采用液相色谱 / 三重四极杆质谱对食物样品中的 301 种农药进行多残留分析 应用简报 农药 作者 E. Michael Thurman 与 Imma Ferrer Department of Civil, Environmental and Architectural Engineering Center for Environmental Mass Spectrometry University of Colorado ECOT 441, 428 UCB Boulder, CO 80309 美国 Jerry A. Zweigenbaum 安捷伦科技有限公司 2850 Centerville Road Wilmington, Delaware 19806 美国 摘要采用安捷伦 G6410A 三重四极杆质谱 (QQQ) 开发了一种用于筛选和确证蔬菜样品中 301 种农药的分析方法 我们发现这 301 种化合物中的 90% 都可以通过该方法被鉴定出来, 蔬菜基质样品的分析检测限 (LOD) 为 0.01 mg/kg(ppm) 或更低, 该检测限符合婴儿食品和禁用物质的限量要求, 也是欧盟规定的最大残留限量 (MRL) 本文采用正离子电喷雾模式, 在每个时间段 99 次的监测速度下, 使用每种化合物的定量和确认离子, 在单次分析中即可达到上述浓度 利用不同类型的蔬菜( 西红柿和青椒 ) 对该方法的分析性能进行评价, 发现基质效应很小或几乎没有 所有化合物的响应值在 2 个数量级范围内线性关系良好 (r 2 > 0.99)
前言 当前世界上用于食品以及土壤与作物处理的农药 ( 包括合法的与不合法的 ) 就有 900 多种 为保护消费者安全, 食物和饮用水中的上述大多数农药都有最大残留限量 (MRL) 作为食物质量控制的一部分, 尤其是水果和蔬菜, 必须对其最大残留限量浓度进行监测 ; 因此, 食物质量控制需要涉及数百种农药的多残留分析方法 然而, 一次分析同时监测数百种农药的要求, 对于色谱和质谱分析来说都是一种极大的挑战 在本文中, 我们联合使用了新型的 1.8 µm 液相色谱柱 ( 可获得最大的峰容量 ) 及每个时间段可进行 100 次 transitions 的八个时间段, 评价了单次分析中采用安捷伦 6410 三重串联四极杆质谱对 301 种农药的筛选和确证, 以获得相应的满足欧盟 (EU) 采用质谱分析实现明确鉴定规定的定量离子和定性离子 本研究在检测限 响应速度以及色谱分离方面拓展了仪器的测试能力 本研究系首次全面检验安捷伦三重串联四极杆质谱在单次运行中分析食物中数百种农药的能力 选择本课题是因为这些化合物与食品的相关性, 以及其在食品上的广泛使用 三重串联四极杆质谱的检测灵敏度很容易满足食物中 90% 所研究农药的限量规定 实验部分 样品制备 农药分析标准品购自 Chem Services 有限公司 ( 费城, 美国 ) 和 Sigma Aldrich 公司 ( 路易斯维尔, 美国 ) 各农药贮备液 ( 浓度约 1000 µg/ml) 根据每个化合物的溶解性采用纯乙腈或甲醇制备, 并于 18 ºC 贮藏 取上述母液适量, 用乙腈和水稀释制备工作标准溶液 蔬菜样品采自当地市场 为进行方法验证, 采用 空白 蔬菜提取物制备基质匹配的标准样品 因此, 采用 QuEChERS 方法 [2] 对两种蔬菜 ( 青椒和西红柿 ) 进行提取 将农药标准品混合物以不同浓度加标到蔬菜提取物中 ( 0.1-100 ng/ml 或 ppb), 然后采用液相色谱 - 串联质谱进行分析 液相色谱串联质谱联用仪液相色谱条件色谱柱 : Agilent SB C18,4.6mm 150 mm,1.8 µm ( 部件号 829975-902) 柱温 : 25 ºC 流动相 : 10% ACN 和 90% H 2 O, 含 0.1% HCOOH 流速 : 0.6 ml/min 梯度程序 : 时间 0 = 10% ACN 线性升至时间 28 = 98% ACN 时间 30 = 100% ACN 时间 31 = 100% ACN 进样体积 : 10 µl 质谱条件模式 : 正离子 ESI 模式的 Agilent G6410AA 三重四极杆质谱 雾化器 : 40 psig 干燥气流速 : 9 L/min 毛细管电压 : 4000 V 干燥气温度 : 350 ºC 碎裂电压 : 70-120 V 碰撞能量 : 5-30 V MRM: 各化合物的两个离子 transitions 见表 1 驻留时间 : 10 ms 结果与讨论 液相色谱串联质谱联用条件优化 初始研究包括两方面的内容 : 首先是优化这 301 个化合物各自的碎裂电压, 以获得相关母离子的最大信号 通常质子化的分子可以用来作为母离子 采用自动程序分别对每个化合物进行分析, 考察每个电压下的碎片丰度 选择产生最佳碎片信号的碎裂电压, 在程序运行中注入浓度为 10 µg/ml 的各化合物, 测定定量和定性离子的碰撞能量 研究中对这些化合物施加了不同的碰撞能量 (5 10 15 20 25 和 30 V) 针对每种离子进行能量优化, 最终选择能给出最高检测灵敏度的电压 本研究中的 MRM transitions 和这 301 种化合物均列于表 1A 和 1B 2
