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我国食品中大肠埃希菌 )E 耐药及,-I 分子分型特征分析!!! 白莉 " 等!%<!!M O! V :)E pdmov OV :)E p6e O>)-*)- /DO!^ O6/ )E V! V O 1DO[M> /DO!^M ^MO DMV ^ODOV" :)E $ OMVO+/I1:)E% DOD OV O!O O^OO^[O!OOV OV VO^ V O^!VO O!O>? )/ 6/ )E# O^O# MVV D# VMO#!M O 大肠埃希菌 $ 6/ ">% 通常存在 于人类和动物的肠道内 " 但是通过粪便或是动物屠宰过程的污染 " 也常常存在于水 土壤 食物中 ))* 产志贺毒素大肠埃希菌 $ D O VMO 6/ "+/I1% 是一类携带了前噬菌体编码 一种或两种志贺毒素基因 $ 61D% 的食源性致病菌 )* 自 )? 年以来 " 产志贺毒素大肠埃希菌 )Ep6E 相 继在美国 英国 加拿大 日本等国家引起暴发和流行 )* " 可导致患者出现腹泻 " 出血性结肠炎 " 其中有 g eeg 的病人会出现血栓性血小板减少性紫癜及 溶血性尿毒综合症 " 严重者死亡 " 产志贺毒素大肠 埃希菌引发的食源性疾病已成为严重的公共卫生 安全问题 )<* 对于大肠埃希菌 )E p6e 耐药特征 的研究文章显示 " 该菌株耐药率较低 " 对多种抗生 )% 素敏感 " 多重耐药菌株较为少见 i* 一直以来 " 对于 +/I1 菌株导致的感染 " 是否使用抗生素一直是有争议的 )** )E* 年 "ZO 等 发现婴幼儿在感染 +/I1)E p6e 后 " 某些情况下 " 抗生素的治疗不能改善其引起的感染状况 " 且还会 加重引发溶血性尿毒综合症 $ 6X+% 的风险 因为 抗生素裂解了细菌的细胞膜 " 加速毒素的释放 但 也有研究发现 " 某些抗生素 " 如果是在感染早期使用 " 可能会降低疾病发展成为 6X+ 的风险 )?* 对 )) 年德国产志贺毒素暴发事件溶血性尿毒综合 症病人分离的 )%p6% 菌株 " 添加某种抗生素进行 培养 " 就没有出现志贺毒素合成和释放的增加 )* 但近年来 " 大肠埃希菌 )E 的耐药性一直在增加 " 可能是由于某类抗生素在养殖业的预防性用药和 )"? 作为生长剂的使用 i))* 在养殖业 " 抗生素不仅作为预防性治疗也作为一种促生长剂 " 必然对经济动物 肠道内的菌株造成一定的耐药选择性压力 ))* " 经济 型动物在饲养 生产 加工过程中 " 动物的排泄物等物质势必携带耐药菌株 可移动的耐药基因 ))<* " 对外在的环境也造成耐药的选择性压力 ))%* )) 年德国暴 发的 +/I1)%p6% 疫情 " 该菌株联合携带了产志贺 毒素大肠埃希菌的基因 $ 61D-"/"@ * "@ ))< % 和聚 集性黏附大肠埃希菌的基因 $ /<<"/<<E"6=1,"" //%" 并表现出以上基因赋予的特性 " 同时该菌株具有产生! 内酰胺酶的基因 " 并表现出对多种青霉素类和头孢类药物耐药 ))* 经济型动物 " 特别是牛羊等 牲畜 " 是大肠埃希菌 )E$ 包括 +/I1)E% 的天然宿主 当动物生存的环境使用抗生素时 " 它必然也就成为了耐药细菌的耐药库 本研究首次对我国食品来源的的 )) 株大肠埃希菌 )E 的耐药性和分子分型进行研究 " 目的是更好的了解不同食品来源菌株的耐药性及分布特征 ) 材料和方法 ):) 材料 ):):) 菌株来源沙门菌试验用 )) 株大肠埃希菌 )E 来自! ) 年国家污染物监测网 " 本实验室使用生化反应 血清方法和,1" 方法完成 )) 株菌鉴定 " 明确毒力基因携带情况 ))** 根据不同的血清和毒力基因携带情况 " 在 )) 株大肠埃希菌 )E 中 "*E 株为大肠埃希菌 )Ep6E" 其中有 <E 株携带了 61D 基因 " %< 株为 )E 非 6E 的大肠埃希菌 菌株的分布情况见表 ) 大肠埃希菌 )Ep6E I8<<" 大肠埃希菌 $ 3)*% " 大肠埃希菌 $ $/11 % " 脉冲场凝胶电泳 $ MVV D",-I% 使用的相对分子量标准菌株为 #/:3=/ ^OVM 6?) 