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1 第 4 卷 第 2 期 食 品 安 全 质 量 检 测 学 报 Vol. 4 No 年 4 月 Journal of Food Safety and Quality Apr., 2013 王 长 春 1, 林 向 阳 1*, 巫 春 宁 1, 林 梅 西 2, 吴 佳 1, 叶 南 慧 (1. 福 州 大 学 生 物 科 学 与 工 程 学 院, 福 州 ; 2. 福 建 闽 中 有 机 食 品 有 限 公 司, 莆 田 ) 1 摘 要 : 目 的 以 熊 果 酸 提 取 得 率 为 指 标, 研 究 对 比 水 浴 提 取 法 超 声 波 提 取 法 以 及 微 波 提 取 法 提 取 枇 杷 叶 中 熊 果 酸 的 提 取 效 果 方 法 比 较 提 取 时 间 温 度 乙 醇 体 积 分 数 及 料 液 比 四 个 因 素 下 三 种 方 法 的 提 起 效 果, 并 在 电 子 显 微 镜 下 进 行 比 较 研 究 结 果 在 相 同 条 件 下, 微 波 法 和 超 声 波 法 提 取 率 较 接 近, 均 比 水 浴 法 高 在 提 取 时 间 上, 当 采 用 控 温 措 施 时, 超 声 波 法 比 微 波 法 和 水 浴 法 缩 短 提 取 时 间 至 少 20%, 当 不 采 用 控 温 措 施 时, 微 波 法 比 水 浴 法 缩 短 时 间 至 少 92%, 比 超 声 波 法 缩 短 90%; 在 提 取 温 度 上, 微 波 提 取 法 比 超 声 波 法 降 低 提 取 温 度 14.3%, 比 水 浴 法 降 低 至 少 25%; 在 乙 醇 体 积 分 数 上, 微 波 法 和 超 声 波 法 提 取 率 均 在 乙 醇 体 积 分 数 85% 时 达 到 最 高 点, 比 水 浴 法 的 高 6.25%; 在 料 液 比 上, 超 声 波 法 和 微 波 法 提 取 率 达 到 最 高 点 所 需 的 料 液 比 均 比 水 浴 法 低, 微 波 法 比 超 声 波 多 消 耗 溶 剂 16.7%, 超 声 波 法 比 水 浴 法 减 少 消 耗 至 少 25% 结 论 相 比 于 水 浴 提 取 法, 超 声 波 辅 助 提 取 法 和 微 波 辅 助 提 取 法 在 提 取 得 率 和 效 率 上 具 有 明 显 的 优 势, 超 声 波 辅 助 提 取 法 操 作 简 便, 而 微 波 辅 助 提 取 法 效 率 更 高, 但 溶 剂 消 耗 更 多 关 键 词 : 水 浴 ; 超 声 波 ; 微 波 ; 熊 果 酸 Effect of water bath extraction, ultrasonic and microwave assisted extraction on ursolic acid from loquat leaves WANG Chang-Chun 1, LIN Xiang-Yang 1*, WU Chun-Ning 1, LIN Mei-Xi 2, WU Jia 1, YE Nan-Hui 1 (1. College of biological science and technology, Fuzhou University, Fuzhou , China; 2. Fujian Minzhong organic food co., LTD, Putian , China) ABSTRACT: Objective To compare the extraction effects of ursolic acid from loquat leaves by water bath extraction(wbe), ultrasonic assisted extraction (UAE) and microwave assisted extraction(mae) taking the extraction rate of ursolic acid as the index. Methods The extraction effects of these three methods were compared on the factors such as extraction time, temperature, ethanol concentration and solid-to-liquid ratio. The comparison was performed with its