1117 化 于生后 14d 21d 留取视网膜组织, 检测精氨酸 2 活性及血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,vegf) 的表达 出生 70d, 应用视网膜电流图评估视网膜功能 结果生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠出生体质量明显低于其

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1 1116 欁欁 引文格式 : 刘大鹏, 张耀东, 熊虹, 孟莉, 康文清, 孙慧清, 等. 生长发育迟滞与鼠视网膜病变发生的相关研究 [J]. 眼科新进展,2016,36(12): doi: /j.cnki.rao 欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁 实验研究 生长发育迟滞与鼠视网膜病变发生的相关研究 刘大鹏张耀东熊虹孟莉康文清孙慧清许邦礼王彩君李明超金娟郭静孙仙桃周炎娟余增渊 欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞欞 欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁 作者简介 : 刘大鹏, 男,1978 年 3 月出生, 河南濮阳人 研究方向 : 危重新生儿疾病 联系电话 : ;E AboutLIU Da Peng:Male,borninMarch, 1978.Tel: ;E 收稿日期 : 修回日期 : 本文编辑 : 盛丽娜 基金项目 : 河南省医学科技攻关计划项目 ( 编号 : ); 河南省基础与前沿技术研究计划项目 ( 编号 : ); 河南省教育厅自然科学研究项目 ( 编号 :2011B310009); 郑州市科技攻关项目 ( 编号 : ) 作者单位 : 河南省郑州市, 郑州市儿童医院 NICU( 刘大鹏, 张耀东, 熊虹, 康文清, 许邦礼, 王彩君, 金娟, 郭静, 周炎娟 ); 河南省新乡市, 新乡医学院基础医学院 ( 孟莉 ); 河南省郑州市, 郑州市儿童医院早产儿病区 ( 孙慧清, 李明超, 余增渊 ); 河南省郑州市, 郑州市儿童医院眼科 ( 孙仙桃 ) 通讯作者 : 孙慧清,E mail:pediatrics@126. com;orcid: Receiveddate:Jun20,2016 Accepteddate:Sep17,2016 Foundationitem:MedicalScienceandTech nique Foundation ofhenan Province(No: , );NationalBasic Re search Program of Henan Province (No: );NaturalScienceFoundationof EducationDepartmentofHenanProvince(No: 2011B310009);ScienceandTechnologyDevel opment Program of Zhengzhou City(No: ) FromtheDepartmentofNICU,ZhengzhouChil dren shospital(liu Da Peng,ZHANG Yao Dong,XIONG Hong,KANG Wen Qing,XU Bang Li,WANGCai Jun,JINJuan,GUOJing, ZHOU Yan Juan),Zhengzhou450018,Henan Province,China;theSchoolofBasicMedical Science,XinxiangMedicalUniversity(MENG Li),Xinxiang453003,HenanProvince,China; WardofPrematureInfant,ZhengzhouChildren shospital(sun Hui Qing,LIMing Chao,YU Zeng Yuan),Zhengzhou450018,HenanProv ince,china;departmentofophthalmology, ZhengzhouChildren shospital(sun Xian Tao),Zhengzhou450018,HenanProvince,Chi na Responsibleauthor:SUN Hui Qing,E mail: pediatrics@ 126.com;ORCID: Correlation of intra,extrauterine malnutrition andretinopathyofprematurityinmice LIU Da Peng,ZHANG Yao Dong,XIONG Hong,MENG Li,KANG Wen Qing,SUN Hui Qing,XU Bang Li,WANG Cai Jun,LIMing Chao,JIN Juan,GUO Jing,SUN Xian Tao,ZHOU Yan Juan,YU Zeng Yuan Key words