478 江 苏 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) 第 25 卷 [Keywords] mesenchymalstem cels;systemiclupuserythmatosus;dendriticcels;immunoregulatory efects 间 充 质 干 细 胞 (mesenchy

第 25 卷 第 6 期 2015 年 11 月 江 苏 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) JournalofJiangsuUniversity(MedicineEdition) Vol.25 No.6 Nov.2015 间 充 质 干 细 胞 对 系 统 性 红 斑 狼 疮 患 者 树 突 状 细 胞 的 免 疫 抑 制 作 用 裘 影 影 1, 何 建 强 2, 汤 郁 1 1, 李 晶 ( 江 苏 大 学 附 属 医 院 1. 风 湿 科,2. 肾 内 科, 江 苏 镇 江 212001) [ 摘 要 ] 目 的 : 探 讨 间 充 质 干 细 胞 (mesenchymalstemcels,mscs) 在 体 外 对 系 统 性 红 斑 狼 疮 (systemiclupuserythema tosus,sle) 患 者 外 周 血 单 核 细 胞 来 源 树 突 状 细 胞 (dendriticcels,dc) 免 疫 功 能 的 影 响 方 法 : 从 人 骨 髓 中 分 离 培 养 MSCs, 采 用 流 式 细 胞 仪 (FCM) 分 析 鉴 定 MSCs 的 纯 度 分 离 SLE 患 者 外 周 血 单 核 细 胞, 用 重 组 人 粒 巨 噬 细 胞 集 落 刺 激 因 子 (rhgm CSF) 重 组 人 白 细 胞 介 素 4(rhIL 4) 诱 导 培 养 DC 的 同 时 加 入 MSCs 共 培 养, 设 立 MSCs 处 理 组,MSCs 未 处 理 组 在 第 7 天 收 集 细 胞, 流 式 细 胞 术 检 测 两 组 DC 表 面 CD1a,CD14 的 表 达 SLE 患 者 的 不 成 熟 DC 与 MSCs 共 同 培 养 加 入 终 浓 度 为 50ng/mL 的 重 组 人 肿 瘤 坏 死 因 子 α(rhtnf α)48h 后 收 集 细 胞, 流 式 细 胞 术 检 测 两 组 DC 表 面 CD86 CD83 HLA DR 的 表 达 分 别 将 MSCs 处 理 或 未 处 理 的 DC 和 T 淋 巴 细 胞 共 培 养,72h 后 用 MTT 法 检 测 DC 刺 激 淋 巴 细 胞 增 殖 的 能 力 结 果 : 与 对 照 组 相 比,MSCs 处 理 组 DCs 表 面 CD1a CD86 CD83 以 及 HLA DR 表 达 明 显 下 降 (P<0.01),CD14 表 达 明 显 增 高, 对 淋 巴 细 胞 的 刺 激 能 力 明 显 减 弱 (P<0.01) 结 论 :MSCs 可 能 通 过 抑 制 SLE 患 者 DC 的 发 育 成 熟 和 功 能 的 途 径, 抑 制 SLE 患 者 的 免 疫 反 应 [ 关 键 词 ] 间 充 质 干 细 胞 ; 系 统 性 红 斑 狼 疮 ; 树 突 状 细 胞 ; 免 疫 调 节 [ 中 图 分 类 号 ] R593.241 [ 文 献 标 志 码 ] A [ 文 章 编 号 ] 1671-7783(2015)06-0477-05 DOI:10.13312/j.isn.1671 7783.y150142 Immunosuppresiveefectsofmesenchymalstem celsondendritic celsinsystemiclupuserythematosus QIUYing ying 1,HEJian qiang 2,TANGYu 1,LIJing 1 (1.DepartmentofRheumatology,2.DepartmentofNephrology,theAfiliatedHospitalofJiangsuUniversity,ZhenjiangJiangsu212001,China) [Abstract] Objective:Toinvestigatetheimmunoregulatoryefectsofmesenchymalstemcels(MSCs)on