electron microscopy image. Results In the same condition, extraction yields of MAE s and UAE s were similar, which were both higher than that of WBE. For the extraction time, when temperature control measures were used, UAE shortened the extraction time by at least 20% than MAE and WBE; when temperature control measures were not adopted, MAE shortened the extraction time by at least 基 金 项 目 : 福 建 闽 中 有 机 食 品 有 限 公 司 枇 杷 及 桂 圆 系 列 产 品 综 合 开 发 与 利 用 项 目 (FZ200802) Fund: Supported by Fujian minzhong organic food co., LTD comprehensive development and utilization of Loquat and longan series products( FZ200802) * 通 讯 作 者 : 林 向 阳, 博 士, 副 教 授, 主 要 研 究 方 向 为 食 物 资 源 综 合 开 发 与 利 用 ( 生 物 质 资 源 化 ) xylin@fzu.edu.cn *Corresponding author: LIN Xiang-Yang, Associate Professor, School of Biological Science and Engineering, Fuzhou University, No.2, Xue Yuan Road, University Town, Fuzhou , China. xylin@fzu.edu.cn

2 564 食 品 安 全 质 量 检 测 学 报 第 4 卷 92% than WBE and 90% than UAE. For the temperature, MAE reduced the extraction temperature by 14.3% than UAE and at least 25% than WBE. For the ethanol volume fraction, MAE s and UAE s extraction yields were peaked at a volume fraction of 85% ethanol which was 6.25% higher than that of WBE. For the solid-liquid ratio, MAE and UAE consumed less solvent than WBE when the yield of ursolic acid was peaked; MAE consumed solvent 16.7% more than UAE and UAE reduced solvent consumption by at least 25% than WBE. Conclusion Compared with WBE, UAE and MAE have the obvious advantages of higher extraction yields and efficiency. The operation of UAE is more simple, while MAE is more efficient but consumes more solvent. KEY WORDS: water bath; ultrasonic; microwave; ursolic acid 枇 杷 叶 为 蔷 薇 科 植 物 枇 杷 [Eriobotrya japonica ( Thunb. ) Lindl.] 