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材料 方法

细胞壁 1. G + 细胞壁 ; 2. G - 细胞壁 ; 3. 缺壁细菌 ; 4. 抗酸细菌细胞壁 ; 5. 古生菌细胞壁 G+ 菌细胞壁肽聚糖 G- 菌细胞壁 磷壁酸 外膜 细胞壁 - 肽聚糖 肽聚糖真细菌细胞壁的特有成分 ( 粘肽 胞壁质 粘质复合物 ) 肽聚糖是聚合物, 由肽和聚糖组成网格状

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原核微生物细菌

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福建农业学报 材料与方法 试验菌株 引物 主要仪器 主要试剂 细菌培养 模板的制备 反应条件 扩增产物的检测 特异性试验 敏感性试验 分离菌株检测 产物的克隆及序列测定 结果与分析


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材料与方法 试剂与溶液 主要仪器 试验动物 人工抗原的合成

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目录 附录 A 实验室结果统计汇总和评价... 1 附录 A1 菌落总数项目结果汇总和统计评价... 1 附录 A2 大肠菌群项目结果汇总和统计评价... 5 附录 A3 粪大肠菌群项目结果汇总和统计评价... 9 附录 A4 大肠杆菌项目结果汇总和统计评价 附录 A5 沙门氏菌项目结果

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三 细菌的生理与遗 传变异 7. 芽胞 1. 细菌的生理 2. 细菌的遗传与变异 (1) 芽胞的形成与特性 1,2 (2) 芽胞的功能 1,2 (1) 细菌的化学组成 1,2 (2) 细菌的物理性状 1,2 (3) 细菌的代谢 (4) 细菌生长繁殖的条件 (5) 细菌生长繁殖的规律 (1) 细菌的遗

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三 细菌的生理与遗 传变异 1. 细菌的生理 2. 细菌的遗传与变 异 中公医考网 : 电话 : ) (2) 芽胞的功能 1,2 (1) 细菌的化学组成 1,2 (2) 细菌的物理性状 1,2 (3) 细菌的代谢 (4) 细菌生长繁殖的条件 (5)


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四 细菌感染的病原学诊断 1. 标本的采集和处理原则 2. 细菌形态学检查 3. 细菌分离培养和鉴定 4. 细菌的非培养检测方法 五 抗菌药物 2. 分枝杆菌的药敏物敏感试验感试验 1. 概述六 细菌的分类与命名 七 革兰阳性球菌 1. 抗菌药物的敏感性试验 3. 厌氧菌体外药物敏感试验 2. 细菌

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四、微生物的形态与类别

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680 微生物学通报 2008, Vol.35, No.5,, [1 4],,,,, Paracoccus Pseudomonas [2,3] Bacillus [5] Rhodococcus [5],, [6],, [7], 4, 40 h, A1, 99.05% 16S rdna A1 ph A

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,4, (GB/T , 2010),25 g 225 ml 4 (BPW), (MagneticNanoparticles, O157 MNPs) 1.2.2, -NMR, (150 r/min) 37 18~24 h ( 3% NaCl), 2 (CFU/mL)

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一 课程基本信息医学微生物学 (Medical Microbiology) 是微生物学的一个分支, 是一门医学的基础学科 它主要研究与医学有关的病原微生物的生物学性状 致病性 免疫性 微生物学检查方法以及特异性预防和治疗等的科学 与临床内 外科学 传染病学 妇产科学 儿科学中感染 / 传染性疾病高度

李小曼 等 溶菌酶与 05 二钠的协同抑菌作用 优势 开发利用新型天然抗菌剂是当前抗菌药物研 # 发的热点? 溶菌酶 又名胞壁质酶或 ( 乙酰胞壁质聚糖水解酶 是目前应用最为广泛的天然抑菌剂之一 溶菌酶作为一种抑菌免疫蛋白 存在于人的鼻黏液 泪液 唾液 乳汁及部分细菌和噬菌体中 溶菌酶化

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1051 熟悉细菌学诊断标本的采集和送检原则及一般检验程序 1052 了解血清学试验原理, 列出常用的血清学诊断方法 2053 比较人工主动免疫和人工被动免疫的区别 1054 列出人工主动免疫和人工被动免疫常用制剂, 比较减毒活疫苗和灭活疫苗的区 别 1055 掌握消毒 灭菌 防腐 无菌 抑菌 无菌

