RIDASCREEN® Parvovirus IgG

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祥盛
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1 RIDASCREEN Tetracyclin 酶联免疫法定量检测四环素族订货号 :R3505 体外检测试剂储存温度 2-8 C

2 产品简介 RIDASCREEN Tetracyclin( 订货号 :R3505) 四环素族检测试剂盒, 采用竞争性酶联免疫反应, 定量检测液奶奶粉奶酪蜂蜜肉类和虾类样品中的四环素金霉素罗利环素地美环素土霉素强力霉素和米诺环素试剂盒中含有酶联免疫检测所需的所有试剂, 包括标准品试剂盒足够进行 96 次检测 ( 包括标准测定 ) 定量分析需要使用微孔板酶标仪样品处理 : 检测时间 : 液奶样品 : 稀释奶粉样品 : 溶解和稀释奶酪样品 : 均质和去脂蜂蜜样品 : 稀释肉类样品 : 均质和提取虾类样品 : 均质和提取样品制备 (10 个液奶样品 ):... 约 30 分钟 (10 个奶粉样品 ):... 约 45 分钟 (10 个奶酪样品 ):... 约 90 分钟 (10 个蜂蜜样品 ):... 约 30 分钟 (10 个肉类样品 ):... 约 45 小时 (10 个虾类样品 ):... 约 30 分钟检测过程 ( 孵育时间 ):...1 小时 30 分钟检测限 : 针对四环素和金环素 : ( 以标准品为基础测得 ) 液奶样品... 约 1 ppb 奶粉样品... 约 21 ppb 奶酪样品... 约 4 ppb 蜂蜜样品... 约 4 ppb 肉类样品... 约 2 ppb 虾类样品... 约 1.5 ppb 黄油样品 *... 约 3 ppb 其他乳制品 *... 约 1 ppb 香肠样品 *... 约 5 ppb * 请联系德国拜发公司索要相关的样品处理方法回收率 : 液奶样品... 约 93 % ( 以标准品为基础测得 ) 奶粉样品... 约 109 % 奶酪样品... 约 87 % RIDASCREEN Tetracyclin

3 蜂蜜样品约 97% 肉类样品约 99% 虾类样品... 约 97 % 黄油样品 *... 约 87 % 其他乳制品 *... 约 % 香肠样品 *... 约 97 % * 请联系德国拜发公司索要相关的样品处理方法特异性 : RIDASCREEN Tetracyclin 四环素检测试剂盒的特异性根据与溶解在缓冲液体系中的相应物质的交叉反应确定四环素 % 金霉素... 约 70 % 罗利环素... 约 34 % 地美环素... 约 26 % 土霉素... 约 13 % 米诺环素... 约 2 % 强力霉素约 0.2% 1. 用途 RIDASCREEN Tetracyclin 四环素族检测试剂盒, 采用竞争性酶联免疫反应, 定量检测液奶奶粉奶酪蜂蜜肉类和虾类样品中的四环素金霉素罗利环素地美环素土霉素强力霉素和米诺环素 2. 概要 1948 年 Duggan 首次从放线菌属中的金霉素链霉菌的代谢产物中分离出金霉素, 使其成为四环素家族中第一个抗生素成员在德国, 四环素金霉素和土霉素常被用于兽医领域, 因此也对人类的健康存在隐患欧盟法律编号为 37/2010 的条例, 对各类食品中的四环素 ( 母体及异构体总量 ) 最大残留限量作出了如下规定 : 肉和奶中不得超过 100 ppb 3. 检测原理检测的基础是抗原抗体反应微孔板包被有一种四环素 - 蛋白连接物加入标准品样品溶液和四环素抗体游离的和微孔板上固定的四环素竞争四环素抗体结合位点 ( 竞争性酶免疫分析 ) 在洗涤步骤之后加入酶标记的二级抗体, 二级抗体会结合微孔板上的四环素抗体没有结合的酶标记抗体在洗涤步骤中再次被除去将底物 ( 过氧化脲 ) 和发色剂 ( 四甲基对二氨基联苯 ) 加入到孔中结合的酶连接物将发 4 RIDASCREEN Tetracyclin

