研發創新有基因甚至所有等位基因的資訊但即使是所有的等位基因都認識了, 一個等位基因在農藝學特性方面的貢獻通常不單是它本身的好或壞, 而需評估其他等位基因在基因組網絡中的整體表現最後, 我們可能想設計一個比自然形成更好的合成的等位基因, 所以基因組和擴增育種材料一樣, 都將帶給育種者一個更好的

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纲汤
7 years ago
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1 RESEARCH & DEVELOPMENT 植物分子育種技術平台之建構撰文 / 吳方盛沈翰祖孫永偉郭宏遠莊淑貞鍾文全李美娟劉明宗陳駿季植物分子育種略分為三個技術平台, 第一個為植物分子育種的生物資訊學平台, 此平台著重於植物之基因標誌第二個為基因分子標誌技術平台, 此平台將提供新的或改良式的篩選方式服務, 使得優良基因型的選拔更加迅速而有效率第三個是直接基因移轉平台, 能使 DNA 轉移進入細胞的工作更有效率產出量也更高以下將介紹每一個目標平台的現況與內容第一部份 : 建構整合生物資訊學和植物育種之平台概述生物資訊學對於未來植物研究和植物育種而言是一項重要的資源基於此我們將有能力去處理和連結大量的資料, 這些資料能發掘出育種上植物種和屬特性的問題爭議, 如此便能鑑定和使用適當的自然資源 ( 植物材料 ), 這在未來數十年的植物育種工作上, 將是一個重要資源和工具基因組學在生物資訊學上是不可或缺的一部分, 它能提供大量的 DNA 和蛋白質序列的相似性研究, 並且標明出該序列是在何時何地被發表對於分子育種工作而言, 基因組學同樣是非常重要的使用更尖端的基因工具來研究便能發現, 雖然複雜的性狀是由許多的基因構成, 然而有時候表現型所表現的許多變異, 只是由少量的主要調節基因所引起基於序列的相似性基因表現和分子標誌, 這些基因現在已經能被鑑定和標定在圖譜上近年來, 許多令人印象深刻的遺傳學和基因組學上的長足進步, 已經讓我們對植物基因組上結構性和功能性等方面更加了解配合上發展迅速的電腦技術, 讓我們可以利用電腦來整合大量的資訊, 以提升作物改良的能力阿拉伯芥和水稻的完整基因序列及大量的植物表現序列標籤 (plant expressed sequence tags, ESTs) 都已完成而為了讓我們對其他主要作物有更加深入認識, 近一步延續性計畫也已在持續進行中結合傳統育種方法對基因組研究中所獲得的新知識, 對於提升品種改良已是一項不可少的技術優良的品種可因發現新的基因變異改良式的選拔技術, 或鑑定因為多基因座的優良等位基因組合所產生新的或改良的基因型特性而產生基因組學的研究產生了許多新工具, 諸如功能性的基因標誌和資訊學統計和遺傳表現的新知識, 使得作物改良的效率和準確性更加提升高昂的花費是目前限制基因組學輔助作物改良的原因, 特別是對品系純化和次要作物而言然而, 基因標誌輔助的育種和選拔工作, 將逐漸發展成生物資訊學輔助育種的作物改良建構並持續更新感興趣的作物遺傳質資源的資料庫, 對於持續性的作物改良工作是必須的理想上, 育種者必須掌握所有可利用的遺傳質資源的所 28 農業生技產業季刊