表 1A. 分析条件 MRM 检测限和测试化合物的 r 2 青椒的检测限 西红柿的检测限 3,4,5- 三甲威 194 137 0.9 0.5 0.999 122 3- 羟基呋喃丹 238 163 5.0 5.0 0.999 220 高灭磷 184 143 9.0 5.0 1.000 125 啶虫脒 223 126 0.2 0.5 1.000 56 苯草醚 265 248 20.0 10.0 0.979 193 涕灭威 116 89 1.5 5.0 1.000 70 涕灭威砜 223 148 6.0 1.0 1.000 76 涕灭威亚砜 207 89 4.0 1.0 0.999 132 莠灭净 228 186 4.3 4.3 0.999 96 灭害威 209 137 4.5 2.0 1.000 152 阿特拉津 216 174 0.8 0.6 1.000 132 甲基吡啶磷 325 183 0.9 0.9 0.993 139 甲基谷硫磷 318 132 1.0 1.0 0.975 160 嘧菌酯 404 372 0.5 0.5 0.973 344 苯霜灵 326 148 1.0 0.5 0.992 294 恶虫威 224 109 1.0 1.0 0.996 167 苄嘧磺隆 411 149 0.5 0.4 0.998 182 苯螨特 364 199 1.0 0.5 0.999 105 治草醚 342 189 25.0 40.0 *** 310 双苯三唑醇 338 99 0.6 2.0 0.995 269 除草定 261 205 2.0 1.0 0.999 188 3
糠菌唑 1 376 159 1.0 1.0 1.000 70 糠菌唑 2 376 159 4.0 2.0 0.983 70 磺酸丁嘧啶 317 166 1.0 5.0 0.999 272 稻虱净 306 201 0.7 0.8 0.999 116 丁酮威 213 156 5.0 *** 0.940 75 丁酮威亚砜 207 75 5.0 5.0 0.997 132 播土隆 237 84 1.0 0.5 0.999 126 苏达灭 218 57 5.0 45.0 0.990 156 西维因 202 145 5.0 5.0 0.999 117 多菌灵 192 160 0.5 1.0 0.997 132 长杀草 237 118 0.5 0.5 0.996 192 呋喃丹 222 165 1.0 1.0 0.999 123 萎锈灵 236 143 0.5 0.5 0.993 87 唑酮草酯 412 346 8.0 8.0 0.998 366 氯溴隆 293 204 7.0 10.0 0.996 182 毒虫畏 359 155 2.0 1.0 0.990 127 定虫隆 540 383 1.0 1.0 0.989 158 氯草敏 222 104 0.9 1.0 1.000 92 枯草隆 291 72 0.5 2.0 0.983 218 氯苯胺灵 214 172 1.0 1.0 0.998 154 甲基毒死蜱 322 125 7.0 35.0 0.978 290 4
氯磺隆 358 141 1.0 1.0 0.999 167 醚磺隆 414 183 3.0 1.0 0.998 157 烯草酮 360 164 5.0 10.0 0.940 268 炔草酯 350 266 5.0 1.0 0.993 238 四螨嗪 303 138 6.0 10.0 0.998 102 异恶草酮 240 125 0.9 5.0 0.999 89 解毒喹 336 238 0.1 0.5 0.990 192 蝇毒磷 363 227 1.0 5.0 1.000 307 草净津 241 214 2.0 1.0 0.999 174 草灭特 216 83 1.0 10.0 0.999 154 霜脲氰 199 128 6.0 5.0 1.000 111 环唑醇 292 70 1.0 2.0 0.993 125 嘧菌环胺 226 93 5.0 7.0 1.000 108 环丙马秦 167 85 10.0 10.0 0.997 125 丁酰肼 161 143 50.0 40.0 0.999 61 脱乙基阿特拉津 188 146 1.0 1.0 0.999 104 去乙基特丁津 202 146 1.0 0.5 0.999 110 脱异丙基莠去津 174 96 4.0 5.0 0.998 132 内吸磷 -S- 甲基砜 263 169 0.5 0.5 0.990 125 甜菜安 301 136 1.0 10.0 0.999 182 二嗪农 305 169 0.5 0.2 1.000 153 5