growthretardation;retinopathyofprematurity;insulin like growthfactors 1;vascularendothelialgrowthfactor;arginine2 Abstract Objective Toinvestigatetheefectsofgrowthretardationaf terpreterm birthonretinopathyofprematurity.methods Thepregnant18 daysc57bl/6micewererandomlydividedintonormalcontrolgroup,growth retardationgroup,oxygen inducedretinopathy(oir)group,andgrowthretarda tion+oirgroup.thepregnantmiceinnormalcontrolgroupwereonlygiventhe normaldiet.thepregnantmiceingrowthretardationgroupweregiventheiso caloriclow proteindiet,continuedto21daysforpupsafterbirth,toinduce growthretardationpups.foroirgrouppups,theoirmodelswereestablished inthemotherandpups.thepregnantmiceingrowthretardation+oir group weregivengrowthretardationandoirmodelswereestablished.at14daysand 21daysafterbirth,thebloodglucose,insulin,andinsulin likegrowthfactor 1 (IGF 1) weretested.thearginine2and vascularendothelialgrowth factor (VEGF)inretinaltissueweredetected.At70daysafterbirth,electroretinogram (ERG)wasusedtoassessretinalfunction.Results Thebirthweightofthe growthretardationgroupandgrowthretardation+oirgroupweresignificantly lowerthanthoseofothertwogroups(alp<0.05),at14daysand21daysafter birth,theweight,insulin,igf 1andVEGFinthegrowthretardationgroupand growthretardation+oirgroupweresignificantlylowerthanthoseofthenormal controlgroup(alp<0.05),butarginine2wasmuchhigher(alp<0.05).the retinalcapilarydensityindexsignificantlyincreasedinoirgroup,growthretar dationgroupandgrowthretardation+oirgroup,especialyingrowthretarda tion+oirgroup.at70daysofmiceafterbirth,erg analysiswasdoneforal groups,ergresponseweakenedingrowthretardationgroupandoirgroup,and RmP2amplitude(bipolarcels)and8Hzflickeramplitude(R8:theretinafunc tion)wassignificantlyreduced.ergresponsewasthemostweakestingrowth retardation+oirgroups.conclusion Growthretardationafterbirthforpre maturitycanefecttheexpressionofigf 1,VEGFandarginine2,andsignificant lyefecttheoccurenceofretinopathyofprematurity. 中图分类号 R774.1 关键词 生长发育迟滞 ; 早产儿视网膜病变 ; 胰岛素样生长因子 1; 血管内皮生长因子 ; 精氨酸 2 摘要 目的探讨生后生长发育迟滞对鼠视网膜的影响 方法将怀孕 18d 的 C57BL/6 母鼠随机分为正常对照组 生长发育迟滞组 氧诱导视网膜病 (oxygen inducedretinopathy,oir) 组 生长发育迟滞 +OIR 组 正常对照组母鼠予正常饮食 ; 生长发育迟滞组母鼠予等热卡低蛋白饮食, 持续至幼鼠出生 21d;OIR 组建立 OIR 模型 ; 生长发育迟滞 +OIR 组予生长发育迟滞及 OIR 联合诱导 于出生 14d 欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁 21d 检测血糖 胰岛素和胰岛素样生长因子 1(insulin likegrowthfactor,igf 1) 的变