2 研發創新有基因甚至所有等位基因的資訊但即使是所有的等位基因都認識了, 一個等位基因在農藝學特性方面的貢獻通常不單是它本身的好或壞, 而需評估其他等位基因在基因組網絡中的整體表現最後, 我們可能想設計一個比自然形成更好的合成的等位基因, 所以基因組和擴增育種材料一樣, 都將帶給育種者一個更好的可用材料在此, 我們所遇到的瓶頸是評估無數的等位基因所形成的不同表現型和使用可利用的遺傳質資源所形成的等位基因組合的能力即使這些基因中已知的變異尚未透過基因研究來進行觀察, 然而, 分子標誌能透過混合篩檢的策略用來協助篩選出大量的品系, 也能被用於從收集的種原中篩選參與了重要過程的候選基因 (candidate genes) 中的等位基因例如 : 國際水稻研究學會 (International Rice Research Institute) 以發掘等位基因為基礎來發展 DNA 庫 (DNA bank), 並進行等位基因的發掘工作未來發展 ( 一 ) 建立分子育種用之生物資訊庫不僅作為分子育種資訊資料庫外, 更可成為基因庫與該相關生理特性之連結者對於台灣農業特別重要之經濟作物, 提供篩選作物生理病理與基因完整之分子標記的資訊平台此資訊平台可以藉由相關之分子標記, 區別具有候選特色可辨識或選擇性之基因, 作為進行相關試驗, 篩選合適之分子標記, 及相關工具的持續研發使用者為了發現作物相關的基因, 將允許進入已建構的資訊庫與允許提供簡單使用權和搜尋能力, 如鑑別與顯性特性相關基因, 或數量性狀基因座 (quantitative trait loci, QTL) 研究這樣的資訊資源的發展, 不僅可應用於阿拉伯芥模式植物, 亦可應用於一般作物, 如此才可統整作物相關的生理資源, 變成改進作物之目標的基礎 ( 二 ) 發展標準化的分子標記技術平台利用特殊的分子標記技術如 PCR 或非 PCR 基礎性標記技術基因定位對偶基因數量及相關基因等, 使發展相關技術的搜尋相關連結 ( 如基因預測 (gene prediction) 蛋白質交互反應等) 更加容易, 如此複雜且精密的介面將會持續改進植物種苗生技 2008 NO.13 29

3 RESEARCH & DEVELOPMENT 第二部分 : 分子標誌技術平台之建立概述建立分子標誌技術平台可提供育種者利用現有分生技術來輔助田間育種選拔,DNA 標誌能在育種早期世代鑑定基因型, 因此可減少育種過程需分析鑑定之品系數目及後裔族群大小而加速育種時程以 DNA 分子標誌輔助作物育種選拔 (marker assisted selection, MAS), 主要有三個目的, 一為追蹤各世代之目標對偶基因 ( 顯性或隱性 ) 以累積目標對偶基因之頻度 ; 其次為鑑定部份或全部基因組之對偶基因組成 ( 即基因型 ), 於分離世代族群中鑑定出最適當之單株 ; 第三為改變目標優良基因與不良基因連鎖現象 : 當目標優良性狀是由單一基因所控制, 則由供源親轉移基因組單一區域至接受品系, 可顯著改善性狀分子標誌輔助選拔可加速育種時程而於育種計畫中日顯重要, 若建立分子標誌生物資訊平台, 我們將有機會利用源自於遺傳圖譜上農業重要性狀控制基因位置與相連鎖分子標誌之訊息, 目前研究結果顯示, 下列情況最適合以分子標誌輔助選拔 : 不需進行試交或後裔試驗即可進行選拔分子標誌可於植物生長任何時期進行偵測, 故可早期進行選拔選拔不需耗費人力之天工作或繁複之實驗室工作選拔不受環境及植物栽培條件影響篩選困難或耗費人物力之性狀 ( 如植物對病原菌之抗性, 稔性回復基因 ) 選拔複基因和 / 或由多基因控制之複雜性狀所組成之性狀 ( 如產量組成性狀複基因控制之抗病性之或數量性狀 ) 以高效率應用時間和成本方式分析大量單株個體整個基因組層次的選拔等擁有鑑定過之育種材料對育種者非常重要, 而我們如何將材料轉變成品種呢? 