除线磷 315 287 10.0 40.0 0.520 259 抑菌灵 333 123 10.0 10.0 0.999 224 敌敌畏 221 109 5.0 5.0 0.999 145 苄氯三唑醇 328 70 2.0 5.0 1.000 159 乙霉威 268 152 0.5 1.0 0.998 226 苯醚甲环唑 -1 406 251 0.3 0.5 0.989 337 苯醚甲环唑 -2 406 251 0.3 0.5 0.989 337 枯莠隆 287 72 0.6 0.2 0.980 123 除虫脲 311 158 6.0 6.0 0.959 141 吡氟草胺 395 266 5.0 1.0 0.999 246 噁唑隆 339 72 0.5 1.0 0.991 167 二甲草胺 256 224 0.5 1.0 0.993 148 二甲噻草胺 276 244 0.6 0.1 0.987 168 乐果 230 199 0.7 0.7 0.994 171 烯酰吗啉 1 388 301 0.6 0.6 0.998 165 烯酰吗啉 2 388 301 0.6 0.6 0.998 165 烯唑醇 326 70 1.0 1.0 0.988 159 二苯胺 170 93 0.5 0.1 0.985 65 乙拌磷 275 89 5.0 10.0 0.991 61 敌草隆 233 72 0.8 1.0 0.996 160 吗菌灵 282 116 10.0 10.0 0.983 98 EPN 324 157 30.0 10.0 0.991 296 6
氟环唑 330 121 20.0 *** *** 141 乙硫苯威 226 107 0.9 1.0 0.995 164 乙硫苯威砜 258 107 6.0 6.0 0.998 201 乙硫苯威亚砜 242 107 0.5 1.0 0.990 185 乙硫磷 385 171 1.0 5.0 1.000 199 乙菌定 210 98 50.0 45.0 0.990 140 唑啶草 287 121 7.0 10.0 0.974 161 灭线磷 243 173 2.0 2.0 0.987 215 乙嘧硫磷 293 125 0.7 5.0 0.999 265 噁唑菌酮 331 195 5.0 5.0 *** 238 苯线磷 304 217 1.0 0.5 0.989 234 氯苯嘧啶醇 331 81 5.0 6.0 0.984 268 喹螨醚 307 57 1.0 5.0 0.999 161 腈苯唑 337 125 0.5 2.0 1.000 70 甲氟酰胺 202 109 5.0 2.0 0.999 83 环酰菌胺 302 97 3.0 9.0 1.000 55 仲丁威 208 95 1.0 1.0 1.000 152 恶唑禾草灵 362 288 0.6 2.0 0.999 244 苯氧威 302 88 1.0 1.0 0.999 116 拌种咯 237 202 1.0 10.0 0.998 166 甲氰菊酯 350 125 50.0 5.0 0.967 97 丁苯吗啉 304 147 10.0 10.0 1.000 130 7
倍硫磷 1 279 247 5.0 9.0 0.998 169 倍硫磷 2 279 169 5.0 10.0 0.999 247 非草隆 165 72 1.0 2.0 0.999 120 氟虫腈 437 263 10.0 50.0 0.994 368 麦草氟异丙酯 364 105 5.0 10.0 0.974 304 麦草氟甲酯 336 105 5.0 9.0 0.986 304 啶嘧磺隆 408 182 8.0 5.0 0.898 301 吡氟禾草灵 384 282 1.0 0.5 0.991 328 氟噻草胺 364 152 0.5 1.0 0.991 194 氟虫脲 489 158 9.0 5.0 0.990 141 咯菌腈 229 158 5.0 10.0 0.987 185 伏草隆 233 72 2.0 1.0 0.988 160 乙羧氟草醚 344 223 25.0 10.0 0.999 300 氟草烟 255 209 10.0 5.0 0.997 181 呋草酮 334 247 0.5 0.4 0.996 303 氟硅唑 316 247 0.1 0.1 0.991 165 粉唑醇 302 70 1.0 1.0 0.998 123 灭菌丹 260 130 5.0 50.0 *** 232 地虫磷 247 109 1.0 5.0 *** 137 伐虫脒 222 165 10.0 9.0 0.995 120 麦穗宁 185 157 1.1 1.0 1.000 156 呋线威 383 195 0.5 0.1 0.991 252 8
