04 1 昆 明 理 工 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 第 40 卷 0 引 言 牙 周 炎 是 一 种 慢 性 炎 性 疾 病, 特 征 为 牙 周 致 病 菌 与 宿 主 炎 性 反 应 之 间 的 相 互 作 用, 导 致 牙 周 组 织 和 牙 槽 骨 附 着 破 坏, 最 终

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1 第 40 卷 第 2 期 2015 年 4 月 昆 明 理 工 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) JournalofKunmingUniversityofScienceandTechnology(NaturalScienceEdition) Vol.40 No 2 Apr.2015 doi: /j.cnki /n 五 倍 子 非 酚 性 成 分 缓 释 凝 胶 对 大 鼠 慢 性 牙 周 炎 抑 制 作 用 的 实 验 研 究 谭 小 兵, 徐 静 舒 ( 云 南 省 第 一 人 民 医 院 / 昆 明 理 工 大 学 附 属 医 院 口 腔 内 科, 云 南 昆 明 ) 摘 要 : 中 药 五 倍 子 可 明 显 抑 制 牙 周 可 疑 致 病 菌 生 长, 但 其 活 性 成 分 及 机 制 尚 未 明 确. 本 实 验 应 用 五 倍 子 非 酚 性 成 分 缓 释 凝 胶 处 理 SD 大 鼠 慢 性 牙 周 炎 4 周, 牙 周 炎 临 床 指 数 评 价 实 验 动 物 牙 周 炎 情 况,ELISA 法 检 测 大 鼠 龈 沟 液 内 基 质 金 属 蛋 白 酶 -9(MMP-9) 的 表 达 变 化. 结 果 发 现 五 倍 子 处 理 组 PD GI MBI MMP-9 水 平 均 显 著 低 于 阴 性 对 照 组 (P<0 05), 与 派 丽 奥 处 理 组 间 无 显 著 性 差 异 (P>0 05), 但 PD 降 低 明 显 多 于 派 丽 奥 组 (P<0 05). 结 果 说 明, 五 倍 子 大 极 性 非 酚 性 物 质 能 够 通 过 抑 制 慢 性 牙 周 炎 SD 大 鼠 龈 沟 液 内 MMP-9 表 达, 有 效 降 低 细 胞 外 基 质 和 胶 原 降 解, 从 而 抑 制 牙 周 炎 进 展. 关 键 词 : 五 倍 子 ; 非 酚 性 成 分 ; 慢 性 牙 周 炎 ; 基 质 金 属 蛋 白 酶 -9 中 图 分 类 号 :R276.8 文 献 标 志 码 :A 文 章 编 号 : X(2015) EfectofGalaChinensisExtractedSustained Release GelonChronicPeriodontitisinRats TANXiao-bing,XUJing-shu (DepartmentofEndodontics,1stPeople shospitalofyunnanprovince/afiliatedhospital ofkunminguniversityofscienceandtechnology,kunming650032,china) Abstract:GalaChinensisextracts(GCE)playanefectiveroleinpreventingthegrowthofputativeperiodonto pathicbacterias.however,theactivecomponentanditsmechanismstilremainunknown.non-phenolicingre dientsextractedfromgalachinensisaremadeintosustained-releasegelandappliedtothepocketofchronic periodontitisinsd