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1 中国中西医结合消化杂志 ZhongguoZhonḡXiyiJieheXiaohuaZazhi 月刊 1993 年 10 月创刊第 24 卷第 8 期 2016 年 8 月 主管中华人民共和国教育部 目 次 主办华中科技大学同济医学院中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员会中华中医药学会脾胃病分会 总顾问李道本 专家笔谈 重视溃疡性结肠炎的中西医结合治疗 沈洪, 朱磊 (571) 主编危北海李乾构张声生杨胜兰 ( 常务 ) 杂志社社长胡豫 编辑出版 中国中西医结合消化杂志 编辑部 , 武汉市解放大道 1277 号电话 :(027) 传真 :(027) 网址 : zxyjhxhzz@qq.com QQ: 排版江松多媒体技术发展有限公司 印刷武汉湖印印务有限责任公司 发行国内 : 中国邮政集团公司湖北省分公司中国邮政报刊订阅网址 :htp://bk cn 国外 : 中国国际图书贸易集团公司 ( 北京车公庄西路 35 号,100048) 国外代号 :BM6471 订购全国各地邮局邮发代号 ( 国内 ) NTE 1065( 国际 ) 邮 购 中国中西医结合消化杂志 编辑部 , 武汉市解放大道 1277 号电话 :(027) 定价每期 元, 全年 元 中国标准连续出版物号 ISSN X CN /R 广告经营许可证武工商广字 号 2016 年版权归 中国中西医结合消化杂志 编辑部所有 论著 大黄蛰虫丸联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化疗效观察 张红星, 刘旭东, 王朝阳 (575) 苍菊清肝降脂方对脂肪肝大鼠肝组织脂肪沉积 氧化应激和脂 质过氧化的影响 龚亚华, 张银华, 成扬, 等 (578) HBV DNA 联合 ALT 对 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的诊断价值 汪涛, 刘娟, 王婵, 等 (582) 非甾体抗炎药物活化基因 -1 的表达水平与胃癌发生发展的相 关性研究 李丽娟, 刘明, 李晨光 (586) 中医健脾疗法对消化性溃疡愈合质量及血清正表皮生长因子 的影响 刘越洋, 黄雅慧, 孙洁, 等 (590) 肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜炎性因 子的影响 李思聪, 李玉明 (594) 奥美拉唑治疗小儿胃食管反流性哮喘疗效观察及对肺功能 炎 性因子及免疫功能的影响 研究报告 奥沙利铂对结直肠癌急慢性神经毒性的观察 林志刚, 潘慧, 林忠响 (600) 林珍喜, 郭志军 (604) 基于数据挖掘的中药专利复方治疗幽门螺杆菌相关性胃病的 用药规律分析 沈正泽, 古锐, 曾宪泉, 等 (608) 牛奶蛋白诱导的婴儿过敏性直肠结肠炎 66 例临床分析 胡海燕, 赵青, 金翠, 等 (612)

2 马来酸曲美布汀联合复方消化酶对老年肠易激综合征患者临床症状及其对 P 物质 生长抑素及降钙素基因相肽的影响 卢思超 (616) 蛇毒血凝酶及云南白药对非静脉曲张上消化道出血治疗效果及并发症的影响 周青梅, 付晓林, 乔强 (620) 益气化浊解毒汤剂联合胃复春片治疗慢性萎缩性胃炎伴异型增生疗效观察及其安全性评价 蔡亚君 (623) 名医经验 魏玮教授调理情志治疗脾胃病经验介绍 朱佳杰, 苏晓兰, 郭宇, 等 (627) 经验交流 基于阴虚质体质的乙肝相关性原发性肝癌的病因病机探讨 张 栓, 赵亚林, 何玲玲, 等 (630) 四磨汤口服液治疗原发性肝癌介入化疗栓塞术后胃肠功能障碍 41 例临床观察 乌司他丁对急性胰腺炎患者肝损伤的保护作用研究 范文轩, 王三虎, 黄 瑞, 等 (632) 吴 平, 谭小燕, 许超贵 (634) 乌贝散联合雷贝拉唑治疗反流性食管炎患者的临床疗效及其对 G-17 PGⅠ PGⅡ 水平的影响 儿宝颗粒联合锌硒宝治疗小儿厌食症临床疗效观察 曹 静, 查安生 (636) 病例报告 苏 婵, 邵 莉, 胡国华 (639) 白眉蛇毒血凝酶致十二指肠溃疡出血患者低纤维蛋白原血症 1 例 杨成, 占强 (642) 综 述 PTEN 在胃癌中作用的研究进展 张顺荣, 李东芳 (644) 慢性萎缩性胃炎与幽门螺杆菌感染及其主要毒力因子研究进展 舒晓霞, 黄 彬, 谢伟昌, 等 (648) 中国中西医结合消化杂志 编辑部严正声明 (577) 科技论文中插图的规范化 (629) 网上投稿注意事项 (643) 中国中西医结合消化杂志 稿约 (652) 期刊基本参数 :CN /R*1993*m*A4*84*zh*P*$12.00*22* 责任编委李道本责任编辑阮方英文摘要审校卢芙蓉

3 CHINESEJOURNALOFINTEGRATEDTRADITIONAL AND WESTERN MEDICINEONDIGESTION Monthly Establishedin1993 Vol24No8 August2016 Supervisor MinistryofEducationofPeople srepublic ofchina Sponsor Tongji MedicalColegeof Huazhong UniversityofScienceandTechnology SpecialCommiteeoftheDigestiveSystem Diseaseof Chinese Commitee ofintegratedtraditionaland Western Medicine SpecialCommiteeoftheGastro-spleenDiseasesof Chinese Commiteeof DepartmentofTraditionalChineseMedicine Contents GeneralCounsel LIDao-ben ChiefEditor WEIBei-hai,LIQianḡou,ZHANGShenḡsheng, YANGShenḡlan(standing) ManagingDirector HU Yu EditingandPublishing DepartmentofChineseJournalofIntegratedTraditionaland Western MedicineonDigestion Add:1277,JiefangRoad,Wuhan, Tel:(027) Fax:(027) Internet: QQ: Seting WuhanJiangsong MultimediaCo.,Ltd Printing WuhanHuyinPrintingCo.,Ltd OverseasDistribution ChinaInternationalBookTradingCorporation 35 Chegongzhuang Xilu,Beijing,100048, China LILi-juan,LIU Ming,LIChen-guang(586) Efectsofspleenstrengtheningtherapyonhealingqualityofpepticulcerand onserum EGF LIUYue-yang,HUANGYa-hui,SUNJie,etal(590) Changfukangdecoction simpactongeneralconditionandtheexpressionof inflammatoryfactorofsmalintestinalmucosainratswithacuteradiation enteritis LISi-cong,LIYu-ming(594) immunefunction LINZhi-gang,PAN Hui,LINZhonḡxiang(600) Mail-Order EditorialDepartmentofChineseJournalof IntegratedTraditionalandWesternMedicineonDigestion TheclinicalobservationoftreatmentofDahuang Zhechong pilcombined withentecavirinchronichepatitisbpatientwithlivercirrhosis ZHANG Honḡxing,LIUXu-dong,WANGChao-yang(575) EfectofCangjuQingganJiangzhidecoctiononfatdeposition,oxidativestress andlipidperoxidationinratswithfatyliver GONGYa-hua,ZHANGYin-hua,CHENGYang,etal(578) DiagnosticvalueofHBVDNAcombinedALTinHBeAgnegativechronicactivehepatitisB WANGTao,LIUJuan,WANGChan,etal(582) RelationshipoftheexpressionlevelofNAG-1andtheoccurrenceanddevelopmentofgastriccancer Curativeefectofomeprazoleinthetreatmentofchildrenwithgastroesophagealrefluxasthmaanditsefectonlungfunction,inflammatoryfactorsand Observationofoxaliplatinoncolorectalcancerwithacuteandchronicneurotoxicity LINZhen-xi,GUOZhi-jun(604) SHENZhenḡze,GURui,ZENGXian-quan,etal(608) Clinicalanalysison66casesofinfantilealergicproctocolitiscausedbymilk protein HU Hai-yan,ZHAOQing,JINCui,etal(612) Efectoftrimebutinemaleatecombinedwithcompounddigestiveenzymeson Psubstance,plasmasomatostatinandcalcitoningene-relatedpeptidelevels andclinicalsymptomsinelderlypatientswithirritablebowelsyndrome LUSi-chao(616) CSSN ISSN X CN /R Copyright 2016bytheEditorialDepartmentof Chinese JournalofIntegrated Traditionaland Western MedicineonDigestion StudyonthepaternsofChinese medicinepatentformulastreatinghelicobacterpyloriassociatedgastritisbasedondatamining TheefectsofhemocoagulaseandYunnanBaiyaointreatingnon-varicealuppergastrointestinalbleeding ZHOUQinḡmei,FUXiao-lin,QIAOQiang(620) CurativeefectandsafetyevaluationofYiqiHuazhuoJiedudecoctioncombinedwith Weifuchunintreatingchronicatrophicgastritiswithdysplasia CAIYa-jun(623)

4 第 24 卷第 8 期第 571 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P571 Aug2016 专家笔谈 doi: /j.issn x 重视溃疡性结肠炎的中西医结合治疗 沈洪, 朱磊 ( 江苏省中医院消化科, 江苏南京 ) 关键词 : 溃疡性结肠炎 ; 中西医结合 ; 治疗 中图分类号 :R 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) 专家简介 : 沈洪, 医学博士, 教授, 主任中医师, 南京中医药大学博士生导师 现任江苏省中医院消化科主任, 卫生部国家重点临床专科主任, 国家中医药管理局中医脾胃病学重点学科和重点专科学科学术带头人, 溃疡性结肠炎协作组组长, 江苏省中医消化病临床医学中心 江苏省医学重点学科和重点专科主任 兼任中华中医药学会脾胃病分会副主任委员, 世界中医药学会联合会消化病专业委员会副会长, 中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员会委员, 江苏省中医药学会脾胃病专业委员会主任委员, 江苏省医学会消化病分会常务委员, 中国民族医药学会脾胃病分会常务副会长 溃疡性结肠炎 (ulcerativecolitis,uc) 是一种慢性炎症性疾病, 炎症累及直肠及不同范围的结肠, 病变呈持续性, 特征是复发与缓解交替出现 近年来随着生活方式 饮食结构的改变以及对疾病认识水平的提高, 本病的发病率和患病率逐年升高, 推测我 [1-3] 国的患病率约为 11.6/10 万, 已成为临床常见的疑难疾病, 因此对本病的中西医结合治疗和研究应该受到足够的重视 1 中医药治疗 UC 的疗效是中西医结合的基础 UC 的治疗目标是诱导并维持临床缓解及黏膜愈合, 防治并发症, 改善患者生活质量 目前西药治疗大多采用升阶梯方案, 氨基水杨酸制剂仍为治疗轻中度 UC 的主要药物, 糖皮质激素和免疫抑制剂用于中重度 UC 的治疗, 当激素及免疫抑制剂治疗无效或激素依赖 或不能耐受上述药物治疗时, 可运用生物制剂, 左半结肠炎可联用局部治疗, 如栓剂或 [4] 灌肠 中医药治疗 UC 是我国的特色优势, 一些传统中药应用广泛, 在 2009 年世界胃肠病组织推荐的炎症性肠病全球指南中也被推荐使用, 如锡类散 青黛粉 云南白药, 或口服方剂 ( 如白头翁汤 ), 以及一些 收稿日期 : 基金项目 : 国家中医药行业科研专项 (No: ); 江苏省临床医学科技专项项目 (No:BL ); 国家中医临床研究基地 ( 脾胃 ) 资助 ; 江苏省高校优势学科项目通讯作者 : 沈洪, shenhong999@163.com 单一的中药成分 ( 如白头翁根 黄连根 黄柏 黄芩和 [5] 姜黄素 ) 等 有研究观察中药与柳氮磺胺吡啶 (SASP) 治疗 UC 的临床疗效, 结果表明中药治疗组 346 例患者中 321 例临床治疗有效,SASP 对照组 265 例患者中 207 例临床治疗有效, 两者间差异有统计学意义 (P<0.01) [6] 另一项研究对湿热内蕴型 UC 采取多中心 随机 双盲 对照研究, 研究结果显示复方苦参结肠溶胶囊和艾迪莎治疗组中医证候疗效总有效率 (91.7% vs.85.0%) 肠镜下病变改善总有效率 (92.0% vs.83.3%) 镜下组织学评估病变改善率 (66.7% vs.52.0%) 疾病活动指数 DAI(1.03±1.87vs.1.78±2.18) 方面比较差异均无统计学意义 (P>0.05), 复方苦参结肠溶胶囊疗效不劣于艾迪莎, 且有优于艾迪莎的趋势, 可作为艾 [7] 迪莎等化学药治疗效果不佳时的替代治疗 我们针对活动期和缓解期呈现的不同中医证候学特征, 采用多中心 随机 对照的临床研究, 将 224 例轻 中度 UC 患者采用中药分期序贯治疗或者阳性对照药物 ( 美沙拉嗪肠溶片 ) 治疗 24 周结束, 试验组证候总有效率 92.45%, 缓解率 64.15%, 黏膜愈合率 78.89%; 对照组的证候总有效率 90.32%, 缓解率 51.61%, 黏膜愈合率 75.00% 24 周随访试验组复发率 13.24%, 对照组的复发率 14.58% 结果显示中药分期序贯治疗能更快地减轻症状并诱导病情缓解, 其临床疗效非劣效于美沙拉嗪肠溶片, 中药组对患者脓血便症状的控制较西药组更为迅速

5 572 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 ( 第 8 周 66.99% vs.50.56%, 第 16 周 73.79% vs %) 基础研究方面显示了中医药治疗 UC 的疗效机 制, 研究表明中药复方 单味药或中药成分具有抗 炎 调节免疫 抗自由基损伤 影响肠黏膜屏障 改善 血液高凝状态和调节肠动力等作用 如清肠栓能下 调 UC 大鼠 MAdCAM-1 表达 [8], 肠炎清可减少 UC 大鼠黏附分子 ICAM-1 产生以及降低中性粒细胞浸 润 [9], 白藜芦醇可以提高 UC 小鼠外周血和肠系膜 淋巴细胞 CD4 + CD25 + Foxp3 + Treg 细胞占 CD4 + T 淋巴细胞的百分率, 提高 CD4 + CD25 + Foxp3 + Treg 数量 [10], 复方苦参结肠溶胶囊可抑制 UC 患者结肠 黏膜 NF-κBp65 及 STAT6 的活化及表达 [11], 青黛 颗粒可上调 UC 大鼠结肠黏膜组织 MUC2 基因表 达, 保护肠黏膜屏障 [12] 研究显示芦荟 小麦草汁 穿心莲提取物 (HMPL-004) 和锡类散在诱导缓解和 应答方面优于安慰剂, 乳香和车前子疗效类似美沙 拉嗪, 姜黄素在维持缓解方面优于安慰剂 [13] 姜黄 素能够活化氧化还原反应诱导的转录因子 Nrf, 抑 制胞浆型磷脂酶 A2(cPLA2) 的磷酸化, 抑制花生四 烯酸的有效性抗炎等, 从而发挥抗炎作用 [14], 将姜 黄素与胡椒碱共同构成自乳微粒系统灌肠能够提高 临床疗效 [15] 我们从分子水平探讨了中药调节炎症性肠病免 疫功能 抑制炎症 修复黏膜的作用机制, 结果表明 清肠化湿方能有效抑制 NF-κB 的活化入核, 调控 NF-κB/PPAR-γ 及 Tols 通路, 抑制树突状细胞的 成熟与分化, 下调抗原提呈功能, 降低炎症反应, 修 复紧密连接 [16-20] 健脾补肾 清肠化湿方可以促进 移植的 MSCs 向 UC 模型大鼠受损肠组织归巢, 促 进其向肠干细胞分化, 减轻肠道炎症反应, 修复受损 黏膜 [21-24] 2 UC 的中西医结合治疗是我国的特色和优势 [25] 胡仁伟等统计了 1989~2003 年中国医学专 业杂志中中药及中西药结合治疗的试验研究文章共 1369 篇, 采用西医治疗的文献 157 篇 (10.2%), 中 医治疗的文献 934 篇 (60.9%), 中西医结合治疗的 文献 442 篇 (28.8%) 87.6% 中医治疗和中西医结 合治疗文献的疗效高于 90%,59.2% 西医治疗文献 的疗效高于 90% 检索 1991~2010 年中国发表有 关 IBD 的文献, 前 10 年治疗性文献其中 67.8% 是 关于单独中药治疗,15.9% 是关于中西药联合治疗, 后 10 年治疗性文献其中 70.1% 是关于单独中药治 疗,19.5% 是关于中药和西药联合治疗 [26] 与前 10 年相比, 后 10 年治疗性文献均以中药治疗及中西医 结合治疗为主, 这在一定程度上反映了目前我国 UC 的治疗现状 中西医结合的方式包括 :1 中西药联合口服治 疗, 如研究观察中西医结合 ( 中药联合美沙拉嗪缓释 颗粒 ) 和单纯服用美沙拉嗪缓释颗粒的临床疗效, 结 果显示中西医结合组在综合疗效 黏膜病变疗效及 证候疗效方面均优于西药组 (P<0.05), 在证候疗 效方面亦优于中药组, 部分主要症状及肠黏膜病变 治疗前 后积分差值与中药组及西药组比较差异亦 有统计学意义 (P<0.05) [27] ;2 中西药联用灌肠治 疗 : 研究表明采用中药和西药联合灌肠的方法, 与单 用西药或中药的治疗组相比, 总有效率明显升高, 且 溃疡面愈合周期短, 疾病不易复发 如将中药制剂 锡类散和甲硝唑 庆大霉素混合液睡前 2h 保留灌 肠, 与不加锡类散组相比,10d 后治疗组总有效率 95.24%, 明显高于对照组总有效率 55.00% [28] ; 3 中西医结合综合疗法 : 有研究采用口服柳氮磺胺 吡啶 中医辨证分型中药内服配合中药保留灌肠 穴 位针刺治疗以及腹部 TDP 照射的综合疗法治疗 UC 患者 69 例, 取得总有效率 94% 的疗效 [29] 此外, 通过对 UC 患者进行规范的中西医结合 临床路径的治疗, 发现其与既往经验治疗相比, 中西 医结合治疗具备明显的卫生经济学优势 张海燕 [30] 等研究表明中西医结合路径组平均住院天数比 非路径组缩短 2.35 d, 使平均住院天数减少 13.22% 住院总费用方面, 实施临床路径后, 路径 组平均住院总费用比非路径组减少 元,2 组 中度 UC 病例住院总费用方面, 路径组比非路径组 减少 元 3 中西医结合治疗 UC 的应用的适用人群和模式 方法 ASA 治疗无效的轻中度患者 按照国内外诊疗共识和治疗流程, 轻中度患者 主要采用口服和 / 或局部应用氨基水杨酸类制剂治 疗, 但对于效果不佳或无效患者可联用中医辨证和 中药保留灌肠治疗, 以诱导病情缓解, 促进黏膜愈 合, 提高临床疗效 中医认为本病活动期以标实为 主, 病理因素主要为湿热, 兼有瘀热伤络, 反复难愈 应考虑痰浊血瘀的因素 对于 5-ASA 治疗效果欠 佳或无效时, 可联用清热化湿, 调气和血中药, 直肠 型或左半结肠型采用中药灌肠或中药栓剂治疗, 广 泛结肠型采用中药口服加灌肠方法治疗 UC 维持治疗时间长, 复发率高仍是治疗中的 难点 糖皮质激素不宜用于维持治疗, 氨基水杨酸 制剂 1 年的复发率高达 40%~70%, 而免疫抑制剂 虽可以使 40%~70% 的患者维持缓解, 但其持续用 药后 1 年复发率也达 36%, 且停药之后复发率明显

6 沈 洪, 等. 重视溃疡性结肠炎的中西医结合治疗 573 升高, 且不良反应大, 很难被患者接受 中医认为缓解期以本虚为主, 兼有湿热, 且本虚主要为脾虚, 兼有肾亏, 部分患者可出现血虚 阴虚和阳虚的临床证候特征, 治疗时联用健脾益气以复运化之职, 杜生湿之源, 补肾以助气化之功, 有助于维持持久的临床缓解, 提高患者的生活质量 3.2 针对激素依赖 抵抗和免疫抑制剂抵抗等难治性 UC 的治疗激素依赖 抵抗和免疫抑制剂不耐受及抵抗等难治性 UC 的处理是本病治疗中的棘手问题, 而临床实践证明中医药的补泻兼施 肺 脾 肾同调的治疗方法对该类病情有一定的疗效 中医认为激素依赖的关键病机在于先天肾气不足, 后天脾土失养, 运化失健, 蕴滞肠道, 气血不调, 瘀滞化热, 肠络受损成疡 ; 或湿热壅滞肠道, 脾胃运化失健, 久泄及肾, 脾肾两虚, 湿浊留恋不化, 病理特点是脾肾两虚, 气血同病, 寒热错杂, 虚实并见, 治疗大法应健脾补肾, 配合清肠化湿 生肌敛疡中药, 有助于减撤激素 免疫抑制剂, 维持临床缓解 3.3 降低重度 UC 患者的并发症和手术率重度 UC 患者易出现消化道出血等并发症, 死亡率高, 预后差 年过 60 岁或 20 岁以下者, 病情往往更为严重 20%~30% 的重度 UC 患者药物治疗不能缓解,30%~50% 的重度患者需手术治疗 针对该类患者, 应重视中西医结合治疗 湿 热 瘀 毒是重度 UC 的主要病理因素, 治疗应祛邪扶正, 慎用兜涩 如脓血便为主, 治疗以清热化湿 凉血解毒为主, 化瘀解毒凉血可加地榆 仙鹤草, 甚者槐花 紫草 赤芍 丹皮等 ; 热毒伤阴者, 应扶正祛邪同用, 可合用银花 石斛 生地等药对 ; 对于腹痛 排便不畅患者, 可采用通因通用的治法, 可加制大黄通导祛邪 3.4 提高患者生活质量, 预防相关结肠癌病程较长的 UC 患者发生结直肠癌的风险较普通人群要高 一项大规模分析显示,UC 诊断 8~10 年后, 发生 UCRCC 风险每年增加 0.5% ~1%, 病程为 年的患者癌变概率为 2%,8%, 18% 一项迄今为止包含最大样本量的研究利用结肠镜监测具有癌变风险的广泛 UC 患者 (30 年内 600 例患者 ), 结果显示, 结肠炎病程为 20 年,30 年和 40 年的患者 CRC 的累积发生率分别为 2.5%, 7.6% 和 10.8% 该研究中, 仅 30 例 (5%) 患者最终发生 CRC [31-32] 因此针对 UC, 探讨发生癌变的关键病机, 发挥中医药优势, 制定规范的中西医结合治疗方案, 从而降低癌变的风险 要建立长期随访, 根据病变范围定期肠镜监测, 化学预防, 加强中医药预防结肠癌的中医药作用机制研究, 发挥中医药的优势 4 中西医结合治疗 UC 存在的不足及对策中西医结合治疗 UC 具有广泛适用性, 近 10 年来中西医结合治疗 UC 已取得了很大的进展, 在提高临床疗效, 减轻毒副作用及卫生经济学方面有显著的优势, 但仍有一些问题值得进一步研究 4.1 加强中西医结合临床循证研究, 提高临床疗效规范的临床设计和循证医学研究是保证疗效的关键, 目前多数临床药物试验设计不规范, 文献论证强度较低, 缺乏说服力, 且中国患病人群逐年增多, 因此, 在今后的工作中, 有必要规范临床研究设计和实施, 通过循证医学研究, 收集高质量临床数据, 利用大数据总结适用于中国人的发病规律和特点, 得出权威性的临床结论, 提高中西医结合研究水平 4.2 制订适合我国国情的中西医结合诊疗方案, 规范临床诊疗依据循证医学资料, 借鉴国外指南, 针对 5- ASA 治疗无效的轻中度患者 激素依赖抵抗 免疫抑制剂不耐受或抵抗等难治性 UC 患者和重度 UC 患者分别采用规范化个体化的中西医结合治疗, 找准中西医结合切入的时间, 明确中医 西医各自应解决的关键问题, 制定诊疗方案, 规范临床诊疗, 提高临床疗效 4.3 运用中西医结合疗效评价标准, 客观评估临床疗效治疗目标的转变带来疗效评价标准的变革和提高, 制定中西医结合疗效评价标准时应整合中西医 UC 疗效评价方法, 重视黏膜愈合的重要性, 重视症状 ( 腹痛 腹泻 脓血便 里急后重等 ) 的采集和评分, 在突出中医证候疗效评价的基础上, 注意应用现代医学理化检查指标, 评价指标向实用性 可行性改良, 以客观为主, 兼顾主观, 并根据不同的研究目的, 疗效评价标准有所侧重 4.4 加强中西医结合治疗发病机制的阐明, 注重成果转化明确的中药有效物质和相互药理作用及多靶点网络调控机制的阐明是实现高水平成果转化的基础, 应增强基础研究的力度, 进一步探索传统中药以及中西医结合治疗的作用机制, 从复方 - 单味药 - 物质成分多层次的对药物的作用机制进行阐明, 注重成果转化, 通过多学科合作, 基础和临床并重, 必将对 UC 的研究取得更大的进展 参考文献 [1] LOFTUSEVJr.Clinicalepidemiologyofinflammatory boweldisease:incidence,prevalence,andenvironmen- talinfluences[j].gastroenterology,2004,126:

7 574 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 [2] MOLODECKY N A,SOONIS,RABID M,etal.Increasingincidenceandprevalenceoftheinflammatory boweldiseaseswithtime,basedonsystematicreview [J].Gastroenterology,2012,142: [3] 江学良, 崔慧婓. 中国溃疡性结肠炎 例的特点 [J]. 世界华人消化志,2001:9(8): [4] 中华医学会消化病学分会炎症性肠病学组. 炎症性肠病诊断与治疗的共识意见 (2012 广州 )[J]. 中华内科杂志,2012,51(10): [5] BERNSTEIN C N,FRIED M,KRABSHUISJH,et al. World Gastroenterology Organization Practice GuidelinesforthediagnosisandmanagementofIBDin 2010[J].InflammBowelDis,2010,16: [6] 贺敏, 蒋健. 中药制剂与柳氮磺胺吡啶治疗溃疡性结肠炎疗效的 Meta 分析 [J]. 辽宁中医杂志,2007, 34(11): [7] 仝战旗, 杨波, 童新元, 等. 复方苦参结肠溶胶囊治疗湿热内蕴型溃疡性结肠炎多中心 随机 双盲 对照研究 [J]. 中国中西医结合杂志,2011,31(2): [8] 张亚利, 唐志鹏, 李凯, 等. 清肠栓对三硝基苯磺酸诱导结肠炎大鼠结肠黏膜地址素细胞黏附分子 -1 表达的影响 [J]. 世界华人消化杂志,2008,16(30): [9] 吕永慧, 宋卫兵, 肖冰, 等. 肠炎清对大鼠溃疡性结肠炎肠黏膜介素 -10 和细胞间黏附分子 -1[J]. 南方医科大学学报,2008,28(10): ,1896. [10] 姚君, 王立生, 李迎雪, 等. 白藜芦醇对溃疡性结肠炎小鼠外周血和肠系膜淋巴结 CD4 + CD25 + Foxp3 + 调节 T 淋巴细胞表达的影响 [J]. 世界华人消化杂志, 2010,18(27): [11] 赵佳, 沈霖, 范恒, 等. 关于 STAT6 复方苦参结肠溶胶囊对溃疡性结肠炎患者肠黏膜 NF-κB 及 STAT6 活化的影响 [J]. 时珍国医国,2009,20(8): [12] 杜立阳, 刘清芳, 程晓磊, 等. 青黛颗粒对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜 MUC2 和 inos 基因表达的影响 [J]. 世界华人消化杂志,2010,18(9): [13]NGSC,LAM Y T,TSOIK K,etal.Systematicreview:theeficacy ofherbaltherapyininflammatory boweldisease[j].alimentpharmacolther,2013,38: [14]VECCHIBRUMATTIL,MARCUZZIA,TRICARI- COPM,etal.CurcuminandInflammatoryBowelDisease:Potentialand Limits ofinnovative Treatments [J].Molecules,2014,19: [15]LIQ,ZHAI W,JIANG Q,etal.Curcumin-piperine mixturesinself-microemulsifyingdrugdeliverysystem forulcerativecolitistherapy[j].intjpharm,2015, 490: [16] 沈洪, 刘智群, 朱荃. 清肠化湿方对溃疡性结肠炎 NF-κB/Tols 通路的影响及其机制 [J]. 中国中西医结合杂志,2013,33(9): [17] 谷静, 沈洪. 清肠化湿方对小鼠骨髓来源树突状细胞生物学特性的影响 [J]. 中国方剂学杂志 2013,19 (13): [18] 翟金海, 沈洪, 倪菲菲, 等. 清肠化湿方对实验性大鼠结肠炎结肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白 claudin-1 的影响 [J]. 南京中医药大学学报,2013,29(2): [19] 翟金海, 沈洪, 倪菲菲, 等. 清肠化湿方对实验性大鼠结肠炎结肠黏膜及肠系膜淋巴结树状突细胞的影响 [J]. 中国中西医结合杂志,2012,32(10): [20] 刘智群, 沈洪, 朱萱萱, 等. 清肠化湿方对 TNBS 诱导大鼠 UC 模型紧密连接蛋白的影响 [J]. 辽宁中医杂志,2012,39(8): [21] 朱磊, 沈洪, 刘丽, 等. 健脾补肾 清肠化湿方对骨髓间充质干细胞增殖迁移的影响 [J]. 中国中西医结合杂志,2016,36(2): [22] 朱磊, 沈洪, 顾培青, 等. 健脾补肾 清肠化湿方联合 BMSCs 对溃疡性结肠炎模型大鼠肠屏障的修复作用 [J]. 世界华人消化杂志,2016,24(7): [23] 朱磊, 沈洪, 顾培青, 等, 健脾补肾方促进 BMSCs 增殖治疗溃疡性结肠炎的实验研究 [J]. 南京中医药大学学报,2015,31(6): [24] 朱磊, 沈洪, 刘丽, 等, 健脾补肾清肠化湿方对静脉移植 MSCs 向溃疡性结肠炎大鼠结肠迁移分化的影响 [J], 中国实验方剂学杂志,2015,21(21): [25] 胡仁伟, 欧阳钦, 陈曦. 近 15 年我国炎症性肠病文献分析 [J]. 胃肠病学,12(2): [26] 薛林云, 欧阳钦, 黄中华, 等. 近 20 年中国 IBD 研究进展 20 年文献总结 [J].2013,33(4): [27] 陆宇平. 中西医结合治疗溃疡性结肠炎的临床研究 [J]. 中国中西医结合消化杂志,2008,16(2): [28] 徐东花, 李艳秋, 何法. 锡类散 甲硝唑加庆大霉素保留灌肠治疗溃疡性结肠炎疗效观察 [J]. 中国医院药学杂志,2008,28(13): [29] 宇傲霜, 王红梅, 荣新奇. 中西医结合治疗溃疡性结肠炎的疗效观察 [J]. 现代中西医结合杂志,2000,9 (21): [30] 张海燕, 黄穗平, 黄绍刚, 等. 中西医结合临床路径在溃疡性结肠炎住院患者中的应用与评价 [J]. 时珍国医国药,24(12): [31] WINTHER K V,JESS T,LANGHOLZ E,etal. Lonḡtermriskofcancerinulcerativecolitis:apopulation-basedcohortstudyfrom CopenhagenCounty[J]. ClinGastroenterolHepatol,2004,2: [32] RUTTER M D,SAUNDERS B P,WILKINSON K H,etal.Thirtȳyearanalysisofacolonoscopicsurveillanceprogram forneoplasiain ulcerativecolitis[j]. Gastroenterology,2006,130:

8 第 24 卷第 8 期第 575 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P575 Aug2016 论著 doi: /j.issn x 大黄蛰虫丸联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化疗效观察 张红星 1, 刘旭东 1, 王朝阳 2 ( 1 广西中医药大学附属瑞康医院肝病科, 广西南宁 ; 2 湖北中医药大学基础医学院, 湖北武汉 ) 摘要 :[ 目的 ] 评价大黄蛰虫丸联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化的临床疗效 [ 方法 ] 将 64 例慢性乙型肝炎肝硬化患者随机分成对照组和观察组, 每组 32 例 对照组单用恩替卡韦片治疗, 观察组予大黄蛰虫丸联合恩替卡韦片治疗,2 组均连续治疗 6 个月 比较 2 组临床疗效和治疗前后肝功能 (ALT AST 和 TBIL) 和肝纤维化 (HA PCⅢ IV-C 和 LN) 指标变化 [ 结果 ] 治疗后, 观察组疗效明显优于对照组 (P<0.05), 观察组血清 ALT AST TBIL HA PCⅢ IV-C 和 LN 水平均显著低于对照组, 差异均有统计学意义 (P<0.01) [ 结论 ] 大黄蛰虫丸联合恩替卡韦可明显改善慢性乙型肝炎肝硬化患者肝功能和肝纤维化指标, 疗效优于单用恩替卡韦治疗, 值得临床推广应用 关键词 : 大黄蛰虫丸 ; 恩替卡韦 ; 慢性乙型肝炎后肝硬化 ; 疗效观察中图分类号 :R575.2 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) TheclinicalobservationoftreatmentofDahuangZhechongpilcombined withentecavirinchronichepatitisbpatientwithlivercirrhosis ZHANG Honḡxing 1,LIUXu-dong 1,WANGChao-yang 2 ( 1 Department of Hepatology,Ruikang Hospital Afiliated to Guangxi University of TCM,Nanning ,China; 2 SchoolofBasic MedicalScience,HubeiUniversityofChinese Medicine,Wuhan430065, China) Correspondingauthor:WANG Chaoȳang, wcyer@sina.com Abstract:[Objective]ToevaluatetheclinicalobservationoftreatmentofDahuangZhechongPilcombinedwithentecavirinchronicHepatitisBpatientwithlivercirrhosis.[Methods]The64casesofchronic HepatitisBpatientwithlivercirrhosiswererandomlydividedintocontrolgroupandobservationgroup,32 casesineachgrouṗ Controlgroup wastreated withentecavirtreatment,observationgroup weregiven DahuangZhechongPilcombinedwithentecavirtreatment,twogroupsweretreatedfor6months.Theclinicalefectsofthetwogroupswerecompared,andthechangesofliverfunction(ALT,IV-CandAST)and liverfibrosis(ln,tbil,pcandha)werecomparedbetweenthegroups.[results]theefectoftheobservationgroupwassignificantlybeterthanthatofthecontrolgroup(p<0.05),andtheserum AST,TBIL, ALT,HA,LN,PCandIV-C weresignificantlylowerintheobservationgroupthaninthecontrolgroup (P<0.01).[Conclusion]DahuangZhechongPilcombinedwithentecavircanimprovetheliverfunctionand liverfibrosisindexinchronic HepatitisBpatientwithlivercirrhosis,theefectisbeterthanthesingle treatmentwithentecavir,worthyofclinicalapplication. Keywords:DahuangZhechongpil;entecavir;chronichepatitisBpatientwithlivercirrhosis;clinical observation 收稿日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金 (No: ) 作者简介 : 张红星, 男, 硕士, 主治医师, 从事肝病的中西医结合治疗通讯作者 : 王朝阳, wcyer@sina.com

9 576 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 肝硬化是多种慢性肝病晚期阶段的共同结局, 及时阻断或逆转肝纤维化已成为慢性肝病治疗中的 [1] 一个关键 笔者采用大黄蛰虫丸联合恩替卡韦片治疗慢性乙型肝炎肝硬化, 取得较好疗效 现报告如下 1 资料与方法 1.1 临床资料选择 2013 年 1 月 ~2015 年 6 月在我院肝病科就诊的慢性乙型肝炎肝硬化患者 64 例, 所有病例均 [2] 符合 慢性乙型肝炎防治指南 中诊断标准, 近 6 月未接受抗病毒或免疫调节治疗, 排除其他原因引起的肝硬化 随机分成对照组和观察组, 每组 32 例 观察组男 24 例, 女 8 例 ; 年龄 40~75 岁, 平均 (52.5±8.2) 岁 ; 病程 1~15 年, 平均 (8.3±3.6) 年 ; Chlid-Pugh 分级 :A 级 25 例,B 级 7 例 对照组男 26 例, 女 6 例 ; 年龄 40~75 岁, 平均 (52.2±8.5) 岁 ; 病程 1~15 年, 平均 (8.6±4.1) 年 ;Chlid-Pugh 分级 :A 级 26 例,B 级 6 例 2 组一般资料比较差异无统计学意义 (P>0.05), 具有可比性 所有受试者签署知情同意书 1.2 方法对照组予恩替卡韦片,0.5 mg/d,1 次 /d; 观察组在对照组基础上加服大黄蛰虫丸,2 丸 / 次,2 次 /d 2 组均连续治疗 6 个月 1.3 观察指标 肝功能指标检测采用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 天门冬氨酸氨基转移酶 (AST) 和总胆红素 (TBIL) 等指标 肝纤维化指标检测采用放射免疫法测定 血清透明质酸 (HA) Ⅲ 型前胶原 (PCⅢ) IV 型胶 原 (IV-C) 和层黏蛋白 (LN) 等指标 [3] 1.4 疗效标准 显效 : 临床症状消失, 肝功能和肝纤维化指标恢 复正常 ; 好转 : 临床症状消失或明显好转, 肝功能和 肝纤维化指标下降幅度达 50% 以上而未恢复正常 ; 无效 : 肝功能和肝纤维化指标未达到好转标准 总 有效率 =( 显效例数 + 好转例数 )/ 总例数 100% 1.5 统计学处理 所有资料应用 SPSS17.0 软件进行统计学分 析, 计数资料比较采用 χ 2 检验, 计量资料以 x±s 表 示, 比较采用 t 检验, 以 P<0.05 为差异有统计学 意义 2 结果 组临床疗效比较 观察组显效 9 例, 有效 21 例, 无效 2 例, 总有效 率为 93.75%, 对照组显效 4 例, 有效 20 例, 无效 8 例, 总有效率为 75.00%, 观察组疗效明显优于对照 组 (P<0.05) 2.2 治疗前后 2 组肝功能指标比较 治疗前,2 组 ALT AST 和 TBIL 比较, 差异无 统计学意义 (P>0.05); 治疗后, 观察组 ALT AST 和 TBIL 均显著低于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.01) 见表 治疗前后 2 组肝纤维化指标比较 治疗前,2 组 HA PCⅢ IV-C 和 LN 水平比 较, 差异均无统计学意义 (P>0.05); 治疗后, 观察 组 HA PCⅢ IV-C 和 LN 均明显低于对照组, 差异 有统计学意义 (P<0.01) 见表 2 表 1 治疗前后 2 组肝功能比较 x±s 组别例数 ALT/(U L -1 ) AST/(U L -1 ) TBIL/( μ mol L -1 ) 观察组 32 对照组 32 治疗前 ± ± ±18.72 治疗后 55.26± )2) 53.74± )2) 30.52± )2) 治疗前 ± ± ±17.91 治疗后 73.27± ) 69.53± ) 39.59± ) 与同组治疗前比较, 1) P<0.01; 与对照组比较, 2) P<0.01 表 2 治疗前后 2 组肝纤维化指标比较 ng/ml, x±s 组别例数 HA PCⅢ IV-C LN 观察组 32 对照组 32 治疗前 ± ± ± ±46.34 治疗后 ± )2) ± )2) 89.72± )2) 92.16± )2) 治疗前 ± ± ± ±45.63 治疗后 ± ) ± ) ± ) ± ) 与同组治疗前比较, 1) P<0.01; 与对照组比较, 2) P<0.01

10 张红星, 等. 大黄蛰虫丸联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化疗效观察 讨论慢性乙型肝炎肝硬化的发病机制至今尚不明了 有多项研究表明, 慢性乙型肝炎患者经抗病毒治疗后, 肝组织纤维化有所减轻, 故抗病毒治疗是慢 [4] 性乙型肝炎肝硬化治疗的基础 恩替卡韦目前主要用于乙型肝炎抗病毒治疗, 具有起效快 抗病毒强 低耐药等特点, 是慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗 [5] 的首选 多数学者认为, 抗病毒治疗不能全面逆转肝脏的病理改变, 但在抗病毒治疗慢性乙型肝炎的同时, 适当给予护肝 抗纤维化药物可阻断或延缓 [6] 向肝硬化进展 慢性乙型肝炎肝硬化属中医学 积聚 癥积 肝积 等范畴 中医学认为, 慢性乙型肝炎肝硬化多反复发作, 病程较长, 久病入络, 瘀血阻滞肝络发为本病 大黄蟅虫丸由熟大黄 蟅虫 生地黄 水蛭 桃仁 白芍等 12 味中药组成, 方中熟大黄 桃仁活血化瘀, 蟅虫破血逐瘀, 生地黄养阴清热, 白芍养血柔肝, 甘草调和诸药 诸药合用, 共奏活血破瘀 通经消痞之功效 本研究结果显示, 观察组加服大黄蟅虫丸治疗后, 其疗效明显优于对照组 (P<0.05), 且肝功能和肝纤维化指标均明显低于对照组 (P < 0.01), 提示大黄蛰虫丸联合恩替卡韦可明显改善慢性乙型肝炎肝硬化患者肝功能和肝纤维化指标, 疗效优于单用恩替卡韦治疗, 值得临床推广应用 参考文献 [1] 武守国, 高婷婷. 益气健脾方联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎后肝硬化患者治疗作用的临床观察 [J]. 中国中西医结合消化杂志,2015,23(3): [2] 中华医学会肝病学分会, 中华医学会感染病学分会. 慢性乙型肝炎防治指南 (2010 版 )[J]. 中华肝脏病杂志,2011,19(16):1-16. [3] 中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员会. 肝硬化中西医结合诊治方案 [J]. 中国中西医结合杂志, 2004,24(10):869. [4] 黄英男, 吴昊, 沈锡中. 乙型肝炎肝硬化抗病毒治疗研究进展 [J]. 复旦学报 ( 医学版 ),2013,40(2): [5] 周培, 陈辉, 王鲁文, 等. 恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化失代偿期患者的近期疗效及安全性 [J]. 中西医结合肝病杂志,2014,24(1): [6] 蒲春文, 刘威, 李梅, 等. 慢性乙型肝炎的长期抗病毒治疗可逆转肝硬化 [J]. 中华实验和临床感染病杂志 ( 电子版 ),2014,8(4): 中国中西医结合消化杂志 编辑部严正声明 近日, 本刊编辑部频繁接到作者举报, 有机构冒充本刊采编部的名义进行论文代写及快速发表业务 严重侵犯本刊的合法权益, 损害本刊的名誉 本刊特严正声明如下 : 1. 本刊严格遵守和执行新闻出版的有关法律 法规和管理规定, 从未在全国任何地方设立过分支机构 分部和代办点 ; 从未委托任何人或组织进行组稿 征稿 代发论文及快速发表活动 2. 中国标准连续出版物号 CN /R, 国际标准连续出版物号 ISSN X 为本刊出版物和编辑部设在湖北武汉的特定登记号, 凡在湖北武汉以外出现的 CN /R 刊号的出版物和编辑出版机构都是非法冒充的 3. 本刊唯一联系地址 : 湖北省武汉市解放大道 1277 号协和医院杂志社, 邮编 :430022; 官方网站 : 联系电话 : ; zxyjhxhzz@qq.com 4. 敬请广大作者 读者务必认准本刊刊号和编辑部地址及电话, 谨防上当受骗 中国中西医结合消化杂志 编辑部

11 第 24 卷第 8 期第 578 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P578 Aug2016 doi: /j.issn x 苍菊清肝降脂方对脂肪肝大鼠肝组织脂肪沉积 氧化应激和脂质过氧化的影响 龚亚华 1, 张银华 1, 成扬 1,2, 侯天禄 2, 陈建杰 1,2 ( 1 上海市浦东新区传染病医院肝科, 上海 ; 2 上海中医药大学附属曙光医院肝科, 上海 ) 摘要 :[ 目的 ]: 研究苍菊清肝降脂方对脂肪肝大鼠肝组织脂肪沉积 氧化应激和脂质过氧化的影响 [ 方法 ] 采用雄性 Wistar 大鼠予以 CCl4 联合高脂低蛋白饮食复制脂肪肝模型, 大鼠随机分成正常组 模型组和中药干预组 实验结束处死大鼠, 肝组织行油红 O 染色, 并检测肝组织甘油三酯 SOD GSH 和 MDA 等指标 [ 结果 ] 油红 O 染色发现中药干预组肝细胞脂肪变性明显减轻, 尤其以大剂量组减轻程度更为明显, 同时大鼠肝组织中 TG 含量较模型组均显著下降 ( 小剂量组 P<0.05, 大剂量组 P<0.01), 大剂量组降低程度显著优于小剂量组 ( 大剂量组与小剂量组比较 P<0.05) 大鼠肝组织中 SOD 活性和 GSH 含量较模型组均明显升高,MDA 含量则显著下降 ( 小剂量组 P<0.05, 大剂量组 P<0.01); 大剂量组对 SOD 活力和 MDA 含量的改善程度显著优于小剂量组 ( 大剂量组与小剂量组比较 P<0.05), 但大剂量组和小剂量组 GSH 含量差异无统计学意义 (P>0.05) [ 结论 ] 苍菊清肝降脂方显著降低脂肪肝大鼠肝组织脂肪沉积, 并能显著改善氧化应激和脂质过氧化的作用 关键词 : 苍菊清肝降脂方 ; 脂肪肝 ; 甘油三酯 ; 氧化应激 ; 脂质过氧化 ; 大鼠中图分类号 :R285.5 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) EfectofCangjuQingganJiangzhidecoctiononfatdeposition,oxidativestres andlipidperoxidationinratswithfatyliver GONGYa-hua 1,ZHANGYin-hua 1,CHENGYang 1,2,HOUTian-lu 2,CHENJian-jie 1,2 ( 1 DepartmentofLiverDisease,ShanghaiInfectiousDiseaseHospitalofPudongDistrict,Shanghai201299, China; 2 DepartmentofLiverDisease,Shuguang HospitalAfiliatedtoShanghaiUniversityofTraditional ChineseMedicine,Shanghai201203,China) Correspondingauthor:CHENG Yang, drchengyang@126.com Abstract:[Objective]TostudytheefectofCangjuQingganJiangzhidecoctiononfatdeposition,oxidativestressandlipidperoxidationinratswithfatyliver.[Methods]MaleWistarratswereusedtoreproduce fatylivermodelbycombiningcarbontetrachlorideandhighfatandlowproteindiet.ratswererandomly dividedintocontrolgroup,modelgroupandcangjuqingganjiangzhidecoctiongroups.attheendoftheexperiment,alratsweresacrificedandlivertissueswerestainedwithoilredo,andtheindexesoftriglyceride(tg),sod,gshand MDAinlivertissuesweredetected.[Results]OilredOstainingresultsindicated thatfatydegenerationoflivercelswassignificantlyreducedininterventiongroupscomparedwithmodel group,especialyinhigh-dosegroupthedegreewasreducedmoreobviouslẏ ThecontentofTGwassignificantlydecreased(low-dosegroupP<0.05,high-dosegroupP<0.01)andhigh-dosegroupdecreasedsignificantlybeterthanthatoflow-dosegroup(high-dosegroupandlow-dosegroupP<0.05).Inratlivertissue comparedwithmodelgroup,sodactivityandgshcontentweresignificantlyincreased,mdacontentwas significantlydecreased(low-dosegroupp<0.05,high-dosegroupp<0.01);sodactivityand MDAcontent 收稿日期 : 基金项目 : 上海市浦东新区卫计委基金 (No:PW2014A-59), 上海市浦东新区科委基金 (No:PKJ2014-Y37), 上海市中医药三年行动计划 (No: ZY3-RCPY ZY3-JSFC ) 作者简介 : 龚亚华, 女, 副主任医师, 从事慢性肝病和传染病的临床研究通讯作者 : 成扬, drchengyang@126.com

12 龚亚华, 等. 苍菊清肝降脂方对脂肪肝大鼠肝组织脂肪沉积 氧化应激和脂质过氧化的影响 579 inhigh-dose groupimproved significantly beterthanlow-dose group(high-dose group andlow-dose groupp<0.05),butgshcontentinhigh-dosegroupandlow-dosegroupwasinsignificantlydiferent(p> 0.05).[Conclusion]CangjuQingganJiangzhidecoctioncansignificantlydecreasefatdeposition,improveoxidativestressandlipidperoxidationinratfatyliver. Keywords:CangjuQingganJiangzhidecoction;fatyliver;triglyceride;oxidativestress;lipidperoxidation;rats 非酒精性脂肪肝 (non-alcoholicfatyliverdisease,nafld) 是一种胰岛素抵抗和遗传易感性相关的代谢应激性肝损伤, 随着肥胖及其相关代谢紊乱起病渐趋低龄化, 而且程度日益加剧, 该病对肝脏 [1] 健康的影响变得愈来愈严重 氧化应激 (oxidativestress) 是指机体促氧化物和抗氧化物之间动态平衡失调所导致的对细胞内大分子的氧化损伤 有研究表明, 氧化应激与胰岛素抵抗关系密切, 在脂肪 [2] 肝发病机制中有重要地位 目前临床对脂肪肝治疗缺少有效药物, 以控制饮食 控制体重和增加运动为主 苍菊清肝降脂方系我院协定方, 治疗脂肪肝具有较好疗效 本课题组前期研究发现苍菊清肝降脂方能够有效减轻大鼠脂肪肝模型肝组织损伤和脂肪变性, 能够有效改善 [3] 肝组织病理改变, 显著改善肝脏生化功能 本文研究进一步探讨该方对氧化应激和脂质过氧化的影响, 以阐明该方的作用机制 1 材料与方法 1.1 材料 实验动物 SPF 级 Wistar 大鼠 40 只, 雄性, 体重 (170±10)g, 购自上海西普尔 - 必凯公司提供, 饲养于上海中医药大学实验动物中心 药物和主要试剂苍菊清肝降脂方制备参考文献报道 [4] 分析纯 CCl4 和化学纯橄榄油, 购自中国医药集团上海化学试剂公司 甘油三酯 (TG) 超氧化物歧化酶 (SOD) 还原型谷胱甘肽 (GSH) 和丙二醛 (MDA) 检测试剂盒, 均购自南京建成建成生物工程研究所 1.2 方法 制备脂肪肝大鼠模型大鼠喂养 1 周适应环境后, 按体重分层随机法分正常组 10 只 模型组 10 只和中药干预组 ( 小剂量组 10 只 大剂量组 10 只 ) 模型组和干预组以 40%CCl4 橄榄油溶液 1ml/kg 大鼠体重腹腔注射,2 次 / 周, 共 4 周 模型组和中药组在第 1 2 周给予高脂低蛋白饲料 (79.5% 玉米粉 20% 猪油 0.5% 胆固醇 ), 第 3 4 周予纯玉米粉饲料, 自由饮水 普通饲料 高脂低蛋白饲料 纯玉米粉饲料均由上海中医药大学动物房提供 正常组常规饮食, 自由饮水 给药方法苍菊清肝降脂方分别浓缩成大 小 2 种浓度药液, 即每 ml 药液所含生药量分别相当于人体剂量的 16 倍和 8 倍 自造模之日起, 按照 1ml/100g 大鼠体重给予小剂量和大剂量中药灌胃 正常组与模型组按 1 ml/100g 大鼠体重给予生理盐水灌胃 1.3 观察指标 标本采集实验结束后大鼠禁食不禁水 24h, 用 3% 戊巴比妥钠 2ml/kg 体重的剂量腹腔注射, 麻醉后的大鼠打开腹腔, 统一于肝脏左叶切取 2 块肝组织, 分别于 10% 中性甲醛固定和 OCT 包埋, 余下肝组织 -70 低温保存 肝组织油红 O 染色肝组织 OCT 包埋剂包埋, 液氮固定, 冰冻切片, 切片厚 7μm, 采用修正异丙醇油红 O 染色法染色 检测指标采用试剂盒, 检测肝组织 TG SOD GSH 和 MDA 指标 1.4 统计学处理采用 SPSS17.0 软件进行统计处理 计量资料以 x±s 表示, 采用 ANOVA 程序进行单因素方差分析, 并用 LSD 程序进行两两比较, 以 P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 各组大鼠肝组织油红染色冰冻切片油红 O 染色显示, 正常组肝细胞内几乎未见脂滴 模型组染色后可见大量大泡样的脂滴, 并且多数相互融合 中药干预组肝细胞脂肪变性明显减轻, 多以小脂滴状存在, 尤其以大剂量组减轻程度更为明显, 见图 各组大鼠肝组织 TG 含量变化经 CCl4 联合高脂低蛋白饮食诱导后, 模型组大鼠肝组织中 TG 含量较正常组显著增高 (P < 0.01); 而经中药干预, 大鼠肝组织中 TG 含量较模型组均显著下降 ( 小剂量组 P<0.05, 大剂量组 P< 0.01), 大剂量组降低程度显著优于小剂量组 (P< 0.05), 见表 1 检测显示各组大鼠肝组织 TG 含量与上述油红 O 染色显示的病理改变相一致, 证明中药干预能够明显减少大鼠肝内脂肪沉积, 减轻肝细胞脂肪变性, 并呈现剂量依赖性

