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- 嗣 穆
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1 荧 光 PCR 原 理 及 应 用 周 煜 ZHOU Yu Application Specialist
2 ABI 公 司 及 其 荧 光 PCR 仪 器
3 美 国 ABI 公 司 荧 光 定 量 PCR 仪 发 展 历 史 世 界 上 第 一 台 定 量 PCR 仪 7700 型 向 医 院 用 户 推 出 5700 型 定 量 PCR 仪 推 出 7900 型 384 孔 荧 光 定 量 PCR 仪 } 公 认 最 高 端 定 量 PCR 仪 型 96 孔 荧 光 定 量 PCR 仪 推 出 7000 型 荧 光 定 量 PCR 仪 取 得 巨 大 成 功 获 得 了 荧 光 定 量 PCR 仪 专 利 - 确 立 ABI 在 业 界 内 的 独 特 地 位 第 3 代 荧 光 定 量 PCR 仪 7300 和 7500 型 第 4 代 荧 光 定 量 PCR 仪 StepOne 和 StepOnePlus 3
4 ABI 公 司 荧 光 PCR 仪 器 4
5 ABI 公 司 荧 光 PCR 仪 器 Applied Biosystems 7900HT Fast Real-Time PCR System Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System Applied Biosystems StepOne Real-Time PCR System Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System 5
6 各 种 荧 光 PCR 仪 器 6
7 荧 光 PCR 的 化 学
8 两 种 荧 光 化 学 原 理 Fluorogenic 5 Nuclease Assay An established and proven chemistry for high specificity nucleic acid real-time quantitation The introduction of TaqMan MGB (Minor Groove Binder) probes has produced a turn-key homogeneous chemistry for the detection of Single Nucleotide Polymorphisms (SNPs) SYBR Green 1 Double Stranded DNA Binding Dye Assay Ideal for target identification (screening) assays A lower-cost alternative when high specificity is not required 8
9 TaqMan 探 针 Excitation Excitation R Q Q R R 3 5 9
10 TaqMan MGB 探 针 R (non-fluorescent quencher) NFQ Q AGGCCTTGAGAGATAT Q MGB (minor groove binder) 提 高 探 针 Tm 值 R AGGCCTTGAGAGATAT Q GCTACACAGTCCGGAACTCTCTATAGCATCACAC R 报 告 荧 光 NFQ 无 荧 光 淬 灭 基 团 MGB 小 沟 结 合 物 10
11 MGB 探 针 的 优 点 提 高 淬 灭 效 率 减 少 背 景 提 高 信 噪 比 提 高 探 针 Tm 值 长 15 碱 基, 提 高 18 C 缩 短 探 针 长 度 最 佳 范 围 碱 基 11
12 TaqMan MGB 探 针 鉴 别 等 位 基 因 FAM MGB NFQ Q R 5 3 MGB 分 辨 1 个 碱 基 的 精 确 度 完 全 配 对, 有 信 号 FAM MGB 一 个 碱 基 不 配 对, 没 有 信 号 12
13 SYBR Green 染 料 SYBR Green I 与 dsdna 结 合 与 DNA 结 合 时 游 离 时 光 13
14 融 解 曲 线 (Dissociation curve) Easily check for specificity of your SYBR assays immediately after PCR Thermal conditions (after last cycle of PCR): Hold at 95 C for 20 sec Hold at 60 C for 20 sec Ramp and collect fluorescent data to 95 C over course of 20 minutes Software automatically generates melt curve profiles 14
15 融 解 曲 线 (Dissociation curve) 原 始 图 谱 导 数 图 谱 15
16 高 分 辨 溶 解 曲 线 (HRM, High Resolution Melting ) Different from a regular SYBR Green dye melt curve: Chemistry: Saturating and brighter dsdna binding dyes LCGreen EvaGreen TM SYTO 9 Instrument: More data points are collected Software: New fluorescent normalization algorithms and plots 16
17 Now can be performed on the ABI 7500 Fast System The analysis is based on the difference in curve shape as well as Tm. HRM can identify mutations that cause Tm changes as minor as 0.1 C. 17
18 染 料 法 的 特 点 成 本 低 兼 容 熔 解 曲 线 特 异 性 问 题 不 能 进 行 多 重 扩 增 18
19 荧 光 PCR 的 防 污 染 技 术 Uracil N-glycosylase Chemical method to destroy contaminating amplicons. U U All amplification chemistries use dutp. U U UNG does not function above 55 o C 19
