 CS 与系水率 MDA 含 SC IC 和 CS 均显著高于鲁莱黑猪和大约克夏猪相应性状 量 P<.1 拿破率和剪切力值 P<.5 呈显著负相关 的平均值 P<.5 鲁莱黑猪肌肉 TC SC IC 和 CS 也 与滴水损失 烹饪损失 P<.1 和 SOD 活性 P<.5 表 1 不同品种猪肌肉胶原蛋白特性 Table 1 Intramuscular collagen characteristics of different pig breeds 品种 Breed TC (mg/g) SC (mg/g) IC (mg/g) CS (%) 11kg LWB.22a±.12.87a± a± a±.1 11kg LLB 3.31b±.8.5b± b± b±.1 11kg LY 2.5c±.1.25c± c±.9 1.c±.1 8kg LWB.28a±.12.9a± a± a±.2 9kg LLB 3.1b±.9.55b± b± b±.1 F value 7.8** 3.6** 21.93** 96.35** 表中数值以最小二乘均数 ± 标准误表示 同一列各平均数间具有不同标记字母的表示差异显著 P<.5 ns 表 示差异不显著 P>.5 * 表示差异显著 P<.5 ** 表示差异极显著 P<.1 LWB 莱芜猪 Laiwu Black pig LLB 鲁莱黑猪 Lulai Black pig LY 大约克夏猪 Large Yorkshire 下表相同 TC 总胶原蛋白 Total collagen SC 可溶性胶原蛋白 Soluble collagen IC 不溶性胶原蛋白 Insoluble collagen CS 胶原 蛋白溶解度 Collagen solubility 239

244 表 2 不同品种猪的肉质特性 Table 2 Meat quality properties of different pig breed 品种 Breed DL (%) WHP (%) CL (%) NY (%) SF (N) SOD MDA 11kg LWB.69 ± ± ± ± ± ±.71.26c±.1 11kg LLB 1.81b± b± ab± ± ± a±.7.26c±.1 11kg LY 2.87a± c± a± ± ± c±.7.3a±.1 8kg LWB.96bc± a± c± ± ± a±.71.27bc±.1 9kg LLB 1.2bc± b± b± ± ± c±.77.29b±.1 F value 7.82** 18.1** 28.2** 1.1ns 1.52ns.9** 11.7** c a c a DL 滴水损失 Drip loss WHP 系水率 Water holding percentage CL 烹饪损失 Cooking loss NY 拿 破 率 Napole yield SF 剪 切 值 Shear force SOD (U/mg protein) 超 氧 化 酶 歧 化 酶 Superoxide dismutase MDA (nmol/mg protein) 丙二醛 Malonilaldehyde 表 3 肌肉胶原蛋白含量及性质与肉质性状间的相关分析 Table 3 Correlation analysis between collagen characteristics and meat quality properties 性状 Trait DL WHP CL NY SF SOD MDA TC -.6**.71** -.75**.*.6**.5** -.52** SC.6** -.76**.79** ** -.61** IC -.57**.66** -.69** * -.6** CS.5** -.69**.7** -.* -.2*.2* -.66** * P<.5 ** P<.1 分别呈显著的正相关 现交链或断裂 导致细胞结构和功能的破坏 [16] 过氧化产 3 讨论 物 MDA 等对膜的流动性 交叉联结 结构功能等都会带来 胶原蛋白分子含有大量甘氨酸 脯氨酸和羟脯氨酸 不 不利影响 导致膜的孔隙扩大 通透性增加 细胞脆性增加 含胱氨酸和色氨酸 是构成肌肉结缔组织的主要成分 其溶 从而使细胞内水分易于渗出 表现出肌肉滴水损失和烹饪损 解度主要决定于胶原蛋白分子间的交联程度 本研究通过 失增加 系水率和拿破率降低的肉质特性 Hernandez 等 [18] 对莱芜猪 鲁莱黑猪和大约克夏猪的研究 显示莱芜猪胶原 研究了 5 个猪种肌肉中抗氧化酶的活性 结果表明 SOD 活 蛋白的 SC 和 CS 明显低于鲁莱黑猪和大约克夏猪 由此可 性在品种间差异较大 本研究结果表明 相同贮存时间的莱 以得出莱芜猪肌肉胶原蛋白分子间的交联程度显著低于鲁 芜猪肌肉 SOD 活性显著高于大约克夏猪肌肉 SOD 活性 说 莱黑猪和大约克夏猪 莱芜猪肌肉胶原蛋白含量有随体重 明莱芜猪肌肉抗氧化能力高于大约克夏猪 其肉品的货架期 的增加而增大 但其溶解度则随之降低的趋势 [9] Bailey 可能相应的会长于大约克夏猪 [2] 等 [17] 的研究表明胶原蛋白分子间交联的增减是肉质发生变 肌肉胶原蛋白含量越多 溶解度越低 其系水力越强但 化的主要诱发因素 由此可见 肌肉胶原蛋白溶解度的测定 肉质越粗老 [9] 本研究表明 肌肉系水力以及肌肉的剪切力 可以间接的体现肉质特性 可作为肉质评价的一种方法 值与肌肉胶原蛋白含量及其性质存在不同程度的显著相关 肌肉的系水力的高低不仅对肉品的食用品质和技术品 结果与其一致 Warriss[2] 认为 胶原结缔组织形成类似膜 质有较大影响 而且还影响着肉品的贮存和所有的加工过程 鞘的结构 这种膜鞘结构的数量和完整性很大程度上决定了 本研究结果表明 不同品种间的肉质特性变化比较规 肌肉的系水力和嫩度 Smith 等 [19] 认为肌肉细胞外基质中 律 从莱芜猪 鲁莱黑猪到大约克夏猪 肌肉滴水损失 失 主要有 I 型和 III 型胶原蛋白组成 其分子的架桥分为羟赖 水率和烹饪损失逐渐增加 并呈现出显著 P<.5 或极 氨酰吡啶盐组成的架桥和吡啶架桥 吡啶架桥具有较强的热 显著差异 P<.1 动物宰后肌肉成熟过程中 机体代谢 稳定性和化学稳定性 肉的嫩度随动物年龄的增加而下降 所产生的氧自由基会受到 SOD 清除能力的限制而产生过剩 不仅仅是由于肌肉胶原蛋白含量的增加引起的 还可能与胶 从而使生物膜中 PUFA 等生物大分子发生过氧化反应而出 原蛋白的吡啶架桥数的增多密切相关 此外 肌肉的嫩度也 [2, 3] 2

245 与肌肉中蛋白酶的氧化有关 [2] SOD 作为抗氧化剂 可通 on beef collagen characteristics and palatability[j]. Journal 过抑制氧化而提高宰后肌肉中蛋白质降解酶及其它蛋白质 of Animal Science, 1981, 53: 水解酶的活性 提高肌肉嫩度 本研究对莱芜猪 鲁莱黑猪 [9] 曾勇庆, 王根林, 魏述东, 等. 莱芜猪肌肉胶原蛋白的发 和大约克夏猪肌肉胶原蛋白特性 抗氧化性能及其与肉质性 育性变化及其与肉质的相关性分析 [J]. 中国农业科学, 28, 状关系的研究结果进一步证实了这种关系的存在 1(2): 致谢 本研究在试验猪屠宰和肉质性状测定中 得到安 [1] 曾勇庆, 孙玉民, 张万福, 等. 莱芜猪肌肉组织学特性与肉 徽农业大学张伟力教授 南京农业大学王林云教授 东北农 质关系的研究 [J]. 畜牧兽医学报, 1998, 29(6): 业大学陈润生教授 中国农业大学陈清明教授 扬州大学经 [11] 刘永祥, 刘艳丽, 黄炎坤, 等. 日粮中添加天门冬氨酸镁对 荣斌教授的现场指导 在此表示诚挚的感谢 肉仔鸡肝脏和腿肌脂质过氧化状态的影响 [J]. 畜牧兽医学报, 28, 39(1): 参考文献 [1] Anderson HJ. What is pork quality[a]. In: Quality [12] 曾勇庆, 王根林, 魏述东, 等. 含不同比例莱芜猪血缘杂交 猪胴体品质及肉质特性的研究 [J]. 遗传, 25, 27(1): of meat and fat in pigs as affected by genetic and [13] 张伟力. 猪肉系水力测定方法 [J]. 养猪, 22, (3): nutrition[c]. EAAP Publication, 2, 1: [1] 杨海玲, 曾勇庆, 魏述东, 等. 莱芜猪肌肉脂肪酸组成的 [2] Warriss PD. Meat Science: An Introductory Text[M]. Oxon, U. K: CABI Publishing, 2: 1-3, 55-56, [3] Lawrie RA. Meat Science[M]. 6th edition, Oxford, U. K: Pergamon Press, 22: [] Crouse JD, Cross HR, Seideman SC. Effects of sex condition, genotype, diet and electrical stimulation on the collagen content and palatability of two bovine muscles[j]. Journal of Animal Science, 1985, 6: [5] P r o s t E, P e l c z y n s k a E, K o t u l a A W. Q u a l i t y 发育性变化及其对肉质特性的影响 [J]. 中国畜牧杂志, 26, 2(5): [15] 曾勇庆, 王 慧. 猪肉中羟脯氨酸的分光光度法测定 [J]. 山东 农业大学学报, 2, 31(1): [16] 杨明升, 刘红林, 王林云. 导致猪肉系水力下降的主要因素 及防制措施 [J]. 畜牧与兽医, 22, 3(7): 1-15 [17] Bailey AJ, Paul RG, Knott L. Mechanisms of maturation and ageing of collagen[j]. Mechanisms of Ageing and Development, 1998, 16: 1-56 characteristics of bovine meat. 1. Content of connective [18] Hernandez P, Zomeno L, Arino B, et al. Antioxidant, tissue in relation to individual muscles, age and sex of lipolytic and proteolytic enzyme activities in pork meat animals and carcass quality grades[j]. Journal of Animal from different genotypes[j]. Meat Science, 2, 66(3): Science, 1975, 1: [6] Crouse JD, Calkins CR, Seideman SC. The effects of rate [19] Smith SH, West L. Relationship between pyridinoline of change in body weight on tissue development and meat concentration and thermal stability of bovine intramuscular quality of youthful bulls[j]. Journal of Animal Science, collagen[j]. Journal of Animal Science, 1991, 69(5): , 63: [7] S e i d e m a n S C. M e t h o d s o f e x p r e s s i n g c o l l a g e n [2] Rowe LJ, Maddock KP, Lonergan SM, et al. Oxidative characteristics and their relationship to meat tenderness environments decrease tenderization of beef steaks through and muscle fiber types[j]. Journal of Food Science, 1986, inactivation of µ-calpain[j]. Journal of Animal Science, 51: , 82: [8] Wu JJ, Kastner CL, Hunt MC, et al. Nutritional effects 21

246 利用体细胞核移植技术生产优秀公猪 薛振华 1 肖 炜 1* 罗学明 2 潘登科 2 1. 北京市畜牧兽医总站 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 19 摘 要 利用体细胞核移植技术大量复制优秀种公猪 用于种猪的实际生产 精选优秀种公猪作为供体 取其 耳组织细胞作核供体 体外成熟的猪卵母细胞为核受体构建克隆胚胎 胚胎体外培养后进行移植 先后移植 了337枚1 细胞期克隆胚胎到18头受体母猪的输卵管内 28 d B超检测16头受体母猪妊娠(88.89%) 11头妊 娠足月(68.75%) 分娩产下53头仔猪 体细胞克隆猪的生产效率为2.8%(出生仔猪/移植胚胎) 早期生长 性状测定结果显示 d和7 d时克隆猪的体重和体尺与普通公猪无显著差异(p.5) 利用体细胞核移植技 术生产克隆种公猪 可以延伸种公猪的利用时间和空间 放大优秀种猪的利用价值 关键词 体细胞核移植 胚胎移植 克隆 种公猪 表 1 供体种公猪选择标准 应用体细胞克隆技术 即使没有遗传材料 也能生产优 秀种猪 更重要的是可以使优良个体得以复制 扩大其利用 范围 整体上加快我国养猪业的发展 而且 猪的体细胞克 隆技术在猪肉品质改良和人类异种器官移植上也有着巨大 选择项目 父系指数 的应用前景 猪的体细胞克隆相对于牛 羊等家畜难度较大 直到 2 年才获得世界首例体细胞克隆猪 [1] 截止到目前 1 kg 体重校正日龄 生产克隆猪的总效率不到 1%[2] 直接导致了制作克隆猪的 成本高 严重束缚着应用推广 所以 科研人员不断优化和 改进技术来提高克隆效率 进而为推广应用克隆猪扫除障 1 kg 体重校正背膘厚 碍 我国已掌握克隆猪的制作方法 [3] 但在生产和应用克隆 猪 以及安全性评价方面还处于起步阶段 [,5] 本研究旨在 月生产合格精液 品种 大白 杜洛克 标 准 13 大白 15 d 杜洛克 155 d 大白 11 mm 杜洛克 12 mm 大白 杜洛克 1 头份 将体细胞核移植技术用于实际生产 复制优秀种公猪 为我 国克隆猪的生产和应用提供技术支持 1 材料方法 1.2 卵母细胞体外成熟 从屠宰场采集初情期前母猪卵巢 放入含青 链霉素 除特别注明外 所有化学试剂均购自 Sigma 公司 细 的 35 生理盐水中 2 h 内运回实验室 用配有 18 号针头 胞培养相关耗材为 BD Falcon 产品 卵母细胞体外成熟以 的 1 ml 注射器抽吸卵巢上 3 6 mm 的卵泡 体视镜下 及胚胎培养耗材为 Nunc 公司产品 挑选卵丘包裹 3 层以上 致密 胞质均匀的卵丘细胞 - 卵 1.1 供体选择及其供体细胞系的建立 母细胞复合体 (cumulus-oocyte- complexes, COCs) 卵母 依据北京市 28 年种猪遗传评估报告 结合种公猪 细胞体外成熟液 (IVM 液 ) 为 NCSU-23 添加 1 猪卵泡液 精液实际生产情况 以父系指数 达 1 kg 体重日龄 达 (pff).57 mmol/l 半胱氨酸 1 ng/ml 表皮生长因子 1 kg 体重背膘厚和平均每月生产合格精液数量 个生产 (EGF) 1 IU/mL 人 绒 毛 膜 促 性 腺 激 素 (hcg) 和 1 IU/ 性能指标为依据 制定大白猪和杜洛克 2 个品种的种公猪选 ml 孕 马 血 清 促 性 腺 激 素 (ecg) 培 养 条 件 为 38.5 择标准 表 1 5 CO2 饱和湿度的环境 将 COCs 先在 IVM 液中培养 无菌操作取所选供体猪的耳部组织 采用常规组织块接 (2±2) h 之后转移到无 hcg ecg 的 IVM 液中继续培 种培养 建立细胞系 原代细胞用 DMEM 添加 2 胎牛血 养 (2±2) h 在 IVM 中 h 后 将 COCs 转移到含 清贴壁培养 传代细胞用 DMEM 添加 1 胎牛血清培养 1 mg/ml 透明质酸酶中脱去卵丘细胞 挑选排出第一极体 培养条件为 37 5 CO2 饱和湿度的环境 细胞在体外 卵黄膜完整 卵周隙清晰 胞质均匀的 M Ⅱ卵母细胞为核 经 3 5 次传代用于核移植 受体 [6] 22

247 1.3 体细胞核移植制作克隆胚胎 色体的荧光标记的微卫星引物 (SW2,SW72,SW857,SW1 采 用 显 微 操 作 结 合 spindle-view 系 统 去 核 和 电 融 合 22,S7,S226) 对上述基因组进行 PCR 扩增 PCR 扩 法进行体细胞核移植 简单过程如下 显微操作液为添 增 产 物 在 ABI 377 全 自 动 测 序 仪 上 进 行 电 泳 以 软 件 加 7.5 μg/ml 细 胞 松 弛 素 B(CB) 的 HEPES 缓 冲 的 无 钙 Genescan3.1 对电泳结果进行基因型分析 NCSU-23 在 spindle- view 系 统 下 去 除 M Ⅱ 卵 的 纺 锤 1.6 早期生长性状测定 体及第一极体 选取一个体细胞注射到透明带下 并使之 在克隆猪出生 d 时和出生 7 d 时 对克隆公猪和普通 与卵母细胞质膜紧密接触 用 ECM21 融合仪 (BTX) 施 公猪进行生长性状的测定 测量项目包括体重 体长 体高 加 1 DC 2. kv/cm 3 μs 的直流电脉冲诱导融合并同 和胸围 时激活 融合 / 激活液为.28 mol/l 甘露醇.1 mmol/ 1.7 数据处理 L CaCl2.1 mmol/l MgCl2.5 mmol/l 的 HEPES 及 应用 SPSS 13. 软件 采用 χ2 确切概率法检验 28 d.1 PVA 组成. 融合的重构胚放入含 1 μg/ml CB 和 妊娠率 妊娠足月率和克隆生产效率 对生长性状的测定值 1 μg/ml 放线菌酮 (Cyclohexmide, CHX) 的胚胎培养液 进行 t 检验和单因素方差分析 PZM-3 溶液中进行 2 次激活处理 h 最后转入胚胎培养 2 液 PZM-3 内培养 体外发育到囊胚或进行早期移植 2.1 供体种公猪选择和细胞系建立情况 1. 胚胎移植和妊娠检测 结果 共选择出符合标准的优秀种公猪 6 头作为供体 如表 2 克隆胚胎体外培养 1 2 d 后 挑选形态和发育较好的 所示 成功建立耳组织细胞系 5 个 其中 大白猪细胞系 3 个 胚胎进行移植 自然发情第 1 d 或第 2 d 的母猪用作受体 ( 以 杜洛克细胞系 2 头 并建立个体信息档案 出现压背静立反射为发情的第 d) 移植方法为手术法输卵 2.2 克隆胚胎的体内发育 管深部移植 胚胎移植后 28 d 进行超声波妊娠检测 妊 如表 3 所示 共向 18 头受体移植克隆胚胎 337 枚 妊 娠母猪每月超声波检测一次 跟踪胎儿发育情况 调整饲养 娠受体接受的克隆胚胎全部来自 1# 5# 和 6#3 个供体 管理 直至克隆猪出生 细胞系 情期受胎率 (28 d 妊娠率 ) 为 88.89% 妊娠分娩率 1.5 微卫星 DNA 分析 为 68.75% 共产仔 53 头 当选择经产母猪作为受体时 情 应用微卫星 DNA 分析法检测体细胞克隆猪的基因型是 期受胎率 妊娠分娩率和克隆生产效率分别 92.31% 75% 否与供体细胞一致 DNA 样品来源于供体细胞系 6 头克 和 2.91% 与选用后备母猪作为受体时的 8.% 5.% 和 隆猪和 3 头代孕母猪的耳部组织 选取 6 对分布于不同染 2.26% 均无显著差异 (P.5) 在分娩的 11 头受体中 表 2 供体种公猪的性能指标和细胞系建立 1 kg 体重校正 1 kg 体重校正 日龄 (d) 背膘厚 (mm) 生产合格精液 份 / 月 细胞建系情况 * / 英系大白 # 英系大白 # 台系杜洛克 # 美系杜洛克 供体编号 品种品系 1# 美系大白 13 2# 英系大白 3# 注 * 细胞系建系情况 / 为建系成功 为建系失败 表 3 克隆胚胎移植后的体内发育 受体状况 移植受体数量 移植克隆胚胎数 产仔数 % 产仔 28d 妊娠数 % 妊娠足月数 % 头 量 枚 数 / 移植胚胎数 经产母猪 后备母猪 / /31 23

248 2. 克隆猪早期的生长性状 由表 5 可知 在出生 d 时和出生 7 d 时 克隆仔猪的 体重 体长 体高和胸围均与普通仔猪的测量结果无显著差 异 (P.5) 本研究移植了 337 枚 1 细胞期克隆胚胎到 18 头受 体母猪的输卵管内 28 d 时 B 超检测 16 头受体母猪妊娠 图 1 以供体耳组织细胞为核供体获得的克隆猪 A 为最早一窝 产下 5 头克隆猪 B 为最多一窝 产下 11 头 克隆猪 11 头妊娠足月并分娩 产仔 53 头 体细胞克隆猪的生产效 最早的胎次产仔 5 头 图 1.A 最多的胎次产仔 11 头 图 生产胚胎质量的有效途径之一 前期研究认为 [7] 体细胞克 1.B 隆猪胚胎在受体母猪排卵前进行胚胎移植可使体细胞克隆 2.3 微卫星分析鉴定 猪胚胎适应输卵管和子宫的环境 增加其受孕率 最佳时期 率为 2.8% ( 出生仔猪 / 移植胚胎 ) 超过了公认 1% 胚胎移植是生产克隆种公猪的关键环节 也是检测体外 所产后代全部来自 1# 5# 和 6# 细胞系 微卫星鉴 是受体母猪卵泡发育处于即将排卵时进行胚胎移植 排卵后 定结果如表 所示 6 对微卫星 DNA 分析证实 抽测的 6 的受体母猪不适合作为培养 1 2 d 胚胎的移植受体 本研 头 克 隆 猪 究按此思路进行胚胎移植 受体的情期受胎率 28 d 妊娠 3-1 和供体细胞系的基因型一致 而与代孕母猪 受体 a 率 为 88.89% 妊娠分娩率为 68.75% Petersen 等 [8] 采 b c 无相关性 说明克隆猪的遗传物质来自供体细胞 用体细胞克隆猪胚胎的发育程度与受体母猪的排卵状况不 按照国家标准 产品质量监督小总体计数一次抽样检验 同步时 ( 移植后 2 h 排卵 ) 进行胚胎移植 12 头受体母猪 程序及抽样表 (GB/T ) 随机抽取 6 头仔猪证 25d 的妊娠率为 75% 妊娠足月率为 75% Harrison 等人 [9] 实全部为克隆猪 可间接证实抽样总体 53 头仔猪全部为克 采取受体母猪的发情比胚胎迟 1 d 的胚胎移植方案 1 头 隆猪 受体母猪 头妊娠足月 (%) 并产仔 18 头 当选择经产母 表 微卫星位点检测 位点 SW2 SW72 SW857 SW122 S7 S226 1# 供体细胞 96/115 98/98 18/15 11/ / / /115 98/98 17/15 19/ / / /115 98/98 18/15 11/ / / /115 98/98 18/15 11/ / /19 受体 b 96/115 16/18 13/17 11/115 27/ /19 5# 供体细胞 9/18 98/18 15/15 11/ /29 18/ /18 98/18 15/15 11/ /29 18/ /19 98/18 15/15 11/ /29 18/19 受体 a 115/115 98/1 13/13 19/19 293/293 19/2 6# 供体细胞 9/18 98/11 15/15 115/ /285 18/ /19 98/11 15/15 115/ /285 18/19 受体 c 19/115 98/16 139/ / / /19 样品 表 5 克隆公猪 d 和 7 d 的生长性状测定 试验对象 体重 kg d 7d 体长 (cm) d 体高 (cm) 7d d 胸围 (cm) 7d d 7d 克隆公猪 1.22± ± ± ± ±.5 2.3± ± ±1.32 普通公猪 1.3±.8 2.± ± ± ± ± ± ±1.62 注 d 时 克隆公猪 n=16 普通公猪 n=17 7 d 时 克隆公猪 n=5 普通公猪 n=9. P.5 2

249 猪作为受体时 情期受胎率和妊娠分娩率分别 92.31% 为和 科学通报 % 明显优于以上研究 原因可能是将受体母猪卵泡发育 [] Scientific Opinion of the Scientific Committee Food 状况作为判断体细胞克隆胚胎移植时机的标准 可以较准确 Safety, Animal Health and Welfare and Environmental 找出输卵管和子宫的环境适应体细胞克隆猪胚胎移植的最 Impact of Animals derived from Cloning by Somatic Cell 佳时机 本研究中 由于选择后备母猪做受体的数量较少 Nucleus Transfer (SCNT) and their Offspring and Products 使统计学分析显示与选择经产母猪时的情期受胎率 妊娠分 Obtained from those Animals (Question No EFSA-Q 娩率和克隆生产效率均无显著差异 但要注意 选择使用经 ),Adopted on 15 July 28.The EFSA Journal 产母猪时 各项统计指标的绝对值均大于选用后备母猪 所 (28) 以在实际生产中建议使用经产母猪 以获得较高的情期受胎 [5] Animal Cloning: A Draft Risk Assessment Center for 率 妊娠分娩率和克隆生产效率 并且会在产后哺育方面和 Veterinary Medicine U. S. Food and Drug Administration 提高仔猪成活率上较有优势 Department of Health and Human Services 75 Standish 针对克隆猪出生后早期的个体发育研究报道较少 本研 Place Rockville, 26. 究测定比较了克隆公猪和普通公猪分别在 d 和 7 d 时的体 [6] 张 运 海 潘 登 科 孙 秀 柱 等. 利 用 体 细 胞 核 移 植 技 术 生 重 体长 体高和胸围 发现二者并无显著差异 Mir 等 [1] 产表达绿色荧光蛋白的猪转基因克隆胚胎 [J ]. 中国科学 C 分别对 5 只克隆母猪及其后代 在 15 周龄和 27 周龄时的体 辑,25,35 (5) : 重和血液进行了检测 结果显示 与对照组正常猪的体重和 血液指标相比 均无显著差异 本研究的研究结果与 Mir 等 [1] 的结论基本一致 同时也丰富了克隆猪出生早期个体发育方 面的资料 [7] 潘登科 张莉 周艳容 等. 体细胞核移植生产转 ω-3 脂肪 酸去饱和酶基因 sfat-1 克隆猪 [J ]. 中国科学 C 辑 : 生命科 学, 29, 39(3): [8] Petersen B, Lucas-Hahn A, Oropeza M, et al. 本研究将体细胞核移植技术用于实际生产 通过选择优 Development and validation of a highly efficient protocol 秀供体 胚胎移植时机和受体母猪 建立了制作克隆猪的技 of porcine somatic cloning using preovulatory embryo 术平台 为我国生产克隆种公猪奠定基础并提供技术支持 transfer in peripubertal gilts[j ]. Cloning Stem Cells, 28, 参考文献 1(3): [1] Polejaeva I A, Chen S H, Vaught T D, et al. Cloned [9] Harrison S, Boquest A, Grupen C, et al. An efficient pigs produced by nuclear transfer from adult somatic method for producing alpha (1,3)- galactosyl transferase cells[j]. Nature, 2, 7: gene knock out pigs[j ]. Cloning Stem Cells, 2, 6: [2] Martinez Diaz M A, Suzuki M, Kagawa M, et al. Effects of cycloheximide treatment on in-vitro development of [1] Bashir M, Gretchen Z, Greg S, et al. Progeny of porcine parthenotes and somatic cell nuclear transfer Somatic Cell Nuclear Transfer (SCNT) Pig Clones Are embryos[j]. Jpn J Vet Res, 23, 5(): Phenotypically Similar to Non-Cloned Pigs[J ]. Cloning [3] 潘登科 张运海 孙秀柱 等. 低氧培养早期胚胎克隆小型猪 [J]. Stem Cells, 25, 7:

250 猪生长和背膘厚相关基因的 多基因标记遗传效应研究 韩雪蕾 杨华威 蒋腾飞 王维民 殷勤 刘榜 华中农业大学动物分子生物学与育种实验室 农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 武汉 37 摘 要 在大白猪试验群体中采用PCR-RFLP方法检测IGF2 MCR TEF-1 JHDM1A四个基因的单核苷酸多态位 点 运用SPSS方法对单基因标记和多基因标记与生长和背膘厚性状之间关联性 单基因标记分析结果显示 IGF2与1kg腰荐结合处背膘厚显著关联 P<.5 AA型为优势基因型 比AG和GG基因型薄.51和.629cm MCR的基因型与生长和背膘厚性状无显著关联 JHDM1A与1kg腰荐结合处背膘厚显著关联 P <.5 CC 型为优势基因型 分别比GG和GC基因型背膘薄.52和.89cm TEF-1与1kg腰荐结合处背膘厚趋于显著关 联.5< P <.1 GG基因型背膘厚分别比AA和AG基因型薄.973和.379cm 且与达1kg日龄显著关联 P <.5 AG为优势基因型 分别比AA和GG基因型短.5和2.258天 通过对个基因的多基因标记效应进行分 析发现 多基因标记的遗传效应与单基因标记相一致 对于1kg腰荐结合处背膘厚性状IGF2 TEF-1和JHDM1A 基因多态位点合并基因型AGCCGG和AACCGG为优势基因型组合 可以作为分子标记在育种中应用 引言 和小鼠的心肌和骨骼肌中高表达 缺失后可以导致心脏缺失 生长速度是猪的主要选育目标之一 但随着人们生活 和胚胎致死 [6] TEF-1 的 TEA 结构域能与肌肉特异基因的 水平的不断提高 对背膘厚和肌肉品质方面提出了更高的 M-CAT 元件作用调节其他的肌肉基因的表达 [7] Xu 等将 要求 同时标记辅助选择在育种中的应用也加快了对目标 猪 TEF-1 基因位于 SSC12p13.2-p13.3 在 5 UTR 区发 性状的选择 但是生物机体的性状或功能都是由不同层次 现 G93A 突变位点 研究发现其与平均日增重 腰部背膘厚 的多个基因控制 是一个由多个基因及其产物调控的网络 平均背膘厚和眼肌面积呈显著相关 [8] 通过对以上四个候选 多基因标记效应的研究和及其在育种中的应用可以加快目 基因的多态位点进行单基因分子标记效应和多基因分子标 标性状的选择 进而提高选择效率 缩短世代间隔 IGF-2 记效应的分析 为标记辅助选择在猪育种中的应用提供一定 基因 在动物细胞的增殖 分化 细胞凋亡和转化中具有 的理论基础 重要作用 该基因定位于猪 2p17 其内含子 3 的 G372A 2 1 材料与方法 的单核苷酸突变位于高度保守的调控区域 影响 IGF2 在骨 试验材料 本研究中用于基因性状关联的群体为湖北天 骼肌中的表达水平 是影响肌肉生长和背膘厚性状的致因 种畜牧股份有限公司大白种猪 共 235 头 采集试验群体 突变 MCR 基因 是 G- 蛋白偶联受体超家族的成员 血样 带回实验室后采用酚仿抽提方法提取基因组 DNA - 在哺乳动物中 MCR 在体重 能量稳态和采食量的调控 2 保存备用 试验群体主要测量的性状有 达 1 kg 体 中发挥重要作用 猪 MCR 基因定位于 SCC1q22-27 在 重日龄 g/day 1 kg 肩胛骨后部膘厚 SBF 1 kg [1] 第 7 跨膜结构功能域的一个高度保守区内的 G/A 突变导致 Asn 298Asp 错义突变 与猪的背膘厚 生长速率和采食量 呈显著关联 [2,3] JHDM1A 基因 是编码 JHDM1 蛋白基因 最 后 肋 骨 处 背 膘 厚 LBF 1 kg 腰 荐 结 合 处 背 膘 厚 LJBF 三点平均背膘厚 ABF 试 验 方 法 根 据 参 考 文 献 和 网 上 提 交 的 序 列 运 家族其中的成员之一 含有 F-box 和 CXXC 锌指已知的功 用 Primer Primer 5. 软 件 设 计 引 物 IGF2 MCR 能域 参与细胞周期调控和 DNA 的甲基化 JHDM1A EU66198 和 TEF-1 EU 采用常规 [, 5] 彭勇波等 研究发现该基因位于 2q17 该区域存在有与日增重和背膘 的 PCR-RFLP 方法检测候选基因的基因型 厚相关的 QTL 在 3 UTR 区第 2 位碱基发现 G/C 突变 数据统计分析方法 采用 SPSS 13. 软件中的广义线 位点与出生至上市日增重 臀部背膘厚和三点平均背膘厚 性模型 General Linear Model 程序来完成的 首先建立 呈显著相关 TEF-1 基因 是一个重要的转录因子 在人 Yij=μ+ FLESHLESSi+ SEXj+ (FS)ij +εij 的 分 析 模 型 以 消 26