13 580 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 A:正常组; B:模型组; C:小剂量组; D:大剂量组 图 1 各组大鼠肝组织油红 O 染色变化(油红 O 染色, 100) 表 1 各组大鼠肝组织 TG 含量变化 组别 例数 正常组 10 模型组 小剂量组 大剂量组 x ±s 肝组织 TG/( mg g ) ± 高( P <0.01);而 经 中 药 干 预,大 鼠 肝 组 织 中 SOD 活性和 GSH 含量较模型组均 明 显 升 高,MDA 含 量 75.6± ) 50.7±6. 82 ) ±4. 5 3) 4) 1) 2) 与正常组 比 较, P <0.01;与 模 型 组 比 较, P <0.05; 4 P<0.01;与小剂量组比较, P<0.05 3) 模型 组 大 鼠 肝 组 织 中 SOD 活 性 和 GSH 含 量 较正常组显著降低( P<0.01),MDA 含量则显著增 ) 2.3 各组大鼠肝组 织 氧 化 应 激 和 脂 质 过 氧 化 指 标 变化 则显 著 下 降 (小 剂 量 组 P <0.05,大 剂 量 组 P < 0.01);大 剂 量 组 对 SOD 活 力 和 MDA 含 量 的 改 善 程度显著优 于 小 剂 量 组 ( P <0.05),但 大 剂 量 组 和 小剂量组 GSH 含量差异无统计学意义( P>0.05), 见表 2 该检测显示本发明中药具 有 良 好 的 抗 脂 质 过氧化作用,并存在显著的剂量依赖性 表 2 各组大鼠肝组织肝组织氧化应激和脂质过氧化指标变化 组别 例数 正常组 10 模型组 小剂量组 大剂量组 肝组织 SOD 活性 /( U mg-1 ) 214±35 106±23 1) 257±382 ) 302±453 4 )) x ±s 肝组织 MDA 含量 肝组织 GSH 含量 19±8 21±3.7 /( nmo l mg-1 ) 75±23 1) 50±182 ) 37±63 4 )) 1) 2) 3) 4) 与正常组比较, P<0.01;与模型组比较, P<0.05; P<0.01;与小剂量组比较, P<0.05 /( mg g-1 ) 9±2.31 ) 27±3.82 ) 31±4.33 ) 3 讨论 本课 题 组 综 合 传 统 中 医 理 论,并 结 合 长 期 的 临 水平有关 罗先钦等 [7]则认为决明子总蒽醌通过调 床实践,认为脂肪 肝 的 病 因 病 机 主 要 是 饮 食 不 节 PPAR-gmRNA 和蛋 白 的 表 达,从 而 具 有 预 防 酒 精 肝失疏泄 脾失健 运 湿 滞 中 焦 造 成 的,基 于 对 该 病 因病机的深刻认识,并 在 长 期 的 临 床 实 践 中 不 断 探 索和总结,最终拟定 了 苍 菊 清 肝 降 脂 方 治 疗 脂 肪 肝 患者,取得了较好疗效 该方由苍术 菊花 荷叶 决 明子等药物组成,方 中 苍 术 燥 湿 健 脾 祛 风 散 寒,菊 花清肝热,疏肝风,二 药 联 用 针 对 脂 肪 肝 的 病 机,能 够起到很好的燥湿健脾疏肝的作用 崔艳 [ 5] 研究发 现,菊花提取物可以抑制小鼠高脂性脂肪肝的形成, 其作用机 制 可 能 与 通 过 增 加 肝 中 的 PPAR a 表 达 后,调 节 与 脂 代 谢 相 关 靶 基 因 SREBP 1c FAS 节脂 肪 代 谢 改 善 肝 脏 功 能 抗 脂 质 氧 化,并 增 加 性脂肪 肝 发 生 的 作 用 本 课 题 组 前 期 研 究 发 现 [7] PPAR g被 特 异 激 活 后,可 以 减 少 胶 原 的 合 成 抑 制 肝星状细胞增殖 趋化和迁移,从而起到抗纤维化的 作用 [8] 因此苍菊 清 肝 降 脂 方 除 了 具 有 疏 肝 理 气 健脾 消 脂 功 效 之 外 [3],可 能 对 脂 肪 性 肝 纤 维 化 的 形 成也有预防作用 迄今为止, NAFLD 机制 极 为 复 杂,目 前 几 乎 都 处于假 说 阶 段,占 主 导 地 位 的 是 1998 年 Day 提 出 的 二次打击 学说 Day 等提出的 二次打击 理论 被认为是较好地解释了脂肪肝发病机制的学 LPL 和 CYP7A1 的表达以及增 加 肝 脏 的 抗 氧 化 作 说 [1,9] 高脂饮食可导 致 高 脂 血 症 以 及 肝 脏 脂 代 谢 酒精性脂肪 肝 的 作 用,其 作 用 机 制 与 降 低 肝 脏 TG 胞脂肪变性,对肝脏造成 初次打击,并诱导其对各 用有关 王俊杰等 [6]发现荷叶黄酮具有治疗小鼠非 紊乱,过量高脂饮食可导致肝内 TG 堆积,引起肝细

14 龚亚华, 等. 苍菊清肝降脂方对脂肪肝大鼠肝组织脂肪沉积 氧化应激和脂质过氧化的影响 581 种内外源性损害因子敏感性增高 脂肪变性的肝细胞活力下降, 过多的反应性氧化代谢产物引发 氧化应激 作为二次打击, 加剧肝细胞的损伤, 导致非酒精性脂肪性肝炎的发生 由于肝细胞内脂质代谢平衡的破坏是引起 TG 大量沉积于肝脏的重要原因, 而肝脏中 TG 大量沉积则会导致肝脏脂肪变性, 如何减少肝脏中 TG 的沉积是预防和治疗脂肪肝的关键因素 本研究发现经中药干预后, 与模型组相比较, 大鼠肝组织中 TG 含量显著下降, 与肝组织油红 O 染色显示的病理改变相一致, 说明苍菊清肝降脂方干预能够明显减少大鼠肝内脂肪沉积, 减轻肝细胞脂肪变性, 并呈现剂量依赖性 单纯性脂肪肝不会增加患者短期的肝病发病率和病死率, 但当疾病进展为非酒精性脂肪性肝炎时, 则可以快速进展为肝硬化, 导致肝功能衰竭和肝癌 [10] 的风险增加 因此氧化应激是单纯性脂肪肝进展至脂肪性肝炎的中心环节 SOD 是生物体内重要的抗氧化酶, 是生物体内清除自由基的首要物质, 其活力的高低则反映自由基的产生情况和机体抗氧化能力 GSH 为内源性的抗氧化剂, 可以被氧化生成氧化型谷胱甘肽, 清除自由基, 可以起到保护细胞膜结构和功能完整的作用, 其活力高低则反映机体抗氧化能力的强弱 脂质过氧化产物 MDA 和 ḇ 羟化壬烯可水解载脂蛋白 B-100, 减少 TG 转变为极低密度脂蛋白胆固醇, 从而抑制了肝脏向外输送脂肪酸, 从而加重脂肪堆积 因此 MDA 含量的增减代表着脂质过氧化作用的强弱, 间接反映机体细胞 [11] 受自由基攻击导致细胞损伤的严重程度 由于氧化应激反应在脂肪肝发生发展中占据重要地位, 本研究观察了苍菊清肝降脂方对大鼠肝组织 SOD GSH MDA 等指标的影响 结果发现中药干预之后, 大鼠肝组织中 SOD 活性和 GSH 含量较模型组均明显升高,MDA 含量则显著下降, 而且总体而言, 大剂量组改善程度显著优于小剂量组 综合分析, 本实验结果证实苍菊清肝降脂方可降低脂肪肝大鼠肝脏的脂肪沉积, 有效对抗氧化应激, 从而 起到防治脂肪肝发生和发展的作用 参考文献 [1] CHENGY,MAIJ,HOU T,etal.MicroRNA-421induceshepaticmitochondrialdysfunctioninnon-alcoholicfatyliverdisease micebyinhibitingsirtuin3[j]. BiochemBiophysResCommun,2016,474: [2] GENTRICG,MAILLET V,PARADISV,etal.Oxidativestress promotes pathologic polyploidizationin nonalcoholicfatyliverdisease[j].jclininvest,2015, 125: [3] 侯天禄, 成扬, 陈建杰. 苍菊清肝降脂方对大鼠脂肪肝保护作用的研究 [J]. 中国中西医结合消化杂志, 2015,23(7): [4] 成扬, 陈建杰, 侯天禄, 等. 一种用于治疗脂肪肝的中药组合物及其用途 : 中国, [P] [5] 崔艳. 菊花提取物抑制小鼠高脂性脂肪肝形成及其机制研究 [D]. 苏州大学,2014. [6] 王俊杰, 舒洋, 龙婷, 等. 荷叶黄酮治疗小鼠非酒精性脂肪肝的研究 [J]. 中药药理与临床,2011,27 (2): [7] 罗先钦, 徐晓玉, 黄崇刚, 等. 决明子总蒽醌对酒精性脂肪肝大鼠肝组织脂质过氧化与 PPAR-g 表达的影响 [J]. 中国中药杂志,2011,36(12): [8] 汪美凤, 麦静愔, 陈高峰, 等. 黄芪总黄酮对二甲基亚硝胺肝硬化大鼠肝组织 PPAR g 和 FXR 表达的影响 [J]. 中国中西医结合消化杂志,2014,22(5): [9] NASCIMBENIF,PAISR,BELLENTANIS,etal. From NAFLD in clinicalpracticeto answersfrom guidelines[j].jhepatol,2013,59: [10] MCPHERSON S,HARDY T,HENDERSON E,et al.evidenceofnafld progressionfrom steatosisto fibrosinḡsteatohepatitisusingpairedbiopsies:implicationsforprognosisandclinicalmanagement[j].jhepatol,2015,62: [11]KUMAR A,SHARMA A,DUSEJA A,etal.Patients withnonalcoholicfatyliverdisease(nafld)have HigherOxidativeStressinComparisontoChronicViralHepatitis[J].JClinExpHepatol,2013,3:8-12.

15 第 24 卷第 8 期第 582 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P582 Aug2016 doi: /j.issn x HBV DNA 联合 ALT 对 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的诊断价值 汪涛, 刘娟, 王婵, 朱武 ( 安康市中医医院检验科, 陕西安康 ) 摘要 :[ 目的 ] 探讨 HBV DNA 联合 ALT 对 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的诊断价值 [ 方法 ] 选取 2014 年 8 月 ~2015 年 11 月于我院诊治的 HBeAg 阴性慢性乙型肝炎患者 320 例, 根据肝组织活检结果分为慢性活动性乙型肝炎 (229 例 ) 与慢性非活动性乙型肝炎 (91 例 ), 采用 ROC 曲线分析天门冬氨酸氨基转移酶 (AST) 丙氨酸氨基转移酶 (ALT) HBVDNA HBVDNA 联合 ALT 诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的价值 [ 结果 ] 与非活动性乙肝组比较, 活动性乙肝组患者 AST ALT HBV DNA 水平较高 (P<0.001) ROC 曲线图显示,AST ALT HBV DNA HBV DNA 联合 ALT 曲线下面积分别为 (P<0.05) 以 AST 40IU/L 为标准诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎时, 其敏感性为 78.4% 特异性为 64.5%; 以男性 ALT 30IU/L 女性 ALT 19IU/L 为标准时, 敏感性为 90.3% 特异性为 54.4%; 以 HBV DNA cps/ml 为标准时, 敏感性为 52.3% 特异性为 98.4%; 以男性 ALT 30IU/L 女性 ALT 19IU/L 联合 HBVDNA cps/ml 为标准时, 敏感性为 90.2% 特异性为 98.6% [ 结论 ]HBV DNA 联合 ALT 诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的价值高于单用 AST ALT HBV DNA, 可以男性 ALT 30IU/L 女性 ALT 19IU/L 联合 HBV DNA cps/ml 为标准诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎 关键词 : 乙型肝炎病毒 ; 脱氧核糖核酸 ; 丙氨酸氨基转移酶 ; 活动性 ; 诊断价值中图分类号 :R575.1 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) DiagnosticvalueofHBVDNAcombinedALTinHBeAgnegativechronic activehepatitisb WANG Tao,LIUJuan,WANGChan,ZHU Wu (DepartmentofClinicalLaboratory,Ankang HospitalofTraditionalChinese Medicine,Ankang725000, China) Correspondingauthor:ZHU Wu, @qq.com Abstract:[Objective]ToexplorethediagnosticvalueofHBV DNAcombinedALTinHBeAgnegative chronicactivehepatitisb.[methods]320patientswithhbeagnegativechronicactivehepatitisbfrom August2014toNovember2015inourhospitalweredividedintochronicactivehepatitisB(229patients)and chronicnon-activehepatitisb(91patients)accordingtoliverbiopsyresults.diagnosticvalueofast,alt, HBV DNAandHBV DNAcombinedALTin HBeAgnegativechronicactivehepatitisBwereanalyzedby ROCcurve.[Results]Comparedtonon-activehepatitisBgroup,patientsinactivehepatitisBgrouphad higherlevelofast,alt,hbv DNA(P<0.001).ROCshowedthatAUCofAST,ALT,HBV DNA, HBV DNAcombined ALT were0.798,0.846,0.852,0.953(p <0.05).Whenthediagnosticcriteriaof AST was40iu/l,thesensitivityandspecificitywere78.4%,64.5%;whilethediagnosticcriteriaofalt ofmenandwomenwere30iu/land19iu/l,thesensitivityandspecificitywere90.3%,54.4%;asthe diagnosticcriteriaofast ALT HBVDNAandHBVDNAwas copy/ml,thesensitivityandspecificitywere52.3%,98.4%;andifthediagnosticcriteriaofaltofmenandwomenwere30iu/land19 IU/LcombinedHBVDNA was copy/ml,thesensitivityandspecificitywere90.2%,98.6%.[conclusion]thediagnosticvalueofhbvdnacombinedaltinhbeagnegativechronicactivehepatitisbishigher 收稿日期 : 作者简介 : 汪 通讯作者 : 朱 涛, 男, 大学本科, 主管检验师, 主要从事生化免疫学研究 武, @qq.com

16 汪 涛, 等.HBV DNA 联合 ALT 对 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的诊断价值 583 thansingleast,alt,hbv DNA,thenALTofmenandwomenwere30IU/Land19IU/Lcombined HBV DNA was copy/mlaresuggestedtobethecut-ofvaluesforhbeagnegativechronicactivehepatitisb. Keywords:hepatitisBvirus;deoxyribonucleicacid;alanineaminotransferase;active;diagnosticvalue 目前我国大约有 3.5 亿人感染了乙型肝炎病毒 (hepatitisbvirus,hbv), 其中 20% 的患者由慢性 乙型肝炎进展为肝硬化, 且部分患者最终由肝硬化 发展为肝细胞癌 [1] 由于在血清学上很难正确区分 慢性活动性乙型肝炎与慢性非活动性乙型肝炎携带 者, 美国国立卫生研究院建议应用 HBVDNA cps/ml 作为鉴别二者的指标之一 [2] 在常规的 肝功能检测项目中, 天门冬氨酸氨基转移酶 (aspartateaminotransferase,ast) 水平的上升与肝硬化 有一定的相关性 [3], 而丙氨酸氨基转移酶 (alanine aminotransferase,alt) 主要反映患者肝细胞损伤 的严重程度 [4] 早期诊断慢性活动性乙型肝炎的关 键在于检测试验的高敏感性 近年来, 慢性乙型肝 炎患者 HBV DNA 及 ALT 的诊断界值研究越来越 受到临床医生的重视 [5] 本研究探讨 HBV DNA 联合 ALT 对 HBVe 抗原 (HepatitisBviruseantigen,HBeAg) 阴性慢性活动性乙型肝炎的诊断价值 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取 2014 年 8 月 ~2015 年 11 月于我院诊治 的 HBeAg 阴性慢性乙型肝炎患者 320 例, 根据肝 组织活检结果分为慢性活动性乙型肝炎与慢性非活 动性乙型肝炎 与非活动性乙肝组比较, 活动性乙 肝组患者男性比例较高, 差异有统计学意义 (P< 0.001) 2 组间年龄比较差异无统计学意义 (P> 0.05), 具有可比性 见表 1 排除标准 :1 其他类 型病毒性肝炎 ;2 酒精性肝炎 ;3 药物性肝炎 本研 究经我院医学伦理委员会批准通过 所有患者均签 署知情同意书 1.2 方法 采用贝克曼 5800 全自动生化分析仪及上海科 华生物工程股份有限公司生物生产的 AST ALT 试剂盒检测血清 AST ALT 水平 采用中山大学 达安基因股份有限公司生产的 DA7600 荧光定量 PCR 仪及中山大学达安基因股份有限公司生产的 HBV DNA 试剂盒检测血清 HBV DNA 拷贝量 ; 采用深圳爱康生物科技有限公司生产的 AE120 时间分辨荧光检测仪及 HBV 血清标志物定量检测试剂盒检测 HBV 血清标志物 表 1 2 组患者一般资料比较 x±s, 例 (%) 性别组别例数年龄 / 岁男女活动性乙肝组 ± (80.8)44(19.2) 非活动性乙肝组 ± (61.5)35(61.5) 2 t/ χ P < 统计学处理将本组研究数据录入 SPSS19.0 行数据分析, 计数资料行 χ 2 检验, 计量资料用 x±s 表示, 行 t 检验, 以 P<0.05 为差异有统计学意义 采用受试者工作特征 (receiveroperatingcharacteristic,roc) 曲线分析 AST ALT HBV DNA HBV DNA 联合 ALT 诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的价值 2 结果 组患者肝功能及 HBV DNA 水平比较与非活动性乙肝组比较, 活动性乙肝组患者 AST ALT HBV DNA 水平较高, 差异有统计学意义 (P<0.001) 见表 AST ALT HBV DNA HBV DNA 联合 ALT 的 ROC 曲线图以敏感度为纵坐标,1- 特异性为横坐标绘制 ROC 的曲线如图 1 所示,AST ALT HBV DNA HBV DNA 联合 ALT 曲线下面积分别为 (P <0.05),HBV DNA 联合 ALT 曲线下面积最大, 敏感性 特异性最高 表 2 2 组患者肝功能及 HBV DNA 水平比较 x±s 组别 例数 AST/(IU L -1 ) ALT/(IU L -1 ) HBV DNA/(cps ml -1 ) 活动性乙肝组 ± ±35.5 (4.6±2.4) 10 5 非活动性乙肝组 ± ±13.6 (1.3±1.0) 10 3 t P <0.001 <0.001 <0.001

17 584 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 以直接反映 HBV 在体内的复制情况, 血清 ALT 水平升高常反映肝细胞受到轻到中度损伤, 当 AST 水 [9] 平升高时则代表肝细胞已重度受损 由于成本低及技术成熟,HBV DNA ALT AST 这 3 项指标的检测技术已广泛应用于临床 目前临床上 ALT 以 图 1 AST ALT HBV DNA HBV DNA 联合 ALT 的 ROC 曲线图 2.3 AST ALT HBV DNA HBV DNA 联合 ALT 诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的价值分析以 AST 40IU/L 为标准诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎时, 其敏感性为 78.4% 特异性为 64.5%; 以男性 ALT 30IU/L 女性 ALT 19IU/L 为标准诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎时, 敏感性为 90.3%, 特异性为 54.4%; 以 HBV DNA cps/ml 为标准诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎时, 敏感性为 52.3% 特异性为 98.4%; 以男性 ALT 30IU/L 女性 ALT 19IU/L 联合 HBVDNA cps/ml 为标准诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎时, 敏感性为 90.2% 特异性为 98.6% 3 讨论血清学 小三阳 模式是指 HBeAg 阴性的慢性乙型肝炎血清模式, 其长期以来被认为是 HBV 感 [6] 染后传染性低或无传染性 近年来, 在 HBV 感染患者中,HBeAg 阴性的慢性乙型肝炎所占比例逐年上升, 且相当一部分 HBeAg 阴性的慢性乙型肝 [7] 炎患者体内 HBV 仍然处于复制状态, 即为 HBeAg 阴性的慢性活动性乙型肝炎 目前临床上仍然难以明确诊断慢性活动性乙型肝炎, 特别是 HBeAg 阴性的 HBV 感染者, 其诊断和治疗更容易受到忽略 目前国际上公认的明确诊断慢性活动性 [8] 乙型肝炎的金标准是肝组织穿刺活检, 但由于肝组织穿刺活检技术难度大, 属于有创性检查, 认为因素干扰大 患者痛苦增加及费用增加等缺点, 难以早期诊断慢性活动性乙型肝炎 而慢性活动性乙型肝炎的早期明确诊断可为临床医生早期选取合适治疗方案提供参考意见 定量检测血清 HBV DNA 可 35IU/L( 女性 ) 40IU/L( 男性 ) 作为参考范围的上 限值, 但慢性乙型肝炎患者血清 ALT 水平可在很 长一段时间内处于相当稳定状态, 其检测值是 正 [10] [11] 常 的 褚小慧等研究表明, 慢性乙型肝炎患 者血清 ALT 水平与肝纤维化发生风险有相关性 在 HBeAg 阴性的慢性乙型肝炎患者中, 当 ALT 水 平达到参考范围上限值一半时, 其活性与肝纤维化 的发生发展呈正相关 将 ALT 的诊断界值降低有 利于早期诊断 HBeAg 阴性的慢性活动性乙型肝 炎 除此之外, 慢性乙型肝炎患者体内病毒复制活 动活跃与肝纤维化 肝细胞癌的发生发展有密切联 系 [12], 病毒复制受抑制者肝脏炎症反应较轻, 肝纤 维化程度也较轻, 肝细胞癌的发生率也降低 Fung [13] 等研究表明, 当 HBVDNA 病毒复制水平持续较 高 ( 超过 cps/ml) 时, 其与肝细胞癌的发生率 呈正相关, 即 HBV DNA 拷贝数越大, 最终进展为 干细胞癌的风险越大 本研究以肝组织穿刺活检作为金标准对 320 例 慢性乙型肝炎进行分析发现, 与非活动性乙肝组相 比, 活动性乙肝组患者 AST ALT HBV DNA 水平 较高 (P<0.001) ROC 曲线图显示,AST ALT HBV DNA HBV DNA 联合 ALT 曲线下面积分别 为 , 均在 0.75 以上, 说 明其诊断价值均较高, 而 HBV DNA 联合 ALT 诊 断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的价值最高, [14] 与李文楷等研究结果相符 以男性 ALT 30IU/L 女性 ALT 19IU/L 联合 HBV DNA cps/ml 为标准诊断 HBeAg 阴性慢性活动性 乙型肝炎时, 敏感性为 90.2% 特异性为 98.6%, 说 明 HBV DNA 联合 ALT 诊断 HBeAg 阴性慢性活 动性乙型肝炎敏感性与特异性均高于单用 AST ALT HBV DNA, 可用于早期明确诊断和治疗 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎 慢性活动性乙 型肝炎患者得到早期及时的抗病毒与保护肝脏治疗 可赢得治疗的最佳时机, 可有效延缓慢性乙型肝炎 进展为肝硬化及肝细胞癌 [15] 综上所述,HBV DNA 联合 ALT 诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的价值高于单用 AST ALT HBV DNA, 可以男性 ALT 30IU/L 女性 ALT 19IU/L 联合 HBV DNA cps/ml 为标准诊断 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎

18 汪 涛, 等.HBV DNA 联合 ALT 对 HBeAg 阴性慢性活动性乙型肝炎的诊断价值 585 参考文献 [1] 张香梅, 乐晓华, 王敏, 等. 乙型肝炎肝细胞内 HBcAg 表达模式与肝组织炎症及血清学指标的关系 [J]. 临床与实验病理学杂志,2014,30(6): [2] YANGFQ,YU YY,WANGGQ,etal.Apilotrandomizedcontroledtrialofdual-plasmid HBV DNA vaccinemediatedbyinvivoelectroporationinchronic hepatitis B patients underlamivudine chemotherapy [J].JViralHepat,2012,19: [3] 王欣欣, 袁国盛, 赖静兰, 等.HBeAg 阳性慢性乙型肝炎患者干扰素治疗 24 周应答不佳时的治疗方案 [J]. 南方医科大学学报,2015,10(6): [4] 陈萍, 李旭, 苏菲, 等.HBeAg 阴性慢性乙型肝炎患者血清 HBV DNA 含量与 ALT 的关系 [J]. 安徽医药,2012,16(5): [5] PAWŁOWSKA M,HALOTA W,SMUKALSKA E, etal.hbv DNA suppressionduringentecavirtreatmentinpreviouslytreatedchildrenwithchronichepatitisb[j].eurjclin MicrobiolInfectDis,2012,31: [6] PRADEEP K S,MEDHIS,ASIM M,etal.Evaluationofadefovir & lamivudineinchronichepatitisb: correlation with HBV viralkinetic,hepatic-necroinflammation & fibrosis[j].indianj Med Res,2011, 133: [7] FUNGJ,SETO W K,LAICL,etal.ProfilesofHBV DNAinalargepopulationofChinesepatients with chronichepatitisb:implicationsforantiviraltherapy [J].JHepatol,2011,54: [8] 封婷, 程延安, 石娟娟, 等.ALT<2ULN 的慢性乙型肝炎抗病毒治疗的疗效分析 [J]. 西安交通大学学报 ( 医学版 ),2013,34(6): ,837. [9] 苏荣, 罗娜, 杨延斌, 等.3 种临床类型乙型肝炎患者 HBeAg HBV-DNA 及 ALT 的差异分析 [J]. 现代预防医学,2013,40(21): [10]SANAIF M,HELMY A,BZEIZIKI,etal.Discriminantvalueofserum HBV DNAlevelsaspredictorsof liverfibrosisinchronichepatitisb[j].jviralhepat, 2011,18:e217-e225. [11] 褚小慧. 慢性乙型肝炎患者血清 HBV DNA,HBeAg 和 ALT 滴度与恩替卡韦疗效的关系 [J]. 现代检验医学杂志,2015,8(2): [12]LESMANACR,GANIRA,HASANI,etal.SignificanthepatichistopathologyinchronichepatitisBpatientswithserum ALTlessthantwiceULNandhigh HBV DNAlevelsinIndonesia[J].JDigDis,2011, 12: [13]FUNGJ.ProfilesofHBV DNAinalargepopulation ofchinesepatients withchronichepatitisb:implicationsforantiviraltherapy[j].j Hepatol,2011,54: [14] 李文楷, 丁波, 魏容, 等. 联合检测血清标志物 ALT 和 HBV-DNA 对乙型肝炎患者诊疗的临床意义 [J]. 四川医学,2013,34(1): [15]GÖBELT,ERHARDT A,HERWIG M,etal.High prevalenceofsignificantliverfibrosisandcirrhosisin chronichepatitisbpatientswithnormalaltincentraleurope[j].jmedvirol,2011,83:

19 第 24 卷第 8 期第 586 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P586 Aug2016 doi: /j.issn x 非甾体抗炎药物活化基因 -1 的表达水平与胃癌发生发展的相关性研究 李丽娟, 刘 明, 李晨光 ( 内蒙古医科大学附属医院普外科 E 区, 内蒙古呼和浩特 ) 摘要 :[ 目的 ] 研究正常黏膜 癌旁正常组织 胃癌上非甾体抗炎药物活化基因 -1(NAG-1) 的表达情况及胃癌的发生发展与 NAG-1 的关系 [ 方法 ] 测定正常胃黏膜 癌旁组织正常黏膜及胃癌组织上的 mrna 及 NAG-1 的表达情况, 可分别采用 RT-PCR 免疫组化 SP 法测定 [ 结果 ]NAG-1 蛋白在正常胃黏膜组织 癌旁正常组织 胃癌组织上的表达水平均不同, 其中在癌旁正常组织的表达水平最高, 明显高于其他 2 种组织中 NAG-1 蛋白的表达水平 (P<0.01) 其次为正常黏膜的 NAG-1 蛋白的表达水平 ; 而胃癌组织中的 NAG-1 蛋白的表达水平是最低的 同时 NAG-1mRNA 的表达水平也具有相同的规律,NAG-1mRNA 在癌旁组织中表达最高, 在正常组织黏膜中次之, 而在胃癌黏膜上的表达最低 NAG-1mRNA 在分化水平不同的胃癌组织中的表达水平也是不同的, 在低分化胃癌中的 NAG-1 表达要低于高分化胃癌组织 (P<0.01) 且可发现,NAG-1 蛋白质表达与肿瘤大小, 胃癌的浸润程度 TNM 分化无明显的关联 (P>0.05) [ 结论 ] 胃癌的发生发展过程中 NAG-1 起着重要的作用, 其正常水平的表达可能对癌细胞的增殖起着抑制的作用, 而 NAG-1 表达减弱或丢失会使其抑癌作用减弱或者丧失 关键词 : 胃癌 ;NAG-1 表达水平 ; 非甾体类抗炎药中图分类号 :R735.1 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) RelationshipoftheexpressionlevelofNAG-1andtheoccurrence anddevelopmentofgastriccancer LILi-juan,LIU Ming,LIChen-guang (AreaEofGeneralSurgeryDepartment,Inner Mongolia MedicalUniversity Afiliated Hospital,Huhhot ,China) Correspondingauthor:LiChenguang, @qq.com Abstract:[Objective]ToexploretherelationshipbetweentheexpressionofNAG-1ingastriccarcinoma,adjacentnormaltissueandnormalgastricmucosa,andtherelationshipbetweentheoccurrenceanddevelopmentofgastriccancerandtheexpressionofNAG-1.[Methods]TheexpressionofmRNAandNAG-1 innormalgastricmucosa,adjacentnormalgastricmucosaandgastriccarcinomatissuesweredetectedby RT-PCRandimmunohistochemistrẏ [Results]NAG-1proteininnormalgastricmucosatissue,paracanceroustissueandgastriccancertissuewasdiferent,whichwasthehighestinadjacentnormaltissue,significantlyhigherthanintheothertwogroups(P<0.01).TheexpressionlevelofNAG-1mRNAalsohadthe sametrend.theexpressionofnag-1mrna washighestintheadjacenttissues,andthesecondwasinthe normaltissue,andtheexpressionwasthelowestinthemucosaofthegastriccancer.theexpressionlevel ofnag-1mrnaindiferenttissuesofgastriccancerwasdiferent,andtheexpressionofnag-1inlower diferentiatedgastriccarcinomawaslowerthanthatinhighlydiferentiatedgastriccarcinoma(p<0.01).nag-1proteinexpressionwasnotsignificantlycorrelatedwithtumorsize,infiltrationdegree,tnm differentiationofgastriccancer(p>0.05).[conclusion]nag-1playsanimportantroleinthedevelopmentof gastriccancer.itsnormallevelplaysanimportantroleininhibitingtheproliferationofcancercels,while thelowerexpressionorevenitsabsencemaycausetheweakerinhibitionornoinhibitionofcancercels. Keywords:gastriccarcinoma;NAG-1expression;Non-steroidalanti-inflammatorydrug 收稿日期 : 作者简介 : 李丽娟, 女, 学士, 主要从事消化疾病的临床与研究通讯作者 : 李晨光, @qq.com

20 李丽娟, 等. 非甾体抗炎药物活化基因 -1 的表达水平与胃癌发生发展的相关性研究 587 胃癌是我国常见的恶性肿瘤, 其死亡率在各种肿 瘤中占第 1 位, 是各医疗工作中的突出重点 近年来 的流行病学研究表明, 长期服用非甾体类抗炎药 (Non-steroidalanti-inflammatory drug,nsaids) 能降低胃癌的发病率 NSAIDs 是一类不含有甾体 结构的抗炎药, 具有消炎 解热 镇痛及防止癌症的 作用 大多数的研究都表明 NSAIDs 对胃癌细胞 的作用机制为 COX-2 和非 COX-2 的途径起到防止 胃癌发生的作用 部分研究表明 NSAIDs 可诱导 肿瘤细胞表达 (Non-steroidalanti-inflammatory drug,nsaids,nag-1) 基因,COX-2 途径中的 NAG-1 基因对癌细胞的增殖和凋亡的作用机制引 起的广泛关注 但对于 NAG-1 在胃癌组织上 癌 旁正常组织上及正常黏膜上的表达的是否有差异仍 然存在争议 本研究将通过检测胃癌组织 癌旁正 常组织及正常黏膜上 NAG-1 蛋白及 mrna 的表 达, 来探究 NAG-1 在胃癌的发生发展的是否起到 抑制作用 1 资料与方法 1.1 一般资料 随机选取 2014 年 3 月 ~2015 年 3 月在我院接 受胃癌病理确诊的胃癌手术标准标本 42 例, 其中男 30 例, 女 12 例, 平均年龄 (55.3±7.8) 岁 ; 选取正常 胃黏膜 60 例, 其中男 42 例, 女 18 例, 平均年龄为 (56.1±8.1) 岁 ; 选取癌旁正常组织 24 例, 其中男 16 例, 女 8 例, 平均年龄为 (54.9±7.6) 岁 所有患 者在年龄 性别等方面比较差异无统计学意义 (P> 0.05), 具有可比性 1.2 免疫组化法 1 切片脱蜡制片 ;2 用冲洗液冲洗, 每 3min 冲 洗 2 次 ;3 把切片孵育在 HydrogenPeroxideBlock 中 12 min 左右 ;4 用缓冲液冲洗 ;5 加入 UltraV Block 液体, 常温下放置 5 min, 封闭非特异性的染 色 ;6 再用缓冲液冲洗, 每 5 min 冲洗 2 次 ;7 加入 抗工作液后在 37 环境下孵育 2h 左右 ;8 再次使 用缓冲液冲洗, 加入增强子, 置于室温下孵育 18min 左右 ;9 使用缓冲液冲洗切片, 将酶标二抗滴入, 置 于室温中 20 min 左右 ;10 重复使用冲洗缓冲液 ; 将 1~2 滴 DABPlusChromogen 滴入 1mlDAB PlusSubstrate 中, 将上述混合液滴入切片中, 孵育 10min 左右 ; 用蒸馏水冲洗, 染色, 再进行脱水, 透明, 最后进行封片 1.3 RT PCR 技术 反转录 PCR(reversetranscription-PCR,RT- PCR), 是聚合酶链式反应的一种广泛应用 RNA 链被逆转录形成互补的 DNA, 以该互补的 DNA 模 板, 使用 PCR 扩增 应用 Trizol 溶液在新鲜的组织中提取 RNA,RT-PCR 总过程为两步法, 首先是合成 cdna 第 1 链 :1 加入 RNA1~5μg 于 0.5 ml 微量离心管中, 补充 DEPC H2O 至总体积达 11μl 将 10μM Oligo(dT)12~18μl 加入管中, 混匀再进行离心 ;270 下加热 10 min, 马上将上述离心管放入冰浴中至少 1 min 将下列混合物加入其中 : 0.1 M DTT 2μl 25 mm MgCl2 2μl 10 PCR bufer2μl 10 mm dntpmix1μl, 混匀后进行离心 在 42 环境下孵育 2~5 min 3 在离心管中加入 SuperscriptⅡ 液体 1 μl, 放入 42 水浴中 50min 4 在加入至 70 约 15 min, 便可终止反应 5 在管中加入 RNase H 1μl, 再将管插入冰中, 在 37 的环境下放置 20min 保存于-20 以备用 其次为 PCR:1 依次将第 1 链 cdna2μl 下游引物 (10pM)2μl 上游引物 (10pM)2μl dntp (2mM)4μl 10 PCRbufer5μl Taq 酶 (2U/ μ l) 1μl 加入 0.5mlPCR 管 ;2 滴入 ddh2o 至总体积达 50μl, 混匀后进行离心 ;3 选择适宜的温度扩增 29~31 个循环 ;4 电泳鉴定 : 在紫外灯下观察琼脂糖凝胶电泳结果 ;5 使用凝胶图像分析电泳条带 1.4 统计学处理采用 SPSS17.0 统计软件进行分析, 对年龄, 性别等符合正态分布的资料进行单因素方差分析 对于胃癌分化程度,TNM 等不符合正态分布的资料应该采用秩和检验, 以 P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 种黏膜组织 NAG-1 蛋白表达的比较胃癌组织与正常胃黏膜上 癌旁正常组织中 NAG-1 蛋白表达的异同 检测结果表明在胃癌与正常黏膜上 NAG-1 蛋白的表达具有差异, 在正常黏膜上与癌旁正常组织中的表达较高, 见图 1 在 3 种组织中, 胃癌组织中 NAG-1 蛋白的表达水平是最低的, 而癌旁正常组织表达水平最高, 同时癌旁正常组织中 NAG-1 的表达水平也比正常黏膜组织的要高, 差异均有统计学意义 (P 均 <0.05) 见表 肿瘤 TNM 分期 浸润程度 肿瘤大小及肿瘤分化程度与 NAG-1 蛋白表达的相关性免疫组化检测的结果表明,NAG-1 的表达水平与胃癌得到分化程度有相关性, 肿瘤分化程度越低, NAG-1 蛋白的表达水平越低 (t= ,P < 0.001), 见表 3 同时相关性研究表明,NAG-1 的表达水平与肿瘤的浸润程度 (P=0.81) 肿瘤大小 (P=0.96) 及 TNM 分期 (P=0.76) 无明显联系, 见表 4

21 588 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 A:低分化胃癌; B:中高分化胃癌; C:癌旁正常组织; D:正常黏膜; E:胎盘组织; F:正常胃黏膜 图 1 NAG1 在胃癌与正常黏膜的表达 表 1 3 种黏膜组织 NAG1 蛋白表达比较 x ±s IOD 值 F 组别 样本量 癌旁正常组织 ± ± 正常黏膜 胃癌组织 29.4± P <0.001 样本量 胃癌 正常黏膜 例数 低分化肿瘤组 30 高分化肿瘤组 IOD 值中位数 P 3.01( 1.22~23.6) ( 12.56~45.36) IOD 值 2.43± ±2.54 A:胃癌组织; B:正常黏膜; C:癌旁正常组织 t P <0.01 表 4 NAG1 变大水平与浸润程度 肿瘤大小及 TNM 分期的相关性分析( IOD 值) 例数 浸润程度 TNM 分期 肿瘤大小 中位数 M T0 -T ( 1.32~28.00) Ⅰ-Ⅱ ( 1.45~35.60) T3 -T4 Ⅲ-Ⅳ <5cm 5cm NA 在 癌 旁 正 常 组 织 中 的 表 达 要 高 于 其 他 的 组 织 ( P<0.01),正 常 黏 膜 中 NAG1 mrna 的 表 达 要 NA 表达水平最低( P<0.01),见表 5 表 3 NAG1 蛋白的表达水平与胃癌分化程度 的相关性分析 x ±s 组别 NAG1mRNA 在 正 常 黏 膜 癌 旁 正 常 组 织 及 胃癌上的表达 水 平 存 在 差 异,见 图 2 NAG1 mr高于胃癌组织中的表达,即胃癌组织中 NAG1mR- 表 2 胃癌组织与正常胃黏膜上 NAG1 蛋白表达比较 组别 癌组织上的比较 2.29( 1.45~29.47) 4.50( 0~37.19) 3.02( 0~20.01) 2.98( 1.23~23.96) P 图 2 正常黏膜 癌 旁 正 常 组 织 及 胃 癌 上 NAG1 mrna 的表达情况 表 5 正常黏膜 癌旁正常组织及胃癌上 NAG1mRNA 的表达 组别 例数 灰度比 胃癌 ± ±0.096 癌旁正常组织 正常黏膜 ±0.151 t x ±s P < < 讨论 随着对 NSAIDs 研 究 的 逐 步 深 入,NSAIDs 抑 制肿瘤中的非 COX2 途 径 的 作 用 越 来 越 受 到 重 视 近几年 来 的 研 究,多 为 探 究 NSAIDs 对 NAG1基 因的诱 导 作 用 来 解 释 非 COX2 抑 制 癌 症 的 作 用 之前有学 者 将 能 由 多 种 NSAIDs 诱 导 表 达 的 基 因 [] 称为 NAG16 现有研究对于 NAG1 在癌症的发 生发展中的所起到 作 用 的 观 点 并 不 一 致,有 研 究 表 2.3 NAG1 mrna 表 达 水 平 在 正 常 黏 膜 上 与 胃 明在前列腺癌和胎 盘 中 NAG1的表达均比正常组

22 李丽娟, 等. 非甾体抗炎药物活化基因 -1 的表达水平与胃癌发生发展的相关性研究 589 织的表达水平要高 ; 而在结肠癌中的表达水平却明显降低了 ; 也有研究表明,NAG-1 能抑制乳腺癌及肺癌的发生, 起到抑癌基因的作用, 诱导癌症细胞的死亡 本研究的检测结果显示, 胃癌组织中 NAG-1 表达水平较正常黏膜低, 明显低于癌旁正常组织, 提示胃癌的发生与 NAG-1 的缺失或者抑制有相关性 本研究采用 RT-PCR 测定 NAG-1 在不同组织之间的表达情况 抑癌基因在癌细胞的增殖分化起 [5] 到负调节的作用, 诱导细胞凋亡, 维持基因稳定 结果提示,NAG-1 的表达水平与肿瘤大小 浸润程度 TNM 分期并无明显相关联系 而 NAG-1 的表达水平与肿瘤的分化程度具有明显的相关性, 肿瘤分化程度越低,NAG-1 的表达水平越低, 提示 [8] NAG-1 可能为胃癌的抑制基因之一 本研究结果同时表明, 胃癌组织中的 NAG-1 的表达水平要明显低于癌旁正常组织, 这可能与人为的操作因素相关, 故需要更为周全的实验研究进行证实与探究其原理 同时本研究进一步采用了 RT-PCR 检测正常组织 癌旁正常组织 胃癌组织中 NAG-1mRNA 的表达情况 结果显示,NAG-1mRNA 在组织上的 3 种组织上的表达水平同之前检测的 NAG-1 蛋白在 3 种组织上的表达水平的规律有一致性, 在胃癌组织中 NAG-1mRNA 的表达水平是 3 种检测组织中最低的, 其次为正常黏膜组织, 而癌旁正常组织中的表达水平是最高的 进一步说明,NAG-1 与胃癌的发生发展有着明显的相关性 综上所述, 胃癌组织中的 NAG-1 的表达水平明显低于癌旁组织, 正常组织, 表明 NAG-1 为可能的抑癌基因, 对癌症细胞的增殖分化起着抑制的作用 尽管目前对 NAG-1 的生物活性及其作为抑癌基因的作用机制的研究具有令人瞩目的成果, 但目前对于 NAG-1 的许多生物作用机制还未完全明确 虽然目前 NAG-1 抑制肿瘤的作用被广泛认可, 但其作用在肿瘤的不同发展阶段起着如何的作用还并未明确, 故在临床研究中, 需要重视研究 NSAIDs 对 NAG-1 的诱导作用的研究, 更为深入地探究 NAG-1 在癌症发展发生过程中的转变, 更好地掌握胃癌的发生发展过程, 做到更好地预防和及时的治疗, 防止严重并发症及不良预后的发生 参考文献 [1] VAISH V,PIPLANI H,RANA C,etal.NSAIDs mayregulateegr-1-mediatedinductionofreactiveoxygenspeciesandnon-steroidalanti-inflammatorydruḡ inducedgene(nag)-1toinitiateintrinsicpathwayof apoptosisforthechemopreventionofcolorectalcancer [J].MolCelBiochem,2013,378: [2] 刘霞, 王启明, 牛会林, 等. 胃癌中新抑癌基因 WTX 启动子区域甲基化水平的检测 [J]. 南方医科大学学报,2013,33(3): [3] 刘佳骅, 沈艳莹, 倪醒之, 等.FGFR4 基因单核苷酸多态性和杂合性丢失在胃癌发病中的作用 [J]. 上海交通大学学报 ( 医学版 ),2013,33(2): [4] JUNGSK,SUJH,KIM Y A,etal.MLK3isanovel targetof dehydroglyasperin D forthe reduction in UVB-inducedCOX-2expressioninvitroandinvivo. [J].JCelMolMed,2015,19: [5] 唐人, 熊剑勇, 刘丹, 等. 低分子肝素对老年胃癌根治术患者的氧化应激反应及肾功能的影响 [J]. 中国生化药物杂志,2014,15(3): [6] HARN H J,CHUANG H M,CHANG L F,etal. Taiwanin A targets non-steroidal anti-inflammatory druḡactivatedgene-1inhumanlungcarcinoma[j].fitoterapia,2014,99: [7] MA R,YIB,PIAZZA G A,etal.MechanisticRoleof MicroRNAinCancerChemopreventionby NonsteroidalAnti-inflammatoryDrugs[J].CurPharmacolRep, 2015,1:1-7. [8] 谷新荣, 王灿琴, 王忠云, 等. 氯诺昔康联合曲马多对胃癌根治术患者术后血浆细胞因子的影响 [J]. 临床麻醉学杂志,2014,30(10): [9] SAHINIH,HASSAN M M,GARRETTCR.Impact ofnon-steroidalanti-inflammatorydrugsongastrointestinalcancers:currentstate-of-thescience[j].cancer Let,2014,345: [10]SATO T,KIMOTO N,OHKIY,etal.Methodsfor screeningofpatienttobeadministered withpharmaceuticalagentcomprisinganti-cancerantibodyasactive ingredient:ep,us [p] [11]ENOLK,ÖZKAN M B,VURALS,etal.Theroleof inflammationingastriccancer.[j].advexpmedbiol, 2014,816: [12]ALLOTTE H,TSECK,OLSHAN AF,etal.Nonsteroidalanti-inflammatorydruguse,hormonereceptor status,and breast cancer-specific mortality in the CarolinaBreastCancerStudy[J].BreastCancer Res Treat,2014,147:1-7. [13] 张丽萍, 马欣, 郑丽娟, 等. 抑癌基因 Maspin 在胃癌及癌前病变组织中的表达研究 [J]. 中华微生物学和免疫学杂志,2014,17(3):

23 第 24 卷第 8 期第 590 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P590 Aug2016 doi: /j.issn x 中医健脾疗法对消化性溃疡愈合质量及血清正表皮生长因子的影响 刘越洋, 黄雅慧, 孙 洁, 黎婉荣 ( 西安市中医医院脾胃病科, 陕西西安 ) 摘要 :[ 目的 ] 探讨健脾疗法对消化性溃疡愈合质量及血清正表皮生长因子 (EGF) 的影响 [ 方法 ] 将 90 例患者随机分为西药组 中药 1 组 中药 2 组, 每组 30 例 经治疗后评估临床疗效 内镜下再生黏膜成熟度 再生黏膜组织学成熟度及血清 EGF 含量, 以判定溃疡愈合质量 [ 结果 ]3 组均能改善消化性溃疡患者症状及体征,3 组临床治愈率分别为 76.7% 73.3% 86.7%, 差异无统计学意义 (P>0.05); 中药 2 组溃疡愈合 Sc 期为 20 例 (66.7%), 再生黏膜组织优级为 17 例 (56.7%), 均明显高于其他 2 组 (P<0.05); 治疗后 3 组血清 EGF 含量增高, 中药 2 组血清 EGF 含量为 ( )ng/ml, 与其他 2 组比较差异有统计学意义 (P<0.05) 1 年后随访复发率, 中药 2 组的复发率明显低于其他 2 组, 差异有统计学意义 (P<0.05) [ 结论 ] 健脾益气 祛瘀生肌为法的健脾疗法能提高溃疡愈合质量, 降低复发率, 其作用机理可能与提高血清 EGF 含量有关 关键词 : 健脾 ; 消化性溃疡 ; 愈合质量中图分类号 :R256.3 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) Efectsofspleenstrengtheningtherapyonhealingqualityofpeptic ulcerandonserum EGF LIUYue-yang,HUANGYa-hui,SUNJie,LIWan-rong (DepartmentofSpleenandStomach,Xi'anChineseMedicineHospital,Xi an710069,china) Correspondingauthor:LIU Yueȳang, @qq.com Abstract:[Objective]Toinvestigatetheinfluenceofspleenstrengtheningtherapyonthehealingquality ofpepticulcerandonthecontentofserum EGF.[Methods]Ninetycaseswererandomlydividedintowesternmedicinegroup,herbsNo.1groupandherbsNo.2grouṗ Aftertreatment,theclinicaleficacy,maturity ofendoscopicregeneratedmucosa,histologicalmaturityofregeneratedmucosaandserum EGFlevelswere evaluatedtodeterminethequalityofulcerhealinġ [Results]Thesymptomsandsignsofpepticulcerpatientsinal3groupswereimproved.Theclinicalcureratesof3groupswere76.7%,73.3% and86.7%respectively,buttherewasnoobviousdiference(p>0.05).thenumberofulcerhealingscperiodinherbs No.2groupwas20cases(66.7%),andthetopḡrademucosaltissueregenerationswas17cases(56.7%). Bothofthem weresignificantlyhigherthantheothertwogroups(p< 0.05).Aftertreatment,theserum levelsofegfinal3groupswereincreased,with ng/mlinherbsno.2group,whichwassiḡ nificantlydiferentwithothertwogroups(p<0.05).after1yearoffolow-up,therecurrencerateinherbs No.2groupwassignificantlylowerthanothertwogroups,withsignificantdiference(P<0.05).[Conclusion]Basedonstrengtheningthespleen,replenishingQiandremovingbloodstasistopromotemuscleregeneration,thespleenstrengtheningtherapycaneficientlyimprovethequalityofulcerhealingandreduce therecurrencerate.itcanprobablybeatributedtotheincreaseoftheserum EGFlevel. Keywords:spleenstrengtheningtherapy;pepticulcer;healingquality 收稿日期 : 基金项目 : 陕西省科学技术研究发展计划项目 (No:2013K ) 作者简介 : 刘越洋, 女, 副主任医师, 长期从事中医脾胃病临床及科研工作通讯作者 : 刘越洋, @qq.com

24 刘越洋, 等. 中医健脾疗法对消化性溃疡愈合质量及血清正表皮生长因子的影响 591 消化性溃疡是临床常见病 多发病, 在我国消化性溃疡占胃镜检查的 10.3% ~32.6% [1] 随着 PPI 制剂的临床应用, 溃疡的治愈率不断提高 但消化性溃疡复发率高, 仍为临床医生研究的热点 溃疡愈合质量是其复发率的重要影响因素, 经我科长期临床观察中西医结合治疗可提高溃疡愈合质量, 并降低复查率 现将研究健脾疗法对消化性溃疡组织学成熟度及血清正表皮生长因子 (epidermal growthfactor,egf) 的影响, 总结如下 1 资料与方法 1.1 一般资料选择我院脾胃病科门诊消化性溃疡患者 90 例, 随机分为 3 组, 每组各 30 例 西药组男 16 例, 女 14 例 ; 年龄 24~70 岁, 平均 (42±3.21) 岁 ; 病程 2~ 23 个月, 平均 (6±1.22) 个月 中药 1 组男 17 例, 女 13 例 ; 年龄 22~69 岁, 平均 (38±2.17) 岁 ; 病程 2~21 个月, 平均 (5±1.89) 个月 中药 2 组男 16 例, 女 14 例, 年龄 21~70 岁, 平均 (39±4.63) 岁, 病程 1~22 个月, 平均 (6±3.01) 个月 3 组一般资料比较差异无统计学意义 (P>0.05), 具有可比性 1.2 病例选择 诊断标准参考中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员会, 消化性溃疡中西医结合诊疗共识意见 (2011 年天津 ) [2] 纳入标准 1 符合消化性溃疡诊断标准 ; 21 周内电子胃镜检查诊断为溃疡活动期, 溃疡直径在 1~2cm 者, 碳 13- 呼气试验及快速尿素酶试验 : 阳性 ;3 年龄 20~70 岁 ;4 入组者知情同意, 并签署知情同意书 排除标准参考 2002 年郑筱萸主编 中药新药临床研究指导原则 [3] 1 消化性溃疡并穿孔, 胃底溃疡, 胃溃疡合并出血 重度异型增生者 ;2 消化性溃疡排除特殊病因者, 如胃泌素瘤 肝硬化等 ; 3 准备妊娠 妊娠及哺乳期妇女 ;4 过敏体质及对 青霉素 等多种药物过敏者 ;5 酗酒 精神异常或有其他不宜做入组者 ;6 患严重心脑血管 肝肾和造血系统疾病的患者 1.3 方法 3 组入组前均行胃镜检查, 诊断为消化性溃疡, 并用钟表法确定溃疡部位 治疗前晨起空腹抽出静脉血 3ml, 静置 30min 后, 离心取血清以检测血清中 EGF 含量 治疗均采用四联疗法根除幽门螺杆菌 (Hp)( 用药 10d), 奥美拉唑 (20 mg 14 粒 ) 果胶铋 (50mg 24 粒 ) 克拉霉素 (0.5g 4 片 ) 阿莫西林 (0.25g 24 粒 ) 此后西药组口服奥美拉唑及果胶铋 5 周, 中药 1 组口服中汤药 2 月 中药 2 组口服中汤药 3 月, 并于第 2 年秋冬交替季节口服 中汤药 1 月预防复发 口服中汤药以健脾益气 祛 瘀生肌为治法, 口服愈疡汤 ( 炙黄芪 30g 苍术 15g 桃仁 15 g 白及 15 g) 日一剂, 水煎 2 次, 取汁 300ml, 分 2 次早晚温服 每位患者均于研究开始 3 个月后复查胃镜, 并于溃疡愈合部位取 2 块活检 组织, 用 10% 中性甲醛液固定, 常规石蜡包埋 切片 后进行苏木精 - 伊红染色病理观察 晨起空腹抽出 静脉血 3ml, 静置 30min 后, 离心取血清以检测血 清中 EGF 含量 1.4 观察项目 [2] 临床疗效指标 临床治愈 : 症状全部消 失, 溃疡愈合或无痕迹愈合,Hp 阴性 显效 : 主要 症状消失, 溃疡达愈合期 (H2),Hp 阴性 ; 有效 : 症状 有所减轻, 溃疡达愈合期 (H1),Hp 减少 ( 由 变为 +); 无效 : 症状 内镜及 Hp 检查均无好转者 [4] 内镜下再生黏膜成熟度的评价 Sa 期 : 溃疡瘢痕中央部分凹陷 ;Sb 期 : 瘢痕中央无凹陷, 再 生绒毛呈粗大颗粒状 ;Sc 期 : 瘢痕中央无凹陷, 再生 绒毛呈细颗粒状, 瘢痕愈合部位黏膜平坦, 接近正常 黏膜形态 [5] 再生黏膜组织学成熟度评价 在溃疡愈 合处取 2 块组织, 按照 Pan 分级 [4] 标准, 将再生黏 膜组织学成熟度分为 3 级 优 : 绒毛或上皮完整, 腺 体数量多, 结构形成较好, 毛细血管较多, 炎性细胞 浸润少 ; 良 : 绒毛矮小 粗糙或上皮完整性较差, 腺体 数量较少, 结构紊乱, 毛细血管较少, 中度炎性细胞 浸润 ; 差 : 仅有几个新生上皮细胞, 上皮完整性极差, 绒毛和腺体结构无或少, 毛细血管网少, 大量炎性细 胞浸润 EGF 水平测定患者治疗前后血清中 EGF 含量采用 ELISA 法测定, 检测试剂盒为南京 建成生物工程研究所 复发率随访一年后随访观察各组溃疡复 发率, 给予复查胃镜以观察溃疡复发 探讨溃疡愈 合质量与复发率关系及预防性治疗与溃疡复发率的 关系 1.5 统计学处理 选用 SPSS17 统计软件分析, 计数资料以例数 及 % 表示, 组间比较用 χ 2 检验 计量资料以 x±s 表示, 组间比较用 t 检验, 以 P<0.05 为差异有统计 学意义 2 结果 2.1 临床疗效指标 3 组均能改善消化性溃疡患者症状及体征, 在 临床疗效上均无无效病例, 有效率为 100% 临床

