1112 畜牧兽医学报 39 卷 [1 2] 平衡等为了禁用或少用抗生素作为饲料添加剂, 许多科研工作者开始致力于抗生素替代品的研发在此过程中人们发现饲料中添加中草药幼康宝可以预防疾病, 提高机体免疫力, 促进畜禽生长, 并且可解决抗生素激素等药物添加剂无法解决的药 [3 4] 物残留问题另

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洽磨
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1 畜牧兽医学报 2008,39(8): 犃犞狀犣狀犛狀 3 种饲料添加剂对肉鸡小肠形态结构的影响王继凤 1, 李芙燕 1, 陈耀星 1, 王子旭 1, 呙于明 2 (1. 中国农业大学动物医学院, 北京 ;2. 中国农业大学动物科技学院, 北京 ) 摘要 : 将 32 只 1 日龄健康 AA 肉鸡随机分为 4 个处理组 :A 组 ( 对照组, 基础日粮 ) B 组 ( 抗生素组, 基础日粮 + 硫酸抗敌素 100mg/kg) C 组 ( 中草药组, 基础日粮 + 幼康宝 500mg/kg) 和 D 组 ( 丁酸钠组, 基础日粮 + 丁酸钠 500 mg/kg) 试验 7 周后, 采用组织学技术研究肉鸡小肠黏膜结构的形态及其变化结果显示 :(1) 各试验组小肠的黏膜结构都比对照组完整 ;(2) 各试验组的小肠各段绒毛高度 V/C 值黏膜厚度及肌层厚度均高于对照组 ;(3) 对照组 V/C 值由十二指肠向回肠逐渐降低, 而各试验组 V/C 值, 十二指肠的最大, 回肠的次之, 空肠的最小结论 :3 种添加剂均可不同程度地改善肉鸡小肠黏膜结构, 并且丁酸钠和幼康宝在一定程度上具有替代硫酸抗敌素的可行性关键词 : 饲料添加剂 ; 黏膜结构 ; 小肠 ; 肉鸡中图分类号 :S852.16;S816.7 文献标识码 :A 文章编号 : (2008) 犈犳犳犜犉犱犃犱犱狏狀犕犛狀犛犿犐狀狀犳犅 WANGJi feng 1,LIFu yan 1,CHEN Yao xing 1,WANGZi xu 1,GUO Yu ming 2 (1. 犆犵犳犞狀狔犕犱狀, 犆狀犃犵犝狀狏狔, 犅犼狀犵 , 犆狀 ;2. 犆犵犳犃狀犿犛狀狀犱犜狀犵狔, 犆狀犃犵犝狀狏狔, 犅犼狀犵 , 犆狀 ) 犃犫 :Thirty twohealthyone day oldaa broilersweredividedinto4groupsinthisstudy: GroupA (control)withbasicdiet,groupb withbasicdietandantibiotic(100mg/kgofcolis tin),groupc withbasicdietand500 mg/kgofchinese Medicine(Youkangbao),andGroupD withbasicdietand500 mg/kgofsodium butyrate.aftersevenweeks,themucosalstructureof smalintestinewasobserved.resultswereasfolows:(1)thereweresignificantlydiferencesin themorphologicalchangeofmucosaofsmalintestineamong A,B,C,andDgroups.(2)The lengthsofvili,v/cvalue,thicknessofmucosa,andthicknessofmuscularlayerinexperimental groupswerelargerthanthatofcontrolgroup.