人 体 细 胞 治 疗 研 究 和 制 剂 质 量 控 制 技 术 指 导 原 则 一 序 言 体 细 胞 治 疗 是 指 应 用 人 的 自 体 同 种 异 体 或 异 种 ( 非 人 体 ) 的 体 细 胞, 经 体 外 操 作 后 回 输 ( 或 植 入 ) 人 体 的 治 疗 方 法 这 种 体 外 操 作 包 括 细 胞 在 体 外 的 传 代 扩 增 筛 选 以 及 药 物 或 其 他 能 改 变 细 胞 生 物 学 行 为 的 处 理 经 过 体 外 操 作 后 的 体 细 胞 可 用 于 疾 病 的 治 疗, 也 可 用 于 疾 病 的 诊 断 或 预 防 体 细 胞 治 疗 具 有 多 种 不 同 的 类 型, 包 括 体 内 回 输 体 外 激 活 的 单 个 核 白 细 胞 如 淋 巴 因 子 激 活 的 杀 伤 细 胞 (LAK) 肿 瘤 浸 润 性 淋 巴 细 胞 (TIL) 单 核 细 胞 巨 噬 细 胞 或 体 外 致 敏 的 杀 伤 细 胞 (IVS) 等 等 ; 体 内 移 植 体 外 加 工 过 的 骨 髓 细 胞 或 造 血 干 细 胞 ; 体 内 接 种 体 外 处 理 过 的 肿 瘤 细 胞 ( 瘤 苗 ); 体 内 植 入 经 体 外 操 作 过 的 细 胞 群 如 肝 细 胞 肌 细 胞 胰 岛 细 胞 软 骨 细 胞 等 等 由 于 体 细 胞 治 疗 的 最 终 制 品 不 是 某 一 种 单 一 物 质 而 是 一 类 具 有 生 物 学 效 应 的 细 胞, 其 制 备 技 术 和 应 用 方 案 具 有 多 样 性 复 杂 性 和 特 殊 性, 因 此 不 能 象 一 般 生 物 制 品 那 样 制 订 出 适 合 于 每 一 种 方 案 的 具 体 标 准, 本 指 导 原 则 只 提 出 一 个 共 同 的 原 则, 具 体 的 申 报 资 料 和 应 用 方 案 应 根 据 本 技 术 指 导 原 则 加 以 准 备 申 请 和 实 施 对 每 个 方 案 的 整 个 操 作 过 程 和 最 终 制 品 必 须 制 定 并 严 格 执 行 ( 实 施 ) 标 准 操 作 程 序, 以 确 保 体 细 胞 治 疗 的 安 全 有 效 二 申 报 资 料 ( 一 ) 体 细 胞 治 疗 制 剂 的 名 称 选 题 目 的 与 依 据 国 内 外 研 究 现 状 或 生 产 使 用 情 况 1. 申 请 表 2. 体 细 胞 治 疗 制 剂 的 名 称 及 命 名 依 据 3. 选 题 的 目 的 和 立 题 依 据 4. 国 内 外 有 关 该 制 剂 的 研 究 现 状 生 产 及 临 床 应 用 情 况 ( 包 括 专 利 查 询 情 况 ) 5. 临 床 应 用 的 风 险 性 评 估 ( 二 ) 体 细 胞 的 采 集 分 离 和 检 定 1. 体 细 胞 类 型 和 供 体 的 情 况 (1) 体 细 胞 类 型
须 指 出 细 胞 来 源 是 属 于 自 体 同 种 异 体 异 种 还 是 细 胞 系 必 须 提 供 细 胞 的 组 织 来 源 及 细 胞 类 别 的 确 证 资 料, 其 中 包 括 形 态 生 化 或 表 面 标 志 等 (2) 供 体 若 体 细 胞 来 源 于 同 种 异 体, 需 说 明 供 体 的 年 龄 性 别, 供 体 必 须 符 合 国 家 对 献 血 员 的 要 求, 并 提 供 测 试 的 方 法 及 符 合 条 件 的 依 据 供 体 