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结果与讨论

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材料 方法 两种不同细胞学方法的筛查结果 敏感性和特异性

北京市2011年1-2月份细菌耐药监测结果

支学科, 药学微生物学的范畴及与药学专业的关系 ( 二 ) 微生物学的发展史 ( 三 ) 微生物学的发展趋势及其在医药学中的作用 第十章细菌学概论教学目的 通过学习细菌大小 基本形态 基本结构 特殊结构 生长繁殖及其规律和所产生的代谢产物与医学的关系 掌握病原微生物致病的物质基础 第一节细菌的形态


干细胞和再生医学 科学学位 免考 免考 非定向 干细胞和再生医学 科学学位 免考 85 非定向 干细胞和再生医学 科学学位 免考 69 非定向 护理学 科学学位 免考 免考 非定向 护理学 科学学位

对虾病毒病的症状

A. 裂解肽聚糖的 1,4 糖苷键 B. 干扰细菌蛋白质合成 C. 抑制肽聚糖中四肽侧链和五肽交联桥的联结 D. 抑制细菌核酸代谢 E. 破坏细菌细胞膜 9. 对外毒素描述错误的是 : C A. 为蛋白质 B. 毒性作用强 C. 抗原性弱 D. 不耐热 E. 选择毒害作用 10. 下列哪项感染血培养

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细菌的细胞壁和细胞膜都有半透性, 允许水及部分小分子物质通过, 有利于吸收营养和排出代谢产物 ( 五 ) 渗透压 细菌体内含有高浓度的营养物质和无机盐, 一般革兰阳性菌的渗透压高达 20~25 个大气压, 革兰阴性菌为 5~6 个大气压 细菌所处一般环境相对低渗, 但有坚韧细胞壁的保护不致崩裂 若处


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微生物学 第一章原核微生物的形态 构造和功能 1 1

研究形态构造的意义 入门的导向 研究的基础 ; 菌种分类鉴定的必要知识 ; 及时检测杂菌的有力依据 ; 提高菌种定向筛选的效率 ; 拓宽思路 求实创新的基础 结构与功能相适应 --- 生物学的基本观点 2 2

微生物类别 微生物 非细胞型 细胞型 (Acellular organisms), 如病毒 原核 ( 微 ) 生物 (Prokaryotes) 真核微生物 (Eucaryotic microorganisms) 微生物不是一个分类意义的名词 通过 1 ~ 3 章的课堂教学, 了解各种微生物, 包括细菌 古生菌和真核微生 物 病毒的基本结构特点 ( 个体 / 群体 ) 和生活特性, 对细胞型 / 非细胞型 微生物的多样性形成概念 3

生物类群 原核 ( 微 ) 生物特点 : 细胞核无核膜包裹, 只存在核区 (nuclear region) 原核生物 Procaryotes:1969 年美国生物学家魏泰克将各类原核生物归在一起成立原核生物界, 五界学说提出 ( 详见第十章 ) 原核生物界这一概念被放弃 1977 年美国沃斯根据 16sRNA 和 18sRNA, 提出三域学说 4

Tree of Life (Domain System) Prokaryotes ( 原核生物 ) Eukaryotes( 真核生物 ) 细菌域古生菌域真核生物域 Bacteria Archaea Eukarya 三域学说 Macroorganisms 5

衣原体门 蓝细菌门 革兰氏阳性菌 放线菌门 (Actinobacteria) 支原体目 (Mycoplasma) 朊细菌 / 变形杆菌门 教材 10-10: 建立在 16sRNA 序列基础上的细菌进化谱系树 立克次氏体目 (Rickettsia) 6

古生菌的主要类群 盐杆菌 盐球菌古生球菌 Euryarchaeota 广古生菌 嗜盐甲烷菌 甲烷八叠球菌 甲烷螺菌 热原体 甲烷杆菌 甲烷栖热菌 甲烷嗜热菌 甲烷球菌 热网菌 Crenarchaeota 热球菌 热变型菌 泉古生菌 硫化叶菌 硫还原球菌 古古生菌 Korarchaeota 7