ratsfor4weeks.probingdepth(pd),gingivalindex(pli)andsulcusbleedingindex (SBI)areusedtoaccestheperiodontalcondition.ELISAisusedtodetectthelevelsofmatrixmetaloproteinase -9(MMP-9)ingingivalcrevicularfluidinSDrats.TheresultsindicatethatPD,PLI,MBIandtheexpres sionofmmp-9ingceorperiogrouparemuchlesthanthoseinnegativegroup(p<0 05).Thereisnosig nificantdiferencebetweengceandperiogroups(p>0 05),exceptthatPDinGCEgroupismuchlesthan thatinperiogroup(p<0 05).Theseresultssuggestthatthenon-phenolicingredientsofGalaChinensiscan preventtheprogresofchronicperiodontitisbypreventingtheexpresionofmmp-9ingingivalcrevicularfluid insdrats. Keywords:GalaChinensis;non-phenolicingredient;chronicperiodontitis;matrixmetaloproteinase-9 收 稿 日 期 : 基 金 项 目 : 国 家 自 然 科 学 基 金 项 目 ( ), 云 南 省 应 用 基 础 研 究 计 划 项 目 (2011FB220). 作 者 简 介 : 谭 小 兵 (1974-), 男, 硕 士, 主 治 医 师. 主 要 研 究 方 向 : 根 面 龋 防 治. txb942005@163.com 通 信 作 者 : 徐 静 舒 (1963-), 女, 主 任 医 师, 教 授, 硕 士 生 导 师. 主 要 研 究 方 向 : 根 面 龋 防 治 及 口 腔 微 生 物. xjs @163.com

2 04 1 昆 明 理 工 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 第 40 卷 0 引 言 牙 周 炎 是 一 种 慢 性 炎 性 疾 病, 特 征 为 牙 周 致 病 菌 与 宿 主 炎 性 反 应 之 间 的 相 互 作 用, 导 致 牙 周 组 织 和 牙 槽 骨 附 着 破 坏, 最 终 发 生 牙 缺 失. 牙 周 炎 的 一 个 重 要 宿 主 因 素 就 是 基 质 金 属 蛋 白 酶 (MatrixMetalo proteinases,mmps), 主 导 牙 周 炎 时 牙 周 组 织 胶 原 和 胞 外 基 质 的 降 解, 尤 其 是 MMP-9 在 牙 周 组 织 破 坏 过 程 中 发 挥 着 重 要 作 用. 龈 沟 液 内 MMPs 的 表 达 可 作 为 牙 周 炎 诊 断 及 治 疗 预 后 的 一 个 重 要 生 物 指 标 [1,2]. 中 药 五 倍 子 (GalaChinesis) 提 取 物 可 明 显 抑 制 牙 周 可 疑 致 病 菌 生 长 调 节 细 菌 代 谢 [3], 但 其 活 性 成 分 及 机 制 尚 未 明 确. 我 们 的 前 期 研 究 发 现 五 倍 子 非 酚 性 成 分 对 变 形 链 球 菌 放 线 菌 的 抑 制 作 用 明 显 高 于 酚 性 成 分, 且 以 大 极 性 非 酚 性 充 分 作 用 最 为 显 著. 