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- 樽冥 尹
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1 第 ３５ 卷第 ８ 期 环 境 科 学 学 报 Ａｃｔａ Ｓｃｉｅｎｔｉａｅ Ｃｉｒｃｕｍｓｔａｎｔｉａｅ ２０１５ 年 ８ 月 Ｖｏｌ ３５ Ｎｏ ８ Ａｕｇ ２０１５ ＤＯＩ １０ １３６７１ ｊ ｈｊｋｘｘｂ ２０１４ １０１３ 何腾霞 李振轮 ２０１５ 耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌的分离 筛选与鉴定 Ｊ 环境科学学报 ３５ ８ ２３９３ ２３９９ Ｈｅ Ｔ Ｘ Ｌｉ Ｚ Ｌ ２０１５ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｙｐｏｔｈｅｒｍｉａ ｈｉｇｈｌｙ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｎｉｔｒｉｔｅ ｄｅｎｉｔｒｉｆｙｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ Ｊ Ａｃｔａ Ｓｃｉｅｎｔｉａｅ Ｃｉｒｃｕｍｓｔａｎｔｉａｅ ３５ ８ ２３９３ ２３９９ 耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌的分离 筛选与鉴定 何腾霞 李振轮 西南大学资源环境学院 土壤多尺度界面过程与调控重庆市重点实验室 重庆 ４００７１６ 收稿日期 ２０１４ １０ ０２ 修回日期 ２０１４ １１ １６ 录用日期 ２０１４ １２ ２０ 摘要 在 １０ 条件下 以亚硝酸钠为唯一氮源从长期淹水的冬水田中分离得到了 １２ 株亚硝酸盐型反硝化细菌 采用乙酸钠为唯一碳源 以高 效去除亚硝酸盐氮和总氮且产生较低生物量氮为主要指标筛选出了一株反硝化能力最强的亚硝酸盐型反硝化细菌 命名为 Ｙ １２ 研究发现 该 菌在 ２０ 条件下 对亚硝酸盐氮和总氮的去除率分别为 ９９ ８７ 和 ５７ ７４ 产生了 ３ ２５ ｍｇ Ｌ １ 的生物量氮 在 １５ 条件下 对亚硝酸盐氮和 总氮去除率分别为 ９９ ４８ 和 ５１ ５３ 产 生 了 ３ ００ ｍｇ Ｌ １ 的 生 物 量 氮 对 其 １６Ｓ ｒｒｎａ 基 因 序 列 进 行 分 析 发 现 该 菌 与 恶 臭 假 单 胞 菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ 的同源性达到 ９９ 对其特异性磷脂脂肪酸进行分析 发现与恶臭假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ ｂｉｏｔｙｐｅ Ａ 的相似指数为 ０ ４６９ 初步鉴定为恶臭假单胞菌 关键词 耐冷 亚硝酸盐 反硝化细菌 除氮 文章编号 ０２５３ ２４６８ ２０１５ ０８ ２３９３ ０７ 中图分类号 Ｘ１７２ 文献标识码 Ａ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｙｐｏｔｈｅｒｍｉａ ｈｉｇｈｌｙ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｎｉｔｒｉｔｅ ｄｅｎｉｔｒｉｆｙｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ ＨＥ Ｔｅｎｇｘｉａ ＬＩ Ｚｈｅｎｌｕｎ Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｓｏｉｌ Ｍｕｌｔｉｓｃａｌｅ Ｉｎｔｅｒｆａｃｉａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４００７１６ Ｒｅｃｅｉｖｅｄ ２ Ｏｃｔｏｂｅｒ ２０１４ ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｉｎ ｒｅｖｉｓｅｄ ｆｏｒｍ １６ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１４ ａｃｃｅｐｔｅｄ ２０ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１４ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ａｔ １０ ｔｗｅｌｖｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ ｎｉｔｒｉｔｅ ｄｅｎｉｔｒｉｆｙｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ ｗｉｔｈ ｓｏｄｉｕｍ ｎｉｔｒｉｔｅ ａｓ ｔｈｅ ｓｏｌｅ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｓｏｕｒｃｅ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｌｏｎｇ ｔｅｒｍ ｆｌｏｏｄｅｄ ｐａｄｄｙ ｓｏｉｌ Ｔｈｅ ｓｔｒａｉｎ ｎａｍｅｄ Ｙ １２ ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｔｏ ｂｅ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｉｎ ｒｅｍｏｖｉｎｇ ｎｉｔｒｉｔｅ ａｎｄ ｔｏｔａｌ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｗｉｔｈ ｌｏｗ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏｍａｓｓ ｎｉｔｒｏｇｅｎ Ｔｈｅ ｓｔｒａｉｎ ｃａｎ ｒｅｍｏｖｅ ｎｉｔｒｉｔｅ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ａｎｄ ｔｏｔａｌ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｕｐ ｔｏ ９９ ８７ ａｎｄ ５７ ７４ ａｔ ２０ ９９ ４８ ａｎｄ ５１ ５３ ａｔ １５ ａｎｄ ｐｒｏｄｕｃｅ ｂｉｏｍａｓｓ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｏｆ ３ ２５ ｍｇ Ｌ １ ａｔ ２０ ａｎｄ ３ ００ ｍｇ Ｌ １ ａｔ １５ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ Ｔｈｉｓ ｓｔｒａｉｎ ｗａｓ ｆｕｒｔｈｅｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｔｏ ｂｅ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｕｔｉｄａ ｏｗｉｎｇ ｔｏ ９９ ｈｏｍｏｌｏｇｙ ｗｉｔｈ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ ｂｙ ｉｔｓ １６Ｓ ｒｒｎａ ｇｅｎｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ０ ４６９ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｉｎｄｅｘ ｗｉｔｈ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ ｂｉｏｔｙｐｅ Ａ ｂｙ ｉｔｓ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ａｎａｌｙｓｉｓ Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ｈｙｐｏｔｈｅｒｍｉａ ｎｉｔｒｉｔｅ ｄｅｎｉｔｒｉｆｙｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｒｅｍｏｖａｌ １ 引言 Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ 随着人类生产生活的快速发展 高氮污染已成 为全世界高度关注的重大问题 Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ ２０１４ 李焱生等 ２０１０ 其中 高亚硝酸盐氮会严重影响 人与动物 的 生 命 活 动 甚 至 导 致 死 亡 杨 小 龙 等 ２０１１ Ｋｒｏｕｐｏｖａ ｅｔ ａｌ ２００５ 因此 如何减少或去除 水体中的亚硝酸盐氮成为当前人类亟待解决的一 个问题 在去除亚硝酸盐氮污染的众多方法中 生物 除氮是最行之有效且绿 色 环 保 的 方 法 之 一 周 超 等 ２０１１ 赵翠娟等 ２０１３ 然而 晚秋至来年初春 期间 生物法去除亚硝酸盐氮因气温低效果不明显 前人研究表明 当温度低于 １０ 时会强烈地抑制硝 化作用 和 反 硝 化 作 用 的 进 行 Ｃａｒｒｅｒａ ｅｔ ａｌ ２００３ Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ Ｃａｂａｌｌｅｒｏ ｅｔ ａｌ ２０１２ 而目前国内外研究 报道的反硝化除氮细菌温度一般都在 ３０ 左 右 Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ ２０１２ Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ ２０１２ 辛 玉 峰 等 ２０１１ 金敏等 ２００９ 还未见耐冷高效亚硝酸盐型 基金项目 国家科技支撑计划项目 Ｎｏ ２０１３ＢＡＪ１１Ｂ０３ Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｋｅｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｒ Ｄ Ｐｒｏｇｒａｍ Ｎｏ ２０１３ＢＡＪ１１Ｂ０３ 作者简介 何腾霞 １９８８ 女 Ｅ ｍａｉｌ ｈｅｔｅｎｇｘｉａ５１５３ １６３ ｃｏｍ 通讯作者 责任作者 Ｅ ｍａｉｌ ｌｉｚｈｌｕｎ４７４０ ｓｉｎａ ｃｏｍ Ｂｉｏｇｒａｐｈｙ ＨＥ Ｔｅｎｇｘｉａ １９８８ ｆｅｍａｌｅ Ｅ ｍａｉｌ ｈｅｔｅｎｇｘｉａ５１５３ １６３ ｃｏｍ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ Ｅ ｍａｉｌ ｌｉｚｈｌｕｎ４７４０ ｓｉｎａ ｃｏｍ
