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每 盒 1/5 7. 可 选 半 对 数 绘 图 纸 每 盒 50 张 警 告 和 预 防 措 施 用 于 体 外 诊 断 不 适 于 人 和 动 物 外 服 或 内 用 潜 在 传 染 源 的 处 理 : 在 制 备 本 产 品 中 所 使 用 的 每 一 血 清 和 血 浆 捐 献 者 单 位, 均 已 采 用 FDA 提 供 的 方 法 测 试 过, 发 现 对 存 在 的 HbsAg,HCV 抗 体 和 HIV 抗 体 均 无 反 应 尽 管 这 些 方 法 具 有 高 度 的 准 确 性, 但 也 无 法 保 证 能 发 现 所 有 的 感 染 单 位 本 产 品 仍 可 能 含 有 其 他 能 通 过 测 试 的 人 源 物 质 因 此, 没 有 已 知 的 测 定 方 法 可 以 给 出 满 意 的 保 证 ( 既 保 证 不 存 在 乙 肝 病 毒, 丙 肝 病 毒 和 HIV 病 毒 或 其 他 传 染 因 素 ), 因 而 其 使 用 和 运 输 必 须 在 良 好 的 实 验 规 程 和 适 当 的 防 卫 措 施 下, 按 照 国 家 相 关 政 策 进 行 含 叠 氮 化 钠 的 试 剂 : 警 告 : 本 药 盒 中 部 分 试 剂 含 有 叠 氮 化 钠, 叠 氮 化 钠 可 与 含 铜 铅 的 装 置 反 应 形 成 易 爆 炸 的 金 属 叠 氮 化 物, 其 处 理 是 冲 入 大 量 的 水 以 防 止 叠 氮 化 物 的 积 聚, 更 进 一 步 的 资 料 参 阅 Decontamination of Laboratory Sink to Remove Azide Salts 含 125I 的 试 剂 : 此 试 剂 含 有 放 射 性 物 质, 其 运 输 和 使 用 应 在 适 当 的 防 护 措 施 及 良 好 的 实 验 规 程 下 进 行 1 其 贮 存 应 被 限 制 在 特 定 地 点 2 对 其 接 近 限 定 为 被 授 权 本 人 3 禁 止 用 嘴 吸 取 放 射 性 物 质 4 禁 止 在 指 定 放 射 性 工 作 地 点 吃 饭 或 饮 水 5 擦 净 可 能 发 生 溢 出 的 地 方, 再 用 碱 性 去 污 剂 或 放 射 性 去 污 溶 液 清 洗 任 何 使 用 过 的 玻 璃 器 具 在 清 洗 其 它 实 验 室 玻 璃 器 具 前, 必 须 用 清 水 彻 底 清 洗 干 净 领 取 从 事 放 射 性 的 实 验 人 员 或 机 构 应 持 有 的 特 定 许 可 证

警 告 : 此 产 品 含 有 加 利 福 尼 亚 州 所 知 的 致 癌 物 注 意 : 印 于 包 装 上 的 放 射 性 与 印 于 盒 子 标 签 及 标 记 物 小 瓶 标 签 上 的 放 射 性 有 轻 微 区 别 盒 子 标 签 和 标 记 物 小 瓶 标 签 表 明 校 准 日 起 的 准 确 放 射 性 数 量, 而 包 装 上 表 明 的 是 试 剂 盒 的 理 论 放 射 性 数 量 试 剂 的 配 制 : 将 小 瓶 内 的 标 记 物 加 入 到 1 瓶 磷 酸 盐 缓 冲 液 中, 充 分 混 匀 后, 用 混 合 液 冲 洗 标 记 物 瓶 以 最 大 限 度 的 转 移 标 记 物 将 混 合 液 装 入 易 识 别 的 容 器 中, 贴 上 备 用 标 签, 将 其 置 于 黑 暗 中 保 存 或 用 金 属 箔 包 裹, 温 度 控 制 在 2~8 样 品 要 求 : 样 品 的 收 集 和 处 理 : 血 浆 样 本 : 静 脉 取 血 放 在 