<443A5CC2DBCEC45C32303038706167656D616B655C3132C6DA5C3035D3AA3FBB8889E92502>

658 2008, Vol. 29, No. 12 食 品 科 学 营 养 卫 生 蒋 利 和 1,2, 史 岩 1, 张 玉 芳 1, 古 二 超 1, 杨 志 荣 1, * (1. 四 川 大 学 生 命 科 学 院, 生 物 资 源 与 生 态 环 境 教 育 部 重 点 实 验 室, 四 川 成 都 610065; 2. 广 西 大 学 科 技 处, 广 西 南 宁 530004) : 实 验 用 超 临 界 CO2 萃 取 法 从 白 苏 种 子 提 取 得 白 苏 油, 并 用 白 苏 油 对 非 酒 精 性 脂 肪 肝 进 行 研 究, 结 果 表 明, 白 苏 油 能 显 著 降 低 非 酒 精 性 脂 肪 肝 大 鼠 血 清 和 肝 脏 丙 氨 酸 转 换 酶 (ALT) 及 谷 草 氨 基 酸 转 换 酶 (AST) 的 活 性, 减 少 丙 二 醛 (MDA) 总 甘 油 三 脂 (TG) 总 胆 固 醇 (TC) 和 低 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 (LDL-c) 的 含 量 及 肝 脏 指 数, 提 高 高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 (HDL-c) 的 含 量 和 超 氧 化 歧 化 酶 (SOD) 的 活 性, 组 织 切 片 也 显 示 了 白 苏 油 良 好 的 治 疗 效 果 结 果 表 明 : 一 定 量 的 白 苏 油 具 有 调 节 血 脂 保 护 肝 脏 的 作 用, 其 机 制 可 能 与 抗 氧 化 有 关 : 超 临 界 CO2; 气 相 色 谱 - 质 谱 联 用 ; 白 苏 油 ; 非 酒 精 性 脂 肪 肝 Effects of Perilla frutescens (linn) Britt Seed Oil on Nonalcoholic Fatty Liver in Rat JIANG Li-he 1,2,SHI Yan 1,ZHANG Yu-fang 1,GU Er-chao 1,YANG Zhi-rong 1, * (1.College of Life Sciences, Sichuan University, Key Laboratory of Bio-resources and Eco-environment, Ministry of Education, Chengdu 610064, China;2.Sience and Technology Division, Guangxi University, Nanning 530004, China) Abstract :Perilla frutescens (linn) Britt seed oil (PO) was extracted with supercritical-co2 method. This study aimed to evaluate the effects of PO on nonalcoholic fatty liver. The results showed that the PO significantly lowers the activities of aminotransferase (AST), and alanise aminonsferase (ALT), and reduces the contents of malondialdeh 1 yde (MDA), total Cholesterol(TC), triacylglycerol (TG), low density lipoprotein cholesterol (LDL-c), the peroxidation product, malondialdehyde (MDA) and liver indexes and elevates the activity of superoxide dismutase (SOD) and high density lipoprotein cholesterol (HDL-c) in serum and liver of male Wistar rats. Histological examination is consistent with physiological indicators. In conclusion the PO can be proposed to protect the liver against fatty liver in rats, and the protective effect on liver may be correlated