本 实 验 将 五 倍 子 大 极 性 非 酚 性 成 分 制 成 缓 释 凝 胶, 应 用 于 慢 性 牙 周 炎 动 物 模 型, 观 察 实 验 动 物 牙 周 指 标 及 龈 沟 液 内 MMP-9 表 达 变 化, 初 步 了 解 五 倍 子 抗 牙 周 炎 效 应 及 作 用 机 制, 为 临 床 研 究 提 供 实 验 依 据. 1 实 验 材 料 1 1 试 剂 和 仪 器 五 倍 子 ( 云 南 省 昭 通 地 区 );1- 甲 基 -2- 吡 咯 烷 酮 三 乙 酸 甘 油 酯 ( 天 津 市 化 学 试 剂 三 厂 ); 派 丽 奥 ( 盐 酸 米 诺 环 素 ) 软 膏 ( 日 本 新 时 代 株 式 会 社 );MMP-9ELISA 试 剂 盒 ( 上 海 赛 默 生 物 科 技 有 限 公 司 );No vapathtm 酶 标 仪 ( 美 国 BlO-RAD 公 司 );XW -80A 震 荡 仪 ( 上 海 医 科 大 学 仪 器 厂 ); 牙 龈 卟 啉 单 胞 菌 (Porphyromanusgingivalis,P g) 标 准 株 ATCC33277( 上 海 复 祥 生 物 科 技 公 司 ). 1 2 实 验 动 物 及 分 组 选 取 牙 体 牙 列 完 整 无 龋 病 或 牙 周 病 清 洁 级 5 周 龄 SD 大 鼠 30 只, 雌 雄 不 限 ( 昆 明 医 科 大 学 实 验 动 物 科 提 供, 实 验 动 物 合 格 证 号 :SYXK 滇 ), 随 机 分 为 3 组 : 阴 性 对 照 组 (N 组 ) 派 丽 奥 处 理 组 (P1 组 ) 五 倍 子 凝 胶 处 理 组 (P2 组 ), 每 组 各 10 只. 2 实 验 方 法 2 1 五 倍 子 非 酚 性 成 分 提 取 称 取 五 倍 子 2000g, 粉 碎,80% 丙 酮 水 冷 浸 提 3 次, 每 次 24h; 提 取 液 合 并 减 压, 浓 缩 得 丙 酮 总 提 取 物 (1914g); 以 1%NaOH 溶 解 丙 酮 总 提 取 物, 乙 酸 乙 酯 萃 取 3 次, 减 压 回 收 乙 酸 乙 酯 萃 取 物, 即 中 低 极 性 非 酚 性 成 分 (312g); 乙 酸 乙 酯 萃 取 后 的 碱 水 层 用 盐 酸 水 溶 液 调 中 性 后, 用 正 丁 醇 萃 取 3 次, 减 压 回 收 溶 剂 得 正 丁 醇 萃 取 物 即 酚 性 成 分 (748g); 萃 取 后 的 水 层 过 D101 大 孔 树 脂 洗 脱, 改 用 95% 乙 醇 洗 脱, 减 压 回 收 溶 剂 得 大 极 性 非 酚 性 成 分 (90g). 2 2 五 倍 子 酚 性 成 分 缓 释 凝 胶 的 制 备 参 照 祝 磊 等 方 法 [4], 将 1- 甲 基 -2- 吡 咯 烷 酮 和 三 乙 酸 甘 油 酯 按 7:3 配 成 混 合 溶 剂, 加 入 35% 聚 乳 酸 - 羟 基 乙 酸 共 聚 物, 完 全 溶 解 后 加 入 五 倍 子 大 极 性 非 酚 性 成 分 溶 剂, 搅 拌 均 匀, 漩 涡 震 荡, 常 温 避 光, 磁 力 搅 拌 机 缓 慢 搅 拌 5d, 制 备 五 倍 子 凝 胶 ( 终 浓 度 40mg/mL), 静 置 24h,4 避 光 保 存. 2 3 实 验 性 慢 性 牙 周 炎 动 物 模 型 的 建 立 [5] 参 照 Nakamura 等 方 法, 肌 肉 注 射 200mg/kg 盐 酸 氯 胺 酮 麻 醉 大 鼠 后, 丝 线 结 扎 双 侧 上 颌 第 二 磨 牙 牙 颈 部, 结 扎 后 给 予 10% 糖 水 以 代 替 饮 水. 氨 苄 青 霉 素 ( 每 天 20mg) 磨 碎 后 放 入 饮 水 中 口 服 共 3d,3d 后 每 只 大 鼠 管 饲 P g0 5mL( CFU/mL), 每 48h 追 加 一 次, 共 管 饲 3 次. 2 4 药 物 处 理 所 有 动 物 局 麻 ( 肌 注 200mg/kg 盐 酸 氯 胺 酮 ), 清 洁 牙 表 面 软 垢, 隔 湿 将 药 物 ( 五 倍 子 非 酚 性 成 分 缓 释 凝 胶 ) 注 入 牙 周 袋 内 ( 以 溢 出 为 止 ), 每 周 1 次, 连 续 4 周, 每 次 上 药 前 均 仔 细 检 查 各 临 床 指 标 (PD GI SBI) 并 记 录.

