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含井
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1 GE Healthcare FTA 技术手册

前言 1962 年,Robert Guthrie 博士发表了用于筛选新生儿苯丙酮尿症 (PKU) 的方法, 并首次引入干血点 (Dry Blood Spot,DBS) 技术截至今日, 该技术已经面世逾 40 年干血点方法是将采集的血样滴加在特殊的纸介质上 ( 通常是滤纸 ), 干燥后可以长期保存或经抽提后分析抽提液中的目标物 FTA 卡则是对干血点技术良好的诠释 FTA 卡作为

2 前言 1962 年,Robert Guthrie 博士发表了用于筛选新生儿苯丙酮尿症 (PKU) 的方法, 并首次引入干血点 (Dry Blood Spot,DBS) 技术截至今日, 该技术已经面世逾 40 年干血点方法是将采集的血样滴加在特殊的纸介质上 ( 通常是滤纸 ), 干燥后可以长期保存或经抽提后分析抽提液中的目标物 FTA 卡则是对干血点技术良好的诠释 FTA 卡作为 Whatman 的一项专利技术, 创新性的应用于室温下 DNA 和 RNA 的采集运输纯化和储存, 所有工作均在一张卡上完成目前, Whatman 处于这一市场技术的领先者行列 FTA 卡包括 FTA 卡和 FTA Elute 卡, 集采集运输纯化和储存于一身, 广泛应用于以下各个研究和应用领域 : CDC 法医系统畜牧业植物研究基因组研究中心 Whatman is now part of GE Healthcare 引领分离技术的发展 Whatman 在样品制备和过滤领域中值得信赖的专业品质已为他们在世界上赢得了美誉, 并已掌握基因和蛋白功能研究方面的核心技术现在 Whatman 已全部并入 GE Healthcare, 两支技术领先团队的融合, 将为实验室和相关研究提供更加广泛专业化的技术支撑更多详情, 请访问

3 FTA 卡适用物种 FTA 卡适用样品口腔细胞 : 人 / 犬指尖取血移液器取样耳部取样组织按压植物样品鼠尾取血 1

FTA 技术集收集纯化运输储存于一身 FTA 卡为血样口腔细胞植物 DNA 样本的长期保存和分析提供了简单可靠的解决方案原理 :

包括对操作人员有潜在传染性的病原体简单的清洗后,DNA 链清晰可见用于样品采集的同一张 FTA 卡, 可取一部分用于 DNA 分析,

只需 2 种缓冲液, 核酸即可被纯化含有样品的 FTA 卡可按普通邮件邮寄安全卡上化学试剂灭活有害病原体适合常规实验室操作, 操作更安全稳定

4 FTA 技术集收集纯化运输储存于一身 FTA 卡为血样口腔细胞植物 DNA 样本的长期保存和分析提供了简单可靠的解决方案原理 : 简单三步即得纯化 DNA 上样血液样品初加至 FTA 卡专利的 FTA 技术可裂解细胞释放 DNA, 并可灭活有潜在破坏性的细菌真菌, 包括对操作人员有潜在传染性的病原体简单的清洗后,DNA 链清晰可见用于样品采集的同一张 FTA 卡, 可取一部分用于 DNA 分析, 也可即刻纯化或室温长期储存打孔特点 : 纯化 / 清洗常温核酸固定, 无需低温, 可常温储存运输方便血样唾液加至 FTA, 即可固定核酸只需 2 种缓冲液, 核酸即可被纯化含有样品的 FTA 卡可按普通邮件邮寄安全卡上化学试剂灭活有害病原体适合常规实验室操作, 操作更安全稳定血样可常温稳定保存 17.5 年口腔细胞可常温稳定保存 8 年随着时间的推移, 该保存记录年限仍在不断增加应用 : STR 分析犯罪现场采样遗传鉴定 DNA 数据库 2

5 FTA 技术什么是 FTA? FTA 是经化学试剂特殊处理的棉纤维卡片 FTA 特殊性能 : 可用于核酸抽提以备后续分析保护核酸免于酶的损伤可阻断病毒的受体信号通路以杀灭有害病原体利于核酸的室温长期稳定保存 FTA 技术分为 FTA 和 FTA Elute 1.FTA/FTA 指示卡 :DNA 结合于纤维素卡片, 而蛋白质被洗脱 DNA 取样 2.FTA Elute/FTA Elute 指示卡 :: 蛋白结合于纤维素,DNA 可直接被水洗脱 PCR 抑制物结合溶液中的 DNA 取样 3

年 2 个月 3 年 3 年 N/A N/A 备注 : 室温保存记录 ; 以上保存记录随着时间的推移仍在不断增加 A.

