复方曲肽注射液 Fufang qutai Zhusheye Compound Troxerutin and Poreine Cerebroside Injection 本品为曲克芦丁 猪脑蛋白提取物和猪脑神经节苷脂提取物制成的灭菌水溶液 含曲克芦丁 (C 33 H 42 O 19 ) 应为标示量的 90.0%~110.0%, 含总氮应为标示量的 85.0%~115.0%, 含单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 应为标示量的 85.0%~125.0% 处方 猪脑蛋白提取物适量 ( 含总氮 500mg) 猪脑神经节苷脂提取物适量 ( 含单唾液酸四己糖神经节苷脂 300mg) 曲克芦丁 40g( 按 C 33 H 42 O 19 计 ) 注射用水适量制成 1000ml 制法 本品中所用猪脑蛋白提取物与猪脑神经节苷脂提取物均应从检疫合格的猪脑中提取, 生产过程均应符合现行版 药品生产质量管理规范 的要求 猪脑蛋白提取物系由健康猪脑经匀浆 两次酶解 多次调节 ph 加热 离心 过滤 超滤等工艺步骤提取制成 猪脑神经节苷脂提取物系由健康猪脑经抽提 萃取 水解 两次层析 浓缩 沉淀 干燥等工艺步骤提取制成 按处方将猪脑蛋白提取物和猪脑神经节苷脂提取物混合得到猪脑提取物 将处方量的曲克芦丁用适量注射用水溶解于浓配罐中, 加入适量药用炭, 煮沸, 将药液降温脱炭过滤至稀配罐中, 猪脑提取物检验合格后过滤至同一稀配罐中, 补加适量注射用水定容, 将药液混匀, 控制 ph 值至 6.5~7.5, 药液经终端过滤后灌封, 灭菌 性状 本品为黄色至浅棕黄色的澄明液体 鉴别 (1) 取本品 0.5ml, 加水稀释至 20ml, 加盐酸 1ml 和锌粉少量, 置水浴上加热, 显持续的红色 (2) 取本品 0.5ml, 加水稀释至 20ml, 加三氯化铝少量, 溶液显亮黄色 (3) 取本品 2ml, 加茚三酮试液数滴, 加热, 应显蓝紫色 (4) 在曲克芦丁含量测定项下记录的色谱图中, 供试品溶液主峰的保留时间应与曲克芦丁对照品溶液主峰的保留时间一致 (5) 在单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 含量测定项下记录的色谱图中, 供试品溶液主峰的保留时间应与单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 对照品溶液主峰的保留时间一致 检查 ph 值应为 6.0~8.0( 中国药典 2010 年版二部附录 Ⅵ H) 蛋白质取本品 2ml, 加 20% 磺基水杨酸溶液 2ml, 溶液应澄清 高分子量物质照分子排阻色谱法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 ⅤH) 测定 色谱条件与系统适用性试验用亲水改性硅胶为填充剂 ( 如 TSK GEL 2000SW xl 7.8mm 300mm,5μm); 流动相为三氟醋酸 - 乙腈 - 水 (0.05:10:90); 检测波长为 214nm; 理论板数按胰岛素峰计算应不低于 3000 测定法精密量取本品 5ml, 加流动相稀释至 10ml, 混匀, 作为供试品溶液 ; 另取胰岛素 ( 分子量 5800) 适量, 用流动相制成每 1ml 中含 1mg 的溶液, 作为对照品溶液 取对照品溶液
和供试品溶液各 20μl, 分别注入液相色谱仪, 记录色谱图 按面积归一化法计算, 保留时间小于胰岛素峰的峰面积之和不得过 4.0% 其他羟乙基芦丁衍生物精密量取本品适量, 用流动相稀释制成每 1ml 中含曲克芦丁 0.6mg 的溶液, 作为供试品溶液 ; 精密量取供试品溶液适量, 用流动相稀释制成每 1ml 中含曲克芦丁 0.12mg 的溶液, 作为预试溶液 照曲克芦丁含量测定项下的方法试验, 取预试溶液 10µl, 注入液相色谱仪, 调节检测灵敏度, 使主成分色谱峰高为满量程的 40%~60%; 再精密量取供试品溶液 10µl, 注入液相色谱仪, 记录色谱图至主成分峰保留时间的 2 倍 按面积归一化法计算, 其他物质峰面积之和不得大于总峰面积的 15% 异常毒性取本品, 