Captiva EMR-Lipid 结合 LC-QQQ 测定动物源性食品中硝基咪唑类药物
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- 财扁 倪
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1 应用简报 食品检测与农业 Captiva EMR-Lipid 结合 LC-QQQ 测定动物源性食品中硝基咪唑类药物 作者 安娟 吴翠玲 黄悯嘉安捷伦科技 ( 中国 ) 有限公司 摘要 本应用简报采用 Captiva EMR-Lipid 对鸡肉 猪肉和猪肝样品中的 7 种硝基咪唑类药物进行萃取净化后, 在 Agilent 647 LC-QQQ 上进样分析 前处理过程简单 快速并且分析结果符合国家标准要求的检测限与定量限, 以及可接受的加标回收率
2 前言 硝基咪唑类药物是一类抗生素和抗原虫药, 主要用于预防和治疗家禽组织滴虫病 球虫病以及猪出血性肠炎等疾病, 广泛应用于 [3] 畜禽和水产养殖业 然而这些化合物被认为可能对人类产生致癌 致畸 致突变作用, 已被美国和欧盟国家禁止使用 我国农业部将二甲硝基咪唑和甲硝唑列为允许作治疗用 但不得在动物源性食品中检出的兽药 因此, 为进一步加强相关食品安全问题的监管, 开发简单 准确 快速检测动物源性食品中硝基咪唑类药物及其代谢物的方法显得十分必要 本文建立了一种将 Captiva EMR-Lipid 与 LC-QQQ 相结合同时分析动物源性食品中残留的 7 种硝基咪唑类抗生素的方法 对 7 种硝基咪唑类药物的净化和回收情况, 发现大多数硝基咪唑类药物在三种前处理方法中均具有很好的保留和洗脱性能 ; 通过盐析的方法可以更好地去除极性干扰物, 提高净化效果, 配合 EMR 的方法也能达到最大限度去除脂肪的作用 样品前处理称取样品 5 g, 加入 3 ml 水和陶瓷均质子, 涡旋混匀后, 加入 1 ml 乙腈和 Bond Elut QuEChERS 兽药残留分析萃取盐包 ( 部件号 : ), 涡旋振荡 5 min; 在 4 C 下以 9 r/min 的转速低温离心 1 min; 移取 4 ml 上清液至另一离心管中, 再加入 1 ml 水, 充分混匀后, 经过 Captiva EMR-Lipid 6 mg 过滤柱萃取 ; 收集流出液, 在 4 C 下用氮气吹干, 并用流动相定容至 1 ml; 经 Agilent Captiva.2 µm RC 滤膜过滤后进行 LC-QQQ 测定 样品前处理流程图如图 1 所示 称取 5 g 样品, 加入标准品 ( 内标 ) 3 ml 水和陶瓷均质子, 涡旋混合 1 min 加入 1 ml 乙腈, 涡旋 1 min, 加入 Bond Elut QuEChERS 兽药残留分析萃取盐包涡旋或振荡 1 min, 静置 1 min, 在 4 下以 9 r/min 的转速低温离心 1 min 取 4 ml 上清液至离心管中, 加入 1 ml 水, 涡旋混匀后直接过 Captiva EMR 过滤柱 6 mg; 收集全部流出液, 在 4 下用氮气吹至近干 实验部分 试剂和样品甲酸 乙腈均为色谱纯, 购于迪马公司 ; 实验用水为经过密理博纯水仪的二次水 所用标准品包括甲硝唑 (MNZ) 二甲硝基咪唑 (DMZ) 洛硝哒唑 (RNZ) 异丙硝唑 (IPZ) 羟基甲硝唑 (MNZOH) 羟甲基甲硝咪唑 (HMMNI) 羟基异丙硝唑 (IPZOH), 上述标准品纯度均大于 99.%, 购于 Dr 公司 Agilent Bond Elut QuEChERS , 部件号 :1826 Captiva EMR-Lipid,6 mg,6 ml, 部件号 :157 样品为市售产品 仪器和设备采用 Agilent 9 Infinity 高效液相色谱系统与 Agilent 647 串联质谱系统 标样前处理取适量的 MNZ DMZ RNZ IPZ MHZOH HMMNI IPZOH, 分别用甲醇配制成 1 mg/l 的单标储备液 然后取适量的各种单标储备液, 用甲醇溶液配制成 1 mg/l 的混标工作液 用流动相定容至 1 ml, 通过 Agilent Captiva.2 µm RC 滤膜进行过滤利用 Agilent 647 LC-QQQ 进行检测图 1. 样品前处理流程图 色谱条件 色谱柱 : Agilent Poroshell SB-C18 (3. 1 mm, 2.7 µm) 柱温 : 3 C 进样体积 : 5 µl 流动相 A: 水相 ( 含.1% 甲酸 ) 流动相 B: 乙腈 ( 含.1% 甲酸 ) 流速 :.4 ml/min 梯度程序 : 时间 (min) B% 后运行 : 3 min 2