4 色剂转化为蓝色的产物加入反应终止液后使颜色由蓝色转变为黄色在 450 nm 处测量吸光度值与样品中的四环素浓度成反比 4. 试剂盒组份每一个盒中的试剂足够进行 96 个试验 ( 包括标准测定 ), 盒中的组份如下 : 1 x 96 孔微孔板 (12 条每条 8 孔 ) 包被有四环素 - 蛋白连接物 6 x 标准品浓缩液 ( 每瓶 1.3 ml) 0 ppb( 零标准品 ),0.5 ppb,1.5 ppb,3 ppb,6 ppb,18 ppb 四环素水溶液 1 x 酶连接物 (10 ml)... 红色瓶盖过氧化物酶标记二级抗体即用型 1 x 四环素抗体 (6 ml)... 黑色瓶盖即用型 1 x 底物 / 发色剂 (10 ml)... 棕色瓶盖底物 / 发色剂溶液, 红色, 含有四甲基对二氨基联苯 1 x 反应终止液 (14 ml)... 黄色瓶盖含 1 N 的硫酸 1 x 缓冲液 (60 ml), 即用型标准品和样品稀释缓冲液 1 x 洗涤缓冲液 ( 盐 ) 用于制作 10 mm 的磷酸缓冲液,PH 7.4 含有 0.05 % Tween 另需的试剂和设备 5.1. 设备 : 微孔板酶标仪 (450 nm) 离心机振荡器 ( 漩涡混合器 ) 巴斯德移液管刻度移液管可调式 20 µl µl 和 µl 微量移液器针对奶酪和奶粉样品 : 温控水浴 RIDASCREEN Tetracyclin

5 针对奶酪样品槽纹过滤器针对蜂蜜样品超声波清洗器针对肉类样品 : 绞肉器均质器 (Stomacher 均质器,Ultra-Turrax 匀浆机 ) 振荡器 5.2. 试剂 : 针对蜂蜜肉类和虾类样品 : 20 mm PBS 缓冲液 :0.55 g NaH 2 PO 4 x H 2 O + 2,85 g Na 2 HPO 4 x 2 H 2 O + 9 g NaCl, 用氢氧化钠调节 ph 至 7.4, 加入蒸馏水定容至 1000 ml 针对奶粉样品 : 去离子水针对奶酪样品 : 甲醇 (100 %) 针对肉类样品 : 正己烷 6. 操作者应该注意之事项建议由经过相关培训的实验人员进行本试剂盒的使用操作请严格按照说明书的要求使用本试剂盒标注品中含有四环素使用时请小心反应终止液含 1 N 硫酸 (R36/38, S2-26) 7. 储存条件保存试剂盒于 2-8 C, 不要冷冻将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封储存于 2-8 C 条件下发色剂对光敏感, 因此要避免直接暴露在光线下 6 RIDASCREEN Tetracyclin

6 对过了有效期 ( 见试剂盒标签 ) 的试剂盒不再提供任何质量保证不能交叉使用不同批号的盒中试剂 8. 试剂变质的迹象发色剂在使用前颜色变蓝零标准品的吸光度值小于 0.6 (A 450 nm < 0.6) 9. 样品处理样品应冷藏保存 9.1. 液奶样品脱脂液奶样品 : 脱脂奶类样品按比例 1:10(1+9) 用缓冲液稀释 ( 例如 :50 µl 奶类样品 µl 缓冲液 ) 脂肪液奶样品 : 脂肪牛奶样品离心 :3000 g / 10 min / 10 C( 如果没有冷冻离心机, 奶类样品应在离心前降温至 10 C) 去除上层脂肪 ( 例如 : 用巴斯德移液管吸取 ), 脱脂奶类样品按比例 1:10 (1+9) 用缓冲液稀释 ( 例如 :50 µl 奶类样品 µl 缓冲液 ) 9.2. 奶粉样品称取 10 g 奶粉, 加入预热 (60 C) 的去离子水定容到 100 ml 振荡 10 分钟或者更长的时间, 让奶粉彻底溶解 ( 针对难以溶解的奶粉, 请将其放置在超声波水浴中处理 3 分钟 ) 离心 :3000 g / 10 min / 10 C 去除上层脂肪 ( 例如 : 用巴斯德移液管吸取 ), 脱脂奶类样品按比例 1:10 (1+9) 用缓冲液稀释 ( 例如 :50 µl 奶类样品 µl 缓冲液 ) RIDASCREEN Tetracyclin

