DSL Non Extrac tion IGF-I (I RMA)

DSL-2800 非 提 取 胰 岛 素 样 生 长 因 子 -1 免 疫 放 射 法 天 津 市 协 和 医 药 科 技 有 限 公 司 免 费 咨 询 热 线 :800-8180100 Ⅰ. 用 途 : DSL-2800 活 性 非 提 取 胰 岛 素 样 生 长 因 子 -1(IGF-I) 包 被 管 放 免 试 剂 盒 为 血 清 或 EDTA 血 浆 中 的 IGF-I 的 定 量 测 量 提 供 材 料 本 文 对 于 与 生 长 发 育 相 关 的 紊 乱 造 成 的 疾 病 的 体 外 诊 断 性 应 用 将 提 供 依 据 Ⅱ. 简 介 : 胰 岛 素 样 生 长 因 子 I(IGF I) 是 一 种 7.6kDa,70 个 氨 基 酸 的 小 肽, 介 导 生 长 激 素 (GH) 的 作 用 IGF I 作 为 激 素 原 合 成, 包 含 A,C,B,D 和 E 链 成 熟 的 IGF-1 包 含 A,C,B 链, 与 IGF-2 和 胰 岛 素 的 结 构 相 似 IGF-1 由 肝 和 其 他 一 些 组 织 分 泌, 被 认 为 对 合 成 部 位 或 其 附 近 有 促 有 丝 分 裂 和 促 进 新 陈 代 谢 的 作 用, 称 之 为 IGF-I 的 旁 分 泌 作 用 IGF-I 也 在 周 围 血 循 环 中 出 现, 通 常 是 一 种 高 分 子 复 合 物, 与 IGF 结 合 蛋 白 -3(IGFBP-3) 和 一 不 稳 定 酸 亚 单 位 (ALS) 结 合 小 比 例 的 IGF-1 则 和 其 他 IGF 结 合 蛋 白 相 连 循 环 中 未 结 合 的 IGF-1 的 量 估 计 <5% 血 浆 IGF-1 的 水 平 依 赖 于 GH 水 平 及 其 他 一 些 因 素, 包 括 适 宜 的 营 养 血 浆 IGF-1 的 水 平 也 可 以 阻 止 垂 体 GH 的 合 成, 可 是, 反 馈 机 制 尚 未 完 全 阐 明 在 人 类, 血 浆 IGF-1 水 平 在 胚 胎 期 和 新 生 期 是 低 的, 在 儿 童 期 逐 步 上 升, 在 青 春 期 中 达 高 峰, 在 整 个 成 年 期 逐 步 下 降 平 均 血 浆 IGF-1 水 平 在 各 年 龄 组 均 以 妇 女 较 高 妇 女 在 孕 期 IGF-1 的 水 平 上 升 IGF-1 在 尿 中 也 可 检 测 到 与 IGF 结 合 蛋 白 结 合 后 血 浆 IGF-1 水 平 稳 定 无 昼 夜 变 化 血 浆 IGF-1 水 平 低 见 于 GH 缺 乏, 营 养 不 良,GH 受 体 缺 乏 综 合 征 (Laron 侏 儒 ) 及 各 种 慢 性 病 异 常 低 水 平 的 IGF-1 是 GH 缺 乏 的 诊 断 指 标, 虽 然 大 多 数 的 GH 缺 乏 的 儿 童 血 浆 IGF-1 水 平 可 能 在 正 常 范 围, 而 正 常 的 矮 个 子 的 儿 童 可 能 有 IGF-1 水 平 降 低 血 浆 IGF-1 水 平 还 可 以 用 于 监 测 短 期 或 长 期 的 GH 处 理 后 的 反 应 GH 过 多 时, 异 常 IGF-1 检 出 可 作 为 诊 断 工 具 和 监 测 手 段 IGF-1 是 GH 作 用 于 软 骨 最 初 的 传 递 介 质 注 射 外 源 性 GH 后 能 提 高 内 源 性 GH 的 活 性 当 矮 小 儿 童 GH 正 常 而 IGF-1 基 础 值 低 时, 如 注 射 外 源 性 GH, 则 IGF-1 升 高, 同 时 生 长 率 增 加, 可 认 为 该 矮 小 儿 童 有 变 异 的 生 长 激 素 分 子 当 矮 小 儿 童 GH 基 础 值 升 高 而 IGF-1 值 降 低 时, 用 外 源 性 GH 不 能 使 IGF-1 值 升 高, 也 不 显 示 生 长 反 应, 可 能 该 矮 小 儿 童 为 生 长 激 素 受 体 缺 陷, 高 水 平 GH 是 由 于 缺 乏 IGF-1 介 导 的 负 反 馈 作 用 