任 务 四 头 孢 拉 定 的 含 量 测 定
( 一 ) 概 述 1 色 谱 法 又 称 层 析 法 : 是 利 用 不 同 物 质 在 不 同 的 两 相 ( 固 定 相 和 流 动 相 ) 中 所 表 现 的 物 理 化 学 性 质 上 差 异 来 进 行 分 离 分 析 的 方 法 2 色 谱 过 程 : 是 物 质 分 子 在 相 对 运 动 的 两 相 间 分 配 平 衡 的 过 程
3 色 谱 法 的 分 离 机 制 : 1) 分 配 色 谱 法 ( 液 相 色 谱 法 ): 利 用 被 分 离 组 分 在 固 定 相 或 流 动 相 中 的 溶 解 度 差 异 而 实 现 分 离, 色 谱 过 程 为 分 配 过 程
2) 吸 附 色 谱 法 ( 薄 层 色 谱 ): 利 用 被 分 离 组 分 对 固 体 表 面 活 性 吸 附 中 心 吸 附 能 力 的 差 异 而 实 现 分 离, 色 谱 过 程 为 吸 附 和 解 吸 附 过 程
4 液 相 色 谱 (L): 流 动 相 为 液 体 的 色 谱 法 经 典 液 相 色 谱 : 在 常 压 下 采 用 普 通 规 格 的 固 定 相 及 流 动 相 进 行 组 分 分 离 的 液 相 色 谱 法 高 效 液 相 色 谱 (HPL): 以 高 压 泵 输 送 液 体 流 动 相 的 色 谱 法
HPL 的 特 点 :( 三 高 一 广 一 快 ) 1 分 离 效 能 高 : 柱 效 用 理 论 塔 板 数 表 示 高 效 :2 10 3-4 10 4 m -1 经 典 :2-50m -1 气 相 :10 3 m -1 2 选 择 性 高 3 检 测 灵 敏 度 高 4 适 用 范 围 广 5 分 析 速 度 快
分 离 是 一 个 物 理 的 过 程
5 高 效 液 相 色 谱 法 的 有 关 术 语 : 1) 色 谱 图 ( 色 谱 流 出 曲 线 ) 由 电 信 号 强 度 对 时 间 作 图 所 绘 制 的 曲 线 2) 色 谱 峰 : 流 出 曲 线 上 的 突 起 部 分 3) 基 线 : 在 操 作 条 件 下 没 有 组 分 流 出 的 流 出 曲 线
4) 保 留 值 ( 滞 留 值 ) 保 留 时 间 (t ) 死 时 间 (t 0 ) 调 整 保 留 时 间 (t`) 峰 高 h t 2 t 1 半 峰 宽 E W 1/2 t 0 D 基 线 宽 (FG) t`1 F B G t`2
5) 理 论 塔 板 数 : 为 柱 效 指 标 ( 柱 的 分 离 效 能 ) n t 5.54( W 1/ 2 6) 分 离 度 (): 为 相 邻 两 峰 的 保 留 时 间 之 差 与 两 峰 峰 底 宽 度 总 和 之 半 的 比 值 t W 2 1 2 1 t W 2 t2 t / 2 W W 1 ) 2 2 1 除 另 有 规 定 外, 分 离 度 应 大 于 1.5 t 1 t 2 w 1 w 2
7) 拖 尾 因 子 ( 又 叫 对 称 因 子 )(T)( 应 在 0.95~1.05 之 间 ) T W 0.05h 2d 0.05 峰 高 处 的 峰 宽 峰 顶 点 至 峰 前 沿 之 间 的 距 离 W h/2 W 0.05h 0.05h d
6 固 定 相 和 流 动 相 1) 固 定 相 ( 填 充 剂 )( 色 谱 柱 由 固 定 相 与 柱 管 组 成 ) 最 常 用 的 为 化 学 键 合 硅 胶 [ 把 固 定 液 的 官 能 团 键 合 在 载 体 ( 硅 胶 ) 的 表 面 而 构 成