with its antioxidant and free radical scavenger effects. Key words:supercritical-co2 extraction;gc-ms ;Perilla frutescens (linn) Britt seed oil;nonalcoholic fatty liver 中 图 分 类 号 :R151.2 文 献 标 识 码 :A 文 章 编 号 :1002-6630(2008)12-0658-05 非 酒 精 性 脂 肪 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD) 是 一 类 肝 组 织 学 病 变, 它 与 酒 精 性 肝 病 相 类 似, 属 于 一 种 无 过 量 饮 酒 史 的 临 床 病 理 综 合 症 在 病 [1] 理 上 包 括 非 酒 精 性 单 纯 性 脂 肪 肝 (nonalcoholic fatty liver,nafl), 非 酒 精 性 脂 肪 肝 炎 (nonalcoholic steatohepatitis,nash) 和 非 酒 精 性 脂 肪 肝 硬 化 三 种 类 [2] 型 近 年 来 NAFLD 的 发 病 率 逐 年 升 高, 而 且 越 来 越 [3] 多 的 研 究 表 明 NAFL 是 隐 源 性 肝 硬 化 的 重 要 病 因, 甚 [4] 至 可 发 展 为 肝 癌 但 其 发 病 机 制 尚 未 完 全 明 确, 可 能 [5] 与 脂 质 代 谢 异 常 脂 质 过 氧 化 及 胰 岛 素 抵 抗 等 因 素 有 关 [1] 目 前 临 床 上 药 物 治 疗 效 果 尚 不 理 想 中 药 在 临 床 治 疗 非 酒 精 性 脂 肪 肝 过 程 中 无 副 作 用, 而 且 还 具 有 多 方 面 改 善 人 体 机 能 的 作 用 因 此, 从 传 统 中 医 宝 库 中 挖 掘 对 非 酒 精 性 脂 肪 肝 具 有 治 疗 作 用 的 特 色 中 药 具 有 重 大 的 现 实 意 义, 也 是 开 发 治 疗 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 有 效 措 施 之 一 白 苏 (Labiatac, Perilla frutescens (linn.) Britt), 别 名 荏 子 玉 苏 子, 但 在 民 间 将 其 当 成 紫 苏 苏 属 唇 形 科 紫 苏 属 植 物, 又 名 野 紫 苏 白 紫 苏 假 紫 苏 等 白 苏 是 紫 苏 的 同 属 植 物, 据 中 国 植 物 志 记 载 将 唇 形 科 ( Labiatae) 植 物 紫 苏 和 白 苏, 合 并 为 一 种 Penilla frutescens (Linn.) Britt, 在 分 类 学 当 作 同 一 物 种, 在 中 收 稿 日 期 :2007-10-26 基 金 项 目 :2005 四 川 省 科 技 条 件 平 台 ( 中 药 细 胞 分 子 生 物 学 实 验 平 台 建 设 ) 项 目 [ 川 财 教 (2005172)] 作 者 简 介 : 蒋 利 和 (1976-), 男, 博 士 研 究 生, 研 究 方 向 为 现 代 生 物 技 术 与 遗 传 学 E-mail:lhjaaaa162@sina.com * 通 讯 作 者 : 杨 志 荣 (1951-), 男, 教 授, 研 究 方 向 为 现 代 生 物 技 术 与 遗 传 学 E-mail:au72191@gmail.com

营 养 卫 生 食 品 科 学 2008, Vol. 29, No. 06 659 [6] 国 药 典 未 收 载, 但 不 少 地 区 仍 有 栽 培, 在 中 国 四 川 贵 州 江 苏 等 地 与 紫 苏 同 等 使 用, 但 是 也 有 些 地 区 不 认 为 是 一 种 中 药, 白 苏 其 含 有 丰 富 的 生 物 活 性 成 分, 开 发 潜 力 巨 大 但 目 前 苏 麻 的 药 理 及 药 用 价 值 研 究 一 直 涉 入 较 少, 有 待 深 入 研 究, 提 高 白 苏 应 用 价 值 因 此 本 实 验 探 索 用 超 临 界 CO2 萃 取 的 白 苏 油 对 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 效 果 1 材 料 与 方 法 1.1 材 料 与 试 剂 Wistar 大 鼠,8w 龄, 体 重 344 ± 21g, 自 由 取 食 ( 均 饲 喂 基 础 饲 料 ) 鼠 和 鼠 料 均 购 于 四 川 省 医 学 科 学 院 医 学 实 验 动 物 中 心 白 苏 种 子 成 都 市 中 药 材 市 场 ; 白 苏 油 用 白 苏 籽 进 行 超 临 界 CO2 萃 取 法 提 取 ; 辛 伐 他 汀 丙 基 硫 氧 嘧 啶 上 海 复 星 朝 晖 药 业 有 限 公 司 ; 胆 固 醇 四 川 大 学 生 化 技 术 实 验 厂 ; 脱 氧 胆 酸 钠 北 京 奥 博 星 生 物 技 术 有 限 公 司 ; 血 清 谷 丙 转 氨 酶 (ALT) 试 剂 盒 谷 草 转 氨 酶 (AST) 试 剂 盒 超 氧 化 歧 化 酶 (SOD) 试 剂 盒 丙 二 醛 (MDA) 试 剂 盒 南 京 建 成 生 物 工 程 研 究 所 总 胆 固 醇 (TC) 试 剂 盒 总 甘 油 三 酯 (TG) 试 剂 盒 高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 (HDL-c) 试 剂 盒 四 川 迈 克 科 技 有 限 公 司 ; 低 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇 (LDL-c) 试 剂 盒 四 川 同 昌 公 司 其 他 试 剂 均 为 国 产 分 析 纯 1.2 仪 器 与 设 备 U23310 紫 外 可 见 光 光 度 仪 日 本 日 立 公 司 ;JAUAS 离 心 机 ;DK-98-1 电 子 恒 温 水 浴 锅 1.3 方 法 1.3.1 白 苏 油 的 提 取 用 超 临 界 CO2 萃 取 法 提 取 200g 白 苏 子 粗 粉 置 于 萃 取 釜 中, 通 过 压 缩 泵 对 其 加 压, 当 压 力 分 别 达 到 7MPa 时 循 环 开 始, 循 环 程 序 为 7MPa 0.5h 10MPa 0.5h 28MPa 1h 40MPa 1h,CO2 流 量 为 40kg/h, 恒 温 恒 压 萃 取 6h, 得 金 黄 色 透 明 油 状 液 体, 得 率 为 29% ± 2% 1.3.2 实 验 动 物 分 组 60 只 Wistar 雄 性 大 鼠 体 重 344 ± 21g 按 体 重 随 机 分 为 正 常 组 (control group) 模 型 组 (model group) 白 苏 油 大 剂 量 组 (POL group) 中 剂 量 组 (POM group) 小 剂 量 组 (POS group) 辛 伐 他 汀 组 (ST group), 每 组 10 只 实 验 动 物 自 由 饮 无 菌 水 和 进 食, 饲 养 于 22~24, 相 对 湿 度 40%~45%, 明 暗 各 12h 的 清 洁 级 动 物 实 验 室 内 动 物 笼 具 为 塑 料 盒, 不 锈 钢 丝 盖, 大 鼠 笼 (40cm 30cm 20cm), 每 笼 5 只 1.3.3 造 模 正 常 组 喂 普 通 饲 料, 其 余 四 组 喂 高 脂 高 胆 固 醇 饲 料 (86.6% 普 通 饲 料 猪 油 10% 胆 固 醇 3% 丙 基 硫 氧 嘧 啶 0.2% 脱 氧 胆 酸 钠 0.2%), 先 喂 高 脂 高 胆 固 醇 饲 料 2w 后, 每 周 一 次 40% CCl4 的 橄 榄 油 溶 液 3ml/kg 皮 下 注 射 共 6w, 同 时 给 予 高 脂 高 胆 固 醇 饲 料, 实 验 一 共 8w 1.3.4 给 药 从 第 2w 开 始, 正 常 组 和 模 型 组 给 予 生 理 盐 水 10ml/ kg bw 白 苏 油 大 剂 量 组 2.4ml/kg bw 白 苏 油 中 剂 量 1.8ml/kg bw 白 苏 油 小 剂 量 1.2ml/kg bw 辛 伐 他 汀 组 给 予 4mg/kg bw 辛 伐 他 汀 每 日 一 次 灌 胃, 持 续 用 药 6W 1.3.5 生 化 指 标 测 定 肝 指 数 测 定 : 大 鼠 处 死 后, 取 肝 脏 用 电 子 天 平 称 重, 肝 指 数 =( 肝 脏 重 / 体 重 ) 100%; 血 清 ALT AST 活 性 测 定 均 为 赖 氏 法 ; 血 清 和 肝 组 织 中 TG TC 含 量 测 定 用 GK- GPOPOD 酶 比 色 法,LDL- C 测 定 用 直 接 法, HDL- C 根 据 Friedwaid 计 算 ;200mg 肝 脏 4 下 制 成 10% 的 生 理 盐 水 肝 匀 浆 液, 离 心 取 上 清 液 按 说 明 书 操 作, 测 定 SOD 和 MDA, 用 硫 代 巴 妥 酸 (TBA) 比 色 法 测 MDA 用 黄 嘌 呤 氧 化 酶 法 测 SOD, 按 照 试 剂 盒 说 明 书 操 作, 在 紫 外 可 见 光 光 度 仪 上 测 定 ; 蛋 白 质 浓 度 测 定 采 用 考 马 斯 亮 兰 法 1.3.6 肝 组 织 常 规 HE 染 色 取 肝 脏 左 叶 同 一 部 位 相 同 大 小 的 肝 组 织, 甲 醛 固 定, 石 蜡 包 埋 进 行 苏 木 素 - 伊 红 染 色, 光 镜 下 观 察 肝 脏 