窑 610窑 中 华 地 方 病 学 杂 志 2014 年 11 月 20 日 第 33 卷 第 6 期 Chin J Endemiol 袁 November 20 袁 2014 袁 Vol. 33 袁 No.6 mrna 渊 依 7.01 袁 依 5.10 冤 and

中 华 地 方 病 学 杂 志 2014 年 11 月 20 日 第 33 卷 第 6 期 Chin J Endemiol 袁 November 20 袁 2014 袁 Vol. 33 袁 No.6 染 氟 大 鼠 骨 组 织 转 化 生 长 因 子 茁 1 与 白 细 胞 介 素 6 mrna 和 蛋 白 表 达 水 平 观 察 窑 609窑 论 著 邓 超 男 于 燕 妮 张 颖 摘 要 目 的 探 讨 转 化 生 长 因 子 茁 1 渊 transforming growth factor 鄄 茁 1 袁 TGF 鄄 茁 1 冤 尧 白 细 胞 介 素 6 渊 interleukin 袁 IL 鄄 6 冤 在 慢 性 氟 中 毒 大 鼠 骨 组 织 表 达 变 化 的 意 义 遥 方 法 采 用 随 机 数 字 表 法 袁 按 体 质 量 将 36 只 健 康 SD 大 鼠 分 为 3 组 袁 每 组 12 只 袁 雌 雄 各 半 遥 对 照 组 饮 用 自 来 水 渊 含 氟 量 < 1 mg 辕 L 冤 袁 低 氟 组 和 高 氟 组 分 别 饮 用 含 5 尧 50 mg 辕 L 氟 化 钠 的 自 来 水 遥 大 鼠 饲 养 6 个 月 袁 建 立 慢 性 氟 中 毒 模 型 袁 股 动 脉 放 血 处 死 遥 取 大 鼠 股 骨 干 骺 端 袁 灰 化 鄄 氟 离 子 选 择 电 极 法 检 测 骨 氟 含 量 曰 光 镜 观 察 骨 组 织 形 态 学 改 变 曰 酶 联 免 疫 吸 附 法 检 测 血 清 骨 碱 性 磷 酸 酶 渊 BALP 冤 水 平 曰 原 位 杂 交 和 免 疫 组 织 化 学 检 测 骨 组 织 中 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 mrna 和 蛋 白 表 达 水 平 遥 结 果 对 照 组 尧 低 氟 组 和 高 氟 组 的 骨 氟 含 量 咱 渊 306.04 依 12.57 冤 尧 渊 652.91 依 51.83 冤 尧 渊 1 094.11 依 91.41 冤 mg 辕 kg 暂 依 次 增 加 渊 F = 31.14 袁 P < 0.05 冤 袁 低 氟 组 和 高 氟 组 大 鼠 股 骨 干 骺 端 呈 骨 质 硬 化 表 现 遥 对 照 组 尧 低 氟 组 和 高 氟 组 血 清 BALP 水 平 咱 渊 27.78 依 4.09 冤 尧 渊 46.59 依 5.75 冤 尧 渊 57.45 依 3.99 冤 U 辕 L 暂 尧 骨 组 织 TGF 鄄 茁 1 mrna 表 达 水 平 渊 111.84 依 4.62 尧 123.86 依 7.46 尧 140.83 依 5.21 冤 和 蛋 白 表 达 水 平 渊 118.60 依 7.09 尧 133.17 依 7.33 尧 145.67 依 9.61 冤 均 依 次 增 加 渊 F 值 分 别 为 30.29 尧 73.28 尧 33.65 袁 P 均 < 0.05 冤 曰 低 氟 组 和 高 氟 组 骨 组 织 IL 鄄 6 的 mrna 表 达 水 平 渊 117.78 依 7.01 尧 119.90 依 5.10 冤 和 蛋 白 表 达 水 平 渊 122.79 依 6.49 尧 123.81 依 7.99 冤 均 高 于 对 照 组 渊 106.49 依 6.76 袁 112.11 依 5.80 袁 F 值 分 别 为 15.47 尧 10.83 袁 P 均 < 0.05 冤 遥 结 论 TGF 鄄 茁 1 尧 IL 鄄 6 在 染 氟 大 鼠 骨 组 织 上 表 达 改 变 袁 提 示 氟 可 通 过 调 节 骨 骼 微 环 境 来 影 响 骨 形 成 增 强 遥 揖 关 键 词 铱 氟 中 毒 曰 骨 曰 骨 骼 微 环 境 Expressions of transforming growth factor 鄄 茁 1 and interleukin 6 mrna and protein in bone of rats with chronic fluorosis Deng Chaonan 袁 Yu Yanni 袁 Zhang Ying. Department of Pathology 袁 Guiyang Medical College 袁 Guiyang 550004 袁 China Corresponding author 院 Yu Yanni 袁 Email 院 gyyxybl2010@163.com 揖 Abstract 铱 Objective To investigate the significance of osteo 鄄 immunology related factor transforming growth factor 鄄 茁 1 渊 TGF 鄄 茁 1 冤 and interleukin 6 渊 IL 鄄 6 冤 in bone of rats with chronic fluorosis. Methods Thirty 鄄 six healthy SD rats were divided to three groups according to body weight with the method of random digits table. The rats of control were fed with tap water 渊 NaF < 1 mg 辕 L 冤 and the experimental rats were exposed to NaF 渊 lower dose group 院 5 mg 辕 L 袁 higher dose group 院 50 mg 辕 L 冤 added to the drinking water to establish the chronic fluorosis model. All rats were killed on the six months and the metaphysic of femoral was collected. Bone fluorine was detected by ashing 鄄 fluorin ion selective