251 除性别 猪场对性状的影响 其中 FLESHLESSi 是场次效 基因间互作较小 在三基因聚合中 因客观条件 样本数量 应 SEXj 是性别效应 应用这个模型对于所分析的每个性 有限 该结果需扩大群体做进一步验证 但从目前结果表明 状都获得了一个新的性状值 即标准化的残差值 然后将所 对试验群体 1 kg 腰荐结合处背膘厚性状来说 单基因标 获得残差值作为新的性状值 再建立如下的分析模型 记与多基因标记基因型的遗传效应相一致 单基因分析模型 Yi μ GENOTYPEi εi 讨论 多基因分析模型 Y=μ+TEF-1 基因效应 +JHDM1A 分子标记辅助选择是利用重要经济性状的主基因或与 基因效应 +IGF2 基因效应 + TEF-1*JHDM1A 基因间互作 QTL 连锁的 DNA 标记来改良畜禽经济性状的现代选种技 效 应 + TEF-1* IGF2 基 因 间 互 作 效 应 + JHDM1A* IGF2 术 它综合利用了 DNA 标记信息 个体表型信息和系谱信 基因间互作效应 + TEF-1*JHDM1A* IGF2 基因间互作效 息 是分子生物技术与传统育种技术的结合 其主要作用是 应 + 随机残差效应 通过监测 DNA 标记来改变性状受控基因的频率 从而对以 3 表型值或育种值为基础的常规选择进行补充或替代 PIC 是 结果 3.1 单基因效应 最早开展标记辅助育种的猪育种公司 其所利用的标记辅助 对 MCR JHDM1A TEF-1 和 IGF2 个 基 因 的 多 选择达几十个之多 并在育种工作中取得了显著的成果 且 态位点进行单基因效应分析 对于 IGF2 基因 与 1 kg 始终在猪育种工作中保持领先地位 随着基因组研究的迅速 腰荐结合处背膘厚显著关联 P<.5 AA 基因型为优势 发展 大量的分子标记应用的畜禽育种中 近期在猪育种 基因型 且与 AA BB 基因型差异显著 比 AG 和 GG 基 所用的标记基因增加到 28 个 正在开发的 DNA 标记有 因型背膘厚薄.51 cm 和.629 cm MCR 基因的基因型 个 本研究通过对 IGF2 MCR JHDM1A 和 TEF-1 基 与生长和背膘厚性状无显著相关 对于 JHDM1A 基因 与 因的分子标记在大白猪群体中进行检测和分析 结果发现对 1 kg 腰荐结合处背膘厚显著关联 P<.5 CC 基因型 候选基因进行单基因标记效应分析和多基因标记效应分析 为优势基因型 分别比 GG 和 GC 基因型背膘薄.52 cm 时 结果基本一致 且与前人报道的研究结果相一致 Kim 和.89 cm 对于 TEF-1 基因 TEF-1 与 1 kg 腰荐结 等在数个猪品系中研究猪 MCR 基因此位点证实与猪背膘 合处背膘厚趋于显著关联.5<P<.1 GG 基因型背膘 厚 生长率和采食量相关 显示 AA 基因型背膘比 BB 型 厚分别比 AA 和 AG 基因型薄.973 cm 和.379 cm 且与 薄 9%[3] 虞德兵等研究发现 A 等位基因为优势等位基因 1 kg 体重日龄显著关联 P<.5 AG 基因型为优势基 IGF2 主要以显性作用方式发挥作用 在本大白猪群体中研 因型 分别比 AA 和 GG 基因型短.5 天和 天 究发现 JHDM1A 基因的优势基因型为 CC 与彭勇波等报 3.2 多基因效应 道的结果不一致 基因的效应受很多因素的影响 尤其是遗 通 过 对 单 基 因 效 应 分 析 发 现 IGF2 JHDM1A 和 传背景的影响 在某个品种中影响显著的的主效基因 在另 TEF-1 基 因 均 与 1 kg 腰 荐 结 合 处 背 膘 厚 呈 显 著 关 联 外一个群体中不一定会表现出不相同的作用 具体有待于进 MCR 基因与 1 kg 最后肋骨处背膘厚呈显著相关 与 一步的分析 本研究在大白群体中发现 IGF2 JHDM1A 和 1 kg 腰荐结合处背膘厚未达显著水平 P>.5 故用 TEF-1 基因对猪 1 kg 腰荐结合处背膘厚性状呈显著关联 多因素有互作模型方差分析三个候选基因对 1 kg 腰荐结 当单基因标记分析时 优良基因型分别为 AA CC 和 GG 合处背膘厚的影响 因此在进行多基因标记效应分析时 只 多基因标记分析时 AACCGG 合并基因型也为优势基因型 选用了 IGF2 JHDM1A 和 TEF-1 三个基因 分析不同的 因此这些标记可用于在本试验大白猪群体中对 1 kg 腰荐 合并基因型对大白猪群体生长和背膘厚性状的影响 在对 结合处背膘厚性状的选择 对于生长性状 在试验群体中只 两个基因标记合并基因型效应的分析中 JHDM1A 和 IGF2 有 TEF-1 基因与达 1 kg 日龄呈显著关联 其他候选基 基因组合中 CCAA 合并基因型的背膘厚表型值最薄 IGF2 因未表现出显著关联效应 需要选择更加有效的标记基因进 和 TEF-1 组合中 AGGG 合并基因型最薄 且 AAGG 合并 行多基因标记选择 随着猪基因组测序的完成及生物信息学 基因型的表型值与 AGGG 合并基因型的表型值差异不显著 的快速发展 数据库的种类和信息量与日俱增 猪的基因功 JHDM1A 和 TEF-1 基因合并基因型效应分析中 CCGG 能将会逐渐被揭示 这将会为猪生长发育规律 生殖与抗病 合并基因型背膘厚最薄 从分析结果可以看出 两个基因标 机理的揭示奠定基础 从而将为猪的分子育种提供更多的可 记效应与单基因效应分析结果一致 在对三基因合并基因型 用分子标记 的效应分析中 AGCCGG 和 AACCGG 为三个基因标记合 并后背膘厚优良基因型 同样与单基因效应分析结果一致 由于猪基因组计划的完成及序列的逐步释放 通过获得 微卫星序列便可得知基因间的准确距离 确定其连锁程度 27

252 其次在阐明单个性状 单个基因的遗传规律上的前提下 通 receopter(mcr) gene. Journal of Animal Science, 27, 过杂交方式 打破不利基因原有的连锁不平衡 将有利标 8: 志基因型聚合在同源染色体上 形成稳定连锁的聚合基因 [3] Kim K S, Larsen N, Short T, Plastow G, Rothschild 型 从而完成多个优良性状的聚合 随后 我们将通过对 M F. A missense variant of the porcine melanocortin- 试验群体的后代的表型数据和基因标记的多态性做进一步 receptor (MCR) gene is associated with fatness, growth 研究 以深入了解这些基因的功能与及多基因标记的连锁, and feed intake traits. Mammalian Genome, 2, 11: 情况 当然随着猪基因组测序的完成 用于分子育种标记 的基因将逐步增多 同时随着基因功能的深入研究 并借 [] Bai C, Sen P, Hofmann K, Ma L, Goebl M, Harper J W, 鉴植物育种中基因聚合的经验 在猪等动物聚合育种的方 Elledge S J. SKP1 connects cell cycle regulators to the 法正在逐步的走向成熟 实现优良基因的聚合并不遥远 ubiquitin proteolysis machinery through a novel motif, 5 the F-box. Cell, 1996, 86(2): 结论 通过在试验群体对 IGF2 MCR TEF-1 和 JHDM1A [5] Lee H, Habas R, Abate-Shen C. MSX1 cooperates 四个候选基因的单基因效应和多基因互作效应分析 对于 with histone H1b for inhibition of transcription and 1 kg 腰荐结合处背膘厚性状 通过对 IGF2 TEF-1 和 myogenesis. Science, 2, 3(5677): JHDM1A 基因单基因标记和多基因标记效用进行分析发现 [6] Stewart A F, Larkin S B, Farrance I K, Mar J H, 单基因标记效应和多基因标记效应分析结果相一致 基因间 Hall D E, Ordahl C P. Muscle-enriched TEF-1 isoforms 互作效应不明显 通过对 IGF2 TEF-1 和 JHDM1A 基因 bind M-CAT elements from muscle-specific promoters 多基因分子标记效应的分析 说明其可以在育种中运用到对 and differentially activate transcription. The Journal of 猪背膘厚性状的选育过程中 Biological Chemistry, 199, 269: [7] Maeda T, Gupta M P, Stewart A F. TEF-1 and 参考文献 MEF2 transcription factors interact to regulate muscle- [1] Van Laere A S, Nguyen M, Braunschweig M, Nezer C, specific promoters. Biochemical and Biophysical Research Collette C, Moreau L, Archibald A L, Haley C S, Buys Communications, 22, 29: N, Tally M, Andersson G, Georges M, Andersson L. A [8] Xu X W, Xing S, Du Z Q, Rothschild M F, Yerle regulatory mutation in IGF2 causes a major QTL effect on M, Liu B. Porcine TEF1 and RTEF1: Molecular muscle growth in the pig. Nature, 23, 25(696): characterization and association analyses with growth [2] Kim K S, Larsen N J, Rothschild M F. Lingage and physical mapping of the porcine melanocortin- 28 traits. Comparative Biochemistry and Physiology, Part B, 28, 15: 7-53.

253 科学选留后备公猪 孙晓超 河南省谊发牧业有限责任公司 河南 鹤壁 猪场获取利益的第一推动力便是具有优秀的种公猪 可 做好母猪选配计划的前提 在制定配种计划的同时 应考虑 以说一个种猪场的好坏 便是看他有没有优秀的种公猪 俗 本场的选育改进侧重点 有的放矢的制定配种计划 话说 公猪好 好一坡 母猪好 好一窝 作为种猪场 特别是优秀种猪企业 后备公猪的选留便成为头等大事 而 单纯的通过外貌选留的时代 早已不符合育种技术飞速发展 的中国养猪业 众所周知 猪的性状是在其个体发展过程中 后备公猪选留 后备公猪选留可分为以下几个阶段.1 出生 同窝仔数低于 6 头 初生重 1.KG 以下 有明显外观缺 逐渐形成的 所以只有不断通过育种软件 采用科学的选种 陷 同窝内有遗传疾患 不予留种 同时应注意长白 大白 育种方法进行选留培育 才能真正逐渐提高公猪生产性能 奶头不低于 6 对 杜洛克不低于 5 对 且无瞎乳头 进一步提高本场生产成绩.2 去势 1 育种软件的使用 利用育种软件完成种猪登记 可根据动态数据管理种 猪 严格执行各项测定指标进行测定 并规范记录测定值 为种猪育种计算和遗传评估分析提供依据 主要进行生长性 能和繁殖性能测定和登记 结合实际生长繁育测定数据 进 行近交系数计算 BLUP 运算 遗传进展评估分析 为选种 每窝选留 2 头 有明显外观缺陷 不符合品种特征 产 仔少 生长慢 有遗传缺陷的不予选留.3 断奶 有明显外观缺陷 断奶重个体重低于 5KG 不予选留. 下保育前 要求 食欲旺盛 动作灵活 背毛光洁 生长快 没有 选配 后备选留提供技术平台 遗传疾患 进行仔细挑选 有明显外观缺陷 不符合品种特 2 核心群建立 征 生长速度慢不予选留 如果说种猪群育种是走的普通路 那么核心群的建立就.5 始测 是行驶的高速路 一些大型种猪场曾一度忽略了核心群和生 7 日龄始测体重低于 2KG 不予选留 有明显外观缺 产群的概念 忽略了核心群继代选育的作用 过分强调全 陷不予选留 群测定 择优选留 从而造成无论是公猪还是母猪独立血.6 结测 缘数目减少 群体近交系数增大 猪群整体质量提高困难 体重达 85-15Kg 称重 利用 B 超测活体背膘 眼肌 等问题 核心群应在全群测定及综合评定的基础上选择优 面积 秀个体进入 核心群的生产性能应高于生产群的平均水平.7 留种 并有较宽的血统及丰富的遗传基础 选择母系指数 父系 指数达到公司标准 公司标准根据本场实际情况制定 且 高产不超 3 胎优秀种母猪为核心群以加速时代更新 加快 利用育种软件计算综合育种值 结合体形外貌评定进行 选留 在对所有种猪进行测定完毕 对欲留后备公猪进行外貌 育种步伐 评定 采用多人评分制 评分内容为肢体 生殖器官 品种 3 配种计划制定 特征 体型 性欲 腹线 本厂改进点等 应根据本厂实际 根据系谱资料 种猪的体形及生产性能测定资料进行同 情况有所侧重的进行比分分配 质选配 以保证其后代的一致性 很多公司是仅看猪的体型 后备公猪的选择要重点突出生长速度快 背瞟薄 饲料 造配种计划 也有的公司只看育种软件的近交系数 父系指 转化率高和肢蹄结实等特征 并保证为核心群后代 选留要 数来制定 正确的制定方法应该是现场观看后备母猪及每批 求种公猪本品种特征明显 眼睛要有神 反应灵敏 步态矫 所断奶母猪 根据公猪血缘特点及使用情况合理的进行同质 健 健康活泼 性欲旺盛 背线平直或微弯 收腹好 前胸 选配 再通过育种软件进行筛选 以确定最佳公猪 同时 深宽 后躯发达 背臀肌肉丰满 四肢粗壮 后肢要直 蹄 在保种的基础上 准确细致的选择优质的核心群后备公猪是 质结实 无 X 型腿 O 型腿 镰刀腿 大小蹄 卧系 肉 29

254 飞节等 尾根要粗 尾尖卷曲 毛色正常 无卷曲 旋毛 据排名进行选留 不断使用此排名选择法 则将会按照本厂 奶头匀称 无瞎奶头 左右睾丸外露 稍下垂 大而明显对称 所制定的选育方向前进 通过坚持不懈的努力 一定会逐渐 切忌单睾或隐睾 包皮不能过大或积尿液 无任何疾病及外 接近预期结果 观遗传缺陷 5 在进行外貌评分后 再结合父系指数进行选留 不要过 小结 摈弃落后的选留方法 制定自己的选育目标 通过一套 多的选留某一头公猪的后代 因为一个种猪场核心群数量有 科学的选留模式 持续不断的选育 结果必然朝目标靠近 限 容易导致近交系数上升 某血缘确实优秀者 后代适当 在今后的育种道路上 继续追求高瘦肉率 高生长速度的同 多留 但也要靠结合种猪各世代的选育 逐步优化种群结构 时 还要把肉质作为育种方向 综合考虑各方面的内容 才 来实现选育提高 外貌评定结束的公猪要对预留血缘后代进 能培育出一流的种猪 通过坚持不断的种猪测定 采用科学 行父系指数计算 所选后代父系指数 11 以上 同时父系指 方法选留优秀的种公猪 才能不断的提高种猪的生产性能 数不能低于其父亲 母系指数采用平均母系不低于 1 为标 进一步提高本场种猪影响力 市场占有率 从而实现种猪场 准 根据本厂实际情况调整 结合外貌评分进行排序 根 最大的经济效益 25

255 ESR 基因在苏姜猪选育中的遗传变异及与 公猪繁殖性状的关联研究 王宵燕 经荣斌 宋成义 何庆玲 扬州大学动物科学与技术学院 摘 要 采用PCR-RFLP的方法对96头二至六世代苏姜猪的ESR基因PVUⅡ酶切位点多态性进行分析 并与公猪 的繁殖性能进行关联性分析 结果表明 ESR基因在苏姜猪二至六世代中B基因频率呈现出不断增加的趋势 基 因型BB在三世代开始出现并且频率呈现出上升的趋势 不同基因型的与配公母猪产仔数有显著差异 说明公 猪对产仔数有显著影响 在世代选育过程中应加强公猪的选择 关键词 ESR基因 苏姜猪 遗传变异 公猪 产仔数 产仔数是一个重要的经济性状 但遗传力很低 ( 约为 A 和 B 等位基因频率 多态信息含量 杂合.1) 分 子 标 记 辅 助 选 择 MAS 的 产 生 为 显 著 改 良 像 度计算见文献 [11] 产仔数这样的低遗传力性状提供了有效途径 雌激素受体 (Estrogen Receptor ESR) 基 因 是 Rothschild 等 (199 ESR 基因多态与繁殖性能的相关性分析 利用 SPSS 建立数据库 采用单因子方差分析不同基因 1996)[1-2] 通过 候选基因法证明是控制猪产仔性状的一个主 型产仔数 产活仔数及死仔数的影响 LSD 法检测差异显 效基因 并认为 Pvu Ⅱ酶切位点的一个有利基因 B 与高初 著性分析 生窝仔数相关联 此后 国内外学者对这一位点进行了大 2 量的研究 2.1 各世代 ESR 基因型及基因频率分布情况 [3-6] 大部分的研究结果认为 ESR 基因与猪产仔 结果与讨论 数显著相关 可以用于育种实践中改良猪的产仔数 此后 国内外学者对 ESR 基因的 PVU Ⅱ酶切位点进行了大 许多基因被研究人员证实与猪的繁殖性状相关 如 FSHβ 量的研究 [1-6] 大部分的研究证明该位点的多态性显著影响 OPN RBP 等 [7] 母猪的产仔数 但也有研究表明该位点与母猪繁殖性能之间 苏姜猪是以杜洛克猪 枫泾猪 姜曲海猪三个品种猪为 的相关性不高 [,6] 这可能与猪的品种 饲养水平 样本量 亲本进行选育 目前已进入六世代的选育阶段 自 23 年起 及环境不同造成 但通过前期研究表明 该位点与苏姜猪的 每个世代的育种群都检测 ESR 基因的多态性 并通过研究 繁殖性能显著相关 [1] 因此在苏姜猪的世代选育中每个世 证实 ESR 基因与苏姜猪繁殖性状紧密关联 [8] 但同时对生 代检测该基因位点 表 1 可以看出二世代中 ESR 基因的 BB 长性状及背膘厚具有一定影响 本研究分析了二到六世 型纯合子数量为 可能是因为二世代群体较小 且前期研 代的 ESR 基因多态性并利用已有的繁殖资料分析了公母猪 究表明 B 等位基因与生长有显著负效应 [11] 在选择过程中 不同的多态性之间的总产仔数 产活仔数和死胎数 以进 注重肉质和生长速度的选择会导致 BB 型纯合子被淘汰 而 一步探讨从 DNA 水平上为苏姜猪的选育工作提供先进的 三世代以后对种猪以繁殖和生长性能相结合来进行选择 结 技术手段 果出现 B 等位基因频率逐渐上升 各世代的苏姜猪 ESR 1 基因的 B 等位基因频率低于所报道的中国地方猪种 但高 [9] 材料与方法 1.1 实验材料 于外种猪 原因可能是苏姜猪含有一定血缘比例的杜洛克 取自姜堰市种猪场和江苏姜曲海种猪场 2-6 世代育种 姜曲海和枫泾猪 但对于培育猪种苏钟猪来讲 B 等位基因 群共 96 头苏姜猪的耳朵样 繁殖资料主要为总产仔数 产 频率偏低 [12] 可能是因为苏姜猪培育的重点是对其肉质的 活仔数和死胎数 选择 1.2 实验方法 由表格可以看出基因型 BB 个体从三世代开始出现 B 猪耳样 DNA 提取采取酚 / 氯仿抽提法 引物与 PCR 反应条件见参考文献 1.3 数据分析 [3 5] [1] ESR 基因 等位基因频率在逐渐增加 杂合度和多态性呈现出不断增加 的变化趋势 多态信息含量 杂合度都是衡量群体内遗传变 异大小的指标 PIC 高杂合度大 说明群体在该位点的遗传 251

256 表 1 ESR 基因型及基因频率分布表 世代 头数 N 二 基因型频率 等位基因频率 杂合度 PIC AA AB BB A B 三 四 五 六 著 p.5 高于其他基因型 因为样本量和组合的问题 表 2 公猪不同 ESR 基因型对产仔数的影响 AA AB BB N 总产仔数 9.18± ± ±1.76 产活仔数 8.66± ± ±3.52 死仔数.52±.99.67± ±3.21 总产仔数 产活仔数 产仔数的优势 产仔数属限性性状 以往的研究只注重于 ESR 与母猪 的繁殖性状的分析 [13] 而公猪对产仔数也具有一定的贡献 [1] 有研究表明同样条件下采用人工授精的方式三头公猪配 种的母猪受胎率可以达到 75% 而第四头公猪只有 33%[15] 而本研究发现 ESR 基因对苏姜 1-5 世代公猪无显著效应 表 3 与配公母猪合并基因型对产仔数的影响 公猪 母猪 N 没有发现预期优势组合 BBBB 无法计算出该基因型组合在 但 BB 型有提高产仔数的趋势 但将公母猪的基因型合并分 死仔数 析发现 BBAA 型的总产仔数与 ABAA ABAB 比较 差 AA AA ab± ± a±1.13 异显著 p.5 与其他两种基因型相比有提高的趋势 AA AB ± ± ±1.8 这可能是母猪 ESR 对母猪繁殖性能影响的研究结果各不相 AB AA ± ± ±1.56 同的原因之一 公猪的基因型与母猪的基因型是否有相加的 AB AB ± ± ±1.18 效应还有待进一步研究 但可以肯定的是对繁殖性状而言不 AB BB 5 1.ab± ± a±2.9 可忽视公猪的作用 由于在一个特定的季节或一生中 公猪 BB AA 3 12.b± ± b±.62 比母猪的后代要多得多 从遗传观点上看 就整个猪群来说 ab a a a a a 注 上标有相同字母者为差异不显著 p.5 不同字 母者为差异显著 P.5 单个公猪比母猪更重要 因此 公猪对后代的遗传影响是相 当显著的 因此 对今后苏姜猪的培育工作而言 应关注公 猪的繁殖性能及基因型 使得其产仔数能被快速改良 虽然 变异性高 ESR 基因的群体杂合度分别为.-.5 说明 随着总产仔数的提高 死胎数也显著提高 但是可以通过孕 ESR 为中等多态位点 苏姜猪目前还存在一定的选择的空 期合理的饲养管理来降低死胎数 达到提高产仔数的目的 间 五世代的 AB 等位基因频率与 A 等位基因频率下降 B 3 上升的趋势不符 可能原因为五世代猪群正处于更换育种场 结论 苏姜猪 ESR 基因为中等多态位点 目前还存在一定的 地的时候 应激可能会使生长较弱的 BB 个体处于选择劣势 选择的空间 应在选择过程中加强公猪繁殖性能的选育 而被淘汰 参考文献 2.2 公猪不同 ESR 基因型对产仔数的影响 [1] Rothschild M F, Jacobson C, Vaske D A, et al. A 从表 2 中可以看出苏姜公猪中 AA AB BB 三种基因 Major gene for litter size in pigs [C]. Proceedings of 型在总产仔数 产活仔数中呈现出 AB AA BB 的趋势 the 5th world Congress on Genetics Applied Livestock 但它们之间的差异也没有达到显著水平 (P.5) Production,Guelph, 199, 21: 与配公母猪不同基因型组合对产仔数的影响 从 表 3 中 可 以 看 出 总 产 仔 数 与 产 活 仔 数 呈 现 出 [2] Rothschild M F, Jacobson C, Vaske D A, et al.the estrogen receptor locus is associated with a major gene ABAA ABAB AAAA AAAB BBAA 的趋势 influencing litter size in pigs[j]. Proceedings of the 并且 BBAA 型的总产仔数与 ABAA ABAB 比较 差异显 National Acadamy of Sciences of the United States of 著 p.5 随着总产仔数的提高 BBAA 的死仔数显 America, 1996, 93:

257 [3] Short T H,Rothschild OI, Southwood DG, et al.effect [9] 王宵燕, 曹国林, 孙丽亚, 宋成义, 霍永久, 经荣斌. 苏姜猪 of the estrogen receptor locus on reproduction and ESR 基因和 FSHβ 基因的多态性及其对部分生长性状的影响. production traits in four commercial pig lines. J Anim 中国畜牧杂志, 29(13):1-3 Sci, 1997,75(12): [] Progemuller C, Hamann H, Distl O. Candidate gene markers for litter size in German pig lines [J].Journal of Animal Science, 21,79: [5] 陈克飞 黄路生 罗明 李宁. 猪 ESR(Estrogen Receptor) 基 因的 PCR-RFLPs 多态性分析. 见中国动物遗传育种研究进 展. 北京 : 中国农业科技出版社 1999: [6] 徐宁迎, 彭淑红, 章胜乔. 金华猪 3 个繁殖性状主基因的 分布及其效应的研究 [J]. 遗传学报, 23, 3 (12): [7] Distl O. Mechanisms of regulation of litter size in pigs on the genome level. Reprod Domest Anim. 27(2):1-16. [8] 孙丽亚, 王宵燕, 宋成义, 等. 苏姜猪 ESR 基因和 FSHβ 基 [1] 萨姆布鲁克. 分子克隆试验指南 [M]. 金冬雁 黎孟枫 译. 北京 科学出版社 1992:6-69 [11] 数量遗传学导论. 储明星译. 北京 中国农业科技出版社 2:2-5 [12] 孟庆利 刘铁铮. 猪雌激素受体基因 PVU Ⅱ酶切片段多态性 与产仔性能的关系. 江苏农业学报 25 21(1):9-52 [13] Bolet G, Bidanel JP, Ollivier L. Selection for litter size in pigs. II. Efficiency of closed and open selection lines. Genet Sel Evol, 21(33): [1]J.A.B. Robinson, M.M. Buhr. Impact of genetic selection on management of boar replacement, Theriogenology 25(63): [15] Foote RH. Within-herd use of boar semen at 5, with 因的多态性与繁殖性能的相关性研究. 安徽农业科学 28 a short note on electronic detection of oestrus. Reprod 36(13): Dom Anim, 22(37):

258 利用氯前列烯醇控制母猪白天分娩的效 果观察与分析 吴同山 1 吴云燕 2 胡毅军 1 (1. 东莞市畜牧科学研究所 广东 东莞 华南农业大学兽医学院 广东 广州 5162) 摘 要 通过新丰板岭原种猪场八年来利用氯前列烯醇控制待产母猪白天分娩的技术数据分析 发现使用该 技术后 母猪白天分娩率为9%左右 仔猪压死和死胎比例减少 断奶母猪一周内发情率89% 并且生产正 常 效果显著 关键词 氯前列烯醇 白天 分娩 针对母猪晚上分娩的比例比较大 造成值班人员工作 辛苦 初生仔猪压死现象突出 母猪难产难以发现的情况 新丰板岭原种猪场 原广东省板岭原种猪场 从 1998 年年 2 结果与分析 2.1 母猪白天分娩情况 见表 1 八年来 通过后海穴注射氯前列烯醇控制母猪白天分娩 开始开展用氯前列烯醇控制母猪白天分娩的小规模试验 的工作没有间断 效果也比较显著 基本上有 9% 以上的 由于其他原因 后停止一段时间 23 年又做了一年的试验 分娩母猪能控制在注射后的第二天 预产期 下午 前 两次的试验 效果显示显著 可以很大程度上让待产母猪 分娩 并且大部分集中在上午 使工作人员接产方便 易于 在白天分娩 减少了仔猪被压死的数量 也有利于难产母 对初生仔猪进行护理 晚上也不在另外安排值班人员专门接 猪的处理 2 年开始 全场待产母猪分娩前全部注射氯 产 只是组内饲养员轮流值班到晚上 9 主要观察仔猪 前列烯醇 使用至今 效果分析如下 保温及处理突发问题 既节约了人工 又提高了效益 而 1 材料与方法 27 年的白天分娩率比较低 主要是由于当年猪场整体搬 1.1 氯前列烯醇 迁 人手比较紧张 估计有漏打的现象存在 28 年 晚 [1] 2 年至 26 年 使用的是上海计划生育研究所生产 上分娩的比例也比较大 应该与刚从温暖的东莞搬到山区而 的氯前列烯醇 27 年至 211 年 使用的是宁波第二激素 形成的保温效果差且遇到持续时间比较长的严重的严寒天 厂生产的兽用氯前列醇钠注射液 PG 曾用名 多宝素该 气有关 品为人工合成的前列腺素 F2α 同系物 具有强大的溶解黄 2.2 仔猪死胎及压死情况 见表 2 体作用 能迅速引起黄体消退 并抑制其分泌 对子宫平滑 分娩时死胎的比例 整体上在正常范围内 [2] 但 27 肌也具有直接兴奋作用 可引起子宫平滑肌收缩 子宫颈松 年的比例比较高 主要由于一部分怀孕母猪经历了长途运 弛 可用于妊娠猪的同期分娩 以及治疗产后子宫复原不全 表1 胎衣不下 子宫内膜炎和子宫蓄脓等 1.2 适用对象 全场所有待产的母猪 1.3 用法与用量 母猪预产期前一天上午 9-1 用 的长 针后海穴 母猪尾根与肛门之间的凹陷处 注射一支 2ML 氯前列烯醇 1. 饲养管理方法 按原有的饲养管理规程 免疫程序 饲料配方进行饲 养管理 并根据具体情况和疾病流行情况等适当做出修改 1.5 数据统计时间 2 年 1 月 211 年 12 月 25 年度 母猪白天分娩情况 单位 头 % 分娩总头 白天分娩 白天分娩 晚上分娩 晚上分娩 数 数 比例 数 比例 合计

