704 综 述 凝 集 素 结 构 域 本 文 主 要 介 绍 了 β-gal 的 来 源 生 化 特 性 在 植 物 生 长 发 育 中 的 功 能 及 主 要 应 用 同 时, 我 们 研 究 组 从 白 菜 雄 配 子 减 数 分 裂 的 胞 质 分 裂 突 变 体 (male meiotic

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1 中 国 细 胞 生 物 学 学 报 Chinese Journal of Cell Biology 2014, 36(5): DOI: /cjcb 植 物 β- 半 乳 糖 苷 酶 田 爱 梅 1,2 刘 金 龙 2 曹 家 树 2* ( 1 西 安 文 理 学 院 生 物 技 术 学 院, 西 安 ; 2 浙 江 大 学 蔬 菜 研 究 所, 杭 州 ) 摘 要 β- 半 乳 糖 苷 酶 是 一 个 与 细 胞 壁 降 解 相 关 的 酶, 广 泛 分 布 于 植 物 组 织 中, 参 与 一 系 列 的 生 理 生 化 过 程, 如 植 物 的 花 粉 发 育 果 实 成 熟 及 生 长 过 程 中 多 糖 的 裂 解 目 前, 已 从 多 种 植 物 中 分 离 到 β- 半 乳 糖 苷 酶 基 因 β- 半 乳 糖 苷 酶 基 因 属 于 多 基 因 家 族, 随 着 研 究 的 深 入, 其 不 同 水 平 的 转 录 本 在 不 同 植 物 的 不 同 组 织 中 被 发 现 但 目 前 β- 半 乳 糖 苷 酶 在 植 物 发 育 中 确 切 的 作 用 机 制 尚 不 明 确 现 介 绍 目 前 这 一 领 域 内 细 胞 与 分 子 生 物 学 方 面 的 研 究 进 展, 并 结 合 所 在 课 题 组 的 研 究 结 果 进 行 相 关 探 讨, 为 进 一 步 研 究 β- 半 乳 糖 苷 酶 在 植 物 中 的 作 用 机 制 提 供 新 的 线 索 关 键 词 β- 半 乳 糖 苷 酶 ; 基 因 表 达 ; 生 物 学 功 能 Beta Galactosidase in Plants Tian Aimei 1,2, Liu Jinlong 2, Cao Jiashu 2 * ( 1 College of Biological Technology, Xi an University, Xi an , China; 2 Institute of Vegetable Science, Zhejiang University, Hangzhou , China) Abstract Beta galactosidase is an enzyme associated with cell wall degradation. It is widely distributed in plant tissues, taking part in a series of physiological and biochemical processes. According to recent studies, beta galactosidase genes have already been isolated from a number of plant species. Beta galactosidase genes belong to a multigene family. Increasing studies have shown that different members of beta galactosidase gene family exhibit a wide range of expression profiles throughout plants development. However, their precise biological function in vivo still remains controversial. In this review, we presented recent information on cell and molecular biology referring to the results of our investigation. This study may also facilitate us to fully understand their mechanism of action in plant. Key words beta galactosidase; gene expression; biological function 引 言 β- 半 乳 糖 苷 酶 (β-galactosidase, β-gal) 是 一 个 与 细 胞 壁 降 解 相 关 的 