第一章原核生物的形态 结构和功能 原核微生物 古生菌域 (Archaea) 细菌域 (Bacteria) 细菌域包括 : 细菌放线菌 蓝细菌 支原体 立克次氏体和衣原体 ( 三体 ) 8

重点掌握内容 : 各种细菌的基本特性, 特点 : 壁 膜 质 内容物 各种细胞的结构与功能 : 存在的合理性 区分微生物研究范围 类别, 比如放线菌与细菌 霉菌的区别 难点 : 细胞壁的结构与功能 9

第一节 细菌 一 细菌个体的形态 结构及其功能 ( 一 ) 形态和染色 ( 二 ) 构造 1 细菌细胞的一般构造 (1) 细胞壁 (2) 细胞膜 (3) 细胞质和内容物 (4) 核区 2 细菌细胞的特殊结构二 细菌的群体形态 10 10

( 一 ) 细菌个体的形态和染色 细菌存在于 适宜生长的环境条件 : 温度, 湿度,pH, 营养 How to find and detect? 1. 培养 2. 可观察的形态群体 ( 菌落, 菌苔 ) 个体 ( 显微镜 ) 11

( 一 ) 细菌个体的形态和染色 ( 一 ) 形态和染色 基本形态 ( 多见 ) 球状菌 (coccus) 杆状菌 (rod) 螺旋状 (spirillum) 自然界中 : 杆菌 > 球菌 > 螺菌 > 其他菌 ( 到现在培养的菌 ) 12

( 一 ) 细菌个体的形态和染色 1 球状菌个体呈球形或椭圆形, 细胞分裂后空间排列方式各异, 作为分类依据 依分裂面及分裂后相连否分 : 单球菌 双 四 八 链 葡萄球菌 13

金黄色葡萄球菌 Staphyloccocus aureus 14

肺炎链球菌 Streptococcus pneumoniae 15

( 一 ) 细菌个体的形态和染色 2 杆状菌(bacillus) 细胞呈杆状或圆柱形, 粗细稳定, 长度有较大变化 排列方式常因生长阶段和培养条件而发 生变化, 一般不作为分类依据 依细胞外形为主分 : 短杆 棒杆 梭杆 分枝 伏螺杆 竹节 链状 栅状 八字状 丝状 16

枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis 地衣芽胞杆菌 产生抗活性物质, 并具有独特的生物夺氧作用机制, 能抑制致病菌的生长繁殖 Bacillus licheniformis 17

铜绿假单胞菌 ( 绿脓杆菌 ) Pseudomonas aeruginosa 药物敏感性试验 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌 18

结核分枝杆菌 Mycobacterium tuberculosis 19

炭疽病的病原菌 ---- 炭疽芽胞杆菌 Bacillus anthraci 20

梭菌 肉毒梭菌 Clostridium botulinum 破伤风梭菌 Clostridium tetani 21

破伤风梭菌 22

( 一 ) 细菌个体的形态和染色 3 螺旋菌 ( 一 ) 细菌个体的形态和染色弧菌 (vibrio) < 1 环 (spirilla) 菌体只有一个弯曲, 其程度不足一圈, 形似 C 字或逗号, 鞭毛偏端生 螺旋菌 (spirillum) 2~ 6 环 菌体回转如螺旋, 螺旋数目和螺距大小因种而异 鞭毛二端生 细胞壁坚韧, 菌体较硬 螺旋体菌 (spirochaeta) > 6 环 菌体柔软, 用于运动的类似鞭毛的轴丝位于细胞外鞘内 23 23

弧菌 霍乱弧菌 ( 寄生性弧菌 ----- 蛭弧菌 ) 24

螺旋菌 : 25

梅毒密螺旋体 菌体柔软, 用于运动的类似鞭毛的轴丝位于细胞外鞘内 26

古生菌细胞形态 形态与细菌域微生物类似, 球状 杆状等 产甲烷菌属 超嗜热菌, 杆状 嗜盐菌 杆状 球状 27

4. 特殊形态的细菌 1) 柄杆菌 (prosthecate bacteria) 2) 星形细菌 (star-shaped bacteria ) 3) 方形细菌 (square-shaped bacteria) (Haloarcula 盐盒菌属 ) 4) 异常形态 28