259 表2 年度 仔猪死胎及压死情况 死胎占总产仔 活产仔数 数比例 单位 头 % 断奶前压 死数 压死比例 [5] 以季节划分 第一 二 三 四季度分别占 16.3% 19.31% 31.86% 32.1% 第三季度 第四季度明显高于 第一季度和第二季度 以淘汰原因划分 年老 肢蹄原因 子宫炎 疾病 难产 屡配不孕 其他原因分别占 5.5% % 5.87% 8.36% 7.7%.8% 5.16% 除年老 原因正常淘汰外 肢蹄引起的淘汰为最主要的淘汰原因 而 子宫炎的发生比例 与以前占淘汰母猪比例的 1% 以上相比 明显减少 长期使用氯前列烯醇控制母猪白天分娩 对生产没有不 良影响 从以上八年的数据可以看出 母猪正常情期发青率 平均 讨论与结论 等各项生产指标不但没有受到影响 反而都有不同程度的提 高 有的猪场使用一段时间后 认为会影响母猪的正常发情 输 人手紧张的原因 甚至有的整窝死胎 压死仔猪的比例 下一胎的产仔数等 很大程度上的原因是管理不善造成的 与没有注射氯前列烯醇时相比 明显下降 [3] 并且压死的仔 工人嫌麻烦不做或偷工减料 或者注射的方法不当 如后海 猪多以畸形 弱仔为主 另外 这种效果也应该与饲养员的 穴注射时针头太短 肌肉注射时没有进入肌肉而进入脂肪里 责任心增强有关 由于从 23 年开始实行岗位责任制 大 面等 有的认为子宫炎发生率提高 应该是与配种 母猪分 家的收入明显提高 工作积极性 主动性也显著提高了 娩时的人工助产 分娩后母猪生殖道的保健 缩宫素等使用 2.3 断奶后母猪的发情 见表 3 量不当有关 断 奶 后 母 猪 的 发 情 相 对 集 中 在 3 7 天 占 了 使用氯前列烯醇控制母猪白天分娩 可以提高养猪场生 83.3% 而断奶一周内的发情比例为 89% 左右 比较正常 [] 产效率 除了 27 年因为猪场搬迁而生产成绩稍微偏低外 27 年的正常发情比例偏低 主要应该还是由管理原因造 其他年份 每头生产母猪每年提供的上市猪只数量 包括种 成的 其他比例中 也有断奶后两个月不发情的 也有同一 猪 猪苗 商品猪 均不低于 18.5 头 其中 28 年后基本 批断奶母猪中大部分母猪发情异常的 但这种情况一般都是 上都达到 2 头以上 说明在其他管理措施完善的同时 母 发生在炎热的夏季 并且降温措施不到位的情况下 人为地 猪白天分娩在一定程度上也起到了很大的作用 因素比较大 使用效果方面 后海穴注射氯前列烯醇比肌肉注射效果 2. 淘汰母猪中因子宫炎淘汰的比例 见表 结果表明 年 年均存栏生产母猪 115 头 以 好 后海穴位于猪的肛门上方 尾根的下方正中窝处 在此 穴位对症注射药物 能刺激猪的神经系统 促进血液循环 纯种长白 大白 杜洛克为主 8 年全场共淘汰母猪 279 头 调节体液 而达于病变部位 发挥针刺的神经刺激及药物治 年均淘汰率 33.36% 比正常水平 25% 3% 略微偏高 疗的双重作用 而且通过神经传导见效快 对治疗生猪胃肠 表3 年度 断奶母猪发情情况 单位 头 % 断奶母猪 3 天内发 3 7 天 8 3 天 其他比例 总数 情比例 发情比例 发情比例 表 淘汰母猪中子宫炎的比例 单位 头 % 淘汰原因 第一季度 第二季度 第三季度 第四季度 合计 比例 年老 胎及以上 疾病 难产 屡配不孕 其他原因 合计 平均 子宫炎 平均

260 道及泌尿生殖系统疾病有很好效果 但注射时应与猪的脊柱 参考文献 方向平行刺入 不可往下刺 以防刺伤直肠 肌肉注射 如 [1] 胡毅军 李炳坤 何各安等. 氯前列烯醇诱导母猪限期分娩 [J]. 果深度不够 肌肉很难吸收 并且作用于生殖系统的时间也 比较慢 因此 效果没有后海穴注射好 使用氯前列烯醇控制母猪白天分娩 母猪的预产期一定 要准确 不准确的预产期 可以误导饲养员注射氯前列烯醇 后产生严重的后果 提前的可能仔猪还没有发育完全 生出 来的仔猪不健康或很快死亡 推后的 可能晚上分娩的多 或死胎增多 特别是炎热的夏季 推迟一天分娩 死胎就会 增加一些 因此 母猪配种时间 预产期一定要准确才能使 用这种方法 否则 宁愿让其自然分娩 也不能使用 256 广东畜牧兽医科技,1998,(3): [2] 刘海良主译. 养猪生产 [M]. 北京 : 中国农业出版社, [3] 马吉平, 吕瑞彬. 提高仔猪成活率的重要措施 [J]. 畜牧兽医科 技信息,21,(6): [] 刘 彦. 采 取 综 合 措 施 提 高 母 猪 的 发 情 率 [J]. 北 京 农 业 科 学,2,18(6): [5] 马振强 陈美光 阮国荣等 种猪生产 [M]. 北京 : 中国农业大 学出版社,

261 养猪业要从传统养猪的劳动密集型转移 向技术和资本密集型 孙德林 猪业科学编辑部 中国种猪信息网 生猪产业技术体系北京市创新团队 北京 112 中国养猪业已有几千年历史 改革开放前 中国的养猪 养猪企业可以像工厂一样上下班 能够充分享受到城市文化 业基本上属于传统 分散的饲养方式 从产业类型看全部属 生活 养猪既是他们的谋生手段 又使他们成为拥有一定社 于劳动密集型产业 进入 2 世纪 7 年代 出现了一批机械 会地位的产业工人 化猪场 逐步开始使用机械代替部分手工操作 到了 2 世 2 标准化的养猪业需要信息化 纪 8 年代 一批工厂化猪场在沿海地区诞生 以后逐步影 近年来 我国养猪业受市场波动影响巨大 主要原因一 响到内地猪场 使用了较多的机械 但仍然是以劳动力和人 是生猪生产规模化 产业化水平较低 散养户缺乏及时准确 工操作为主的劳动密集型产业 的市场信息和预测能力 具有很强的从众心理 经济行为带 近 3 年来 中国养猪业发生了深刻变化 但也存在一 有相当程度的同步性 直接加剧了生猪价格波动的幅度 目 些问题 主要表现在 一是养猪业带来的环境污染没有彻底 前我国约有 6 5 万个养猪场户 每户增养 1 头猪 全国就 解决的办法 二是随着城镇化的进展 带来的劳动力短缺 增加 1% 的猪肉产量 要实现规模化养猪 实现标准化养 三是产业链上不合理的利益分配机制造成养猪业承受市场 殖必须走信息化之路 严重波动和沉重打击 四是整体环境带来猪病防不胜防给养 猪业带来的创伤不可愈合 猪场实施信息化管理是迟早的事情 在奶牛方面做得很 好 在猪方面很差 国外来讲学的专家常说 由于使用了软 中国是养猪大国 大多的中国人又有喜欢吃猪肉的饮食 件给养猪企业带来若干效益 他们都建议使用软件控制生产 习惯 中国养猪业要从数量型转型质量 效益型 必然从传 过程 控制成本的变化 中国养猪老板都好算大帐 而不算 统养猪的劳动密集型转向技术和资本密集型 计丢失的东西 比如 应用饲料自动饲喂系统 可以减少很 1 城市化进展的需要 大浪费 因个体差别而提供不同的饲喂量 这样既可以实现 一般说来 一个万头猪场需要员工 25 3 人 目前在 满足个体需要 又能降低生产成本 应用信息技术动态管理 规模化猪场中多数猪场除去几个主要岗位外 一年中都要更 生产过程 对母猪处于空怀 妊娠 分娩和待配了如指掌 新 1 2 次 有时像配种 产房等关键岗位也经常走人 养 这样可以减少母猪非生产时间 不用信息技术 不知道这头 猪老板都非常苦恼 再有 目前从事养猪乃至农业生产大 母猪何时分娩 何时下床 总是要翻生产纪录 作为一个生 部分都是 3 岁以上农民 很多地方都是 5 岁人养猪 产管理人员 每天可以看到不同母猪在不同生理状态头数 全国各地大大加快城镇化进展速度 农民变市民 种地变打 胎次 年龄结构及生产成绩 这样让母猪这个生产机器总是 工 农村变城镇 在美国和欧洲也是 5 岁人养猪 那么 处于优化状态和高速运转的状态 我们能否培养一批中专毕业生 让有知识的人干这一行 要 信息技术硬件设备来调控猪舍环境 如自动温控系统 猪场变工厂 他们照样可以周六日休息 旅游 度假 1997 自动给水系统 自动换气系统 自动控制有害气体系统等 年我们在荷兰学习 老板就讲 什么是现代化猪场 那就是 在国外猪舍空气都过滤 严格控制有害气体的质量浓度 同 周六日可以谈恋爱 旅游 度假 应用信息化 让那些猪可 时也要及时换气 保持猪舍内空气的新鲜 能不在周六 日生产 即使不能完全避免周六日生产 把纸 全漏缝地板和自动排污系统完全可以 现在养猪工艺是 或锯末铺好 走人 自己断脐带 在法国一个万头猪场只有 一场革命 在美国 加拿大和部分欧洲养猪发达国家都是全 3 个人 主要靠自动化设施 设备来完成 中国劳动力短缺 漏缝地板 全部是水泡粪工艺 当然污水排到哪里是个严肃 现象已经非常凸显 必将走 少用人 减少系统误差 降低 问题 在广西农垦系统 有很多甘蔗地 在地下铺设管道 劳动力成本 的道路 中国未来养猪劳动力应该寄托在中等 定期在地上喷灌 效果很好 职业技术学校学生 把他们培养成熟悉养猪设施设备操作的 3 高级技工 使他们成为既有技术 又能赚到钱的职业工作者 健康 可持续的养猪业必须产业化做保证 一个产业要健康发展 必须充分考虑到上游 下游产业 257

262 的平衡发展 在养猪业发展中要考虑到上游屠宰加工企业 其次是大力推进产业化 建立紧密的利益联结关系 养 下游饲料原料供应等产业经济利益的合理分配 中国养猪业 猪场户的市场问题解决了 产品有了稳定的销路 出现大波 与屠宰加工乃至饲料原料产业彼此独立 没有经济利益分配 动的风险就会降低 欧洲在经历几百年的发展后形成了 养 关系 在养猪发达国家 很多屠宰厂是养猪企业联合筹资兴 殖户 + 专业合作社 + 专业合作社企业 的模式 日本则采 建 这样你中有我 我中有你 彼此均衡发展 产业链中 取了养殖户 + 农协 + 公司的模式 这些产业模式都保护了 利益分配较为合理 不至于出现产品过剩或产品十分紧缺 养殖户利益 分担了产业风险 的现象 5 高端 高效的养猪业需要加大资金和技术的 传统 分散养殖之路将走向死胡同 中国是养猪大国 投入 也是消费大国 13 亿人口吃猪肉怎么能靠散户经营 从市 现代养猪业要实现高投入 高产出 中国养猪产业就要 场保障供给的角度看 必须以规模化养猪为主体 散养户和 从劳动密集型向资本和技术密集型转变 尤其要走向资本 小规模户养殖基础设施薄弱 饲养技术落后 疫病防控体系 密集型 在未来养猪产业中 没有资金的投入就带不来高生 不健全 同时 组织化程度比较低 获取和利用信息能力较 产水平的养猪业 比如母猪年生产力的一个重要指标 每头 差 有利可图一哄而上 无利可图一哄而散 加大了供给保 母猪年提供断奶仔猪数 现在中国大约 2 头 发达国家大 障的风险 其次 散户经营无法控制产品质量 不可能建立 约 25 头以上 当然也有达到 3 头以上的 中国为什么这么 起产品质量保障体系 无法建立产品追溯制度 无法实现 从 低呢 一是母猪不能及时配种 二是母猪配种后流产 三是 农场到餐桌 的管理 从推进产品标准化角度看 要创建健 出生仔猪成活率低 这些都是管理的问题 而管理都是由人 康产业链 产品规格大小不一 营养水平不同 管理人员素 控制的 人与人差别甚大 我们叫系统误差 如果加大资金 质不同 生产条件不同很难做到产品的一致性和标准化 多 投入 给猪创造良好的通风 换气 温度和湿度条件 则有 数屠宰线都无法接受散户饲养的活重超过 15 kg 的生猪 利于仔猪存活 有利于母猪及时发情 配种 实现科学管理 我国肉制品深加工的比重仅占肉类产量的 15% 左右 这些因素决定生猪供给的库存调节回旋余地很小 长期以 要尽量减少人的参与 克服人的因素 加大资本投入 多使 用现代化的设备设施 来 生猪生产 销售 加工 流通等各环节利益主体关系松 现在国家很重视养猪生产 最近启动国家生猪遗传改良 散 利益分配严重失调 在产业链条中 养殖是一个最弱 计划 制定国家生猪核心育种场遴选标准 结合全国生猪优 势 最不稳定的环节 周期长 风险大 供给过剩时除了 势区域布局规划 采用企业自愿 省级畜牧行政主管部门审 亏本出售没有退路 因此 要实现产业链健康 有序 利 核推荐的方式 选择 1 家种猪场组成国家生猪核心育种群 益分配协调 必须加大投入 走标准化道路 产品一致性好 215 年前完善 1 家核心种公猪站 种公猪总存栏 1 5 头 标准化程度高 以上 2 家社会化服务种公猪站 并配备相应猪人工授精 技术服务点 实现养猪标准化 猪场信息化时机即将带来 随着工业化 信息化 城镇化进程加快 受养猪比较效 从今年开始 农业部启动畜禽标准化示范创建活动 今 益影响 分散饲养逐渐退出 规模养殖发展势头逐渐显现 年计划在全国启动创建 1 5 个畜禽标准化示范场 涉及生 加快推进生猪生产规模化 标准化 信息化的条件日渐成熟 猪 奶牛 蛋鸡 肉鸡 肉牛和肉羊等 6 个主要畜禽品种 尤其经历 年养猪波动 国家投入大量资金发展 力争到 215 年 全国主要畜禽规模养殖比重在现有基础上 规模化养猪 29 年年出栏 5 头以上的场户生猪出栏比重 提高 1 15 个百分点 其中达到标准化的规模养殖场占规 达 61.1% 在市场拉动下 各地推进生猪规模养殖发展劲头 模养殖场总量的 5% 较足 行业内知名的产业化龙头企业纷纷延伸产业链条 建 除此之外 还有生猪标准化规模养殖场 小区 建设项 设高标准化生产示范基地 成为带动生猪规模养殖发展的重 目 国家生猪良种补贴项目 生猪调出大县奖励政策 能繁 要力量 力争在 5 1 年时间把年出栏 2 头作为一个标 母猪保险 生猪疫病防控支持 能繁母猪补贴 暂缓 还 准化养猪的标准 力争达到 5% 以上 美国从 有国家良种工程项目等 我们做事要和国家政策一致 把我 年 猪场数量从 96.8 万个下降到 7.5 万个 生猪存栏量却 们的工作做到国家项目中去 这些举动都是推进国家生猪生 一直维持在 6 万头左右 猪场的平均存栏规模从 195 产从传统劳动密集型走向技术和资本密集型 年的 26 头增长到 22 年的 782 头 258

263 规模化种猪场种猪选种育种流程 林善波 1 刘 芳 1 重庆市 69 原种猪场 重庆 黔江 139 摘 要 科学合理的选育种流程能够保证育种方案实施和育种目标的实现 全文结合本场实际 根据本场育种 方案制定了从母猪选配 哺乳阶段选育 断奶阶段选育 九大阶段种猪选育流程 实行流水线式操作模式 使育种工作流程化 精细化 可管理化 促进了选育种工作的开展 关键词 种猪选育 父系指数 母系指数 综合指数 性能测定 留种 种 ( 良种猪 ) 料 ( 营养饲料 ) 舍 ( 猪舍环境控制 ) 病 ( 猪 病防治 ) 管 ( 经营管理 ) 等是构成现代养猪生产的五大基 2 选种育种流程 2.1 选配阶段 本要素 而以上要素中 品种改良对畜牧业发展的贡献率约 每 2 个月进行一次配种计划制定和修正 配种计划的制 为 % 饲料营养贡献率 2% 饲养管理贡献率 2% 疫病 定要遵行 后备公猪优先配 25 窝 然后把综合指数前 1% 防治所带来的贡献率为 15% 其他方面的改善和提高贡献率 的公猪和综合指数前 1% 的母猪进行随机选配 最后剩余 为 5% 由此可见 猪种质量的好坏对养猪业的发展起着决 的母猪用核心公猪群进行随机交配 严格控制单头公猪的配 定性作用 而科学合理的选种育种流程又是提高种猪质量的 种窝数 后备母猪经过测定评定后立即进行配种计划制定 关键点 配种计划做好后严格按照计划配种 当出现产仔连续两胎出 1 关键名词解释 现产仔数低于 5 头 或者某两个血缘之间配种出现产仔头数 父系指数 通常是指个体作为父本的综合估计育种值 低于 5 头的要及时淘汰或调整下一轮的配种计划 它包含包括个体达 1kg 日龄估计育种值和背膘厚估计育 种值 2 个性状 各个场根据自己实际可以调节两个性状在指 数中的加权系数 母系指数 通常是指个体作为母本的综合估计育种值 2.2 哺乳阶段选育 仔猪出生后在 2 小时内进行个体称重和打耳缺号 查 乳头数 对有遗传缺陷的个体做好记录 及时把产仔信息录 入电脑数据库 在 7-1 日龄时 把不符合品种特征 有遗 它包含包括个体达 1kg 日龄估计育种值 背膘厚估计育 传缺陷的仔猪转入育肥 窝产子数少于 5 头 或同窝仔猪出 种值和总产仔数估计育种值 3 个性状 各个场根据自己实际 现遗传缺陷时 本窝公猪去势 全窝不留种 可以调节两个性状在指数中的加权系数 2.3 断奶阶段选育 根据全国种猪联合育种小组相关文件提供的各个品种 选择符合本品种特征 健康 乳头数排列整齐 6 对以上 指数计算公式为 生殖器官发育良好 四肢粗壮 无遗传缺陷 断奶时个体重 (1 杜洛克 不低于 6.5kg 在 21 日龄时称窝重 断奶称个体重 断奶 父系指数 =1-.21AGE-17.1BF 信息和选种情况等及时录入电脑数据库 母系指数 =1-3.16AGE-12.85BF+3.NB 2. 保育阶段选育 (2) 长白 保育转群前一天 对符合本品种特征 体质健壮 生殖 父系指数 =1-3.62AGE-1.7BF 器官发育良好 四肢粗壮 发育良好 同窝活仔数 1 头以 母系指数 =1-2.5AGE-1.17BF+3.33NB 上的种猪 每窝挑选体重目测最大的两母 两公 或四头 (3) 大白 以上 做好个体标记 保育转群时称个体重 淘汰体重低 父系指数 =1-3.79AGE-15.BF 于 22kg 的猪 此阶段除了根据体重外还要根据双亲的生产 母系指数 =1-2.5AGE-1.33BF+3.88NB 性能进行后备种猪选留 第一胎和第二胎的母猪后代不做留 其中 AGE 达 1kg 体重日龄的育种值 BF 背膘 种 确实其双亲母系和父系指数都大于 11 的可以选留 2 母 厚的育种值 NB 总产仔数的育种值 1 公 第 6 胎以上的母猪后代不做留种 母亲母系指数低于 259

264 1 当胎产仔低于 1 头以下 满足其任何一项的后代也不 后按照父系指数排序打印待选报告 测定成绩特别差的直接 作为后备种猪选留 做商品猪处理 部分测定猪只要无遗传缺陷 四肢健壮 生 2.5 性能测定选育 殖器发育好 品种特征明显的做种猪处理 保育转群时 直接转入测定舍开始生产性能测定 2.7 外貌评分 kg 体重阶段结束 测定期间个别猪只异常要及时处 对每头待选报告中的猪进行体型外貌评分 参加人员 理并做好记录 结测时进行性能测定 采用个体电子称进 不少于 3 人 主要根据种猪的品种特征 生殖器官 肢蹄 行称重并采用 B 超仪在测定猪左侧倒数第三至第四肋之间 体型毛色等进行评定打分 总分低于 7 分的 或者某个部 离背中线 至 5 厘米处进行背膘和眼肌面积的测定 性能测 位有明显缺陷的直接作为商品猪处理 定完后的一天内及时录入电脑数据库 2.8 综合指数选育 2.6 育种分析 根据血缘留种计划挑选出血缘种猪中遗传指数和外貌 采用育种软件利用 BLUP 模型进行育种分析 形成育 指数靠前的种猪 自留后备后剩余的作为特级种猪销售 公 种报告 在育种报告中 筛选出后备公猪的父系指数 11 猪选留比列控制在 1% 母猪选留比列控制在 3% 估计母系指数 父母双亲的母系指数平均值 9 后备 2.9 核心群选育 母猪估计母系指数 9 1kg 日龄估计育种值增加的猪 表1 每月月底进行一次育种分析 计算出全群在场种猪的母 系指数 淘汰母系指数低于 8 的经产母猪 母系指数大于 体型外貌评分项目表 8 低于 1 的核心群母猪转入扩繁群 大于 胎的核心群 项目 要求 最高分 体质 健康 品种 毛色 大约克 长白 毛色全白 允 特征 许头部有暗斑符合品种标准 母猪母系指数高于 12 可以, 再利用两胎 其余的全部转为 扩繁群 后备母猪有两胎产仔记录的母系指数高于 1 的进 1 入核心母猪群 8 至 1 的转入扩繁群 8 以下的直接淘汰 后备公猪有 25 窝产仔记录母系指数高于 9 直接进入核心公 耳型 符合品种标准 猪群 核心群公猪使用年限不超过 2 个月 前躯 丰满 肌肉发达 深宽适中 1 中躯 背腰长 腹部紧凑不下垂 2 通过以上使育种选育工作变得流程化 可管理化 也在 后躯 腿臀部丰满 但避免篮球型臀 15 同时不断提高种猪质量水平和强化企业管理 目前全国正在 乳头 排列整齐 有效乳头长白 大 乳头与 约克在 7 对以上 杜洛克和皮特兰 6 生殖器 对以上 无瞎乳头 小乳头 内翻乳 官 四肢 合计 26 3 讨论 积极开展种猪联合育种 使得各种猪场正在进行育种工作标 准化建设 选育流程管理正是解决种猪企业育种工作标准化 25 建设难的问题 要真正实施选育流程管理 企业领导要高度 头等不正常乳头 重视育种工作 实行全场全员育种意识 密切配合育种工作 生殖器官 发育正常 结实有力 粗壮 无关节脓肿 卧系 搞好饲养管理和疫病控制 各负其责 专人管理 成立育种 等不良结构 2 1 小组 定期开展选育和外貌评比活动 制定相关质量奖罚措 施 只要持之以恒的长期坚持 就能使育种工作开展的更好 使种猪的质量越来越高 促进养猪业的健康发展

265 开展联合育种加速我国生猪遗传改良进展 王丽娟 马振强 范安泽 北京大北农种猪科技有限公司 北京 18 摘 要 开展联合育种能够扩大育种群规模 增加群体遗传变异 提高遗传评估的准确性 加速生猪遗传改良 进展 提高种猪质量和育种水平 扩大种猪的选择范围 更有效地应用现代育种理论和技术充分利用优秀遗 传资源 种公猪 提高育种效益 减少从国外引进种猪的数量 为促进我国养猪业的可持续发展 制定联合育 种方案 组织区域性乃至全国范围内的种猪遗传评估和联合育种工作势在必行 本文总结了猪联合育种国内 的进展 我国开展联合育种存在的问题以及解决策略 猪的联合育种就是将相同或相近育种目标的种猪场有 29 年 9.8 头 母 猪 平 均 年 产 窝 数 变 化 2 年 为 2.5 组织地联合起来建立的良种繁育体系 形成一个大的核心 窝, 29 年 达 到 2.17 窝 年 出 栏 肥 猪 199 年 1.62 头 群 即 超级核心群 具有统一的数据记录系统 性能测 29 年达到 2.56 头 199 年 丹麦国家猪育种计划联合 定制度和选择方法 统一进行遗传评估 选出最优秀的种 全国 3 家核心种猪场 85 头纯种母猪开展联合育种工作 公猪 以供各场 / 群共享 猪场 / 群间通过人工授精或购 丹麦十分重视猪种的选育和改良 全国建立起了高效的三级 买种猪进行基因交换 建立遗传联系 每个猪场 / 群相当 良种繁育体系 目前共有 71 个核心群 95 头纯种母猪参与 于一个子核心群 各猪场 / 群开放 整个群体 育种系统 种猪选育 近年来所取得的进展如表 1 所示 加拿大猪育 闭锁繁育 必要时才导入基因 加快育种进展和提高群体性 种组织由加拿大猪改良中心 Canadian Center for Swine 能水平从而实现种猪的跨场比较和选择 英国是最早提 Improvement CCSI 及四大区域性遗传评估中心组成 出并实行猪联合育种的国家 [2][3] 目前世界上很多著名的猪 核心群母猪为 9 头 年测定近 1 万头 CCSI 提供的加 育种公司都采用联合育种这种主流的育种模式 联合育种不 拿大猪遗传改良计划方案 通过区域中心 为参加的育种者 仅可以提高选择强度 充分发挥 BLUP 方法选择准确的优点 提供猪重要经济性状的遗传评估 过去 2 年加拿大已经取 同时还可有效地避免群体太小而导致的近交 提高选育的效 得了巨大的性能改进 如表 2 所示 目前 CCSI 与养猪业 果和育种效率 的很多组织合作 正在开展关于基因组学 肉质 动物福利 1 国外猪联合育种及取得的遗传进展 等的研究计划 [5] 美国 丹麦 加拿大都是世界养猪强国 也是世界种猪 2 [1] [] 强国 在其完善的育种体系工作下 近些年来获得遗传进 中国种猪联合育种的发展 2.1 中国种猪联合育种的发展道路 展相当大 1991 年 美国制定并颁布了 STAGES Swine 中国第一次真正意义上的猪联合育种是 双肌臀 猪联 Testing and Genetic Evaluation System, 猪测定与遗传 合育种 该项目开始于 1997 年并于 21 年 11 月通过了验 评估系统 计划 该计划由国家种猪登记协会 National 收 双肌臀 猪联合育种 通过实施多点核心群联合育种 Swine Registry NSR 负责来自全国各种猪场的数据进 方案 充分发挥了引进优良种猪在生长速度 瘦肉率等方面 行分析 通过多年的选择 窝断奶仔猪数 199 年 7.87 头 的遗传优势 通过有效地选育提高引进猪种的性能 达到了 表 年丹麦种猪选育进展 品种 日增重 kg 日增重 3-1 kg 分娩 5 天活仔 LP5 体型 杜洛克 长白 大白 平均 料肉比 kg/kg 瘦肉率 % 屠宰损失, kg 261

266 表 年加拿大种猪选育进展 性状 杜洛克 2-29 年 21 年 长白 大白 父系指数 母系指数 瘦肉率 % 眼肌面积 cm 料肉比 kg/kg kg 日龄 背膘厚 mm 肌肉深度 mm 窝产仔 减少种猪重复引进 促进我国养猪生产发展的目的 [6] 在 双 ( 市 ) 建立了区域遗传评估中心 在一些地区建立了中心测 肌臀 联合育种开展的同时 全国畜牧兽医总站和中加瘦肉 定站和人工授精服务中心 联合育种框架已构建完成 [5] 全 型猪项目办公室合作 在全国开展种猪生产性能现场测定与 国种猪遗传评估中心主要负责收集参加联合育种各成员单 遗传评估技术推广工作 并于 2 年 5 月颁布 全国种猪 位的种猪信息 定期或实时的联合遗传评估 定期总结联合 遗传评估方案 试行 对我国种猪遗传评估测定的性状 遗传评估实施进展及成果 提供全国性种猪比较和选择的网 测定数量及统一遗传评估方法等作了规范 为实现全国种猪 络平台 截止 211 年 12 月 1 日全国种猪遗传评估中心已 联合育种奠定基础 2 年以来 建立了全国种猪遗传评 收集数据个体档案见表 余万头猪的档案记录 其中 估中心及华南 华东 西南 华北 华中等五家区域性种猪 大白猪 167 余万头 长白猪 9 余万头 杜洛克 余万头 遗传评估中心 26 年初全国种猪遗传评估中心建成 同 从 211 年 月和 1 月起全国种猪遗传评估中心分对核心场 年 1 月成立全国猪育种协作组 全国种猪资源共享体系初 以及核心场以外的注册猪场进行遗传评估 部分猪场取得了 步形成 目前 有三批共 13 个单位被确定为全国猪联合育 较好的遗传进展 大部分猪场的遗传进展不显著 有的呈下 种协作组成员单位 27 年 启动了国家生猪产业技术体系 降趋势 [7] 如表 所示 29 年农业部颁布了 全国生猪遗传改良计划 存在的问题及解决策略 年 初步构建了政府指导下的产学研合作平台 21 年 3 自从联合育种开展以来我国的猪育种工作在取得了一 月 农业部正式颁布了 全国生猪遗传改良计划 些进展 但同时我们也应该认识到我国的种猪联合育种工 年 实施方案 开展国家生猪核心育种场的遴选与种猪育 作还存在很多不足 遗传进展总体进展缓慢 没有实现预期 种群的组建 计划 216 年前分批完成 1 家国家生猪核心 的育种目标 没有在全国范围内开展实质性的联合育种工 育种场的评估遴选 至今已有 37 家种猪场被确定为国家核 作 没有实现跨场的联合遗传评估 仍然需要每年从国外大 心育种场 量引种 联合育种中存在的问题主要有以下几种 1 缺乏 2.2 联合育种所取得的成绩 有效的组织管理 没有专职的工作人员从事联合育种的组 目前我国已经初步建立了全国和区域性种猪遗传评估 织管理工作 全国猪育种协作组的工作仅局限于技术讲座和 体系 成立了全国猪联合育种协作组 建立了全国种猪遗 交流 必须加强全国猪联合育种协作组的功能 设置专职人 传评估中心 在北京 上海 四川 广东 河南和湖北等省 员从事组织管理工作制定详细可行的工作计划 定期检查计 表 3 全国种猪遗传评估中心数据统计 截止 211 年 12 月 1 日 性状 262 杜洛克 长白 大白 全国 核心场 全国 核心场 全国 核心场 种猪登记 661, (68%) 1,337, ,57(7%) 2,22,25 1,67,31(72) 生产性能测定 129,195 8,193(65%) 27,2 157,92(6%) 38, ,78(59%) 繁殖记录 8,23 56,311(67%) 225,29 15,931(67%) 36,3 238,27(65%)

