论 著 临 床 研 究 STR 遗 传 标 记 在 广 西 地 区 血 友 病 A 携 带 者 诊 断 中 的 应 用 周 峻 荔 韦 红 英 2 吴 华 2 胡 艳 玲 梁 伟 玲 (. 广 西 医 科 大 学 第 一 附 属 医 院 儿 科, 广 西 南 宁 53002;2. 广 西 医 科 大 学 医 学 科 学 实 验 中 心, 广 西 南 宁 53002) 方 法 [ 摘 要 ] 目 的 建 立 理 想 的 STR 遗 传 标 记 体 系, 对 广 西 地 区 血 友 病 A 携 带 者 进 行 快 速 简 便 的 基 因 诊 断 选 取 广 西 地 区 0 个 血 友 病 A 家 系 作 为 研 究 对 象, 运 用 荧 光 PCR 联 合 毛 细 管 电 泳 的 方 法, 对 家 系 成 员 中 FⅧ 基 因 内 外 具 有 高 度 遗 传 性 的 3 个 STR 位 点 F8Int3 DXS073 DXS990 进 行 等 位 基 因 分 型, 评 估 该 体 系 用 于 家 系 中 血 友 病 A 携 带 者 的 诊 断 效 率, 并 对 待 检 者 进 行 携 带 者 诊 查 结 果 0 个 血 友 病 A 家 系 中, 例 肯 定 女 性 携 带 者 均 含 有 与 相 应 先 证 者 完 全 一 致 的 3 个 STR 等 位 基 因 (F8Int3 DXS073 DXS990) 片 段 长 度 ; 在 待 检 的 8 例 女 性 中,5 例 检 出 3 个 STR 等 位 基 因 片 段 与 相 应 家 系 中 先 证 者 完 全 相 同, 被 诊 断 为 血 友 病 A 携 带 者 结 论 联 合 应 用 3 个 STR 位 点 F8Int3 DXS073 DXS990 进 行 遗 传 分 析 能 够 快 速 检 出 血 友 病 A 携 带 者, 给 血 友 病 A 产 前 诊 断 提 供 可 靠 的 依 据 [,202,4(2):95-955] [ 关 键 词 ] 短 串 联 重 复 序 列 ; 血 友 病 A; 基 因 分 型 ; 携 带 者 [ 中 图 分 类 号 ] R554 +. [ 文 献 标 识 码 ] A [ 文 章 编 号 ] 008-8830(202)2-095-05 ApplicationofSTRgeneticmarkersystem inthedetectionofhemophiliaa carriers inguangxi,china ZHOUJun Li,WEIHong Ying,WUHua,HUYan Ling,LIANGWei Ling.DepartmentofPediatrics,FirstAfiliatedHos pitalofguangximedicaluniversity,nanning53002,china(weih Y,Email:lzwwhy@yahoo.com.cn) Abstract:Objective Toestablishafastandsimplegeneticdiagnosistechniquebasedonareliable,shorttandemrepeat (STR)geneticmarkersystemforthedetectionofhemophiliaAcariersinGuangxi,China.Methods FluorescentPCRand capilaryelectrophoresiswereusedforalelegenotypingatthreeintragenic/extragenicstr loci(f8int3,dxs073,and DXS990)ofFV Igeneinthemembersof0hemophiliaAfamiliesinGuangxi,soastoevaluatethediagnosticeficiencyofthe STRgeneticmarkersystem fordetectionofhemophiliaacariers.thenthestrgeneticmarkersystem wasusedtodetect hemophiliaacariersamongexaminees.results Inthe0hemophiliaAfamilies,confirmedfemalecariershadthesame alelefragmentlengthsatthethreestrloci(f8int3,dxs073,anddxs990)astheprobands.ofthe8femalesexamined, 