细菌类

荧 光 PCR 肿 瘤 检 测 试 剂 名 称 英 文 缩 写 产 品 简 介 优 惠 价 甲 胎 蛋 白 细 胞 角 蛋 白 20 细 胞 角 蛋 白 19 癌 胚 抗 原 尿 激 酶 型 纤 溶 酶 原 激 活 物 基 质 金 属 蛋 白 酶 多 药 耐 药 基 因 AFP mrna CK20 mrna CK19 mrna CEA mrna upa mrna MMP9 mrna MDR1 mrna 原 发 性 肝 癌 患 者 血 中 AFPmRNA 阳 性 率 36% (23/64), 对 照 组 48 例 无 一 阳 性 ( 急 慢 性 肝 病 和 健 康 志 愿 者 ), 肝 外 转 移 组 阳 性 率 100%(6/6) 统 计 表 明,AFP mrna 的 检 出 率 与 肿 瘤 大 小 临 床 分 期 AFP 血 浆 水 平 门 脉 血 栓 形 成 及 肝 内 外 转 移 密 切 相 关, 血 清 AFP 不 能 反 应 上 述 变 化 结 肠 癌 胃 癌 乳 腺 癌 等 许 多 上 皮 来 源 的 癌 细 胞 保 留 了 上 皮 细 胞 的 部 分 特 征,Ck20 仅 在 结 肠 癌 等 细 胞 中 表 达, 正 常 外 周 血 为 阴 性 因 此, 可 以 作 为 结 肠 癌 患 者 血 中 或 骨 髓 中 癌 细 胞 转 移 的 标 志 CK19 mrna 可 以 作 为 乳 腺 癌 患 者 骨 髓 及 血 中 瘤 细 胞 的 标 志 19 例 临 床 IV 期 患 者 4 例 血 中 阳 性, 其 中 1 例 出 现 瘤 性 脑 膜 炎, 且 脑 脊 液 中 CK19 mrna 也 阳 性,6 例 经 过 系 统 化 疗, 在 自 体 骨 髓 移 植 前 检 测 其 骨 髓, 发 现 5 例 阳 性, 而 细 胞 学 检 查 均 为 阴 性 以 上 结 果 表 明, 应 用 RT-PCR 检 测 乳 腺 癌 患 者 骨 髓 及 血 中 CK19 mrna 对 于 判 断 乳 腺 癌 转 移 评 价 治 疗 效 果 有 重 要 意 义 血 清 CEA 蛋 白 的 检 测 曾 经 广 泛 用 于 结 直 肠 胃 癌 肺 癌 和 肝 癌 的 辅 助 诊 断 最 近 发 现, 检 测 外 周 血 中 CEAmRNA 可 以 确 定 结 直 肠 癌 等 病 人 是 否 发 生 转 移 另 外, 检 测 淋 巴 结 中 CEAmRNA 可 以 确 定 各 种 消 化 肿 瘤 乳 腺 癌 是 否 发 生 转 移 恶 性 实 体 瘤 的 侵 袭 转 移 是 治 疗 失 败 和 病 人 死 亡 的 主 要 原 因, 尿 激 酶 型 纤 溶 酶 原 激 活 因 子 upa 主 要 参 与 纤 溶 酶 原 的 激 活 和 细 胞 外 基 质 的 降 解, 是 介 导 肿 瘤 转 移 侵 袭 转 移 的 主 要 因 子 之 一 MDR1 的 蛋 白 产 物 定 位 于 细 胞 膜 上 的 分 子 量 为 170 kda 的 P 糖 蛋 白 (P-gp), 可 以 将 细 胞 内 的 药 物 排 至 细 胞 外, 从 而 使 细 胞 产 生 耐 药 1200RMB/20 人 份 热 线 电 话 :021-6485 8053 8009881995 E-mail:master@shinegene.org.cn 网 址 :www.shinegene.org.cn 1