必 须 经 过 检 验 证 明 HBV 抗 原 抗 HCV 抗 HIV-1/2 梅 毒 抗 体 细 菌 霉 菌 均 为 阴 性, 必 要 时 需 说 明 供 体 的 既 往 病 史 家 族 史 等 临 床 资 料 对 于 那 些 需 通 过 激 活 体 内 免 疫 功 能 发 挥 作 用 或 需 体 细 胞 在 体 内 长 期 存 活 的 体 细 胞 治 疗 项 目, 除 ABO 血 型 外, 还 必 须 对 供 体 做 HLA-I 类 和 II 类 分 型 检 查, 并 证 明 与 受 体 ( 病 人 ) 相 匹 配, 同 时 提 供 检 测 方 法 和 依 据 若 体 细 胞 来 源 于 动 物, 必 须 提 供 动 物 的 来 源, 遗 传 背 景, 健 康 证 明 ( 如 重 要 病 原 体, 包 括 人 畜 共 患 疾 病 的 病 原 体 ), 饲 养 条 件, 应 用 此 类 体 细 胞 的 必 要 性 和 安 全 性 (3) 细 胞 系 若 采 用 细 胞 系 进 行 体 细 胞 治 疗, 应 按 国 家 相 关 规 定 进 行 主 细 胞 库 种 子 细 胞 库 及 生 产 细 胞 库 三 级 细 胞 库 的 建 立 及 管 理 应 详 细 记 述 细 胞 的 来 源 鉴 别 标 志 保 存 预 计 使 用 寿 命, 在 保 存 和 复 苏 条 件 下 稳 定 性 的 依 据 生 产 细 胞 库 不 应 含 有 可 能 的 致 癌 因 子, 不 应 含 有 感 染 性 外 源 因 子, 如 细 菌 霉 菌 支 原 体 及 病 毒 2. 体 细 胞 的 采 集 应 对 采 集 体 细 胞 的 技 术 方 法 的 安 全 性 可 行 性 稳 定 性 进 行 充 分 论 证, 应 提 供 体 细 胞 采 集 技 术 的 标 准 操 作 程 序, 应 说 明 采 集 体 细 胞 的 地 址 / 环 境, 所 用 的 设 备 和 设 施 保 存 和 运 输 的 环 节 和 条 件, 预 防 微 生 物 及 病 毒 等 有 害 因 子 污 染 的 方 法, 预 防 共 用 设 备 和 设 施 可 能 带 来 的 交 叉 污 染 等 措 施 3. 体 细 胞 的 分 离 应 详 细 规 定 分 离 体 细 胞 用 的 方 法 材 料 及 设 备, 应 提 供 在 此 过 程 中 所 用 的 各 种 材 料 的 资 料, 如 果 是 购 买 的 原 材 料, 应 有 供 应 商 / 制 造 商 提 供 的 产 品 说 明 及 分 析 合 格 证 明 当 应 用 单 克 隆 抗 体 进 行 有 关 操 作 时, 应 参 照 国 家 药 品 管 理 当 局 有 关 规 定 进 行
4. 体 细 胞 的 检 定 在 体 细 胞 采 集 及 分 离 过 程 中 的 适 当 阶 段, 应 对 体 细 胞 进 行 质 控 检 定, 包 括 采 集 与 分 离 体 细 胞 的 收 率 存 活 率 纯 度 均 一 性 等 应 详 细 说 明 检 定 体 细 胞 所 用 的 方 法 材 料 及 设 备, 并 制 定 合 格 标 准 ( 三 ) 体 细 胞 的 体 外 操 作 1. 