对 血 浆 IGF-1 的 检 测 由 于 IGF 结 合 蛋 白 的 存 在 而 显 得 复 杂, 后 者 会 使 IGF-1 因 反 应 而 被 影 响 众 多 的 实 验 都 设 计 为 在 检 测 前 分 离 IGF-1 和 IGF 结 合 蛋 白 在 酸 中 进 行 凝 胶 色 谱 层 析 法 是 效 果 最 好 的 一 种, 但 它 不 能 用 于 常 规 检 测 用 甲 醇 或 丙 酮 沉 淀 IGF 片 段 后 再 酸 化 所 得 结 果 与 前 者 近 似 以 上 标 本 处 理 过 程 均 费 时 费 力 因 此,DSL 开 发 了 一 种 简 单 的 非 提 取 的 IGF-1 免 疫 放 射 方 法, 具 有 高 度 的 敏 感 性 和 特 异 性 Ⅲ. 试 验 原 理 : 本 试 验 采 用 最 先 由 Miles 提 出 的 双 位 点 放 免 法 (IRMA) 原 理 DSL-2800 IGF-I IRMA 是 一 种 非 竞 争 性 检 测 法, 此 法 中 被 测 物 介 于 两 个 抗 体 之 间, 形 成 三 明 治 夹 心 第 一 个 抗 体 被 固 定 于 试 管 内 壁 另 一 抗 体 被 放 射 性 元 素 所 标 记 以 便 于 检 测 待 测 物 存 在 于 患 者 试 样 中, 标 准 品 及 质 控 品 与 两 个 抗 体 相 连 而 形 成 三 明 治 的 络 合 物 未 结 合 部 分 因 转 移 和 刷 洗 试 管 而 除 掉 Ⅳ. 试 剂 : 1

DSL-2800 活 性 IGF-I 包 被 试 管 IRMA 药 盒, 包 括 可 供 100 支 试 管 使 用 的 试 剂, 每 盒 含 : A. IGF-I 标 准 品 :( 经 真 空 冷 冻 干 燥 ) 6 支 小 瓶, 以 A-F 标 记 在 含 有 非 汞 防 腐 剂 的 蛋 白 减 缓 冲 液 中 配 制 近 似 浓 度 为 0,8,30,100, 300 和 1000 ng/ml 的 系 列 标 准 液 准 确 浓 度 参 见 小 瓶 上 的 标 签 在 失 效 期 前 于 2~8 密 封 保 存 用 1ml 去 离 子 水 复 溶, 在 使 用 过 程 中, 贮 存 在 -20 直 到 4 周 标 准 品 的 折 合 含 量, 考 虑 到 样 品 稀 释 问 题 已 用 稀 释 倍 数 51 校 正 绝 对 浓 度 范 围 近 似 0.16~19.6 ng/ml 注 :DSL IGF-I 来 自 重 组 人 IGF-I 并 经 世 界 卫 生 组 织 (WHO) 专 为 IGF-I 免 疫 法 测 定 提 供 的 国 际 参 考 试 剂 所 校 正 B. 抗 -IGF-I[I-125] 试 剂 : 1 瓶 22 ml, 内 含 以 叠 氮 化 钠 为 防 腐 剂 的 蛋 白 减 缓 冲 溶 液 配 制 而 成 的 浓 度 <10uCi(370KBq) 的 [I- 125]- 标 记 的 山 羊 抗 -IGF-I( 多 克 隆 抗 体 ) 贮 存 于 2~8 C. 以 抗 -IGF-I 包 被 的 试 管 :( 浅 绿 色 金 属 边 ) 含 4 包, 每 包 25 支 塑 料 试 管 试 管 内 壁 固 定 有 抗 -IGF-I( 小 鼠 单 抗 ) 免 疫 球 蛋 白 将 试 管 于 原 包 装 中 贮 存 并 将 其 重 新 密 封 隔 潮 贮 存 于 2~8 干 燥 处 注 : 用 抗 体 包 被 过 程 中 有 时 可 有 晶 体 附 着 于 试 管 壁 内, 但 不 影 响 检 测 D. 样 品 稀 释 剂 : 1 瓶 105 ml, 含 以 叠 氮 化 钠 为 防 腐 剂 的 样 品 缓 冲 液 贮 存 于 2~8 温 度 下 E. 洗 涤 液 : 1 瓶 60 ml, 含 以 非 离 子 型 表 面 活 性 剂 的 缓 冲 溶 液 室 温 下 保 存 F. IGF-I 质 控 : Ⅰ 和 Ⅱ 两 瓶, 含 有 以 非 汞 防 腐 剂 的 蛋 白 减 缓 冲 溶 液 配 制 而 成 的 高 低 两 个 浓 度 的 IGF-I, 控 制 范 围 见 标 签, 于 2~8 下 密 封 贮 存 重 新 使 用 时 用 1 ml 去 离 子 水 复 融, 于 -20 贮 存 4 周 注 : 所 有 试 剂 及 样 品 必 须 达 到 室 温 并 于 使 用 前 轻 轻 振 摇 混 匀 Ⅴ. 