electrode method. Bone tissues were stained with hematoxylin 鄄 eosin and observed under optical microscope. The content of bone alkaline phosphatase 渊 BALP 冤 in rat serum was detected by enzyme 鄄 linked immunosorbent assay 渊 ELISA 冤. The expressions of TGF 鄄 茁 1 and IL 鄄 6 mrna and protein in bone were detected by in situ hybridization 渊 ISH 冤 and immunohistochemistry 渊 IHC 冤. Results The contents of bone fluorine were increased gradually in the control 袁 the lower and higher doses fluoride groups 咱 渊 306.04 依 12.57 冤 袁 渊 652.91 依 51.83 冤 袁 渊 1 094.11 依 91.41 冤 mg 辕 kg 袁 F = 31.14 袁 P < 0.05 暂. Bone sclerosis could be observed under optical microscope in lower and higher dose groups. The content of BALP in serum increased with the dose of fluoride gradually in the control 袁 the lower and higher doses fluoride groups 咱 渊 27.78 依 4.09 冤 袁 渊 46.59 依 5.75 冤 袁 渊 57.45 依 3.99 冤 U 辕 L 暂 袁 expressions of mrna 渊 111.84 依 4.62 袁 123.86 依 7.46 袁 140.83 依 5.21 冤 and protein 渊 118.60 依 7.09 袁 133.17 依 7.33 袁 145.67 依 9.61 冤 of TGF 鄄 茁 1 were both increased 渊 F = 30.29 袁 73 袁 28 袁 33.65 袁 all P < 0.05 冤. The expressions of DOI 院 10.3760 辕 cma.j.issn.2095-4255.2014.06.005 基 金 项 目 院 国 家 自 然 科 学 基 金 渊 81260419 冤 曰 教 育 部 博 士 点 基 金 渊 博 导 类 冤 渊 20125215110001 冤 曰 贵 州 省 科 技 厅 社 会 发 展 攻 关 项 目 渊 黔 科 合 SY 咱 2011 暂 3006 号 冤 作 者 单 位 院 550004 贵 阳 医 学 院 病 理 学 教 研 室 通 信 作 者 院 于 燕 妮 袁 Email 院 gyyxybl2010@163.com

窑 610窑 中 华 地 方 病 学 杂 志 2014 年 11 月 20 日 第 33 卷 第 6 期 Chin J Endemiol 袁 November 20 袁 2014 袁 Vol. 33 袁 No.6 mrna 渊 117.78 依 7.01 袁 119.90 依 5.10 冤 and protein 渊 122.79 依 6.49 袁 123.81 依 7.99 冤 of IL 鄄 6 were both higher than those of the control 渊 106.49 依 6.76 袁 112.11 依 5.80 袁 F = 15.47 尧 10.83 袁 all P < 0.05 冤. Conclusion The expressions of osteo 鄄 immunology related factor TGF 鄄 茁 1 and IL 鄄 6 in bone of rats with chronic fluorosis have changed 袁 which indicates that fluoride can impact the increased bone formation by regulating the micro environment of bone. 揖 Key words 铱 Fluorosis 曰 Bone 曰 Bone micro environment 地 方 性 氟 中 毒 是 一 类 在 我 国 分 布 较 广 的 地 方 病 袁 其 主 要 损 害 的 靶 器 官 是 骨 和 牙 袁 严 重 者 可 造 成 关 节 畸 形 袁 影 响 生 活 质 量 甚 至 丧 失 劳 动 力 遥 氟 骨 症 是 慢 性 氟 中 毒 骨 骼 损 伤 的 主 要 表 现 袁 可 呈 骨 硬 化 尧 骨 软 化 尧 混 合 型 及 骨 周 化 骨 等 多 种 形 式 遥 Arron 和 咱 1 暂 Choi 2000 年 首 次 提 出 骨 免 疫 学 的 概 念 袁 描 述 了 骨 骼 系 统 与 免 疫 系 统 细 胞 间 的 相 互 作 用 袁 免 疫 失 调 可 导 致 骨 代 谢 异 常 遥 随 后 有 研 究 显 示 袁 骨 免 疫 参 与 了 类 风 湿 关 节 炎 尧 骨 质 疏 松 尧 Paget 骨 病 尧 骨 溶 解 等 咱 2 暂 诸 多 骨 科 疾 病 的 发 生 与 发 展 遥 但 骨 免 疫 学 与 氟 骨 症 之 间 联 系 的 研 究 尚 少 袁 本 实 验 旨 在 观 察 骨 免 疫 中 重 要 的 细 胞 因 子 转 化 生 长 因 子 鄄 茁 1 渊 Transforming growth factor 鄄 茁 1 袁 TGF 鄄 茁 1 冤 和 白 细 胞 介 素 渊 interleukin 袁 IL 冤 鄄 6 在 慢 性 氟 中 毒 大 鼠 骨 组 织 上 的 表 达 情 况 袁 探 讨 这 些 因 子 变 化 的 意 义 袁 为 研 究 骨 骼 微 环 境 变 化 与 氟 骨 症 发 病 机 制 的 联 系 打 下 基 础 袁 也 为 骨 免 疫 学 变 化 在 骨 关 节 疾 病 中 所 起 的 作 用 提 供 新 的 研 究 思 路 遥 1 