這必須努力促進有趣的是育種公司通常較研究者更為重視縮短育種時程, 且兩者鮮少趨於一致在模式植物如阿拉伯芥和一些作物如玉米, 調控重要之農園藝性狀的基因正以加快腳步的方式不斷被選殖出來, 包括如株高始花時間春化作用種夾之開裂和莖節之分枝, 為數不少的這些植物基因解碼出轉錄因子, 進而調控更大量其他基因之表達對於更複雜之性狀, 如產量和非生物性逆境之耐性, 許多因子成為有效應用分子標誌輔助選拔的限制因子, 由於近來基因型鑑定技術與比較性功能性基因體研究之進展, 因而在進行選拔優良農藝性狀之基因型時提供了非常實用之工具利用分子標誌輔助育種選拔來加速回交育種計畫中輪迴親性狀之回復, 比較傳統的回交育種, 利用分子標誌可提高回交育種效率, 至少有三個方面 : 首先針對難以表現型分類之性狀, 從非輪迴親篩選與目標基因連鎖相近之標誌, 可以增加選拔效率及正確性其次分子標誌可用於選拔除移轉目標基因外, 基因組中具較少非輪迴親遺傳質之回交育種後裔, 也可用於選拔目標基因附近經雜交重組產生之少數後裔, 而將連鎖效應降至最低第三在傳統上回交育種之目標基因若為隱性, 每次回交後必須再次自交, 而使育種效率低落, 由於低至中等之遺傳率, 選拔超級基因型之機率並不高, 傳統育種選拔過程, 植物育種者必須製造並鑑定大量的雜交組合後裔, 以低選拔強度重複試驗及多世代之觀察測試來克服這個問題希望 MAS 可以幫助我們解決這些問題目前 MAS 已應用在作物育種上, 許多以基因標誌輔助不同作物之抗病篩選的精選案例已被報導, 以下是最近的兩個例子 : 1. 荷蘭 Wageningen 大學和私人種子公司 De Ruiter Seeds 已經應用 MAS 於他們的育種計畫將具有灰黴病抗性的野生種番茄 Solanum habrochaites LYC4 與感病的栽培種番茄 S. lycopersicum cv. Moneymakestarted 雜交, 即可利用分子標誌去鑑定兩個具有抗病基因之區域, 按部就班地掃描整個野生番茄之基因組 DNA, 再用以鑑定可能影響抗病性的區域, 結果發現了 10 個區域會調節對 30 農業生技產業季刊

4 研發創新前就成為一實用可行之技術現在也應用於田間篩選但需要複雜的組織與相當的投資如特殊設備實驗室設計和管理數據處理與統計和生物資訊處理能力有效應用 MAS 技術也需要專業人員及充足的資金除了投資需求外大多數國家面臨 MAS 技術應用最大的限制在於缺乏技術平台無法使策略規劃評估及應用顯現 MAS 的實用價值未來目標是建立智慧型生物資訊庫學使用者擁有一個分子標誌基因或序列即可透過此智慧型生物資訊庫去確認基因體的 DNA 序列蛋白質序列特殊結構 (motifs) 序列任何已知序列變異和基因中之單核苷酸多態性 (single nucleotide polymorphism, SNPs) 物理圖譜資料 BAC 選殖 (clones) 和其它適用之資源相同物種之已知基因所在圖譜之位置和其它物種之同源性已知或質疑的交互作用基因基因表現的產物或生合成途徑在基因和同源性之轉錄組學 (transcriptomics) 和表現資料 (expression data) 在種內或其它同源物種中是否有任何特性報告 (reports of traits) 與此基因有關聯的出版品研究報告和其它有關聯的資訊等灰黴病的抗性並針對每一區域發展出相對應之 DNA標誌用以偵測每個抗性因子的存在與否而加以選拔最後育成抗灰黴病(Botrytis cinerea) 的番茄新品種這個研究提供了突破番茄育種困境的一個策略 2. 