2 1117 化 于生后 14d 21d 留取视网膜组织, 检测精氨酸 2 活性及血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,vegf) 的表达 出生 70d, 应用视网膜电流图评估视网膜功能 结果生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠出生体质量明显低于其他两组 ( 均为 P<0.05), 生后 14d 21d, 生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠体质量 胰岛素 IGF 1 值 VEGF 在视网膜表达均显著低于正常对照组 ( 均为 P<0.05), 而精氨酸 2 活性显著高于正常对照组 ( 均为 P<0.05) OIR 组 生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠视网膜毛细血管密度指数增加, 而以生长发育迟滞 +OIR 组小鼠增加最显著 生后 70d 时 OIR 组 生长发育迟滞组小鼠视网膜电流图反应减弱,RmP2 振幅 ( 双极细胞 ) 及 8Hz 频闪振幅 (R8: 视网膜内功能 ) 显著减小, 且生长发育迟滞 +OIR 组小鼠变化更加明显 结论生长发育迟滞小鼠影响 IGF 1 VEGF 的表达及精氨酸 2 的活性, 对视网膜病的发生有显著促进作用 早产儿视网膜病 (retinopathyofprematurity, ROP) 是引起早产婴儿视力损害的主要原因, 出生体质量和出生时胎龄一直被认为是 ROP 最有力的预测因素 [1], 生后氧疗被认为是其主要的附加因素 [2], 有研究证实胰岛素样生长因子 1(insulin likegrowth factor 1,IGF 1) 在人类视网膜的血管发育和增生中起重要作用 [1] 体质量增长与 IGF 1 密切相关 [3] 生后体质量增长作为一个独立因素预测 ROP 的发生在临床工作中日益受到重视 [4 8] 在病态下精氨酸活性增加, 一氧化氮合成酶 (ni tricoxidesynthase,nos) 功能改变, 诱导一氧化氮合成酶 (induciblenitricoxidesynthase,inos) 参与视网膜凋亡, 在氧诱导视网膜病变 (oxygen inducedreti nopathy,oir) 的视网膜损伤中精氨酸可能发挥重要作用 本研究建立与人类 ROP 特征类似的视网膜病变动物模型, 通过观察生后体质量与 IGF 1 和血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor, VEGF) 的变化, 研究早产儿生后体质量不增影响发育中视网膜血管形成的机制 ; 并通过精氨酸 2 的活性来揭示生后体质量增长迟滞与 ROP 视网膜细胞凋亡是否有相关性 1 材料与方法 1.1 实验分组 48 只怀孕 18d 的 C57BL/6 母鼠购自河南省实验动物中心, 随机将孕鼠分为正常对照组 生长发育迟滞组 OIR 组及生长发育迟滞 +OIR 组, 每组孕鼠 12 只, 而每组新生小鼠 30 只, 雌雄不限, 均体健 正常对照组不给予任何干预, 造模前后所有新生大鼠均置于室温 (20±2) 湿度 60% ~ 70% 光照时间白天黑夜各 12h 的环境中, 由母鼠自由喂哺 1.2 制备生长发育迟滞小鼠模型正常对照组给予正常蛋白饮食 ; 生长发育迟滞组及生长发育迟滞 +OIR 组诱导生长发育迟滞小鼠, 自胎龄 18d, 怀孕母鼠均给予等热卡低蛋白饮食 (90g L -1 酪蛋白 ); 每组怀孕母鼠喂养均持续至小鼠生后 21d, 自出生后开始每天清晨给幼鼠称体质量, 以生后 14d 21d 小鼠体质量均低于正常小鼠体质量均值的 10 个百分位以下为生后生长发育迟滞 1.3 制备 OIR 模型参考文献 [9] 制备 OIR 模型, OIR 组及生长发育迟滞 +OIR 组新生鼠与哺乳母鼠一起置于密闭容器内 以体积分数 45.0% 氧气 24h 和体积分数 12.5% 氧气 24h 为 1 个循环, 共 7 个循环 期间用测氧仪间断监测容器内的氧浓度, 每天 4~6 次 每 2d1 次打开容器更换垫料 加食 换水 替换母鼠 在此氧波动环境中饲养 14d 后回到室内空气中饲养并用于实验 OIR 组与生长发育迟滞 + OIR 组小鼠生后在氧诱导环境下饲养, 正常对照组与生长发育迟滞组小鼠生后即在空气中饲养 1.4 方法正常对照组 生长发育迟滞组 OIR 组及生长发育迟滞 +OIR 组每组 30 只小鼠, 分别进行视网膜 HE 染色检查 视网膜电流图分析 视网膜 VEGF 表达及精氨酸 2 活性检测, 同时行血糖 胰岛素和 IGF 1 测定 血糖 胰岛素和 IGF 1 测定于生后 14d 21d( 即 OIR 和诱导生长发育迟滞结束后 ) 清晨, 各组随机取 10 只小鼠抽取尾静脉血液 1mL, 进行血糖 胰岛素和 IGF 1 检测, 用 Accu Chek 血糖仪 (Roche,Mannheim, 德国 ) 检测血糖, 剩余血离心后采集血清, 冷冻在 -80 冰箱中 ; 胰岛素用 ELISAs (CrystalChem.) 