6 FTA 技术室温保存的稳定性样品的室温保存记录抗革兰氏阴性 / 阳性菌抗病毒抗真菌血样 - 保存期口腔细胞 - 保存期质粒 - 保存期微生物 - 保存期 RNA 分离水溶液 FTA 指示型 FTA 17 年 7 个月 8 年 4 年 4 年 7 周 FTA Elute 指示型 FTA Elute 12 年 2 个月 3 年 3 年 N/A N/A 备注 : 室温保存记录 ; 以上保存记录随着时间的推移仍在不断增加 A. 血样的室温保存记录血样保存于 FTA 卡 17 年 7 个月,DNA 扩增后的 STR 结果 B. 口腔细胞的室温保存记录口腔细胞保存于 FTA 卡 8 年,DNA 扩增后的 STR 结果 4

FTA 技术抗菌特性确保样品稳定性紫外线保护 1. 抗菌特性, 确保操作人员的安全 1. 血样滴于 FTA 卡 2. 例如, 黑曲霉培养于 4% 葡萄糖琼脂 3. FTA 卡圆片置于该培养基, 培养过夜 4. 通过噬菌斑直径的大小判断抗菌能力 FTA 卡圆片高于 99% 的有害微生物可被 FTA 卡灭活 ; 保证操作人员免受 HCV HIV 等病毒的侵害 BACTEERIA/YEAST S.

16 Average Organisms Destroyed @1 Hour CFU 18,999,000 22,999,000 13,999,000 8,200,000 22,996,000 Virus Detected@1 Hour Non-detectable Non-detectable Average Organisms Destroyed @2 Hour Not tested Not

7 FTA 技术抗菌特性确保样品稳定性紫外线保护 1. 抗菌特性, 确保操作人员的安全 1. 血样滴于 FTA 卡 2. 例如, 黑曲霉培养于 4% 葡萄糖琼脂 3. FTA 卡圆片置于该培养基, 培养过夜 4. 通过噬菌斑直径的大小判断抗菌能力 FTA 卡圆片高于 99% 的有害微生物可被 FTA 卡灭活 ; 保证操作人员免受 HCV HIV 等病毒的侵害 BACTEERIA/YEAST S.epidermidis P.aeruginosa E.coli B.subtilis C.albicans VIRUS BVDV HIV Organisms Applied Log 10 Virus Applied Average Organisms Hour CFU 18,999,000 22,999,000 13,999,000 8,200,000 22,996,000 Virus Detected@1 Hour Non-detectable Non-detectable Average Organisms Hour Not tested Not tested Not tested 7,500,000 22,996,000 Log 10 Rcduction in Virus@1 Hour * HCV 丙型肝炎病毒采用 BVDV 模型 * 更多数据支持可访问网站或拨打技术热线咨询 2. 防紫外线损伤特性, 确保核酸的稳定 FTA 卡普通滤纸图示为经对比处理所获 puc 质粒的 PCR 扩增结果图 : FTA 卡 UV 处理组与未处理组 ; 普通滤纸 UV 处理组与未处理组 ; 阴性对照 (NTC) 与阳性对照 (Pos) Line 1, 14 : DNA Marker Line 2-4: FTA 卡 UV 未处理组 Line 8-10: 普通滤纸 UV 未处理组 Line 15: 空白 FTA Line 5-7: FTA 卡 UV 处理组 Line 11-13: 普通滤纸 UV 处理组 Line 16: 含质粒 FTA 5