4. 特殊形态的细菌 1) 柄杆菌 (prosthecate bacteria) 细胞上有柄 (stalk) 菌丝 (hyphae) 附器 (appendages) 等细胞质伸出物, 细胞呈杆状或梭状, 并有特征性的细柄 一般生活在淡水中固形物的表面, 其异常形态使得菌体能有效地吸附在颗粒表面, 吸收有限的营养物 ; 29

4) 异常形态出现的原因 环境条件的变化 : 物理 化学因子的刺激 培养时间过长 细胞衰老 营养缺乏 阻碍细胞正常发育 自身代谢产物积累过多 正常形态 异常形态 环境条件恢复正常 30 30

结核杆菌的正常形态 结核杆菌的异常形态 31

( 一 ) 细菌个体的形态和染色 细菌的大小 (the size of bacteria) 测量 : 显微测微尺表示 : 直径 长单位 :μm 0.5 ~ 1 μm ( 直径 ) 0.2 ~ 1 μm( 直径 ) 1 ~ 80μm( 长度 ) 0.3 ~ 1 μm( 直径 ) 1 ~ 50 μm( 长度 ) 32 32

细菌细胞的大小 菌名直径或宽 长 /(μm μm ) 乳链球菌 0.5 ~ 1 金黄色葡萄球菌 0.8 ~ 1 大肠杆菌 0.5 (1 ~ 3) 枯草芽孢杆菌 (0.8 ~ 1.2) ( 1.2 ~ 3) 霍乱弧菌 (0.3 ~ 0.6) (1 ~ 3) 33

较大细菌 费氏刺尾鱼菌 草履虫 1985 年费氏刺尾鱼菌 (Epulopiscium fishelsoni) (80μm 200~600μm) 体积比大肠杆菌大 100 万倍 (1985 年发现 ) 34

最大细菌 纳米比亚嗜硫珠菌 Thiomargarita namibiensis 细胞直径 0.32 ~ 1 mm ( 迄今发现最大的细菌!) 德国 Schulz 等 1997 年在非洲西部大陆架土壤中 发现的, 以海底散发的 H 2 S 为生 35

其体积比 E. fishelsoni 还大 100 倍 Science, Vol 284, Issue 5413, 493-495,1999 胞内约 98% 的空间被富含硝酸盐的液泡所占据, 液泡中的硝酸盐则被用作硫氧化的电子受体, 以产生能量 充满硫粒的细胞质层则环绕在液泡的周围, 厚度在 0.5-2.0 mm 36

微生物命名 ( 拉丁文 ) 属名可用缩写, 但种名不能缩写 属名可以单独用, 但种名必须与属名一起用 属名和种名必须要用斜体, 当手写时需用下划线 Escherichia coli K12 属名 种名 菌株名 例 : Escherichia coli, E. coli, Escherichia sp. K12, Escherichia sp.,escherichia spp., and the genus Escherichia 文章中首次用学名时需要用全称, 第二次开始属名可以用缩写 ( 但必须与种名一起用 ) 如果用缩写后可能与其它属引起混淆, 就不能用缩写 37

Escherichia coli 大肠 ( 埃希氏 ) 杆菌 Bacillus anthracis 炭疽杆菌 rod-shaped (bacilli; bacillus; 杆菌 ) 38

Pseudomonas aeruginosa 绿脓杆菌 ( 铜绿假单胞菌 ) 俗名 学名 39

Staphylococcus aureus 金黄色葡萄球菌 Enterococcus faecium 粪肠球菌 spherical (coci; coccus; 球菌 ) 40

Vibrio cholerae 霍乱弧菌 41

Borrelia burgdorferi 布氏疏螺旋体 Treponema pallidum 苍白密螺旋体 ( 梅毒密螺旋体 ) 42

第一节 细菌 一 细菌的形态 结构及其功能第一节 ( 一 ) 形态和染色 ( 二 ) 构造 1 细胞的一般构造 (1) 细胞壁 1)G+ 细菌的细胞壁 2)G- 细菌的细胞壁 3) 革兰氏染色 4) 抗酸细菌的细胞壁 5) 古细菌的细胞壁 6) 缺壁细菌 43 细菌 43

