BE 第二军医大学学报!!年月第%卷 K V S- S = K?! S!% ' 5 66! % %! BB E! %是一类全球性的神经精神!!抑郁症 系统疾病具有高发病率'高死亡率和高致残率的特 以及其机制是否涉及脑内炎症状态尚无文献报道 点研究发现女性群体的抑郁症发病率是男性的 的影响及其

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1 % 第二军医大学学报!!年月第%卷第期!!! %! ' BB ' 5 6 < = %>= 6 6!?@! = %B!5D= = E= BB!论! 著! 运动锻炼对雌激素缺乏所致小鼠抑郁样行为的作用及炎症机制 鲍青悦!王玉君!!徐永君!盛!慧!曹敏佳%!倪!鑫 =第二军医大学基础部生理学教研室上海!%% 上海体育学院运动科学院上海!%E %=上海中医药大学药学院上海!!!!!摘要!目的!阐明运动锻炼对雌激素缺乏所致小鼠抑郁样行为的影响及其炎症机制并为运动锻炼治疗更年期抑郁 症提供理论依据 方法!将只雌性小鼠随机分为假手术组 5 组%'假手术 i 运动组 5 ir 旷场实验和 悬 尾 实 验 来 观 察 各 组 小 鼠 的 行 为 学 改 变 情 况提 取 各 组 小 鼠 海 马 组 织用 R 5' 试 剂 盒 检 测 羟 色 胺 YU%'吲哚胺!% 双加氧酶!% S?@%及炎性细胞因子的水平 结果 与 5 鼠抑郁样行为与 5 YU 含量降低 - = %?@ 含量升高 动锻炼能够逆转上述改变与 5 组小鼠海马中促炎细胞因子 %' %和 %含量增加抑炎细胞因子 %' 小鼠运动锻炼能够逆转 ' 表达的改变 结论!运动锻炼可能通过减轻海马炎症反应来改善雌激素缺乏所致抑郁样行为 和!关键词!运动抑郁雌激素类 羟色胺吲哚胺! % 双加氧酶细胞因子!!!!!文献标志码!'!!!!文章编号!!E EBIH!% BB!!!中图分类号!XBI= B Q U O'@ 6a'@jS ]'>[\!H \S 5YR>[ Y %>H M M M =? D SO a S -!%%O S L S5 S S -!%EO %=O D S - U O 6 5 S -!!O S 5!< 6!U V S S!! = K S V =! ' OBa V 5 5 %5 5 @ir%s =5 =' V 5 i V V =] K S V V = YU%!% S?@% V S R 5' = O V K S K K S K =O V 5 S YU %?@ % V V S K S=U % % %@S V 5 V S % - = S = > R S S!收稿日期!!! I!!!!!接受日期!!!I!基金项目!上海市自然科学基金 %GXEB%=5 K> 5 Q 5 S - %GXEB%=!作者简介!鲍青悦硕士生=R!K S!%= T 通信作者 O S %=U!! EEBIBER! =

2 BE 第二军医大学学报!!年月第%卷 K V S- S = K?! S!% ' 5 66! % %! BB E! %是一类全球性的神经精神!!抑郁症 系统疾病具有高发病率'高死亡率和高致残率的特 以及其机制是否涉及脑内炎症状态尚无文献报道 点研究发现女性群体的抑郁症发病率是男性的 的影响及其内在机制以及运动锻炼对此的作用这!% 倍特别是在体内雌激素急剧减少的围绝经 期约有`的女性罹患更年期抑郁症动物研 将有助于阐明女性更年期抑郁症的发病机制并为 究也表明动物血清雌二醇 R!%水平与抑 论基础 郁样行为负相关!众所周知雌激素是由卵巢产 生的一类类固醇类激素包括 R!'雌三醇和雌酮其 本研究旨在探讨雌激素缺乏对动物抑郁样行为 运动锻炼作为一种更安全有效的抗抑郁手段提供理!材料和方法 中 R! 是体内活性最强'最为重要的雌激素形式R! =! 动物来源! 