材 料 与 方 法 1.1 实 验 动 物 处 理 院 体 质 量 约 100 ~ 120 g 健 康 SD 大 鼠 36 只 咱 第 三 军 医 大 学 大 坪 医 院 医 学 实 验 动 物 中 心 袁 合 格 证 号 院 SCXK 渊 渝 冤 2007 鄄 0005 暂 袁 雌 雄 各 半 袁 按 体 质 量 采 用 随 机 数 字 表 法 分 为 3 组 袁 每 组 12 只 遥 对 照 组 大 鼠 自 由 饮 用 自 来 水 咱 氟 化 钠 渊 NaF 冤 含 量 < 1 mg 辕 L 暂 袁 低 氟 组 和 高 氟 组 大 鼠 分 别 饮 用 含 5 尧 50 mg 辕 L NaF 的 自 来 水 遥 各 组 均 饲 以 由 贵 阳 医 学 院 实 验 动 物 中 心 配 制 的 标 准 固 体 饲 料 渊 含 氟 量 < 0.5 mg 辕 kg 冤 遥 定 期 观 察 氟 斑 牙 发 生 率 袁 饲 养 6 个 月 袁 明 确 模 型 建 立 成 功 后 袁 股 动 脉 放 血 处 死 遥 1.2 主 要 试 剂 及 仪 器 院 大 鼠 血 清 骨 碱 性 磷 酸 酶 渊 bone alkaline phosphatase 袁 BALP 冤 酶 联 免 疫 分 析 试 剂 盒 渊 美 国 RD 公 司 冤 曰 TGF 鄄 茁 1 兔 抗 鼠 多 克 隆 抗 体 尧 IL 鄄 6 兔 抗 鼠 多 克 隆 抗 体 渊 北 京 博 奥 森 公 司 冤 曰 SP 鄄 9000 三 步 法 免 疫 组 织 化 学 渊 SP 冤 试 剂 盒 尧 二 氨 基 联 苯 胺 渊 DAB 冤 显 色 试 剂 盒 渊 北 京 中 杉 金 桥 生 物 技 术 有 限 公 司 冤 曰 TGF 鄄 茁 1 原 位 杂 交 渊 situ hybridization 袁 ISH 冤 试 剂 盒 渊 天 津 灏 洋 生 物 制 品 科 技 有 限 责 任 公 司 冤 和 IL 鄄 6 原 位 杂 交 试 剂 盒 渊 武 汉 博 士 德 生 物 试 剂 有 限 公 司 冤 曰 Biomias 彩 色 图 像 分 析 仪 系 统 渊 四 川 大 学 图 像 图 形 研 究 所 冤 遥 1.3 实 验 方 法 1.3.1 尿 氟 和 骨 氟 测 定 院 处 死 大 鼠 前 24 h 收 集 所 有 大 鼠 尿 液 曰 处 死 大 鼠 后 袁 取 大 鼠 股 骨 干 骺 端 袁 采 用 氟 离 子 选 择 电 极 法 和 灰 化 鄄 氟 离 子 选 择 电 极 法 检 测 尿 氟 和 骨 氟 含 量 遥 1.3.2 血 清 BALP 水 平 测 定 院 大 鼠 股 动 脉 取 血 袁 离 心 取 上 层 血 清 袁 按 试 剂 盒 步 骤 操 作 遥 1.3.3 骨 组 织 病 理 学 及 形 态 计 量 学 院 取 大 鼠 股 骨 干 骺 端 袁 4% 中 性 甲 醛 固 定 袁 乙 二 胺 四 乙 酸 渊 EDTA 冤 脱 钙 液 脱 钙 袁 常 规 石 蜡 包 埋 后 进 行 苏 木 精 - 伊 红 渊 HE 冤 染 色 袁 光 镜 观 察 骨 组 织 形 态 学 改 变 遥 在 股 骨 干 骺 端 骨 骺 线 下 1 mm 处 测 量 骨 小 梁 宽 度 尧 骨 小 梁 密 度 和 骨 皮 质 厚 度 遥 1.3.4 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 mrna 表 达 检 测 院 ISH 检 测 大 鼠 骨 组 织 中 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 mrna 表 达 遥 TGF 鄄 茁 1 探 针 合 成 序 列 院 淤 5 忆 鄄 AGCCCTGTATTCCGTCTCCTT GGTTCA 曰 于 5 忆 鄄 CTCAGGCGTATCAGTGGGGGTCAG CAGC 遥 IL 鄄 6 探 针 合 成 序 列 院 淤 5 忆 鄄 CTCCGCAAGAG ACTTCCAGCCAGTTGCCTT 鄄 3 忆 曰 于 5 忆 鄄 CTTCCAAACT GGATATAACCAGGAAATTTG 鄄 3 忆 曰 盂 5 忆 鄄 ATTTCTAA AGGTCACTATGAGGTCTACTCG 鄄 3 忆 遥 探 针 淤 尧 于 和 盂 混 合 标 记 地 高 辛 袁 按 照 ISH 试 剂 盒 说 明 书 操 作 袁 细 胞 质 显 棕 黄 色 为 阳 性 遥 高 倍 镜 渊 400 倍 冤 下 取 5 个 视 野 袁 每 个 视 野 取 5 个 区 域 测 其 阳 性 表 达 平 均 灰 度 值 遥 表 达 强 则 平 均 灰 度 值 高 袁 反 之 则 低 遥 1.3.5 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 蛋 白 表 达 检 测 院 SP 法 检 测 成 骨 细 胞 中 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 蛋 白 表 达 水 平 遥 石 蜡 切 片 常 规 脱 蜡 至 水 袁 3%H 2 O 2 孵 育 15 min 袁 高 压 修 复 2.5 min 袁 取 出 自 然 冷 却 至 室 温 袁 血 清 孵 育 20 min 后 倾 去 不 洗 袁 滴 加 按 比 例 稀 释 的 一 抗 4 益 过 夜 渊 TGF 鄄 茁 1 1 颐 80 尧 IL 鄄 6 1 颐 100 冤 遥 次 日 取 出 复 温 30 min 袁 依 次 加 入 二 抗 孵 育 30 min 袁 辣 根 过 氧 化 物 酶 孵 育 25 min 曰 DAB 显 色 袁 流 水 终 止 反 应 曰 苏 木 素 复 染 袁 脱 水 尧 透 明 尧 封 片 遥 每 组 切 片 均 设 立 空 白 对 照 袁 用 磷 酸 缓 冲 液 渊 PBS 冤 代 替 一 抗 作 为 阴 性 对 照 遥 高 倍 镜 渊 400 倍 冤 下 取 5 个 视 野 袁 每 个 视 野 取 5 个 区 域 测 其 阳 性 表 达 平 均 灰 度 值 遥 表 达 强 则 平 均 灰 度 值 高 袁 反 之 则 低 遥