依法检查 ( 中国药典 2010 年版二部附录 XI C), 按静脉注射给药, 应符合规定 热原取本品, 依法检查 ( 中国药典 2010 年版二部附录 XI D), 剂量按家兔体重每 1kg 注射 1ml, 应符合规定 降压物质取本品, 依法检查 ( 中国药典 2010 年版二部附录 XI G), 剂量按猫体重每 1kg 注射 0.2ml, 应符合规定 过敏反应取本品, 依法检查 ( 中国药典 2010 年版二部附录 XI K), 应符合规定无菌取规定量供试品, 转移至 100ml 的无菌 0.1% 蛋白胨水溶液中, 采用薄膜过滤法处理后, 分别将膜接种至相应培养基中, 同时以金黄色葡萄球菌 (CMCC(B)26003) 为阳性对照菌, 依法检查 ( 中国药典 2010 年版附录 XI H), 应符合规定 其他应符合注射剂项下有关的各项规定 ( 中国药典 2010 年版二部附录 I B) 含量测定 曲克芦丁照高效液相色谱法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 V D) 测定 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ; 以 0.1% 枸橼酸溶液 - 乙腈 - 四氢呋喃 (85:9:6) 为流动相 ; 检测波长为 254nm; 理论板数按曲克芦丁峰计算不低于 2000 曲克芦丁峰与其他物质峰之间的分离度应符合要求 测定法精密量取本品适量, 用流动相定量稀释成每 1ml 中含曲克芦丁 0.20mg 的溶液, 作为供试品溶液, 取 10μl 注入液相色谱仪, 记录色谱图 ; 另精密称取曲克芦丁对照品适量, 加流动相溶解并稀释制成每 1ml 中约含 0.20mg 的溶液, 作为对照品溶液, 同法测定, 按外标法以峰面积计算, 即得 总氮精密量取本品适量, 照氮测定法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 Ⅶ D 第二法 ) 测定, 即得 单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 照高效液相色谱法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 V D) 测定 色谱条件与系统适用性试验用氨基键合硅胶为填充剂 ( 如 ;Merck Lichrospher 100NH 2, 250 4mm,5μm 或性能相当 ), 以乙腈 -0.1mol/L 磷酸溶液 - 四氢呋喃 (66:34:10) 为流动相 ; 检测波长为 205nm 理论板数按单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1) 峰计算应不低于 2000 测定法精密量取本品适量, 用水定量稀释制成每 1ml 中含单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1)0.5mg 的溶液, 作为供试品溶液 ; 另取单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 对照品适量, 精密称定, 加水溶解并稀释制成每 1ml 中含 0.5mg 的溶液, 作为对照品溶液 精密量取供试品溶液与对照品溶液各 10μl, 分别注入液相色谱仪, 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算, 即得 类别 心脑血管药
规格 (1)2ml:80mg 曲克芦丁,1.0mg 总氮,0.6mg 单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) (2)5ml:200mg 曲克芦丁,2.5mg 总氮,1.5mg 单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) (3) 10ml:400mg 曲克芦丁,5.0mg 总氮,3.0mg 单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 贮藏 遮光, 密闭, 在阴凉处保存