培 养 基 (1) 所 有 成 分 应 有 足 够 纯 度 ( 例 如 水 应 符 合 注 射 用 水 标 准 ), 残 留 的 培 养 基 或 受 者 不 应 有 明 显 影 响 每 个 培 养 细 胞 的 部 门 应 保 证 所 用 的 各 种 成 分 的 质 量 都 经 过 鉴 定, 并 制 定 标 准 规 格 若 用 商 业 来 源 的 培 养 基, 应 由 厂 商 提 供 全 部 培 养 基 成 分 资 料 (2) 血 清 的 使 用 除 能 证 明 体 细 胞 培 养 或 激 活 需 要 血 清 外, 应 避 免 使 用 任 何 血 清 不 得 使 用 同 种 异 体 人 血 清 或 血 浆 如 必 须 使 用 动 物 血 清, 应 考 虑 每 批 血 清 都 应 对 潜 在 的 外 源 因 子 ( 包 括 人 的 病 原 体 ) 进 行 检 查 筛 选 例 如, 牛 血 清 应 进 行 病 毒 和 支 原 体 污 染 的 检 查 筛 选 等 (3) 人 血 液 成 份 的 应 用 若 培 养 基 中 含 有 人 的 血 液 成 份, 如 白 蛋 白 及 转 铁 蛋 白, 应 说 明 其 来 源 批 号 质 量 检 定 合 格 报 告, 应 尽 可 能 用 已 批 准 上 市 的 产 品 (4) 条 件 培 养 基 的 应 用 在 体 细 胞 培 养 中 使 用 细 胞 培 养 来 源 的 条 件 培 养 基 时, 有 可 能 增 加 了 制 剂 的 危 险 性 及 降 低 产 品 的 一 致 性 因 此, 尽 可 能 确 定 条 件 培 养 基 的 必 要 成 份, 以 及 尝 试 用 确 定 的 试 剂 取 代 条 件 培 养 基 在 应 用 条 件 培 养 基 时 应 考 虑 以 下 几 点 : 1 应 详 细 提 供 条 件 培 养 基 的 来 源 加 工 及 使 用 说 明 2 当 用 供 者 ( 人 ) 细 胞 制 备 条 件 培 养 基 时, 应 对 供 者 按 献 血 员 标 准 进 行 传 染 因 子 的 检 查 3 当 用 自 体 细 胞 制 备 条 件 培 养 基 时, 应 减 少 传 播 病 毒 性 疾 病 的 危 险, 病 毒 在 体 外 扩 增 的 能 力 亦 应 考 虑
(5) 抗 生 素 的 应 用 培 养 基 中 尽 量 避 免 使 用 内 酰 胺 类 抗 生 素 若 采 用 青 霉 素 类 抗 生 素, 应 做 青 霉 素 皮 试, 该 细 胞 制 剂 应 标 明 加 用 的 抗 生 素, 并 不 得 用 于 已 知 对 该 药 过 敏 的 患 者 另 外, 应 做 不 加 抗 生 素 的 培 养 对 照, 以 证 明 能 够 保 持 无 菌 (6) 其 他 成 份 应 充 分 说 明 体 细 胞 培 养 和 激 活 时 所 采 用 的 有 丝 分 裂 原 抗 体 细 胞 因 子 化 学 物 质, 以 及 培 养 物 应 尽 可 能 采 用 国 家 批 准 临 床 应 用 的 产 品 如 上 述 成 份 的 生 产 厂 家 已 获 国 家 批 准 临 床 应 用, 可 以 引 用 该 批 件 如 上 述 成 份 的 生 产 厂 家 未 获 国 家 批 准 临 床 应 用, 应 参 照 国 家 对 相 应 产 品 的 质 控 要 点, 提 供 质 量 标 准, 并 对 每 批 产 品 提 供 详 尽 的 质 量 检 定 报 告 (7) 培 养 基 的 检 定 对 每 批 制 成 的 培 养 基 ( 例 如 已 加 入 血 清 及 生 长 添 加 物 等 ) 应 进 行 无 菌 试 验, 以 及 对 拟 给 病 人 用 的 体 外 培 养 细 胞 的 激 活 及 / 或 支 持 生 长 试 验 2. 