中 华 地 方 病 学 杂 志 2014 年 11 月 20 日 第 33 卷 第 6 期 Chin J Endemiol 袁 November 20 袁 2014 袁 Vol. 33 袁 No.6 窑 611窑 1.4 统 计 分 析 院 实 验 数 据 采 用 SPSS 17.0 软 件 进 行 处 理 遥 若 方 差 齐 袁 采 用 单 因 素 方 差 分 析 袁 进 一 步 多 重 比 较 采 用 LSD 鄄 t 检 验 曰 若 方 差 不 齐 袁 采 用 多 个 独 立 样 本 的 Kruskal 鄄 wallis 秩 和 检 验 曰 相 关 性 分 析 用 Pearson 分 析 遥 检 验 水 准 为 0.05 遥 2 结 果 2.1 骨 氟 水 平 院 对 照 组 尧 低 氟 组 尧 高 氟 组 大 鼠 骨 氟 依 次 增 加 袁 任 意 两 组 组 间 比 较 差 异 均 有 统 计 学 意 义 渊 P 均 < 0.05 冤 袁 见 表 1 遥 表 1 3 组 大 鼠 骨 氟 含 量 和 血 清 BALP 水 平 渊 x 軃 ±s 冤 组 别 鼠 数 骨 氟 渊 mg 辕 kg 冤 BALP 渊 IU 辕 L 冤 对 照 组 12 306.04 依 12.57 27.78 依 4.09 低 氟 组 12 652.91 依 51.83 a 46.59 依 5.75 a 高 氟 组 12 1 094.11 依 91.41 ab 57.45 依 3.99 ab F 值 31.14 30.29 P 值 < 0.05 < 0.05 注 院 BALP 院 骨 碱 性 磷 酸 酶 曰 与 对 照 组 比 较 袁 a P < 0.05 曰 与 低 氟 组 比 较 袁 b P < 0.05 2.2 血 清 BALP 含 量 院 对 照 组 尧 低 氟 组 尧 高 氟 组 大 鼠 血 清 BALP 含 量 依 次 增 加 袁 任 意 两 组 组 间 比 较 差 异 均 有 统 计 学 意 义 渊 P 均 < 0.05 冤 袁 见 表 1 遥 2.3 骨 组 织 病 理 学 及 形 态 计 量 学 结 果 院 光 镜 下 见 低 氟 组 尧 高 氟 组 大 鼠 股 骨 干 骺 端 骨 小 梁 较 对 照 组 增 粗 尧 排 列 紧 密 袁 骨 皮 质 变 厚 袁 骨 髓 腔 变 狭 窄 袁 呈 骨 质 硬 化 表 现 曰 且 高 氟 组 较 低 氟 组 病 变 明 显 遥 对 照 组 尧 低 氟 组 尧 高 氟 组 大 鼠 骨 小 梁 宽 度 尧 骨 小 梁 密 度 和 骨 皮 质 厚 度 依 次 增 加 袁 任 意 两 组 组 间 比 较 差 异 均 有 统 计 学 意 义 渊 P 均 < 0.05 冤 袁 见 表 2 遥 表 2 3 组 大 鼠 骨 小 梁 宽 度 骨 小 梁 密 度 骨 皮 质 厚 度 形 态 计 量 学 结 果 渊 x 軃 ±s 冤 组 别 鼠 数 骨 小 梁 宽 度 骨 皮 质 厚 度 骨 小 梁 密 度 渊 滋 m 冤 渊 滋 m 冤 渊 % 冤 对 照 组 12 61.61 依 1.46 180.89 依 4.51 32.03 依 2.29 低 氟 组 12 75.65 依 0.94 a 200.03 依 2.18 a 43.25 依 1.92 a 高 氟 组 12 98.26 依 3.06 ab 219.76 依 3.32 ab 52.60 依 2.08 ab F 值 996.53 376.72 288.07 P 值 < 0.05 < 0.05 < 0.05 注 院 与 对 照 组 比 较 袁 a P < 0.05 曰 与 低 氟 组 比 较 袁 b P < 0.05 2.4 骨 组 织 TGF 鄄 茁 1 尧 IL 鄄 6 的 mrna 和 蛋 白 表 达 情 况 院 成 骨 细 胞 尧 破 骨 细 胞 和 骨 髓 腔 中 的 巨 核 细 胞 细 胞 质 内 均 有 TGF 鄄 茁 1 尧 IL 鄄 6 的 mrna 和 蛋 白 阳 性 表 达 渊 图 1 尧 2 冤 遥 对 照 组 尧 低 氟 组 尧 高 氟 组 大 鼠 骨 组 织 TGF 鄄 茁 1 的 mrna 和 蛋 白 表 达 水 平 依 次 增 加 袁 任 意 两 组 组 间 比 较 差 异 均 有 统 计 学 意 义 渊 P 均 < 0.05 冤 曰 低 氟 组 和 高 氟 组 骨 组 织 IL 鄄 6 的 mrna 和 蛋 白 表 达 水 平 均 高 于 对 照 组 渊 渊 P 均 < 0.05 冤 袁 见 表 3 遥 2.5 骨 氟 含 量 与 骨 组 织 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 蛋 白 含 量 相 关 性 分 析 院 骨 氟 与 骨 组 织 TGF 鄄 茁 1 蛋 白 含 量 呈 正 相 关 渊 r = 0.782 袁 P < 0.05 冤 曰 骨 氟 与 骨 组 织 IL 鄄 6 蛋 白 含 量 呈 正 相 关 渊 r = 0.547 袁 P < 0.05 冤 遥 3 讨 论 成 人 每 年 超 过 10% 的 骨 质 通 过 骨 形 成 和 骨 吸 收 功 能 获 得 重 建 袁 正 常 骨 组 织 保 持 着 这 种 动 态 的 平 衡 来 维 持 骨 骼 完 整 性 遥 在 此 过 程 中 袁 二 者 活 性 受 某 些 细 胞 因 子 和 生 长 因 子 严 格 调 控 袁 打 破 这 种 平 衡 通 咱 3-4 暂 常 会 导 致 骨 骼 疾 病 如 骨 质 疏 松 和 骨 质 硬 化 遥 以 往 咱 5-6 暂 大 量 研 究 显 示 袁 信 号 转 导 通 路 变 化 尧 激 素 调 节 尧 氧 咱 7 暂 化 应 激 等 均 可 能 导 致 骨 转 换 加 速 遥 机 体 摄 入 过 量 的 氟 后 大 部 分 蓄 积 于 骨 袁 众 多 研 究 认 为 袁 骨 氟 含 量 可 作 为 判 断 氟 中 毒 严 重 程 度 的 指 标 之 一 遥 本 实 验 利 用 不 同 浓 度 的 饮 用 水 建 立 慢 性 氟 中 毒 大 鼠 模 型 袁 检 测 骨 氟 含 量 袁 发 现 其 随 染 氟 浓 度 的 增 加 而 逐 渐 增 高 袁 说 明 模 型 建 立 成 功 遥 目 前 认 为 野 骨 形 成 和 骨 吸 收 均 增 强 袁 骨 转 换 加 速 冶 是 氟 骨 症 主 要 的 发 病 机 制 之 一 遥 BALP 是 碱 性 磷 酸 酶 的 同 工 酶 袁 特 异 性 来 源 于 成 骨 细 胞 袁 是 反 映 成 骨 细 胞 活 性 和 骨 形 成 的 特 异 性 较 咱 8-9 暂 强 的 标 志 物 遥 在 骨 形 成 过 程 中 袁 成 骨 细 胞 活 性 增 强 袁 大 量 分 泌 BALP 遥 本 实 验 中 慢 性 氟 中 毒 大 鼠 血 清 BALP 增 高 袁 