根瘤線蟲侵襲了整個南美洲的大豆植物育種家正以與病原菌競賽的方式企圖育成抗根瘤線蟲的品種但卻因傳統費時和昂貴的篩選方法而延宕現在Georgia 大學的研究人員研究發現許多與根瘤線蟲抗性連鎖的分子標誌也發展出高效率的MAS方法來協助大豆育種者精確選拔抗病單株且較傳統方法省時且成本低建置專一性分子標記平台一分子標記應用於多樣性研究及遺傳演化以分子標記資料解釋遺傳分類及多樣性將受到不確定之多型性及偽同質結合基因型 (false homology) 結果所混淆以 RFLPs(restriction fragment length polymorphism) 在水稻方面為例核酸因為插入及缺失 insertions and deletions, InDels 之故所以利用限制酶切位可以產生更多多型性 InDels 及晶片二者也可以提升 AFLPs(ampliﬁcation fragment length polymorphism) 與 RAPDs(random ampliﬁed polymorphic DNA) 靈敏度 InDels 及晶片二者比例變化對於研究多樣性是非常重要的因綜合以上我們認為 MAS 為達成育出高產與為分子標記被用於估算核苷酸多樣性時若只由高經濟價值作物品種的重要因子 MAS 在 20 年 InDel 獲得多型性將出現高估現象確認 SNP 最植物種苗生技 2008 NO.13 31

5 RESEARCH & DEVELOPMENT 佳多型性技術是直接分析確認基因每一序列差異 AFLP DarTs ISSRs 及 RAPDs 中即使不知 SSR(simple sequence repeat) 分子標記技術適用於延道基因序列情況下仍有非常高價值性然而分子伸重複序列多型性以遺傳距離 (genetic distance) 標記資料難以紀錄且需要較高技術技術層次與為例遺傳變異性增加可提升 InDel 使用機會 DNA 樣品品質及 PCR 條帶出現情形有關此外二異源同形 homoplasy 問題任何一種方法均與測定 DNA 條帶分子量如 SSRs 在 RAPDs ISSRs 及 AFLPs 分子標記方面異源同形可發生於二個或更多基因座類似分子量 PCR 產物雖然愈多 DNA 條帶可獲得較多遺傳訊息但必須考慮平衡及可能增加異源同形風險性逐步使用 SSR 標記突變模式不適用於高度族群遺傳多樣性 SSR 也存在異源同形問題因為高度有關每一條等位基因所獲得正確分子量可能受標記 PCR 產物不同而有差異若無控制每一個等位基因將很困難獲得有用分子標記一個正確的分子標記結論應該是與試驗結論具有一致性由獨立資料組可信度觀點而言 SNP 分子標記技術是較受歡迎 SNP 資料組可以很容易整合基因序列而且遺傳多樣性受等位基因大小影響異源同形包含對於低突變率之演化推論特別具有價值性平行演化 (parallelism) 同源演化 (convergence 四分子標記技術的選擇逆轉演化 reversion 逆轉演化將影響轉座子 (transposonbased) 分子標記或其他來自於 Class II DNA 轉座元素 (transposable elements, TEs) 產生之多型性標記這種 TEs 可切割黏貼跳躍子轉位故 TE 可插入基因座三分子標記資料的再現性對單一物種而言在引子來源不明方法 32 農業生技產業季刊如之前已提到並無任何一種技術可檢測所有分子標記影響決定性的因素包括研究目的生物特定序列的有效性設備技術資源及品種的生物特性每一種分子標記技術均有其優缺點第一部分所提及分子資料庫對於建立特定育種目標之分子標記是非常重要 MAS 是一種更可靠且更方便高品質分子標記技術共顯性分子標記不需