等质控菌株由本室保存 表 ) 各种不同类别的食品中 )Ep6E 和 )E 非 6E 数量 /^)OM>)Ep6E OV >)EpDMOV V! V 样品种类 菌株类型 生羊肉 生猪肉 生牛肉 生鸡肉! 其他 合计 )Ep6E? * )< % )* *E )E 非 6E )% )* * %< 注! 表示熟肉制品 @ 凉拌菜 @ 豆制品等 ):): 主要仪器与试剂恒温培养箱 $ 美国 <3% 涡旋振荡器 $ 德国 GF$% 微量紫外分光光度计 #O #) + D!$ 美国 /D!-D% 细菌多点接种仪 ^3rMmR 浊度计 $ 法国梅里埃 % 恒温振荡器 16I-! 型脉冲场凝胶电泳仪 I81 ]" 凝胶成像系统 $ 美国伯乐 % 纯水仪 电子天平 小型高速离心机 脑心浸液肉汤和脑心浸液琼脂均购于北京陆桥技术有限公司 "36! 肉汤 $ 美国 c% " 试验用抗生素氯霉素 头孢噻肟 头孢西丁 四环素 庆大霉

!%%! 16G#I+IYX"#$8--6\GI#I )% 年第 * 卷第 期 素 磺胺甲恶唑 复方新诺明 萘碇酸 环丙沙星 氨苄西林 头孢吡肟 头孢曲松 阿米卡星 卡那霉素均购自美国 +!" 3M6OO 琼脂 $ 英国 V% " 氯化钠 $ 北京化工厂 % "/^/61 均购自美国,!" 蛋白酶 F$ 德国 3R% " 限制性内切酶?/ $ 美国 #[IOOV c8^% " 月桂酰肌氨酸钠 十二烷基磺酸钠 乙二胺四乙酸二钠 比浊管 +F! V 琼脂糖均购自美国 c ): 方法 )::) 菌株活化将于 ie f 冰箱中冻存的 )) 株大肠埃希菌 )E 和质控菌株划线接种于脑心浸液琼脂 $ c6$% 上 "<E f 培养过夜 " 次日挑取单菌落再次接种于 c6$ 上 "<E f 培养过夜 ):: 药敏试验菌悬液的制备和试验分别取 e< 个第二次 c6$ 上传代的新鲜菌落 " 于 <! 无菌 :?g 生理盐水比浊管中 " 用微量紫外分光光度计调整菌悬液至 : 麦氏单位 " 取上述液体 ) %" 加入到 % 无菌 :?g 生理盐水中 " 充分混匀 用细菌多点接种仪分别对不同的抗生素进行接种 " 接种完毕后于 <E f" 培养 )* e D" 观察结果 )::< 抗生素最低抑菌浓度的测定抗生素最低抑菌浓度 $ 3G1% 参考美国临床实验室标准化委员会 $ 18+G% ) 版 ))E* " 使用琼脂稀释法测定肠杆菌科 )% 种抗生素 $ 氯霉素 头孢噻肟 头孢西丁 四环素 庆大霉素 磺胺甲恶唑 复方新诺明 萘碇酸 环丙沙星 氨苄西林 头孢吡肟 " 头孢曲松 阿米卡星 卡那霉素 % 的 3G1 值 " 并参照 18+G 判断 3G1 结果是否为耐药或敏感 )::% 脉冲场凝胶电泳分析参照美国 11,M# 的统一,-I 方法 ))?* " 脉冲场凝胶电泳分型所用标准菌株为 #>?/=38=9 血清型全球参考菌株 6?) 电泳图像分析和结果聚类分析 ",-I 图像应用 com!%: 数据库软件进行处理 " 识别图像条带 在图像识别过程中 " 在 3R 最小片段外的试验菌株条带因为不能为 3R 校准而被舍去 图像通过统一的 3R 进行校准 " 标定条带位置 " 必要时进行人工校正 聚类方法和参数选择 聚类图类型选择 X,3$$ MO[DV M!DV MOD!