预 防 措 施 : 适 用 于 体 外 诊 断 性 应 用 放 射 性 物 质 - 禁 止 人 或 动 物 内 用 或 外 用 放 射 性 物 质 只 能 由 内 科 医 生 临 床 实 验 室 或 医 院 用 于 体 外 检 测, 不 可 内 服 或 外 用 给 药, 由 此 可 对 人 或 动 物 产 生 放 射 性 在 处 理 放 射 性 物 质 时 应 注 意 以 下 预 防 措 施 : 将 放 射 性 物 质 贮 存 于 标 记 区 域 将 放 射 性 物 质 所 在 之 处 严 禁 进 食 饮 水 或 使 用 化 妆 品 禁 止 用 嘴 吸 气 接 触 放 射 性 物 质 要 戴 手 套, 使 用 后 彻 底 洗 手 用 可 处 理 的 吸 收 纸 覆 盖 工 作 区 及 时 彻 底 清 扫 所 有 碎 屑, 并 处 理 作 为 放 射 性 废 物 的 被 污 染 物 质 将 液 态 的 放 射 性 废 物 排 入 当 地 的 公 卫 污 水 系 统 注 意 : 潜 在 的 生 物 危 害 性 材 料 : 该 试 剂 盒 可 能 含 有 由 人 血 清 或 血 浆 制 成 的 试 剂 所 用 血 清 或 血 浆 已 采 用 FDA 认 可 的 方 法 检 测 过 并 已 发 现 对 HIV-1/2 抗 体 无 放 射 性, 对 HCV 及 HBsAg 也 无 放 射 性 由 于 没 有 一 种 方 法 能 够 确 保 完 全 不 含 HIV-1/2 HCV HBsAg 或 其 它 具 有 感 染 性 的 因 素, 所 以 这 些 试 剂 应 经 生 物 安 全 性 标 准 2 来 进 行 处 理 这 一 标 准 曾 在 1998 年 的 疾 病 控 制 中 心 / 国 家 健 康 研 究 院 的 微 生 物 及 生 物 医 学 实 验 室 中 的 生 物 安 全 性 手 册 中 介 绍, 并 被 推 荐 用 于 任 何 具 有 潜 在 感 染 性 的 人 血 清 或 血 浆 标 本 警 惕 化 学 危 害 : 2

正 如 Ⅳ 所 述, 一 些 试 剂 中 含 有 叠 氮 化 钠 防 腐 剂, 这 样 的 试 剂 中 叠 氮 化 钠 含 量 0.09%, 它 可 与 铅 铜 等 反 应 形 成 具 有 爆 炸 性 的 叠 氮 化 金 属 化 合 物 故 需 用 大 量 水 冲 洗 处 理 非 放 射 性 物 质 Ⅵ. 标 本 的 收 集 与 准 备 : 采 用 血 清 或 EDTA 血 浆 并 注 意 静 脉 穿 刺 的 有 关 预 防 措 施 标 本 可 于 2~8 贮 存 24 小 时, 也 可 在 -20 下 保 存 30 天 避 免 反 复 冻 溶 在 室 内 研 究 中,23 个 血 清 和 EDTA 血 浆 样 品 使 用 DSL-2800 比 较 结 果 如 下 : 样 品 范 围 :56-295ng/ml [ 血 浆 ]=0.85[ 血 清 ]+2.40,γ=0.98 不 要 使 用 明 显 溶 血 或 高 脂 血 症 的 标 本 冷 冻 样 品 应 在 使 用 前 旋 转 或 倒 转 以 混 匀 血 清 和 EDTA 血 浆 应 在 使 用 前 按 1 :50 比 例 用 样 品 稀 释 剂 稀 释, 见 实 验 部 分 Ⅶ. 注 意 事 项 : 透 彻 理 解 本 篇 插 叙 对 于 成 功 使 用 该 产 品 是 很 有 必 要 的 应 用 精 密 的 实 验 技 术 及 正 确 运 用 本 文 要 求 才 可 得 到 可 靠 结 果 每 种 检 测 必 须 有 一 条 标 准 曲 线 对 于 单 独 检 测 不 要 将 许 多 成 分 混 在 一 起 不 要 使 用 过 期 产 品 检 测 试 剂 从 冰 箱 取 出 后, 达 到 室 温 后 再 进 行 量 取 使 用 后 应 按 照 试 剂 部 分 的 要 求 贮 存 标 准 品 及 质 控 品 在 使 用 前 应 混 匀, 混 匀 可 利 用 倒 转 或 旋 动, 而 不 要 涡 旋 要 确 保 每 支 检 测 试 管 中 的 试 剂 的 绝 对 均 匀, 彻 底 地 振 摇 及 涡 旋 是 必 要 的 质 控 品 的 测 量 值 不 准 确 可 能 是 由 于 操 作 不 精 确 样 品 处 理 不 当 或 试 剂 变 质 引 起 的 未 充 分 洗 涤 试 管 及 转 移 可 造 成 重 复 性 差 甚 至 错 误 的 结 果 Ⅷ. 