间 接 反 映 成 骨 细 胞 活 性 增 强 情 况 遥 结 合 形 态 计 量 学 指 标 中 股 骨 干 骺 端 的 骨 硬 化 表 现 袁 考 虑 在 一 定 剂 量 的 氟 影 响 下 袁 骨 形 成 作 用 增 强 袁 并 且 强 于 骨 吸 收 遥 骨 骼 与 免 疫 系 统 在 细 胞 起 源 尧 空 间 分 布 尧 功 能 及 调 控 等 方 面 存 在 许 多 相 似 性 袁 尤 其 是 近 年 来 对 骨 保 护 素 辕 核 因 子 资 B 受 体 活 化 因 子 配 体 辕 核 因 子 资 B 表 3 3 组 大 鼠 骨 组 织 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 的 mrna 和 蛋 白 表 达 情 况 渊 x 軃 ±s 冤 组 别 鼠 数 TGF 鄄 茁 1 IL 鄄 6 mrna 蛋 白 mrna 蛋 白 对 照 组 12 111.84 依 4.62 118.60 依 7.09 106.49 依 6.76 112.11 依 5.80 低 氟 组 12 123.86 依 7.46 a 133.17 依 7.33 a 117.78 依 7.01 a 122.79 依 6.49 a 高 氟 组 12 140.83 依 5.21 ab 145.67 依 9.61 ab 119.90 依 5.10 a 123.81 依 7.99 a F 值 73.28 33.65 15.47 10.83 P 值 < 0.05 < 0.05 < 0.05 < 0.05 注 院 TGF 鄄 茁 1 院 转 化 生 长 因 子 鄄 茁 1 曰 IL 鄄 6 院 白 细 胞 介 素 曰 与 对 照 组 比 较 袁 a P < 0.05 曰 与 低 氟 组 比 较 袁 b P < 0.05

窑612窑 中华地方病学杂志 2014 年 11 月 20 日第 33 卷第 6 期 Chin J Endemiol袁 November 20袁 2014袁Vol. 33袁 No.6 1a 1b 1c 1d 1e 1f 1a院 对照组袁转化生长因子鄄茁1渊TGF鄄茁1冤mRNA 阳性细胞较少袁染色较淡曰1b院 低氟组袁TGF鄄茁1 mrna 阳性细胞较对照组增加袁染色加深曰 1c院 高氟组袁TGF鄄茁1 mrna 阳性细胞明显增多袁染色较深曰1d院 对照组袁白细胞介素 6渊IL鄄6冤mRNA 阳性细胞较少袁染色较淡曰1e院低氟组袁IL鄄6 mrna 阳性细胞较对照组增加袁染色加深曰1f院 高氟组袁IL鄄6 mrna 阳性细胞明显增多袁染色较深 图1 3 组小鼠骨组织 TGF鄄茁1 和 IL鄄6 mrna 表达情况渊ISH 伊 400冤 2a 2b 2c 2d 2e 2f 2a院对照组袁转化生长因子鄄茁1渊TGF鄄茁1冤蛋白阳性表达细胞较少袁染色较淡曰2b院低氟组袁TGF鄄茁1 蛋白阳性表达细胞较对照组增加袁染色加深曰 2c院高氟组袁TGF鄄茁1 蛋白阳性表达细胞明显增多袁染色较深曰2d院对照组袁白细胞介素 6渊IL鄄6冤蛋白阳性表达细胞较少袁染色较淡曰2e院低氟组袁IL鄄6 蛋白阳性表达细胞较对照组增加袁染色加深曰2f院 高氟组袁IL鄄6 蛋白阳性表达细胞明显增多袁染色较深 图2 3 组小鼠骨组织 TGF鄄茁1 和 IL鄄6 蛋白表达情况渊SP 伊 400冤 受体活化因子渊OPG 辕 RANKL 辕 RANK冤系统研究的深 入袁对骨与免疫系统间的相互用机制有了更进一步 的认识遥 在此基础上袁有些学者提出了骨骼免疫学 的概念咱10鄄11暂遥 骨与免疫系统的空间分布联系紧密院破 骨细胞和巨噬细胞均起源于造血干细胞的单核细 胞前体袁配对盒基因 5渊paired box gene袁pax5冤基因 缺失的原 B 细胞可分化为成熟的破骨细胞尧巨噬细 胞尧树突状细胞尧粒细胞和自然杀伤细胞袁分化过程 中都受到基质干细胞 辕 成骨细胞前体分泌的多种细 胞因子的调控袁而基质细胞多分布于骨髓骨内膜表 面及骨小梁表面袁 与四周的破骨细胞前体及早期 B 细胞前体紧密接触袁 这是实现共同调控的基础 咱12暂遥

中 华 地 方 病 学 杂 志 2014 年 11 月 20 日 第 33 卷 第 6 期 Chin J Endemiol 袁 November 20 袁 2014 袁 Vol. 33 袁 No.6 窑 613窑 免 疫 系 统 和 骨 骼 系 统 有 共 同 的 细 胞 因 子 尧 转 录 因 子 咱 13 暂 和 受 体 遥 成 骨 细 胞 具 有 合 成 细 胞 因 子 袁 刺 激 T 淋 咱 14 暂 巴 细 胞 的 功 能 袁 因 此 有 学 者 认 为 袁 成 骨 细 胞 是 一 种 特 殊 的 免 疫 细 胞 遥 由 于 存 在 着 共 同 的 细 胞 因 子 尧 转 录 因 子 和 受 体 袁 免 疫 细 胞 不 仅 可 接 收 到 信 息 传 递 袁 而 且 可 作 用 于 成 骨 细 胞 和 破 骨 细 胞 袁 最 终 影 响 咱 15 暂 骨 重 塑 遥 TGF 鄄 茁 是 一 簇 具 有 多 种 功 能 的 蛋 白 多 肽 袁 在 骨 组 织 中 袁 TGF 鄄 茁 1 主 要 来 源 于 成 骨 细 胞 袁 可 刺 激 骨 膜 间 充 质 细 胞 增 殖 分 化 袁 促 进 成 骨 细 胞 和 软 骨 细 胞 增 生 袁 刺 激 玉 型 胶 原 渊 Col 玉 冤 合 成 袁 诱 导 膜 内 成 骨 和 软 骨 内 成 骨 过 程 遥 TGF 鄄 茁 1 也 是 人 类 骨 骼 中 含 量 最 丰 富 的 生 长 因 子 袁 通 过 影 响 rbmscs 向 成 骨 细 胞 方 向 咱 16 暂 的 转 化 而 影 响 正 常 及 病 理 下 的 骨 骼 形 态 遥 IL 鄄 6 是 具 有 多 种 生 物 学 功 能 的 细 胞 因 子 袁 在 体 内 具 有 广 泛 的 生 物 学 效 应 遥 已 有 体 内 外 实 验 证 明 袁 IL 鄄 6 具 有 广 泛 的 生 物 学 效 应 袁 成 骨 细 胞 合 成 的 IL 鄄 6 是 破 骨 性 分 咱 17 暂 化 和 骨 代 谢 的 重 要 调 节 因 子 遥 ISH 和 IHC 可 观 察 到 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 在 骨 组 织 中 的 成 骨 细 胞 尧 破 骨 细 胞 及 骨 髓 腔 中 的 巨 核 细 胞 中 均 有 表 达 袁 说 明 维 持 骨 组 织 动 态 平 衡 以 及 与 骨 组 织 形 