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佻朔鲍
4 years ago
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1 ICS L 51 DB 深圳市地方标准 DB XX/ XXXXX XXXX 凉茶中 31 种非法添加药物的快速检测胶体金免疫层析法 Rapid detection of 31 illegally added drugs in herbal tea by colloidal gold immunochromatography ( 征求意见稿 ) - XX - XX 发布 XXXX - XX - XX 实施深圳市市场监督管理局发布

3 DBXX/ XXXXX XXXX 前言本文件根据 GB/T 标准化工作导则第一部分 : 标准的结构和编写规则编写请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本文件由 XXX 提出并归口本文件主要起草单位 : 深圳市标准研究院深圳市易瑞生物技术股份有限公司本文件主要起草人 :XXX 付辉金虹王西丽马涛张美娟杨星星李细清朱海 XXX I

5 DBXX/ XXXXX XXXX 凉茶中 31 种非法添加药物的快速检测胶体金免疫层析法 1 范围本文件规定了凉茶中 31 种非法添加药物的胶体金免疫层析快速检测方法本文件适用于凉茶中对乙酰氨基酚阿司匹林布洛芬安乃近氨基比林异丙安替比林吡罗昔康吲哚美辛双氯芬酸钠地塞米松倍他米松氢化可的松甲基泼尼松龙醋酸地塞米松醋酸泼尼松泼尼松氟氢可的松马来酸氯苯那敏吗啡可待因枸橼酸喷托维林氯霉素环丙沙星氧氟沙星洛美沙星诺氟沙星磺胺甲恶唑磺胺嘧啶磺胺甲基嘧啶磺胺噻唑磺胺二甲氧嘧啶等 31 种化学药物的胶体金免疫层析快速检测 2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件, 仅所注日期的版本适用于本文件凡是不注日期的引用文件, 其最新版本 ( 包括所有的修改单 ) 适用于本文件 GB/ T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理样品中待测药物与胶体金标记的特异性抗体结合, 抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线 (T 线 ) 上抗原的结合, 从而导致检测线颜色深浅的变化通过检测线与控制线 (C 线 ) 颜色深浅比较, 对样品中化学药物进行定性判定 4 试剂与材料 4.1 胶体金免疫层析试剂盒凉茶中非法添加药物检测试剂盒, 含乙酰氨基酚阿司匹林布洛芬安乃近类 ( 含安乃近氨基比林异丙安替比林 ) 吡罗昔康吲哚美辛双氯芬酸地塞米松类马来酸氯苯那敏枸橼酸喷托维林吗啡类 ( 含吗啡可待因 ) 氯霉素喹诺酮类磺胺类药物胶体金免疫层析试纸条及凉茶稀释试剂 4.2 参考物质 31 种药物的参考物质的中文名称英文名称 CAS 登录号分子式相对分子质量见表 1, 纯度均 90% 表 1 31 种药物参考物质中文名称英文名称 CAS 登录号分子式相对分子质量中文名称英文名称 CAS 登录号分子式相对分子质量对乙酰氨基酚 Acetaminophen C8H9NO

6 阿司匹林 Aspirin C9H8O 布洛芬 Ibuprofen C13H18O 安乃近 Analgin C13H18N3NaO5S 氨基比林 Aminophenazone C13H17N3O 异丙安替比林 Propyphenazone C14H18N2O 吡罗昔康 Piroxicam C15H13N3O4S 吲哚美辛 Indomethacin C19H16ClNO 双氯芬酸钠 Diclofenac sodium C14H10Cl2NNaO 地塞米松 Dexamethasone C22H29FO 倍他米松 Betamethasone C22H29FO 氢化可的松 Hydrocortisone C21H30O 甲基泼尼松龙 Methylprednisolone C22H30O 醋酸地塞米松 Dexamethasone acetate C24H31FO 醋酸泼尼松 Prednisone acetate C23H28O 泼尼松 Prednisone C21H26O 氟氢可的松 Fludrocortisone C21H29FO 马来酸氯苯那敏 Chlorpheniramine maleate C20H23ClN2O 吗啡 Morphine C17H19NO 可待因 Codeine C18H21NO 枸橼酸喷托维林 Pentoxyverine C20H31NO 氯霉素 Chloramphenicol C11H12Cl2N2O 环丙沙星 Ciprofloxacin C17H18FN3O 氧氟沙星 Ofloxacin C18H20FN3O 洛美沙星 Lomefloxacin C17H19F2N3O 诺氟沙星 Norfloxacin C16H18FN3O 磺胺甲恶唑 Sulfamethoxazole C10H11N3O3S 磺胺嘧啶 Sulfadiazine C10H10N4O2S 磺胺甲基嘧啶 Sulfamerazine C11H12N4O2S 磺胺噻唑 Sulfathiazole C9H9N3O2S 磺胺二甲氧嘧啶 Sulfadimethoxine C12H14N4O4S 注 : 或等同可溯源物质 4.3 标准溶液的配制标准储备液 : 精密称取或量取适量参考物质 (4.2), 置于 10 ml 容量瓶中, 用甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 制成标准储备液 ( 浓度见表 2); 或可直接购买参考物质的标准储备液 -20 避光保存备用, 有效期 3 个月表 2 31 种药物参考物质标准储备液浓度参考物质对乙酰氨基酚阿司匹林安乃近氨基比林异丙安替比林马来酸氯苯那敏磺胺甲恶唑磺胺甲基嘧啶布洛芬吡罗昔康吲哚美辛双氯芬酸钠甲基泼尼松龙吗啡可待因枸橼酸喷托维林环丙沙星氧氟沙星洛美沙星诺氟沙星磺胺嘧啶磺胺噻唑磺胺二甲氧嘧啶地塞米松倍他米松氢化可的松醋酸地塞米松醋酸泼尼松泼尼松氟氢可的松氯霉素标准储备液浓度 mg/ml