的 病 理 损 伤 情 况, 光 镜 下 评 估 肝 脂 肪 及 炎 症 活 动 度 计 分 1.3.7 统 计 分 析 采 用 statistica 6.0 处 理 数 据, 结 果 以 均 数 ± 标 准 差 表 示, 组 间 比 较 用 t 检 验 2 结 果 与 分 析 2.1 白 苏 油 对 大 鼠 的 肝 脏 指 数 的 影 响 表 1 白 苏 油 对 大 鼠 的 肝 脏 指 数 的 影 响 Table 1 Effects of PO on liver indexes 体 重 (g) 肝 脏 重 (g) 肝 脏 系 数 对 照 组 385.63 ± 13.76 13.52 ± 1.34 3.50 ± 0.28 模 型 组 307.08 ± 31.62 aabb 14.21 ± 1.13 aabb 4.64 ± 0.21 aabb 辛 伐 他 汀 组 345.29 ± 31.21 aacc 12.53 ± 1.05 cc 3.63 ± 0.14 cc 小 剂 量 组 324.16 ± 23.73 aabbc 13.08 ± 0.97 cc 4.05 ± 0.30 aabbc 中 剂 量 组 354.21 ± 26.68 aacc 13.71 ± 0.95 cc 3.89 ± 0.29 cc 大 剂 量 组 358.61 ± 16.75 aabcc 13.27 ± 0.64 cc 3.70 ± 0.15 cc 注 :a. 与 正 常 组 比 较, 差 异 显 著 (p < 0.05);aa. 与 正 常 组 比 较, 差 异 极 显 著 (p < 0.01);b. 与 与 阳 性 药 物 组 比 较, 差 异 显 著 (p < 0.05);bb. 与 阳 性 药 物 组 比 较, 差 异 极 显 著 (p < 0.01);c. 与 模 型 组 比 较, 差 异 显 著 (p < 0.05);cc. 与 模 型 组 比 较, 差 异 极 显 著 (p < 0.01) 下 同 表 1 中 的 数 据 表 明, 模 型 组 的 肝 / 体 重 指 数 ( 肝 湿 重 / 体 重 100%) 比 对 照 组 均 显 著 增 高 (p < 0.01;p < 0.05); 白 苏 各 剂 量 组 的 肝 指 数 显 著 低 于 模 型 组, 其 中 白 苏 各 剂

660 2008, Vol. 29, No. 12 食 品 科 学 营 养 卫 生 量 与 模 型 组 的 肝 指 数 差 异 达 显 著 水 平 (p < 0.01;p < 0.05); 辛 伐 他 汀 组 的 肝 指 数 比 白 苏 油 组 少, 辛 伐 他 汀 组 除 了 与 白 苏 小 剂 量 组 差 异 达 到 了 显 著 水 平 (p < 0.01), 与 大 剂 量 和 中 剂 量 各 个 组 差 异 没 有 达 到 显 著 水 平 (p > 0.05) 空 白 组 与 白 苏 各 个 组 差 异 达 显 著 水 平 (p < 0.01) 实 验 中, 模 型 组 肝 脏 肿 大, 饮 食 不 正 常, 导 致 体 重 下 降 ( 见 表 1) 2.2 白 苏 油 对 大 鼠 血 清 谷 丙 转 氨 酶 (ALT) 和 谷 草 转 氨 酶 (AST) 影 响 表 2 白 苏 油 对 大 鼠 血 清 谷 丙 转 氨 酶 (ALT) 和 谷 草 转 氨 酶 (AST) 影 响 Table 2 Effects of PO on ALT and AST activities in rat serum AST(U/L) ALT(U/L) 对 照 组 128.44 ± 7.27 69.60 ± 5.05 模 型 组 222.47 ± 10.52 aabb 98.31 ± 2.24 aabb 辛 伐 他 汀 组 142.15 ± 5.20 acc 73.37 ± 2.32 aacc 小 剂 量 组 199.57 ± 14.48 aabbcc 89.61 ± 5.06 aabbcc 中 剂 量 组 174.85 ± 8.93 aabbcc 78.23 ± 3.67 aabcc 大 剂 量 组 149.41 ± 8.99 aabcc 73.25 ± 3.54 aacc 由 表 2 可 知, 模 型 组 肝 组 织 中 AST 与 ALT 与 对 照 组 和 辛 伐 他 汀 组 差 异 都 有 达 到 极 显 著 性 水 平 (p < 0.01), 白 苏 各 组 与 模 型 组 比 较, 其 中 AST 和 ALT 的 值 有 所 下 降, 白 苏 各 组 与 模 型 组 显 著 性 水 平 (p < 0.01) 而 辛 伐 他 汀 的 ALT 与 白 苏 大 剂 量 组 的 差 异 差 异 未 达 显 著 水 平 (p < 0.01), 与 小 剂 量 和 中 剂 量 各 组 都 达 到 了 显 著 水 平 (p < 0.01;p < 0.05), 但 辛 伐 他 汀 组 的 