方法分析 ;IGF 1 用 ELISAs(Sys tems,minneapolis,mn) 方法分析, 根据说明书进行检测 视网膜电流图分析于小鼠生后 70d, 每组随机选取 10 只小鼠, 用视网膜电流图评估视网膜功能, 测定视杆细胞光反应及双极细胞接收光反应的功能 视网膜 HE 染色每组随机选取 10 只小鼠, 于生后 14d 摘出双侧眼球, 行石蜡切片, 每只眼球每间隔 30μm(5 张切片 ) 取 1 张切片, 在光学显微镜下计数每张切片上突破视网膜内界膜且与视网膜内界膜有联系的内皮细胞核数, 图像分析仪 (LeicaQ5501w) 直接测量视网膜内界膜面积 计算单位视网膜内界膜表面积中所含的突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数, 即得到视网膜毛细血管密度指数 ELISA 法测定视网膜 VGEF 表达及精氨酸 2 活性于生后 14d 21d, 每组随机取 10 只小鼠摘出双侧眼球, 剥离出视网膜组织储存在 -80 以下, 利用上海恒远生物科技有限公司生产的 VEGF 及精氨酸 2ELISA 试剂盒对视网膜 VEGF 表达及精氨酸 2 活性进行测定 1.5 统计学处理采用统计软件 SPSS17.0 处理数据, 各组数据以 x±s 珋表示, 计量资料根据方差齐性检

3 1118 验结果, 多组间比较采用单因素方差分析, 两两比较采用 t 检验 ; 计数资料采用 χ 2 检验, 以 α=0.05 作为检验水准,P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 各组小鼠体质量变化不同时间点各组小鼠体质量变化情况见表 1 由表 1 可知, 生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠出生体质量及生后 14d 21d 体质量均明显低于正常对照组 ( 均为 P< 0.05);OIR 组小鼠各时间点体质量与正常对照组相比, 差异均无统计学意义 ( 均为 P>0.05; 见表 1) 2.2 各组小鼠视网膜毛细血管密度指数变化小鼠视网膜毛细血管密度指数正常对照组 OIR 组 生长发育迟滞组和生长发育迟滞 +OIR 组分别为 12 35% ±10.41% 14.21% ±12.73% 29.37% ± 13 78% 和 87.21% ±21.39%,4 组间小鼠视网膜毛细血管密度指数相比差异有统计学意义 (F=64.51, P<0.001) 进一步两两比较示, 与正常对照组相 比, 生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠视网膜毛细血管密度指数均明显增加 (t= , 均为 P<0 05); 与 OIR 组相比, 生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠视网膜毛细血管密度指数均明显增加 (t= , 均为 P<0.05); 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠视网膜毛细血管密度指数与生长发育迟滞组相比明显增加 (t=6.71,p<0.001) 各组视网膜发育程度不等, 生长发育迟滞组小鼠及生长发育迟滞 +OIR 组小鼠视网膜新生血管明显增多 ( 图 1) 表 1 各组小鼠生后不同时间体质量变化 ( 珋 x±s,m/g) 组别 出生体质量 生后 14d 体质量 生后 21d 体质量 正常对照组 1.8± ± ±3.4 OIR 组 1.8± ± ±3.8 生长发育迟滞组 1.2± ± ±2.9 生长发育迟滞 +OIR 组 1.2± ± ±3.2 F 值 P 值 < 图 1 各组生后 14d 小鼠视网膜发育情况 A: 正常对照组 ;B: 生长发育迟滞组 ;C:OIR 组 ;D: 生长发育迟滞 +OIR 组 2.3 不同时间点各组 VEGF 表达及精氨酸 2 活性测定正常对照组 VEGF 在各时间点无明显变化, OIR 组 生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠在生后 14d 及 21d 视网膜中 VEGF 的表达显著降低 ( 图 2) 生后 14d 21d,OIR 组 生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠精氨酸 2 的活性均较正常对照组增高, 差异均有统计学意义 ( 均为 P< 0.05; 见表 2) 2.4 不同时间点各组视网膜电流图分析生后 70 d 小鼠的视网膜电流图示,OIR 组 生长发育迟滞组小鼠视网膜电流图反应减弱,RmP2 振幅 ( 双极细胞 ) 及 8Hz 频闪振幅 (R8: 视网膜内功能 ) 显著减小 ; 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠变化更加明显 ; 正常对照组未见明显变化 ( 图 3) 图 2 不同时间点各组 VEGF 在视网膜的表达情况 注 : 与正常对照组相比, P<0.05 P<0.01 P<0.001 图 3 生后 70d 小鼠视网膜电流图 (P I: 视杆细胞光反应功能 ; PI: 双极细胞接收光反应功能 ;Ops: 视网膜振荡电位图 ;Flicker: 8Hz R8 刺激视网膜频闪反应 )