5hadalelefragmentsatthethreeSTRloci(F8Int3,DXS073,andDXS990)whichwereidenticaltothoseoftheprobands, andthustheywerediagnosedashemophiliaa cariers.conclusions GeneticanalysisatthethreeSTR loci(f8int3, DXS073,andDXS990)canbeusedtodetecthemophiliaAcariersrapidlyandprovidereliablebasisforprenataldiagnosisof hemophiliaa. [,202,4(2):95-955] Keywords: Shorttandemrepeats;HemophiliaA;Genotyping;Carier 血 友 病 A 是 最 常 见 的 遗 传 性 出 血 性 疾 病 之 一, 为 X 连 锁 隐 性 遗 传, 即 女 性 传 递 男 性 发 病, 男 性 患 病 率 约 为 /5000 [], 该 病 主 要 由 于 凝 血 因 子 Ⅷ (F Ⅷ) 基 因 缺 陷 而 引 起 血 浆 内 FⅧ 含 量 不 足 或 功 能 缺 陷, 导 致 凝 血 功 能 障 碍 临 床 上 根 据 患 者 新 鲜 血 浆 所 含 因 子 Ⅷ C 活 性 水 平 的 高 低, 将 血 友 病 A 分 为 重 型 (<%) 中 型 (% ~5%) 轻 型 (>5% ~25%) 及 亚 临 床 型 (>25% ~45%) [2] 目 前 尚 无 有 效 根 治 措 施, 只 能 采 用 输 入 凝 血 因 子 的 终 身 替 代 疗 法 来 控 制 病 情, 携 带 者 诊 查 及 产 前 诊 断 是 有 效 降 低 本 病 发 生 率 的 首 选 措 施 本 研 究 选 择 FⅧ 基 因 内 外 的 3 个 短 串 联 重 复 序 列 (shorttandem repeats,str) 基 因 位 点 作 为 遗 传 标 记, 运 用 荧 光 PCR 联 合 毛 细 管 电 泳 自 动 分 型 的 方 法 对 广 西 地 区 0 个 血 友 病 A 家 系 进 行 携 [ 收 稿 日 期 ]202-05-22;[ 修 回 日 期 ]202-07-22 [ 项 目 基 金 ] 广 西 科 学 基 金 项 目 (0728070) [ 作 者 简 介 ] 周 峻 荔, 女, 硕 士 研 究 生 [ 通 信 作 者 ] 韦 红 英, 副 主 任 医 师 95
带 者 诊 断, 现 将 结 果 报 道 如 下 资 料 与 方 法. 研 究 对 象 0 个 无 血 缘 关 系 的 血 友 病 A 家 系 纳 入 本 研 究, 各 家 系 成 员 资 料 见 表 个 体 3 代 均 为 广 西 人 群, 民 族 为 汉 族 或 壮 族 静 脉 血 标 本 采 集 经 广 西 医 科 大 学 第 一 附 属 医 院 医 学 伦 理 委 员 会 批 准, 并 获 得 受 试 者 知 情 同 意 表 0 个 家 系 成 员 的 基 本 资 料 家 系 号 受 检 者 STR 位 点 的 等 位 基 因 片 段 大 小 (bp) 是 否 APTT(s) FⅧ C(%) 编 号 身 份 年 龄 ( 岁 ) F8Int3 DXS073 DXS990 携 带 者 先 证 者 2 99.9.35 52 37 97 Ⅰ 2 先 证 者 舅 舅 34 80.4.8 52 37 97 3 先 证 者 母 亲 36 35.4 55.8 52 52 37 25 97 2 是 4 先 证 者 妹 妹 5 32.0 8.5 52 52 37 25 203 2 否 5 先 证 者 4 23.6.3 56 25 203 Ⅱ 6 先 证 者 母 亲 30 35.5 59.3 56 50 25 23 203 99 是 7 先 证 者 姨 妈 28 3.2 65.6 56 50 25 23 203 99 是 8 先 证 者 28 6.8.3 50 25 20 Ⅲ 9 先 证 者 弟 弟 26 0.6 4.3 50 25 20 0 先 证 者 母 亲 50 35.8 57.6 50 50 25 25 20 95 是 先 证 者 女 儿 5 37.6 70.0 50 50 25 23 20 203 是 2 先 证 者 55 70.5 2.8 50 25 97 Ⅳ 3 先 证 者 弟 弟 48 6.6 3 50 25 97 4 先 证 者 妹 妹 49 35.9 82.7 50 52 25 25 97 97 是 5 先 证 者 妹 妹 2 53 37.7 62.4 50 52 25 25 97 97 是 6 先 证 者 7 03.9 4. 