酶, 能 够 从 β- 半 乳 聚 糖 支 链 非 还 原 末 端 切 除 β- 半 乳 糖 残 基, 既 能 降 解 果 胶 和 半 纤 维 素, 也 能 降 解 糖 蛋 白 和 糖 脂, 使 细 胞 壁 中 一 些 组 分 变 得 不 稳 定, 促 使 细 胞 壁 膨 胀 进 而 软 化, 为 植 物 的 快 速 生 长 发 育 释 放 储 存 的 能 量 β- 半 乳 糖 苷 酶 还 参 与 衰 老 过 程 中 细 胞 壁 的 降 解, 如 多 糖 糖 蛋 白 和 半 乳 糖 脂 [1-3] 的 水 解, 释 放 游 离 半 乳 糖 在 种 子 幼 苗 花 粉 和 果 实 等 植 物 生 长 发 育 各 阶 段 均 可 以 检 测 出 β- 半 乳 糖 苷 酶 的 活 性 和 基 因 的 表 达 β-gal 基 因 属 于 多 基 因 家 族 植 物 β-gal 基 因 分 为 两 个 类 群, 其 中 类 群 I 的 氨 基 酸 序 列 为 712~731 个, C 端 不 含 凝 集 素 结 构 域 (lectinlike domain); 类 群 II 氨 基 酸 序 列 为 832~888 个, C 端 含 收 稿 日 期 : 接 受 日 期 : 国 家 自 然 科 学 基 金 ( 批 准 号 : ) 和 西 安 市 科 技 计 划 项 目 ( 批 准 号 : CX12189WL06) 资 助 的 课 题 * 通 讯 作 者 Tel: , jshcao@zju.edu.cn Received: December 26, 2013 Accepted: February 10, 2014 This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (Grant No ) and Xi an Science and Technology Project (Grant No.CX12189WL06) *Corresponding author. Tel: , jshcao@zju.edu.cn 网 络 出 版 时 间 : :35 URL:

2 704 综 述 凝 集 素 结 构 域 本 文 主 要 介 绍 了 β-gal 的 来 源 生 化 特 性 在 植 物 生 长 发 育 中 的 功 能 及 主 要 应 用 同 时, 我 们 研 究 组 从 白 菜 雄 配 子 减 数 分 裂 的 胞 质 分 裂 突 变 体 (male meiotic cytokinesis, mmc) 与 其 野 生 型 植 株 花 蕾 差 异 表 达 的 基 因 中, 分 离 到 一 个 β-gal 基 因 [4], 这 一 研 究 结 果 将 为 研 究 β-gal 在 生 殖 发 育 中 的 功 能 提 供 新 的 思 路 1 β-gal 的 来 源 β- 半 乳 糖 苷 酶 的 天 然 来 源 十 分 丰 富, 包 括 多 种 微 生 物 植 物 和 动 物 β-gal 的 动 物 来 源 主 要 有 肠 脑 等 器 官 和 皮 肤 组 织 在 微 生 物 中, β-gal 在 细 菌 真 菌 和 酵 母 中 均 有 分 布 真 菌 中 的 β-gal 是 一 类 热 稳 定 的 酶, 但 容 易 受 到 半 乳 糖 等 产 物 的 抑 制 酵 母 中 的 β-gal 因 其 可 用 于 生 产 低 乳 糖 的 牛 奶 而 在 食 品 领 域 备 受 关 注 [5] 植 物 中 的 β-gal 与 细 菌 相 比 有 很 大 的 差 异 细 菌 的 β-gal 通 常 是 四 聚 体 或 者 单 体, 并 且 较 植 物 常 为 二 聚 体 的 酶 分 子 量 更 大 [6] β-gal 广 泛 分 布 于 植 物 组 织 中, 参 与 到 一 系 列 的 生 理 生 化 过 程 中, 如 植 物 生 长 果 实 成 熟 和 乳 糖 的 裂 解 研 究 发 现, β-gal 在 果 实 发 育 和 成 熟 过 程 中 具 有 重 要 的 作 用 [7-8] 在 果 实 成 熟 过 程 中, β-gal 可 以 降 低 细 胞 壁 多 糖 及 果 胶 [9], 在 番 茄 柿 子 木 瓜 和 草 莓 的 果 实 成 熟 过 程 中 均 检 测 到 β-gal 的 活 性 [10-11] 2 β-gal 的 特 性 β- 半 乳 糖 苷 酶 可 以 裂 解 聚 合 物 寡 糖 和 次 生 代 谢 产 物 中 的 半 乳 糖 残 基 β-gal 能 在 一 个 相 对 广 泛 的 ph 环 境 中 工 作, 在 真 菌 中 ph2.5~5.4 酵 母 和 细 菌 中 ph6.0~7.0 所 有 这 些 β-gal 可 分 为 两 类, 其 中 一 类 为 糖 苷 水 解 酶 II 家 族, 这 一 类 主 要 在 微 