267 表 我国种猪遗传进展 杜洛克 年度 1k 日龄 1kg 背膘 EBV EBV 长白 产仔数 EBV 1k 日龄 1kg 背膘 EBV EBV 大白 产仔数 EBV 1kg 日龄 1kg 背膘 EBV EBV 产仔数 EBV 划完成情况利用地方畜牧行政管理部门的权威性 开展区域 参数 目前 我国猪育种中所使用的参数主要是参考加拿大 性联合育种严格对种猪场的审批 提高准入门槛规范种猪市 的育种体系如用于表型性状的校正参数 用于计算育种值的 场 2 对联合育种的认识不够 缺乏长远的育种目标 只 遗传参数 用于计算选择指数的经济参数 这些参数并不完 注重眼前利益 不愿意共享优秀遗传资源 有些场参加联合 全符合我国种猪育种的需求 要加速我国种猪育种进展必须 育种是为了增加信誉 或为了政府的补贴 要提高我国猪育 建立起符合我国猪群特征和市场特点的参数体系 种工作进展 开展联合育种工作势在必行 可以在有条件的 地区先开展区域性联合育种 组织已具有一定场间关联的的 参考文献 种猪场开展联合育种 完善全国和区域种猪遗传评估中心 [1] 王 爱 国 建 立 场 间 遗 传 联 系 实 现 猪 的 联 合 育 种 [J] 养 猪 论 规范遗传评估及结果发布 保证所有参加联合育种的成员单 坛,23,(1) 位都有利可图 3 不重视性能测定 虽然在猪育种硬件发 [2] Bampton,P.R Best linear unbiased prediction for pigs 备方面以及具有足够的条件 我国猪场普遍不重视性能测 the commercial experience Pig news andinformati 定 先留种 后测定 并且性能测定规模太小大多数场的性 on,1992,13(3): 能测定流于形式 只是为了测定而测定 没有认识到测定的 重要性 数据记录不规范 因此对参加单位要提出明确的测 [3] Webb,A J Future challenges in pig genetics Pig news and Information,1996,17(1):ll 16 定要求 加强测定技术及数据管理软件的培训 专家组要定 [] 王立贤. 场内遗传改良计划与联合育种 [J]. 中国畜牧兽医学会 期或不定期地到相关猪场指导和检查测定情况 场间关 养猪学分会第五次全国会员代表大会暨养猪业创新发展论坛论 联性低 我国种猪场间关联性普遍较弱 目前只有只局部地 文集 区的个别场之间有少量的遗传交流 不能够对场间关联性作 [5] Canadian Centre for Swine Improvement Annual Report 全面准确的分析 人工授精技术没有得到广泛普及 公猪站 的服务对象主要是商品猪场和父母代猪场 由于我国的中心 Ann211_EN.pdf 测定站一般规模不大 每次测定的猪只数量有限 所以通过 测定站来建立关联的作用有限 因而主要还是要通过公猪的 跨群使用和种猪交换来建立遗传联系 5 没有自己的育种 [6] 吴克亮 吴常信 师守垄 双肌臀猪联合育种 [J] 中国畜牧杂志 22,38():3- [7] 211 年全国猪联合育种协作组会议材料 四 专家讲座资料汇编. 263

268 母猪利用年限的选择 王丽娟 马振强 范安泽 北京大北农种猪科技有限公司 北京 18 摘 要 母猪利用年限在养猪生产中起着重要的经济作用 母猪利用年限与其一生所产的仔猪数量有关系 但 是在很多猪育种方案中通常不选择母猪利用年限 关于母猪利用年限遗传参数 遗传变异和遗传相关 以及 育种值估计的方法的文献也比较少 因此 本文总结了母猪利用年限的遗传学知识 讨论了母猪利用年限的育 种值估计方法 以及需要进一步研究的内容 母猪利用年限在养猪生产中起着重要的作用 首先 母 定义 S(t) = exp[h(t)] [2] 而 H(t) 是积累危险函数 th(u) 猪利用年限与母猪终生生产的仔猪数量直接相关 其次 由 du 在这种情况下 估计育种值中是在原始时间尺度的单 于后备母猪的增加能够带来疾病的危险 第三 母猪利用年 位上提出 例如中位生存时间出现在点 S t =.5 时 在 限变短能增加母猪更新的费用 因此 商业生产者和育种者 动物育种文献中 生存工具包经常被用于很多物种使用年限 的管理方案都应该集中在提高母猪利用年限上 可靠的育种 的分析中 值估计是提高猪所有重要经济性状有效选择的基础 然而 生存分析被认为是理论上较优的利用年限的分析方法 目前没有统一恰当的方法来估计母猪利用年限的育种值 母 [3,] 这种方法正确地解释了设限观察值 非正态分布 模 猪利用年限育种值估计的选择寿命大致可以分为两种类型 型时间依赖性的影响 使用生存工具包进行只有单一性状分 第一种类型是利用生存分析 第二种类型使用线性模型分 析是可能的 相反 线性的模型分析 可以实现多性状模型 析 遗传力和遗传相关的估计需确定这两种方式哪一个估计 这些模型是基于母猪利用年限或持久力的分析 [1,3,5] 在奶 母猪利用年限育种值最有效 在猪育种方案中母猪利用年限 牛育种中 通过生存分析和单性状线性模型分析得到的育种 与其它重要经济性状高遗传相关强调了多性状评估的重要 值已经非常相关.9-.9 [6,7] 但是相关性有时也会有 性 反之亦然 母猪利用年限是一个复杂的性状 甚至其定 所降低 ( ) [6] 此外 有研究者比较了用生存分析 义也会由于研究者和研究目的的不同而随着变化 大多数研 和 7 个性状线性模型分析两种方法获得的母猪利用年限育种 究认为存在足够的遗传变异对母猪利用年限进行有效选择 值 他们发现相关性.-.72 较低 [1] 还需要更多的 遗传力估计范围介于.2 和.25 之间 此外 已经证明母 研究比较多性状线性模型分析和生存分析获得母猪利用年 猪利用年限与繁殖力和腿部的构造特征遗传相关 因此 可 限育种值的预测能力 以利用母猪利用年限与其它性状的遗传相关 也需要更多的 2 遗传变异 研究确定有效的母猪利用年限的选择方法 未来的研究需要 已有文献中遗传力的估计表明 有可能对母猪利用年限 集中多性状分析母猪利用年限 因此 本文的目的回顾当前 进行选择 [1,5,8,9] 但是由于不同的母猪利用年限性状定义和 母猪利用年限的遗传学知识 讨论育种值估计方法 并推荐 研究种群导致遗传力估计大小有个变动范围 根据生存分析 了未来需要哪些母猪利用年限遗传基础的研究 估计的母猪利用年限遗传力介于.11 和.31 之间 [1,1,11] 1 母猪利用年限育种值估计的不同选择方法 而根据持久力线性模型分析的遗传力介于.2 和.11 之 母猪利用年限育种值估计方法大致分为两种 生存分析 间 [8,9,12] 此外 用生存分析和线性模型分析母猪利用年限 和线性模型分析 生存分析是基于比例风险模型 其中最常 发现用线性模型估计遗传力.5-.1 明显低于生存分 见的基线危险是假设遵循威布尔分布 [1] 育种值和类似的其 析估计的遗传力.16 至.19 [1] 它因素存在于一个统计模型中 通常是指因无论任何时候无 不同的终检率对终生繁殖力和使用年限有影响 遗传 论何种原因而从繁殖群中淘汰的母猪比例 在实践中 被淘 力估计似乎随着终检率的提高而降低 [5] 例如 一个 35 汰的比例风险可能很难解释 然而 危险函数 [h t ] 和生 终检率的估计终生繁殖力和使用年限的遗传力分别为.16 存函数 [S t ] 相互联系 因此 生存函数可以用危险函数 和.15 而终检率只有 15.5 时 相应的遗传力分别为 26

269 .25 和.22 研究结果还表明 终身繁殖力 遗传力范围 3.2 腿型 略低于利用年限 遗传力范围 有繁殖障碍以后 腿无力是最常见的淘汰母猪的理由 后来的研究与该结果相似 并且得出这两种性状有较高的遗 [16] 然而 母猪利用年限与腿型的遗传相关由于品种不同 传相关 rg>.95 [1] 因此 通过选择获得的利用年限的 而不同 例如 芬兰长白猪是中等的遗传相关.32 而 遗传获得量将导致直接的终身繁殖力遗传进展 反之亦然 芬兰大白猪是低遗传相关.17 [1] 同样 德国长白猪腿 母猪利用年限的育种是在遗传上提高纯种和杂交母猪 型得分与持久力之间的相关介于.19 和.36 之间 但是德 的生产寿命 这一目标提出了一些问题 就是估计母猪利用 国大白猪接近零 在瑞典 长白猪和大白猪的软骨病和母猪 年限育种值时应当实施非加性遗传变异和适当的杂交模式 利用年限之间的相关都是介于.8 和.12 之间 [1] 目前 文献中没有估计母猪利用年限的非加性效应的报道 研究表明腿型性状遗传力的估计范围变化较大 介于 然而 研究发现日增重有一个中等比例的显性遗传变异 而.1 至. 之间 [17] 腿无力的不同症状与母猪利用年限的 背膘厚的显性遗传变异接近于零 非加性遗传效应在一些经 相关决定了这些性状应该包括在总的腿型指数中 也就是 济上重要的猪肉生产性状的育种值估计上应该起重要的作 说 腿部构型性状的经济权重的大小由其与母猪利用年限的 用 [13] 因为母猪利用年限是一个所谓的健康性状 因此人 相关大小决定 凹膝的前腿 直立的后腿 摇摆的后躯显著 们期望其在遗传的优势上发挥重要的作用 对奶牛的研究结 不利于母猪利用年限 此外 凹膝的前腿与猪所有的腿部动 果已经支持了这一观点 目前 还需要做进一步研究 以确 作遗传相关 这是一个猪腿部没有任何疼痛进行移动的指标 定母猪利用年限或一些类似的性状存在非加性遗传变异 性状 3 总之 猪的腿型有两种得分系统 1 二进制类型的记录 母猪利用年限的早期选育指标 因为母猪利用年限的信息只有在母猪被淘汰或者死亡 表明猪是否有一定的问题 2 线性评分系统 其中所有的 后才可以记录 母猪利用年限的选择决定必须通过系谱使用 猪根据腿部运动来评估 虽然在实际育种计划中有两种类型 亲属的信息 因此 与母猪利用年限高度遗传相关的性状的早 的得分系统 但是线性评分系统被认为是猪腿部评价的最优 期记录 可能会提高育种值估计的可靠性 母猪的繁殖力和 方法 采用这种方法时 更有效地记录性状的变化 腿部构造性状被视为母猪利用年限早期指标的候选性状 [] 3.1 繁殖力性状 母猪利用年限与生产性状的遗传相关 在过去 2 年 生产性状取得了非常高的遗传改良 例 商品猪场青年母猪被早期淘汰的主要原因是繁殖障碍 如 日增重 料肉比 胴体瘦肉率 于此同时 母猪利用 由于断奶后母猪再次繁育出现问题会导致产仔间隔增加 有 年限却有所下降 这就引起了大家的关注 是否这些性状之 研究报道长白猪和大白猪的产仔间隔与母猪利用年限之间 间是负遗传相关的问题 很多研究表明预计这些相关的总的 呈负遗传相关 分别为 -. 和 -.3 同样 产仔间 趋势是不利的 例如持久力与背膘厚 日增 隔和持久力之间的遗传相关介于 -.2 和 -.5 之间 重 的遗传相关是不利的 然而 在一些 [1] [9] 从实际生产中的一些性状和性状定义可以看出存在不 同的繁殖问题 如分娩间隔 从断奶到发情或怀孕的间隔 研究中它们之间的相关还不清楚 [9] 还有研究发现在芬兰长白母猪利用年限与背膘厚之间 返情率 从这些性状的遗传力估计可以看出 断奶至发情间 不利的遗传相关.22 而芬兰长白接近零 此研究不支 隔的遗传力.2-.3 高于断奶至怀孕的遗传力.1 持日增重与母猪利用年限或终生繁殖力显著相关的的结论 [1] 这些差异可能是由于返情率的遗传力.-. 非常 研究表明 背膘厚和母猪利用年限之间的关系可能是非线性 低 [1] 的 把母猪按背膘厚 眼肌面积 达 113 公斤体重日龄的标 由于哺乳期间的低采食量和高背膘损失对未来的母猪 利用年限是有害的 准差分组 发现母猪背膘厚低的组有一个明显较低的终身 因此 这两个测量性状可以作为母 繁殖力 而背膘厚最高组的母猪有更长的母猪利用年限 [18] 猪繁殖问题的指标 这与断奶到发情的间隔和返情率之间高 还需要做更多的研究来确定是否可能存在一个背膘厚阈值 的遗传和剩余相关 rg =.93; re =.79 是相符的 也就 能最大化或优化母猪利用年限 尽管胴体质量与母猪利用年 是说 高的相关性表明 母猪断奶至发情的间隔延长也将最 限之间有不利的相关 但是这种相关不是非常大 因此 这 有可能导致怀孕有问题 目前 关于哺乳期间的低采食量和 两种性状很可能同时选择 [15] 高背膘损失的遗传学基础的研究还比较少 因此 哺乳期间 总之 大多数猪群存在足够的遗传变异 使母猪利用年 的采食量和背膘损失与母猪利用年限之间的关联还需要做 限可以通过选择来改良 然而 关于母猪利用年限正确的育 进一步的研究 种值估计方法还没有达成共识 生存分析在理论上被认为是 265

270 比较适当的方法 然而 多性状的分析目前无法正确使用现 [9] Tholen, E., K. L. Bunter, S. Hermesch, and H.- 有的生存分析软件 由于母猪利用年限与繁殖力和胴体品质 U. Graser. 1996b. The genetic foundation of fitness 是遗传相关的 可以使用所有可用的信息通过适当的遗传相 and reproduction traits in Australian pig populations 2. 关来估计母猪利用年限的育种值 还需要更多的研究来确定 Relationships between weaning to conception interval, 最佳母猪利用年限育种值的估算方法 还需要进一步研究确 farrowing interval, stayability, and other common 定非加性遗传变异大小对母猪利用年限的影响 估计哺乳期 reproduction and production traits. Aust. J. Agric. Res. 间母猪利用年限与采食量和背膘损失之间的遗传相关 确定 7: 与母猪利用年限相关的腿无力的症状 最后确定母猪利用年 [1] Yazdi, M. H., N. Lundeheim, L. Rydhmer, E. 限与生产性状之间是否存在非线性关系 Ringmar-Cederberg, and K. Johansson. 2a. Survival 参考文献 of Swedish Landrace and Yorkshire sows in relation to [1] Serenius, T., and K. J. Stalder. 2. Genetics of osteochondrosis: A genetic study. Anim. Sci. 71:1-9. length of productive life and lifetime prolificacy in the [11] Yazdi, M., L. Rydhmer, E. Ringmar-Cederberg, N. Finnish Landrace and Large White pig populations. J. Lundeheim, and K. Johansson. 2b. Genetic study of Anim. Sci. 82: longevity in Swedish Landrace sows. Livest. Prod. Sci. [2] Ducrocq, V. 21. Survival analysis applied to animal breeding and epidemiology. Mimeo. Institut National de la Recherche Agronomique, Paris, France. [3] Caraviello, D. Z., K. A. Weigel, and D. Gianola. 2. Comparison between a Weibull proportional hazard 63: [12] Lo pez-serrano, M., N. Reinsch, H. Looft, and E. Kalm. 2. Genetic correlations of growth, backfat thickness and exterior with stayability in Large White and Landrace sows. Livest. Prod. Sci. model and a linear model for predicting the genetic merit [13] Lutaaya, E., I. Misztal, J. W. Mabry, T. Short, H. of US Jersey sires for daughter longevity. J. Dairy Sci. H. Timm, and R. Holzbauer. 21.Genetic parameter 87: estimates from joint evaluation of purebreds and crossbreds [] Serenius, T. 2. Genetics of sow efficiency in the Finnish Landrace and Large White populations. Ph.D. Dissertation, University of Helsinki, Finland. Agrifood Research Reports 55. [5] Guo, S.-F., D. Gianola, R. Rekaya, and T. Short. 21. Bayesian analysis of lifetime performance and prolificacy in Landrace sows using linear mixed model with censoring. Livest. Prod. Sci. 72: [6] Vollema, A. R., and A. F. Groen A comparison of breeding value predictors for longevity using a linear in swine using the crossbred model. J. Anim. Sci. 79: : [1] Holm, B., M. Bakken, O. Vangen, and R. Rekaya. 25. Genetic analysis of age at first service, return rate, litter size, and weaning-to-first service interval of gilts and sows. J. Anim. Sci. 83:1-8. [15] Serenius, T.,K. J. Stalder, T. J.Baas, J.W.Mabry, and R.N.Goodwin. 25. A comparison of six maternal genetic lines for sow longevity. J. Anim. Sci. 83 (Suppl. 2):53. (Abstract.) model and survival analysis. J. Dairy Sci. 81: [16] Stalder, K. J., M. Knauer, T. J. Baas, M. F. [7] Boettcher, P. J., L. K. Jairath, and J. C. M. Dekkers. Rotschild, and W. Mabry. 2. Sow longevity. Pig Comparison of methods for genetic evaluation of sires for survival of their daughters in the first three lactations. J. Dairy Sci.82:13-1. [8] Tholen, E., K. L. Bunter, S. Hermesch and H.U. Graser. 1996a. The genetic foundation of fitness News Inf. 25:53-7. [17] Serenius, T., M.-L. Sevo n-aimonen, and E. A. Ma ntysaari. 21. The genetics of leg weakness in Finnish Large White and Landrace populations. Livest. Prod. Sci. 69: and reproduction traits in Australian pig populations 1. [18] Stalder, K. J., A.M. Saxton, G. E. Conatser, and T. V. Genetic parameters for weaning to conception interval, Serenius. 25. Effect of growth and compositional traits farrowing interval, and stayability. Aust. J.Agric. Res. on first parity and lifetime reproductive. Livest. Prod. 7: Sci. 97:

271 制定育种场种猪育种方案之我见 彭中镇 1 华中农业大学动物科技学院遗传育种系 武汉 37 摘 要 本文在对 全国生猪遗传改良计划 的指导思想解读的基础上 指出了制定本育种场种 猪育种方案 下简称 方案 的必要性 根据笔者体会对制定好 方案 提出了六点基本要求 就 方案 的 体例发表个人看法 并对 方案 体例中的某些组成部分应涵盖的主要内容或者应注意的事项进行了讨论 做 了些建议 仅供国家生猪核心育种场和其他外种猪育种场制定或修订 方案 时参考 关键词 育种场 场内种猪育种方案 制定 必要性 基本要求 体例 体例中某些组成部分的讨论 全国生猪遗传改良计划 农办牧 号 下简称 计划 的 保障措施 中要求国家生猪 核心育种场制定实施育种方案 < 全国生猪遗传改良计划 > 实施方案 农办牧 21 1 号 下 简称 计划实施方案 的附件 2 国家生猪核心育种场遴 选标准 试行 规定 要 有明确的种猪选育方案 国 于社会化遗传改良与生猪良种补贴的两类种公猪站 ⑥支持 地方猪品种的保护 选育与利用 根据笔者对 计划 精神的粗浅领会 计划 的指导 思想似可用 一个目标 一条主线 一个重点 两个基础 来概括 1 关于 计划 的目标 笔者的学习体会是 针对当前存 家生猪核心育种场管理办法 试行 牧站 牧 211 在的种猪 引种依赖 现象 以及我国生猪生产水平 出栏 28 号 下简称 核心场管理办法 要求核心场与联系专 率 胴体重 每头母猪年提供的商品猪头数和猪肉量 生 家共同制定本场种猪选育方案和育种工作实施计划 根据上 猪育种组织工作水平与发达国家存在的差距情况 为逐步摆 述文件精神以及笔者以往制定 参与制定和修订有关猪育种 脱对国外种猪的依赖 应走出一条 适度引进 改造创新 方案 计划的体会 结合现代育种技术要求 从我国当前实 自主选育 形成特色 的瘦肉猪改良之路 通过着力推进前 际出发 提出有关制定育种场猪育种方案 下简称 方案 述 6 项关键性建设 力争拥有世界上最大的瘦肉型纯种核心 的看法与建议 供国家生猪核心育种场和其他外种猪育种场 猪群和有较高的种猪质量 培育出有自主知识产权和有中国 参考 特色 具有核心竞争力的种猪群 为实现我国种猪走向世界 1 从对 计划 的解读到对为何要制定场内育 种方案的理解 参与全球竞争 同步提高全国生猪生产水平和养猪综合效 全国生猪遗传改良计划 是我国首次 益 形成多样化 优质化和特色化的国内猪肉产品市场而 努力 制定的全国性生猪改良计划 它的发布与实施 标志着国家 计划 贯穿的一条主线是联合育种 联合育种的实质 对猪遗传改良事业在组织工作 在宏观调控上得到了极大加 与最高层次是指统一 规范的场内测定及其基础上的联合遗 强 发生了质的飞跃 是我国猪育种发展史上一个新的里程 传评估 碑 这份 全国生猪遗传改良计划 应是今后一个时期发展 我国生猪育种产业的指导性文件 猪的联合遗传评估即种猪的跨场遗传评估 旨在使估计 育种值能跨场比较 跨场排序 实现种猪的跨场选择 这等 计 划 及 其 配 套 文 件 计 划 实 施 方 案 提 出 了 于育种群规模的成百倍增大 好处大致有两方面 1 由于 年期间 6 项关键建设内容 ①遴选和建设国家 参与联合育种的各场种猪其主要性能可作比较 顶级 或 生猪核心育种场 以其作为开展生猪联合育种的主体力量 顶尖 公猪 top boar 的培养 选拔变得相对容易和有 ②组织开展种猪登记 ③建立种猪性能测定体系 ④开展场 成效 它们出现的几率将大大提高 使得大型种公猪站 大 间遗传交流 提高场间种猪的关联性 connectedness 程度 型猪 AI 中心 所需要的 顶级 公猪在来源 数量与质量 为逐步实现种猪的跨场联合遗传评估 即 跨群遗传评估 上有了基本保证 加上其后代中具有性能可比性的头数大为 across-herd genctic evaluation 和场间性能比较 跨场 增加 AI 公猪的动态 遗传 评估与再次选种将成为可能 选种创造条件 ⑤建设用于核心育种群公猪精液交换以及用 核心场也将会主动配合大型种公猪站在一定地域内实施有 267

272 组织 有计划的多场 使用共同的 AI 公猪 的新举措 其 康养猪与疫病防控方面 应有得力措施 结果是 种猪与商品猪群的改良加速了 场间的遗传关联 遗 3 先进行调查研究 摸清育种群家底 这是制定好 育 传联系 增强了 2 由于各核心场育种群的整体性能即平 种方案 的第一步与不可或缺的一步 为写出尽可能具体 均遗传水平可直接相互比较 加上其 系谱登记与性能登记 紧密结合本场情况 可操作性强的 育种方案 奠定基础 过的种猪比例 这一参数也有可比性 故对各场育种工作水 把育种工作本身的重点与难点突出地放在 开展持 平的提高将有很大的促进作用 各场的遗传交流工作将变得 续 科学的生产性能测定 以及配合全国种猪遗传评估中心 更为顺利 总之 良性循环将持续产生 开展种猪登记 按时上传相关育种数据与记录 完成遗传交 计划 实施中的重点 无疑将是遴选与建设国家生猪 核心育种场 计划 中所列主要任务 技术指标 主要内 流配种计划的拟订与执行 确保测定数据 上传数据与场间 遗传交流的真实性 容以及保障措施 都将核心场放在重要位置 所占篇幅也是 重点还体现在 ① 对整个育种群的选育上 实行点面 最大的 核心场管理办法 及国家近期出台的举措更加说 结合 建议从育种群中筛选出核心群 作为重中之重进行选 明了这一点 育 ②在品种上 建议一个育种场重点选育一个品种 最多 计划 的两项基础工作是 种猪性能的场内测定以及 两个品种 公猪的遗传选择 这两项工作之所以成为基础工作请参见文 献 1 在此不予赘述 综上分析 笔者认为 制定本场猪育种方案的必要性至 少有下列三点 5 严肃对待 方案 的制定 本场领军人物 法人代表 要亲自动手 带领团队花大力气去完成 这不仅关系到 方 案 本身质量与效力的提高 也便于法人代表及早与育种主 管进行沟通 1 以 计划 为指导 以其贯彻落实为契机 结合本 人才强场 科技办场极为重要 稳定和引入技术人才措 场场情制定育种方案 能帮助我们总结好正反两方面经验 施要适当反映在 方案 中 要完善有利于推动全场员工关 进一步理清办场方向 思路与路径 提升对猪育种工作特点 心育种工作的绩效评价考核制度和具体考核办法 地位与作用的理解 能增强改良意识 树立世界眼光 坚守 6) 定期总结核心群的育种成效 其最终成效还要看扩 发展观念 坚持创新思维 摆脱急功近利观念的束缚 2 繁群 商品群的变化 要注意总结 提升育种工作中带有规 走出 闭关自守 的阴影 拿出敢于承担的魄力 站在新的 律性的东西 并反映到修订的 方案 中 起点上 谋划 安排 部署好今后一段时期本场落实 计划 的措施 撰写好 方案 2 计划 通篇体现国家对核心场的期望与高度关注 计划 既对核心场进行 动态监管 严格要求 又全力予 以支持 表示生猪产业政策将适当向国家生猪核心育种场倾 方案 应可反复修订 使其精益求精 使之更符合国 家要求和本场需要 更加体现理论与实践的结合 更能反映 现代育种科技的应用 并不断提高可操作性 3 育种场种猪育种方案体例 体例 指文稿的组成部分与顺序 以及对各组成部分 斜 核心场管理办法 更规定 核心场 优先享受 计划 的基本内容与要求 种猪育种方案的体例由于无定规可以遵 相关政策 资金和技术支持 优先使用遗传交流优秀公猪精 循 现仅根据笔者的看法提出供参考 液 因此 核心场无理由不用心制定好本场育种方案以及 3.1 企业基本情况 含企业简介 企业经营生产销售 年度育种工作计划与总结 效益简况 育种群品种 规模 来源 血统数简况 3 制定本场种猪育种方案的过程也是学习 计划 动 公猪站与性能测定站 舍 简况 育种人员及相关设 员团队 统一认识 凝聚资源的过程 是提高企业领军人物 施设备 企业业绩 与领导层生猪遗传改良组织工作水平的良机 有利于加快育 3.2 育种群现有基础的调查分析 种场建设的步伐 利于发挥比较优势 增强企业的竞争力 3.3 育种目标 方案 本身也是企业育种工作水平的重要标志之一 2 3. 育种方法 制定育种场种猪育种方案的基本要求 3.5 引种 1 方案 应找准定位 内容的安排 要体现从全国大 3.6 核心群的组建 局出发 勇担 计划 所赋予的重任 体现提高经济效益与 3.7 选种方案 提高种猪年遗传进展的统一 体现近期与长远利益的统一 3.8 选配 2 猪群健康是种猪企业的生命线 关系到种猪企业的 3.9 父系和母系的选育 配套系的培育与利用 参见 生存 是搞好育种工作的前提与根本 在 方案 中 在健 文献 2,,5 配套系的培育最好与相关场联合进行 根 268

273 据情况此节可写可不写 或部份写入 较普遍存在什么缺点 ④变异程度如何 ⑤分析 拟重点利 3.1 标记辅助育种 含标记辅助选择 标记辅助基 用哪个家系 哪头公猪 保留什么优点 改良什么缺点? 因渗入 基因组选择 的应用 5) 集体至现场整体观察外形体质 并注意观察分析来 3.11 育种群主要性状的遗传趋势分析 自不同国家 场 血统种猪的外形体质特点 直至发现并记 3.12 核心群遗传进展向商品群传递的措施 2,3, 录突出个体 3.13 场内公猪站的建设与场间遗传交流 5 6) 讨论修改前面由档案得出的初步结论 写出各品种 育 3.1 营养方案与饲养管理 种群现有基础报告 3.15 健康养猪 生物安全与疫病防控.2 关于育种目标 3,, 种猪推广 销售策略 含优质优价 与售后服 方案 中的育种目标 一般可分为育种方向与育种指 务 含回访客户猪场与种公猪站 标两个方面来描述 但作为选育引入品种的国家生猪核心育 3.17 育种部门设置 如育种部 育种中心等 技术 种场来说其育种方向肯定为瘦肉型 故在 方案 中可略去 人员配备与培训 育种指标可理解为在某一时段内通过某些选育措施使 3.18 保障措施 ( 含组织领导机制 管理 含精细化管 有些性状获得遗传改进而达到预计的 理想 水平时这些性 理 办法 管理信息系统的建立 产学研结合等 状的指标 编写育种指标时 要说明起止年份 并写明某一 3.19 附件 时段结束时可达到预计指标的头数 就体例中的某些组成部分谈看法提建议.1 关于育种群现有基础的调查分析 上面提到的性状常被称为目标性状 target traits 实 际上 目标性状可分为两类 即改良性状与选择性状 改良 也就是首先要摸清育种群的家底 身在育种群工作的技 性状指在某一时段内可获得遗传改进的性状 亦即想要改 术人员 对育种群家底不一定了解得十分清晰全面 建议摸 良的性状 包括通过直接选择和间接选择获得的 而选择 底内容与步骤为 性状则一般指综合育种值 aggregate breeding value 估 1) 全场繁育体系 含宝塔形繁育结构各层次猪群及场 内公猪站 性能测定站 的总体情况分析 计公式和父系指数式 母系指数式中所包含的性状 是实 际用来选种的性状 选择性状又被称作选择标准 selection 2) 各品种育种群的遗传基础的广泛度 即血统数 为 criterion 改良性状明显多于选择性状 譬如 在我国外 使选种收到实效 最忌讳的是遗传基础狭窄 遗传多样性贫 种猪中 对父系种猪的选择性状有达 1 公斤体重日龄和 乏 遗传变异小 在选种实践中了解群体遗传基础广泛度最 1 kg 活体背膘厚 对母系种猪的选择性状除上述两性状 直观 能间接反映群体内遗传基础和遗传多样性的指标是猪 外 还有总产仔数 直接选择达 1 公斤体重日龄可间接改 群的血统数主要是公猪的血统数 为此 可编制猪群系谱图 良饲料转化率 直接选择 1 kg 活体背膘厚可使胴体瘦肉 从不同角度计算平均近交系数 个体间的亲缘系数以及各个 率得到遗传改进 像饲料转化率和胴体瘦肉率这些性状即为 体的近交系数 改良性状 不过 选择性状与改良性状的划分是相对的 譬 3) 各品种育种群的整体质量 可通过近年来特别是近 如此例中达 1 kg 体重日龄与 1 kg 活体背膘厚也都可同 三年来每年的种猪性能测定与繁殖性能以及主要性状的平 时列为改良性状 随着科技的发展 有些目前不能在活体上 均育种值和选择指数的统计结果 如有屠宰测定记录另加 度量或有效度量 不能直接用于选种的性状 但又需加以改 来反映 饲料转化率须注明是按栏计料还是按个体计料 如 良的性状 即改良性状 在不久的将来有可能成为选择性 同时有两种计料方法则应分别统计 如按个体计料 须说明 状 如肌内脂肪含量 是用什么设备 方法测定的 全场是否统一用一种设备 屠 因此 列入 方案 中的目标性状既包括重点改良性状 宰性状则须注明屠宰年份 日期与批次 屠宰头数与性别 又包括选择性状 但有必要在 方案 中明确说明选择性状 繁殖性能必须分胎次 分头胎 二胎 三胎以上 统计 并 是哪些 注明涵盖年份 统计的母猪头数 统计窝数 所有数据必须 统计 均数 ± 标准误 必要时须统计 最小二乘均数 LSM ± 标准误 ) 进一步从种猪个体档案中挖掘育种群中的有用信息 确定选择性状时应遵循如下原则 或者说应从以下几点 综合考虑 2,6 1 属经济上的重要性状 2 易于在活体上度量 ①分析来自不同国家 场 血统的种猪性能有无差异 有无 3 有较高 至少为中等 的遗传力 由于遗传力高的 各自特点 ②有无特别突出的家系或个体 尤为公猪 ③ 性状其群体表型值差异较接近于育种值差异 表型值的高 269