3 第 2 期 谭 小 兵, 徐 静 舒 : 五 倍 子 非 酚 性 成 分 缓 释 凝 胶 对 大 鼠 慢 性 牙 周 炎 抑 制 作 用 的 实 验 研 究 慢 性 牙 周 炎 指 标 评 价 从 大 鼠 管 饲 P g 结 束 后 开 始, 每 周 对 大 鼠 口 腔 进 行 检 查 并 记 录 两 侧 上 颌 第 二 磨 牙 牙 周 指 数, 包 括 探 诊 深 度 (Probingdepth,PD) 牙 龈 指 数 (Gingivalindex,GI) 和 龈 沟 出 血 指 数 (Sulcusbleedingindex,SBI); 药 物 处 理 后 第 1 周 第 2 周 和 第 4 周 分 别 记 录 各 牙 周 指 标, 取 平 均 值. 具 体 方 法 :(1)PD:CPI 牙 周 探 针 沿 牙 齿 长 轴 各 个 面 进 行 检 查, 记 录 颊 舌 面 近 中 正 中 远 中 共 六 个 点 的 探 诊 深 度, 取 平 均 值 为 该 牙 检 查 结 果, 各 组 再 取 平 均 值 为 该 组 结 果 ;(2) 使 用 CPI 牙 周 探 针, 结 合 视 诊 和 探 针, 检 查 牙 龈 唇 侧 近 中 正 中 远 中 及 舌 侧, 取 平 均 值. 探 针 沿 龈 缘 轻 轻 滑 动, 观 察 出 血 情 况,0 为 正 常 牙 龈,1 为 牙 龈 略 有 水 肿, 探 诊 不 出 血,2 为 龈 缘 有 探 诊 出 血, 若 有 自 发 出 血 倾 向 或 溃 疡 形 成 则 记 为 3;(3)SBI: 探 诊 无 出 血 为 0, 仅 在 探 诊 处 点 状 出 血 为 1, 出 血 在 龈 沟 内 成 线 状 为 2, 出 血 沿 龈 缘 扩 展 或 溢 出 龈 缘 为 龈 沟 液 提 取 及 龈 沟 液 内 MMP-9 含 量 检 测 所 有 大 鼠 治 疗 前 及 治 疗 后 第 1 周 第 2 周 和 第 4 周 分 别 提 取 龈 沟 液 检 测 MMP-9 浓 度. 龈 沟 液 提 取 方 法 : 大 鼠 仰 卧 位 固 定, 吹 干 清 洁 牙 面,20 # 吸 潮 纸 尖 插 入 上 颌 第 二 磨 牙 龈 下, 遇 轻 微 阻 力 即 停 止,60s 后 取 出, 将 浸 润 部 分 剪 下 置 入 已 标 记 EP 管 内, 加 入 100μL 缓 冲 液 (0 1M Tris-HCL,pH= 8 0), 震 荡 1h,4 离 心 10min, 取 上 清 液,-70 保 存 备 用. 如 发 现 纸 尖 上 有 血 污 染, 则 弃 之 重 取. 冰 浴 解 冻 标 本, 严 格 按 照 MMP-9 的 ELISA 试 剂 盒 说 明 书 进 行 操 作, 酶 标 仪 450nm 记 录 OD 值, 建 立 标 准 曲 线, 确 定 检 测 样 本 MMP-9 浓 度. 2 7 统 计 学 处 理 计 量 资 料 以 均 数 ± 标 准 差 (x±s) 表 示, 符 合 正 态 分 布 及 方 差 齐 性 检 验 的 资 料 采 用 单 因 素 方 差 分 析 进 行 组 间 比 较, 采 用 重 复 测 量 资 料 的 方 差 分 析 进 行 组 内 比 较 ; 不 符 合 正 态 分 布 方 差 不 齐 的 资 料 采 用 秩 和 检 验.SPSS16 0 进 行 处 理,Ρ<0 05 为 差 异 有 统 计 学 意 义. 3 结 果 3 1 药 物 处 理 后 大 鼠 牙 周 炎 指 数 变 化 情 况 药 物 处 理 前 三 组 大 鼠 牙 周 炎 临 床 指 数 PD GI 和 SBI 间 无 显 著 性 差 异 (P>0 05), 五 倍 子 或 派 丽 奥 处 理 不 同 后,P1 P2 组 各 项 指 数 持 续 性 降 低 ( 与 N 组 相 比,P<0 05),P1 P2 组 各 点 GI SBI 值 间 无 显 著 性 差 异 (P>0 05), 而 PD 值 有 显 著 性 差 异 (P<0 05)( 见 表 1~ 表 3). 