反 相 色 谱 系 统 ( 流 动 相 极 性 大 于 固 定 相 ) 一 般 采 用 非 极 性 键 合 固 定 相, 如 硅 胶 -18H37 ( 简 称 OD 或 18), 硅 胶 - 苯 基 等 ; 用 强 极 性 的 溶 剂 为 流 动 相, 如 甲 醇 / 水, 乙 腈 / 水, 水 和 无 机 盐 的 缓 冲 液 等 结 果 极 性 大 的 组 分 先 流 出, 极 性 小 的 组 分 后 流 出 正 相 色 谱 系 统 ( 流 动 相 极 性 大 于 固 定 相 ) 一 般 采 用 极 性 键 合 固 定 相, 如 硅 胶 表 面 键 合 极 性 基 团 ( 氰 基 (-N) 氨 基 (-NH 2 ) 等 ; 用 弱 极 性 的 溶 剂 为 流 动 相, 如 烃 类 溶 剂 结 果 极 性 小 的 组 分 先 流 出, 极 性 大 的 组 分 后 流 出
流 程 图 1. 贮 液 罐 ( 滤 棒, 可 滤 去 颗 粒 状 物 质 ) 2. 高 压 泵 ( 输 液 泵 ) 3. 进 样 装 置 4. 色 谱 柱 分 离 5. 检 测 器 分 析 6. 废 液 出 口 或 组 分 收 集 器 7. 记 录 装 置
色 谱 泵 及 控 制 器 数 据 处 理 及 控 制 色 谱 柱 检 测 器 Waters486 进 样 器
P230 型
岛 津 高 效 液 相 色 谱 仪
( 三 ) 高 效 液 相 色 谱 法 ( 讲 义 P100) 1 仪 器 的 基 本 要 求 除 固 定 相 种 类 流 动 相 组 成 检 测 器 类 型 不 得 任 意 改 变 外, 其 余 均 可 适 当 改 变 ( 如 : 流 动 相 流 速 混 合 流 动 相 各 组 分 的 比 例 柱 温 进 样 量 检 测 器 的 灵 敏 度 等 ) 以 适 应 具 体 药 品 并 达 到 系 统 适 应 性 试 验 一 般 色 谱 图 约 20 分 钟 内 记 录 完 毕.
2 系 统 适 用 性 试 验 在 进 行 色 谱 分 析 时, 应 先 进 行 色 谱 系 统 适 用 性 试 验, 检 查 色 谱 系 统 是 否 符 合 要 求 系 统 适 用 性 试 验 的 内 容 有 : 1) 色 谱 柱 的 理 论 塔 板 数 (n): 反 映 色 谱 系 统 的 分 离 效 能 ( 即 柱 效 ) ( 应 不 低 于 药 品 项 下 规 定 的 最 小 理 论 塔 板 数 ) 2) 分 离 度 : 指 相 邻 两 峰 分 离 的 程 度 ()>1.5 3) 拖 尾 因 子 (T)[(0.95~1.05) 用 峰 高 计 算 含 量 时 特 别 要 求 ] W T 2d 4) 重 复 性 ( 取 对 照 品 液, 连 续 进 样 5 次, 峰 面 积 的 相 对 标 准 偏 差 应 不 大 于 2.0%) 0.05h t n 5.54( W t W 1 1/ 2 t W 2 ) 2 2 1 2 D t2 t / 2 W W 1 1 2 ( i ) 1 i1 100% n 1 n 2 100%
3 定 性 定 量 方 法 : 1) 定 性 方 法 1 与 纯 物 质 对 比 在 同 一 根 柱 上 和 相 同 条 件 下 分 别 测 被 测 组 分 和 被 测 组 分 的 纯 物 质 的 保 留 值, 若 相 同, 则 为 同 一 物 质 2 加 入 纯 物 质 增 加 峰 高 法 在 试 样 中 加 入 纯 物 质, 如 色 谱 图 的 某 一 组 分 的 峰 高 增 加 了, 则 说 明 试 样 中 含 有 该 纯 物 质 的 这 种 组 分
f 2) 定 量 方 法 定 量 依 据 : 被 测 物 质 的 浓 度 与 峰 面 积 成 正 比 为 质 量,f f 为 对 照 品 和 内 标 物 的 相 对 校 正 因 子, 为 峰 面 积 ( 积 分 仪 自 动 计 算 ), 为 内 标 物, 为 对 照 品 ( 为 被 测 物 质 的 纯 物 质 ), 为 样 品 f f =f, =f, / / x =f x f 为 相 对 校 正 因 子, 简 称 为 校 对 因 子