(3)thevalueofv/cdecreasedfromduodenumto ileumincontrolgroup,butit waslargerinileum thanthatofthejejunum inexperimental groups.however,thevalueofv/c waslargerinexperimentalgroupscompared withcontrol group.thisstudyindicatedthatthreefeedadditivescouldimprovemucosalstructureofsmalin testineinbroiler;sodium butyrateandchinese Medicine (Youkangbao)havethefeasibilityto substituteofantibioticinimprovingmucosalstructureofsmalintestine. 犓狔狑犱 :feedadditives;mucosalstructure;smalintestine;broiler 抗生素在畜禽生产中可以预防病原微生物的感染, 促进动物的生长, 改善禽蛋的品质, 但随着抗生素的大量使用也产生了许多常见的问题, 例如 : 药物的残留病原菌耐药性增加破坏微生物在肠道中的收稿日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金资助项目 ( ; ) 作者简介 : 王继凤 (1963 ), 女, 北京人, 实验师, 主要从事黏膜免疫方面的研究通讯作者 : 陈耀星, 主要从事动物神经与黏膜免疫方面的研究,E mail:yxchen@cau.edu.cn

2 1112 畜牧兽医学报 39 卷 [1 2] 平衡等为了禁用或少用抗生素作为饲料添加剂, 许多科研工作者开始致力于抗生素替代品的研发在此过程中人们发现饲料中添加中草药幼康宝可以预防疾病, 提高机体免疫力, 促进畜禽生长, 并且可解决抗生素激素等药物添加剂无法解决的药 [3 4] 物残留问题另外在畜禽日粮中添加酸化剂丁酸钠也可以促进动物生长提高饲料转化率改善动物肠道内微生物区系以及调整动物肠道菌群的生态 [5 7] 平衡, 提高其机体免疫力因此中草药和酸化剂作为新的添加剂以替代抗生素已引起了人们的极大关注, 但对于饲料添加剂幼康宝和丁酸钠的研究主要集中于对动物生长和生产的影响, 而对小肠形态结构影响的研究比较薄弱为此, 本试验拟研究中草药饲料添加剂和酸化剂饲料添加剂对肉鸡小肠形态结构的影响, 并与抗生素的作用相比较, 从而为科学使用这两种饲料添加剂来替代抗生素的可行性提供形态学依据 1 材料与方法 1 1 实验动物的分组与饲养将 32 只 1 日龄健康 AA 肉鸡随机分成 4 个处理组, 每组 8 只 :A 组 ( 对照组, 基础日粮 ) B 组 ( 抗生素组, 基础日粮 + 硫酸抗敌素 100 mg/kg) C 组 ( 中草药组, 基础日粮 + 幼康宝 500mg/kg) 和 D 组 ( 丁酸钠组, 基础日粮 + 丁酸钠 500 mg/kg) 开放式鸡舍单笼饲养, 各组其它饲养管理方法完全一致, 即按北京爱拔益加家禽育种有限公司提供的肉用仔鸡饲养管理手册进行饲养管理饲养期为 7 周 1 2 取材将肉鸡放血处死, 剖开腹腔, 迅速取出十二指肠空肠和回肠各 5cm 左右, 用新配制的生理盐水洗干净, 放入 4% 多聚甲醛磷酸缓冲液 (0.1mol/L, ph7.4) 中固定 48h 1 3 染色与数据处理石蜡包埋, 连续横断切片, 厚 6μm, 进行常规 HE 染色光镜下详细观察和比较各处理组肠黏膜形态结构的变化情况, 并利用 Moditec 照相处理软件和病理图像分析系统, 每个肠管取 5 张切片, 每张切片选取 5 个最长绒毛高度最深隐窝深度最厚黏膜厚度和最厚的肌层厚度进行测量应用 SAS8.2 软件包 (SASInstitute,2001) 对数据进行单因素方差分析 2 试验结果种添加剂对小肠黏膜形态结构的影响经 HE 染色后在光镜下观察, 对照组的肠黏膜结构不是很完整, 偶见有上皮脱落现象, 