生 物 中 发 现 ; 另 一 类 是 糖 苷 水 解 酶 35 家 族, 这 一 类 大 约 70% 的 成 员 来 源 于 植 物 也 有 报 告 称, 在 植 物 中 该 酶 的 最 适 ph 在 酸 性 范 围, 而 在 细 菌 中 该 酶 更 趋 向 于 中 性 环 境 Dwevedi 和 Kayastha 从 豌 豆 中 分 离 得 到 一 个 经 典 的 β-gal(psβ-gal) [3] ph5.0 时, 能 够 从 成 熟 种 子 的 液 泡 中 分 离 到 Psβ-Gal, 该 酶 能 裂 解 豌 豆 种 子 中 的 木 葡 聚 糖, 并 且 在 幼 苗 生 长 和 发 育 时 期 能 改 变 细 胞 壁 结 构 在 高 等 植 物 中, β-gal 是 唯 一 可 以 内 切 方 式 切 割 β-1,4- 半 乳 糖 体 的 酶, 进 而 裂 解 来 自 细 胞 壁 多 糖 的 半 乳 糖 残 基 [12-13] 它 可 以 水 解 β-d- 半 乳 糖 苷 末 端 非 还 原 性 的 β-d- 半 乳 糖 残 基, 从 而 降 低 成 熟 果 实 中 半 乳 糖 残 基 的 含 量 [14] 较 多 的 研 究 表 明, β-gal 不 仅 可 以 为 快 速 生 长 释 放 储 存 的 能 量, 还 能 够 在 正 常 的 多 糖 代 谢 细 胞 壁 组 分 代 谢 以 及 衰 老 过 程 中 细 胞 壁 降 解 糖 蛋 白 以 及 半 乳 糖 脂 末 端 半 乳 糖 残 基 的 水 解, 释 放 自 由 的 半 乳 糖 另 外, 许 多 β-gal 可 以 在 体 外 适 宜 的 热 力 学 条 件 下, 通 过 转 糖 基 作 用 和 反 向 水 解 作 用 发 挥 其 特 异 的 生 物 活 性 事 实 上, 在 果 实 成 熟 过 程 中, 细 胞 壁 组 分 的 显 著 变 化 之 一 是 在 β-gal 作 用 下 与 细 胞 壁 结 合 的 半 乳 糖 残 基 的 减 少 这 种 现 象 在 多 种 果 实 中, 如 巴 特 利 特 梨 日 本 梨 苹 果 番 茄 等 得 到 证 实 [12-14] 3 β-gal 的 在 植 物 生 长 发 育 中 的 功 能 3.1 β-gal 在 花 粉 发 育 中 的 功 能 植 物 花 粉 壁 由 花 粉 内 壁 和 外 壁 组 成, 在 植 物 花 粉 发 育 过 程 中 起 着 重 要 作 用 花 粉 壁 的 发 育 正 常 与 否 受 花 药 发 育 和 减 数 分 裂 等 多 方 面 因 素 的 影 响 由 孢 粉 素 构 成 的 花 粉 外 壁 性 质 稳 定, 能 够 有 效 保 护 花 粉 而 免 受 外 界 环 境 的 影 响 孢 粉 素 等 花 粉 壁 成 分 的 合 成 与 分 解 过 程 极 其 复 杂, 其 代 谢 过 程 是 众 多 基 因 共 同 作 用 的 结 果 如 阿 拉 伯 半 乳 糖 和 多 聚 半 乳 糖 醛 酸 酶 抑 制 蛋 白 等 基 因 是 参 与 花 粉 壁 合 成 的 重 要 基 因, 而 β- 半 乳 糖 苷 酶 等 基 因 是 参 与 花 粉 壁 分 解 的 重 要 基 因, 例 如 果 胶 甲 酯 酶 基 因 (pectin methylesterase, PME) 等 [12-14] 因 此, 充 分 认 识 花 粉 壁 代 谢 过 程 参 与 的 基 因 有 助 于 对 其 进 行 精 确 调 控 在 拟 南 芥 中, Atβ-Gal7 Atβ-Gal15 Osβ-Gal5 Osβ-Gal12 Oβ-Gal14 和 Osβ-Gal15 能 在 小 孢 子 发 育 早 期 和 花 粉 发 育 过 程 中 发 挥 功 能 [15], 聚 类 分 析 发 现 这 6 个 基 因 分 布 在 同 一 亚 家 族 中 Atβ-Gal11 Atβ- Gal13 Osβ-Gal10 和 Osβ-Gal10 在 成 熟 花 粉 中 表 达 量 最 高 在 烟 草 花 粉 中 也 检 测 到 有 β-gal 的 表 达, Northern 杂 交 显 示 该 基 因 在 发 育 中 的 花 药 和 成 熟 花 粉 粒 中 特 异 表 达, 在 减 数 分 裂 时 其 表 达 量 较 低, 但 在 有 丝 分 裂 后 的 小 孢 子 发 育 后 期 表 达 量 急 剧 上 升, 表 明 其 在 花 粉 管 生 长 过 程 也 能 发 挥 作 用 [16] 在 白 菜 (Brassica campestris) 中, 通 过 细 胞 化 学 染 色 检 测 到 花 药 中 含 有 β-gal 活 性 缺 失 突 变 体 gal(galactosidase) gal 是 从 白 菜 花 粉 中 分 离 得 到 的 自 然 发 生 的 雄 配 子 体 转 录 分 子 标 记 在 基 因 杂 合 状 态 下, 蓝 色 不 透 明 的 正 常 花 粉 粒 与 黄 色 透 明 的 非 正 常 花 粉 粒 发 生 1:1 分 离, 在 隐 性 纯 合 状 态 时, 所 有 的 花 粉 粒 均 表 现 出 突