定 量 方 法 : 1 内 标 法 (2010 版 )( 教 材 P71(4) 是 2005 版 药 典 的 名 称 ) a 配 对 照 溶 液 ( 测 校 正 因 子 ) 由 对 照 品 + 内 标 物 组 成 b 配 供 试 品 溶 液 由 样 品 + 内 标 物 组 成 c a 和 b 分 别 进 样, 得 色 谱 图, 在 积 分 仪 上 直 接 得 峰 面 积 (,, ) 可 按 下 式 计 算 样 品 的 含 量 内 标 对 照 品 内 标 f f f 供 试 品 / / 对 照 溶 液 图 谱 供 试 溶 液 图 谱
=f, =f, x =f x f f f / / 内 标 法 含 量 的 计 算 公 式 为 : 100% 100% % ` ` c f 含 量 因 对 照 品 是 被 测 物 的 纯 物 质, 所 以 f =f ` ` ` f f f f ` ` f f 供 试 品 溶 液 中 含 被 测 成 份 的 浓 度 供 试 品 溶 液 的 浓 度 ( 含 杂 质 ) ` 以 区 别 对 照 液 的 内 标, 对 照 液 内 标 与 样 品 液 的 内 标 可 以 相 同, 也 有 时 候 不 同
内 标 法 的 含 量 计 算 公 式 为 100% 100% 100% % ` ` ` ` ` ` ' ' s s W W f V W V W f f s s f 原 料 药 ` ' ' s s f 供 试 品 溶 液 中 含 被 测 成 份 的 浓 度 供 试 品 溶 液 的 浓 度 ( 含 杂 质 )
内 标 法 加 校 正 因 子 测 定 供 试 品 的 含 量 的 计 算 公 式 为 片 剂 f 标 示 量 % ' s ' s 平 均 片 重 标 示 量 100% 或 标 示 量 f % ` W W ` 平 均 片 重 标 示 量 100% 注 射 剂 标 示 量 % f ' s 标 示 ' s f 100% 或 ` ` 每 支 容 量 100% 标 示 量 式 中 : 标 示 为 注 射 剂 每 ml 的 标 示 量
例 : 按 药 典 规 定 用 HPL 法 测 定 黄 体 酮 注 射 液 的 含 量, 先 进 行 仪 器 适 用 性 试 验 : 精 密 称 取 内 标 物 己 烯 雌 酚 25.03mg, 黄 体 酮 对 照 品 24.89mg, 按 药 典 方 法 处 理, 进 样 量 为 5μl, 黄 体 酮 对 照 品 的 保 留 时 间 为 7.30min, 峰 面 积 为 1382, 峰 宽 0.17min, 半 峰 宽 0.08min, 内 标 物 的 保 留 时 间 为 5.95min, 峰 面 积 为 1560, 峰 宽 0.14min, 半 峰 宽 0.07min 按 黄 体 酮 计 算 色 谱 柱 的 理 论 塔 板 数 是 多 少? 两 峰 的 分 离 度 是 多 少? 校 正 因 子 是 多 少? 再 取 标 示 量 为 20mg/ml 的 黄 体 酮 注 射 液 2.5ml, 照 药 典 规 定 用 乙 醚 配 成 50ml 取 乙 醚 溶 液 5ml, 经 适 当 处 理 后, 加 入 内 标 溶 液 (1.0mg/ml)5ml, 用 甲 醇 配 成 25ml 供 试 品 溶 液 用 上 述 色 谱 柱 按 HPL 法 测 定 黄 体 酮 注 射 液 的 含 量, 进 样 量 仍 为 5μl, 供 试 品 黄 体 酮 的 保 留 时 间 为 7.83min, 峰 面 积 为 1295, 内 标 物 保 留 时 间 为 2.32min, 峰 面 积 为 1525, 求 注 射 液 中 黄 体 酮 的 含 量 为 标 示 量 的 多 少?
