氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

仅 供 体 外 研 究 使 用, 不 用 于 临 床 诊 断! SEA485Po 96T 氨 基 端 前 脑 钠 素 (NT-ProBNP) 检 测 试 剂 盒 ( 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 法 ) 适 用 生 物 : 猪 使 用 说 明 书 第 11 版 (2013 年 07 月 修 订 ) [ 预 期 应 用 ] 本 试 剂 盒 运 用 双 抗 体 夹 心 ELISA 法 定 量 测 定 猪 血 清 血 浆 或 其 它 相 关 生 物 液 体 中 NT-ProBNP 含 量 [ 试 剂 盒 内 容 ] 试 剂 名 称 数 量 试 剂 名 称 数 量 96 孔 板 ( 预 包 被 ) 1 96 孔 板 覆 膜 4 标 准 品 2 标 准 品 稀 释 液 1 20mL 检 测 溶 液 A 1 120μL 检 测 稀 释 液 A 1 12mL 检 测 溶 液 B 1 120μL 检 测 稀 释 液 B 1 12mL TMB 底 物 1 9mL 终 止 液 1 6mL 浓 洗 涤 液 (30 ) 1 20mL 使 用 说 明 书 1 [ 需 自 备 的 设 备 及 试 剂 ] 1 450±10nm 滤 光 片 的 酶 标 仪 ( 建 议 仪 器 使 用 前 提 前 预 热 ) 2 单 道 或 多 道 微 量 加 液 器 及 吸 头 3 稀 释 样 品 的 EP 管 4 蒸 馏 水 或 去 离 子 水 5 吸 水 纸 6 盛 放 洗 液 的 容 器 [ 试 剂 盒 的 储 存 及 有 效 期 ] 1 未 开 封 的 试 剂 盒 : 所 有 试 剂 均 按 试 剂 瓶 标 签 上 所 示 保 存 请 注 意, 收 到 试 剂 盒 后 请 尽 快 将 标 准 品 检 测 溶 液 A 检 测 溶 液 B 以 及 96 孔 板 保 存 于 -20 o C 2 使 用 后 的 试 剂 盒 : 剩 余 试 剂 仍 需 按 照 试 剂 瓶 标 签 所 示 的 温 度 保 存, 开 封 后 的 酶 标 板 要 加 干 燥 剂 后 密 封 保 存 于 -20 o C, 避 免 潮 湿 试 剂 盒 内 酶 标 条 可 拆 卸, 按 实 验 需 求 可 分 多 次 使 用 ; 使 用 后 的 剩 余 试 剂 盒 建 议 在 首 次 实 验 后 1 个 月 内 使 用 完 毕 产 品 过 期 时 间 以 盒 子 上 的 标 签 为 准, 保 质 期 内 所 有 组 分 都 确 保 是 稳 定 的 [ 标 本 的 采 集 与 保 存 ] 1 血 清 : 将 收 集 于 血 清 分 离 管 的 全 血 标 本 在 室 温 放 置 2 小 时 或 4 o C 过 夜, 然 后 1000 g 离 心 20 分 钟, 取 上 清 即 可, 或 将 上 清 置 于 -20 o C 或 -80 o C 保 存, 但 应 避 免 反 复 冻 融

2 血 浆 : 用 EDTA 或 肝 素 作 为 抗 凝 剂 采 集 标 本, 并 将 标 本 在 采 集 后 的 30 分 钟 内 于 2-8 o C 1000 g 离 心 15 分 钟, 取 上 清 即 可 检 测, 或 将 上 清 置 于 -20 o C 或 -80 o C 保 存, 但 应 避 免 反 复 冻 融 3 其 它 生 物 标 本 : 请 1000 g 离 心 20 分 钟, 取 上 清 即 可 检 测, 或 将 上 清 置 于 -20 o C 或 -80 o C 保 存, 但 应 避 免 反 复 冻 融 1 以 上 标 本 均 需 密 封 保 存,4 o C 保 存 应 小 于 1 周,-20 o C 不 应 超 过 1 个 月,-80 o C 不 应 超 过 2 