peripheralmonocyte deriveddendriticcels(dc)insystemiclupuserythematosus(sle)patientsinvitro. Methods:MSCswereisolatedandexpandedfromhumanbonemarowcels.ThepurityofMSCswasiden tifiedbyflowcytometry(fcm).themonocyteswereisolatedfromperipheralbloodofslepatientsandcul tivatedintodcwithcytokinessuchasrhgm CSFandrhIL 4for7days.SetuptheMSCstreatedgroupand MSCsuntreatedgroup.Colectedthecelsonthe7thday,flowcytometrywasusedtodetecttheexpresion ofdcs surfacemarkerscd1a,cd14inthesetwogroups.theimmaturedcsofslepatientswereco cul turedwithmscswithaddingtherhtnf αatthefinalconcentration50ng/ml.thecelswerecolectedaf ter48hrs.weusedflowcytometrytochecktheexpresionofdcs surfacemarkercd86,cd83,hla DR inthesetwogroups.theprocesedornotproceseddcbymscswereco cultivatedwithtlymphocytesre spectively.after72hrstheabilityofdcstimulatinglymphocytesproliferationwasdetectedbymtt.re sults:invitro,comparedwithcontrolgroup,expresionofcd1a,cd86,cd83andhla DRweresignifi cantlydecreasedinmsc treatedgroup(p<0.01),expresionofcd14wassignificantlyincreased(p< 0.01),theabilityofDCstimulatinglymphocytesproliferationwasdecreased(P<0.01).Conclusion: MSCscaninhibitDCdiferentiationandfunctioninSLEpatientswhichmayplayanimportantroleinitsim munosuppresiveafectsinsle. [ 基 金 项 目 ] 镇 江 市 科 技 局 社 会 发 展 项 目 (SH2012022); 江 苏 大 学 临 床 医 学 科 技 发 展 基 金 资 助 项 目 (JLY2010119) [ 作 者 简 介 ] 裘 影 影 (1976 ), 女, 江 苏 镇 江 人, 副 主 任 医 师, 硕 士, 主 要 从 事 干 细 胞 与 自 身 免 疫 性 疾 病 的 研 究 ; 李 晶 ( 通 讯 作 者 ), 教 授, 硕 士 生 导 师,E mail:11686662@qq.com

478 江 苏 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) 第 25 卷 [Keywords] mesenchymalstem cels;systemiclupuserythmatosus;dendriticcels;immunoregulatory efects 间 充 质 干 细 胞 (mesenchymalstem cels,mscs) 是 具 有 多 向 分 化 潜 能 的 一 类 干 细 胞, 具 有 免 疫 调 节 等 功 能 [1] 细 胞 免 疫 应 答 时, 环 境 中 的 可 溶 性 