表 1 三 组 大 鼠 药 物 处 理 后 不 同 探 诊 深 度 变 化 Tab 1 Probingdepth(PD)of3groupsoverdiferenttimeperiodsfolowingtreatments(x±s,n=10) N 组 3 36 ± ±0 16 a 3 94 ±0 29 a 4 26 ±0 23 a P1 组 3 42 ± ±0 32 ab 2 36 ±0 28 ab 2 21 ±0 32 ab P2 组 3 50 ± ±0 23 abc 2 18 ±0 19 abc 1 89 ±0 28 abc 注 :(a) 与 同 组 前 一 点 比 较,P<0 05;(b) 与 N 组 比 较,P<0 05;(c) 与 P1 组 比 较,P<0 05. 表 2 三 组 大 鼠 药 物 处 理 后 不 同 牙 龈 指 数 变 化 Tab 2 Gingivalindex(GI)of3groupsoverdiferenttimeperiodsfolowingtreatments(x±s,n=10) N 组 2 83 ± ± ± ±0 33 P1 组 2 75 ± ±0 25 ab 1 89 ±0 26 ab 1 29 ±0 25 ab P2 组 2 85 ± ±0 26 abc 1 87 ±0 29 abc 1 32 ±0 19 abc 注 :(a) 与 同 组 前 一 点 比 较,P<0 05;(b) 与 N 组 比 较,P<0 05;(c) 与 P1 组 比 较 P>0 05.

4 06 1 昆 明 理 工 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 第 40 卷 表 3 三 组 大 鼠 药 物 处 理 后 不 同 龈 沟 出 血 指 数 变 化 Tab 3 Sulcusbleedingindex(SBI)of3groupsoverdiferenttimeperiodsfolowingtreatments(x±s,n=10) N 组 2 73 ± ± ± ±0 31 P1 组 2 84 ± ±0 23 ab 1 79 ±0 36 ab 1 28 ±0 43 ab P2 组 2 76 ± ±0 29 abc 1 68 ±0 43 abc 1 31 ±0 41 abc 注 :(a) 与 同 组 前 一 点 比 较,P<0 05;(b) 与 N 组 比 较,P<0 05;(c) 与 P1 组 比 较 P> 药 物 处 理 后 大 鼠 龈 沟 液 内 MMP-9 水 平 表 达 变 化 药 物 处 理 前 三 组 大 鼠 龈 沟 液 MMP-9 水 平 无 显 著 性 差 异 (P>0 05), 五 倍 子 或 派 丽 奥 处 理 1 周 2 周 及 4 周 后,P1 和 P2 组 龈 沟 液 MMP-9 表 达 明 显 减 低 ( 与 N 组 相 比,P<0 05),P1 与 P2 组 各 个 点 龈 沟 液 MMP-9 水 平 无 显 著 性 差 异 (P>0 05)( 见 表 4). 表 4 三 组 大 鼠 药 物 处 理 后 不 同 龈 沟 液 MMP-9 水 平 Tab 4 ExpresionlevelsofMMP-9in3groupsoverdiferenttimeperiodsfolowingtreatments(x±s,n=10) N 组 0 25 ± ±0 12 a 0 63 ±0 29 a 0 89 ±0 13 a P1 组 0 25 ± ±0 19 b 0 28 ±0 16 b 0 30 ±0 17 b P2 组 0 26 ± ±0 16 b 0 30 ±0 14 b 0 31 ±0 12 b 注 :(a) 与 同 组 前 一 点 比 较,P<0 05;(b) 与 N 组 比 较,P<0 05;(c) 与 P1 组 比 较 P> 讨 论 普 遍 认 为 牙 菌 斑 是 牙 周 炎 发 生 的 主 要 危 险 因 素, 牙 周 炎 的 进 展 包 括 细 胞 通 路 间 的 相 互 作 用, 由 促 炎 性 介 质 如 细 胞 因 子 生 长 因 子 活 性 氧 MMPs 及 其 抑 制 剂 组 成. 