274 低较能反映遗传上的优劣 因此 选择准确性 selection 成指标的期限要远一些 最好到 22 年 指标要留有余地 accuracy 较高 选择效果较好 不宜过高 特别是遗传力低的总产仔数 选择性状与某一改良性状具有较高的遗传相关 只 有这样 对选择性状的选择才有可能在不同程度上带来某改 良性状的遗传改进.3 关于育种方法 写时可从以下几方面考虑 1 长期坚持生产性能测定 与选择并结合精细的选配是最有效的一种育种方法 是任何 5 同时选择的选择性状不能太多 同时选择的性状越 多 则每个性状的选择进展 即遗传进展 就越小 育种猪场都必须采用的 总的要求是 2 个字 科学测定 准确评估 严格选留 指高强度选择 留种率尽可能低 尤 当前在瘦肉猪育种中 为降低养猪成本和适应市场需 其是公猪 适速更新 ( 指年更新率尽可能高 世代间隔尽 求 多生 快长 省料 瘦肉多 瘦肉品质好的猪受到欢迎 可能短 尤其是公猪 ) 合理引种 精心选配 2 对于高 因此 生长速度 饲料转化率 瘦肉率和瘦肉品质自然应成 中等遗传力和低遗传力的性状 应采用不同的选择法进行改 为改良性状 良 培育新的父系和母系 也要遵循这一原则 并正确认识 由于生长速度 日增重 与饲料转化率 饲料 增重 即 和处理引种与自主选育 开放与闭锁的关系 不能走极端 单位增重耗料量 有高的遗传相关 ra= [2] 3 要考虑是否需保持从国外引入时就有的同一品种 如大 两性状的遗传力又均属中等 因此 选择活体易度量的生 长速度即可兼顾度量较困难的饲料转化率性状的改良 又 由于胴体瘦肉率与超声活测背膘厚的遗传相关达 超声活测背膘厚的平均遗传力又较高 白猪 中的父系和母系 是否需保持来自不同国家的血缘 结合采用标记 / 基因选择技术. 关于核心群的组建 建议从现有育种群中挑选出最好的公母猪组成 核心 而瘦肉率的遗传力虽高.8.5 但种猪无法直 群 在适当引种后重点对该群进行选育 原种猪场要把主 接度量 故人们通过选择活体背膘厚来改良胴体瘦肉率是可 要精力放在核心群的测定 选择和选配上 余下的组成 一 行的 般育种群 但对其仍需进行测定与选择 对核心群的要求 6 日增重与背膘厚接近于独立遗传 ra =.1 对 是 测定规模大 选留率小 年更新率高 世代间隔短 选 其中一个性状的选择不能代替对另一性状的选择 因此 选 配精细 使用优秀公猪精液配种 尽量不用或少用同一血统 择指数式中同时有这二个性状是合理的 中的 候补公猪 以至拉下选择差 核心群的成员组成是 6 总产仔数的遗传力低.11 6 且到一定年龄才表现 动态变化的 过去一般不将该性状作为选择性状 而现在 由于可用亲属 一般育种群由下列优良种猪组成 ①调离核心群的 用 资料通过家系指数选择法来提高选择的准确性 故人们还是 过一或两胎的母猪与其同世代的而又不想留在核心群的优 将其纳入了母系指数中 秀公猪 ②因失配 流产 一次 等原因未列入核心群但经 体型外貌性状本身由于具有商业价值 生产者买猪是要 相猪的 其组分性状有些又涉及到体质 肢蹄结实度 适 应性或与繁殖性能相关 故宜作为选择性状 建议用独立淘 汰法进行选择 列入育种目标中 鉴定为合格 并想再观察者 ③一般育种群内选育出的后代.5 关于选种方案.5.1 选种总要求 通过科学测定 准确评估 严格选留 适速更新等措施 综上所述 在当前 计划 所指出的在场内性能测定 不断筛选出遗传性能相对较优的个体补充 更新核心群 生 结束时 父系种猪主选达 1 公斤体重日龄与 1 kg 体重 产下一代 以提高核心群的年选择进展 再通过传递 扩散 活体背膘厚 母系种猪再加上总产仔数是合适的 这种进展较快地改良宝塔形繁育结构中的扩繁群和商品群 当然 实际进行结测阶段选择时 应先根据遗传评估结.5.2 各阶段的选择 果按照父系指数对父系种猪 按照母系指数对母系种猪 依 1 初选 3 kg 前 测定猪的确定 指数的高低进行排序 然后参考体型外貌表现 根据设计的 除体重过小 发育不良 不具备品种特征要求 同窝产 留种率来决定种猪的选留 另外 对于指数中各性状的经济加权值 即经济重要性 仔数过少 同窝仔猪有遗传疾患 指公猪 氟烷基因分子 检测结果为氟烷敏感等位基因 (n 即 Haln) 的纯合子 (nn 即 或者育种重要性 也可随时间的推移进行调整 但全国的核 HalnHaln) 或携带者 杂合子 Nn 即 HalNHaln) 外 其 心育种场与其他育种场必须统一执行当时的全国种猪性能 他仔猪均可列为测定猪 初选阶段不可过于严格 否则影响 测定与遗传评估方案 全场测定量和全群测定 全窝测定 的实施 还可能导致 注意 订指标时 必要时要注明是父系还是母系 完 27 留种率过高 选择强度过小

275 2 测定结束时的选择 1 kg 饲槽 饮水设备等相同 特别是要全部采用自由采食 1 kg 体重时为种猪性能充分表现的时期 因 1 kg 在整个测定期让各受测猪自始至终都处在相对相同的 体重基本上相当于瘦肉型育肥猪的最佳屠宰体重 上市体 条件下进行测定十分重要 只有这样 才能缩小环境方差 重 此时生长速度和胴体组成等性状的个体差异都表现出 提高遗传力 从而提高选择反应 2 如国外有在自由采食 来了 故为决定各个体选留或淘汰的最佳期和体重段 故在 条件下 生长速度的遗传力估值较限食条件下的遗传力估值 测定期 3 kg 1 kg 中途原则上不予销售 确需销售 为高的报道 者 须经本场育种部 育种中心确认 目前有些场对测定环境关注不够 如 ①同一批受测猪 3 配种适龄时的选择 后备群的建立 出生日期相差过大 ②非自由采食 有的场甚至至今仍未配 主要淘汰超期无发情征候及累配不孕以及因各种原因 齐统一的自由采食饲槽 不能参加配种的个体 7 测定人员 建议由总场育种技术部门固定专人进行 说明 其他阶段的正常淘汰或不正常淘汰从略.5.3 巡回测定 分场选育员配合 8 测定结果的上报 计划实施方案 规定 国家生 种猪性能测定 1) 生长性状测定 猪核心育种场至少每 2 周进行一次性能测定 并于周四前将 1 测定规模 参考 计划实施方案 要求 核心育 种场育种群的纯繁后代每窝至少测定 1 公 2 母 鼓励实施全 新的测定数据上报到全国种猪遗传评估中心 全国种猪遗传 评估中心于下周一将结果反馈至国家生猪核心育种场 群测定 性能测定量 指系谱记录完整 有达 1 kg 体重 2 体型外貌评定 外形体质评定 日龄 1 kg 活体背膘厚测定成绩 并在全国种猪遗传评 猪的体型外貌的遗传力多数为中等 有一定选择效果 估信息网备案 要求年测定 2 头以上 如猪的外形评分的遗传力为.3.35 体长为 主 要 测 定 性 状 必 须 测 定 的 基 本 性 状 为 ① 达 脊椎数为.7.75 奶头数为.3. 肢蹄结实度 1 kg 体重日龄 简称 日龄 ② 1 kg 体重活体背膘 为.1.3 对于测定猪 除初次接触体型外貌评定者外 厚度 简称 膘厚 按 全国种猪遗传评估方案 试行 一般可不进行外形评分 但须注意品种外貌特征是否明显 尚可根据各场实际情况考虑测定 3 1 kg 饲料转化率 整个体型和各部位发育是否正常 肢蹄与体质是否结实 奶 注 须说明是按栏计料还是按个体计料 如同时有两种计 头数是否符合品种要求 性器官是否正常 第二性征表现是 料方法则须分别统计 否明显 3 测定猪的确定 转群 入测与预试 3 繁殖性状测定 关于终测体重规定问题 湖北天种畜牧股份有限 必须测定的基本性状为 总产仔数 其次是产活仔数 公司明文规定在体重 95 kg±5 kg 范围内进行称重和活体测 21 日龄窝仔数与窝重 断奶仔猪数 育成仔猪数 断奶窝 膘 笔者支持这一规定 笔者认为 测定 达 1 kg 体重 重 顺便提出 3 个问题 ① 由于目前同一场不同窝的仔猪 日龄 和 1 kg 体重活体背膘厚 两性状的时间放在体 断奶日龄很难一致 断奶仔猪数与断奶窝重数据不太可靠 重 为 85 kg 115 kg ( 有 时 又 写 85 kg 12 kg) 时 进 行 ② 由于常规繁殖性状相对易于观测 最好对影响 母猪年 体重范围太宽 很不合理 笔者曾一再呼吁作适当修改 生产力 ( 每头母猪年提供断奶仔猪数 ) 2 的产活仔数 断 2 5 测定设施 ①须有测定公猪和测定母猪的专用测定 奶前仔猪死亡率 哺乳期长即仔猪断奶日龄 断奶至受胎间 舍 ②有条件的场可统一设置测定站或公猪测定站 ③关于 隔等都进行测定与记载 以便对 母猪年生产力 性状进行 配备 全自动种猪生产性能测定系统 建议不对所有育种 考察 这对生产中提高母猪年生产力以及进行用于选种的遗 场作统一要求 但目前大多数场都只配备少量此种设备 由 传育种研究都有好处 ③在英文文献中可常见到对猪的 产 于此系统较昂贵 即使一个性别的测定猪如公猪也不够用 活仔数 number born alive 这样下定义 产活仔数指 只好一部分测定公猪用这种设备 另一部份则采用普通自由 总产仔数减去死胎数 木乃伊和产后 2 小时内的死亡仔猪 采食饲槽 测定环境很不一致 结果有些场还是将两部份测 数 即我国所称的 产后即死 这一定义解决了实践中对 定猪混在一起根据其 日龄 和 膘厚 数据进行排序 笔 产后即死 的时间界定难题 对于我们测定记载 产活仔数 者认为即使校正也不合理 亟待解决 6 测定环境 除要求营养水平 饲料种类等做到合理 性状也有个统一标准 是否可采用 有条件时可有计划地进行屠宰测定 且相对稳定外 每头测定猪所处的一切条件均须相对一致 性状主要有 宰前活重 胴体重 屠宰率 胴体平均背 如同批入测猪出生日期相近 测定舍 内部结构设施 栏圈 膘厚 眼肌面积 后腿比例 胴体瘦肉率以及重要的肉质性 271

276 状如肌肉的颜色 ph 值 大理石纹 肌内脂肪含量 剪切 参加配种 笔者的亲身体会是 这很容易造成选择差的明显 力等 下降.5. 5 通过选配有目的地造就特色家系 种猪遗传评估 场内种猪遗传评估方法经统一培训均已掌握或基本掌 制定选配计划的步骤 握 其原理可参见文献 5 及 全国种猪遗传评估方案 牧 第一步 再次摸清当前猪群家底 内容可参考前面 关 站 总 2 6 号 全国生猪核心育种场尚应参考全 于育种群现有基础调查分析 再加上对以往选配效果的分 国种猪遗传评估中心得出的评估结果作为本场种猪选留的 析 重要依据.5.5 第二步 修改猪群系谱图 重新计算平均近交系数 亲 缘系数和个体近交系数 种猪选留与留种率 种猪性能测定与遗传评估后 首先依据选择指数排出种 猪优劣名次 然后至现场审查 评定选择指数靠前个体的体 第三步 育种班子至现场观察体型外貌 修改第一步的 分析结果 型外貌 采用独立淘汰法将体型外貌不合格个体排除在种猪 第四步 育种班子讨论选配原则 选留名单之外 再结合家系 血统 方面的要求 全面考虑 第五步 写出选配计划与配种计划 包括完成遗传交流 性能测定个体的去留 配种计划 留种率小是提高选择差 选择强度和一代遗传进展的必 备条件 从测定开始直至整个测定期以至种猪选留时都要考 虑这一问题 从更明确的留种率公式.7 关于父系和母系的选育以及配套系的培育 建议培育特色父系和母系 以满足不断变化和多样化的 可看出 要求留种 市场需求以及培育配套系对亲本系的需求 ① 既可在大白 率小就必须做到结测时测定群 即供选群 规模大 留种头 长白猪中培育新的母系 亦可培育父系 原同时进口了母系 数少 特别是对于公猪 父系的 可试着在此基础上进一步选育 ② 通过分析进口 2 目前存在的问题是 留种率大 选择差小 原因是 1 猪资料 现场观察外形 有可能发现培育特色品系的宝贵素 测定中途陆续出售大量 6 kg 左右的测定猪 2 入测仔猪 材 ③ 用非常规选择法有可能在纯种中培育出高产仔母系 少 或由于入测猪标准定得过高 或出于降低测定费用 3 ④ 在培育特色父系和母系中 可试用国际上有一定影响的 测定结束时每个血统的公猪留得过多 配种时不必要地 几个候选基因以及我国自主筛选的新基因 / 标记进行标记 使用了质量较次的各血统的 候补公猪 亦称 备选公猪 辅助选择或标记辅助渗入 ⑤抗应激亦可作为母系的特点加 一般需在性能测定评估结束后再入市 应尽可能做到 以培育 以剔除应激敏感 等位 基因 ⑥可尝试在外种中.5.6 适当引入中国地方猪血液以培育特色母系 年更新率 指每年核心群公母猪的更新率 公猪最好接近 1% 母猪可适当低些 尽可能做到缩短世代间隔 核心群用公猪 配套系的培育最好与相关场联合进行 [2].8 关于附件 最好能接近做到一年一个世代 母猪可适当放宽 建议将如下规程规范类和档案记录报表类资料列为附件.6 关于选配 1 场内种猪性能测定技术规程 种猪测定登记表 种 1 要求订好选配计划 精心安排选配 巩固选种效果 猪引种规范 引进种猪登记表 种猪血检规程 种猪血检登 2 选配计划要建立在再次深入调查分析当前猪群家底 记表 公母猪遗传评估表 公母猪留种登记表 生产公母猪 的新发展和新情况的基础上 3 选配要注意以下问题 1 最重要的选配原则是最好的配最好的 国际上已形 成共识 最好的配最好的是选配的第一 首要 原则 异质 死亡淘汰情况周报表 后备种猪登记表 留种率与年更新率 统计表 2 育种繁殖与生产管理档案及报表填写规范与核实保 存办法 交配 必须是最好的公猪配中等水平的母猪 中等质量的公 3 近交系数 亲缘系数估计登记表 猪不能参与配种 要合理 灵活地运用同质 异质交配 但 种猪系谱卡与种猪出场系谱证明 不能忘记选配的第一原则 5 母猪分娩与仔猪哺育登记表 母猪断奶日期与仔猪 2 一分为二看待近交 个别优秀公母猪间可视具体情 况进行高度近交 旨在巩固优点 增加优秀后代数量 3 一般情况下采用分血统分组轮回 循环 交配法 尽最大努力不动用或少动用各血统中的 备选公猪 272 育成数断奶重登记表 母猪断奶至受胎观测记录 母猪年生 产力及其影响因素统计表 6 公猪精液质量检测登记表 公猪站场内精液分配记 录 场间遗传交流计划与交流种猪的配种计划 场间公猪交

277 流登记表 公猪站精液遗传交流登记表 7 母猪配种计划表 母猪配种情况周报表 待配 断奶 返情 流产 母猪情况登记表 8 种猪病历 种猪群健康状况日志 种猪免疫登记 9 场内性能测定站管理办法 场内公猪站管理办法 1) 场内公猪站管理办法 参考文献 [1] 彭 中 镇. 全 国 生 猪 遗 传 改 良 计 划 解 读 及 实 施 中 有 关 问 题 的 讨 论. 猪 业 科 学 [2] 赵 书 红 刘 榜 樊 斌 主 编 彭 中 镇 文 集. 中 国 农 业 出 版 社 ,3-35,5-52,58-59,63,8,1618,111,12 121,132, ,23. [3] 张 沅 主 编. 家 畜 育 种 学 中 国 农 业 出 版 社 , [] 刘 榜 主 编. 家 畜 育 种 学 中 国 农 业 出 版 社 27 55,18218,192, , [5] 农业部畜牧业司 全国畜牧总站 全国猪育种方案与工作细则 , , 58-6, [6] Rothschild M F and Ruvinsky A. The Genetics of the Pig. 2nd ed. CAB Intenational, , 331,358,

278 贵州白香猪的育种原理与方法 刘培琼 刘若余 张依裕 贵州大学 贵阳 5525 摘 要 贵州白香猪是从贵州剑白香猪 两头乌毛猪 中纯系选育出的新品系 育种原理是 在猪群中根据其毛 色分布 用 同质选配的方法 让其后代中白毛基因重组 使白毛 白皮逐渐增多 黑毛 黑皮逐渐减少 至全白 毛个体形成 关键词 贵州白香猪 育种原理与方法 香猪是世界上著名的小型猪种 是经我国黔桂接壤地区 人民长期选育而形成 但要使同一类型香猪更加标准化 就 需对其选育 近年来 不同专家对从江香猪 环江香猪 巴 马香猪和贵州白香猪的选育连续不断 但创新性最强的是从 剑白香猪中纯系选育出来的新品系 贵州白香猪 1 剑白香猪的体型外貌 剑白香猪是垂耳 额部皱纹呈倒三角形 据 1997 年 图 1 剑白香猪 两头乌 刘 图 2 剑白香猪 白尾 刘培琼 培琼 1997 年 5 月科研照 1997 年产 5 月科研照 5 月贵州大学动科院刘培琼等引进的 3 头剑白香猪统计 5% 左右的猪嘴筒略短 5% 左右的猪嘴筒略长 额纹直 细 鼻吻至嘴筒的前 1/3 处为粉白色 背腰微凹 腹大下垂 后躯欠丰满 四肢略细 蹄质坚实 后备猪无卧系 成年后 多卧系 该猪外貌与华中型两头乌相似 体躯与贵州从江香猪 差异不大 毛色与广西巴马香猪大体相同 据引种时市场 图 3 白香猪 刘培琼 1995 年 图 具有 游走黑毛修饰基因 的猪同 12 月在南加考察照 质配仔代毛色分布 刘培琼科研照 上 7 多头猪统计 8% 的猪毛色为两头乌 体躯中部白色 选育出的一个香猪新品系 类型 故我们命名为 贵州白 头颈的前 1/3 处和臀部接近尾部为黑色 12.2% 的猪仅头 香猪 图 6 7 该香猪在育种中 事前无具体育种方案 部为黑毛 黑皮 黑 白交界处有 1-3cm 宽的黑皮上着生 也无育种经费 是在该猪作种质测定的配种过程中 根据猪 白毛 图 1 的毛色遗传 白色是显性的原理 渴望选出全白香猪 达中 极少数猪体躯中部有一 二块不定型的黑斑 不同的猪 国养猪界老先生们的愿望 为人类医用实验动物准备最佳猪 这黑斑位置不定 可称 游走黑毛修饰基因 经场内育种 种 一开始就用 同质配 试图使白色显性基因在后代中 过程观察 用具有此基因的猪同质配 其后代全窝的毛色分 重组 找出猪体白毛 皮增多 黑毛 皮减少的途经 布与其父母相同 如图 2.1 选育方法 如久仰香猪随机交配 游走黑毛修饰基因向前后扩大 贵州白香猪的选育方法与肉用型猪的选育方法不同 对 有可能定型像湖南宁乡猪或关岭猪的毛色分布 甚至会出现 其主要是质量性状 毛 皮的颜色 选择 猪的毛皮颜色遗 银带式的毛色 如图 5 传属质量性状遗传, 毛色是猪品种的主要特征之一 根据毛 两头乌萝卜猪因头部黑色的大小不一 甚至仅有眼 耳 色可判断其是否属于纯种或杂种 我们 根据猪毛皮颜色 和脸为黑色 尾根处黑的部分也大小不一 甚至全白 黑色 白色是显性 的遗传理论进行纯系选择 目标是选择白香猪 部分极少 故已命名为 剑白香猪 重点在 白 字上下工夫 个体大小的选择方向为负向选择 2 贵州白香猪的育种简介 其选择方法 当时根据场内现有剑白香猪的毛色分布确定 3 贵州白香猪是贵州大学香猪研究所从剑白香猪中纯系 个途径 27

279 图5 久仰香猪随机交配的后代 22 年刘培琼科研照 图8 白尾剑白香猪同质配的后代 刘 培琼 21 科研照 图6 图9 贵州白香猪的怀妊母猪 21 年 张启林摄影 ) 剑白香猪 白耳缺 刘培琼 1997 年 5 月引种照 而其种质特性越接近从江香猪 世代 25# 幼母香猪 刘培琼 1997 科研照 1 用剑白香猪与大约克猪进行正交 和反交 观察后 代毛色变化及其生长发育 2 再用杂种猪与剑白香猪回交 观察其毛色变异 用黑头 而其余部分全白的 白尾 香猪同 3 将 白耳缺 25 # 与耳尖着生白毛的 # 幼公猪交配 质配 产生白尾和两头乌猪 图 8 猪体毛色的黑 白比例 观察其后代毛 皮颜色变异 与引进时的比例未发生变化 对不同方法配种的后代猪进行同胞测定 比较它们 用 耳有白色 基因表型的猪进行同质配 可增加白皮和白毛 黑色部分逐渐减少 经多世代选育 而得全白毛香猪 因此 全白毛香猪称 贵州白香猪 两 头乌猪称 剑白香猪 3 图 1 种方法检测 头乌猪 其毛 皮的白色部分不会增加 黑毛 皮不会减少 贵州白香猪的 6 月龄公猪 刘培 琼 21 科研照 为确定这 2 头耳有白色基因表型的猪是纯种还是杂种 用 3 利用两头乌猪同质配 越选两头乌猪 其群体的体型外貌表现越一致 均为两 图7 的体尺变化 进行选育 选育结果 为了解剑白香猪用引进的白色猪种作杂交后的毛色, 进 行以下实验 1 剑白香猪 J 与长白猪 L 正交 图 11 贵州白香猪的育种过程 由于白色香猪在实验动物中用途最佳 因而纯系选育全 白毛 白皮的香猪 ( 贵州白香猪 ) 是当时我们育种工作者的 F1 代为全白毛 耳型倾向长白猪 图 11 2 大约克猪 LW 与剑白香猪 J 反交 图 奋斗目标 12 F1 代仔猪毛色均为全白 仅见极少部分皮有轻微的黑 3.1 应用猪种 斑点 证明两头乌香猪和贵州其它地方猪一样 与引进白毛 将 白耳缺 25 # 幼母香猪参加全群生长发育测定后 猪杂交 白色为显性的原理 而头 耳型与剑白香猪相似 经仔细观察 发现引回 的 3 头公猪中 有 1 头 耳 边 有 宽 1.2 cm 长 1.5 cm 左右的黑皮着生 白毛的 # 幼公猪交配 3.2 方法 因当时基因检测国 内仅一两家 而经费贵 图 11 J L 正交 F1 代的体型外 貌 刘培琼科研照 图 12 LW J 反交 F1 代的 体型外貌 刘培琼科研照 图 13 LWJ J 回交后代猪的毛色变 化比例照片 刘培琼 1998 科研照 275

280 图 1 LWJ J 回交 F1 图 15 一世代花耳的幼 图 16 二世代两头乌 图 17 三世代全白毛香猪黑 图 18 四世代幼仔香猪毛 代双月仔猪的外貌特征 母香猪 63 # 6 # 仔 香猪比例减少 刘培琼 皮部分减少 刘培琼 1999 年 色已全白 仅头部还有黑 刘培琼 1998 科研照 猪 刘培琼 1998 科研照 1999 年 2 月科研照 11 月科研照 皮 刘培琼 2 年科研照 3 用杂种猪的公猪 LWJ 再与剑白香猪 J 回交 行同质交配 仔代猪中 其中 2 头幼母香猪 (63 # 6 # ) 7 头仔猪毛色出现 头全白 3 头两头乌猪 图 13 为花耳 图 15 脸部和耳的黑色毛 皮面积比父母代大约 5 杂种猪的生长发育测定 减少 2/ 3 证实白色基因在 (63 # 6 # ) 这 2 头仔代身 1997 我们对剑白香猪作正 反交试验 其 F1 代作生长 上开始重组 白毛 白皮已增多 这为纯系选育白香猪找到 发育测定结果 用其判断剑白香猪基因型 结果见表 1 由表 1 说明 杂种猪 2-6 月龄体重 体尺均大于纯种 了捷径 7 3 世代全白毛香猪的毛色分布 剑白香猪 而小于大约克猪 虽表现了杂种优势 但杂种猪 为得到全白色香猪 用 63 # 6 # 幼母香猪与 28 # 的体尺 体重小于大约克同龄猪的体尺体重 说明杂种猪受 半同胞 ( 耳边仅一点白边 ) 公猪再进行同质交配 63 # 母 矮小型基因影响而控制其体型增大 进一步说明剑白香猪是 香猪产仔 9 头 其中 头全白毛 (3 母 1 公 ) 5 头两头乌 小型猪 正交 F1 代的平均体重 体尺均大于反交 因大约 猪 (3 母 2 公 ) 6 # 号母香猪产仔 7 头 其中 头全白毛 (3 克母猪的体型大 哺乳期储备的营养多 可能与母体效应有 母 1 公 ) 3 个黑头 白尾的仔猪 为得到全白毛 白皮 关 反交 杂种猪的体尺 体重偏向剑白香猪 反交后 不 的香猪 再作白色基因型同质配 其仔代中 两头乌仔猪的 同月龄杂种猪体尺变化趋向于剑白香猪纯繁后代的体尺参 数逐渐减少 全白数逐渐增加 图 16 图 17 四世代已全 数 这些参数与从江香猪相近 更说明剑白香猪是小型猪 白 图 18 从零至四世代的图片说明 从一世代花耳猪的出生 到 6 用 白耳缺 的剑白香猪同质交配 毛 皮 颜色变异 以后每个世代 每窝猪中 全白毛猪数逐渐增多 两头乌猪 毛色变异 用 # 公猪与 25 # 幼母香猪 图 1 进 数逐步减少 到四世代猪全部为全白毛香猪 为贵州白香猪 表1 白香猪与大约克猪正 反交 F1 代猪的生长发育统计 月龄 测定头数 头 正 体重 (kg) 13.38± ± ± ± ±8.8 交 体高 (cm) 33.7± ± ±2..17± ±1.5 F1 体长 (cm) 56.25± ± ± ± ±7.91 代 胸围 (cm) 53.2± ± ± ± ±3.93 腹围 (cm) 62.83± ± ± ± ± ± ± ± ±97.7 平均日增重 (g) 正 交 F1 代 测定头数 头 体重 (kg) 7.31± ± ± ± ±3.15 体高 (cm) 27.38± ± ± ± ±1.9 体长 (cm) 9.67± ± ± ± ±8.65 胸围 (cm) 6.17± ± ± ± ±.57 腹围 (cm) 55.67± ± ± ± ± ± ± ± ±56. 平均日增重 (g) 276