含 有 肝 素 或 DETA 的 试 管 中, 分 理 处 小 分 血 浆,2~8 冷 藏 可 过 夜, 长 时 间 则 学 20 冻 存 避 免 使 用 溶 血 脂 血 和 黄 疸 性 血 样 血 清 样 本 : 尽 管 皮 质 醇 检 测 通 常 指 定 使 用 血 浆 样 本, 但 也 可 使 用 血 清 样 本 获 得 相 似 结 果 静 脉 取 血 放 在 试 管 中, 不 用 任 何 添 加 剂 分 离 出 血 清 部 分,2~8 冷 藏 可 过 夜 长 时 间 则 学 20 冻 存 避 免 使 用 溶 血 脂 血 和 黄 疸 性 血 样 尿 样 : 收 集 24 小 时 尿 样, 记 下 尿 的 容 量, 每 升 尿 添 加 10 克 硼 酸 作 为 防 腐 剂, 充 分 混 匀 后 20 冻 存 使 用 前, 室 温 融 化 样 本 并 充 分 混 匀 检 测 过 程 : 成 功 使 用 该 药 盒, 必 须 完 全 理 解 该 部 分 内 容, 严 格 按 照 文 中 所 述, 仔 细 操 作 实 验 每 一 步 以 获 得 可 靠 结 果 药 盒 各 部 分 都 作 为 整 体 单 位 使 用 许 多 部 分 单 个 测 定 不 能 混 用 不 能 使 用 过 期 药 盒 每 一 次 检 测 都 必 须 做 一 条 标 准 曲 线 未 提 供 需 自 备 的 材 料 : 1. 恒 温 水 浴 锅,37±2 2. 10μl 精 确 吸 管 3. 1.0ml 半 自 动 吸 管

4. γ- 计 数 仪 5. 检 测 用 试 管 架 6. 抽 水 器 ( 可 选 ) 7. 涡 旋 混 匀 器 8. 吸 纸 ( 可 选 ) 尿 样 检 测 时 使 用 的 材 料 : 1. 随 时 可 用 的 玻 璃 试 管 (12 75mm) 和 试 管 帽 2. 二 氯 甲 烷 ( 二 氯 甲 ; 美 国 化 学 学 会 分 析 试 剂 等 级 ) 3. 冰 壶 4. 100μl 200μl 精 确 吸 管 5. 通 风 橱 或 通 风 良 好 的 工 作 区 6. 蒸 发 二 氯 甲 烷, 其 意 义 在 于 产 生 一 股 干 燥 的 空 气 或 氮 气 是 提 取 物 缓 缓 升 温 至 37 尿 样 提 取 过 程 该 过 程 包 括 监 测 二 氯 甲 烷 抽 取 效 率 的 方 法 在 INCSTAR 实 验 室 里, 典 型 的 尿 样 中 回 收 皮 质 醇 为 99±14% 1. 在 冰 壶 里 放 一 个 适 当 的 二 氯 甲 烷 容 器 使 之 冷 却, 每 管 许 可 放 1ml 冰 壶 应 足 够 大 以 容 纳 二 氯 甲 烷 的 烧 杯 和 提 取 血 样 试 管 的 架 子 2. 为 检 测 提 取 效 率, 用 病 人 的 标 签 给 每 个 试 管 做 标 记, 一 管 标 上 S ( 样 本 ), 另 一 管 标 上 E ( 提 取 效 率 ) 3. 分 别 向 S 管 和 E 管 加 入 200μL 24 小 时 尿 样 4. 只 向 E 管 加 10μl 浓 度 为 60μg /ml 24 皮 质 醇 血 清 标 准 CA-2372, 震 荡 试 管 架, 混 匀 试 剂 或 每 管 单 独 混 匀 5. 向 各 个 S 管 和 E 管 加 上 1ml 冷 却 的 二 氯 甲 烷, 充 分 涡 旋 混 匀, 提 取 皮 质 醇 到 有 机 层, 盖 上 帽 或 放 在 冰 壶 里 以 避 免 二 氯 甲 烷 过 渡 蒸 发, 为 更 好 的 用 吸 管 转 移 乙 氯 甲 烷, 在 转 移 前, 用 冷 的 二 氯 甲 烷 清 洗 试 管 3~4 次 6. 等 待 分 离 的 这 段 时 间 里, 给 每 个 S 管 和 E 管 标 记 好 两 个 皮 质 醇 包 被 管. 7. 分 离 阶 段 后, 仔 细 小 心 的 从 每 管 有 机 层 ( 二 氯 甲 烷 ) 底 部 吸 取 100μl 并