例 : 按 药 典 规 定 用 HPL 法 测 定 黄 体 酮 注 射 液 的 含 量, 先 进 行 仪 器 适 用 性 试 验 : 精 密 称 取 内 标 物 己 烯 雌 酚 25.03mg, 黄 体 酮 对 照 品 24.89mg, 按 药 典 方 法 处 理, 进 样 量 为 5μl, 黄 体 酮 对 照 品 的 保 留 时 间 为 7.30min, 峰 面 积 为 1382, 峰 宽 0.17min, 半 峰 宽 0.08min, 内 标 物 的 保 留 时 间 为 5.95min, 峰 面 积 为 1560, 峰 宽 0.14min, 半 峰 宽 0.07min 按 黄 体 酮 计 算 色 谱 柱 的 理 论 塔 板 数 是 多 少? 两 峰 的 分 离 度 是 多 少? 校 正 因 子 是 多 少? (1) n (2) t 5.54( W 2 t W 1 t W 1/ 2 2 ) 2 5.54 7.30 ( ) 0.08 2(7.30 5.95) 0.17 0.14 2 1 46129 1560 f / ( 3) f 25.03 1.122 f / 1382 24.89 2 8.7 对 照 和 内 标 混 在 一 起 配 的, 所 以 体 积 一 样, 可 以 约 掉
再 取 标 示 量 为 20mg/ml 的 黄 体 酮 注 射 液 2.5ml, 照 药 典 规 定 用 乙 醚 配 成 50ml 取 乙 醚 溶 液 5ml, 经 适 当 处 理 后, 加 入 内 标 溶 液 (1.0mg/ml)5ml, 用 甲 醇 配 成 25ml 供 试 品 溶 液 用 上 述 色 谱 柱 按 HPL 法 测 定 黄 体 酮 注 射 液 的 含 量, 进 样 量 仍 为 5μl, 供 试 品 黄 体 酮 的 保 留 时 间 为 7.83min, 峰 面 积 为 1295, 内 标 物 保 留 时 间 为 2.32min, 峰 面 积 为 1525, 求 注 射 液 中 黄 体 酮 的 含 量 为 标 示 量 的 多 少? 1295 1.05 标 示 量 % f ' s 标 示 1295 1.05 25 (1.122 ) 1525 25 5 20 ' s 100% 50 2.5 100% (1.122 ) 1525 25 每 ml 测 定 液 中 含 被 测 成 分 的 克 数 1295 1.05 ( 1.122 ) 1525 25 25 5 50ml 乙 醚 液 中 每 ml 含 被 测 成 分 的 克 数 1295 1.05 25 50 ( 1.122 ) 1525 25 5 2.5 每 ml 黄 体 酮 注 射 液 中 含 被 测 成 分 的 克 数
2 外 标 法 (2010 版 )( 教 材 P71(5) 是 2005 版 药 典 的 名 称 ) 对 照 液 和 供 试 液 分 别 进 样 计 算 公 式 : 100% 100% 100% 100% % ` ` W W V W V W 含 量 =f, x =f x 当 f x 是 用 对 照 品 进 行 测 定 时 则 f =f 供 试 品 溶 液 中 含 被 测 成 份 的 浓 度 f f
外 标 法 : 对 照 液 和 供 试 液 分 别 进 样 计 算 公 式 原 料 药 W 含 量 % 100% 100% ` W V m V 或 样 品 % 100% 100% 100% ` V
外 标 法 片 剂 注 射 剂 W 平 均 片 重 标 示 量 % 100% W 标 示 量 V平 均 片 重 或 标 示 量 % 100% 标 示 量 每 支 容 量 标 示 量 % 100% 标 示 量 例 :( 见 头 孢 拉 定 的 含 量 测 定 )