2 2394 环境科学学报 35 卷 反硝化细菌的研究报道. 基于此, 本研究在 10 条 件下, 从长期淹水的冬水田中分离出 12 株耐冷亚硝 酸盐型反硝化细菌, 通过检测 12 株亚硝酸盐型反硝 化细菌对亚硝酸盐氮 总氮的去除效率及合成的生 物量氮含量, 筛选出一株耐冷高效亚硝酸型反硝化 细菌 Y 12, 该菌对去除低温水体中亚硝酸盐氮具有 很好的研究意义及应用前景. 2 材料与方法 (Material and methods) 2.1 材料 样品采于贵州 ( 海拔 2494 m, 北纬 N , 东经 E ) 长期淹水的冬水田. 2.2 培养基 富集培养基 ( 陈薇等,2011): 葡萄糖 5 g,nacl 1 g,nano 2 2 g,mgso g,kh 2 PO 4 4 g,k 2 HPO 4 6 g, 超纯水水定容至 1 L, 调 ph 至 7.2. 根据反硝化细菌能够还原亚硝酸盐, 使 ph 值 升高, 当 ph 大于 7.6 时 BTB 培养基变为蓝色 ( 杨小 龙等, 2011 ) 的原理设计 BTB 选择性培养基 (Bromothymol Blue,BTB) ( 邵晴等,2008):NaNO 2 1 g,kh 2 PO 4 1 g,fecl 2 6H 2 O 0.5 g,cacl 2 7H 2 O 0.2 g,mgso 4 7H 2 O 1 g, 琥珀酸钠 8.5 g, 琼脂 20 g,btb (1.5% 溴百里酚蓝溶于无水乙醇 )1 ml, 超纯水定容 至 1 L, 调 ph 至 7.0. 反硝化培养基 ( Song et al.,2011): 乙酸钠 4.72 g,nano g,kh 2 PO g,na 2 HPO g, MgSO 4 7H 2 O 0.1 g, 超纯水定容至 1 L, 调 ph 至 7.2. LB 培养基 ( 陈薇等,2011): 牛肉膏 3 g, 蛋白胨 10 g,nacl 5 g, 蒸馏水定容至 1 L( 固体加 2.0% 的琼 脂 ), 调 ph 至 7.2. 以上所有培养基均在 0.11 MPa 121 下灭菌 30 min, 冷却后备用. 2.3 耐冷亚硝酸盐型反硝化细菌的富集 分离和 纯化 取 1 g 样品接入 100 ml 富集培养基中, r min -1 下恒温振荡培养 2 d, 取培养液 5 ml 至 100 ml 新鲜富集培养基中, 如此反复 3 次. 将富集 培养物分别取 μl 涂布于 BTB 平板培养 基上,10 培养 2 ~ 3 d, 挑取能使培养基变蓝的单 菌落于新的 BTB 培养基上进行划线培养, 纯化 3 ~ 5 次后, 获得纯化的反硝化菌株, 接种于 LB 斜面培养 基上, 编号,15 培养 1 d,4 保存备用. 2.4 耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌的筛选 用灭菌的 10 μl 枪头从 10 培养的平板培养 基上挑取一个单菌落于反硝化培养基中, 于 r min -1 条件下振荡培养, 每 12 h 测定各培养液 的 OD 600 值, 制作各细菌的生长曲线 ; 将处于对数生 长期的含约 CFU 的各菌悬液分别转接到新 的反硝化培养基中, 以不接菌的反硝化培养基为对 照, 于 r min -1 条件下振荡培养, 每 24 h 分别检测实验组和对照组反硝化培养基中亚硝态 氮 总氮 细菌 OD 600 及离心除菌后培养液中的总氮 含量, 以亚硝态氮和总氮去除率最高且合成生物量 氮少为主要指标, 筛选耐冷高效亚硝酸盐型反硝化 细菌. 用以下公式计算亚硝态氮和总氮的去除率 : R = (T 1 -T 2 ) / T 1 100% (1) 式中,R 为反硝化培养基中亚硝态氮或总氮的去除 率,T 1 为反硝化培养基中亚硝态氮或总氮的初始浓 度 (mg L -1 ),T 2 为反硝化培养基中亚硝态氮或总氮 的最终浓度 (mg L -1 ). 生物量氮通过氮平衡计算获得, 其公式为 : T = T 2 -T 3 (2) 式中,T 为生物量氮 (mg L -1 ),T 2 为反硝化培养基中 总氮的终浓度 (mg L -1 ),T 3 为通过离心去除菌体后 培养液中总氮的终浓度 (mg L -1 ). 2.5 耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌的耐冷试验 将含约 CFU 的 Y 12 菌株悬液转接到 新的反硝化培养基中, 于 r min -1 条件下振 荡培养 48 h 后, 分别检测亚硝酸氮 总氮的去除率 及生物氮含量. 总氮浓度采用碱性过硫酸钾消解紫外分光光 度法测定 ( 国家环境保护局,2012.), 亚硝态氮浓度 采用 N ( 1 萘基 ) 乙二胺光度法测定 ( 魏复盛等, 2002), 菌体生长量采用 OD 600 光电比浊法测定. 2.6 细菌的鉴定 特异性磷脂脂肪酸 ( Phospholipid fatty acid, PLFA) 鉴定 : 对所培养的纯菌进行皂化 甲基化 萃 取及碱洗涤后获得上机样品, 用 Agilent 6850 气相 色谱仪 ( FID 检测器 ) 分析 PLFA 的成分. 色谱条件 为 :(25.0 m 200 μm 0.33 μm), 进样量 1 μl, 分流 比 10 1, 载气 (H 2 ), 尾吹气高纯 N 2, 助燃气空气, 流 速 0.8 ml min -1. 二阶程序升高柱温 :170 起始,5 min -1 升至 260, 而后以 40 min -1 升温至 310, 维持 1.5 min. 各成分脂肪酸通过 MIDI Sherlock 微生物鉴定系统 ( Version 6. 1, MIDI, Inc., Newark, DE) 进行, 标准品购买于美国 MIDI 公司的 C9 ~ C20 的脂肪酸甲酯,PLFA 用 C19:0 做内标换算 PLFA 的
3 ８期 何腾霞等 耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌的分离 筛选与鉴定 ２３９５ 绝对含量 为两类 ①对反硝化培养基适应能力强 生长量大 线 于 ２０ 培养 ４８ ｈ 后观察菌落形态 并挑取少量 Ｙ ９ 和 Ｙ １２ 菌株 ②对反硝化培养基适应能力弱 形态学鉴定 挑取单菌落于 ＢＴＢ 培 养 基 上 划 的菌体进行革兰氏染色和电镜扫描观察 １６Ｓ ｒｒｎａ 序列测定及同源性分析 以纯化细菌 的基 因 组 ＤＮＡ 为 模 板 采 用 通 用 引 物 ２７Ｆ ５ ＡＧＡＧＴＴＴＧＡＴＣＣＴＧＧＣＴＣＡＧ ３ 和 出现平台期晚的菌株 包括 Ｙ １ Ｙ ２ Ｙ ６ Ｙ ７ Ｙ ８ 生长量少 出现平台期早的菌株 包括 Ｙ ３ Ｙ ４ Ｙ ５ Ｙ １０ 和 Ｙ １１ 菌株 １４９２Ｒ ５ ＧＧＴＴＡＣＣＴＴＧＴＴＡＣＧＡＣＴＴ ３ 进行 １６Ｓ ｒｄｎａ 聚合 酶链式反应 ＰＣＲ 扩增 扩增体系 ５０ μｌ 模板 ２ μｌ ２７Ｆ 和 １４９２Ｒ 各 ２ μｌ ２ Ｔａｑ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ ２５ μｌ 无菌水 １９ μｌ 扩增程序 ９４ 预变性 ５ ｍｉｎ ９４ 变性 １ ｍｉｎ ５０ ５ 退火 ３０ ｓ ７２ 延伸 １ ｍｉｎ 循 环 ３０ 次 ７２ 延伸 １０ ｍｉｎ 扩增完成后对目的条带 进行切胶回收 纯化后将其连至 ｐｍｄ２０ Ｔ 载体 转 化到 Ｅ ｃｏｌｉ Ｔｒａｎｓ１ Ｔ１ 宿主细胞中 挑取阳性转化子 扩大培养后送公司测序 将其测序结果在 ＮＣＢＩ 网 站进行 Ｂｌａｓｔ 比对分析 ３ ３ １ 结果 Ｒｅｓｕｌｔｓ 耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌的富集 分离 和纯化 图１ １２ 株亚硝酸盐型反硝化细菌在反硝化培养基中的生长 曲线 Ｆｉｇ １ Ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ １２ ｎｉｔｒｉｔｅ ｄｅｎｉｔｒｉｆｙｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ 通过比较 １２ 株耐冷反硝化细菌对亚硝酸盐氮 采用富集培养和酸碱指示剂相结合的方法进 的去除效果发现 图 ２ ２４ ｈ 内 Ｙ ４ 对亚硝酸盐氮 为 Ｙ １ Ｙ １２ 对其中反硝化活性较高的 ８ 株菌进行 ｍｇ Ｌ １ 去除率为 ８２ ２８ Ｙ １ 对亚硝酸盐氮的去 行分离和纯化 共获得 １２ 株反硝化细菌 分别编号 了 １６Ｓ ｒｒｎａ 鉴 定 发 现 有 ７ 株 菌 为 假 单 胞 菌 属 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ 其 中 ２ 株 菌 与 蒙 氏 假 单 胞 菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｏｎｔｅｉｌｉｉ 的同源性达到 ９９ １ 株菌 的去除量 最 大 可 使 其 从 １５ ３０ ｍｇ Ｌ １ 降 至 ２ ７１ 除效果最慢 仅从 １５ ２６ ｍｇ Ｌ １ 降至 ９ ３４ ｍｇ Ｌ １ 去 除率只有 ３８ ８１ ４８ ｈ 内 Ｙ １ Ｙ ２ 和 Ｙ ３ 菌株对 亚硝 酸 盐 氮 的 去 除 率 分 别 为 ９８ ２９ ９６ ９９ 和 与托拉斯假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｔｏｌａａｓｉｉ 的同源性 ９６ ２６ 其余菌株对亚硝酸盐氮的去除效率均高达 ｐｕｔｉｄａ 的同源性达到 ９９ １ 株菌与恶臭假单胞菌 ９９ ５３ ７２ ｈ 内 所有菌株对亚硝酸盐氮的去除率 达到 ９９ ３ 株 菌 与 恶 臭 假 单 胞 菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ 的同源性只有 ９６ 这 ７ 株菌落形态相似 １ 株菌为 ９９ 以上 其中 Ｙ １２ 对亚硝酸盐氮的去除率高达 节杆菌属 与阿氏节杆菌 Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ａｒｉｌａｉｔｉ 的同 源性达到 ９９ 这些细菌都具有一定的反硝化活性 ３ ２ 耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌的筛选 细菌在反硝化培养基中生长繁殖要经过 ４ 个时 期 即延滞期 对数生长期 稳定期和衰亡期 当细 菌生长处于对数期时其个体形态与生理特性都比 较稳定 且对环境适应能力强 为了筛选出耐冷高效 亚硝酸盐型反硝化细菌 需要将生长处于对数期的 好氧反硝化细菌接入新的反硝化培养基中 因此 挑取了 １２ 株纯化后的单菌落于反硝化培养基中 测 定各细菌的 ＯＤ ６００ 值 绘制其生长曲线 结果如图 １ 所示 根据该生长曲线 将 １２ 株反硝化细菌大致分 图２ １２ 株菌对亚硝酸盐的去除效果 Ｆｉｇ ２ Ｎｉｔｒｉｔｅ ｒｅｍｏｖａｌ ｒａｔｅ ｏｆ １２ ｓｔｒａｉｎｓ
4 ２３９６ 环 境 科 学 学 ３５ 卷 报 均达 ９９ 以上 但各菌株对亚硝酸盐氮的去除速率 具有差异性 图 ２ １２ 株菌对总氮的去除量表现出了显著差异性 ４８ ｈ 内 Ｙ １２ 对总氮去除率最高 去除率为 ５４ ３８ ７２ ｈ 内 有 ５ 株反硝化细菌 Ｙ ７ Ｙ ９ Ｙ １０ Ｙ １１ 和 Ｙ １２ 对总氮去除率较高 均达到了 ５０ 以上 这 ５ 株细 菌 对 总 氮 的 去 除 能 力 显 著 强 于 Ｚｈｅｎｇ 等 ２０１１ 分离的好氧反硝化细菌 Ｓ１ １ 实验条件 ２０ ５ ｄ １６０ ｒ ｍｉｎ １ 总氮去除率为 ３１ ８９ Ｙ １２ 对总氮去除率最大 能使总氮由 １５ ３７ ｍｇ Ｌ １ 降至 ６ ５０ ｍｇ Ｌ １ 去除率高达 ５７ ７４ 图 ３ 余下菌株 对总氮的去除能力较弱 Ｙ ５ 对总氮的去除率最低 图４ 只有 ２５ １３ Ｆｉｇ ４ １２ 株菌的生物量氮含量 Ｂｉｏｍａｓｓ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｏｆ １２ ｓｔｒａｉｎｓ 高 水体的透明度降低 由此可见 采用生物法除氮 时生物氮含量不容忽视 因此 筛选出生物量氮合 成少的亚硝酸盐型反硝化细菌对污水处理具有重 要意义 综合比较 １２ 株反硝化细菌对亚硝酸盐氮和总 氮去除率 同化作用合成的生物量氮含量及在反硝 化培养基中的生长速度 最终筛选出了一株耐冷高 效亚硝酸盐型反硝化细菌 命名为 Ｙ １２ 该菌在 ７２ ｈ 内可 将 亚 硝 酸 盐 氮 由 １５ ２２ ｍｇ Ｌ １ 降 至 ０ ０２ ｍｇ Ｌ １ 去除率为 ９９ ８７ 总氮由 １５ ３７ ｍｇ Ｌ １ 降 图３ Ｆｉｇ ３ １２ 株菌对总氮的去除效果 Ｔｏｔａｌ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｒｅｍｏｖａｌ ｒａｔｅ ｏｆ １２ ｓｔｒａｉｎｓ 通过氮平衡的方法计算出了菌体生长所合成 的生物量氮含量 结果如图 ４ 所示 其中 Ｙ １ Ｙ ５ 生物量氮合成量较大 该类菌对亚硝酸盐氮和总氮 的去除可能主要是将它们转化为了生物量氮或含 氮物质的代谢产物 导致总氮下降不显著 相反 Ｙ ７ Ｙ １１ 和 Ｙ １２ 三株反硝化细菌合成的生物量氮含 至 ６ ５０ ｍｇ Ｌ １ 去 除 率 为 ５７ ７４ 其 中 只 有 ２１ １４ ３ ２５ ｍｇ Ｌ １ 的转化成为生物量氮 ３ ３ 菌株 Ｙ １２ 的耐冷试验 实验结果表明 Ｙ １２ 菌株在 １５ 条件下 ４８ ｈ 内均能有效地去除亚硝酸盐氮和总氮 表 １ 与该 菌在 ２０ 条件下除氮效果相比 其对亚硝酸盐氮的 去除率没有表现出明显的差异 但对总氮的去除效 果有所下降 生物量氮的合成量也有所降低 这也 许是温度降低导致细菌生长减慢的原因 量较少 分别为 ３ ５６ ３ ３２ 和 ３ ２５ ｍｇ Ｌ １ 该类菌对 表１ Ｔａｂｌｅ １ 亚硝酸盐氮和总氮的去除可能主要是将它们转化 为氮的氧化物或氮气 释放到大气中 使亚硝酸盐 氮源种类 氮和总氮明显下降 ＮＯ ２ 生物法除氮比物理和化学方法更加有效且低 廉而受到广泛的研究 Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ ２０１３ 但在进行 生物脱氮时 微生物会通过同化作用将部分亚硝酸 盐氮转化为自身生长所必需的含氮化合物 如蛋白 质 核糖核酸 脱氧核糖核酸等 微生物死亡后 这 部分氮将会返回水环境 导致水体中有机氮含量增 Ｔ Ｎ 生物量氮 ３ ４ Ｙ １２ 在 １５ 条件下的除氮效果 Ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｒｅｍｏｖａｌ ｒａｔｅ ｏｆ Ｙ １２ ａｔ １５ 初始氮浓度 ｍｇ Ｌ １ 最终氮浓度 ｍｇ Ｌ １ １５ ３１ ７ ４２ １５ ２８ ０ ０３ ０ ０８ ３ ０３ 去除率 ９９ ４８ ５１ ５３ 耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌的特异性磷 脂脂肪酸鉴定和形态学鉴定 磷脂脂肪酸是生物体重要组成部分之一 不同