一 什 么 是 肿 瘤 标 志 物? 肿 瘤 标 志 物 可 被 定 义 为 肿 瘤 细 胞 合 成 和 释 放 的 生 物 性 物 质 或 宿 主 响 应 肿 瘤 组 织 而 产 生 的 物 质 目 前 临 床 上 应 用 的 肿 瘤 标 志 物 的 分 类 大 致 有 : 1 癌 胚 抗 原 2 胎 盘 蛋 白 3 作 为 肿 瘤 标 志 物 的 酶 和 同 功 酶 4 激 素 5 类 固 醇 受 体 6 免 疫 素 型 7 DNA 分 析 二 肿 瘤 标 志 物 检 测 的 临 床 价 值 肿 瘤 标 志 物 项 目 测 量 是 肿 瘤 有 抗 原 或 患 者 体 内 存 在 的 有 助 于 诊 断 分 期 病 情 进 展, 对 治 疗 有 响 应 的 检 测 和 复 发 指 示 的 物 质 国 外 学 者 认 为 肿 瘤 标 志 物 的 潜 在 应 用 有 以 下 几 方 面 : 1 一 般 人 群 中 疾 病 的 检 查 2 有 症 状 患 者 的 诊 断 3 临 床 分 期 中 辅 助 诊 断 4 肿 瘤 体 积 的 指 示 5 有 助 于 选 择 适 宜 的 治 疗 6 对 治 疗 响 应 的 监 测 7 预 后 的 指 示 8 疾 病 复 发 早 期 测 定 目 前 肿 瘤 标 志 物 的 主 要 临 床 价 值 是 肿 瘤 分 期 监 测 治 疗 响 应 预 测 患 者 结 果 和 检 测 恶 性 肿 瘤 的 复 发 三 为 什 么 要 开 发 肿 瘤 标 志 物 的 核 酸 检 测? 国 外 学 者 认 为, 理 想 的 肿 瘤 标 志 物 其 临 床 需 要 的 特 点 是 : 1 对 疾 病 的 高 灵 敏 度 ( 没 有 假 阴 性 结 果, 能 检 测 微 转 移 ) 热 线 电 话 :021-6485 8053 8009881995 E-mail:master@shinegene.org.cn 网 址 :www.shinegene.org.cn 2

2 对 疾 病 的 高 特 异 性 ( 没 有 假 阳 性 结 果, 在 无 病 个 体 中 阴 性 ) 3 水 平 应 反 映 出 肿 瘤 的 大 小 4 在 病 情 稳 定 的 患 者 中 水 平 保 持 相 对 地 恒 定 并 且 没 有 波 动 5 在 完 全 缓 解 的 患 者 中 应 该 检 测 不 到 或 是 最 低 的 6 在 病 因 稳 定 的 患 者 中 应 能 预 测 结 果 临 床 上, 一 种 理 想 的 肿 瘤 标 志 物 应 对 疾 病 是 高 度 灵 敏 的 换 而 言 之, 该 肿 瘤 标 志 物 对 患 特 定 癌 的 所 有 患 者 应 是 阳 性 存 在 微 转 移 时 肿 瘤 标 志 物 的 检 出 水 平 应 明 显 高 于 正 常 值, 并 且 应 具 有 预 警 性 肿 瘤 标 志 物 应 对 某 疾 病 具 有 高 特 异 性, 并 且 在 健 康 人 群 良 性 病 患 者 和 不 同 类 的 癌 瘤 中 检 测 呈 阴 性 或 处 于 低 水 平 上 在 病 情 稳 定 的 患 者 中, 其 表 达 水 平 应 无 波 动, 而 在 疾 病 的 活 动 期 应 与 临 床 和 病 理 生 理 学 改 变 相 平 行 例 如 : 肿 瘤 标 志 物 水 平 应 与 肿 瘤 负 载 相 关, 当 肿 瘤 负 载 增 加 时 肿 瘤 标 志 物 应 超 过 时 段 增 加 ; 经 历 成 功 地 化 疗 病 人 应 减 少 在 完 全 缓 解 的 患 者 中 应 像 无 病 状 态 般 长 时 间 的 呈 阴 性 或 低 水 平 状 态, 反 之 指 标 升 高 则 预 示 有 复 发 的 可 能 最 后, 当 对 恶 性 病 的 医 疗 处 置 无 效 时, 初 始 及 其 系 列 肿 瘤 标 志 物 的 水 平 应 具 有 预 后 价 值 但 国 内 外 专 家 普 遍 认 为 : 目 前 尚 无 理 想 的 肿 瘤 早 期 诊 断 及 判 断 肿 瘤 转 移 的 标 志 物, 蛋 白 型 肿 瘤 标 志 物 可 能 难 以 解 决 这 个 问 题, 基 因 标 志 物 应 该 是 一 个 方 向 随 着 分 子 生 物 学 技 术 的 飞 速 发 展 及 其 在 医 学 研 究 中 的 广 泛 应 用, 基 因 检 测 技 术 已 为 人 们 所 熟 知 并 接 受, 通 过 逆 转 录 聚 合 酶 链 反 应 (RT-PCR) 技 术 检 测 恶 性 肿 瘤 细 胞 标 志 物 mrna 的 