3 响应 vs. 采集时间 结果与讨论 Captiva EMR-Lipid 的选择本研究考察了 QuEChERS QuEChERS EMR 和 Captiva EMR-Lipid 对 7 种硝基咪唑类药物的回收情况, 仅有 MNZ-OH 极性较强, 易产生大量极性干扰, 导致相应抑制, 其它六种硝基咪唑类药物在三种前处理方法中均具有很好的保留和洗脱性能 最终通过盐析的方法可以更好地去除极性干扰物, 提高净化效果, 配合 EMR 的方法也达到最大限度去除脂肪的作用 因此方法配合使用 QuEChERS 兽药萃取盐包和 Captiva EMR-Lipid 来完成对 7 种硝基咪唑类药物的分析 图 2. 7 种硝基咪唑类药物的 MRM 谱图 (5 ng/ml) 质谱条件 离子源 : 采用 AJS ESI,MRM 监测模式 干燥气温度 : 25 C 干燥气流速 : 7 L/min 雾化器压力 : 4 psi 鞘气温度 : 325 C 鞘气流速 : 11 L/min 毛细管电压 : 4 V 喷嘴电压 : V 本研究所涉及的各种分析物的质谱参数如表 1 所示 QuEChERS Captiva EMR-Lipid QuEChERS EMR 图 3. 不同前处理方式 MNZ-OH 回收率比较 ( 注 :QuEChERS 方法为利用 Agilent Bond Elut QuEChERS , ;Captiva EMR-Lipid 方法为利用 Captiva EMR-Lipid 6 mg,6 ml;quechers EMR 方法为利用 Agilent Bond Elut QuEChERS 和 Captiva EMR-Lipid 6 mg,6 ml) 表 1. 化合物质谱参数表 化合物 母离子 (m/z) MNZ-OH 188 HMMNI 158 MNZ 172 DMZ 142 子离子 (m/z) 裂解电压 (V) 碰撞能量 (ev) 线性范围与检测限本方法采取基质标准曲线外标法定量 MNZ DMZ RNZ IPZ MHZOH HMMNI IPZOH 在浓度.5 1 ng/ml 范围内线性相关, 且线性相关系数均高于.99 在 S/N > 3 和 S/N > 1 的信噪比下, 测得 7 种硝基咪唑类药物在鸡肉 猪肉和猪肝中的检测限为.5 µg/kg, 定量限为 1 µg/kg, 完全可以满足我国标准方法中硝基咪唑药物检测限和定量限的要求, 具体检测限和定量限数据列于表 2 中 RNZ IPZ-OH IPZ
4 加标回收率与精密度取空白样品进行加标回收和精密度实验, 向空白鸡肉 猪肉和猪肝中添加 1 μg/kg 2 μg/kg 5 μg/kg 三个浓度水平的混标 在不同加标浓度下得到的鸡肉基质中的加标回收率在 71.9% 111.% 之间, 猪肉基质中的加标回收率在 79.1% 1.7% 之间, 猪肝基质中的加标回收率在 69.9% 114.7% 之间 鸡肉基质中的加标回收率相对标准偏差 (RSD) 小于 1.%, 猪肉基质中的加标回收率 RSD 小于 9.8%, 猪肝基质中的加标回收率 RSD 小于 1.8% 结果详见表 2 表 2. 硝基咪唑类药物在不同基质中的回收率和精密度 (n = 3) 鸡肉猪肉猪肝添加浓度平均平均平均目标物精密度精密度精密度 (ng/g) 回收率回收率回收率 结论 本文建立了 Captiva EMR-Lipid 结合液相色谱 - 串联质谱测定动物源性食品中 7 中硝基咪唑的残留的分析方法 方法灵敏度满足国际 [1,2] 和国内标准对于食品中硝基咪唑药物最大残留限量的要求 方法采用 Captiva EMR-Lipid 最大程度去除脂肪, 并且中简单易操作, 大大减少了常规 SPE 时间消耗 参考文献 1. GB/T 动物源食品中硝基咪唑残留量检验方法 2. 农业部 5 号公告 动物源食品中 4 种硝基咪唑残留检测液相色谱 - 串联质谱法 3. 陈杖榴. 兽医药理学. 北京 : 中国农业出版社, 21: MNZ-OH HMMNI MNZ DMZ RNZ IPZ-OH IPZ 消耗品订购信息 Agilent Bond Elut QuEChERS 部件号 : Captiva EMR-Lipid 6 mg,6 ml 部件号 : Agilent Poroshell SB-C18 色谱柱 3. 1 mm 2.7 µm 部件号 : Agilent VacElut2 固相萃取装置部件号 :23414 Agilent Captiva RC 15 mm.2 µm 针头过滤器部件号 :
5 安捷伦对本资料可能存在的错误或由于提供 展示或使用本资料所造成的间接损失不承担任何责任 本文中的信息 说明和技术指标如有变更, 恕不另行通知 安捷伦科技 ( 中国 ) 有限公司, 年 1 月 7 日, 中国出版 ZHCN