20 荧 光 参 比 - Passive Reference Dye: ROX ROX 以 固 定 的 浓 度 配 在 Master Mix 中, 不 参 与 PCR 扩 增 ROX 的 功 能 : Improves precision. Compensates for small fluorescent fluctuations that can occur from well-to-well Can be useful for diagnosing troubles Rn = Normalization = Reporter / Reference Reporter Reference 20
21 ROX Normalizer 36 Replicates analyzed with ROX passive reference dye 36 Replicates analyzed without ROX passive reference dye 21
22 定 量 PCR 的 数 学 原 理
23 实 时 定 量 与 终 点 定 量 终 点 处 产 物 量 不 恒 定 Ct 值 则 极 具 重 现 性! 23
24 PCR 动 力 学 曲 线 和 四 个 阶 段 线 性 图 谱 平 台 期 线 性 增 长 期 指 数 增 长 期 基 线 期 平 台 期 线 性 增 长 期 指 数 增 长 期 基 线 期 对 数 图 谱 24
25 什 么 是 CT 值? 荧 光 信 号 穿 过 阈 值 线 时 的 循 环 次 数 -threshold cycle 线 性 图 谱 对 数 图 谱 C T 值 C T 值 25
26 PCR 扩 增 的 数 学 模 型 扩 增 产 物 的 总 数 量 可 以 下 式 表 示 : Y n =X (1+E) n Y n 为 PCR 产 物 的 分 子 数 量 n 为 周 期 数 E 为 扩 增 效 率 (0<E<1) 理 想 条 件 下 浓 度 增 加 1 倍 - CT 值 减 小 1 个 单 位 浓 度 增 加 10 倍 - CT 值 减 小
27 斜 率 与 截 距 CT = - k lgx0 + b Slope=-1/log(1+E) If E=1, Slope= Normally, slope is about -3.5~-4.2 Intercept Normally, intercept is about 30~40 27
28 C T 值 对 [DNA] 0 作 图 C T 值 C T = - k lgx 0 + b lg [ 起 始 DNA] 28
29 成 功 的 定 量 PCR 数 据 29
30 实 时 荧 光 PCR 技 术 的 主 要 优 点 可 进 行 定 量 PCR 检 测, 定 量 范 围 (Dynamic Range) 宽 ; 操 作 方 便 - 无 复 杂 的 PCR 后 分 析 步 骤 ; 全 封 闭 式 检 测 - 减 少 污 染 ; 检 测 灵 敏 度 及 特 异 性 高 ; 多 通 道 分 析 ; 熔 点 曲 线 分 析 (Dissociation curve) 30
31 荧 光 PCR 技 术 的 应 用
32 主 要 应 用 Real time Quantitative PCR End point Plus/minus Assays Allele Discrimination 32
33 定 量 PCR - Quantitative PCR How many? 绝 对 定 量 Absolute Quantitation How much? 相 对 定 量 Relative Quantitation 33
34 Results from RNase P Instrument Verification Plate Standard curve amplifications showing 20K, 10K, 5K, 2.5K and 1.25K copy populations in replicates of four Unknown amplifications showing 10K and 5K copy populations in replicates of 36 34
35 Results from RNase P Instrument Verification Plate 35
36 Calculating DNA Quantity of a Sample y = Ln(x) R 2 = Sample 30 C T (Log N) initial concentration 36
37 Data Report Table 37
38 Dynamic Range Data Amplification of serial dilutions of IL-10 target in replicates of 8 Standard curve showing 7 logs of linear dynamic range 38
39 相 对 定 量 Relative gene expression: Compare treated samples vs. untreated samples (calibrator samples) RNAi validation Array validation 39
40 相 对 定 量 ΔΔCt 相 对 量 = 2 -ΔΔCT 目 标 序 列 和 内 参 序 列 的 扩 增 效 率 相 等 ( 且 接 近 100%) The Relative Standard Curve Method 40
41 Relative Expression 41
42 等 位 基 因 分 析 Allelic Discrimination (SNP Detection) 42
43 等 位 基 因 鉴 定 机 理 野 生 型 (wt) 突 变 型 (mut) 43
44 TaqMan MGB 探 针 Minor Groove Binder enhances the melting temperature (Tm) of the probe resulting in shorter probes Shorter probes provide better discrimination TaqMan MGB probes provide excellent discrimination even with A/T rich sequences 44
45 Allelic Discrimination Assay FAM VIC VIC FAM FAM VIC Homozygote for FAM-specific allele Homozygote for VIC-specific allele Heterozygote for both alleles 45
46 Allelic Discrimination Dye Components Viewer FAM VIC 46
47 阴 阳 性 鉴 定 Plus/Minus Assay 47
48 Plus/Minus Calls = Automatic Results Pathogen Internal Positive Control + - = Yes - - = No Amp - + = No + + = Yes 48