5 ８期 何腾霞等 耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌的分离 筛选与鉴定 菌株 Ｙ １２ 在 ＢＴＢ 培养基上形成的菌落特征为 微生物类群可通过不同代谢途径合成不同的磷脂 脂肪酸 磷脂脂肪酸在不同的微生物类群中比较恒 定 且具有微生物特异性和结构多样性 是磷脂脂 肪酸图谱分析方法的重要依据 而气相色谱能够简 单 快速 灵敏且精确地检测出细胞所持有的特异 性磷脂脂 肪 酸 张 国 赏 等 ２００５ 蓝 江 林 等 ２０１０ ２３９７ 淡蓝色 湿润 圆形 中央隆起 边缘整齐 革兰氏染 色为阴性 油镜下观察细胞呈短杆状 图 ５ 通过对 菌株 Ｙ １２ 电镜扫描 发现该菌也呈短杆状 且着生 鞭毛 图 ６ Ｐｒａｔｔ ｅｔ ａｌ ２０１２ 本研究对 Ｙ １２ 的特异性磷脂脂 肪酸鉴定 结 果 如 表 ２ 所 示 该 菌 与 恶 臭 假 单 胞 菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ ｂｉｏｔｙｐｅ Ａ 的 相 似 指 数 为 ０ ４６９ 为非典型的恶臭假单胞菌 表２ Ｔａｂｌｅ ２ Ｌｉｂｒａｒｙ 特异性磷脂脂肪酸的鉴定结果 Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏ Ｓｉｍ Ｉｎｄｅｘ ＲＴＳＢＡ６６ ２１ ０ １１０ ０ ０８５ ＲＣＬＩＮ６６ ２０ ＭＩ７Ｈ１０３ ８０ ０ ０７０ ０ ４６９ Ｅｎｔｒｙ Ｎａｍｅ Ｐａｎｔｏｅａ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ ＧＣ ｓｕｂｇｒｏｕｐ Ｃ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ ｂｉｏｔｙｐｅ Ｂ ｖａｎｃｏｕｖｅｒｅｎｓｉｓ 图６ 电镜扫描下的 Ｙ １２ 菌株 １５０００ Ｆｉｇ ６ Ｙ １２ ｓｔｒａｉｎ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ １５０００ Ｈｅｒｂａｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｍ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ ｂｉｏｔｙｐｅ Ａ ３ ５ Ｎｏ Ｍａｔｃｈ 菌株 Ｙ １２ 的系统发育分析 对菌株 Ｙ １２ 的 １６Ｓ ｒｒｎａ 进行 ＰＣＲ 扩增 克隆 后的测序结果显示 该菌的 １６Ｓ ｒｒｎａ 全长为 １４５９ ｂｐ Ｂｌａｓｔ 比对分析发现 菌株 Ｙ １２ 与恶臭假单胞菌 Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ 系统发生地位基本相同 相似 度达到 ９９ 从 ＧｅｎＢａｎｋ 数据库中选取该菌株对应 的模式菌株 采用 ＭＥＧＡ６ ０ 软件进行多序列比对分 析 并用邻近法构建系统发育树 图 ７ 结合菌株 Ｙ １２ 的 形 态 学 观 察 特 异 性 磷 脂 脂 肪 酸 鉴 定 及 １６Ｓ ｒｒｎａ 鉴定结果显示 菌株 Ｙ １２ 与恶臭假单胞菌亲 图５ Ｆｉｇ ５ 缘关系最近 菌株 Ｙ １２ 菌体形态 １０ １００ Ｕｎｉｃｅｌｌ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ Ｙ １２ １０ １００ 图７ Ｆｉｇ ７ 菌株 Ｙ １２ 的系统发育进化树 Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ｔｒｅｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｙ １２ ｓｔｒａｉｎ
6 2398 环境科学学报 35 卷 4 讨论 (Discussion) 目前, 国内外对反硝化细菌除氮的研究比较深入, 同时取得了很大的进展, 但对反硝化除氮过程所产生的生物量氮关注较少,Zheng 等 (2011) 采用离心后用蒸馏水洗涤 2 遍, 再按照测定总氮的方法进行生物量氮的测定, 该方法的缺点在于 :1 用蒸馏水洗涤并不一定能将菌液中的氮全部清洗干净 ; 2 用蒸馏水洗涤可能带走部分菌体 ;3 蒸馏水作为一种低渗溶液, 不适合那些在低渗溶液中细胞容易破裂的细菌. 这 3 个方面都将导致生物量氮测定不准确. 本研究采用的是氮平衡法, 即测定出总氮含量和去除菌体后培养液中的总氮含量, 二者之差则为生物合成的氮含量, 这种研究方法避免了以上各种因素导致的不准确性. 前人研究认为, 能在 0 ~ 5 生长繁殖, 最适生长温度在 15 以上, 最高温度可达 20 以上的细菌为耐冷菌 ( Morita,1975; 刘梦洋等,2011). 本研究将分离筛选的 Y 12 菌株在 LB 平板培养基上划线, 于 10 条件下培养,2 d 可见大量菌落出现 ; 在 BTB 平板培养基上划线, 同等条件下培养,3 d 可见大量菌落 ; 挑取单菌落于反硝化培养基中,20 条件下, 48 h 内其生长可进入对数期. 为了快速筛选出耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌, 本试验根据前人研究耐冷脱氮菌进行生物脱氮时的最适温度 ( 20 ) ( Zheng et al., 2011; Huang et al., 2013; Yao et al., 2013) 设置为筛选耐冷反硝化细菌的温度. 筛选出来的 Y 12 菌株在 15 条件下,48 h 内对亚硝酸盐氮和总氮的去除率分别能达到 99.48% 和 51.53%, 达到了较高水平. 据报道, 温度对反硝化作用的限制比起其他影响因素 (ph 低溶解氧浓度 有毒化合物 高有机负荷等 ) 是最显著的, 低温是导致亚硝酸盐还原潜势下降的主要原因 ( Carrera et al., 2003; Rodriguez Caballero et al.,2012). 为了提高微生物对晚秋至来年初春低温地区受氮化合物污染水体的脱氮能力, 前人对低温反硝化细菌除氮进行一定的探索. 如李军等 (2012) 从冬季淹水泥中分离筛选出一株耐冷反硝化细菌 Y2, 以 10% 的接种量考察了反硝化细菌在不同温度条件下对硝酸盐的去除情况, 结果显示,3 d 内,15 条件下该菌对硝酸盐的去除率只有 12.9%, 在其最适温度条件下 (25 ), 对硝酸盐氮的去除率只有 57.7%. Huang 等 (2013) 对所分离获 得的一株耐冷菌 ( Acinetobacter sp.) Y16 的研究显示, 该菌株在其最优温度 (20 ) 条件下对铵氮的去除率只有 61.40%±1.01%.Zheng 等 (2011) 对所分离的耐冷菌 ( Psychrobacter sp) 的研究表明, 该菌在其最适温度 (20 ) 条件下对亚硝酸盐的去除率为 63.50%, 对总氮的去除率只有 31.89%. 而本研究在 10 条件下分离出了一株耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌 Y 12, 在 20 条件下,72 h 内对亚硝酸盐氮和总氮的去除率分别能达到 99.87% 和 57.74%, 其脱氮率均显著高于前人所分离的好氧反硝化细菌, 达到了较高的水平. 此外, 还未见能以亚硝酸盐为唯一氮源生长的耐冷亚硝酸盐型反硝化细菌的有关报道. 本研究以去除亚硝酸盐氮和总氮效率高 生物量氮合成少相结合的方法筛选耐冷高效亚硝酸盐反硝化细菌, 避免了单一因素筛选的局限性. 对所分离筛选得到的反硝化细菌采用特异性磷脂脂肪酸和 16S rrna 进行双重鉴定, 发现其均与恶臭假单胞菌的亲缘关系最近, 因此, 将其鉴定为恶臭假单胞菌具有可靠性. 5 结论 (Conclusions) 1) 本研究在 10 条件下分离出了一株耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌 Y 12, 该菌株在 20 条件下能有效地去除亚硝酸盐氮和总氮, 其去除率分别为 % 和 %, 其中有 % ( mg L -1 ) 的氮转化成为生物量氮 ; 在 15 条件下, 该菌对亚硝酸盐氮和总氮去除率分别为 99.48% 和 51.53%, 在该过程中只有 19.60% (3.00 mg L -1 ) 的氮转化成为生物量氮. 2)Y 12 菌株的 16S rrna 序列与恶臭假单胞菌的同源性达到 99%, 其特异性磷脂脂肪酸与恶臭假单胞菌相似指数为 0.469, 结合其形态学特征, 将其初步鉴定为恶臭假单胞菌. 责任作者简介 : 李振轮, 男, 博士, 教授, 硕士研究生导师, 研究方向 : 土壤学和微生物学. 参考文献 (References): Carrera J, Vicent T, Lafuente F J Influence of temperature on denitrification of an industrial high strength nitrogen wastewater in a two sludge system[ J].Water SA,29(1): Chen Q, Ni J R Ammonium removal by Agrobacterium sp. LAD9 capable of heterotrophic nitrification aerobic denitrification [ J ]. Journal of Bioscience and Bioengineering,113(5):
7 8 期何腾霞等 : 耐冷高效亚硝酸盐型反硝化细菌的分离 筛选与鉴定 2399 陈薇, 丁祥力, 贺月林, 等 亚硝酸盐降解菌的分离鉴定及其降解特性 [J]. 环境科学与技术,34(12H): 国家环境保护局.2012.HJ 水质总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法 [S]. 北京 : 中华人民共和国环境保护部 Huang X F, Li W G, Zhang D Y, et al Ammonium removal by a novel oligotrophic Acinetobacter sp. Y16 capable of heterotrophic nitrification aerobic denitrification at low temperature[ J].Bioresource Technology,146: 金敏, 王景峰, 孔庆鑫, 等 好氧异养硝化菌 Acinetobacter sp.yy 5 的分离鉴定及脱氮机理 [ J]. 应用与环境生物学报, 15 ( 5): Kroupova H,Machova J,Svobodova Z Nitrite influence on fish: a review[ J].Veterinarni Medicina,50(11): 蓝江林, 刘波, 陈璐, 等 芭蕉属植物内生细菌磷脂脂肪酸 (PLFA) 生物标记特性研究 [ J]. 中国农业科学, 43 ( 10 ): 李军, 闫爽, 邓娴, 等 一株耐冷反硝化菌的分离鉴定及其反硝化特性 [J]. 沈阳建筑大学学报 ( 自然科学版 ),28(4): 李焱生, 魏民, 张艾晓, 等 一株异养型亚硝酸盐氧化细菌的分离及其降解特性的研究 [J]. 生物技术通报,(5): 刘梦洋, 李明堂, 翟强强 耐冷菌在低温下处理污水的研究进展 [J]. 