氯霉素类药物的检测方法目前有 GC/MS 法 LC/MS 法和酶联免疫法等 近年来, 随着液质联用系统和相关技术的快速普及以及对此类禁用药物越来越苛刻的检测限要求, LC/QQQ 技术因其灵敏度高 无需衍生化等特点, 已成为动物源性食品中氯霉素类药物残留量的主要检测确证技术手段 [-3], 被广泛应
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采用安捷伦三重四极杆液质联用系统对动物源食品中氯霉素类药物残留进行分析 应用简报 食品检测和农业 作者李建中 马鑫 薄涛 安蓉 张之旭 安捷伦科技 ( 中国 ) 有限公司 摘要 本文采用 Agilent 9 Infinity 液相色谱系统 /69 三重四极杆液质联用系统建立了氯霉素 氟苯尼考 甲砜霉素和琥珀氯霉素的分析方法 动物源性样品 ( 肌肉 内脏 蜂产品 水产品 乳制品等 ) 经过提取后, 采用薄壳型填料反相
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70 陈伟珠, 等 : 超高压液相色谱法测定鱼油中的 和 DHP-EE % (RSD 1.05 %) respectively. The RSD of repetition was 1.54 %(n=6) for and 1.25 %(n=6) for. This method was
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PET 1 100.000 ppm100.000 ppm 1 10 20% 标题
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Qubit-DNA RNA 总浓度测定 dsdna BR Assay Kits 各试剂加样量 : 总量 ( 溶液体积 ) 50 或 250ml 1 或 5ml 1 或 5ml 待测 250µl 或 1.25ml 原始浓度 未知 0 ng/μl 100 ng/μl 待测 200 测定时要求浓度 未知 0 ng/μl 5000ng/ml 0~5000 ng/ml 1 备注 -Buffer:Qubit dsdna
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实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin( 氨卡青霉素 )(100 mg/ml) 100 mg/ml Ampicillin 50 ml 配制方法 1. 称量 Ampicillin 置于 50 ml 离心管中 ; 2. 加入 40 ml 灭菌水, 充分混合溶解后, 定容至 50 ml; 3. 用 0.22 µm 过滤膜过滤除菌 ; 4. 小份分装 (1 ml/ 份 ) 后,-20 保存 IPTG(
9.1.乳房炎
1. 1 3 4 5 -- -- 1 3 2 3,, 3 4 2. : 1 2 3 4 6~12h 2 1~2d (1) 15~18 7~15b 70% 2%~5% 2 3 2. 1 2 3. 3-7d 3-4 ( ) 1 2 3% 2 3 2% 1% 2 3 3 5 10mg 10% 4. (1) (2) (3) (4) (5) (1) (2) 3
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依据日本肯定列表使用 SPE 柱及 LC- MS/MS 对肉类样品中的兽药 (I) 和 (II) 进行多残留分析 应用报告 食品与农业 作者 Eugene Chang, Kazuyuki Yamashita 和 Ritu Arora 安捷伦科技有限公司 252 Commercentre Drive Lake Forest, CA 9263 美国 引言 相当于美国 FDA 的日本厚生劳动省 (MHLW)
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HJ HJ/T194-2005 Manual methods for ambient air quality monitoring 2005 11-09 2006 01-01 ...1 1...1 2...1 3...1 4...1 4.1 24...1 4.2...6 4.3...8 4.4...9 4.5...9 4.6...10 4.7...10 5...11 6...11 6.1...11
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