附件一 : 猪脑蛋白提取物 本品系由健康猪脑经加热 酶解 超滤等步骤提取制成的水溶液 每 1ml 含总氮应不少于 2.5 mg; 含总氨基酸 ( 以氮计 ) 应不低于总氮的 80%; 含肽 ( 以氮计 ) 应不低于总氮的 60% 性状 本品为微黄色至黄色的溶液 制法要求 本品应从检疫合格猪脑中提取, 生产过程均应符合现行版 药品生产质量管理规范 的要求 猪脑蛋白提取物系由健康猪脑经匀浆 两次酶解 多次调节 ph 加热 离心 过滤 超滤等工艺步骤提取制成 本品为动物来源, 应有有效去除病毒或病毒灭活的方法和措施 鉴别 (1) 取本品适量, 加水稀释制成每 1ml 约含总氮 0.5mg 的供试品溶液 取供试品溶液 2ml, 加茚三酮试液数滴, 加热, 应显蓝紫色 (2) 取本品 2ml, 加双缩脲试液 ( 取硫酸铜 0.75g 和酒石酸钾钠 3.0g, 加水 250ml 使溶解, 在搅拌下加入 10% 氢氧化钠溶液 150ml, 加水至 500ml)4ml, 应显紫红色 (3) 在肽含量测定项下记录的游离氨基酸色谱图中, 供试品溶液色谱图中各氨基酸峰的保留时间应与相应对照品峰的保留时间一致 (4) 鉴别分别取本品与工作对照品适量, 照高效液相色谱法 ( 中国药典 2000 年版二部附录 VD) 试验, 用十八烷基硅烷键合硅胶为填料, 流动相 A:0.1(V/V)% 三氟醋酸, 流动相 B: 0.085%(V/V)% 三氟醋酸乙腈溶液 -0.1(V/V)% 三氟醋酸 (80:20), 检测波长 276nm, 柱温 40, 流速为每分钟 0.8ml 进样量为 20µl, 梯度如下 : 时间 ( 分钟 ) 流动相 A(%) 流动相 B(%) 0 100 0 40 50 50 45 0 100 53 0 100 55 100 0 65 100 0 按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算, 供试品溶液的色谱图与工作对照品溶液色谱图的相似度 ( 扣除色氨酸峰后 ) 不得低于 0.85 检查 ph 值应为 6.5~7.5( 中国药典 2010 年版二部附录 VI H) 蛋白质取本品 5ml, 加 20% 磺基水杨酸溶液 2ml, 溶液应澄清 细菌内毒素取本品, 依法检查 ( 中国药典 2010 年版二部附录 XI E), 每 1mg( 以总氮计 ) 中含细菌内毒素的量应小于 4EU 降压物质取本品, 用氯化钠注射液稀释成每 1ml 中含总氮 0.25mg 的溶液, 依法检查 ( 中国药典 2010 年版二部附录 XI G), 剂量按猫体重每 1kg 注射 0.2ml, 应符合规定 微生物限度取本品, 采用平皿法进行细菌 霉菌及酵母菌计数, 采用常规法进行控制菌检查, 依法检查 ( 中国药典 2010 年版二部附录 Ⅺ J), 细菌 霉菌和酵母菌总数每 1ml 不得过 10cfu, 大肠埃希菌 沙门菌不得检出 含量测定 总氮取本品适量, 加水稀释制成每 1ml 约含总氮 0.5mg 的溶液, 作为供试品溶液 精密量取适量, 照氮测定法 ( 中国药典 2010 年版二部附录 Ⅶ D 第二法 ) 测定, 即得
总氨基酸取总氮测定项下供试品溶液, 精密量取适量, 置消化管中, 加盐酸适量, 充氮封口, 置 110 水解 20 小时, 放冷, 启封, 置蒸发皿中, 水浴蒸发至干, 加水使残留物溶解并稀释至合适浓度, 作为总氨基酸供试品溶液 用适宜的高效液相色谱仪进行测定 另取除胱氨酸 色氨酸外的氨基酸对照品, 精密称定并稀释制成合适浓度, 作为对照品溶液, 同法测定 按外标法以峰面积计算各氨基酸含量 ( 以氮计 ) 肽取总氮测定项下供试品溶液, 精密量取适量, 加水稀释至合适浓度, 作为游离氨基酸供试品溶液, 用适宜的高效液相色谱仪进行测定 另取总氨基酸项下对照品溶液, 同法测定 按外标法以峰面积计算游离氨基酸含量 ( 以氮计 ), 以总氨基酸减去游离氨基酸并计算其在总氮中的含量 贮藏 密闭,4~8 以下保存 2 天或 -20 冷冻保存 1 年