8 FTA 卡的选择与使用方法如何选择 FTA 卡和 FTA Elute 卡? 基因组 DNA 如 : 血液, 细胞, 组织, 植物, 细菌, 体液等是否需要溶液形式的 DNA? 否是您的下游应用是什么? 您的下游应用是什么? 单次反应 :PCR,STR,RFLP,Invader Assay,SNP,WGA 多次反应 :PCR,STR,RFLP,Invader Assay,SNP,WGA; 定量 PCR 等 DNA 固化形式 FTA! DNA 溶液形式 FTA Elute! FTA 的操作方法 FTA Elute 的操作方法点样取样清洗取样清洗 PCR 扩增 DNA 附于纸片 DNA 存在于溶液混悬加热 6

9 FTA 用于个人身份识别口腔细胞收集 1. 什么是 EasiCollect? EasiCollect 是 all-in-one 设备, 用于收集口腔细胞并转移至 FTA 卡可收集大量细胞将细胞持续转移至 FTA 卡 PCR 结果可信正向放置弯折 EasiCollect 以收集细胞细胞收集过程移去保护膜用力按压泡沫头以闭合装置取出 FTA 卡, 干燥并用于后续操作 2. 泡沫采样棒用于口腔细胞的收集人类基因 ID 7

10 FTA 的其他应用领域 1. FTA 卡用于犯罪现场取证附着于不同材质血斑的 DNA 回收量对比如下 : 外观木材 10ul 血样镜片 10ul 血样瓷砖 10ul 血样毛毯 10ul 血样 DNA 回收量 1.5 ng/ul 2.0 ng/ul 1.7 ng/ul 1.75 ng/ul 收集犯罪现场镜片的血迹于 FTA 卡 2. FTA 卡用于农业研究 A. 牛的耳静脉取血 B. 植物样品的收集各样品于室温保存 8 年后的扩增图谱 8

结果图 Line 1 DNA marker; Line 2 阳性对照 Line 3&4 阳性 DNA 与空

11 FTA 的其他应用领域 3. FTA 卡用于基因组研究 FTA 技术专为基因研究领域设计优点 : 无需低温装置可以文件形式保存避免克隆的反复冻融造成丢失易获取克隆 CloneSaver 的操作流程 : 加样取样结合质粒大肠杆菌转化含质粒取样片与细胞孵育清洗保存于 CloneSaver 卡上超过 30 个月的 pmab32/jm109pcr 结果图 Line 1 DNA marker; Line 2 阳性对照 Line 3&4 阳性 DNA 与空 CloneSaver Line 5& 点样的 CloneSaver Line 7 空 CloneSaver Line 8& 点样的 CloneSaver Line 10 DNA 阴性对照 Line 11 DNA marker(haeiii 酶切 ) 9

Whatman FTA 产品选择指南 EasiCollect 采样器用于采集唾液或口腔细胞, 泡沫头大小与 FTA 卡样品区大小吻合, 方便采样和加样咽拭子棒端厚的棉纤维材质 ; 棉纤维头部可直接插入测试试管 ; 不是 FTA; 采集口腔细胞后需存于 -20 度 Harris UniCore 取样器一次性 ; 可取样 300 次 ;1.2/2.0/3.0/6.

基因卡用于 NDA 采集纯化和分析的指示型 FTA 卡 WB120206 指示型 FTA 标准卡 WB120306 指示型 FTA 标准卡 WB120056 指示型 FTA 迷你卡 WB120356 指示型 FTA 迷你卡 WB120211 指示型 FTA 微型卡 WB120311 指示型 FTA 微型卡用于 DNA 采集纯化的 FTA Elute 卡 WB120410 FTA Elute

纯化和分析 WB120068 FTA 植物试剂盒 WB120065 PlantSaver FTA 卡 WB120365 PlantSaver FTA 卡寄生虫 DNA 采集纯化和分析 WB120220 FTA Concentrator-PS 50/pk FTA 纯化试剂 WB120204 FTA 纯化试剂 500 ml Harris Micro 取样器 WB100005 Harris