的 干 燥 叶, 别 名 巴 叶 芦 桔 叶, 在 我 国 分 布 很 广, 为 传 统 中 草 药, 性 微 寒, 味 苦 平, 止 咳, 清 肺 和 胃, 降 气 化 痰, 收 载 于 历 版 中 国 药 典 供 中 医 临 床 使 用 [1] 枇 杷 叶 的 主 要 化 学 成 分 为 金 合 欢 醇 橙 花 叔 醇 以 及 丰 富 的 黄 酮 类 化 合 物, 亦 含 熊 果 酸 齐 墩 果 酸 酒 石 酸 苦 杏 仁 苷 鞣 质 柠 檬 酸 苹 果 酸 维 生 素 B 和 维 生 素 C 等 研 究 表 明 [2,3] : 枇 杷 叶 可 用 于 肺 热 咳 嗽, 清 肺 止 咳, 胃 热 呕 逆, 烦 热 口 渴, 降 逆 止 呕, 还 可 治 疗 腰 椎 增 生 性 关 节 炎 前 列 腺 增 生 术 后 疼 痛 痹 症 肩 周 痛 消 除 乳 房 硬 块 及 辅 治 神 经 疾 病 等 [4,5] 在 国 外, 枇 杷 叶 被 用 于 治 疗 皮 肤 病 和 糖 尿 病 [6] 目 前 从 天 然 植 物 中 提 取 熊 果 酸 的 方 法 主 要 有 : 回 流 提 取 法 渗 漉 法 超 临 界 萃 取 法 超 声 波 提 取 法 常 温 超 高 压 提 取 法 和 沉 淀 吸 附 法 等 [7] 这 些 方 法 部 分 已 经 实 现 工 业 化 生 产, 但 都 存 在 一 些 不 足, 例 如 回 流 提 取 法 溶 剂 消 耗 量 大, 提 取 时 间 较 长 ; 渗 漉 法 操 作 时 间 较 长, 对 药 材 粒 度 要 求 较 高, 易 产 生 污 染 ; 超 临 界 萃 取 法 操 作 压 力 高 能 耗 大, 设 备 成 本 高 ; 常 温 超 高 压 提 取 法 对 设 备 有 较 高 的 要 求, 一 次 性 投 资 大 近 年 来, 超 声 波 强 化 提 取 法 和 微 波 辅 助 提 取 法 被 广 泛 应 用 于 植 物 有 效 成 分 的 提 取 超 声 波 法 主 要 利 用 空 化 作 用 产 生 的 剪 切 力 破 碎 细 胞, 加 速 植 物 材 料 中 有 效 成 分 溶 出, 从 而 增 加 有 效 成 分 的 提 取 率, 缩 短 提 取 时 间, 整 个 过 程 在 较 低 的 温 度 下 操 作, 避 免 高 温 对 提 取 成 分 的 影 响 [8,9] ; 微 波 法 则 利 用 微 波 辐 射 产 生 的 高 频 电 磁 波, 使 材 料 内 分 子 互 相 碰 撞 挤 压, 使 得 位 于 细 胞 内 的 有 效 成 分 从 细 胞 壁 周 围 自 由 流 出, 传 递 并 被 萃 取 介 质 获 取 并 溶 解 其 中, 其 具 有 穿 透 力 强 选 择 性 高 萃 取 效 率 高, 提 取 时 间 短, 溶 剂 用 量 少 等 优 点, 可 获 得 高 的 萃 取 速 度 和 萃 取 效 率 及 较 好 的 萃 取 质 量 [9,10] 两 者 均 可 以 破 坏 细 胞 壁 的 组 成 和 结 构, 提 高 其 通 透 性, 加 速 胞 内 物 质 的 溶 出 速 度, 与 传 统 方 法 相 比, 具 有 节 省 时 间 节 约 溶 剂 提 取 率 高 等 优 点 [11] 本 研 究 旨 在 从 提 取 时 间 温 度 乙 醇 体 积 分 数 及 料 液 比 四 个 因 素 对 比 这 三 种 提 取 方 法, 并 在 电 子 显 微 镜 下 对 比 经 过 这 三 种 方 法 提 取 后 枇 杷 叶 的 微 观 结 构 变 化, 进 一 步 探 究 这 三 中 提 取 方 法 的 差 异 1 材 料 与 方 法 1.1 材 料 枇 杷 干 叶 : 已 晒 干, 来 自 福 建 闽 中 有 机 食 品 有 限 公 司 ; 熊 果 酸 ( 分 析 标 准 品, 98.5%) 芦 丁 ( 98%) 购 自 阿 拉 丁 公 司 ; 氢 氧 化 钠 ( 分 析 纯, 西 陇 化 工 股 份 有 限 公 司 ); 硝 酸 铝 ( 分 析 纯, 西 陇 化 工 股 份 有 限 公 司 ); 亚 硝 酸 钠 ( 分 析 纯, 广 东 光 华 化 学 厂 有 限 公 司 ); 95% 乙 醇 ( 分 析 纯, 西 陇 化 工 股 份 有 限 公 司 ); 无 水 乙 醇 : ( 分 析 纯, 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司 ); 高 氯 酸 ( 分 析 纯, 广 东 光 华 科 技 股 份 有 限 公 司 ); 香 草 醛 ( 分 析 纯, 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司 ) 1.2 仪 器 设 备 主 要 仪 器 与 设 备 见 表 方 法 熊 果 酸 标 准 曲 线 的 绘 制 精 密 称 取 熊 果 酸 标 准 品 10 mg, 用 无 水 乙 醇 定 容 于 100 ml 容 量 瓶 中, 即 得 0. 1 mg/ml 的 熊 果 酸 标 准 溶 液 分 别 准 确 吸 取 熊 果 酸 标 准 溶 液 ml 和 2.0 ml 于 具 塞 试 管 中, 减 压 加 热 挥 去 溶 剂 后, 加 5% 香 草 醛 - 冰 醋 酸 0.3 ml 和 高 氯 酸 0.7 ml, 60 水 浴 中 加 热 15 min, 取 出 冷 却 后 移 至 1 ml 比 色 管 中, 用 乙 酸 乙 酯 定 容, 摇 匀 后 在 548