外 来 抗 原 不 能 直 接 触 发 T 淋 巴 细 胞, 而 是 由 抗 原 递 呈 细 胞 (antigen presentingcel,apc) 以 特 定 方 式 呈 递 给 T 淋 巴 细 胞 树 突 状 细 胞 (dendriticcels,dc) 作 为 一 类 专 职 性 APC, 是 刺 激 T 淋 巴 细 胞 最 强 的 唯 一 能 激 活 初 始 T 淋 巴 细 胞 的 APC 系 统 性 红 斑 狼 疮 (systemiclupuserythematosus, SLE) 是 一 种 累 及 多 系 统 多 器 官 的 自 身 免 疫 性 疾 病, 主 要 以 T B 淋 巴 细 胞 高 度 活 化, 大 量 自 身 抗 体 产 生 和 累 及 多 器 官 组 织 为 特 点 [2] SLE 患 者 体 内 高 度 活 化 的 T B 细 胞 功 能 的 异 常 多 继 发 于 DC 功 能 的 缺 陷, 因 此 DC 在 SLE 的 发 病 中 起 重 要 作 用 [3] 研 究 表 明 MSCs 可 以 抑 制 髓 系 或 单 核 细 胞 来 源 的 DC 成 熟, 对 DC 具 有 免 疫 抑 制 作 用 [4] 目 前 MSCs 对 SLE 患 者 DC 影 响 的 报 道 较 少, 本 实 验 主 要 探 讨 MSCs 对 SLE 患 者 外 周 血 单 核 细 胞 来 源 DC 免 疫 功 能 的 影 响 1 材 料 与 方 法 1.1 材 料 与 仪 器 Percol( 质 量 浓 度 1.073g/mL) 为 Pharmacia 公 司 产 品,RPMI1640 胎 牛 血 清 及 低 糖 DMEM (Gibco 公 司 ), 淋 巴 细 胞 分 离 液 (Ficol,1.077g/mL) 购 于 上 海 恒 信 试 剂 公 司, 藻 红 蛋 白 (PE) 或 异 硫 氰 酸 荧 光 素 (FITC) 标 记 的 鼠 抗 人 HLA DR CD86 CD83 CD1a CD14 CD34 CD45 CD105 CD29 CD44 单 克 隆 抗 体 及 相 应 的 同 型 对 照 抗 体 ( 美 国 ebioscience 公 司 ) 重 组 人 粒 巨 噬 细 胞 集 落 刺 激 因 子 (rhgm CSF) 重 组 人 白 细 胞 介 素 4(rhIL 4) 重 组 人 肿 瘤 坏 死 因 子 α (rhtnf α) 均 为 R&D 公 司 产 品 流 式 细 胞 仪 ( 美 国 BD 公 司,FACSCalibur), 紫 外 可 见 光 扫 描 酶 标 仪 ( 美 国 Bio TEK 公 司,MQX200) 1.2 病 例 本 实 验 选 取 初 发 SLE 患 者 10 例, 为 我 科 2011 年 1 月 至 2014 年 12 月 住 院 患 者, 均 为 女 性, 年 龄 16~54(33.10±11.33) 岁 患 者 入 院 前 均 未 使 用 糖 皮 质 激 素 和 免 疫 抑 制 剂, 均 符 合 1997 年 由 美 国 风 湿 病 学 会 推 荐 的 SLE 分 类 标 准 且 SLE 活 动 指 数 (SLEDAI 评 分 ) 10 分 1.3 方 法 1.3.1 MSCs 的 分 离 培 养 及 鉴 定 采 集 成 人 健 康 志 愿 者 骨 髓 10mL, 以 Percol 梯 度 离 心, 吸 取 中 间 单 个 核 细 胞 层, 用 PBS 洗 2 次, 以 2 10 5 /cm 2 的 密 度 接 种 于 含 10% 胎 牛 血 清 的 低 糖 DMEM 培 养 瓶 中, 在 37 5%CO 2 培 养 箱 中 培 养 24h 去 除 悬 浮 的 细 胞, 每 隔 3d 换 液, 当 有 90% 的 贴 壁 细 胞 层 融 合 时, 以 0.25% 胰 蛋 白 酶 消 化 传 代 培 养, 取 第 3 代 MSCs, 分 别 与 CD14 CD105 CD29 CD34 CD45 CD44 单 克 隆 抗 体 及 同 型 单 抗 孵 育 20min,PBS 洗 涤 后, 经 流 式 细 胞 仪 检 测, 第 3 代 的 MSCs 经 鉴 定 和 确 定 纯 度 后 冻 存 于 液 氮 罐 中 备 用 1.3.2 DC 的 诱 导 培 养 及 鉴 