7 DBXX/ XXXXX XXXX 标准中间液 : 精密量取标准储备液 (4.3.1)1 ml, 置于 100 ml 容量瓶中, 用甲醇稀释至刻度, 摇匀, 参考物质标准中间液浓度见表 3 临用新制表 3 31 种药物参考物质标准中间液浓度参考物质对乙酰氨基酚阿司匹林安乃近氨基比林异丙安替比林马来酸氯苯那敏磺胺甲恶唑磺胺甲基嘧啶布洛芬吡罗昔康吲哚美辛双氯芬酸钠甲基泼尼松龙吗啡可待因枸橼酸喷托维林环丙沙星氧氟沙星洛美沙星诺氟沙星磺胺嘧啶磺胺噻唑磺胺二甲氧嘧啶地塞米松倍他米松氢化可的松醋酸地塞米松醋酸泼尼松泼尼松氟氢可的松氯霉素标准储备液浓度 μg/ml 仪器设备 5.1 电子天平 (d=0.1 g~ g) 5.2 温育器 :40 ±2 5.3 便携式读数仪 ( 可选 ) 测量波长:525 nm, 带宽 ±8 nm, 波长准确度 ±3 nm 计算方式: 峰面积分析, 并可计算检测线峰面积 / 控制线峰面积比值 5.4 移液器 :200 µl 6 测定步骤 6.1 样品前处理取 1 ml 凉茶, 用 9 ml 凉茶稀释液稀释制成检测样 6.2 分析步骤取 7 滴稀释后凉茶样品于红色微孔中, 上下抽吸 1-3 次混匀将检测试纸条插入红色微孔中,20-40, 反应 6 分钟从红色微孔中取出试纸条, 去掉下端样品垫, 进行结果判读 7 结果判读 7.1 结果的判断也可使用胶体金读数仪判读, 读数仪的具体操作与判读原则请参照读数仪的使用说明书采用目视法对结果进行判读, 目视判定示意图如图 1 和图 2 所示 7.2 比色法无效控制线 (C 线 ) 不显色, 表明不正确操作或试纸条 / 检测卡无效 3

7.2.2 阳性结果检测线 (T 线 ) 不显色或检测线 (T 线 ) 颜色比控制线 (C 线 ) 颜色浅, 表明样品中检测药物高于方法检测限, 判为阳性 7.2.3 阴性结果检测线 (T 线 ) 颜色比控制线

消线法 7.3.1 无效控制线 (C 线 ) 不显色, 表明不正确操作或试纸条 / 检测卡无效 7.3.2 阳性结果检测线 (T 线 ) 不显色, 表明样品中检测药物高于方法检测限, 判为阳性 7.3.3 阴性结果检测线 (T 线 ) 与控制线 (C 线 ) 均显色, 表明样品中检测药物低于方法检测限或无残留, 判为阴性 7.