4 各组小鼠血糖 胰岛素和 IGF 1 变化各组小鼠血糖 胰岛素和 IGF 1 变化见表 2 生后 14d 时 4 组血糖值间差异有统计学意义 (F=2.67,P= 0 04), 且生长发育迟滞组血糖值均较正常对照组 OIR 组明显降低 (t= , 均为 P<0 05); 生后 21d 时,4 组血糖值间差异有统计学意义 (F= 3 20,P=0.03), 且生长发育迟滞组血糖值明显低于正常对照组 (t=2.33,p<0.05) 生后 14d 时 4 组胰岛素值差异有统计学意义 (F=46 07,P<0.001), 与正常对照组相比, 生长发育迟滞组及生长发育迟滞 +OIR 组胰岛素值明显降低 (t= , 均为 P<0.001); 与 OIR 组相比, 生长发育迟滞组及生长发育迟滞 +OIR 组胰岛素值也明显降低 (t= , 均为 P<0.001); 生长发育迟滞 +OIR 组胰岛素值与生长发育迟滞组相比明显降低 (t=2.55,p<0.05) 在生后 21d 时 4 组胰岛素值间差异有统计学意义 (F=77.80,P<0 001), 与正常对照组相比, 生长发育迟滞组及生长发育迟滞 +OIR 组胰岛素值明显降低 (t= , 均为 P<0.001); 与 OIR 组相比, 生长发育迟滞组及生长发 育迟滞 +OIR 组胰岛素值也明显降低 (t= , 均为 P<0.001); 生长发育迟滞 +OIR 组胰岛素值与生长发育迟滞组相比无明显变化 在生后 14d 时 4 组 IGF 1 值间差异有统计学意义 (F=276.14,P<0.001), 与正常对照组相比,OIR 组 IGF 1 值明显降低 (t=3.67,p<0.01), 生长发育迟滞组及生长发育迟滞 +OIR 组 IGF 1 值显著降低 (t= , 均为 P<0.001); 与 OIR 组相比, 生长发育迟滞组及生长发育迟滞 +OIR 组 IGF 1 值明显降低 (t= , 均为 P<0.001); 生长发育迟滞 +OIR 组 IGF 1 值与生长发育迟滞组相比明显降低 (t=6.30,p<0.001) 在生后 21d 时 4 组 IGF 1 值间差异有统计学意义 (F=324.30,P< 0 001), 与正常对照组相比,OIR 组 生长发育迟滞组及生长发育迟滞 +OIR 组 IGF 1 值均明显降低 (t= , 均为 P<0.001); 与 OIR 组相比, 生长发育迟滞组及生长发育迟滞 +OIR 组 IGF 1 值也明显降低 (t= , 均为 P< 0 001); 生长发育迟滞 +OIR 组 IGF 1 值与生长发育迟滞组相比明显降低 (t=6.21,p<0.001) 表 2 不同生长环境下小鼠血糖 胰岛素 IGF 1 值的变化及精氨酸 2 在视网膜的活性测定 组别 血糖 (c/mmol L -1 ) 胰岛素 (ρ/ng L -1 ) IGF 1(ρ/μg L -1 ) ( 珋 x±s) -1 精氨酸 2/nmol mg -1 protein -1 min 生后 14d 生后 21d 正常对照组 4.09± ± ± ± ± ± ± ±8.91 OIR 组 3.96± ± ± ± ± ± ± ±7.81 生长发育迟滞组 2.11± ± ± ± ± ± ± ±32.72 生长发育迟滞 +OIR 组 2.87± ± ± ± ± ± ± ±23.64 F 值 P 值 <0.001 <0.001 <0.001 < < 讨论 ROP 是早产儿视网膜血管发育异常的血管增生性疾病, 早产儿出生时视网膜血管未发育完善, 必须生后逐渐发育 随着新生儿重症监护水平的提高, 早产儿尤其极早早产儿成活率逐渐升高,ROP 的发病率也相应逐年增多 ROP 的发生表现在两个阶段, 第一阶段为视网膜血管发育延迟 ; 第二阶段为神经视网膜层持续增长呈现不适当的视网膜血管化导致周边视网膜血管缺氧,VEGF 诱导异常视网膜血管生成 在 ROP 发生第一阶段 IGF 1 表达降低, 而在第二阶段 IGF 1 表达则升高 [10] 临床工作中发现早产儿围产期低体质量是视网膜病发病的重要危险因素 本研究发现不同生长环境下视网膜血管发育不同, 生长发育迟滞组小鼠及生长发育迟滞 +OIR 组小鼠视网膜新生血管明显增多 生长发育迟滞及生长发育迟滞 +OIR 组小鼠在生后 21d 血糖值较正常小鼠显著降低, 在生后 14d 21d 时胰岛素值及 IGF 1 值均明显降低, 影响视网膜血管发育, 导致 ROP 的发生危险性增加 在正常的眼部组织中, 血管生成的自身稳定由生成血管的刺激物质 ( 如 VEGF) 和生成血管的抑制 物质 [ 如色素上皮衍生因子 (pigmentepithelium de rivedfactor,pedf)] 之间的平衡调控 [11] 大多数正常组织内抑制因素占主导地位, 