固有层暴露, 但是其肠黏膜结构层次分明, 上皮细胞轮廓清晰, 排列整齐 ; 柱状细胞呈高柱状, 单层排列, 胞质丰富, 胞核椭圆形, 位于细胞基部 ; 杯状细胞散在分布于柱状细胞间, 呈高脚杯状固有层结构清晰, 肠腺较发达各试验组的肠黏膜结构相对于对照组较完整 ( 图 1), 层次分明, 肠黏膜上皮细胞的轮廓清晰, 染色鲜明, 排列整齐, 且试验组的肠绒毛明显宽于对照组, 也比对照组高 ; 柱状细胞呈高柱状, 单层排列, 胞质丰富, 胞核椭圆形, 位于细胞基部 ; 杯状细胞散在分布于柱状细胞间, 呈高脚杯状固有层结构清晰, 肠腺发达上皮细胞呈正常生长更新状态种添加剂对小肠绒毛高度绒毛长度 / 隐窝深度比值 ( 犞 / 犆值 ) 黏膜厚度和肌层厚度的影响种添加剂对十二指肠绒毛高度 V/C 值黏膜厚度和肌层厚度的影响由表 1 可以看出, 十二指肠中试验组的绒毛高度都显著高于对照组其中以中草药组的绒毛高度最高, 其次是丁酸钠组, 但是两组间没有显著性的差异, 而抗生素组的绒毛高度低于前两组, 且与前两组差异都显著 4 个处理组中 V/C 值以抗生素组最大, 与中草药组和丁酸钠组没有显著性的差异, 但是与对照组差异显著, 而中草药组与丁酸钠组和对照组之间没有显著性的差异黏膜厚度在中草药组和丁酸钠组间没有显著性的差异, 但都比抗生素组厚, 而对照组黏膜厚度的值最小, 且与试验组差异都显著肌层厚度以丁酸钠组的最厚, 其次是抗生素组和中草药组, 但是丁酸钠与抗生素组和中草药组间的差异不显著, 同时这两组间的差异也不显著,3 个试验组与对照组差异都显著, 且都厚于对照组种添加剂对空肠绒毛高度 V/C 值黏膜厚度和肌层厚度的影响从表 2 可以看出,4 个处理组空肠中以丁酸钠组的绒毛高度最高, 其次是中草药组, 且两组间存在显著性的差异, 同时中草药组的绒毛高度显著高于抗生素组,3 个试验组空肠的绒毛高度显著高于对照组在空肠中 4 个组的 V/ C 值以丁酸钠组的最大, 但是 4 组之间没有显著性差异 4 组空肠的黏膜厚度以丁酸钠组的最厚, 其

８期１１１３王继凤等３种饲料添加剂对肉鸡小肠形态结构的影响Ａ对照组Ｂ抗生素组Ｃ中药组Ｄ丁酸钠组ＡＣｎｇｕｐＢＡｎｂｇｕｐＣＣｈｎＭｄｎｇｕｐＤＳｄｕｍｂｕｇｕｐｙ图１肉鸡空肠绒毛结构犎犈染色犉１犜犳狏狀犼狀犿犳犫犎犈狀狀犵犵犼表１３种添加剂对肉鸡十二指肠绒毛高度绒毛长度隐窝深度比值

3 ８期１１１３王继凤等３种饲料添加剂对肉鸡小肠形态结构的影响Ａ对照组Ｂ抗生素组Ｃ中药组Ｄ丁酸钠组ＡＣｎｇｕｐＢＡｎｂｇｕｐＣＣｈｎＭｄｎｇｕｐＤＳｄｕｍｂｕｇｕｐｙ图１肉鸡空肠绒毛结构犎犈染色犉１犜犳狏狀犼狀犿犳犫犎犈狀狀犵犵犼表１３种添加剂对肉鸡十二指肠绒毛高度绒毛长度隐窝深度比值犞犆值黏膜厚度和肌层厚度的影响犜犫１犈犳犳犳犳犱犱犱狏狀犳狏犞犆狏犽狀犳犿狀犱犽狀犳犵犿狀犱犱狀犿犳犫狔组别Ｇｕｐ绒毛高度 μｍＶＣ黏膜厚度 μｍ肌层厚度 μｍ对照Ｃｎ１４３５５７±９８９２３±０４４１５８８４６±８８２２２８３６９±１０４０抗生素Ｃｎ１６０６５±８７８４９６±０１６１８１５０６±１１３６５３４９００±３２３０ｂｂｂｂｄｂｄ中草药Ｙｕｋｎｇｂ１９８９８２±５８０７３３±０３１２２６７７９±６７１３５８５０±２４９２ｂ丁酸钠Ｓｄｕｍｂｕｙ１８９３７６±２８３２ｂ８０±０２４ｂ２１４１２８±４８４２ｂ４００５２±２２８９ｂ同行上标含不同字母表示差异极显著犘００１下同Ｔｈｄｎｕｐｗｈｎｈｍｕｍｎｍｎｎｎ犘００１ｈｍｂｐｙｇｎｙｄｗ

1114 畜牧兽医学报 39 卷表 2 3 种添加剂对肉鸡空肠绒毛高度绒毛长度 / 隐窝深度比值 ( 犞 / 犆值 ) 黏膜厚度和肌层厚度的影响犜犫 2 犈犳犳犳犱犱犱狏狀犵犳狏, 犞 / 犆狏, 犽狀犳犿狀犱犽狀犳犿狔狀犼犼狀犿犳犫组别 Group 绒毛高度 / μ m V/C 黏膜厚度 / μ m 肌层厚度 / μ m 对照 Control 976.54±57.54 d 3.