6 研發創新進行後裔檢定 (progeny test) 有時使用 MAS( 如 RAPDs ISSRs AFLPs) 可能在所需要的等位基因上獲得較少分子標記一旦找到一個分子標記, 可能將其對應 DNA 條帶解序這種基因序列可能可作為共顯性分子標記, 如 CAPS(cleaved amplified polymor phic sequences) 或 SCARs(sequence characterized polymorphic regions) SCAR 及 CAPs 是一種適用共顯性分子標記且可簡化大量篩檢個體當有遺傳圖譜時, 分子標記可標示基因圖譜位置及與其他基因連鎖關係額外的分子標記可作為有效率找出有用等位基因上其他連鎖分子標記如有可能, 微衛星 (microsatellite) 及 SNP 分子標記技術是不錯的選擇挑選適合的 SSR 試劑組及可擴增理想多型性基因組,SSR 技術使用機會將可提高且分析成本降低利用 SSR 試劑組在水稻遺傳研究上有不錯成效且成本低廉如同 SNPs 一樣, 有需要開發有用的大量的及低成本的分子標記由分子資料庫或分析其他實驗式資料庫, 以建置 SNP 試劑組是非常具有優勢除了分子標記試劑組外, 有需要準備控制基因組 (control genotypes) 樣品, 特別是整合 SSR 資料組遭遇困難時, 有其必要性當無法使用 SNPs 或 SSRs 時, 可以改用與特定品種有高度相關之分子標記技術若有經費限制問題, RAPDs AFLPs 和 ISSRs 是不錯的選擇, 搭配使用自動定序儀, 可產生高效率分子標記, 最小的設備投資觀點可採用 RAPDs 及 ISSRs 方式每種技術效果因品種及使用方式而異因此, 研究初期應多使用不同方式進行分析 ( 五 ) 分子標記功能在過去幾年期間, 研究功能性基因 EST 及基因組序列之計畫, 有利於發展基因組轉錄區域分子標記能夠從 ESTs 發展出更重要更受歡迎的分子標記技術, 是 SNPs SSRs 或 COSs(conserved orthologous sets) 推測是否可作為分子標記功能, 可從尋找蛋白質資料庫 BLASXT 之 ESTs 或基因中取得 ( 如 NR-PEP 及 SWISSPROT) ( 六 ) 高效能技術基因晶片可從偵測數以千計基因轉錄作用雜合反應試驗中, 獲得有用功能性基因寡核苷酸晶片及基因表達系列分析 (serial analysis of gene expression, SAGE) 為高效能檢測技術, 適合作為特定組織或特定時期之全體基因表達分析晶片上數以千計獨特 DNA 序列方格中, 可辨識特定基因影響力基因晶片之 DNA 來源, 有 cdna ESTs 特定染色體次基因組區域或整個基因組以寡核苷酸作為基因晶片探針之技術, 已被應用至商業化阿拉伯芥基因上, 應用至水稻及其他研究正進行中未來建置各種有用基因表達資料庫將有其必要性開發高效能基因組技術可剖析複雜的遺傳特色, 如遺傳基因間隔 (genetic intervals) 辨識特定基因及顯現一個等位基因對於外表性狀貢獻度基因晶片極化螢光法 (fluorescence polarization) 質譜分析法 (mass spectrometry) 及分子條碼 (molecular barcodes) 均是有用的新技術, 達成 10,000 個分子標記是有可能的, 這顯示以自然變異 / 自然族群為基礎之高效能分析技術, 可作為反向遺傳學 (reverse genetics) 研究策略開發功能性基因過程中, 有賴於利用高效能技術研究植物數以萬計基因功能許多尚未被檢測植物基因角色, 已在細菌酵母或動物中被確認 ( 七 ) 以基因轉殖作為育種工具基因轉殖的方法是利用許多轉殖技術直接移動個別基因, 可導入有用基因進入植物王國內一系列等位基因轉殖至同源基因可確定個別功能性基因序列區域以非同源末端連接 (nonhomologous end joining) 為基礎方法, 因轉殖基因在基因組任意整合位置效應轉殖基因間多重插入, 導致等位基因與數量性狀間關植物種苗生技 2008 NO.13 33