成 关 系 密 切 的 骨 髓 腔 内 的 细 胞 均 可 表 达 细 胞 因 子 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 遥 目 前 袁 较 为 公 认 的 一 种 氟 骨 症 发 病 机 制 是 野 骨 转 换 加 速 冶 袁 鉴 于 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 在 染 氟 大 鼠 骨 组 织 中 成 骨 细 胞 尧 破 骨 细 胞 和 骨 髓 腔 内 细 胞 的 表 达 情 况 袁 将 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 蛋 白 含 量 与 骨 氟 含 量 作 相 关 性 分 析 袁 发 现 均 呈 正 相 关 性 袁 且 有 统 计 学 意 义 遥 提 示 袁 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 的 表 达 变 化 与 慢 性 氟 中 毒 所 致 咱 18 暂 的 骨 骼 损 伤 存 在 一 定 联 系 遥 研 究 表 明 袁 TGF 鄄 茁 1 能 够 刺 激 间 充 质 细 胞 的 增 殖 与 分 化 袁 促 进 成 骨 细 胞 和 成 软 骨 细 胞 增 殖 袁 诱 导 成 骨 细 胞 合 成 I 型 胶 原 袁 促 进 新 骨 基 质 的 形 成 袁 加 快 骨 生 成 速 度 袁 从 而 加 速 了 骨 愈 合 进 程 遥 TGF 鄄 茁 对 牵 张 成 骨 的 骨 重 建 过 程 中 袁 可 咱 19 暂 促 进 成 骨 细 胞 的 分 化 袁 导 致 成 骨 细 胞 成 熟 遥 Zhao 咱 20 暂 等 观 察 到 TGF 鄄 茁 1 可 促 进 鼠 类 BMSCs 的 成 骨 分 化 袁 表 现 在 它 能 增 加 Runt 相 关 转 录 因 子 2 渊 Runt 鄄 related transcription factor 2 袁 Runx2 冤 尧 骨 桥 蛋 白 渊 osteopontin 袁 OPN 冤 及 Col 玉 mrna 表 达 及 碱 性 磷 酸 酶 渊 alkaline phosphatase 袁 ALP 冤 活 性 遥 T 细 胞 存 在 咱 21 暂 时 袁 IL 鄄 17 能 刺 激 成 骨 细 胞 产 生 IL 鄄 6 遥 本 研 究 结 果 显 示 袁 一 定 剂 量 氟 暴 露 下 袁 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 的 mrna 和 蛋 白 含 量 均 随 染 氟 增 加 而 表 达 增 强 遥 说 明 成 骨 细 胞 合 成 两 种 因 子 的 作 用 增 强 袁 这 可 间 接 证 明 成 骨 细 胞 增 殖 和 分 化 加 强 袁 促 进 了 骨 形 成 作 用 增 加 袁 表 现 为 骨 质 硬 化 袁 与 本 实 验 骨 形 态 计 量 学 指 标 所 示 相 符 遥 但 是 也 有 研 究 指 出 袁 TGF 鄄 茁 1 对 于 骨 形 成 具 有 咱 22 暂 促 进 和 抑 制 的 双 重 作 用 遥 成 骨 细 胞 分 泌 的 IL 鄄 6 可 促 进 原 始 的 或 未 分 化 的 破 骨 细 胞 前 体 细 胞 生 长 咱 23 暂 分 化 袁 增 加 破 骨 细 胞 的 数 目 袁 增 强 骨 吸 收 代 谢 遥 邹 咱 24 暂 军 等 发 现 袁 抑 制 骨 质 疏 松 耦 联 信 号 因 子 IL 鄄 1 茁 尧 IL 鄄 6 分 泌 袁 可 间 接 地 抑 制 骨 吸 收 袁 调 节 骨 吸 收 和 骨 形 成 的 动 态 平 衡 遥 提 示 在 成 骨 细 胞 分 泌 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 增 加 的 同 时 袁 两 种 细 胞 因 子 可 影 响 破 骨 细 胞 的 作 用 袁 促 进 或 抑 制 骨 吸 收 遥 骨 组 织 的 重 塑 并 非 一 个 独 立 的 过 程 袁 骨 骼 微 环 境 的 变 化 与 其 关 系 密 切 袁 免 疫 系 统 中 细 胞 因 子 表 达 的 变 化 可 能 为 其 中 重 要 的 环 节 遥 从 本 实 验 结 果 来 看 袁 TGF 鄄 茁 1 和 IL 鄄 6 主 要 参 与 到 氟 促 进 骨 形 成 的 过 程 中 袁 而 TGF 鄄 茁 1 的 作 用 可 能 更 为 重 要 遥 细 胞 因 子 的 表 达 变 化 影 响 了 骨 骼 微 环 境 袁 这 可 能 是 慢 性 氟 中 毒 骨 骼 损 伤 发 生 机 制 的 一 个 方 面 袁 可 为 完 善 过 量 氟 暴 露 所 致 的 骨 关 节 疾 病 的 研 究 奠 定 基 础 遥 参 考 文 献 咱 1 暂 Arron JR 袁 Choi Y. Bone versus immune system 咱 J 暂. Nature 袁 2000 袁 408 渊 6812 冤 院 535 鄄 536. 咱 2 暂 Schett G. Osteoimmunology in rheumatic diseases 咱 J 暂. Arthritis Res Ther 袁 2009 袁 11 渊 1 冤 院 210. 咱 3 暂 Teitelbaum SL 袁 Ross FP. Genetic regulation of osteoclast development and function 咱 J 暂. Nat Rev Genet 袁 2003 袁 4 渊 8 冤 院 638 鄄 649. 咱 4 暂 Zeizer E 袁 Oisen BR. The genetic basis for skeletal diseases 咱 J 暂. Nature 袁 2003 袁 423 渊 6937 冤 院 343 鄄 348. 咱 5 暂 杨 丹 袁 于 燕 妮. 成 骨 细 胞 特 异 性 转 录 因 子 Osterix 研 究 进 展 咱 J 暂. 中 国 公 共 卫 生 袁 2013 袁 29 渊 1 冤 院 142 鄄 145. 咱 6 暂 谢 莹 袁 于 燕 妮 袁 万 良 斌 袁 等. 氟 对 大 鼠 骨 组 织 钙 调 蛋 白 神 经 磷 酸 酶 mrna 及 其 蛋 白 表 达 的 影 响 咱 J 暂. 中 华 病 理 学 杂 志 袁 2012 袁 41 渊 11 冤 院 761 鄄 764. 