附件二 猪脑神经节苷脂提取物 本品系由健康猪脑提取制成的含有神经节苷脂的水溶液 每 1ml 含单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 应不少于 24mg 制法要求 本品应从检疫合格猪脑中提取, 生产过程均应符合现行版 药品生产质量管理规范 的要求 猪脑神经节苷脂提取物系由健康猪脑经抽提 萃取 水解 层析 浓缩 沉淀 干燥等工艺步骤提取, 即得 本品为动物来源, 应有有效去除病毒或病毒灭活的方法和措施 性状 本品为无色至淡黄色的溶液 鉴别 在单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 含量测定项下记录的色谱图中, 供试品溶液主峰的保留时间应与单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 对照品溶液主峰的保留时间一致 检查 ph 值应为 6.5~8.0 ( 中国药典 2010 年版二部附录 VI H) 甲醇 丙酮与三氯甲烷精密称取甲醇 丙酮 三氯甲烷适量, 加水制成 1ml 中含 3mg 5mg 0.06mg 的溶液, 作为对照品溶液 ; 另取本品作为供试品溶液 照残留溶剂测定法 ( 附录 Ⅷ P 第一法, 毛细管顶空进样等温法 ), 用 (5% 苯基 )-95% 甲基聚硅氧烷为固定相的键合交联毛细管柱, 柱温 40 ; 检测器为氢火焰离子化检测器 精密量取对照品和供试品溶液各 4ml, 分别置于 20ml 顶空瓶中, 平衡温度 80, 平衡时间为 35min 精密抽取对照品溶液和供试品溶液顶空气体各 0.5ml, 注入气相色谱仪 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算, 均应符合规定 细菌内毒素取本品, 依法检查 ( 中国药典 2010 年版二部附录 XI E), 每 1μg 单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 中含细菌内毒素的量应小于 0.03EU 微生物限度取本品, 采用平皿法进行细菌 霉菌及酵母菌计数, 采用常规法进行控制菌检查, 依法检查 ( 中国药典 2010 年版二部附录 Ⅺ J), 细菌 霉菌和酵母菌总数每 1ml 不得过 10 个, 大肠埃希菌 沙门菌不得检出 含量测定 单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 照高效液相色谱法 ( 中国药典 2010 年版附录 VD) 测定 色谱条件与系统适用性试验用氨基键合硅胶为填充剂 ( 如 Merck Lichrospher 100NH2 250 4mm,5μm), 以乙腈 -0.1mol/L 磷酸 - 四氢呋喃 (66:34:10) 为流动相 ; 检测波长为 205nm 理论板数按单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 峰计算应不低于 1500 测定法精密量取本品适量, 加水制成每 1ml 中约含 0.12mg 单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 的溶液, 作为供试品溶液 精密量取 10μl 注入液相色谱仪, 记录色谱图 另取单唾液酸四己糖神经节苷脂 (GM1) 对照品适量, 同法测定, 按外标法以峰面积计算 贮藏 密闭,4~8 冷藏保存 2 天或 -20 冷冻保存 1 年
附件三 猪脑质量标准 来源于健康猪, 猪脑要求有动物检疫部门动物产品检疫合格证明 外观 形状肉眼观察, 猪脑特征明显, 鲜品猪脑形态基本完整, 呈球状固体外观, 血管及沟 回组织纹理清晰可辨, 不得有病变 模糊 液化现象 色泽肉眼观察, 应色泽鲜明, 具备新鲜脏器特征, 血管鲜红, 皮层 灰质髓质呈白色灰夹, 不得有全部灰色 无血色或任何发黑 发黄现象 气味具新鲜血腥味, 无臭味或异味 纯度不得夹杂其他脏器组织或异物 包装 包装应能有效防止贮运污染, 如使用大包装应有不使猪脑因包装过大而产生深部变质的措施 贮藏 离体后速置 4 以下暂存并当日使用 ; 长期应存放于 -10 以下, 贮存期不得超过 6 个月 起草单位 : 辽宁省食品药品检验所 复核单位 : 吉林省食品药品检验所