个 月 2 标 本 溶 血 会 影 响 最 后 检 测 结 果, 因 此 溶 血 标 本 不 宜 进 行 此 项 检 测 3 标 本 使 用 前 应 缓 慢 均 衡 至 室 温, 不 应 加 热 使 之 融 解 [ 试 剂 准 备 ] 1 使 用 前 将 所 有 的 试 剂 和 标 本 缓 慢 均 衡 至 室 温 (18-25 o C), 试 剂 不 能 直 接 在 37 o C 溶 解 2 标 准 品 ( 冻 干 品 ): 每 瓶 标 准 品 加 入 标 准 品 稀 释 液 1mL, 盖 好 后 室 温 静 置 大 约 10 分 钟, 同 时 反 复 颠 倒 / 搓 动 以 助 溶 解, 其 浓 度 为 4,000pg/mL( 贮 液 ) 先 将 其 稀 释 为 1,000pg/mL( 标 准 曲 线 最 高 浓 度 ) 后, 再 准 备 7 个 稀 释 标 准 品 的 EP 管, 每 个 EP 管 中 加 入 500μL 的 标 准 品 稀 释 液, 如 图 所 示 依 次 倍 比 稀 释 成 1,000pg/mL, 500pg/mL, 250pg/mL, 125pg/mL, 62.5pg/mL, 31.2pg/mL, 15.6pg/mL, 标 准 品 稀 释 液 (0pg/mL) 直 接 作 为 空 白 孔 为 保 证 实 验 结 果 有 效 性, 每 次 实 验 请 使 用 新 的 标 准 品 溶 液 Tube 1 2 3 4 5 6 7 8 9 pg/ml 4,000 1,000 500 250 125 62.5 31.2 15.6 0 3 检 测 溶 液 A 及 检 测 溶 液 B:Detection A 及 Detection B 在 使 用 前 请 手 甩 几 下 或 少 时 离 心 处 理, 以 使 管 壁 或 瓶 盖 的 液 体 沉 积 到 管 底 临 用 前 分 别 以 检 测 稀 释 液 A 或 B1:100 稀 释 ( 如 :10μL 检 测 溶 液 A/990μL 检 测 稀 释 液 A), 充 分 混 匀, 稀 释 前 根 据 预 先 计 算 好 的 每 次 实 验 所 需 的 总 量 配 制 (100μL/ 孔 ), 实 际 配 制 时 应 多 配 制 0.1-0.2mL 4 浓 洗 涤 液 : 用 580mL 蒸 馏 水 或 去 离 子 水 将 20mL 浓 洗 涤 液 稀 释 至 600mL, 进 行 30 倍 稀 释 5 底 物 溶 液 : 请 用 灭 菌 的 移 液 器 吸 头 吸 取 所 需 体 积 的 TMB 至 另 一 干 净 容 器 中 使 用, 容 器 中 剩 余 的 底 物 应 予 丢 弃, 不 要 倒 回 TMB 瓶 中 1 标 准 品 的 稀 释 不 能 直 接 在 板 中 进 行 2 标 准 品 请 于 临 用 前 15 分 钟 内 配 制 该 标 准 品 只 能 使 用 一 次 3 标 准 品 检 测 溶 液 A 工 作 液 检 测 溶 液 B 工 作 液 请 使 用 相 应 的 稀 释 液 配 制, 不 能 混 淆 混 匀 时 要 轻 轻 充 分 混 匀, 避 免 起 泡 为 保 证 实 验 结 果 的 准 确 请 使 用 微 量 吸 管, 并 校 准 微 量 加 液 器 请 依 据 所 需 的 量 精 确 配 制, 尽 量 不 要 微 量 配 制 ( 如 吸 取 检 测 溶 液 A 时, 一 次 不 要 小 于 10μL), 以 避 免 造 成 浓 度 误 差 4 请 勿 重 复 使 用 已 经 稀 释 过 的 标 准 品 检 测 溶 液 A 工 作 液 和 检 测 溶 液 B 工 作 液 5 浓 洗 涤 液 中 如 有 结 晶 析 出, 请 先 温 育 至 室 温, 轻 轻 混 匀, 至 到 结 晶 完 全 溶 解 再 进 行 配 制