咱 7 暂 张 亚 楼 袁 孙 小 娜 袁 张 丽 袁 等. 氟 对 人 成 骨 细 胞 氧 化 应 激 和 骨 连 接 素 表 达 的 影 响 咱 J 暂. 新 疆 医 科 大 学 学 报 袁 2012 袁 35 渊 12 冤 院 1627 鄄 1631 袁 1637. 咱 8 暂 Takahashi M 袁 Kushida K 袁 Hoshino H 袁 et al. Comparison of bone and total alkaline phosphatase activity on bone turnover during menopause and in patients with established osteoporosis 咱 J 暂. Clin Endocrinol 袁 1997 袁 47 渊 2 冤 院 177 鄄 183. 咱 9 暂 刘 丽 君 袁 罗 湘 杭 袁 廖 二 元 袁 等. 男 性 骨 特 异 性 碱 性 磷 酸 酶 尧 骨 钙 素 尧 玉 型 胶 原 氨 基 末 端 肽 与 骨 密 度 的 关 系 咱 J 暂. 中 国 骨 质 疏 松 杂 志 袁 2007 袁 13 渊 11 冤 院 783 鄄 787. 咱 10 暂 Theill LE 袁 Boyle WJ 袁 Penninger JM. RANK 鄄 L and RANK 院 T cells 袁 bone loss 袁 and mammalian evolution 咱 J 暂. Annu Rev Immunol 袁 2002 袁 20 院 795 鄄 823. 咱 11 暂 Grcevic D 袁 Katavic V 袁 Lukic IK 袁 et al. Cellular and molecular interactions between immune system and bone 咱 J 暂. Croat Med J 袁 2001 袁 42 渊 4 冤 院 384 鄄 392. 咱 12 暂 曾 晓 峰 袁 赵 建 宁. 骨 代 谢 与 免 疫 功 能 的 相 互 调 节 咱 J 暂. 细 胞 与 分 子 免 疫 学 杂 志 袁 2003 袁 19 渊 6 冤 院 629 鄄 632.

窑 614窑 中 华 地 方 病 学 杂 志 2014 年 11 月 20 日 第 33 卷 第 6 期 Chin J Endemiol 袁 November 20 袁 2014 袁 Vol. 33 袁 No.6 咱 13 暂 张 立 智 袁 蒋 垚. 骨 免 疫 学 研 究 进 展 咱 J 暂. 国 际 骨 科 学 杂 志 袁 2009 袁 30 渊 4 冤 院 218 鄄 220. 咱 14 暂 Gomes JI. Medial patellofemoral ligament reconstruction with half width 渊 hemitendon 冤 semitendinosus graft 咱 J 暂. Orthopedics 袁 2008 袁 31 渊 4 冤 院 322 鄄 326. 咱 15 暂 Schottle PB 袁 Hensler D 袁 Imhoff AB. Direct anatomic reconstruction of the medial patellofemoral ligament with the double 鄄 bundle technique 院 aperture fixation 咱 J 暂. Arthroskopie 袁 2008 袁 21 渊 3 冤 院 192 鄄 195. 咱 16 暂 Kanaan RA 袁 Kanaan LA. Transforming growth factor beta1 袁 bone connection 咱 J 暂. Med Sci Monit 袁 2006 袁 12 渊 8 冤 院 RA164 鄄 RA169. 咱 17 暂 Ishimi Y 袁 Miyaura C 袁 Jin CH 袁 et al. IL 鄄 6 is produced by osteoblasts and induces bone resorption 咱 J 暂. J Immunol 袁 1990 袁 145 渊 10 冤 院 3297 鄄 3303. 咱 18 暂 Kim IS 袁 Song YM 袁 Hwang SJ. Osteogenic responses of human mesenchymal stromal cells to static stretch 咱 J 暂. J Dent Res 袁 2010 袁 89 渊 10 冤 院 1129 鄄 1134. 咱 19 暂 郭 娜 袁 张 志 纯. 转 化 生 长 因 子 鄄 茁 及 其 下 游 信 号 蛋 白 Smad2 辕 3 和 Smad7 在 牵 张 成 骨 中 表 达 的 研 究 咱 J 暂. 辽 宁 医 学 院 学 报 袁 2010 袁 31 渊 2 冤 院 103 鄄 106. 咱 20 暂 Zhao L 袁 Jiang S 袁 Hantash BM 袁 et al. Transformingg growth factor 茁 1 induces osteogenic differentiation of murine bone marrow stromal Cells 咱 J 暂. Tissue Eng Part A 袁 2010 袁 16 渊 2 冤 院 725 鄄 733. 咱 21 暂 Nomura E 袁 Horiuchi Y 袁 Kihara M. A midterm follow 鄄 up of medial patellofemoral ligament reconstruction using an artificial for recurrent patellar dislocation 咱 J 暂. Knee 袁 2000 袁 7 渊 4 冤 院 211 鄄 215. 咱 22 暂 Sila 鄄 Asna M 袁 Bunyaratvej A 袁 Maeda S 袁 et al. Osteoblast differentiation and bone formation gene expression in strontium 鄄 inducing bone marrow mesenchymal stem cell 咱 J 暂. Kobe J Med Sci 袁 2007 袁 53 渊 1 鄄 2 冤 院 25 鄄 35. 