4 1114 畜牧兽医学报 39 卷表 2 3 种添加剂对肉鸡空肠绒毛高度绒毛长度 / 隐窝深度比值 ( 犞 / 犆值 ) 黏膜厚度和肌层厚度的影响犜犫 2 犈犳犳犳犱犱犱狏狀犵犳狏, 犞 / 犆狏, 犽狀犳犿狀犱犽狀犳犿狔狀犼犼狀犿犳犫组别 Group 绒毛高度 / μ m V/C 黏膜厚度 / μ m 肌层厚度 / μ m 对照 Control ±57.54 d 3.52±0.49 a ±71.60 c ±21.09 b 抗生素 Colistin ±53.31 c 4.03±0.14 a ±80.43 c ±43.63 b 中草药 Youkangbao ±56.45 b 4.22±0.40 a ±93.67 b ±21.08 b 丁酸钠 Sodiumbutyrde ± a 4.33±0.30 a ± a ±93.23 a 次是中草药组, 且两组间存在显著性的差异, 中草药和抗生素组与对照组间没有显著性的差异 4 个处理组空肠的肌层厚度以丁酸钠组的最厚, 且与其他 3 组间存在有显著性的差异, 而其他 3 组间差异不显著种添加剂对回肠绒毛高度 V/C 值黏膜厚度和肌层厚度的影响从表 3 可以看出,4 个处理组回肠的绒毛高度以丁酸钠组最高, 其次是抗生素组与中草药组,3 组间没有显著性差异, 但都显著高于对照组 4 个处理组回肠 V/C 值以抗生素组最大, 其次是丁酸钠组, 两组间差异不显著, 丁酸钠组的 V/C 值大于抗生素组, 但差异不显著, 而中草药组与抗生素组间的差异显著,3 个试验组的 V/C 值都大于对照组, 且差异都显著 4 个处理组回肠的黏膜厚度以抗生素组的最厚, 其次是丁酸钠组, 两组间的差异显著, 中草药组的黏膜厚度小于丁酸钠组, 同时两组间的差异显著,3 个试验组的黏膜厚度都大于对照组, 且 3 个试验组的黏膜厚度与对照组存在显著性的差异肌层厚度以中草药组的最厚, 其次是丁酸钠组, 两组间差异不显著, 丁酸钠组的黏膜厚度大于抗生素组, 但两组间的差异不显著, 而中草药组与抗生素组间存在显著性的差异,3 个试验组的肌层厚度都大于对照组, 且差异显著表 3 3 种添加剂对肉鸡回肠绒毛高度绒毛长度 / 隐窝深度比值 ( 犞 / 犆值 ) 黏膜厚度和肌层厚度的影响犜犫 3 犈犳犳犳犱犱犱狏狀犵犳狏, 犞 / 犆狏, 犽狀犳犿狀犱犽狀犳犿狔狀犿犳犫组别 Group 绒毛高度 / μ m V/C 黏膜厚度 / μ m 肌层厚度 / μ m 对照 Control ±62.60 b 2.82±0.35 c ±43.07 d ±22.01 c 抗生素 Colistin ±58.41 a 4.20±0.36 b ± a ±8.98 b 中草药 Youkangbao ±67.76 a 4.99±0.53 a ±46.92 c ±31.02 a 丁酸钠 Sodiumbutyrate ±40.57 a 4.67±0.44 ab ±44.17 b ±20.15 ab 2 3 小肠各段犞 / 犆值的变化从图 2 可以看出, 对照组的 V/C 值由十二指肠到回肠逐渐减少, 而加了 3 种添加剂后回肠的 V/C 值都比相应组的空肠大, 其中中草药组的回肠 V/C 值比空肠的 V/C 值增加了 18.25%, 丁酸钠组回肠的 V/C 值比空肠的 V/C 