加 到 标 记 好 的 包 被 管 中, 吸 取 样 本 前, 用 冷 的 二 氯 甲 烷 冲 洗 吸 管 头, 将 吸 管 头 样 本 的 渗 出 量 减 到 最 小, 转 移 100μl 提 取 液 时, 不 要 试 图 擦 拭 吸 管 头, 否 则 会 因 二 氯 甲 烷 的 特 性 会 引 起 吸 管 头 部 溶 液 产 生 气 泡 小 心 的 向 包 被 管 转 移 提 取 液, 用 一 只 手 抓 住 包 被 管 和 提 取 管, 快 速 小 心 的 吸 取 100μl 至 包 被 管 的 底 部 8. 伴 随 着 一 股 干 燥 的 空 气 和 氮 气, 二 氯 甲 烷 从 包 被 管 底 部 蒸 发, 提 取 物 缓 缓 升 温 至 37 警 告 : 工 作 区 避 免 过 多 雾 状 卤 化 烃 产 生 提 取 只 能 在 通 风 处 或 通 风 良 好 的 工 作 区 进 行 9. 二 氯 甲 烷 蒸 发 后, 向 每 个 带 有 病 人 样 本 的 包 被 管 ( S 管 和 E ) 加 入 10μl 皮 质 醇 血 清 空 白,CA-2367, 以 使 每 个 样 本 都 包 括 适 当 水 平 的 蛋 白 质 10. 有 检 测 过 程 的 第 一 步 继 续 放 免 操 作 检 测 过 程 : 包 括 绘 制 标 准 曲 线, 从 曲 线 上 可 查 得 未 知 样 本 皮 质 醇 的 含 量 1. 将 所 有 试 剂 恢 复 到 室 温, 使 用 前 充 分 混 匀., 不 可 有 气 泡 产 生 2. 将 标 记 好 的 包 被 管 按 如 下 所 述 安 置 总 管 (T1,T2) 和 B0 管 (1,2) 对 于 确 凿 的 数 据 变 化 和 质 控 程 序 是 必 需 的, 但 如 果 在 半 对 数 绘 图 纸 上 作 标 准 曲 线, 二 则 是 可 省 略 的 3. 加 样 至 包 被 管 底 部 a. 10μl 皮 质 醇 血 清 空 白, 或 每 个 血 清 皮 质 醇 标 准 b. 加 10μl 样 本 ( 血 清 血 浆 和 非 提 取 尿 样 ), 仔 细 小 心 的 吸 取 标 准 样 本 c. 对 于 提 取 尿 样, 使 用 包 被 管, 管 中 含 有 经 过 9 步 尿 提 取 操 作 而 得 的 提 取 尿 注 : 若 要 求 稀 释 病 人 血 清 或 血 浆 样 本, 药 盒 提 供 的 皮 质 醇 血 清 空 白 可 作 稀 释 剂, 提 取 和 非 提 取 尿 样 可 用 蒸 馏 水 稀 释, 对 于 尿 游 离 皮 质 醇 吸 取 200μl 稀 释 尿 样 ( 尿 提 取 过 程 步 骤 3), 常 规 检 测 继 续 进 行, 计 算 结 果 应 将 稀 释 因 素 考 虑 进 去

4. 每 管 加 入 1.0ml 标 记 - 缓 冲 混 合 液, 低 速 涡 旋 混 匀 5. 水 浴 锅 中 37±2 温 育 45 分 钟 6. 除 总 管 外, 吸 出 或 倾 析 所 有 试 管 若 用 抽 吸 技 术, 一 定 要 将 吸 管 的 塑 料 头 接 触 到 包 被 管 底 部 将 液 吸 出 若 用 倾 析 技 术, 允 许 将 试 管 倾 倒 3~5 分 钟 排 液, 试 管 向 上 前 在 试 纸 上 轻 呵 试 管, 移 出 粘 附 液 体 7. 所 有 管 在 γ- 计 数 仪 上 计 数 1 分 钟 ( 注 意 测 的 是 125I ) 8. 