定 1 无 菌 抽 取 SLE 患 者 外 周 静 脉 血 20mL 并 采 用 肝 素 抗 凝,Ficol 密 度 梯 度 离 心 法 收 获 单 个 核 细 胞 (2000r/min,20 min),pbs 液 洗 涤 2 次 (1500r/min,5min) 2 用 含 10% 胎 牛 血 清 的 RMPI 1640 培 养 基 重 悬 细 胞, 3 10 6 / 孔 接 种 于 24 孔 培 养 板 中,37 5%CO 2 培 养 箱 中 孵 育 2h 后 吸 去 非 贴 壁 细 胞, 轻 轻 洗 涤 2 次, 加 入 含 rhil 410ng/mL,rhGM CSF20ng/mL 的 10% 胎 牛 血 清 的 RMPI 1640 培 养 基 1mL,37 5%CO 2 培 养 箱 中 孵 育, 第 3 天 第 5 天 各 吸 弃 0.3mL, 加 入 含 等 量 rhil 4 rhgm CSF 的 新 鲜 培 养 基 0.5mL 3 部 分 细 胞 第 7 天 加 入 rhtnf α(50ng/ml) 促 其 成 熟, 第 9 天 收 获 悬 浮 细 胞 加 入 FITC/PE 标 记 的 鼠 抗 人 CD1a CD14 CD83 CD86 HLA DR 单 克 隆 抗 体, 流 式 细 胞 仪 鉴 定 1.3.3 MSCs 对 SLE 患 者 单 核 细 胞 来 源 DC 分 化 的 影 响 在 培 养 第 0 天, 经 20Gy 照 射 的 MSCs 与 SLE 患 者 单 核 细 胞 共 培 养, 二 者 的 数 量 比 例 为 1 10 分 为 MSCs 处 理 组 和 MSCs 未 处 理 组 诱 导 体 系 为 含 rhgm CSF(20ng/mL),rhIL 4(10ng/mL) 和 10% 胎 牛 血 清 的 RPMI 1640 诱 导 3d 后 半 量 换 液, 在 第 7 天 收 集 细 胞, 标 记 荧 光 抗 体, 流 式 细 胞 仪 检 测 两 组 DC 表 面 CD1a CD14 的 表 达, 观 察 MSCs 对 SLE 患 者 单 核 细 胞 来 源 DC 分 化 的 影 响 1.3.4 MSCs 对 rhtnf α 刺 激 SLE 患 者 DC 成 熟 的 影 响 在 rhgm CSF rhil 4 诱 导 体 系 下 培 养 7d 的 SLE 患 者 的 不 成 熟 DC 中, 加 入 终 浓 度 为 50ng/mL 的 rhtnf α, 与 经 20Gy 照 射 的 MSCs 共 同 培 养, MSCs 与 DC 数 量 比 例 为 1 10, 作 为 MSCs 处 理 组

第 6 期 裘 影 影, 等. 间 充 质 干 细 胞 对 系 统 性 红 斑 狼 疮 患 者 树 突 状 细 胞 的 免 疫 抑 制 作 用 479 同 时 设 立 MSCs 未 处 理 组 各 组 继 续 培 养 48h 后 收 集 细 胞, 流 式 细 胞 仪 检 测 两 组 DC 表 面 HLA DR CD83 CD86 和 CD1a 的 表 达 1.3.5 MSCs 对 成 熟 DC 刺 激 的 淋 巴 细 胞 增 殖 的 影 响 效 应 细 胞 : 按 上 述 方 法 分 离 的 外 周 血 单 个 核 细 胞, 贴 壁 2h 后 吸 取 悬 浮 细 胞, 调 整 细 胞 密 度 为 2 10 6 /ml 作 为 效 应 细 胞 刺 激 细 胞 :SLE 患 者 的 不 成 熟 DC, 加 入 终 浓 度 为 50ng/mL 的 rhtnf α, 与 经 20 Gy 照 射 的 MSCs 共 同 培 养 获 得 成 熟 的 DC,MSCs 与 DC 数 量 比 例 为 1 10, 分 为 MSCs 处 理 组 和 MSCs 未 处 理 组 成 熟 的 DC 经 20Gy 照 射 后 调 整 细 胞 密 度 为 2 10 5 /ml 作 为 刺 激 细 胞 96 孔 板 中 每 孔 加 入 刺 激 细 胞 和 效 应 细 胞 各 100μL, 每 组 各 设 3 个 复 孔, 共 培 养 72h, 在 培 养 结 束 前 4h 向 各 孔 中 分 别 加 入 MTT(5mg/mL), 培 养 结 束 后 250 g 离 心 5 min, 弃 上 清, 向 各 孔 中 加 入 二 甲 基 亚 