52 25 95 Ⅴ 7 先 证 者 舅 舅 28 49.3 0.98 52 25 95 8 先 证 者 母 亲 30 36.5 6.2 52 52 25 23 95 95 是 9 先 证 者 29 52.7 9.4 48 37 25 Ⅵ 20 先 证 者 女 儿 6 37.4 62.4 48 52 37 25 25 203 是 2 先 证 者 姨 妈 38 37.5 55.9 48 52 37 25 23 23 否 22 先 证 者 8 00.5.2 50 25 203 Ⅶ 23,# 先 证 者 母 亲 35 36.9 52.9 50 48 25 25 203 203 是 24 先 证 者 妹 妹 6 34.2 83.3 50 48 25 35 203 95 是 25 先 证 者 9 38.6.09 56 23 95 Ⅷ 26,# 先 证 者 母 亲 35 33.7 5.8 56 52 23 25 95 99 是 27 先 证 者 姨 妈 33 33.5 57.4 54 52 25 25 95 99 否 28 先 证 者 22 0..22 48 23 95 Ⅸ 29,# 先 证 者 母 亲 45 38.4 63.8 48 50 23 37 95 203 是 30 先 证 者 妹 妹 9 4.8 44.4 48 50 23 23 95 203 是 3 先 证 者 7 03.6.97 50 25 95 Ⅹ 32,# 先 证 者 母 亲 30 30.7 06.3 50 52 25 27 95 209 是 33 先 证 者 妹 妹 5 37.5 78.5 50 50 25 35 95 203 是 注 : 表 示 血 友 病 A 携 带 待 检 者 ; 表 示 血 友 病 A 肯 定 携 带 者 ;# 表 示 经 直 接 基 因 测 试 确 诊 为 血 友 病 A 女 性 携 带 者 952
中国当代儿科杂志 第 14卷第 1期 Chi JCo mpp d i r 0 1年 1月 Vo l 1 4No 1 D c 01 方法 1 DNA的提取 运用血液 DNA提取试剂 结果 盒 Qi g 按照试剂说明书的步骤提取提取的 DNA通过紫外可见分光光度计测定其浓度和含量 10个血友病 A家系中11例肯定女性携带者 引物合成及荧光标记 引物合成参见文 均含有与相应先证者完全一致的 3个 STR等位基 献 3 由上海生工合成 S TR位点的引物序列及荧 因 F8I 13 DXS 103 DXS 01 片段长度其中有 光标记 产物长度见表 4例经直接基因诊断确定为女性携带者 在待检的 3 PCR反 应 体 系 PCP反 应 的 总 体 积 为 8例女性中 5例检出 3个 STR等位基因片段与相 0μL Mi x1 0μL模板 1μL上下游引物各取 0 4μL 应家系中先证者完全相同被诊断为血友病 A携带 引物浓度为 1 0μM 运用 ABI 0进行 PCR扩增 者其他 3例 STR等位基因片段与先证者不完全相 PCR循环条件为 5 预变性 5mi 5 变性 3 0s 同被判断为非血友病 A携带者 见表 1 本研究应用家系Ⅰ进行说明家系情况见表 3 6 0 退火 4 5s 延伸 5mi 共3 0个循环 再延 伸 5mi 编号 1 均为血友病 A编号 3 4分别为先证者的 4 毛细管电泳 去离子甲酰胺 G S c 母亲和妹妹其中编号 3为该家系中血友病 A肯定 0 6 50 0 ROX 分子量标准物 PCR混合产物按 TR遗传标记分析提示 携带者编号 4为待检者 S 0 6的比例混合均匀离心置 5 变性 3mi 然 编号 3带有和编号 1 同样的等位基因片断证实 后立即置冰上 10mi 运用 ABI 31 00对 PCR产物进 其为血友病 A肯定携带者 编号 4未带有和编号 1 行毛细管电泳 同样的等位基因片断可以初步判断先证者的妹 5 DNA基因分型 采用 G Sc 软件及 G o y p r软件进行 STR基因分型 妹为非血友病 A携带者见图 1 4 图 1 血友病 A家系Ⅰ3个位点 F8I 1 3DXS1 0 3DXS 0 1 的毛细管电泳图 横轴表示的是等位基因片段长度 纵轴表示的是荧光的敏感度图中字母 A代表等位基因对应的波峰单个 A表示的是纯合子两个 A表示的是杂合子其他波峰为 s uf f r峰或杂峰 1为先证者 为先证者舅舅 血友病 A患者 3为先证者母亲 4为先证者妹妹 53