细菌细胞的结构 一般构造 : 一般细菌都有的构造 特殊构造 : 部分细菌具有的或一般细菌在特殊环境下才有的构造 44

(1) 细胞壁 ( 二 ) 细胞的结构 A 概念 : 细胞壁 (cell wall) 位于细胞最外? 的一层厚实 坚韧的外被 )--( 位于细胞表面, 内侧紧贴细胞膜的一层较为坚韧, 略具弹性的细胞结构 ) 细胞壁 45 45

(1) 细胞壁 B 研究 证实细胞壁的方法: 细菌超薄切片的电镜直接观察 ; 适当的质 壁染色, 可以在光学显微镜下看到细胞壁 ; 机械法破裂细胞后, 分离得到纯的细胞壁 ; 制备原生质体, 观察细胞形态的变化 ; 制备原生质体后, 可以证明细胞壁存在 ; 46

(1) 细胞壁 C 细胞壁的功能 : 固定细胞外形和提高机械强度 ; 有报道说大肠杆菌的膨压 (turgor) 可达 2 个大气压 ( 相当于汽车内胎的 压力 ) 47

(1) 细胞壁 C 细胞壁的功能 : 为细胞的生长 分裂和鞭毛运动所必需 ; 渗透屏障, 阻拦酶蛋白和某些抗生素等大分子物质 ( 分子量大于 800) 进入细胞, 保护细胞免受消化酶和链霉素等有害物质的损伤 ; 细菌特定的抗原性 致病性以及对抗生素和噬菌体的敏感性的物质基础 ; 48

(1) 细胞壁 D 细胞壁的化学组成与结构 : 多数细菌基本成分是肽聚糖 (Peptidoglycan) 但是 G- G+ 和古生菌中还有自己的特点 49 49

1)G + 细菌的细胞壁 特点 : 肽聚糖层厚度大 (20~80nm) 细胞壁化学组分简单, 一般只含 90% 肽聚糖和 10% 磷壁酸 50

1)G + 细菌的细胞壁 1 肽聚糖 (peptidoglycan) 脂磷壁酸磷壁酸肽聚糖 又称粘肽 (mucopeptide) 胞壁质 (murein) 或粘质复合物 (mucocomplex), 是细菌细胞壁中的特有成分 2 磷壁酸 (teichoic acid) 结合在 G+ 细菌细胞壁上的一种酸性多糖 细胞膜 G + 51 51

1)G + 细菌的细胞壁 1 肽聚糖 : 厚 20~80 nm, 由几层至 25 层左右的网格状分子织成的网套覆盖在整个细胞上 肽聚糖 肽 聚糖 四肽尾肽桥 N - 乙酰葡糖胺 (G) N - 乙酰胞壁酸 (M) 52 52

原核生物所特有的己糖 G M 双糖单位 四肽尾 肽桥 肽聚糖单体组成 革兰氏阳性细菌肽聚糖的立体结构 ( 片段 ) 53 53

双糖单位中的 β-1,4- 糖苷键很容易被溶菌酶 (lysozyme) 所水解, 从而引起细菌因肽聚糖细胞壁的 散架 而死亡 青霉素 肽桥起着连接前后两个四肽尾分子的 桥梁 作用 青霉素 D- 丙氨酰 -D 丙氨酸结构类似物, 抑制转肽 p144( 第五章新陈代谢 ) L 型与 D 型交替方式连接而成 54 四肽尾 由四个氨基酸分子按

G + 肽聚糖网格状结构 55

肽桥 ( 肽间桥 ) 目前所知的肽聚糖已超过 100 种, 在这一 肽聚糖的多样性 中, 主要的变化 发生在肽桥上 在金黄色葡萄球菌中, 肽桥为甘氨酸五肽 56

2 磷壁酸 (teichoic acid) p18 磷壁酸是 G + 细菌细胞壁上特有的化学成分, 主要分为甘油磷酸或核糖醇磷酸 a, 核糖醇磷酸 b, 甘油磷酸 57 57

磷壁酸种类 膜磷壁酸 / 脂磷壁酸 壁磷壁酸 由甘油磷酸链分子与细胞膜上的磷脂进行共价结合后形成 其含量与培养条件关系不大 与肽聚糖分子间进行共价结合, 含量随培养基成分而改变, 一般占细胞壁质 量的 10%, 有时接近 50% 58