3 田 爱 梅 等 : 植 物 β- 半 乳 糖 苷 酶 705 变 体 的 性 状, 这 符 合 孟 德 尔 自 由 组 合 定 律 与 野 生 型 花 粉 粒 相 比, 携 带 gal 基 因 的 花 粉 粒 受 精 时 竞 争 能 力 要 差, 回 交 和 正 反 交 结 果 表 明, 这 种 缺 陷 是 由 隐 性 单 基 因 gal 控 制 的 [17] 3.2 β-gal 在 果 实 成 熟 中 的 功 能 Pressey [18] 最 先 从 番 茄 中 纯 化 出 3 种 β-gal(tbgs), 并 且 证 实 只 有 β-galii 具 有 外 切 半 乳 聚 糖 酶 活 性 随 后, Smith 等 [19] 克 隆 到 了 编 码 β-galii 的 cdna 序 列, 并 且 得 到 了 另 外 6 个 与 它 具 有 氨 基 酸 同 源 性 的 cdna 序 列 Yoshioka 等 [20] 从 0 C 贮 存 了 5 个 月 的 苹 果 细 胞 壁 提 取 物 中 检 测 到 了 4 种 β-gal 活 性 (GA-I~IV)GA-I 活 性 在 采 收 时 检 测 不 到, 随 着 果 实 的 成 熟, 酶 的 活 性 增 加, 其 他 的 酶 亚 型 在 采 收 时 活 性 最 高, 随 着 果 实 在 贮 藏 中 的 软 化 而 酶 活 性 下 降 Smith 等 [12,14] 对 番 茄 7 个 β-gal 基 因 的 研 究 表 明, 它 们 在 果 实 的 发 育 过 程 中 有 着 复 杂 的 表 达 模 式 陈 昆 松 等 [21] 对 猕 猴 桃 的 分 析 发 现, 在 果 实 采 收 时, β-gal 基 因 的 mrna 含 量 最 高, 随 果 实 的 衰 老 呈 下 降 趋 势 乙 烯 处 理 可 以 诱 导 β-gal 基 因 的 表 达, 但 在 乙 烯 跃 变 期 该 β-gal 基 因 的 表 达 量 没 有 显 著 变 化 因 此, β-gal 被 认 为 可 能 在 果 实 后 熟 软 化 的 初 期 阶 段 起 作 用 [19] Sumathi 等 [22] 对 阳 桃 的 研 究 表 明, 在 果 实 成 熟 过 程, β-gali 可 以 溶 解 和 降 解 结 构 完 整 的 果 胶, 从 而 改 变 碱 性 水 溶 性 半 纤 维 素 的 结 构, 使 果 实 硬 度 下 降 目 前, 已 经 在 番 茄 苹 果 梨 草 莓 等 较 多 果 实 中 证 实 了 β-gal 和 XTH( 木 葡 聚 糖 内 糖 基 转 移 酶 / 水 解 酶 ) 与 果 实 的 成 熟 软 化 密 切 相 关 人 们 还 相 继 从 草 莓 脐 橙 猕 猴 桃 桃 番 木 瓜 香 蕉 和 枣 等 果 实 中 克 隆 出 与 软 化 相 关 的 β-gal 基 因 并 进 行 了 相 关 的 研 究 [23] 3.3 其 他 功 能 β-gal 活 性 在 萌 发 的 旱 金 莲 (Tropaeolum majus L.) 子 叶 中 也 有 报 道, 并 且 研 究 发 现 该 酶 能 参 与 体 内 贮 藏 的 木 葡 聚 糖 的 裂 解 [24] 从 鹰 嘴 豆 (Cicer arietinum) 中 分 离 和 纯 化 的 β-gal 表 现 出 较 高 的 酶 活 性, 并 且 可 用 于 分 解 牛 奶 中 的 乳 糖 在 豇 豆 萝 卜 绿 豆 大 麦 胡 萝 卜 水 稻 茎 羽 扇 豆 [25] 和 云 豆 也 分 离 得 到 β-gal [26-29] 此 外, 在 苹 果 芒 果 日 本 梨 和 鳄 梨 发 现 多 种 β-gal 的 同 工 酶 [23-26] 4 β-gal 的 应 用 4.1 β-gal 在 工 业 中 的 应 用 酶 是 在 生 物 体 内 具 有 多 种 功 能 的 生 物 催 化 剂, 由 于 酶 成 本 是 决 定 反 应 过 程 经 济 性 最 关 键 的 因 素, 所 以 无 论 是 基 础 研 究 领 域 还 是 工 业 应 用 领 域, β-gal 都 极 具 发 展 潜 力 如 在 食 品 工 业 中 β-gal 可 将 乳 糖 裂 解 为 其 基 本 成 分 的 冷 激 型 β- 半 乳 糖 乳 制 品 中 乳 清 是 一 种 含 有 高 有 机 物 的 污 染 产 物, 其 裂 解 后 可 以 作 为 牲 畜 的 食 物 来 源, 也 可 用 于 工 业 