3 第 2 期 王 长 春, 等 : 水 浴 提 取 超 声 波 和 微 波 辅 助 提 取 枇 杷 叶 中 熊 果 酸 的 比 较 研 究 565 表 1 仪 器 设 备 Table 1 Instrument and equipment 仪 器 名 称 型 号 公 司 三 频 数 控 超 声 清 洗 器 KQ-300VDE 昆 山 市 超 声 仪 器 有 限 公 司 微 波 实 验 仪 MG08S-2B 南 京 汇 研 微 波 系 统 工 程 有 限 公 司 数 显 恒 温 水 浴 锅 HH-4 国 华 电 器 有 限 公 司 电 子 天 平 CP153 奥 豪 斯 仪 器 ( 上 海 ) 有 限 公 司 循 环 水 式 多 用 真 空 泵 SHB-Ⅲ 郑 州 长 城 科 工 贸 有 限 公 司 高 速 多 功 能 粉 碎 机 Q-250A3 上 海 冰 都 电 器 有 限 公 司 紫 外 可 见 分 光 光 度 计 UV-1100 上 海 美 谱 达 仪 器 有 限 公 司 场 发 射 扫 描 电 子 显 微 镜 Nova NanoSEM 230 美 国 FEI 公 司 nm 处 测 定 吸 光 度, 同 时 以 试 剂 空 白 作 参 比, 以 吸 光 度 为 横 坐 标, 熊 果 酸 质 量 浓 度 为 纵 坐 标, 绘 制 标 准 曲 线, 线 性 方 程 为 C=24.164A , 相 关 系 数 R 2 = 枇 杷 叶 熊 果 酸 的 提 取 用 粉 碎 机 将 枇 杷 干 叶 粉 碎, 制 得 枇 杷 叶 干 叶 粉 末 称 取 g 枇 杷 叶 粉 末 到 100 ml 烧 杯 中, 按 实 验 所 需 料 液 比 加 入 不 同 浓 度 的 乙 醇 溶 液, 搅 拌 均 匀, 用 保 鲜 膜 盖 住 烧 杯, 防 止 乙 醇 挥 发, 然 后 放 入 超 声 清 洗 仪 器 微 波 实 验 仪 或 水 浴 中 提 取, 设 置 功 率 温 度 等 参 数, 提 取 一 定 时 间, 取 出 后 用 真 空 泵 抽 滤 两 次, 得 到 滤 液, 移 入 100 ml 的 容 量 瓶 中, 然 后 用 无 水 乙 醇 溶 液 定 容, 制 得 样 品 液 分 别 吸 取 0.5 ml 的 样 品 液 到 10 ml 比 色 管, 按 上 述 节 方 法 测 定 其 在 548 nm 处 的 吸 光 度, 以 试 剂 空 白 作 参 比, 根 据 标 准 曲 线 计 算 所 测 样 品 溶 液 的 质 量 浓 度, 并 计 算 每 克 枇 杷 叶 中 熊 果 酸 的 提 取 率 每 组 实 验 做 三 次 平 行 提 取 率 %= 提 取 出 的 熊 果 酸 质 量 / 枇 杷 叶 干 粉 质 量 结 果 与 分 析 2.1 提 取 时 间 的 比 较 分 别 采 用 水 浴 法 超 声 波 法 与 微 波 法 提 取, 在 料 液 比 1:12, 温 度 60, 乙 醇 体 积 分 数 85% 的 条 件 下, 改 变 提 取 时 间, 研 究 对 比 三 种 方 法 下 提 取 时 间 对 熊 果 酸 提 取 率 的 影 响 其 中 超 声 波 功 率 及 频 率 分 别 是 150 W 和 45 khz 由 图 1 可 知, 在 提 取 时 间 为 20~40 min, 超 声 波 法 和 微 波 法 的 熊 果 酸 提 取 率 明 显 高 于 水 浴 法 微 波 法 和 水 浴 法 均 未 能 看 出 最 高 点, 提 取 率 仍 继 续 上 升 可 知, 在 保 证 达 到 提 取 率 最 高 点 的 情 况 下, 超 声 波 法 所 需 提 取 时 间 比 水 浴 法 和 微 波 法 至 少 缩 短 20% 在 提 取 时 间 为 20~30 min 时, 超 声 波 法 和 微 波 法 的 提 取 率 较 接 近, 提 取 时 间 为 40~50 min 时 微 波 提 取 效 率 明 显 比 较 高, 而 且 随 着 时 间 的 延 长, 提 取 率 不 断 提 高, 说 明 