磷壁酸的主要生理功能 1. 通过负电荷浓缩 Mg 2+, 提高细胞膜上合成酶活性 ; 2. 贮藏磷元素 ; 3. 调节细胞内自溶素 (autolysin) 的活力, 防止自溶 ; 自溶素是细菌自身产生的可降解细菌细胞壁的蛋白水解酶. 磷壁酸对自溶素 有调节功能, 阻止胞壁过度降解和壁溶 4. 噬菌体的特异性吸附受体 ; 5. G+ 细菌特异表面抗原的物质基础 ; 金葡菌的细胞壁有大量磷壁酸构成该菌的表面抗原, 通 过共价键与肽聚糖层的胞壁酸相连. 可作为细菌分类 鉴定的依据 6. 增强某些致病菌 ( 如 A 族链球菌 ) 对宿主细胞的粘连, 避免被白细胞吞 噬以及抗补体的作用 59 59

G+ 菌形成脚手架一样的坚固的细胞壁 60

2) G- 细菌细胞壁 D 细胞壁的化学组成与结构 : 61 61

2) G- 细菌细胞壁 2 外膜 3 外膜蛋白 4 周质空间 1 肽聚糖 62

2) G- 细菌的细胞壁 1 肽聚糖 1 肽聚糖 : 埋藏在外膜层之内, 是仅由 1~2 层肽聚糖网状分子组成的薄层 (2~3nm), 含量约占细胞壁总重的 5%~10%, 故对机械强度的抵抗力较革兰氏阳性菌弱 肽桥 : 没有特殊的肽桥, 只形成较为疏稀 机械强度较差的肽聚糖网套 肽尾 : 内消旋二氨基庚二酸 (m-dap) ( 只在原核微生物细胞壁上发现 ) 63

2)G- 细菌的细胞壁 2 外膜 (outer membrane) 脂多糖 位于革兰氏阴性细菌细胞壁外层, 由脂多糖 磷脂和脂蛋白等若干种蛋白质组成的膜, 有时也称为外壁 外膜 磷脂 脂蛋白 64

2)G- 细菌的细胞壁 2 外膜 (outer membrane) 脂多糖 (lipopolysaccharide, LPS) 位于 G- 细菌细胞壁最外层的一层较厚 (8~10nm) 的类脂多糖类物质, 由 3 部分组成 : 类脂 A(lipidA) 核心多糖 (core polysaccharide) O- 特异侧链 (O-specific side chain, 或称 O- 多糖或 O- 抗原 ) 65

2)G- 细菌的细胞壁 2 外膜 (outer membrane) 脂多糖的主要功能 O- 特异侧链具有抗原性, 结构多变, 决定了 G- 细菌细胞表面抗原决定簇的多样性 ; 根据 LPS 抗原性的测定, 沙门氏菌属 (Salmonella) 的抗原型多达 2107 种 O- 特异侧链种类的变化 1) 躲避宿主免疫系统攻击, 保持感染成功 2) 用灵敏的血清学方法对病原菌进行鉴定, 在传染病的诊断中有其重要意义 66 66

2)G- 细菌的细胞壁 2 外膜 (outer membrane) 脂多糖的主要功能 核心多糖含有带电荷的糖和磷酸, LPS 负电荷较强, 与磷壁酸相似, 也有吸附 Mg2+ Ca2+ 等阳离子以提高其在细胞表面浓度的作用 ; Ca2+ 对 LPS 结构起稳定作用 67 67

2)G- 细菌的细胞壁 2 外膜 (outer membrane) 脂多糖的主要功能 类脂 A 是革兰氏阴性细菌致病物质 内毒素的物质基础 ; 68 68

2)G- 细菌的细胞壁 2 外膜 (outer membrane) 脂多糖的主要功能 许多噬菌体在细胞表面的吸附受体 ; 具有控制某些物质进出细胞的部分选择性屏障功能 ; 教材 p19 69 69

2)G- 细菌的细胞壁 3 外膜蛋白 (outer membrane protein) 嵌合在 LPS 和磷脂层外膜上的蛋白 有 20 余种, 但多数功能尚不清楚 70

2)G- 细菌的细胞壁 3 外膜蛋白 (outer membrane protein) 孔蛋白 (porins), 一种三聚体跨膜蛋白, 中间有孔道, 通过孔的开 闭, 可对进入外膜层的物质进行选择 非特异性孔蛋白 可通过分子量小于 800~900 的任何亲水性分子 特异性孔蛋白 只容许一种或少数几种相关物质通过, 如维生素 B 12 和核苷酸等 71