计 算 提 交 结 果 插 图 略 标 准 : 本 药 盒 中 的 皮 脂 醇 标 准 都 对 照 美 国 专 利 提 及 的 皮 脂 醇 标 准 进 行 了 校 准 其 他 产 品 和 过 程 都 是 以 该 标 准 作 对 照 质 控 每 个 实 验 室 都 应 采 用 不 同 浓 度 的 质 控 监 控 检 测 进 行 质 控 品 应 按 未 知 样 本 来 对 待, 保 持 质 控 记 录 哥 哥 实 验 室 都 应 确 定 自 己 的 质 控 结 果 未 知 血 清 血 浆 和 未 知 尿 样 可 同 时 检 测, 用 内 插 法 从 标 准 曲 线 上 查 出 结 果, 标 准 曲 线 由 皮 脂 醇 标 准 品 绘 制 非 提 取 尿 皮 脂 醇 样 本 (UC) 和 提 取 尿 游 离 皮 质 醇 样 本 (UFC) 在 用 公 式 换 算 到 μg /24hr 1. 记 录 各 管 的 每 分 钟 计 数 (CPM) 2. 皮 质 醇 标 准 品 计 数 为 纵 坐 标, 以 相 对 应 的 皮 脂 醇 浓 度 为 横 坐 标, 在 半 对 数 绘 图 纸 上 制 图 3. 画 出 标 准 曲 线, 例 子 见 表 1 和 图 1 4. 确 定 每 个 样 品 各 管 计 数 在 纵 坐 标 上 的 位 置, 画 一 条 水 平 横 线 与 标 准 曲 线 相 交, 在 这 个 交 点, 读 出 相 对 应 的 横 坐 标 上 的 皮 脂 醇 浓 度 (μg /dl) 非 提 取 尿 皮 脂 醇 : 将 非 提 取 尿 样 的 皮 脂 醇 浓 度 (UC) 从 μg /dl 换 算 到 μg /24hr, 使 用 如 下 公

式 : S V UC= 100 单 位 S: 非 提 取 尿 样 浓 度 (μg /dl) V: 总 尿 容 量 (ml/24hr) 100: 换 算 因 子 提 取 尿 游 离 皮 质 醇 : 将 UFC 从 μg /dl 换 算 到 μg /24hr, 使 用 如 下 公 式 : S V UFC= 33.3(E-S) S: 提 取 尿 样 浓 度 (μg /dl) E: 符 合 样 效 率 管 的 浓 度 (μg /dl) V: 总 尿 容 量 (ml/24hr) 33.3: 结 合 了 稀 释 和 提 取 因 素 的 换 算 因 子 对 于 每 个 实 验 室 来 说, 都 希 望 监 控 尿 提 取 过 程 (EE) 的 效 率, 按 下 面 公 式 计 算 出 效 率 的 百 分 比 E-S EE= 100 6.0 S: 提 取 尿 样 浓 度 (μg /dl) E: 符 合 样 效 率 管 的 浓 度 (μg /dl) 6.0: S 管 和 E 管 浓 度 间 的 预 期 差 值 100: 换 算 因 子 把 血 清 标 准 品 质 控 和 病 人 样 本 ( 血 清 和 血 浆 ) 值 乘 以 27.59( 见 表 1 所 列 皮 质 醇 标 准 的 两 种 单 位 值 ), 使 用 362.5 道 尔 顿 分 子 量, 从 μg /dl 换 算 到 国 际 单 位 nmol/ml 同 样, 提 取 和 非 提 取 尿 质 控 和 病 人 值 乘 以 2.76, 将 μg /24hr 换 算 到 国 际 单 位 nmol/24hr. 过 程 的 局 限 性