牙 周 炎 时 牙 周 组 织 胶 原 降 解 由 MMPs 的 亚 群 : 胶 原 酶 引 起, 不 同 类 型 的 正 常 和 炎 性 牙 龈 细 胞 均 可 释 放 MMPs.MMPs 是 一 组 钙 / 锌 依 赖 性 肽 链 内 切 酶, 参 与 细 胞 外 基 质 降 解 组 织 重 建 及 肿 瘤 生 长 和 入 侵 过 程 [6].MMPs 由 多 种 宿 主 细 胞 分 泌 或 释 放, 包 括 多 形 核 白 细 胞 巨 噬 细 胞 成 纤 维 细 胞 及 上 皮 和 内 皮 细 胞 [7].MMPs 的 表 达 由 生 长 因 子 细 胞 因 子 及 自 由 基 调 控, 而 活 性 依 赖 于 组 织 内 源 性 金 属 蛋 白 酶 抑 制 剂 水 平 [8].MMP-9 属 于 Ⅳ 型 胶 原 酶, 又 称 明 胶 酶 B, 主 要 由 PMLs 分 泌, 降 解 牙 周 组 织 及 基 底 膜 重 建 过 程 中 的 Ⅳ 型 胶 原 [9]. 多 项 研 究 证 实 牙 周 炎 使 患 者 龈 沟 液 内 MMP-9 表 达 水 平 明 显 升 高 [10,11], 因 此 龈 沟 液 内 MMP-9 水 平 可 作 为 牙 周 炎 的 一 个 指 标, 提 示 炎 症 状 态 牙 周 破 坏 情 况 及 其 对 牙 周 治 疗 的 反 应 情 况, 也 可 考 虑 靶 向 治 疗 时 以 降 低 MMP-9 的 表 达 来 抑 制 牙 周 炎 进 展. 天 然 植 物 药 物 来 源 丰 富 不 易 产 生 耐 药 性 副 作 用 少, 近 年 来 在 口 腔 疾 病 预 防 中 得 到 广 泛 应 用. 大 量 研 究 证 实 五 倍 子 富 含 鞣 酸, 能 有 效 抑 制 变 形 链 球 菌 粘 性 放 线 链 球 菌 的 生 长 和 产 酸 [11,12] ; 五 倍 子 提 取 物 可 明 显 抑 制 牙 周 常 见 可 疑 致 病 菌 牙 龈 卟 啉 单 胞 菌 伴 放 线 放 线 杆 菌 等 生 长, 调 节 细 菌 代 谢 [2]. 本 实 验 采 用 丝 线 结 扎 结 合 细 菌 接 种 法 建 立 慢 性 牙 周 炎 动 物 模 型, 所 有 大 鼠 均 出 现 典 型 牙 周 炎 表 现, 实 验 牙 牙 周 袋 深 度 均 大 于 3mm 且 伴 出 血, 各 组 间 牙 周 指 数 及 MMP-9 水 平 无 显 著 性 差 异 (P>0 05). 药 物 处 理 4 周 后, 治 疗 组 (P1 和 P2 组 )PD PLI MBI 均 有 明 显 降 低 (P<0 05); 其 中 PD 减 少 程 度 以 五 倍 子 组 较 为 显 著 (P<0 05), 是 因 为 五 倍 子 缓 释 凝 胶 主 要 由 高 分 子 材 料 PLGA 和 五 倍 子 冻 干 粉 组 成,PLGA 遇 水 后 形 成 骨 性 支 架, 五 倍 子 中 鞣 酸 与 龈 沟 液 及 唾 液 形 成 蛋 白 质 沉 淀 物, 为 牙 周 膜 再 生 提 供 有 利 空 间. 我 们 还 发 现 五 倍 子 组 和 派 丽 奥 组 龈 沟 液 MMP-9 水 平 均 明 显 降 低, 说 明 五 倍 子 大 极 性 非 酚 性 成 分 对 SD 大 鼠 分 泌 MMP-9 有 抑 制 效 应. 5 结 论 慢 性 牙 周 炎 动 物 经 五 倍 子 大 极 性 非 酚 性 成 分 提 取 物 制 成 的 缓 释 凝 胶 处 理 4 周 后, 其 牙 周 炎 症 状 明 显

5 第 2 期 谭 小 兵, 徐 静 舒 : 五 倍 子 非 酚 性 成 分 缓 释 凝 胶 对 大 鼠 慢 性 牙 周 炎 抑 制 作 用 的 实 验 研 究 107 改 善, 牙 周 指 数 PD PLI 和 MBI 明 显 降 低, 效 果 与 派 丽 奥 凝 胶 相 当, 尤 其 牙 周 袋 探 针 深 度 减 少 更 为 明 显, 同 时 能 抑 制 动 物 龈 沟 液 内 MMP-9 的 表 达, 有 效 降 低 细 胞 外 基 质 和 胶 原 降 解, 起 到 抑 制 牙 周 炎 进 展 的 作 用. 