2)G- 细菌的细胞壁 3 外膜蛋白 (outer membrane protein) 脂蛋白 (lipoprotein) 是一种通过共价键使外膜层牢固地连接在肽聚糖内壁层上的蛋白 除脂蛋白和孔蛋白外, 还有一些外膜蛋白与噬菌体的吸附或细菌素的作用有关 72

合成酶类 ( 抗抗生素 ) 2)G- 细菌的细胞壁 1 细胞壁 4 周质空间 (periplasmic space, periplasm) 在周质空间中, 存在着多种周质蛋白 (periplasmic proteins) 水解酶类 ( 消化 ) 结合蛋白 ( 运输 ) 受体蛋白 ( 趋化 ); 73

2)G- 细菌的细胞壁 1 细胞壁 4 周质空间 (periplasmic space, periplasm) 一般认为革兰氏阳性细菌是无周质空间的, 故一些水解酶就无法保留而只能释放到外环境中 G+ 多产胞外酶 74

小结 :G+ 与 G- 细菌的细胞壁 肽聚糖仅在细菌中发现 肽聚糖有利于防止由于膨压引起的细胞溶解 75 75

G + 和 G - 细胞壁结构比较 ( 立体模型 ) 肽聚糖 磷壁酸 脂磷壁酸 外膜 多糖 孔蛋白蛋白质 脂质 肽聚糖 周质空间 细胞膜 膜蛋白 膜蛋白 G + G - 76

革兰氏阳性和阴性细菌的比较 ( 沈 p45) 项目革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌 细胞壁 厚度厚 (20~80nm) 薄 (8~11nm) 层次 1 2 肽聚糖层厚度厚薄 磷壁酸 有 无 外膜 (LPS) 无 有 孔蛋白 无 有 脂蛋白 无 有 周质空间 无或窄 有 溶质通透性 强 弱 肽聚糖 四肽尾中 Lys 有无 四肽尾中 m-dap 无有 Gly 五肽等肽桥有无 细胞细胞硬度硬实柔软 产芽胞有的产不产 鞭毛基体有 2 个环有 4 个环 对理化因子抗性 机械力抗性强抗性弱 青霉素 磺胺敏感较抗 链霉素 氯霉素 四环素较抗敏感 阴离子去污剂敏感较抗 碱性染料敏感较抗 溶菌酶处理后形成原生质体形成球状体 其他产毒素以外毒素为主以内毒素为主 77 77

第一节 细菌 一 细菌的形态 结构及其功能 ( 一 ) 形态和染色 ( 二 ) 构造 1 细胞的一般构造 (1) 细胞壁 1)G+ 细菌的细胞壁 2)G- 细菌的细胞壁 3) 革兰氏染色 4) 抗酸细菌的细胞壁 5) 古细菌的细胞壁 6) 缺壁细菌 78 78

3) 革兰氏染色法的机制 革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法, 是由丹麦医生 Hans Christian Gram 于 1884 年创立的一种鉴别不同类型细菌的染色方法 ( G+,G-) 79

A 革兰氏染色的基本原理 肽聚糖层次多 厚 交联度大, 网格结构, 留住碘与结晶紫复合物 不含类脂和脂蛋白 不受脱色剂影响 G+ 80 80

B. 革兰氏染色结果及细菌分类 单菌染色结果 (G + 或 G - ) 混合菌染色结果 (G+ 和 G-) 81 81

4) 抗酸细菌的细胞壁 : 抗酸性细菌 : 细胞壁中含有大量分枝菌酸 ( 长链脂肪酸 ) 等蜡质的特殊 G + 如某些 G+ 的分枝杆菌和诺卡氏菌 分枝菌酸与酸性复红染料结合后, 很难被酸性脱色剂 ( 盐酸乙醇 ) 脱色, 故名抗酸性细菌 与侵袭力 ( 致病性 ) 有关 ; 简单染色很难使其着色 结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌均是抗酸性细菌 82 82