% 方法 " 条带位置差异容许度选择 ):g" 优化值为 :g"cov ^V @ 方法计算相似性系数 在限制性内切酶的作用下 " 不同的菌株会呈现不同的条带数和片段大小 " 按照,M# 的命名原则 " 对每一种不同的带型进行命名 结果 :))) 株大肠埃希菌 )E 的药敏结果在受试的 )% 种抗生素中 " 对所有抗生素都敏感的菌株有 *E 株菌 其余的 %< 株菌至少对一种抗生素有抗性 耐药率最多的前四种抗生素依次是四环素 $<:g"<< @))%" 磺胺甲恶唑 $:)g"< @))%" 萘啶酸 $*:%g" @))%" 复方新诺明 $<:*g"* @ ))%" 其次为氨苄西林 氯霉素 庆大霉素 环丙沙星 卡那霉素和头孢西丁 对阿米卡星 头孢吡肟 " 头孢曲松 头孢噻肟耐药株各 ) 株 " 药敏结果见表 抗生素种类 表 食品中分离的 )) 株大肠埃希菌 )E 的药敏结果 $ g% /^$O!^O DO )) >)E! V 耐药率 @g 生羊肉 $ 3 h%% 生猪肉 $ 3 h% 生牛肉 $ 3 h)?% 生禽肉 $ 3 h)% 其他 $ 3 h)?% 合计 $ 3 h))% 阿米卡星 :%$) @%% :$ @% :$ @)?% :$) @)% :$ @)?% :$) @))% 氨苄西林 )*:E$E @%% :$)) @% )):)$ @)?% :$ @)% :*$) @)?% <:*$* @))% 氯霉素 )):$ @%% )?:$% @% :$ @)?% <:$< @)% :$ @)?% ):$) @))% 环丙沙星 %:?$ @%% %:$) @% :$ @)?% <:$< @)% :$ @)?% :$* @))% 头孢曲松 :$ @%% %:$) @% :$ @)?% :$ @)% :$ @)?% :$) @))% 头孢噻肟 :$ @%% %:$) @% :$ @)?% :$ @)% :$ @)?% :$) @))% 头孢吡肟 :$ @%% %:$) @% :$ @)?% :$ @)% :$ @)?% :$) @))% 头孢西丁 :$ @%% %:$) @% :$ @)?% ):$) @)% :*$) @)?% :E$< @))% 庆大霉素 E:)$< @%% :)$ @% :$ @)?% :$) @)% :*$) @)?% *:<$E @))% 卡那霉素 %:?$ @%% :)$ @% :$ @)?% :$ @)% :$ @)?% <:*$% @))% 萘啶酸 ):$? @%% *<:*$)% @% )):)$ @)?% :$ @)% :$ @)?% *:%$ @))% 磺胺甲恶唑 ):%$ @%% %:$) @% )*:E$< @)?% %:$% @)% :$% @)?% :)$< @))% 复方新诺明 ):$? @%% :$)) @% )*:E$< @)?% %:$% @)% :$ @)?% <:*$* @))% 四环素?:*$) @%% *<:*$)% @% )):)$ @)?% %:$% @)% :*$) @)?% <:$<< @))% 注 抗生素对应的耐药临界点 $ %@!% 阿米卡星 $*% % # 氨苄西林 $< % # 氯霉素 $< % # 环丙沙星 $ % % # 头孢曲松 $ < % # 头孢噻肟 $ % % # 头孢吡肟 $<% # 头孢西丁 $%% # 庆大霉素 $)*% # 卡那霉素 $*%% # 萘啶酸 $<% # 磺胺甲恶唑 $)% # 复方新诺明 $% @E*% # 四环素 $)*%

我国食品中大肠埃希菌 )E 耐药及,-I分子分型特征分析!!!白莉"等!%! :大肠埃 希 菌 )E p6e 和 大 肠 埃 希 菌 )E 非 6E 药敏结果的比较及耐药谱 *E 株大肠埃希菌 )E p6e 和 %< 株大肠埃希菌 )E 非 6E 分 别 有 株 菌 和 <? 株 菌 对 所 测 试 的 )% 种抗生素有不同程度的耐药 株耐药的大肠 埃 *E % "磺 胺 甲 恶 希菌 )Ep6E仅对萘啶 酸 $):g") @ *E% "对 其 余 抗 生 素 均 敏 感 但 大 唑耐药$*:g"% @ 肠埃希菌 )E 非 6E 对 这 几 种 抗 生 素 的 耐 药 率 明 显高于大肠 埃希菌 )E p6e 菌 株"对 上述 种 抗 生 素的 耐 药 率 均 有 统 计 学 差 异 $ 萘 啶 酸 " h%:*)"!9:#磺胺 甲 恶 唑 " h%%:%)*"!9: % " 药 敏 结果比较见图 ) 图 产志贺毒素大肠埃希菌 )Ep6E的耐药情况 - M, VM D O > )Ep6E O :%,-I分析结果,-I分析结 果 见 图 <")) 株 菌 经? /内切 OM! 