值增加了 7.85%, 抗生素组回肠的 V/C 值比空肠的 V/C 值增加了 4.22% 3 讨论 3 1 肠道是机体消化吸收营养物质的重要场所, 而肠绒毛作为小肠的重要组成部分, 不但在吸收营养物质上至关重要, 而且其强有力的有规律的摆动 [8] 也有助于排斥有害菌群的定植, 同时, 绒毛形态的图 2 3 种添加剂对肉鸡小肠绒毛长度 / 隐窝深度比值 ( 犞 / 犆值 ) 的影响犉犵.2 犈犳犳犳犱犱犱狏狀犞 / 犆狏犳犿狀狀狀犫

5 8 期王继凤等 :3 种饲料添加剂对肉鸡小肠形态结构的影响 1115 变化也直接影响绒毛的表面积, 进而影响机体吸收营养物质的能力 Caspary [9] 报道指出绒毛高度增加后会使小肠接触营养物质的面积增大, 从而增强小肠对营养物质的吸收, 所以肠绒毛的形态直接和机体的生长发育有关隐窝深度反映了隐窝细胞的增殖率和成熟度隐窝细胞从底部向绒毛上部迁移迁移过程中, 细胞逐渐分化, 形成具有吸收能力的柱状细胞, 肠绒毛高度与细胞数量呈显著相关绒毛短时, 成熟的绒毛细胞减少, 对养分的吸收能力低而隐窝深度反映了细胞生成率, 不断有细胞从隐窝基部向绒毛端部迁移分化, 形成具有吸收能力的绒毛细胞, 以补充绒毛上皮的正常脱落如果此过程减慢, 则基部的细胞生成率降低, 使隐窝变 [10] 浅而 V/C 值综合反映小肠的功能状况, 比值 [11] 下降表明消化吸收功能下降本试验中, 在饲料中添加抗生素中草药及丁酸钠后使肉鸡十二指肠的绒毛相对于对照组分别增加了 11.92% 38.61% 及 31.92%,V/C 值分别增加了 11.72% 1.60% 及 9.15%; 使空肠的绒毛高度分别增加了 7.35% 29.20% 及 %, 而相应的 V/C 值也分别增加了 14.49% 19.89% 及 23.01%; 三种添加剂对肉鸡回肠的肠绒毛也有一定的作用, 其绒毛高度分别增加了 77.72% 73.97% 及 89.57%, 相应的 V/C 值分别增加了 48.94% 76.95% 及 65.60% 结果表明, 使用这 3 种饲料添加剂可以增加肠绒毛的高度, 并在一定的程度上可以促进肉鸡肠道对营养物质的吸收, 从而有利于肉鸡的生长王俐等人的研究表明在饲料中添加硫酸抗敌素可以降低大肠杆菌的数量, 同时可以增加益生菌双歧杆菌的数量, 从而引起 [12 13] 肠道中菌群的变化, 促进动物的生长有研究表明丁酸钠可以促进肠黏膜细胞的增生, 促进空肠 [14] 和回肠上皮细胞的增殖, 有利于动物的生长在试验中发现对照组 V/C 值由十二指肠到回肠逐渐降低, 这可能表明在正常的生长状态下十二指肠的细胞代谢更活跃, 细胞周期更快而试验组回肠的 V/C 值却都比相应组空肠的 V/C 值大, 可能说明 3 种添加剂在一定的程度上对肉鸡回肠的作用更为显著 3 2 生理学家认为, 消化道内物质的转运包括两种形式, 一种是物质从肠腔进入血液, 即食物的消化产物以及水分盐类等通过上皮细胞进入血液和淋巴的过程, 称为吸收 ; 另一种是从血液进入肠腔, 即把 [11] 代谢废物或异物从血液转运入肠腔, 称为分泌所以肠黏膜的厚薄影响营养物质的吸收和转运过程, 进而影响小肠的吸收功能本试验的结果表明在饲料中添加不同的添加剂可以在一定程度上增加小肠的黏膜厚度, 