49 Target vs. IPC Competition Target IPC 49
50 荧 光 PCR 光 学 原 理
51 需 要 了 解 的 问 题 荧 光 染 料 激 发 光 源 波 长 检 测 器 原 件 波 长 51
52 7500 System Common Hardware Features - Lamp New Tungsten Halogen Excitation Lamp Rated to 2,000 hours Instrument has lamp life monitoring capability and notifies user when change is required or estimated lifetime is exceeded User changeable 52
53 7500 System Hardware Features - Optical 5 Excitation Filters 5 Emission Filters Filters are optimized to excite a broader range of dyes FAM, SYBR Green I VIC, JOE NED,TAMRA, CY3 Dye. ROX (passive reference), Texas Red CY5 Dye Multicomponenting algorithm means that we don t require new filters to add new custom dyes 53
54 配 套 试 剂 TaqMan Master Mix TaqMan Gene Expression Master Mix TaqMan SNP Genotyping Master Mix Fast SYBR Green Master Mix TaqMan Gene Expression Assays TaqMan SNP Genotyping Assays Custom Primers & Probes 54
55 定 量 PCR 的 实 验 要 素
56 定 量 PCR 实 验 要 素 目 标 基 因 样 品 标 准 曲 线 标 准 品 监 控 系 统 故 障 阳 性 对 照 监 控 污 染 阴 性 对 照 校 准 生 物 学 误 差 阳 性 内 对 照 (IPC) 校 准 物 理 误 差 参 比 荧 光 (ROX) 降 低 其 余 误 差 重 复 实 验 56
57 样 品 DNA 纯 度 :OD260/OD280=1.8,1.6 ~ 2.0 之 间 DNA 用 量 :0.05 ng 100 ng RNA 纯 度 :OD260/OD280=2.0 cdna 用 量 :1-100 ng 总 RNA 反 转 录 的 cdna 取 1 ul 57
58 标 准 品 目 的 : 生 成 标 准 曲 线, 建 立 CT 值 与 浓 度 之 间 的 线 性 关 系 要 求 : 浓 度 已 知 5 点 以 上 标 准 品 与 待 测 样 品 的 PCR 效 率 一 致, 且 接 近 100% 仪 器 质 量 一 致 试 剂 质 量 一 致 : 模 板 纯 度 引 物 和 探 针 的 Tm 值 酶 活 性 缓 冲 液 成 分 反 应 条 件 一 致 : 循 环 参 数 相 同 同 一 次 实 验 不 要 求 : 不 要 求 标 准 品 与 目 标 基 因 使 用 相 同 的 DNA 可 以 相 同, 也 可 以 不 同 C T = - k lgx 0 + b 58
59 标 准 品 梯 度 稀 释 方 法 选 择 目 标 提 取 /PCR 纯 化 测 定 浓 度 调 整 浓 度 梯 度 稀 释 CT 值 在 之 间, 覆 盖 全 部 样 品 浓 度 区 间 10 倍 连 续 梯 度 稀 释 方 法 : 1v 原 液 ( 标 准 品 i) +9v 稀 释 缓 冲 液, 得 标 准 品 ii 1v 标 准 品 ii+9v 稀 释 缓 冲 液, 得 标 准 品 iii 1v 标 准 品 iii +9v 稀 释 缓 冲 液, 得 标 准 品 iv 1v 标 准 品 iv +9v 稀 释 缓 冲 液, 得 标 准 品 v 切 不 可 由 标 准 品 i 分 别 加 不 同 体 积 的 稀 释 缓 冲 液 直 接 得 到 标 准 品 ii iii iv v 59
60 标 准 品 单 位 标 准 品 的 单 位 根 据 最 终 目 的 选 择 标 准 品 单 位 如 果 要 求 测 定 样 品 的 基 因 拷 贝 数, 则 梯 度 稀 释 已 知 摩 尔 浓 度 的 DNA 片 段 如 果 要 求 测 定 样 品 的 重 量 百 分 比 [%(w/w)], 如 转 基 因, 标 准 品 是 将 转 基 因 与 非 转 基 因 食 品 粉 末 按 重 量 比 混 合, 然 后 抽 提 混 合 DNA; 切 不 可 先 抽 好 转 基 因 DNA, 再 梯 度 稀 释, 也 不 可 分 别 抽 提 转 基 因 与 非 转 基 因 DNA, 再 按 重 量 比 例 混 合 ( 这 样 得 出 的 是 基 因 重 量 百 分 比, 而 不 是 样 品 重 量 百 分 比 ) 60
61 PCR 效 率 对 定 量 结 果 的 影 响 n = 30 1+Ex = 1.95 N = N = N 0 x 5.0 x 10 8 相 差 2.2 倍 n = 30 1+Ex = 1.90 N = N = N 0 x 2.3 x 10 8 (Ex= 扩 增 效 率 ;n= 循 环 圈 数 ;No= 起 始 模 板 分 子 数 ;N= 扩 增 产 物 分 子 数 ) 61
62 PCR 效 率 测 定 K=-1/log(1+Ex) 62
63 ??? 在 使 用 TaqMan MGB 探 针 的 情 况 下, 你 认 为 管 家 基 因 与 目 标 基 因 是 在 同 一 管 内 做 多 重 定 量 好, 还 是 分 成 两 管 分 别 定 量 好? 哪 一 种 检 测 的 数 据 更 精 确? 63
64 ROX 校 准 增 加 数 据 精 度 64
65 复 管 测 试 样 品 和 标 准 品 都 要 重 复 重 复 次 数 须 遵 循 统 计 学 要 求 65
66 误 差 的 校 正 生 物 学 方 面 的 误 差 :IC 校 正 细 胞 数 量 的 差 异 抽 提 效 率 纯 化 损 失 反 转 录 效 率 等 物 理 方 面 的 误 差 :ROX 校 正 枪 的 误 差 ( 如 试 剂 体 积 ) 耗 材 质 量 ( 如 管 盖 厚 度 透 光 性 能 不 一 致 ) 所 导 致 的 光 能 损 失 仪 器 稳 定 性 ( 如 孔 间 批 间 温 度 的 波 动 ) 的 误 差 等 其 余 的 误 差 : 统 计 校 正 重 复 实 验, 取 平 均 值 66
67 Q & A 67
68 术 道 生 物 学 意 义 检 测 技 术 68
69 谢 谢!