8 7.2.2 阳性结果检测线 (T 线 ) 不显色或检测线 (T 线 ) 颜色比控制线 (C 线 ) 颜色浅, 表明样品中检测药物高于方法检测限, 判为阳性阴性结果检测线 (T 线 ) 颜色比控制线 (C 线 ) 颜色深或者检测线 (T 线 ) 颜色与控制线 (C 线 ) 颜色相当, 表明样品中检测药物低于方法检测限或无残留, 判为阴性图 1 目视判定示意图 ( 比色法 ) 7.3 消线法无效控制线 (C 线 ) 不显色, 表明不正确操作或试纸条 / 检测卡无效阳性结果检测线 (T 线 ) 不显色, 表明样品中检测药物高于方法检测限, 判为阳性阴性结果检测线 (T 线 ) 与控制线 (C 线 ) 均显色, 表明样品中检测药物低于方法检测限或无残留, 判为阴性 7.4 质控试验要求图 2 目视判定示意图 ( 消线法 ) 空白试验测定结果应为阴性, 加标质控试验测定结果应为阳性 4

9 DBXX/ XXXXX XXXX 8 结论当检测结果为阳性时, 应对结果进行确证 9 方法性能指标 9.1 按附录 A 的规定计算快速检测方法性能指标 9.2 检出限检出限应符合表 4 的规定表 4 胶体金免疫层析检测方法检出限检测药物名称检出限 (μg/kg) 检测药物名称检出限 (μg/kg) 对乙酰氨基酚氟氢可的松 10 阿司匹林马来酸氯苯那敏 200 布洛芬 200 吗啡 100 安乃近 800 可待因 100 氨基比林 700 枸橼酸喷托维林 50 异丙安替比林 700 氯霉素 5 吡罗昔康 60 环丙沙星 300 吲哚美辛 300 氧氟沙星 300 双氯芬酸钠 100 洛美沙星 300 地塞米松 10 诺氟沙星 300 倍他米松 10 磺胺甲恶唑 500 氢化可的松 10 磺胺嘧啶 400 甲基泼尼松龙 50 磺胺甲基嘧啶 500 醋酸地塞米松 10 磺胺噻唑 200 醋酸泼尼松 10 磺胺二甲氧嘧啶 300 泼尼松灵敏度 : 灵敏度应 99% 9.4 特异性 : 特异性应 90% 9.5 假阴性率 : 假阴性率应 1% 9.6 假阳性率 : 假阳性率应 10% 10 其他本方法所述试剂试剂盒信息及操作步骤是为给方法使用者提供方便, 在使用本方法时不做限定方法使用者在使用替代试剂试剂盒或操作步骤前, 须对其进行考察, 应满足本方法规定的各项性能指标 5

10 A A 附录 A ( 规范性附录 ) 快速检测方法性能指标计算表表 A.1 性能指标计算方法样品情况 a 阳性检测结果 b 阴性总数阳性 N11 N12 N1.=N11+N12 阴性 N21 N22 N2.=N21+N22 总数 N.1=N11+N12 N.2=N21+N22 N=N1.+N2. 或 N.1+N.2 显著性差异 ( 2 ) 灵敏度 (p+,%) 特异性 (p-,%) 假阴性率 (pf-,%) 假阳性率 (pf+,%) 相对准确度,% c a 由参比方法检验得到的结果或者样品中实际的公议值结果 ; 2=( N12-N21-1) 2 /(N12+N21), 自由度 (df)=1 p+=n11/n1. p-=n22/n2. pf-=n12/n1.=100- 灵敏度 pf+=n21/n2.=100- 特异性 (N11+N22)/(N1.+N2.) b 由待确认方法检验得到的结果灵敏度的计算使用确认后的结果 N: 任何特定单元的结果数, 第一个下标指行, 第二个下标指列例如 :N11 表示第一行, 第一列,N1. 表示所有的第一行,N.2 表示所有的第二列 ;N12 表示第一行, 第二列 C 为方法的检测结果相对准确性的结果, 与一致性分析和浓度检测趋势情况综合评价 6

凉茶中 31 种非法添加药物的快速检测胶体金免疫层析法编制说明

凉茶中 31 种非法添加药物的快速检测胶体金免疫层析法编制说明凉茶中 31 种非法添加药物的快速检测胶体金免疫层析法编制说明 1. 概况 1.1. 任务来源本标准的编制任务来源于深圳市市场监督管理局于 2018 年 12 月 29 日发布的深市质 2018 721 号附件 2018 年第三批深圳市地方标准计划项目汇总表 1.2. 标准起草单位与主要起草人本标准主要起草单位 : 深圳市标准研究院深圳市易瑞生物技术股份有限公司本标准主要起草人 :XXX