Schambeck SFD GmbH 德国珊贝克公司 ( 北京办事处 ) 凝胶液相色谱系统 示差检测器 RI 蒸发光散射检测器 ELSD 气相色谱 GC(SRI 中国服务中心 ) 标准型 8610 普及型 310 工业专用 410
在 HPLC 检测中, 最常用的检测器为紫外吸收检测器, 其他常见的检测器有二极管阵列检测器 (DAD) 荧光检测器 示差折光检测器 蒸发光散射检测器 电化学检测器和质谱检测器等 紫外 二极管阵列 荧光 电化学检测器为选择性检测器, 其响应值不仅与待测物的质量有关, 还与化合物的结构有关 ; 示差折光检测器和蒸发光散射检测器为通用型检测器, 对所有的化合物结构均有响应 ; 蒸发光散射检测器属质量型检测器, 对结构类似的化合物, 其响应值几乎仅与待测物的质量有关 ; 二极管阵列检测器可以同时记录待测物在规定波长范围内的吸收光谱, 故可用于待测物的光谱管制和色谱峰纯度的检查 紫外 荧光 电化学和示差折光检测器的响应值与待测物的质量呈线性关系, 但蒸发光散射检测器响应值与待测物的质量通常并不呈线性关系, 必要时需对响应值进行数学转换后进行计算 不同的检测器, 对流动相的要求不同 当采用紫外检测器时, 所用流动相应至少符合紫外 - 可见分光光度法项下对溶剂的要求 ; 采用低波长检测时, 还应考虑有机相中有机溶剂的截止使用波长, 并选用色谱级有机溶剂 有些样品并没有紫外吸收, 或者是不能找到一种合适的溶剂作为流动相, 而采用示差等检测器也有一定的限制 ( 比如不能进行梯度试验 ), 这时候就要考虑使用 ELSD 作为检测器了
为什么提倡低温型的 ELSD 技术? ELSD 按照蒸发管的蒸发温度可分为高温型和低温型两种, ZAM4000 属于低温型蒸发 在市场上, 低温型的蒸发光散射价格要比高温型更高一些, 为什么低温型蒸发光散射价格高却更受使用者青睐呢? 主要有以下原因 : 基线更为稳定, 灵敏度更高 蒸发温度越低, 则越有利于样 品组份的结晶, 这样样品组分经过蒸发管之后可得到较大的颗粒, 增强了散射光的强度, 提高了灵敏度 从样品的适用性这个角度来考虑, 低温蒸发可以检测到半挥发物质和热不稳定化合物 高温蒸发对一些化合物的分析非常不利, 在使用上有着一定的局限性, 诸如蛋白质等热不稳定的化合物可能会发生变性
喷雾汽化室 含有待测组分的流动相被雾化成气溶胶并在一个给定的角度喷射入旋转室, 在这个过程中, 大的和小的悬浮物质存在一个选择性, 大的悬浮物质沿着池壁流向废液出口而小的悬浮物质被可加热的载气携带并进行旋转运动, 悬浮物质被干燥 载气的量 可以通过流量控制器控制影响悬浮物质干燥时间的长短 这个最新的技术 ( 专利技术 ) 使得悬浮物质的处理最优化, 所以其工作可在相对低温模式下进行 气化单元的设计 : 如右图所示,ZAM4000 采用了专利性的螺旋管技术, 传统的蒸发光散射检测器内部设计多采用直型蒸发管, 尺寸也较短, ZAM4000 革命性的推出了螺旋蒸发管技术, 有效的增加了蒸发管的长度 理论界公认的观点认为蒸发管越长, 所需要蒸发温度就越低, 流动相被蒸发得也就越完全, 基线噪音
也就越低, 所以 ZAM4000 得到了更好的基线, 更高的灵敏度, 更低的检出限 另外 ZAM4000 采取了二次载气技术, 如右图, 红颜色的为载气, 而蓝颜色的流路为二次载气, 采取二次载气技术是为了使颗粒集中在检测池的正中, 这里是入射光最强的地方 这个设计非常重要, 首先能够提高检测的灵敏度 其次, 能够避免经常需要清洗检测池 因为如果没有二次载气, 从蒸发室出来的颗粒会向检测池的四壁扩散, 粘在检测池的壁上, 从而影响检测池的寿命 检测单元的设计 绝大部分的产品的光电检测系统为激光加光电二极管, 激光的光强度确实比较大, 用光电二极管即能产生足够检测的电流 但激光为单波长光, 如果某些含有发色基团的化合物的吸收波长为 670nm, 也就是说刚好与激光波长相同时, 就会发生光吸收, 这样这个样品就无法检测 另一方面, 科学证明多色光光源更能