只成年雌性 5DQ 级 OBa 不仅与机体的生殖功能有关 在中枢神经系统中还 小鼠购 于 上 海 西 普 尔必 凯 实 验 动 物 有 限 公 司 情绪反应等诸多生理过程 并与抑郁 参与学习记忆' 产 许 可 证 号! 动物 生 5OHL沪 %!! %于 症等精神神经系统疾病密切相关然而关于雌激 通风 良 好'卫 生 清 洁 的 动 物 房 内 适 应 性 饲 养 素调节抑郁情绪的机制尚未完全阐明 周自由饮 食动 物 房 温 度 控 制 在!!h!%e 近年来的研究提示抑郁症是一种炎症性疾病 相对 湿 度 为 ` B` 光 照 度 控 制 在 抑郁症患者以及抑郁症模型动物的脑组织呈炎性状 % 光照时间! B! I! %本研究通 态如抑郁症患者脑脊液中促炎细胞因子水平明显 过第二军医大学科 学 研 究 伦 理 委 员 会 审 核所 有 升高而应用抗炎药物能够明显改善其抑郁症状 % 操作均遵循国家-实 验 动 物 管 理 条 例及-国 家 实 在慢性应激导致的抑郁动物模型中大脑皮质白细 验动物管理实施细则 胞介素 %'肿瘤坏死因子 % U>Q %%等促炎 =!!建立去卵巢小鼠模型! 将小鼠随机分为 ' 组 细胞因子表达量增加 因此有人提出抑郁症的 和 a 组每组 % 只将 ' 组小鼠腹腔注射 ` 水 发生与脑内炎症反应有关已有研究报道雌激素 合氯醛= 待动物麻醉后俯卧于手术板上并固 织 的 炎 症 反 定四肢 B`乙醇棉球擦拭消毒背部皮肤沿正中剪 应发挥抗炎作用 但雌激素缺乏所致抑郁样行 为是否与脑内炎症反应有关尚无明确报道 开长约 = 切口剪开肌肉层找到卵巢卵巢为 粉红色球形组织团%结扎支配卵巢的血管后剪下卵 目前临床上常用三环类抗抑郁药合并雌激素替 巢随后以同样方法去除另一侧卵巢手术完成后 代疗法来治疗女性更年期抑郁症但是这种治疗方 分层缝合切口a 组小鼠的处理方法同 ' 组但在 案存在一定不足!一方面三环类抗抑郁药具有明显 找到两侧卵巢后不予去除仅去除卵巢附近一块与 的肝'肾毒性还可引发心理依赖等问题另一方面 卵巢大小接近的脂肪组织其余操作同 ' 组手术 雌激素可以直接导致子宫内膜癌和乳腺癌等恶性肿 结束后将两组实验动物饲养于完全相同的环境中 瘤的发病率增加 因此人们一直在寻求更为安 全有效的治疗更年期抑郁症的新方法 自由饮食 = %! 动物分组及运动锻炼! 术后恢复 周将 ' 近年来 运动锻炼作为一种新型抗抑郁手段越来 组%和去卵巢 i 运动组 组%将 a 组 平 均 分 为 假 手 术 组 5 心肺功能 调节机体代谢和神经内分泌从而改善冠 组%和假手术i运动组 5iR 组%每组 只 心病' 神经官能症等多种疾病的临床症状BI运动 对 组小鼠进行 周的运 锻炼也能够有效地缓解多种原因如慢性应激'胎儿 动锻炼每周于固定时间点训练休息!其中 期糖皮质激素暴露等%所导致的抑郁样行为!而 第周为适应性跑台锻炼方案!跑道倾角 l第 有关运动锻炼能否调节雌激素缺乏所致抑郁样行为 天速度为!时间为第!天训练

3 BI 第期=鲍青悦等=运动锻炼对雌激素缺乏所致小鼠抑郁样行为的作用及炎症机制 强度不变逐步增加训练时间分别至!' %' 第天速度为时间为%后周为!结!果 正式 跑 台 锻 炼 方 案!跑 道 倾 角 l跑 步 速 小鼠体质量子宫质量和血清 R! 浓度的 时间% - 变化!由表可见与 5 组小鼠体 =!行为学测试! 质量增加 %子宫质量减少 %血 =!糖水实验!适应性实验!正式性糖水实验开 清 R! 浓度降低 始前周进行糖水适应即实验小鼠单只单笼饲养 成功 每只笼子配! 只分别装有自来水和 ` 糖水的饮水 表!两组小鼠体质量子宫质量和血清 B 浓度 瓶 保证水瓶摆放的位置'高度一致每隔! 将! E!T 只饮水瓶的位置互换 次适应性糖水实验持续 H - 5<6 Q 5 g %h 周 在这期间跑台运动锻炼时将小鼠拿出饲养笼运 动结束后放回正式性实验!糖水适应实验 周后 [ a V S V S 5 R! S S Sf% a!