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生 物 技 术 通 报 胡 立 敏 陶 兴 林 侯 栋 朱 惠 霞 张 东 琴 选 取 温 敏 花 椰 菜 不 育 系 与 杂 交 组 合 的 高 可 育 和 高 不 育 单 株 构 建 基 因 池 利 用 对 随 机 引 物 对 其 进 行 标 记 同 时 采 用 正 交 设 计 对 其 反 应 体 系 及 扩 增 条 件 进 行 优 化 试 验 结 果 表 明 在 反 应 体 系 中 含 引 物
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名 称 生 命 科 学 学 院 083001 环 境 科 学 1 生 物 学 仅 接 收 院 内 调 剂, 初 试 分 数 满 足 我 院 生 物 学 复 试 最 低 分 数 线 生 命 科 学 学 院 071300 生 态 学 5 生 态 学 或 生 物 学 生 命 科 学 学 院 040102
华 中 师 范 大 学 2016 年 接 收 校 内 外 优 秀 硕 士 研 究 生 调 剂 信 息 表 名 称 经 济 与 工 商 管 理 学 院 020101 政 治 经 济 学 1 经 济 学 类 毕 业 学 校 与 报 考 学 校 不 低 于 我 校 办 学 层 次 经 济 与 工 商 管 理 学 院 020105 世 界 经 济 学 1 经 济 学 类 毕 业 学 校 与 报 考 学 校
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北 京 市 中 医 管 理 局 二 一 五 年 四 月 ... 1... 18 2015... 30 京 中 医 政 字 [2014]160 号 1 2 一 充 分 认 识 中 医 健 康 乡 村 建 设 工 作 的 重 要 意 义 二 建 立 健 全 工 作 保 障 机 制 2014 12 15 三 做 好 工 作 启 动 的 准 备 事 宜 1 2014 12 15 5-10 2014 12 15
评 委 : 李 炎 斌 - 个 人 技 术 标 资 信 标 初 步 审 查 明 细 表 序 号 投 标 单 位 投 标 函 未 按 招 标 文 件 规 定 填 写 漏 填 或 内 容 填 写 错 误 的 ; 不 同 投 标 人 的 投 标 文 件 由 同 一 台 电 脑 或 同 一 家 投 标 单
评 委 : 李 炎 斌 - 个 人 清 标 评 审 明 细 表 评 审 因 素 序 号 投 标 单 位 清 标 评 审 1 深 圳 市 创 捷 科 技 有 限 合 格 2 四 川 川 大 智 胜 软 件 股 份 有 限 合 格 3 北 京 航 天 长 峰 科 技 工 业 集 团 有 限 公 司 合 格 4 深 圳 中 兴 力 维 技 术 有 限 合 格 5 深 圳 键 桥 通 讯 技 术 股 份 有
导 数 和 微 分 的 概 念 导 数 的 几 何 意 义 和 物 理 意 义 函 数 的 可 导 性 与 连 续 性 之 间 的 关 系 平 面 曲 线 的 切 线 和 法 线 导 数 和 微 分 的 四 则 运 算 基 本 初 等 函 数 的 导 数 复 合 函 数 反 函 数 隐 函 数 以
2015 年 考 研 数 学 二 考 试 大 纲 考 试 科 目 : 高 等 数 学 线 性 代 数 考 试 形 式 和 试 卷 结 构 一 试 卷 满 分 及 考 试 时 间 试 卷 满 分 为 150 分, 考 试 时 间 为 180 分 钟. 二 答 题 方 式 答 题 方 式 为 闭 卷 笔 试. 三 试 卷 内 容 结 构 高 等 教 学 约 78% 线 性 代 数 约 22% 四 试 卷
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附 件 1 国 际 中 药 专 业 高 级 技 术 职 称 评 审 条 件 及 报 名 材 料 一 系 列 ( 一 ) 中 1 高 级 专 科 ( 副 ) 高 级 专 科 ( 副 ) 1 取 得 中 专 科 职 称 后, 独 立 从 事 中 临 床 实 践 5 年 以 上 2 取 得 中 博 士 学 位 后, 临 床 实 践 2 年 以 上 3 取 得 中 硕 士 学 位 后, 临 床 实 践 7
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梁 运 文 霍 震 刘 凯 本 文 利 用 奥 尔 多 中 心 的 调 查 数 据 从 三 个 方 面 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 状 况 进 行 了 详 细 的 实 证 分 析 首 先 刻 画 了 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 的 总 体 统 计 特 征 然 后 从 财 产 构 成 出 发 对 我 国 城 乡 居 民 财 产 分 布 进 行 了 结 构 分 解 最 后 通
评 委 : 徐 岩 宇 - 个 人 技 术 标 资 信 标 初 步 审 查 明 细 表 序 号 投 标 单 位 投 标 函 未 按 招 标 文 件 规 定 填 写 漏 填 或 内 容 填 写 错 误 的 ; 不 同 投 标 人 的 投 标 文 件 由 同 一 台 电 脑 或 同 一 家 投 标 单
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编号：
编 号 : 企 业 内 高 技 能 人 才 培 养 评 价 实 施 方 案 ( 仅 适 用 于 企 业 特 有 行 业 特 有 工 种 ) 实 施 单 位 ( 公 章 ) 申 报 日 期 年 _ 月 日 1 企 业 内 高 技 能 人 才 培 养 评 价 项 目 实 施 方 案 申 报 表 项 目 名 称 等 级 项 目 性 质 课 时 申 报 单 位 联 系 人 通 讯 地 址 电 话 手 机 电