AST 与 白 苏 各 剂 量 组 的 差 异 均 达 显 著 水 平 (p < 0.01;p < 0.05) 2.3 白 苏 油 对 大 鼠 血 清 和 肝 组 织 中 TC TG HDL-c LDL-c 的 影 响 实 验 结 果 表 明, 在 血 清 中, 模 型 组 与 空 白 组 和 辛 伐 他 汀 组 相 比, 其 LDL-c HDL-c TG TC 均 差 异 达 到 显 著 水 平 (p < 0.01) 与 模 型 组 相 比, 白 苏 油 各 剂 量 组 的 TC TG HDL-c LDL-c 的 差 异 均 达 到 了 显 著 水 平 (p < 0.01), 具 体 结 果 见 表 3 在 肝 组 织 中, 模 型 组 与 对 照 组 和 辛 伐 他 汀 组 相 比, 模 型 组 的 LDL-c HDL-c TG TC 差 异 均 达 到 显 著 水 平 (p < 0.01) 与 模 型 组 相 比, 白 苏 油 各 剂 量 组 的 TC 表 3 白 苏 油 对 大 鼠 血 清 中 的 TC TG HDL-c LDL-c 影 响 Table 3 Effects of PO on TC,TG,HDL-c and LDL-c contents in rat serum TC TG HDL-c LDL-c (mmol/l) (mmol/l) (mmol/l) (mmol/l) 对 照 组 1.56 ± 0.6 0.38 ± 0.05 0.93 ± 0.04 0.32 ± 0.08 模 型 组 3.15 ± 0.11 aabb 0.82 ± 0.06 aabb 0.49 ± 0.03 aabb 0.77 ± 0.06 aabb 辛 伐 他 汀 组 1.13 ± 0.18 aacc 0.42 ± 0.29 acc 0.85 ± 0.05 cc 0.37 ± 0.07 acc 小 剂 量 组 2.42 ± 0.15 aabbcc 0.50 ± 0.04 aabbcc 0.70 ± 0.03 aabbcc 0.52 ± 0.09 aabbcc 中 剂 量 组 1.63 ± 0.16 aabbcc 0.44 ± 0.02 acc 0.77 ± 0.04 aabbcc 0.46 ± 0.04 aabbcc 大 剂 量 组 1.35 ± 0.06 aabbcc 0.39 ± 0.03 cc 0.82 ± 0.03 aacc 0.38 ± 0.04 acc TG HDL-c LDL-c 的 差 异 都 达 到 了 极 显 著 性 水 平 (p < 0.01) 辛 伐 他 汀 组 的 LDL-c HDL-c 与 白 苏 组 小 剂 量 中 剂 量 的 差 异 都 达 到 了 显 著 水 平 (p < 0.01); 辛 伐 他 汀 组 与 大 剂 量 相 比, 除 了 HDL-c 未 达 到 显 著 水 平 (p > 0.05), 其 他 各 项 指 标 都 达 到 了 显 著 水 平 (p < 0.01), 具 体 结 果 见 表 4 表 4 白 苏 油 对 大 鼠 肝 组 织 中 TC,TG,HDL-c,LDL-c 的 影 响 Table 4 Effects of PO on TC,TG,HDL-c and LDL-c contents in rat liver tissue TC TG HDL-c LDL-c (mmol/l) (mmol/l) (mmol/l) (mmol/l) 对 照 组 1.75 ± 0.17 0.29 ± 0.07 1.13 ± 0.18 0.45 ± 0.08 模 型 组 6.25 ± 0.59 aabb 1.23 ± 0.14 aabb 0.71 ± 0.14 aabb 1.87 ± 0.48 aabb 辛 伐 他 汀 组 2.26 ± 0.21 aacc 0.49 ± 0.08 aacc 1.23 ± 0.21 cc 0.89 ± 0.17 aacc 小 剂 量 组 5.24 ± 0.46 aabbcc 1.07 ± 0.11 aabbcc 0.82 ± 0.13 aabbcc 1.52 ± 0.39 aabbc 中 剂 量 组 3.63 ± 0.32 abbcc 0.85 ± 0.17 aabbcc 0.94 ± 0.11 aabbcc 1.24 ± 0.34 aabbcc 大 剂 量 组 2.87 ± 0.29 aabbcc 0.61 ± 0.08 aabbcc 1.25 ± 0.23 cc 1.15 ± 0.29 aabbcc 2.4 白 苏 油 对 大 鼠 血 清 和 肝 组 织 中 丙 二 醛 (MDA) 含 量 及 超 氧 化 歧 化 酶 (SOD) 活 力 的 影 响 模 型 组 血 清 和 肝 匀 浆 中 SOD 酶 活 性 显 著 低 于 对 照 组 辛 伐 他 汀 组 和 白 苏 油 组 (p < 0.01); 模 型 组 MDA 含 量 显 著 高 于 正 常 组 辛 伐 他 汀 