砜, 静 置 10 min, 以 紫 外 可 见 光 扫 描 酶 标 仪 检 测 各 孔 570nm 的 光 密 度 (D) 值 1.4 统 计 学 处 理 应 用 SPSS18.0 软 件 进 行 统 计 分 析, 百 分 率 数 据 经 平 方 根 反 正 弦 转 换, 计 量 数 据 用 均 数 ± 标 准 差 ( x±s) 珋 表 示, 组 间 比 较 采 用 t 检 验 以 P<0.05 为 差 异 有 统 计 学 意 义 CD1aFITC CD83FITC 图 1 流 式 细 胞 术 检 测 MSCs 向 树 突 状 细 胞 分 化 情 况 加 入 rhtnf α 刺 激 48h 促 进 DC 成 熟 后 细 胞 边 缘 有 明 显 突 起, 细 胞 毛 刺 增 多, 细 胞 表 面 抗 原 HLA DR 表 达 率 为 (87.57±5.91)% 共 刺 激 分 子 CD86 表 达 率 为 (91.30±4.12)%, 成 熟 标 志 CD83 的 表 达 率 为 (45.66±7.27)% 见 图 2, 图 3 DC 2 结 果 2.1 MSCs 的 分 离 培 养 和 鉴 定 MSCs 培 养 3d 左 右 可 见 单 个 分 散 存 在 的 克 隆, 呈 现 80% 融 合 的 时 间 为 7~10d, 第 3 代 MSCs 形 态 均 一, 呈 长 梭 形 流 式 细 胞 仪 检 测 第 3 代 MSCs, 均 为 CD44 CD29 CD105 阳 性,CD14 CD45 CD34 阴 性, 纯 度 鉴 定 达 到 了 90% 以 上 2.2 MSCs 不 能 被 诱 导 分 化 为 DC 由 于 MSCs 具 有 多 向 分 化 的 潜 能, 我 们 首 先 观 察 体 外 诱 导 DC 的 培 养 体 系 是 否 能 诱 导 照 射 后 的 MSCs 分 化 为 DC 结 果 见 图 1, 在 rhgm CSF 和 rhil 4 作 用 7d 后, 未 发 现 MSCs 表 达 CD14 CD1a CD83 CD86 镜 下 观 察 仍 然 为 贴 壁 的 成 纤 维 样 细 胞, 说 明 在 此 条 件 下 MSCs 不 能 被 诱 导 分 化 为 DC 2.3 DC 的 鉴 定 结 果 SLE 患 者 外 周 血 单 个 核 细 胞 贴 壁 2h 后, 获 得 的 贴 壁 细 胞 为 单 核 细 胞, 在 含 细 胞 因 子 的 血 清 培 养 体 系 中 诱 导 培 养 外 周 血 单 核 细 胞 随 着 培 养 时 间 延 长, 细 胞 逐 渐 变 大, 第 7 天 大 部 分 细 胞 半 悬 浮 生 长, 相 对 特 异 的 表 面 分 子 CD1a 表 达 率 为 (61.60±9.91)% DC 图 2 SLE 患 者 单 核 细 胞 来 源 树 突 状 细 胞 的 形 态 2.4 MSCs 抑 制 SLE 患 者 单 核 细 胞 来 源 DC 的 分 化 SLE 患 者 单 核 细 胞 在 rhgm CSF 和 rhil 4 的 诱 导 条 件 下 与 MSCs 共 同 培 养 7d 后, 与 MSCs 未 处 理 组 相 比,MSCs 处 理 组 的 DC 细 胞 体 积 虽 然 变 大, 但 未 见 明 显 毛 刺 ( 图 4); 流 式 细 胞 术 检 测 结 果 显 示, MSCs 处 理 组 CD1a 的 表 达 率 为 (11.12±5.50)%, 较 MSCs 未 处 理 组 的 (61.60±9.91)% 明 显 下 降 (t=-14.08,p<0.01);mscs 处 理 组 CD14 的 表 达 率 为 (47.46±4.65)%, 较 MSCs 未 处 理 组 的 (1.08±0.27)% 明 显 升 高 (t=31.47,p<0.01) 见 图 5 说 明 在 MSCs 存 在 的 情 况 下,SLE 患 者 大 部 分 单 核 细 胞 没 有 分 化 为 DC