表 达, 检 测 外 周 血 中 微 量 肿 瘤 细 胞 已 成 为 可 能 并 被 尝 试 RT-PCR 有 着 比 病 理 学 或 ELISA/RIA 等 方 法 无 法 比 拟 的 高 灵 敏 度 极 相 对 的 高 特 异 性, 为 外 周 血 中 微 量 肿 瘤 细 胞 的 检 测 带 来 希 望 同 时, 如 果 对 标 本 进 行 定 量 检 测, 将 对 监 控 病 程 治 疗 效 果 转 移 状 况 等 方 面 提 供 更 多 的 临 床 信 息 无 疑, 这 将 是 一 个 很 有 意 义 的 工 作 四 为 什 么 要 以 外 周 血 为 恶 性 肿 瘤 标 志 物 的 核 酸 为 检 测 标 本? 目 前 肿 瘤 转 移 的 发 现 和 确 定, 主 要 靠 临 床 及 病 理 资 料, 根 据 影 像 学 (X 光 片 CT 磁 共 振 PET 等 ) 或 病 理 形 态 来 诊 断 但 要 使 影 像 学 检 查 中 能 够 发 现 病 灶, 需 要 一 定 大 小 转 移 灶 的 形 成 能 够 被 仪 器 成 像 且 有 效 分 辨 ; 要 是 病 理 形 态 上 判 断 出 细 胞 恶 变 与 否, 则 一 定 要 取 到 合 适 的 检 测 标 本, 且 有 相 当 数 量 的 可 观 察 到 的 肿 瘤 细 胞 存 在 从 这 一 点 上 讲, 无 论 是 影 像 学 诊 断 还 是 病 理 学 诊 断, 都 是 肿 瘤 形 成 及 转 移 后 相 当 晚 期 有 了 大 量 恶 变 细 胞 积 累 的 极 端, 如 果 在 肿 瘤 发 生 转 移 早 期, 在 病 理 上 可 观 察 到 或 转 移 灶 形 成 前 就 发 现, 并 确 定 转 移, 则 可 以 指 导 临 床 治 疗 方 案 的 设 计, 并 提 供 有 力 的 预 后 依 据 血 道 转 移 是 肿 瘤 扩 散 的 主 要 途 径 之 一, 因 才 在 患 者 外 周 血 中 进 行 肿 瘤 细 胞 特 异 性 表 达 基 因 检 测 是 热 线 电 话 :021-6485 8053 8009881995 E-mail:master@shinegene.org.cn 网 址 :www.shinegene.org.cn 3

了 解 肿 瘤 转 移 情 况 的 一 个 有 效 的 方 式, 因 此 肿 瘤 标 志 物 的 检 测 对 肿 瘤 形 成 及 转 移 的 诊 断 具 有 极 大 的 帮 助 但 是 在 肿 瘤 转 移 发 生 的 早 期, 外 周 血 中 的 肿 瘤 细 胞 常 常 很 少, 无 法 完 成 依 赖 病 理 形 态 检 查, 同 时 肿 瘤 特 异 性 抗 原 的 含 量 也 很 少, 也 很 难 通 过 常 用 的 酶 标 免 疫 吸 附 分 析 (ELISA) 或 放 射 免 疫 分 析 (RIA) 等 方 法 检 测 到, 因 此, 对 循 环 血 中 的 微 量 肿 瘤 细 胞 基 因 表 达 和 一 些 特 异 性 产 物 检 测 的 研 究, 已 经 引 起 人 们 的 广 泛 关 注 五 核 酸 检 测 肿 瘤 标 志 物 中, 为 什 么 要 采 用 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术? 在 实 时 荧 光 定 量 PCR 检 测 技 术 出 现 之 前, 人 们 对 PCR 模 板 的 定 量 不 论 是 直 接 PCR 还 是 竞 争 性 PCR, 基 本 上 都 要 通 过 PCR 产 物 电 泳, 再 将 电 泳 结 果 经 计 算 机 图 像 处 理, 根 据 电 泳 条 带 的 亮 度 来 确 定 最 终 PCR 产 物 量 的 多 少, 或 将 带 标 记 的 PCR 产 物 以 ELISA 的 方 式 进 行 检 测, 再 由 此 推 测 起 始 模 板 的 量 的 多 少, 但 这 些 方 法 实 际 上 