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- 阀砾 张
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1 第 37 卷第 2 期西南大学学报 ( 自然科学版 ) 2015 年 2 月 Vo 37 No 2 JounofSouhwsUnvsy (NuScncEdon) Fb 2015 DOI: /j cnk xdzk 试管菊芋块茎诱导及萌发研究 苏承刚, 庞少萍, 李金华, 万发香, 潘宇 西南大学园艺园林学院 / 南方山地园艺学重点实验室, 重庆 摘要 : 以试管苗为材料, 比较不同外源激素浓度配比和不同蔗糖浓度对菊芋试管芋诱导的影响 ; 探讨不同培养基质对试管芋萌发的影响, 研究结果表明 : 菊芋试管芋诱导最佳培养基为 MS+BA0 5 mg/l+naa0 1 mg/l+ 蔗糖 60g/L, 试管芋形成率达 86%; 诱导得到的试管芋包衣处理后在菜园土与腐殖质基质中萌发率达到 92%. 关键词 : 菊芋 ; 试管芋诱导 ; 萌发率中图分类号 :S503 文献标志码 :A 文章编号 : (2015) 菊芋 (HnhusubosusL ) 又叫洋姜, 地姜, 为菊科向日葵属,1 年生草本植物. 其块茎可制作酱 菜, 泡菜, 口味香甜, 质地脆嫩, 深受人们喜爱 ; 从块茎中提取菊糖 (160g/kg), 广泛应用于食品. 医药行 [1] 业中, 医学研究证明 : 菊糖对人体具有良好的保健功能. 菊芋是未来生物能源, 通过发酵生产酒精, 替代 [2] 汽油. 菊芋地上部茎 叶产量高, 有丰富的营养, 是优良的牲畜饲料. 同时, 种植菊芋可防水土流失, 改 善环境, 所以, 发展菊芋资源, 造福人类, 促进经济发展具有积极的重要意义. 由于菊芋以块茎繁殖为主, 其生长周期长, 繁殖系数低, 不能满足菊芋规模化生产用种. 利用组织培养 技术虽然是菊芋种苗快繁的一个重要途径 [3-5], 但是因试管苗大规模移栽需要保护设施和大量人工, 且不 能有效保证较高移栽成活率, 成本高, 同时也受到栽培季节的影响. 因此, 探讨快速而又成本低廉的试管芋 技术是解决上述问题的有效方法, 菊芋试管芋诱导尚未有报道. 本研究在菊芋快繁体系建立的基础上, 利 用试管苗进行试管芋诱导和试管芋发芽试验, 旨在为菊芋优良品种快速繁殖和推广奠定技术基础. 1 材料与方法 1 1 材料 [5] 选自北碚地方品种菊芋, 利用潘宇等菊芋快繁方法, 繁殖菊芋试管苗. 1 2 方法 材料处理 利用培养基 MS+BA2 0mg/L+NAA0 01mg/L 繁殖菊芋试管苗, 当幼苗长到 2~3cm 高时分芽切 分, 用于以下试验 : 筛选激素培养基 : 将芽接种于 MS+ 蔗糖 40g/L 附加激素 BA 0 05~2 0 mg/l 和 NAA 0 1mg/L 不同配比培养基中 ( 表 1) 进行试管芋诱导, 筛选激素培养基 培养基添加蔗糖量筛选 : 在 试验筛选激素配比的基础上, 进行不同蔗糖浓度 (40~80g/L) 1 收稿日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金 ( ); 国家大学创新性实验计划 ( ); 中央高校基本业务费专项基金 (XDJK2013B007). 作者简介 : 苏承刚 (1964 ), 男, 重庆江津人, 高级实验师, 主要从事蔬菜生物技术的研究. 通信作者 : 潘宇, 博士, 副教授.