25 592 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 痊愈病例中药 2 组最高 (26 例 ), 依次为西药组 (23 例 ) 中药 1 组 (22 例 ) 3 组在临床疗效方面经 χ 2 检验差异无统计学意义 (P>0.05), 见表 1 表 1 临床疗效比较例 中药 1 组脱落 13 例, 中药 2 组脱落 13 例 ) 西药组 20 例患者复发 6 例 (30%), 中药 1 组 17 例患者中复发 2 例 (11.8%), 中药 2 组 17 例患者中复发 1 例 (5.9%), 中药 2 组与西药组比较差异有统计学意义 (P<0.05) 组别例数临床痊愈显效有效无效 西药组 表 4 血清 EGF 含量变化 ng/ml, x±s 中药 1 组 中药 2 组 组别例数治疗前治疗后 西药组 ± ±0.23 1) 中药 1 组 ± ±0.12 1) 2.2 内镜下再生黏膜成熟度的评价 3 组在内镜下再生黏膜成熟度上, 中药 2 组 Sc 期为 20 例, 与其他 2 组比较差异有统计学意义 (P<0.05),Sa 期病例为 3 例, 明显低于其他 2 组 (P<0.05), 见表 2 表 2 内镜下再生黏膜成熟度比较 例 (%) 组别 例数 Sa 期 Sb 期 Sc 期 西药组 30 9(30.0) 1) 11(36.7) 10(33.3) 1) 中药 1 组 30 9(30.0) 1) 12(40.0) 9(30.0) 1) 中药 2 组 30 3(10.0) 7(23.3) 20(66.7) 与中药 2 组比较, 1) P< 再生黏膜组织学成熟度评价 3 组在再生黏膜组织学成熟度上, 中药 2 组优 级为 17 例, 与其他 2 组比较差异有统计学意义 (P<0.05), 良级病例为 13 例, 明显低于其他 2 组 (P<0.05), 见表 3 表 3 再生黏膜组织学成熟度比较 例 (%) 组别 例数 优 良 差 西药组 30 10(33.3) 1) 20(66.7) 1) 0 中药 1 组 30 9(30.0) 1) 21(70.0) 1) 0 中药 2 组 30 17(56.7) 13(43.3) 0 与中药 2 组比较, 1) P< 血清 EGF 含量 3 组治疗前血清 EGF 含量比较, 差异无统计学 意义 (P>0.05) 治疗后 3 组血清 EGF 含量均增 高, 中药 2 组血清 EGF 含量增高显著, 与其他 2 组 比较差异有统计学意义 (P<0.05), 见表 复发率随访 1 年后对 90 例患者进行随访, 脱落 36 例 ( 因为 无临床症状, 拒绝复查胃镜, 其中西药组脱落 10 例, 中药 2 组 ± ± 讨论 与中药 2 组比较, 1) P<0.05 消化性溃疡愈合率不断提高, 但因环境 精神及 Hp 感染等因素消化性溃疡存在高复发率, 仍为临 床一大难题 据报道, 消化性溃疡年复发率,Hp 根 除后为 6.45%,Hp 阳性的可达 23.33% [6] 溃疡愈合质量 (QOUH) 的概念首先由 Tar- [4] nawski 等提出, 认为溃疡愈合后修复和再生的上 皮组织必须具有完整的黏膜防御能力 并提出通过 再生黏膜组织学成熟度及功能学成熟度, 来评估溃 疡愈合质量 其研究示, 内镜下观察初愈合的溃疡 上皮表面完整, 但存在明显的组织学和超微结构的 异常 这些异常导致细胞氧和能力 能量供给及黏 膜防御功能下降, 所以溃疡愈合质量与其复发率有 [7] 密切的相关性 徐永成等利用放大内镜研究十二 指肠溃疡愈合质量与复发率相关性, 结果发现十二 指肠溃疡内镜下溃疡愈合 Sa 期 Sb 期和 Sc 期的复 发率分别为 82.7% 47.5% 0;Sb 期和 Sc 期复发率 明显低于 Sa 期 (P<0.05) 中医药对消化性溃疡愈合质量的相关性研究多 采用动物实验 本研究采用临床研究方法, 入组患 者口服愈疡汤 ( 黄芪 30g 苍术 15g 桃仁 15g 白及 15g), 其以健脾益气 祛瘀生肌为法 素问 痿 论 曰 : 脾主身之肌肉, 脾主运化水谷之精, 以生 养肌肉 消化性溃疡黏膜的修复与脾胃功能畅旺 有关, 脾旺则气血生化旺盛, 利于肌肉续接 溃疡修 复 黏膜再生 [8] 方中黄芪补气健脾 生肌为君药 ; 苍术燥湿运脾, 以助黄芪之健脾之功, 视为臣药 周 学文教授认为消化性溃疡病位在胃, 与肝脾密切相 关 [9] 脾胃虚弱为发病之本以, 毒热 为标 ; 久病入 络, 气滞血滞, 久则热盛毒腐成痈 提出消化性溃疡 活动期可依照 胃痈 进行论治, 采用 消 托 补 三法治之 故方中桃仁活血祛瘀消痈, 白及消

26 刘越洋, 等. 中医健脾疗法对消化性溃疡愈合质量及血清正表皮生长因子的影响 593 肿生肌敛疮共为佐药 研究结果发现 3 组均能改善消化性溃疡患者症 状及体征, 经统计学分析差异无统计学意义 (P> 0.05) 在内镜再生黏膜成熟度比较中, 中药 2 组溃 疡愈合黏膜组织最接近正常黏膜形态 中央凹陷消 失, 再生绒毛表面呈细颗粒状, 瘢痕及周边部黏膜平 坦 在 Sa 期病例数减少 Sc 期病例数增多, 与其他 2 组比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) 再生黏膜 组织学成熟度比较中,3 组病理组织均呈优良两级, 无差级病例 中药 2 组绒毛或上皮完整程度 腺体 数量多少 结构形毛细血管数量 炎性细胞浸润多少 优于其他 2 组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 中 药 1 2 组 1 年后复发率低于西药组, 差异有统计学 [10] 意义 (P<0.05) 同样, 江国荣等研究示益气活 血方联合奥美拉唑能提高乙酸性大鼠胃溃疡的愈合 质量 颌下腺 十二指肠 胰腺及肾脏等均分泌表皮生 长因子, 其与上消化道上皮细胞中的表皮生长因子 受体结合, 对修复消化道炎症及损伤起到重要作 [11] [12] 用 李成军等动物实验研究显示,EGF 和 VEGF 随着溃疡的愈合, 能促进大鼠胃溃疡再生的 异常胃黏膜向正常胃黏膜转化及再生胃黏膜功能的 恢复 本研究发现消化性溃疡患者治疗前 EGF 含 量较低,3 组之间差异无统计学意义, 治疗后 EGF 含量均增高, 中汤药 2 组与其他 2 组比较差异有统 [13] 计学意义 刘鹏程研究发现中药制剂 ( 三七 白 及 茯苓 黄芪 蒲黄 五灵脂 ) 同样能使 EGF 表达增 高 溃疡受损的胃黏膜增生, 溃疡愈合质量提高及 复发率减少, 都可能是通过介导 EGF 蛋白的表达来 实现的 根据研究结果提示中药 1 组口服中汤药 2 个 月, 与西药组临床疗效 再生黏膜成熟度 再生黏膜 组织学成熟度方面差异无统计学意义 中药 2 组口 服中汤药 3 个月后能显著提高消化性溃疡再生黏膜 成熟度 再生黏膜组织学成熟度 证实健脾益气 祛 瘀生肌是治疗消化性溃疡的有效治则及溃疡愈合质 量与治疗时间呈正相关性 中药 2 组在第 2 年预防 性治疗, 能显著降低复发率 健脾疗法提高消化性 溃疡愈合质量及低复发率可能是通过提高血清中 EGF 含量而发挥作用的 参考文献 [1] 中华消化杂志编委会. 消化性溃疡病诊断与治疗规范 (2013 年, 深圳 )[J]. 中华消化杂志,2014,32(2): [2] 中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员会. 消化性溃疡中西医结合诊疗共识意见 (2011 年天津 )[J]. 中国中西医结合杂志,2012,32(6): [3] 中华人民共和国卫生部. 中药新药临床研究指导原则 ( 试行 )[S]. 北京 : 中国医药科技出版社,2002: [4] TARNAWSKIA,HOLLANDER D,KRAUSE W J, etal."healed"experimentalgastriculcersremainhistologicalyandultrastructuralyabnormal.jclingastroenterol,1990,12:s139-s147. [5] PANS,LIAOC H,LIEN GS,etal.Histologicalmaturityofhealedduodenalulcersandulcersrecurrence aftertreatmentwithcoloidalbismuthsubcitrateorcmi et-idine[j].gastroenterology,1991,101: [6] SIJ M,JIN Y Y,WUJG.Therelationshipbetween ulcerrecuurenceand HelicobaterPylori:Aprospective oneȳearfolow-upstudyinchina[j].jzhejiang UniversityScience,2000,1: [7] 徐永成, 许岸高, 陈惠新, 等. 放大胃镜对判断十二指肠溃疡愈合质量和复发的价值 [J]. 中国医药指南, 2011,9(11): [8] 林路平, 邝卫红. 许鑫梅教授治疗消化性溃疡复发经验 [J]. 广州中医药大学学报,2013,30(1): [9] 季顺欣, 陈欢雪, 陈民, 等. 周学文教授以痈论治消化性溃疡学术渊源 [J]. 中华中医药学刊,2010,28 (5): [10] 江国荣, 张露蓉, 王纯痒, 等. 益气活血方联用奥美拉唑对大鼠消化性溃疡愈合质量的影响 [J]. 东南大学学报 ( 医学版 ),2013,32(3): [11]SATO T,AMANO H,ITO Y,etal.Vascularendothelialgrowth factorreceptor1 signaling facilitates gastriculcerhealingandangiogenesisthroughtheupregulationofepidermalgrowthfactorexpression on VEGFR1+CXCR4+celsrecruitedfrombonemarrow [J].JGastroenterol,2014,49(3):455. [12] 李成军, 王丽萍, 夏立丁, 等. 大鼠乙酸胃溃疡愈合过程中 EGF 和 VEGF 对胃黏膜组织形态的影响 [J]. 医学研究杂志,2010,39(8): [13] 刘鹏程. 中药制剂对消化性溃疡 QOUH 及 EGF TNFα 表达的影响 [J]. 中华中医药学刊,2013,31(9):

27 第 24 卷第 8 期第 594 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P594 Aug2016 doi: /j.issn x 肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜炎性因子的影响 李思聪 1, 李玉明 2 ( 1 湖南中医药大学研究生教育学院, 湖南长沙 ; 2 湖南省肿瘤医院 / 中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院中医 / 中西医结合科, 湖南长沙 ) 摘要 :[ 目的 ] 探讨肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜相关炎性因子的影响 [ 方法 ] 以 X 线直线加速器给予实验大鼠全腹照射 (DT9.0Gy), 建立急性放射性肠炎大鼠模型 实验大鼠随机分成正常对照组 (NC) 模型对照组 (MC) 肠复康方低剂量治疗组 (CFKD-LG) 肠复康方中剂量治疗组 (CFKD-MG) 肠复康方高剂量治疗组 (CFKD-HG) 造模成功后连续 30d 灌胃, 期间观察对比大鼠精神状态 摄食进水 排便情况及体质量变化, 处死后取相应部位的小肠用 RT-PCR 方法检测黏膜上皮细胞中炎性因子 IL-1β IL-6 TNF-αmRNA 的表达 [ 结果 ] 造模成功后肠复康方低 中 高剂量组精神状态 饮食进水 排便情况较模型对照组好 ; 与模型对照组比较, 肠复康方低 中 高剂量组大鼠体质量显著增加, 肠复康方中剂量组效优 (P<0.01) 肠复康方低 中 高剂量组小肠黏膜的炎性因子 IL-1β IL-6 TNF-αmRNA 较模型对照组显著下调 (P<0.01) [ 结论 ] 肠复康方低 中 高剂量组通过下调小肠黏膜上皮细胞中炎性因子 IL-1β IL-6 TNF-αmRNA 的表达, 改善小肠黏膜的炎症反应, 促进急性放射性肠炎受损小肠黏膜的修复, 以中剂量效优 关键词 : 肠复康方 ; 放射性肠炎 ; 动物模型 ; 炎性因子中图分类号 :R285.5 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) Changfukangdecoction simpactongeneralconditionandthe expressionofinflammatoryfactorofsmalintestinalmucosa inratswithacuteradiationenteritis LISi-cong 1,LIYu-ming 2 ( 1 GraduateSchoolofEducation,HunanUniversityofChineseMedicine,Changsha410208,China; 2 DepartmentofTCM & IntegratedTraditionaland Western Medicine,HunanCancerHospitalandtheAfiliated CancerHospitalofXiangyaSchoolofMedicine,CentralSouthUniversity,Changsha410013,China) Correspondingauthor:LIYu-ming, liyuming@hnszlyẏcom Abstract:[Objective]ToexploretheefectofChangfukangdecoctionongeneralconditionandtheexpressionofinflammatoryfactorofsmalintestinalmucosainratswithacuteradiationenteritis.[Methods] Anabdominalirradiationinadoseof9.0GyX-rayoflinearacceleratorwasperformedonceonagroupof ratstoestablishamodelofacuteradiationenteritis.theexperimentalratswererandomlydividedintofive groups:normalcontrolgroup,modelcontrolgroup,changfukangdecoctionlow dosegroup,middledose groupandhighdosegrouṗ Afterthemodelwasestablished,alratsweregivencorrespondingtreatmentby gavageonceadayfor30days.inthemeantime,thementalstate,dietaryintake,defecationandbodymass changesofalratswereobservedandcompared.aftertheratsweresacrificed,correspondingintestinaltissuesweretakenfordetectingtheexpressionofinflammatoryrelatedfactorsil-1β, IL-6andTNF-αmRNA intheintestinalmucosalepithelialcelsbyrt-pcr.[results]afterthemodelwasestablished,medication 收稿日期 : 基金项目 : 湖南省中医药管理局一般课题 (No:201177) 作者简介 : 李思聪, 女, 硕士, 研究方向 : 中西医结合防治恶性肿瘤通讯作者 : 李玉明, liyuming@hnszlyẏcom

28 李思聪, 等. 肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜炎性因子的影响 595 groups mentalstate,dietaryintakeanddefecation werebeterthan modelcontrolgroup.compared with modelcontrolgroup,medicationgroupshadsignificantincreaseinbodymass,typicalyinchangfukangdecoctionmiddledosegroup(p<0.01).treatmentwithlow,middleandhighdoseofchangfukangdecoction alsosignificantlydown-regulatedtheexpressionofil-1β, IL-6andTNF-αmRNAintheintestinalmucosal epithelialcelscomparedwiththatofmodelcontrolgroup(p<0.01).[conclusion]thelow,middleand highdosegroupofchangfukangdecoctionimprovedthesmalintestinalmucosainflammationandpromotedrestorationoftheacuteradiationenteritisofsmalintestinalmucosadamagebydown-regulatingtheexpressionofil-1β, IL-6andTNF-αmRNAintheintestinalmucosalepithelialcels.Theefectisespecialy beterinmiddledosegrouṗ Keywords:Changfukangdecoction;radiationenteritis;animalmodel;inflammatoryfactor 放射性肠炎是盆腹腔或腹膜后恶性肿瘤放疗后 的主要并发症, 可累计小肠 结肠 直肠, 其中小肠损 害为高发区, 且预后较大肠预后差 目前临床上西 医主要采用手术 营养支持疗法及对症处理, 远期疗 效并不理想 我科经验方肠复康方在改善放射性肠 炎临床症状上疗效满意 [1-2] 我们通过观察低 中 高剂量组肠复康方药液对直线加速器诱导的急性放 射性肠炎的大鼠一般情况及小肠黏膜 IL-1β IL-6 TNF-αmRNA 表达的影响, 探讨肠复康方对急性放 射性肠炎的作用机制 1 材料与方法 1.1 实验仪器及试剂 1 仪器 :X 线直线加速器 ( 美国 ElektaSynergy) 摇床 ( 其林贝尔公司,TS-92) 台式冷冻离心机 (Eppendorf 公司,TGL-18 R) 荧光定量 PCR 仪 (Thermo 公司,PIKO REAL 96) 荧光 PCR 板 (Thermo 公司,SPL0960) 恒温水浴箱 ( 河南金博公 司,HH-S2) 旋涡混合器 ( 其林贝尔公司,QL-901) 电泳仪 (Bio-rad 公司, ) 水平琼脂糖电泳 槽 ( 北京六一公司,DYCP-31DN) 2 试剂 :3% 戊 巴比妥钠 ( 德国 merck 公司 ) 逆转录试剂盒 (Fermentas 公司 ) EDTA(Sigma 公司 ) Tris(Sigma 公 司 ) Trizol(Invitrogen 公司 ) Taq 酶 (Genstar 公 司 ) 引物 ( 南京金斯瑞 ) DEPC(Sigma 公司 ) DL2000DNA Marker(Genstar 公司 ) dntp(genstar 公司 ) E.B.(Sigma 公司 ) SYBGREEN PCR Mix Mix(ABI 公司 ) 1.2 实验动物 健康成年 SPF 级 SD 大鼠 48 只,6~8 周龄, 体 重为 (220±20)g( 由湖南省肿瘤医院动物实验中心 提供, 动物使用许可证编号 :SYXK ( 湘 ) ) 在湖南省肿瘤医院动物实验中心 SPF 条件 下饲养, 室温 20~25, 相对湿度 40%~70%, 持续 12h 明暗交替日光灯照明, 以无菌消毒处理的标准 鼠食饲养 饮水, 自由活动, 经过适应性喂养 7d, 造 模后继续实验性喂养 30d 1.3 实验造模 SD 大鼠适应性饲养 7d 后, 除空白对照组, 其 余组均禁食 12~14h, 称重, 用 3% 戊巴比妥钠 (30mg/kg 体重 ) 腹腔麻醉后, 固定在手术板上, 于 长沙市中心医院放疗科以 X 线直线加速器给予大 鼠全腹部照射 ( 从剑突至耻骨联合 ), 照射面积 8.5cm 7.5cm, 源皮距 100cm, 腹部给予 1cm 组织 补偿, 照射剂量 9Gy, 放射剂量率为 300cGy/min, 照 射时间约 3min 1.4 动物分组 大鼠随机分为 5 组 : 正常对照组 (NC,n=8) 为 未经腹部照射的正常大鼠 ; 模型对照组 (MC,n= 10) 肠复康方低剂量治疗组 (CFKD-LG,n=10) 肠 复康方中剂量治疗组 (CFKD-MG,n=10) 肠复康 方高剂量治疗组 (CFKD-HG,n=10) 均需经腹部照 [3] 射 参照杨永滨等急性放射性肠炎造模成功的判 定标准 : 受照射大鼠 1d 内出现吐黄或大便性状改 变, 如黏液便 便血等放射性损伤症状, 或用目测八 联试纸检测大便呈潜血强阳性 (+++) 1.5 药物及给药方式 肠复康方由银花 15g 连翘 15g 败酱草 10g 白头翁 15g 苦参 10g 黄柏 10g 苍术 10g 苡仁 15g 金钱草 10g 车前草 10g 仙鹤草 10g 乌药 10g 白术 10g 谷芽 15g 川牛膝 10g 组成 ( 均采 用由湖南省中医药研究院中药房提供的中药饮片 ) 参考 标准汤剂论 [4] 制备肠复康方低 中 高剂量药 液, 分别含生药 :1.575g/ml 3.15g/ml 6.3g/ml, 每次制备 7d 的量置于 4 冰箱中备用 [5] 于判定 [5] 造模成功后, 参考李晟等方法开始灌胃 : 灌胃体积 均为 10ml/kg, 低 中 高剂量组剂量换算后分别含 生药 15.75g/(kg d) 31.50g/(kg d) 63.00g/ (kg d), 其中低剂量为临床等效剂量 ; 模型对照 组 正常对照组, 同时予等量生理盐水灌胃 :1 次 /d, 连续 30d

29 596 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 1.6 观察大鼠一般情况及体质量变化每天观察造模成功后灌胃期间大鼠精神状态 摄食进水 排便情况变化 ; 以电子秤称取各组大鼠体质量,7d/ 次 1.7 采用 RT-PCR 法检测指标取大鼠回盲部近端中段回肠 3cm, 沿纵轴剪开, 冷生理盐水洗净,-80 冰箱冷冻保存 根据 RNA 提取液试剂盒说明书进行总 RNA 提取 Trizol 提取细胞总 RNA 将经液氮冷冻后的肠道组织剪切成小块, 放入普通玻璃匀浆器内, 加入 1mlTrizol 充分吹打, 混匀后室温裂解 3min, 加入 0.2 倍体积的三氯甲烷, 振荡, 室温静置 3~ 5min, 然后 12000rpm 离心 15min, 取上层液相加入等体积的异丙醇,-20 静置 20min 后 12000rpm 低温离心 15min, 去上清, 在沉淀中加入 1ml75% 乙醇 ( 无菌 DEPC 处理水配制 ), 仪器震荡, 再次 12000rpm 低温离心 5 min, 去上清, 空气干燥 5~ 10min, 加入 40μl 无菌 DEPC 处理水溶解沉淀, 用紫外分光光度计测定样本浓度, 吸取 2μlRNA 溶液于石英比色皿中, 用无酶水定容至 100μl, 在 260nm 与 280nm 处测其吸光度值, 并计算其浓度跟纯度 (RNA 浓度 =A260 稀释倍数 40) RNA 的琼脂糖凝胶电泳, 在凝胶成像系统下观察, 见图 1 照射后各组标本于 18s 28s 附近均出现条带, 亮度不一, 质量很好 1:NC;2:MC;3:CFKD-LG;4:CFKD-MG;5:CFKD-HG 图 1 各组 RNA 的琼脂糖凝胶电泳带 RNA 反转录以组织总 mrna 为模板, 涡旋振荡混匀, 短暂离心, 使管壁上的溶液收集到管底, 置入逆转录试剂盒中 42 孵育 30~50 min, 85 孵育 5 min, 反应结束后, 短暂离心, 置于冰上冷却, 逆转录为 cdna, 作为 PCR 的模板 RT-PCR 引物序列采用 SYBR 法, 在 NCBI 上搜索目的基因的序列, 运用 primer5 软件设计引物, 见表 1 表 1 引物序列 基因 5 -( 正向 ) 引物 3 -( 反向 ) 引物 长度 actin CATCCTGCGTCTGGACCTGG TAATGTCACGCACGATTTCC 107bp IL-1β CGTTCCCATTAGACAACTGCA GGTATAGATTCTTTCCTTTGAGGC 206bp IL-6 CCAGTTGCCTTCTTGGGACT GTCTGTTGTGGGTGGTATCCTCTGT 100bp TNF-α TGAGGACCAAGGAGGAAAGTATGT CAGCAGGTGTCGTTGTTCAGG 228bp 首先对引物特异性和退火温度进行条件优化 然后制备反应体系 :2XSYBGREEN PCR Master Mix15 μl, 反转录产物 1 μl, 上游 / 下游引物各 0.5μl,PCR 水 13μl 总体反应体积 30μl 然后 12000rpm 离心将反应混合物甩至管底, 根据反应条件进行 PCR: 预变性 :95,10 min; 变性 :95, 10s; 退火 / 延伸 :59,50s; 熔解曲线采集 :60~ 95, 进行 40 个循环 结果计算 : 通过相对定量以 2 -ΔΔCt 表示样本中目的基因相对表达量 1.8 统计学处理用 SPSS19.0 统计软件进行处理, 不同组间的差异比较采用 ANOVA 单因素方差分析, 所有数据以 x±s 表示, 以 P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 大鼠一般情况及体质量变化造模成功后, 第 4~7 天模型对照组大鼠一般情 况最差, 大部分有黏液便或稀烂便, 精神较差, 甚至出现不进食及不饮水, 给药组较模型对照组程度较轻 ;4 组体质量比较差异无统计学意义 (P>0.05) 7~10d 各组大鼠的精神状态 饮食进水逐渐恢复, 模型对照组仍有少量黏液便或稀烂便, 给药组已基本与正常对照组无异 ; 给药组大鼠体质量较模型对照组明显升高, 差异有统计学意义 (P<0.05), 其中低剂量组与高剂量组之间比较差异无统计学意义, 中剂量组与低剂量组之间比较差异有统计学意义 整个实验过程中, 模型对照组因造模时麻醉过量死亡 1 只大鼠 ; 造模成功后灌胃期间, 肠复康方药液中剂量组死亡 1 只 ( 死亡原因分析 : 灌胃针刺破大鼠食管致组织间隙感染, 不排除肺气肿可能 ) 各组大鼠的体重变化情况见表 2