上 开 发 新 的 不 含 乳 糖 产 品 干 酪 乳 清 是 另 一 高 度 污 染 物, 其 含 有 0.7%(w/v) 的 蛋 白 5%(w/v) 的 乳 糖 及 93%(w/v) 的 水 分 和 盐 在 用 β-gal 裂 解 乳 糖 后, 该 有 机 污 染 物 可 以 作 为 廉 价 易 得 的 微 生 物 食 物 [30] β-gal 可 将 半 乳 糖 苷 催 化 裂 解 为 单 糖, 利 用 β-gal 裂 解 乳 糖 的 作 用 可 以 为 乳 糖 过 敏 人 群 提 供 低 乳 糖 牛 奶 和 相 关 奶 制 品 [31] β-gal 可 直 接 运 用 于 干 酪 乳 清 生 成 高 甜 度 的 可 作 为 冰 激 凌 和 甜 点 等 添 加 剂 的 糖 浆 剂 [32] 因 而, β-gal 在 食 品 工 业 中 被 广 泛 用 于 提 高 乳 制 品 的 糖 度 稳 定 性 风 味 和 消 化 性 4.2 在 医 学 中 的 应 用 据 估 计, 全 球 大 约 75% 的 成 年 人 在 其 成 年 后 乳 糖 酶 活 性 有 所 降 低 而 超 过 70% 的 世 界 人 口 因 小 肠 黏 膜 缺 乏 β-gal 活 性 而 患 乳 糖 不 耐 症, 进 而 导 致 不 能 消 化 乳 糖 和 含 有 乳 糖 的 产 品 [33] 此 外, HIV 感 染 的 病 人 也 已 被 证 实 β-gal 活 性 低 乳 糖 吸 收 障 碍 可 能 是 AIDS 肠 道 表 现 出 的 症 状 之 一 在 医 学 上, 一 种 经 济 适 用 的 乳 糖 裂 解 法 可 以 解 决 乳 糖 不 耐 症 病 人 出 现 的 诸 多 问 题, 如 利 用 β-gal 使 乳 糖 酶 促 裂 解 生 成 葡 萄 糖 和 半 乳 糖 [34] 4.3 在 分 析 检 测 中 的 应 用 生 物 传 感 器 是 免 疫 测 定 毒 物 分 析 取 证 药 物 检 测 基 因 表 达 分 析 基 因 鉴 定 农 业 诊 断 和 药 物 基 因 学 等 诸 多 方 面 的 重 要 工 具 它 可 以 将 对 生 物 分 子 的 分 子 识 别 的 选 择 性 与 信 号 传 感 器 的 敏 感 性 相 结 合 [35-36] 目 前, 酶 抗 体 多 肽 细 胞 和 核 酸 等 不 同 生 物 识 别 元 件 的 生 物 传 感 器 已 被 大 量 地 开 发 [35] 而 牛 奶 及 其 衍 生 品 的 质 量 控 制 是 一 个 要 求 严 格 的 领 域, 利 用 β-gal 可 以 灵 敏 省 时 且 准 确 地 对 牛 奶 质 量 进 行 监 测 5 展 望 对 于 植 物 而 言, 果 实 的 成 熟 花 粉 的 发 育 都 是 至 关 重 要 的 生 理 过 程 果 实 的 成 熟 象 征 着 生 长 发 育 的 结 束 并 伴 随 着 种 子 的 生 成 成 熟 果 实 经 历 了 许 多 生 理 生 化 的 变 化, 从 而 引 起 质 地 色 泽 风 味 等

4 706 综 述 的 改 变 相 关 研 究 已 经 证 实, 在 果 实 的 成 熟 衰 老 过 程 中, 细 胞 壁 超 微 结 构 和 代 谢 过 程 发 生 了 重 大 变 化 其 中 细 胞 壁 果 胶 纤 维 素 以 及 半 纤 维 素 结 构 的 改 变 与 成 熟 过 程 中 硬 度 的 变 化 有 关 这 些 变 化 不 仅 包 括 多 糖 的 溶 解 和 解 聚, 还 包 括 解 聚 物 等 其 他 小 分 子 的 [37-39] 重 新 排 列 近 年 来 研 究 发 现, β- 半 乳 糖 苷 酶 和 木 葡 聚 糖 内 糖 基 转 移 酶 / 水 解 酶 (XTH) 是 果 胶 和 纤 维 素 半 纤 维 素 结 构 变 化 中 重 要 的 酶 类, 它 们 在 细 胞 壁 代 谢 中 具 有 重 要 的 功 能 目 前, 已 经 在 番 茄 苹 果 梨 草 莓 等 较 多 果 实 中 证 实 了 β-gal 和 XTH 与 [36-42] 果 实 的 成 熟 软 化 密 切 相 关 但 由 于 果 实 种 类 的 广 泛 性, 不 难 想 象 它 们 在 各 自 代 谢 方 式 上 是 不 同 的 这 些 不 同 可 以 影 响 或 反 映 细 胞 壁 特 定 的 生 化 变 化 和 特 定 的 调 节 基 础 由 于 特 定 果 实 的 成 熟 和 软 化 可 能 经 历 很 多 不 同 的 机 制, 因 此 需 要 针 对 各 种 不 同 的 果 实 来 分 析 这 些 问 题, 而 从 一 个 品 种 上 得 到 的 结 果 也 许 并 不 能 恰 当 的 推 及 到 同 一 物 种 的 所 有 品 种 近 年 来, 关 于 