过 程 中 标 记 - 缓 冲 混 合 液 必 须 避 光 保 存 包 被 管 又 接 收 至 使 用 前 应 2~7 保 存, 保 存 未 用 管 时 应 将 塑 料 包 装 安 全 的 封 闭 好, 以 防 止 冷 凝 现 象 温 育 条 件 应 按 照 程 序 检 查, 水 域 锅 温 度 必 须 保 持 在 37±2, 而 且 水 面 要 高 于 试 管 内 溶 液, 但 不 可 淹 没 试 管 操 作 者 应 注 意 到 错 误 结 果 可 能 由 不 正 确 贮 藏 和 处 理 样 本 所 致, 避 免 使 用 溶 血 脂 血 和 黄 疸 性 血 样 未 能 获 得 正 确 的 质 控 皮 质 醇 浓 度 意 味 着 操 作 不 精 确 处 理 不 当 或 试 剂 变 质 每 次 检 测 都 要 作 质 控, 每 次 检 测 都 要 绘 制 标 准 曲 线 本 药 盒 不 能 用 于 测 定 正 在 用 氢 化 泼 尼 松 治 疗 的 病 人 的 血 清 ( 参 见 阐 述 ) 阐 述 总 的 来 说, 皮 质 醇 水 平 上 午 5~10 点 最 高, 下 午 8 点 至 凌 晨 4 点 最 低 上 午 水 平 通 常 是 下 午 水 平 的 1/2 或 1/3 女 性 一 天 中 皮 质 醇 水 平 的 变 化, 摄 入 食 物 时 升 高 而 丧 失 食 物 时 显 著 减 少, 这 一 点 已 有 所 描 述 昼 夜 变 化, 刺 激 和 抑 制 试 验 各 种 压 力 都 会 使 皮 质 醇 浓 度 发 生 变 化, 例 如 : 甲 状 旁 腺 激 素 刺 激 会 使 皮 质 醇 浓 度 升 至 上 午 水 平 的 2~3 倍 甲 毗 酮 或 地 塞 米 松 抑 制 会 使 上 午 水 平 不 超 过 5μg /dl 雌 激 素 作 为 口 服 避 孕 药 会 引 起 血 浆 或 血 清 蛋 白 中 皮 质 醇 水 平 升 高 因 此, 每 个 病 人 的 皮 质 醇 值 以 他 / 她 上 午 皮 质 醇 水 平 为 准 正 常 参 数 值 血 浆 或 血 清 水 平 早 晨 :7~25μg /dl 获 70~250ng/ml (193~690nmol/ml) 晚 上 :2~9μg /dl 获 20~90ng/ml (55~248nmol/ml) 在 每 个 实 验 室 确 立 自 己 的 正 常 范 围 前, 这 些 范 围 作 指 导 用 非 提 取 尿 皮 质 醇 : 非 提 取 尿 样 的 尿 皮 质 醇 的 正 常 范 围 为 75~270 μg /24hr(207~745nmol/24hr) 尿 样 收 集 不 当 可 导 致 错 误 的 病 人 结 果, 建 议 测 定 肌 酸 酐 以 鉴 别 尿 样 收 集 是 否 合 适 提 取 尿 样 游 离 皮 质 醇 尿 游 离 皮 质 醇 的 正 常 范 围 为 20~80μg /24hr 皮 质 醇 (55~248nmol/24hr) 尿 样 收 集 不 当 可 导 致 错 误 的 病 人 结 果, 建 议 测 定 肌 酸 酐 以 鉴 别 尿 样 收 集 是 否 合 适

灵 敏 度 : 最 低 可 测 浓 度 为 0.21μg /dl 亲 和 力 : 皮 质 醇 抗 血 清 的 亲 和 常 数 近 似 为 2 10 8 liter/mol 特 异 性 : 如 下 化 合 物 使 用 皮 质 醇 放 射 免 疫 法 测 定 其 交 叉 反 应, 是 皮 质 醇 浓 度 恰 为 抑 制 50% 时, 比 较 各 类 混 合 物 的 交 叉 反 应 化 合 物 % 交 叉 反 应 皮 质 醇 100 泼 尼 松 77 6- 甲 强 的 松 龙 43 11- 脱 氧 皮 质 醇 6.3 17- 烃 孕 酮 1.2 皮 质 酮 <0.4 地 塞 米 松 0.2 氢 化 泼 尼 松 0.2 脱 氢 皮 质 酮 0.1 四 氢 皮 质 酮 0.1 醛 固 酮 <0.1 可 的 松 <0.1 双 氢 皮 质 酮 <0.1 孕 酮 <0.1 四 氢 皮 质 酮 <0.1 6-β- 皮 质 醇 <0.1