SDS 1.3
Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System (With RQ Study) SDS 1.3 I. ~ I. 1. : Dell GX280 2.8GHz with Dell 17 Flat monitor 256 MB RAM 40 GB hard drive DVD-RW drive Microsoft Windows XP Operating System
伊 犁 师 范 学 院 611 语 言 学 概 论 全 套 考 研 资 料 <2016 年 最 新 考 研 资 料 > 2-2 语 言 学 纲 要 笔 记, 由 考 取 本 校 本 专 业 高 分 研 究 生 总 结 而 来, 重 点 突 出, 借 助 此 笔 记 可 以 大 大 提 高 复 习 效
伊 犁 师 范 学 院 611 语 言 学 概 论 全 套 考 研 资 料 ......2 伊 犁 师 范 学 院 802 文 学 概 论 全 套 考 研 资 料 ......2 伊 犁 师 范 学 院 702 普 通 物 理 全 套 考 研 资 料 ......3 伊 犁
《C语言基础入门》课程教学大纲
C 语 言 开 发 入 门 教 程 课 程 教 学 大 纲 课 程 编 号 :201409210011 学 分 :5 学 分 学 时 :58 学 时 ( 其 中 : 讲 课 学 时 :39 学 时 上 机 学 时 :19 学 时 ) 先 修 课 程 : 计 算 机 导 论 后 续 课 程 :C++ 程 序 设 计 适 用 专 业 : 信 息 及 其 计 算 机 相 关 专 业 开 课 部 门 : 计
上证指数
上 证 与 修 正 方 法 一 ( 一 ) 计 算 公 式 1. 上 证 指 数 系 列 均 采 用 派 许 加 权 综 合 价 格 指 数 公 式 计 算 2. 上 证 180 指 数 上 证 50 指 数 等 以 成 份 股 的 调 整 股 本 数 为 权 数 进 行 加 权 计 算, 计 算 公 式 为 : 报 告 期 指 数 =( 报 告 期 样 本 股 的 调 整 市 值 / 基 期 )
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行 测 高 分 冲 刺 练 习 题 资 料 分 析 ( 共 15 题, 参 考 时 限 10 分 钟 ) 材 料 题 - 1 2012 年 1 月 某 小 区 成 交 的 二 手 房 中, 面 积 为 60 平 方 米 左 右 的 住 宅 占 总 销 售 套 数 的 ( ) A.25% B.35% C.37.5% 长 沙 市 雨 花 区 侯 家 塘 佳 天 国 际 大 厦 北 栋 20 楼 第 1
1600 1000 40 50 2030 2000 采 取 行 动 的 机 会 90% 开 拓 成 功 的 道 路 2
简 略 版 本 :2015 3 10 2016 2021 全 球 卫 生 部 门 病 毒 性 肝 炎 战 略 2016 2021 2015 3 12 2012 2010 2014 2015 2016 2021 140 55% 35% 5 15% 5 20% 2.4 1.3 1.5 1 1600 1000 40 50 2030 2000 采 取 行 动 的 机 会 90% 开 拓 成 功 的 道 路
生产支援功能 使用说明书（IP-110 篇）
生 产 支 援 功 能 使 用 说 明 书 (IP-110 篇 ) 目 录!. 前 言...1 1. 概 要...1 2. 基 本 操 作 方 法...3 2-1. 信 息 模 式 和 通 常 缝 制 模 式 的 变 换...3 2-2. 信 息 模 式...4 2-3. 通 常 缝 制 模 式...5 @. 设 定 篇...6 1. 首 次 使 用 生 产 支 援 功 能 时 的 设 定 方 法...6
¹ º ¹ º 农 业 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 农 业 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个 月 及 以 上 的 流 动 人 口 非 农 流 动 人 口 是 指 户 口 性 质 为 非 农 户 口 在 流 入 地 城 市 工 作 生 活 居 住 一 个
¹ 改 革 开 放 年 来 人 口 流 动 规 模 持 续 增 加 对 我 国 社 会 经 济 的 持 续 发 展 起 到 了 重 要 作 用 为 全 面 了 解 我 国 流 动 人 口 生 存 状 况 准 确 把 握 流 动 人 口 发 展 规 律 和 趋 势 不 断 加 强 流 动 人 口 服 务 管 理 引 导 人 口 有 序 流 动 合 理 分 布 国 家 人 口 计 生 委 于 年 月 启
新, 各 地 各 部 门 ( 单 位 ) 各 文 化 事 业 单 位 要 高 度 重 视, 切 实 加 强 领 导, 精 心 组 织 实 施 要 根 据 事 业 单 位 岗 位 设 置 管 理 的 规 定 和 要 求, 在 深 入 调 查 研 究 广 泛 听 取 意 见 的 基 础 上, 研 究 提
广 西 壮 族 自 治 区 人 事 厅 广 西 壮 族 自 治 区 文 化 厅 文 件 桂 人 发 2009 42 号 关 于 印 发 广 西 壮 族 自 治 区 文 化 事 业 单 位 岗 位 设 置 结 构 比 例 指 导 标 准 的 通 知 各 市 人 事 局 文 化 局, 区 直 各 部 门 ( 单 位 ): 根 据 人 事 部 印 发 的 事 业 单 位 岗 位 设 置 管 理 试 行 办