281 表 2 3 世代全白毛香猪的毛色分布 世 代 窝 数 窝 总产仔 数 头 白色基因公猪数 头 1 ( 耳尖白 ) 1 (28 # 公猪耳尖黑皮着生白毛 ) 2 ( 全白毛 ) 6 ( 全白毛 ) 白色基因母香猪数 头 1 ( 白耳缺 ) 2 (63 # 6 # 黑白花耳 ) 6 ( 全白毛 ) 8 ( 全白毛 ) ( 白尾 ) 两头乌猪数 头 白 = 白香猪 约 = 大约克 白 约 = 白香猪 大约克 正交 约 白 = 大约克 白香猪 反交 的选育成功稳定了选育技术路线 零至三世代仔猪毛色变化 8 见表 2 选育中出现纯白香猪 该猪育种过程中也曾产过纯白香猪 图 2 但该猪成 从表 2 分析 世代基础群的 3 头猪中 发现仅有 1 活率极低 就是能活 视力和听力极差 失去育种目的 以 头母香猪 白耳缺 和 1 头耳尖着生白毛的公香猪, 然后同 后不再往纯白选 而是就固定 9 世代外貌 为 贵州白香猪 质配 该母香猪产下 8 头仔猪 其中 2 头花耳幼母 (63 # 9 6 # ) 表明白色基因在这类群的猪中 只要同质配 都 同胞测定 1997 年 5 月 21 年 5 月 四年间 共进行 5 个世代 有极少数猪表现显性 白耳缺 将一世代两窝作白色基因 世代 选育 世代为引进猪种组成基础群 同质配 产下 16 头仔猪 其中全白毛猪 8 头 两头乌猪 8 头 两头乌香猪 剑白香猪 全白毛香猪 贵州白香猪 两个 全白毛和两头乌颜色变异比例为 1 1 品系共 6 个家系已建立 将 二 世 代 的 6 头 母 香 猪 再 作 同 质 配, 因 酒 糟 中 毒 试猪选自 97 年 5 月从剑河县引进的剑白香猪到贵州大 5 窝 产 下 2 头 仔 猪 仔 猪 毛 色 变 异 显 不 出 遗 传 规 律 学香猪育种场 进行种质测定的同时 经四个世代选育 已 但从正常产仔的窝中 全白毛香猪数与两头乌猪数比例基 初步保留 3 个家系 现将 26# 系 两头乌猪 27# 系 黑 本为 1 1 但每头全白毛猪的额部黑皮面积减少 有个 头 白尾猪 B 系 贵州白香猪 等三个家系 二世代时 别的猪几乎皮 毛为全白 为区分两类毛色的猪 称两头 进行同胞测定 其内容主要报道生长发育 结果如下 乌猪和白尾猪为 剑白香猪 Ⅰ系 各世代选育的全白 剑河白香猪 26# 系 两头乌 27# 系 两头乌 白尾 毛香猪为 贵州白香猪 四世代 II 系 图 和 B# 系 白耳缺 二世代 2 6 月龄体重 体尺测量 不 同家系的同胞测定比较 结果见表 3 图 19 四世代贵州白香猪 刘培 琼 2 年科研照 图 2 四世代贵州白香猪 2 年 刘培琼科研照 图 21 五世代贵州白香猪 刘培琼 21 科研照 图 22 五世代贵州白香猪 刘培 琼 21 科研照 图 23 八世代贵州白香猪 刘培琼 25 年 8 月科研照 图 2 近交后代的纯白香猪 22 刘培琼科研照 277

282 表 3 不同家系香猪的同胞测定结果 家系 B系 月龄 测定头数 体重 Kg 7.± ± ± ± ±3.12 体高 cm 27.99± ± ± ± ±1.32 体长 cm 8.8± ±.28 6.± ± ±1.85 胸围 cm.23± ±.2 57.± ± ±.9 腹围 cm 53.73± ± ± ± ± ± ± ±66.22 平均日增重 g 26# 系 27# 系 177.5± ±21.6 测定头数 体重 Kg 7.1± ± ± ± ±2.96 体高 cm 3.7± ± ± ± ±2.6 体长 cm 9.72± ± ± ± ±3.18 胸围 cm 5.7± ± ± ± ±.2 腹围 cm 55.± ± ± ± ± ± ± ±39.25 平均日增重 g 112.± ±26.28 测定头数 体重 Kg 11.35± ± ± ± ±2.12 体高 cm 3.25± ± ± ±1.76.9±1.2 体长 cm 55.± ± ± ± ±1.58 胸围 cm 5.57± ± ± ± ±3.5 腹围 cm 61.± ± ± ± ± ± ± ±2.3 平均日增重 g 全期 22.51± ±1.9 注 B 家系经纯系选育后就是贵州白香猪类型 从表 3 分析 1 体重 2 月龄 B 家系 26# 家系 和 27# 家系分别为 7.Kg 2 体高 2 月龄 26# 家系 3.7cm 略高于 B 家系 cm 和 27# 家系 3.25 cm 经方差分析 家系间差异显著 7.1kg 和 11.35kg 27# 家系显著高于 B 系和 26# 家系 P <.5) 多重比较结果 27# 家系大于 B 家系 家系间 经方差分析 家系间差异极显著 P <.1) 多重比较结 差异显著 P <.5) 26# 家系和 B 家系差异显著 P <.5 果 27# 家系大于 26# 家系 家系间差异极显著 P <.1) 3 5 月龄各家系体高参数均较接近 经方差分析 家系 27# 家系也大于 B 家系 家系间差异极显著 P <.1) 间差异不显著 P >.5) 6 月龄各家系体高分别为 B 家 26# 家 系 虽 小 于 B 系 但 差 异 不 显 著 P >.5 3 月 系 1.59 cm 26# 家系 cm 和 27# 家系.9 cm 龄 体 重 27# 家 系 为 1.3kg 均 高 于 B 家 系 1.83kg 经方差分析 家系间差异显著 P <.5) 多重比较结果 和 26# 家 系 (11.93kg) 经 方 差 分 析 家 系 间 差 异 显 著 27# 家系高于 26# 家系 系间差异显著 P <.5) 26# P <.5) 作多重比较 27# 家系大于 26# 家系 家系 家系矮于 B 家系 家系间差异显著 P <.5) 27# 家系 间差异显著 P <.5) 27# 家系大于 B 家系 家系间差 矮于 B 家系 家系间差异不显著 P >.5 异极显著 P <.1) 5 月龄各家系体重均较接近 经 3 体长 方差分析 家系间差异不显著 P >.5) 6 月龄体重分别 2 月 龄 B 家 系 26# 家 系 和 27# 家 系 体 长 分 别 为 为 26# 家 系 23.kg B 家 系 2.5kg 和 27# 家 系 9.18 cm 9.72 cm 和 55. cm 27# 家系略长于 B 家 29.83kg 经方差分析 家系间差异不显著 P >.5) 系和 26# 家系 经方差分析 家系间差异不显著 P >.5) 278

283 3 5 月龄各家系体长均较为接近 经方差分析 家系间 较为接近 经方差分析 家系间差异不显著 P >.5) 6 差异不显著 P >.5) 6 月龄 26# 家系体长为 cm 月龄 26# 家系腹围为 cm B 家系腹围为 8.75 cm 均 短 于 B 家 系 cm 和 27# 家 系 cm 经 和 27# 家系腹围为 cm 经方差分析 差异不显著 方差分析 系间差异显著 P <.5) 多重比较结果 27# P >.5) 家系长于 26# 家系 系间差异显著 P <.5) 26# 家 综上所述 三个家系在不同月龄的体重 体尺参数较为 系短于 B 家系 家系间差异显著 P <.5) 27# 家系长 稳定 虽然在生长前期 断奶后 表现差异性大 是由于仔 于 B 家系 但系间差异不显著 P >.5 猪在饲养前期受一些环境因素和母香猪泌乳量影响而导致 胸围 因此 剑白香猪经过选育后 不同家系同月龄体重 体尺参 2 月 龄 B 家 系 26# 家 系 和 27# 家 系 胸 围 分 别 为 数较为稳定 说明三个家系依然保留了剑白香猪原种特点.23 cm.7 cm 5.57 cm 27# 家 系 略 大 于 B 家 不同家系间同一月龄胸围和体长参数接近 也说明它们是脂 系 经方差分析 系间差异显著 P <.5) 多重比较结果 肪型的小型猪种 27# 家系和 26# 家系比较 差异显著 P <.5) 27# 家 1 结束语 系和 B 家系比较 差异极显著 P <.1) 月 1 从贵州白香猪的育种过程 说明猪的常规育种既简 龄时 各家系胸围参数接近 经方差分析 家系间差异不显 单 又复杂 但只要我们努力 有明确的育种目标 把常规 著 P >.5) 5 月龄各家系胸围参数均较接近 经方差 育种与现代育种相结合 育出不同历史时期市场所需的猪 分析 差异不显著 P >.5) 中国的育种学家一定能作出优异成绩 5 腹围 2 月 龄 27# 家 系 的 腹 围 61. cm 大 于 B 家 系 cm 和 26# 家系 55. cm 经方差分析 家系 2 中国地方猪种五彩斑斓 是我们进行猪育种的最好 原始猪种 我们要用好这些猪种 沿着前辈的足迹前进 参考文献略 间差异不显著 P >.5) 3 5 月龄各家系腹围参数 279

284 持续准确的进行猪第 1 肋处测定的重要性 冯细钢 北京华特希尔种猪技术有限公司 北京 1 自农业部 29 年颁布 全国生猪遗传改良计划 29- 回顾 猪的骨骼结构图如下 22 以来 全国涌现出一大批优秀的种猪育种企业 至 211 年年底 全国共有 37 家企业申请成为国家核心育种场 同时也得益于该计划的推出 场内育种人员的地位得到了很 大的提高 场内测定工作也得以真正的实施 笔者也有幸参 与过核心育种场的评审准备工作 现就如何持续准确的进行 场内的测定工作 尤其是运用 B 超进行实时扫描以获取背 膘厚及眼肌面积这一议题浅谈个人的看法 1 测定背膘厚与眼肌面积的缘由 很早就有文献提出运用背膘厚以及眼肌面积的测定结 果来推算猪只的瘦肉率 目前基于这两个测定结果用来计算 瘦肉率以及瘦肉重量的计算公式如下 北 卡 罗 拉 州 州 立 大 学 (North Carolina State University) 动物科学系对于瘦肉率的计算公式如下 % 假定一头猪的测定结果为活体重 11kg 1 肋处背膘 厚为 1.3cm 眼肌面积为 cm2 则该猪的预测瘦肉率计算 为 而美国猪肉联合会 National Pork Board 对于活猪 根据 B 超实时扫描结果预测瘦肉重量的计算公式如下 备 注 性别值阉公猪为 1 母猪为 2 一般从动物的外观上来讲 定位第 1 肋或者 11 肋的一 个简单的标准是从肩胛肋骨上方向后一手掌的距离就是 至 于测定的位置左右均可 没有不一样 但需要保证的是测定 假定一头阉公猪的测定结果为活体重 125.6kg 1 肋 的位置持续相同或者至少保证每一批次的测定方向是相一 处背膘厚为 1.8cm 眼肌面积为 7cm2 则根据上述公式 致的 一般来说习惯使用右手的人测右边比较顺手 该猪的预测无脂瘦肉重量为 9.86kg 按照屠宰率为活重的 3 7% 进行推算 则该猪只的瘦肉率为 如何准确定位第1肋 第 1 肋和第 11 肋的中间处是公认的测定背膘厚与眼肌 面积的标准点 虽然猪的肋骨可能有 肋不等 但无 因此来说 只有不断的进行上述两个指标的选育 以期 数的屠宰数据证明第 1 肋处测定所取得的数据与猪只的屠 取得遗传进展, 方能提高瘦肉率 最大限度的创造经济价值 宰率 屠宰瘦肉率有直接相关 见上述公式 借助实时 B 同时也从另一方面说明准确进行扫描定位取得数值的重要性 超的测量我们可以清晰的得到眼肌的二维图像 而后根据仪 2 器的计算结果得出数值 第1肋的位置 要讨论第 1 肋的位置 则需要重新进行动物解剖学的 28 眼肌从第 1 肋处开始 到最后肋时变得最大化 可根据

285 积偏小 从左上图可以看到脊髓背阔肌和斜方肌均出现在视 野中 这时应当将探头稍向后移少许 中间图片出现在视野中时 提示我们可能测定位点过于 靠后 视野中出现的眼肌变为不规则扇形 此时背膘比实际 偏薄 同时眼肌面积无法取点进行计算 最后一张图片的位置刚刚适合 眼肌图片显示较为椭 第 5 肋处 第１ 肋处 最后肋处 圆 唯一出现的问题是眼肌图片的下缘相对平直以及右下角 下述肌肉纵切面图 从第 5 肋到第最后肋处 看到不同肋处 边缘黑暗显示不完整 这时候需要轻微调整角度即可取得较 的眼肌形状变化 只有当眼肌处于最椭圆形时采集的数据才 好的图片用于分析 是最准确的 5 分析与取值 同样背膘厚从前往后是慢慢变薄的 也就说测量位点的 改变也会引起背膘数值的不同 场内测定工作应准确持续的 在位于第 1 肋处测定 测定图片的采集与调整 目前场内测定使用仪器最多的为 Aloka SSD 5V 和 Aquila Vet 设备 上述的实际纵切面图可以给我们的现场 实际操作人员一个很明显的提示 只有将这些基本的解剖 学理论与实际相结合 就可以在临床上根据视野图像做出 调整 取得一张满意的图片后 接下来的工作就是如何取值 背膘厚的取值应该从最上面的点一直拉到眼肌的上方 而并 非之前部分人所说的去掉皮厚 这样取得的数值才是较为准 确的 同样的取值还有眼肌面积的计算 目前通用的做法有 描圈计算以及取四点仪器自动生成椭圆进行计算 当然这一 切的结果还是取决于图片的质量了 如果说坚持场内测定是 育种工作的基础 那么持续准确的进行第 1 肋处的测定则 例如第 1 张视野显示的图片提示太过靠前 可能位于 6-8 肋处 如果此处取值出现的问题就是背膘偏厚 眼肌面 是保证有效场内测定的基础以及是否取得遗传进展的关键 之所在 281

286 原种猪场育种工作的实践开展 贺佳伟 才永娟 黄如渠 湛江广垦沃而多原种猪有限公司 广东 湛江 5238 摘 要 本文结合广垦沃而多场内实际情况进行实践 开展育种工作 从3个方面论述了原种场在实际生产中 育种工作的实践操作即组建专业队伍 应合理 严谨地在实践生产操作中开展育种工作 建立完善的种猪选育 制度 关键词 原种场 育种 实践生产 作为猪群繁育体系塔尖的原种场 其职能及作用对于整 2.3 详细记录数据内容 个体系的建立是至关重要的 同时其工作也是极其繁重的 配怀舍数据收集包括发情配种记录 建立发情配种档 育种工作对于原种场的稳定 持久发展起到重要的作用 如 案 尤其是对首次发情日龄和断奶至发情时间间隔的记录 何在实践生产中合理高效的开展育种工作应从以下几方面 以及. 配种明细记录 要求准确无遗漏及时输入育种软件中 着手 以保证后代血统无误 分娩舍数据收集包括母猪产仔记录 1 组建专业队伍 树立正确的育种理念 记录好总产仔数 活仔数 健仔数 弱仔 畸形 死胎 木 育种工作的开展与生产实践是密不可分的 而组建专业 乃伊和预产期与实际产仔时间的间隔 仔猪猪个体出生及生 队伍和树立正确的育种理念的前提是 参与其中的饲养员 长情况 仔猪出生重 断奶重 断奶个体重 并计算出生窝 技术员 育种主管 场长能够完成各自职责 重 断奶窝重 母猪的哺乳率 保育舍数据收集 77 天左右 本厂育种技术指导为美国育种专家 Socha 博士 另外 下床的个体重 并计算在保育期间的个体生长速度和批次料 有丰富的生产实践经验的技术管理人员任场长 这样对整个 肉比 测定舍数据收集被测定猪的生长速度 达 1kg 体 育种工作开展起到了有利的支持 推动及监督作用 育种主 重的背膘厚 批次料肉比 有条件的猪场可用生长自动测定 管是日常育种工作的规划者 监督者 主要负责测定数据分 器进行测定 在此阶段还要收集一些遗传缺陷 并追踪其血 析 后备选育选留以及对日常育种工作中各个环节的监督 统及时进行选配计划的调整 有遗传缺陷个体的同窝不做留 其工作中要保持理性 严谨的工作态度 种对象考虑 场长 育种主管应及时与育种技术员 岗位技术员 饲 2. 配备专业人员和设备 养员沟通育种工作方面的相关情况 并及时作出调整 生产 数据是猪群性能的直接体现 如出生重量 出生活仔数 断 配备专门的采集数据人员 测定人员及统一测定设备 包括电子磅称背膘仪等 奶重量 断奶头数等相关数据直接反应育种工作的开展情 3 况 3.1 确定育种选育方向 2 合理 严谨地在实践生产中开展育种工作 2.1 收集育种相关数据 可安排与生产数据同时收集 如出生重 出生活仔数 建立完善的种猪选育制度 根据品种制定明确选育侧重 杜洛克将猪达到 1 kg 时的日龄和背膘厚度及 EBV 父系指数作为首选依据注重个 体成绩 大白 长白品种侧重繁殖性能的成绩 EBV 母系 断奶重 断奶头数等育种数据 并做好详细记录 如母猪的 指数 从大群成绩综合考虑选留 设计父系指数的目的是选 耳号 胎次 出生日期等能够确定反应出母猪本胎次成绩及 择终端父本所需的品种或品系 将其日龄和背膘厚度估计育 繁殖性能 种值综合在一起选种 设计母系指数的目的是选择商品生产 2.2 简化收集育种相关数据的环节 的母系品种或品系 将其窝产仔数 (NB) 日龄 (AGE) 和 如断奶转群时测定断奶重 而不测定 21 日龄体重 保 背膘厚度 (FAT) 等性状的估计育种值综合在一起选种 指 育猪转群时测定 77 日龄重量 保育期间不再测定体重 育 数中的经济加权系数以性状的经济加权 ($) 和估计育种值 成阶段在保证测定头数规模前提下非种猪不测定 的标准差为基础 指数的均数为 1 标准差是 25 约克 282

287 表 1 不同猪种的综合选择指数公式 品种 父系指数 母系指数 约克夏 FAT-3.9 AGE NB-1.3 FAT-2.6 AGE 长白猪 FAT-3.28 AGE NB-1.2 FAT-2.5 AGE 杜洛克 FAT-3.75 AGE NB-12.8 FAT-3.16 AGE 注 引自 Nicholls 1997 夏 长白猪 杜洛克猪种的父系和母系综合选择指数见表 1 合指数 指数越高说明进展越快 指数在 1 以上才可作为 3.2 建立核心育种群 选留对象 且同窝数不能太少 全同胞中没有遗传缺陷性状 规模化原种猪场一般种猪群年更新比率为 3% 左右 并且一定要结合现场根据本品种外貌特点对体型的进行评 通常是在 2 5 胎的原种群中挑选同窝仔数多 且无遗传 分育种主管场长应对决定最终选留数量及个体, 具体步骤 疾患 体型外貌符合要求并生长速度快的留做后备种猪进 如下 行补充 测定初生重 首先对现存种猪群的血缘进行分析 将生产性能相对较 现代版进口杜洛克初生重为 1.7 kg 初产 和 1.8 kg 经 低或头数较少的血缘转入扩繁群 其次对已有繁殖及生长性 产 最新版的杜洛克初生重 kg 也不稀罕 初生重 能等测定的数据进行分析 根据生产性能的高低或选择指数 大是向体大快长方向育种的必然结果 优秀的种公猪的后代 进行排队 在保证血缘的情况下 将繁殖性能好 生长速度 的初生重往往落在 kg 之间 快 体型外貌符合品种要求的种猪选入联合育种核心群 育种核心群的数量要根据本场原种猪的规模选择 28 日龄初选 28 日龄断奶重在 kg 体长 无单睾 隐睾 1/3 1/ 的猪群 ( 一般不少于 5 头 ) 组成核心群 核心 毛色符合本品种特点 杜洛克品种毛色 金黄 --- 大红 --- 群内公母猪比例维持在 1 5 以保证公猪数量和质量 棕红 --- 棕 --- 深棕 接近黑色 此毛色在初生时带条 对测定数据不全的群体 拟先根据血缘 体型外貌及繁 殖记录等进行组建基础群 然后按核心群管理方法进行配 种 繁殖记录及后代生长性能测定 最后依据测定成绩评估 排序 在保证血缘的情况下按要求组建新一代核心群 核心群与扩繁群的管理 核心群选育采取一年一世代 新的核心群组建后 将上一世代的核心群中部分性能较差 状斑纹 都属正常 日龄选种 选择 77 日龄个体重在 37 kg 以上的个体 骨架高大 身材修长伸展而无厚重之感 淘汰有疝气 包皮过大 耳血 肿 蹄匣过长 两蹄叶大小不一 母猪阴户异常的个体 月龄测试成绩 的种猪淘汰 其余的将转入扩繁群 目前核心群选育均采用 生长猪 5 月龄时测定其背膘 眼肌深度 体重 通过 闭锁 - 开放 相结合的管理方法 一是允许世代交替 即 Herdsman 软件得到其终端指数成绩并参考其背膘 9-11 对核心群中性能表现特别好的种猪 允许再留至下一世代 mm 眼肌深度 (5-6mm) 28 日龄个体重 77 日龄个 与后代一起共同组成新的核心群 更叠比例不超过 25% 二 体重 达到 1 kg 的日龄结合外观评定 此时的后备公猪 是允许导入外血 在核心群近交增量过大或有优秀外血情况 应具有的外部特点是 身高体长 背阔肉厚 深胸圆肋 四 下 适当引入外来血缘 丰富核心群遗传资源 肢宛如立柱四蹄蹋地有力 眼大额阔 鼻直口宽 一对下垂 3.3 采用有效的 简洁的选留后备猪方法 小耳 精神充沛泡沫满口 雄狮般的气宇轩昂 稳重矫健无 阶段性选留对后备猪选育意义重大 哺乳阶段对公猪 与伦比 后备母猪眼大有神 口鼻清秀 脸腮圆润而不臃肿 阉割率应有明确的数值前提保证测定的数量及规模 挑选 颈清秀而不单薄 腰身修长有力而不下塌 腹线紧收排列 7 3 日 龄 kg 以 上 公 猪 将 其 留 下 并 对 出 生 重 在 对奶头整齐 臀宽而丰满阴户大而下垂 四肢有力步态轻盈 kg 个体进行跟踪 保育阶段侧重对本胎次母系指 参考体型挑选后备猪时 应按品种和性别的顺序来进行选留 数优秀的后代进行跟踪并记录 77 日龄转群重成绩优秀个体 工作 这样可以在一段时间内让挑选者对一品种一性别保持 的耳号 37kg 以上 对于猪群 1kg 测定时应根据终端 较强的判断 辨别能力提高工作效率从而挑选体型优秀的后 指数 母系指数 校正达到 1 公斤的日龄 背膘厚度以及 备猪 之前的转群体重 根据本场的具体情况按比例选留后备公母 经过近 3 年的不断选育我场猪群性能成绩有了一定提 猪 所有选留对象都必须经过测定 并运用育种软件计算综 高 29 年广东省春季种猪拍卖会我场杜洛克公猪 耳号 283

288 核心群公猪每年 5% 更新率 母猪群根据情况 25%3% 更新率 首先对病残生产性能下降以及无效生产日期超 过 2 天的母猪进行淘汰 另外根据本场群体终端指数 母 系指数成绩水平对公猪 母猪进行淘汰 3.5 针对育种工作种猪选育反面开展奖罚制度 建立完善的管理考核体制将配种工作 育种工作 管理 图１ 图2 工作与劳动收入挂钩的合理奖惩制度 具体如数据的采集的 18 获第一名 图 1 21 年年广东省秋季种猪拍卖会我 准确性及阉割的公猪体型鉴别能力 测定种猪的熟练度及种 场大白公猪 耳号 33 获第二名 图 2 猪等级鉴别等 制定细致奖罚方案 在原种猪场突出育种目 3. 坚持核心群更新工作可加快遗传进展 标的实现 28

289 加强基层畜禽品种改良工作的思考 翟诗明 湖北省远安县畜牧兽医局 湖北 畜禽品种改良工作是推动现代畜牧业科学发展的基础 和先导 自十一届三中全会以来 特别近些年来 在各级党 委 政府的领导和上级畜牧兽医主管部门的正确指导下 基 2 远安 2 当前基层畜禽品种改良工作存在的主要问题 2.1 专职人员不足 专业技术滞后 国务院关于推进兽医管理体制改革的若干意见 国发 层畜禽品种改良工作得到了较快发展 所产生的经济效益 [25]15 号 下发后 各地建立健全了基层畜牧技术推广机 社会效益十分明显 为提升城乡居民生活质量 促进现代畜 构 明确了工作职责 落实了编制等 但却未严格按照文件 牧业又好又快发展和社会主义新农村建设发挥了重要作用 要求将人员 经费 办公场地等落实到位 特别是乡 镇 为更好地发挥基层畜禽品种改良在建设现代畜牧业中的巨 没有畜禽品种改良管理者和工作人员 基本上是由乡镇畜牧 大作用 笔者结合工作实际 就如何加强基层畜禽品种改良 兽医服务中心负责人和驻村动物防疫员分别替代 既没有相 工作谈以下几点看法 供参考 应的技术职称 也没有明确的工作目标和管理办法 畜禽品 1 充分认识加强基层畜禽品种改良工作的重要 意义 种改良工作存在较大的随意性 严重影响了畜禽品种改良工 1.1 加强基层畜禽品种改良工作是发展现代畜牧业的 2.2 资金投入不足 设施设备欠缺 需要 作 制约了现代畜牧业又好又快发展 近些年来 国家和各级政府分别出台了的一些惠牧政 良种是现代畜牧业最基本的生产资料 是发挥科技增产 策 极大地改善了基层动物防检机构的工作环境和工作人员 作用最重要的载体 有了足够数量的良种 才可能实现畜禽 的工资福利待遇 但真正投入到基层畜禽品种改良基础设施 产品数量的增加和质量的提高 有了数量和质量的保证 才 建设方面的资金却不多 少数基层畜禽品种改良站 点 由 可能确保现代畜牧业又好又快的发展 于投入不足 自己又无力更新和添置设备 工作环境仍是 1.2 加强基层畜禽品种改良工作是提高畜产品质量的 二十世纪八十年代建设的房屋 开展工作的基础设施设备也 需要 局限于饲养几头种公畜 猪 一台冰箱 一台显微镜 随着城乡居民生活水平的不断提高 人们对畜禽及其产 2.3 重视种公畜引进 忽视种母畜品质 品的需求 已不仅仅是数量上的满足 而是更加重视畜禽及 近些年来 各地紧紧依托畜牧兽医专业大专院校的科技 其产品的质量 故此 要提高畜禽及其产品的质量就必须通 力量和上级畜禽繁育机构的技术支持 生猪人工授精 肉牛 过品种改良来实现 冻配等畜禽品种改良技术获得了较好的推广和应用 养殖户 1.3 加强基层畜禽品种改良工作是增强竞争力的需要 的经济效益得到了较大提升 但从实际情况来看 基层畜禽 良种是竞争力 只有优化资源配置 整合现有力量 做 品种改良机构往往只重视种公畜 或冻精 的引进 不重视 大做强种畜禽产业 培育形成一批育 繁 推一体化的种畜 种母畜养殖 繁育 事宜 而小规模养殖户和散养户因对畜 禽产业大户 大场 提高种畜禽生产力水平 才能增强畜禽 禽品种改良缺乏足够的认识等原因 饲养的种母畜也基本是 产品在国内和国际市场的竞争力的目的 通过地方品种进行轮换 只有在种母畜病死或者繁殖力持续 1. 加强基层畜禽品种改良工作是促进养殖户增收的 下降的情况下 养殖户才对其进行更换或者淘汰 需要 2. 监督管理不严 惩处打击不力 良种是效益 现阶段 在同等条件和环境下 养殖户饲 虽然国务院和各级政府相继出台了 种畜禽管理条例 养一头三元杂交生猪的效益比饲养本地 土 生猪的效益高 及其实施细则等法律法规 但个别地方的少数群众无视法律 一成左右 饲养一头杂交牛可比饲养一头未经改良牛多收入 法规 随意饲养种畜禽 随意实施动物交配 造成了伪劣种 3 5 元 畜禽坑农 害农 损坏群众利益的事件发生 个别地方政府 285

290 的畜牧兽医主管部门不认真履职 有法不依 执法不严 违 体 私营经济参与畜禽品种改良工程建设 多渠道筹措的资 法不究的现象依然存在 未能对畜禽品种改良工作实施严 金应集中用于基础设施建设 改善检测手段等方面 确保以 格 有效监督和管理 造成了基层畜禽品种改良工作秩序混 最快速度 最大限度地发挥畜禽品种改良的经济效益和社会 乱 畜禽品质下降等现象 这种状况不彻底改变 基层畜禽 效益 品种改良工作的质效不仅不会得到提升 还会严重影响现代 3. 强化队伍建设 提升业务技能 畜牧业的发展 甚至会波及该区域社会和谐 稳定和发展 3 加强基层畜禽品种改良工作的对策与建议 3.1 加强法规宣传 营造良好环境 各级畜牧兽医主管部门和畜禽品种改良单位要高度重 建立健全教育培训工作机制 着力推进学习教育培训工 作的制度化 经常化 以提高专业服务能力和水平为目的 以解决基层畜禽品种改良工作中存在的实际问题为重点 脱 产培训与短期培训相结合 专业技术培训与综合业务培训相 视畜禽品种改良相关法律法规的宣传 加大宣传工作力度 结合 采取 送出去 请进来 县校合作 阳光工程 要充分采用群众喜闻乐见的方式 或者采取发放宣传资料 等多种方式 抓好现有专业技术人员的新知识和基本业务操 送法上门 播放影像资料 现场答疑等形式广泛宣传 真 作技能培训 突出抓好人才引进 敞开人员入口 有计划的 正使畜禽品种改良的生产者 经营者 管理者学法 懂法 引进畜牧兽医专业大 ( 中 ) 专毕业生 优化队伍知识 年龄 守法 执法 营造一个良好的畜禽品种改良社会环境 专业结构 提升服务现代畜牧业的能力 3.2 突出区域重点 科学合理布局 3.5 强化监督管理 促进产业发展 因各地自然 地理 气候 经济状况不同 畜牧业生产 种畜禽是现代畜牧业生产最重要的基础 只有加强种畜 水平和畜禽及其产品消费能力不一样 加强畜禽品种改良工 禽生产监督和管理才能保证现代畜牧业生产的正常进行 各 作须在严格遵循国家和上级政府畜禽品种改良建设总体规 地畜牧兽医主管部门和畜禽品种改良单位要积极与法院 公 划的基础上 紧紧结合地方实际需要 突出重点 制订科学 安 工商等有关部门联合组建工作专班 定期或不定期地开 合理的规划 要杜绝盲目投资 重复建设 展执法检查 严厉打击违法违规行为 切实保护种畜禽生产 3.3 争取资金投入 夯实工作基础 者 经营者的合法利益 保障现代畜牧业健康 持续 有序 畜禽品种改良是一项系统工程 仅依靠地方财政投入远 远不够 在畜禽品种改良建设过程中 各地除了要积极争取 党委政府和领导的重视 获得各级财政支持外 还要引导集 286 科学发展 为社会主义新农村建设和养殖户增收做出积极的 贡献