β-gal 的 研 究 进 展 迅 速, 但 仍 存 在 许 多 问 题 需 要 深 入 探 讨, 如 在 功 能 方 面 对 β-gal 的 研 究 主 要 集 中 在 果 实 成 熟 方 面, 而 β-gal 在 调 控 花 粉 发 育 的 报 道 相 对 较 少 我 们 研 究 组 在 对 白 菜 雄 配 子 减 数 分 裂 的 胞 质 分 裂 突 变 体 (male meiotic cytokinesis, mmc) 与 其 野 生 型 植 株 花 蕾 差 异 表 达 的 基 因 分 析 中, 分 离 到 一 个 β-gal 基 因, 该 β-gal 在 花 粉 发 育 过 程 中 特 异 表 达, 通 过 反 义 RNA 对 其 进 行 功 能 分 析 发 现, 该 β-gal 缺 失 [4] 会 导 致 花 粉 发 育 的 异 常, 这 将 为 研 究 β-gal 在 花 粉 发 育 中 的 功 能 提 供 新 的 线 索 有 关 花 粉 发 育 机 制 的 研 究 一 直 是 国 内 外 发 育 生 物 学 领 域 的 一 个 热 点 尽 管 目 前 有 关 β-gal 分 子 机 制 的 研 究 信 息 还 非 常 有 限, 但 这 些 重 要 的 实 验 结 果 将 为 阐 明 其 作 用 机 制 提 供 了 新 的 依 据, 并 对 进 一 步 揭 示 其 分 子 机 制, 促 进 β-gal 基 因 相 关 生 物 学 功 能 的 研 究 具 有 重 要 意 义 参 考 文 献 (References) 1 Bell AN, Magill E, Hallsworth JE, Timson DJ. Effects of alcohols and compatible solutes on the activity of beta-galactosidase. Appl Biochem Biotechnol 2013; 169: 高 山, 陈 桂 信, 许 端 祥, 林 碧 英, 林 义 章, 潘 东 明. 苦 瓜 果 实 β- 半 乳 糖 苷 酶 基 因 的 克 隆 表 达 及 亚 细 胞 定 位. 植 物 遗 传 资 源 学 报 (Gao Shan, Chen Guixin, Xu Duanxiang, Lin Biying, Lin Yizhang, Pan Dongming. Cloning expression and subcellular localization of beta galactosidase gene from momordica charantial. Journal of Plant Genetic Resouces) 2013; 14(6): Dwevedi A, Kayastha AM. A beta-galactosidase from pea seeds (Psβ-Gal): Purification, stabilization, catalytic energetics, conformational heterogeneity, and its significance. J Agric Food Chem 2009; 57(15): 刘 金 龙, 曹 家 树. 白 菜 花 粉 壁 发 育 相 关 基 因 的 表 达 分 析 与 功 能 验 证 ( 博 士 论 文 ). 浙 江 大 学 (Liu Jinlong, Cao Jiashu. Expression and functional analysis of genes related to pollen wall development in cabbage. Zhejiang University), Tello-Solis SR, Jimenez-Guzman J, Sarabia-Leos C, Gomez- Ruiz L, Cruz-Guerrero AE, Rodriguez-Serrano GM, et al. Determination of the secondary structure of Kluyveromyces lactis betagalactosidase by circular dichroism and its structure-activity relationship as a function of the ph. J Agric Food Chem 2005; 53(26): Biswas S, Kayastha AM, Seckler R. Purification and characterization of a thermostable beta-galactosidase from kidney beans (Phaseolus vulgaris L.) cv. PDR14. J