软 件 酶消化后制胶 进行,-I分型"经 c 聚类 分 析 发 现" 每 株 菌 的 条 带 数 在 )* e< 之 间" )) 菌株共分为 )) 种带型"带 型间 差别 很 大"说 明 食品来源的菌株在基因水平上具有多态性 有 个 O O! 带型 有 相 同 的 条 带" 分 别 是 O * O + O,"相 同带 型 的 菌 株 都 具有相同的耐药 谱,-I将 菌 株 分 为 两 个 主 要 的 图 )大肠埃希菌 )Ep6E和大肠埃希菌 )E 非 6E 对 )% 种抗生素耐药的比较 - M )1! O O )% O ^ )Ep6E V! V ^ [ O > 在 %< 株耐药 菌 株 中" 一 共 有 % 个 耐 药 谱 其 M " M G $ 相 似 度 *):<g% 和 M G G $相似 M G全 是 )E p6e 菌 株# M G G 度?:<g% 全 是 )E 非 6E 菌 株" 耐 药 菌 株 大 多 集 中 在 M G G <讨论 中大肠 埃 希 菌 )E 非 6E 有 < 种 耐 药 谱"大 肠 埃 人类经济型动 物 及 食 品 之 间 存 在 一 个 相 互 紧 希菌 )Ep6E有 种耐药谱 其中耐 < 种不同类别 密联系的微 生 态 环 境" 养 殖 业 大 量 使 用 抗 生 素" 会 抗生素及其以上的多重耐药的共 < 株"且都为大 肠 使动物体内的微生 物 长 期 存 在 耐 药 筛 选 压 力"必 然 埃希菌 )E 非 6E 菌株"大肠埃希菌 )Ep6E没有 会产生耐 药 菌 株 这 些 菌 株 又 可 以 通 过 食 物 链 定 多重耐药菌株"前者的多重耐药率明显高于后者 值于人体的 肠 道" 对 社 区 人 群 的 健 康 产 生 威 胁 ) ) * 在 %< 株耐药 菌 株 中" 一 共 有 % 个 耐 药 谱 耐 研究 食 品 来 源 大 肠 埃 希 菌 )E 菌 株 的 耐 药 情 况" 两种以上抗生素的菌株有 <% 株"耐 < 种以上抗生素 可以为 我 们 探 索 人 员 社 区 感 染 提 供 一 定 的 线 索 的多重耐药菌株 有 < 株 最 常 见 的 五 种 耐 药 谱 依 本研究中 <:)g 菌 株 对 至 少 一 种 测 试 的 抗 生 素 耐 #$8 +3] +]/ /I/$ * % " $3, 次是 +3]$ * % " $3, D V 等 ) * * 对 <*) 株 $ ) 株 产 志 药 这与先前 + 168 #$8 +3] +]/ /I/$ % % " $3, +3] +]/ /I/ 贺毒素大肠埃希菌 )Ep6E和 )) 株不产志贺毒素 $%% "/I/$%% 多重耐药菌株最多可同时对 ) 种抗 的 大 肠 埃 希 菌 )E % 进 行 药 敏 检 测 并 发 现 约 有 168 1G, 1" 1/] 生 素 耐 药" 其 耐 药 谱 为 $3, %g的菌株对至少一种测试的抗生素耐药的结果相 -I, I# +3] F$# #$8 +]/ /I/ 近 本研究 中 大 肠 埃 希 菌 )E 菌 株 对 四 环 素" 复 :<产志贺毒素大肠埃希菌 )Ep6E的耐药情况 方新诺明"萘啶酸"氨 苄 西 林 耐 药 率 较 高"这 与 先 前 <E 株携带了志贺毒素基因的大肠埃希菌 )Ep 6E 报道的结果大 体 一 致 )? " * "但 是 萘 啶 酸 的 耐 药 率 本 研究高于文献 报 道 )?") * )@ <E%有耐药 对 种抗生素的耐药率明显低于其他 酮类药物使 用 有 关 ) ) * 不携带志贺毒素的大肠埃希菌 )E"两种抗生素均有 食源性致病菌株对 喹 诺 酮 类 耐 药"其 耐 药 率 远 高 于 Eg") @ <E%萘 碇 酸 $: Eg" 菌株仅 对 磺 胺 甲 恶 唑 $:?E"!9: #萘啶酸 统计学差异$磺胺甲恶唑 " h): %<)"!9: % <E 株携带志贺毒素的大肠埃希 " h)*: 6E没有多重耐药菌株"结果见图 菌 )Ep "这 可 能 与 我 国 养 殖 业 喹 诺 在我国食品中分离的其他 欧美发达国家的报道屡见不鲜 ) ) * 从耐药谱看"%< 株菌共 有 % 个 耐 药 谱"这 与 本 ^ 等 ) * 的 研 次研究菌 株 来 源 的 多 样 性 有 关 o