在抗酸细菌的细胞壁中含有约 60% 类脂 ( 包括分枝菌酸和索状因子等 ), 肽聚糖含量则很少, 所以从染色反应上属于革兰氏阳性细菌, 但从其类脂外壁层 ( 相当于革兰氏阴性菌的 LPS 外膜 ) 和肽聚糖内壁层的结构来看, 又与革兰氏阴性菌的细胞壁相似 索状因子 ( 糖脂 ) 使菌体液体中生长肩并肩聚集, 缠绕, 形成菌膜 蜡质阻挡物质运输, 包括养份 药物 染料 83 83

抗酸性染色 细菌细胞需要染色后才能在显微镜下观察! 正染色死菌 简单染色法 鉴别染色法 革兰氏染色法抗酸性染色法芽孢染色法姬姆萨染色法 细菌染色法 负染色 : 荚膜染色法等 活菌 用美蓝 ( 亚甲蓝 ) 或 TTC( 氯化三苯基四氮唑 ) 等 作活菌染色 84 84

抗酸性染色 : 1) 细胞与石碳酸复红和苯酚的混合液一起加热 ; 2) 盐酸乙醇脱色 ( 也不脱色 ); 3) 碱性美蓝复染 ( 仍为红色 ); 抗酸性染色阳性菌 : 抗酸性染色阴性菌 : 红色 蓝色 被称为抗酸性细菌 用抗酸性染色检测宿主体内麻风及结核分枝杆菌病原体 85 85

5) 古生菌的细胞壁 具有与细菌功能类似的细胞壁 ; 细胞壁的结构和化学成分均差别甚大 ; 已研究过的一些古生菌, 它们细胞壁中没有真正的肽聚糖, 而是由多糖 ( 假肽聚糖 ) 糖蛋白或蛋白质构成的 热原体属 (Thermoplasma) 没有细胞壁 ; 86 86

糖苷键 :β-1,3 糖苷键, 不被溶菌酶水解 糖骨架 :N- 乙酰葡糖胺和 N- 乙酰塔罗糖胺糖醛酸交替连接 肽尾没有 D- Ala, 对青霉素不敏感 肽尾和肽桥 : 肽尾由 L-glu L-ala 和 L-lys 三个 L 型氨基酸组成, 肽桥则由 L-glu 一个氨基酸组成 假肽聚糖 87 87

6) 缺壁细菌 (cell wall deficient bacteria) 缺壁细菌 实验室或宿主体内形成 缺壁突变 L 型细菌基本去尽 原生质体 (G + ) 人工去壁部分去除 球状体 (G - ) 在自然界长期进化中形成 支原体 88 88

6) 缺壁细菌 1 L 型细菌 (L-form of bacteria) 英国李斯特 (Lister) 预防研究所首先于 1935 年发现 专指在某些环境条件下 ( 实验室或宿主体内 ) 通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型 特点 : 细胞呈多形态 ; 有些能通过细菌滤器, 故又称 滤过型细菌 ; 对渗透压敏感, 在固体培养基上形成 油煎蛋 似的小菌落 ( 直径 ~0.1 mm) 89 89

6) 缺壁细菌 2 原生质体 (protoplast) 在人为条件下, 用溶菌酶处理或在含青霉素的培养基中培养, 抑制新生细胞壁合成而形成的仅由一层细胞膜包裹的 圆球形 对渗透压变化敏感的细胞, 一般由 G + 细菌形成 90

原生质体特点 6) 缺壁细菌 对环境条件变化敏感, 易引起其破裂 ; 有鞭毛, 但不能运动, 也不被噬菌体感染 ; 在适宜条件可再生形成菌落 ; 更易导入外源遗传物质, 是研究遗传规律和 进行原生质体育种的良好实验材料 91

6) 缺壁细菌 3 球状体 (sphaeroplast), 又称原生质球 处理 G - 获得的残留部分细胞壁 ( 外壁层 ) 的球状体 与原生质体相比, 它对外界环境具有一定的抗性, 可在普通培养基上生长 92

6) 缺壁细菌 4 支原体 (Mycoplasma) 在长期进化过程中形成 的 适应自然生活条件的无 细胞壁的原核生物 93

需要掌握的知识点 细胞壁化学组成与结构 G- G+ 细菌细胞壁的区别? 生物学意义 革兰氏染色法及其机理 青霉素 溶菌酶的作用机理 思考 : 为什么 G- 更难抑制, 或为什么致病菌多为 G-? 94 94