北方环境,23(3): Morita R Y Psychrophilic bacteria[ J]. Bacteriological Reviews,39 (2): 144 l67 Pratt B, Riesen R, Johnston C G PLFA analyses of microbial communities associated with PAH contaminated riverbank sediment [ J].Microbial Ecology,64(3): Rodriguez Caballero A, Hallin S, Påhlson C, et al Ammonia oxidizing bacterial community composition and process performance in wastewater treatment plants under low temperature conditions [ J]. Water Science & Technology,65(2): 邵晴, 余晓斌 好氧反硝化细菌的筛选及反硝化特性研究 [J]. 生物技术,18(3): Song Z F,An J,Fu G H,et al Isolation and characterization of an aerobic denitrifying Bacillus sp.yx 6 from shrimp culture ponds[ J]. Aquaculture,319(1 / 2): Wang P,Yuan Y Z,Li Q,et al.2013.isolation and immobilization of new aerobic denitrifying bacteria [ J ]. International Biodeterioration & Biodegradation,76: 魏复盛, 毕彤, 齐文启 水和废水检测分析方法 ( 第四版 ) [ M]. 北京 : 中国环境科学出版社 ; ; ; 辛玉峰, 曲晓华, 袁梦东, 等 一株异养硝化 反硝化不动杆菌的分离鉴定及脱氮活性 [J]. 微生物学报,51(12): 杨小龙, 李文明, 陈燕, 等 一株好氧反硝化菌的分离鉴定及其除氮特性 [J]. 微生物学报,51(8): Yao S,Ni J R,Ma T,et al Heterotrophic nitrification and aerobic denitrification at low temperature by a newly isolated bacterium, Acinetobacter sp.ha2[ J].Bioresource Technology,139: 张国赏, 吴文鹃, 潘仁瑞 气相色谱 质谱法检测细胞脂肪酸及其在细菌鉴定上的应用 [J]. 合肥联合大学学报,10(4): Zhang H J,Qi S D,Dong Y L,et al.2014.a sensitive colorimetric method for the determination of nitrite in water supplies, meat and dairy products using ionic liquid modified methyl red as a colour reagent [ J].Food Chemistry,151: Zhang Q L, Liu Y, Ai G M, et al The characteristics of a novel heterotrophic nitrification aerobic denitrification bacterium, Bacillus methylotrophicus strain L7[ J].Bioresource Technology,108: 赵翠娟, 宋文军, 朱高雄, 等 除氨氮菌在污水处理中的研究进展 [J]. 生物技术通报,(2): Zheng H Y,Liu Y,Sun G D,et al.2011.denitrification characteristics of a marine origin psychrophilic aerobic denitrifying bacterium[ J].Journal of Environmental Sciences,23(11): 周超, 高乃云, 楚文海, 等 水体中亚硝酸盐生物毒性和去除的研究进展 [J]. 给水排水,37(5):
680 微生物学通报 2008, Vol.35, No.5,, [1 4],,,,, Paracoccus Pseudomonas [2,3] Bacillus [5] Rhodococcus [5],, [6],, [7], 4, 40 h, A1, 99.05% 16S rdna A1 ph A
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微生物学通报 MAY 20, 2008, 35(5): 679~684 Microbiology tongbao@im.ac.cn 2008 by Institute of Microbiology, CAS 研究报告 生物滤塔体系好氧反硝化菌的分离鉴定 与特性研究 * 范利荣黄少斌 杨军张永清 ( 510006) 摘要 : 从实验室生物滤塔填料的生物膜上, 经选择性培养基筛选, 分离出 4 株好氧反硝化菌
第 期 王 兴 涛 等 猪 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 种 猪 精 液 分 离 株 的 鉴 定 及 进 化 分 析 病 料 毒 株 及 细 胞 试 剂 引 物 设 计 提 取 及 基 因 克 隆 及 测 序
河 南 农 业 科 学 王 兴 涛 罗 俊 滕 蔓 樊 剑 鸣 鄂 巍 禹 斌 刘 力 张 改 平 利 用 技 术 对 河 南 省 某 规 模 化 猪 场 乙 脑 疑 似 病 例 的 种 猪 精 液 进 行 分 析 从 部 分 样 本 中 扩 增 出 与 流 行 性 乙 型 脑 炎 病 毒 基 因 和 基 因 具 有 高 度 同 源 性 的 预 期 产 物 在 日 龄 乳 鼠 脑 内 接 种 种 猪
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土壤 (Soils), 2013, 45(4): 683 690 1 一株根际好氧反硝化菌的筛选及其反硝化条件研究 1,2 1,2 1* (1 ( ) 210008; 2 100049) RWX31 NO 3 -N 140 mg/l 24 h 82% N 2 O RWX31 1% Mg 2+ 0.05 g/l NO 2 -N 0 28 ~ 32 ph 7.0 ~ 7.5 C/N 8 ~ 12 DO
刘陈立 邵宗泽 以柴油为惟一碳源 从胜利油田黄河码头和厦门储油码头两个海水样品中富集得到两组柴 油降解菌 共 株细菌 株真菌 它们对柴油都有降解能力 鉴定结果表明这 株细菌 中有 株摩加夫芽孢杆菌 株施氏假单胞菌 株腊样芽孢杆菌 株反硝化产碱杆菌 株阿氏葡萄球菌 株食烷菌和 株类似很小海旋菌的未知新菌 其中 对柴油的降解能力最强 已 报道的食烷菌属中其他种的同源性最高 为 表明它是该属中的一个新种
卢全 章等 鳗鲡 肾病病原 菌 的研 究 期 鱼 放 人 水 族箱 中 饲 养 观 察 发 病情 况 生 化试 验 采用 和 常 规 方 法 药物 敏 感 试验 用 试 管稀释 方法 步 骤 和 结果 鳗鲡 肾病 症 状 病 鳗 症 状 主 要 表 现 在 鳗 鱼 前 腹 部 区 部 位 肿 大 严
卢全 章等 鳗鲡 肾病病原 菌 的研 究 期 鱼 放 人 水 族箱 中 饲 养 观 察 发 病情 况 生 化试 验 采用 和 常 规 方 法 药物 敏 感 试验 用 试 管稀释 方法 步 骤 和 结果 鳗鲡 肾病 症 状 病 鳗 症 状 主 要 表 现 在 鳗 鱼 前 腹 部 区 部 位 肿 大 严重 时 区 腹 部 皮 肤 软 化 溃 烂 穿 孔 脏 露 出 的 粘稠 状 液 体 肾脏 部 位和
期 周 凯等 欧 洲 鳗 鲡 红 头 病 病 原 的研 究 酒 精 棉 球 将 尾 部 反 复 擦 洗 消 毒 然 后 用 灭 菌 剪 刀 剪 断 尾 巴 将 血 液滴 加 在 营 养 琼 脂 或 琼脂 平板 上作 划线 分 离 在 获 得 纯 培 养 后 移 人 斜 面 保存备 用 培养 后 取
期 周 凯等 欧 洲 鳗 鲡 红 头 病 病 原 的研 究 酒 精 棉 球 将 尾 部 反 复 擦 洗 消 毒 然 后 用 灭 菌 剪 刀 剪 断 尾 巴 将 血 液滴 加 在 营 养 琼 脂 或 琼脂 平板 上作 划线 分 离 在 获 得 纯 培 养 后 移 人 斜 面 保存备 用 培养 后 取 形 态 致 的 单 个 菌 落 进 步 划 线 纯化 人 工 感 染试 验 肌 注 感染是 将 斜 面
第 期 马 海 燕 等 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 材 料 与 方 法 臭 氧 水 的 制 取 臭 氧 水 处 理 超 声 波 处 理 超 声 波 和 臭 氧 水 协 同 处 理 对 照 处 理 邻 苯 二 胺 分 光 光 度 法 测
第 卷 第 期 年 月 食 品 与 生 物 技 术 学 报 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 马 海 燕 张 慜 孙 金 才 食 品 科 学 与 技 术 国 家 重 点 实 验 室 江 南 大 学 江 苏 无 锡 海 通 食 品 集 团 股 份 有 限 公 司 浙 江 慈 溪 由 于 速 冻 蔬 菜 加 工 过 程 中 的 热 烫 处 理 对
生 物 技 术 通 报 相 关 载 体 及 试 剂 动 物 组 织 及 细 胞 培 养 总 的 提 取 及 反 转 录 内 蒙 古 白 绒 山 羊 基 因 的 分 子 克 隆 生 物 信 息 学 分 析
生 物 技 术 通 报 鲍 文 蕾 杨 娇 馥 李 彬 刘 俊 娥 王 潇 郭 旭 东 王 志 钢 侯 鑫 刘 东 军 旨 在 克 隆 内 蒙 古 白 绒 山 羊 血 管 内 皮 生 长 因 子 基 因 并 分 析 其 基 本 表 达 模 式 采 用 技 术 克 隆 基 因 将 得 到 的 基 因 序 列 及 其 编 码 的 氨 基 酸 序 列 进 行 生 物 信 息 学 分 析 利 用 半 定 量
380 研 究 论 文 发 酵 天 数 双 乙 酰 测 定 : 参 照 GB4927-4928-2001 标 准 发 酵 液 中 的 化 学 成 分 的 测 定 : 采 用 GC-8A 型 气 相 色 谱 测 定 1.5 离 子 注 入 方 法 [6] 把 待 处 理 的 菌 株 细 胞 均 匀 涂
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中 国 细 胞 生 物 学 学 报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(4): 379-384 http://www.cjcb.org 全 小 麦 啤 酒 酵 母 菌 株 的 诱 变 育 种 及 应 用 研 究 袁 仲 1* 张 百 胜 1 张 慎 举 1 马 绮 云 2 陈 柯 羽 2 ( 1 商 丘 职 业 技 术 学 院 园 林 食 品 加 工 系,
说 明 为 了 反 映 教 运 行 的 基 本 状 态, 为 校 和 院 制 定 相 关 政 策 和 进 行 教 建 设 与 改 革 提 供 据 依 据, 校 从 程 资 源 ( 开 类 别 开 量 规 模 ) 教 师 结 构 程 考 核 等 维 度, 对 2015 年 春 季 期 教 运 行 基
内 部 资 料 东 北 师 范 大 教 运 行 基 本 状 态 据 报 告 2015 年 春 季 期 教 务 处 2015 年 10 月 27 日 说 明 为 了 反 映 教 运 行 的 基 本 状 态, 为 校 和 院 制 定 相 关 政 策 和 进 行 教 建 设 与 改 革 提 供 据 依 据, 校 从 程 资 源 ( 开 类 别 开 量 规 模 ) 教 师 结 构 程 考 核 等 维 度,
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17 6 Vol.17 No.6 2010 11 Journal of Fishery Sciences of China Nov. 2010 1 熊焰, 刘力源, 罗睿, 朱欢 (,, 625014) 摘要 : 1, 16S rrna (Bacillus megaterium), SZ-3 SZ-3, : ph 7.0, 33, 0.01 mg/l, 24 h 69.58% 5 mg/l 100