!%*! 16G #I+IY X"#$8--6\G I#I 图 <)) 株大肠埃希菌 )E 食品分离株带型聚类图 - M <,-I O )) O > )E V! V> )% 年第 * 卷第 期

我国食品中大肠埃希菌 )E 耐药及,-I 分子分型特征分析!!! 白莉 " 等!%E! 究显示大肠埃希菌 )E 耐药谱的多样性与菌株噬 菌体型有关 细菌在某种生存环境压力下 " 带有耐 药机制的遗传物质 $ 质粒 噬菌体 插入序列 整合 子等 % 通过水平传播方式 " 逐渐向细菌传递和积累 的结果 ))* 超广谱! 内酰胺酶 $ I+c8% 大肠埃希 菌在世界范围内已有大量报道 ))* " 且国内外已有 I+c8+/I1 菌株的报道 )< i%* 特别是 )) 年德 国暴发的 +/I1)% p6%" 具有产生! 内酰胺酶的基因 " 并表现为对多种青霉素类和头孢类药物耐 药 " 警示人类关注这类新型超级耐药的高致病性菌 株的存在 ))* )< 年 " 丹麦首次报道了从人类分 离到 I+c8+/I1)E p6e )* 但是本次研究中 " 我们没有进行 I+c8 表型和基因型的研究 " 这也是 未来的研究中需要完善的地方,-I 分子分型显示食品来源的菌株在基因水平上具有多态性 " 且可以将 )E p6e 菌株和 )E 非 6E 菌株很好的分为两个群 " 可见两簇在进化的 过程中来源于不同的克隆群 " 这与先前研究已经证实 )Ep6E 是从 p6e 进化而来的结果是一致 的 )** 通过本研究,-I 的方法也可以为分离菌 株的预警提供有效的分子分型比对 本研究对我国食品分离的 )E 菌株进行药敏 检测 " 发现抗生素的使用 " 包括四环素类 磺胺类 喹诺酮类及青霉素类 " 对大肠埃希菌 )E 菌株产 生了选择性压力 美国相关研究显示生猪肉分离 的大肠埃希菌 )E 菌株的高耐药率与生猪可批准 使用的兽药有一定的相关性 " 养殖过程兽药的使用 可能会促进大肠埃希菌 )E 菌株新的耐药性出 现 )?* )E* mv 等报道动物来源的 )E 菌株与人来源的菌株在统计学上有显著差异 " 造成差异的 原因也是因为养殖过程中抗生素的使用 新出现 且广泛分布的耐药菌株必将对未来可能出现的 +/I1)E 疫情产生更加复杂的影响 我们应加强养殖环节和零售环节食源性致病菌 " 特别是大肠埃 希菌 )E$ 包括 +/I1)E% 菌株药敏特征的监测 " 探明食品与养殖环节菌株耐药的传播关系 " 并为国 家制定科学的抗生素用药提供依据 $ 志谢 感谢参与全国食源性疾病监测的同志 % 参考文献 ) ) * +DM!O + /"-V!OO 61"OV +!"6>/DVIDD D VOMV DO ) Y* >1O GOM"E"%$?% ))> ) * #Y,"F Yc>DO6/ ) Y* >1O 3^"[")?"))$)% )%)> ) < * O,3"/M"m>/D V!OOMV ^ 6/ )E p6e" DOD!D>OV DV D!M!OV!) Y* >I V!"" ))")<*?> ) % * 3I#Y" o6$ +" 3," >$O^"O 6/ )Ep6E OV )E p#3 V! O!" V OV DM!O) Y* >YMO-V,O")?"*) $)) % )))))%> ) * OV Y1"6""1M + +">,O"O^ M ^OV V6/ )E p6e! OMVOMV^V) Y* >$ V OV IOO!O3^")"*E$%% )*))*E> ) * * +DV1 3" o6$ 1" ^" 1" >$O!