2 2 西南大学学报 ( 自然科学版 ) hp://xbbjb swu cn 第 37 卷 对试管芋诱导培养的影响试验 ( 表 2), 筛选培养基试验的蔗糖添加量. 以上试验每处理 3 瓶,3 次重复, 每瓶 10 株. 基本培养基是 MS, 琼脂 6 5g/L,pH5 8. 培养条件 : 室温 25+2, 光照为 2 支 40 W 日光灯 14h/d, 在培养过程中经常观察生长情况, 每 30d 记录 1 次 试管芋包衣处理试管芋从试管中取出, 用自来水冲洗掉残留的培养基, 晾干表面水汽后, 进行包衣处理. 包衣材料组成 : 粘土与草木灰比例为 3 1, 混合粉碎成 100 目以上的粉末待用. 粘结剂配制 :1/4MSGCC2+ 液体量的 1% 多菌灵 +0 5% 海藻酸钠充分溶解混匀装入喷雾器中. 包衣方法 : 将试管芋放入脸盆内, 边喷入粘接剂湿润试管芋表面, 边撒入配好的包衣材料, 筛动盆子, 使试管芋裹上包衣形成圆球状或椭圆状. 晾晒表面泛白, 即用塑料袋包装, 在 10 左右条件储藏 试管芋萌发试验随机抽取试管芋 50 粒分别播种于菜园土与腐殖质比例为 1 2 和珍珠岩中进行催芽, 湿度为 70% 左右, 室温 25+2, 光照为 2 支 40 W 日光灯 14h/d, 在培养过程中经常观察生长情况,30d 统计发芽数 未发芽数 腐烂数. 2 结果与分析 2 1 不同激素配比对试管芋诱导的影响将菊芋试管苗分别接种于 MS 附加不同激素配比的培养基中, 接种后约 15d, 在切口处均有少量愈伤组织形成, 并形成须根和根状茎, 但不同激素浓度配比对根生长形态的影响存在显著差异. 研究结果表明 ( 表 1):BA0 5mg/L 时,NAA 浓度在 0 1~2 0mg/L 范围内, 根的产生率都达到 100%, 但根状茎的形成有差异, 随着 NAA 浓度的增加根状茎产生率由低到高再降低, 较低 NAA 有利于芽的生长, 须根多, 不利于形成根状茎 ; 过高的 NAA( 大于 1 0mg/L) 时不利于根状茎的产生, 易愈伤化, 组织疏松. 根据根状茎的生长情况确定最优组合为 MS+BA0 5mg/L+NAA0 1mg/L, 根状茎达到最高即 59%. 表 1 不同激素配比对试管芋诱导的影响 激素 /(mg L -1 ) 接种数试管芋数诱导率 BA NAA / 个 / 个 /% 根 生 长 状 态 须根较多, 有根状茎产生, 且紧实 须根较多, 有根状茎产生, 且紧实 须根少, 根粗短, 较疏松, 粗而短 须根少, 粗短, 疏松, 粗而短 2 2 不同蔗糖量对菊芋试管芋的影响 将试验 1 的最佳培养激素基配方附加不同浓度的蔗糖培养基中进行试管芋诱导试验, 研究结果表明 ( 表 2): 接种后 25d 在切口处均有少量愈伤组织形成, 并形成须根和肥胖根, 随着培养时间延长, 有的形 成长条状, 有的为豌豆形状, 根色泽由白色变褐色, 并膨大紧实. 培养基添加不同蔗糖量, 对试管芋形成有 一定差异, 添加蔗糖量为 40g/L 和 70g/L 组合的成球率较低, 而添加蔗糖量为 60g/L 组合的成球率最 高, 达到 86%. 蔗糖添加量超过 70g/L 以上, 芽苗逐渐变黄枯死, 试管芋形成率降低. 根据成球率 球茎大 小 形成球茎快慢等因素分析, 菊芋试管芋诱导培养基中添加蔗糖量为 60g/L, 成球率达 86%( 图 1). 表 2 不同蔗糖量对菊芋试管芋膨大的影响 激素 /(mg L -1 ) 蔗糖量 接种数 试管芋数 试管芋产生率 BA NAA /(g L -1 ) / 块 / 块 /%