30 597 李思聪,等. 肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜炎性因子的影响 表 2 对比各组大鼠的体质量 第1天 分组 第8天 NC ± ±8. 11 CFKD-LG ± ±6. 15 MC CFKD-MG CFKD-HG ± ± ±3. 57 第 15 天 ± ) 1) ± ) ± ) 与 NC 组比较, P<0.01;与 MC 组比较, P<0.05 1) 2) 2.2 大鼠小肠黏膜IL 1β mrna 变化表达 应用 RT-PCR 方 法 检 测 各 组 小 肠 组 织 IL 1β mrna 表达,扩 增 曲 线 见 图 2 比 较 各 组 间 IL 1β mrna 表达 量,差 异 有 统 计 学 意 义 ( F= , P<0.0001) 模型组IL 1β mrna 表达明显增高, 其他各组与之比较,差异有 统 计 学 意 义( P<0.01), ± ± ) ± ) ± ) 2) 第 22 天 第 29 天 ± ± ± ± ± ± ± ± ) x ±s g, ± ± ± P<0.0001) 模型组 IL 6 mrna 表 达 明 显 增 高, 其他各组与之比较,差异有 统 计 学 意 义( P<0.01), 提示小肠黏膜 受 放 射 线 刺 激 后 发 生 了 IL 6 mrna 表达明显升高,经 过 肠 复 康 方 治 疗 后 低 中 高 剂 量 组均出 现 了 IL6 mrna 表 达 降 低,其 中 低 剂 量 组 与高剂量组之间比 较 差 异 无 统 计 学 意 义,中 剂 量 组 提示小肠黏膜受放射线刺激后发生了 IL 1β mrna 与低剂量组之间比较差异有统计学意义 说明肠复 组均出现了IL 1β mrna 表 达 降 低,其 中 低 剂 量 组 的表达,以中剂量组效优,见表 4 表达明显升高,经 过 肠 复 康 方 治 疗 后 低 中 高 剂 量 与高剂量组之间比 较 差 异 无 统 计 学 意 义,中 剂 量 组 康方能下调急 性 放 射 性 肠 炎 小 肠 黏 膜 IL 6 mrna 与低剂量组之间比较差异有统计学意义 说明肠复 康方能下调急性放射性肠炎小肠黏膜 IL 1β mrna 的表达,以中剂量组效优,见表 3 图 3 IL 6 的 RT-PCR 扩增曲线 表 4 各组大鼠小肠黏膜的IL6mRNA 相对表达量 x ±s 表 3 各组大鼠小肠黏膜的IL 1β mrna 相对表达量 x ±s IL 1β mrna 分组 大鼠/只 NC ± CFKD-LG ± CFKD-HG 10 MC CFKD-MG 9 大鼠/只 NC ± CFKD-LG ± CFKD-HG ) ± MC CFKD-MG ± ) 2) ± ) 1) 2) 与 MC 组比 较, P<0.01;与 CFKD-LG 组 比 较, P< 大鼠小肠黏膜IL 6mRNA 变化表达 应用 RT-PCR 方 法 检 测 各 组 肠 道 组 织 IL 6 mrna 表达,扩 增 曲 线 见 图 3 比 较 各 组 间 IL 6 ( mrna 表达 量,差 异 有 统 计 学 意 义 F= , IL 6mRNA 分组 图 2 IL 1β的 RT-PCR 扩增曲线 ± ) ± )) ± ) 1) 2) 与 MC 组比 较, P<0.01;与 CFKD-LG 组 比 较, P< 大鼠小肠黏膜 TNF αmrna 变化表达 应用 RT-PCR 方 法 检 测 各 组 肠 道 组 织 TNF α mrna 表达,扩增曲线见图 4 比较各组间 TNF α mrna 表达 量,差 异 有 统 计 学 意 义 ( F= , P<0.0001) 模 型 组 TNF α mrna 表 达 明 显 增 高,其 他 各 组 与 之 比 较,差 异 有 统 计 学 意 义 ( P< 0.01),提示小肠黏膜受放射线刺激后发生了TNF α 表达明显升高, 经过肠复康 方 治 疗 后 低 中 mrna

31 598 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 高剂量组均出现了 TNF-α mrna 表达降低, 其中低剂量组与高剂量组之间比较差异无统计学意义, 中剂量组与低剂量组之间比较差异有统计学意义 说明肠复康方能下调急性放射性肠炎小肠黏膜 TNF-αmRNA 的表达, 以中剂量组效优, 见表 5 图 4 TNF-αmRNA 的 RT-PCR 扩增曲线表 5 各组大鼠小肠黏膜的 TNF-αmRNA 相对表达量 x±s 分组大鼠 / 只 TNF-αmRNA NC ± MC ± CFKD-LG ± ) CFKD-MG ± )2) CFKD-HG ± ) 与 MC 组比较, 1) P<0.01; 与 CFKD-LG 组比较, 2) P< 讨论放射治疗已成为盆 腹腔或腹膜后恶性肿瘤综合治疗的重要组成部分, 被越来越多的患者接受, 伴随其生存情况改善所带来的肠道并发症逐年上升, 由 1990 年的 0.5%~17% 到 2007 年上升至 5% ~ 20% [6],2010 年 65%~75% 患者放疗后引起的肠道 [7] 组织损伤成为制约其疗效的主要因素 据统计, 有 10%~21% 经过盆腹腔放疗的患者发生放射性 [8] 肠炎, 可累计小肠 结肠 直肠 小肠的放射损伤预后较大肠差, 而末端回肠因相对固定并邻近盆腔 [9] 照射野, 所以是小肠损害高发区, 且肠黏膜基底部 [10] 的隐窝细胞和黏膜上皮细胞表现最为明显 我科王云启教授根据多年临床经验, 对治疗放射性肠炎颇有造诣, 认为放射性肠炎病变部位在大 小肠, 与脾胃关系密切相关 ; 致病的主因是放射线 热毒 的损伤侵犯 ; 病机总属本虚标实, 虚实夹杂, 气机失调为其根本 放射性肠炎临床以湿热蕴结证型多见, 治疗原则为急则治其标, 以清利湿热调理气机为主, 拟定肠复康方以清利下焦湿热 理气行滞 肠复康方由银花 连翘 败酱草 白头翁 苦参 黄柏 苍术 苡仁 金钱草 车前草 仙鹤草 乌药 白术 谷 芽 川牛膝等组成 其中以银花 连翘 败酱草 白头 翁为君, 共奏清热解毒之功 以 治痈要药 银花与 疮家圣药 相须为用, 消散肠痈 ; 败酱草为治疗肠痈 腹痛的首选, 而白头翁善清胃肠湿热, 两者均归大肠 经, 以排痈凉血 燥湿止痢 苦参 黄柏 苍术 金钱 草 车前草为臣, 达清利下焦湿热之效 黄柏主入下 焦, 清热燥湿 ; 苦参 苍术主入脾胃, 既内燥脾湿以杜 生湿之源, 又能外散湿邪, 相合为用, 洁源清流, 湿热 同除 ; 金钱草 车前草共用, 为利小便以实大便 苡 仁 白术 谷芽 乌药 仙鹤草为佐 苡仁 白术合用 以健脾运湿, 加强清利湿热之功 ; 谷芽和胃消食, 乌 药温通止痛, 一起可防止苦寒之品败坏胃气 ; 仙鹤草 性平, 味涩收敛, 加强止血止痢, 兼可补虚, 尤适于血 痢及久病泻痢 川牛膝为使药, 苦善降泄, 能导热下 泄, 引血下行 诸药合用, 组方严谨 配伍合理, 在经 方基础上继承创新 现代药理研究表明银花中的绿原酸 异绿原酸 为主要抗菌成分, 连翘中三萜皂苷 连翘酚及其挥发 油, 均具有广谱抗菌 解热抗炎等作用 白头翁 败 酱草不但具有抑菌抗炎等作用, 还可以镇静 镇痛 另外苦参 黄柏 苍术 仙鹤草也均有抗炎抑菌的作 用, 仙鹤草还可以通过改善微循环, 减轻黏膜炎症, 加速黏膜修复 [11] 本实验依据韩磊等对照用不同剂量全腹照 射剂量后大鼠的肠黏膜损伤情况结果, 选用 9.0Gy 造出适合临床急性放射性肠炎肠黏膜屏障损伤防治 研究的急性放射性肠炎动物模型 既往实验研究证 实了多种炎性因子参与是放射性肠炎形成的重要机 制 [12], 其中与放射性肠炎密切相关的炎性因子有 IL-1β IL-6 TNF-a 等 [13] 本实验旨在通过动物实 验探究肠复康方对急性放射性肠炎大鼠小肠黏膜炎 性因子的影响 本实验结果显示, 肠复康方能够改善急性放射 性肠炎大鼠的黏液便或稀烂便 精神状态 饮食进 水 体重变化等一般情况, 这种作用与药物的剂量有 关, 剂量过低时疗效一般, 达到中剂量时疗效增强, 但再增加剂量疗效又随之降低 肠复康方低剂量为 临床等效剂量, 低 中 高剂量比例为 1 2 4, 高剂 量组大鼠的一般情况及体质量变化不如中剂量组, 参考文献 [14] 考虑与剂量过高, 浓度过高, 大鼠肠道 吸收达到饱和, 使药物不能充分发挥作用有关, 但具 体机制尚不明确, 有待进一步研究探讨 有研究表明 IL-1β IL-6 TNF-a 作为急性炎性 因子在辐射损伤后短时间内较为活跃, 其中 IL-1β TNF-α 更为显著, 而且 IL-1β TNF-α 有可能与辐射 损伤介导内毒素的释放有关 [15] 另有研究表明, 减

32 李思聪, 等. 肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜炎性因子的影响 599 少这三者对局部组织的刺激, 可显著降低慢性炎症 的风险 [16] TNF-α 作为一种促炎因子可由辐射诱 发肠黏膜巨噬细胞等分泌, 通过激活肠组织中 NFkB MAPK 信号通路, 影响细胞的转录调控 [17], 启 动肠道内炎症反应, 使细胞水肿, 渗出, 黏膜溃烂 坏 死 脱落, 机械屏障功能受损 ; 还可加强单核巨噬细 胞的吞噬功能, 诱导前列腺素的合成增加, 加重炎 症 IL-1β 能够通过自分泌和旁分泌刺激其他的细 胞分泌产生炎性因子和炎症递质, 促进趋化中性粒 细胞等炎性细胞进入肠道病变部位, 促进血管内皮 - 白细胞黏附分子表达, 引起一系列组织破坏和肠道 炎症反应 [18] IL-6 可作为炎性细胞因子参与放射 [19] [20] 对正常组织引起的炎性损伤反应 Ao 等研 究指出,IL-6 是放疗后急性炎症反应的调节因子, 在放疗后数小时其数量可显著升高, 并加速急性炎 症反应, 同时会刺激成纤维细胞增殖, 引起纤维化 IL-1 IL-6 对 TNF 的生物学作用有明显的增强作 用, 可能与增加细胞 TNF 受体的表达有关 本实 验从细胞分子学水平用 RT-PCR 方法检测证实肠 复康方可显著下调急性放射性肠炎大鼠小肠黏膜上 皮细胞中的炎性因子 IL-1β IL-6 TNF-αmRNA 的 表达, 结合大鼠一般情况结果, 表明可降低小肠黏膜 的炎症反应, 促进急性放射性肠炎受损肠黏膜的修 复, 以中剂量组效优 有望为肠复康方治疗放射性 肠炎提供重要理论依据和参考价值, 值得进一步临 床推广 参考文献 [1] 王云启, 李玉明, 王希. 肠复康方治疗放射性肠炎湿 热蕴结证临床观察 [J]. 湖南中医药大学学报,2014, 34(6): [2] 王云启, 王希, 李玉明. 肠复康方治疗宫颈癌放疗后 湿热蕴结下焦型放射性肠炎 32 例临床观察 [J]. 中医 药导报,2014,20(9): [3] 杨永滨, 赵占学, 刘元昀, 等. 扶正活血清热方预防大 鼠急性放射性肠炎机制分析 [J]. 中国实验方剂学杂 志,2014,20(13): [4] 魏刚. 标准汤剂论 [J]. 中国中医药信息杂志,1998, 5(4):6-8. [5] 李晟, 陈晓阳, 邹志, 等. 加味厚朴温中汤对泄泻 湿阻证大鼠胃肠道 P 物质和白细胞介素 2 表达的影响 [J]. 中国中西医结合消化杂志,2009,17(5): [6] LEIPER K,MORRIS A I.Treatmentof Radiation [7] WILLIAMSJP,BROWNSL,GEORGESGE,etal. Animalmodelsfor medicalcountermeasurestoradiationexposure[j].radres,2010,173:557. [8] 殷茜, 周航, 曾继泽, 等. 盆腔肿瘤放疗致放射性肠炎的临床观察 [J]. 中国老年学杂志,2011,31(15): [9] 李宁. 放射性肠炎 [J]. 中国实用外科杂志,2001,21 (12): [10] 马辉, 丁建华, 张生彬, 等. 凉血愈肠汤灌胃对放射性肠炎模型大鼠肠上皮细胞的增殖调节作用 [J]. 中华实验外科杂志,2013,30(2):396. [11] 韩磊, 单信芝, 刘芝军, 等. 腹部辐射诱发大鼠肠黏膜损伤模型的建立 [J]. 青岛大学医学院学报,2011, 47(4): [12]MAKKIK,FROGUELP,WOLOWCZUKI.Adipose Tissuein ObesitȳRelated Inflammation and Insulin Resistance:Cels,Cytokines,andChemokines[J].ISR Ninflammation,2013,2013: [13]GONGP,XU X,SHIJ,etal.Phosphorylationofmitogenandstress-activatedproteinkinase-1inastrocytic inflammation:apossibleroleininhibitingproductionof inflammatorycytokines[j].plosone,2013,8:e [14] 于淼, 焦拥政, 仝小林, 等. 中药复方实验研究量效关系的进展与思考 [J]. 中医杂志,2011,25(17): [15]KIM K,MCBRIDE W H.Modifyingradiationdamage [J].CurrDrugTargets,2010,11:1352. [16]TOWARDR,MONTANDONS,WALTON G,etal. Efectofprebioticsonthehuman gut microbiotaof elderlypersons[j].gutmicrobes,2012,3:57. [17]XIAF,WANGC,JINY,etal.LuteolinProtectsHU- VECsfrom TNF-alpha-induced OxidativeStressand Inflammation viaits Efectsonthe Nox4/ROS-NFkappaB and MAPK Pathways [J].J Atheroscler Thromb,2014,21: [18]MULAYSR,KULKAMIOP,RUPANAGUDIKV, etal.calcium oxalatecrystalsinducerenalinflammationbynlrp3-mediatedil-lbetasecretion[j].jclin Invest,2013,123: [19] 王文闻. 放射对小肠黏膜上皮细胞 IL-2 和 IL-6 分泌的影响 [J]. 实用癌症杂志,2013,28(4):335. [20]AO X,ZHAO L,DAVIS M A,etal,Radiationproducesdiferentialchangesincytokineprofilesinradiationlungfibrosissensitiveandresistantmice[J].HematolOncol,2009,2:512. Proctitis[J].ClinOncol,2007,19:

33 第 24 卷第 8 期第 600 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P600 Aug2016 doi: /j.issn x 奥美拉唑治疗小儿胃食管反流性哮喘疗效观察及对肺功能 炎性因子及免疫功能的影响 林志刚, 潘 慧, 林忠响 ( 永康市第一人民医院小儿科, 浙江永康 ) 摘要 :[ 目的 ] 探讨奥美拉唑治疗小儿胃食管反流性哮喘疗效及对肺功能 炎性因子 免疫功能的影响 [ 方法 ] 入组胃食管反流性哮喘患儿 86 例依据随机数字表法随机分为观察组 43 例与对照组 43 例 2 组均采用常规处理, 对照组采用必可酮气雾剂治疗, 观察组在对照组基础上结合奥美拉唑治疗 2 组疗程均为 8 周 [ 结果 ]2 组患儿胃食管反流症状和哮喘症状评分治疗后明显减少 (P<0.05); 观察组患儿胃食管反流症状和哮喘症状评分治疗后低于对照组 (P<0.05);2 组 FEV1 PEF 治疗后明显增加 (P<0.05);2 组 FEV1 PEF 治疗后高于对照组 (P< 0.05);2 组患儿 IL-5 治疗后明显降低 (P<0.05),IL-10 治疗后明显增加 (P<0.05); 观察组患儿 IL-5 治疗后低于对照组 (P<0.05),IL-10 高于对照组 (P<0.05);2 组患儿 CD3 + CD4 + CD4 + /CD8 + 治疗后明显增加 (P<0.05), CD8 + 治疗后明显降低 (P<0.05); 观察组患儿 CD3 + CD4 + 治疗后高于对照组 (P<0.05),CD8 + 治疗后低于对照组 (P<0.05);2 组均未见严重药物不良反应 [ 结论 ] 奥美拉唑治疗小儿胃食管反流性哮喘疗效显著, 可明显改善患儿肺功能 微炎症状态 免疫功能, 改善具有重要研究价值 关键词 : 奥美拉唑 ; 小儿胃食管反流性哮喘 ; 疗效 ; 肺功能 ; 免疫功能中图分类号 :R 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) Curativeeffectofomeprazoleinthetreatmentofchildrenwithgastroesophageal refluxasthmaanditseffectonlungfunction,inflammatoryfactorsand immunefunction LINZhi-gang,PAN Hui,LINZhonḡxiang (DepartmentofPaediatrics,TheFirstPeople shospitalofyongkang,yongkang321300,china) Correspondingauthor:LINZhiḡang, @qq.com Abstract:[Objective]Toinvestigatetheefectofomeprazoleinthetreatmentofgastroesophagealrefluxasthmainchildrenandtheefectonlungfunction,inflammatoryfactorsandimmunefunction.[Methods]86childrenwithgastroesophagealrefluxwererandomlydividedintoobservationgroup(43cases)and controlgroup(43cases).afterthetwogroupsweretreatedwithconventionaltreatment,thecontrolgroup wastreatedwithbecotidespray,whiletheobservationgroupwastreatedwithomeprazoleonthebasisof thecontrolgrouṗ Thecourseoftreatmentwas8 weeksintwogroups.[results]twogroupsofchildren withgastroesophagealrefluxsymptomsandasthmasymptomsscoreaftertreatmentwassignificantlyreduced(p<0.05);observationgroupofchildrenwithgastroesophagealrefluxsymptomsandasthmasymptomsscoreaftertreatmentwaslowerthanthecontrolgroup(p<0.05);aftertreatment,twogroupsof FEV1andPEFweresignificantlyincreased(P<0.05);thetwogroupsofFEV1andPEFaftertreatment werehigherthanthoseinthecontrolgroup(p<0.05);aftertreatment,thetwogroups IL-5weresignificantlydecreased(P<0.05),IL-10wassignificantlyincreased(P<0.05);IL-5oftheobservationgroupaftertreatmentwaslowerthanthecontrolgroup(P<0.05),whileIL-10washigherthanthecontrolgroup (P<0.05);CD3 +,CD4 +,CD4 + /CD8 + aftertreatmentofthetwogroupsofchildrensignificantlyincreased 收稿日期 : 作者简介 : 林志刚, 男, 本科, 副主任医师 通讯作者 : 林志刚, @qq.com

34 林志刚, 等. 奥美拉唑治疗小儿胃食管反流性哮喘疗效观察及对肺功能 炎性因子及免疫功能的影响 601 (P<0.05),CD8 + aftertreatmentsignificantlydecreased(p<0.05);cd3 +,CD4 + aftertreatmentofobservationgroupwashigherthanthecontrolgroup(p<0.05),cd8 + aftertreatmentwaslowerthanthecontrolgroup(p<0.05);noseriousadversedrugreactionswerefoundinthetwogroups.[conclusion]the curativeefectofomeprazoleinthetreatmentofchildren withgastroesophagealrefluxasthmaissignificant.itcanobviouslyimprovethepulmonaryfunction,microinflammatorystate,immunefunction,andit hasimportantresearchvalue. Keywords:omeprazole;gastroesophagealrefluxasthmainchildren;eficacy;pulmonaryfunction;immunefunction 胃食管反流主要是指胃内容物反流入食管甚至口咽部, 是儿科常见的一种上消化道动力障碍性疾病, 与小儿反复发作性哮喘 支气管炎及肺炎等密切 [1-3] 相关 近年来临床上对小儿哮喘发作与胃食管 [4] 反流研究越来越受到临床医师的重视 故而针对小儿胃食管反流性哮喘采取积极有效地治疗方法尤为重要 本研究笔者旨在分析奥美拉唑治疗小儿胃食管反流性哮喘疗效及对肺功能和免疫功能的影响, 提供一定的临床指导意义, 现报告如下 1 资料与方法 1.1 一般资料选自 2012 年 4 月 ~2015 年 4 月我院收治的胃食管反流性哮喘患儿 86 例, 均依据 诸福棠实用儿科学 [5] 中相关诊断标准 所有患儿均表现为夜间哮喘发作频繁, 且伴上腹痛 反酸 恶心呕吐等症状 依据随机数字表法随机分为观察组 43 例与对照组 43 例 观察组中, 男 24 例, 女 19 例 ; 年龄 3~14 岁, 平均 (6.84±1.62) 岁 ; 病程 1~7 年, 平均 (3.48±0.92) 年 对照组中男 25 例, 女 18 例 ; 年龄 3~13 岁, 平均 (6.41±1.57) 岁 ; 病程 2~8 年, 平均 (3.79±0.87) 年 2 组患儿一般资料比较差异无统计学意义 (P>0.05), 具有可比性 1.2 入组标准及排除标准入组标准 :1 符合小儿胃食管反流性哮喘诊断标准者 ;2 年龄 3~14 岁 ;3 签订知情同意书者 ; 4 均已经医院伦理委员会批准者 排除标准 :1 不符合上述入组标准者 ;2 存在肾 肺 肝等功能异常者 ;3 过敏体质患儿 1.3 治疗方法 2 组患儿均于入院后给予常规抗感染 平喘等治疗 对照组 : 在常规基础上常规吸入必可酮气雾剂 100μg/ 次, 每日 3 次, 用药 2 周后减少用药剂量为每次 50μg; 观察组在常规和对照组基础上口服奥美拉唑 0.3 mg/(kg 次 ), 每日 2 次 2 组疗程均为 8 周 1.4 观察指标 1 观察 2 组患儿胃食管反流症状评分和支气管 哮喘症状评分评价疗效 胃食管反流症状评分标准 : 以患儿胃肠道症状如上腹痛 反酸 恶心呕吐等症状消失为 1 分, 以患儿胃肠道症状偶有发作为 2 分, 以患儿胃肠道症状好转为 3 分, 以患儿胃肠道症状缓解不明显为 4 分 ; 支气管哮喘症状评分标准 : 以患儿白天和夜晚均无任何症状为 0 分, 以夜晚患儿由于哮喘相关症状醒来 1 次或白天患儿短暂时间有哮喘相关症状为 1 分, 以患儿夜间由于哮喘相关症状醒来 2~3 次或白天有 2~3 次以上短暂时间出现症状为 2 分, 以患儿夜间由于相关症状经常醒来或日间经常出现症状为 3 分 2 观察 2 组患儿肺功能指标水平治疗前后变化, 包括 1s 用力呼出量 (FEV1) 呼吸峰流速 (PEF) 3 观察 2 组患儿血清炎性因子水平治疗前后变化, 包括白介素 -5(IL-5) 白介素 -10(IL-10), 分别于治疗前后采集外周静脉血 3 ml, 离心分离血清, 于 -20 下保存待测 4 观察 2 组患儿免疫功能指标水平治疗前后变化, 包括 CD3 + CD4 + CD4 + /CD8 +, 于治疗前后分别采集患者外周静脉血 3 ml, 以密度梯度离心法分离细胞处理, 采用美国 BD 公司生产的流式细胞仪测定 5 观察 2 组患儿不良反应发生情况 1.5 统计学处理运用统计学软件 SPSS22.0 对数据进行分析, 采用 χ 2 检验计数资料, 采用配对 t 检验组内计量资料 独立样本 t 检验组间计量资料, 以 P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 组患儿胃食管反流症状和哮喘症状评分比较 2 组患儿胃食管反流症状和哮喘症状评分治疗前比较差异无统计学意义 (P>0.05);2 组患儿胃食管反流症状和哮喘症状评分治疗后明显减少 (P< 0.05); 观察组患儿胃食管反流症状和哮喘症状评分治疗后低于对照组 (P<0.05) 见表 组患儿肺功能指标水平变化比较 2 组肺功能指标 FEV1 PEF 治疗前比较无统计学意义 (P>0.05);2 组 FEV1 PEF 治疗后明显增加 (P<0.05); 观察组 FEV1 PEF 治疗后高于对

35 602 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 照组 (P<0.05) 见表 组患儿血清炎性因子水平变化比较 2 组患儿血清炎性因子指标 IL-5 和 IL-10 治疗前比较差异无统计学意义 (P>0.05);2 组患儿 IL- 5 治疗后明显降低 (P<0.05),IL-10 治疗后明显增加 (P<0.05); 观察组患儿 IL-5 治疗后低于对照组 (P<0.05),IL-10 高于对照组 (P<0.05) 见表 组患儿免疫功能指标水平变化比较 2 组患儿免疫功能指标 CD3 + CD4 + CD8 + CD4 + /CD8 + 治疗前比较差异无统计学意义 (P> 0.05);2 组患儿 CD3 + CD4 + CD4 + /CD8 + 治疗后明显增加 (P<0.05),CD8 + 治疗后明显降低 (P< 0.05); 观察组患儿 CD3 + CD4 + 治疗后高于对照组 (P<0.05),CD8 + 治疗后低于对照组 (P<0.05) 见表 不良反应 2 组均未见严重药物不良反应 表 1 2 组患儿胃食管反流症状和哮喘症状评分比较 分, x±s 组别 例数 治疗前 胃食管反流症状评分 治疗后 治疗前 哮喘症状评分 治疗后 观察组 ± ±0.31 1)2) 2.58± ±0.25 1)2) 对照组 ± ±0.52 1) 2.64± ±0.39 1) 与同组治疗前比较, 1) P<0.05; 与对照组比较, 2) P<0.05 表 2 2 组患儿肺功能指标水平变化比较 L, x±s 组别 例数 治疗前 FEV1 治疗后 治疗前 PEF 治疗后 观察组 ± ±0.46 1)2) 64.39± ±8.31 1)2) 对照组 ± ±0.45 1) 66.17± ±7.68 1) 与同组治疗前比较, 1) P<0.05; 与对照组比较, 2) P<0.05 表 3 2 组患儿血清炎性因子水平变化比较 pg/ml, x±s 组别 例数 治疗前 IL-5 治疗后 治疗前 IL-10 治疗后 观察组 ± ±4.89 1)2) 15.89± ±4.57 1)2) 对照组 ± ±5.13 1) 16.54± ±4.25 1) 与同组治疗前比较, 1) P<0.05; 与对照组比较, 2) P<0.05 表 4 2 组患儿免疫功能指标水平变化比较 x±s 组别 治疗前 CD3 + /% 治疗后 治疗前 CD4 + /% 治疗后 治疗前 CD8 + /% 治疗后 治疗前 CD4 + /CD8 + 治疗后 观察组 57.82± ±3.87 1)2) 31.41± ±2.65 1)2) 30.64± ±2.34 1)2) 1.03± ±0.49 1)2) 对照组 59.14± ±3.61 1) 31.89± ±2.98 1) 30.41± ±2.45 1) 1.05± ±0.51 1) 与同组治疗前比较, 1) P<0.05; 与对照组比较, 2) P< 讨论胃食管反流主要是指因全身或局部因素致使食管下端括约肌功能不全, 以及胃内容物流入食管而产生的一种上消化道功能紊乱性综合征 临床研究报道胃食管反流是诱发和加重哮喘, 致使哮喘难以 [6-7] 控制的因素之一 胃食管反流诱发加重哮喘的 [8-10] 可能机制主要包括以下几方面 :1 反流物刺激食管黏膜上的迷走神经受体, 继发支气管痉挛 ;2 反流物误吸入支气管, 直接刺激致使支气管痉挛 认为这 2 种机制均于胃酸反流相关 奥美拉唑系质子