6 试 剂 盒 中 部 分 试 剂 为 储 存 液, 客 户 需 配 置 成 工 作 液 后 使 用, 在 配 置 过 程 中 如 因 纯 净 水 质 量 差 或 水 质 污 染, 以 及 实 验 中 所 用 耗 材 洁 净 度 差, 可 能 造 成 实 验 结 果 不 准 确, 甚 至 完 全 错 误, 请 使 用 双 蒸 水 [ 标 本 处 理 ] 1 本 公 司 只 对 试 剂 盒 本 身 负 责, 不 对 因 使 用 该 试 剂 盒 所 造 成 的 样 本 消 耗 负 责, 请 使 用 者 使 用 前 充 分 考 虑 到 样 本 的 可 能 使 用 量, 预 留 充 足 的 样 本 2 实 验 前 应 预 测 标 本 含 量, 如 果 标 本 浓 度 过 高, 应 对 标 本 进 行 稀 释, 使 稀 释 后 的 标 本 符 合 试 剂 盒 的 检 测 范 围, 计 算 时 再 乘 以 相 应 的 稀 释 倍 数 3 血 清 或 血 浆 标 本 推 荐 稀 释 大 约 10 倍, 如 : 稀 释 10 倍, 取 20μL 血 清 或 血 浆 加 入 180μL PBS 标 本 使 用 0.01mol/L 的 PBS 稀 释 (PH=7.0-7.2) 4 若 所 检 样 本 不 包 含 在 说 明 书 所 列 样 本 之 中, 建 议 进 行 预 实 验 验 证 其 有 效 性, 并 注 意 留 存 样 本 5 使 用 化 学 裂 解 液 制 备 的 组 织 匀 浆 或 细 胞 提 取 液 可 能 会 由 于 某 些 化 学 物 质 的 引 入 导 致 ELISA 实 验 结 果 偏 差 6 若 样 本 为 细 胞 培 养 上 清, 因 该 类 样 本 干 扰 因 素 较 多, 如 : 细 胞 状 态 细 胞 数 量 采 样 时 间 等, 所 以 可 能 存 在 检 测 不 出 的 情 况 7 某 些 天 然 蛋 白 或 重 组 蛋 白, 包 括 原 核 及 真 核 重 组 蛋 白, 可 能 因 为 与 本 产 品 所 使 用 的 检 测 抗 体 及 捕 获 抗 体 不 匹 配, 而 不 被 检 测 出 8 建 议 使 用 新 鲜 样 本, 保 存 时 间 过 长 可 能 会 存 在 蛋 白 降 解 或 变 性 导 致 实 验 结 果 偏 差 [ 操 作 步 骤 ] 1 加 样 : 分 别 设 标 准 孔 待 测 样 品 孔 空 白 孔 设 标 准 孔 7 孔, 依 次 加 入 100μL 不 同 浓 度 的 标 准 品 ( 见 试 剂 准 备 2) 空 白 孔 加 100μL( 见 试 剂 准 备 第 二 步 最 后 一 管 ), 余 孔 加 待 测 样 品 100μL, 酶 标 板 加 上 覆 膜,37 o C 温 育 2 小 时 2 弃 去 液 体, 甩 干, 不 用 洗 涤 3 每 孔 加 检 测 溶 液 A 工 作 液 100μL( 临 用 前 配 制 ), 酶 标 板 加 上 覆 膜,37 o C 温 育 1 小 时 4 弃 去 孔 内 液 体, 每 孔 用 350μL 的 洗 涤 液 洗 涤, 浸 泡 1-2 分 钟, 吸 去 ( 不 可 触 及 板 壁 ) 或 甩 掉 酶 标 板 内 的 液 体, 在 实 验 台 上 铺 垫 几 层 吸 水 纸, 酶 标 板 朝 下 用 力 拍 几 次 ( 也 可 轻 拍 将 孔 内 液 体 拍 干 ), 重 复 洗 板 3 次 最 后 一 次 洗 涤 后, 要 把 孔 内 的 洗 涤 液 完 全 甩 干 自 动 洗 板 机 亦 可 5 每 孔 加 检 测 溶 液 B 工 作 液 ( 临 用 前 配 制 )100μL, 加 上 覆 膜,37 o C 温 育 30 分 钟 6 弃 去 孔 内 液 体, 甩 干, 洗 板 5 次, 方 法 同 步 骤 4 7 每 孔 加 底 物 溶 液 90μL, 酶 标 板 加 上 覆 膜,37 o C 避 光 显 色 ( 反 应 时 间 控 制 在 