7 RESEARCH & DEVELOPMENT 係模糊此可以利用同源基因重組及標的基因座, 以避免上述情形發生在水稻中, 約可發現 1% 插入現象是由同源基因重組造成若能改進轉殖技術將可大幅提升育種效率在第三部份中, 我們將描述如何建置基因轉殖技術平台第三部份 : 直接基因轉殖技術平台概述經過許多時間與精力的消耗, 且經許多無效的錯誤嘗試後, 即將藉由基因槍電穿孔與其他系統, 達成直接轉殖基因進入未受傷的植物細胞雖然要針對特殊的植物組織或類型需要有一些改進, 每一個轉殖系統各有其有利與不利的條件, 並且沒有任何單一系統能像以農桿菌為媒介進行 DNA 間接轉殖一樣, 被如此廣泛的應用, 植物基因轉殖 ( 特別是雙子葉植物 ), 大部分都可藉由農桿菌來達成, 但卻比直接基因轉殖操作繁瑣例如, 需在共培養 (co-cultivation) 階段添加農桿菌, 又必須在共培養後清除農桿菌也需要在大腸桿菌中操作質體構築後, 再將質體送進農桿菌中另外, 農桿菌轉殖系統並不容易應用在單子葉與某些雙子葉植物另外, 只有直接基因轉殖技術能被使用來傳遞其他分子, 如 RNA 蛋白質誘變劑以及其他化學物質, 這也是農桿菌無法達到的無疑的, 一種有效率且高產能的直接基因轉殖系統, 並非仰賴於寄主與載體間的相互作用, 就能具備簡單快速適合廣泛應用等優勢目前學術研究報導相關直接性基因轉殖技術 (direct DNA delivery) 包括利用極性非質子性溶劑 dimethyl sulfoxide (DMSO), 於超音波震盪 (ultrasonication) 作用下, 將外來基因直接送入活化煙草葉片然而當細胞遭受到超音波刺激達亞致死劑量 (sub-lethal doses) 時, 會改變細胞之正常代謝, 甚至導致細胞破裂部分研究指出若利用碳化矽 (Silicon Carbide, SiC) 纖維震盪的方式轉殖外來基因, 通常於試驗震盪的過程中, 往往會造成細胞嚴重的傷害, 同時這種碳化矽纖維對於操作者也有如同石綿一樣, 具有使用上的危險性此外, 亦有部分研究報導利用雷射微光束 (Laser microbeam) 將外來基因導入植物細胞級葉綠體, 但需要相當精細複雜之儀器設備近年來, 利用基因槍法 (Microprojectile bombardment, Gene gun) 進行轉殖較為盛行在年代期間, 將此技術成功的廣泛應用於豆類植物 (leguminous) 及單子葉植物之轉殖試驗, 包括豆類之胚培養大豆莖頂培養以及細胞懸浮培養甘蔗之分生組織培養水稻未成熟胚培養經活化之玉米胚培養玉米之雄蕊原體組織培養 (stamen primordia) 小麥胚盤培養 (scutellar) 及榖類花器培養 (cereal inflorescence) 等相關研究由於基因槍法是以金屬顆粒來傳輸外來基因, 於機械力機制的基 34 農業生技產業季刊