%= Ih= = Ih= Ih= E! h=!!e= Bh %! 分别向每只水瓶加入足量的糖水或自来水并称量 记录糖水和自来水总质量! 后再次称量糖水和 自来水总质量分别计算每只小鼠! 消耗的糖水 量占总水量糖水量i自来水量%的百分比 Eh= B R = 5 S!R!! =!! 旷场实验! 小鼠抑郁样行为!! 在糖 为反应判断动物探索性行为的变化安静环境下 水实验中糖水消耗百分比下降情况可以反映动物 将实验小鼠放入测试箱中动物在测试箱中自由活 快感缺失这是抑郁症的典型症状之一实验结果 动待实验结束后选用中央活动路程'穿越场 图'%显示!与 5 组小鼠! 糖 中心 次 数! 个 指 标 来 判 断 动 物 是 否 出 现 抑 郁 样 水消耗百分比降低 行为 组! 糖水消耗百分比上升 %与 5 = %! 悬尾实验! 通过测试动物逃脱的愿望来评 组比较 5iR组! 糖水消耗百分比没有明 价抑郁情绪安静环境下用胶带在距实验鼠尾根 小鼠糖水消耗 %处将铁丝钩粘住并将其倒挂在测试设备上测 量的下降 试时间为实验结束后记录小鼠的不动时间 在旷场实验中 中央活动路程和穿越场中心次数 作为评价抑郁样行为指标 这也是动物抑郁情绪的 可以反映动物的探索性行为 =! 标本获取与检测! 实验结束后采用快速断头 重要指标实验结果图a'图O%显示!与 5 组 法处死动物用= 离心管收集血液室温静置 组小鼠中央活动路程和穿越场中心次数降 %c 离心后吸取上层血清并及 低 % ir 组小鼠中央活动 时放入fEe 低温冰箱保存备用同时冰上剥离 路程和穿越场中心次数增多 与 5 % 组 脑组织分离海马并装入冻存管中用液氮将上述标 相比 5 ir组中心活动路程和穿越场中心次数 本迅速冷冻后转移至 fee 冰箱中保存备用用 小鼠中 R 5' 法 R 5' 试剂盒购自上海西塘生物科技有 央活动路程和穿越场中心次数的改变 限公司%测定血清 R! 及大脑海马组织 YU'吲哚胺 在悬尾实验中动物不动时间反映其绝望情绪!% 双加氧酶?@%'各炎性因子含量具体操作按 这也是判断动物是否出现抑郁情绪的重要指标实 试剂盒说明书进行 验结果图?%显示!与 5 组小鼠 =!统计学处理!! 采用 5D55E= 统计软件进 不动时间增加 组 行统计学分析计量数据以 %h表示多组间比较 小鼠不 动 时 间 减 少 - = %与 5 组 比 较 采用双因素方差分析 V V '>@<'%检验水 5iR 组不动时间没有明显差异可见运动锻 准!%为=

4 E 第二军医大学学报!!年月第%卷 表达的影响!经检测各组小鼠海马组织中促炎细胞 因子 和 %以及抑炎细胞因子 ' 和 的表达后发现与 5 % 组小鼠 海马 组 织 中 ' ' 含 量 增 加而 ' 含量降低 或 % 组比 ir组小鼠海马组织中 含量减 ' 少 而 与 5 含量增加 或 % 组相比 5 ir 组 ' ' 以及 ' 表!% 小鼠海马组织 YU 和?@ 图!各组小鼠的行为学测试结果 含量的影响! 实验结果显示与 5 6 5!T 组小鼠海马中 YU 含量降低 %?@ 含! ' 5 a 量升高 组小! %=R!R? U U5U == 鼠海马中 YU 含量升高 %?@ 含量降 5 =g %h S 低 %与 5 组相比 5iR组 YU 和?@ 含量没有明显差异图!%说明运动锻炼能 小鼠大脑海马组织炎性因子 YU 和?@ 含量的改变 表!各组小鼠海马炎性细胞因子的表达 E! - U g %ha SSf% [ 5 B= %h B= h= E = h= % h= I E= %h= Ih % Eh 5iR = IIh E= EBh= Bh= = Bh= I= h= = %Ih= I = Eh= B! %= h= B = Bh= E I=!h= B %B= EhB=!h= h=!!! = 5 的生殖活动还与学习记忆'神经保护和情绪反应等 生理功能密切相关流行病学调查显示抑郁症的 发病有着明显的性别差异女性抑郁症的发病率是 男性的!