生 产 过 程 生 产 部 门 对 制 备 工 艺 流 程 应 有 详 细 的 标 准 操 作 程 序 和 适 时 修 订 的 程 序 收 获 时 应 保 留 细 胞 及 培 养 基 样 品, 供 检 定 用 若 细 胞 培 养 技 术 有 改 进, 则 应 评 估 对 细 胞 得 率 生 物 学 效 应 均 一 性 及 纯 度 的 影 响 应 叙 述 保 证 细 胞 批 同 一 性 和 防 止 交 叉 污 染 的 质 量 控 制 系 统, 以 及 适 用 于 长 期 培 养 时 定 期 进 行 的 和 在 体 外 培 养 后 输 注 前 对 所 有 培 养 物 进 行 的 质 量 控 制 系 统 3. 质 量 控 制 应 对 所 有 成 份 分 离 培 养 及 最 后 处 理 细 胞 所 用 的 器 具 进 行 质 量 控 制 各 种 成 份 都 应 进 行 同 一 性 及 污 染 物 检 查 有 生 物 活 性 的 成 份 还 应 进 行 功 能 检 定 批 记 录 应 予 保 存, 该 记 录 应 反 映 制 备 每 批 体 细 胞 的 所 有 步 骤, 记 载 每 一 成 份 的 批 号 及 所 有 检 定 结 果 ( 四 ) 体 细 胞 制 剂 的 检 定 与 质 量 控 制 各 批 体 细 胞 的 检 定 包 括 为 验 证 操 作 过 程 对 最 初 数 批 体 细 胞 所 进 行 的 检 定 及 在 操 作 过 程 做 任 何 改 变 后 进 行 的 检 定, 以 及 确 定 安 全 性 和 生 物 学 效 应 等 对 每 批 体 细 胞 所 进 行 的 检 定, 应
依 据 实 施 方 案 制 定 合 格 标 准 1. 每 批 体 细 胞 的 检 定 (1) 得 率 及 存 活 率 : 于 回 输 前 应 进 行 体 细 胞 得 率 及 存 活 率 检 定 (2) 每 批 细 胞 来 源 的 确 认 : 应 注 明 供 者 的 来 源 并 加 以 标 记 或 确 定 批 号 (3) 无 菌 试 验 : 每 批 培 养 的 体 细 胞 在 患 者 输 注 前 均 应 进 行 无 菌 试 验 建 议 在 培 养 开 始 后 3~4 天 起 每 间 隔 一 定 时 间 取 培 养 液 样 品, 包 括 患 者 回 输 前 24 小 时 取 样, 按 现 行 版 中 国 药 典 生 物 制 品 无 菌 试 验 规 程 进 行 在 患 者 使 用 前, 取 培 养 液 及 / 或 沉 淀 物 用 丫 啶 橙 染 色 或 革 兰 染 色, 追 加 一 次 污 染 检 测 进 行 长 期 培 养 的 体 细 胞, 应 进 行 支 原 体 检 查 对 大 多 数 自 体 体 细 胞 产 品 而 言, 有 效 期 很 短, 因 此 有 些 试 验 ( 如 支 原 体 检 测 ) 可 能 对 制 品 的 应 用 来 说 耗 时 太 长, 但 每 批 制 品 的 留 样 检 测 是 必 需 的, 其 结 果 可 以 为 制 品 的 质 量 控 制 提 供 完 整 资 料 虽 然 单 个 病 人 应 用 的 体 细 胞 不 会 等 到 检 测 完 成 后 再 回 输, 但 是 如 果 留 样 发 现 阳 性 结 果 或 发 现 几 次 阳 性 结 果 后, 应 及 时 对 生 产 过 程 进 行 检 查 如 果 在 体 细 胞 制 备 的 早 期 发 现 有 污 染 的 情 况, 应 终 止 该 批 体 细 胞 制 品 的 继 续 制 备 如 果 某 些 检 测 结 果 在 制 品 应 用 时 还 无 结 果, 应 说 明 可 获 