36 林志刚, 等. 奥美拉唑治疗小儿胃食管反流性哮喘疗效观察及对肺功能 炎性因子及免疫功能的影响 603 泵抑制剂, 该药物能够抑制 W + -K + -ATP 酶活性, 阻断胃酸分泌缓解, 故而可达到最大抑酸效果, 并且 [11] 还可迅速改善胃食管反流症状 ; 此外, 奥美拉唑能够促胃肠动力作用, 还可刺激胃平滑肌细胞的黏膜下神经或胃动素受体, 内源性胃动素的释放, 增加食管下括约肌压力, 促进胃排空, 控制胃食管反流发 [12-13] 生, 故而控制胃食管反流相关哮喘的发作 本文研究结果显示,2 组患儿胃食管反流症状和哮喘症状评分治疗后明显减少, 观察组患儿胃食管反流症状和哮喘症状评分治疗后低于对照组, 故而奥美拉唑可通过降低胃食管反流症状和哮喘症状提高治疗疗效 以往临床研究仅局限于小儿胃食管反流性哮喘治疗疗效观察 而笔者在以往研究基础上进行了进一步深入研究, 包括对小儿胃食管反流性哮喘肺功能 微炎症状态及免疫功能方面的研究 本研究结果显示, 奥美拉唑通过增加胃食管反流性哮喘患儿 FEV1 PEF 水平变化, 从而改善患儿肺功能 ; 奥美拉唑通过降低 IL-5 水平 提高 IL-10 水平, 从而改善患儿微炎症状态 ; 奥美拉唑通过提高 CD3 + CD4 + CD4 + /CD8 +, 降低 CD8 +, 改善患儿免疫功能 综上所述, 奥美拉唑治疗小儿胃食管反流性哮喘疗效显著, 可明显改善患儿肺功能 微炎症状态 免疫功能, 改善具有重要研究价值 虽目前临床越来越重视小儿胃食管反流性哮喘研究, 但相关治疗报道很少 故而笔者还需在后续研究中进一步深入研究 参考文献 [1] 白桂林, 韦祁山. 小儿胃食管反流的诊治研究进展 [2] 何平, 刘志峰, 李玫, 等.24 小时食管动态 ph- 阻抗联合监测评估小儿胃食管反流性咳嗽的临床特征 [J]. 中国实用儿科杂志,2014,15(8): [3] 王翠玲, 崔红, 杨丽君. 小儿胃食管反流病的诊断和治疗 [J]. 中国医刊,2013,48(3):4-7. [4] 杨青, 赵瑞斌. 法莫替丁治疗小儿胃食管反流性哮喘 55 例 [J]. 中国药业,2015,5(17): [5] 胡亚美, 江载芳. 诸福棠实用儿科学 [M].7 版. 北京 : 人民卫生出版社,2005: [6] 程智宏, 曾伟斌. 奥美拉唑和多潘立酮联合治疗以消化道外症状为主小儿胃食管反流病的临床观察 [J]. 国际医药卫生导报,2013,19(6): [7] 杨晓霞, 李忠义. 小儿胃食管反流病致哮喘 13 例误诊分析 [J]. 临床误诊误治,2011,12(8): [8] 张军利, 郭爱萍. 小儿胃食管反流病误诊误治 90 例临床讨论 [J]. 临床误诊误治,2012,25(6): [9] 曾韬. 必可酮气雾剂和法莫替丁治疗小儿胃食管返流性哮喘的临床观察 [J]. 医学理论与实践,2010,22 (11): [10] 杨德胜. 奥美拉唑和多潘立酮联合治疗小儿胃食管反流病的临床疗效观察 [J]. 现代诊断与治疗,2015,19 (5): [11] 庞军, 陈文燕, 贾玲. 奥美拉唑治疗儿童胃食管反流并发哮喘 19 例 [J]. 医学导报,2010,29(8): [12] 罗艳红, 游洁玉, 徐斌, 等. 奥美拉唑联合多潘立酮治疗以哮喘为首发症状的小儿胃食管反流病的临床观察 [J]. 实用预防医学,2009,16(1): [13] 周庆华, 邱其武. 奥美拉唑和必可酮气雾剂联合治疗小儿胃食管反流性哮喘 84 例 [J]. 世界华人消化杂志, 2013,14(5): [J]. 甘肃科技纵横,2015,44(10):20-22.

37 第 24 卷第 8 期第 604 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P604 Aug2016 研究报告 doi: /j.issn x 奥沙利铂对结直肠癌急慢性神经毒性的观察 林珍喜, 郭志军 ( 南京军区福州总医院第一附属医院药学科, 福建莆田 ) 摘要 :[ 目的 ] 观察并分析结直肠癌完全切除后奥沙利铂辅助化疗疗效及神经毒性 [ 方法 ] 选取 2014 年 1 月 ~ 2014 年 12 月我院肿瘤科接受结直肠癌手术完全切除的患者 100 例, 患者肿瘤分期为高危 I 期及高危 I 期, 接受奥沙利铂联合氟尿嘧啶辅助化疗, 对患者应用 2 种不同的 FOLFOX 方案进行治疗 研究前期主要采用 FOLFOX4 方案, 后期主要应用 mfolfox6 方案 参照美国癌症研究所常规毒性判定标准 (NCI-CTCAE3.0) 进行分级, 使用 NTX-12 自评量表对患者常见症状进行评分 [ 结果 ] 患者急性神经毒性共发生 49 例, 发生率 49.00%, 慢性神经毒性 84 例, 发生率 84.00% 60 岁患者慢性神经毒性发生率与发生程度较 <60 岁患者更高 ( χ 2 =4.645,P= 0.031),FOLFOX4 和 mfolfox6 方案, 后者较前者神经毒性发生率更高 NTX-12 自评未发现 60 岁患者较 < 60 岁患者评分提高更多, 但前者明显高于后者 [ 结论 ] 奥沙利铂治疗结直肠癌神经毒性发生率高, 但多数可在 12 个月内恢复 关键词 : 奥沙利铂 ; 神经毒性 ; 结直肠癌中图分类号 :R 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) Observationofoxaliplatinoncolorectalcancerwithacuteand chronicneurotoxicity LINZhen-xi,GUOZhi-jun (DepartmentofPharmacy,FirstAfiliatedHospitalofFuzhouGeneralHospital,Nanjing MilitaryRegion, Putian351100,China) Correspondingauthor:GUOZhi-jun, @qq.com Abstract:[Objective]Observeandanalyzeadjuvantchemotherapyandneurotoxicityofoxaliplatinafter colorectalcancerresection.[methods]select100casesunderwentcompletelyresectedsurgeryforcolorectal cancerinourhospitalfromjanuary2014todecember2014patientsseclectedwereunder,high-riskstage I andhigh-riskstage I,receivingadjuvantchemotherapy withoxaliplatinandfluorouracil.twodiferent FOLFOXregimenfortreatmentwereapplied.Intheearlystageofthestudy,theFOLFOX4schemeis used,andthemainapplicationofthemfolfox6schemeisusedduringthelateperiod.thestandard(nci- CTCAE)wasgradedaccordingtothestandardofroutinetoxicityintheAmericanCancerInstitute,NTX-12 isappliedtoscorecommonsymptom.[results]therewere49casesofacuteneurotoxicity,theincidence ratewas49%,84casesofchronicneurotoxicity,theincidenceratewas84%.thepatientsmorethanorequalto60yearsold,whosechronicneurotoxicityoccurredrateandoccurrencedegreeishigherthanthose ageisbelow60( χ 2 =4.645,P=0.031),accordingtoFOLFOX4andmFOLFOX6,thelaterneurotoxicity incidenceishigher.throughntx-12self-assessmentdidnotfindthatthescoreofthepatientsmorethan 60yearsthanitsofpatientsbelow60yearoldhaveincreasedmore,theformerisobviouslyhigherthanthe lateractualẏ [Conclusion]OxaliplatinNeurotoxicityintreatmentofcolorectalcancerhasahighincidence rate,butmostcanberecoveredwithin12months. Keywords:oxaliplatin;neurotoxicity;colorectalcancer 收稿日期 : 作者简介 : 林珍喜, 男, 本科, 药师, 主要从事医院药学工作 通讯作者 : 郭志军, @qq.com

38 林珍喜, 等. 奥沙利铂对结直肠癌急慢性神经毒性的观察 605 奥沙利铂是一种第 3 代的铂类化疗药物, 目前在临床治疗手术后辅助治疗中得到广泛的应用, 现已成为临床上治疗结直肠癌不可或缺的化疗药物, 奥沙利铂的应用在姑息化疗与辅助化疗中均有着良 [1-2] 好的治疗效果 奥沙利铂与卡铂 顺铂等化疗药物相比, 肠胃反应更小, 没有明显的肾毒性, 骨髓抑 [3] 制更轻 但是奥沙利铂具有明显的神经毒性, 会给患者治疗后的生活带来严重的影响, 重度情况可 [4-5] 以致残 因此在临床辅助化疗后加强对接受这一限制性神经毒性药物治疗患者的监控与随访具有极为重要的临床意义与价值 近年来, 随着临床上更大剂量的氟尿嘧啶的 mfolfox6 方案的广泛使 [6-7] 用, 对神经毒性的研究显得更为重要 本研究通过对 100 例结直肠癌完全切除患者接受奥沙利铂联合氟尿嘧啶辅助化疗的进行神经毒性相关的观察与随访, 现将结果报告如下 1 资料与方法 1.1 一般资料选取 2014 年 1 月 ~2014 年 12 月我院肿瘤科接受结直肠癌手术完全切除患者 100 例, 患者肿瘤分期为高危 Ⅱ 期及高危 Ⅲ 期, 并接受奥沙利铂联合氟尿嘧啶辅助化疗, 所有患者经手术后病理检查确认为腺癌 100 例患者中, 男 57 例, 女 43 例 ; 年龄 (58.2±13.5) 岁 ; 60 岁 44 例,<60 岁 56 例 ; 结肠癌 61 例, 直肠癌 39 例 ; 无淋巴结转移 21 例,1~3 枚淋巴结转移 52 例, 4 枚淋巴结转移 27 例 所有患者化疗前心肺肾肝等主要脏器功能基本正常, 未发现化疗禁忌证 辅助化疗结束后, 未进行进一步化疗, 并完成后续全部随访 本研究由我院医学伦理委员会批准通过并进行监督, 所有患者及家属对本研究研究内容及风险均表示知情并理解, 并签署知情同意书 1.2 方法因临床常用方法更新, 本研究中对患者采用 2 种不同的 FOLFOX 方案进行辅助化疗治疗 研究开始初期按照医院常用辅助化疗方案主要采用 FOLFOX4 方案 : 第 1 天, 奥沙利铂 85 mg/m 2,2~ 4h 静脉给药 ; 第 1~2 天, 亚叶酸钙 200mg/m 2,2h 静脉给药 ; 第 1~2 天, 氟尿嘧啶 400mg/m 2, 静脉推注 ; 第 1~2 天,600 mg/m 2,22h 持续泵入 ; 每 2 周 [8] 重复 研究后期主要应用 mfolfox6 方案 : 第 1 天, 奥沙利铂 85mg/m 2,2~4h 静脉给药 ; 第 1 天, 亚叶酸钙 400mg/m 2,2h 静脉给药 ; 第 1 天, 氟尿嘧啶 400mg/m 2, 静脉推注 ;2400 mg/m 2,46h 持续 [9] 泵入 ; 每 2 周重复 2 种方案治疗效果差异无统计学意义, 见表 1 表 1 患者一般资料比较例 治疗方案 例数 男 性别 女 年龄 / 岁 60 <60 淋巴转移 0 1~3 4 结肠 病变部位 直肠 FOLFOX mfolfox χ P 神经毒性的观察与评价 临床观察与评价奥沙利铂所导致的神经毒性主要累及外周神经纤维, 根据其在临床上的表 [10] 现可分为 2 类, 急性神经毒性和慢性神经毒性 急性神经毒性在用药后迅速发作, 遇冷可诱发且恶化, 感觉障碍, 末梢神经感觉异常, 肌肉痉挛等, 临床上具体表现为肢体末端麻木或感觉丧失, 肢体末端肌肉强直 痉挛, 口腔咽喉感觉丧失等 一般在给药 [11] 后数小时后出现相应症状, 数日后消失 慢性神经毒性一般多在使用奥沙利铂多周期后逐渐出现并呈现累及加重迟发的神经感觉障碍 神经损伤初期表现为肢体出现较轻感觉障碍, 随后逐渐出现感觉迟钝 精细分辨能力下降 精细动作能力下降等症 状, 严重时可出现严重的机体功能障碍影响患者日 [12] 常生活 根据美国癌症研究所制定的常规毒性判定标准 (NCI-CTCAE3.0), 结合奥沙利铂神经毒性的临床 [13] 症状进行分级 4 级 : 致残 ;3 级 : 感觉改变或异常妨碍日常生活 ;2 级 : 感觉改变或异常影响功能但不妨碍日常生活 ;1 级 : 深腱反射丧失或感觉异常但不影响功能 每次治疗周期后 2~3 天对患者进行神经毒性评价 NTX-12 自评量表使用 NTX-12 自评量 [14] 表对患者常见症状进行评分, 自评量表共计有 12 项内容, 包括手感知物体形状困难 周身乏力 手足遇冷疼痛 足痉挛疼痛 行走困难 关节肌肉疼痛 听

39 606 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 力下降 手痉挛疼痛 耳鸣 足麻木刺痛 手麻木刺痛 系纽扣鞋带困难 每项内容根据患者自身评价进行评分, 评分标准为 0 分 : 无 ;1 分 : 很少出现 ;2 分 : 有时出现 ;3 分 : 经常出现 ;4 分 : 频繁出现且表现严重 最终得分 0~48 分, 分数越低显示神经毒性越轻 患者在开始治疗前 治疗后 1 月 3 月 6 月 12 月 18 月进行 NTX-12 自评 1.4 统计学处理研究使用 SPSS19.0 进行数据处理分析, 计量资料表示为 x±s, 组间差异采用 t 检验, 计数资料用 % 表示, 组间差异采用 χ 2 检验, 以 P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2.1 总体情况患者急性神经毒性共发生 49 例, 其中多为 1~ 2 级, 其中肢体末端麻木或感觉丧失 33 例, 口腔咽喉感觉丧失 9 例, 肢体末端肌肉强直 痉挛 6 例, 遇冷可诱发且恶化 1 例 多数症状一周内逐渐消退 患者慢性神经毒性 84 例, 其中肢体出现较轻感觉障碍 28 例, 感觉迟钝 32 例, 精细分辨能力下降和精细动作能力下降 24 例 最终有 16 例患者出现 3 级毒 性 急性与慢性神经毒性间无相关性 将患者神经毒性与患者性别 年龄 淋巴转移 发生部位等一般资料进行比较, 结果显示 60 岁患者慢性神经毒性发生率与发生程度较 <60 岁患者更高, 差异有统计学意义 ( χ 2 =4.054,P=0.044) 其他临床资料与急性慢性神经毒性差异无统计学意义 本研究患者采用 FOLFOX4 和 mfolfox6 方案进行辅助化疗, 后者较前者神经毒性较后者发生里更高, 但差异无统计学意义 见表 NTX-12 自评与随访 100 例患者进行 NTX-12 自评, 所有患者得分范围 0~36, 以患者治疗前自评得分作为患者基础评分, 治疗后 3 个月 NTX-12 评分较基础评分平均提高 3.57 分, 治疗后 6 个月,NTX-12 评分较基础评分平均提高 6.98 分, 治疗后 12 个月 NTX-12 评分下降, 较基础评分平均提高 2.58 分, 治疗后 18 个月 NTX-12 评分继续下降, 较基础评分平均提高 1.57 分 结果未显示 NTX-12 自评得分与性别 淋巴结转移 发病部位 治疗方案有相关影响 同样也并未发现 60 岁患者较 <60 岁患者评分提高更多, 但前者明显高于后者, 见表 4 表 2 患者急性毒性比较 例 分级 男 性别 女 年龄 / 岁 60 <60 淋巴转移 0 1~3 4 结肠 病变部位 直肠 治疗方案 FOLFOX4 mfolfox6 1~2 级 级 χ P 表 3 患者慢性毒性比较例 分级 男 性别 女 年龄 / 岁 60 <60 淋巴转移 0 1~3 4 结肠 病变部位 直肠 FOLFOX4 治疗方案 mfolfox6 1~2 级 级 χ P 表 4 患者不同年龄 NTX-12 评分变化分, x±s 年龄 时间 / 月 ± ± ± ±1.73 < ± ± ± ±1.04 t P

40 林珍喜, 等. 奥沙利铂对结直肠癌急慢性神经毒性的观察 讨论奥沙利铂与顺铂 卡铂等化疗药物相比, 肠胃反 [15] 应更小, 没有明显的肾毒性, 骨髓抑制更轻 目前奥沙利铂联合氟尿嘧啶已经成为临床上手术完全切除结直肠癌后标准的辅助化疗方案, 临床反馈具有良好的疗效, 较高的安全性, 已得到广泛的认可 但是奥沙利铂具有明显的神经毒性, 会给患者治疗后的生活带来严重的影响, 重度情况可以致残 术后持续 6 个月奥沙利铂治疗以后奥沙利铂的神经毒性逐步积累, 对患者造成不可逆的神经损伤, 严重影 [16-17] 响患者日常生活 奥沙利铂所导致的神经毒性根据其在临床上的表现可分为 2 类, 急性神经毒性和慢性神经毒性 目前急性毒性作用被认为是一种急性离子通道病 [18-19] 变, 可引起外周感觉神经兴奋升高 慢性毒性作用的靶点可能是位于脊神经后根的神经节, 此部位感觉神经元丰富, 缺乏血脑屏障保护, 极易受到损伤, 并且损伤随着奥沙利铂的积累而加重, 具有明显 [20] 的累积效应 本研究结果显示,100 例患者中急性神经毒性共发生 49 例, 发生率 49.00%, 其中多为 1~2 级, 慢性神经毒性 84 例, 发生率 84.00%, 最终有 16 例患者出现 3 级毒性 患者神经毒性与患者性别 淋巴转移 发生部位等一般资料与急性慢性神经毒性差异无统计学意义, 60 岁患者慢性神经毒性发生率与发生程度较 <60 岁患者更高,FOLFOX4 和 mfolfox6 方案, 后者较前者神经毒性较后者发生率更高 NTX-12 自评未显示 NTX-12 自评得分与性别 淋巴结转移 发病部位 治疗方案有相关影响 60 岁患者明显高于 <60 岁患者 总之, 奥沙利铂相关神经毒性发生率高, 部分患者还很严重, 医生需要加强对患者的教育指导和门诊随访, 有效地将神经毒性带来的不良后果控制在有效范围内 参考文献 [1] 刘慧龙, 王莉, 贾佳, 等. 奥沙利铂治疗结直肠癌相关神经毒性的临床观察及随访 [J]. 中国肿瘤临床, 2013,13(12): [2] WU L,MAN C,WANG H,etal.PEGylated multiwaledcarbon nanotubesforencapsulation and sustainedreleaseofoxaliplatin.[j].pharmres,2013,30: [3] 骆曼, 冯觉平, 卜佳珺, 等. 黄芪注射液治疗奥沙利铂所致神经毒性的疗效观察 [J]. 湖北中医药大学学报,2012,14(3): [4] 郑林静. 奥沙利铂与顺铂联合 5- 氟尿嘧啶治疗结直肠癌疗效及安全性比较 [J]. 实用药物与临床,2012,15 (9): [5] ARGYRIOU A A,CAVALETTIG,BRIANIC,et al.clinicalpaternandassociationsofoxaliplatinacute neurotoxicity[j].cancer,2013,119: [6] MCQUADE R M,BORNSTEINJC,NURGALIK. Anti-Colorectal Cancer ChemotherapȳInduced Diarrhoea:CurrentTreatmentsandSide-Efects[J].IntJ Clin Med,2014,5: [7] 丁令池, 田思源, 陆俊国, 等. 希罗达联合奥沙利铂治疗老年晚期结直肠癌的临床观察 [J]. 肿瘤基础与临床,2012,25(5): [8] ARGYRIOU A A,GUIDO C,ANNA A,etal.Voltageḡatedsodiumchannelpolymorphismsplayapivotal roleinthedevelopmentofoxaliplatin-inducedperipheralneurotoxicity:resultsfromaprospectivemulticenter study[j].cancer,2013,119: [9] 黎昌国, 殷果, 朱土福, 等. 奥沙利铂联合亚叶酸钙 氟尿嘧啶治疗晚期结直肠癌的疗效观察 [J]. 中国当代医药,2012,19(16): [10] 彭杰, 唐清碧, 杜池, 等. 重组人血管内皮抑素联合 FoLFox4 方案治疗结直肠癌肝转移的临床观察 [J]. 西部医学,2012,24(7): [11] 朱眉, 张彦华, 高伟艳, 等. 奥沙利铂联合替吉奥治疗局部晚期或转移性结直肠癌的临床观察 [J]. 肿瘤研究与临床,2014,26(12): [12] ARGYRIOU A A,BRIANIC,CAVALETTIG,et al.advancedageandliabilitytooxaliplatin-inducedperipheralneuropathy:posthocanalysisofaprospective study[j].eurjneurol,2013,20: [13] 李西军, 赵春华. 奥沙利铂加卡培他滨经肝动脉化疗栓塞术治疗结直肠癌肝转移 [J]. 肿瘤基础与临床, 2015,28(1): [14] 曹顺金. 黄芪桂枝五物汤加味防治奥沙利铂所致外周神经毒性疗效观察 [J]. 光明中医,2013,28(1): [15]LOUPAKISF,CREMOLINIC,MASIG,etal.FOL- FOXIRIplusbevacizumab(bev)versusFOLFIRIplus bevasfirst-linetreatmentofmetastaticcolorectalcancer(mcrc):resultsofthephase IrandomizedTRIBE trial[j].jclinoncol,2013,31: [16] 王永领, 刘华强, 杨平, 等. 替吉奥联合奥沙利铂治疗晚期结直肠癌临床观察 [J]. 山东医药,2014,22 (19): [17] 缪继东, 蔡典琨. 钙镁合剂预防奥沙利铂相关神经毒性的随机对照研究 [J]. 现代预防医学,2012,39(18): [18]YEF,LIUZ,TAN A,etal.XRCC1andGSTP1polymorphismsandprognosisofoxaliplatin-basedchemotherapyincolorectalcancer:ameta-analysis[J].Cancer ChemothPharmacol,2013,71: ( 下转第 611 页 )

41 第 24 卷第 8 期第 608 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P608 Aug2016 doi: /j.issn x 基于数据挖掘的中药专利复方治疗幽门螺杆菌相关性胃病的用药规律分析 沈正泽 1, 古锐 2, 曾宪泉 1, 金梅 1 ( 1 重庆医科大学附属永川医院药剂科, 重庆 ; 2 成都中医药大学民族医药学院, 四川成都 ) 摘要 :[ 目的 ] 应用关联规则 聚类方法等数据挖掘技术分析治疗幽门螺杆菌 (Hp) 相关性胃病中药专利复方组方配伍规律 [ 方法 ] 检索治疗 Hp 相关性胃病中药专利复方, 排除中西药物合用的复方 对入选的中药专利复方进行术语规范化等处理, 抽取信息 建立 EXCEL 表, 应用数据分析软件 R-project 对数据进行关联规则分析, 应用网络分析软件 Cytoscape 进行聚类分析 [ 结果 ]64 首治疗 Hp 相关性胃病的中药专利复方中, 发现配伍频数较高的中药为甘草 黄连 蒲公英 延胡索 海螵蛸 白及 香附等 ; 常用的药对为干姜 - 甘草 高良姜 - 香附 乌药 - 香附 乳香 - 延胡索 瓦楞子 - 三七等 ; 强关联规则提示以甘草 黄连 黄芩 蒲公英 半夏等为核心药物 ; 聚类分析结果发现 3 个中药 功能模块, 其中 黄连 - 干姜 - 黄芩 - 大枣 - 人参 - 半夏 - 甘草 与半夏泻心汤一致 [ 结论 ] 运用数据挖掘技术可以发现治疗 Hp 相关性胃病的中药专利组方配伍规律, 为临床优化处方 提高疗效及抗 Hp 中药的开发提供参考依据 关键词 : 幽门螺杆菌 ; 中药专利复方 ; 关联规则 ; 聚类分析中图分类号 :R573.6 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) StudyonthepaternsofChinesemedicinepatentformulastreatinghelicobacter pyloriasociatedgastritisbasedondatamining SHENZhenḡze 1,GURui 2,ZENGXian-quan 1,JIN Mei 1 ( 1 DepartmentofPharmacy,Yongchuan HospitalofChongqing MedicalUniversity,Chongqing402160, China; 2 ColegeofEthnicMedicine,ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine,Chengdu611730, China) Correspondingauthor:JIN Mei, @qq.com Abstract:[Objective]ThepurposeofthisstudywastorevealthepaternsofChinesemedicinepatent formulasoftreatinghelicobacterpyloriassociatedgastritisbasedonassociationrulesandclusteringofdata miningtechnologẏ [Methods]ChinesemedicinepatentformulastreatingHelicobacterpyloriassociatedgastritiswereretrievedfrom CNKIand WanFangdatabases.Formulasmixedwithwestern medicinesandexternalformulaswereexcluded.terminologiesintheselectedformulaswerestandardized,andtheinformationwasextractedtoestablishexceltables.associationrulesanalysisandclusteringanalysiswereusedto revealthepaternsofchinesemedicinepatentformulasoftreating Helicobacterpyloriassociatedgastritis bysoftwarerandcytoscape.[results]theresultsshowedthatchinesemedicinalswithhigherfrequencyin 64formulaswereGlycyrrhizaradix,Coptischinensis,Taraxacum,Corydalisyanhusuo,cutlebone,Bletila rhizoma,cyperusrotundusetal.thecommonlyusedherbalpairsweregingerradix-glycyrrhizaradix,alpiniaoficinarum-cyperusrotundus,linderaaggregata-cyperusrotundus,olibanum-corydalisyanhusuo, ConchaArcae-Panaxnotoginsenġ StrongassociationrulesindicatethatGlycyrrhizaRadix,Coptischinensis,Scutelariaeradix,Taraxacum,PineliaternatarethecoredrugsinthetreatmentofHelicobacterpylori 收稿日期 : 基金项目 : 重医永川医院青年课题 (No:YJQN201428) 作者简介 : 沈正泽, 硕士, 主管药师, 研究方向 : 网络药理学 通讯作者 : 金 梅, @qq.com