使 ELSD 的响应因子接近于真正的质量型检测器, 而单色光源 ELSD 的响应因子会有较大的变化 而 ZAM4000 的光电检测系统为卤素 LED 灯 + 光电倍增管, 光电倍增管的实质为光电二极管 + 电子放大器, 能将很微弱的电流放大, 提高检测灵敏度 已普遍用于紫外 和荧光等液相检测器中, 是一种非常成熟的电子器件 如果非得与光电二极管相比, 那就是能更好的扩大电流, 提高灵敏度 卤素灯光强虽然会衰减, 但并不影响样品检测 如果是定量需要用标准品标定, 在一定的时间内, 可以认为卤素灯的光强是恒定的, 可忽略不计, 这一点与紫外检测器的氚灯是一致的, 众所周知, 氚灯光强也是有衰减的, 但没有人因此怀疑紫外检测器的结果是不准确的 操作模式 : ZAM4000 与传统的蒸发光散射检测器相比, 无需分流模式, 众所周知, 传统的 ELSD 都需要使用分流模式, 而 ZAM4000 则无需分流进样, 可同时检测含有半挥发性, 热不稳定和稳定组分的样品, 保证各组份的灵敏度和检测极限, 这种创新设计极大地拓宽了 ELSD 这种通用检测器的使用范围 所有操作都是通过前面板完成, 只需设置一个蒸发温度, 而无需进一步设置漂移管温度和雾化温度, 仪器自行默认 通常开机后, 只需要 5-10 分钟就可以进行检测了, 通常的蒸发温度 ( 针对水 ) 只需要 35 左右 而传统的高温型仪器需要将温度升高
到 100 以上才可以进行检品的检测 开机预热时间长, 温度还高, 影响了检出限和对微小含量杂质的灵敏度 因为 ZAM4000 采用的低温技术, 实验完成后就即可关机, 而高温型仪器等待关机需要一定的时间等温度降下来 另外特制玻璃设计的雾化室, 即便造成污染, 也可以很容易的清洗 主要参数 ZAM3000 ZAM4000 检测方法 高灵敏度光倍增管 雾化器材质 玻璃管, 易清洁, 耐所有普通溶剂 加热管材质 玻璃管, 易清洁, 耐所有普通溶剂 雾化管材质 玻璃管, 易清洁, 耐所有普通溶剂 光源 白质发光二极管 液体流速 0.5-3.0 ml/min 气体流速 0.5-3.5 L/min 1.2 L/min 记录输出 0 V - +1.2 V 数字接口 RS232 串口 数字输入 自动调零, 开始运行 ( 开气 /PMT 开关 )(TTL) 可使温度 35 C - 85 C, 室温 信号平滑 原始, 高, 中, 低 电源 110 V AC / 220 V AC 尺寸 18cm 宽 / 49cm 高 / 50cm 深 重量 24 kg
磷脂(Phospholipids) 的分析 组分 : 磷脂酰胆硷 / 溶血磷脂酰胆碱色谱柱 : Merck Lichrospher 100diol-5μ 125 x 4 mm 柱温 : 40 C 流动相 : 梯度洗脱 A: 正己烷 / 异丙醇 / 乙腈 / 三乙胺 B: 水 / 异丙醇 / 乙腈 / 三乙胺检测器设置 : 载气压 ( 氮气 ):1,0 bar 载气流速 :1,7 L/min 检测器温度 :50 C 糖(Sugar) 的分析 组分 : 木糖 / 葡萄糖 / 蔗糖 / 乳糖色谱柱 : HyperSil APS, 5μ, 250 x 4.6 mm, 室温流动相 : 乙腈 : 水 90:10, 流速 :1,0 ml/min 检测器设置 : 载气压 ( 氮气 ): 1,6 bar 载气流速 : 1,5 L/min 温度 : 50 C