% 倍这被认为与血清 R! 含量密切相 关%动物研究也表明在一个动情周期中动情 图!各组小鼠海马组织M LE% 和DG<% T含量 6 M LE % DG< % T -5!V 55 5 R! R YU! Y?@!! % S =- = - = 5 =g %h 间期动物血清 R! 水平较低而抑郁样行为增加! 卵巢是合成雌激素的主要场所摘除小鼠双侧卵巢 能够降低体内雌激素水平并能很好地模拟绝经期妇 模型上我们观察到在糖 水实验中糖水消耗百分比下降旷场实验中中央活 动路程和穿越场中心的次数降低悬尾实验中小鼠 I!讨!论 R! 是一类类固醇类激素它不仅参与调节机体 组小鼠发生了快感缺失' 探究性行为减少'绝望情绪增加说明其出现了抑郁 样行为

5 第 期 鲍 青 悦 等 运 动 锻 炼 对 雌 激 素 缺 乏 所 致 小 鼠 抑 郁 样 行 为 的 作 用 及 炎 症 机 制 - 众 所 周 知 适 量 的 体 育 锻 炼 能 够 改 善 机 体 的 不 良 情 绪 临 床 研 究 证 实 运 动 锻 炼 可 以 改 善 抑 郁 症 状 并 且 也 作 为 一 种 治 疗 手 段 被 应 用 然 而 其 中 的 生 物 学 机 制 目 前 还 未 阐 明 动 物 实 验 也 证 实 运 动 锻 炼 可 以 明 显 改 善 慢 性 应 激 和 胚 胎 期 受 到 应 激 刺 激 等 多 种 因 素 所 导 致 动 物 的 抑 郁 样 行 为 然 而 运 动 锻 炼 对 雌 激 素 缺 乏 所 导 致 的 抑 郁 样 行 为 具 有 怎 样 的 影 响 目 前 尚 无 相 关 报 道 与 之 前 的 研 究 结 果 相 类 似 在 本 实 验 中 给 予 小 鼠 跑 台 锻 炼 后 能 够 改 善 它 们 的 抑 郁 样 行 为 提 示 运 动 锻 炼 对 雌 激 素 缺 乏 所 致 抑 郁 样 行 为 同 样 有 着 积 极 的 改 善 作 用 而 其 中 的 机 制 尚 未 阐 明 要 想 了 解 运 动 锻 炼 是 如 何 改 善 雌 激 素 缺 乏 所 致 的 抑 郁 样 行 为 必 须 先 明 确 雌 激 素 缺 乏 产 生 抑 郁 样 行 为 的 机 制 不 同 运 动 锻 炼 时 间 对 炎 症 因 子 水 平 的 影 响 可 能 不 同 等 研 究 发 现 运 动 锻 炼 周 后 才 开 始 引 起 自 发 性 高 血 压 大 鼠 下 丘 脑 室 旁 核 中 炎 细 胞 因 子 等 表 达 降 低 运 动 锻 炼 - 周 仍 维 持 在 较 低 水 平 提 示 运 动 锻 炼 周 后 即 可 以 改 变 脑 内 炎 症 因 子 水 平 本 研 究 中 我 们 选 取 运 动 锻 炼 周 后 观 察 雌 激 素 缺 乏 所 致 小 鼠 抑 郁 样 行 为 的 炎 症 机 制 近 年 来 的 研 究 提 示 抑 郁 症 是 一 种 炎 症 性 疾 病 抑 郁 症 患 者 以 及 抑 郁 症 动 物 模 型 的 脑 组 织 呈 现 炎 性 状 态 临 床 研 究 发 现 抑 郁 症 患 者 血 清 中 一 些 促 炎 细 胞 因 子 水 平 升 高 而 一 些 抑 炎 细 胞 因 子 在 应 用 抗 抑 郁 药 物 后 表 达 上 升 有 研 究 报 道 雌 激 素 可 以 抑 制 大 鼠 心 血 管 组 织 的 炎 症 反 应 发 挥 抗 炎 作 用 我 们 的 研 究 结 果 显 示 组 小 鼠 海 马 促 炎 细 胞 因 子 和 含 量 增 加 而 抑 炎 细 胞 因 子 和 含 量 降 低 提 示 雌 激 素 缺 乏 可 能 是 打 破 了 促 炎 性 细 胞 因 子 和 抑 炎 细 胞 因 子 之 间 的 平 衡 导 致 动 物 抑 郁 样 行 为 研 究 认 为 促 炎 细 胞 因 子 如 和 等 能 够 增 加 的 表 达 而 抑 制 脑 内 的 水 平 能 够 改 善 各 种 急 性 慢 性 炎 症 诱 发 的 抑 郁 样 - 行 为!