属 于 半 定 量 水 平, 因 为 即 使 PCR 条 件 已 最 优 化, 电 泳 及 后 续 步 骤 的 操 作 的 不 稳 定 性 仍 会 给 结 果 分 析 带 来 影 响, 从 而 影 响 定 量 这 一 目 的 随 着 实 时 荧 光 定 量 PCR 技 术 的 出 现, 人 们 可 以 真 正 地 做 到 对 PCR 模 板 的 精 确 定 量, 这 种 定 量 不 仅 保 持 了 常 规 PCR 的 高 灵 敏 性, 而 且 由 于 特 异 性 荧 光 探 针 杂 交 技 术 的 应 用, 使 得 被 检 测 基 因 的 特 异 性 大 大 提 高 六 AFP mrna 表 达 水 平 检 测 的 临 床 意 义 AFP 是 1956 年 由 Bregstrand 等 首 次 发 现 的 血 清 蛋 白 成 分 1963 年 Abelev 等 首 先 报 道 了 它 与 肝 细 胞 的 密 切 关 系 原 发 性 肝 癌 细 胞 大 量 表 达 的 AFP 也 是 一 种 较 为 特 异 的 肿 瘤 标 记 物 有 大 量 的 文 献 报 道 利 用 RT-PCR 技 术 检 测 肝 癌 患 者 外 周 血 中 AFP mrna 的 表 达 结 果 表 明,AFP mrna 在 健 康 志 愿 者 非 肝 癌 恶 性 肿 瘤 患 者 外 周 血 中 均 为 阴 性 ; 在 肝 细 胞 癌 组 外 周 血 中 AFP mrna 的 检 出 率 (61.5-67.7%) 明 显 高 于 对 照 性 乙 型 肝 炎 或 肝 硬 化 组 (0-13.3%) AFP mrna 检 出 率 与 临 床 分 期 门 静 脉 癌 栓 肝 外 转 移 显 著 相 关 经 1 年 的 随 访 发 现 治 疗 后 外 周 血 AFP mrna 阳 性 与 肝 癌 患 者 预 后 有 显 著 相 关 在 血 清 AFP<25 ug/l 的 肝 癌 病 人 血 中,58.3% 可 检 出 AFP mrna AFP mrna 可 作 为 血 循 环 中 有 肝 癌 细 胞 或 肝 细 胞 的 标 志 物, 在 肝 癌 患 者, 用 此 方 法 可 以 较 目 前 其 他 检 查 方 法 更 早 发 现 肝 癌 患 者 体 内 的 血 行 微 转 移 灶, 阳 性 预 示 有 血 源 性 转 移 的 可 能, 可 作 为 预 测 肝 癌 复 发 转 移 的 参 考 指 标 ;AFP mrna 可 作 为 定 性 诊 断 原 发 性 肝 癌 的 血 液 学 指 标, 也 可 作 为 肝 癌 细 胞 转 移 的 标 志, 并 可 判 断 肝 癌 临 床 分 期 转 移 倾 向 预 后 和 复 发 并 且 AFP mrna 对 血 清 AFP 阴 性 或 低 值 的 肝 癌 患 者 能 起 到 补 充 诊 断 作 用 该 方 法 在 1 ml 血 中 含 有 5 个 干 癌 细 胞 时 即 可 检 测 到 AFP mrna 热 线 电 话 :021-6485 8053 8009881995 E-mail:master@shinegene.org.cn 网 址 :www.shinegene.org.cn 4

另 有 文 献 报 道, 应 用 巢 式 RT-PCR 方 法 检 测 肝 癌 患 者 手 术 和 TAE 术 前 后 外 周 血 中 AFP mrna 的 表 达, 结 果 表 明, 手 术 术 前 AFP mrna 阳 性 患 者 术 后 有 57.1% 转 阴, 随 访 观 察 术 前 或 术 后 AFP mrna 阳 性 患 者 中 发 生 肝 内 复 发 率 为 50.0%, 而 术 前 或 术 后 AFP mrna 均 为 阴 性 患 者 中 除 肝 内 转 移 者 仅 为 14.3%, 随 访 期 间 未 发 现 患 者 术 后 发 生 远 处 转 移 TAE 患 者 术 前 阳 性 者 依 然 全 部 阳 性, 未 发 现 有 转 阴 者 ; 阴 