3 加 校 正 因 子 的 主 成 分 自 身 对 照 法 教 材 P69(3)( 略 ) 4 不 加 加 校 正 因 子 的 主 成 分 自 身 对 照 法 教 材 P69(2)( 高 低 浓 度 对 照 法 ) 5 面 积 归 一 化 法 教 材 P69(1) 按 各 品 种 项 下 的 规 定, 配 制 供 试 品 溶 液, 取 一 定 量 注 入 仪 器, 记 录 色 谱 图 测 量 各 峰 的 面 积 和 色 谱 图 上 除 溶 剂 峰 以 外 的 总 色 谱 峰 面 积, 计 算 各 峰 面 积 占 总 峰 面 积 的 百 分 率 用 于 杂 质 检 查 时, 由 于 峰 面 积 归 一 化 法 测 定 误 差 大, 因 此, 本 法 通 常 只 能 用 于 粗 略 考 察 供 试 品 中 的 杂 质 含 量 除 另 有 规 定 外, 一 般 不 宜 用 于 微 量 杂 质 的 检 查
( 六 ) 具 体 操 作 方 法 : 操 作 前 准 备 1 流 动 相 的 准 备 试 剂 : 析 谱 纯 水 : 超 纯 水 调 ph: 用 精 密 ph 计 配 好 的 流 动 相 应 通 过 0.45μm 适 宜 的 滤 膜 滤 过, 用 前 脱 气, 并 配 充 足 的 流 动 相 待 用
2 供 试 液 的 配 制 配 好 的 供 试 液 和 对 照 液 进 样 前 应 经 0.45μm 适 宜 的 滤 膜 滤 过, 必 要 时 样 品 液 还 要 进 行 前 处 理, 如 提 取 净 化 预 过 滤 等
操 作 步 骤 1 开 机 打 印 机 计 算 机 泵 的 电 源 (POWE) 2 排 气 待 主 机 稳 定 后, 将 排 气 阀 (DIN) 旋 至 打 开 位 置 (open 方 向 180 ), 按 冲 洗 键 (purge), 排 气 完 毕, 按 冲 洗 键 (purge)( 关 ), 旋 关 DIN( 向 右 旋 180 )
3 跑 基 线 1) 按 pump 键 2) 设 置 参 数 :func( 功 能 键 ) 流 速 最 大 压 力 (15) 最 小 压 力 (0.1) Enter E, 设 置 完 毕 注 : 流 速 要 慢 慢 依 次 增 加 (0.2 0.4 0.6 0.8 1.0) 待 柱 压 稳 定 后 换 流 动 相, 每 次 换 流 动 相 要 依 次 减 流 速, 并 按 pump 键 ( 关 ), 换 好 后, 要 排 气, 流 速 要 依 次 增 加.
3) 开 启 检 测 器 电 源 开 关 自 检 完 毕 设 定 参 数 ( 波 长, 光 源 等 ) (func 设 定 Enter E) 4) 查 看 基 线 ( 打 开 工 作 站, 把 衰 减 调 至 0, 直 至 基 线 平 稳
4 进 样 1) 把 进 样 器 手 柄 放 在 载 样 位 置 (LOD) 2) 注 射 器 吸 样 后 要 排 气, 把 注 射 器 的 平 头 针 直 插 至 进 样 器 的 底 部, 注 入 供 试 溶 液 ( 为 定 量 环 的 3-5 倍 ) 3) 校 零 进 样 ( 进 样 器 手 柄 转 至 inject, 定 量 环 内 供 试 液 即 被 流 动 相 带 入 流 路 ), 停 留 在 inject 位 置 一 段 时 间
5 收 集 色 谱 数 据 1) 最 后 一 峰 出 完 后, 应 继 续 走 一 段 时 间, 确 定 无 组 分 流 出, 方 能 结 束 记 录 2) 含 量 测 定 的 对 照 液 和 样 品 液 每 份 至 少 注 样 2 次, 由 全 部 注 样 结 果 (n>4) 求 得 平 均 值, 其 相 对 标 准 偏 差 (D) 液 应 不 大 于 1.5%
6 清 洗 和 关 机 1) 分 析 完 毕 关 检 测 器 关 数 据 处 理 器 冲 柱 ( 用 甲 醇 冲 30 分 钟, 如 使 用 含 盐 流 动 相, 则 先 用 10% 甲 醇 水 冲 1h 以 上, 再 用 50% 甲 醇 水 冲 约 20 分 钟, 再 用 甲 醇 冲 1h 以 上 ) 2) 冲 柱 期 间 进 样 器 也 应 用 相 应 的 溶 剂 冲 冼, 3) 冲 洗 完 毕 后, 逐 步 降 低 流 速 至 0, 关 泵, 关 电 源, 登 记
高 效 液 相 色 谱 法 小 结 1 特 点 2 反 相 色 谱 的 固 定 相 和 流 动 相 ( 流 动 相 极 性 大 于 固 定 相 ) 3 系 统 适 应 性 试 验 4 定 量 方 法 : 5 具 体 操 作 方 法 :