实 验 步 骤 : A. 供 试 材 料 :( 见 表 ) DSL-2800 活 性 非 提 取 IGF-I 包 被 试 管 放 免 试 剂 盒 材 料 数 量 编 号 IGF-I 标 准 品 A 1 小 瓶 2801 IGF-I 标 准 品 B 1 小 瓶 2802 IGF-I 标 准 品 C 1 小 瓶 2803 IGF-I 标 准 品 D 1 小 瓶 2804 IGF-I 标 准 品 E 1 小 瓶 2805 IGF-I 标 准 品 F 1 小 瓶 2806 抗 -IGF-I- 包 被 试 管 4 包 2810 抗 IGF-I [I- 125 ] 试 剂 1 小 瓶 2820 样 品 稀 释 剂 A 1 小 瓶 2850 洗 涤 浓 缩 液 B 1 小 瓶 10-9730 IGF-I 质 控 品 Ⅰ 1 小 瓶 2851 IGF-I 质 控 品 Ⅱ 1 小 瓶 2852 B. 自 备 材 料 : 12 75mm 塑 料 或 玻 璃 试 管, 总 计 数 用 ; 12 75mm 试 管 所 用 试 管 架 ; 去 离 子 水 ; 20ul 及 50ul 移 液 管 ; 200ul 及 3ml 刻 度 吸 管 ; 涡 旋 混 合 器 ; 3

倾 注 用 海 绵 试 管 架 或 类 似 装 置 ; 擦 试 试 管 用 的 吸 收 性 材 料 ; 10-6 数 量 级 计 数 器 ; 对 数 坐 标 纸 或 计 算 机 IRMA 数 据 分 析 程 C. 血 清 或 EDTA 血 浆 样 品 的 予 稀 释 : ㈠. 用 便 于 于 处 理 的 玻 璃 试 管 标 记 患 者 的 血 样, ㈡. 吸 取 20ul 样 品 加 入 被 标 记 的 试 管 中, ㈢. 加 入 1ml 稀 释 剂, 涡 旋 并 在 室 温 下 静 置 20-30 分 钟 ( 约 25 ) D. 试 剂 制 备 : 洗 涤 浓 缩 液 : 取 60ml 置 于 干 净 容 器 中 并 加 1500ml 去 离 子 水, 于 室 温 下 密 封 可 保 存 2 周 E. 检 测 步 骤 : 所 有 试 剂 使 用 前 均 应 达 到 室 温 并 混 匀 标 准 品 质 控 品 及 未 知 物 一 式 两 份 1. 标 记 两 支 普 通 ( 未 包 被 ) 试 管 作 为 总 计 管 标 记 包 被 试 管, 一 式 两 份 未 用 试 管 应 立 即 封 好, 放 回 冰 箱 于 2-8 贮 存 2. 吸 取 50ul 标 准 品 质 控 品 及 未 知 物, 移 入 相 应 试 管 底 部 3. 立 即 向 所 有 试 管 中 加 入 200ul 抗 -IGF-I[I 125 ] 试 剂 4. 轻 轻 振 摇 试 管 架 混 合, 在 室 温 下 将 试 管 放 于 振 动 器 上, 转 速 180γpm 5. 倾 注 除 总 计 数 管 外 的 所 有 试 管, 同 时 利 用 海 绵 试 管 架 将 其 倒 入 放 射 性 废 物 接 受 器 中 在 吸 收 材 料 上 轻 击 试 管 加 速 液 体 流 出 并 控 1~2 分 钟 以 控 干 吸 收 材 料 轻 拭 试 管 以 去 除 附 着 于 管 壁 的 水 珠, 然 后 将 试 管 直 立 如 水 珠 未 完 全 拭 干 会 影 响 测 定 重 复 性 差 甚 至 出 现 错 误 结 果 6. 除 总 计 管 中, 在 各 试 管 中 加 入 3ml 清 洗 液, 并 倾 注 完 全 7. 重 复 步 骤 6 两 次 8. 在 计 算 器 中 计 数 1 分 钟 Ⅸ. 