性 患 者 中 有 18.2% 转 为 阳 性 随 访 观 察 发 现 AFP mrna 阳 性 患 者 肝 内 肝 外 转 移 发 生 率 和 AFP mrna 阴 性 患 者 差 异 显 著 手 术 切 除 原 发 灶 可 消 除 播 散 肝 癌 细 胞 的 来 源, 但 手 术 亦 可 能 激 活 癌 细 胞 而 产 生 血 道 播 散 ; 而 TAE 可 能 促 使 原 发 性 肝 癌 发 生 血 道 播 散, 临 床 可 给 予 积 极 治 疗, 预 防 肝 外 转 移 的 发 生 同 时, 检 测 肝 癌 患 者 外 周 血 中 的 AFP mrna, 是 一 种 灵 敏 的 预 后 诊 断 方 法 七 CK19 CK20 mrna 表 达 水 平 检 测 的 临 床 意 义 细 胞 角 蛋 白 是 一 类 细 胞 结 构 蛋 白 的 总 称, 根 据 相 对 分 子 量 等 电 点 等 不 同 可 分 为 1-20 种 片 段 其 中 肿 瘤 细 胞 中 含 量 最 丰 富 者 为 18(CK18) 和 19(CK19) 片 段 CK19 CK20 等 细 胞 角 蛋 白 为 上 皮 来 源 的 细 胞 所 特 异 性 表 达, 在 外 周 血 及 淋 巴 结 中 应 无 表 达 这 些 蛋 白 的 细 胞 如 果 在 外 周 血 或 淋 巴 结 中 检 测 到 CK19 CK20 的 mrna, 则 表 明 有 上 皮 来 源 的 细 胞 存 在, 如 果 是 肿 瘤 患 者, 则 应 考 虑 通 过 血 道 和 淋 巴 结 发 生 微 转 移 的 可 能 早 期 诊 断 和 及 时 发 现 微 转 移 现 象 对 于 临 床 治 疗 和 判 断 预 后 有 着 重 要 意 义, 在 这 一 方 面 已 积 累 了 大 量 的 研 究 文 献 有 文 献 报 道, 采 用 RT-PCR 技 术 检 测 肿 瘤 患 者 外 周 血 CK19 CK20 mrna 的 表 达,40% 肺 癌 外 周 血 标 本 中 CK19 mrna 阳 性,6.6% 肺 良 性 病 变 中 阳 性, 正 常 人 为 阴 性 有 转 移 的 肺 癌 患 者, 其 外 周 血 CK19 mrna 均 为 阳 性,20% 检 测 时 尚 无 转 移 证 据 者 为 阳 性 胃 癌 病 人 外 周 血 中 检 测 出 CK19 mrna 阳 性 率 30.9%, 阳 性 结 果 与 肿 瘤 大 小 浸 润 深 度 和 肿 瘤 分 期 密 切 相 关 正 常 人 外 周 血 中 CK20 mrna 阴 性, 大 肠 癌 患 者 CK20 mrna 检 出 率 达 40.4%, 其 中 Dukes B,C,D 期 患 者 外 周 血 CK20 mrna 检 出 率 分 别 为 25.0%,41.2% 和 87.5% 肝 转 移 患 者 CK20 mrna 检 出 率 为 87.5%, 无 肝 转 移 患 者 检 出 率 为 30.8% CK19 CK20 mrna 检 测 可 作 为 上 皮 来 源 肿 瘤 患 者 外 周 血 微 转 移 指 标, 有 助 于 预 测 肿 瘤 复 发 及 转 移, 识 别 高 危 患 者 另 外 一 项 以 CK20 mrna 为 指 标 检 测 手 术 治 疗 的 大 肠 癌 患 者 血 液 中 结 肠 癌 细 胞 结 果 59.63% 病 人 外 周 血 75.9% 的 门 静 脉 血 中 阳 性, 阳 性 检 出 与 Duke s 分 期 淋 巴 转 移 显 著 相 关 门 静 脉 血 CK20 扩 增 阳 性 者, 术 后 发 生 肝 转 移 机 会 增 加, 外 周 血 CK20 的 检 测 可 帮 助 综 合 判 断 疾 病 恶 性 程 度 及 患 者 预 后, 研 究 大 肠 癌 患 者 外 周 血 微 转 移 对 化 疗 的 反 应 及 其 与 相 关 基 因 的 关 系, 有 助 于 知 道 辅 助 治 疗 药 物 的 选 择 和 治 疗 方 案 的 确 定, 可 作 为 临 床 个 体 化 治 疗 的 重 要 参 考 为 指 导 辅 助 治 疗 提 供 了 理 论 依 据 在 大 量 对 乳 腺 癌 胃 癌 食 管 癌 肺 癌 和 大 肠 癌 患 者 的 淋 巴 结 中 检 测 CK19 CK20 mrna 表 达 热 线 电 话 :021-6485 8053 8009881995 E-mail:master@shinegene.org.cn 网 址 :www.shinegene.org.cn 5