从而有助于机体对营养物质的吸收, 促进动物的生长 4 结论通过本试验在饲料中添加 500 mg/kg 的丁酸钠 100mg/kg 的硫酸抗敌素和 500 mg/kg 的幼康宝后, 均可增加肉鸡小肠绒毛的高度 V/C 值黏膜厚度及肌层厚度, 提高肉鸡小肠对营养物质吸收的能力, 而且丁酸钠和幼康宝在一定程度上具有替代饲用抗生素添加剂的可行性参考文献 : [1] ROUVEIXB.Antibioticsafetyassessment[J].Inter JAntimicrobialAgents,2003,21: [2] WEGENER H C.Antibioticsinanimalfeedandtheir roleinresistancedevelop[j].currentopinioninmi crobiology,2003,6: [3] 李文彬, 张换成, 李三禄, 等. 蛋鸡中草药饲料添加剂研究 [J]. 中国家禽,2004,26(18): [4] 马得莹, 单安山, 李群道, 等. 中草药对蛋雏鸡生长性能和免疫功能的影响 [J]. 中国兽医学报,2005,1: [5] VERSTEEGH H AJ,JONGBLOED A W.Lactic acidhasapositiveefectonbroilerperformance[j]. WorldPoultry,1999,15(8): [6] 尹靖东, 霍启光. 饲料酸化剂的发展现状与新型产品的开发 [J]. 饲料工业,1999,20 (10):5 8. [7] 王继凤, 陈耀星, 王子旭, 等. 丁酸钠对断奶仔猪小肠黏膜形态结构的影响 [J]. 中国兽医科技,2005,35 (4): [8] 马仲华. 家畜解剖及组织胚胎学 [M]. 北京 : 中国农业出版社,2002. [9] CASPARY W F.Physiologyandpathophysiologyof intestinalabsorption [J].AmJClinNut,1992,55: [10] 王子旭, 佘锐萍, 陈越, 等. 日粮锌硒水平对肉鸡小肠黏膜结构的影响 [J]. 中国兽医科技,2003,33 (7): [11] 韩正康. 家畜营养生理学 [M]. 北京 : 农业出版社, 1991: [12] 王俐, 蔡辉益, 刘国华. 不同抗生素对肉鸡肠道微生物的影响 [J]. 中国饲料,2003,6: [13] 黄卫民, 张忠海, 夏万忠. 三种饲用抗生素对生长猪饲喂效果试验 [J]. 甘肃畜牧兽医,2000,5(154): [14] 李可洲, 李幼生, 鲍扬, 等. 短链脂肪酸对 TPN 大鼠小肠粘膜结构及细胞增殖作用的研究 [J]. 肠外与肠内营养,1999,6(3):

酸化剂对肉鸡肠道微生物数量及生产性能影响的研究

深圳市生物源生物技术有限公司技术资料 BC-C-20 酸化剂对肉鸡肠道微生物数量及生产性能影响的研究酸化剂对肉鸡肠道微生物数量及生产性能影响的研究王冉 2,, 邵春荣, 胡来根, 周岩民李保全, 朱泽远, 孙佩元, 申爱华 ( 江苏省农业科学院畜牧兽医研究所, 南京,2004)( 2 南京农业大学动物科技学院, 南京,20095) [ 摘要 ] 本试验研究了富马酸和复合型饲料酸化剂对肉鸡肠道微生物数量及其生产性能的影响