7 9.3 奶酪样品向 15 g 奶酪样品中加入 30 ml 10% 的甲醇 (v/v) 使用 stomacher 均质器, 振荡器或 Ultra-Turrax 匀浆机对样品进行均质处理将均质好的样品转移到一支 50 ml 的离心管中将样品在约 40 C 的水浴中孵育 10 分钟, 并在孵育过程中轻轻振荡样品三次离心 :15 分钟 / 3000 g / 4 C 之后请取 1 ml 中间层, 加入到 1.5 ml 容量的离心管中离心 :5 分钟 / g / 室温 (20-25 C) 将上清液 1:10(1+9) 在缓冲液中进行稀释或者使用塑料棒去除上层的脂肪层使用槽纹过滤器对下层进行过滤将滤液 1:10(1+9) 在缓冲液中进行稀释最后 9.4. 蜂蜜样品称取 1 g 蜂蜜样品于 80 ml 磨口玻璃容器中按比例 1:50(1+49) 用 20 mm PBS 缓冲液,pH 7.4( 参见 5.2.) 稀释超声波浴池中处理 5 分钟充分混合 2 分钟 ( 用漩涡混合器 ) 检测前回转摇晃样品容器 9.5. 肉类样品粉碎肉类样品 ( 绞肉器均质器 Stomacher 均质器或 Ultraturrax 匀浆机 ) 取 1 g 均质肉类样品, 加入 9 ml 20 mm PBS 缓冲液 ph 7.4( 参见 5.2.) 振荡, 让样品和缓冲液充分混合振荡器中提取 10 分钟离心 :10 min / 4000 g / 室温 (20-25 C) 将 1 ml 上清液收集于另一容器中加入 2 ml 正己烷振荡 10 秒钟离心 :10 min / 4000 g / 室温 (20-25 C) 8 RIDASCREEN Tetracyclin

8 9.6. 肉类样品粉碎肉类样品 ( 绞肉器均质器 Stomacher 均质器或 Ultraturrax 匀浆机 ) 取 1 g 均质肉类样品, 加入 9 ml 20 mm PBS 缓冲液 ph 7.4( 参见 5.2.) 振荡, 让样品和缓冲液充分混合振荡器中提取 10 分钟离心 :10 min / 4000 g / 室温 (20-25 C) 将 1 ml 上清液收集于另一容器中请根据您的需求向德国拜发公司索要其他样品例如黄油其他乳制品 ( 鲜奶酪, 原味 / 水果酸奶奶油 ( 含 10/24% 脂肪 ) 和香肠的样品处理方法 10. 检测步骤检测前的准备标准品为浓缩液, 即用型四环素标准品的制备步骤为 : 每 50 µl 标准品浓缩液用 450 µl 即用型缓冲液 ( 标准品稀释缓冲液 ) 稀释并充分混合应使用玻璃容器, 不要使用塑料容器标准品 1:50 µl 标准品浓缩液 (0 ppb) µl 缓冲液 1* 0 ppb 标准品 2:50 µl 标准品浓缩液 (0.5 ppb) µl 缓冲液 1* 0.05 ppb 标准品 3:50 µl 标准品浓缩液 (1.5 ppb) µl 缓冲液 1* 0.15ppb 标准品 4:50 µl 标准品浓缩液 (3 ppb) µl 缓冲液 1* 0.3 ppb 标准品 5:50 µl 标准品浓缩液 (6 ppb) µl 缓冲液 1* 0.6 ppb 标准品 6:50 µl 标准品浓缩液 (18 ppb) µl 缓冲液 1* 1.8 ppb 每次检测使用的标准品必须新鲜配制洗涤缓冲液是 PBS-Tween 缓冲液, 为此试剂盒中提供了一袋洗涤缓冲液盐 ( 参见 4.) 使用 1 l 蒸馏水溶解一袋洗涤缓冲液盐制得洗涤缓冲液制备好的洗涤缓冲液可在 2-8 C 下保存大约 4-6 周时间或者 : 用 100 ml 蒸馏水溶解袋中的洗涤缓冲液盐, 得到 10 倍的洗涤缓冲液盐浓缩液, 此溶液能在室温 (20-25 C) 下储存 8-12 周使用时, 用 9 份蒸馏水溶解 1 份此浓缩液得到洗涤缓冲液 RIDASCREEN Tetracyclin