的 研 究 中, 正 常 对 照 淋 巴 结 RT-PCR 结 果 均 为 阴 性, 病 理 检 查 有 转 移 的 淋 巴 结 RT-PCR 结 果 均 为 阳 性, 病 理 检 查 阴 性 的 淋 巴 结 中 有 9.1-25% 为 RT-PCR 结 果 阳 性, 说 明 RT-PCR 法 检 测 CK19 CK20 mrna 结 果 较 病 理 组 织 学 检 出 淋 巴 结 敏 感 性 更 高, 其 结 果 可 能 对 改 进 分 期 和 治 疗 方 案 具 有 积 极 的 临 床 意 义 八 CEA mrna 表 达 水 平 检 测 的 临 床 意 义 癌 胚 抗 原 最 初 是 大 肠 癌 组 织 中 抽 提 的 抗 原, 也 存 在 于 胎 儿 的 肠 管 中 1965 年,Gold 等 发 现 CEA 之 初, 曾 认 为 它 对 于 大 肠 癌 等 消 化 道 肿 瘤 是 特 异 性 的 标 志 物, 其 后 的 研 究 表 明 不 仅 消 化 道 肿 瘤, 其 他 肿 瘤 也 可 不 同 程 度 地 表 达 CEA CEA 是 在 胃 肠 道 肿 瘤 细 胞 中 表 达 的 较 为 特 异 的 肿 瘤 标 记 物 有 作 者 报 道 应 用 巢 式 RT-PCE 检 测 肿 瘤 组 织 及 此 肿 瘤 标 本 的 远 端 边 缘 组 织 良 性 消 化 道 疾 病 组 织 的 CEA mrna 表 达, 结 果 肿 瘤 组 织 37 例 (84.1%), 肿 瘤 远 端 边 缘 组 织 13 例 (29.5%), 良 性 疾 病 组 织 3 例 (12.5%)CEA mrna 阳 性 CEA mrna 指 标 诊 断 消 化 道 恶 性 肿 瘤 的 特 异 性 为 87.5% 敏 感 性 为 84.1% 由 此 认 为 检 测 组 织 CEA mrna 指 标 诊 断 消 化 道 恶 性 肿 瘤 的 特 异 性 和 敏 感 性 均 较 高, 尤 其 在 检 测 组 织 远 端 微 小 瘤 灶 方 面 有 较 大 优 势 在 探 讨 应 用 巢 式 RT-PCR 技 术 检 测 胸 水 标 本 CEA mrna 指 标 鉴 别 诊 断 恶 性 胸 水 的 应 用 价 值 方 面, 有 研 究 表 明, 恶 性 胸 水 CEA mrna 的 阳 性 检 测 率 达 79.5% 而 良 性 胸 水 仅 为 5.9% CEA mrna 指 标 的 特 异 性 为 94.1% 敏 感 性 为 79.5%, 因 此 在 诊 断 和 鉴 别 诊 断 恶 性 胸 水 方 面,CEA mrna 是 一 个 特 异 性 和 敏 感 性 较 好 的 实 用 指 标, 具 有 应 用 价 值 另 外, 用 RT-PCR 方 法 测 定 腹 腔 冲 洗 中 游 离 细 胞 的 CEA mrna 表 达, 同 时 做 冲 洗 液 细 胞 学 检 查 (PLC) 的 研 究 表 明, 腹 腔 冲 洗 液 游 离 细 胞 的 CEA mrna 表 达 量 随 病 期 的 进 展 浸 润 程 度 的 加 深 而 逐 渐 升 高 ; 因 胃 浆 膜 类 型 和 大 体 类 型 的 不 同 其 阳 性 级 别 亦 存 在 明 显 差 异 该 方 法 对 于 检 测 腹 腔 微 量 游 离 癌 细 胞 较 PLC 有 更 高 的 灵 敏 性 和 特 异 性, 是 一 种 检 