供 试 材 料 试 验 试 剂 和 仪 器 基 因 组 提 取 分 析 方 法 反 应 体 系 最 佳 配 比 的 筛 选 退 火 温 度 对 扩 增 效 果 的 影 响
生 物 技 术 通 报 胡 立 敏 陶 兴 林 侯 栋 朱 惠 霞 张 东 琴 选 取 温 敏 花 椰 菜 不 育 系 与 杂 交 组 合 的 高 可 育 和 高 不 育 单 株 构 建 基 因 池 利 用 对 随 机 引 物 对 其 进 行 标 记 同 时 采 用 正 交 设 计 对 其 反 应 体 系 及 扩 增 条 件 进 行 优 化 试 验 结 果 表 明 在 反 应 体 系 中 含 引 物
天 然 沸 石 对 氨 氮 的 吸 附 特 性 研 究 邹 娟 郭 雪 松 李 琳 刘 俊 新 从 天 然 沸 石 对 氨 氮 的 吸 附 动 力 学 吸 附 平 衡 对 吸 附 的 影 响 及 其 作 为 垂 直 流 人 工 湿 地 的 填 料 处 理 生 活 污 水 的 效 果 进 行 了 研 究 结 果 表 明 该 沸 石 对 氨 氮 的 吸 附 行 为 符 合 和 吸 附 等 温 式 最 大
2006年顺德区高中阶段学校招生录取分数线
2014 年 顺 德 区 高 中 阶 段 学 校 考 试 提 前 批 第 一 批 第 二 批 学 校 录 取 根 据 佛 山 市 办 提 供 的 考 生 数 据, 现 将 我 区 2014 年 高 中 阶 段 学 校 考 试 提 前 批 第 一 批 第 二 批 学 校 的 录 取 公 布 如 下 : 一 顺 德 一 中 录 取 分 第 1 志 愿, 总 分 585, 综 合 表 现 评 价 A, 考
朱 丽 明 柯 美 云 周 丽 雅 袁 耀 宗 罗 金 燕 候 晓 华 陈 旻 湖 滥 用 安 非 他 命 会 增 加 得 心 脏 病 的 风 险 据 美 国 科 技 新 闻 网 报 道 根 据 纽 约 路 透 社 报 道 一 份 新 的 研 究 显 示 青 年 及 成 年 人 若 滥 用 安 非 他 命 会 增 加 得 心 脏 病 的 风 险 美 国 德 州 大 学 西 南 医 学 中 心
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第 第 卷 海 欺 环 洋 科 境 学 月 年 铜 锌 镐 汞 锰 铬 对 斑 节 对 虾仔虾 急性 致毒 的研 究 高淑 英 邹栋梁 厦 门 大学 海洋 系 厦 门 摘 仔虾 的 急 性 致 毒 效 应 土 本文在恒温 要 结果 表 明 值 分别 为 充 气条 件下 研 究 了 值分 别为 十 对斑节对虾 对 斑 节对 虾 仔 虾 值分 别 为 值 分别 为 六 种重 金 属 的 毒性 顺 序 为
张 琳 段 紫 英 耿 欣 李 克 刚 魏 宗 胡 颂 平 从 蛇 足 石 杉 的 培 养 组 织 中 分 离 内 生 真 菌 利 用 传 统 方 法 观 察 菌 落 的 外 观 形 态 对 照 真 菌 鉴 定 手 册 对 其 进 行 鉴 定 通 过 马 铃 薯 培 养 基 培 养 菌 体 通 过 三 点 接 种 分 区 划 线 的 方 法 进 行 分 离 纯 化 利 用 显 微 摄 影 的 技 术
第 卷 第 期 年 月 水 生 生 物 学 报 肠 丫 搔蒸霎 原 位杂 交 和 原 位 技 术在 鱼 类基 因 定位 中 的 应 用 黄 袁仕 取 梅 朱作言 中 国科 学 院 水 生 生 物 研 究 所 淡 水 生 态 与 生 物 技 术 国 家 重 点 实验 室 武 汉 陕 西 师 范 大学 生 命 科 学 院 西 安 # 万 尸 了夭 如 趾 郑 人 扭寿 卿 关 键词 艺 只 妙 毛山知
材料! 方法! # 基因的扩增及其序列分析
生物技术通报 黄艳燕 黄靖华 卢福芝 孙靓 彭立新 周兴 黄日波 利用 的方法从鼠李糖乳杆菌基因组 中扩增到 乳酸脱氢酶基因 并连接到载体 上 构建表达质粒 将重组质粒 转化大肠杆菌 重组菌株经 诱导表达 电泳分 析表明 在大肠杆菌中实现了表达 表达产物的分子量约为 同时采用紫外分光光度法测定 乳酸脱氢酶的酶活 测得重组菌株的 乳酸脱氢酶活力为 最适反应温度为 最适 乳酸脱氢酶 克隆 表达 鼠李糖乳杆菌
上 海 麦 工 意 义 世 界 的 人 类 学 解 读 潘 天 舒 洪 浩 瀚 本 文 以 年 在 上 海 市 静 安 区 和 黄 浦 区 的 麦 当 劳 门 店 所 进 行 的 田 野 研 究 为 基 础 通 过 检 视 其 员 工 在 日 常 工 作 环 境 中 所 采 取 的 一 系 列 调 适 性 策 略 探 讨 麦 工 在 全 球 化 和 地 方 转 型 特 殊 语 境 中 的 多 重 含
李 一 博 孙 立 瑛 靳 世 久 邢 菲 菲 杜 刚 基 于 大 型 常 压 立 式 金 属 储 罐 底 板 在 线 声 发 射 检 测 及 定 位 的 原 理 针 对 声 发 射 检 测 过 程 中 因 声 源 性 质 不 明 确 导 致 的 罐 底 完 整 性 评 价 结 果 不 准 确 的 问 题 采 用 小 波 分 析 方 法 对 罐 底 声 发 射 信 号 进 行 了 分 解 通 过 提
第 期 黄雪莲等 响应面优化绿色木霉菌培养基 材料与方法 菌种 仪器与试剂 菌种的活化 单因素试验 响应面优化试验 优化工艺的验证 数据处理 结果与分析
第 卷第 期 年 月 食品与生物技术学报 响应面优化绿色木霉菌培养基 黄雪莲 于新 仲恺农业工程学院轻工食品学院 广东广州 利用响应面分析法对绿色木霉菌的培养基进行优化 通过测量不同营养条件下绿色木霉 菌落生长直径研究其生物学特性 在单因素实验的基础上 选定葡萄糖添加量 丙氨酸添加量和磷酸二氢钾添加量 个因素进行中心组合实验 建立二次回归方程 并应用响应面分析法进行优化 结果表明 绿色木霉菌最佳培养基为葡萄糖
第 期 李 伟 等 用 方 法 对 中 国 历 史 气 温 数 据 插 值 可 行 性 讨 论
李 伟 李 庆 祥 江 志 红 使 用 插 值 方 法 对 已 经 过 质 量 控 制 和 均 一 化 的 年 月 年 月 中 国 全 部 基 本 基 准 站 气 温 资 料 逐 月 进 行 空 间 插 值 通 过 站 点 的 实 际 序 列 与 插 值 后 格 点 序 列 进 行 比 较 针 对 相 关 系 数 和 线 性 趋 势 等 多 个 量 来 检 验 方 法 对 气 候 资 料 插 值 的
中国油 料 年第 卷第 期 三 冰 冻 保 护 剂 对 花粉 储 存的影 响 本 试 验 的几 种保 护 剂 配 方 均 只 能使少 量新 鲜花 粉 免遭 冻 害 基 亚 矾 浓 度 低 时 萌发 率 稍 高 例 如 方 的 花 粉 萌 发 率均 低 于 蔗搪和 蔗 搪 其 余配 冰 冻保护剂处 理 的 花粉 夭 的 萌发 率 保存 单位 十 蔗搪 二甲 十 蔗 搪 浓度高 而 蔗箱 蔗楷 蔗粉 蔗箱
材 料 方 法 统 计 学 分 析 体 外 作 用 对 细 胞 增 殖 的 影 响
生 物 技 术 通 报 罗 春 燕 官 涛 王 红 宁 杨 艳 姜 蓉 胡 晓 舒 华 自 森 王 建 伟 旨 在 探 讨 人 参 总 皂 苷 对 细 胞 表 达 的 影 响 法 显 示 对 细 胞 增 殖 抑 制 程 度 呈 剂 量 与 时 间 依 赖 性 增 加 且 呈 正 相 关 关 系 流 式 细 胞 术 表 明 能 阻 止 细 胞 从 期 向 期 移 行 激 光 共 聚 焦 显 微 镜 观
赵世嘏 高乃云 楚文海 微曝气工艺是在常规 基础上发展起来的 试验表明在紫外光强 投加量为 三氯乙酸 初始浓度约为 的情况下 后该工艺对 的去除达到 以上 工艺效果受 光强 投加量 初 始浓度和 的影响 其他条件一定时 随着 光强和 投加量的增大 去除率增加 然而 投加量超过 后 去除效果增加缓慢 对不同初始浓度 时去除率最 高 而后浓度增加 去除率下降 中性或弱酸性 条件下更有利于降解 消毒副产物
256 微生物学通报 2009, Vol.36, No.2, 1 异养硝化菌的发现及其脱氮特性 ( ),,,,, [3,4],,,, [5], [5,6],, COD,,,, [7,8],,, 1 Table 1 表 1 一些异养硝化菌的脱氮特性 The denitrification charac
![256 微生物学通报 2009, Vol.36, No.2, 1 异养硝化菌的发现及其脱氮特性 ( ),,,,, [3,4],,,, [5], [5,6],, COD,,,, [7,8],,, 1 Table 1 表 1 一些异养硝化菌的脱氮特性 The denitrification charac](/thumbs/50/26638290.jpg "256 微生物学通报 2009, Vol.36, No.2, 1 异养硝化菌的发现及其脱氮特性 ( ),,,,, [3,4],,,, [5], [5,6],, COD,,,, [7,8],,, 1 Table 1 表 1 一些异养硝化菌的脱氮特性 The denitrification charac")
微生物学通报 FEB 20, 2009, 36(2): 255~260 Microbiology tongbao@im.ac.cn 2009 by Institute of Microbiology, CAS 专论与综述 异养硝化细菌脱氮特性及研究进展 * 苟莎黄钧 ( 610041) 摘要 : 异养硝化细菌能够在利用有机碳源生长的同时将含氮化合物硝化生成羟胺 亚硝酸盐 硝酸盐等产物, 多数还能同时进行好氧反硝化作用,
价样 品 川 振 荡汉 取 叮 盛极 曲 的 示差 溶 出脉 具 体 方 法 见 有 机质 含 量 用 丘 林 法 测 定 沉积 物 的 矿 物 组 成 由 本 所 地质 室 测 数 据 由厦 门 大 学 海 洋 系 洪 家 珍 同志 提 供 三 各站 位 于表 谱 分析仪 进行 微 米膜 滤 后 分 斯 其 酿 可溶 部 分 的 含 鼠 零 用 冲测定 卷 报 分析 三 定 学 洋 海 表示 结
黄 河 中 游 汛 期 水 沙 联 合 分 布 模 型 及 其 应 用 丁 志 宏 张 金 良 冯 平 为 在 宏 观 上 对 黄 河 中 游 水 沙 运 动 的 变 化 规 律 从 随 机 过 程 的 角 度 予 以 揭 示 以 黄 河 中 游 潼 关 水 文 站 年 期 间 流 量 超 过 的 次 洪 过 程 中 的 洪 峰 流 量 和 相 应 的 沙 峰 含 沙 量 系 列 为 基 础 运 用
深圳市新亚电子制程股份有限公司
证 券 代 码 :002388 证 券 简 称 : 新 亚 制 程 公 告 编 号 :2016-053 深 圳 市 新 亚 电 子 制 程 股 份 有 限 公 司 2016 年 第 二 次 临 时 股 东 大 会 决 议 公 告 本 公 司 及 董 事 会 全 体 成 员 保 证 公 告 内 容 真 实 准 确 和 完 整, 不 存 在 虚 假 记 载 误 导 性 陈 述 或 者 重 大 遗 漏 特
August 大 学 化 学 (Daxue Huaxue) Univ. Chem. 2016, 31 (8), 71-75 71 化 学 实 验 doi: 10.3866/PKU.DXHX201510028 www.dxhx.pku.edu.cn 高 校 化 学 实 验 教 学 中 产 生 的 化 学 废 物 的 回 收 及 处 理 * 兰 景 凤 俞 娥 ( 兰 州 大 学 化 学 化 工 学 院,
Microsoft Word - 793-797 tb20150504赵宏宇s-高校教改纵横.doc
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Apr. 20, 2016, 43(4): 793 797 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150504 高 校 教 改 纵 横 生 物 工 程 专 业 发 酵 课 程 群 建 设 探 索 * 赵 宏 宇
刘 慧 君 利 用 卫 生 统 计 年 鉴 数 据 和 两 个 县 区 的 生 殖 健 康 调 查 数 据 从 宏 观 和 微 观 两 个 层 次 评 价 我 国 农 村 生 殖 健 康 现 状 揭 示 农 村 育 龄 人 群 在 生 殖 健 康 风 险 模 式 中 的 性 别 差 异 及 其 社 会 性 别 渊 源 结 果 显 示 农 村 生 殖 健 康 状 态 有 所 改 善 但 总 体 仍 然
中 国 投 资 率 波 动 的 度 量 与 变 化 的 分 解 年 经 济 发 展 水 平