结 果 : 此 次 实 验 的 结 果 是 通 过 对 数 曲 线 计 算 得 到 的 其 它 演 算 方 法 可 能 会 有 一 点 微 小 的 差 别 A. 从 每 个 标 准 品 质 控 品 及 未 知 物 的 每 分 平 均 计 数 中 (cpm) 减 去 0ng/ml 标 准 品 的 每 分 平 均 计 数, 从 而 计 算 出 每 分 净 计 数 按 下 式 计 算 每 个 标 准 品 质 控 品 及 未 知 物 的 %B/T: 净 cpm %B/T= 100% 总 平 均 cpm B. 在 对 数 坐 标 纸 上 以 每 个 标 准 品 为 纵 坐 标, 以 IGF-I 浓 度 横 坐 标 绘 制 净 cpm 或 %B/T 曲 线 通 过 各 点 绘 制 标 准 曲 线, 使 各 点 尽 量 均 匀 分 布 在 曲 线 两 侧 C. 根 据 每 个 质 控 品 及 未 知 物 的 净 cpm 或 %B/T 值, 利 用 坐 标 曲 线 测 出 IGF-I 浓 度 D. 如 样 品 测 量 值 高 于 曲 线 最 高 点, 则 用 样 品 稀 释 剂 精 确 稀 释, 重 新 测 定 E. 低 于 最 地 点 的 样 品 读 数 应 如 实 记 录 F. 样 品 可 直 接 从 曲 线 读 数, 不 重 新 稀 释 是 十 分 必 要 的 Ⅹ. 局 限 性 : * 此 试 剂 盒 提 供 的 试 剂 对 于 测 定 血 清 或 EDTA 血 浆 中 IGF-I 水 平 是 比 较 完 善 的 * 避 免 试 剂 或 样 品 的 反 复 冻 融 * 溶 血 黄 疸 及 高 脂 血 症 的 标 本 可 能 会 产 生 错 误 的 结 果, 应 避 免 使 用 * 由 于 IRMA 检 测 方 法 自 身 所 具 有 的 高 剂 量 钩 特 异 性 效 应, 对 于 IGF-I 预 期 浓 度 高 于 6000ng/ml 的 样 品 要 比 最 高 浓 度 (1000 ng/ml) 的 标 准 品 产 生 的 结 果 要 小, 故 对 于 预 期 浓 度 超 出 此 范 围 的 样 品 在 检 4

测 前 应 用 样 品 稀 释 液 进 行 稀 释 Ⅺ. 质 量 控 制 : *DSL 质 控 及 商 业 质 控 应 在 已 确 立 的 置 信 范 围 内 DSL 质 控 品 的 置 信 限 列 于 质 控 品 的 标 签 上 * 每 次 检 测 均 应 包 括 高 低 两 个 水 平 的 质 控 品 经 典 活 性 非 提 取 IGF-I IRMA 标 准 曲 线 数 据 界 限 平 均 试 管 编 号 试 管 标 记 (cpm) (cpm) 01,02 总 计 管 151077,150567 150822 B/T (%) IGF-I (ng/ml) 03,04 标 准 品 A 1520, 1327 1424 0.0 05,06 标 准 品 B 3597, 3711 3654 1.5 8.3 07,08 标 准 品 C 6460, 6605 6533 3.4 33.3 09,10 标 准 品 D 13062,13440 13251 7.8 100.0 11,12 标 准 品 E 38102,39718 38910 24.9 333.0 13,14 标 准 品 F 91423,90435 90929 59.3 1000.0 15,16 质 控 品 Ⅰ 14185,14326 14256 8.5 107.5 17,18 质 控 品 Ⅱ 39993,42053 41023 26.3 347.9 注 意 : 以 上 数 据 不 可 代 替 试 验 数 据 Ⅻ. 预 期 值 : 每 个 实 验 室 应 建 立 自 己 的 正 常 值 范 围, 使 用 DSL-5600 IGF-I IRMA 药 盒, 在 三 个 独 立 研 究 中 所 测 得 的 血 清 中 IGF-I 水 平, 儿 科 的 数 据 是 从 正 常 身 高 体 重 的 儿 童 中 得 到 的 所 有 数 据 均 以 ng/ml 为 单 位 年 龄 男 女 个 数 均 值 标 准 差 中 位 数 绝 对 范 围 0-1 52 35.3 23.9 29.0 3.7-100.0 1-2 33 44.2 30.0 37.3 6.1-131.0 