表 2 各 位 点 的 引 物 序 列 及 荧 光 标 记 STR 位 点 引 物 序 列 及 荧 光 标 记 产 物 长 度 (bp) F8Int3 5 AATAAGTTTGTTGTAATTCCCATTTGC 3 5 (HEX)GCCTAGAGAATGCCAAAGTAACACA 3 DXS073 5 ATGCCCTCTCCGAGTTATTACA 3 5 (6 FAM)ATTGGTGGCCTTTGAAACAC 3 DXS990 5 GACCAGTCCTCCCTTCTGTT 3 5 (6 FAM)GTGTGGAGTGAAAGGGACAG 3 表 3 家 系 Ⅰ 相 关 成 员 的 APTT 值 及 FⅧ 活 性 52~68 20~38 86~24 编 号 家 系 成 员 APTT FⅧ 活 性 (%) 先 证 者 99.9.35 2 先 证 者 舅 舅 80.4.8 3 先 证 者 母 亲 35.4 55.8 4 先 证 者 妹 妹 32.0 8.5 图 2 血 友 病 A 家 系 Ⅰ 的 遗 传 图 谱 证 者 舅 舅,3 为 先 证 者 母 亲,4 为 先 证 者 妹 妹 3 讨 论 为 先 证 者,2 为 先 FⅧ 基 因 位 于 染 色 体 Xq28 上, 长 约 86kb, 包 含 26 个 外 显 子 及 25 个 内 含 子, 结 构 庞 大 复 杂, 且 突 变 类 型 多,70% ~80% 血 友 病 A 的 FⅧ 基 因 突 变 具 有 显 著 的 遗 传 异 质 性 [2], 几 乎 每 一 不 同 的 家 系 都 有 自 已 独 特 的 突 变 类 型, 运 用 直 接 基 因 诊 断 检 测 突 变 类 型 相 当 繁 琐 耗 时, 诊 断 费 用 昂 贵, 目 前 对 于 在 能 提 供 先 证 者 DNA 样 本 和 完 整 家 系 的 前 提 下, 国 内 外 学 者 多 通 过 分 析 DNA 遗 传 标 记 的 多 态 性 来 估 计 该 家 系 中 被 检 查 者 患 病 的 可 能 性, 即 连 锁 分 析 STR 在 人 群 中 分 布 广 泛, 因 其 多 态 性 好, 突 变 率 低, 种 属 特 异 性 高 而 倍 受 学 者 们 的 青 睐, 近 年 来 成 为 血 友 病 A 连 锁 分 析 中 最 常 用 的 遗 传 标 记 [3,5 6] 国 内 外 学 者 研 究 均 发 现,FⅧ 基 因 中 内 含 子 3(CA)n 含 有 较 为 理 想 的 多 态 信 息 量 [7], 是 迄 今 为 止 所 含 信 [8] 息 量 最 大 的 位 点,Laloz 等 报 道 其 多 态 信 息 量 达 69% 位 于 FⅧ 基 因 外 的 DXS990 和 DXS073 两 个 位 点 在 中 国 汉 族 人 群 中 也 有 较 高 的 杂 合 率, 上 海 954 瑞 金 医 院 选 用 DXS5 DXS990 G6PD DXS073 DXS08 和 F8Int3 等 数 个 多 态 性 位 点, 运 用 多 重 荧 光 PCR 的 方 法, 已 成 功 应 用 于 血 友 病 A 的 携 带 者 和 产 前 诊 断 [3] STR 存 在 地 区 和 民 族 差 异 性, 研 究 中 应 根 据 不 同 人 群 的 实 际 情 况 选 择 杂 合 率 较 高 的 一 些 标 志 物 联 合 检 测, 以 提 高 检 出 率 和 可 靠 性 由 于 壮 族 和 汉 族 为 广 西 地 区 最 大 的 2 个 民 族, 在 既 往 的 研 究 中, 本 研 究 课 题 组 对 广 西 地 区 正 常 人 群 ( 汉 族 和 壮 族 )FⅧ 基 因 内 外 的 5 个 X STR 位 点 (F8Int22 F8Int3 DXS073 DXS08 DXS990) 进 行 长 度 多 态 性 分 析, 结 果 示 5 个 STR 位 点 的 杂 合 率 分 别 为 42% 56% 57% 40% 78%, 多 态 信 息 量 分 别 为 0.43 0.59 0.59 0.42 0.82, 个 体 识 别 能 力 分 别 为 0.658 0.89 0.824 0.665 0.945, 由 此 可 见,F8Int3 DXS073 DXS990 这 3 个 STR 位 点 在 广 西 地 区 汉 族 