数 量 经 济 技 术 经 济 研 究 年 第 期 中 国 投 资 率 波 动 的 度 量 与 变 化 的 分 解 年 方 红 生 楼 琳 琳 郭 林 浙 江 大 学 金 融 研 究 院 浙 江 财 经 学 院 经 贸 学 院 本 文 从 产 业 角 度 对 中 国 投 资 率 的 波 动 和 变 化 进 行 了 度 量 和 分 解 表 明 年 产 业 内 效 应 解 释 了 中 国 投 资 率 波
Syngene GBOXHR Retsch MM400 KQ DE Eppendorf Table 1 The sources of Astragali Radix and Hedysarum Radix No. 1 AMM2011_NMGTY Astr
PCR 龙平, 崔占虎, 李虔全, 徐建平, 张春红, 周立社 * *, 李旻辉 ( 包头医学院, 内蒙古包头 014060) DNA 30 28 DNA trnl-trnf PCR PCR 136 bp 323 bp 10% PCR PCR Astragalus membranaceus Fisch. Bge. var. mongho- licus Bge. Hsiao A. membranaceus
算 公 式 为 :G = (t 2 t 1 ) log 2 (log W 2 log W 1 ) 式 中 t 1 和 t 2 为 所 取 对 数 期 两 点 时 间,W 1 和 W 2 为 相 应 时 间 测 得 的 细 胞 含 量 或 OD 值 测 定 微 生 物 的 数 量 有 多 种 不 同
测 定 细 菌 生 长 曲 线 生 92 沈 睿 2912372 同 组 成 员 : 徐 鲁 斌 赵 磊 韦 人 杨 丹 灵 实 验 日 期 :211-5-15 一. 实 验 目 的 1. 了 解 细 菌 生 长 曲 线 特 征, 测 定 细 菌 繁 殖 的 代 时 2. 学 习 液 体 培 养 基 的 配 制 及 注 意 事 项 3. 学 习 液 体 种 子 和 固 体 种 子 的 不 同 接 种
黄 金 原 油 总 持 仓 增 长, 同 比 增 幅 分 别 为 4.2% 和 4.1% 而 铜 白 银 以 及 玉 米 则 出 现 减 持, 减 持 同 比 减 少 分 别 为 9.4%,9.4% 以 及 6.5% 大 豆, 豆 粕 结 束 连 续 4 周 总 持 仓 量 增 长, 出 现 小 幅
小 麦 净 多 持 仓 增 加, 豆 油 豆 粕 净 多 持 仓 减 少 美 国 CFTC 持 仓 报 告 部 门 : 市 场 研 究 与 开 发 部 类 型 : 量 化 策 略 周 报 日 期 :212 年 5 月 7 日 电 话 :592-5678753 网 址 :www.jinyouqh.com 主 要 内 容 : 根 据 美 国 CFTC 公 布 的 数 据, 本 报 告 中 的 11 个
ph ph ph Langmuir mg /g Al 2 O 3 ph 7. 0 ~ 9. 0 ph HCO - 3 CO 2-3 PO mg /L 5 p
1 2 1 2 3 1 2 1. 100054 2. 100054 3. 100036 ph ph ph Langmuir 166. 67 mg /g Al 2 O 3 ph 7. 0 ~ 9. 0 ph HCO - 4 5. 00 mg /L 5 ph doi 10. 13928 /j. cnki. wrahe. 2017. 03. 017 TV213. 4 + TU991. 26 + 6 A 1000-0860
100566035515613 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566035715658 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566037615926 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000100357 101 思 想
2016 年 天 津 大 学 硕 士 学 位 研 究 生 考 试 初 试 成 绩 复 核 结 果 公 示 考 生 编 号 科 目 码 科 目 名 称 复 核 结 果 100566000100858 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000101151 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000101348 101 思 想 政 治 理 论 经
福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析
国际财务报告准则第13号——公允价值计量
附 件 : 企 业 会 计 准 则 第 39 号 公 允 价 值 计 量 第 一 章 总 则 第 一 条 为 了 规 范 公 允 价 值 的 计 量 和 披 露, 根 据 企 业 会 计 准 则 基 本 准 则, 制 定 本 准 则 第 二 条 公 允 价 值, 是 指 市 场 参 与 者 在 计 量 日 发 生 的 有 序 交 易 中, 出 售 一 项 资 产 所 能 收 到 或 者 转 移 一
生 物 技 术 通 报 材 料 方 法 导 致 的 重 复 序 列 不 稳 定 性
生 物 技 术 通 报 赵 宏 宇 蔡 禄 赵 秀 娟 王 晶 妍 陈 元 秀 刘 水 峰 重 复 序 列 异 常 扩 增 或 删 除 会 引 起 多 种 人 类 遗 传 疾 病 目 前 其 不 稳 定 性 机 制 还 不 清 楚 为 了 探 索 化 学 药 物 对 重 复 序 列 的 作 用 采 用 甲 基 磺 酸 乙 酯 和 丝 裂 霉 素 连 续 多 次 处 理 含 重 复 序 列 质 粒 的
反 学 校 文 化 与 阶 级 再 生 产 小 子 与 子 弟 之 比 较 周 潇 作 者 通 过 对 北 京 某 打 工 子 弟 学 校 的 田 野 调 查 后 发 现 在 农 民 工 子 弟 中 间 盛 行 着 类 似 学 做 工 中 所 描 述 的 工 人 阶 级 小 子 的 反 学 校 文 化 但 是 由 于 制 度 安 排 与 社 会 条 件 的 差 异 子 弟 与 小 子 的 反 学 校
结 果 与 讨 论
倪 卓 杜 学 晓 王 帅 邢 锋 以 脲 醛 树 脂 为 囊 壁 双 酚 型 环 氧 树 脂 为 囊 芯 采 用 原 位 聚 合 法 合 成 环 氧 树 脂 微 胶 囊 根 据 化 学 反 应 动 力 学 得 到 脲 醛 树 脂 预 聚 体 及 微 胶 囊 囊 壁 合 成 反 应 过 程 中 的 速 率 方 程 测 定 不 同 温 度 下 甲 醛 浓 度 随 时 间 变 化 的 曲 线 确 定 不
龚 亚 夫 在 重 新 思 考 基 础 教 育 英 语 教 学 的 理 念 一 文 中 援 引 的 观 点 认 为 当 跳 出 本 族 语 主 义 的 思 维 定 式 后 需 要 重 新 思 考 许 多 相 连 带 的 问 题 比 如 许 多 发 音 的 细 微 区 别 并 不 影 响 理 解 和
语 音 语 篇 语 感 语 域 林 大 津 毛 浩 然 改 革 开 放 以 来 的 英 语 热 引 发 了 大 中 小 学 英 语 教 育 整 体 规 划 问 题 在 充 分 考 虑 地 区 学 校 和 个 体 差 异 以 及 各 家 观 点 的 基 础 上 遵 循 实 事 求 是 逐 级 定 位 逐 层 分 流 因 材 施 教 的 原 则 本 研 究 所 倡 导 的 语 音 语 篇 语 感 语 域
H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g
16 6 2018 11 Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol. 16 No. 6 Nov. 2018 doi 10. 3969 /j. issn. 1672-3678. 2018. 06. 004 1 2 1 1 1. 330200 2. 330006 4 Box-Behnken 1 25 g /ml 121 92 min 2 6. 284%
模 型 假 设 假 设 假 设 假 设 假 设 假 设 模 型 建 立 与 推 导
系 统 工 程 罗 彪 巩 超 朱 晓 梅 报 酬 契 约 是 所 有 者 激 励 经 营 者 努 力 工 作 的 基 本 方 法 其 传 统 做 法 是 将 经 营 者 报 酬 与 企 业 业 绩 进 行 直 接 挂 钩 而 企 业 业 绩 产 出 本 身 具 有 多 源 性 特 点 除 来 自 经 营 者 的 个 人 努 力 外 还 与 行 业 结 构 资 源 特 征 与 经 营 者 能 力 等
何 秋 琳 张 立 春 视 觉 学 习 研 究 进 展 视 觉 注 意 视 觉 感 知
第 卷 第 期 年 月 开 放 教 育 研 究 何 秋 琳 张 立 春 华 南 师 范 大 学 未 来 教 育 研 究 中 心 广 东 广 州 随 着 图 像 化 技 术 和 电 子 媒 体 的 发 展 视 觉 学 习 也 逐 步 发 展 为 学 习 科 学 的 一 个 研 究 分 支 得 到 研 究 人 员 和 教 育 工 作 者 的 广 泛 关 注 基 于 此 作 者 试 图 对 视 觉 学 习
AFLP % 1. 1 DNA 5 RAPD DNA 0. 1g % ~ ph 6 10 DNA 9 40μl TE SSR STS 20ng /L
2012 13 2 201-206 Journal of Plant Genetic Resources / 071001 41 SSR 21 SSR 41 52 2 ~ 4 2. 5 Shannon 0. 21 ~ 1. 40 0. 73 5. 54 3 7 9 13. 16% ~ 186. 49% 5. 48 6 11 SSR Genetic Diversity of Peanut Arachis
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微生物学通报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn 主编点评文章 Nov. 20, 2013, 40(11): 2146 2155 2013 by Institute of Microbiology, CAS 一株高效去除亚硝酸氮细菌的分离鉴定及其脱氮特性研究 * 聂欢欢赵群芬 李长红王一农张德民 ( 宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室浙江宁波 315211)
浙 江 师 范 大 学 硕 士 学 位 论 文 16-17 世 纪 的 远 东 保 教 权 之 争 姓 名 : 许 璐 斌 申 请 学 位 级 别 : 硕 士 专 业 : 世 界 史 指 导 教 师 : 许 序 雅 20090410 16-17
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编 号 : 企 业 内 高 技 能 人 才 培 养 评 价 实 施 方 案 ( 仅 适 用 于 企 业 特 有 行 业 特 有 工 种 ) 实 施 单 位 ( 公 章 ) 申 报 日 期 年 _ 月 日 1 企 业 内 高 技 能 人 才 培 养 评 价 项 目 实 施 方 案 申 报 表 项 目 名 称 等 级 项 目 性 质 课 时 申 报 单 位 联 系 人 通 讯 地 址 电 话 手 机 电
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- 1 - - 2 - - 3 - - 4 - - 5 - 做 四 个 全 面 的 宣 传 者 实 践 者 - 6 - - 7 - - 8 - - 9 - - 10 - - 11 - - 12 - - 13 - - 14 - - 15 - - 16 - - 17 - - 18 - - 19 - - 20 - 创 新 调 处 新 机 制 构 筑 稳 定 防 火 墙 - 21 - - 22 - - 23
王 桂 华 黄 韦 艮 王 辉 基 于 第 二 版 本 潜 热 感 热 和 海 表 温 度 个 参 量 的 年 逐 月 平 均 资 料 利 用 经 验 正 交 方 法 分 解 分 析 了 这 个 参 量 在 南 海 的 时 空 分 布 结 果 表 明 在 夏 季 模 态 潜 热 表 现 为 南 高 北 低 感 热 表 现 为 中 间 低 两 边 高 两 者 主 要 都 是 海 洋 向 大 气 输 送