血管保持安静状态 PEDF 最初从培养的视网膜色素上皮细胞中分离而来, 显示亲神经活性, 是一种已知最强的血管生成抑制物 PEDF 在体外可抑制血管内皮细胞增殖, 在眼部可抑制血管形成, 如抑制 VEGF 诱导的角膜新生血管形成和缺血诱导小鼠视网膜病变模型中的病理性视网膜新生血管形成 PEDF 通过促使血管内皮细胞程序性死亡发挥其抗血管增殖作用 在眼内, 视网膜色素上皮细胞 神经元 神经胶质细胞 睫状上皮细胞 Mfiler 细胞 内皮细胞均有 VEGF 表达 现有研究表明, 细胞因子 VEGF A 在视网膜异常血管发育中占主要地位 [12] 缺氧是诱发 VEGF 表达增加的主要因素, 缺氧通过活化 VEGF 基因转录 提高 VEGFmRNA 稳定性, 从而上调 VEGF 表达 在 ROP 患者玻璃体发现有较高水平的 VEGF A 表达, 并且在 4 期 ROP 患者视网膜下也有 VEGF A 表达 然而,VEGF AmRNA 在胚胎 20 周才开始表达, 提示缺氧以外的因素也可促使 VEGF A 的表达 本研究发现正常对照组 VEGF 在各时间点无明显变化,OIR 组 生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠在

5 1120 生后 14d 及 21d 视网膜 VEGF 的表达显著降低, 影响视网膜血管正常发育, 引起视网膜异常血管增生, 导致 ROP 的发生 异常血管增生和病理的新生血管形成是 ROP 的主要特征, 视网膜神经细胞功能异常也同样引起 ROP 发生 [13], 在氧诱导的视网膜损伤中精氨酸可能发挥重要作用, 本研究发现 OIR 组 生长发育迟滞组 生长发育迟滞 +OIR 组小鼠视网膜组织精氨酸 2 活性表达在生后 14d 及 21d 显著增高, 提示精氨酸 2 参与 ROP 的发生, 进一步机制有待研究 精氨酸由精氨酸 1 和精氨酸 2 组成, 其中精氨酸 1 分布于视网膜神经胶质细胞 [14], 精氨酸 2 主要分布在水平细胞, 而视网膜其他细胞内部细胞核层也有少量分布 [15], 水平细胞活性传递神经源性 NOS 和参与谷氨酸信号合成 [16 17], 谷氨酸是兴奋毒性神经传递素, 可产生精氨酸 / 鸟氨酸信号通路 [18], 参与 ROP 的形成 本研究结果显示在生后 70d, 生长发育迟滞 + OIR 组 OIR 组 生长发育迟滞组小鼠的视网膜电流图反应减弱,RmP2 振幅 ( 双极细胞 ) 及 8Hz 频闪振幅 (R8: 视网膜内功能 ) 显著减小, 且以生长发育迟滞 +OIR 组更明显 此结果说明不同生存环境 营养状况影响着视网膜的功能, 尤其是营养成分影响着视网膜血管的增生程度 [19] 总之,ROP 除血管增生和血管形成异常外, 神经胶质细胞活化是其另一特点, 生后生长发育迟滞可能是导致 ROP 发生的重要因素之一 参考文献 [1] WIKSTRANDMH,H?RDAL,NIKLASSON A,SMITH L,L?F QVISTC,HELLSTR?M A.Maternalandneonatalfactorsas sociatedwithpoorearlyweightgainandlaterretinopathyof prematurity[j].actapaediatr,2011,100(12): [2] 贺美华, 罗先琼, 杨洋, 聂川, 张嘉雯, 梁志江, 等. 广东省早产儿视网膜病防治现状 [J]. 中华实用儿科临床杂志,2016,31(2): [3] AYDEMIRO,SARIKABADAYIYU,AYDEMIRC,TUNAYZO, TOKL,ERDEVEO,etal.Adjustedpoorweightgainforbirth weightandgestationalageasapredictorofsevereropin VLBW infants[j].eye(lond),2011,25(6): [4] HANSEN PUPPI,L?FQVISTC,POLBERGERS,NIKLASSON A,FELLMAN V,HELLSTR?M A,etal.Influenceofinsulin likegrowthfactoriandnutritionduringphasesofpostnatal growthinverypreterm infants[j].pediatrres,2011,69(5pt 1): [5] HARTMANNJS,THOMPSONH,WANGH,KANEKARS,HU ANGW,BUDD SJ,etal.Expressionofvascularendothelial growthfactorandpigmentepithelial derivedfactorinarat modelofretinopathyofprematurity[j].molvis,2011,17: [6] CHUITY,BISSIGD,BERKOWITZBA,AKULAJD.Refractive Developmentinthe ROP Rat [J].JOphthalmol,2012, 2012: [7] HELLSTROM A,LEYD,HANSEN PUPPI,NIKLASSON