有机酸(Organic Acids) 的分析 组分 : 苹果酸 / 琥珀酸 / 富马酸色谱柱 : Inertsil ODS-3, 5 μ m, 250 x 4,6 mm, 室温流动相 : 0,01% 三氟乙酸 in 90/10 甲醇 / 水. 检测器参数 : 载气压 :1,6 bar 载气流速 :1,5 L/min 检测器温度 :50 C 聚苯乙烯标准品(Polystyrene Standard Mixture) 的分析 组分 : 聚苯乙烯标准品混合物, 分子量分别为 18700 / 8300 / 2360 色谱柱 : Jordi Gel DVB, 500., 500 x 10 mm, 室温流动相 : 四氢呋喃, 流速 :1 ml/min. 检测器参数 : 载气压 ( 氮气 ):1,0 bar 载气流速 :1,1 L/min 检测器温度 :35 C
聚乙二醇(Polyethyleneglycol) 的分析 组分 : 聚乙二醇色谱柱 : OptoSil ODS-2, 5 μ m, 300 x 4 mm, 室温流动相 : 梯度洗脱 : A: 水 / 甲醇 80/20 B: 水 / 甲醇 50/50 流速 :1mL/min 检测器参数 : 载气压 ( 氮气 ):1,0 bar 流速 :1,5 L/min 柱温 : 50 C 多元醇(Higher Alcohols) 的分析 组分 : 多元醇色谱柱 : Inertsil ODS-3, 40 x 4 mm 流动相 : 水 / 乙腈 5/95 检测器参数 : 载气压 :1,0 bar 载气流速 1,5 L/min 检测器稳定 :50 C
尿素(Urea) 的分析 组分 : 尿素尿素 5mg/100 ml in 80/20 乙腈 / 水流动相 : 80/20 乙腈 / 水检测器参数 : 载气压 :1,0 bar, 载气流速 :1,1 L/min, 检测器温度 :25 C
在新修正的 2010 年版 中国药典 中规定了以下药品必须 使用 ELSD 作为检测器 : 产品名 检测化合物 页数 山银花 灰毡毛忍冬皂苷乙 ; 川续断皂苷乙一部 P29 马鞭草 熊果酸 一部 P49 巴戟天 耐斯糖 一部 P75 四季青 长梗冬青苷 一部 P93 瓜子金 瓜子金皂苷 一部 103 地肤子 地肤子皂苷 一部 P115 伊贝母 西贝素苷 一部 P132 知母 知母皂苷 一部 P198 桔梗 桔梗皂苷 一部 P260 益母草 盐酸水苏碱 一部 P273 浙贝母 贝母素甲 一部 P274 黄芪 黄芪甲苷 一部 P284 炙黄芪 黄芪甲苷 一部 P285 银杏叶 萜类内酯 ( 白果内酯 ) 一部 P297 商路 商路皂苷甲 一部 P305 湖北贝母 贝母素乙 一部 P327 路路通 路路通酸 一部 P335 酸枣仁 酸枣仁皂苷 一部 P344 薏苡仁 甘油三油酸酯 一部 P354 浙贝流浸膏 贝母素甲 一部 P390 银杏叶提取物 萜类内酯 ( 白果内酯 ) 一部 P393 乙肝宁颗粒 黄芪甲苷 一部 P403 三黄片 羟基积雪草苷 一部 P456 牛黄消炎片 人工牛黄 ( 胆酸 ) 一部 P562 牛黄蛇胆川贝液 胆酸 一部 P563 升气养元糖浆 黄芪甲苷 一部 P571 升血颗粒 黄芪甲苷 一部 P571 丹桂香颗粒 黄芪甲苷 一部 P582 乌贝散 贝母素甲 一部 P588 玉屏风口服液 黄芪甲苷 一部 P616 北芪五加片 黄芪甲苷 一部 P640 归脾丸 黄芪甲苷 一部 P643 乐儿康糖浆 黄芪甲苷 一部 P659 当归补血口服液 黄芪甲苷 一部 P687 安神补脑液 维生素 B1 一部 P716