４８０ 江苏大学学报 医学版 第 ２ ５卷 ２ ５ ＭＳ Ｃｓ抑制 Ｓ ＬＥ单核细胞来源 ＤＣ的成熟 检测结果发现 ＭＳ Ｃｓ处理组 ＤＣ较 ＭＳ Ｃｓ未处理组 Ｓ ＬＥ患者单核细胞用 ｒ ｈｇｍ ＣＳ Ｆ和 ｒ ｈｉ Ｌ ４培养 ＤＣ表面标志物 ＣＤ８ ６ ＣＤ８ ３ ＨＬＡ ＤＲ的表达均显 ７天获得不成熟的 ＤＣ 在 ｒ ｈｔｎｆ α存在的条件下 著降低 Ｐ ０ ０ １ 提示 ＭＳ Ｃｓ能抑制 Ｓ ＬＥ患者未 将其与 ＭＳ Ｃｓ共同培养 ２ｄ后收集细胞 流式细胞术 成熟 ＤＣ的成熟 图 ６ 图 ３ 流式细胞术检测树突状细胞的细胞表型 ２ ６ ＭＳ Ｃｓ抑制成熟 ＤＣ刺激同种异体淋巴细胞的 增殖 ＭＴＴ法检测结果表明 ＭＳ Ｃｓ处理组淋巴细胞 Ｄ 值为 ０ ３ １ ３±０ ０ ５ ０ 较 ＭＳ Ｃｓ未处理组的 ０ ８ ７ ３± ０ ０ ４ ８明 显 降 低 ｔ ２ ４ １ ２ Ｐ ０ ０ １ 说 明 经 ＭＳ Ｃｓ处理后 Ｓ ＬＥ患者 ＤＣ刺激淋巴细胞增殖的能 力明显下降 图 ４ ＭＳＣｓ共同培养的树突状细胞形态 MSCs!"#$ 图 ５ 不同培养条件对树突状细胞表型的影响 MSCs"#$

第 6 期 裘 影 影, 等. 间 充 质 干 细 胞 对 系 统 性 红 斑 狼 疮 患 者 树 突 状 细 胞 的 免 疫 抑 制 作 用 481 (%) 3 讨 论 120 100 80 60 40 20 0 CD1a CD83 CD86 HLA-DR :P<0.01, 与 MSCs 未 处 理 组 比 较 MSCs MSCs 图 6 MSCs 抑 制 树 突 状 细 胞 的 成 熟 SLE 主 要 特 征 是 体 内 存 在 大 量 的 自 身 抗 体, 这 些 抗 体 的 产 生 依 赖 于 T 淋 巴 细 胞 [5], 而 T 淋 巴 细 胞 的 激 活 及 分 化 又 依 赖 于 APC DC 是 目 前 认 为 作 用 最 强 的 APC, 它 可 以 通 过 递 呈 抗 原 肽 MHC 复 合 物 的 作 用 激 活 T 淋 巴 细 胞,DC 和 抗 原 信 号 及 炎 症 因 子 共 同 决 定 了 初 始 CD4 + T 淋 巴 细 胞 向 Th1 或 Th2 分 化 [6] SLE 患 者 体 内 过 量 的 自 身 反 应 性 T 淋 巴 细 胞 可 能 是 由 DC 异 常 信 号 传 递 所 诱 导 的, 因 此 目 前 认 为 DC 异 常 是 SLE 发 病 机 制 之 一 [7] MSCs 具 有 低 免 疫 原 性, 体 内 外 实 验 均 证 实 MSCs 具 有 较 强 的 免 疫 抑 制 作 用 [8], 但 其 中 的 作 用 途 径 和 机 制 目 前 不 是 很 明 确 由 于 MSCs 具 有 多 向 分 化 的 潜 能, 我 们 首 先 检 测 了 在 加 入 rhgm CSF 和 rhil 4 的 情 况 下, 经 直 线 加 速 器 照 射 的 MSCs 能 否 被 诱 导 分 化 为 DC, 结 果 提 示 MSCs 不 能 被 诱 导 分 化 为 DC 为 了 探 讨 MSCs 是 否 通 过 对 免 疫 始 动 者 DC 的 调 节 作 用 来 抑 制 SLE 患 者 T 淋 巴 细 胞 的 增 殖, 我 们 进 行 了 MSCs 对 SLE 患 者 单 核 细 胞 来 源 DC 功 能 影 响 的 实 验, 结 果 显 示,MSCs 对 SLE 患 者 DC 的 发 育 成 熟 和 功 能 均 有 负 调 控 作 用 MSCs 可 以 使 DC 刺 激 淋 巴 细 胞 增 殖 的 能 力 显 著 下 降 ; 在 DC 的 分 化 阶 段,MSCs 可 以 明 显 抑 制 SLE 患 者 单 核 细 胞 向 DC 的 分 化, 抑 制 DC 上 CD1a 表 达 的 上 调, 使 其 丧 失 摄 取 抗 原 的 能 力 ; 在 DC 成 熟 阶 段,MSCs 可 以 显 著 抑 制 共 刺 激 分 子 CD86 抗 原 呈 递 分 子 HLA DR 和 成 熟 标 [9] 志 物 CD83 的 表 达 Gerl 等 发 现 在 SLE 活 动 期, DC 的 表 面 标 志 如 CD83 HLA DR 明 显 增 高, 提 示 SLE 患 者 DC 分 化 和 T B 淋 巴 细 胞 分 化 均 异 常 增 加 ; 同 时 DC 表 面 的 共 刺 激 分 子 CD86 也 明 显 增 高 CD86 是 APC 表 面 提 供 协 同 刺 激 信 号 的 重 要 分 子, 它 调 节 着 T 淋 巴 细 胞 的 增 殖 反 应 及 效 应 功 能, 因 此 认 