组 和 白 苏 油 组 (p < 0.01; p < 0.05) 对 照 组 SOD 活 性 比 辛 伐 他 汀 组 和 白 苏 油 组 要 高 对 照 组 MDA 含 量 比 辛 伐 他 汀 组 和 白 苏 油 组 要 低 辛 伐 他 汀 组 血 清 的 SOD 酶 活 性 与 白 苏 大 剂 量 组 差 异 达 到 了 显 著 水 平 (p < 0.05), 与 小 剂 量 中 剂 量 的 差 异 达 到 极 显 著 水 平 (p < 0.01) 辛 伐 他 汀 组 肝 组 织 中 的 SOD 与 其 他 各 个 组 的 差 异 达 到 极 显 著 水 平 (p < 0.01) 模 型 组 血 清 的 SOD 酶 活 性 与 白 苏 各 组 差 异 达 显 著 水 平 (p < 0.01; p < 0.05) 而 模 型 组 肝 组 织 中 的 SOD 酶 活 性 与 其 他 各 个 组 的 差 异 达 显 著 水 平 (p < 0.01) 对 于 MDA 含 量, 模 型 组 血 清 的 MDA 与 其 他 各 个 组 都 差 异 达 显 著 水 平 (p < 0.01) 但 在 肝 组 织 中, 模 型 组 与 小 剂 量 组 差 异 没 有 达 到 显 著 水 平 (p > 0.05), 与 中 剂 量 大 剂 量 的 差 异 差 异 达 显 著 水 平 (p < 0.01) 辛 伐 他 表 5 白 苏 油 对 大 鼠 血 清 和 肝 组 织 中 丙 二 醛 (MDA) 含 量 及 超 氧 化 歧 化 酶 (SOD) 活 力 的 影 响 Table 5 Effects of PO on MDA content and SOD activity in rat serum and liver tissue SOD MDA 血 清 肝 组 织 血 清 肝 组 织 (U/ml) (U/mg 蛋 白 ) (nmol/ml) (nmol /mg 蛋 白 ) 对 照 组 236.77 ± 17.41 82.66 ± 4.12 6.96 ± 0.54 3.44 ± 0.45 模 型 组 98.05 ± 11.87 aabb 35.02 ± 4.82 aabb 16.56 ± 1.77 aabb 7.42 ± 0.91 aabb 辛 伐 他 汀 组 232.38 ± 21.55 cc 81.84 ± 2.34 cc 7.82 ± 0.30 cc 4.46 ± 0.57 cc 小 剂 量 组 122.05 ± 18.45 aabbc 39.86 ± 7.97 aabbc 12.17 ± 1.57 aabbc 7.23 ± 0.88 aabb 中 剂 量 组 167.82 ± 19.53 aabbcc 48.27 ± 10.11 aabbcc 10.09 ± 1.39 aabbcc 5.53 ± 0.56 aabbcc 大 剂 量 组 212.76 ± 20.37 bcc 54.19 ± 10.59 aabbcc 9.68 ± 1.61 aabbcc 5.11 ± 0.43 aabcc

营 养 卫 生 食 品 科 学 2008, Vol. 29, No. 06 661 汀 组 血 清 和 肝 匀 浆 中 MDA 与 其 他 各 个 组 都 差 异 达 到 极 显 著 性 水 平 (p < 0.01), 具 体 结 果 情 况 见 表 5 2.5 大 鼠 肝 脏 外 观 和 切 片 分 析 大 鼠 标 本 肉 眼 观 察 : 正 常 组 大 鼠 肝 色 鲜 红 边 缘 锐 利 质 韧 ; 模 型 组 大 鼠 肝 外 观 呈 奶 油 黄 或 红 黄 相 间, 体 积 明 显 增 大, 边 缘 变 钝, 质 地 变 软, 切 面 略 带 油 腻 感, 切 片 模 型 组 肝 组 织 可 见 广 泛 弥 漫 性 肝 细 胞 脂 肪 变 性, 脂 质 沉 积, 肝 索 排 列 紊 乱, 肝 细 胞 体 积 增 大, 血 窦 腔 隙 缩 小, 有 明 显 的 炎 症 反 应 ; 药 物 防 治 组 肝 外 观 均 接 近 正 常 光 镜 观 察 : 正 常 组 大 鼠 肝 小 叶 清 晰, 肝 细 胞 索 排 列 整 齐, 模 型 组 肝 小 叶 中 央 静 脉 区 小 泡 状 脂 肪 变, 小 叶 内 及 门 管 区 灶 性 炎 细 胞 浸 润 ; 高 倍 镜 下, 大 鼠 肝 小 叶 中 心 带 肝 细 胞 中 出 现 大 小 不 等 的 脂 肪 滴, 一 些 肝 细 胞 核 则 被 脂 肪 滴 挤 得 明 显 偏 位 白 苏 油 组 肝 病 理 学 改 变 较 模 型 组 显 著 减 轻, 辛 伐 他 汀 组 较 模 型 组 病 变 明 显 减 轻 ( 见 图 1) 具 体 结 果 见 表 6, 统 计 方 法 参 照 卫 生 部 保 健 食 品 检 验 与 评 价 技 术 规 范 进 行 A B C D E F A. 正 常 组 ;B. 