和 壮 族 两 大 人 群 的 杂 合 率 较 高, 且 PIC 均 大 于 0.5, 为 高 度 信 息 量 位 点 [9], 此 外 三 者 个 体 识 别 能 力 (DP) 均 达 0.8 以 上, 根 据 联 合 个 体 识 别 能 力 (TDP) 公 式 :TDP= ( DP) ( DP2) ( DPn) [0],3 个 STR 位 点 累 计 个 体 识 别 能 力 为 0.9824 由 于 F8Int3 DXS073 DXS990 这 3 个 STR 位 点 具 有 较 高 的 遗 传 性, 且 联 合 个 体 识 别 能 力 高, 可 入 选 为 广 西 地 区 血 友 病 A 家 系 连 锁 分 析 的 遗 传 标 记 位 点 本 研 究 运 用 了 荧 光 PCR 的 方 法, 将 这 3 个 入 选 的 STR 位 点 (F8Int3 DXS073 DXS990) 作 为 遗 传 标 记 联 合 应 用 于 0 个 血 友 病 A 家 系 进 行 连 锁 分 析, 结 果 所 有 肯 定 女 性 携 带 者 均 被 检 出 ;8 例 待 检 者 中,5 例 被 诊 断 为 血 友 病 A 携 带 者,3 例 被 判 断 为 非 血 友 病 A 携 带 者 提 示 联 合 应 用 适 合 本 土 的 STR 遗 传 标 记 体 系 能 够 快 速 检 出 血 友 病 A 携 带 者, 并 为 下 一 步 血 友 病 A 产 前 诊 断 提 供 了 可 靠 的 遗 传 信 息 STR 连 锁 分 析 用 于 血 友 病 A 的 携 带 者 诊 断 具 有 简 单 快 速 经 济 等 优 势, 然 而, 本 法 的 应 用 受 到 特 定 家 系 条 件 的 限 制 其 适 用 范 围 包 括 :() 肯 定 女 性 携 带 者 家 系 中 携 带 者 的 诊 断 所 谓 肯 定 女 性 携 带 者, 是 指 父 亲 为 血 友 病 A, 或 2 个 儿 子 为 血 友 病 A, 或 一 个 儿 子 患 病, 并 且 有 其 他 男 性 亲 属 为 血 友 病 A 的 女 性 (2) 联 合 直 接 测 序 法 对 可 疑 女 性 携 带 者 家 系 中 携 带 者 的 诊 断 所 谓 可 疑 女 性 携 带 者, 即 有 一 个 儿 子 患 病, 其 他 家 庭 成 员 正 常, 或 其 家 系 中 有 血 友 病 A 的 女 性 [4] 首 先 对 先 证 者 及 其 母 亲 进 行 直 接 基 因 诊 断, 在 确 定 母 亲 为 肯 定 女 性 携 带 者 后 可 用 STR 连 锁 分 析 进 行 家 系 中 携 带 者 诊 断 (3) 同 样 的 诊 断 程 序, 不 仅 可 以 应 用 于 判 断 携 带 者, 也 可 应 用 于
产 前 诊 断 值 得 注 意 的 是, 由 于 重 型 血 友 病 A 中 约 40% ~50% 患 者 为 FⅧ 中 内 含 子 22 或 内 含 子 倒 位 所 致 [ 2],STR 连 锁 分 析 并 不 适 用 于 此 类 患 者 家 系 的 携 带 者 诊 断 或 产 前 诊 断 不 可 否 认, 随 着 科 学 实 验 技 术 的 飞 速 发 展 和 迅 速 普 及, 直 接 测 序 基 因 芯 片 技 术 等 直 接 基 因 诊 断 的 短 处 会 越 来 越 淡 化, 直 接 基 因 诊 断 有 着 更 广 阔 的 应 用 和 发 展 空 间 利 用 STR 遗 传 标 记 间 接 诊 断 血 友 病 A 携 带 者 的 方 法 虽 然 在 适 用 人 群 上 有 一 定 的 局 限 性, 但 是 由 于 其 低 成 本 便 捷 易 操 作 等 优 点, 较 适 用 于 经 济 或 实 验 室 欠 发 达 的 地 区 根 据 200 年 血 友 病 的 诊 断 和 治 疗 专 家 共 识, 对 于 内 含 子 22 和 倒 位 均 为 阴 性 的 家 系, 主 要 通 过 对 联 合 FⅧ 基 因 内 外 多 态 性 位 点 进 行 遗 传 连 锁 分 析, 最 后 对 血 友 病 A 家 系 女 性 成 员 作 携 带 者 或 产 前 基 因 诊 断 [3] ; 另 外, 采 用 荧 光 标 记 STR 遗 传 位 点 连 锁 分 析 联 合 直 接 基 因 测 序 检 测 突 变 位 点 的 方 法 进 行 血 友 病 A 携 带 者 的 诊 断 及 产 前 诊 断 也 被 认 为 是 目 前 血 友 病 A 的 主 流 预 防 措 施 [4] 可 见 间 接 基 因 诊 断 仍 旧 为 血 友 病 A 携 带 者 诊 断 和 产 前 诊 断 体 系 中 的 构 成 部 分, 仍 然 有 较 高 的 实 际 应 用 价 值 本 研 究 建 立 的 STR 遗 传 标 记 连 锁 分 析 体 系, 通 过 增 加 受 试 家 系, 必 要 时 基 因 测 序 进 一 步 验 证 其 有 效 性 等 深 入 研 究 后, 相 信 能 为 广 西 地 区 血 友 病 A 的 高 危 家 庭 提 供 遗 传 咨 询, 甚 至 应 用 于 产 前 诊 断 [ 参 考 文 献 ] [J]. 