2-3 21 66.4 36.4 58.1 24.3-152.0 3-4 12 66.1 32.5 58.4 44.0-117.0 4-5 18 76.3 31.7 75.3 30.0-150.0 5-6 18 108.3 55.4 93.2 33.0-276.0 6-7 19 134.4 73.3 122.0 43.0-373.0 年 龄 男 性 个 数 均 值 标 准 差 中 位 数 绝 对 范 围 7-8 33 193.4 92.3 169.0 23.9-392.0 8-9 22 182.2 63.7 199.5 81.4-290.0 9-10 24 222.3 125.7 201.5 72.0-526.0 10-11 22 151.6 70.0 156.0 30.0-289.0 11-12 24 175.2 118.8 135.0 29.0-466.0 12-13 19 255.6 130.3 294.0 55.0-570.0 5

13-14 28 397.0 218.2 384.0 71.0-972.0 14-15 15 576.9 241.1 551.0 153.0-995.0 15-16 15 530.4 121.5 518.5 358.0-870.0 16-18 20 454.4 111.6 476.0 239.0-630.0 18-20 23 489.0 206.7 475.0 197.0-956.0 20-23 29 0420.1 114.7 413.0 215.0-628.0 23-25 23 320.7 106.3 304.0 169.0-591.0 25-30 47 236.7 81.2 241.0 119.0-476.0 30-40 41 211.9 102.5 188.0 100.0-494.0 年 龄 女 性 个 数 均 值 标 准 差 中 位 数 绝 对 值 范 围 7-8 20 205.0 111.9 185.5 20.0-484.0 8-9 12 275.3 96.1 295.0 22.1-383.0 9-10 21 277.6 119.6 289.0 30.0-428.0 10-11 21 307.3 158.7 277.0 108.0-648.0 11-12 17 358.2 186.0 340.0 97.0-699.0 12-13 21 444.9 226.4 481.0 163.0-991.0 13-14 26 489.0 165.0 493.0 203.0-831.0 14-15 18 499.3 135.9 504.0 288.0-756.0 15-16 21 494.2 142.7 499.0 261.0-752.0 16-18 21 436.9 120.8 471.0 236.0-624.0 18-20 15 367.9 106.1 341.0 193.0-575.0 20-23 25 288.9 109.8 279.0 110.0-521.0 23-25 19 274.9 93.1 273.0 129.0-480.0 25-30 45 253.5 106.6 236.0 96.0-502.0 30-40 24 217.7 76.2 209.0 130.0-354.0 年 龄 男 女 个 数 均 值 标 准 差 中 位 数 绝 对 范 围 30-40 80 214.0 88.3 193.5 100.0-494.0 40-50 43 180.4 48.3 175.0 101.0-303.0 50-70 41 153.7 49.3 145.0 78.0-258.0 注 : 见 方 法 比 较 部 分 的 DSL-5600 与 DSL-2800 之 间 的 联 系 ⅩⅢ. 实 验 特 性 参 数 : 所 有 的 特 性 参 数 均 由 血 清 样 品 得 到 以 ng/ml 为 单 位, 若 折 合 成 nmol/l, 则 : A. 灵 敏 度 : ng/ml 0.13= nmol/l 平 均 加 上 0 ng/ml IGF 标 准 品 20 个 样 品 的 两 个 标 准 偏 差, 通 过 内 插 法 计 算 得 到 的 理 论 灵 敏 度 或 最 小 检 测 限 为 2.06 ng/ml 或 2pg/tube( 按 1 50 稀 释 进 行 校 正 ) B. 精 密 度 : 对 3 个 血 清 样 品 进 行 10 次 测 定 得 到 组 内 精 密 度 样 品 数 量 平 均 值 (ng/ml) S D (ng/ml) 变 异 系 数 (%) Ⅰ 10 34.03 2.38 7.0 Ⅱ 10 142.45 5.25 3.9 6