得 结 果 的 时 间 (4) 体 细 胞 的 纯 度 与 均 一 性 在 体 细 胞 回 输 前, 应 证 明 其 纯 度 和 均 一 性 已 达 到 可 应 用 水 平 对 于 经 过 数 代 培 养 的 体 细 胞 应 进 行 细 胞 的 鉴 定 及 无 污 染 检 查, 以 保 证 未 被 其 他 类 型 细 胞 污 染 或 取 代 对 于 体 细 胞 体 外 操 作 中 所 用 的 非 人 用 成 份 应 测 定 其 成 品 中 的 含 量, 并 制 定 相 应 的 限 量 指 标 (5) 生 物 学 效 应 如 有 可 能, 应 尽 量 检 测 每 批 体 细 胞 的 生 物 学 效 应, 例 如 体 细 胞 具 有 的 某 种 生 物 学 功 能, 分 泌 某 种 产 物 的 能 力, 表 达 某 种 标 志 的 水 平 等 2. 体 细 胞 制 剂 的 检 定 ( 申 报 临 床 前 完 成 ) 检 定 项 目 :
(1) 体 细 胞 制 品 的 得 率 和 存 活 率 : (2) 体 细 胞 制 品 的 纯 度 和 均 一 性 或 特 征 性 表 面 标 志 : (3) 体 细 胞 制 品 的 生 物 学 效 应 ; (4) 体 细 胞 制 品 外 源 因 子 的 检 测 包 括 : 细 菌 真 菌 支 原 体 病 毒 内 毒 素 (5) 体 细 胞 制 品 其 他 添 加 成 份 残 余 量 的 检 测 ( 如 牛 血 清 蛋 白 抗 体 血 清 抗 生 素 固 相 微 粒 等 ) 报 告 3. 体 细 胞 制 剂 的 制 造 及 检 定 过 程, 及 原 始 记 录 和 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 的 复 核 检 定 4. 体 细 胞 制 剂 的 稳 定 性 根 据 稳 定 性 的 实 验 结 果 确 定 有 效 期, 说 明 体 细 胞 制 剂 的 保 存 条 件 保 存 液 的 成 份 与 配 方 如 果 体 细 胞 在 处 理 之 前 处 理 当 中 或 处 理 之 后 需 由 一 地 运 到 另 一 地, 应 说 明 运 输 条 件 对 保 存 体 细 胞 存 活 率 和 功 能 的 影 响, 应 确 保 运 输 过 程 中 体 细 胞 制 品 达 至 上 述 检 定 标 准 应 提 供 运 输 容 器 能 适 用 运 输 材 料 的 合 格 证 明 若 体 细 胞 制 品 经 冻 存 后 继 续 用 于 病 人 应 在 冻 融 或 再 扩 增 后 进 行 上 述 检 定, 达 到 检 定 标 准 ( 五 ) 体 细 胞 治 疗 的 临 床 前 试 验 1. 安 全 性 评 价 (1) 生 长 因 子 依 赖 性 细 胞, 对 其 生 长 行 为 必 须 予 以 监 测, 若 某 细 胞 株 在 传 代 过 程 中 失 去 对 该 生 长 因 子 的 依 赖, 不 能 再 予 以 使 用 (2) 对 同 种 异 体 细 胞 的 移 植, 必 须 从 免 疫 学 方 面 提 供 其 安 全 性 依 据 (3) 对 异 种 细 胞, 必 须 提 供 该 异 种 细 胞 在 体 内 存 活 的 时 间 及 安 全 性 的 依 据