测 胃 癌 腹 膜 微 转 移 的 较 好 方 法 在 用 RT-PCR 方 法 检 测 正 常 人 及 肿 瘤 病 人 外 周 血 有 核 细 胞 成 分 中 的 CEA mrna 的 研 究 中, 肿 瘤 患 者 的 阳 性 率 为 54.35%, 而 正 常 对 照 者 均 为 阴 性 肿 瘤 临 床 分 期 为 III IV 期 的 患 者 血 清 CEA mrna 检 出 率 明 显 高 于 I II 期 的 病 人, 临 床 有 远 处 转 移 者 CEA mrna 阳 性 率 明 显 高 于 无 远 处 转 移 者 但 外 周 血 检 测 CEA mrna 与 血 清 CEA 水 平 无 显 著 性 关 系 CEA mrna 的 检 出 率 随 病 程 的 进 展 而 升 高, 而 CEA 与 病 程 无 明 显 的 相 关 性 RT-PCR 是 肿 瘤 微 循 环 检 测 的 灵 敏 方 法, 血 中 CEA mrna 阳 性 提 示 肿 瘤 的 早 期 转 移 九 upa mrna 表 达 水 平 检 测 的 临 床 意 义 热 线 电 话 :021-6485 8053 8009881995 E-mail:master@shinegene.org.cn 网 址 :www.shinegene.org.cn 6

恶 性 实 体 瘤 的 侵 袭 转 移 是 治 疗 失 败 和 病 人 死 亡 的 主 要 原 因, 尿 激 酶 型 纤 溶 酶 原 激 活 因 子 upa 主 要 参 与 纤 溶 酶 原 的 激 活 和 细 胞 外 基 质 的 降 解, 是 介 导 肿 瘤 转 移 侵 袭 转 移 的 主 要 因 子 之 一 通 过 核 酸 杂 交 技 术 检 测 胃 癌 及 其 癌 旁 组 织 中 upa mrna 表 达 的 研 究 表 明, 癌 与 癌 周 比 较,uPA 阳 性 表 达 率 明 显 升 高, 在 伴 有 淋 巴 结 转 移 的 病 例 upa 阳 性 率 为 65.5%, 无 转 移 的 则 为 28.6% 在 浸 润 至 基 层 浆 膜 层 的 病 例 upa 阳 性 率 为 65.8%, 浸 润 到 黏 膜 和 黏 膜 下 层 病 例 阳 性 率 为 15.4% 和 26.9% 另 一 项 类 似 研 究 表 明, 胃 癌 近 癌 旁 和 远 癌 胃 组 织 upa mrna 表 达 阳 性 率 分 别 为 85% 31% 和 10% 早 期 胃 癌 为 阳 性 表 达, 进 展 期 胃 癌 有 浆 膜 侵 袭 和 淋 巴 结 转 移 的 胃 癌 呈 显 著 高 表 达 这 些 研 究 均 说 明 upa 表 达 在 胃 癌 中 明 显 升 高, 与 胃 癌 浸 润 转 移 密 切 相 关 检 测 涎 腺 肿 瘤 组 织 upa mrna 表 达 的 研 究 表 明, 良 性 肿 瘤 组 织 upa mrna 表 达 无 明 显 升 高, 恶 性 肿 瘤 组 织 upa mrna 含 量 显 著 高 于 相 应 癌 旁 组 织 和 良 性 肿 瘤 组 织,uPA 的 表 达 水 平 与 淋 巴 结 转 移 关 系 密 切, 伴 有 淋 巴 结 转 移 和 肺 转 移 的 癌 组 织 upa 高 于 无 转 移 者 涎 腺 肿 瘤 组 织 upa 表 达 明 显 增 强, 表 达 水 平 与 肿 瘤 的 转 移 能 力 相 关 在 对 人 脑 胶 质 瘤 的 临 床 研 究 中 发 现, 高 级 别 胶 质 瘤 较 低 级 别 和 正 常 脑 组 织 upa mrna 表 达 水 平 明 显 增 高, 低 级 别 胶 质 瘤 与 正 常 脑 组 织 的 表 达 无 显 著 差 异, 术 后 18 个 月 内 复 发 和 生 存 期 小 于 3 年 者,uPA mrna 表 达 显 著 高 于 术 后 18 个 月 无 复 发 及 生 存 期 大 于 3 年 者,uPA mrna 表 达 水 平 与 胶 质 瘤 微 