% 等 认 为 抑 郁 症 与 脑 中 单 胺 类 神 经 递 质 如 等 含 量 低 下 有 关 而 作 为 色 氨 酸 代 谢 过 程 中 关 键 的 限 速 酶 能 够 催 化 色 氨 酸 循 犬 尿 氨 酸 途 径 代 谢 降 解 间 接 导 致 含 量 减 少 等 研 究 认 为 水 平 增 加 可 导 致 犬 尿 氨 酸 增 加 脑 组 织 中 含 量 降 低 从 而 诱 发 抑 郁 样 行 为 在 本 实 验 中 发 现 小 鼠 不 仅 出 现 了 抑 郁 样 行 为 同 时 海 马 含 量 降 低 含 量 升 高 提 示 雌 激 素 缺 乏 通 过 调 节 脑 内 炎 症 反 应 导 致 增 加 引 起 色 氨 酸 代 谢 异 常 从 而 导 致 动 物 抑 郁 样 行 为 为 了 探 讨 运 动 锻 炼 改 善 雌 激 素 缺 乏 所 致 抑 郁 症 状 的 机 制 是 否 涉 及 脑 内 炎 症 反 应 和 改 变 我 们 在 小 鼠 运 动 锻 炼 的 模 型 中 进 行 了 研 究 发 现 小 鼠 跑 台 锻 炼 后 可 以 逆 转 海 马 炎 性 细 胞 因 子 和 表 达 的 改 变 提 示 运 动 锻 炼 可 能 通 过 平 衡 促 炎 性 细 胞 因 子 和 抑 炎 细 胞 因 子 表 达 而 改 善 雌 激 素 缺 乏 所 致 的 抑 郁 样 行 为 同 样 运 动 锻 炼 也 可 以 逆 转 小 鼠 海 马 含 量 的 降 低 和 含 量 的 升 高 提 示 运 动 锻 炼 可 能 通 过 脑 内 炎 症 反 应 调 节 中 枢 单 胺 类 神 经 递 质 系 统 以 及 色 氨 酸 代 谢 来 改 善 雌 激 素 缺 乏 所 致 的 抑 郁 样 行 为 综 上 所 述 雌 激 素 缺 乏 可 导 致 小 鼠 出 现 抑 郁 样 行 为 给 予 运 动 锻 炼 可 缓 解 这 一 现 象 雌 激 素 缺 乏 导 致 海 马 组 织 中 促 炎 细 胞 因 子 升 高 抑 炎 细 胞 因 子 降 低 以 及 含 量 降 低 含 量 升 高 给 予 运 动 锻 炼 能 够 逆 转 炎 性 细 胞 因 子 以 及 改 变 因 此 本 研 究 结 果 提 示 运 动 锻 炼 可 能 通 过 调 节 脑 内 炎 症 反 应 降 低 含 量 维 持 中 枢 单 胺 类 神 经 递 的 正 常 水 平 从 而 改 善 雌 激 素 缺 乏 所 致 的 抑 郁 样 行 为 参 考 文 献!5!%>=!>! = %%! %%!% %- 5!5!%! %!! % %5%%%% = = 5 % =!%!! %%%%!5 =!5!%! %!! %!!!!5 =!

6 - 第 二 军 医 大 学 学 报 年 月 第 卷 ---!!> =%!!%!%% %5%!% % %%%%! 5!%!!! %%!%!% 5!!5 % %!!5-5!5 %! %%%%!5! %! %% 55 5!%! %!%5!% % % 5 5!%!!%%!%%!% % %% = = 55 5 %!%5! %% % %%!!% =!%!%%- = %5%!5! =!% % %!% %%5!%! %! % %! % %!%!%% %! =!%! =%!>>%!% 5% % %%!% - 5>!5!%! %%5 %! %! 5% %! %5% %!!!%! 5%%! % - = % %!%%%! 5!%!!%% %%%!%% %!%%%%% %% 5!%!% %!!% %!!5!!% - 本 文 编 辑 魏 学 丽 %5 %%!%

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