9 10.2. 检测操作仔细洗板非常重要避免在操作过程中微孔出现干燥 1. 将足够标准品和样品检测所需数量的孔条插入微孔板架, 均做两个平行实验记录下标准品和样品的位置 2. 将 50 µl 标准品及处理好的样品溶液加到相应的微孔中, 均做两个平行实验 3. 向每一个微孔中加入 50 µl 四环素抗体溶液, 充分混合, 在室温条件下 (20-25 C) 孵育 1 小时 4. 倒出孔中的液体, 将微孔板架倒置在吸水纸上拍打 ( 每轮拍打 3 次 ) 以保证完全除去孔中的液体每孔加入 250 µl 洗涤缓冲液 ( 参见 10.1.) 洗涤微孔上述操作重复进行两遍 5. 向每一个微孔中加入 100 µl 酶连接物溶液, 充分混合, 在室温条件下 (20-25 C) 孵育 15 分钟 6. 倒出孔中的液体, 将微孔板架倒置在吸水纸上拍打 ( 每轮拍打 3 次 ) 以保证完全除去孔中的液体每孔加入 250 µl 洗涤缓冲液 ( 参见 10.1.) 洗涤微孔上述操作重复进行两遍 7. 向每一个微孔中加入 100 µl 底物 / 发色剂 ( 棕色瓶盖 ), 充分混合后在室温 (20-25 C) 条件下暗处孵育 15 分钟 8. 向每一个微孔中加入 100 µl 反应终止液, 充分混合在加入反应终止液后 30 分钟内于 450 nm 处测量吸光度值 11. 结果评估请使用 R-Biopharm 德国拜发公司专门为 RIDASCREEN 系列产品设计的应用软件 RIDA SOFT Win( 订货号 :Z9999) 来进行结果分析关于标准曲线请参看试剂盒中附带的质保证书以下是没有使用软件的计算方法 : 标准品的吸光度值 ( 或样品 ) x 100 = % 吸光度比值零标准品的吸光度值吸光度值以百分比表示, 因此零标准品等同于 100 % 计算标准品相应的比值, 并绘成一个与四环素 [µg/kg] 相关的半对数坐标系统的曲线图 10 RIDASCREEN Tetracyclin

10 为了真实反映四环素的浓度 µg/kg, 从校正曲线上读出的浓度值必须乘以相对应样品的稀释倍数按照说明书中给出的方法进行操作, 可得到针对四环素和金霉素的稀释倍数 : 液奶样品奶粉样品奶类酪样品蜂蜜样品肉类样品虾类样品以上信息是基于我们现有知识的基础上对我们的产品及其相关应用的说明而并非对产品的任何特定性能或特定使用目的进行担保 R-Biopharm 德国拜发公司不承担除试剂基本品质之外的任何责任除因产品使用而造成的直接或间接损坏及损失外, 其它有缺陷的试剂盒可退换 RIDASCREEN Tetracyclin

Microsoft Word - R3103 Strepto k 链霉素和双氢链霉素 v2

Microsoft Word - R3103 Strepto k 链霉素和双氢链霉素 v2 RIDASCREEN Streptomycin 酶联免疫法定量检测链霉素和双氢链霉素订货号 :R3103 体外检测试剂储存温度 2-8 C RIDA 和 RIDASCREEN 均为 R-Biopharm 德国拜发公司的注册品牌标志制造商 :R-Biopharm AG, Darmstadt, 德国 R-Biopharm AG 拥有 ISO 9001 认证 RIDA and RIDASCREEN are