15-25 分 钟, 不 要 超 过 30 分 钟 当 标 准 孔 的 前 3-4 孔 有 明 显 的 梯 度 蓝 色, 后 3-4 孔 梯 度 不 明 显 时, 即 可 终 止 ) 8 每 孔 加 终 止 溶 液 50μL, 终 止 反 应, 此 时 蓝 色 立 转 黄 色 终 止 液 的 加 入 顺 序 应 尽 量 与 底 物 溶 液 的 加 入 顺 序 相 同 如 出 现 颜 色 不 匀 一, 请 轻 轻 晃 动 酶 标 板 以 使 溶 液 混 合 均 匀 9 在 确 保 酶 标 板 底 无 水 滴 及 孔 内 无 气 泡 后, 立 即 用 酶 标 仪 在 450nm 波 长 测 量 各 孔 的 光 密 度 (O.D. 值 ) 1 试 剂 准 备 : 准 备 一 次 实 验 所 需 要 的 酶 标 条, 其 它 的 可 从 微 孔 板 上 拆 下, 密 封, 按 照 说 明 书 要 求 保 存, 以 备 下 次 使 用 2 加 样 : 实 验 操 作 中 请 使 用 一 次 性 的 吸 头, 避 免 交 叉 污 染 加 样 时 注 意 不 要 有 气 泡, 将 样 品 加 于 酶 标 板 底 部, 尽 量 不 触 及 孔 壁, 轻 轻 晃 动 混 匀 加 样 或 加 试 剂 时, 第 一 个 孔 与 最 后 一 个 孔 加 样 之 间 的 时 间 间 隔 如 果 太 大, 将 会 导 致 不 同 的 预 温 育 时 间, 从 而 明 显 地 影 响 到 测 量 值 的 准 确 性 及 重 复 性 因 此, 一 次 加 样 时 间 ( 包 括 标 准 品 及 所 有 样 品 ) 最 好 控 制 在 10 分 钟 内 推 荐 设 置 复 孔 进 行 实 验

3 温 育 : 为 防 止 样 品 蒸 发, 实 验 时 请 将 加 上 盖 或 覆 膜 的 酶 标 板 置 于 湿 盒 内, 以 避 免 液 体 蒸 发, 洗 板 后 应 尽 快 进 行 下 步 操 作, 任 何 时 侯 都 应 避 免 酶 标 板 处 于 干 燥 状 态, 同 时 应 严 格 遵 守 给 定 的 温 育 时 间 和 温 度 4 洗 涤 : 充 分 的 洗 涤 非 常 重 要, 在 每 次 洗 涤 过 程 中, 都 要 将 洗 涤 液 完 全 甩 干 洗 涤 过 程 中 反 应 孔 中 残 留 的 洗 涤 液 应 在 滤 纸 上 拍 干, 勿 将 滤 纸 直 接 放 入 反 应 孔 中 吸 水, 同 时 要 消 除 板 底 残 留 的 液 体 和 手 指 印, 避 免 影 响 最 后 的 酶 标 仪 读 数 如 果 有 自 动 洗 板 机, 应 在 熟 练 使 用 后 再 用 到 正 式 实 验 过 程 中 5 反 应 时 间 的 控 制 : 加 入 底 物 后 请 定 时 观 察 反 应 孔 的 颜 色 变 化 ( 比 如, 每 隔 10 分 钟 观 察 一 次 ), 如 颜 色 较 深, 请 提 前 加 入 终 止 液 终 止 反 应, 避 免 反 应 过 强 从 而 影 响 酶 标 仪 光 密 度 读 数 6 底 物 : 底 物 请 避 光 保 存, 在 储 存 和 温 育 时 避 免 强 光 直 接 照 射 7 如 果 实 验 室 内 湿 度 低 于 60%, 推 荐 使 用 加 湿 器 提 高 湿 度 水 平 [ 实 验 原 理 ] 将 NT-ProBNP 抗 体 包 被 于 96 孔 微 孔 板 中, 制 成 固 相 载 体, 向 微 孔 中 分 别 加 入 标 准 品 或 标 本, 其 中 的 NT-ProBNP 与 连 接 于 固 相 载 体 上 的 抗 体 结 合, 然 后 加 入 生 物 素 化 的 NT-ProBNP 抗 体, 将 未 结 合 的 生 物 素 化 抗 体 洗 净 后, 加 入 HRP 标 记 的 亲 和 素, 再 次 彻 底 洗 涤 后 加 入 TMB 底 物 显 色 TMB 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色, 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 最 终 的 黄 色 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 NT-ProBNP 呈 正 相 关 用 酶 标 仪 在 450nm 波 长 下 测 定 吸 光 度 (O.D. 