291 关于开发利用我国黑猪资源的意见 李锦钰 佛山科技学院 广东 1 佛山 528 引进国外良种是一把双刃剑 国内首家通过国际多家有机食品认证的产品 精气神黑猪 据不完全统计 211 年我国从加拿大 美国 英国 法国 瘦肉率 58.71% 肌肉脂肪.% 猪肉口感好 风味佳 雪 丹麦引进种猪数量达到 7166 头 多数猪场一次引种在 5 花肉售价 元 / 公斤 肋排 18.2 元 / 公斤 五花肉 头以上 211 年 5 月广州畜牧总公司引进英国曾祖代猪就 元 / 公斤 深受高端顾客欢迎 达到 129 头 从国外引进种猪的后代在国内售价为 公猪 3 关于开发利用黑色猪种的意见 3 1 元 / 头 母猪 2 元 / 头 由于利 我国黑猪主要分布在东北 华北 西北 淮河与长江之 润丰厚 以致国外的种猪公司和一些投资集团与中国的猪企 间的沿江沿海 四川盆地 青藏高原等地区 据 中国猪品 合资办场或大量收购国内的猪场和饲料厂 从而使得我国猪 种志 介绍 中国地方猪种 8 个 其中黑色猪品种 33 个 场大多是国外品种 土种猪少之又少 占 69% 黑猪分布的地区约占我国国土面积的 7% 左右 良种的引进是一柄双刃剑 国外良种繁殖力高 生长快 主要代表猪种有东北民猪 西北八眉猪 内蒙古河套大耳猪 耗料少 瘦肉率高 用以改良地方品种 能迅速提高其生产 山东莱芫猪 沂蒙黑猪 姜曲海猪 黄淮海黑猪 太湖猪 性能 对于我国发展现代化养猪业 成效显著 功不可没 内江猪 乌金猪 粤东黑猪和藏猪等 黑猪耐粗饲 适应性 另一方面 引进的杜洛克 长白和大白猪 肉质相对较差 好 抗病力强 肉色鲜红 肉质好 肌肉脂肪含量高 味香 肌纤维粗糙 肌肉含水量高 肉质风味不适合我国人民要 浓 我国自行培育的猪种均含有本国黑猪的血统 如北京黑 求 大批量从国外引种对我国猪种的影响力较大 使得许多 猪的育成是以华北型的黑猪 新金猪 吉林黑猪和巴克夏 具有悠久历史特色的地方猪种迅速减少或消失 即使再投资 中约克夏 苏联大白猪等多猪种杂交育成 苏太猪是以太湖 保种 收效甚微 特别是在引进外国种猪的同时也引进了过 猪 小梅山 中梅山 二花脸和枫泾猪 导入杜洛克公猪血 去国内没有的猪病 这对国内猪场带来的风险也是不容忽视 液育成 新淮猪是以江苏省淮安市的淮猪与大约克夏猪杂交 的 引进国外的种猪 其生长快与采用 玉米 + 豆粕 + 添 育成 新金猪是由东北 华北地区的民猪与巴克夏公猪杂交 加剂 的饲养方式有关 我国粮食生产水平适合走欧美以精 育成 三江白猪是用长白猪和民猪杂交选育成的瘦肉型猪新 料为主的饲养方式 猪是杂食性动物 采用精 青 粗饲料 品种 上海白猪是由太湖猪与约克夏猪 苏联大白猪等品种 适当配合比例的饲养方法是发展适合我国生产水平的现代 杂交育成 哈白猪则是由不同类型约克夏与东北民猪杂交育 化养猪业的最佳选择 若从国外同一猪场引进几百头猪 难 成 采用中西猪种的杂交选育 生产性能就能达到取长补短 免在血缘上有近亲的关系 以致引起后代性能有所退化 很 的目的 多猪场已出现 引种 退化 再引种 再退化 的现象 从 回顾 2 世纪 6 7 年代 我国当时饲养的猪种多为 我国国情出发 走 引种 中西融合 创新 是我国猪育种 本地黑猪 少部分为黑白花猪或巴克夏和约克夏的一代杂 工作的最佳道路 种 在以青粗饲料为主的饲养条件下 猪打三针 猪瘟 猪 2 黑猪选育的新思路 丹毒 猪肺疫 疫苗就极少发病 当然这和当时集体养猪规 吉林长春精气神农业公司选育的精气神黑猪是引进国 模不大 又极少引入国外精种 种猪交流不多有关 内外 6 个优良黑猪品种 历经 12 年培育出的体型外貌 生 利用中国黑猪作第一母本可减少从国外引种 减少种猪 产性能 肉质风味等指标均优于其他黑猪品种的精气神黑 的生产成本和减少猪病流行造成的损失 可以发挥本国良种 猪 实行生态饲养 山林放牧 喝山泉水 采食野果野菜 优良的耐粗特性 可以因地制宜 种植牧草 利用青饲料养 生长期 8 个月以上 体质强健 肉质细嫩 成为我国养猪行 猪 减少对 玉米 + 豆粕 + 添加剂 饲养模式的依赖 减 业第一个拥有完全自主知识产权的卓越企业 目前精气神黑 少对玉米豆粕的进口 211 年中国玉米进口总量 万 猪产品已进入北京 天津 上海 广州 深圳 沈阳 大连 吨 进口总额 千美元 211 年中国大豆累计进 等地的高级酒店和超市 销量以每年 65% 的速度增长 是 口量为 万吨 进口金额累计 千美元 287

292 进口的饲料主要来自美国 目前 玉米已成为国际贸易的金 笔者针对我国养猪生产模式 提出三种不同的方案 供 融产品 由于外国资本在期货市场炒作的原因 玉米价格大 养猪生产者参考 对家庭副业养猪 以选择我国黑色地方品 起大落 使我国猪肉价格涨价与降价轮番出现 使我国养殖 种母猪与杜洛克或巴克夏公猪进行经济杂交为宜 对规模化 户无所适从 备受困扰 211 年 2 月以来 芝加哥期货交易 猪场以选用我国的黑色猪作母本引用长白 大白或杜洛克 所玉米价格在过去 3 个月中竟然反弹近 3% 玉米的回报率 巴克夏公猪作二洋一土的杂交为适宜 对东部大城市和有出 竟然远远高于黄金 发挥我国地方猪种的生物特性和传统的 口任务的工厂化猪场饲养洋种猪 亦可以我国黑猪为母本选 饲养方式 可以破解猪粮产品被金融化引发的风险 利用中 育肉味香浓 口感好 肌肉弹性强 肌间脂肪多 胆固醇含 国特色的猪种资源 生产多样化的猪肉品牌就能满足消费者 量低的精品种猪 进一步生产有机猪肉 抢占国外市场 我 多样化的猪肉需求 国是农业生产的大国 期望 212 年成为 中国黑猪复兴元年 288

293 关于母猪生产力情况的调查报告 李志强 舒知魁 湘乡市畜牧水产局 湖南 湘潭 11 摘 要 目前 在养猪业发达国家 管理和经营良好的猪场 母猪可达到年产3头活仔的目标 而我国母猪每年 提供的仔猪数相对较低 本文通过对我市7个乡镇152户 场 3519头母猪生产力情况的调查和分析 阐明了我 市生猪养殖水平的现状 提出了提高母猪生产力的技术措施 关键词 母猪 繁殖性能 技术措施 提高母猪生产力是提高养猪生产效益的前提 作为养猪 管理水平至关重要 调查数据显示 三个规模化程度及饲养 生产的管理和技术服务部门 必须了解当地母猪的生产力情 管理水平较高的猪场 母猪年产胎数和产活仔数 断奶仔猪 况 并从中找出问题 加强技术指导 帮助养殖户提高技术 存活数都高于一般规模猪场及散养户饲养的母猪 和管理水平 从而提高能繁母猪年产仔猪数 促进养猪业的 健康发展 1 调查情况与分析 1.1 基本数据 本次调查采取当面了解 查看养殖档案 电话询问等形 母猪品种对繁殖力有一定影响 良种母猪胎平产仔数略低于土杂母猪 其中大约克母猪 易肥 发情不太明显 难产发生率较高 土杂母猪初情期早 分娩时产程短 难产发生率低 产仔数多 但仔猪初生重小 增重慢 饲料报酬低 同时 由于仔猪哺乳期较长 母猪平 式 先后调查了 7 个乡镇 152 户 场 共 3519 头能繁母猪 均年产胎数相对较低 农村散养户可利用土杂母猪与瘦肉型 其中存栏能繁母猪 5 头以上的规模养猪场 3 个 存栏能繁 种猪杂交育种 选留其后代作母本 能明显改善二者的繁殖 母猪 1 头至 3 头的养猪场 9 个 存栏 1 1 头的散养户 性能 1 个 据统计 3519 头能繁母猪共年产 7129 胎 平均年 产 2.2 胎 产活仔 712 头 平均每胎产活仔 9.98 头 28 下列因素对母猪的繁殖力影响较大 ①母猪产后疾病影响母猪妊娠 有的母猪产后发生子宫 日龄断奶时存活 6628 头 胎平提供断奶仔猪数为 8.5 头 炎 阴道炎 产后无乳综合症等疾病 虽经积极治疗 但往 母猪产死仔 623 头 占总产仔数的 8.27 仔猪在哺乳期死 往影响母猪妊娠 一般推迟一个情期 或推迟 1 天左右发情 亡 119 头 死亡率为 6.5% 据调查情况分析 不同规模猪场 不同管理水平 其母 猪生产力有一定差异 其中存栏母猪 5 头以上的猪场 母 ②良种母猪第 1 胎断奶后发情困难 养猪户反映 良种 母猪膘情控制不好 往往推迟产后发情期 甚至长久不发情 这种情况一般为 25% 左右 猪平均年产 2.8 胎 胎平产活仔 1.1 头 胎平提供断奶 ③妊娠期流产 引起母猪妊娠期流产的原因 一是某些 仔猪 8.61 头 存栏 1 头至 3 头母猪的猪场 母猪年产 1.92 传染性疾病如猪瘟 伪狂犬病 细小病毒病 蓝耳病等 二 胎 胎平产活仔 9.75 头 胎平提供断奶仔猪 8.2 头 散养 是高温高湿条件 如有的猪场猪舍条件差 往往到夏季气 户母猪平均年产 1.88 胎 胎平产活仔 9.5 头 胎平提供断 温 39 相对湿度达到 87% 左右时 部分母猪难耐高温而 奶仔猪数 8. 头 散养户中土杂母猪胎平产活仔 9.7 头 胎 发生流产 三是免疫应激反应 如有些油佐剂疫苗注射妊娠 平提供断奶仔猪 8.2 头 期母猪 可引起 2% 3% 的流产率 四是霉菌毒素的影响 1.2 结果分析 如玉米水分大或保存不当 发霉变质后其霉菌毒素可造成母 根据调查数据及养猪户反映的情况 对我市母猪繁殖力 猪流产或死胎 情况作如下分析 养好后备母猪 3 个因素对母猪生产力的影响 母猪生产力受 3 个相互独立的因素影响 即母猪繁殖力 公猪繁殖力和饲养管理技术水平 在规模饲养条件下 饲养 提高母猪生产力的技术措施 首先要选择优质后备母猪 商品猪的遗传组成包括父 母各 1/2 的基因 后备母猪的好坏可影响后代的生长速度 289

294 肉质 体型以及产仔数 选留大约克纯种母猪时要注意其外 妊娠后期要 攻胎 阴大小 阴户太小的多发生难产 第二是加强后备母猪的培 母猪妊娠后期指怀孕 8 天至 11 天 这一阶段 胎儿 育 后备母猪宜小群饲养 要求确保正常生长发育 保持不 发育迅速 需要大量的营养 母猪还需要保证泌乳而蓄积营 肥不瘦的利用体况 在培育后备母猪期间 要注意调教和加 养 所以 应采用高营养标准和自由采食 即所谓 攻胎 强运动 调教主要是训练母猪养成良好的生活规律 如定时 尽量提高仔猪初生重 特别要注意调整钙 磷比例 预防母 吃食 定点排泄等 加强运动和适当的阳光照射能强壮体质 猪产后瘫痪 要多喂些易消化和易于通便的饲料 如增加麦 促进猪体发育匀称 特别是增强四肢的灵活性和坚实性 预 麸比例 多喂青绿多汁饲料 防止食滞和便秘 以免造成难 防肢蹄病 其次是适时配种 后备母猪的初配年龄一般应达 产和死胎 到 2 日龄 体重 1 千克以上 且发情 2 次以上 当母猪 2.2. 分娩期管理要加强 表现出精神兴奋 外阴部红肿开始消退 阴户松驰 出现竖 母猪分娩期指怀孕 11 天到分娩这段时间 妊娠母猪进 直皱褶 有粘液流出 用手压臂部不动或后退 这时即可配 入预产期 要有专人看护 注意观察临产征兆 做好接产 种 由于个体间发情长短有差异 为了保证受孕 应采取复 准备 日粮供给应比妊娠后期减少 3 5% 多喂青饲料 配技术 即在母猪发情后一天输精 过 12 小时再重复输一 应避免应激反应而导致难产 不泌乳或发生乳房炎 子宫炎 次精 等产科疾病 母猪分娩时 可停喂饲料 喂一些温热淡盐水 2.2 养好妊娠母猪 妊娠前期重保胎 在接产前要将母猪乳房 外阴部 臀部洗净 然后用消毒药 母 猪 从 配 种 到 受 精 卵 在 子 宫 内 膜 着 床 一 般 需 要 水清洗 当母猪分娩时产程时间超过 3 小时或每头仔猪产出 所需时间超过 3 分钟的 要及时安排助产 以避免或减少 18 3 天 这一阶段的饲料以中等营养水平和每日限喂 2 因难产而造成的母猪疾病 千克以内为宜 可适当喂些青绿饲料 要尽量让母猪安静 2.3 养好哺乳母猪 避免各种应激反应和过强运动 防止跌跤或吵架 以减少胚 母猪分娩对机体是强烈的应激反应 体力消耗大 抵抗 胎损失或流产 力下降 需要细心护理 取走胎衣后 要用干净的毛巾擦净 母猪后躯血水 用温水洗净乳房 同时按摩十多分钟 分娩 妊娠中期适当控料 母猪妊娠中期指配种后 8 天阶段 此时 受精卵 当天 只喂些麸皮汤 稀饭等流质饲料 供应充足饮水 第 已经牢固地在子宫壁上着床 流产和死胎情况较少发生 这 二天开始喂少量饲料 以后逐日增加 至 7 1 天 才能 一阶段 母猪食欲旺盛 消化力强 而胎儿营养需要少 可 让母猪自由采食 要补充一些青绿多汁饲料和富含钙质及无 适当控制精料喂量 增喂青粗饲料 防止母猪过肥而影响后 机盐的骨粉等 同时 可参照产妇的补养方法 给母猪喂些 期仔猪增长和产后正常发情 活血化瘀的中草药 促进母猪产后康复和泌乳 29

295 人工授精和基因组技术在猪育种中的应用 王相生 1 黄洪武 2 胥学新 3 1. 法国 IMV 卡苏 公司 北京 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 北京 中国农业大学动物科技学院 北京 193 摘 要 随着多种转基因动物的问世 基因组技术已经成为现代生物技术中一个重要的研究领域 本文对当前 最新生物工程技术的研究成果进行综述 并且认为这些成果若能通过人工授精在猪育种中的应用 则是提高 未来养猪业遗传进展的最佳方法 关键词 人工授精 基因组学 遗传进展 育种 改革开放 3 年来 我国不断从世界养猪发达国家引进 猪人工授精技术是指用人工的方法采集公猪的精液 经 大量的原种猪 大大推动了我国养猪业的发展 但大部分企 过精液品质检查 稀释 保存等一系列处理后 再将精液输 业往往只注重引种 扩繁 销售 而忽视进一步的选育 从 入到发情母猪的生殖道内以达到受胎的目的配种方法 与自 而陷入 引种 维持 退化 再引种 的恶性循环局面 猪 然交配相比 它具有提高优秀公猪利用率 提高商品猪整齐 的人工授精在猪育种中成功应用 对生猪的遗传改良起到了 度 减少饲养公猪数量 节省开支 可以克服公母猪体格大 巨大的推动作用 通过保存优良种公畜或濒危物种公畜的精 小相差悬殊时造成的本交困难等优点 目前 猪人工授精技 液 使公畜的使用不受其生理年限的限制 实现遗传资源的 术的应用产生的经济效益已被我国养猪界共识 保存 可使种公猪跨群或跨地区使用更为方便 经济 安 1.1 液态保存精液的人工授精 全 便于引入外源群体的基因 对公猪需求量的减少可增加 冷藏精液输精效果令人满意 但每次需要大量精子 这 公猪的选择强度 可以获得大量优良公畜的后代 从而加快 就降低了良种的公猪生产的精液的效率和利用 而且 当精 遗传进展的扩散速度 通过控制公畜的使用建立一个均衡的 液的数量有限而大量的母猪需要授精时 精液来源可能出现 群体结构 提高遗传参数及育种值估计效率 和本交相比 困难 因此 养猪者对于在不降低繁殖率的同时减少每次输 5% 1% 人工授精分别使 1 年选择的累积遗传进展提高 精需要的精子数量很感兴趣 目前 液态保存精液的人工授 1% 及 17% 楼平儿 21 因此 人工授精在技术上可以 精基本有一下两种形式 解决我国种猪场数量多 规模小的问题 实现猪的联合育种 也是当前我国养猪业提高猪育种效率 完善良种繁育体系的 经济 有效的手段 子宫颈后授精 子宫颈后授精 使用的是一个细的和半软的输精装置 通过一个事先插入子宫颈皱褶的常规导尿管 因为特殊的 近 15 年来 随着转基因动物的成功生产 该领域已经 输精装置比常规输尿管长 15 2 cm 它可以通过子宫颈 成为猪育种工作者研究的热点 目前 已经大量应用到生猪 皱 褶 进 入 子 宫 体 Waston & Behan(22) 在 英 国 每 次 使 的遗传改良 根据英美等西方发达国家政府和国际粮农组织 用 1 亿精子通过子宫颈后授精技术给 32 只经产母猪输 的预测 21 世纪全球畜牧业的 9% 畜牧品种都将通过基因 精 产仔率为 88.7% 胎仔数为 12.1 只 与子宫颈内授精 组技术来提供 朝着快速改变动物基因型的方向发展 王爱 的产仔率 91.3% 胎仔数 12.5 个相比无显著差异 然而 国 25 但是转基因动物生产效率很低 并且缺乏多基因 Roberts & Bilkei(25) 在匈牙利和克罗地亚对 1783 只经产 之间交互作用的信息 这些都限制了基因组技术在生产体系 母猪分别使用 1 亿精子子宫颈后授精和 3 亿精子子宫颈内 中的应用 虽然传统育种学 功能基因组学和克隆研究等相 授精 尽管 2 者在产仔率上相似 但子宫颈后授精的母猪胎 结合的技术对猪育种具有显著的发展潜力 但是只有把这些 产数却明显少 前者 1.2 只 后者 12.3 只 这些结果与 技术和人工授精技术相结合 才能对猪的遗传育种产生革命 Rozeboom 等 2 于美国研究报道一致 当尝试更少输 的变革 精数量时 即每次输精 5 亿精子 产仔率和胎仔数更低 1 人工授精是提高生产效率的繁殖技术 加速 生猪的遗传改良 因此 子宫颈后授精方式直接把每次 1 亿精子输入 子宫体可获得正常的产仔率 但胎产仔数可能下降 使用 291

296 子宫颈后授精可以减少精子数量而不会减少产仔率的 2 个 大剂量子宫颈内授精 但受孕率与产仔率都很低 这可能与 主要原因是半软授精装置越过子宫颈皱褶, 同时精液逆 子宫颈内授精方式的低效有关 同时 冷冻 解冻精液品质 流减少 2% 然而 每胎产仔数减少的原因还不清楚 而 下降 冷冻 解冻精子通过子宫颈褶 进入子宫到达子宫输 Roberts & Bilkei(25) 认为是非正规的授精造成的 因为 卵管连接处更加困难 导致在输卵管峡部不能储存足够的精 缺少对使用子宫颈后授精装置操作的训练 一些其他原因 子 当然 使用冷冻 解冻精子与液态保存精子相比 胚胎 如老化的精子 操作不当或者输精与排卵时间间隔 在使 透明带附着的精子数量大约少 1 倍左右 输精的精子数量 用较少的精子数量时都会导致繁殖率下降 此外 在当前 前者比后者要多 2 倍 因此 冷冻 解冻精子的有效应用需 生产条件下使用子宫颈后授精 1 亿输精数量似乎不能达 要在授精方式上改进 到正常繁殖率 因此 为了获得高繁殖率 应该考虑增加 无论子宫颈后授精还是子宫深部授精都应该是改善冷 输精数量 冻 解冻精子受精产仔效果的比较适合的授精方式 这两种 授精方式应能抵消冷冻 解冻精子在商业农场中常规应用 子宫深部授精 子宫深部授精方式包括通过一个事先插入子宫颈皱褶 的限制因素 即每次需要的大量精子和得到的低受精率 此 用作向导的常规授精输尿管 把一个柔韧纤细的装置导入一 外 这两种授精方式适合商业化应用 尤其是农户使用 在 个子宫角 子宫深部授精装置能够顺着子宫腔前进 使精液 西班牙 澳大利亚和瑞典完成的不同的报告证明了这一点 容易输入子宫角近端 1/3 处 Vazquez 等 21 在西班 Bolarin 等 (26) 研究了自发排卵母猪 n=7 强调每 牙对 329 只经产母猪使用子宫深部授精 1.5 亿精子 / 次 次授精只使用 1 亿冷冻 解冻精子的效果 当接近排卵时 一次 2 次或 3 次以及子宫颈内授精 3 亿精子 / 次 产 间 超声波检查 时采取子宫深部授精 获得超过 8% 的 仔率为 83.3% 87.3% 胎产仔数在 个 虽然 产仔率和胎产仔数也超过 1 只 并强调重视发情排卵时间 2 种授精方式间无统计差异 子宫深部授精的胎仔数总是最 确定在更精确时间授精以得到最高受精率的重要性 此外 低的 Day 等 23 在美国对 15 只经产母猪分别采用 Wongtawan 等 (26) 建议使用冷冻 解冻精子子宫深部授 2 次子宫深部授精 1.5 亿精子或者子宫颈内授精 3 亿精子 精应该在自发排卵前 8 h 进行 虽然在产仔率 子宫深部授精 83% 子宫颈内授精 9% 上 在人工授精方式中冷冻 解冻精子的受精成功率取决 没有差异 但子宫深部授精的母猪每胎产子猪数较少 前者 于人工授精的排卵的时间间隔 目前 预测排卵时间的方法 1.5 只 后者 12.9 只 从 2 个研究中结果可以推测 胎 受限于平均发情持续时间的评估 因为自发排卵在发情后发 仔数的下降可以通过增加每次授精的精子数克服 情期的 3 分之二时发生 因此 建议常规繁育管理的养猪户 与子宫颈内授精相比 子宫颈后授精和子宫深部授精方 使用冻精授精时增加子宫深部授精每次剂量的冷冻 解冻 式可以减少每次对冷藏精子数目的需要 达到子宫颈内授精 精子数 总之 子宫深部授精方式有使用最少 1 2 亿冷 3 亿精子每次 的受精效果 可以期待由每次输精 亿 子宫颈后授精 或 6 亿 子宫深部授精 得到 因此 冻 解冻精子实现高受精率的潜力 1.3 性控精液的人工授精 这 2 种方式都可以被视为接近在生产条件下使用冷藏精液的 通过流式细胞仪进行 X Y 精子分离技术是基于 DNA 实用 有效的授精方式 特别是在精源有限或者高质量的种 含量的相对差可以鉴别含 X 或 Y 染色体的精子 并且受精 公猪的精液需要被尽可能有效的使用情况下 但该技术中将 前确定后代的性别 精子由荧光染料 (Hoechst 3332) 染色 输精管准确的插入到子宫及子宫深部需要培训和练习 授精 染料穿入精子头部细胞膜与 DNA 结合 因为 Y 染色体比 后阴门出现的血液很可能与外伤有关 应该是对装置的不正 较大的 X 染色体偏小并携带更少的 DNA 精细胞在激光下 确操作所致 同时 利用该技术给初配猪授精要慎重 因为 曝光表现出 2 种不同的荧光强度并可通过流式细胞仪测量 使装置通过小猪子宫颈比较困难液态保存精液的人工授精 目前 借助高速分离系统 每分钟能鉴别超过 2 万个精细胞 1.2 冷冻保存精液的人工授精 1 h 内超过 15 万精子能够被性别分离 超过 85% 的纯度 在大型种公猪场使用冷冻精液人工授精 充分利用优秀 因此 每 2 h 能得到 3.6 亿性别分离的精子 种公猪的遗传潜力很有必要 然而 冷冻精液在世界范围内 性控精子通过外科手术授精生产了第一只小猪 给 126 的人工授精中应用不到 1% 冷冻解冻精液子宫颈内授精获 只母猪 n=126) 子宫深部授精每次至少 5 万精子 产仔 得繁殖率低于冷藏精液 同时每次授精需要的大量精子 这 率超过 75% 和胎仔数 9 只 Vazquez 等 (23) 报告激素处 就限制了冷冻精液在养猪业世界范围内的商业化应用 理 6 只经产母猪 一次授精最少 5 到 7 万新鲜性控 目前 猪冻精人工授精一般每次采用 5 6 亿精子的 292 精子 产仔率达到 % 但每次授精所需精子数量还是太大

297 以致不能认为子宫深部授精对性控精液是一种有效的授精 就是产仔数 瘦肉率 生长速度 饲料转化率等等 分子生 方式 物学育种的主要目的便是找到决定这些经济性状的主效基 最近 研究显示最少 1 万冷藏精子通过外科手术植 入子宫输卵管结合部即可得到高的受孕率 89% 虽然 因 然后用于生产 美国 26 年启动了猪基因组计划 至 27 年 12 月 2 手术卫生严格 但外科剖腹手术不被认为是养猪场母猪授精 日 已经完成 8 条染色体的初步测序工作 包括 l 7 的实用方式 一种可选择的方法是腹腔镜法 比起剖腹手术 和 x 染色体 目前整个猪基因组的测序工 把精液直接输入子宫 腹腔镜法是一种创伤较小的手术 并 作已经完成 且可在大的养殖场培训推广 在意大利完成的一项近期试 近年来我国猪育种学家对基因组学技术也进行了深入 验 Fantinati 等 (25) 通过腹腔镜把精子输入接近子宫输 而广泛的研究 在探索工作中结合了我国特有的动物遗传资 卵管连接处 达到高受精率所需的冷藏精子数量可以减少至 源 已取得了很多令国际猪育种学界特别关注的学术成就 每个子宫角 5 万个精子 这种腹腔镜技术已经被证明可用 美国动物基因组计划首席科学家 Schook 教授曾说 没有 于性控精液输精 最近报道 使用腹腔镜法每个子宫角最少 中国科学家与我们共同来研讨畜禽基因组计划 那么这种研 3 万个性别分离精子 受孕率可达到 8% 此外 近来的 讨绝对是不全面和缺乏特色的 研究也证明必须在排卵前输精才可获得最高的繁殖率 因为 2.1 在国际上首次确定了促卵泡素 β 亚基基因 Ｆ 性别分离精子在雌性生殖道中的存活时间较短 ＳＨ β 是控制猪产仔数的主效基因 1. 胚胎移植 产仔数性状对养猪生产来说是十分重要的性状之一 世 猪的胚胎移植是进行猪胚胎工程 如体外受精 胚胎切 界著名动物遗传育种学家 Chris HaLey 估计 如果母猪的 割 性别决定 胚胎克隆 基因导入 嵌合体的制作 配子 每胎产仔数能够提高 1 头 那么英国养猪业每年可净获 7 亿 和胚胎冷冻保存等项生物技术的关键技术之一 英镑的纯利 而整个欧共体则每年可获约 2 亿英镑的纯利 C 胚胎移植的重要效益之一是在全球以胚胎运输代替活 Haley 等 年始 我国科学家及其课题组在 猪运输 它有最低的成本和最小的疾病风险 目前已经有数 国家自然科学基金重点资助下 经过三年的努力 确定了我 例报道 表明了该技术实际应用的可行性 使用损伤性最小 国特有地方品种二花脸太湖猪 世界上产仔数最高的品种 的内窥镜法收集胚胎 并以非手术法通过子宫颈将胚胎植入 存在着产仔数主效基因 采用候选基因鉴定路线 精细确定 到受体的方法将极大地提高胚胎移植的效率和效益 实现全 了 FSHβ 基因是控制猪产仔数的主效基因 FSHβ 基因型 世界性的以胚胎运输代替活猪运输 可改善猪群的健康状 为 BB 的母猪与基因型为 AA 的母猪相比 总产仔数平均每 况 但是由于猪的胚胎移植 一方面由于猪是多胎动物 胚 胎可多产出 l 5 2. 头 而活产仔数平均每胎则多产出 胎移植被陷入应用范围较窄的误区 另一方面是由于配套的 头 根据研究结果 专家设计了高产仔数基因座 非手术取卵和移植及胚胎冻存很困难 因此至今未能像牛 位的 PCR 基因诊断盒 kit 以适于在育种现场使用 羊那样被广泛应用 综合国内外目前的已有技术和水平 猪 2.2 证明了雌激素受体 ESR 基因是一种广泛存在 胚胎移植技术的应用已处于水到渠成的阶段 并且能够给猪 的 控制猪产仔数的主效基因 育种和生产经营者带来可观的经济效益 从妊娠的母猪子宫 199 年美国依阿华大学 Rothchild 教授报道了雌激素 内取出受精卵 将其移植到发情周期相同的其它母猪体内 受体基因是控制猪产仔的主效基因之一 这个发现主要是基 并使其妊娠 着床 分娩的过程就是猪的胚胎移植技术 猪 于我国太湖猪中的梅山猪与大约克猪的杂交种群 因而推断 的胚胎移植 1951 年在世界上首次获得成功 由于猪的生殖 优势基因只可能存在我国太湖猪种中 1995 年 我国科学 系统构造复杂及猪受精卵对低温抵抗力较弱等原因 猪胚胎 家也证实了雌激素受体基因的确调控猪产仔数 但优势基因 移植技术目前还未得到普及 但是 近年来 作为生猪遗传 不仅仅存在于我国太湖猪 而且在我国其他猪种如东北民 改良的手段 已被世界养猪界所关注 猪 香猪以及外国著名商业品种长白猪 皮特兰 杜洛克猪 2 基因组技术在猪的育种中的应用 也存在 只是基因频率很低 这个新的发现为有效快速地利 随着各种转基因动物的相继成功 基因组技术的研究已 用雌激素受体基因来改良猪产仔数性状奠定了重要基础 再 经成为目前动物遗传育种的研究热点 并且大有成为育种方 次引起国际动物遗传育种学界注意 法主流的趋势 由于基因是可遗传的 只要找到决定动物某 2.3 全面地对猪高温应激综合症 MHS 基因进行了 种性状的基因 就可以按照人类的需要选育品种 大大缩短 研究并建立了基因诊断技术 育种年限 并且性状遗传稳定 对于养猪业来说 经济性状 猪高温应激综合症是造成我国养猪业损失最大的猪遗 293