中 华 血 液 学 杂 志,992,3(9):46 463. [2] 杨 仁 池, 王 鸿 利. 血 友 病 [M]. 上 海 : 上 海 科 学 技 术 出 版 社, 2007: 20. [3] FangY,WangXF,DaiJ,WangHL.Arapidmultifluorescent polymerasechainreactionforgeneticcounselinginchinesehae mophiliaafamilies[j].haemophilia,2006,2():62 67. [4] 侯 一 平, 刘 雅 诚. 法 医 DNA 分 型 [M]. 北 京 : 科 学 出 版 社, 2007:274 284. [5] 朱 春 江, 龙 桂 芳. 微 卫 星 及 在 血 友 病 甲 基 因 诊 断 中 的 研 究 进 展 [J]. 华 夏 医 学,2006,9(3):595 597. [6] LiangY,ZhaoY,YanM,FanXP,XiaoB,LiuJZ.Prenataldi agnosisofhaemophiliaainchina[j].prenatdiagn,2009,29 (7):664 667. [7] LalozMR,McVeyJH,PatinsonJK,Tuddenham EG.Haemo philiaadiagnosisbyanalysisofahypervariabledinucleotidere peatwithinthefactorv Igene[J].Lancet,99,338(876): 207 2. [8] LalozMR,SchwaabR,McVeyJH,MichaelidesK,Tuddenham EG.HaemophiliaAdiagnosisbysimultaneousanalysisoftwovari abledinucleotidetandemrepeatswithinthefactorv Igene[J]. BrHaematol,994,86(4):804 809. [9] 吕 宝 忠. 多 态 信 息 量 (PIC) 等 于 杂 合 度 吗?[J]. 遗 传,994, 6(4):3 33. [0] 李 彩 霞, 凌 凤 俊, 涂 政, 郑 秀 芬. 犬 的 三 个 STR 基 因 座 遗 传 多 态 性 [J]. 动 物 医 学 进 展,2002,23(5):80 8. [] LakichD,KazazianHHJr,AntonarakisSE,GitschierJ.Inver sionsdisruptingthefactorv Igeneareacommoncauseofsevere haemophiliaa[j].natgenet,993,5(3):236 24. [2] BagnalRD,WaseemN,GreenPM,IanneliF.Recurentinver sionbreakingintronofthefactorv Igeneisafrequentcauseof severehemophiliaa[j].blood,2002,99():68 74. [3] 丁 秋 兰, 王 学 锋, 王 鸿 利, 孙 竞, 华 宝 来, 吴 竞 生, 等. 血 友 病 诊 断 和 治 疗 的 专 家 共 识 [J]. 临 床 血 液 学 杂 志,200,23():49 53. [4] DaiJ,LuY,DingQ,WangH,XiX,WangX.Thestatusof carierandprenataldiagnosisofhaemophiliainchina[j].hae mophilia,202,8(2):235 240. ( 本 文 编 辑 : 邓 芳 明 ) [] 邵 宗 鸿, 杨 天 楹. 中 国 血 友 病 患 病 率 与 八 个 地 区 生 存 率 调 查 955