3 第2期 3 苏承刚,等:试管菊芋块茎诱导及萌发研究 图 1 试管芋形态 2 3 不同基质对试管芋萌发的效果 经过包衣处理的试管芋在 3 种培养基质中进行催芽试验,结果表明:试管芋在 3 种基质中的发芽率差 异不显著,在菜园土与腐殖质基质中发芽率略高于珍珠岩和菜园土基质,即达到 92,生产中可以将菜园 土与腐殖质基质作为菊芋试管芋催芽,取材方便,成本低,效果好(图 2) 表 3 不同基质对试管芋萌发的效果 培养基质 播种数/粒 发芽数/粒 菜园土与腐殖质 46 43 珍珠岩 菜园土 发芽率/ 92 45 90 86 3 讨论与结论 菊芋试管 芋 是 在 组 织 培 养 基 础 上,通 过 生 长 条件调控诱导形成,主要影响因素有外源激素 蔗 糖量 温度和光照 等 本 试 验 在 温 度 光 照 满 足 条 件下,主要对外源激素和蔗糖量的探讨,试验结果 表明:外 源 激 素 对 试 管 芋 诱 导 是 必 需 的,BA 和 NAA 浓 度 在 适 宜 范 围,对 试 管 芋 诱 导 有 效 果, /L 和低于 0 /L 都不利于试管 NAA 高于 1mg 1 mg 芋诱导;蔗糖对试管芋的 膨 大 有 促 进 作 用 其 适 宜 /L NAA0 /L, 培养基 是:MS BA0 5 mg 1 mg 图 2 试管芋萌发 /L,诱导率为 86 添加蔗糖量为 60g 试管芋包衣处理是为了防止试管芋腐烂,失去水分,增加营养,提高发芽率 试管芋发芽试验表明:菜 园土与腐殖质基质中发芽率略高于珍珠岩基质和菜园土,发芽率达 92,在生产中可以应用推广 参考文献: [ 1] 陈铭达,刘兆普 菊芋的加工及开发利用 [ J] 中国林副特产,2004,71( 4):35 36 [ 2] SZAMBELAN K,NOWAKJ,CHRAPKOWSKA KJ Comp s ono fb c ndy s E hno F mn ony d f omj us m A choktub spu c s[ J] Ac Sc Po T chno A mn,2004,3( 1):45 53 pndju
4 4 西南大学学报 ( 自然科学版 ) hp://xbbjb swu cn 第 37 卷 [3] 王利琳, 陈立明, 林文丽. 菊芋的组织培养及植株再生 [J]. 植物生理学通讯,1997,33(5):358. [4] 陆杰, 宋洋, 王珣, 等. 菊芋组织培养快繁技术的建立 [J]. 植物生理学通讯,2010,46(5): [5] 潘宇, 庞少萍, 邹卓, 等. 菊芋快速繁殖与植株再生研究 [J]. 西南大学学报 : 自然科学版,2013,35(12): ASudyonTubInduconndGmnonnvoof Jusm Achok(HnhusubosusLnn ) SU ChngGgng, PANGShoGpng, LIJnGhu, WAN FGxng, PAN Yu SchooofHocuundLndscpAchcu,SouhwsUnvsy/KyLbooyofHocuuScncfo SouhnMounnousRgons,MnsyofEducon,Chongqng400715,Chn Absc:RgndpnsofJusmchok(HnhusubosusLnn )wcuudnvoon mdwhdfncombnonsofxognoushomonsnddfnsucosconcnons.thopm mdumfoubnduconwsms + BA0 5mg/L + NAA0 1mg/L + sucos60g/l,whchgv ubnduconof86%.ofhcodubs,92% gmndsuccssfuynsubsofgg dnsondhumus. Kywods:Jusmchok(HnhusubosusLnn );ubnducon;gmnon 责任编辑 周仁惠
5 第 2 期 苏承刚, 等 : 试管菊芋块茎诱导及萌发研究 5
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