值 ), 计 算 样 品 浓 度 [ 计 算 ] 各 标 准 品 及 样 本 O.D. 值 扣 除 空 白 孔 O.D. 值 后 作 图 ( 七 点 图 ), 如 设 置 复 孔, 则 应 取 其 平 均 值 计 算 以 标 准 品 的 浓 度 为 纵 坐 标 ( 或 对 数 坐 标 ),O.D. 值 为 横 坐 标 ( 或 对 数 坐 标 ), 绘 出 标 准 曲 线 ( 最 佳 方 程 式 应 依 回 归 方 程 计 算 的 R 2 值 来 定, 以 R 2 值 越 趋 近 于 1 为 好 ) 推 荐 使 用 专 业 制 作 曲 线 软 件 进 行 分 析, 如 curve expert 1.30, 根 据 样 品 O.D. 值, 由 标 准 曲 线 查 出 相 应 的 浓 度, 乘 以 稀 释 倍 数 ; 或 用 标 准 物 的 浓 度 与 O.D. 值 计 算 出 标 准 曲 线 的 回 归 方 程 式, 将 样 品 的 O.D. 值 代 入 方 程 式, 计 算 出 样 品 浓 度, 再 乘 以 稀 释 倍 数, 即 为 样 品 的 实 际 浓 度 [ 典 型 数 据 ] 为 了 便 于 计 算, 尽 管 浓 度 为 自 变 量 而 O.D. 值 为 因 变 量, 我 们 绘 图 时 仍 采 用 标 准 品 的 O.D. 值 作 为 横 坐 标 (X 轴 ), 标 准 品 的 浓 度 为 纵 坐 标 (Y 轴 ) 同 时 为 了 试 验 结 果 的 直 观 性, 图 中 提 供 的 是 原 始 数 据 而 非 对 数 值 推 荐 使 用 对 数 值 建 立 标 准 曲 线 图 由 于 实 验 操 作 条 件 的 不 同 ( 如 操 作 者 移 液 技 术 洗 板 技 术 和 温 度 条 件 等 ), 标 准 曲 线 的 O.D. 值 会 有 所 差 异 所 提 供 的 标 准 曲 线 仅 供 参 考, 实 验 者 需 要 根 据 自 已 的 实 验 建 立 标 准 曲 线 猪 氨 基 端 前 脑 钠 素 (NT-ProBNP) 检 测 试 剂 盒 标 准 曲 线

[ 检 测 范 围 ] 15.6pg/mL-1,000pg/mL [ 最 低 检 测 限 ] 6.2pg/mL 此 值 为 20 个 空 白 样 品 ( 即 标 准 品 稀 释 液 ) 测 定 的 平 均 值 加 二 倍 标 准 差 所 对 应 的 浓 度 [ 特 异 性 ] 本 试 剂 盒 用 于 检 测 NT-ProBNP, 经 检 测 与 其 它 相 似 物 质 无 明 显 交 叉 反 应 由 于 受 到 技 术 及 样 本 来 源 的 限 制, 不 可 能 完 成 对 所 有 相 关 或 相 似 物 质 交 叉 反 应 检 测, 因 此 本 试 剂 盒 有 可 能 与 未 经 检 测 的 其 它 物 质 有 交 叉 反 应 [ 回 收 率 ] 分 别 于 定 值 血 清 及 血 浆 样 本 中 加 入 一 定 量 的 NT-ProBNP( 加 标 样 品 ), 重 复 测 定 并 计 算 其 均 值, 回 收 率 为 测 定 值 与 理 论 值 的 比 率 样 本 回 收 率 范 围 (%) 平 均 回 收 率 (%) 血 清 (n=5) 79-98 93 EDTA 血 浆 (n=5) 90-102 96 肝 素 血 浆 (n=5) 83-95 89 [ 线 性 ] 在 定 值 血 清 及 血 浆 样 本 内 加 入 适 量 的 NT-ProBNP, 并 倍 比 稀 释 成 1:2,1:4,1:8,1:16 的 待 测 样 本, 线 性 范 围 即 为 稀 释 后 样 本 中 NT-ProBNP 含 量 的 测 定 值 与 理 论 值 的 比 率 样 本 1:2 1:4 1:8 1:16 血 清 (n=5) 82-91% 90-101% 87-103% 79-95% EDTA 血 浆 (n=5) 88-102% 89-96% 78-98% 81-104% 肝 素 血 浆 (n=5) 92-105% 83-97% 84-94% 86-99% [ 精 密 度 ] 精 密 度 用 样 品 测 定 值 的 变 异 系 数 CV 表 示 CV(%) = SD/mean 100 批 内 差 : 取 同 批 次 试 剂 盒 对 低 中 高 值 定 值 样 本 进 行 定 量 检 测, 每 份 样 本 连 续 测 定 20 次, 分 别 计 算 不 同 浓 度 样 本 的 平 均 值 及 SD 值 批 间 差 : 选 取 3 个 不 同 批 次 的 试 剂 盒 分 别 对 低 中 高 值 定 值 样 本 进 行 定 量 测 定, 每 个 样 本 使 用 同 一 试 剂 盒 重 复 测 定 8 次, 分 别 计 算 不 同 浓 度 样 本 的 平 均 值 及 SD 值 批 内 差 : CV<10% 批 间 差 : CV<12% [ 稳 定 性 ] 经 测 定, 试 剂 盒 在 有 效 期 内 按 推 荐 温 度 保 存, 其 活 性 降 低 率 小 于 5% 为 减 小 外 部 因 素 对 试 剂 盒 破 坏 前 后 检 测 值 的 影 响, 实 验 室 的 环 境 条 件 需 尽 量 保 持 一 致, 尤 其 是 实 验 室 内 温 度 湿 度 及 温 育 条 件 其 次 由 同 一 实 验 员 来 进 行 操 作 可 减 少 人 为 误 差

[ 实 验 流 程 ] 1 实 验 前 标 准 品 试 剂 及 样 本 的 准 备 ; 2 加 样 ( 标 准 品 及 样 本 )100μL,37 o C 孵 育 2 小 时 ; 3 吸 弃, 加 检 测 溶 液 A100μL,37 o C 孵 育 1 小 时 ; 4 洗 板 3 次 ; 5 加 检 测 溶 液 B100μL,37 o C 孵 育 30 分 钟 ; 6 洗 板 5 次 ; 7 加 TMB 底 物 90μL,37 o C 孵 育 15-25 分 钟 ; 8 加 终 止 液 50μL, 立 即 450nm 读 数 [ 说 明 ] 1 由 于 现 有 条 件 及 科 学 技 术 水 平 尚 不 能 对 所 有 供 货 商 提 供 的 所 有 原 料 进 行 全 面 的 鉴 定 与 分 析, 本 产 品 可 能 存 在 一 定 的 质 量 技 术 风 险 2 最 终 的 实 验 结 果 与 试 剂 的 有 效 性 实 验 者 的 相 关 操 作 以 及 当 时 的 实 验 环 境 密 切 相 关, 请 务 必 准 备 充 足 的 标 本 备 份 3 不 同 批 次 的 同 一 产 品 可 能 会 有 少 许 差 别, 如 : 检 测 限 灵 敏 度 以 及 显 色 时 间 等, 请 依 据 试 剂 盒 内 说 明 书 进 行 实 验 操 作, 网 站 电 子 版 说 明 书 仅 作 参 考 4 只 有 全 部 使 用 本 试 剂 盒 配 套 试 剂 才 能 保 证 检 测 效 果, 不 能 混 用 其 他 制 造 商 的 产 品 只 有 严 格 遵 守 本 试 剂 盒 的 实 验 说 明 才 会 得 到 最 佳 的 检 测 结 果 5 在 储 存 及 温 育 过 程 中 避 免 将 试 剂 暴 露 在 强 光 中 所 有 试 剂 瓶 盖 须 盖 紧 以 防 止 