氟吡甲禾灵 376 316 1.0 5.0 1.000 288 蚜螨磷 251 127 2.0 1.0 0.999 125 己唑醇 314 70 1.0 0.6 0.993 159 氟铃脲 461 158 5.0 10.0 0.984 141 环嗪酮 253 171 0.5 1.0 0.994 71 噻螨酮 353 168 2.0 1.0 0.996 228 羟基莠去津 198 156 4.0 4.0 0.998 86 抑霉唑 297 159 10.0 10.0 0.850 255 咪唑烟酸 262 217 1.0 1.0 0.996 234 咪唑喹啉酸 312 199 0.6 1.0 0.998 267 吡虫啉 256 175 5.0 1.0 0.993 209 茚虫威 528 249 5.0 1.0 0.997 293 碘苯腈 372 118 30.0 10.0 0.998 245 咪唑霉 330 245 10.0 30.0 0.999 288 缬霉威 321 119 1.0 1.0 0.997 203 2- 甲硫基 -4- 叔丁基氨基 -6-254 198 1.0 1.0 0.999 环丙基氨基 -S- 三嗪 156 2- 甲硫基 -4- 叔丁基氨基 -6-214 158 5.0 4.0 1.000 环丙基氨基 -S- 三嗪代谢物 110 氯唑磷 314 120 1.0 0.5 0.991 162 异丙胺磷 346 217 3.0 0.5 0.996 245 异丙隆 207 72 1.0 1.0 0.999 165 异噁唑草酮 360 251 1.0 20.0 1.000 69 9
醚菌酯 314 206 5.0 5.0 0.997 267 环草定 235 153 5.0 25.0 0.998 136 利谷隆 249 160 1.0 5.0 1.000 182 氯芬奴隆 511 158 5.0 10.0 0.995 141 马拉氧磷 315 99 1.0 0.5 0.996 127 马拉硫磷 331 99 0.8 2.0 0.998 127 甲苯咪唑 296 264 0.6 0.6 0.990 105 灭蚜磷 330 199 2.0 1.0 0.989 227 嘧菌胺 224 77 1.0 1.0 0.997 106 甲霜灵 280 192 1.0 2.0 0.994 220 苯嗪草酮 203 175 1.0 1.0 1.000 104 吡草胺 278 134 1.0 1.0 0.986 210 叶菌唑 320 70 1.0 0.5 0.979 125 噻唑隆 222 165 0.5 1.0 0.999 150 甲胺磷 142 94 1.0 1.0 0.999 125 呋菌胺 230 137 0.5 0.4 1.000 111 杀扑磷 303 85 1.0 0.5 0.987 145 灭虫威 226 121 0.9 1.0 0.996 169 灭多虫 163 88 1.0 1.0 0.990 106 秀谷隆 259 170 5.0 10.0 0.999 148 甲氧毒草安 284 252 0.5 1.0 0.988 176 速灭威 166 109 3.0 1.0 1.000 91 10
磺草唑胺 418 175 5.0 1.0 0.993 354 甲氧隆 229 72 0.5 1.0 0.996 156 赛克津 215 187 2.0 0.5 0.999 131 甲磺隆 382 167 1.0 0.5 0.996 141 草达灭 188 126 2.0 5.0 0.999 83 绿谷隆 215 126 1.0 2.0 1.000 148 灭草隆 199 72 1.0 5.0 0.995 126 腈菌唑 289 70 0.5 1.0 0.997 125 二溴磷 379 127 10.0 10.0 0.997 297 敌草胺 272 129 1.0 1.0 1.000 171 草不隆 275 57 1.0 0.5 0.989 88 烟嘧磺隆 411 182 1.0 0.6 0.937 213 氟苯嘧啶醇 315 81 1.0 1.0 *** 252 呋酰胺 282 160 0.5 1.0 0.981 254 氧化乐果 214 125 1.1 1.0 1.000 183 恶霜灵 279 219 5.3 5.0 0.989 102 草氨酰 242 72 45.0 50.0 0.990 121 砜吸磷 263 169 1.1 1.0 0.990 109 多效唑 294 70 0.5 2.0 0.998 165 甲基对氧磷 248 90 3.0 5.0 0.994 202 乙基对硫磷 292 236 5.0 10.0 0.999 264 甲基对硫磷 264 125 10.0 10.0 0.986 232 11