A, SMITHL,L?FQVISTC,etal.New insightsintothedevelop mentofretinopathy ofprematurity:importance ofearly weightgain[j].actapaediatr,2010,99(4): [8] BINENBAUM G,YING GS,QUINN GE,DREISEITLS,KARP K,ROBERTSRS,etal.Aclinicalpredictionmodeltostratify retinopathyofprematurityriskusingpostnatalweightgain [J].Pediatrics,2011,127(3):e [9] LOFQVISTC,HANSEN PUPPI,ANDERSSON E,HOLM K, SMITHLE,LEYD,etal.Validationofanew retinopathyof prematurityscreeningmethodmonitoringlongitudinalpost natalweightandinsulinlikegrowthfactori[j].archoph thalmol,2009,127(5): [10] DOWNIELE,PIANTAMJ,VINGRYSAJ,WILKINSON BER KAJL,FLETCHEREL.Neuronalandglialcelchangesare determinedbyretinalvascularizationinretinopathyofpre maturity[j].jcompneurol,2007,504(4): [11] 李亚永, 薛鹏, 王瑜玲, 刘岩, 李玉坤, 江新利. 血浆色素上皮衍生因子及血管内皮生长因子含量与 2 型糖尿病视网膜病变相关性的研究 [J]. 河北医科大学学报,2015,36(6): [12] 谢婉花, 李亚洁, 项道满, 陈锋, 陈正珊, 刘佩珍, 等. 激光治疗早产儿视网膜病患儿手术前后血浆应激因子水平的变化 [J]. 中华实用儿科临床杂志,2014,29(10): [13] HUHTALA T,RYTK?NEN J,JALANKO A,KAASALAINEN M,SALONEN J,RIKONEN R,etal.Nativeandcomplexed IGF 1:Biodistribution and pharmacokinetics in infantile neuronalceroidlipofuscinosis[j].jdrugdeliv,2012,2012: [14] NAKAGAWAY,MASUDAH,ITO R,KOBORIM,WADAM, SHIZUNOT,etal.Aberantkineticsofbonemarow derived endothelialprogenitorcelsinthemurineoxygen induced retinopathymodel[j].investophthalmolvissci,2011,52 (11): [15] HARRISME,MOSKOWITZA,FULTON AB,HANSEN RM. Long term efectsofretinopathyofprematurity(rop)on rodandrod drivenfunction[j].docophthalmol,2011,122 (1): [16] ZHANGW,BABAN B,ROJASM,TOFIGH S,VIRMANISK, PATELC,etal.Arginaseactivitymediatesretinalinflamma tioninendotoxin induceduveitis[j].am JPathol,2009, 175(2): [17] NARAYANAN SP,SUWANPRADID J,SAULA,XU Z,STILL A,CALDWELLRW,etal.Arginase2deletionreducesneuro glialinjuryandimprovesretinalfunctioninamodelofreti nopathyofprematurity[j].plosone,2011,6(7):e [18] IMAGAMAT,OGINOK,TAKEMOTOK,KATOY,KATAOKA H,SUZUKIH,etal.Regulationofnitricoxidegenerationby up regulatedarginaseiinratspinalcordinjury[j].jclin Biochem Nutr,2012,51(1): [19] STAHLA,SAPIEHAP,CONNORKM,SANGIOVANNIJP,CHEN J,ADERMANCM,etal.PPARgammamediatesadirectanti angiogenicefectofω3 PUFAsinproliferativeretinopathy [J].CircRes,2010,107(4):

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