参 考 文 献 : [1]KimKA,ChungSB,HawngEY,etal.Corelationofexpresionandactivityofmatrixmetaloproteinase-9and-2inhu mangingivalcelsofperiodontitispatients[j].journalofperiodontal&implantscience,2013,43(1): [2] KinaneDF.Regulatorsoftisuedestructionandhomeostasisasdiagnosticaidsinperiodontology[J].Periodontology2000, 2000,24(1): [3] 朱 秀 丽, 陈 强, 唐 荣 银, 等. 五 倍 子 对 5 种 常 见 牙 周 细 菌 抑 制 作 用 的 体 外 研 究 [J]. 牙 体 牙 髓 牙 周 病 学 杂 志,2002,12 (5): [4] 祝 磊, 唐 荣 银, 张 海 鸥, 等. 五 倍 子 牙 周 缓 释 凝 胶 对 LPS 介 导 HPDLFs 分 泌 MMP -3 的 影 响 [J]. 牙 体 牙 髓 牙 周 病 学 杂 志,2009,19(5): [5] Nakamura-KiyamaM,OnoK,MasudaW,etal.Changesofsalivaryfunctionsinexperimentalperiodontitismodelrats[J]. Archivesoforalbiology,2014,59(2): [6] MaesoG,BasconesA.Levelsofmetaloproteinase-2and-9andtisueinhibitorofmatrixmetaloproteinase-1ingingival crevicularfluidofpatientswithperiodontitis,gingivitis,andhealthygingival[j].quintesenceinternational,2007,38(3): [7] SapnaG,GokulS,Bagri ManjrekarK.Matrixmetaloproteinasesandperiodontaldiseases[J].Oraldiseases,2014,20 (6): [8]El AwadyAR,LappCA,GamalAY,etal.Humanperiodontalligamentfibroblastresponsestocompresioninchronicperi odontitis[j].journalofclinicalperiodontology,2013,40(7): [9]NisinenL,Ka ha rivm.matrixmetaloproteinasesininflammation[j].biochimicaetbiophysicaacta(bba)-general Subjects,2014,1840(8): [10]PanY,LiD,CaiQ,etal.MMP C>Tcontributestoperiodontitissusceptibility[J].Journalofclinicalperiodon tology,2013,40(2): [11] AhmedGM,El-BazAA,Hashem AAR,etal.Expresionlevelsofmatrixmetaloproteinase-9andgram-negative bacteriainsymptomaticandasymptomaticperiapicallesions[j].journalofendodontics,2013,39(4): [12] ChengL,ExterkateRA,ZhouX,etal.EfectofGalachinensisongrowthandmetabolism ofmicrocosm biofilms[j]. Cariesresearch,2010,45(2): [13] XieQ,LiJ,ZhouX.AnticariesefectofcompoundsextractedfromGalachinensisinamultispeciesbiofilmmodel[J].Oral microbiologyandimmunology,2008,23(6):

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