HPL 的 特 点 三 高 一 快 一 广 高 柱 效 高 灵 敏 度 高 选 择 性 分 析 速 度 快 应 用 范 围 广 泛 ( 可 分 析 80% 有 机 化 合 物 )
固 定 相 : 1 十 八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶 ( 简 称 :18 柱 ) 2 辛 基 硅 烷 键 合 硅 胶 3 氰 基 硅 烷 键 合 硅 胶 流 动 相 : 为 甲 醇 - 水 或 乙 腈 - 水
系 统 适 用 性 试 验 1) 色 谱 柱 的 理 论 塔 板 数 (n)( 应 高 于 药 品 项 下 规 定 的 最 小 理 论 塔 板 数 ) 2) 分 离 度 ()>1.5 3) 拖 尾 因 子 (T)[(0.95~1.05) 用 峰 高 计 算 峰 面 积 时 特 别 要 求 ] 4) 重 复 性 ( 取 对 照 品 液, 连 续 进 样 5 次, 峰 面 积 的 相 对 标 准 偏 差 应 不 大 于 2.0%)
学 习 目 标 1 掌 握 β- 内 酰 胺 类 抗 生 素 的 鉴 别 试 验 方 法 含 量 测 定 方 法 的 原 理 和 方 法 2 学 会 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 头 孢 拉 定 的 含 量 计 算 ; 3 了 解 β- 内 酰 胺 类 抗 生 素 的 杂 质 检 查 项 目 和 方 法
( 一 ) 结 构 分 析 青 霉 素 类 与 头 孢 菌 素 类 基 本 结 构 ONH O N H 3 H 3 OOH ONH O N H 3 H 3 H 2 OOH 3 OOH
( 二 ) 鉴 别 试 验 (P189)
色 谱 条 件 与 系 统 适 用 性 试 验 色 谱 柱 : 十 八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶 流 动 相 : 水 - 甲 醇 -3.86% 醋 酸 钠 溶 液 -4% 醋 酸 溶 液 (1564:4O0:30:6)
色 谱 条 件 与 系 统 适 用 性 试 验 流 速 : 每 分 钟 0.7-0.9 ml 检 测 波 长 :254unm 取 头 孢 拉 定 对 照 品 溶 液 10 份 和 头 孢 氨 苄 对 照 品 贮 备 液 (0.4mg/ ml)1 份, 混 匀, 取 10μl 注 入 液 相 色 谱 仪 测 定, 头 孢 拉 定 峰 和 头 孢 氨 苄 峰 的 分 离 度 应 符 合 要 求 理 论 板 数 按 头 孢 拉 定 峰 计 算 不 低 于 2500
头 孢 氨 苄 对 照 品 贮 备 液 制 备 取 头 孢 氨 苄 对 照 品 约 20mg, 精 密 称 定, 置 50 ml 量 瓶 中, 加 流 动 相 约 30 ml, 置 超 声 波 浴 中 使 溶 解 ( 按 照 KQ-250 型 超 声 波 清 洗 器 标 准 操 作 规 程 操 作 ), 再 加 流 动 相 稀 释 至 刻 度, 摇 匀
对 照 品 溶 液 的 制 备 取 头 孢 拉 定 对 照 品 适 量 ( 相 当 于 头 孢 拉 定 约 35mg), 精 密 称 定, 置 50 ml 量 瓶 中, 加 水 约 6 ml, 置 超 声 波 浴 中 使 溶 解, 再 加 流 动 相 稀 释 至 刻 度, 摇 匀 供 试 品 溶 液 的 制 备 取 本 品 约 70mg, 精 密 称 定, 置 100 ml 量 瓶 中, 加 流 动 相 约 70 ml, 置 超 声 波 浴 中 使 溶 解, 再 加 流 动 相 稀 释 至 刻 度, 摇 匀
含 量 则 定 : 取 供 试 品 溶 液 10μl 注 入 液 相 色 谱 仪, 记 录 色 谱 图 ; 另 取 头 孢 拉 定 对 照 品 溶 液, 同 法 测 定 按 外 标 法 以 峰 面 积 计 算 供 试 品 中 16 H 19 N 3 O 4 的 含 量 m ( ( mg / ml) 50
含 量 则 定 : 计 算 ) / : ( ml mg 100% 100% 100% % V V m 孢 拉 定 1 2 平 均 值 相 对 偏 差 100% % V 头 孢 拉 定