微 波 作 用 时 间 还 需 延 长, 本 实 验 微 波 提 取 时 采 用 控 温 装 置, 所 以 微 波 是 间 断 供 给 的, 微 波 实 际 作 用 时 间 并 不 长, 大 约 1~2 min, 但 却 大 大 延 长 了 提 取 时 间 所 以 接 下 来 我 们 采 用 不 控 温 措 施 来 探 究 微 波 提 取 是 否 可 以 大 大 缩 短 提 取 时 间, 除 了 温 度 未 控 制 外, 其 他 提 取 条 件 均 保 持 不 变 结 果 如 图 2 所 示 图 1 提 取 时 间 对 熊 果 酸 提 取 率 的 影 响 Fig.1 The effect of extraction time on the yield of ursolic acid 熊 果 酸 提 取 率 /% 微 波 作 用 时 间 /min 图 2 微 波 时 间 对 熊 果 酸 提 取 率 的 影 响 Fig.2 The effect of microwave time on the yield of ursolic acid

4 566 食 品 安 全 质 量 检 测 学 报 第 4 卷 由 图 2 可 知, 随 着 微 波 时 间 的 增 长, 熊 果 酸 的 提 取 得 率 先 升 高 后 明 显 下 降, 这 可 能 是 由 于 熊 果 酸 长 时 间 受 热 而 导 致 其 结 构 发 生 了 改 变, 或 长 时 间 的 高 温 导 致 乙 醇 的 挥 发 而 使 提 取 率 降 低 [12] 当 微 波 时 间 为 4 min 时, 熊 果 酸 提 取 率 达 到 最 高, 为 2.23%, 与 图 1 微 波 法 的 最 高 点 2.20% 接 近, 说 明 当 采 用 不 控 温 措 施 时, 微 波 提 取 法 可 以 大 大 缩 短 提 取 时 间 至 4 min, 比 水 浴 法 缩 短 了 至 少 92%, 比 超 声 波 法 缩 短 了 90%, 并 保 证 了 较 高 的 提 取 率, 提 取 效 率 非 常 高 2.2 提 取 温 度 的 比 较 分 别 采 用 水 浴 法 超 声 波 法 与 微 波 法 提 取, 在 料 液 比 1:12, 时 间 40 min, 乙 醇 体 积 分 数 85% 的 条 件 下, 改 变 提 取 温 度, 研 究 对 比 三 种 方 法 下 提 取 温 度 对 熊 果 酸 提 取 率 的 影 响 由 图 3 可 知, 相 同 温 度 下, 微 波 法 和 超 声 波 法 的 熊 果 酸 提 取 率 均 比 水 浴 法 的 高, 微 波 法 的 更 高, 在 60 时 达 到 最 高, 超 声 波 法 在 70 达 到 最 高 点, 而 水 浴 法 未 能 观 察 出 最 高 点 但 已 基 本 稳 定, 微 波 提 取 法 达 到 最 高 点 所 需 提 取 温 度 比 超 声 波 法 降 低 14.3%, 比 水 浴 法 至 少 降 低 25%, 说 明 微 波 法 和 超 声 波 法 所 需 的 提 取 温 度 较 低, 微 波 法 更 低 有 文 献 指 出, 微 波 法 最 大 的 优 点 是 提 取 时 间 很 短, 提 取 效 率 高 [9] 由 图 2 可 知, 不 控 温 不 仅 未 导 致 提 取 率 降 低, 而 且 可 以 大 大 缩 短 时 间, 只 需 几 分 钟 即 可 ( 备 注 : 微 波 法 在 提 取 温 度 设 置 为 80 时, 提 取 结 束 后 溶 剂 几 乎 全 部 挥 发, 所 以 未 测 出 得 率 ) Fig.3 图 3 提 取 温 度 对 熊 果 酸 提 取 率 的 影 响 The effect of extraction temperature on the yield of ursolic acid 2.3 乙 醇 体 积 分 数 的 比 较 分 别 采 用 水 浴 法 超 声 波 法 与 微 波 法 提 取, 在 料 液 比 1:12, 时 间 40 min, 温 度 60 的 条 件 下, 改 变 乙 醇 体 积 分 数, 研 究 对 比 三 种 方 法 下 乙 醇 体 积 分 数 对 熊 果 酸 提 取 率 的 影 响 由 图 4 可 知, 在 各 个 乙 醇 体 积 分 数 下, 超 声 波 法 和 微 波 法 的 提 取 率 较 接 近, 且 均 比 水 浴 法 的 高, 但 是 提 取 率 达 到 最 高 点 所 需 的 乙 醇 体 积 分 数 亦 比 水 浴 法 的 高 6.25% 水 浴 法 在 乙 醇 