戊菌唑 284 70 0.5 1.0 0.986 159 戊菌隆 329 125 0.5 5.0 0.987 218 二甲戊乐灵 282 212 5.0 2.0 0.990 194 苯敌草 301 136 1.0 1.0 0.999 168 稻丰散 321 163 5.0 9.0 0.975 247 甲拌磷 261 75 25.0 8.0 0.999 199 伏杀磷 368 182 5.0 1.0 1.000 322 亚胺硫磷 318 160 5.0 7.0 0.988 133 肟硫磷 299 77 5.0 5.0 0.998 129 氟吡酰草胺 377 238 1.0 1.0 0.999 359 啶氧菌酯 368 145 0.5 0.5 0.991 205 抗蚜威 239 72 2.0 8.0 0.999 182 乙基虫螨磷 334 198 0.1 0.1 0.995 182 甲基虫螨磷 306 164 0.1 0.1 0.934 108 甲基氟嘧磺隆 469 254 1.0 1.0 0.980 199 咪鲜胺 376 308 5.0 10.0 0.999 266 腐霉利 284 256 30.0 8.0 0.998 67 丙溴磷 373 303 5.0 5.0 1.000 345 猛杀威 208 109 1.0 1.0 0.998 151 扑灭通 226 142 3.0 3.0 1.000 184 扑草净 242 158 1.0 5.0 0.999 200 扑草胺 212 170 1.0 1.0 0.998 152 12
霜霉威 189 102 8.7 9.0 0.999 144 敌稗 218 127 1.0 4.0 0.963 162 扑灭津 230 146 1.0 0.5 1.000 188 巴胺磷 282 138 5.0 0.5 0.972 156 苯胺灵 180 120 5.0 2.0 1.000 138 戊唑醇 -1 342 159 0.5 1.0 0.997 69 戊唑醇 -2 342 159 0.5 1.0 0.995 69 残杀威 210 111 0.5 0.5 0.999 168 拿草特 256 190 3.0 1.0 0.998 173 苄草丹 252 91 0.8 1.0 1.000 128 氟磺隆 420 141 1.0 1.0 0.989 167 吡蚜酮 218 105 30.0 50.0 0.980 79 吡唑醚菌酯 388 163 0.5 0.1 0.976 194 定菌膦 374 222 0.5 0.1 0.996 194 哒螨灵 365 147 0.1 0.5 0.997 309 嘧霉胺 200 107 8.0 5.0 0.999 183 吡丙醚 322 96 0.6 0.5 0.999 227 喹硫磷 299 147 1.0 1.0 0.999 163 氯甲喹啉酸 222 204 4.7 5.0 0.999 176 灭螨猛 235 207 5.0 10.0 0.994 163 喹氧灵 308 197 1.0 0.5 0.998 272 13
喹禾灵 373 299 0.5 5.0 1.000 271 玉嘧磺隆 432 182 5.0 1.0 0.810 325 鱼藤酮 395 213 1.0 1.0 0.999 192 西玛津 202 132 1.0 1.0 0.998 124 西草净 214 124 10.0 10.0 0.998 144 螺甲螨酯 371 273 7.0 10.0 0.968 255 磺酰磺隆 471 211 1.0 1.0 1.000 261 硫特普 323 171 1.0 5.0 0.999 143 硫灭克磷 323 219 30.0 30.0 0.990 247 戊唑醇 308 70 1.0 0.5 0.983 151 虫酰肼 353 133 0.5 0.1 0.983 297 牧草胺 234 91 0.5 0.5 0.987 192 特丁噻草隆 229 172 0.9 1.0 1.000 116 伏虫隆 381 158 10.0 9.0 0.981 141 特丁磷 289 57 12.0 10.0 0.976 103 特丁通 226 170 5.0 5.0 1.000 114 特丁津 230 174 0.1 0.5 0.999 132 特丁净 242 186 5.0 2.0 1.000 71 杀虫畏 365 127 1.0 5.0 0.999 239 噻苯达唑 202 175 6.0 1.0 0.999 131 噻虫啉 253 126 3.0 1.0 0.998 186 噻虫嗪 292 211 5.0 8.0 0.990 181 14