^ O6/ )E V! DM!O"" [O"OV V ) Y* >$ V OV IOO!O3^" "*?$% E*?)> ) E * ZO1+"Y+"6^^ "8">/DR DD! M!OV! O^!O6/ )Ep6E OO) Y* >#[ IOOV YMO3VO" "<%$*% )<)<*> )? * o6$ + 6" ZD " I c 8" >GVOO OV DdO OO!VV O^O!O +DO VMO6/ ) Y* >$ V OV IOO!O3^")"*E$%% )?)*%> ) * 1OM " Z! "" ZR 3" > /D M OOOO^ OD^+D O! OD!D:)% p6%! D ))!O M^R) Y* >c313^")")$)% )*> ))* $ 1" 3O I" $OVM $" >,DM " MOV!OOOV O!^OO 61D- O O6/ V! jmoo!o) Y* > "D O 3^"")*$?%?)> )))* 3s O/" +!3" #[R c" >,!OMV O " OOV O!^O O6/ $ m/i1% V O coov!o! OV D VM) Y* >GOOO YMO-V 3^"E"))E$% )?))> ))* Z$# \" 16I# " 1XG +" > IOM!O OV DdO #/:3=/! DRO O co" 1DO) Y* >-V^O,DO OV ")%"))$% )*)<> ))<* 3OdY8>IOO!O MO ^ O^OV ^ O^OV!OO) Y* >IOO!O,MO" ")E$))%?<> ))%* /#"moyz"cr$mo 1>$jM!!OOO"!OOV!^OO!^O) Y*> /OVO IHIMO"))"*$*%E??%> ))* cd[r3"3oc"$ov3">1do D6/ O V [D O M^R D! M!OV!O!O"))!^MV)Y*>/D 8OGOM"))"))$%*E)*E*> ))** 白莉 " 刘秀梅 " 付萍 " 等 >!E 年中国食品中疑似 )E 大肠埃希菌的鉴定及毒素基因的检测 ) Y* > 卫生研究 ")" <$<% <<<<?> ))E* 18+G>3)+<,!OOVVO!^M ^ O#/[O/DV GO!O+M!O)+*>)<> ))?* "^I3" -3" M! "" >+OVVdO MV V D DM^ O6/ )E p6e" #/:3=/ OV #<=/,M#) Y* > -V^MO,DOH "*"<$)% *E>

16G #I+IY X"#$8--6\G I#I!%?! )) * 崔生辉"徐潇"张凤兰>中国 超级耐药细菌1 流行原 因 与 控 制 * >中华预防医学杂志")< "%E $% % %> 措施探讨) Y ) * ]X ]" 1XG + 6" o6$# - 8" >, O OV )% 年第 * 卷第 期 $% % %?> )% * 16I# Y " 1$ 1 \" Z$# c -" >+ MV O D / % )E O 8 O O 1 " -M O" M O 6 D d O! OV O O 1D O! ) ) Y* >, O 3 V O / ^MO" 6 / O D R O OV MOV * ") $*% *%* *%?> R"1D O )Y * >3 ^ M" O ")% " $) % E<?)> )) * 3 $"c O YI" c O 3" >$O! ^ O +D O $ O% VM O6 / )Ep6E OV " " D OV V O O O )E O V! DM! O + O) Y * >" D O 3 ^ " ")* $E % E<?