吉 林 农 业 大 学 学 报 年 月 粮 食 生 产 能 力 畜 牧 业 生 产 能 力
吉 林 农 业 大 学 学 报 邵 喜 武 郭 庆 海 吉 林 农 业 大 学 经 济 管 理 学 院 长 春 通 过 分 析 吉 林 省 新 农 村 建 设 的 基 础 和 在 资 金 观 念 人 才 村 庄 规 划 等 方 面 的 制 约 因 素 提 出 了 拓 宽 新 农 村 建 设 所 需 资 金 来 源 科 学 选 择 和 培 训 人 才 确 保 九 年 义 务 教 育 加 强 农 村 劳
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呼 伦 贝 尔 学 院 十 三 五 发 展 规 划 二 〇 一 六 年 三 月 目 录 呼 伦 贝 尔 学 院 十 三 五 发 展 规 划 呼 伦 贝 尔 学 院 十 三 五 专 项 发 展 规 划 呼 伦 贝 尔 学 院 各 学 院 十 三 五 发 展 规 划 - 2 - 呼 伦 贝 尔 学 院 十 三 五 发 展 规 划 序 言 - 1 - 一 指 导 思 想 和 发 展 思 路 二 建 设
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58 9 2014 5 梳 理 改 革 开 放 新 时 期 以 来 图 书 馆 学 研 究 的 人 文 学 派 技 术 学 派 实 证 学 派 的 形 成 与 演 变, 并 从 历 史 继 承 国 外 引 入 现 实 学 科 定 位 等 3 方 面 分 析 3 个 学 派 产 生 与 演 变 的 原 因, 认 为 3 种 研 究 倾 向 在 各 自 独 立 发 展 的 过 程 中 会 互 相 借 鉴
新 疆 医 科 大 学 307 中 医 综 合 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 > 2-2 中 药 化 学 笔 记, 由 考 取 本 校 本 专 业 高 分 研 究 生 总 结 而 来, 重 点 突 出, 借 助 此 笔 记 可 以 大 大 提 高 复 习 效 率,
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中 国 软 科 学 年 第 期!!!
山 寨 模 式 的 形 成 机 理 及 其 对 组 织 创 新 的 启 示 山 寨 模 式 的 形 成 机 理 及 其 对 组 织 创 新 的 启 示 陶 厚 永 李 燕 萍 骆 振 心 武 汉 大 学 经 济 与 管 理 学 院 武 汉 大 学 中 国 产 学 研 合 作 问 题 研 究 中 心 湖 北 武 汉 北 京 大 学 经 济 研 究 所 光 华 天 成 博 士 后 工 作 站 北 京 本
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关 于 2015-2016 学 年 第 二 学 期 期 末 周 内 考 试 时 间 地 点 安 排 选 课 课 号 班 级 名 称 课 程 名 称 课 程 性 质 合 考 人 数 实 际 人 数 考 试 教 室 考 试 段 考 试 时 间 (2015-2016-2)-0006178-04247-1 130101 测 试 技 术 基 础 学 科 基 础 必 修 课 35 35 1 教 401 17 周
北 京 工 业 大 学 硕 士 学 位 论 文 Carrousel 氧 化 沟 强 化 生 物 脱 氮 研 究 姓 名 : 殷 芳 芳 申 请 学 位 级 别 : 硕 士 专 业 : 环 境 工 程 指 导 教 师 : 王 淑 莹 20090501 Carrousel
解 放 军 理 工 大 学 学 报 自 然 科 学 版
第 卷 第 期 解 放 军 理 工 大 学 学 报 自 然 科 学 版 年 月 温 差 和 荷 载 引 起 的 钢 组 合 梁 界 面 剪 应 力 分 析 朱 坤 宁 万 水 为 了 解 钢 组 合 梁 桥 的 连 接 界 面 受 力 特 性 分 析 外 荷 载 对 桥 面 板 与 钢 纵 梁 连 接 界 面 的 剪 应 力 分 布 的 影 响 利 用 接 触 面 层 间 纵 向 伸 长 相 等 条
古 地 理 学 报 年 月
第 卷 第 期 年 月 古 地 理 学 报 胡 广 成 鲍 志 东 张 震 罗 小 玉 蔡 雨 刘 丽 中 国 石 油 大 学 北 京 资 源 与 信 息 学 院 北 京 贵 州 桐 梓 松 坎 剖 面 中 下 三 叠 统 发 育 齐 全 化 石 丰 富 出 露 良 好 是 研 究 上 扬 子 地 区 海 相 地 层 的 理 想 剖 面 之 一 根 据 地 层 划 分 与 对 比 将 其 分 为 下
数 学 标 准 不 练 习 1.1 理 解 问 题 并 坚 持 解 决 这 些 问 题 1.2 以 抽 象 和 定 量 方 式 推 理 1.3 建 构 可 行 参 数 和 评 判 他 人 的 推 理 1.4 使 用 数 学 方 法 建 模 1.5 策 略 性 地 使 用 合 适 的 工 具 1.6
课 程 表 格 科 学 框 架 不 练 习 1.1 提 问 1.2 开 发 和 使 用 模 型 1.3 规 划 和 开 展 调 查 1.4 分 析 和 解 释 数 据 1.5 使 用 数 学 运 算 信 息 和 计 算 机 技 术 以 及 计 算 思 维 1.6 构 造 解 释 和 设 计 解 决 方 案 1.7 通 过 证 据 进 行 论 证 1.8 获 取 评 估 和 交 流 信 息 跨 领 域
物理学报 Acta Phys. Sin. Vol. 62, No. 14 (2013) 147802 叠 [4]. PET 设备最重要的部件就是探测器环, 探测 备重建图像具有减少数据插值的优势. 器环的性能直接影响 PET 的成像能力. 探头与探头 之间得到的符合直线叫做投影线. 所有的投影线在
![物理学报 Acta Phys. Sin. Vol. 62, No. 14 (2013) 147802 叠 [4]. PET 设备最重要的部件就是探测器环, 探测 备重建图像具有减少数据插值的优势. 器环的性能直接影响 PET 的成像能力. 探头与探头 之间得到的符合直线叫做投影线. 所有的投影线在](/thumbs/41/22573722.jpg "物理学报 Acta Phys. Sin. Vol. 62, No. 14 (2013) 147802 叠 [4]. PET 设备最重要的部件就是探测器环, 探测 备重建图像具有减少数据插值的优势. 器环的性能直接影响 PET 的成像能力. 探头与探头 之间得到的符合直线叫做投影线. 所有的投影线在")
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南 昌 大 学 学 报 人 文 社 会 科 学 版 唐 美 丽 张 保 和 南 京 信 息 工 程 大 学 公 共 管 理 学 院 江 苏 南 京 南 京 师 范 大 学 公 共 管 理 学 院 江 苏 南 京 井 冈 山 大 学 政 法 学 院 江 西 吉 安 伯 恩 施 坦 以 资 本 主 义 经 济 发 展 中 的 新 材 料 为 借 口 声 称 垄 断 组 织 和 信 用 制 度 一 样 可
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¹ º ¹ º 农 业 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 农 业 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个 月 及 以 上 的 流 动 人 口 非 农 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 非 农 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个
¹ 改 革 开 放 年 来 人 口 流 动 规 模 持 续 增 加 对 我 国 社 会 经 济 的 持 续 发 展 起 到 了 重 要 作 用 为 全 面 了 解 我 国 流 动 人 口 生 存 状 况 准 确 把 握 流 动 人 口 发 展 规 律 和 趋 势 不 断 加 强 流 动 人 口 服 务 管 理 引 导 人 口 有 序 流 动 合 理 分 布 国 家 人 口 计 生 委 于 年 月 启
第 03 期 刘高军等 : 基于 CNONIX 的 XML 与 EXCEL 相互转换技术研究 XML XML CNONIX XML EXCEL EXCEL EXCEL EXCEL CNONIXEXCEL XML EXCEL CNONIX XML EXCEL CNONIX 1 CNONIX 数据元分析
电子科学技术电子科学技术第 02 卷第 03 期 Electronic 2015 年 Science 5 月 & Technology Electronic Science & Technology Vol.02 No.03 May.2015 年 基于 CNONIX 的 XML 与 EXCEL 相互转换技术研究 刘高军, 李丹, 程利伟, 钱程, 段然 ( 北方工业大学计算机学院, 北京,100144)
物 流 从 业 人 员 职 业 能 力 等 级 证 书 分 为 四 个 级 别, 分 别 为 初 级 助 理 级 中 级 和 高 级 ; 采 购 从 业 人 员 职 业 能 力 等 级 证 书 分 为 三 个 级 别, 分 别 为 中 级 高 级 和 注 册 级 请 各 有 关 单 位 按 照 通
物 联 培 字 2016 16 号 各 有 关 单 位 : 为 适 应 国 家 一 带 一 路 战 略 实 施 和 物 流 产 业 转 型 升 级 对 人 才 的 新 要 求, 确 保 物 流 采 购 人 才 培 养 工 作 有 序 衔 接 和 持 续 健 康 发 展, 参 照 国 际 惯 例, 中 国 物 流 与 采 购 联 合 会 ( 以 下 简 称 中 物 联 ) 经 研 究 决 定, 以 物
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16 3 2011 6 Vol 16 No 3 JOURNAL OF HARBIN UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY Jun 2011 1 2 3 1 150040 2 150040 3 450052 1 3 4 > 1 ~ 3 > > U414 A 1007-2683 2011 03-0121- 06 Shrinkage Characteristics of
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美 声 演 唱 方 向 培 养 方 案 一 培 养 目 标 本 方 向 要 求 学 生 德 智 体 美 全 面 发 展, 培 养 能 在 文 艺 团 体 从 事 声 乐 演 唱 及 能 在 艺 术 院 校 从 事 本 方 向 教 学 的 高 级 门 人 才 二 培 养 规 格 本 方 向 学 生 应 系 统 掌 握 声 乐 演 唱 方 面 的 理 论 和 技 能, 具 备 较 高 的 声 乐 演 唱
张 荣 芳 中 山 大 学 历 史 系 广 东 广 州 张 荣 芳 男 广 东 廉 江 人 中 山 大 学 历 史 系 教 授 博 士 生 导 师 我 们 要 打 破 以 前 学 术 界 上 的 一 切 偶 像 以 前 学 术 界 的 一 切 成 见 屏 除 我 们 要 实 地 搜 罗 材 料 到 民 众 中 寻 方 言 到 古 文 化 的 遗 址 去 发 掘 到 各 种 的 人 间 社 会 去
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姚 洁 敏 ( 上 海 中 医 药 大 学 基 础 医 学 院, 上 海 201203) 本 文 通 过 对 发 表 在 SCI SSCI 及 A&HCI 收 录 期 刊 上 的 中 国 医 学 教 育 研 究 文 献 的 分 析, 从 发 文 年 代 期 刊 来 源 被 引 情 况 作 者 机 构 及 国 际 合 作 等 方 面, 来 解 析 中 国 该 领 域 目 前 的 国 际 学 术 影 响,