物 流 从 业 人 员 职 业 能 力 等 级 证 书 分 为 四 个 级 别, 分 别 为 初 级 助 理 级 中 级 和 高 级 ; 采 购 从 业 人 员 职 业 能 力 等 级 证 书 分 为 三 个 级 别, 分 别 为 中 级 高 级 和 注 册 级 请 各 有 关 单 位 按 照 通
物 联 培 字 2016 16 号 各 有 关 单 位 : 为 适 应 国 家 一 带 一 路 战 略 实 施 和 物 流 产 业 转 型 升 级 对 人 才 的 新 要 求, 确 保 物 流 采 购 人 才 培 养 工 作 有 序 衔 接 和 持 续 健 康 发 展, 参 照 国 际 惯 例, 中 国 物 流 与 采 购 联 合 会 ( 以 下 简 称 中 物 联 ) 经 研 究 决 定, 以 物
附 件 : 上 海 市 建 筑 施 工 企 业 施 工 现 场 项 目 管 理 机 构 关 键 岗 位 人 员 配 备 指 南 二 一 四 年 九 月 十 一 日 2
公 开 上 海 市 城 乡 建 设 和 管 理 委 员 会 文 件 沪 建 管 2014 758 号 上 海 市 城 乡 建 设 和 管 理 委 员 会 关 于 印 发 上 海 市 建 筑 施 工 企 业 施 工 现 场 项 目 管 理 机 构 关 键 岗 位 人 员 配 备 指 南 的 通 知 各 区 县 建 设 和 交 通 委 员 会 : 为 进 一 步 加 强 对 建 设 工 程 施 工 现
金 不 少 于 800 万 元, 净 资 产 不 少 于 960 万 元 ; (3) 近 五 年 独 立 承 担 过 单 项 合 同 额 不 少 于 1000 万 元 的 智 能 化 工 程 ( 设 计 或 施 工 或 设 计 施 工 一 体 ) 不 少 于 2 项 ; (4) 近 三 年 每 年
工 程 设 计 与 施 工 资 质 标 准 一 总 则 建 筑 智 能 化 工 程 设 计 与 施 工 资 质 标 准 ( 一 ) 为 了 加 强 对 从 事 建 筑 智 能 化 工 程 设 计 与 施 工 企 业 的 管 理, 维 护 建 筑 市 场 秩 序, 保 证 工 程 质 量 和 安 全, 促 进 行 业 健 康 发 展, 结 合 建 筑 智 能 化 工 程 的 特 点, 制 定 本 标
科 学 出 版 社 科 学 出 版 社 前 言 本 书 是 针 对 普 通 高 等 院 校 经 济 类 和 工 商 管 理 类 本 科 专 业 财 务 管 理 学 的 教 学 需 求, 结 合 教 育 部 经 济 管 理 类 本 科 财 务 管 理 学 课 程 教 学 大 纲 编 写 而 成 的 本 书 执 笔 者 都 是 长 期 工 作 在 财 务 管 理 教 学 一 线 的 专 业 教 师,
际 联 考 的 非 美 术 类 本 科, 提 前 批 本 科 体 育 类 第 一 批 第 二 批 第 三 批 的 理 工 类 和 文 史 类 本 科 平 行 志 愿, 考 生 可 以 填 报 6 所 院 校 志 愿 符 合 贫 困 地 区 专 项 计 划 和 农 村 考 生 专 项 计 划 报 考
第 四 部 分 平 行 志 愿 57. 什 么 是 平 行 志 愿?/ 32 58. 我 省 在 哪 个 批 次 实 行 平 行 志 愿? 考 生 最 多 可 以 填 报 几 所 院 校 志 愿?/ 32 59. 第 一 二 三 批 本 科 平 行 志 愿 如 何 投 档?/ 32 60. 艺 术 本 科 ( 二 ) 艺 术 本 科 ( 三 ) 和 体 育 本 科 的 平 行 志 愿 如 何 投 档?/
随着执业中医师资格考试制度的不断完善，本着为我校中医学专业认证服务的目的，本文通过对我校中医类毕业生参加2012年和2013年的中医执业医师考试成绩及通过率、掌握率进行分析，并与全国的平均水平进行差异比较分析，以此了解我校执业中医师考试的现状，进而反映我校中医类课程总体教学水平，发现考核知识模块教学中存在的不足，反馈给相关学院和教学管理部门，以此提高教学和管理水平。
2012-2013 中 医 类 别 执 业 医 师 综 合 笔 试 成 绩 分 析 反 馈 报 告 教 务 处 二 零 一 三 年 三 月 1 目 录 1 前 言 3 2 2012-2013 中 医 类 别 执 业 医 师 综 合 笔 试 成 绩 分 析 反 馈 报 告 4 附 件 1:2012 年 中 医 类 别 医 师 资 格 综 合 笔 试 院 校 学 科 成 绩 分 析 报 告 附 件 2:2013
( 二 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 培 养 人 的 创 新 精 神,,,,,,,,,,,,, [ ],,,,,,,,,,, :, ;,,,,,,? ( 三 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 全 体 学 生 都 获 得 全 面 发 展,, [ ],,,,,,,,,,,
![( 二 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 培 养 人 的 创 新 精 神,,,,,,,,,,,,, [ ],,,,,,,,,,, :, ;,,,,,,? ( 三 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 全 体 学 生 都 获 得 全 面 发 展,, [ ],,,,,,,,,,,](/thumbs/39/20125331.jpg "( 二 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 培 养 人 的 创 新 精 神,,,,,,,,,,,,, [ ],,,,,,,,,,, :, ;,,,,,,? ( 三 ) 现 行 统 一 高 考 制 度 不 利 于 全 体 学 生 都 获 得 全 面 发 展,, [ ],,,,,,,,,,,")