辛 伐 他 汀 组 ;C. 模 型 组 ;D. 大 剂 量 白 苏 油 组 ; E. 中 剂 量 白 苏 油 组 ;F. 小 剂 量 白 苏 油 组 图 1 实 验 各 组 肝 组 织 切 片 结 果 (40 ) Fig.1 Histological examinations of liver tissue section stained with hematoxylin and eosin dye (40 ) 由 表 6 可 见, 模 型 的 平 均 得 分 高 于 空 白 组, 差 异 均 有 显 著 性 意 义 (p < 0.01), 说 明 模 型 成 立 白 苏 油 剂 量 组 与 模 式 对 照 组 之 间 的 平 均 分 异 有 显 著 意 义 (p < 0.01), 各 剂 量 组 肝 细 胞 坏 死 程 度 减 轻, 与 模 型 组 差 异 有 显 著 意 义 (p < 0.01) 表 6 实 验 各 组 的 组 织 切 片 得 分 统 计 结 果 (n=10) Table 6 Histological injury scores of rat liver and statistic results (n=10) 脂 肪 变 性 总 得 分 ( 分 ) 0 分 1 分 2 分 3 分 4 分 对 照 组 9 1 0 0 0 1 模 型 组 0 0 1 2 7 36 aabb 辛 伐 他 汀 组 1 6 2 1 0 13 cc 小 剂 量 组 0 1 4 2 3 27 aabbcc 中 剂 量 组 0 1 5 2 1 21 aabbcc 大 剂 量 组 0 3 6 1 18 aabbcc 注 : 记 分 标 准 为 :0 分 代 表 肝 细 胞 无 脂 肪 变 ;1 分 代 表 有 少 于 25% 的 肝 脂 肪 变 ;2 分 代 表 有 大 于 25%, 但 小 于 50% 的 肝 脂 肪 变 ;3 分 代 表 有 50%, 但 小 于 75% 的 肝 脂 肪 变 ;4 分 代 表 肝 脂 肪 变 大 于 75% 3 讨 论 非 酒 精 性 脂 肪 肝 是 遗 传 - 环 境 - 代 谢 应 激 相 关 性 疾 病, 与 胰 岛 素 抵 抗 及 相 关 的 代 谢 综 合 症 和 遗 传 易 感 性 密 切 相 关 二 次 打 击 学 说 可 以 解 释 其 复 杂 的 发 病 机 制 以 氧 应 激 和 脂 质 过 氧 化 为 轴 心 的 二 次 打 击 学 说 已 成 为 探 讨 脂 肪 肝 发 病 机 制 的 热 点 本 实 验 通 过 改 良 的 高 脂 饲 料 在 短 期 内 快 速 成 功 的 建 立 了 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 模 型, 其 原 理 主 要 是 在 高 脂 饮 食 的 基 础 上 添 加 了 药 物 胆 酸 钠 和 丙 硫 氧 嘧 啶 它 干 扰 了 甘 油 三 脂 (TG) 的 代 [4] 谢, 快 速 引 起 脂 代 谢 紊 乱 肝 脏 脂 肪 的 动 态 平 衡 受 到 破 坏, 且 由 于 肝 内 氧 应 激 细 胞 内 反 应 氧 化 类 体 (reactive oxygenspecies,ros) 生 成 增 加 等 机 理, 很 快 [7] 实 现 由 初 次 打 击 转 向 第 二 次 打 击, 该 模 型 制 备 稳 定, 造 模 时 间 短 死 亡 率 低, 是 一 理 想 的 模 型 丙 二 醛 (MDA) 是 一 种 强 有 力 的 脂 质 过 氧 化 产 物, 常 常 作 为 判 断 脂 质 过 氧 化 的 指 标 因 此, 降 低 肝 MDA 和 提 高 超 氧 化 物 歧 化 酶 (SOD) 活 性 能 对 抗 氧 应 激 状 态, 清 除 氧 自 由 基, 提 高 机 体 抗 氧 化 能 力, 从 而 对 治 疗 脂 肪 肝 有 显 著 功 效 本 实 验 将 白 苏 种 子 用 超 临 界 CO2 萃 取 白 苏 油, 其 中 白 苏 油 含 有 大 量 的 α- 亚 麻 酸,α- 亚 麻 酸 是 一 种 无 法 由 人 体 自 身 合 成, 日 常 膳 食 结 构 稀 缺 的 人 体 必 需 脂 肪 酸 和 血 液 营 养 素, 它 在 链 加 长 酶 和 脱 氢 酶 作 用 下 转 化 成 EPA DHA 等 功 效 物 质 有 研 究 报 道 ω -3 PUFA 是 生 成 参 与 生 命 过 程 的 必 需, 并 且 能 转 化 代 谢 成 其 他 成 分, 具 有 调 节 平 衡 人 体 内 分 泌 和 抗 衰 老 等 诸 多 药 用 [8] 价 值 和 营 养 价 值 TC 和 TG 升 高 常 见 于 原 发 性 高 脂 血 症 或 继 发 于 其 他 疾 病, 如 肾 病 糖 尿 病 和 内 分 泌 失 调 等 TC TG 水 平 增 高 是 导 致 动 脉 粥 样 硬 化 的 危 险 指 标, 而 HDL-C 被 认 为 是 预 防 冠 状 动 脉 疾 病 的 重 要 因 素 保 持 TC TG 的 较 低 水 平 和 HDL-C 的 较 高 水 平 对 预 防 心 [7] 血 管 疾 病 和 肝 脏 疾 病 具 有 重 要 意 义 血 脂 浓 度 的 高 低 除 受 到 机 体 代 谢, 特 别 是 内 分 泌 系 统 的 调 控 外, 外 源