42 沈正泽, 等. 基于数据挖掘的中药专利复方治疗幽门螺杆菌相关性胃病的用药规律分析 609 associatedgastritis.clusteranalysisfoundthree"function modules",suchas"coptischinensis-gingerradix-scutelariaeradix-jujube-panaxginsenḡpineliaternat-glycyrrhizaradix"areconsistentwithbanxiaxiexintanġ [Conclusion]Theuseofdata miningtechnologycanfindoutthepaternsofchinese medicine patentformulasforhelicobacterpyloriassociatedgastritis,whichcouldprovideevidenceforclinicalprescriptionmodificationandanti-helicobacterpylorichinesemedicineexplorinġ Keywords:helicobacterpylori;Chinesemedicinepatentformulas;associationrule;clusteranalysis 1983 年, 澳大利亚 Warren 和 Marshal 成功从胃炎和消化性溃疡患者胃黏膜标本中分离出幽门螺杆菌 (helicobacterpylori,hp), 现已证实 Hp 与慢性胃炎 消化性溃疡 胃黏膜相关淋巴组织 (MALT) 淋巴瘤等疾病密切相关 2015 年更新的 京都全球幽门螺杆菌胃炎共识报告 [1] 强烈推荐 Hp 阳性患者行根除 Hp 治疗, 西医一线治疗方案疗效明确但存在不良反应大 易产生耐药等问题 Hp 相关性胃病属于中医 胃脘痛 胃胀 痞满 等范 [2] 畴 中医药治疗这类疾病更注重整体的调节, 因此可避免不良反应 耐药等问题, 加上中药组方变化大, 可供选择的药物多, 有其独到优势 本文采取数据挖掘技术中关联规则 聚类分析方法对治疗 Hp 相关性胃病中药专利复方的配伍规律进行分析, 以期为中医药治疗 Hp 相关性胃病提供参考, 并为抗 Hp 药物的中药组方开发提供科学依据 1 资料与方法 1.1 资料来源万方数据库和中国知网中的专利数据库, 以 ( 幽门螺杆菌 or 幽门螺旋杆菌 )and( 中药 or 中成药 or 中草药 or 植物药 or 方剂 ) 为检索式检索治疗 Hp 相关性胃病的中药专利复方 1.2 纳入标准以治疗 Hp 相关性胃病为目的的内服中药专利复方 1.3 排除标准排除治疗 Hp 相关胃病的中西药物混合应用的复方 单味中药处方及中药提取物 1.4 数据规范及数据表建立抽取专利主权项中的复方内容, 建立 Excel 表 同时依据 中药学 [3] 中药大辞典 [4] 等规范专利复方中中药的名称, 如 乌贼骨 规范为 海螵蛸, 熟地 规范为 熟地黄, 麦冬 规范为 麦门冬 等 1.5 统计学处理应用开源的统计软件 R-project 进行频数分析及关联规则分析, 运用网络分析软件 Cytoscape 对专利处方中药物配伍关系形成的复杂网络进行聚类分析 2 结果 共有 64 首中药专利复方纳入分析, 所有复方中 共出现 219 味中药, 中药频数为 616, 平均每首复方 包含 9.6 味中药 2.1 治疗 Hp 相关性胃病中药专利复方用药频数 分析 治疗 Hp 相关性胃病中药专利复方中出现频数 较高的药物反映了组方配伍的主要思路, 其中频 数 >5 的中药见表 1, 提示在治疗 Hp 的中药专利复 方中, 所用中药主要分为如下几类 : 清热药, 主要有 黄连 黄芩 大黄 蒲公英 ; 补益药, 主要有党参 黄 芪 白术 白芍 甘草 ; 活血化瘀药, 丹参 延胡索 乳 香 ; 温里化湿理气药, 陈皮 厚朴 香附 佛手 木香 乌药 砂仁 半夏 高良姜 吴茱萸 ; 以及制酸止痛, 收 敛止血药, 瓦楞子 海螵蛸 白及 用药体现了治疗 Hp 相关性胃病的治则为清热化湿 补脾益气 理气 通滞 制酸止痛 收敛止血 表 1 治疗 Hp 的中药专利复方中用药频数 >5 的中药 药名 频次 药名 频次 药名 频次 药名 频次 甘草 26 白术 15 黄芪 10 瓦楞子 7 黄连 25 木香 15 吴茱萸 10 乌药 6 蒲公英 22 三七 14 黄芩 9 柴胡 6 延胡索 20 半夏 13 陈皮 8 佛手 6 海螵蛸 20 白芍 13 乳香 8 高良姜 6 白及 18 党参 11 厚朴 7 丹参 6 香附 17 砂仁 11 大黄 7 干姜 治疗 Hp 相关性胃病的中药专利复方关联规 则分析 从专利文献中抽取配伍数据, 创建数据表, 采用 开源软件 R-project 中的关联规则分析软件包 (arules) 进行分析, 可从数据中发现项集之间频繁 出现的模式 关联和相关性, 并形成的复杂配伍关系 网络图 图 1 为经该软件分析后生成的治疗 Hp 相 关胃病的中药专利复方配伍关联规则分析图, 文字 为组成方剂的中药, 带箭头的直线组成了药物间的

43 610 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 关联规则, 直线中间的黑色或灰色的圆点代表该关 联规则的强度, 圆点直径越大, 提示关联规则的强度 越大 MCODE 算法, 识别出配伍关系网络中存在的 社团结构 或 功能模块 表 4 为聚类分析得到 3 个药物配伍 社团 或 模块, 这些配伍 模块 具有相对固定而密切的联系 其中聚类 1 由白及 桂枝 枳壳组成, 具有消肿生肌, 行滞消积的作用, 见图 2 聚类 2 由黄连 干姜 黄芩 大枣 人参 半夏 甘草组成, 具有调和肝脾, 消痞散结的作用, 见图 3 聚类 3 由乌药 香附 高良姜 木香 孩儿茶 血竭 蜈蚣 百合组成, 具有理气解郁, 行气止痛的作用, 见图 4 表 2 治疗 Hp 相关性胃病中药专利复方中药对 的关联规则分析 序号 关联规则 支持度 置信度 1 { 干姜 }=>{ 甘草 } { 高良姜 }=>{ 香附 } { 乌药 }=>{ 香附 } { 乳香 }=>{ 延胡索 } { 瓦楞子 }=>{ 三七 } { 厚朴 }=>{ 蒲公英 } 图 1 治疗 Hp 相关性胃病中药专利复方药物间关联规则分析图 治疗 Hp 相关性胃病中药专利复方药对的关联规则分析药对是中医临床组方常用的配伍形式, 是方剂配伍规律研究的基础和重要切入点 表 2 为支持度 >0.09, 置信度 0.6 时且双向关联的药对分析结果 由表 2 分析得到的药对配伍可以发现在治疗 Hp 相关性胃病方面, 多用清热燥湿 益气复脉 行气止痛 和胃制酸的药对 治疗 Hp 相关性胃病中药专利中复方的强关联规则分析关联规则分析的主要目的是发现强关联规则 ( 即兴趣度高的关联规则 ), 通过设定支持度和置信度的较高阈值可以得到强关联规则 表 3 为支持度 >0.08, 置信度 0.8 时的强关联规则 分析 Hp 相关胃病中药专利复方中的强关联规则, 可见强关联规则的右件集中在甘草 黄连两味药上, 因此甘草 黄连是治疗 Hp 相关性胃病组方的核心中药 强关联规则左件的药物为清热燥湿类黄芩 黄连 蒲公英 半夏, 活血化瘀类延胡索, 温中理气类吴茱萸 2.3 治疗 Hp 相关性胃病中药专利复方的网络聚类分析治疗 Hp 相关性胃病专利复方中的各中药之间形成了一个复杂的配伍关系网络 网络聚类方法是一种不依赖于预先定义的分类的数据集的无监督学习, 可有效发现配伍关系网络中的配伍规律 本文聚类方法使用 Cytocape 的插件来实现, 具体算法为 7 { 大黄 }=>{ 甘草 } { 黄芪 }=>{ 白术 } { 黄芪 }=>{ 白及 } { 黄芪 }=>{ 甘草 } { 黄芩 }=>{ 半夏 } { 半夏 }=>{ 甘草 } { 半夏 }=>{ 黄连 } { 黄芩 }=>{ 甘草 } { 黄芩 }=>{ 黄连 } { 吴茱萸 }=>{ 延胡索 } { 吴茱萸 }=>{ 黄连 } { 党参 }=>{ 甘草 } { 白芍 }=>{ 海螵蛸 } { 白术 }=>{ 甘草 } 表 3 治疗 Hp 相关性胃病中药专利复方的 强关联规则分析 序号 关联规则 支持度 置信度 1 { 半夏, 黄芩 }=>{ 甘草 } { 黄芩, 甘草 }=>{ 半夏 } { 半夏, 黄芩 }=>{ 黄连 } { 半夏, 甘草 }=>{ 黄连 } { 半夏, 黄连 }=>{ 甘草 } { 黄芩, 甘草 }=>{ 黄连 } { 黄连, 黄芩 }=>{ 甘草 } { 延胡索, 吴茱萸 }=>{ 黄连 } { 延胡索, 蒲公英 }=>{ 甘草 } { 半夏, 黄芩, 甘草 }=>{ 黄连 } { 半夏, 黄连, 黄芩 }=>{ 甘草 } { 半夏, 黄连, 甘草 }=>{ 黄芩 } { 黄连, 黄芩, 甘草 }=>{ 半夏 }

44 沈正泽, 等. 基于数据挖掘的中药专利复方治疗幽门螺杆菌相关性胃病的用药规律分析 611 表 4 Hp 相关胃炎中药专利复方的网络聚类分析 聚类 分值 顶点 边数 药物 白及 桂枝 枳壳 黄连 干姜 黄芩 大枣 人参 半夏 甘草 乌药 香附 高良姜 木香 孩儿茶 血竭 蜈蚣 百合 图 2 聚类分析 1 3 讨论 现代医学认为胃炎的发生主要是攻击因素增强 与防御因素减弱所致,Hp 是主要的攻击因子之一 西医治疗策略是采用 质子泵抑制剂 + 两联抗菌药 物 + 铋剂的四联疗法 根除 Hp 中医学观点与西 医观点 攻击 防御失衡 类似, 提出了脾胃虚弱是 Hp 感染的病理基础, 在此基础上形成的气滞 血 瘀 郁热 湿阻等病理变化为 Hp 的附着 繁殖 致病 提供了客观条件 [5] 本文对治疗 Hp 相关性胃病中 药专利复方进行了频次和关联规则分析, 结果发现 主要采用清热燥湿 理气通滞 活血化瘀等药物 祛 邪,Hp 即为外邪致病因素, 同时采用补益药 扶 正, 提高机体防御机能 配伍关系网络的聚类分析结果显示了治疗 Hp 相关性胃病常用的中药 社团 或 功能模块, 反映 了复方中一些配伍关系相对密切 固定的中药联合, 临床运用可以提高疗效 如聚类 2 为 伤寒论 名方 半夏泻心汤, 能有效治疗 Hp 相关性胃病 [6] 参考文献 [1] SUGANO K,TACK J,KUIPERS EJ,etal.Kyoto globalconsensusreportonhelicobacterpylorigastritis [J].Gut,2015,64: [2] 陈秀珍. 中医药治疗儿童幽门螺杆菌相关性胃病研究 图 3 聚类分析 2 进展 [J]. 云南中医中药杂志,2014,35(7): [3] 高学敏. 中药学 [M]. 北京 : 中国中医药出版社,2002: [4] 南京中医药大学. 中药大辞典 [M]. 上海 : 上海科学技 术出版社,2006: [5] 谢春娥, 薛晓轩. 中医药治疗幽门螺杆菌相关性胃病的研究进展 [J]. 北京中医药大学学报,2013,20(1): [6] 邓天好, 谭达全, 龙承星, 等. 半夏泻心汤治疗幽门螺杆菌相关性胃病与消化性溃疡的 Meta 分析 [J]. 湖南中医杂志,2015,31(10): 图 4 聚类分析 3 ( 上接第 607 页 ) [19]GEWANDTERJS,MOHILESG,HECKLERCE, etal.aphase Irandomized,placebo-controledstudy oftopicalamitriptylineandketamineforchemotherapȳ inducedperipheralneuropathy(cipn):auniversityof RochesterCCOP studyof462cancersurvivors[j]. SupportCareCancer,2014,22: [20]ZEDAN A H,HANSEN TF,FEXSVENNINGSEN A,etal.Oxaliplatin-inducedneuropathyincolorectal cancer:many questions with few answers[j].clin ColorectalCancer,2014,13:73-80.

45 第 24 卷第 8 期第 612 页 2016 年 8 月 中国中西医结合消化杂志 ChinJIntegrTrad WestMedDig Vol24No8P612 Aug2016 doi: /j.issn x 牛奶蛋白诱导的婴儿过敏性直肠结肠炎 66 例临床分析 胡海燕, 赵青, 金翠, 高朝燕 ( 山西省儿童医院消化科, 山西太原 ) 摘要 :[ 目的 ] 探讨牛奶蛋白诱导的婴儿过敏性直肠结肠炎 (AP) 临床特征 有价值的诊断手段 有效的治疗及预后 [ 方法 ] 对 66 例牛奶蛋白诱导的 AP 患儿行末梢血常规及嗜酸细胞检测 便常规 + 潜血 便培养 生化全项 食物特异性 IgG 抗体检测 血清总 IgE 检测 电子结肠镜检查及肠黏膜病理组织学检查, 给予回避牛奶及奶制品等饮食干预, 症状缓解后行开放性激发试验确诊, 随访中每 3~6 个月逐步调整饮食配方直至耐受 [ 结果 ] 牛奶蛋白诱导的婴儿 AP 以腹泻 便血为主要症状, 末梢血嗜酸性粒细胞增高 (63.6%) 食物特异性 IgG 抗体检测显示牛奶阳性者达 80.3%[(38+15)/66], 电子结肠镜检查 100% 均显示阳性结果, 结肠镜下结肠及直肠黏膜表现多发充血 水肿 糜烂灶, 可见圆形红斑 多发浅小溃疡 出血斑及弥漫性颗粒样隆起, 黏膜改变多样, 可单一出现, 也有混合出现且在肠腔内弥漫分布 波及范围较广, 其病理结果显示黏膜慢性炎及嗜酸性粒细胞浸润 给予回避牛奶蛋白以氨基酸奶粉替代,1 周缓解率即有效率达 96.97%(64 例 ), 随访 1 年,63 例 (95.45%) 获得耐受 [ 结论 ] 牛奶蛋白诱导的婴儿 AP 以慢性反复便血 结肠及直肠黏膜弥漫性改变 嗜酸性粒细胞浸润 末梢血嗜酸细胞升高 牛奶特异性 IgG 阳性为特征, 在去除母乳和患儿食物中牛乳蛋白后 48~72h 内症状缓解则有助于诊断, 治疗以饮食干预最为有效并可逐步获得耐受, 预后较好 关键词 : 牛奶蛋白过敏 ; 直肠结肠炎 ; 婴儿中图分类号 :R 文献标志码 :A 文章编号 : X(2016) Clinicalanalysison66casesofinfantilealergicproctocolitis causedbymilkprotein HU Hai-yan,ZHAOQing,JINCui,GAOChao-yan (DepartmentofGastroenterology,ShanxiChildren shospital,taiyuan030013,china) Correspondingauthor:Hu Haiȳan, huhaiyanyu@sina.com Abstract:[Objective]Toinvestigatetheclinicalfeatures,diagnostic methods,efectivetreatmentand prognosisoftheinfantswithalergicproctocolitis(ap)inducedby milkprotein.[methods]detectblood routineandeosinophiliccelofcapilaryblood,stool(routineincludeoccultblood),stoolculture,biochemicalcompleteset,foodspecificiggantibody,serumtotalige,electroniccolonoscopy,histopathologicalexaminationofintestinalmucosaof66infantswithapinducedbymilkprotein.givingavoidanceofmilkand dairy products,the diagnosis of open provocation test was performed after the symptoms relieved.folowingupevery3to6 monthsgradualyadjustthedietformulauntiltolerance.[results]the mainsymptomsofinfantswithapinducedbymilkproteinarediarrhea,hematochezia.eosinophiliccelof capilarybloodincreased(63.6%).foodspecificiggantibodytestshowedthatthemilkpositivewasupto 80.3%[(38+15)/66].ThepositiveresultsofElectroniccolonoscopyis100%.Undercolonoscopy,the colorectalmucosashowedmultiplecongestion,edemaanderosion,visibleerythema,multiplesmalulcers, bleedingspotsanddifusegranularlikeuplift,thechangesofmucosaldiversity,canbeasingleappearance, therearealsomixedintheintestinalcavityfiledwithawiderangeofdistribution,thepathologicalresults showedthatchronicinflammationandeosinophilicinfiltrationofmucosa.toavoidmilkproteinandreplace theaminoacidformula,1weeksremissionratewas96.97%,(64cases).folowingupfor1years,63cases (95.45%)weretolerant.[Conclusion]ThefeaturesofinfantswithAPinducedbymilkproteinischronicre- 收稿日期 : 作者简介 : 胡海燕, 女, 本科, 副主任医师, 从事儿科消化的研究 通讯作者 : 胡海燕, huhaiyanyu@sina.com

46 胡海燕, 等. 牛奶蛋白诱导的婴儿过敏性直肠结肠炎 66 例临床分析 613 currenthemafecia,colonandrectumdifusechangesandeosinophilinfiltration,eosinophiliccelofcapilary bloodincreasedandmilkspecificiggpositive.afterremovalofmilkproteinfrombreastmilkandfood48-72h,thesymptomreliefishelpfulinthediagnosis.dietaryinterventionisthemostefectivetreatment,becauseofmakinginfantsgettolerancegradualyandprognosisbeter. Keywords:milkproteinalergy;proctocolitis;infant 婴儿过敏性直肠结肠炎 (alergicproctocolitis, AP) 是指以摄入外源性蛋白质后由非 IgE 免疫反应介导的直肠 结肠炎性改变为特征的疾病, 以便血 [1] 腹泻为主要表现 本研究对 66 例诊断为牛奶蛋白诱导的过敏性直肠结肠炎住院患儿的临床资料及诊治过程进行分析报告 1 资料与方法 1.1 一般资料选择 2011 年 1 月 ~2015 年 2 月我院住院的 66 例患儿, 其中男 36 例, 女 30 例, 年龄 1~12 个月, 平均 5.5 个月, 母乳喂养 23 例, 人工喂养 15 例, 混合喂养 28 例, 病程 2d~6 个月, 平均 36.5d, 发病年龄为生后 8d~10 个月,6 个月内发病者 42 例, 腹泻并便血 64 例, 单纯腹泻 2 例, 伴有湿疹 15 例, 家族中有哮喘等过敏史者 11 例 1.2 方法 辅助检查给予进行末梢血常规及嗜酸细胞检测 便常规 + 潜血 便培养 生化全项 食物特异性 IgG 抗体检测 ( 酶联免疫法定性检测指尖全血的包括牛奶等 14 种食物特异性 IgG 抗体 ) 血清总 IgE 检测 同时行腹部立卧位片及腹部彩超以首先除外肠套叠 肠梗阻 坏死性小肠结肠炎等外科急腹症, 进一步行电子结肠镜检查及肠黏膜病理组织学检查 (OlympasPCF-Q260 AI 电子结肠镜及活检钳, 低于 6 个月婴儿以 OlympasGIF-XP260 型电子胃镜替代肠镜操作 ; 采用单人操作短缩法进镜, 进镜达回盲部或根据患儿合作程度 肠道迂曲程度及清洁度到达病变消失部位即可退镜, 退镜时取病变部位黏膜 1~3 处送病理检查及嗜酸细胞计数 ) 治疗评估饮食干预治疗 : 对于 15 例人工喂养儿应用氨基酸配方奶粉喂养 ; 对于 23 例母乳喂养儿嘱母亲回避牛奶及奶制品, 其中 14 例停母乳并以氨基酸配方奶粉替代 5~7d 后恢复母乳,9 例不停母乳仅母亲回避饮食, 观察症状缓解 ; 对于 28 例混合喂养儿同样母亲回避饮食后, 氨基酸配方奶粉与母乳混合喂养, 停用所有普通配方奶制品 疗效判定 :1 实施治疗即饮食干预 2 周临床症状缓解 ( 大便次数减少, 肉眼血便消失 ) 或症状消失 ( 大便次数 <3 次 /d, 便潜血阴性 ) 视为有效 ;2 实施治疗 2 周临床症状无缓解视为无效 症状缓解后与患儿家 长沟通后行开放性激发试验, 本组 42 例实施均为阳性 症状缓解后出院随访, 每 3~6 个月逐步深度水解配方奶粉 适度水解奶粉 整蛋白配方奶过渡, 若症状复现则延长 1~3 个月现用奶粉再继续过渡直至耐受 由于家长依从性较差, 只有 6 例患儿行结肠镜复查 2 结果 2.1 实验室检测本组 66 例婴儿实验室检测结果见表 1 表 1 66 例 AP 患儿儿实验室检测结果例 (%) 项目例数血常规白细胞增高 18(27.3) 嗜酸性粒细胞增高 42(63.6) 轻度贫血 12(18.2) 中度贫血 6(9.1) 便常规潜血阳性 64(97.0) 脓球 (54.5) 生化谷丙转氨酶增高 3(4.5) 血清总 IgE 增高 3(4.5) 便培养阳性 6(9.1) * 食物变应原 IgG 牛奶 (57.6) 鸡蛋 (13.6) 小麦 + 6(9.1) 大豆 + 9(13.6) 大米 + 3(4.5) 多种食物 +( 均包括牛奶 ) 15(22.7) * 均为肠球菌 2.2 影像学腹部 X 片均未提示器质性病变 ; 腹部彩超结果显示 3 例部分肠壁水肿,3 例提示腹腔少量积液,60 例 (90.9%) 则没有显示异常

47 614 中国中西医结合消化杂志 2016 年 8 月第 24 卷第 8 期 2.3 电子结肠镜检查及黏膜组织病理学改变 100% 均显示阳性结果,结肠镜下结肠及直肠黏 膜表现多发充血 水肿 糜烂灶,可见圆形红斑 多发 浅小溃疡 出血斑及弥漫性颗粒样隆起等,黏膜改变 多样,可单一出现,也有混合出现且在肠腔内弥漫分 布 波及范围较广,其 中 53 例 累 及 左 半 结 肠 (直 肠 乙状结肠及降结肠), 10 例 累 及 至 横 结 肠, 3例累及 全结肠;其病 理 结 果 显 示 100% 存 在 黏 膜 慢 性 炎 及 嗜酸性 粒 细 胞 浸 润 (>6 个/HP60 例, 90.9% ) 见 图 1~4 2.4 疗效结果 饮食干预 2d 症 状 缓 解 者 22 例, 3d 症 状 缓 解 者 25 例, 1 周 缓 解 率 即 有 效 率 达 97.0% ( 64 例), 2 例母乳喂养儿无效,母亲回避饮食效果不显著,给予 氨基酸奶粉替代母乳 1 周内缓解 图 4 直肠黏膜充 血 水 肿,见 多 发 出 血 斑 及 糜 烂,多 发 小 溃疡形成 2.5 随访 本组患儿随访 1 年, 63 例( 95.5% )患 儿 可 以 耐 受 牛 奶 蛋 白, 3 例 患 儿 仍 以 深 度 水 解 配 方 奶 过 渡 肠镜下黏膜恢复较临床症状晚, 6 例 患 儿 复 查 肠 镜, 结果显示黏膜恢复需 3~5 个月,尤其黏膜表现为淋 巴滤泡增生者黏膜恢复时间更长 3 讨论 婴儿期食 物 过 敏 以 牛 奶 蛋 白 过 敏 ( c ow' s mi l k [] a l l e r CMA)最 为 常 见 2 有 50% ~60% 牛 奶 蛋 gy, 白过敏可累及消化道,其表现包括溢乳 呕吐 腹痛 腹泻 消化道出血,可 合 并 肠 道 蛋 白 丢 失 生 长 发 育 迟缓,这些症状可突然发生也可能逐渐加重,可能很 轻微,也可能 很 严 重 乃 至 危 及 生 命 [3] 食 物 蛋 白 介 图 1 乙状结肠黏膜淋巴滤泡增生,可见大小不等的 颗 粒 样隆起结节,顶端充血糜烂 导的 结 肠 直 肠 炎 ( f ood p r o t e i n i nduc ed p r o c t oco l i - t i s)发生的危险因素 有:免 疫 系 统 不 成 熟 小 肠 通 透 性改变和激活免疫 系 统 的 其 他 因 素,如 基 因 的 易 感 性和对食物(如鸡蛋 牛奶 鱼 坚果 大豆等)的特异 的敏感程度 [4] AP 可在生 后 第 1 周 甚 至 生 后 几 小 时 发 病,生 后 6 个月内发病最为常见,与本组病例 相 符( 6月龄 内发 病 者 占 63.6%, 42/66) 主 要 临 床 表 现 为 腹 泻 黏液便 血便(从 便 中 带 少 量 血 丝 到 以 较 多 血 为 主的大便) 患儿一般状况不受影响,个别患儿有贫 图 2 直肠黏膜充血 易脆,多发点片状出血斑及糜烂灶 血 低蛋白血 症 或 者 外 周 血 嗜 酸 细 胞 增 多 [4] 本 组 有 18 例( 27.3% )合并贫血且程度较轻,亦并不完全 由 AP 所致,还 存 在 生 理 性 贫 血 的 因 素 患 儿 生 长 发育良好,正是由于患儿临床表现的非特异性,故缺 乏有效的诊断方 法 CMA 诊 断 的 金 标 准 是 双 盲 安 慰剂对照口服 食 物 激 发 试 验 ( doub l e b l i ndp l a c ebo - [] con t r o l l edf oodcha l l enget e s t, DBPCF)5 婴 儿 由 于年龄因素,受心理影响因素不大,往往采取开放性 激发试验,但口服 牛 奶 激 发 试 验 费 时 费 力,家 长 与 患儿依从性较差,且存在一定风险,要求具有急救设 备的医院内由专 业 人 员 实 施 故 在 临 床 工 作 中,我 图 3 降结肠黏膜弥漫性水肿,见多发圆形红斑弥漫分布 们往往多采取食物 回 避,即 回 避 牛 奶 蛋 白 的 摄 入 后