芪冬颐心口服液 黄芪甲苷 一部 P740 补中益气丸 黄芪甲苷 一部 P780 补中益气丸 ( 水丸 ) 黄芪甲苷 一部 P781 补心气口服液 黄芪甲苷 一部 P782 阿胶补血口服液 黄芪 ( 黄芪甲苷 ) 一部 P791 阿胶补血膏 黄芪 ( 黄芪甲苷 ) 一部 P792 驴胶补血颗粒 黄芪 ( 黄芪甲苷 ) 一部 P796 肾康宁片 黄芪甲苷 一部 P812 金贝痰咳清颗粒 贝母素甲 一部 p823 降糖甲片 黄芪甲苷 一部 P857 胃乃安胶囊 黄芪甲苷 一部 P880 复方石韦片 黄芪 ( 黄芪甲苷 ) 一部 P908 复方蛤青片 黄芪甲苷 一部 P925 复方止汗颗粒 黄芪甲苷 一部 P927 复脉定胶囊 黄芪甲苷 一部 P929 养心氏片 黄芪甲苷 一部 P943 养正消积胶囊 齐墩果酸 一部 P945 养阴生血合剂 黄芪甲苷 一部 P948 前列通片 黄芪甲苷 一部 P953 黄氏响声丸 贝母素甲 一部 P1065 虚寒胃痛颗粒灸 黄芪 ( 黄芪甲苷 ) 一部 P1074 银杏叶片 萜类内酯 ( 白果内脂 ) 一部 P1079 银杏叶胶囊 萜类内酯 ( 白果内脂 ) 一部 P1080 银杏叶滴丸 萜类内酯 ( 白果内脂 ) 一部 P1081 清开灵片 胆酸 ( 胆酸 ) 一部 P1106 清开灵软胶囊 胆酸 ( 胆酸 ) 一部 P1108 清开灵软泡腾片 胆酸 ( 胆酸 ) 一部 P1109 清开灵胶囊 胆酸 ( 胆酸 ) 一部 P1112 紫金龙片 黄芪甲苷 一部 P1150 舒心口服液 黄芪甲苷 一部 P1161 舒心糖浆 黄芪甲苷 一部 P1162 渴乐宁胶囊 黄芪甲苷 一部 P1177 新血宝胶囊 黄芪 ( 黄芪甲苷 ) 一部 P1199 醒脑再造胶囊 黄芪甲苷 一部 P1226 糖脉康颗粒 黄芪 ( 黄芪甲苷 ) 一部 P1228 藿胆片 猪去氧胆酸 一部 P1236 妥布霉素 妥布霉素 卡那霉素 二部 P364 妥布霉素滴眼液 妥布霉素 卡那霉素 二部 P365 硫酸妥布霉素注射液妥布霉素 卡那霉素 二部 P365 硫酸小诺霉素 小诺霉素 庆大霉素 二部 P960 硫酸小诺霉素口服液小诺霉素 庆大霉素 二部 P961 硫酸小诺霉素片 小诺霉素 庆大霉素 二部 P961
硫酸小诺霉素注射液小诺霉素 庆大霉素 二部 P962 硫酸巴龙霉素 巴龙霉素 二部 P966 硫酸巴龙霉素片 巴龙霉素 二部 P966 硫酸卡那霉素 卡那霉素 二部 P967 硫酸卡那霉素注射液卡那霉素 二部 P968 硫酸卡那霉素滴眼液卡那霉素 二部 P968 注射用硫酸卡那霉素卡那霉素 二部 P969 硫酸西索米星 西索米星 庆大霉素 二部 P971 硫酸西索米星注射液西索米星 庆大霉素 二部 P972 硫酸庆大霉素 庆大霉素 小诺霉素 二部 P976 硫酸庆大霉素片 庆大霉素 小诺霉素 二部 P977 硫酸庆大霉素注射液庆大霉素 小诺霉素 二部 P977 硫酸庆大霉素缓释片庆大霉素 小诺霉素 二部 P977 硫酸庆大霉素颗粒 庆大霉素 小诺霉素 二部 P978 硫酸庆大霉素滴眼液庆大霉素 小诺霉素 二部 P978 硫酸萘替米星 萘替米星 依替米星 二部 P986 硫酸萘替米星注射液萘替米星 依替米星 二部 P987 硫酸依替米星 依替米星 萘提米星 二部 P987 硫酸依替米星注射液依替米星 萘替米星 二部 P988 注射用硫酸依替米星依替米星 萘替米星 二部 P989 硫酸核糖霉素 核糖霉素 新霉胺 二部 P995 注射用硫酸核糖霉素核糖霉素 新霉胺 二部 P996 硫酸链霉素 链霉素 妥布霉素 二部 P998 注射用硫酸链霉素 链霉素 妥布霉素 二部 P999 胆固醇 胆固醇 二部 P1214