( ) ( )... 李 雪 岩, 龙 耀 (. 广 西 民 族 大 学 商 学 院, 广 西 南 宁 ;. 中 山 大 学 教 育 学 院, 广 东 广 州 ) : 高 等 教 育 是 专 业 教 育 高 考 是 为 高 等 教 育 服 务 的, 是 为 高 等 专 业 教 育 选 拔 有 专 业 培 养 潜 质 的 人 才 现 行 高 考 制 度 忽 略 专 业 潜 质 的 因 素, 过 份 强
全国建筑市场注册执业人员不良行为记录认定标准（试行）.doc
- 1 - - 2 - 附 件 全 国 建 筑 市 场 注 册 执 业 人 员 不 良 记 录 认 定 标 准 ( 试 行 ) 说 明 为 了 完 善 建 筑 市 场 注 册 执 业 人 员 诚 信 体 系 建 设, 规 范 执 业 和 市 场 秩 序, 依 据 相 关 法 律 法 规 和 部 门 规 章, 根 据 各 行 业 特 点, 我 部 制 订 了 全 国 建 筑 市 场 注 册 执 业 人
100566035515613 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566035715658 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566037615926 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000100357 101 思 想
2016 年 天 津 大 学 硕 士 学 位 研 究 生 考 试 初 试 成 绩 复 核 结 果 公 示 考 生 编 号 科 目 码 科 目 名 称 复 核 结 果 100566000100858 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000101151 101 思 想 政 治 理 论 经 核 查 无 误 100566000101348 101 思 想 政 治 理 论 经
黄 金 原 油 总 持 仓 增 长, 同 比 增 幅 分 别 为 4.2% 和 4.1% 而 铜 白 银 以 及 玉 米 则 出 现 减 持, 减 持 同 比 减 少 分 别 为 9.4%,9.4% 以 及 6.5% 大 豆, 豆 粕 结 束 连 续 4 周 总 持 仓 量 增 长, 出 现 小 幅
小 麦 净 多 持 仓 增 加, 豆 油 豆 粕 净 多 持 仓 减 少 美 国 CFTC 持 仓 报 告 部 门 : 市 场 研 究 与 开 发 部 类 型 : 量 化 策 略 周 报 日 期 :212 年 5 月 7 日 电 话 :592-5678753 网 址 :www.jinyouqh.com 主 要 内 容 : 根 据 美 国 CFTC 公 布 的 数 据, 本 报 告 中 的 11 个
类 似 地, 又 可 定 义 变 下 限 的 定 积 分 : ( ). 与 ψ 统 称 为 变 限 积 分. f ( ) d f ( t) dt,, 注 在 变 限 积 分 (1) 与 () 中, 不 可 再 把 积 分 变 量 写 成 的 形 式 ( 例 如 ) 以 免 与 积 分 上 下 限 的
5 ( 一 ) 微 积 分 学 基 本 定 理 当 函 数 的 可 积 性 问 题 告 一 段 落, 并 对 定 积 分 的 性 质 有 了 足 够 的 认 识 之 后, 接 着 要 来 解 决 一 个 以 前 多 次 提 到 过 的 问 题 在 定 积 分 形 式 下 证 明 连 续 函 数 必 定 存 在 原 函 数. 一 变 限 积 分 与 原 函 数 的 存 在 性 设 f 在 [,] 上
I
机 电 一 级 注 册 建 造 师 继 续 教 育 培 训 广 东 培 训 点 网 上 报 名 操 作 使 用 手 册 (2013 年 1 月, 第 一 版 ) 第 一 章 个 人 注 册 与 个 人 信 息 管 理 1. 个 人 注 册 ( 请 每 人 只 申 请 一 个 注 册 号, 如 果 单 位 批 量 报 班 单 位 帮 申 请 注 册, 不 需 个 人 再 注 册 ) 首 次 报 班,
第二讲 数列
Togisu XueD Persolized Eduio Developme Ceer 高 考 中 不 等 式 问 题 的 解 决 方 法 通 润 达 久 王 力 前 言 : 近 年 来 不 等 式 问 题 正 越 来 越 多 的 出 现 在 调 研 题 和 高 考 试 题 中 而 且 大 多 出 现 在 江 苏 高 考 的 填 空 压 轴 题 中 是 高 考 考 察 的 重 点 和 难 点 由 于
《自然》新方法解决癌症50年纷争
实 时 定 量 PCR: 了 解 影 响 CT 的 关 键 因 素 影 响 CT 值 的 因 素 CT( 阈 值 循 环,Threshold Cycle) 是 扩 增 曲 线 和 阈 值 线 的 交 叉 点 ( 图 1B) 它 是 PCR 反 应 中 模 板 浓 度 的 相 对 测 量 除 了 模 板 浓 度 外, 还 有 许 多 因 素 会 影 响 CT 的 绝 对 值 我 们 将 要 讨 论 最
18 上 报 该 学 期 新 生 数 据 至 阳 光 平 台 第 一 学 期 第 四 周 至 第 六 周 19 督 促 学 习 中 心 提 交 新 增 专 业 申 请 第 一 学 期 第 四 周 至 第 八 周 20 编 制 全 国 网 络 统 考 十 二 月 批 次 考 前 模 拟 题 第 一 学
1 安 排 组 织 全 国 网 络 统 考 九 月 批 次 网 上 考 前 辅 导 第 一 学 期 第 一 周 统 考 考 前 半 个 月 2 下 发 全 国 网 络 统 考 九 月 批 次 准 考 证 第 一 学 期 第 一 周 导 出 下 半 年 成 人 本 科 学 士 学 位 英 语 统 一 考 试 报 考 3 信 息 第 一 学 期 第 一 周 4 教 学 计 划 和 考 试 计 划 上 网,
第三章 作业