体 积 分 数 80% 时 提 取 率 已 达 到 最 高 点, 而 超 声 波 法 和 微 波 法 均 在 85% 达 到 最 高 点 对 于 超 声 波 法 和 微 波 法, 提 取 率 均 随 着 乙 醇 体 积 分 数 的 增 加 而 升 高, 在 乙 醇 体 积 分 数 为 85% 时 达 到 最 高, 这 是 由 于 乙 醇 体 积 分 数 越 高, 其 极 性 越 接 近 于 熊 果 酸 的 极 性, 根 据 相 似 相 容 原 理, 越 有 利 于 提 取 [13] 但 当 溶 度 超 过 85% 后, 其 他 极 性 物 质 的 溶 出 影 响 了 熊 果 酸 的 提 取 图 4 乙 醇 体 积 分 数 对 熊 果 酸 提 取 率 的 影 响 Fig.4 The effect of ethanol volume fraction on the yield of ursolic acid 2.4 料 液 比 的 比 较 分 别 采 用 水 浴 法 超 声 波 法 与 微 波 法 提 取, 在 时 间 40 min, 温 度 60, 乙 醇 体 积 分 数 85% 的 条 件 下, 改 变 料 液 比, 研 究 对 比 三 种 方 法 下 料 液 比 对 熊 果 酸 提 取 率 的 影 响 由 图 5 可 知, 当 料 液 比 为 1:10 1:12 时,, 超 声 波 法 和 微 波 法 提 取 率 较 接 近, 均 比 水 浴 法 的 高 ; 当 料 液 比 为 1:14 1:16 时, 微 波 法 提 取 率 明 显 高 于 超 声 波 法, 水 浴 法 提 取 率 继 续 上 升, 未 看 出 最 高 点 超 声 波 提 取 率 最 高 点 在 1:12, 之 后 开 始 下 降 而 微 波 法 在 1:14 时 达 到 最 高 料 液 比 增 加 使 熊 果 酸 扩 散 的 浓 度 差 增 大, 提 取 率 增 大 [12] 但 当 液 料 比 达 到 提 取 率 最 高 点 对 应 值 后, 提 取 率 反 而 有 所 下 降, 可 能 是 过 多 的 溶 剂 导 致 其 他 杂 质 的 溶 出 计 算 可 得 微 波 法 达 到 最 高 点 消 耗 的 溶 剂 比 超 声 波 法 多 16.7%, 这 是 由 于 微 波 的 高 效 加 热 方 式 使 乙 醇 挥 发 较 多 ; 超 声 波 法 达 到 最 高 点 所 消 耗 的 溶 剂 比 水 浴 法 减 少 至 少 25%, 这 是 由 于 超 声 波 特 有 的 空 化 作 用 机 械 作 用 及 热 效 应 极 大 提 高 了 熊 果 酸 的

5 第2期 王长春, 等: 水浴提取 超声波和微波辅助提取枇杷叶中熊果酸的比较研究 提取效率 567 水浴提取对细胞结构有些许破坏 经超声波提取后的 枇杷叶 C, 其细胞结构较不完整, 细胞壁受到较大破 坏, 且整个细胞内容物基本已溶出, 但是细胞框架仍 较完整, 说明超声波对枇杷叶细胞的结构破坏较大, 非常有利于有效成分的提取 而经过微波提取后的枇 杷叶 D, 其细胞结构在电子显微镜下较为凌乱 不完 整, 细胞壁破坏更严重, 碎片较多, 细胞膜被破坏, 说明微波对枇杷叶细胞的破坏也较严重, 能够促进 细胞内有效成分溶出到溶剂中, 极大缩短提取时间, Fig 图 5 料液比对熊果酸提取率的影响 The effect of solid-liquid ratio on the yield of ursolic acid 提高提取效率, 但是对熊果酸化合物亦会造成一定 的破坏, 所以提取率相比超声波不会高太多 综上所述, 在超声波提取和微波提取中, 超声 波和微波均对枇杷叶的细胞结构造成较大程度的破 电镜图像对比 为了进一步探究这三种提取方法的差异, 尤其 是探究这三种方法对原料枇杷叶细胞微观结构的作 用差异, 本实验将经过三种方法提取后的枇杷叶粉 坏, 迫使细胞内有效成分更快溶出到溶剂中, 从而提 高提取效率, 缩短提取时间, 降低成本 3 讨 论 末进行干燥, 再过 200 目筛网, 然后采用场发射电子 通过对比提取时间 温度 乙醇体积分数及料液 显微镜扫描, 见图 6 比这四个单因素来研究对比水浴提取法 超声波辅助 提取法与微波辅助提取法的差异, 结果得出, 在相同 条件下, 微波辅助提取法的熊果酸提取率都要略高 于超声波提取法 在提取时间上, 当采用控温措施时, 超声波法比微波法和水浴法缩短提取时间至少 20%, 微波法在提取时间上没有优势 当采用不控温措施时, 微波提取法只需 4 min 即可达到提取率最高点, 比水 A 