Plant Physiol 2003; 160(4): Li SC, Han JW, Chen KC, Chen CS. Purification and characterization of isoforms of beta-galactosidases in mung bean seedlings. Phytochemistry 2001; 57(3): Carrillo-López A, Cruz-Hernández A, Cárabez-Trejo A, Guevara- Lara F, Paredes-López O. Hydrolytic activity and ultrastructure in fruit skins from two prickly pear (Opuntia sp.) varieties during storage. J Agric Food Chem 2002; 50(6): Kang IK, Suh SG, Gross KC, Byun JK. N-terminal amino acid sequence of persimmon fruit beta-galactosidase. Plant Physiol 1994; 105(3): Lazan H, Ng SY, Goh LY, Ali ZM. Papaya beta-galactosidase/ galactanase isoforms in differential cell wall hydrolysis and fruit softening during ripening. Plant Physiol Biochem 2004; 42(7): Trainotti L, Spinello R, Piovan A, Spolaore S, Casadoro G. beta-galactosidases with a lectin-like domain are expressed in strawberry. J Exp Biol 2001; 52(361): Smith DL, Starrett DA, Gross KC. A gene coding for tomato fruit beta-galactosidase II is expressed during fruit ripening. Cloning, characterization, and expression pattern. Plant Physiol 1998; 117(2): Moctezuma E, Smith DL, Gross KC. Antisense suppression of a beta-galactosidase gene (TBG6) in tomato increases fruit cracking. J Exp Bot 2003; 54(390): Smith DL, Gross KC. A family of at least seven beta-galactosidase genes is expressed during tomato fruit development. Plant Physiol 2000; 123(3): Hruba P, Honys D, Twell D, Capkova V, Tupy J. Expression of β-galactosidase and β-xylosidase genes during microspore and pollen development. Planta 2005; 220(6): Rogers HJ, Bate N, Combe J, Sullivan J, Sweetman J, Swan C, et al. Functional analysis of cis-regulatory elements within the promoter of the tobacco late pollen gene g10. Plant Mol Biol 2001; 45(5): Singh MB, Knox RB. Gene controlling β-galactosidase deficiency in pollen of oilseed rape. J Hered 1985; 76(3): Pressey R. β-galactosidases in ripening tomatoes. Plant Physiol 1983; 71(1): Smith DL, Gross KC. A family of at least seven β-galactosidase

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