- 在 题 图 - 中, 若 电 压 源 U V, 电 阻, 试 在 图 示 参 考 方 向 下 求 支 路 电 流 I Us I 题 图 - 以 电 压 源 为 参 考 方 向,I=-A - 求 图 - 各 支 路 中 未 知 量 的 值 4V V =? A U=? V A U=? A V a b c a =(-4)/=Ω b U=+ =4V c U=4V 题 图 - - 在 题 图 -a b 所
张 荣 芳 中 山 大 学 历 史 系 广 东 广 州 张 荣 芳 男 广 东 廉 江 人 中 山 大 学 历 史 系 教 授 博 士 生 导 师 我 们 要 打 破 以 前 学 术 界 上 的 一 切 偶 像 以 前 学 术 界 的 一 切 成 见 屏 除 我 们 要 实 地 搜 罗 材 料 到 民 众 中 寻 方 言 到 古 文 化 的 遗 址 去 发 掘 到 各 种 的 人 间 社 会 去
精 勤 求 学 自 强 不 息 Born to win! 解 析 : 由 极 限 的 保 号 性 知 存 在 U ( a) 当 a 时 f ( ) f ( a) 故 f ( ) 在 点 a 不 取 极 值 f ( ) f ( a) f ( ) f ( a) lim lim a a a a ( a)
年 考 研 数 学 二 模 拟 题 ( 二 ) 参 考 答 案 本 试 卷 满 分 5 考 试 时 间 8 分 钟 一 选 择 题 :~8 小 题 每 小 题 分 共 分 下 列 每 小 题 给 出 的 四 个 选 项 中 只 有 一 项 符 合 题 目 要 求 的 请 将 所 选 项 前 的 字 母 填 在 答 题 纸 指 定 位 置 上 () 在 点 处 不 存 在 极 限 的 函 数 是 (
何 秋 琳 张 立 春 视 觉 学 习 研 究 进 展 视 觉 注 意 视 觉 感 知
第 卷 第 期 年 月 开 放 教 育 研 究 何 秋 琳 张 立 春 华 南 师 范 大 学 未 来 教 育 研 究 中 心 广 东 广 州 随 着 图 像 化 技 术 和 电 子 媒 体 的 发 展 视 觉 学 习 也 逐 步 发 展 为 学 习 科 学 的 一 个 研 究 分 支 得 到 研 究 人 员 和 教 育 工 作 者 的 广 泛 关 注 基 于 此 作 者 试 图 对 视 觉 学 习
一 六 年 级 下 册 教 科 书 总 体 说 明 ( 一 ) 教 学 内 容 本 册 教 科 书 一 共 安 排 了 5 个 教 学 单 元, 其 中 前 4 个 单 元 为 新 知 识, 第 五 单 元 是 对 整 个 小 学 阶 段 所 学 数 学 知 识 系 统 的 整 理 和 复 习
西 南 师 大 版 小 学 数 学 六 年 级 下 册 教 科 书 分 析 及 教 学 建 议 重 庆 市 教 育 科 学 研 究 院 李 光 树 一 六 年 级 下 册 教 科 书 总 体 说 明 ( 一 ) 教 学 内 容 本 册 教 科 书 一 共 安 排 了 5 个 教 学 单 元, 其 中 前 4 个 单 元 为 新 知 识, 第 五 单 元 是 对 整 个 小 学 阶 段 所 学 数 学
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赵 毅 衡 关 于 标 出 性 的 研 究 在 语 言 学 中 已 经 有 很 长 的 历 史 但 是 至 今 在 一 系 列 关 键 问 题 上 没 有 定 论 标 出 性 在 文 化 研 究 中 更 为 重 要 但 是 至 今 没 有 切 实 的 研 究 本 文 指 出 标 出 性 在 文 化 中 情 况 更 为 复 杂 变 化 多 端 难 以 套 用 语 言 学 成 果 本 文 建 议 以 中
第 期 马 海 燕 等 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 材 料 与 方 法 臭 氧 水 的 制 取 臭 氧 水 处 理 超 声 波 处 理 超 声 波 和 臭 氧 水 协 同 处 理 对 照 处 理 邻 苯 二 胺 分 光 光 度 法 测
第 卷 第 期 年 月 食 品 与 生 物 技 术 学 报 臭 氧 水 和 超 声 波 协 同 作 用 在 速 冻 西 兰 花 中 的 应 用 研 究 马 海 燕 张 慜 孙 金 才 食 品 科 学 与 技 术 国 家 重 点 实 验 室 江 南 大 学 江 苏 无 锡 海 通 食 品 集 团 股 份 有 限 公 司 浙 江 慈 溪 由 于 速 冻 蔬 菜 加 工 过 程 中 的 热 烫 处 理 对
西 南 民 族 学 院 学 报 哲 学 社 会 科 学 版 第 卷 资 料 来 源 中 国 统 计 年 鉴 年 年 新 中 国 五 十 年 统 计 资 料 汇 编 中 国 人 口 统 计 年 鉴 年 数 据 资 料 来 源 中 国 统 计 年 鉴 中 国 统 计 出 版 社 年 版 资 料 来 源
郑 长 德 教 育 的 发 展 人 力 资 源 的 开 发 是 决 定 西 部 民 族 地 区 未 来 发 展 的 关 键 因 素 之 一 是 实 施 西 部 大 开 发 战 略 提 高 其 经 济 竞 争 力 和 综 合 实 力 的 重 要 保 障 本 文 从 西 部 民 族 地 区 教 育 发 展 的 现 状 入 手 指 出 中 华 人 民 共 和 国 成 立 多 年 来 西 部 民 族 地 区
2009—2010级本科课程教学大纲与课程简介格式
机 电 传 动 控 制 A 教 学 大 纲 ( 一 ) 课 程 基 本 信 息 1. 课 程 代 码 :20134146 2. 课 程 名 称 ( 中 文 / 英 文 ): 机 电 传 动 控 制 /Mechatronic Control System 3. 课 程 类 别 : 专 业 主 修 课 4. 课 程 学 分 :2.5 5. 课 程 学 时 :48( 其 中, 授 课 学 时 :32; 实
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