噻吩磺隆 388 167 0.9 1.0 0.998 141 杀虫环 182 137 54.0 54.0 0.986 73 硫双威 355 88 5.0 1.0 0.980 163 久效威 241 184 5.0 10.0 0.987 57 甲基硫菌灵 343 151 10.0 1.0 0.999 311 甲基立枯磷 301 125 6.0 10.0 0.999 269 甲苯氟磺胺 347 137 10.0 1.0 0.999 238 三唑酮 294 69 1.0 1.0 0.998 197 三唑醇 296 70 10.0 1.0 0.976 227 醚苯磺隆 402 167 2.0 0.5 0.991 141 三唑磷 314 162 0.7 1.0 0.984 286 苯磺隆 396 155 100.0 10.0 0.981 181 敌百虫 257 109 10.0 10.0 0.997 221 三氯卡班 315 162 1.0 1.0 0.998 128 三环唑 190 163 1.0 1.0 0.998 136 草达津 230 132 2.0 0.8 1.000 202 肟菌酯 409 186 0.5 0.5 0.997 206 氟菌唑 346 278 4.0 1.0 0.974 73 杀铃脲 359 156 4.0 1.0 0.999 139 氟胺磺隆 493 264 4.0 1.0 0.990 238 蚜灭多 288 146 0.8 2.0 0.998 118 15
表 1B. SB C18 色谱柱检测的灵敏度低和色谱分离度差的化合物 溶剂检测限 母离子 子离子 (pg) 原因 乙草胺 270 148 10 在 SB C18 色谱柱上分离度差 224 苯并噻二唑 211 136 50 超出窗口 91 草不绿 270 162 10 在 SB C18 色谱柱上分离度差 238 涕灭砜威 223 149 50 干扰 177 敌菌灵 275 153 1 超出窗口 178 乙基谷硫磷 346 160 1 超出窗口 132 丙硫克百威 411 195 1.0 超出窗口 252 溴苯腈 278 199 >100 灵敏度低 223 绿麦隆 213 72 20 超出窗口 140 乙氧喹 218 174 >100 色谱分离度差 148 苯锈啶 274 147 100 色谱分离度差 57 伊曲康唑 705 450 *** 无定性离子 404 甲硫威砜 258 122 *** 无定性离子 217 尼古丁 163 130 *** 离子化效率低 132 大灭虫 300 129 100 超出窗口 153 克螨特 373 81 >100 灵敏度低 Na 57 啶斑肟 295 93 >100 灵敏度低 263 多杀菌素 A 732.4 142 20 未从 SB C18 柱流出 99 多杀菌素 D 746.4 558 100 未从 SB C18 柱流出 142 螺环菌胺 298 144 >100 标准品分解 100 特草定 217 161 >100 灵敏度低 144 16
MRM transitions 的驻留时间为 10 ms 记录了色谱运行中八个不同的时间段, 每个时间段包含大约 50 种农药 为了监测恰好在时间段交界处流出的化合物, 有必要交叠此时流出的农药 图 1 为浓度均为 100 ppb 的 301 种化合物标准品经色谱分离的色谱图 根据每个质子化的分子及其 MRM transitions 子离子, 将每个目标分析物的萃取离子色谱图进行重叠 蔬菜基质样品的分析应用 为确证方法是否可适用于实际样品的分析, 对两个不同基质 ( 青椒和西红柿 ) 匹配的标准样品进行了分析, 并与相应纯溶剂标准 样品比较, 采用六个样品浓度 (0.1 0.5 1.0 10.0 50.0 和 100 ng/ml 或 ppb) 图 2 展示了青椒基质中二嗪农的标准曲线 表 1A 列出了青椒基质条件下分析的 r 2 值, 还有纯溶剂和西红柿基质的相关数据 各化合物在超过两个数量级的浓度范围内线性关系良好, 并且检测灵敏度高, 大多数化合物的线性相关系数 r 2 大于 0.99, 其中 150 个化合物的检测限在 1-10 pg 范围内, 而另 140 个化合物的检测限在 10-100 pg 范围内 有 11 个化合物离子化效果很差或色谱分离不佳, 未能达到 0.010 mg/kg 的检测水平 这些化合物见表 1B 图 1. 八个时间段下浓度均为 100 ppb 的 301 种农药标准品子离子的色谱图 (MRM) 17