未经处理枇杷叶原料 B 水浴提取后的枇杷叶 浴法缩短时间至少 92%, 比超声波法缩短 90% 在提 取温度上, 水浴法未能观察出最高点但已基本稳定, 微波提取法达到最高点所需提取温度比超声波法降 低 14.3%, 比水浴法至少降低 25% 在乙醇体积分数 因素上, 微波法和超声波法提取率较接近, 均比水浴 法的高, 均在乙醇体积分数 85%时达到最高点, 比水 浴法提取率达到最高点所需的乙醇体积分数高 C 超声波提取后的枇杷叶 D 微波提取后的枇杷叶 图 6 采用不同方法提取后的枇杷叶电镜图像对比(n=3) Fig.6 Electron microscopy (SEM) images of loquat leaves after extraction by different methods(n=3) 6.25% 在料液比方面, 超声波法和微波法提取率达 到最高点所需的料液比均比水浴法的低, 微波法达 到提取率最高点时比超声波多消耗乙醇溶剂 16.7%, 超声波法比水浴法减少溶剂消耗至少 25% 在电镜图像对比中, 超声波和微波均对枇杷叶 由图 6 可知, 未经处理的枇杷叶原料 A, 在电子 的细胞结构造成较大程度的破坏, 迫使细胞内有效 显微镜下, 其细胞结构较为完整 整齐, 未受任何破 成分更快溶出到溶剂中, 从而提高提取效率, 缩短提 坏 经水浴提取后的枇杷叶 B, 其细胞结构较不完整, 取时间, 降低成本 但是此种试验方法, 由于枇杷叶 有些细胞已出现裂痕, 细胞壁受到轻微的破坏, 说明 已被干燥过, 对枇杷叶微观细胞结构的观察有较大

6 568 食 品 安 全 质 量 检 测 学 报 第 4 卷 的 影 响, 无 法 还 原 细 胞 原 有 结 构 在 提 取 之 后 是 如 何 被 破 坏 的, 无 法 分 辨 细 胞 膜 是 否 已 经 破 裂 及 其 破 裂 的 状 态 等, 在 这 一 点 上, 还 有 待 改 进 方 法 做 进 一 步 的 研 究 参 考 文 献 [1] 刘 传 安, 邹 盛 勤, 陈 武. 枇 杷 叶 化 学 成 分 药 理 作 用 及 其 应 用 研 究 进 展 [J]. 安 徽 农 业 科 学, 2005, 33(11): , Liu CA, Zhou SQ, Chen W. Research Advance in the Chemical Composition, Pharmacologic Effect and Utilization on Eriobotrya japonica(thunb.) Lindl [J]. J Anhui Agr Sci, 2005, 33(11): , [2] 林 启 训. 枇 杷 叶 黄 酮 类 化 合 物 的 水 浸 提 工 艺 研 究 [J]. 农 业 工 程 学 报, 2005, 21(7): 190. Lin QX. Water extraction of flavonoids in loquat leaves [J]. Trans Chin Soc Agr Eng, 2005, 21(7): 190. [3] 刘 祥 义. 超 声 波 提 取 元 宝 枫 叶 总 黄 酮 方 法 研 究 [J]. 云 南 化 工, 2003, 30(1): 27. Liu XY. Study on the Extraction of Flavonoids from the Leaves of Acer Truncatum by Ultreasonic Treatment [J]. Yunnan Chem Technol, 2003, 30(1): 27. [4] 陈 小 刚. 常 用 中 草 药 临 床 新 用 [M]. 广 州 : 广 东 科 技 出 版 社, Chen XG. New clinical use in commonly used Chinese herbal medicine [M]. Guangzhou: Guangdong science and technology press, [5] 光 阳. 枇 杷 叶 新 用 途 [J]. 湘 西 科 技, 2003, 1: 32. Guang Y. New uses of Loquat leaf [J]. Hunan Sci technol, 2003, 1: 32. [6] Taniguchi S, Imayoshi Y, Kobayashi E, et al. Production of bioactive triterpenes by Eriobotrya japonicacalli [J]. Phytochemistry, 2002, 59: [7] 于 明 明, 周 富 强, 刘 军 海. 