12 Whatman FTA 产品选择指南 EasiCollect 采样器用于采集唾液或口腔细胞, 泡沫头大小与 FTA 卡样品区大小吻合, 方便采样和加样咽拭子棒端厚的棉纤维材质 ; 棉纤维头部可直接插入测试试管 ; 不是 FTA; 采集口腔细胞后需存于 -20 度 Harris UniCore 取样器一次性 ; 可取样 300 次 ;1.2/2.0/3.0/6.0 mm 直径 ; 四个一包装 FTA 纯化试剂去除血红素 PCR 抑制剂和其他潜在污染物, 确保得到超优质 DNA 用于下游分析多重保护袋用于运输或保存 FTA 卡,7 层保护垫设计保护 FTA 卡免受气体或液体污染 Harris Micro 打孔器抛光不锈钢头经久耐用, 可消毒, 可打孔 2000 次用于 FTA 卡打孔取样, 每个包装带有 1 个打孔垫, 确保样品操作的情节性, 保护取样头 0.2 mm 打孔器推荐用于血样 ; 2.0 mm 打孔器推荐用于口腔细胞样品货号用于 DNA 采集纯化和分析的普通 FTA 卡 WB FTA 试剂盒 WB FTA 标准卡 WB FTA 标准卡 WB FTA 迷你卡 WB FTA 迷你卡 WB FTA 微型卡 WB FTA 微型卡 WB FTA 基因卡 WB FTA 基因卡用于 NDA 采集纯化和分析的指示型 FTA 卡 WB 指示型 FTA 标准卡 WB 指示型 FTA 标准卡 WB 指示型 FTA 迷你卡 WB 指示型 FTA 迷你卡 WB 指示型 FTA 微型卡 WB 指示型 FTA 微型卡用于 DNA 采集纯化的 FTA Elute 卡 WB FTA Elute 微型卡 WB FTA Elute 微型卡 WB 指示型 FTA Elute 微型卡 WB 指示型 FTA Elute 微型卡包装货号包装质粒存储和分析 WB CloneSaver 卡 5/pk WB CloneSaver Starter 试用包 2/pk WB SPOT CloneSaver 上样托盘植物 DNA 采集纯化和分析 WB FTA 植物试剂盒 WB PlantSaver FTA 卡 WB PlantSaver FTA 卡寄生虫 DNA 采集纯化和分析 WB FTA Concentrator-PS 50/pk FTA 纯化试剂 WB FTA 纯化试剂 500 ml Harris Micro 取样器 WB Harris Micro 取样器 (1.2mm 直径 ) 及取样垫 WB Harris Micro 取样器 (2.0mm 直径 ) 及取样垫 WB Harris Micro 取样器 (3.0mm 直径 ) 及取样垫 WB Harris Micro 取样器 (1.2mm 直径 ) 备用活塞 WB Harris Micro 取样器 (2.0mm 直径 ) 备用活塞 WB Harris Micro 取样器 (3.0mm 直径 ) 备用活塞 WB 备用取样头 (1.2mm) WB 备用取样头 (2.0.mm) WB 备用取样头 (3.0mm) WB 备用取样垫货号一次性 Harris Uni-Core 取样器 WB Harris Uni-Core 取样器 (1.2mm) WB Harris Uni-Core 取样器 (2.0mm) WB Harris Uni-Core 取样器 (3.0mm) WB Harris Uni-Core 取样器 (6.0mm) 多重保护袋 WB 多重保护袋, 小 (8 7 cm) WB 多重保护袋, 大 (9 15 cm) WB CloneSaver 多重保护袋干燥剂 WB 干燥剂 FTA 基因卡托盘 WB FTA 基因卡托盘口腔粘膜细胞采集 WB EasiCollect 卡 WB 无菌泡沫头采样棒 WB 无菌 Omni 拭子包装 4/pk 4/pk 4/pk 4/pk 50/pk 1000/pk 20/pk 50/pk 网址 : 电邮 : lifesciences@ge.com 免费咨询热线 : 上海办事处上海市浦东新区张江高科技园区华佗路 1 号电话 : (8621) 传真 : (8621) 邮编 :

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FTA-11.16.ai GE Healthcare Whatman FTA 手册 FTA 卡适用物种 FTA 卡适用样品口腔细胞 : 人 / 犬指尖取血移液器取样耳部取样组织按压植物样品鼠尾取血前言 1962 年,Robert Guthrie 博士发表了用于筛选新生儿苯丙酮尿症 (PKU) 的方法, 并首