咱 23 暂 Kurihara N 袁 Bertolini D 袁 Suda Y 袁 et al. IL 鄄 6 stimulates osteoclast 鄄 like multinuclear cell formation in long 鄄 term human marrow cultures by inducing IL 鄄 1 release 咱 J 暂. J Immunol 袁 1990 袁 144 院 4226. 咱 24 暂 邹 军 袁 董 苗 淼 袁 张 丽 袁 等. 运 动 配 合 左 归 丸 对 去 卵 巢 大 鼠 骨 质 疏 松 的 偶 联 信 号 IL 鄄 1 尧 IL 鄄 6 及 COX 鄄 2 传 递 的 影 响 咱 J 暂. 中 国 骨 质 疏 松 杂 志 袁 2010 袁 16 渊 6 冤 院 407 鄄 411. 渊 收 稿 日 期 院 2014 鄄 05 鄄 15 冤 渊 本 文 编 辑 院 王 涵 冤 消 息 本 刊 已 启 用 稿 件 远 程 管 理 系 统 为 顺 应 当 今 期 刊 网 络 化 尧 数 字 化 的 发 展 趋 势 袁 进 一 步 提 高 工 作 效 率 袁 更 好 地 为 广 大 读 者 尧 作 者 提 供 高 质 量 的 服 务 袁 中 华 医 学 会 杂 志 社 开 发 了 稿 件 远 程 管 理 系 统 遥 根 据 中 华 医 学 会 杂 志 社 的 要 求 袁 叶 中 华 地 方 病 学 杂 志 曳 渊 原 刊 名 叶 中 国 地 方 病 学 杂 志 曳 冤 自 2012 年 1 月 起 袁 启 用 野 中 华 医 学 会 远 程 稿 件 管 理 系 统 冶 袁 该 系 统 根 据 中 华 医 学 会 系 列 杂 志 稿 件 处 理 流 程 尧 编 辑 加 工 规 范 尧 审 稿 制 度 尧 管 理 规 范 等 业 务 需 求 设 计 袁 采 用 先 进 的 数 据 库 及 网 络 技 术 袁 具 有 强 大 的 数 据 处 理 和 分 析 能 力 遥 稿 件 远 程 管 理 系 统 将 协 助 作 者 尧 编 辑 尧 审 稿 专 家 尧 编 委 尧 定 稿 会 专 家 尧 总 编 等 相 关 人 员 多 位 一 体 地 进 行 稿 件 业 务 处 理 袁 解 决 编 辑 部 对 稿 件 网 络 化 流 程 管 理 的 需 要 袁 并 实 现 各 类 查 询 及 绩 效 评 价 功 能 遥 各 位 作 者 可 以 登 录 该 系 统 投 稿 及 查 询 稿 件 处 理 状 况 遥 自 新 的 稿 件 管 理 系 统 启 用 之 日 起 袁 本 刊 既 往 使 用 的 投 稿 方 式 将 逐 渐 停 止 使 用 遥 操 作 步 骤 如 下 院 淤 浏 览 器 中 输 入 http 院 //www.cma.org.cn/ywzx/index.html 遥 于 网 站 注 册 渊 用 户 名 和 密 码 为 您 在 中 华 医 学 会 统 一 的 登 录 信 息 冤 遥 盂 申 请 成 为 本 刊 作 者 遥 榆 进 入 系 统 袁 点 击 左 菜 单 栏 中 的 揖 稿 件 远 程 管 理 系 统 铱 袁 相 应 的 功 能 显 示 在 下 方 遥 虞 点 击 野 作 者 投 稿 冶 袁 按 照 投 稿 要 求 填 写 内 容 遥 愚 点 击 野 投 稿 冶 袁 稿 件 投 给 当 前 杂 志 编 辑 部 遥 舆 点 击 野 暂 存 冶 袁 稿 件 进 入 揖 我 的 草 稿 铱 模 块 遥 余 作 者 还 可 以 在 系 统 中 进 行 稿 件 状 态 查 询 尧 与 编 辑 部 沟 通 尧 稿 件 退 修 后 的 修 改 尧 在 线 交 纳 稿 件 处 理 费 尧 版 面 费 等 操 作 遥 更 为 详 细 的 操 作 请 登 录 http 院 //www.cma.org.cn/ywzx/index.html 袁 下 载 野 投 稿 作 者 操 作 说 明 冶 遥 在 通 过 新 的 系 统 成 功 提 交 稿 件 并 获 得 稿 件 编 号 后 袁 请 作 者 登 录 http 院 //www.cma.org.cn/ywzx/index.html 袁 下 载 野 中 华 医 学 会 系 列 杂 志 论 文 投 送 介 绍 信 及 授 权 书 渊 中 文 版 冤 冶 袁 打 印 后 使 用 黑 色 笔 认 真 逐 项 填 写 并 盖 章 袁 然 后 连 同 审 稿 费 寄 到 本 刊 编 辑 部 袁 如 文 章 为 基 金 项 目 袁 请 将 基 金 证 明 复 印 件 一 起 寄 来 渊 邮 寄 地 址 院 哈 尔 滨 市 南 岗 区 保 健 路 157 号 袁 哈 尔 滨 医 科 大 学 叶 中 华 地 方 病 学 杂 志 曳 编 辑 部 收 袁 邮 政 编 码 院 150081 冤 遥 使 用 过 程 中 具 体 注 意 事 项 如 下 院 淤 第 1 次 使 用 本 系 统 进 行 投 稿 的 作 者 袁 必 须 先 注 册 袁 才 能 投 稿 遥 注 册 时 各 项 信 息 请 填 写 完 整 遥 作 者 自 己 设 定 用 户 名 和 密 码 袁 该 用 户 名 和 密 码 长 期 有 效 遥 于 已 注 册 过 的 作 者 袁 请 不 要 重 复 注 册 袁 否 则 将 导 致 查 询 稿 件 时 信 息 不 完 整 遥 如 果 遗 忘 密 码 袁 可 以 从 系 统 自 动 获 取 袁 系 统 将 自 动 把 您 的 账 号 信 息 发 送 到 您 注 册 时 填 写 的 邮 箱 中 遥 向 中 华 医 学 会 系 列 杂 志 中 不 同 杂 志 投 稿 时 无 须 重 复 注 册 袁 进 入 系 统 后 即 可 实 现 中 华 医 学 会 系 列 杂 志 间 的 切 换 遥 本 刊 的 审 稿 专 家 使 用 同 一 个 用 户 名 作 为 审 稿 人 进 行 稿 件 审 理 和 作 为 作 者 进 行 投 稿 遥 盂 作 者 投 稿 请 直 接 登 录 中 华 医 学 会 业 务 中 心 下 信 息 管 理 平 台 的 稿 件 远 程 管 理 系 统 袁 点 击 野 作 者 在 线 投 稿 冶 遥 榆 投 稿 成 功 后 袁 系 统 自 动 发 送 回 执 邮 件 遥 作 者 可 随 时 点 击 野 在 线 查 稿 冶 袁 获 知 该 稿 件 的 审 稿 情 况 尧 处 理 进 展 尧 审 稿 意 见 尧 终 审 结 论 等 曰 有 关 稿 件 处 理 的 相 关 结 果 编 辑 部 不 再 另 行 通 知 遥 本 刊 编 辑 部