8 研發創新因槍轉移下, 較長片段的 DNA 很有可能因此斷裂另外, 在大多種的植物細胞內, 液泡 (vacuole) 的空間分布占細胞 90% 以上, 基因槍所攜帶的基因很容易打入至液泡當中, 而無法達到標地的細胞核, 因而導致無法進行短暫性的基因表現或嵌入基因體中的試驗需求, 而植物分生組織細胞內所含的液泡比例較低, 較容易轉殖成功許多試驗結果指出基因轉殖的效率大多限制於這些金屬粒子所嵌入的細胞, 而無法達成傳送基因, 因此, 大部分基因槍轉殖效率普遍較低另外, 在基因槍轉殖系統下, 操作者必須明瞭在進行基因槍轉殖後, 細胞不僅會因為金屬嵌入細胞, 甚至金屬微粒進而穿透細胞, 造成細胞的傷害, 由於目前沒有出現較好的轉殖系統, 基因槍轉殖系統仍為科學家常使用的轉殖方法之一在以原生質體為材料研究上, 常選用電穿孔 (electroporation) 轉殖法, 此技術亦為世界上第三大常使用之轉殖技術如水稻的原生質體培養上, 使用電穿孔轉殖較 PEG( 聚乙二醇 ) 技術, 可高達 13 倍轉殖效率 2 倍的細胞存活率及 6.2 倍的高穩定性轉殖效率大多數電穿孔轉殖技術的轉殖結果較外來基因嵌入基因位置單純然而對不同的植物來說, 植物體原生質體的養成培養及繼代等試驗程序有相當的差異與困難度, 甚至有些植物從未有相關的試驗報告一般來說, 無受到傷害的細胞較容易進行養成培養與繼代等程序因此, 早從十多年前起, 如何發展一套不會傷害植物細胞的電穿孔基因轉殖技術, 普遍受到學者相當迫切關注儘管基因槍法仍有較低的轉殖效率和穩定性不佳等兩大缺點, 然相對於電穿孔法較為簡單容易執行及較符合經濟效益目前各種轉殖技術仍舊不斷的加以精進改良, 以達試驗所求如菠菜 (spinach) 的原生質轉殖技術研究上, 已經能夠使得報導基因 (reporter gene) 在轉殖成功的植物上進行基因的表現更加重要的是, 使用此技術已經能達成相當穩定的轉殖效果未來發展目標我們提出具邏輯的有系統的及健全的計劃, 去建立一個具有高效率和高生產力的方式, 完整運送 DNA 分子進入植物細胞的平台, 最後的目標是建立一個具有高效率且迅速的基因轉殖科技平台, 我們的理論是同時組合數個流程成為一個系統, 才能產生一個有效率可靠適合廣泛應用花費較少時間較少勞力的方法, 將基因送入植物細胞建立這個平台, 首先可以整合挑選出溫和的預措處理包括真空滲透超音波振盪研磨劑, 使細胞壁的部分酵素消化分解, 特別是質壁分離的發生, 用以創造路徑使 DNA 分子穿越細胞壁並進入原生質膜及細胞壁兩者間的空間, 然後使用電穿孔去傳送 DNA 進入細胞其次是開發一個高產量的方法, 也就是在完整的植物組織中直接進行基因轉殖假如我們在建構直接基因轉移的技術平台上獲得成就, 將哺乳動物的轉殖法應用在改良農作物上, 基因轉移技術在植物分子育種中的研究將打開潛在的新視界吳方盛美國維吉尼亞大學教授沈翰祖種苗改良繁殖場助理研究員孫永偉種苗改良繁殖場助理研究員郭宏遠種苗改良繁殖場助理研究員莊淑貞種苗改良繁殖場副研究員鍾文全種苗改良繁殖場副研究員李美娟種苗改良繁殖場副研究員劉明宗種苗改良繁殖場副研究員陳駿季種苗改良繁殖場研究員兼副場長 AgBIO 植物種苗生技 2008 NO.13 35

X 傳統育種技術分子育種技術基因改良育種

X 傳統育種技術分子育種技術基因改良育種 06 2015 7 511 72 92? 2010? X 傳統育種技術 1960 1980 30 60 20 分子育種技術 5 10 3 5 基因改良育種 2015 7 511 07 改良後的基因及其生產的蛋白質都需經過嚴格的動物及田間生物安全試驗才會上市, 程序就跟新藥一樣 20 基改產品禁得起考驗 12 2013 1.75 50 1 5 1996 80 2013 156 35 21 6 90 08