298 传性疾病 每年直接经济损失大约为 6 亿人民币 这种遗传 着基因组学的重要研究 目前专家对猪的基因组测序和以识 病是隐性遗传 因此利用常规的选种方法 如氟烷测定等 别新基因和独特的调控成分 以期能够一些崭新的信息应用 几乎不可能将这种病根除出种群 经过国内外科学家的努力 于猪的育种领域 人工授精 体外胚胎生产和一直 是应用 发现 猪高温应激综合症主要是由于兰诺丁受体基因突变造 这些最先进生物工程技术的来应用于未来猪育种生产的最 成 兰诺丁受体是肌肉细胞中钙离子通道的主要成分 该基 佳方法 因的突变导致兰诺丁受体功能丧失 钙离子的释放受阻 从 而引起应缴综合症表型和个体死亡 我国地方品种 如我国 参考文献 太湖猪 民猪 香猪 耳猪等等 一直被科学界认为不存在 [1] 楼平儿 猪联合育种走向深入 [J] 猪业科学 21 1 高温应激综合症基因 但经过大量分子测检 实际上是存在 [2] 王爱国 北美地区养猪产业化发展与猪的育种 [J] 当代畜禽养 的 只是频率很低 为利用我国猪优良遗传资源时应注意避 免高温应激综合症基因污染提供了科学依据 2. 中国 超级猪 计划 殖业 [3] 王爱国 李力 梅克义 等 加强联合育种提高种猪质量 [J] 中国畜牧杂志 2 3 中国 超级猪 生产性能目标 : 计划经过 8 1 年 [] Graham EF, Rajamannan AHJ, Schmehl MKL, Maki- 的改进, 实现每头母猪年产瘦肉量 1kg, 生长猪日增重 Laurila M, Bower RE. Preliminary report on procedure 125g, 每窝仔猪上市 1 头, 饲料转化率 2.6 计划采取的 and rationale for freezing boar spermatozoa. AI Digest. 分子育种措施 : ① 利用猪高产仔数优良基因诊断盒, 将高 1971 产仔数基因固定在中国 超级猪 品种中 ② 利用猪早期 增重优良基因的 DNA 标记, 提高中国 超级猪 父系的日 增重和饲料利用率 ③ 利用猪双肌基因的 DNA 标记和 肥 胖 基因的 DNA 标记增加中国 超级猪 的瘦肉率 ④ 利 [5] Fertility of deep frozen boar spermatozoa.. Acta Vet Scand..1971, 12 (1) [6] Pursel G,Johnson L A. Fertility with frozen boer semen[j].anim Sci,1971,33:265. 用猪高温应激综合症 MHS 基因诊断盒, 将中国 超级猪 [7] 雷致中 国外猪育种工作概况 [J] 甘肃畜牧兽医, 198 的高温应激综合症基因加以控制 ⑤ 利用猪基因组扫描技 [8] 国外猪育种的发展趋势 ( 续完 ) [J] 国外畜牧学. 猪与禽 术预测最佳的杂种优势, 选择最优配套组合 1992/ 3 人工授精和基因组技术在猪育种生产中有着 广阔的发展前景 [9] 马发顺中国地方猪种资源的繁育与利用措施 [J] 云南畜牧兽 虽然基因组学等新的现代生物工程技术有着广阔的发 [1] 刘明成 译 闫之春 审. 猪人工授精时正确的输精时间和 展前景 但是在猪育种方面能否充分利用这些生物工程的新 技术和研究成果 则取决于能否利用某种形式的人工授精技 术将精液输送到受精点 如图 1 所示人工授精是现代生物工 程技术提高猪育种水平的重要中介 目前在有的猪育种企业 在母猪受孕前采用标记辅助选择可产生出具有所需生产性 状的猪以及抗寄生虫和疾病性状的猪 在操作过程中 将这 些先进的技术与特定的精子操控技术相融合是必不可少的 总之 未来猪育种的方向将是猪生长性能 肉品质量 健康和繁殖效率的综合提高 主要的关键技术是将各种先进 的基因组学等生物工程技术融合起来以改进人工授精 现在 猪育种学家正在为加快选育出有抗病性状的健康猪而开展 29 医 22 3 次数 [J]. 今日养猪业 27(6) [11] 张佳 译 马洁莹 校. 监测母猪人工授精成功与否的技术 [J]. 国外畜牧学 猪与禽 27(6) [12] Diseases in swine transmitted by artificial insemination: An overview. heriogenology , 7 (8) [13] 唐式校 舒明刚 汪秀菊. 猪人工授精与自然交配的对比试验 [J]. 中国猪业 27() [1] 张长兴 猪人工授精操作过程中危害精子的因素分析及对策 [J] 中国畜牧兽医 28, 6 [15] 张守全 美国猪人工授精技术应用现状及启示 [J] 黑龙江动物繁 殖

299 基于家系的种猪选配方案制定及 在生产中的应用 美国 Whiteshire 公司育种方案在湖南美神育种有限公司的实施应用 陈锋剑 郑飞燕 尹德明 梁朝阳 李文明 刘阳 湖南美神育种有限公司 湖南 株洲 127 摘 要 28年湖南美神育种有限公司从美国Whiteshire公司引进8头原种猪 同时与美国Whiteshire公司进行 技术合作 将美国家系育种法在湖南美神育种有限公司进行应用 目前拥有12头母猪的基础群 猪场使用 Herdsman育种软件进行数据管理和育种值计算 在母猪断奶时对母猪繁殖性能 体型外貌进行评定 查找母 猪的父系 母猪的母本父系 通过Herdsman育种软件计算母猪的母系指数 母猪生产指数 父系指数 同时计 算母猪Born/Backfat/Days/Lean的EBV值 对照公猪的育种值及体型外貌确定每头母猪最佳的配种公猪 通过 年的持续选育 其主要经济性状达到或超过选育指标 初产母猪产活仔数在11.2头以上 经产母猪产活仔数 在12.3头以上 公猪达1kg日龄大约克153天 长白151天 杜洛克15天 母猪达到1天数大约克157天 长白156 天 杜洛克155天 屠宰率在77 以上 瘦肉率在66 目前已经将种猪推广到全国2几个省市的168个种猪场 社会效益和经济效益显著 关键词 新美系种猪 家系育种 种猪选配 育种指数 外貌评定 种猪的选种和选配是猪场育种的核心工作 选种指将种 将美国家系育种法在湖南美神育种有限公司进行应用 现将 猪群中最优秀的种猪挑选出来自留 种猪的选种是指通过对 Whiteshire 公司基于家系的种猪选配方案制定及在生产中 种猪的测定 计算种猪的育种值并排序 结合种猪的体型外 的应用做一总结 貌对种猪进行选留 种猪的选配是指制定科学的配种计划 1 种猪基础群的组建 生产出最优秀的种猪 根据种猪的家系及生产性能再结合体 28 年湖南美神育种有限公司从 Whiteshire 公司引进 型外貌 确定每头母猪的配种计划 用最适合这头母猪的公 8 多头种猪 其中公猪 9 多头 覆盖了 Whiteshire 公司 猪进行配种 绝大部分种猪的家系 通过 年的选育 目前湖南美神育种 目前对育种场如何进行测定和选留的报道很多 但是对 猪场如何进行种猪选配的报道很少 报道的只是相关选配的 有限公司拥有 12 头基础母猪 大约克 15 个家系 长白猪 和杜洛克各 1 个家系 表 1 湖南美神育种有限公司种猪结构 原则 规模化猪场种猪的具体选配方案目前报道的也很少 种猪的遗传组成是多样化的 任何交配后代都有来自双亲的 不同基因型 他们的性能有的超过亲本 有的不如亲本 我 们应当认真仔细地做好公 母猪的选配工作 以期获得优于 亲本的后代 使本场的猪群一代更比一代强 Whiteshire 公司是一家全球范围内非常优秀的大白 品种 大约克 长白猪 杜洛克 合计 数量 头 家系 个 将猪场大约克 长白猪按照母系指数进行排名 杜洛克 长白和杜洛克品种的种猪育种公司 是全美拥有大白 长白 按照父系指数排名 前 25 的母猪和公猪作为核心群种猪 和杜洛克种猪的生产性能记录最多的公司 Whiteshire 是 用 N 表示 后 75 的种猪作为 GGP 种猪 用 G 表示 每 母系种猪方面的权威 种猪在出生活仔数 泌乳性能 繁 年 12 月份对所有群体母猪进行重新核定 确定新的核心群 殖能力 返情间隔及种猪使用年限等方面都有很好的表达 和曾祖代种猪 湖南美神育种有限公司 28 年从美国 Whiteshire 公司引进 8 头原种猪 同时与美国 Whiteshire 公司进行技术合作 长白猪和大白猪里面又分为两大品系 即父系和母系 父系偏重生长性能 用 M 表示 母系偏重繁殖性能 用 S 295

300 表 3 湖南美神育种有限公司种猪家系 表 2 湖南美神育种有限公司核心群结构 核心群 N 种猪 品种 曾祖代 GGP 数量 MLI/TSI 数量 MLI/TSI 大白公猪 大白母猪 长白公猪 长白母猪 杜洛克公猪 杜洛克母猪 亚系 S系 大约克 M系 S系 长白 杜洛克 家系 ELEV EDZART21 KD G332 ZOOK ZIEL UKI Frost CAPT Pursi HOLMES PUREPIG3 OLLIE ABEL 1Ton MIL ZEBU L171-9N MEGA KARL 78 BART211- M系 SAM BOY Falk1 ANDY81-9 T系 COWBOY BOLD KOBE FIRESTN BUCK299- WIL M系 GORILLA Basic 98 TILTH6- 表示 杜洛克有两个品系 父系偏重生长性能 用 T 表示 肢 后肢 同时记录这头母猪明显的特征 有何突出的优缺 另外一大品系偏重肉质性能 用 MQ 表示 每个品系里面 点 如泌乳性能 肢蹄情况 后代生长情况 如一期断奶母 又根据猪的特点 按照产仔数 达 1kg 天数 背膘厚 猪体型评定 眼 肌 面 积 断 奶 窝 重 的 EBV 值 分 为 SB SD SF SL 母猪体型外貌评定后通过 Herdsman 育种软件查找母 SW MB MD MF ML MW TB TD TF TL 猪的母系指数 母猪生产指数 父系指数 产仔数 背膘厚 TW MQB MQD MQF MQL MQW 其中 B 代表产 体重达 1kg 天数和眼肌面积的 EBV 值 仔数性状很突出 D 代表生长速度快 即达 1kg 天数的 Whiteshire 公司种猪经过 3 多年的选育 种猪遗传特 日龄短 F 代表背膘比较薄 L 代表瘦肉率性状突出 W 性很稳定 因此在配种的时候 1 的比例采用同质选配 代表断奶窝重性状突出 这些信息将为以后的配种计划做 即 S 系的母猪与 S 系的公猪配种 M 系的母猪与 M 系的公 参考 猪进行配种 9 的比例采用异质选配 即 S 系的母猪与 湖南美神育种有限公司参照美国 Whiteshire 公司的家 系育种法 将一些性能相同或相似的公猪归为一个家系 目 M 系的公猪配种 M 系的母猪与 S 系的公猪进行配种, 让 生产出来的种猪各项性能均非常优秀 前美神共有 35 个家系 其中大约克 15 个家系 长白和杜洛 克 1 个家系 断奶的母猪按照育种值的高低进行排序 育种值高的母 猪用育种值高的公猪进行配种 育种值中等的用育种值中等 美神参照美国 Whiteshire 公司的操作流程制定每头母 的公猪进行配种 育种值低的母猪用育种值中等的公猪或育 猪的配种计划 在配种前均对母猪进行体型外貌评定 结合 种值高的公猪进行配种 个别家系育种值低的公猪用育种值 育种值和 EBV 值再确定最终的配种公猪 高的母猪进行配种 从中选择优秀种公猪后代留种 2 做配种计划时 与配公猪的家系要与需要配种的母猪的 断奶母猪的选配 在母猪断奶前一天 育种师进产房对母猪进行体型外貌 父系和母本父系不是同一个家系 避免进行近交 评定 重点评估母猪的体长 体宽 体深 骨骼 运动 前 大约克和长白猪猪选产活仔数 (BA) 和背膘 BF 杜 表 断奶母猪外貌评定表 296 No. Sow Tag Alive L W D B F R Hereditary Feature 序号 母猪耳标 活仔 体长 体宽 体深 骨骼 前肢 后肢 遗传特征 1 Y183SBN 11 肢蹄结实 2 Y578MBN 15 3 后肢轻微踏蹄 3 Y778MFG 12 5 腹深 泌乳性能好 Y618MD 12 3 后肢纤细 5 G13TDG 体宽 肢蹄结实 6 G292TDG 1 肢蹄结实 7 W52SDG 12 5 体长 肢蹄结实 8 W36SBN 1 5 体宽 泌乳性能好

301 表 5 湖南美神育种有限公司种猪配种计划 No. Sow Tag Line(Sire/Dam) (M/S/T) BA/BF/DAY/LEAN Boar 1 Y183SBN ELEV/ HOLMES 16/133/1 1.57/.51/1./8 B8MDN 2 Y578MBN PURSI/ KD 136/12/13.73/.85/-5.5/ B12SFG 3 Y778MFG PURSI/ KD 17/11/11.25/-.32/-3.9/-1 B87MWG Y618MDG CAPT/KD 111/19/98.51/1.58/.21/65 B95SG 5 G13TDG FIRESTN/WIL 121/11/12.39/1.27/-.9/121 G368MLN 6 G292TDG COWBOY/BLOD 125/17/16.33/-2.66/-1/56 G367TFG 7 W52SDG MIL/ANDY 121/12/93.8/2.82/-.32/- R53MBG 8 W36SBN MIL/FALK 17/113/ /.21/1.5/7.2 R57MBG 表 6 湖南美神育种有限公司种公猪育种值 耳号 BF days lean Born 家系 L W D B F R Falk MIL L26- R57MBG Sam 5 5 D9-1 G333TLN BLOD D8-5 G367TFG KOBE D161- G368MLN GORILLA 3 Y377-8 B87MWG PUREPIG3 5 3 Y93-8 B95SFG ELEV Y151-7 B98SDG G Y8-7 B19SBN ZIEL 5 3 Y126-7 B12SFG KD 5 Y333-2 B8MDN CAPT 5 5 L163-9 耳牌 MLI R53MBG 115 L R56SBN SPI TSI BA 洛克主选背膘 BF 和达 1kg 体重天数 DAY 对于 仔猪出生后无论公母其家系均为其父本的家系 种猪 EBV 值 BA 和 BF 都非常优秀的母猪就用 BA 和 BF 非常好 的品系为其父本的品系 即仔猪的父本家系是 KD 品系 的公猪进行配种 如果 BA 或者 BF 哪项 EBV 值比较低就 为 S 该仔猪的家系为 KD 品系为 S 如果仔猪的父本为 用相对应比较好的公猪进行配种 如表 5 中的配种计划 CAPT 品系为 M 该仔猪的家系为 CAPT 品系为 M 在选配的时候结合母猪的体型外貌评估特点 选择相应 的公猪进行配种 以期达到生产出来的后代体型最好 对于 3 后备母猪的选配 在后备母猪确定进入种群后 就计算母猪的育种值和生 肢蹄不结实的母猪在选配时选择肢蹄结实的公猪进行配种 产性能的 EBV 值 选配方案跟断奶母猪选配方案一样 但 对于体长或者体宽不是很好的母猪选择有相应突出特点的 后备母猪具体的发情时间不能确定 因此在做配种计划时一 公猪进行配种 般做两头公猪的配种计划 首配公猪不能采精时用副配公猪 每次断奶时做好配种计划 在母猪断奶后第 3 天下午将 进行采精 需要配种的公猪的精液准备好 母猪发情后就进行配种 避 经过 年的选育 美神种猪质量逐渐提高 美神种猪以 免断奶母猪发情高峰精液采集紧张 也可以保证每头母猪均 高繁殖性能和高生产性能深受客户的欢迎 大约克 长白猪 能按照配种计划进行配种 初产活仔数在 11.2 头以上 经产母猪产活仔数在 12.3 头以 每次做配种计划时每头公猪配种 5 7 头母猪 每月每 个家系的公猪均参与配种 这样在客户选猪的时候也可以在 同一时期挑选到各个家系的种猪 上 具有高繁殖性能 经过两年的全群测定选育 美神种猪具有非常快的生长 速度 其中公猪达到 1kg 平均天数 大约克 153 天 长 297

302 表 7 美神种猪 年种猪繁殖性能 品种 窝数 详细的进行记录 并进行考核 对错记和漏记的进行处罚 活仔数 头 初生重 kg 断奶数 断奶重 初产 经产 初产 经产 头 kg 大约克 长白猪 杜洛克 公猪 母猪 品种 29 年我们测定了 125 头仔猪的出生重 断奶重 测定 了 23 头种猪的体重 背膘和眼肌面积 21 年我们测定 了 223 头仔猪的出生重 断奶重 测定了 31 头种猪的 体重 背膘和眼肌面积 211 年我们测定了 252 头仔猪 的出生重 断奶重 测定了 33 头种猪的体重 背膘和眼 肌面积 并详细记录了种猪的信息 这些数据的收集和管理 表 8 美神种猪 年种猪生产性能 性别 仔猪出生信息 母猪配种信息要求当天必需输入育种软件 达 达 1kg 眼肌 1kg 屠宰率 瘦肉率 背膘厚 面积 天数 % % mm mm2 天 对做好猪场的选种和选配工作起到关键的作用 保证了育种 工作的准确性.3 根据每头母猪的特点制定每头母猪的配种计划 湖南美神育种有限公司根据每头母猪的特点在每次断 大约克 长白猪 杜洛克 大约克 响 母猪每次断奶的育种值均有一定的变化 所以在每头母 长白猪 猪断奶时均对育种值进行计算 确保育种值的准确性 根据 杜洛克 不同家系母猪的特点 为不同母猪找到最适合这头母猪的公 奶的时候均进行了体型外貌的评定和育种值的计算 母猪再 下一胎分娩时 以前分娩的小猪可能有些猪已经进行了测 定 这些数据反馈回来对这头母猪的育种值均有一定的影 白 151 天 杜洛克 15 天 母猪达到 1kg 天数 大约克 猪进行配种 157 天 长白 156 天 杜洛克 155 天. 长期坚持按照母猪育种值及体型外貌特征制定配 经过持续的选育美神种猪达到非常好的生产性能 深受 种计划 客户的欢迎 自 29 年上市以来一直受到广大客户的青睐 育种师在母猪断奶时均会对母猪体型外貌特征进行评 目前已经将种猪推广到全国 2 几个省市的 168 个种猪场 定 但随着母猪胎次的增加 每头母猪的体型特征可能均有 社会效益和经济效益显著 泰国正大 海南农垦 福建丰泽 所改变 因此育种师要长期坚持对母猪外貌评定 这样育种 等大客户纷纷从美神引进种猪 有些公司从美神引种后 饲 师可以非常熟悉自己猪场的母猪 结合母猪的育种值及后代 养后并再次从美神公司引进种猪 的特点及时的调整母猪的配种计划 确保生产出来的种猪是 最优秀的种猪 结论与讨论.1 明确育种方向 采用家系育种方法 确定每个家系的遗传特点 制定不 同家系的选育方向 大约克和长白猪主选繁殖性能和背膘 参考文献 [1] 彭中镇 再议当前场内种猪的测定与选择 中国动物遗传育种 研究进展 中国农业科技出版社 北京 23 厚 杜洛克主选背膘厚和达 1kg 日龄 使种猪一直沿着 [2] 熊远著 种猪测定原理及方法 中国农业出版社 1999 自己期望的方向选育 [3] 种猪生产性能测定规范 中华人民共和国农业行业标准 2.2 做好猪场数据的记录和管理工作 [] 种猪的选留与选配 江西畜牧兽医杂志 211 猪场数据的记录和管理是育种工作的基础 数据的记录 和测定是一个长期艰巨的工作 因此在制度上面必需有保 证 确保数据的及时和真实 湖南美神育种有限公司在仔猪 出生 2 小时内就对每头小猪进行剪耳号 秤重 剪牙 断 尾 并填写详细的仔猪出生卡片 仔猪寄养 死亡等信息也 298 [5] 浅谈种猪场猪配套系的育种 中国畜牧杂志 28 [6] 实施配套系育种战略 增强种猪市场竞争力 中国畜牧杂志 25 [7] 种猪的外貌评定 猪业科学 26

303 松辽黑猪种公猪繁殖性能简介 李兆华 1 王晓伟 2 张树敏 1 钱芙蓉 1 张志彬 1 金鑫 1 刘庆雨 1 李娜 1 赵晓东 1 张晓三 3 1. 吉林省农业科学院 吉林 长春 长岭县畜牧技术培训中心 吉林 长岭 梨树县兽药监察所 吉林 梨树 1365 本文针对吉林省本地猪生长发育慢 猪肉不能自给的现 自松辽黑猪品种选育以来 已经从饲养 营养 生长性 状 1985 年 吉林省农业科学院开展了 松辽黑猪瘦肉型 能 分子 杂交利用以及母猪的繁殖性能等多方面进行了广 母系新品种选育 课题研究 并被列为农业部 八五 重点 泛的研究 在各类期刊杂志上发表的大量相关研究论文 但 攻关课题 松辽黑猪 以吉林本地猪为母本 丹系长白猪 有关松辽黑猪种公猪繁殖性能的相关研究报道并不是很多 为第一父本 美系杜洛克为第二父本 采用三元杂交育种法 现从性成熟期 精液品质 性器官外貌 性欲表现等几个方 进行培育 原始亲本是经过选择的吉林本地母猪 同长白公 面对松辽黑种公猪繁殖性能进行简要的介绍 以便对松辽黑 猪进行杂交 产生的长本母猪同杜洛克公猪进行杂交 从分 猪这个国家审定的新品种有一个全面的了解 离群中选择黑色猪 组建基础群 经过杂交 横交 选育等 1 阶段 形成的含杜洛克血液约 6% 长白猪和本地猪血液各 约 27% 的培育品种 松辽黑猪 于 29 年 8 月 19 日通过国家畜禽遗传资 源委员会猪品种审定专业委员会的审定 于 29 年 11 月 5 日通过国家畜禽遗传资源委员会的审定 中华人民共和国农 业部公告第 1325 号文件公布 松辽黑猪通过国审 由国家 性成熟期 松辽黑猪的公 母猪的性成熟均较国外引进的其他品种 早 据日常观察 公猪在 2 月龄左右就有爬跨动作出现 至 5 月龄爬跨动作已经非常频繁 5.5 月龄可以配种 但适 宜配种月龄为 8 月龄 初配体重为 1 11kg 2 精液品质 28 年以来 在松辽黑猪的选育以及扩繁 推广过程中 畜禽遗传资源委员会颁发畜禽新品种 配套系证书 证书编 我们使用了猪人工授精技术 相应的获得了一系列与精液品 号为农 1 新品种证字第 17 号 质相关的数据 因人工授精用种公猪的精液品质数据太过繁 松辽黑猪 全身被毛纯黑色 体质结实 结构匀称 头大小适中 耳前倾 背腰平直 中躯较长 腿臀较丰满 琐 各表中只列出了每个月的平均值 2.1 射精量 腹部不下垂 四肢粗壮结实 身体各部位结合良好 乳头七 表 1 是 28 年 7 月至 29 年 7 月一年间吉林省农业科 对以上 排列整齐 生殖器官发育正常 体型外貌一致 遗 学院原种猪场 3 头人工授精用和 3 头本交用松辽黑猪射精量 传性能稳定 成年公猪体重 27.25kg 体长 153.5cm 体 的统计记录 高 86.cm 胸 围 151.cm 腿 臀 围 113.cm 成 年 母 猪 体 重 215.5kg 体 长 152.cm 体 高 76.cm 胸 围 15.3cm 腿臀围 16.5cm 图 1 审定专家组在吉林省农业科学院合影 图 2 松辽黑猪 299

304 表 1 松辽黑猪采精量记录 人工授精用种公猪 公猪 耳号 采精时间 S127 S113 S159 S1211 的 平 均 射 精 量 分 别 为 本交用种公猪 射精量 平均 公猪 耳号 157 S113 采精时间 射精量 ( 单次 ) 22 采精记录也表明 松辽黑猪种公猪的射精量为 8 25ml 189 平均射精量为 16ml 左右 精子活力 151 S S S159 S S S S S159 S S S S S159 S S1211 S S S S S S S1211 S1139 S1139 S1139 S 年 8月 28 年 9月 28 年 1 月 28 年 11 月 S979 S127 S 年 12 月 S979 S 年 9 月1日 28 年 1 月 1 日 28 年 11 月 1 日 28 年 12 月 1 日 S113 表 2 是 28 年 7 月至 29 年 7 月一年间吉林省农业科 学院原种猪场 3 头人工授精用和 3 头本交用松辽黑猪精子活 力的统计记录 通 过 表 2 可 知 6 头 种 公 猪 S127 S1139 S979 S113 S159 S1211 精子的活力分别为 所有公猪精子的平均活力为.81 近 3 年的采精记录也表明 正常松辽黑猪种公猪精子活力为 平均活力为.8 左右 在日常生产中也出现 172 过活力较低 经过一系列处理之后活力仍得不到改善的情 166 况 这样的个体必须淘汰 精子密度 179 表 3 是 28 年 7 月至 29 年 7 月一年间吉林省农业科 159 学院原种猪场 3 头人工授精用和 3 头本交用松辽黑猪精子密 175 度的统计记录 16 通 过 表 3 可 知 6 头 种 公 猪 S127 S1139 S S113 S159 S1211 的平均精子密度分别为 S 年 1 S159 月5日 S1211 S S S159 S S S S S159 S S 与其它品种的种公猪精液的畸形率相当 S S S159 S S 相比 在外观上相对小一些 但通过对精液品质的介绍可知 S S 这种差别对精液的品质上并没有影响 162 S S S S1139 S1139 S1139 S1139 S 年 1月 28 年 8 月1日 最低射精量出现在 29 年 2 月 5 日 S979 的 88ml 最高射 精量出现在 28 年 1 月 1 日 S127 的 25ml 近 3 年的 S ml 所有公猪的平均射精量为 159ml 年 7 S159 月1日 S1211 S 年 7月 通 过 表 1 可 知 6 头 种 公 猪 S127 S1139 S 年 2月 29 年 3月 29 年 月 29 年 5月 S979 S127 S1139 S 年 6月 年 2 月3日 29 年 3 月日 29 年 月2日 29 年 5 月7日 28 年 6 S159 月2日 S 亿 /ml 所有公猪的平均射精量 为 1.91 亿 /ml 最低射精量出现在 28 年 8 月 9 日 S127 的 1.3 亿 /ml 最 高 射 精 量 出 现 在 28 年 11 月 15 日 S978 的 2.89 亿 /ml 近 3 年的采精记录也表明 松辽黑猪 种公猪精液的精子密度为 1 3 亿 /ml 平均密度为 2 亿 / ml 左右 2. 精子畸形率 通过观察表明 松辽黑猪正常精液的畸形率小于 2% 性器官外貌 成年松辽黑猪种公猪的睾丸与其它品种 特别是杜洛克 图 3 睾丸对比照片

305 首 届 全 国 猪 育 种 高 峰 论 坛 暨 联 合 育 种 技 术 与 组 织 模 式 国 际 研 讨 会 论 文 集 公 猪 耳 号 人 工 授 精 用 种 公 猪 采 精 时 间 表 2 松 辽 黑 猪 精 子 活 力 记 录 精 子 活 力 ( 平 均 ) 公 猪 耳 号 本 交 用 种 公 猪 采 精 时 间 精 子 活 力 ( 单 次 ) S S 年 28 年 7 S S 月 月 1 日 S S S S 年 28 年 8 S S 月 月 1 日 S S S127.8 S 年 28 年 9 S S 月 月 1 日 S S S S 年 28 年 S S159 1 月 月 日 S979.8 S S127.8 S 年 28 年 S S 月 月 日 S S S S 年 28 年 S S 月 月 日 S S S S 年 29 年 1 S S 月 月 5 日 S S S S 年 29 年 2 S S 月 月 3 日 S S S127.8 S 年 29 年 3 S S 月 月 日 S S S S 年 29 年 S S159.8 月 月 2 日 S S S S 年 29 年 5 S S 月 月 7 日 S S S127.8 S 年 28 年 6 S S 月 月 2 日 S S 公 猪 耳 号 人 工 授 精 用 种 公 猪 采 精 时 间 表 3 松 辽 黑 猪 精 子 密 度 记 录 精 子 密 度 ( 平 均 ) 公 猪 耳 号 本 交 用 种 公 猪 采 精 时 间 精 子 密 度 ( 单 次 ) S S 年 28 年 7 S S 月 月 1 日 S S S S 年 28 年 8 S S 月 月 1 日 S S S S 年 28 年 9 S S 月 月 1 日 S S S S 年 28 年 S S159 1 月 月 日 S S S S 年 28 年 S S 月 月 日 S S S S 年 28 年 S S 月 月 日 S S S S 年 29 年 1 S S 月 月 5 日 S S S S 年 29 年 2 S S 月 月 3 日 S S S S 年 29 年 3 S S 月 月 日 S S S S 年 29 年 S S 月 月 2 日 S S S S 年 29 年 5 S S 月 月 7 日 S S S S 年 28 年 6 S S 月 月 2 日 S S

306 图 包皮对比照片 成年松辽黑猪种公猪的包皮与其它品种 特别是杜洛克 相比 在外观上相对小一些 这有利于生殖器官的卫生 性欲表现 松辽黑猪母猪的发情症状表现明显 松辽黑猪种公猪的 图 5 性与旺盛的松辽黑猪种公猪 性欲表现也非常明显 特别是在圈舍调换 运输以及配种前 黑猪不仅具备外来品种猪生长快 饲料价格低以及瘦肉率高 的性欲表现的特别明显 等特点 还具有地方猪适应性强 繁殖率高 肉质好 无应 作为我国北方地区第一个瘦肉型黑色母系新品种 松辽 32 激等特征特性 是优良的地方培育品种