蒸 发 和 微 生 物 的 污 染, 因 为 蛋 白 水 解 酶 的 干 扰 将 导 致 出 现 错 误 的 结 果 6 刚 开 启 的 酶 联 板 孔 中 可 能 会 有 少 许 水 样 物 质, 此 为 正 常 现 象, 不 会 对 实 验 结 果 造 成 任 何 影 响 请 勿 提 前 将 酶 标 板 从 包 装 袋 里 拿 出 7 由 于 操 作 者 不 熟 练 操 作 失 误 或 读 数 仪 程 序 选 用 错 误 等 有 可 能 会 导 致 错 误 结 果 的 产 生 请 使 用 者 使 用 该 产 品 前 仔 细 阅 读 说 明 书, 调 试 好 酶 标 仪, 请 使 用 配 备 有 450±10nm 滤 光 片 的 酶 标 仪, 且 该 酶 标 仪 测 量 范 围 在 0.001-3.000 O.D. 或 以 上 8 同 一 使 用 者 在 使 用 同 一 产 品 时, 如 不 同 时 间 订 购, 也 可 能 会 因 不 同 批 次 的 少 量 差 异 产 生 不 同 结 果, 因 此 建 议 使 用 者 在 每 次 使 用 前 均 进 行 预 实 验 9 试 剂 盒 在 出 厂 前 均 经 过 严 格 检 测, 但 由 于 运 输 条 件 及 各 实 验 室 条 件 差 异, 可 能 会 造 成 实 验 结 果 与 出 厂 结 果 不 一 致 或 不 同 批 次 试 剂 盒 批 间 差 大 的 情 况, 对 于 这 种 情 况 会 酌 情 处 理 10 本 试 剂 盒 未 与 其 他 厂 家 同 类 试 剂 盒 或 不 同 方 法 检 测 同 一 目 的 蛋 白 的 产 品 做 对 比, 平 行 检 测 可 能 会 存 在 检 测 结 果 不 一 致 的 情 况 11 本 操 作 说 明 同 样 适 用 于 48T 试 剂 盒, 但 48T 试 剂 盒 所 有 试 剂 减 半 [ 警 告 ] 本 试 剂 盒 中 使 用 了 稀 硫 酸 作 为 终 止 液, 其 具 有 轻 微 腐 蚀 性, 使 用 时 应 避 免 接 触 衣 物 或 眼 手 等 皮 肤 暴 露 部 位

[ 问 题 解 答 ] 问 题 可 能 原 因 解 决 方 案 标 准 品 准 备 不 正 确 进 行 正 确 的 标 准 品 梯 度 稀 释 标 准 曲 线 差 吸 取 及 洗 涤 不 充 分 充 分 的 吸 取 及 洗 涤 移 液 不 精 确 检 查 和 校 正 移 液 器 洗 涤 不 充 分 按 说 明 书 要 求 充 分 洗 涤 和 浸 泡 精 密 度 低 O.D 值 低 样 本 值 混 匀 不 充 分 和 吸 取 试 剂 不 足 充 分 混 匀 和 吸 取 试 剂 重 复 利 用 吸 头 容 器 和 覆 膜 使 用 加 样 器 要 更 换 新 的 吸 头 使 用 新 的 容 器 和 覆 膜 加 样 不 精 确 检 查 和 校 正 移 液 器 每 孔 加 的 试 剂 量 不 精 确 校 正 移 液 器, 精 确 加 入 试 剂 温 育 时 间 不 正 确 保 证 充 足 的 温 育 时 间 温 育 温 度 不 正 确 试 剂 要 平 衡 至 室 温 并 保 证 准 确 的 温 育 温 度 酶 标 记 物 或 底 物 失 效 通 过 混 合 酶 标 记 物 和 底 物, 颜 色 应 迅 速 显 现 来 检 查 没 有 加 入 终 止 液 按 照 说 明 书 实 验 操 作 步 骤 加 入 终 止 液 超 出 读 数 时 间 读 数 在 说 明 书 推 荐 的 读 数 时 间 内 读 数 不 正 确 的 样 本 储 存 方 式 正 确 储 存 样 本, 使 用 新 鲜 样 本 进 行 实 验 不 正 确 的 样 本 收 集 和 处 理 方 法 采 取 正 确 的 样 本 收 集 和 处 理 方 法 待 测 物 质 在 样 本 中 含 量 低 使 用 新 鲜 样 本, 重 复 实 验