*> ) * o ^ F" + 3" o6$# \" > O D d O OV O M O! O1 O V O 6 / O) Y* >$ V OV IO O! O 3 ^ )Ep6E "?"E%$)%% %<)% %<<> ) * / V D3"# O I 3" + D M d-" > O +D! VM O 6 / O OV OV V M!! )Ep6E DM! O O ) Y * >Y M O $O! ^ )%> 1D! D ")< "*? $ % < )* * -I#,1" 3 OV + "" 8 D Z" > O V / )E p6e [! O O O [ D O 6 M O! V ) Y* >I! OG O M E " )< $)) % )E) )E*> )E * m V +"/ +"3 V D," >3 M OV O! ^ )< * " 6 G " 8 ^ OI" Z OO Z" >$O ^ O O / M ^ O V O M D O!^ O6 6 / )E V ^ [ O )? OV < O /D )E O )Y * >Y M O 1 O 3 ^ ")< ") # D OV) Y* >/ V D O RMOV" E " )< $E %???> 论著 北京市食源性金黄色葡萄球菌耐药及分子分型研究 王迪!张晓嫒!陈倩!陆峥!王丽丽! 北京市疾病预防控制中心营养与食品卫生所 食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室 "北京))<# 摘要! 目的分析北京市食源性金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药情况及其分子分型 特 征!预 防 和 控 制 由 该 菌引起的食源性疾病!为临床合理 用 药 提 供 依 据" 方 法 收 集 )*) 年 北 京 地 区 食 源 性 致 病 菌 监 测 网 分 离 到的金黄色葡萄球菌 )?E 株!采用微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌对? 种 常 用 抗 生 素 的 敏 感 性" 采 用 脉 冲 场 凝胶电泳%,-I 进行分子分型" 结 果 ))* 株 金 黄 色 葡 萄 球 菌 表 现 出 对 抗 生 素 耐 药!耐 药 率 为 *:<g!对 抗 生 :?*g#四 环 素 % /I/ )<:g#氯 素的耐药率为红霉素% I"\%:%g#苯唑西林% ]$E:?)g#克林霉 素 % 18G, *:%g#甲 氧 苄 啶 @ +3o :??g" 其 中 耐 甲 氧 西 林 金 黄 色 霉素% 168)):E*g#环丙沙星% 1G 磺 胺 甲 恶 唑 % /,3@ 葡萄球菌% 3"+$ 株#对甲氧西林敏感的金黄色 葡 萄 球 菌 % 3++$ )< 株" 分 离 到 的 3"+$中 <% 株 菌 表 现 出 多 重耐药" 全部菌株共分为 ) 种,-I带型!优势带型不明 显" 结 论 食 源 性 金 黄 色 葡 萄 球 菌 的 耐 药 和 多 重 耐 药 普遍存在!,-I带型分布分散与耐药谱的关联性较差" 关键词! 金黄色葡萄球菌$ 耐药$ 微量肉汤稀释法$ 脉冲场凝胶电泳$ 食源性致病菌$ 分子分型 =?%*$)%% %? E 中图分类号!")#"<E?:) )文献标志码!$文章编号!)%!"# ):)< @ > D> )%:: H /? )%+- 8 )6 +* +- +-/8)* * + 3+ + -% ))/6) - 3% +1 " # # )$) )$ -I - Z$# " o6$#] " 16I# O" 8XoD O" Z$#8 $G O M #M O OV - V 6 O " c O1 O, O O OV 1 O " c OF O1 O 8 ^ O OV / ^ / DO - V, O O" c, O O OV 1 O " c O))< " 1D O% 6 + "6, / O d D O! ^ O OV! M D O V^ O#1 / F 96 ) 收稿日期!)%! [ O V )%S)*>! 作者简介!王迪男主管技师研究方向为食源性致病菌相关研究I! D Oj OS*<>! 通讯作者!陈倩女主任技师研究方向为食源性致病菌相关研究I