662 2008, Vol. 29, No. 12 食 品 科 学 营 养 卫 生 性 物 质 的 影 响 也 是 很 重 要 的 一 个 方 面 李 湛 军 等 观 察 表 明 不 饱 和 脂 肪 酸 对 化 学 毒 物 所 致 大 鼠 对 脂 肪 肝 的 形 成 有 明 显 的 预 防 作 用, 还 表 明 有 抗 脂 质 过 氧 化 作 用, 使 CYP2E1 表 达 下 调, 肝 MDA FFA 浓 度 降 低,SOD 活 性 逐 渐 升 高, 抗 氧 化 能 力 增 强, 防 止 肝 细 胞 的 脂 肪 变 [8] 性 和 肝 脏 损 伤, 促 进 肝 内 脂 代 谢 实 验 表 明 白 苏 种 子 油 能 显 著 降 低 AST ALT TC TG LDL-C 水 平, 提 高 HDL-C 的 水 平, 因 此 认 为 白 苏 种 子 油 具 有 降 低 血 脂 的 作 用 同 时, 本 实 验 显 示 白 苏 油 可 显 著 提 高 在 模 型 组 中 表 现 低 下 的 SOD 活 性 和 降 低 丙 二 醛 (MDA) 的 含 量, 也 显 示 了 其 抗 肝 损 伤 的 作 用 因 此 实 验 认 为 超 临 界 CO2 萃 取 白 苏 油 不 仅 具 有 降 低 非 酒 精 性 脂 肪 肝 损 害 作 用, 而 且 还 能 提 高 机 体 内 的 抗 氧 化 作 用 参 考 文 献 : [1] ARUN J, SANYAL A G. A technical review on nonalcoholic fatty liver disease[j]. Gastroenterology, 2002, 123: 1705-1725. [2] CALDWELL S H, OELSNER D H, IEZZONI J C, et al. Crytogenic cirrhosis: clinical characterization and risk factors for underlying disease [J]. Hepatology, 1999, 29: 664-669. [3] SHIMADA M, HASHMOTO E, TANIAI M, et al. Hepatocellular carcinoma in patients with non-alcoholic steatohepatitis[j]. J Hepatol, 2002, 37: 154-160. [4] YOUNOSSI Z M, DIEHL A M, ONG J P. Nonalcoholic fatty liver disease: an agenda for clinical research[j]. Hepatology, 2002, 35: 746-752. [5] PARK B K, PAIK Y H, PARK J Y, et al. The clinicopathologic significance of the expression of vascular endothelial growth factor-c in intrahepatic cholangiocarcinoma[j]. Am J Clin Oncol, 2006, 29(2): 138-142. [6] 樊 宝 和. 紫 苏 子 和 白 苏 子 的 成 分 比 较 [J]. 时 珍 国 医 国 药, 2002(5): 266. [7] CAPANNI M, CALELLA F, BIAGINI M R, et al. Prolonged n-3 polyunsaturated fatty acid supplementation ameliorates hepatic steatosis in patients with non-alcoholic fatty liver disease: a pilot study[j]. Alimentary Pharmacology and Therapeutics, 2006, 23(8): 1143-1151. [8] 李 湛 军, 邓 莉 娟, 乐 嘉 宁, 等. 海 狗 油 ω -3 多 不 饱 和 脂 肪 酸 对 大 鼠 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 [J]. 中 国 生 化 药 物 杂 志, 2004, 25(6): 324-327.