Ⅲ 10 373.86 14.68 3.9 对 3 个 血 清 样 品 在 同 一 天 进 行 单 独 测 定 12 次 均 值 的 平 均 值 来 测 组 间 精 密 度 : 样 品 数 量 平 均 值 (ng/ml) S D (ng/ml) 变 异 系 数 (%) Ⅰ 12 32.54 2.42 7.4 Ⅱ 12 140.56 5.36 3.8 Ⅲ 12 383.36 15.96 4.2 C. 回 收 率 : 含 有 不 同 水 平 内 源 性 IGF-I 的 三 个 人 血 清 样 品 用 已 知 量 IGF 作 内 标 测 定 : 样 品 内 源 性 (ng/ml) 加 入 量 (ng/ml) 预 期 值 (ng/ml) 实 测 值 (ng/ml) 回 收 率 (%) Ⅰ 18.98 200 218.98 197.45 90 400 418.98 405.20 97 600 618.98 613.20 99 800 818.98 786.45 96 Ⅱ 114.81 200 314.81 271.01 86 400 514.81 448.67 87 600 714.81 578.54 81 800 914.81 767.74 84 Ⅲ 116.89 200 316.89 324.44 102 400 516.89 483.96 94 600 716.89 640.85 89 800 916.89 806.43 88 D. 稀 释 的 线 性 : 将 三 个 人 血 清 样 品 用 0ng/ml IGF-I 标 准 品 稀 释 并 测 定 : 样 品 稀 释 比 预 期 值 (ng/ml) 实 测 值 (ng/ml) 回 收 率 (%) Ⅰ 208.98 1 2 104.49 96.01 92 1 4 52.55 44.57 85 1 8 26.12 22.39 86 7

1 16 13.06 9.62 74 样 品 稀 释 比 预 期 值 (ng/ml) 实 测 值 (ng/ml) 回 收 率 (%) Ⅱ 442.93 1 2 221.47 242.78 110 1 4 110.73 114.47 103 1 8 55.37 53.06 96 1 16 27.68 20.74 75 1 32 13.84 12.64 91 Ⅲ 768.41 1 2 384.21 403.83 105 1 4 192.10 175.31 91 1 8 96.05 93.72 98 1 16 48.03 34.22 71 1 32 24.01 17.12 71 1 64 12.01 8.52 71 E. 特 异 性 : IGF-I 抗 血 清 的 交 叉 反 应 性 依 靠 以 下 肽 类 激 素 进 行 测 定 : 人 : 化 合 物 % 交 叉 反 应 性 IGF-I 100 IGF-2 胰 岛 素 前 - 胰 岛 素 生 长 激 素 检 测 不 出 检 测 不 出 检 测 不 出 检 测 不 出 F. 种 间 血 清 比 较 : 无 交 叉 性 血 清 有 交 叉 性 血 清 小 白 鼠 豚 鼠 家 鼠 家 鼠 绵 羊 马 牛 8

山 羊 猪 G. 方 法 比 较 : DSL-2800 试 剂 盒 与 对 样 品 进 行 萃 取 的 DSL-5600 试 剂 盒 进 行 比 较, 对 146 个 血 清 样 品 进 行 检 测 并 进 行 回 归 分 析 : n=146 DSL-2800 浓 度 范 围 :7-1727ng/ml 回 归 :DSL-2800=1.2[DSL-5600]-22.7 γ= 0.98 注 : 浓 度 在 1000 ng/ml 以 上 的 样 品 按 1 3 稀 释 进 行 分 析 ⅩⅣ. 参 考 文 献 : 9