血 管 数 量 呈 显 著 相 关, 与 患 者 性 别 年 龄 及 肿 瘤 大 小 无 显 著 相 关 UPA 基 因 表 达 与 人 脑 胶 质 瘤 恶 性 度 侵 袭 性 及 血 管 生 成 有 关, 对 胶 质 瘤 的 复 发 和 预 后 有 一 定 的 意 义 另 外, 伴 肝 内 浸 润 和 转 移 癌 组 织 中 upa mrna 水 平 明 显 高 于 无 肝 内 浸 润 和 转 移 肝 组 织, 高 分 化 HCC 癌 组 织 与 中 低 分 化 HCC 相 比,uPA 差 异 显 著, 这 些 结 果 表 明 癌 组 织 内 upa 与 HCC 浸 润 转 移 机 细 胞 分 化 密 切 相 关 值 得 注 意 的 是, 肾 癌 组 织 upa mrna 表 达 水 平 低 于 癌 旁 组 织, 并 与 病 理 分 级 呈 负 相 关 导 致 这 一 现 象 的 原 因 仍 在 研 究 中 目 前 还 未 有 系 统 研 究 肿 瘤 患 者 尤 其 是 有 转 移 的 患 者 外 周 血 中 upa mrna 表 达 的 数 据, 但 这 也 是 很 值 得 研 究 的 一 个 方 面 十 MDR1 mrna 表 达 水 平 检 测 的 临 床 意 义 MDR1 的 蛋 白 产 物 定 位 于 细 胞 膜 上 的 分 子 量 为 170 kda 的 P 糖 蛋 白 (P-gp), 可 以 将 细 胞 内 的 药 物 排 至 细 胞 外, 从 而 使 细 胞 产 生 耐 药 一 项 研 究 表 明, 对 不 同 类 型 白 血 病 患 者 MDR1 mrna 的 表 达 进 行 RT-PCR 检 测,ANLL 的 初 始 敏 感 完 全 缓 解 和 复 发 难 治 组 mdr-1 阳 性 表 达 分 别 为 0% 4.54% 59.09%, 在 ALL 则 分 别 为 0% 0% 33.33% 另 有 研 究 表 明, 初 治 组 mdr-1 的 阳 性 表 达 率 为 35.00%, 复 发 难 治 组 mdr-1 阳 性 表 达 率 热 线 电 话 :021-54460832 8009881995 E-mail:master@shinegene.org.cn 网 址 :www.shinegene.org.cn 7

为 84.62%, 正 常 骨 髓 对 照 均 为 阴 性 表 达,mdr-1 阳 性 与 mdr-1 阴 性 患 者 的 完 全 缓 解 率 分 别 为 21.00-22.22% 和 73.33-82.00%, 临 床 耐 药 与 非 耐 药 组 mdr-1 阳 性 检 测 率 分 别 为 77.78% 和 26.67% 因 此 mdr-1 表 达 可 作 为 一 个 临 床 化 疗 耐 药 指 标, 有 助 于 白 血 病 个 体 化 疗 方 案 制 定 MDR1 的 表 达 与 许 多 实 体 瘤 如 肝 癌 肺 癌 大 肠 癌 等 的 多 药 耐 药 也 密 切 相 关, 与 其 他 多 药 耐 药 相 关 基 因 如 MRP GST-π LRP 等 共 同 构 成 临 床 耐 药 的 基 础, 但 一 般 情 况 下 MDR1 的 表 达 与 细 胞 分 化 程 度, 临 床 分 期 及 病 理 类 型 无 关 MDR1 表 达 的 定 量 检 测 对 肿 瘤 患 者 的 个 体 化 化 疗 有 很 重 要 的 指 导 意 义 上 海 闪 晶 分 子 生 物 科 技 有 限 公 司 地 址 : 上 海 市 邮 编 :201109 联 系 : 市 场 部 电 话 :021-54460832 800-988-1995 E-mail:master@shinegene.org.cn 网 址 :www.shinegene.org.cn 热 线 电 话 :021-54460832 8009881995 E-mail:master@shinegene.org.cn 网 址 :www.shinegene.org.cn 8