为 CD83 CD86 HLA DR 与 SLE 发 病 及 进 展 具 有 密 切 关 系 MSCs 可 能 通 过 抑 制 SLE 患 者 DC 共 刺 激 分 子 的 表 达 抑 制 DC 的 成 熟 和 抗 原 递 呈 能 力, 进 而 抑 制 特 异 性 T 淋 巴 细 胞 的 免 疫 活 性, 因 此 MSCs 有 诱 导 SLE 免 疫 耐 受 的 可 能 我 们 同 时 发 现 将 DC 和 MSCs 共 培 养 时 DC 突 触 数 量 减 少, 这 可 导 致 DC 表 面 积 减 小, 引 起 MHC Ⅱ 类 分 子 不 能 充 分 发 挥 其 捕 获 抗 原 和 提 呈 的 作 用, 导 致 了 DC 免 疫 效 应 的 下 降 综 上,MSCs 可 以 抑 制 SLE 患 者 DC 的 分 化 成 熟, 抑 制 DC 刺 激 异 体 淋 巴 细 胞 增 殖, 从 而 推 断 MSCs 可 能 是 通 过 调 节 DC 而 抑 制 T 淋 巴 细 胞, 进 而 改 变 SLE 患 者 的 免 疫 反 应 [ 参 考 文 献 ] [1] WangS,QuX,ZhaoRC,etal.Mesenchymalstemcels holdpromiseforregenerativemedicine[j].frontmed, 2011,5(4):372-378. [2] NagyG,KonczA,PerlA.T andb celabnormalities insystemiclupuserythematosus[j].critrevimmunol, 2005,25(2):123-140. [3] Mackern ObertiJP,LlanosC,VegaF,etal.Roleof dendriticcelsintheinitiation,progresandmodulation ofsystemicautoimmunediseases[j].autoimmunrev, 2015,14(2):127-139. [4] SadeghiL,Kamali SarvestaniE,AzarpiraN,etal.Im munomodulatoryefectsofmicemesenchymalstem cels onmaturationandactivationofdendriticcels[j].iran JImmunol,2014,11(3):177-188. [5] MoultonVR,TsokosGC.Tcelsignalingabnormalities contributetoaberantimmunecelfunctionandautoim munity[j].jclininvest,2015,125(6):2220-2227. [6] BrilotF,StrowigT,MunzC.NKcelsinteractionswith dendriticcelsshapeinnateandadaptiveimmunity[j]. FrontBiosci,2008,13(17):6443-6454. [7] ChanVS,NieYJ,ShenN,etal.Distinctrolesofmye loidandplasmacytoiddendriticcelsinsystemiclupus erythematosus[j].autoimmunrev,2012,11(12): 890-897. [8] DeMiguelMP,Fuentes JuliánS,Blázquez MartínezA, etal. Immunosuppresivepropertiesofmesenchymal stem cels:advancesandapplications[j].curmol Med,2012,12(5):574-591. [9] GerlV,LischkaA,PanneD,etal.Blooddendritic celsinsystemiclupuserythematosusexhibitalteredac tivationstateandchemokinereceptorfunction[j].ann RheumDis,2010,69(7):1370-1377. [ 收 稿 日 期 ] 2015-06-27 [ 编 辑 ] 何 承 志