熊 果 酸 提 取 工 艺 的 研 究 进 展 [J]. 氨 基 酸 和 生 物 资 源, 2009, 31(1): Yu MM, Zhou FQ, Liu JH. Research Advance on Extraction of Ursolic Acid [J]. Amino Acids Biotic Res, 2009, 31(1): [8] 王 倩, 常 丽 新, 唐 红 梅. 黄 酮 类 化 合 物 的 提 取 分 离 及 其 生 物 活 性 研 究 进 展 [J]. 河 北 理 工 大 学 学 报 : 自 然 科 学 版, 2011, 33(1): Wang Q, Chang LX, Tang HM. Present Situation in Research of Flavonoids Bioactivities and its Extraction and Separation Technology [J]. J Hebei Polytechnic Univ (Natural Science Edition), 2011, 33(1): [9] 曾 里, 夏 之 宁. 超 声 波 和 微 波 对 中 药 提 取 的 促 进 和 影 响 [J]. 化 学 研 究 与 应 用, 2002, 14(3): Zeng L, Xia ZN. The improvement and influence of ultrasonic and microwave irradiation on the extraction of traditional Chinese medicine [J]. Chem Res Appl, 2002, 14(3): [10] 刘 璐, 付 明 哲, 王 侠, 等. 植 物 黄 酮 类 化 合 物 提 取 及 测 定 方 法 研 究 进 展 [J]. 动 物 医 学 进 展, 2011, 32(6): Liu L, Fu MZ, Wang X, et al. Progrees on Extraction and Determination Methods of Plant Flavonoids [J]. Prog Vet Med, 2011, 32(6): [11] 翟 硕 莉. 超 声 波 法 和 微 波 法 提 取 马 齿 苋 中 总 黄 酮 的 比 较 研 究 [J]. China Brewing, 2012, 31(08): Qi SL. Comparative research on flavonoids extraction from Portulaca oleracea L.by ultrasonic method and microwave method [J]. China Brew, 2012, 31(08): [12] 吕 佳 飞, 李 文 飞, 冯 伟, 等. 响 应 曲 面 法 优 化 红 枣 熊 果 酸 微 波 提 取 工 艺 [J]. 贵 州 农 业 科 学, 2010, 38(8): Lv JF, Li WF, Feng W, et al. Optimization of Microwave Extraction Technique of Ursolic Acid from Zizyphus jujube via Response Surface Methodology [J]. Guizhou Agr Sci, 2010, 38(8): [13] 刘 艳 芳, 安 广 杰. 微 波 辅 助 提 取 夏 枯 草 中 熊 果 酸 的 工 艺 [J]. 安 徽 农 业 科 学, 2007, 35(34): Liu YF, An GJ. Study on Extracting Ursolic Acid from Prunella vulgaris L. by Microwave-assisted Technology [J]. J Anhui Agr Sci, 2007, 35(34): ( 责 任 编 辑 : 张 宏 梁 ) 作 者 简 介 王 长 春, 研 究 生, 主 要 研 究 方 向 为 食 品 科 学 @qq.com 林 向 阳, 博 士, 副 教 授, 主 要 研 究 方 向 为 食 物 资 源 综 合 开 发 与 利 用 ( 生 物 质 资 源 化 ) xylin@fzu.edu.cn

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