(4) 毒 性 试 验 尽 可 能 模 拟 临 床 回 输 方 式, 高 于 临 床 用 量 的 相 同 组 织 类 型 的 动 物 体 细 胞 制 品 回 输 入 动 物 体 内, 观 察 其 毒 性 反 应 过 敏 反 应 局 部 刺 激 反 应 对 特 殊 来 源 的 体 细 胞, 按 具 体 情 况 制 定 毒 性 反 应 的 评 价 方 法 (5) 致 癌 试 验 对 于 某 些 长 期 培 养 的 体 细 胞, 应 进 行 致 癌 性 试 验 1 体 外 试 验 : 软 琼 脂 克 隆 形 成 试 验 2 体 内 试 验 : 采 用 裸 鼠 试 验, 按 国 家 药 品 管 理 当 局 有 关 细 胞 株 检 定 和 质 量 控 制 要 求 进 行, 应 证 明 经 体 外 处 理 后 已 失 去 生 长 和 增 殖 能 力 验 (6) 对 于 体 细 胞 终 制 品 所 用 的 附 加 物, 应 视 为 体 细 胞 制 品 的 一 部 分, 应 做 动 物 毒 性 试 2. 有 效 性 评 价 (1) 体 细 胞 的 表 型 应 提 供 该 类 体 细 胞 的 形 态 学 表 面 标 志 等, 该 体 细 胞 应 具 有 预 期 的 功 能 如 分 泌 某 种 产 物 ( 或 因 子 ), 可 通 过 体 外 试 验 加 以 检 测 (2) 体 外 试 验 检 测 体 细 胞 制 品 的 生 物 学 效 应 如 细 胞 毒 效 应 免 疫 诱 导 / 增 强 或 抑 制 效 应 造 血 细 胞 增 殖 能 力 等 (3) 体 内 试 验 如 果 有 可 能 以 动 物 模 型 来 进 行, 临 床 前 试 验 应 测 定 体 细 胞 制 品 在 体 内 生 物 学 功 能 及 其 治 疗 效 果 若 某 种 体 细 胞 治 疗 方 法, 因 种 属 特 异 性 等 原 因 无 法 用 动 物 模 型 体 内 试 验 来 证 实 其 有 效 性, 应 做 特 别 说 明, 并 提 供 和 引 证 有 效 性 的 其 它 依 据
( 六 ) 体 细 胞 治 疗 临 床 试 验 方 案 1. 临 床 试 验 方 案 除 参 照 国 家 有 关 临 床 研 究 的 规 定 外, 必 须 包 括 所 选 用 的 病 种 病 人 的 年 龄 范 围 性 别 疾 病 的 发 展 阶 段 ( 临 床 分 期 ) 试 用 的 病 例 数 事 前 制 定 病 例 选 择 与 淘 汰 的 标 准 2. 给 药 的 方 式 剂 量 时 间 及 疗 程 如 果 通 过 特 殊 的 手 术 条 件 导 入 治 疗 制 品, 必 须 提 供 详 细 的 操 作 过 程 3. 评 估 疗 效 的 客 观 标 准, 包 括 临 床 指 和 实 验 室 检 测 项 目 4. 评 估 毒 副 作 用 及 其 程 度 的 标 准 及 终 止 治 疗 的 标 准 以 及 监 控 毒 副 作 用 必 须 的 临 床 与 实 验 室 检 测 的 项 目 ( 七 ) 研 制 及 试 用 单 位 及 负 责 人 资 格 认 证 提 供 研 究 与 临 床 单 位 的 全 部 主 要 研 究 人 员 和 临 床 工 作 人 员 ( 包 括 负 责 医 师 护 士 和 实 验 室 操 作 人 员 ) 的 工 作 简 历 及 从 事 与 实 施 该 项 体 细 胞 治 疗 方 案 有 关 的 经 验 提 供 研 究 单 位 从 事 符 合 GMP 生 产 临 床 制 品 的 条 件 和 证 明 以 及 临 床 单 位 实 施 该 方 案 的 医 疗 条 件 ( 八 ) 体 细 胞 治 疗 伦 理 学 考 虑 详 细 要 求 参 见 国 家 药 品 监 督 管 理 局 颁 发 的 GCP 有 关 规 定