头 孢 拉 定 的 含 量 测 定 图 谱 和 数 据
相 关 数 据 样 品 名 进 样 峰 面 积 平 均 峰 面 积 称 样 量 浓 度 对 照 品 样 品 1 样 品 2 1 26379446 2 26132453 1 24332678 2 24565467 1 24583945 2 25098903 35.2 mg 70.1 mg 70.5 mg 注 : 对 照 液 配 成 50ml, 供 试 液 配 成 100ml V % 100%
如 为 片 剂 : 标 示 量 % 如 何 计 算? % 100% V 头 孢 拉 定 100% % 标 示 量 平 均 片 重 标 示 量 V
例 : 取 某 片 剂 ( 规 格 为 0.25mg)25 片, 精 密 称 定 ( 0.5225g), 研 细, 精 密 称 取 适 量 ( 约 相 当 于 主 药 6mg )( 片 粉 量 :0.5028g), 置 100ml 量 瓶 中, 精 密 加 入 50% 甲 醇 溶 液 50ml, 微 温, 振 摇 使 主 药 溶 解, 放 冷, 加 50% 甲 醇 溶 液 稀 释 至 刻 度, 滤 过, 精 密 量 取 续 滤 液 20μl 注 入 液 相 色 谱 仪, 记 录 色 谱 图, 另 取 该 药 对 照 品 适 量, 精 密 称 定 (11.2mg), 同 法 配 成 100ml, 同 法 测 定 按 外 标 法 以 峰 面 积 计 算 其 占 标 示 量 的 百 分 比 已 知 : 对 照 品 峰 面 积 :86.25; 供 试 品 峰 面 积 :46.52 标 示 量 % V 平 均 片 重 100% 标 示 量 46.52 11.2 0.5225 100 % 86.25 100 25 100% 100.4% 0.50280.25
片 粉 的 取 量 如 何 算? 片 数 规 定 取 量 取 样 量 平 均 片 重 ( 110% ) 标 示 量 6 0.5225 6 0.5225 90% ~ 110% 0.25 25 0.25 25 0.4514 ~ 0.5518
( 五 ) 克 拉 霉 素 的 含 量 测 定 ( 实 训 十 四 ) 色 谱 条 件 与 系 统 适 用 性 试 验 : 条 件 : 用 十 八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶 为 填 充 剂 ; 以 磷 酸 盐 缓 冲 液 ( 取 磷 酸 二 氢 钾 9.11g, 加 水 溶 解 并 稀 释 到 1000ml, 加 三 乙 胺 2ml, 用 磷 酸 调 节 ph 至 5.5)- 乙 腈 (600:400) 为 流 动 相 ; 检 测 波 长 为 210nm; 柱 温 45. 系 统 适 用 性 试 验 : 理 论 板 数 按 克 拉 霉 素 峰 计 算 不 低 于 3000; 拖 尾 因 子 不 得 过 2.0; 克 拉 霉 素 峰 与 相 邻 杂 质 峰 的 分 离 度 应 符 合 要 求
供 试 品 溶 液 的 制 备 与 测 定 取 本 品 适 量, 精 密 称 定, 加 流 动 溶 解 并 定 量 稀 释 制 成 每 1ml 中 约 含 0.35mg 的 溶 液, 精 密 量 取 20μl l 注 入 液 相 色 谱 仪, 记 录 色 谱 图 ; 另 取 克 拉 霉 素 对 照 品 适 量, 同 法 测 定 按 外 标 法 以 峰 面 积 计 算, 即 得 V 克 拉 霉 素 % 100% W 或 含 量 % 100% 100% ` W
实 训 十 四 克 拉 霉 素 的 含 量 测 定 见 : 实 训 报 告
三 知 识 拓 展 ( 自 学 ) 通 过 β- 内 酰 胺 类 抗 生 素 的 分 析, 学 习 抗 生 素 类 药 物 的 分 析, 要 求 从 结 构 性 质 鉴 别 检 查 含 量 测 定 几 方 面 进 行, 重 点 掌 握 氨 基 糖 苷 类 抗 生 素 的 鉴 别 方 法, 四 环 素 类 抗 生 素 的 结 构 与 性 质 附 : 详 细 内 容 参 阅 参 考 教 材 第 十 二 章