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摘 要 2013 9 20 至 2015 3 27 ( 共 6 个 ) 以 为 换 仓 周 期 每 期 初 评 级 为 股 票 型 至 期 末 到 期 根 据 最 新 评 级 重 新 择 评 级 股 票 型 相 同 期 限 以 此 类 推 上 述 期 间 获 得 为 92.41% 比 同 期 上 证 高 24.01% 比 全 部 股 票 型 高 30.18% 股 票 型 100% 90% 92.41%
说 明 2014 5 1990
说 明 2014 5 1990 中 共 中 央 办 公 厅 关 于 印 发 中 国 共 产 党 发 展 党 员 工 作 细 则 的 通 知 (2014 年 5 月 28 日 ) 1990 1 2 3 中 国 共 产 党 发 展 党 员 工 作 细 则 第 一 章 总 则 第 一 条 第 二 条 第 三 条 4 第 二 章 入 党 积 极 分 子 的 确 定 和 培 养 教 育 第 四 条 第 五 条
文 化 记 忆 传 统 创 新 与 节 日 遗 产 保 护 根 据 德 国 学 者 阿 斯 曼 的 文 化 记 忆 理 论 仪 式 与 文 本 是 承 载 文 化 记 忆 的 两 大 媒 体 在 各 种 仪 式 行 为 中 节 日 以 其 高 度 的 公 共 性 有 组 织 性 和 历 史 性 而 特 别 适 用 于 文 化 记 忆 的 储 存 和 交 流 节 日 的 文 化 功 能 不 仅 在 于
期 王秀 兰 种 新 试荆 在 岩石 牡 含 量 测 定 中 的应 用 吸取 稀至 刻 度 舍 牡溶 液于 试 司 容量 瓶中 加 乙 放 置 却 分钟 在 验 盐酸 型 分 光 光度 计 上 于 欲 夕 草酸 及 处 侧定 其 吸 光 度 布 全 显 色 荆 用 蒸馏水 显色 吸 收 曲线 的侧
期 王秀 兰 种 新 试荆 在 岩石 牡 含 量 测 定 中 的应 用 吸取 稀至 刻 度 舍 牡溶 液于 试 司 容量 瓶中 加 乙 放 置 却 分钟 在 验 盐酸 型 分 光 光度 计 上 于 欲 夕 草酸 及 处 侧定 其 吸 光 度 布 全 显 色 荆 用 蒸馏水 显色 吸 收 曲线 的侧 定 按 照 操 作手 续 以水的 式剂 空 白 为 参 用 不 同 的 波长侧定 其吸 光 度 结 果
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23 5 Vol 23 No 5 2015 10 Journal of Xiamen University of Technology Oct 2015 MBR 361021 MBR MBR COD cr BOD 5 NH 3 - N TP MBR CODcr 86 4% BOD 5 97 6% NH 3 -N 99% TP 68% 86 7% MBR CODcr BOD 5 NH 3 -N TP
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38 5 Vol 38 No 5 2014 9 Journal of Jiangxi Normal UniversityNatural Science Sep 2014 1000-5862201405-0501-05 1 1* 2 2 1 3300222 330052 Streptomyces lincolnensis 13 8 6% 12 4% Q 93 A 0 1 2 Streptomyces
李 栋 陈 德 元 国 防 将 性 能 测 量 与 层 次 化 动 态 雷 达 图 可 视 化 方 法 相 结 合 提 出 了 一 种 空 间 通 信 网 性 能 仿 真 新 方 法 构 建 了 仿 真 系 统 平 台 同 时 在 分 析 空 间 通 信 网 性 能 参 数 的 基 础 上 提 出 了 一 种 改 进 的 双 分 组 对 路 径 带 宽 测 量 方 法 并 利 用 空 间 通 信 网
抗 日 战 争 研 究 年 第 期
田 子 渝 武 汉 抗 战 时 期 是 国 共 第 二 次 合 作 的 最 好 时 期 在 国 共 合 作 的 基 础 上 出 现 了 抗 日 救 亡 共 御 外 侮 的 局 面 这 个 大 好 局 面 的 出 现 与 中 共 长 江 局 的 丰 功 伟 绩 是 分 不 开 的 但 长 期 以 来 由 于 有 一 个 王 明 的 右 倾 错 误 直 接 影 响 了 对 它 的 全 面 科 学 准 确
( 二 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 培 养 人 的 创 新 精 神,,,,,,,,,,,,, [ ],,,,,,,,,,, :, ;,,,,,,? ( 三 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 全 体 学 生 都 获 得 全 面 发 展,, [ ],,,,,,,,,,,
![( 二 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 培 养 人 的 创 新 精 神,,,,,,,,,,,,, [ ],,,,,,,,,,, :, ;,,,,,,? ( 三 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 全 体 学 生 都 获 得 全 面 发 展,, [ ],,,,,,,,,,,](/thumbs/39/20125331.jpg "( 二 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 培 养 人 的 创 新 精 神,,,,,,,,,,,,, [ ],,,,,,,,,,, :, ;,,,,,,? ( 三 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 全 体 学 生 都 获 得 全 面 发 展,, [ ],,,,,,,,,,,")
( ) ( )... 李 雪 岩, 龙 耀 (. 广 西 民 族 大 学 商 学 院, 广 西 南 宁 ;. 中 山 大 学 教 育 学 院, 广 东 广 州 ) : 高 等 教 育 是 专 业 教 育 高 考 是 为 高 等 教 育 服 务 的, 是 为 高 等 专 业 教 育 选 拔 有 专 业 培 养 潜 质 的 人 才 现 行 高 考 制 度 忽 略 专 业 潜 质 的 因 素, 过 份 强
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有 限 理 性 动 物 精 神 及 市 场 崩 溃 对 情 绪 波 动 与 交 易 行 为 的 实 验 研 究 林 树 俞 乔 资 本 市 场 的 经 验 表 明 市 场 参 与 主 体 投 资 者 的 情 绪 波 动 对 资 产 交 易 与 价 格 决 定 产 生 了 不 可 忽 视 的 影 响 但 是 现 有 文 献 尚 缺 乏 对 这 一 重 要 因 素 的 研 究 因 此 本 文 的 目 的
9.1.乳房炎
1. 1 3 4 5 -- -- 1 3 2 3,, 3 4 2. : 1 2 3 4 6~12h 2 1~2d (1) 15~18 7~15b 70% 2%~5% 2 3 2. 1 2 3. 3-7d 3-4 ( ) 1 2 3% 2 3 2% 1% 2 3 3 5 10mg 10% 4. (1) (2) (3) (4) (5) (1) (2) 3
0 年 上 半 年 评 价 与 考 核 细 则 序 号 部 门 要 素 值 考 核 内 容 考 核 方 式 考 核 标 准 考 核 ( 扣 原 因 ) 考 评 得 3 安 全 生 产 目 30 无 同 等 责 任 以 上 道 路 交 通 亡 人 事 故 无 轻 伤 责 任 事 故 无 重 大 质 量
0 年 上 半 年 评 价 与 考 核 细 则 序 号 部 门 要 素 值 考 核 内 容 考 核 方 式 考 核 标 准 无 同 等 责 任 以 上 道 路 交 通 亡 人 事 故 3 无 轻 伤 责 任 事 故 目 标 30 及 事 无 重 大 质 量 工 作 过 失 故 管 无 其 他 一 般 责 任 事 故 理 在 公 司 文 明 环 境 创 建 中, 无 工 作 过 失 及 被 追 究 的
2015-2016 学 年 第 二 学 期 集 中 考 试 安 排 (18 周 ) 考 试 日 期 :6 月 27 日 星 期 一 8:10-9:50 第 二 公 共 教 学 楼 A 区 A303 10811046 高 等 数 学 ( 理 二 2) 复 材 1501-2 材 料 科 学 与 工 程
考 试 时 间 2015-2016 学 年 第 二 学 期 集 中 考 试 安 排 (18 周 ) 考 试 日 期 :6 月 27 日 星 期 一 考 场 所 在 教 学 楼 ( 教 学 区 ) 考 试 教 室 课 程 号 课 程 名 考 生 所 在 专 业 ( 班 级 ) 考 生 所 属 学 院 8:10-9:50 第 二 公 共 教 学 楼 A 区 A101 10811026 高 等 数 学 (
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梁 运 文 霍 震 刘 凯 本 文 利 用 奥 尔 多 中 心 的 调 查 数 据 从 三 个 方 面 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 状 况 进 行 了 详 细 的 实 证 分 析 首 先 刻 画 了 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 的 总 体 统 计 特 征 然 后 从 财 产 构 成 出 发 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 进 行 了 结 构 分 解 最 后 通
王 声 文 等 :GNC62 数 控 系 统 组 态 和 设 备 调 试 设 计 2 GNC62 系 统 组 态 设 计 原 理 2 2 [1] 2 A I/O 1 293
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工 业 技 术 创 新 工 第 02 业 技 卷 术 第 创 03 新 期 Industrial 2015 年 Technology 6 月 Innovation Industrial Technology Innovation Vol.02 No.03 Jun.2015 GNC62 数 控 系 统 组 态 和 设 备 调 试 设 计 王 声 文, 白 彦 庆, 刘 庆 宏, 孙 振, 黄 岩 (
附件1：
附 件 5 增 列 硕 士 专 业 学 位 授 权 点 申 请 表 硕 士 专 业 学 位 类 别 ( 工 程 领 域 ): 工 程 硕 士 ( 控 制 工 程 领 域 ) 申 报 单 位 名 称 : 上 海 工 程 技 术 大 学 一 申 请 增 列 硕 士 专 业 学 位 授 权 点 论 证 报 告 申 请 增 列 硕 士 专 业 学 位 授 权 点 论 证 报 告 一 专 业 人 才 需 求
' ' 1 2 1956-1966 1956 1966 1957 1 50 2 1978 21 30 3 1966-1977 1966 5 1976 10 1984 1 1978-1978 80 3 1978 119
33 Vol. 33 1 Journal of Hubei Normal University Philosophy and Social Science No. 1 2013 ( 湖 北 师 范 学 院 文 学 院, 湖 北 黄 石 435002) 新 中 国 成 立 以 来, 大 学 生 价 值 观 的 变 迁 总 体 上 来 说 经 历 了 两 个 大 的 阶 段, 即 改 革 开 放 前 的
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郑 长 德 教 育 的 发 展 人 力 资 源 的 开 发 是 决 定 西 部 民 族 地 区 未 来 发 展 的 关 键 因 素 之 一 是 实 施 西 部 大 开 发 战 略 提 高 其 经 济 竞 争 力 和 综 合 实 力 的 重 要 保 障 本 文 从 西 部 民 族 地 区 教 育 发 展 的 现 状 入 手 指 出 中 华 人 民 共 和 国 成 立 多 年 来 西 部 民 族 地 区
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