10 7 2 1.75 1.50 1.25 1 0.75 0.50 0.25 0 Diazinon - 6 Levels, 6 Levels Used, 6 Points, 6 Points Used, 0 QCs y = 208335.0516 * x _ 152717.0728 2 R = 0.99956076 _ 10 _ 5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105 110 115 ng/ml 图 2. 未经任何处理的青椒中二嗪农在 0.1-100 ng/ml(ppb) 范围内六 MRMR 个浓度点的校准曲线 图 3 展示了青椒提取物中二嗪农的定性离子比率, 农药混合物加标浓度 0.010 µg/g( 柱上 100 pg) m/z 169 的离子作为定量离子,m/z 153 的离子作为定性离子, 范围定为离子比率的 ±20% 如图 3 的两个离子曲线所示, 由于 MRM transitions 的选择性和仪器的检测灵敏度, 在这种复杂基质中, 二嗪农很容易被鉴定 大体上,301 种农药的检测限符合当前欧盟规定的相应最大残留限量要求 而且, 使用 1.8 µm 填料色谱柱可以得到 5-10 s 峰宽的尖锐色谱峰 因此, 使用 10 ms 快速的驻留时间对于获得表 1A 所列的定量结果非常重要 最后, 定量离子仪器的五次重复性分析的相对标准偏差 (RSD) 是 6%( 中间 ) 或者 6.7%( 平均 ) 这些数据在 0.1 mg/kg 浓度水平下得到 10 6 1.8 1.6 305 169.0, 153.0 Ratio=52.2 10 5 5 4.5 169.0 1.4 4 1.2 3.5 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0 3 2.5 2 1.5 1 153.0 0.5 24.4 24.6 24.8 25 25.2 25.4 min 150 175 200 225 250 275 300 325 m/z 图 3. 展示了青椒基质中二嗪农定性离子和定量离子的离子比率 18
结论 本研究的结果显示,Agilent 6410 三重四极杆是一种耐用性强 灵敏度高并且重现性好的仪器, 可用于食物如蔬菜提取物中农药的高通量研究 50% 的化合物仪器的检测限在 1-10 pg 范围内, 90% 的化合物在 100 pg 以下 这些检测限包括对于化合物鉴定非常重要的定量离子和定性离子 由于每个时间段包含 100 次 transitions, 所以这些检测限使检测非常灵敏, 足够每个时间段分析约 30-40 个化合物 ( 当方法具有良好重现性时, 每个时间段最少重叠 5-10 个化合物 ) 采用 Agilent 6410 三重四极杆质谱和两种子离子确证, 进样体积 10 µl 时, 对于至少 90% 的农药, 检测限一可达到 0.010 mg/kg (ppm) 该最大残留限量是婴儿食品限量 禁用农药限量以及环境与食品分析科学家使用新购液相色谱串联质谱联用系统进行实际食品基质样品检测的一般要求 参考文献 1. Imma Ferrer, E. M. Thurman, Y. Fang, P. Zavitsanos, J. A. Zweigenbaum, 采用液相色谱 / 三重串联四极杆质谱技术进行食品中 100 种农药的多残留分析, 安捷伦科技出版号 5989-5469CHCN,2006 年 8 月 2. M. Anastassiades, S. J. Lehotay, D. Stajnbaher, and F. J. Schenck, J. AOAC International, 86 (2003) 412 431. 更多信息 如需了解更多有关我们产品和服务的信息, 请访问我们的网站 : www.agilent.com/chem/cn 19
www.agilent.com/chem/cn 安捷伦对本材料可能存在的错误, 或由于提供 展示或使用本资料所造成的间接损失不承担任何责任 本文中的信息 说明及技术指标如有变更, 恕不另行通知 安捷伦科技 ( 中国 ) 有限公司,2008 2008 年 11 月 5 日, 中国印刷 5989-8614CHCN